JPH05500062A - 有用な組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 有用な組成物 抗生物質アンホテリシンＢは、ある覆の感染症、特にカビ生物Ｃａｎｄｉｄａに よって引き起こされる感染症に非常に有効である。一般的な治療剤は、天然の界 面活性剤デオキシコール酸ナトリウムに溶解させたアンホテリシン処方物からな るＦｕｎｇｉｚｏｎｅ　（登録商標、５ｑｉｂｂ社）と呼ばれる製品の形態であ る。この製品は５ｑｉｂｂ社から市販されている。

この製品は、Ｃａｎｄｉｄａ感染症を撲滅するには有効であるが、一方、有害反 応及び副作用がある。Ｆｕｎｇｉ　ｚｏｎｅ処方物は特に腎臓に対し毒作用をも つことが明らかに示されている（例えば、Ｒｅｙｎｏｌｄｓら（１９６３）、Ｍ ｅｄ。

Ｃｌ１ｎ、Ｎｏｒｔｈ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　４７　１１４９−１１５４参照）。

アンホテリシンの抗生物質としての性質は、細胞膜中のステロール類との結合及 びその後の膜孔の形成に起因する。カビ類の主要なステロールであるエルゴステ ロールとの結合は、哺乳類ステロールであるコレステロールとの結合よりも強固 である。それ故、アンホテリシンの毒性はカビ細胞に選択的であるが特異的では なく、これが患者における副作用の原因である。アンホテリシン投与のための別 の方法が研究されており、テキサスのＪｕｌｉａｎｏ、Ｌｏｐｅｚ　−Ｂｅｒｅ ｎｓｔｅｉｎらによって為された研究は特に注目すべきものであるｌｌえば、Ｍ 　ｅ　ｈ　ｔ　ａら（１９８４）。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ７７０　２３０−２３４参照）。こ れらの研究者らは、治療の点で利益ｌを得るために、リポソーム処方物を使用し た。同様の線に沿った他の研究としては、５ｑｕｉｂｂ社のブローリポソーム概 念（例えば、Ｐａｙｎｅら（１９８７）、Ｊ、Ｐｈａｒｍ。

Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、３９　２４−２８参照）が挙げられる。

リポソーム系は臨床的に有利であるが、一方、リポソーム類は一般的に大量に再 現性良く調製することが困難であり且つ不安定であることがよく知られている。

市販の脂肪エマルシコン製品（Ｉｎｔｒａｌｉｐｉｄ　（登録商標ＨＫａｂｉ社 ）と市販の可溶化アンホテリシン系（Ｆｕｎｇｉｚｏｎｅ）との単純な混合によ るアンホテリシンエマルジ薔ン系（例えば、ＥＰ−Ａ−２０２８３７参照）の製 造は可能であるが、この系は、混合機薬物の沈澱を生じさせ不安定であり、又数 時間以上おいた場合安定性に欠ける。アンホテリシンＢは明らかに添加処方物中 の油−水の界面に挿入されていない。

ＥＰ−Ａ−２１５３１３（ＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｊｄ社）は、患者への 投与に際し簡単に破壊するある種のエマルジョンを開示している。薬剤は、水を 加えてエマルシコンを形成する前に油相と混合される。ベンジルアルコールは共 界面活性剤として用いられる。このエマルジョンは投与に際し迅速に壊れるだけ でなく貯蔵中さほど安定というわけでもない。

ＷＯ８２１０１８２１（Ｃｈｉｎｏｉｎ社）は、エマルシコン中にまんべんなく 分散した固体懸濁液としての薬物を育する処方物を開示している。同じく、この エマルシコンは、さほど安定というわけでもなく薬物の毒性の問題を解決してい るわけでもない。従来の処方物の全てが局部使用であることは注目すべきである 。

ＥＰ−Ａ−２１１２５８（Ａｂｂｏ　ｔ　を社）は、本発明のエマルジョンとは 全く別のある種のマイクロエマルジ這ンを開示している。

本発明者らが初期に出願したＥＰ−Ａ−２９６８４５号明細書は、薬物が界面活 性剤層中に存在する、水中油型の界面活性剤で安定化した薬物エマルシランの調 製について述べている。

