JPH05188031A

JPH05188031A - 生理活性物質固定化膜

Info

Publication number: JPH05188031A
Application number: JP4021828A
Authority: JP
Inventors: Satoshi Ibaraki; 敏茨木
Original assignee: Kanebo Ltd
Current assignee: Kanebo Ltd
Priority date: 1992-01-10
Filing date: 1992-01-10
Publication date: 1993-07-27

Abstract

(57)【要約】【構成】酵素、抗体、補体及びレセプター等の生理活
性物質を固定化した絹フィブロイン膜と、ポリエステ
ル、ナイロン等からなる織物、編物、不織布等の繊維構
造体とが複合化してなることを特徴とする。【効果】強度、寸法安定性に優れると共に、取扱い性
がよく、バイオセンサー用途に好適に使用できる。トラ
ンスデューサーに装着した場合の装着状態を一定にで
き、また、長時間の使用に於いても当該膜とトランスデ
ューサーの位置関係が一定に保たれる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、バイオセンサーに利用
される生理活性物質固定化膜に関する。

【０００２】

【従来の技術】医療診断、分析、発酵モニターや制御に
有用に用いられるバイオセンサーは、生理活性物質固定
化膜と、この膜内あるいは膜表面で消費あるいは生成す
る物質を検出し、これを電気信号に変換するトランスデ
ューサーとから構成される。バイオセンサーとしては、
生理活性物質として酵素、微生物を用いた酵素センサ
ー、微生物センサーや、抗体、抗原等を用いた免疫セン
サー等があり、酵素グルコースオキシダーゼ固定化膜を
酸素電極や過酸化水素電極表面に被覆装着したグルコー
スセンサー、微生物固定化膜を用い同様な構成としたＢ
ＯＤセンサー等が実用化されている。

【０００３】また、特開昭６３−１１７２５３号公報や
アナリティカル・バイオケミストリー（Ａｎａｌｙｔｉ
ｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）第９４卷，２２−
２８頁（１９７９年）に開示されているように、抗体ま
たは抗原を固定化した膜を被覆した酸素電極と、カタラ
ーゼ等の酵素で標識した対応抗体または抗原とを用い、
エンザイムイムノアッセイの原理に従い、試料溶液中の
被測定物質量を測定するものが開発されている。これ
は、カタラーゼにより引き起こされる酸素濃度変化を酸
素電極で検出することにより、試料溶液中の被測定物質
濃度を測定するものである。こうした酵素センサーや微
生物センサーに於いては、固定化膜中の酵素や微生物に
より、被測定物質が選択的に変換され、生成物質が膜を
透過してトランスデューサーにより検出される。また、
免疫センサーの場合は、被測定物質濃度に応じて免疫反
応で膜表面に結合した標識体酵素の作用により生成した
物質を同様に計測する。

【０００４】バイオセンサー用生理活性物質固定化膜と
しては、一般に、膨潤率の低い緻密膜が用いられてい
る。これは、多様な成分を含む血液、尿や発酵液等の検
体が膜欠陥から内側に入り込んだり、膜表面組織に抱き
込まれたり、あるいは妨害物質の透過により、測定性能
が低下したりするのを防ぐためである。このようなこと
が起こると、測定間、あるいは測定中に必要なセンサー
の洗浄も不完全になり易く、測定値が信頼できないもの
となる。これは、免疫センサーの場合特に問題となる。
また、固定化膜は、被測定物質またはトランスデューサ
ーで検知される物質の移動が可能なことが必要であり、
また、測定に於ける応答速度を高め、高い感度を得るた
めに、比較的薄い膜が用いられている。

【０００５】バイオセンサーの使用に際しては、トラン
スデューサーに生理活性物質固定化膜を装着し、試料を
測定する毎に膜を交換するものと、固定化膜を装着した
状態で複数の試料を繰り返しまたは連続的に測定するも
のがある。何れにしても、生理活性物質固定化膜のトラ
ンスデューサーへの交換、装着を一定の頻度で行う必要
があるが、バイオセンサーの測定精度を高め、信頼性の
ある結果を得るためには、生理活性物質固定化膜の交換
毎の当該膜のトランスデューサーへの装着状態をできる
限り一定にすることが望ましい。また、試料の連続的ま
たは断続的測定に於いては、当該生理活性物質固定化膜
を使用している期間に於いて、当該膜とトランスデュー
サーの位置関係ができる限り一定に保たれることが必要
である。

