JPH06199885A

JPH06199885A - 新規な化合物および該化合物を有効成分とする抗炎症剤

Info

Publication number: JPH06199885A
Application number: JP4340963A
Authority: JP
Inventors: Iwao Sakakibara; 巖榊原; Masamitsu Yoshida; 雅光吉田; Koji Hayashi; 紘司林; Masao Maruno; 政雄丸野
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1992-11-30
Filing date: 1992-11-30
Publication date: 1994-07-19

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】プロスタグランジン生合成酵素阻害作用を有す
る、副作用の少ない抗炎症剤を提供する。【構成】生薬大血藤より単離される下記式（Ｉ）及び
（II）に示す化合物および該化合物を有効成分としてな
る副作用の少ない抗炎症剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規な化合物および該
化合物を有効成分とする抗炎症剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術および課題】近年、食生活等の欧米化によ
りアトピー性疾患、リウマチ性疾患等のプロスタグラン
ジン介在性の炎症疾患が問題となっている。現在、ステ
ロイド系治療剤が臨床において使用されているが、副作
用等の点から問題があり、より優れた抗炎症剤の開発が
望まれていた。

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、従来急性、慢性
の盲腸炎、打撲傷等に用いられている生薬である大血藤
より得られたある種の化合物が抗炎症作用を有すること
を見い出し、これに基づいて本発明を完成するに至っ
た。

【０００３】大血藤は、制菌作用を有することは知られ
ていたが、抗炎症作用を有することは未だ知られておら
ず、また大血藤の成分の一つである式Ｉまたは式ＩＩで
表される化合物が抗炎症作用を有することは本発明者ら
によって初めて明らかにされたことである。

【０００４】すなわち本発明は、下記式Ｉで表される化
合物、下記式ＩＩで表される化合物および下記式Ｉまた
は下記式ＩＩで表される化合物を有効成分とする抗炎症
剤である。式Ｉ式ＩＩ以下、式Ｉで表される化合物を式Ｉの化合物といい、式
ＩＩで表される化合物を式ＩＩの化合物といい、式Ｉの
化合物と式ＩＩの化合物とをまとめて本発明の化合物と
いう。

【０００５】本発明の化合物は、例えば下記のようにし
て得ることができる。

【０００６】すなわち、大血藤（Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏ
ｘａｃｕｎｅａｔａ（ｏｌｉｖ．）Ｒｅｈｄ．
ｅｔＷｉｌｓ．の乾燥茎）を水、メタノール、エタノ
ール、アセトン、酢酸エチル、メチルエチルケトンから
選ばれる単独もしくはそれ以上の混合溶媒を用いて０°
Ｃから使用する溶媒の沸点以下の温度に加熱して抽出す
るか、あるいは０°Ｃから室温で浸出して、抽出液を得
る。

【０００７】この抽出液を水に懸濁し、ベンゼン、クロ
ロホルム、エーテル、ヘキサン、シクロヘキサン等の低
極性溶媒を用いて分配抽出を行い、低極性夾雑物を除去
した残りの水可溶部を、酢酸エチル、ブタノール、メチ
ルエチルケトンから選ばれる単独もしくはそれ以上の混
合溶媒を用いて分配抽出をし、抽出液を得る。

【０００８】ここで得た抽出液を、そのままもしくは乾
燥してシリカゲル、ＯＤＳ−シリカゲル、ポーラスポリ
マーゲル、セファデックス等の担体を使用したカラムク
ロマトグラフィーに付し、溶出液を分取してフラクショ
ンを得る。

【０００９】この際、溶出溶媒として水、メタノール、
エタノール、アセトン、酢酸エチル、テトラヒドロフラ
ン（以下ＴＨＦと略記）、アセトニトリル、ベンゼン、
エーテル、クロロホルム、石油エーテル、ヘキサン、シ
クロヘキサン等の単独もしくはそれ以上の混合溶媒を使
用することができる。