これは、従来の処方物が遭遇した毒性及び安定性の問題を減少させることが分か った。しかしながら、この薬剤エマルジョンは、例えば熱処理により滅菌の必要 が有り、これは薬物の約１０％の損失をもたらす。この結果得られた生成物は完 全に使用できるが、斯くの如き損失が避けられた場合明らかに経費節減につなが る。

本発明の目的は、処方の際の薬物の活性損失を減少させる薬物エマルジョンの製 造方法を提供することである。

本発明は、薬物エマルシランの形成に先立ち、高又は低ｐＨ溶液に薬物を溶解さ せることを特徴とする、水に難溶性である薬物の水中油型のエマルシランの製造 方法を提供する。「高ｐＨ溶液」とは、少なくともｐＨ９、好ましくは少なくと もｐＨ１１の溶液である。ｒ低ｐＨ溶液、とはｐＨ５以下、好ましくはｐＨ３以 下の溶液である。

有利には、高ｐＨ溶液は、好ましくは０．１Ｍから５．ＯＭ。

更に好ましくは０．５Ｍの水酸化ナトリウム溶液である。又、混合物も同じ強度 で用いることが出来る。ナトリウム及びカリウムの混合物は、体内のナトリウム ／カリウムイオンバランスの混乱を避けるために有利である。水酸化ナトリウム 又は水酸化カリウムのいかなる組み合わせも用いることが出来、これらの割合は 、個々の患者に対し臨床的に有利になるならば変えることが出来る。

低ｐＨ溶液は、好ましくは濃度０．１Ｍから５．０Ｍ、更に好ましくは約０．５ Ｍの塩酸であるのが都合がよい。薬物の溶解性に充分大きな変化を起こすならば 臨床的に許容し得るいかなる酸も用いることが出来る。これは当業者によって容 易に決定され得る。

好ましくは、この方法は、（ａ）薬物を高又は低ｐＨ溶液に溶解し、（ｂ）その 結果得られた溶液を予め形成したエマルジョン系に添加し、（Ｃ）ステップ（ｂ ）の生成物を少なくとも実質的に中和するのに適した量の酸、塩基又は緩衝液を 該エマルジョンに添加し、及び（ｄ）ステップ（Ｃ）で酸又は塩基を添加した場 合必要に応じてステップ（Ｃ）の生成物のｐＨを所望の値に調整するのに充分な 緩衝液を添加するステップを包含する。ステップ（Ｃ）に於る酸又は塩基の添加 後、エマルシランから小量の試料を採取し、ｐＨが望ましい値かどうかをみるの に適した手段により調べる。ｐＨが望ましくない場合には、緩衝液を加えること ができる。通常中性のエマルジョン、即ち約ｐＨ７，４のエマルジョンをもつの が望ましい。

臨床的に許容し得るいかなる酸、塩基又は緩衝液をステ・ツブ（Ｃ）で用いるこ とが出来る。好ましくは、酸は塩酸、酢酸又はグルクロン酸であり、塩基は水酸 化ナトリウム又は水酸化カリウムであり、緩衝液はアミノ酸緩衝液又は燐酸緩衝 液である。

市販の且つ非経口的に許容し得るいかなるエマルジョンも用イルコとが出来、例 えば、Ｉｎｔｒａｌ　１ｐｉｄ　（登録商標）、Ｉｖｅｌｉｐ（登録商標）、Ｌ ｉｐｏｆｕｎｄｉｎ（登録商標）　、Ｅｌｏｌｉｐｉｄ　（登録商標）、Ｅｎｄ ｏｌｉｐｉｄ及びＢｒａｕｎ社から市販されているＭＣＴ／ＬＣＴエマルジョン がある。代表的なエマルジ」ンは、３％から３０％の大豆油、サフラワーオイル 又はココナツツオイル（しかしながら、ココナツツオイルは静脈注射には用いら れていない）、及び、分画又は水素化して特定の性質を供与することのできる卵 又は大豆レシチンの如き非経口的に許容し得る乳化剤０．２％から５％を含有す ることが出来る。又、エマルジョンは、グリセロールの如き等強化調整剤、及び アミノ酸及びグルコースを含有することが出来る。かかる系の処方及び性質は、 当業者に周知である。