【０００６】こうしたバイオセンサー用の生理活性物質
固定化膜としては、絹フィブロイン膜が、その固定化能
が高く、膨潤率が小さく、非特異的な吸着を招かないも
のであり、機械的強度に優れ、計測物質として頻用され
る酸素に対しても透過性が高いことから、極めて適した
ものである（特開昭６３−１１７２５３号公報、特開昭
６４−６０３８２号公報）。しかしながら、上述したよ
うに、固定化膜の取扱い性を高めると共に、膜がトラン
スデューサーに対し、いつも均一な状態で装着され、そ
れが経時的にも変化することなく一定に保たれるように
することで、実用性能の一層の向上を計ることが望まれ
ていた。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】この発明は、かかる問
題点を解決するためになされたものであって、その目的
とするところは、機械的強度が大きく、かつ、寸法安定
性が良好であり、バイオセンサー用途に最適な生理活性
物質固定化膜を提供するにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】上記の目的は、生理活性
物質を固定化した絹フィブロイン膜と繊維構造体とが複
合化してなることを特徴とする生理活性物質固定化膜に
よって達成される。

【０００９】以下、本発明を詳述する。本発明に用いる
生理活性物質としては、酵素、抗原、抗体、補体及びレ
セプター等が挙げられ、目的に応じて使用する。

【００１０】本発明において使用する繊維構造体として
は、ポリエステル、ナイロン、アクリル、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、ウレタン、絹、レーヨン、ポリビ
ニルアルコール及びそれらの複合化繊維からなる織物、
編物、不織布等が挙げられる。中でも寸法安定性の良さ
や、機械的強度の高さの点から、ポリエステル、ナイロ
ン、ガラス繊維等を材質とするものが好適に用いられ
る。また、マトリックスとの密着性を向上させるため
に、繊維表面を親水加工したものを使用してもよい。

【００１１】また、物質の透過性を、繊維構造体自体に
より抑制しないという点から、厚さ３０〜１５０μｍ、
オープニングエリア３０％以上の網目構造を有する繊維
構造体が好適に用いられる。

【００１２】本発明の生理活性物質固定化膜の絹フィブ
ロインマトリックスと繊維構造体との複合化形態は、絹
フィブロイン膜内に繊維構造体が埋め込まれた形態で
も、絹フィブロイン膜と繊維構造体が接着した形態に近
いものでも、繊維間の空隙のみが絹フィブロインマトリ
ックスにより埋められた形態のものであってもよく、実
質上、水が通過できる細孔を有しないことが必要であ
る。後述する水透過試験により評価したとき、透過量
０．２ｇ以下のものが好ましい。このためには、繊維構
造体と絹フィブロインマトリックスとの接着性が高いこ
とが好ましいが、絹フィブロインとの接着性の低い繊維
から成る繊維構造体の場合であっても、複合化形態によ
っては目的を満足することができる。

【００１３】好適な一実施態様として、図１に示すよう
な生理活性物質固定化膜が挙げられる。同図において、
１は絹フィブロイン膜、２は生理活性物質、３は繊維構
造体である。

【００１４】図１に示す生理活性物質固定化膜は、絹フ
ィブロイン膜１内に繊維構造体が埋め込まれた形態とな
っており、生理活性物質２は、絹フィブロイン膜１の片
方の表面付近に固定化されている。このような形態の抗
原もしくは抗体を固定化した膜は、免疫測定用の膜とし
て好適なものである。

【００１５】本発明の生理活性物質固定化膜の製造方法
は、目的とする形態等に応じて、例えば、次のような方
法が挙げられる。まず、１つ目の方法は、生理活性物質
及び必要に応じて、架橋剤，結晶化剤，可塑剤等の不溶
化剤を混合溶解または分散させた絹フィブロイン水溶液
を、繊維構造体を密着設置した基盤上に流延し、次いで
乾燥し、更に必要に応じて、不溶化処理を行う方法であ
る。なお、絹フィブロイン水溶液を基盤上に流延した
後、繊維構造体を設置するようにしてもよい。

