JPH0662878A - 微生物によるマイコスポリン様アミノ酸の製造法 - Google Patents
微生物によるマイコスポリン様アミノ酸の製造法Info
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- JPH0662878A JPH0662878A JP21530992A JP21530992A JPH0662878A JP H0662878 A JPH0662878 A JP H0662878A JP 21530992 A JP21530992 A JP 21530992A JP 21530992 A JP21530992 A JP 21530992A JP H0662878 A JPH0662878 A JP H0662878A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ミクロコッカス属に属しマイコスポリン様ア
ミノ酸を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、
培養物中からマイコスポリン様アミノ酸を採取すること
を特徴とするマイコスポリン様アミノ酸の製造法。 【効果】 化粧品添加物等に有用であるマイコスポリン
様アミノ酸を計画的にかつ大量に生産することが可能で
ある。
ミノ酸を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、
培養物中からマイコスポリン様アミノ酸を採取すること
を特徴とするマイコスポリン様アミノ酸の製造法。 【効果】 化粧品添加物等に有用であるマイコスポリン
様アミノ酸を計画的にかつ大量に生産することが可能で
ある。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、マイコスポリン様アミ
ノ酸の製造法に関する。該物質は自然界における紫外線
スクリーン物質と考えられており、このため各種工業製
品を紫外線による劣化から保護する物質または化粧品添
加物として有用である。
ノ酸の製造法に関する。該物質は自然界における紫外線
スクリーン物質と考えられており、このため各種工業製
品を紫外線による劣化から保護する物質または化粧品添
加物として有用である。
【０００２】
【従来の技術】天然のマイコスポリン様アミノ酸は海
藻、海産動物、微細藻、カビ類などが生産することが知
られている〔ボータニカ マリーナ(Bot.Mar.)16,23,(1
974)、マリン バイオロジー(Mar.Biol.)108,157(199
1)、ジャーナル オブ プランクトンリサーチ(J.Plank
ton Res.)12,909(1990)、プラント ディジーズ レポ
ーター(Plant Dis.Reptr.)57,760(1973)〕。また、化学
合成による生産法はオーストラリアの国際特許で報告さ
れている〔インターナショナル パブリッシュ ナンバ
ー(International publication No.)WO88/02251,1988年
４月７日、インターナショナル パブリッシュ ナンバ
ー(International publication No.)WO/86/02350, 1986
年４月24日〕。しかし、細菌による生産法はまだ知られ
ていない。
藻、海産動物、微細藻、カビ類などが生産することが知
られている〔ボータニカ マリーナ(Bot.Mar.)16,23,(1
974)、マリン バイオロジー(Mar.Biol.)108,157(199
1)、ジャーナル オブ プランクトンリサーチ(J.Plank
ton Res.)12,909(1990)、プラント ディジーズ レポ
ーター(Plant Dis.Reptr.)57,760(1973)〕。また、化学
合成による生産法はオーストラリアの国際特許で報告さ
れている〔インターナショナル パブリッシュ ナンバ
ー(International publication No.)WO88/02251,1988年
４月７日、インターナショナル パブリッシュ ナンバ
ー(International publication No.)WO/86/02350, 1986
年４月24日〕。しかし、細菌による生産法はまだ知られ
ていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】大型の海産動植物では
計画的な生産が困難であり、微細藻およびカビでは生育
速度が遅く、効率的な生産には適さない。そこで本発明
は、微生物を用い、天然マイコスポリン様アミノ酸を計
画的にかつ大量に生産する方法を提供することを目的と