又、この方法を用いて、薬物が十分な親和性をもつ、例えばリポソーム、微粒子 又はマイクロエマルジョンのような非経口的に許容し得る任意の分散液に疎水性 薬物を添加することが出来る。

エマルシラン中の酸及びアルカリによって塩が形成される。

水酸化ナトリウム及び塩酸の場合塩化ナトリウムが形成されるが、エマルシラン の不安定化を回避するために、塩の最終濃度は５０ｍＭ以下、好ましくは１０ｍ Ｍ以下にすべきである。この塩の存在は、薬物エマルシランの等強化に寄与する 。従って、等張化剤をほとんど含まないか又は全く含まな−１予め形成されたエ マルジョンの使用が可能である。

ステップ（ａ）で得られた溶液、予め形成したエマルレジ運ン、酸及び必要に応 じて用いる緩衝液は、前述の方法での使用時；こ無菌であることが望ましい。こ れは、ステップ（ｂ）、（Ｃ）及び（ｄ）に於ける溶液の添加を滅菌用フィルタ ーを通して注入することにより達成することが出来る。かかるフィルター（よ当 業者に周知である。フィルターの孔径は全ての微生物を除去するのに充分小さく あるべきであり、斯くして滅菌する。

０．２μｍの孔径が適当である。熱処理のごとき他の滅菌ステップを必要としな いが、毒物シラツクを避けるために発熱性勧賞の存在しない材料を用いるべきで ある。かかる滅菌操作により、通常遭遇した薬物活性の損失問題が減少すること が分かった。

本発明の第二の態様は、薬物が主として油の小滴と結合している、前述の方法に より形成されたエマルジョンを提供する。

「主として結合している」とは、薬物の少なくとも５０％、好ましくは６０％、 ７０％、８０％、９０％又は９９％が油の小滴と結合していることを意味する。

更に好ましくは、実質的に全ての薬物が油の小滴と結合している。油の小滴は、 遠心によりエマルジョンから分離することができ、薬物は油層に存在することが 示される。

エマルシラン中で用いられる薬物は、水に難溶性のものが好ましい。「難溶性」 とは、都合のよい容量の薬物溶液の投与により達成されるべき治療レベルに対し て不十分な溶解性のものをいう。薬物を含む処方物の輸液に関しては、通常１時 間当たり１００ｍ１以下の投与が望ましいが、好ましくは５０ｍ　ｌ／時時下下 更に好ましくは３０又は１０ｍ１／時以下である。本発明の処方は、特に、薬局 方に於て水に「実質的に溶けない」に分類される薬物に特に好適である。しかし ながら、この薬物は低又は高ｐＨのいずれかに溶解すべきである。

薬物が適しているかどうかは、日常的な非発明的実験により当業者に容易に決定 できるであろう。

薬物としては、全身麻酔薬、局所麻酔薬、催眠薬、鎮静剤、オータコイド又はオ ータコイド拮抗薬（例えばプロスタグランジン）、抗生物質又は抗菌薬、抗悪性 腫瘍薬（特にメトトレキセートの如き細胞毒剤）又は免疫抑制薬が挙げられる。

特に好ましい薬物群は、二スタチンのようなテトラエン類、アリオマイシンのよ うなペンタエン類、フィリピンのようなメチルペンタエン類、ミコチシンのよう なカルボニルペンタエン類、クリブトシジンのようなヘキサエン類、デルモスタ チンのようなカルボニルヘキサエン類、及びアンホテリシンＢのようなヘプタエ ン類を含むポリエン抗生物質である。かかる抗生物質は、市販されているか又は 一般的に当業者に既知の方法により調製することが出来る。好ましくは、前記薬 物はアンホテリシンＢにスタチン又はフィリピンであり、更に好ましくはアンホ テリシンＢである。この方法の第一段階に於て、これらの薬物には強アルカリが 用いられる。強酸は、アモジアキン、ブビバカイン、クロルサイクリジン、クロ ルプロマジン、デキストロメトルファン、ジフェンヒドラミン、エトプロパジン 、フェンフルラミン、フルフェナジン、フルフェナジン、イミブラミン、メクロ ジン、ノルトリブチリン、フエナゾシン、フェンサイクリジン、プロマシン、プ ロメタシン、トリフルオロペラジン、トリフルプロマシンもしくはベラパミル、 又は可溶性酸塩、特に塩化水素塩を形成する他の活性化合物のような塩基性薬物 の溶解に用いることが出来る。

