JPH0633307B2 - ニトロフエノ−ル系化合物のβ−配位配糖体の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はニトロフェノール系化合物のβ−配位配糖体の
製造法に関する。

〔従来の技術および発明が解決しようとする問題点〕

近年、ニトロフェノール系化合物のβ−配位配糖体は種
々の酵素の特異的基質として広く用いられ、特に臨床検
査の分野において重要な物質群である。

このニトロフェノール系化合物のβ−配位配糖体の製造
法に関しては酵素的合成法（特公昭59-13198号公報）や
化学合成法（特開昭53-12831号公報）等が知られてい
る。しかしながら、これらの方法は各種の副生物が生成
したり、反応工程が複雑であったりして実用化しうる程
度に完成されたものとはいい難い。

そこで、本発明者らは上記配糖体の効率的、かつ高収率
の合成法を開発すべく鋭意研究を重ねた結果、本発明を
完成するに至った。

〔問題点を解決するための手段〕

すなわち本発明は、有機塩基または無機塩基と臭化第２
水銀，過塩素酸銀，シアン化第２水銀，酸化銀および４
級アンモニウム塩のうちから選ばれたルイス酸触媒の存
在下に下式で示される２−クロロ−４−ニトロフェノー
ルと 下式で表されるヘキサデカアシルマルトペンタオシルハ
ライド（式中、Ｒは炭素数１〜５のアルキル基を示し、
Ｘはハロゲン原子を示す。） を反応させ、次いで脱アシル化することを特徴とする下
式 で表されるβ−（２−クロロ−４−ニトロフェノール）
−マルトペンタオシドの製造法を提供するものである。

本発明に用いるニトロフェノール系化合物は前記した化
合物であり、特に下式 で示される２−クロロ−４−ニトロフェノールが挙げら
れる。

一方、本発明に用いるアシル化糖類はマルトペンタオー
スである。このアシル化糖は、上記したニトロフェノー
ル系化合物との反応に先立って還元末端をハロゲン化す
る必要がある。本発明に用いるアシル化糖類は下記一般
式 （式中、Ｒは炭素数１〜５のアルキル基を示し、Ｘはハ
ロゲン原子を示す。）で表わされるヘキサデカアシルマ
ルトペンタオシルハライドが挙げられる。

前記ニトロフェノール系化合物とアシル化糖ハライドと
の反応は有機塩基または無機塩基とルイス酸触媒の存在
下に行なう。

ここで用いる有機塩基，無機塩基とは上記ニトロフェノ
ール系化合物のフェノール性水酸基と反応して塩を形成
する塩基であり、通常はトリアルキルアミン，ピリジン
等の有機塩基あるいはナトリウム，カリウム等の無機塩
基を用いる。これらの中で、特にトリエチルアミンが好
ましい。

また、ルイス酸触媒として臭化第２水銀，過塩素酸銀，
シアン化第２水銀，酸化銀および４級アンモニウム塩の
うちから選ばれたものが用いられる。

本発明では、前記した如く、このような塩基とルイス酸
触媒の存在下にニトロフェノール系化合物とアシル化糖
ハライドを反応させる。一般的には、目的に応じて選ば
れたアシル化糖ハライドの１モル当量に対し目的に応じ
て選ばれたニトロフェノール系化合物の１〜20モル当
量、好ましくは４〜８モル当量を１〜20モル当量の有機
塩基または無機塩基および0.1〜５モル当量のルイス酸
触媒の存在下に反応させる。

この反応は通常、適当な溶媒中で行なうことが望まし
い。ここで用いる溶媒としては、反応を妨げないもの
で、かつ反応物の溶解に適したものであればよい。具体
例としてはベンゼン，ピリジン，ジクロロメタン，アセ
トニトリル等が挙げられる。この反応は−10℃〜100
℃、好ましくは−５℃〜50℃の温度で行なうことができ
る。また、反応時間は0.1〜15時間の範囲で設定すれば
良いが、通常は３時間程度以内で充分である。

