JPH06122623A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 カルコン化合物を有効成分として含有し、腫
瘍細胞増殖抑制作用及び発ガンプロモーター抑制作用を
有する抗腫瘍剤を提供する。 【構成】 次式のカルコン化合物を有効成分として含有
する抗腫瘍剤。 〔式中、Ｒは−ＯＨ，−ＣＨ₃を；Ｒ₁はＨ，−ＯＨ，−
ＯＣＨ₃，−ＣＨ₃を；Ｒ₂はＨ，−ＣＨ₃をそれぞれ表
す。〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗腫瘍剤に関し、詳し
くは、カルコン化合物を有効成分として含有し、腫瘍細
胞増殖抑制作用及び発ガンプロモーター抑制作用を有す
る抗腫瘍剤を提供するものである。

【０００２】

【従来の技術】生薬中に存在するフラボノイド類（例え
ばクエルセチン、アピゲニン、リクイリチゲニン等）
が、腫瘍細胞増殖抑制作用あるいは発ガンプロモーター
抑制作用を有することが報告されている。

【０００３】しかし、これらの化合物は生薬より抽出、
分離し、さらに精製しなければならない。また、化学合
成により得ようとすると、数段階の工程が必要であり、
合成法によっては一旦カルコン誘導体を作り、それを閉
環させる必要がある。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】上述したように、従来
の方法でフラボノイド化合物を得るには、複雑な作業あ
るいは多段階の工程が必要である。

【０００５】本発明は、上記観点からなされたものであ
り、複雑な作業を必要とせず、短い工程で有効な化合物
を得ることを課題とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を
解決するために、生薬中に存在し抗腫瘍活性を有する物
質を検索している過程で、新彊甘草抽出物に含まれるリ
コカルコンＡが有効であることを見出し、さらにその関
連化合物でより効力が高く、合成も行いやすいカルコン
を鋭意探索した結果、有効な化合物を開発することに成
功し、本発明に至った。

【０００７】すなわち本発明は化１で表されるカルコン
化合物を有効成分として含有する抗腫瘍剤、及び化８で
表されるリコカルコンＡを有効成分として含有する抗腫
瘍剤である。

【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。 ＜１＞本発明に用いるカルコン化合物 上述したように、本発明の抗腫瘍剤は、化９で表される
カルコン化合物、あるいはリコカルコンＡを有効成分と
して含有するものである。

【０００９】

【化９】

【００１０】但し、式中Ｒは−ＯＨ又は−ＣＨ₃を、Ｒ₁
は−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃、−ＣＨ₃のいずれかを、Ｒ
₂は−Ｈ又は−ＣＨ₃をそれぞれ表す。上記カルコン化合
物としては、化２で表される３−ハイドロキシカルコ
ン、化３で表される３，３’−ジハイドロキシカルコ
ン、化４で表される３’−メトキシ−３−ハイドロキシ
カルコン、化５で表される３’−メチル−３−ハイドロ
キシカルコン、化６で表される３’−ハイドロキシ−３
−メチルカルコン、化７で表される３−ハイドロキシ−
４’−メチルカルコン等が挙げられる。

【００１１】本発明に用いるカルコン化合物及びリコカ
ルコンＡは、必要に応じてその塩として提供することも
可能である。例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等が例
示できる。

【００１２】尚、３’−メチル−３−ハイドロキシカル
コン、３’−ハイドロキシ−３−メチルカルコンは新規
化合物である。以下に、３’−メチル−３−ハイドロキ
シカルコンの物性を示す。

【００１３】 融点 ： １０６〜１０７℃ 質量スペクトル ％Int ｍ／ｚ ２３８（Ｍ⁺） （base） ｍ／ｚ ２３７ （59.0） ｍ／ｚ １４７ （22.0） ｍ／ｚ １１９ （28.3） 高分解能質量スペクトル 計算値 ： ２３８．０９９４ 測定値 ： ２３８．０９９４