【００１０】このようにして得たフラクションを水また
はメタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、Ｔ
ＨＦ、アセトニトリル、ベンゼン、エーテル、クロロホ
ルム、石油エーテル、ヘキサン等の単独もしくはそれ以
上の混合溶媒で再結晶もしくは粉末化し、本発明の化合
物を得ることができる。

【００１１】次に、本発明の化合物が優れたプロスタグ
ランジン生合成酵素を阻害することにより抗炎症作用を
有することを実験例を挙げて説明する。

【００１２】実験例酵素試験液として、ヒツジ精嚢腺より得られた酵素（Ｃ
ＡＹＭＡＮＣＨＥＭＩＣＡＬＣｏ．製）を２ｍｇ／
４００μｌの濃度に精製水で希釈した。

【００１３】試験管に上述した酵素試験液、０．５Ｍリ
ン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）５１μｌ、４０ｍ
Ｍトリプトファン溶液５０μｌ、１０ｍＭヘモグロビン
溶液２５μｌ、８０ｍＭグルタチオン溶液５０μｌおよ
び本発明の化合物のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）
溶液４μｌを加え、３７°Ｃで５分間、プレインキュベ
ーションした。さらに基質である［１−¹⁴Ｃ］アラキド
ン酸（５０，０００ｄｐｍ）を加え、全量を２００μｌ
として酵素反応を開始した。

【００１４】酵素反応は３７°Ｃで１５分間行った。

【００１５】１Ｎ塩酸５０μｌを加えることで酵素反応
を停止し、エーテル（１ｍｌ× ２回）にて抽出した。
これを減圧下、留去した後に反応生成物を薄層クロマト
グラフィー（ＴＬＣ、クロロホルム：メタノール：酢酸
＝９０：５：５）にて分離した。プロスタグランジン
シンセターゼ活性はＴＬＣプレート上のプロスタグラン
ジンＥ₂（ＰＧＥ₂）の放射活性をラジオクロマトアナラ
イザー（Ａｌｏｋａ社製）により測定して求めた。

【００１６】阻害率は以下の式により求めた。阻害率＝［（Ｃ−Ｓ）／Ｃ］×１００（％）Ｃ；本発明の化合物を含まない場合の放射活性Ｓ；本発明の化合物を添加した場合の放射活性

【００１７】結果を表１に示した。

【００１８】表１

【００１９】なお本発明の化合物をｄｄＹ系マウスを用
いて安全性について検討した結果、本発明の化合物は投
与限界である１ｇ／ｋｇの経口投与で、７日間観察した
結果、死亡例はなかった。

【００２０】この結果が示すように、本発明の化合物プ
ロスタグランジン生合成阻害作用は顕著であり、極めて
毒性が少なく、優れた抗炎症剤として期待できる。

【００２１】次に、本発明の化合物の投与量および製剤
化について説明する。

【００２２】本発明の化合物はそのまま、あるいは慣用
の製剤担体と共に動物および人に投与することができ
る。投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適
宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒
剤、散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げ
られる。

【００２３】経口剤として所期の効果を発揮するために
は、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通
常成人で本発明の化合物の重量として１０ｍｇ〜５ｇ
を、１日数回に分けての服用が適当と思われる。

【００２４】経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、
マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスタ
ーチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。

【００２５】この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他
に、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進
剤、矯味剤、着色剤、香料等を使用することができる。
それぞれの具体例は以下に示す如くである。

【００２６】［結合剤］デンプン、デキストリン、アラ
ビアゴム末、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、
メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロー
ス、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロ
ゴール。

【００２７】［崩壊剤］デンプン、ヒドロキシプロピル
スターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カ
ルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチ
ルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース。

【００２８】［界面活性剤］ラウリル硫酸ナトリウム、
大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリソルベート
８０。