する。
計画的な生産が困難であり、微細藻およびカビでは生育
速度が遅く、効率的な生産には適さない。そこで本発明
は、微生物を用い、天然マイコスポリン様アミノ酸を計
画的にかつ大量に生産する方法を提供することを目的と
する。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者は、ミクロコッ
カス属に属する菌株の培養物中に含まれる近紫外線吸収
物質がマイコスポリン様アミノ酸であることを見出し、
本発明を完成した。すなわち、本発明は、ミクロコッカ
ス属に属しマイコスポリン様アミノ酸を生産する能力を
有する微生物を培地に培養し、培養物中からマイコスポ
リン様アミノ酸を採取することを特徴とするマイコスポ
リン様アミノ酸の製造法である。
カス属に属する菌株の培養物中に含まれる近紫外線吸収
物質がマイコスポリン様アミノ酸であることを見出し、
本発明を完成した。すなわち、本発明は、ミクロコッカ
ス属に属しマイコスポリン様アミノ酸を生産する能力を
有する微生物を培地に培養し、培養物中からマイコスポ
リン様アミノ酸を採取することを特徴とするマイコスポ
リン様アミノ酸の製造法である。
【０００５】以下に本発明を詳細に説明する。マイコス
ポリン様アミノ酸とは、アミノ酸やアミノアルコール等
の窒素置換体がシクロヘキサノン発色団に結合した、近
紫外線領域を強く吸収する水溶性物質の総称であり、具
体的には、下記の式により示される化合物である。
ポリン様アミノ酸とは、アミノ酸やアミノアルコール等
の窒素置換体がシクロヘキサノン発色団に結合した、近
紫外線領域を強く吸収する水溶性物質の総称であり、具
体的には、下記の式により示される化合物である。
【０００６】
【化１】
【０００７】｛式中の Xは、O、NHあるいはN-R'(R'はア
ミノ酸のアミノ残基）を表し、 Rは Hあるいはアミノ酸
のアミノ残基を表す。｝本発明により生産されるマイコ
スポリン様アミノ酸としては、公知物質であるシノリン
及び以下の理化学的性質を有するマイコスポリン様アミ
ノ酸Ｉ、マイコスポリン様アミノ酸II、マイコスポリン
様アミノ酸IIIが挙げられる。
ミノ酸のアミノ残基）を表し、 Rは Hあるいはアミノ酸
のアミノ残基を表す。｝本発明により生産されるマイコ
スポリン様アミノ酸としては、公知物質であるシノリン
及び以下の理化学的性質を有するマイコスポリン様アミ
ノ酸Ｉ、マイコスポリン様アミノ酸II、マイコスポリン
様アミノ酸IIIが挙げられる。
【０００８】マイコスポリン様アミノ酸Ｉは、HPLCカラ
ムに資生堂製 Capsell Pak Ｃ18（内径15mm 長さ250
m）を用い、溶出溶媒に0.2 ％酢酸、30℃、10ml/minの
流速で溶出したときに、保持時間が7.59min である物質
で、図２に示すようなUV−可視スペクトルを示す物質で
ある。マイコスポリン様アミノ酸IIは、上記と同様な操
作を行った場合、保持時間が9.30min である物質で、図
3 に示すようなUV−可視スペクトルを示す物質である。
ムに資生堂製 Capsell Pak Ｃ18（内径15mm 長さ250
m）を用い、溶出溶媒に0.2 ％酢酸、30℃、10ml/minの
流速で溶出したときに、保持時間が7.59min である物質
で、図２に示すようなUV−可視スペクトルを示す物質で
ある。マイコスポリン様アミノ酸IIは、上記と同様な操
作を行った場合、保持時間が9.30min である物質で、図
3 に示すようなUV−可視スペクトルを示す物質である。
【０００９】マイコスポリン様アミノ酸IIIは、上記と
同様な操作を行った場合、保持時間が12.35minである物
質で、図４に示すようなUV−可視吸収スペクトルを示す
物質である。マイコスポリン様アミノ酸生産菌としては
ミクロコッカス属に属し、マイコスポリン様アミノ酸生
産能を有する菌株であればいずれの菌株でも用いること
ができる。またこれらの菌株の人工的変異方法、例えば
紫外線照射、Ｘ線照射、変異誘起剤処理などあるいは自
然発生による変異株でもマイコスポリン様アミノ酸を生
産するものであれば本発明に用いることができる。上記
微生物の例としてはAK334 株を挙げることができる。本
発明に使用されるAK334 株は、自然界から新たに分離し
た菌株であり、その菌学的性質については以下の通りで
ある。 ａ．形態 １）細胞の形及び大きさ ：球菌、0.4〜0.5μ
m ２）細胞の多形成の有無 ：無し ３）運動性の有無、鞭毛の着生状態：有り、単極毛 ４）胞子の有無 ：無し ５）グラム染色性 ：陽性 ６）抗酸性 ：陰性 ｂ．各培地における生育状態 １）肉汁寒天平板培養 ：生育は中程度、コ