【００１６】絹フィブロイン水溶液は、例えば、特公昭
５７−４７２３号公報、特公昭５４−２７４３９号公報
に示されているように、絹フィブロインを塩化カルシウ
ム、臭化リチウム等の高濃度塩溶液に溶解させた後、透
析脱塩して得ることができる。

【００１７】製膜基盤としては、水平に設置した平滑あ
るいは細かい粗面状のものが用いられる。その材質は、
特に限定されるものではなく、金属、セラミックス、ガ
ラスの他、アクリル等の樹脂製のもの等が用いられる。

【００１８】乾燥の条件は、目的に応じて適宜選択すれ
ばよく、乾燥温度は、通常、生理活性物質の失活のない
室温付近で行うのが好ましい。

【００１９】不溶化処理は、絹マトリックス中に架橋構
造や結晶構造を形成させることにより行うが、乾燥製膜
工程で達成される場合と、製膜後に施す場合とがある。

【００２０】例えば、結晶化剤として働くエチレングリ
コール、グリセリン、プロピレングリコール等の水溶性
ポリオール類化合物やポリエチレングリコール、ポリプ
レングリコール等の水溶性ポリエーテル類化合物を混合
しておくと、乾燥する工程で容易に結晶不溶化できる。
更に、これが可塑剤としても機能するため、乾燥状態で
も可撓性のある良好な膜を形成することができる。

【００２１】したがって、絹フィブロインマトリックス
と繊維構造体の接着性が低い場合であっても、膜が曲げ
られた際のマトリックスと繊維との剥離が起こり難く、
好ましいものである。また、固定化される生理活性物質
の失活が小さく、固定化能を良好とすることができる。

【００２２】また、膜形成後に高湿条件下で処理した
り、メチルアルコールやエチルアルコール等のアルコー
ル水溶液中に浸漬処理することによって、不溶化しても
よい。

【００２３】また、架橋剤を添加し、膜形成後に、緩衝
液中や無媒体下での加温処理、紫外線照射等により、不
溶化を行ってもよい。架橋剤としては、グルタルアルデ
ヒド等の多官能性アルデヒド類、エピクロルヒドリン、
エチレングリコールジグリシジルエーテル等のエポキシ
基をもつ多官能性化合物、ジスクシンイミジルタルタレ
ート、スクシンイミジル−４−マレイミドブチレート等
の活性化エステルをもつ多官能性化合物、４，４′−ジ
チオビスフェニルアジド、ｐ−アジドフェニルグリオキ
サール等のアジド基をもつ多官能光架橋性化合物、ホル
ムアルデヒド、塩化シアヌル、１，５−ジフルオロ−
２，４−ジニトロベンゼン等の架橋性試薬類等が挙げら
れる。

【００２４】これらの架橋剤は、絹フィブロイン水溶液
中に添加してもよく、あるいは製膜後の不溶化工程で添
加してもよい。また、これらの架橋剤は、使用に差し支
えなければ膜中に残留してもよい。

【００２５】次に、２つ目の製造方法として、図２に示
すように、生理活性物質２を絹フィブロイン水溶液に混
合することなく、まず、生理活性物質水溶液４を、予め
基盤１０上に塗布し、これをいったん乾燥した後に、絹
フィブロイン水溶液５を同基盤１０上に流延し、次い
で、繊維構造体３を設置し、乾燥、不溶化処理を行うよ
うにしてもよい。

【００２６】このような製造工程をとることにより、生
理活性物質が膜表面付近に固定化された、図１に示すよ
うな生理活性物質固定化膜を得ることができる。なお、
基盤１０上に繊維構造体３を設置した後、絹フィブロイ
ン水溶液５を流延するようにしてもよい。また、絹フィ
ブロイン水溶液５を繊維構造体３に含浸させ、これを設
置するようにしてもよい。

【００２７】また、上述した製造方法を利用して製膜形
成した繊維構造体複合化絹フィブロイン膜に、生理活性
物質を共有結合により固定化することによっても、本発
明の固定化膜を得ることができる。共有結合の方法は、
特に限定されるものではなく、例えば、グルタルアルデ
ヒドや塩化シアヌル等を結合剤とする方法、臭化シアン
やヒドラジン−亞硝酸系で活性基を導入し、これに生理
活性物質を結合する方法等が挙げられる。