薬物量は、当業者によって投与計画等に適するように選択することが出来るが、 アンホテリシンＢの場合、代表的には５ｍｇ／ｍｌまで、好ましくは約１又は２ 　ｍ　ｇ　／　ｍ　ｌである。

本発明のエマルジョンは、局所、経口、経こう門、又は肺への「エアゾル噴霧」 により投与することができるが、通常非経口的に、例えば、連続静脈内点滴によ り又は静脈注射、皮下注射又は筋肉注射により投与する。皮下デポの如き徐放性 製剤を用いることが出来る。毎日の投与量は、患者、症状及び薬物にあわせて当 業者によって決定されるが、代表的には体重当り０．１０ｍｇ／ｋｇ／日からｌ ｏｍｇ／ｋｇ／日である。

アンホテリシンＢの如きポリエン抗カビ剤の場合、本発明の処方は、種々のカビ 感染、例えばＣａｎｄｉｄａ株（特；こ以。

Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｓｐｐ、ｌこよって弓１き起こされる感染症に罹患し たヒト又は動物の治療に有用である。これらの感染症は、免疫が低下した患者、 例えば免疫抑制剤を用ｕまた治療をした患者、又は後天的免疫不全症候群（ＡＩ ＤＳ、即ち急性エイズウィルス感染症）に罹患した患者に於ては特に一般的であ り深刻である。

本発明のエマルジョンは、製造元により又は使用直前に薬剤師により調合するこ とができる。エマルシコンを不安定１こする薬物には後者の方が有利である。従 って、使用直前ｌこ薬物エマルジョンを調合する必要がある。従って、本発明の 別の実施態様は、（ａ）既知量の薬物、（ｂ）既知量の高又は低ｐＨ溶液、（Ｃ ）高又は低ｐＨ溶液を少なくとも実質的に中和するの番二適した量の酸、塩基又 は緩衝液から成るキットを提供する。好ましくは、このキットは、更に（ｉ）予 め形成されたエマルジョン、及び（ｉ　ｉ）少なくとも１種類の滅菌用フィルタ ーを含む。

この薬物エマルジョンは、全非経口栄養剤（Ｔ　Ｐ　Ｎ）系の一部として用いる ことが出来る。この場合、薬物エマルシコンを処方した後、ＴＰＮ成分（糖、ア ミノ酸等）と混合する。これはＴＰＮ混合液の不安定化を回避する。いくつかの 薬物の場合、処方工程のステップ（ａ）で用いる溶液の容量が少ないならば、Ｔ ＰＮ混合液そのものがエマルジョンを中和するのに十分な緩衝能を有することか ら、中和工程（Ｃ）を省略することが可能である。

本発明の方法は、実施するに簡便であり、粒子サイズ安定性を増加させるエマル シコンをつ（ることが分かつている。又、この方法は、メタノールの如き薬物の 共溶媒の使用を回避する。

非経口投与のための、エマルジョン中のかかる溶媒の存在は、多数の人々により 、たとえ痕跡程度であったとしても許容できないとみなされている。

以下に、図１が一般的細菌フイルターを示し、図２及び３が毒性データを示す添 付の図面を参照しながら、実施例により好ましい実施態様を説明する。

実施例１　アンホテリシンＢエマルジョンの調製１００ｍｇのアンホテリシンＢ を、超音波をかけることにより、０．５Ｍの水酸化ナトリウム２ｍｌに溶解させ る。しかる後、この溶液を注射器に取り、図１に示す如き０．２μｍのフィルタ ーを通してＩｎｔｒａｌｉｐｉｄ２０％の１００ｍ１容瓶に注入する。しかる後 、注射用の水２ｍｌを注射器に取り同じフィルターを通してエマルジョンに注入 する。その後、フィルターを介して０．５Ｍの塩酸２ｍｌをエマルジョンに注入 し、続けて注射用水２ｍｌを注入する。しかる後０．ＩＭ燐酸緩衝液（ｐＨ７） を２ｍｌ加える。瓶全体を振盪により完全に混ぜ合わせる。

