JPH0569516B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0569516B2 JPH0569516B2 JP14582085A JP14582085A JPH0569516B2 JP H0569516 B2 JPH0569516 B2 JP H0569516B2 JP 14582085 A JP14582085 A JP 14582085A JP 14582085 A JP14582085 A JP 14582085A JP H0569516 B2 JPH0569516 B2 JP H0569516B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bitoxin
- neosurgatoxin
- producing
- bacteria
- prosulgatoxin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
産業上の利用分野
本発明は、バイ毒素すなわちエオスルガトキシ
ンおよび（または）プロスルガトキシンの製造法
に関するものである。 従来の技術 ネオスルガトキシンおよびプロスルガトキシン
は、食中毒原因となつた食用巻貝・バイ
（Babylonia japonica、別名「海つぼ」）の中腸
腺から原因毒素として単離され、次のような構造
を有することが確認されている生理活性物質であ
る（海洋科学、16、576、1984；動物と自然、14、
No.５、25、1984）。
ンおよび（または）プロスルガトキシンの製造法
に関するものである。 従来の技術 ネオスルガトキシンおよびプロスルガトキシン
は、食中毒原因となつた食用巻貝・バイ
（Babylonia japonica、別名「海つぼ」）の中腸
腺から原因毒素として単離され、次のような構造
を有することが確認されている生理活性物質であ
る（海洋科学、16、576、1984；動物と自然、14、
No.５、25、1984）。
【化】
但し、
ネオスルガトキシン：
【化】
プルスルガトキシン：
(a) 形態
培養の対数増殖期前期〜中期には桿状を呈
し、その他の時期にいては球状を呈する。（第
１図ないし第４図参照） 無芽胞 グラム陽性 抗酸性 − (b) 倍地における生育状況 トリプトソイブイヨン培地（栄研製；組成：
トリプトン17ｇ／、ソイペプトン３ｇ／、
ブドウ糖2.5ｇ／、K2HPO42.5ｇ／、
NaCl5ｇ／；PH：7.3）で、温度：30℃で振
盪培養を行うと良好な生育を示す。 (c) 生理学的性質 硝酸塩の還元性 − VPテスト − クエン酸利用能 − カタラーゼ ＋ 好気性 ブドウ糖から酸を生成しない エスクリン加水分解能 − 溶血性（馬血液） − 耐熱性（63℃、30分） − 好塩性 運動性 − カゼイン分解能 ＋ ゼラチン分解能 ＋ この細菌・YIT−6013は、臭素化合物、好ま
しくは臭化ナトリウム、臭化カリウムなどアルカ
リ金属の臭化物を含有する培地で、３〜７日間好
気的条件下で培養すると、菌体外にバイ毒素を産
生する。なおこの菌株はネオスルガトキシンとプ
ロスルガトキシンとの両方を産生するものと思わ
れるが、細菌・YIT−6013以外に、ネオスルガ
トシンのみを産生し、生成したネオスルガトキシ
ンの一部が培養液中でプロスルガトキシンに変化
することによりネオスルガトキシンおよびプロス
ルガトキシンを与える菌株も存在するものと思わ
れ、かかる菌株もまた本発明の製造法において使
用することができる（細菌・YIT−6013の場合
も、生成したネオスルガトキシンの一部が培養液
中でプロスルガトキシンに変化する可能性があ
る。）。 培養用の培地組成は、臭素化合物を必須成分と
することを除けば特に限定されるものではない
が、好ましいのは、ペプトン類を主栄養成分とし
て含有する培地である。好ましい臭素化合物濃度
はNaBrとして約0.01〜0.5％であるが、この臭素
化合物の全部または一部は海水（Br-約70ppmを
含む）の形で培地に導入してもよい。培養液のPH
は6.5〜7.5、培養温度は25〜33℃が、それぞれ適
当である。 培養終了後、培養液からバイ毒素を採取するに
は、菌体を遠心分離により除いた後、たとえばセ
フアデツクスＧ−25のカラムを通して、バイ毒素
の存在を示すフラクシヨンを採取する。なお分離
の指標としては、マウスの瞳孔散大活性（日本水
