JPH0523266B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕 本発明は新規抗生物質MG802−AF1−Ｂと、
それに属する抗生物質MG802−AF1−B1、
MG802−AF1−B2及びMG802−AF1−B3の製
造法に関する。 〔従来の技術〕 微生物の生産する抗生物質は、これまでに約
5000種類報告されており、感染症の治療に広く用
いられている。このうちカイニア（Chai−nia）
属に属する微生物からは18種類の抗生物質の生産
が報告されている〔昭和59年ユサコ株式会社発
行、インデツクス オブ アクチノマイスイーテ
ス アンチバイオテイクス（In−dex of
Actinomycetes Antibiotics）〕。 〔発明が解決しようとする問題点〕 抗生物質の使用においてはその抗生物質に耐性
な菌の出現が避けられず、耐性菌に有効な新規抗
生物質は絶えず望まれている。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は新
規抗生物質MG802−AF1−Ｂに関する発明であ
つて、下記一般式： （式中、R₁が水素、R₂がハロゲンを表わすか、
又はR₁及びR₂が一緒になつて結合子を示し、R₃
はハロゲンを示す）で表わされる化合物であるこ
とを特徴とする。 また本発明の第２の発明は、下記式： で表わされる化合物である抗生物質MG802−
AF1−B1、下記式： で表わされる化合物である抗生物質MG802−
AF1−B2、下記式： で表わされる化合物である抗生物質MG802−
AF1−B3の製造法に関する発明であつて、カイ
ニア属に属するMG802−AF1−Ｂ生産菌を培養
し、その培養物から抗生物質MG802−AF1−
B1、MG802−AF1−B2及びMG802−AF1−B3
よりなる群から選択した抗生物質の少なくとも１
種を分離採取することを特徴とする。 前記MG802−AF1−Ｂはグラム陽性菌及び多
剤耐性のグラム陽性菌に同等の抗菌活性を示すの
で、耐性菌にも有効なグラム陽性菌に対する抗生
物質として使用され得るものである。 カイニア属に属するMG802−AF1−Ｂの生産
菌の１例としては、本発明者らによつて昭和58年
２月新潟県佐渡群佐和田町で採取した土壌試料よ
り分離した菌株カイニア・ルブラ（Chainia
rubra）MG802−AF1（微工研菌寄第8022号）が
ある。この菌株の菌学的性状は次のとおりであ
る。 〔MG802−AF1株の菌学的性状〕 １ 形態 MG802−AF1株は、顕微鏡下で分枝した基中
菌糸より、かぎ状からら旋状の気菌糸を形成し、
輪生枝は認められない。成熟した胞子鎖は10個以
上の胞子の連鎖を認め、胞子の大きさは、0.4〜
0.5×0.6〜0.7μm位である。なお、胞子の表面に
は、短かいとげ状の突起を有する。 また菌核様構造が認められ、その直径は約５〜
10μmである。 ２ 各種培地における生育状態 色の記載について括弧に示す標準は、コンテイ
ナー・コーポレーシヨン・オブ・アメリカ
（Container Corporation of America）のカラ
ー・ハーモニイ・マニユアル（Color harmony
manual）を用いた。 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地（27℃培養） うす黄だいだい〔2gc、Bamboo〕〜うす茶
〔3io、Lt Amber〕の発育上に、白〜茶白〔3ba、
Pearl〜3cb、Sand〕の気菌糸を着生し、溶解性
色素は黄茶色を帯びる程度である。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地（27℃培
養） 発育は無色〜うす黄だいだい〔2gc、Bam−
boo〕〜鈍だいだい〔4pe、Orange Rust〕、気菌
糸を着生せず、溶解性色素は赤茶色を帯びる程度
である。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地（ISP−
培地5.27℃培養） うすだいだい〔3ic，Lt Amber〕〜うす茶
〔3le，Maple〕〜茶灰〔4lg，Lt Spice Brown〕
の発育上に、うつすらと白の気菌糸を着生し、溶
解性色素は赤茶色を帯びる程度である。 (4) スターチ・無機塩寒天培地（ISP−培地4.27
℃培養） うす黄茶〔3lg，Adobe Brown〕〜うす茶
〔4ie，Cork Tan〕〜茶灰の発育上に、白〜茶白
〔3dc，Natural〕の気菌糸を着生し、溶解性色素
は赤茶色を帯びる程度である。 (5) チロシン寒天培地（ISP−培地7.27℃培養） うす茶〜灰味赤茶〔5ng，Brick Red〕の発育
上に白〜茶白の気菌糸を着生し、赤茶の溶解性色
素を産生する。 (6) 栄養寒天培地（27℃培養） 黄茶〔3ng，Yellow Maple〕〜茶〔4ni，
Chestnut Brown〕の発育上に、培養後20日目頃
よりわずかに白の気菌糸を着生し、溶解性色素は
茶色を帯びる程度である。 (7) イースト・麦芽寒天培地（ISP−培地２，27
℃培養） 黄茶〜うす茶〔3le，Cinnamon〜3lg，Adobe
Brown〕の発育上に、白の気菌糸を着生し、溶
解性色素は赤茶色を帯びる程度である。 (8) オートミル寒天培地（ISP−培地３，27℃培
