JPH0630601B2 - 分岐サイクロデキストリンの製造方法 - Google Patents
分岐サイクロデキストリンの製造方法Info
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- JPH0630601B2 JPH0630601B2 JP63004492A JP449288A JPH0630601B2 JP H0630601 B2 JPH0630601 B2 JP H0630601B2 JP 63004492 A JP63004492 A JP 63004492A JP 449288 A JP449288 A JP 449288A JP H0630601 B2 JPH0630601 B2 JP H0630601B2
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- Japan
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- pullulanase
- maltose
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はプルラナーゼを用いた分岐サイクロデキストリ
ンの製造方法に関するものである。
ンの製造方法に関するものである。
（従来の技術） 近年、サイクロデキストリンの包接作用が各方面から注
目され、その利用並びに製造方法に関する研究が盛んに
なっており、特にマルトースを結合させた分岐サイクロ
デキストリンはその高い水溶性を利用して食品や医薬品
等の分野で応用範囲が急速に拡大している。このような
分岐サイクロデキストリンはサイクロデキストリンとマ
ルトースとをプルラナーゼの存在下で反応させる方法で
製造することができ、その具体的方法は特開昭６１−７
０９９６号、特開昭６１−１９７６０２号、特開昭６１
−２３６８０２号、特開昭６１−２８７９０１号、特開
昭６１−２８７９０２号公報等に開示されている。これ
らの方法は、α−サイクロデキストリン、β−サイクロ
デキストリン、γ−サイクロデキストリン等のサイクロ
デキストリンとマルトースとを、サイクロデキストリン
１重量部に対しマルトースを通常１〜７重量部、好まし
くは３〜５重量部の範囲で使用し、しかも溶液の基質濃
度を高濃度、通常４０〜８５％にしてプルラナーゼを反
応させる方法である。
目され、その利用並びに製造方法に関する研究が盛んに
なっており、特にマルトースを結合させた分岐サイクロ
デキストリンはその高い水溶性を利用して食品や医薬品
等の分野で応用範囲が急速に拡大している。このような
分岐サイクロデキストリンはサイクロデキストリンとマ
ルトースとをプルラナーゼの存在下で反応させる方法で
製造することができ、その具体的方法は特開昭６１−７
０９９６号、特開昭６１−１９７６０２号、特開昭６１
−２３６８０２号、特開昭６１−２８７９０１号、特開
昭６１−２８７９０２号公報等に開示されている。これ
らの方法は、α−サイクロデキストリン、β−サイクロ
デキストリン、γ−サイクロデキストリン等のサイクロ
デキストリンとマルトースとを、サイクロデキストリン
１重量部に対しマルトースを通常１〜７重量部、好まし
くは３〜５重量部の範囲で使用し、しかも溶液の基質濃
度を高濃度、通常４０〜８５％にしてプルラナーゼを反
応させる方法である。
ところがこれらの先行発明の実施例のデータからも明ら
かなように、従来法における分岐サイクロデキストリン
の収率、すなわち、全サイクロデキストリに対する分岐
サイクロデキストリンの重量百分率（以下分岐化率）は
20〜55％、所要反応時間は48〜72時間であって、長時間
を要するにもかかわらず分岐化率が50％を越えられない
場合があるところに問題があった。
かなように、従来法における分岐サイクロデキストリン
の収率、すなわち、全サイクロデキストリに対する分岐
サイクロデキストリンの重量百分率（以下分岐化率）は
20〜55％、所要反応時間は48〜72時間であって、長時間
を要するにもかかわらず分岐化率が50％を越えられない
場合があるところに問題があった。
（発明が解決しようとする課題） 本発明は上記したような従来の問題点を解決して、所要
反応時間を24時間以下に短縮し、しかも確実に、分岐化