ロニーは円形、凸円状、全縁、不透明、湿光、橙色 ２）肉汁寒天斜面培養 ：生育は中程度、糸
状、橙色 ３）肉汁液体培養 ：生育は中程度、濁
り、沈澱ができる。
同様な操作を行った場合、保持時間が12.35minである物
質で、図４に示すようなUV−可視吸収スペクトルを示す
物質である。マイコスポリン様アミノ酸生産菌としては
ミクロコッカス属に属し、マイコスポリン様アミノ酸生
産能を有する菌株であればいずれの菌株でも用いること
ができる。またこれらの菌株の人工的変異方法、例えば
紫外線照射、Ｘ線照射、変異誘起剤処理などあるいは自
然発生による変異株でもマイコスポリン様アミノ酸を生
産するものであれば本発明に用いることができる。上記
微生物の例としてはAK334 株を挙げることができる。本
発明に使用されるAK334 株は、自然界から新たに分離し
た菌株であり、その菌学的性質については以下の通りで
ある。 ａ．形態 １）細胞の形及び大きさ ：球菌、0.4〜0.5μ
m ２）細胞の多形成の有無 ：無し ３）運動性の有無、鞭毛の着生状態：有り、単極毛 ４）胞子の有無 ：無し ５）グラム染色性 ：陽性 ６）抗酸性 ：陰性 ｂ．各培地における生育状態 １）肉汁寒天平板培養 ：生育は中程度、コ
ロニーは円形、凸円状、全縁、不透明、湿光、橙色 ２）肉汁寒天斜面培養 ：生育は中程度、糸
状、橙色 ３）肉汁液体培養 ：生育は中程度、濁
り、沈澱ができる。
【００１０】 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養 ：液化する（３週
後）。 Ｃ．生理学的性質 １）硝酸塩の還元 ：還元しない。 ２）ＭＲテスト ：陰性 ３）ＶＰテスト ：陰性 ４）インドールの生成 ：生成しない。
後）。 Ｃ．生理学的性質 １）硝酸塩の還元 ：還元しない。 ２）ＭＲテスト ：陰性 ３）ＶＰテスト ：陰性 ４）インドールの生成 ：生成しない。
【００１１】 ５）硫化水素の生成 ：生成しない。 ６）でんぷんの加水分解 ：加水分解する。 ７）クエン酸の利用 ：利用しない（Kose
r 培地） 利用する（Cristensen培地） ８）無機窒素源の利用 ：利用しない。
r 培地） 利用する（Cristensen培地） ８）無機窒素源の利用 ：利用しない。
【００１２】 ９）色素の生成 ：非水素性色素を生
成する。 １０）ウレアーゼ活性 ：陰性 １１）オキシターゼ活性 ：陰性 １２）カタラーゼ活性 ：陽性 １３）生育の範囲（温度、pH） ：温度 12〜37℃
30℃で最も良好に発育。pH 5〜10 １４）酸素に対する態度 ：好気性 １５）Ｏ−Ｆテスト ：陰性（酸化も醗
酵もしない ５日後） １６）糖類から酸およびガスの生成の有無： 酸の生成 ガスの発生 Ｌ−アラビノース − − Ｄ−キシロース ± − Ｄ−グルコース ＋ − Ｄ−マンノース − − Ｄ−フラクトース − − Ｄ−ガラクトース ＋ − 麦芽糖 ＋ − ショ糖 ＋ − 乳糖 ＋ − トレハロース − − Ｄ−ソルビット − − Ｄ−マンニット − − イノシット − − グリセリン − − デンプン ＋ − 基礎培地はペプトン水、30℃ 3週間培養後 （−：生成せず、＋：生成する、±：弱く生成する） １７）エスクリンの分解 ：陽性 １８）アルギニンの分解 ：陰性 １９）塩化ナトリウムの耐性 ： 5％で生育する
が、 7.5％以上で生育せず ２０）ＯＮＰＧテスト ：陽性 ２１）Tween 80 hydrolysis ：陽性 ２２）フォスファターゼ活性 ：陰性 ２３）卵黄反応 ：陰性 ２４）ＧＣ含量 ：73.6％ 検索の結果、AK334 株の性質と一致する種を特定するこ
とは困難であり、AK334 株をミクロコッカス sp.(Micro
coccus sp. AK334) として工業技術院微生物工業技術研
究所に微工研菌寄第12950 号(FERM P-12950)として寄託
した。（原寄託日：平成４年５月８日） 本発明の培養においては、通常の細菌の培養方法を用い
ることができる。培地としては、資化可能な炭素源、窒
素源、無機物および必要な生育、生産促進物質を適当量
含む培地であれば、合成培地、天然培地いずれでも使用
可能である。炭素源としては、グルコース、澱粉、デキ
ストリン、シュクロース、ラクトース、キシロース、糖
蜜などを単独または組合せて用いられる。更に、菌の資
化能によっては炭化水素、アルコール類、有機酸なども
用いられる。窒素源としては、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿
素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コー
ン・スチープ・リカー、大豆粉、カザミノ酸などが単独
または組合せて用いられる。そのほか、必要に応じて食
塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、硫
酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、
硫酸銅などの無機塩類を加えることができる。更に使用
菌の生育やマイコスポリン様アミノ酸の生産を促進する
微量成分を適当に添加することができる。
成する。 １０）ウレアーゼ活性 ：陰性 １１）オキシターゼ活性 ：陰性 １２）カタラーゼ活性 ：陽性 １３）生育の範囲（温度、pH） ：温度 12〜37℃
30℃で最も良好に発育。pH 5〜10 １４）酸素に対する態度 ：好気性 １５）Ｏ−Ｆテスト ：陰性（酸化も醗
酵もしない ５日後） １６）糖類から酸およびガスの生成の有無： 酸の生成 ガスの発生 Ｌ−アラビノース − − Ｄ−キシロース ± − Ｄ−グルコース ＋ − Ｄ−マンノース − − Ｄ−フラクトース − − Ｄ−ガラクトース ＋ − 麦芽糖 ＋ − ショ糖 ＋ − 乳糖 ＋ − トレハロース − − Ｄ−ソルビット − − Ｄ−マンニット − − イノシット − − グリセリン − − デンプン ＋ − 基礎培地はペプトン水、30℃ 3週間培養後 （−：生成せず、＋：生成する、±：弱く生成する） １７）エスクリンの分解 ：陽性 １８）アルギニンの分解 ：陰性 １９）塩化ナトリウムの耐性 ： 5％で生育する
が、 7.5％以上で生育せず ２０）ＯＮＰＧテスト ：陽性 ２１）Tween 80 hydrolysis ：陽性 ２２）フォスファターゼ活性 ：陰性 ２３）卵黄反応 ：陰性 ２４）ＧＣ含量 ：73.6％ 検索の結果、AK334 株の性質と一致する種を特定するこ
とは困難であり、AK334 株をミクロコッカス sp.(Micro
coccus sp. AK334) として工業技術院微生物工業技術研
究所に微工研菌寄第12950 号(FERM P-12950)として寄託
した。（原寄託日：平成４年５月８日） 本発明の培養においては、通常の細菌の培養方法を用い
ることができる。培地としては、資化可能な炭素源、窒
素源、無機物および必要な生育、生産促進物質を適当量
含む培地であれば、合成培地、天然培地いずれでも使用
可能である。炭素源としては、グルコース、澱粉、デキ
ストリン、シュクロース、ラクトース、キシロース、糖
蜜などを単独または組合せて用いられる。更に、菌の資
化能によっては炭化水素、アルコール類、有機酸なども
用いられる。窒素源としては、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿
素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コー
ン・スチープ・リカー、大豆粉、カザミノ酸などが単独
または組合せて用いられる。そのほか、必要に応じて食
塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、硫
酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、
硫酸銅などの無機塩類を加えることができる。更に使用
菌の生育やマイコスポリン様アミノ酸の生産を促進する
微量成分を適当に添加することができる。
【００１３】培養法としては、液体培養法がもっとも適
している。培養温度は16〜32℃が適当であり、培養中の
培地のpHはリン酸緩衝液などの緩衝液の添加により 4〜
10、特に6 〜8 に維持することが望ましい。液体培養で
通常 1〜 4日培養を行うと、目的物質のマイコスポリン
様アミノ酸が培養液中および菌体中に生成蓄積される。
培養物中の生成量が最大に達したときに培養を停止す
る。
している。培養温度は16〜32℃が適当であり、培養中の
培地のpHはリン酸緩衝液などの緩衝液の添加により 4〜
10、特に6 〜8 に維持することが望ましい。液体培養で
通常 1〜 4日培養を行うと、目的物質のマイコスポリン
様アミノ酸が培養液中および菌体中に生成蓄積される。
培養物中の生成量が最大に達したときに培養を停止す
る。
【００１４】培養物からマイコスポリン様アミノ酸の単
離精製は、微生物代謝生産物をその培養物から単離精製
するために常用される方法に従って行われる。例えば培
養物を濾過や遠心分離により培養濾液と菌体に分け、菌