図１のフィルターは、それぞれ液体用の頂ｌＥ（入口）及び底部（出口）２．３ を育する密封ハウジング１から成り、このハウジング１は、フィルター支持体７ 上の２μｍ孔のメンブランフィルタ−６により二つの区画４．５に分割されてい る。滅菌しようとする液体は、第一区画４に入りフィルター６を通過して第二区 画５に入る、斯くして滅菌され、出口３を通って出る。

実施例２　エマルジョンの安定性 前述の方法により調製したエマルシコンは、５０日間にわたって小滴サイズの増 加が検出されなかった。

（Ｍａｌｖｅｒｎ　Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ；Ｄ（ｖ、０．９）＝０．７２μｍ 　開始時、０．６８μｍ　５０日後）。

実施例３　アンホテリシンＢの安定性 エマルジョンをジメチルスルホオキシド中に分散させ、アンホテリジンの吸光度 を５１４　ｎｍで測定した。

アンホテリシンＢの濃度は、開始時（ｔ＝０）の０．４６ｍ　ｇ／　ｍ　ｌから ５０日後の０．４３ｍｇ／ｍｌに減少した。

前述の実施例１に於けると同様に調製した処方物の、イヌ腎臓細胞に対する毒性 を、長期間、単層培養に於て測定した。細胞系（ＭＤＣＫ　ＮＢＬ−２）を改良 ＭＥＭ培地中で樹立し、ミリセル（Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ）ＨＡラフイルター上融 合性の単層として増殖させた。単層の保全性（ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ）をその抵抗 によって測定した。カルシウム及びマグネシウムを含まないハンクス平衡塩溶液 （ＨＢＳＳ）に細胞単層を移してエマルジョンの凝集を回避し、アンホテリシン Ｂ処方物を１００μｇ　／　ｍ　ｌ濃度になるように加え、４８時間にわたって 抵抗を測定した。対照実験をアンホテリシン非含有エマルシコン（Ｉｎｔｒａｌ ｉｐｉｄ２０％）及び市販のアンホテリシン処方物（Ｆｕｎｇｉｚｏｎｅ、５ｑ ｕｉｂｂ社）を用いて行った。抵抗対時間の代表的プロットを図２（アンホテリ シン濃度１０　ａ　ｇ　ｍ　ｌ−１）に示す。黒・四角はＦｕｎｇｉｚｏｎｅ、 白四角はアンホテリシンエマルジョン、白丸は対照としてのＩｎｔｒａｌ　１ｐ ｉｄを表す。Ｆｕｎｇｉ　ｚｏｎｅの添加による融合性（ｃｏｎｆ　Ｉｕｅｎｃ ｅ）の損失は、６時間以内で明らかであり、単層抵抗の急激な落下によって示さ れる。

Ｉｎｔｒａｌ　１ｐｉｄ対照又はアンホテリシンエマルジｊン処方物のいずれか を用いたものは、わずかな減少が見られたのみであり、この減少は、低塩ＨＢＳ Ｓ培地に変えた後の細胞の生存力の僅かな変化のためと思われる。６時間後の対 照の抵抗のパーセントとして算定した用量一応答曲線を図３に示す。黒四角はＦ ｕｎｇｉｚｏｎｅを、白四角はアンホテリシンエマルジタンを表す。エマルジョ ン処方物の低毒性は、アンホテリシン濃度１００μｇｍビ１まで維持される。

この結果は、明らかにアンホテリシンＢエマルシラン処方物の、腎臓細胞に対す る低毒性を示している。

実施例５　クロルブロマジンエマルジタンの調製クロルプロマジン２ｍｇ／ｍｌ を含む約１００ｍ１のエマルジョンを調製する。

クロルプロマジン（２００ｍｇ）を塩酸（０，５Ｍ；２ｍ１）に溶解させ、０． ２μｍフィルターを通してＩｎｔｒａｌｉｐｉｄ　２０％の１００ｍ１容瓶に注 入した。

このフィルターを、注射用の水１ｍｌを通過させて２回洗浄した。しかる後、同 じフィルターを介して水酸化ナトリウム（０，５Ｍ、２ｍ１）　、続けて燐酸緩 衝液（０，５Ｍ、ｐＨ７，０，１ｍ１）を注入した。瓶は添加の間中連続して渦 巻くように撹拌した。