率を50％以上とすることができる分岐サイクロデキスト
リンの製造方法を目的として完成されたものである。
反応時間を24時間以下に短縮し、しかも確実に、分岐化
率を50％以上とすることができる分岐サイクロデキスト
リンの製造方法を目的として完成されたものである。
（課題を解決するための手段） 本発明者は上記の問題点を解決するために研究を重ねた
結果、従来法においては遊離状態のプルラナーゼが用い
られており、このためプルラナーゼが反応温度60℃以上
という厳しい条件に耐えられずに反応中に活性が低下す
ることを見出した。また本発明者は、プルラナーゼを多
孔質無機材料に固定化することにより、反応温度60℃以
上、固形分濃度50％以上という反応系中にありながら機
械的強度を保ち、圧密されることなくプルラナーゼの発
現活性を長期間にわたり高い水準に維持できること、こ
れとともにマルトースとサイクロデキストリンのモル濃
度積を所定レベル以上に維持すれば、短時間に分岐サイ
クロデキストリンを高収率で生産できることを見出し
た。本発明はかかる知見に基いて完成されたものであっ
て、マルトースとサイクロデキストリンをプルラナーゼ
の存在下で反応させ、反応液から分岐サイクロデキスト
リンを採取する分岐サイクロデキストリンの製造方法に
おいて、マルトースとサイクロデキストリンの使用割合
をサイクロデキストリン１重量部に対しマルトースを３
〜５重量部とし、かつマルトースとサイクロデキストリ
ンのモル濃度積を0.25M2以上とするとともに、多孔質無
機材料に担持した固定化プルラナーゼを使用し、しかも
該固定化プルラナーゼの発現活性を反応槽中に含まれる
全サイクロデキストリン１ｍ mole当り、マルトシル−
α−サイクロデキストリンを基質とした場合の分解活性
で3.0ユニット以上とすることを特徴とするものであ
る。尚、ここで言う１ユニットとは、１分間あたり１μ
moleのα−1.6グリコシド結合を加水分解する酵素量で
ある。以下に本発明の各条件についてその根拠を説明す
る。
結果、従来法においては遊離状態のプルラナーゼが用い
られており、このためプルラナーゼが反応温度60℃以上
という厳しい条件に耐えられずに反応中に活性が低下す
ることを見出した。また本発明者は、プルラナーゼを多
孔質無機材料に固定化することにより、反応温度60℃以
上、固形分濃度50％以上という反応系中にありながら機
械的強度を保ち、圧密されることなくプルラナーゼの発
現活性を長期間にわたり高い水準に維持できること、こ
れとともにマルトースとサイクロデキストリンのモル濃
度積を所定レベル以上に維持すれば、短時間に分岐サイ
クロデキストリンを高収率で生産できることを見出し
た。本発明はかかる知見に基いて完成されたものであっ
て、マルトースとサイクロデキストリンをプルラナーゼ
の存在下で反応させ、反応液から分岐サイクロデキスト
リンを採取する分岐サイクロデキストリンの製造方法に
おいて、マルトースとサイクロデキストリンの使用割合
をサイクロデキストリン１重量部に対しマルトースを３
〜５重量部とし、かつマルトースとサイクロデキストリ
ンのモル濃度積を0.25M2以上とするとともに、多孔質無
機材料に担持した固定化プルラナーゼを使用し、しかも
該固定化プルラナーゼの発現活性を反応槽中に含まれる
全サイクロデキストリン１ｍ mole当り、マルトシル−
α−サイクロデキストリンを基質とした場合の分解活性
で3.0ユニット以上とすることを特徴とするものであ
る。尚、ここで言う１ユニットとは、１分間あたり１μ
moleのα−1.6グリコシド結合を加水分解する酵素量で
ある。以下に本発明の各条件についてその根拠を説明す
る。
第１図は基質中のマルトースとα−サイクロデキストリ
ンのモル濃度積を種々に変化させた場合の分岐化率を示
したグラフである。このグラフから明らかなように両者
のモル濃度積を0.25M2以上とすることが分岐化率を50％
以上とするための必要条件となる。このグラフを得るた
めの実験は次の手順で行われた。
ンのモル濃度積を種々に変化させた場合の分岐化率を示
したグラフである。このグラフから明らかなように両者
のモル濃度積を0.25M2以上とすることが分岐化率を50％
以上とするための必要条件となる。このグラフを得るた
めの実験は次の手順で行われた。