【００１４】＜２＞本発明に用いるカルコン化合物の製
法 上記カルコン化合物は、すべて常法による化学合成で得
られる。以下に製造法を示す。

【００１５】化１０に示すように、目的化合物に必要な
官能基を有するアセトフェノンと、同じく必要な官能基
を有するベンズアルデヒドをクライゼン−シュミット縮
合させることにより、前記カルコン化合物が得られる。
尚、官能基の種類に応じて、必要に応じてその官能基に
保護を行い縮合させた後、脱保護し目的化合物を得る。

【００１６】

【化１０】

【００１７】但し、Ｒ¹は−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃又は
−ＣＨ₃、Ｒ²は−Ｈ、−ＯＨ又は−ＣＨ₃を表す。次
に、製造法の一例として、３’−メチル−３−ハイドロ
キシカルコンの製造例を示す。

【００１８】ｍ−ハイドロキシベンズアルデヒド５ｇを
アセトニトリル１５０ｍｌに溶解し、更に１８−クラウ
ン−６−エーテル１ｇ及びクロルジメチルエーテル５ｍ
ｌを加え、室温でしばらく撹伴した後、無水炭酸カリウ
ム２５ｇを撹拌しながら加え、一時間反応を続けた。

【００１９】反応液を濾過した後、濾液を減圧濃縮し、
ジエチルエーテル−水で分配し、エーテル層を分取し
た。得られたエーテル層を硫酸ナトリウムを用いて６時
間乾燥させた後、硫酸ナトリウムを濾過除去し、溶媒を
４０℃以下で留去した。得られた残渣をシリカゲルクロ
マトグラフィー（溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝９：
１）により分離し、ｍ−メトキシメトキシベンズアルデ
ヒド５．５ｇを得た。

【００２０】このようにして得られたｍ−メトキシメト
キシベンズアルデヒド５．５ｇとｍ−メチルアセトフェ
ノン４．５ｇをエタノール４０ｍｌに溶解し、更に２５
％水酸化カリウム水溶液２０ｍｌを加え、室温にて２４
時間撹拌した。

【００２１】反応終了後、反応液をＩＮ ＨＣｌで中和
し、減圧濃縮した後に、ジエテルエーテル−水で分配
し、エーテル層を硫酸ナトリウムを用いて６時間乾燥さ
せた。乾燥後、硫酸ナトリウムを濾過除去し、溶媒を４
０℃以下で留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（展開溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝４：
１）により分離し、３−メトキシメトキシ−３’−メチ
ルカルコンを得た。

【００２２】得られた３−メトキシメトキシ−３’−メ
チルカルコン３ｇをメタノール６０ｍｌに溶解し、３Ｎ
−ＨＣｌ ２０ｍｌを加え、３０分間煮沸還流を行っ
た。反応終了後、反応液を減圧濃縮し、ジエテルエーテ
ル−水で分配し、エーテル層を硫酸ナトリウムで乾燥さ
せた。

【００２３】硫酸ナトリウムを濾過除去し、溶媒を留去
した後、残渣を少量のメタノールに溶解し、オクタデシ
ルシリル（ＯＤＳ）カラムを用いて高速液体クロマトグ
ラフィー（溶媒 メタノール：水＝７５：２５）により
分取した。カルコン化合物の検出は、２５４ｎｍで吸光
度を測定することにより行った。得られた画分をメタノ
ール：水にて再結晶させることにより、３’−メチル−
３−ハイドロキシカルコン１．５ｇを得た。

【００２４】＜３＞本発明の抗腫瘍剤 本発明の抗腫瘍剤は、上記カルコン化合物あるいはリコ
カルコンＡから選ばれる１種又はそれ以上を有効成分と
して含有するものであり、剤型、製法は特に問わず、常
法により製造される。

【００２５】例えば、製剤上許容される無害の一種、或
は数種の賦形剤、例えば、乳糖、バレイショデンプン、
炭酸カルシウム、又はアルギン酸ナトリウム等を配剤し
た散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等とすることができ
る。また、注射剤とする場合は、溶媒は注射用蒸留水、
又はポリエチレングリコール等が使用され、或はこれに
分散剤を添加してもよい。

