JPH06504275A - （−）−［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （−）−［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ− ３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル 本発明は、式 の［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピ リダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリルの純粋な（−）鏡像異 性体に関する。

また本発明は、この鏡像異性体の塩、組成物および該鏡像異性体の製造法さらに この製造法における新規な中間体に関する。

本発明の化合物は、うっ血性心不全の治療のための強心剤、抗高血圧剤および血 管拡張剤として有用である。

融点２５８〜２６３°Ｃの［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチ ル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリ ル（１）のラセミ混合物は、本出願人らの以前の特許出願ＧＢ２２２８００４中 に記載されている。

化合物（１）は、うっ血性心不全の治療に効力を有し、有意なカルシウム依存性 のトロポニン結合能を有することが示された。今回我々のさらなる研究で、予期 せぬことに強心作用の能力は、おもに本化合物の光学活性を有する（−）鏡像異 性体によるものであることが明らかになった。

さらに、（−）鏡像異性体の水溶性は、ラセミ体に比較して、３０倍をこえるも のであることが見出だされた。（−）鏡像異性体のバイオアベイラビリティ−も また、ラセミ体と比較してすぐれていることがわかった。それゆえに、うっ血性 心不全治療のための医薬として用いられるには、純粋な（−）鏡像異性体が、ラ セミ化合物よりもとくに好適である。

［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリ ダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル（１）の（÷）および（ −）の鏡像異性体は、ラセミ化合物をキラル相クロマトグラフィーカラムにとお すことにより分離することができる。しかしながら、この方法は大量の物質を必 要とするばあいには冗長である。

化合物（１）の純粋な鏡像異性体をつるほかの可能性は、中間体として対応する ６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンの光学活 性鏡像異性体を用いることである。式（ＩＩ） の６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンのラセ ミ体は、文献（ジャーナル　オン　メディカルケミストリー（Ｊ、　Ｍｅｄ、　 Ｃｈｅｔ）、１７巻、２７３〜２８１頁（１９７４））で知られる方法によって 合成することができる。しかしながら、分子内の４−アミノ基が弱塩基性である ためにラセミ化合物（ＩＩ）の分離は、非常に困難であることがわかった。結晶 化の際に６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オン の光学活性酸との塩が加水分解して、化合物（ＩＩ）に、そして分離用化合物に 容易にもどってしまい、分離工程を妨害するかまたは完全に分離不能にしてしま う。

キラルＨＰＬＣカラムでの化合物（ＩＩ）の純粋な鏡像異性体の分離がヨーロッ パ特許出願ＥＰ２０８５１　Ｂに記載されている。しかしながら、この方法は工 業的な規模には適用できない。（＋）−２−クロロプロピオン酸から開始する、 （−）−６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２８）オン の鏡像選択的な７段階の合成も、文献（ジャーナル　オン　オーガニック　ケミ ストリー（Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅａｐ、）、５６巻、１９６３頁（１９９１） ）に記載されている。この方法では、光学純度９７．２％の（−）−６−（４− アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２１）オンをえる総酸率は、わ ずか１２％である。

２−プロパツール中で、Ｌ−またはＤ−酒石酸を過剰に、好ましくは化合物（Ｉ Ｉ）に対して約２から約３当量用いることにより、化合物（ＩＩ）の良好な鏡像 異性体分離物をえることができることが、今回見出だされた。（−）−６−（４ −アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２１）オンのし一酒石酸との 酸塩の２−プロパツール溶媒和物（Ｉｌｌｂ）または対応する（＋）−６−（４ −アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２）１）オンのＤ−酒石酸と の酸塩の２−プロパツール溶媒和物（Ｉｌｌａ）は、良好な収率で、また実用的 な光学的純度をもって結晶化する。

ａ さらに、部分的に濃くなった鏡像異性体混合物中の少ない方の成分は、ラセミ化 合物（ＩＩ）として、残りの多い方の成分を溶液に残してジオキサンから結晶化 されることが見出だされた。したがって、前記のように結晶化してえられる（Ｉ ｌｌａ）または（Ｉｌｌｂ）の塩を濾取し、炭酸カリウム溶液を用いてそのフリ ーの塩基を遊離させ、その産物をジオキサンで処理した。こうして、この２相の 結晶化の手順によって、（１）の両方の鏡像異性体が９９％をこえる高い光学的 純度をもってえられる。ラセミ化合物（１）がジオキサンより結晶状態でえられ 、これは再利用可能であるので、この工程における収率もまた、非常にすぐれて いる。分離用の化合物であるし−またはＤ−酒石酸のいずれでも、どちらかを前 記の方法に用いてよいが、天然のし一酒石酸がより安価であるために好ましい。