まずα−サイクロデキストリンとマルトースのモル比が
１：8.52（重量比１：３）、固形分濃度75％／50ｍＭ酢
酸バッファーpH5.0を調整したのちこれを７つに分取
し、それぞれに50ｍＭ酢酸バッファーを適当量添加し、
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でマルトース
とα−サイクロデキストリンの濃度を測定したところ次
表のとおりであった。
１：8.52（重量比１：３）、固形分濃度75％／50ｍＭ酢
酸バッファーpH5.0を調整したのちこれを７つに分取
し、それぞれに50ｍＭ酢酸バッファーを適当量添加し、
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でマルトース
とα−サイクロデキストリンの濃度を測定したところ次
表のとおりであった。
上表の各濃度の基質を多孔質セラミック担体に固定化し
たプルラナーゼとともにカラム中に入れ、60℃の外とう
液を循環させながら滞留時間（ＨＲＴ）を段階的に変化
させて反応させた。分岐化率は充分に一定のＨＲＴで平
衡化したカラムより流出された溶液中に含まれる全サイ
クロデキストリンに対する分岐サイクロデキストリンの
重量百分率で計算した。
たプルラナーゼとともにカラム中に入れ、60℃の外とう
液を循環させながら滞留時間（ＨＲＴ）を段階的に変化
させて反応させた。分岐化率は充分に一定のＨＲＴで平
衡化したカラムより流出された溶液中に含まれる全サイ
クロデキストリンに対する分岐サイクロデキストリンの
重量百分率で計算した。
このように基質中のマルトースとサイクロデキストリン
とのモル濃度積を0.25M2以上にすることとともに、プル
ラナーゼの発現活性を反応時間中高いレベルに維持する
ことが本発明の目的を達成するために重要である。この
ために本発明においてはプルラナーゼを遊離した状態で
はなく、多孔質無機材料、好ましくは多孔質セラミック
ス担体に固定化して用いる。これらのセラミックス担体
は粒状又は粉末状のほか必要に応じてハニカム状等任意
の形状に成型したものを用いることができる。
とのモル濃度積を0.25M2以上にすることとともに、プル
ラナーゼの発現活性を反応時間中高いレベルに維持する
ことが本発明の目的を達成するために重要である。この
ために本発明においてはプルラナーゼを遊離した状態で
はなく、多孔質無機材料、好ましくは多孔質セラミック
ス担体に固定化して用いる。これらのセラミックス担体
は粒状又は粉末状のほか必要に応じてハニカム状等任意
の形状に成型したものを用いることができる。
一方、固定化に用いられるプルラナーゼは、どのような
起源のものでも使用することができる。このような酵素
としては例えば、バチルス−アシドプリティカス（Baci
llus acidopullulyticus）、エアロバクタ−エアロゲネ
ス（Aerobacter aerogenes）、クレブシィエラ−ニュー
モニア（Klebsiella pneumoniae）等から得られるプル
ラナーゼを使用することができる。
起源のものでも使用することができる。このような酵素
としては例えば、バチルス−アシドプリティカス（Baci
llus acidopullulyticus）、エアロバクタ−エアロゲネ
ス（Aerobacter aerogenes）、クレブシィエラ−ニュー
モニア（Klebsiella pneumoniae）等から得られるプル
ラナーゼを使用することができる。
また、固定化に使用する酵素は固定化後の発現酵素活性
を高くするために1.5Ｕ／mg蛋白以上の活性を有する精
製品を用いることが好ましい。
を高くするために1.5Ｕ／mg蛋白以上の活性を有する精
製品を用いることが好ましい。
このような高純度（高活性）のプルラナーゼは市販の酵
素をアセトン沈澱法、硫安分画法等を用いて精製するこ
とにより容易に製造することができる。多孔質セラミッ
クスを用いた場合の固定化の手順は次のとおりである。
素をアセトン沈澱法、硫安分画法等を用いて精製するこ
とにより容易に製造することができる。多孔質セラミッ
クスを用いた場合の固定化の手順は次のとおりである。
まず80〜100メッシュの多孔質セラミックス担体を10％
γ−アミノプロピルトリエトキシシラン／トルエンで４