養） うすだいだい〔3gc，Lt Tan〕〜鈍だいだい
〔3ic，Lt Amber〜4ic，PastelOran−ge〕〜う
す赤味だいだい〔5ic，Lt Persi−mmon〕の発
育上に、白〜茶白〔5cb〕の気菌糸を着生し、溶
解性色素は黄茶色を帯びる程度である。 (9) グリセリン・硝酸塩寒天培地（27℃培養） 発育は、無色〜うす黄〔2gc，Bamboo〕〜う
す黄茶〔3ic，Cinnamon〕、気菌糸は着生せず、
溶解性色素は茶色味を帯びる程度である。 (10) スターチ寒天培地（27℃培養） うす黄茶〜鈍だいだい〔4ic，Pastel Oran−
ge〕の発育上に、うつすらと白の気菌糸を着生
し、溶解性色素はわずかに茶色味を呈する程度で
ある。 (11) リンゴ酸石灰寒天培地（27℃培養） 無色〜うす黄茶の発育上に、白〜茶白の気菌糸
を着生し、溶解性色素はわずかに黄色味を呈する
程度である。 (12) セルロース（紙片添加合成液、27℃培養） うす黄〜うす黄茶の発育上に、白〜茶白の気菌
糸を着生し、溶解性色素は認められない。 (13) ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（20℃培養）、グルコース・
ペプトン・ゼラチン培地（27℃培養）共に、発育
は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素は認めら
れない。 (14) 脱脂牛乳（37℃培養） 発育はうす黄茶〜うす茶、気菌糸は着生せず、
溶解性色素は茶色味を帯びる程度である。 ３ 生理的性質 (1) 生育温度範囲 イースト・スターチ寒天培地〔可溶性デンプン
（小宗化学社製）1.0％、酵母エキス（大五栄養化
学社製）0.2％、ひも寒天3.0％、PH7.0〕を用い、
20℃、24℃、27℃、30℃、37℃、50℃の各温度で
試験の結果、50℃を除いて、そのいずれの温度で
も生育したが、最適温度は27℃〜37℃付近と推定
される。 (2) ゼラチンの液化（15％単純ゼラチン、20℃培
養：グルコース・ペプトン・ゼラチン、27℃培
養） 単純ゼラチン培地では、培養後14日目頃より液
化が始まり、その作用は弱い方である。グルコー
ス・ペプトン・ゼラチン培地では培養後30日間の
観察で、液化を認めなかつた。 (3) スターチの加水分解（スターチ。無機塩寒天
培地、及びスターチ寒天培地、いずれも27℃培
養） スターチ・無機塩寒天培地の場合は、培養後５
日目頃より、スターチ寒天培地では培養後10日目
頃より、共に水解性が認められ、その作用は中等
度である。 (4) 脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、37
℃培養） 培養後14日目頃より凝固が始まり、直ちに完了
後、ペプトン化が始まる。ペプトン化は培養後25
日目頃に完了する。その作用は共に中等度〜強い
方である。 (5) メラニン様色素の生成（トリプトン・イース
トプロス、ISP−培地１：ペプトン・イース
ト、鉄寒天、ISP−培地６：チロシン寒天、
ISP−培地７、いずれも27℃培養） いずれの培地でも、メラニン様色素の生成は認
められなかつた。 (6) 炭素源の利用（プリドハム・ゴドリーブ寒天
培地、ISP−培地９、27℃培養） Ｄ−グルコース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシ
ロース、Ｄ−フラクトース。Ｌ−ラムノース、ラ
フイノース、Ｄ−マンニトールを利用して発育
し、イノシトールを利用しない。シユクロース
は、おそらく利用していると推定される。 (7) リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、27
℃培養） 培養後14日目頃から、発育周辺のリンゴ酸石灰
を溶解し、その作用は中等度である。 (8) 硝酸塩の還元反応（0.1％硝酸カリ含有ペプ
トン水、ISP−培地８、27℃培養） 陽性である。 以上の性状を要約すると、MG802−AF1株は、
胞子のうを認めず、気菌糸はかぎ状〜ら旋状を呈
し、輪生枝は認められない。胞子の表面には、短
かいとげ状の突起を有し、また、菌核様構造が認
められる。 種々の培地で、うす黄〜うす茶〜茶灰の発育上
に、白〜茶白の気菌糸を着生し、溶解性色素は、
黄〜赤茶色を帯びる。メラニン様色素の生成は陰
性、スターチの水解性は中等度である。たんぱく
分解力は、ゼラチンの液化性弱く、ミルクの凝
固・ペプトン化は、中等度〜強い方である。 MG802−AF1株の細胞壁組成は、２，６−ジ
アミノビメリン酸（diaminopimelic acid）はLL
−型、糖成分としてアラビノースを含有しない。 これらの性状より、MG802−AF1株は菌核様
構造を有するカイニア属に属する放線菌であると
推定される。更にカイニア属及びストレプトミセ
ス（Streptomyces）属より、MG802−AF1株に
類似の既知菌種を検索した結果、カイニア・ルブ
ラ（Chainia rubra）〔インターナシヨナル ジ
ヤーナル オブ システマチツク バクテリオロ
ジー（Internatinal Journal of Systematic
Bacteriology）第22巻、第347頁（1972）〕が近
縁の種として挙げられた。 第１表に文献上のカイニア・ルブラとMG802
−AF1株の比較を示す。