【００２６】投与方法としては、経口、非経口のいずれ
も選択できる。投与量は、患者の年齢、症状等により異
なるが、一般には経口投与では成人１人１日当り、カル
コン化合物の量として、０．０１〜１００ｍｇの範囲で
用いることにより、所期の効果が期待できる。また、非
経口の場合の投与量は成人１人１日当り上記経口投与の
６０％の量が適当である。

【００２７】

【作用】以下に、本発明に用いるカルコン化合物の作用
を示す。 ＜腫瘍細胞増殖抑制作用＞本発明に用いるカルコン化合
物及びリコカルコンＡが、イン・ビトロにおける各種腫
瘍細胞の増殖を抑制するか否かを指標として、腫瘍細胞
増殖抑制作用の評価を行った。

【００２８】（１）胃癌に対する効果 ヒト胃癌ＨＧＣ−２７細胞を直径３．５ｃｍのディシュ
に播いて培養を行い、培養１日後にこの培養液中に化２
〜７で表される各カルコン化合物、あるいはリコカルコ
ンＡを１μｇ/ｍｌの濃度になるように添加した。

【００２９】３日間培養を続けた後、細胞数を測定し、
増殖抑制率を算出した。結果を表１に示す。

【００３０】

【表１】

【００３１】いずれのカルコン化合物も、強い増殖抑制
効果を示すことが明かとなった。その中でも３’−メチ
ル−３−ハイドロキシカルコンが最も効力が強かった。

【００３２】（２）ＨＧＣ−２７細胞の増殖に及ぼす
３’−メチル−３−ハイドロキシカルコンの作用 ＨＧＣ−２７細胞を直径３．５ｃｍのディシュに播き、
培養１日後、種々の濃度の３’−メチル−３−ハイドロ
キシカルコンを添加し、さらに１〜４日間培養を行った
後、細胞数を測定した。結果を図１に示した。

【００３３】３’−メチル−３−ハイドロキシカルコン
は、濃度依存的にＨＧＣ−２７細胞の増殖を抑制し、処
理後３日目におけるＩＤ₅₀は約０．５μｇ/ｍｌである
ことが判明した（図１）。

【００３４】また１μｇ/ｍｌの濃度でも本カルコン化
合物は、ＨＧＣ−２７細胞の増殖を完全に抑制し、その
効力は少なくとも４日間継続した（図２）。

【００３５】（３）種々のヒト腫瘍細胞に対する３’−
メチル−３−ハイドロキシカルコンの作用 子宮頸癌由来ＨｅＬａ細胞、神経芽細胞腫由来ＧＯＴＯ
細胞および膵癌由来ＰＡＮＣ−１細胞を直径３．５ｃｍ
のディシュに４×１０４⁴個ずつ播き、培養を行った。
１日後、それぞれの培養液に化合物（４）を１μｇ/の
濃度になるように添加し、３日間培養を継続し細胞数を
測定した。結果を表２に示す。

【００３６】

【表２】

【００３７】以上の結果から、３’−メチル−３−ハイ
ドロキシカルコンは、いずれのヒト腫瘍細胞に対しても
増殖抑制効果を示すことがわかった。

【００３８】＜２＞発ガンプロモーター抑制効果 発ガンプロモーターには種々の物質が知られており、そ
の中でも１２−Ｏ−テトラデカノイルフォルボール−１
３−アセテート（ＴＰＡ）は最も強力なものの一つであ
る。

【００３９】ＴＰＡの作用機序の全貌は現在でもなお不
明であるが、細胞のリン脂質代謝の亢進は、発ガンプロ
モーションにつながる重要な要因の一つであると考えら
れており、ＴＰＡの作用を抑制する化合物の多くのもの
が、ＴＰＡによる発癌プロモーションを阻止し、腫瘍の
発生を効率よく低下させることが明確になっている。

【００４０】そこで今回開発したカルコン化合物の抗プ
ロモーター作用の指標として、ＴＰＡによる細胞のリン
脂質代謝亢進を抑制する効力を測定した。ＴＰＡによっ
て引き起こされる、細胞のリン脂質合成亢進をカルコン
化合物が抑制する作用について培養細胞を用いたイン・
ビトロの系で検定した。