産誌、33、661、1967）が適当である。得られた
活性フラクシヨンを高速液体クロマトグラフイー
により更に精製すると、ネオスルガトキシンとプ
ロスルガトキシンとが、分離した状態で得られ
る。 上述のような本発明の製法により得られるネオ
スルガトキシンおよびプルスルガトキシンは、毒
化バイから得られたネオスルガトキシンおよびプ
ロスルガトキシンと薬理作用において完全に一致
する。 実施例 以下実施例を示して本発明を説明する。 実施例 １ トリプトン17ｇ、ソイペプトン３ｇ、ブドウ糖
2.5ｇ、K2HPO42.5ｇ、NaCl15ｇ、NaBr1ｇ、酵
母エキス３ｇ、蒸留水3600mlおよび海水2400mlか
らなるPH7.3の培地３に細菌・YIT−6013を接
種し、28℃で５日間振とう培養した。 培養終了後、培養液を遠心分離して菌体を除い
た後、セフアデツクスＧ−25のカラムを通してバ
イ毒素活性を有するフラクシヨンを採取し、得ら
れた活性フラクシヨンを更に高速液体クロマトグ
ラフイーにより分離した。 以上の方法により、ネオスルガトキシン約60n
ｇおよびプルスルガトキシン約60nｇが得られ
た。これらは、高速液体クロマトグラフイーおよ
びモルモツト摘出回腸に対する抗ニコチン活性に
おいて、毒化バイより得られたネオスルガトキシ
ンおよびプロスルガトキシンの標品と一致するも
のであつた。 発明の効果 本発明によれば、供給が不安定な毒化バイに依
存することなしに、何時でも必要な量だけバイ毒
素を製造することが可能になる。したがつて本発
明により、バイ毒素を研究用試薬あるいは医薬と
して実用化することが初めて可能になり、さらに
は毒化バイによる中毒の発生を防止するための研
究が進展するものと期待される。
し、その他の時期にいては球状を呈する。（第
１図ないし第４図参照） 無芽胞 グラム陽性 抗酸性 − (b) 倍地における生育状況 トリプトソイブイヨン培地（栄研製；組成：
トリプトン17ｇ／、ソイペプトン３ｇ／、
ブドウ糖2.5ｇ／、K2HPO42.5ｇ／、
NaCl5ｇ／；PH：7.3）で、温度：30℃で振
盪培養を行うと良好な生育を示す。 (c) 生理学的性質 硝酸塩の還元性 − VPテスト − クエン酸利用能 − カタラーゼ ＋ 好気性 ブドウ糖から酸を生成しない エスクリン加水分解能 − 溶血性（馬血液） − 耐熱性（63℃、30分） − 好塩性 運動性 − カゼイン分解能 ＋ ゼラチン分解能 ＋ この細菌・YIT−6013は、臭素化合物、好ま
しくは臭化ナトリウム、臭化カリウムなどアルカ
リ金属の臭化物を含有する培地で、３〜７日間好
気的条件下で培養すると、菌体外にバイ毒素を産
生する。なおこの菌株はネオスルガトキシンとプ
ロスルガトキシンとの両方を産生するものと思わ
れるが、細菌・YIT−6013以外に、ネオスルガ
トシンのみを産生し、生成したネオスルガトキシ
ンの一部が培養液中でプロスルガトキシンに変化
することによりネオスルガトキシンおよびプロス
ルガトキシンを与える菌株も存在するものと思わ
れ、かかる菌株もまた本発明の製造法において使
用することができる（細菌・YIT−6013の場合
も、生成したネオスルガトキシンの一部が培養液
中でプロスルガトキシンに変化する可能性があ
る。）。 培養用の培地組成は、臭素化合物を必須成分と
することを除けば特に限定されるものではない
が、好ましいのは、ペプトン類を主栄養成分とし
て含有する培地である。好ましい臭素化合物濃度
はNaBrとして約0.01〜0.5％であるが、この臭素
化合物の全部または一部は海水（Br-約70ppmを
含む）の形で培地に導入してもよい。培養液のPH
は6.5〜7.5、培養温度は25〜33℃が、それぞれ適
当である。 培養終了後、培養液からバイ毒素を採取するに
は、菌体を遠心分離により除いた後、たとえばセ
フアデツクスＧ−25のカラムを通して、バイ毒素
の存在を示すフラクシヨンを採取する。なお分離
の指標としては、マウスの瞳孔散大活性（日本水
産誌、33、661、1967）が適当である。得られた
活性フラクシヨンを高速液体クロマトグラフイー
により更に精製すると、ネオスルガトキシンとプ
ロスルガトキシンとが、分離した状態で得られ
る。 上述のような本発明の製法により得られるネオ
スルガトキシンおよびプルスルガトキシンは、毒
化バイから得られたネオスルガトキシンおよびプ