流入する液体 流出する滅菌液体 時間／ｈｏｕｒｓ 国際調査報告 ＋−＋ａｌｅａｒ１１−・＋ａ−＊ｈｃ＋＋ｎ−５−，ＰＣＴ／ＧＢ９０１０１ ３０９国際調査報告

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. １．薬物エマルジョンの形成に先立ち、高又は低ｐＨ溶液に薬物を溶解させるこ とを特徴とする、水に難溶性である薬物の水中油型エマルジョンの製造方法。
2. ２．溶液が高ｐＨ溶液であり、０．１Ｍから５．０Ｍの範囲の水酸化ナトリウム 及び／又は水酸化カリウム溶液であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. ３．水酸化物溶液が、実質的に０．５Ｍであることを特徴とする請求項２に記載 の方法。
4. ４．薬物がポリエン抗生物質であることを特徴とする請求項２又は３に記載の方 法。
5. ５．薬物がアンホテリシンＢであることを特徴とする請求項４に記載の方法。
6. ６．溶液が低ｐＨ溶液であり、０．１Ｍから５．０Ｍの範囲の塩酸であることを 特徴とする請求項１に記載の方法。
7. ７．塩酸が、実質的に０．５Ｍであることを特徴とする請求項６に記載の方法。
8. ８．（ａ）薬物を高又は低ｐＨ溶液に溶解し、（ｂ）その結果得られた溶液を予 め形成したエマルジョンに添加し、（ｃ）ステップ（ｂ）の生成物を少なくとも 実質的に中和するのに適した量の酸、塩基又は緩衝液を該エマルジヨンに添加し 、及び（ｄ）ステップ（ｃ）で酸又は塩基を添加した場合、必要に応じてステッ プ（ｃ）の生成物のｐＨを所望の値に調整するのに充分な緩衝液を添加するステ ップを包含することを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
9. ９．ステップ（ｃ）で用いる酸が、塩酸、酢酸又はグルクロン酸であり、ステッ プ（ｃ）で用いる塩基が、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムであり、ステッ プ（ｃ）又は（ｄ）で用いる緩衝液が、アミノ酸緩衝液又は燐酸緩衝液であるこ とを特徴とする請求項８に記載の方法。
10. １０．エマルジヨン中に形成される塩の最終濃度が５０ｍＭ以下であることを特 徴とする請求項８又は９に記載の方法。
11. １１．エマルジョン中に形成される塩の最終濃度が１０ｍＭ以下であることを特 徴とする請求項１０に記載の方法。
12. １２．ステップ（ａ）で得られた溶液、予め形成されたエマルジョン、並びに、 ステップ（ｃ）及び（ｄ）の酸、塩基又は緩衝液が前記方法での使用時に無菌で あることを特徴とする、請求項８から１０のいずれか１項に記載の方法。
13. １３．薬物が主として油の小滴と結合していることを特徴とする、請求項１〜１ ２のいずれか１項に記載の方法により作られたエマルジョン。
14. １４．（ａ）既知量の薬物、（ｂ）既知量の高又は低ｐＨ溶液、及び（ｃ）高又 は低ｐＨ溶液を少なくとも実質的に中和するのに適した量の酸、塩基又は緩衝液 から成ることを特徴とする、薬物の水中油型エマルジョンを作るためのキット。
15. １５．更に（ｉ）予め形成されたエマルジョン、及び（ｉｉ）少なくとも１種類 の滅菌用フィルターを含むことを特徴とする請求項１４に記載のキット。
16. １６．請求項１から１２のいずれか１項に記載の方法により作られた有効且つ無 毒量のエマルジョンを、ヒト又は動物に投与することを包含する、ヒト又は他の 動物に於ける病気の治療又は予防の方法。