JPH0797334A

JPH0797334A - 徐放性製剤

Info

Publication number: JPH0797334A
Application number: JP5306659A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Kamei; 茂亀井; Yasutaka Igari; 康孝猪狩; Tairyo Ogawa; 泰亮小川
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1992-12-07
Filing date: 1993-12-07
Publication date: 1995-04-11
Anticipated expiration: 2020-12-14
Also published as: ES2238247T3; WO1994013317A1; MX9307686A; NO310704B1; US5668111A; EP1088555A1; TW333456B; DK0601799T3; CA2110730C; KR20010016379A; FI116196B; US5480868A; PT1088555E; EP0601799B1; US20020173467A1; NO934423L; CN1099893C; NO934423D0; US5972891A; CN1096221A

Abstract

(57)【要約】【目的】長期間にわたって定常的な薬物の放出を示し、
また、薬物の放出期間を容易に制御できる徐放性製剤の
提供。【構成】一般式【化１】〔式中、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₄は芳香環基を、Ｒ₃はＤ-アミノ
酸残基等を、Ｒ₅は芳香環基等を、Ｒ₆は式-（ＣＨ₂）_n-
Ｒ₆'（式中、ｎ＝２等を、Ｒ₆'は置換されていてもよい
アミノ基を示す）で表される基を、Ｒ₇はＤ-アミノ酸残
基等を、Ｑは水素原子等を示す〕で表される生理活性ペ
プチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル基を有
する生体内分解性ポリマーとからなる徐放性製剤。【効果】本発明の徐放性製剤は、長期間にわたって定常
的な薬物の放出を示し、また、薬物の放出期間を容易に
制御できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、生理活性ペプチドを含
有する徐放性製剤およびその製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来の技術として、例えばＥＰ-Ａ-４８
１，７３２には、薬物とポリ乳酸およびグリコール酸／
ヒドロキシカルボン酸〔ＨＯＣＨ（Ｃ_2-8アルキル）Ｃ
ＯＯＨ〕共重合体からなる徐放性製剤が記載されてい
る。該製剤の製法として、生理活性ペプチドの水溶液を
内水相とし、生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液を油
相とするＷ／Ｏ型乳化物を水等に加え、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳
化物から徐放性マイクロカプセルを製造する方法（水中
乾燥法）等が記載されている。特開昭５７−１１８５１
２号公報には、ホルモン作用を有するポリペプタイド，
生物的に分解可能な重合体および重合体水解性調製剤か
らなるマイクロカプセルが記載されている。その製造法
としては、ポリペプチドの水溶液を内水相とし、ハロゲ
ン化有機溶剤溶液を油相とするＷ／Ｏ型乳化物にコアセ
ルベーション剤を加えてマイクロカプセルを製造する、
いわゆるコアセルベイション法が記載されている。特開
平１−１２１２２２号公報には、ポリラクチド，乳酸と
グリコール酸とのコポリマー，このようなポリマーの混
合物および水不溶性のペプチドからなる薬剤組成物の記
載がある。また、ポリラクチド，ポリグリコリド，乳酸
とグリコール酸とのコポリマー，もしくはそのようなポ
リマーの混合物の溶液中に水不溶性のペプチド塩を分散
させ、溶媒を乾燥除去し、生じた混合物を固体粒子に成
形する方法が記載されている。特開昭５７−１５０６０
９号公報には、ポリラクチドおよび酸に安定なポリペプ
チドを含有する製薬組成物の製造法が記載されて、例え
ばテトラガストリン塩酸塩とポリラクチドとを含水ジオ
キサンに溶かし、これをフイルムとして注出し、溶剤を
蒸発させる方法が開示されている。ＥＰ-Ａ-０４６７３
８９には、ポリマー沈殿法やマイクロスフィア法による
タンパク質またはポリペプチドのドラッグデリバリーシ
ステムの製造法が記載されている。しかし、具体的な製
剤としてＬＨ−ＲＨ誘導体を含む製剤の記載はない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】ＬＨ−ＲＨ（もしくは
ＧnＲＨ）として知られる黄体形成ホルモン放出ホルモ
ンは視床下部から放出され、下垂体のレセプターに結合
する。これによって放出されるＬＨ（黄体形成ホルモ
ン）とＦＳＨ（卵胞刺激ホルモン）は性腺に作動してス
テロイド性ホルモンを合成する。ＬＨ−ＲＨ誘導体には
作動作用を有するペプチドと拮抗作用を有するペプチド
の存在が知られている。作動作用を有するペプチドのう
ち、特に作用が強いものを連続投与することにより、利
用可能な受容体数が減少することによる性腺由来ステロ
イド性ホルモンの形成が抑制される。また、ＬＨ−ＲＨ
拮抗作用を有するペプチドの投与は雄性におけるテスト
ステロン，雌性におけるエストロジェンの形成を抑制す
る。従って、ＬＨ−ＲＨ誘導体は前立腺癌，良性前立腺
肥大，子宮内膜症，子宮筋腫，子宮線維腫，思春期早発
症，乳癌等のホルモン依存性疾患の治療薬および避妊薬
として期待されている。特に、第１世代あるいは第２世
代と称されるＬＨ−ＲＨ拮抗薬ではそのヒスタミン遊離
作用が問題であったが（月刊薬事、32巻、1599〜1605
頁、1990年）、その後数多くの化合物が合成され、ヒス
タミン遊離作用が問題とならないＬＨ−ＲＨ拮抗作用を
有するペプチド（例えば、米国特許第5110904号参照）
が出現してきている。このようなＬＨ−ＲＨ拮抗作用を
有するペプチドが薬効を発揮するには、常に競合的に生
体内のＬＨ−ＲＨの作用を阻害する必要性からこれらの
徐放性製剤が待望されている。しかも、少ないとはいえ
皆無ではないヒスタミン遊離作用のため、特に投与直後
における過剰量の薬物放出が抑制された徐放性製剤が求
められている。特に長期間（例えば１〜３カ月）型徐放
性製剤においては、安全でより確実な効果を得るため
に、より確実性の高い定常的なペプチドの放出が重要な
課題である。また、同時に製造時において生理活性ペプ
チド、特にＬＨ−ＲＨ拮抗作用を有するペプチドの取り
込み率（トラップ率）の高い徐放性製剤の製造法が求め
られている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、（１）一般式