時間還流したのち、充分にトルエン及びアセトンで洗浄
しシラン化セラミックス担体を得た。次にこれを風乾の
のち10ｇ分取し、１％グルタルアルデヒド水溶液中に室
温にて３時間静置し、シラン化セラミックス担体表面に
アルデヒド基を導入した。その後水洗し、37ユニット／
ｍに調整したプルラナーゼ／50mＭ酢酸バッファー中
で一晩静置することにより固定化プルラナーゼを得た。
最終的にこの固定化プルラナーゼを500mＭNaCl／50mＭ
酢酸バッファーで更に洗浄し、多孔質セラミックス担体
への酵素蛋白の不特異的な吸着を取り除き、共有結合に
より固定化されたプルラナーゼのみを残したものを酵素
固定化標品とした。このとき得られた固定化酵素の発現
活性は分岐サイクロデキストリンであるマルトシル−α
−サイクロデキストリンを基質としたときの分解活性が
13ユニット／ｇ−担体であった。
γ−アミノプロピルトリエトキシシラン／トルエンで４
時間還流したのち、充分にトルエン及びアセトンで洗浄
しシラン化セラミックス担体を得た。次にこれを風乾の
のち10ｇ分取し、１％グルタルアルデヒド水溶液中に室
温にて３時間静置し、シラン化セラミックス担体表面に
アルデヒド基を導入した。その後水洗し、37ユニット／
ｍに調整したプルラナーゼ／50mＭ酢酸バッファー中
で一晩静置することにより固定化プルラナーゼを得た。
最終的にこの固定化プルラナーゼを500mＭNaCl／50mＭ
酢酸バッファーで更に洗浄し、多孔質セラミックス担体
への酵素蛋白の不特異的な吸着を取り除き、共有結合に
より固定化されたプルラナーゼのみを残したものを酵素
固定化標品とした。このとき得られた固定化酵素の発現
活性は分岐サイクロデキストリンであるマルトシル−α
−サイクロデキストリンを基質としたときの分解活性が
13ユニット／ｇ−担体であった。
これを直径１cmの外とう付のカラムに充填し、外とうに
60℃の水を流して保温した。ここに基質（α−サイクロ
デキストリンとマルトースを重量比で１：３に混合、固
形分濃度60％／50mＭ酢酸バッファー、pH5.0）を３ｍ
／時で供給し、カラムより流出した反応液中のマルトシ
ル−α−サイクロデキストリンの生成量を高速液体クロ
マトグラフィーで測定し活性の指標とした。最初のカラ
ムの活性を100％として各時間における残存活性を求め
た結果は第２図に示されるとおりであり、400時間経過
後もなお97％の残存活性を保っていた。
60℃の水を流して保温した。ここに基質（α−サイクロ
デキストリンとマルトースを重量比で１：３に混合、固
形分濃度60％／50mＭ酢酸バッファー、pH5.0）を３ｍ
／時で供給し、カラムより流出した反応液中のマルトシ
ル−α−サイクロデキストリンの生成量を高速液体クロ
マトグラフィーで測定し活性の指標とした。最初のカラ
ムの活性を100％として各時間における残存活性を求め
た結果は第２図に示されるとおりであり、400時間経過
後もなお97％の残存活性を保っていた。
一方、遊離プルラナーゼの残存活性は次のようにして測
定した。まずプルラナーゼ粉末（1.6ユニット／mg、マ
ルトシル−α−サイクロデキストリン基質）125mgを保
存液（β−サイクロデキストリン：マルトース＝１：
３、固形分濃度60％）10ｍに溶解し、20ユニット／ｍ
の酵素液を得た。これを60℃の恒温槽中で保温、保存
した。この液から経時的に100μずつサンプリング
し、基質（α−サイクロデキストリン：マルトース＝
１：３、固形分濃度60％）１ｍに混和した。その後60
℃で１時間反応させた反応液を高速液体クロマトグラフ
ィーで測定しマルトシル−α−サイクロデキストリンの
生成量を測定して活性とした。その結果は第２図に示す
ように、保存液中で100時間保存した場合には遊離プル
ラナーゼの残存活性はほとんどなかった。
定した。まずプルラナーゼ粉末（1.6ユニット／mg、マ
ルトシル−α−サイクロデキストリン基質）125mgを保
存液（β−サイクロデキストリン：マルトース＝１：
３、固形分濃度60％）10ｍに溶解し、20ユニット／ｍ
の酵素液を得た。これを60℃の恒温槽中で保温、保存
した。この液から経時的に100μずつサンプリング
し、基質（α−サイクロデキストリン：マルトース＝
１：３、固形分濃度60％）１ｍに混和した。その後60