本発明の製造法は特にニトロフェノール系化合物が前記
式（Ｉ）で示される２−クロロ−４−ニトロフェノール
であり、アシル化糖類が前記一般式（II）で表わされる
ヘキサデカアシルマルトペンタオシルハライドであり、
有機塩基としてトリエチルアミンを用い、ルイス酸触媒
として臭化第２水銀、過塩素酸銀，シアン化第２水銀ま
たは酸化銀を用いて下式 で表わされるβ−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）
−マルトペンタオシドを製造する方法として最適であ
る。

本発明の製造法でアグリコンとして使用するニトロフェ
ノール系化合物の水酸基はそのままの形ではグリコシル
化反応に十分な求核性を有していないため、生化学実験
法（Ｉ）P.318（朝倉書店）や特開昭60-78994号公報等
に記載されている方法、すなわちフェノール性水酸基を
無機塩素または有機塩基の塩としたのち、これを糖ハラ
イドと中和させグリコシド結合を形成する方法が採用さ
れている。本発明の製造法では、この反応にルイス酸触
媒を添加することにより、糖ハライドのハロゲンの脱離
を促進し、反応収率を大幅に向上せしめることに成功し
たのである。

前記反応の終了後、濃縮，析出等の操作により固形物を
得、結晶化や種々のクロマトグラフィーにより精製を行
なったのち、公知の方法により脱アシル化を行ない、目
的とする配糖体が得られる。

〔発明の効果〕

以上の如き本発明の製造法は、広範囲のニトロフェノー
ル系化合物のβ−配位配糖体の合成に応用することが可
能であるが、具体的な化合物を例示すると、特公昭59-1
3198号公報には、アミラーゼ活性測定用の基質として優
れている化合物として「水酸基を有する芳香族化合物が
還元性末端にβ−結合したマルトオリゴ糖」を示してい
るが、本発明の製造法はこのような配糖体の製造にきわ
めて有用である。

〔実施例〕

次に、本発明を実施例によりさらに詳しく説明する。

実施例 マルトペンタオースをピリジン−無水酢酸によりアセチ
ル化した後、アルゴン気流下に酢酸中で臭化水素を用い
てアセチル化マルトペンタオースの還元性末端のブロム
化反応を行なって調製した下式 で表わされるα−およびβ−ブロモヘキサデカアセチル
マルトペンタオース250ｇ（0.16モル）と下式 で示される２−クロロ−４−ニトロフェノール180ｇ
（1.04モル）を400ｍのジクロロメタンに溶解し、ト
リエチルアミン150ｍおよび臭化第２水銀50ｇを加
え、塩化カルウシム管をつけた反応容器中で攪拌下に４
℃で３時間反応させた。得られた反応液をエバポレータ
ーで濃縮し、得られたアメ状固体をイソプロピルアルコ
ールに加熱溶解し、これにジエチルエーテルを加えて結
晶化させて下式 で表わされるβ−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）
−ヘキサデカアセチルマルトペンタオシド215ｇ（0.13
モル，収率81％）が得られた。このものの融点は125〜1
28℃であった。また、下記の分析結果より構造がβ−配
位であることを確認した。

λmax（エタノール）；２８５ｎｍ νmax；1740,1580,1520,1480,1360,1200,1020cm^-1 元素分析；C₆₈H₈₆O₄₄NClに対する 計算値（％）：Ｃ 49.29，Ｈ 5.24 測定値（％）：Ｃ 49.10，Ｈ 5.25 次に、この物質をナトリウムメトキサイドにより脱アセ
チルした後、得られた粗生成物を高速液体クロマトグラ
フィーにより精製して、目的とするβ−（２−クロロ−
４−ニトロフェニル）−マルトペンタオシドを得た。

このものは、アミラーゼ活性測定用の基質として優れた
化合物である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】有機塩基または無機塩基と臭化第２水銀，
   過塩素酸銀，シアン化第２水銀，酸化銀および４級アン
   モニウム塩のうちから選ばれたルイス酸触媒の存在下に
   下式で示される２−クロロ−４−ニトロフェノールと 下式で表されるヘキサデカアシルマルトペンタオシルハ
   ライド（式中、Ｒは炭素数１〜５のアルキル基を示し、
   Ｘはハロゲン原子を示す。） を反応させ、次いで脱アシル化することを特徴とする下
   式 で表されるβ−（２−クロロ−４−ニトロフェノール）
   −マルトペンタオシドの製造法。