【００２８】また、本発明の生理活性物質固定化膜は、
生理活性物質を固定化した絹フィブロイン膜と繊維構造
体とを接着剤を用いて接合しても得ることができる。更
に、生理活性物質を固定化した絹フィブロイン膜と、絹
フィブロイン水溶液を含浸した繊維構造体とを密着接合
した状態で乾燥すると、絹蛋白自体が適した接着剤の役
目を果たし、良好な物性を備えた繊維複合化固定化膜を
得ることができる。

【００２９】また、上記各製造方法により得られた繊維
構造体と複合化した生理活性物質固定化膜を、上述した
水溶性ポリオール類化合物やポリエーテル類化合物の水
溶液に浸漬した後再乾燥処理することにより、更に可塑
性を与え、可撓性を向上させてもよい。

【００３０】

【発明の効果】以上のように、本発明の繊維構造体と複
合化してなる生理活性物質固定化膜は、強度、寸法安定
性に優れると共に、取扱い性がよく、免疫センサー等の
バイオセンサー用途に好適に用いることができる。トラ
ンスデューサーとしては、通常、酸素電極、過酸化水素
電極、ｐＨ電極等の電極が主に用いられるが、これらに
装着した場合の装着状態を一定にでき、また、長時間の
使用に於いても当該膜とトランスデューサーの位置関係
が一定に保たれることに加え、妨害物質の透過や非特異
吸着を招かないものであるため、安定した性能のバイオ
センサーを構成することができる。

【００３１】以下に、実施例を挙げて本発明を具体的に
説明するが、本発明は、これら実施例によりなんら限定
されるものではない。（生理活性物質固定化膜の水透過試験）直径２ｃｍの円
筒下面に評価する固定化膜をパッキングを介して圧接設
置し、円筒中に水１０mlを入れ（液厚は約３．２ｃ
ｍ）、１時間放置した後、膜を通して落下する水を採
取、計量し、膜面積１ｃｍ²当たりの水透過量を求め
た。

【００３２】＜免疫センサーによる抗体固定化絹フィブ
ロイン膜の繰り返し測定試験＞（１）試料（実施例１）絹フィブロイン水溶液の調製生糸１００ｇを１．０重量％のマルセル石けん水溶液５
０００ml中に浸漬し、８０℃で３時間精練した。水洗
後、更に０．５重量％のマルセル石けん水溶液５０００
mlに浸漬して８０℃で３時間精練し、セリシン等を実質
的に除去した絹フィブロイン原料７２ｇを得た。水１０
０ｇとエチルアルコール８０ｇの入ったニーダー中に塩
化カルシウム１５０ｇを溶解し、７５℃に昇温後、上記
の絹フィブロイン原料７０ｇを投入し、１時間攪拌下に
溶解した。次いで、１８０ｇの温水（７５℃）を加えて
希釈した。これを冷却した後、ホローファイバー型の透
析器を用いて、流水に対して透析脱塩し、５．８重量％
の絹フィブロイン水溶液１２００mlを得た。塩化カルシ
ウムの残存量は０．０８％であった。

【００３３】抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体固
定化絹フィブロイン膜の製造抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体（ＩｇＧ）を生
理食塩水に溶解し、２５０μｇ／mlの抗体溶液を調製し
た。次に、この溶液を四方を区切ったガラス板上に抗体
量が２０μｇ／ｃｍ²となるように流延し、１５℃で３
時間乾燥した。上記絹フィブロイン水溶液に、グリセリ
ンを絹フィブロインに対して３０重量％加え、その溶液
を抗体が塗布されたガラス板上に流延し、その溶液上に
さらにポリエステルメッシュ（線径４５μｍ、厚さ７５
μｍ、オープニングエリア６２％）を設置した後、２０
℃で１０時間乾燥する事によって皮膜化させ、剥離し
た。これを直径８ｍｍの円形に裁断し、厚さ８０μｍの
抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体固定化絹フィブ
ロイン膜を得た。