【００４１】被験化合物を５μｇ/ｍｌの濃度になるよ
うにＨｅＬａ細胞培養液中に添加した。対照には、主実
験に用いたのと同量の溶媒のみを添加した。１時間後に
ＴＰＡ（５０ｎＭ）及び放射性無機リン酸³²Ｐｉを加
え、さらに４時間培養を続けた。その後細胞のリン脂質
を抽出し、放射活性を測定し、ＴＰＡによって促進され
た放射活性取り込みをどれほど抑制したかを算出した。
結果を表３に示す。

【００４２】

【表３】

【００４３】いずれのカルコン化合物も、ＴＰＡによっ
て亢進する³²Ｐｉ取り込みを抑制することが明かとなっ
た。その中でも３’−メチル−３−ハイドロキシカルコ
ンは、特に強力な抗プロモーター活性を持つことが判明
した。

【００４４】

【実施例】以下に、本発明の実施例を説明する。

【００４５】

【製剤例１】錠剤 １錠当り５ｍｇのカルコン化合物を含有する錠剤を以下
のようにして製造する。 （製法）カルコン化合物の結晶を粉砕し、それに乳糖及
び澱粉を加え混合する。１０％の澱粉のりを上記の混合
体に加え、撹拌し顆粒を製造する。乾燥後粒径を約８５
０ミクロンに製粒し、これにタルク及びステアリン酸マ
グネシウムを混合し、打錠する。

【００４６】

【製剤例２】カプセル剤 １カプセル当り２０ｍｇのカルコン化合物を含有するカ
プセル剤を以下のようにして製造する。 （製法）カルコン化合物をよく粉砕し、澱粉、乳糖及び
ステアリン酸マグネシウムを加え、充分に混合した後カ
プエルに充填する。

【００４７】

【製剤例３】注射液 注射液を、以下のようにして製造する。 （製法）カルコン化合物を、マクロゴール４０００及び
塩化ナトリウムの処方量を含む蒸留水に溶解させ、ｐＨ
を７．０付近に調整した後アンプルに充填熔封する。

【００４８】

【発明の効果】本発明の抗腫瘍剤は、強い腫瘍細胞増殖
抑制効果、及び抗発ガンプロモーター活性を併せ持って
いる。この効果により、癌の予防及び治療など癌に対す
る総合的な対策を可能になる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 カルコン化合物濃度に対する腫瘍細胞抑制作
用の変化を示す図

【図２】 カルコン化合物存在下での腫瘍細胞の増殖抑
制を示す図

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 化１で表されるカルコン化合物を有効成
   分として含有する抗腫瘍剤。 【化１】 但し、式中Ｒは−ＯＨ又は−ＣＨ₃を、Ｒ₁は−Ｈ、−Ｏ
   Ｈ、−ＯＣＨ₃、−ＣＨ₃のいずれかを、Ｒ₂は−Ｈ又は
   −ＣＨ₃をそれぞれ表す。
2. 【請求項２】 前記カルコン化合物が、化２で表される
   ３−ハイドロキシカルコンである請求項１記載の抗腫瘍
   剤。 【化２】
3. 【請求項３】 前記カルコン化合物が、化３で表される
   ３，３’−ジハイドロキシカルコンである請求項１記載
   の抗腫瘍剤。 【化３】
4. 【請求項４】 前記カルコン化合物が、化４で表される
   ３’−メトキシ−３−ハイドロキシカルコンである請求
   項１記載の抗腫瘍剤。 【化４】
5. 【請求項５】 前記カルコン化合物が、化５で表される
   ３’−メチル−３−ハイドロキシカルコンである特許請
   求の範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 【化５】
6. 【請求項６】 前記カルコン化合物が、化６で表される
   ３’−ハイドロキシ−３−メチルカルコンである請求項
   １記載の抗腫瘍剤。 【化６】
7. 【請求項７】 カルコン化合物が、化７で表される３−
   ハイドロキシ−４’−メチルカルコンである特許請求の
   範囲第１項に記載の抗腫瘍剤。 【化７】
8. 【請求項８】 化８で表されるリコカルコンＡを有効成
   分として含有する抗腫瘍剤。 【化８】