体を含水メタノール、含水エタノールなどで抽出する。
ついで、抽出液と培養濾液とを合わせて、抽出液を濃縮
し、活性炭によるカラムクロマトグラフィー、ゲル濾
過、高速液体クロマトグラフィーなどにより、マイコス
ポリン様アミノ酸の無色粉末を得る。なお、培養、精製
操作中のマイコスポリン様アミノ酸の動向は高速液体ク
ロマトグラフィーによるマイコスポリン様アミノ酸の紫
外線吸収を目安として追跡することができる。
離精製は、微生物代謝生産物をその培養物から単離精製
するために常用される方法に従って行われる。例えば培
養物を濾過や遠心分離により培養濾液と菌体に分け、菌
体を含水メタノール、含水エタノールなどで抽出する。
ついで、抽出液と培養濾液とを合わせて、抽出液を濃縮
し、活性炭によるカラムクロマトグラフィー、ゲル濾
過、高速液体クロマトグラフィーなどにより、マイコス
ポリン様アミノ酸の無色粉末を得る。なお、培養、精製
操作中のマイコスポリン様アミノ酸の動向は高速液体ク
ロマトグラフィーによるマイコスポリン様アミノ酸の紫
外線吸収を目安として追跡することができる。
【００１５】以下に本発明の実施例を示す。
【００１６】
【実施例】種菌としてミクロコッカス sp. AK334株を用
いる。該菌株を、400 mlのB6G液体培地 (ポリペプト
ン：0.25 g/L、ポリペプトンＳ：0.25 g/L、ポリペプト
ンＹ：0.25 g/L、ブレイン・ハート・インフュージョン
バクト：0.5 g/L 、イースト・エキストラクト バク
ト：1 g/L 、マルト・エキストラクト バクト：0.25g/
L、ソルブル・スターチ バクト：0.25 g/L、ポテト・
デキストロース・ブロース バクト：0.5 g/L 、ブドウ
糖：1 g/L 、トロピックマリン（人工海水）：26g/L 、
ヘペス（ＨＥＰＥＳ）：0.5 g/L 、イオン交換水： 1 L
pH：7.7)を入れた1 L 三角フラスコ中で、30℃、 4日
間振とう（ 120r.p.m ）培養した。このようにして得ら
れた培養液 20 L を遠心分離し、得られた菌体を 80 ％
メタノールで抽出、減圧乾固することにより、80％メタ
ノール抽出物を3.78 g得た。抽出物を 1％濃度で水に再
溶解し、合成吸着剤ダイアイオンCHP-20P カラムクロマ
トグラフィー（三菱化成工業社製 内径15mm 長さ150m
m ）を行って脂溶性の不純物を吸着除去した。この溶出
液の全てを活性炭カラム（和光純薬工業（株）社製内径
25mm 長さ200mm ）に通塔して紫外線吸収物質を吸着さ
せ、イオン交換水で洗浄した後、50％エタノールで溶出
した。紫外線吸収物質含有画分を330nm における吸収で
検出して分取し、溶媒を減圧留去して活性炭精製物0.30
g を得た。これを１％濃度で水に再溶解し、ゲル濾過剤
トヨパール HW-40F カラム（東ソー製 内径22mm 長さ
500mm ）で水を溶媒として精製し、粗精製物0.21 gを得
た。この粗精製物を、逆層HPLCカラム（カラム：資生堂
製 カプセル・パック C18SG120 内径15mm 長さ250n
m 、溶出溶媒：0.2 ％酢酸水溶液、30℃、 10ml/min）
で精製し、粗精製物を38.9mg得た。これをGPC-HPLC（カ
ラム：東ソー製 TSK-GEL 3000PWXL、溶出溶媒：0.2 ％
酢酸水溶液、30℃、1ml/min ）で精製し、粗精製物26.5
mgを得た。最後にこの粗精製物を逆層HPLCカラム（カラ
ム：資生堂製カプセル・パック C18 SG120 内径15mm
長さ250mm 、溶出溶媒：0.05％酢酸水溶液、30℃、1m
l/nim ）で精製し、白色の紫外線吸収物質を約10mg得
た。同時に、逆層HPLCで遅く溶出する 3種のマイコスポ
リン様アミノ酸をそれぞれ1mg 、0.8mg 、1.3mg 得た。
上記の白色の紫外線吸収物質の構造を、核磁気共鳴装置
（バリアン社製 UNITY500）、質量分析装置（日本電子
製 JMS-SX102）により解析した結果、公知の物質である
シノリンの構造と一致した。得られたシノリンのUV-可
視吸収スペクトルを図１に示した。
いる。該菌株を、400 mlのB6G液体培地 (ポリペプト
ン：0.25 g/L、ポリペプトンＳ：0.25 g/L、ポリペプト
ンＹ：0.25 g/L、ブレイン・ハート・インフュージョン
バクト：0.5 g/L 、イースト・エキストラクト バク
ト：1 g/L 、マルト・エキストラクト バクト：0.25g/
L、ソルブル・スターチ バクト：0.25 g/L、ポテト・
デキストロース・ブロース バクト：0.5 g/L 、ブドウ