℃で１時間反応させた反応液を高速液体クロマトグラフ
ィーで測定しマルトシル−α−サイクロデキストリンの
生成量を測定して活性とした。その結果は第２図に示す
ように、保存液中で100時間保存した場合には遊離プル
ラナーゼの残存活性はほとんどなかった。
以上の実験から、プルラナーゼの発現活性を高レベルに
維持するためには多孔質セラミックスへの固定化が有利
であることが確認されたが、次にプルラナーゼの固定化
量を変化させた場合の影響を調べた。
維持するためには多孔質セラミックスへの固定化が有利
であることが確認されたが、次にプルラナーゼの固定化
量を変化させた場合の影響を調べた。
まず80〜100メッシュの多孔質セラミックスを10ｇずつ
７つに分取した。このセラミックスを前述した方法でシ
ラン化し、グルタルアルデヒド処理を施した。次にリゾ
チーム蛋白を次表のように含むプルラナーゼ溶液に浸漬
し、プルラナーゼを固定化したのち１モルのNaClで洗浄
した。その結果、リゾチーム蛋白の添加量に応じ、プル
ラナーゼの固定化量の異なる担体が得られた。
７つに分取した。このセラミックスを前述した方法でシ
ラン化し、グルタルアルデヒド処理を施した。次にリゾ
チーム蛋白を次表のように含むプルラナーゼ溶液に浸漬
し、プルラナーゼを固定化したのち１モルのNaClで洗浄
した。その結果、リゾチーム蛋白の添加量に応じ、プル
ラナーゼの固定化量の異なる担体が得られた。
これらの固定化プルラナーゼを前述のカラムに充填した
ところ、ボイドボリュームはブルーデキストランの溶出
速度によりそれぞれ7.2ｍであった。このカラムを外
とう液により60℃に保温し、基質（マルトース518ｇ／
、α−サイクロデキストリン173ｇ／、モル濃度積
0.27M2）を一定流速で供給した。途中、それぞれのカラ
ムの基質流速を段階的に変え、種々の滞留時間（ＨＲ
Ｔ）におけるマトルシル−α−サイクロデキストリンの
生成量を測定し第３図に示した。なおNO.１〜NO.７のカ
ラムでカラム内に存在する全サイクロデキストリン１ｍ
mole分子あたりに寄与する酵素活性は次のとおりであ
る。
ところ、ボイドボリュームはブルーデキストランの溶出
速度によりそれぞれ7.2ｍであった。このカラムを外
とう液により60℃に保温し、基質（マルトース518ｇ／
、α−サイクロデキストリン173ｇ／、モル濃度積
0.27M2）を一定流速で供給した。途中、それぞれのカラ
ムの基質流速を段階的に変え、種々の滞留時間（ＨＲ
Ｔ）におけるマトルシル−α−サイクロデキストリンの
生成量を測定し第３図に示した。なおNO.１〜NO.７のカ
ラムでカラム内に存在する全サイクロデキストリン１ｍ
mole分子あたりに寄与する酵素活性は次のとおりであ
る。
NO.１ 29.7Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.２ 21.1Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.３ 15.6Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.４ 9.4Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.５ 3.1Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.６ 2.3Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン NO.７ 1.6Ｕ／ｍ mole−サイクロデキストリン 第３図のグラフからも明らかなように、24時間以内に50
％以上の分岐化率を達成するにはマルトシル−α−サイ
クロデキストリンを基質とした場合の発現活性をカラム
内の全サイクロデキストリン１ｍ mole当り3.0ユニッ
ト以上とすることが必要であった。
％以上の分岐化率を達成するにはマルトシル−α−サイ
クロデキストリンを基質とした場合の発現活性をカラム
内の全サイクロデキストリン１ｍ mole当り3.0ユニッ
ト以上とすることが必要であった。
（実施例） β−サイクロデキストリン（塩水港精糖ＫＫ製、β−10
0）100ｇ、マルトース（三和澱粉工業ＫＫ製、サンマル