【００３４】（実施例２）実施例１と同様の絹フィブロ
イン水溶液に、グリセリンを絹フィブロインに対して３
０重量％加え、これをポリエステルメッシュ（線径４５
μｍ、厚さ７５μｍ、オープニングエリア６２％）を密
着設置したガラス板上に流延し、２５℃で１５時間乾燥
して繊維構造体複合化絹フィブロイン膜を得た。１重量
％のグルタルアルデヒドを含む０．１Ｍほう酸緩衝液
（ｐＨ１１）を６０℃で１時間処理し、グルタルアルデ
ヒドをオリゴマー化した。これを水で５０倍希釈し、ｐ
Ｈ９に調節した水溶液に、上記繊維構造体複合化膜を浸
漬し、振とう条件下、２５℃で２時間処理し活性化した
後、抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体（ＩｇＧ）
を含有（５０μｇ／ml）する生理食塩水に浸漬、更に１
５時間反応させて抗体を固定化した。次いで、０．１５
Ｍリジン水溶液中で２時間処理し、活性基を後処理し
た。このようにして得られた固定化膜を、６０％グリセ
リン水溶液中に１５分間浸漬後風乾する方法で柔軟化処
理した。これを直径８ｍｍの円形に裁断し、厚さ８０μ
ｍの抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体固定化絹フ
ィブロイン膜を得た。

【００３５】（実施例３）抗ヒトＡＦＰマウスモノクロ
ナール抗体（ＩｇＧ）を生理食塩水に溶解し、２５０μ
ｇ／mlの抗体溶液を調製した。次に、この溶液を四方を
区切ったガラス板上に抗体量が２０μｇ／ｃｍ²となる
ように流延し、１５℃で３時間乾燥した。抗体が塗布さ
れたガラス板上に、実施例１と同様の絹フィブロイン水
溶液に、グリセリンを絹フィブロインに対して３０重量
％加えた水溶液を含浸したポリエステルメッシュ（線径
４５μｍ、厚さ７５μｍ、オープニングエリア６２％）
を設置した後、２０℃で１０時間乾燥する事によって皮
膜化した後、基盤上よりポリエステルメッシュ複合化膜
を剥離した。これを直径８ｍｍの円形に裁断し、厚さ１
０μｍの抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体固定化
絹フィブロイン膜を得た。

【００３６】（実施例４）抗ヒトＡＦＰマウスモノクロ
ナール抗体（ＩｇＧ）を生理食塩水に溶解し、２５０μ
ｇ／mlの抗体溶液を調製した。次に、この溶液を四方を
区切ったガラス板上に抗体量が２０μｇ／ｃｍ²となる
ように流延し、１５℃で３時間乾燥した。実施例１と同
様の絹フィブロイン水溶液に、グリセリンを絹フィブロ
インに対して３０重量％加え、その溶液を抗体が塗布さ
れたガラス板上に流延し、乾燥する事によって皮膜化さ
せた。その皮膜上に絹フィブロイン水溶液に、グリセリ
ンを絹フィブロインに対して３０重量％加えた水溶液を
含浸したポリエステルメッシュ（線径４５μｍ、厚さ７
５μｍ、オープニングエリア６２％）を設置した後、２
０℃で１０時間乾燥する事によってメッシュを皮膜に接
着した後、基板上よりポリエステルメッシュ複合化膜を
剥離した。これを直径８ｍｍの円形に裁断し、厚さ８０
μｍの抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体固定化絹
フィブロイン膜を得た。

【００３７】（比較例１）抗ヒトＡＦＰマウスモノクロ
ナール抗体（ＩｇＧ）を生理食塩水に溶解し、２５０μ
ｇ／mlの抗体溶液を調製した。次に、この溶液を四方を
区切ったガラス板上に抗体量が２０μｇ／ｃｍ²となる
ように流延し、１５℃で３時間乾燥した。実施例１と同
様の絹フィブロイン水溶液に、グリセリンを絹フィブロ
インに対して３０重量％加え、その溶液を抗体が塗布さ
れたガラス板上に流延し、２０℃で１０時間乾燥する事
によって皮膜化させ、剥離した。これを直径８ｍｍの円
形に裁断し、厚さ６０μｍの抗ヒトＡＦＰマウスモノク
ロナール抗体固定化絹フィブロイン膜を得た。

【００３８】尚、実施例１〜４及び比較例１で得られた
抗体固定化膜の水透過性を前述の試験法で評価したとこ
ろ、何れも０〜０．０５ｇの範囲にあった。

【００３９】（２）試験方法上記実施例１〜４及び比較例１の抗体固定膜と次に示す
酸素検出型免疫センサー（図３）とフロー式の測定装置
（図４）とを用い、下記のヒトＡＦＰ標準溶液につい
て、以下のようにして繰り返し測定を行った。