糖：1 g/L 、トロピックマリン（人工海水）：26g/L 、
ヘペス（ＨＥＰＥＳ）：0.5 g/L 、イオン交換水： 1 L
pH：7.7)を入れた1 L 三角フラスコ中で、30℃、 4日
間振とう（ 120r.p.m ）培養した。このようにして得ら
れた培養液 20 L を遠心分離し、得られた菌体を 80 ％
メタノールで抽出、減圧乾固することにより、80％メタ
ノール抽出物を3.78 g得た。抽出物を 1％濃度で水に再
溶解し、合成吸着剤ダイアイオンCHP-20P カラムクロマ
トグラフィー（三菱化成工業社製 内径15mm 長さ150m
m ）を行って脂溶性の不純物を吸着除去した。この溶出
液の全てを活性炭カラム（和光純薬工業（株）社製内径
25mm 長さ200mm ）に通塔して紫外線吸収物質を吸着さ
せ、イオン交換水で洗浄した後、50％エタノールで溶出
した。紫外線吸収物質含有画分を330nm における吸収で
検出して分取し、溶媒を減圧留去して活性炭精製物0.30
g を得た。これを１％濃度で水に再溶解し、ゲル濾過剤
トヨパール HW-40F カラム（東ソー製 内径22mm 長さ
500mm ）で水を溶媒として精製し、粗精製物0.21 gを得
た。この粗精製物を、逆層HPLCカラム（カラム：資生堂
製 カプセル・パック C18SG120 内径15mm 長さ250n
m 、溶出溶媒：0.2 ％酢酸水溶液、30℃、 10ml/min）
で精製し、粗精製物を38.9mg得た。これをGPC-HPLC（カ
ラム：東ソー製 TSK-GEL 3000PWXL、溶出溶媒：0.2 ％
酢酸水溶液、30℃、1ml/min ）で精製し、粗精製物26.5
mgを得た。最後にこの粗精製物を逆層HPLCカラム（カラ
ム：資生堂製カプセル・パック C18 SG120 内径15mm
長さ250mm 、溶出溶媒：0.05％酢酸水溶液、30℃、1m
l/nim ）で精製し、白色の紫外線吸収物質を約10mg得
た。同時に、逆層HPLCで遅く溶出する 3種のマイコスポ
リン様アミノ酸をそれぞれ1mg 、0.8mg 、1.3mg 得た。
上記の白色の紫外線吸収物質の構造を、核磁気共鳴装置
（バリアン社製 UNITY500）、質量分析装置（日本電子
製 JMS-SX102）により解析した結果、公知の物質である
シノリンの構造と一致した。得られたシノリンのUV-可
視吸収スペクトルを図１に示した。
【００１７】
【発明の効果】本発明により近紫外光領域を吸収する能
力を有するため化粧品添加物等に有用なマイコスポリン
様アミノ酸を計画的にかつ大量に生産することが可能で
ある。
力を有するため化粧品添加物等に有用なマイコスポリン
様アミノ酸を計画的にかつ大量に生産することが可能で
ある。
【図１】 シノリンのUV−可視吸収スペクトルを示す
図。
図。
【図２】 マイコスポリン様アミノ酸ＩのUV−可視吸収
スペクトルを示す図。
スペクトルを示す図。
【図３】 マイコスポリン様アミノ酸IIのUV−可視吸収
スペクトルを示す図。
スペクトルを示す図。
【図４】 マイコスポリン様アミノ酸IIIのUV−可視吸
収スペクトルを示す図。
収スペクトルを示す図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 佐野 浩 静岡県清水市袖師町1900番地 株式会社海 洋バイオテクノロジー研究所清水研究所内
Claims (1)
- 【請求項１】 ミクロコッカス属に属しマイコスポリン
様アミノ酸を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養物中からマイコスポリン様アミノ酸を採取する
ことを特徴とするマイコスポリン様アミノ酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21530992A JPH0662878A (ja) | 1992-08-12 | 1992-08-12 | 微生物によるマイコスポリン様アミノ酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21530992A JPH0662878A (ja) | 1992-08-12 | 1992-08-12 | 微生物によるマイコスポリン様アミノ酸の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0662878A true JPH0662878A (ja) | 1994-03-08 |
Family
ID=16670189