【表】

〔MG802−AF1−Ｂの製造法〕

カイニア属に属するMG802−AF1−Ｂ生産菌
株を栄養源含有培地に接種して好気的に発育させ
ることによつてMG802−AF1−Ｂを含む培養物
が得られる。栄養源としては放線菌の栄養源とし
て使用しうるものが使用される。例えば市販され
ているペプトン、肉エキス、コーン、ステイー
ブ・リカー、綿実粉、落花生粉、大豆粉、酵母エ
キス、NZ−アミン、カゼインの水解物、硝酸ソ
ーダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなど
の窒素源、及び市販されているグリセリン、しよ
糖、でん粉、グルコース、ガラクトース、マンノ
ース、糖みつなどの炭水化物、あるいは脂肪など
の炭素源、及び食塩、リン酸塩、炭酸カルシウ
ム、硫酸マグネシウムなどの無機塩を使用でき
る。その他必要に応じて微量の金属塩、消泡剤と
しての動、植、鉱物油等を添加することもでき
る。これらのものは生産菌が利用し、MG802−
AF1−Ｂの生産に役立つものであればよく、公知
の放線菌の培養材料はすべて用いることができ
る。MG802−AF1−Ｂの大量生産には液体培養
が好ましく、培養温度は生産菌が発育し、
MG802−AF1−Ｂを生産する範囲で適用でき、
通常20〜40℃、好ましくは27〜37℃である。培養
は以上に述べた条件を使用するMG802−AF1−
Ｂ生産菌の性質に応じて適宜選択して行うことが
できる。 MG802−AF1−Ｂは培養液及び菌体の両方
に存在する。培養液よりは、PH10以下で酢酸ブ
チル、クロロホルム、ブタノール等水不混和性の
有機溶剤で抽出することができる。菌体よりは、
メタノール、アセトン等の有機溶剤で抽出後、抽
出液を減圧濃縮し培養液と同様の方法で更に抽
出することができる。上述の抽出法に加え、脂溶
性物質の採取に用いられる公知の方法、例えば吸
着クロマトグラフイー、ゲル過クロマトグラフ
イー、薄層クロマトグラフイーよりのかき取り、
高速液体クロマトグラフイー等を適宜組合わせあ
るいは繰返すことによつて純粋に採取することが
できる。 〔MG802−AF1−B1、MG802−AF1−B2、
MG802−AF1−B3の理化学的性状〕 MG802−AF1−B1、B2、B3の形状、質量分
析、分子式、比旋光度、紫外部吸収極大、赤外部
吸収極大、溶解性、酸性、中性、塩基性の区別、
シリカゲル薄層クロマトグラフイーのRf値を第
２表に示す。

【表】 ルム−メタノー

ル40〓1で展開)
メルク社Art. 0.24
0.34
13724(メタノー
ル−水95〓5で展
開)

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記一般式： （式中、R₁が水素、R₂がハロゲンを表わすか、
   又はR₁及びR₂が一緒になつて結合子を示し、R₃
   はハロゲンを示す）で表わされる化合物であるこ
   とを特徴とする抗生物質MG802−AF1−Ｂ。 ２ 該一般式で表わされる化合物が、下記式
   ： で表わされる化合物である特許請求の範囲第１項
   記載の抗生物質MG802−AF1−B1。 ３ 該一般式で表わされる化合物が、下記式
   ： で表わされる化合物である特許請求の範囲第１項
   記載の抗生物質MG802−AF1−B2。 ４ 該一般式で表わされる化合物が、下記式
   ： で表わされる化合物である特許請求の範囲第１項
   記載の抗生物質MG802−AF1−B3。 ５ カイニア属に属するMG802−AF1−Ｂ生産
   菌を培養し、その培養物から抗生物質MG802−
   AF1−B1、MG802−AF1−B2及びMG802−
   AF1−B3よりなる群から選択した抗生物質の少
   なくとも１種を分離採取することを特徴とする抗
   生物質MG802−AF1−B1、MG802−AF1−B2、
   MG802−AF1−B3の製造法。