【００４０】図３は、酸素検出型免疫センサーの説明図
である。同図において、１１は反応セル、１２は抗体固
定化膜、１３は酸素透過膜、１４はＯリング、１５はガ
ルバニー型酸素電極を表わす。使用した酸素検出型免疫
センサーは、特開昭６３−１１７２５３号公報の記載に
準じ、反応セル１１（容量０．２ml）に、抗体固定化膜
１２，酸素透過膜１３，Ｏリング１４及びガルバニー型
酸素電極１５（ＡＮ型，オリエンタル電気株式会社製）
を、図の様に順次装着して構成されている。

【００４１】図４は、フロー式の測定装置の説明図であ
る。同図において、１６は免疫センサー、１７は記録
計、１８ａ，１８ｂ，１８ｃはコック、１９ａ，１９ｂ
はポンプ、２０はサンプル供給口、２１は洗浄液、２２
は解離液、２３は酵素基質溶液である。抗体固定化膜の
繰り返し測定試験は、図４の装置を使用し、次の様にし
て行った。

【００４２】即ち、ヒトＡＦＰ１００ｎｇ／mlを含有す
る０．０１Ｍリン酸緩衝生理食塩水（０．５％牛血清ア
ルブミン含有）をヒトＡＦＰの標準溶液とした。そし
て、カタラーゼ標識抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール
抗体５．５μｇ／mlを含有する同標準溶液０．５mlを反
応セル１１（容量０．２ml）に導入し、７分間静置して
免疫反応を行った後、１０ml／分の流速で２分間蒸留水
を流して反応セルを洗浄した。次いで、２６．５ｍＭの
過酸化水素を含有する０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．
０）０．２mlを反応セルに導入し、酸素電極の酸素濃度
に比例した電流値を求め、これを電位値に変換し、出力
した。続いて、０．１Ｍグリシン−塩酸緩衝液（ｐＨ
２．５、食塩２重量％含有）を２０ml／分の流速で１分
間流した後、２分間静置して結合したヒトＡＦＰとカタ
ラーゼ標識抗ヒトＡＦＰマウスモノクロナール抗体を解
離させ、更に２０ml／分の流速で１分間蒸留水を流して
反応セルを洗浄した。操作はすべて３０℃で行い、酵素
反応時以外はすべて攪拌を行った。

【００４３】その結果を図５（Ａ）〜（Ｅ）に示す。な
お、免疫センサー出力は、繰り返し測定の１回目の出力
値を１００％とし、２回目以降は、１回目に対する相対
値として示した。

【００４４】図５に示す通り、繊維構造体を複合化した
抗体固定化膜（実施例１〜４）（図５（Ａ）〜（Ｄ））
を免疫センサーに使用した場合、繊維構造体を複合化し
ていない抗体固定化膜（比較例１）（図５（Ｅ））に比
較して、第１回目の測定から正確な測定結果が得られ
た。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の生理活性物質固定化膜の一実施態様を
示す説明図。

【図２】本発明の生理活性物質固定化膜の製造工程の一
例を示す説明図。

【図３】生理活性物質固定化膜の繰り返し測定試験に使
用した酸素検出型免疫センサーの説明図。

【図４】図３の免疫センサーを組み込んだフロー式測定
装置の概略説明図。

【図５】実施例１〜４及び比較例の免疫センサーによる
繰り返し測定の安定性試験結果を示す線図であり、縦軸
は、免疫センサー出力（％）、横軸は、測定回数（回）
を表わす。

【符号の説明】１絹フィブロイン膜２生理活性物質３繊維構造体６生理活性物質固定化膜１０基盤１１反応セル１２抗体固定化膜１３酸素透過膜１４Ｏリング１５酸素電極１６免疫センサー１７記録計１８ａ，１８ｂ，１８ｃコック１９ａ，１９ｂポンプ２０サンプル供給口２１洗浄液２２解離液２３酵素基質溶液

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｎ 11/02 2121−4Ｂ 11/08 Ａ 2121−4Ｂ 11/14 2121−4ＢＧ０１Ｎ 33/544 Ｚ 9015−2Ｊ 33/552 9015−2Ｊ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】生理活性物質を固定化した絹フィブロイ
ン膜と繊維構造体とが複合化してなることを特徴とする
生理活性物質固定化膜。