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21530992A Pending JPH0662878A (ja) | 1992-08-12 | 1992-08-12 | 微生物によるマイコスポリン様アミノ酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0662878A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2803201A1 (fr) * | 1999-12-30 | 2001-07-06 | Gelyma | Extrait d'algue a activite filtrante vis a vis des radiations ultraviolettes |
| JP2013127027A (ja) * | 2011-12-19 | 2013-06-27 | National Institute For Agro-Environmental Science | 植物生息微生物由来の紫外線吸収剤組成物 |
| US8834855B2 (en) | 2005-01-21 | 2014-09-16 | Promar As | Sunscreen compositions comprising carotenoids |
| JP5927593B2 (ja) * | 2014-05-13 | 2016-06-01 | 学校法人北里研究所 | 微生物を用いたマイコスポリン様アミノ酸を生産する方法 |
| JP2017519823A (ja) * | 2014-06-17 | 2017-07-20 | トップジェニックス, インク.Topgenix, Inc. | Ｕｖ保護用局所製剤 |
-
1992
- 1992-08-12 JP JP21530992A patent/JPH0662878A/ja active Pending
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2803201A1 (fr) * | 1999-12-30 | 2001-07-06 | Gelyma | Extrait d'algue a activite filtrante vis a vis des radiations ultraviolettes |
| US8834855B2 (en) | 2005-01-21 | 2014-09-16 | Promar As | Sunscreen compositions comprising carotenoids |
| JP2013127027A (ja) * | 2011-12-19 | 2013-06-27 | National Institute For Agro-Environmental Science | 植物生息微生物由来の紫外線吸収剤組成物 |
| JP5927593B2 (ja) * | 2014-05-13 | 2016-06-01 | 学校法人北里研究所 | 微生物を用いたマイコスポリン様アミノ酸を生産する方法 |
| KR20170002587A (ko) | 2014-05-13 | 2017-01-06 | 각코우호우징 기타사토켄큐쇼 | 미생물을 사용한 미코스포린 유사 아미노산을 생산하는 방법 |
| CN106574282A (zh) * | 2014-05-13 | 2017-04-19 | 学校法人北里研究所 | 使用微生物的生产类菌孢素氨基酸的方法 |
| EP3144392A4 (en) * | 2014-05-13 | 2018-02-21 | The Kitasato Institute | Method for producing mycosporine-like amino acid using microbes |
| US10307356B2 (en) | 2014-05-13 | 2019-06-04 | The Kitasato Institute | Method for producing mycosporine-like amino acid using microbes |
| CN106574282B (zh) * | 2014-05-13 | 2020-11-06 | 学校法人北里研究所 | 使用微生物的生产类菌孢素氨基酸的方法 |
| JP2017519823A (ja) * | 2014-06-17 | 2017-07-20 | トップジェニックス, インク.Topgenix, Inc. | Ｕｖ保護用局所製剤 |
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