ト−Ｓ）500ｇを含むモル濃度積0.29M2の混合溶液（50
ｍＭ酢酸バッファー、pH5.0）に、前述の方法により調
製した固定化プルラナーゼをβ−サイクロデキストリン
１ｍ moleの当り3.2ユニットになるように加え、60℃
で24時間反応を行う。終了後、反応液から固定化プルラ
ナーゼを濾別して回収し、一方、濾液をイオン交換樹脂
により脱塩、濃縮して、分岐サイクロデキストリン含有
糖液を得た。次に、上記反応液から濾別して回収した固
定化プルラナーゼを用い、上記と同様の反応を反復して
実施し、更に濾過、脱塩、濃縮して、それぞれ分岐サイ
クロデキストリン含有糖液を得た。次に、上記により得
られた各糖液（反応液）から化学修飾シリカ担体を用い
てマルトース等のオリゴ糖を除去し、各糖液中のサイク
ロデキストリン組成（分岐サイクロデキストリンの含有
率）を調べた結果を下表に示す。尚、液中のサイクロデ
キストリンの測定は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）により行った。
0）100ｇ、マルトース（三和澱粉工業ＫＫ製、サンマル
ト−Ｓ）500ｇを含むモル濃度積0.29M2の混合溶液（50
ｍＭ酢酸バッファー、pH5.0）に、前述の方法により調
製した固定化プルラナーゼをβ−サイクロデキストリン
１ｍ moleの当り3.2ユニットになるように加え、60℃
で24時間反応を行う。終了後、反応液から固定化プルラ
ナーゼを濾別して回収し、一方、濾液をイオン交換樹脂
により脱塩、濃縮して、分岐サイクロデキストリン含有
糖液を得た。次に、上記反応液から濾別して回収した固
定化プルラナーゼを用い、上記と同様の反応を反復して
実施し、更に濾過、脱塩、濃縮して、それぞれ分岐サイ
クロデキストリン含有糖液を得た。次に、上記により得
られた各糖液（反応液）から化学修飾シリカ担体を用い
てマルトース等のオリゴ糖を除去し、各糖液中のサイク
ロデキストリン組成（分岐サイクロデキストリンの含有
率）を調べた結果を下表に示す。尚、液中のサイクロデ
キストリンの測定は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）により行った。
本発明に従い分岐サイクロデキストリンを製造する場合
には上表の如く安定に50％以上の分岐化率が得られてい
ることがわかる。
には上表の如く安定に50％以上の分岐化率が得られてい
ることがわかる。
（発明の効果） 本発明は以上の説明及び実施例からも明らかなように、
マルトースとサイクロデキストリンの使用割合をサイク
ロデキストリン１重量部に対しマルトースを３〜５重量
部とし、かつマルトースとサイクロデキストリンのモル
濃度積を0.25M2以上とするとともに、プルラナーゼを反
応系中に固定化し、その発現活性を反応槽中に含まれる
全サイクロデキストリン１ｍ mole当り3.0ユニット以
上とすることにより、24時間以内の反応時間で確実に50
％以上の分岐化率を達成することに成功したものであ
る。よって本発明は従来の問題点を一掃した分岐サイク
ロデキストリンの製造方法として、産業の発展に寄与す
るところは極めて大きいものである。
マルトースとサイクロデキストリンの使用割合をサイク
ロデキストリン１重量部に対しマルトースを３〜５重量
部とし、かつマルトースとサイクロデキストリンのモル
濃度積を0.25M2以上とするとともに、プルラナーゼを反
応系中に固定化し、その発現活性を反応槽中に含まれる
全サイクロデキストリン１ｍ mole当り3.0ユニット以
上とすることにより、24時間以内の反応時間で確実に50
％以上の分岐化率を達成することに成功したものであ
る。よって本発明は従来の問題点を一掃した分岐サイク
ロデキストリンの製造方法として、産業の発展に寄与す
るところは極めて大きいものである。
第１図はマルトースとα−サイクロデキストリンのモル
濃度積と分岐化率との関係を示すグラフ、第２図はプル
ラナーゼの残存活性を示すグラフ、第３図はプルラナー
ゼの発現活性と分岐化率との関係を示すグラフである。
濃度積と分岐化率との関係を示すグラフ、第２図はプル
ラナーゼの残存活性を示すグラフ、第３図はプルラナー