【００２９】［滑沢剤］タルク、ロウ類、水素添加植物
油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウ
ム、ポリエチレングリコール。

【００３０】［流動性促進剤］軽質無水ケイ酸、乾燥水
酸化アルミニウムゲル、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ
酸マグネシウム。

【００３１】また、本発明の化合物は、懸濁液、エマル
ジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤としても投与する
ことができ、これらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色
剤を含有してもよい。

【００３２】非経口剤として所期の効果を発揮するため
には、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、
通常成人で本発明の化合物の重量として１日１ｍｇ〜
１０ｍｇまでの静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が
適当と思われる。

【００３３】この非経口剤は常法に従って製造され、希
釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖
水溶液、注射用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ
油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチ
レングリコール等を用いることができる。さらに必要に
応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。ま
た、この非経口剤は安定性の点から、バイアル等に充填
後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、使
用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもでき
る。さらに、必要に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防
腐剤、無痛化剤等を加えても良い。

【００３４】その他の非経口剤としては、外用液剤、軟
膏等の塗布剤、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、
常法に従って製造される。

【００３５】次に本発明の化合物の製造の実施例を挙げ
て本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによ
り何ら制限されるものではない。

【００３６】実施例１大血藤（Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘａｃｕｎｅａｔａ
（Ｏｌｉｖ．）Ｒｅｈｄ．ｅｔＷｉｌｓ．の乾燥
茎）９．４ｋｇを水−エタノール（１：１）５０ｌで６
時間室温冷浸抽出を３回行った。得られた抽出液を併
せ、溶媒を減圧化に留去し、乾燥エキス１．２９ｋｇを
得た（収率１３．７％）。

【００３７】本エキスを水１０ｌに懸濁し、ヘキサン１
０ｌ、クロロホルム２０ｌでそれぞれ３回ずつ分配抽出
した。残りの水層をブタノール１０ｌで３回分配抽出
し、ブタノールエキスを得た。ブタノールエキスの溶媒
を減圧下に留去し乾燥エキス４３２．１ｇを得た（収率
４．６％）。

【００３８】本乾燥エキスを水３ｌで希釈し、ポーラス
ポリマーゲル（ダイアイオンＨＰ−２０、５ｌ、三菱化
成社製）カラムクロマトグラフィーに付し、水４０ｌ、
水−メタノール（１：１）４０ｌ、メタノール５０ｌで
順次溶出した。水−メタノール（１：１）の溶出部の溶
媒を減圧下に留去し、乾燥エキス１８４．５ｇを得た
（収率２．０％）。

【００３９】本エキスをシリカゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅ
ｌ６０、７０−２３０メッシュ、メルク社製）カラムク
ロマトグラフィー（１２ｃｍφ×７０ｃｍ）に付し、ク
ロロホルム−メタノールでメタノールの比率を徐々に高
くし、メタノールの含有比率を（５％〜５０％）で展開
した。

【００４０】クロロホルム−メタノール（７５：２５）
の混合溶媒比率で溶出したフラクションを分取液体クロ
マトグラフィー〔ＹＭＣ、Ｒ−３５４、ＯＤＳ、５ｃｍ
φ×５０ｃｍ、山村化学社製）に付し、水−メタノール
（３：１）の混合溶媒で分離精製し、式Ｉの化合物を２
８０ｍｇ（収率０．０３％）および式ＩＩびの化合物を
２２０ｍｇ（収率０．０２％）得た。

【００４１】式Ｉの化合物の理化学的性質は下記に示し
たごとくであり、これらのデータからアセトバニロン−
４−Ｏ−α−Ｌ−ラムノシル−（１→６）−Ｏ−β−Ｄ
−グルコシドであると決定した。