つぎに光学的に実質上純粋な化合物（１）のく−）および（＋）の鏡像異性体は 、本出願人らの特許出願ＧＢ２２２８００４において開示された通常の方法で、 高い光学純度およびほぼ定量的な収率にて、それぞれ対応する化合物（１■）の 光学的に実質上純粋な（−）および（＋）の鏡像異性体から製造することができ る。化合物（１）を製造するための特許出願ＧＢ２２２８００４に記載された工 程は、式（１１）の化合物を酸性条件下で、硝酸ナトリウムとマロン酸ニトリル とで処理することを含んでなる。「光学的に実質上純粋」という語は、ここでは 光学純度が約９０％より大、好ましくは９５％より大、さらに好ましくは９９％ より大であることを意味する。

化合物（＋）の鏡像異性体の塩は、既知の方法で製造されてよい。薬学的に許容 しうる塩は、活性な医薬として有用であるが、好ましいのは、アルカリまたはア ルカリ土類金属の塩である。

溶解性 表１゜ ［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリ ダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル（１）のく−）鏡像異性 体とラセミ体混合物の６７ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２）における水溶性。

強心作用 ［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリ ダジニル）フェニルコヒドラゾノ］プロパンジニトリル（Ｉ）の（−）および（ ＋）鏡像異性体の強心作用を、単離され電気的にペースを施されたモルモットの 右心室乳頭筋で研究した。実験は、オータニ（Ｏｔａｎｉ）ら、ジャパニーズジ ャーナル　オン　ファーマコロジ−（Ｊａｐａｎ、　Ｊ、Ｐｈａｒ＋ｏａｃｏ１ ．　）４５巻、４２５頁、１９８７に記載されるように、通常のタイロード氏浴 液中で行なった。

その結果を表２に示す。その結果より、（−）鏡像異性体が（＋）鏡像異性体よ りも強心作用が４７倍強いことが示される。

表２゜ モルモット乳頭筋における［　［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メ チル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニト リルの（−）および（＋）鏡像異性体の強心作用。

バイオアベイラビリティ− ラセミ体（１ｍｇ／　ｋｇ）および（＝）鏡像異性体（０，５ｍｇ／ｋｇ）を単 回経口投与したのちの犬血漿中の［［４−（１，４゜５．６−テトラヒドロ−４ −メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジ ニトリルの総濃度を図１に示す。曲線Ａは［［４−（１，４，５，６−テトラヒ ドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニルコヒドラゾノコブ ロバンジニトリルの（＝）鏡像異性体に、曲線Ｂはそのラセミ体に対するもので ある。図より（−）鏡像異性体がラセミ体のかわりに用いられたばあいには、全 体の薬物物質の血漿濃度レベルを同じにするのに半分より少ない量しか必要とし ないことが示される。

本発明の薬学的に活性な化合物は、この技術分野で知られた原理を用いて、投与 する形状に製剤化される。それはそれだけでまたは適切な薬物賦形剤と組み合わ せて、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、廃剤、懸濁剤、分散剤または水剤の形状で、 哺乳類生物、すなわちヒト、患者に投与される。本発明の組成物は、本発明の薬 学的に活性な化合物の、治療に有効な量を含む。活性化合物の含有量は、組成物 中約０．５から１００重量％である。一般に、本発明の化合物は、１日あたり約 １がら５０ｔｍｇの範囲程度の低い経口投与量でヒトに投与されてよい。組成物 のための適切な配合物の選択は、当該技術分野の通常の技術者にとってきまりき ったものである。適切な担体、溶媒、ゲル形成用配合物、分散剤形成用配合物、 抗酸化物、色素、甘味料、湿潤剤および当該技術分野で通常用いられるそのほか の配合物もまた、使用されてよいことは明らかである。ラットに静脈投与された 際の（−）鏡像異性体のＬＤ５ｇ値は、５７ｍｇ／ｋｇであった。

医薬の目的に応じて組成物は製剤化されるが、通常の非被覆の錠剤はとても満足 のいくものである。ときには、胃腸管の所望の部位に薬物が到達するのを保証す るために、被覆錠剤すなわち、いわゆる腸溶性錠剤を用いることが賢明である。

糖衣剤やカプセル剤も使用してよい。

実施例１ Ｌ−酒石酸を用いた６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（ ２Ｈ）オンのラセミ体の分離。