ロスルガトキシンと薬理作用において完全に一致
する。 実施例 以下実施例を示して本発明を説明する。 実施例 １ トリプトン17ｇ、ソイペプトン３ｇ、ブドウ糖
2.5ｇ、K2HPO42.5ｇ、NaCl15ｇ、NaBr1ｇ、酵
母エキス３ｇ、蒸留水3600mlおよび海水2400mlか
らなるPH7.3の培地３に細菌・YIT−6013を接
種し、28℃で５日間振とう培養した。 培養終了後、培養液を遠心分離して菌体を除い
た後、セフアデツクスＧ−25のカラムを通してバ
イ毒素活性を有するフラクシヨンを採取し、得ら
れた活性フラクシヨンを更に高速液体クロマトグ
ラフイーにより分離した。 以上の方法により、ネオスルガトキシン約60n
ｇおよびプルスルガトキシン約60nｇが得られ
た。これらは、高速液体クロマトグラフイーおよ
びモルモツト摘出回腸に対する抗ニコチン活性に
おいて、毒化バイより得られたネオスルガトキシ
ンおよびプロスルガトキシンの標品と一致するも
のであつた。 発明の効果 本発明によれば、供給が不安定な毒化バイに依
存することなしに、何時でも必要な量だけバイ毒
素を製造することが可能になる。したがつて本発
明により、バイ毒素を研究用試薬あるいは医薬と
して実用化することが初めて可能になり、さらに
は毒化バイによる中毒の発生を防止するための研
究が進展するものと期待される。
図面は細菌・YIT−6013の増殖過程における
形態変化を示す顕微鏡写真（倍率2500倍）であつ
て、第１図は接種菌、第２図は対数増殖期前期、
第３図は対数増殖期中期、第４図は対数増殖期後
期以降を、それぞれ示す。
形態変化を示す顕微鏡写真（倍率2500倍）であつ
て、第１図は接種菌、第２図は対数増殖期前期、
第３図は対数増殖期中期、第４図は対数増殖期後
期以降を、それぞれ示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ バイ毒素産生能を有するアースロバクター属
細菌を臭素化合物含有培地で培養し、培養液より
バイ毒素を採取することを特徴とするバイ毒素の
製造法。 ２ バイ毒素産生能を有するアースロバクター属
細菌としてYIT−6013（微工研菌寄第8325号）を
用いる特許請求の範囲第１項記載の製造法。 ３ バイ毒素がネオスルガトキシンもしくはプロ
スルガトキシンまたはこれらの両方である特許請
求の範囲第１項記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14582085A JPS6219097A (ja) | 1985-07-04 | 1985-07-04 | バイ毒素の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14582085A JPS6219097A (ja) | 1985-07-04 | 1985-07-04 | バイ毒素の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6219097A JPS6219097A (ja) | 1987-01-27 |
| JPH0569516B2 true JPH0569516B2 (ja) | 1993-10-01 |
Family
ID=15393888
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14582085A Granted JPS6219097A (ja) | 1985-07-04 | 1985-07-04 | バイ毒素の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6219097A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06181423A (ja) * | 1992-12-14 | 1994-06-28 | Kawasaki Steel Corp | ディジタルフィルタ |
-
1985
- 1985-07-04 JP JP14582085A patent/JPS6219097A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6219097A (ja) | 1987-01-27 |
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