【００４２】性状：無晶形粉末比旋光度（ｃ＝０．５４，ＭｅＯＨ）：［α］²⁹ _D＝−
８３．０° 高分解能ファーストアトムボンバードメントマススペク
トロメトリー（ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ）：Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｏ₁₂［Ｍ＋Ｈ］⁺ 理論値：４７５．１８１６実測値：４７５．１８１５赤外線吸収スペクトル（ＩＲ，ν ｍａｘｃｍ^-1，Ｋ
Ｂｒ）：３４０８，２９２４，１６６６，１５９４，１
５１０，８０６紫外線吸収スペクトル［λ ｍａｘｎｍ（ｌｏｇ
ε），ＭｅＯＨ］：２２４（４．１４），２６７（３．
９９），３０２（３．７３）プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍｉｎＭ
ｅＯＨ−ｄ₄）：１．１８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈ
ｚ），２．５８（３Ｈ，ｓ），３．３５（１Ｈ，ｄｄ，
Ｊ＝９．８，８．３Ｈｚ），３．３７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝
８．８Ｈｚ），３．４８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８Ｈ
ｚ），３．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，７．２Ｈ
ｚ），３．５９（１Ｈ，ｍ），３．６１（１Ｈ，ｍ），
３．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，６．４Ｈｚ），
３．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．８，３．４Ｈｚ），
３．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１．５Ｈｚ），
３．９１（３Ｈ，ｓ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．
３Ｈｚ），４．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），
５．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．１９（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
２．０Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，
２．０Ｈｚ）¹³ Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍｉｎＭｅ
ＯＨ−ｄ₄）：１７．９（ｑ），２６．５（ｑ），５
６．８（ｑ），６７．９（ｔ），６９．９（ｄ），７
１．５（ｄ），７２．２（ｄ），７２．５（ｄ），７
４．１（ｄ），７４．８（ｄ），７７．２（ｄ），７
８．０（ｄ），１０１．９（ｄ），１０２．２（ｄ），
１１２．６（ｄ），１１６．５（ｄ），１２４．５
（ｄ），１３３．１（ｓ），１５０．８（ｓ），１５
２．４（ｓ），１９９．６（ｓ）

【００４３】また、式ＩＩの化合物の理化学的性質は下
記に示したごとくであり、これらのデータからアセトバ
ニロン−４−Ｏ−β−Ｄ−アピオシル−（１→６）−Ｏ
−β−Ｄ−グルコシドであると決定した。

【００４４】性状：無晶形粉末比旋光度（ｃ＝０．５４，ＭｅＯＨ）：［α］²⁵ _D＝−
１０７．４° 高分解能ファーストアトムボンバードメントマススペク
トロメトリー（ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ）：Ｃ₂₀Ｈ₂₉Ｏ₁₂［Ｍ＋Ｈ］⁺ 理論値：４６１．１６５９実測値：４６１．１６２８赤外線吸収スペクトル（ＩＲ，ν ｍａｘｃｍ^-1，Ｋ
Ｂｒ）：３４２０，２９２４，１６７０，１５９４，１
５１０，８０４紫外線吸収スペクトル［λ ｍａｘｎｍ（ｌｏｇ
ε），ＭｅＯＨ］：２２４（４．２０），２６７（４．
０６），３０１（３．８１）プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍｉｎＭ
ｅＯＨ−ｄ₄）：２．５７（３Ｈ，ｓ），３．３５（１
Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），３．３．４７（１Ｈ，ｔ，
Ｊ＝８．８Ｈｚ），３．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．
３，７．３Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｓ），３．６０
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．６２（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝６．８，２．０Ｈｚ），３．７４（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝９．３Ｈｚ），３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈ
ｚ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝９．８Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈ
ｚ），４．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），４．９
９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．
４Ｈｚ），７．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４
Ｈｚ）¹³ Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍｉｎＭｅ
ＯＨ−ｄ₄）：２６．５（ｑ），５６．８（ｑ），６
５．６（ｔ），６８．８（ｔ），７１．６（ｄ），７
４．８（ｄ），７５．０（ｔ），７７．３（ｄ），７
７．９（ｄ），７８．１（ｄ），８０．５（ｓ），１０
２．０（ｄ），１１１．０（ｄ），１１２．６（ｄ），
１１６．６（ｄ），１２４．７（ｄ），１３３．１
（ｓ），１５０．７（ｓ），１５２．５（ｓ），１９
９．６（ｓ）