（±）　−６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）ｔ 　ン（２０３ｇ、　１−Ｔ−ル）を、２−ブｏ　ハ／　−ル（４０ｄｍ”）中に 、加熱下に溶解した。この溶液に（Ｌ）−酒石酸（３００ｇ。

２モル）を徐々に加えた。混液を、清澄な液かえられるまで加熱下に攪拌した。

その溶液を、攪拌しながらゆっ（りと室温にまで冷却した。２０°Ｃで一晩攪拌 したのち、結晶性の産物（Ｉｌｌｂ）を濾取した。その湿った塩を水（１゜５ｄ ｏ＋３）に溶解し、炭酸カリウム水溶液（水０．７５ｄａ＋”中１９０ｇ　Ｋ２ Ｃ０３）を攪拌しながら加えた。遊離塩基を濾取し、水洗ののち、乾燥した。産 物（１０４，６ｇ）はジオキサン（０，６ｄａ＋３）中に加熱下で溶解し、室温 まで冷却した。６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ ）オンのラセミ体を濾取しく７４．６ｇ）　、濾液を減圧下で蒸発乾燥させて（ −）−６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンを 光学純度９９．５％、融点２０７〜２１０℃、［ａ］甘せ−３８３″（ｘタノー ルー水−濃塩酸／１７：　２　：　１）の結晶性固形物（２３，８ｇ）としてえ た。

化合物（１）のラセミ体とともに（＋）−鏡像異性体を含む２−プロパツール溶 液を減圧下で蒸発乾燥させた。残渣は、前記と同様に炭酸カリウム水溶液で処理 し、（＋）−鏡像異性体とラセミ体の混合物（８７，３ｇ）をえて、加熱下でジ オキサン（０，４８ｄ＋＋３）中に溶解した。ラセミ体は冷却ののち濾取しく４ ８．０ｇ）　、濾液を減圧下で蒸発乾燥させて、（＋）−６〜（４−アミノフェ ニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンを光学純度９９．５％、融点２ ０６〜２０９°Ｃ１［ａ］２Ｄ５＝＋３９１０（エタノール−水−濃塩酸／１７ ：　２　：　１）の結晶性固形物（２６゜Ｉｇ）としてえた。合計で１２２．６ 　ｇのラセミ体を回収した。

したがって化合物（１）の（−）−鏡像異性体の収率は５９．２％で、（＋）− 鏡像異性体の収率は６４，９％であった。

実施例２ （＋）−［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ− ３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル 表題の化合物を、特許出願ＧＢ２２２８００４に記載のように、（＋）−６−（ ４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンから調製した。

収率は９８％で、融点２１０〜２１４６Ｃ、［ａ］　Ｄ　５６８°（テトラヒド ロフランーメタ、／−／ｌ／／ｌ　：ｌ）であった。

実施例３ （−）−［［４−（１，４，５，６〜テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ− ３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリル 表題の化合物を、前記と同様に、（−）−６−（４−アミノフェニル）−５−メ チルピリダジン−３（２８）オンからえた。収率は９７％で、融点２１０〜２１ ４℃、［ａ１２Ｄ５＝−５６６°（テトラヒドロフラン−メタノール／１　：　 １）であった。

実施例４ 純粋なジアステレオマー塩（Ｉｌｌａ）の調製実施例１でえられた純粋な（＋） −６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オン５０８ −ｇ（２，５ミリモル）を、１００＋ａｌの２−プロパツール中に溶解した。Ｄ −酒石酸７５０＋ａｇ（５，０ミリモル）を加え、混合物を沸騰するまで加熱し た。

冷却して、８００＋＋＋ｇの（＋）−６−（４−アミノフェニル）−５−メチル ピリダジン−３（２Ｈ）オンロー酒石酸塩モノ２−プロパツール溶媒和物の結晶 かえられ、融点は９７〜１０５°Ｃであった。

実施例５ 純粋なジアステレオマー塩（Ｉｌｌｂ）の調製（−）−６−（４−アミノフェニ ル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンとＬ−酒石酸を用いて前記の方法 を繰り返した。融点は９８〜１０６℃であった。

実施例６ Ｌ−酒石酸を用いた対応するラセミ体の分離による（−）−６−（４−アミノフ ェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｂ）オンの調製。

（±）　−６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オ ン（２０３ｇ、１モル）を、加熱下で２−プロパツール（ｌｏｄ■３）中に溶解 した。この溶液に（Ｌ）−酒石酸（３００ｇ。