ゼの発現活性と分岐化率との関係を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 小暮 靖夫 埼玉県児玉郡上里町大字神保原419番地の ７ (72)発明者 坂野 好幸 東京都調布市多摩川１丁目８番地６号 （西調布住宅ＲＧ―203号) (72)発明者 吉田 安子 愛知県名古屋市熱田区旗屋１丁目９番26号 (72)発明者 川瀬 三雄 愛知県名古屋市緑区鳴海町字姥子山22番地 の１ （鳴海団地45棟403号) (56)参考文献 特開 昭61−287902（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−236802（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−236801（ＪＰ，Ａ)
Claims (1)
- 【請求項１】マルトースとサイクロデキストリンをプル
ラナーゼの存在下で反応させ、反応液から分岐サイクロ
デキストリンを採取する分岐サイクロデキストリンの製
造方法において、マルトースとサイクロデキストリンの
使用割合をサイクロデキストリン１重量部に対し、マル
トースを３〜５重量部とし、かつマルトースとサイクロ
デキストリンのモル濃度積を0.25M2以上とするととも
に、多孔質無機材料に固定化したプルラナーゼの発現活
性を、反応槽中に含まれる全サイクロデキストリン１ｍ
mole当たり、マルトシル−α−サイクロデキストリン
を基質とした場合の分解活性で3.0ユニット以上とする
ことを特徴とする分岐サイクロデキストリンの製造方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63004492A JPH0630601B2 (ja) | 1988-01-11 | 1988-01-11 | 分岐サイクロデキストリンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63004492A JPH0630601B2 (ja) | 1988-01-11 | 1988-01-11 | 分岐サイクロデキストリンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01179697A JPH01179697A (ja) | 1989-07-17 |
| JPH0630601B2 true JPH0630601B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=11585582
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63004492A Expired - Lifetime JPH0630601B2 (ja) | 1988-01-11 | 1988-01-11 | 分岐サイクロデキストリンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0630601B2 (ja) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61236802A (ja) * | 1985-04-13 | 1986-10-22 | Nikken Kagaku Kk | 新規な分岐γ―サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPS61236801A (ja) * | 1985-04-13 | 1986-10-22 | Nikken Kagaku Kk | 新規な分岐α―サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPS61287902A (ja) * | 1985-06-17 | 1986-12-18 | Nikken Kagaku Kk | 新規分岐β―サイクロデキストリンの製造方法 |
-
1988
- 1988-01-11 JP JP63004492A patent/JPH0630601B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01179697A (ja) | 1989-07-17 |
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