【００４５】次に本発明の製剤例について説明する。［製剤例１］コーンスターチ４４ｇ結晶セルロース４０ｇカルボキシメチルセルロースカルシウム５ｇ軽質無水ケイ酸０．５ｇステアリン酸マグネシウム０．５ｇ式Ｉの化合物１０ｇ計１００ｇ上記の処方に従って〜を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠剤を得た。この錠剤一
錠には、式Ｉの化合物２０ｍｇが含有されており、成人
１日３〜１０錠を数回にわけて服用する。

【００４６】［製剤例２］結晶セルロース８４．５ｇステアリン酸マグネシウム０．５ｇカルボキシメチルセルロースカルシウム５ｇ式ＩＩの化合物１０ｇ計１００ｇ上記の処方に従って、およびの一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、およびの残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠
剤を得た。この錠剤一錠には、式ＩＩの化合物２０ｍｇ
が含有されており、成人１日３〜１０錠を数回にわけて
服用する。

【００４７】［製剤例３］結晶セルロース７９．５ｇ１０％ヒドロキシプロピルセルロースエタノール溶液５０ｇカルボキシメチルセルロースカルシウム５ｇステアリン酸マグネシウム０．５ｇ式Ｉの化合物１０ｇ計１４５ｇ上記の処方に従って、およびを均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、およびを混合し、打錠機にて圧縮成
型して一錠２００ｍｇの錠剤を得た。この錠剤一錠に
は、式ＩＩの化合物２０ｍｇが含有されており、成人１
日３〜１０錠を数回にわけて服用する。

【００４８】［製剤例４］コーンスターチ８４ｇステアリン酸マグネシウム０．５ｇカルボキシメチルセルロースカルシウム５ｇ軽質無水ケイ酸０．５ｇ式ＩＩの化合物１０ｇ計１００ｇ上記の処方に従って〜を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。この顆粒剤１ｇには、式ＩＩの化合物１００ｍ
ｇが含有されており、成人１日０．６〜２ｇを数回にわ
けて服用する。

【００４９】［製剤例５］結晶セルロース８６．５ｇ１０％ヒドロキシプロピルセルロースエタノール溶液３５ｇ式Ｉの化合物１０ｇ計１３１．５ｇ上記の処方に従って〜を均一に混合し、ねつ和し
た。押し出し造粒機により造粒後、乾燥し、篩別して顆
粒剤を得た。この顆粒剤１ｇには、式Ｉの化合物１００
ｍｇが含有されており、成人１日０．６〜２ｇを数回に
わけて服用する。

【００５０】［製剤例６］コーンスターチ８９．５ｇ軽質無水ケイ酸０．５ｇ式ＩＩの化合物１０ｇ計１００ｇ上記の処方に従って〜を均一に混合し、２００ｍｇ
を２号カプセルに充填した。このカプセル剤１カプセル
には、式ＩＩの化合物２０ｍｇが含有されており、成人
１日３〜１０カプセルを数回にわけて服用する。

【００５１】［製剤例７］注射用蒸留水８９．５ｇ大豆油５ｇ大豆リン脂質２．５ｇグリセリン２ｇ式Ｉの化合物１ｇ全量１００ｇ上記の処方に従ってをおよびに溶解し、これに
との溶液を加えて乳化し、注射剤を得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者丸野政雄茨城県稲敷郡阿見町吉原3586 株式会社ツムラ内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式I で表される化合物。
【請求項２】下記式II で表される化合物。
【請求項３】下記式I または下記式II で表される化合物を有効成分とする抗炎症剤。