２モル）を徐々に添加した。混合物を、清澄な溶液かえられるまで、加熱下に攪 拌し、３時間のあいだに５０℃にまでゆっくりと冷却し、さらに５０℃で一晩攪 拌した。結晶性の産物を濾取し、実施例１に記載した方法を繰り返した。（−） −６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン’　−３（２Ｈ）オンの 収量は３０．３ｇ　（理論値は９７．４％）であった。

光学純度は９９．７％であった。合計で１４０．８　ｇのラセミ体かえられた。

化合物の光学純度は、高速液体クロマトグラフィーによって測定した。装置はＮ ＥＣパワーメイト（Ｐｏｗｅｒｍａｔｅ）ＳＸ　Ｐｌｕｓ　コンピューターによ って制御される、ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）　９９１フオトダイオ一ドアレ イ検出機とウォーターズ７００サテライトウィスブ（Ｓａｔｅｌｌｉｔｅ　Ｗｉ ｓｐ）インジェクター（ミリポア社（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　Ｃｏ、）製）を装備 したウォーターズ６００Ｅグラジェントポンプであった。６−（４−アミノフェ ニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンの鏡像異性体は、セルロースタ イプのキラルカラム（キラセル＝　ＯＪ　（Ｃｈｉｒａｃｅｌ＝　ＯＪ　）　、 ４．６ｘ　２５０＋＋＋ｍ、ダイセル　ケミカル　インダストリーズ社（Ｄａｉ ｃｅｌ　ＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ　ＬＴＤ、）製）を用いて分離 した。移動相は９７％２−プロパツールおよび３％ヘキサンからなるものであっ た。流量は０．３＋＋＋１／　＋ｉｉｎであった。［［４−（１，４，５，６− テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラ ゾノ］プロパンジニトリルの鏡像異性体は、β−シクロデキストリンカラム（シ クロボンドｌ　ｂ　（Ｃｙｃｌｏｂｏｎｄｌｂ）、４．６　Ｘ　２５０ｍｍ、ア ドバンス　セパレーション　チクノロシーズ社（Ａｄｖａｎｃｅ　５ｅｐａｒａ ｔｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　Ｉｎｃ、、）製）を用いて、分離した。

移動相は１％トリエチルアンモニウム酢酸でｐＨ４，０に緩衝能を付与した４１ ％メタノール水溶液からなるものであった。流量は０．３ｍｌ／■ｉｎであった 。

濃度（ｎｇ／ｍｌ） 図１ 補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成５年６月３０副閤

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．（−）−［［４−（１，４，５，６−テトラヒドロ−４−メチル−６−オキ ソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プロパンジニトリルおよびその 薬学的に許容しうる塩。 ２．治療に有効な量の請求項１記載の化合物と薬学的に許容しうる担体を含んで なる医薬組成物。 ３．２−プロパノール中でＬ−またはＤ−酒石酸と鏡像異性体混合物を接触させ ること、えられた結晶性の塩を回収することおよび任意にその塩を塩基として、 対応する遊離塩基を形成させることを含んでなる（±）−６−（４−アミノフェ ニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンの光学的な分離のための方法。 ４．遊離塩基をさらにジオキサンに溶解し、光学活性を有する遊離塩基を含む濾 液を回収する請求項３記載の方法。 ５．レまたはＤ−酒石酸を、鏡像異性体の当量あたり約２から約３酸当量用いる 請求項３または４記載の方法。 ６．結晶性の塩が式（ＩＩＩａ）または（ＩＩＩｂ）のジアステレオマー中間体 の塩を含む請求項３、４または５記載の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩａ▲数式、化学式、表等があります▼ ＩＩＩｂ７．請求項３〜６のいずれかにしたがって調製された光学的に実質上純 粋な６−（４−アミノフェニル）−５−メチルピリダジン−３（２Ｈ）オンの（ −）または（＋）の鏡像異性体を硝酸ナトリウムとマロン酸ニトリルを用いて処 理することを含む、光学的に実質上純粋な（−）−［［４−（１，４，５，６− テトラヒドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラ ゾノ］プロパンジニトリルまたは（＋）−［［４−（１，４，５，６−テトラヒ ドロ−４−メチル−６−オキソ−３−ピリダジニル）フェニル］ヒドラゾノ］プ ロパンジニトリルの製造法。 ８．式（ＩＩＩａ）または（ＩＩＩｂ）のジアステレオマー中間体塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩａ▲数式、化学式、表等があります▼ ＩＩＩｂ９．請求項１記載の化合物のうっ血性心不全を治療するために有効な量 を、本治療を必要とする哺乳類生物に投与することを含んでなる、哺乳類生物に おけるうっ血性心不全の治療法。