【化１１】〔式中、Ｘはアシル基を、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₄は芳香環基
を、Ｒ₃はＤ-アミノ酸残基または式

【化１２】（式中、Ｒ₃'は複素環基を示す）で表される基を、Ｒ₅
は式 -（ＣＨ₂）_n-Ｒ₅'（式中、ｎ＝２または３を、
Ｒ₅'は置換されていてもよいアミノ基を示す）で表され
る基，芳香環基またはＯ−グリコシル基を、Ｒ₆は式-
（ＣＨ₂）_n-Ｒ₆'（式中、ｎ＝２または３を、Ｒ₆'は置
換されていてもよいアミノ基を示す）で表される基を、
Ｒ₇はＤ-アミノ酸残基またはアザグリシル基を、Ｑは水
素原子または低級アルキル基を示す〕で表される生理活
性ペプチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル基
を有する生体内分解性ポリマーとからなる徐放性製剤、
（２）Ｘが５または６員複素環カルボキサミド基で置換
されていてもよいＣ_2-7アルカノイル基である第１項記
載の徐放性製剤、（３）Ｘがテトラヒドロフリルカルボ
キサミド基で置換されていてもよいＣ_2-4アルカノイル
基である第２項記載の徐放性製剤、（４）Ｘがアセチル
である第１項記載の徐放性製剤、（５）生体内分解性ポ
リマーが（Ａ）グリコール酸と一般式

【化１３】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である第１項記載の徐放性製剤、
（６）Ｘがアセチルであり、生体内分解性ポリマーが
（Ａ）グリコール酸と一般式

【化１４】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である第１項記載の徐放性製剤、
（７）共重合体がＧＰＣ測定法で２，０００から５０，
０００の重量平均分子量を有する第５項記載の徐放性製
剤、（８）共重合体が１．２から４．０の分散度を有す
る第５項記載の徐放性製剤、（９）ポリ乳酸がＧＰＣ測
定法で１，５００から３０，０００の重量平均分子量を
有する第５項記載の徐放性製剤、（１０）ポリ乳酸が
１．２から４．０の分散度を有する第５項記載の徐放性
製剤、（１１）生体内分解性ポリマーが乳酸−グリコー
ル酸共重合体である第１項記載の徐放性製剤、（１２）
共重合体がＧＰＣ測定法で５，０００から２５，０００
の重量平均分子量を有する第１１項記載の徐放性製剤、
（１３）共重合体が１．２から４．０の分散度を有する
第１１項記載の徐放性製剤、（１４）生理活性ペプチド
の配合量が生体内分解性ポリマーに対して０．０１から
５０％（Ｗ／Ｗ）である第１項記載の徐放性製剤、（１
５）生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴニストであ
る第１項記載の徐放性製剤、（１６）生理活性ペプチド
が

【化１５】またはその酢酸塩である第１項記載の徐放性製剤、（１
７）生理活性ペプチドがNAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-N
MeTyr-DLys(Nic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂またはそ
の酢酸塩である第１項記載の徐放性製剤、（１８）生理
活性ペプチドがNAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-Tyr-DhArg
(Et₂)-Leu-hArg(Et₂)-Pro-DAlaNH₂またはその酢酸塩で
ある第１項記載の徐放性製剤、（１９）一般式

【化１６】〔式中、Ｘはアシル基を、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₄は芳香環基
を、Ｒ₃はＤ-アミノ酸残基または式

【化１７】（式中、Ｒ₃'は複素環基を示す）で表される基を、Ｒ₅
は式 -（ＣＨ₂）_n-Ｒ₅'（式中、ｎ＝２または３を、
Ｒ₅'は置換されていてもよいアミノ基を示す）で表され
る基，芳香環基またはＯ−グリコシル基を、Ｒ₆は式-
（ＣＨ₂）_n-Ｒ₆'（式中、ｎ＝２または３を、Ｒ₆'は置
換されていてもよいアミノ基を示す）で表される基を、
Ｒ₇はＤ-アミノ酸残基またはアザグリシル基を、Ｑは水
素原子または低級アルキル基を示す〕で表される生理活
性ペプチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル基
を有する生体内分解性ポリマーとを水と実質的に混和し
ない溶媒にいったん溶解し、ついで溶媒を除去すること
を特徴とする徐放性製剤の製造法、（２０）生体内分解
性ポリマーが（Ａ）グリコール酸と一般式

【化１８】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である第１９項記載の徐放性製剤の製
造法、（２１）Ｘがアセチルであり、生体内分解性ポリ
マーが（Ａ）グリコール酸と一般式

【化１９】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である第１９項記載の徐放性製剤の製
造法、（２２）生体内分解性ポリマーが乳酸−グリコー
ル酸共重合体である第１９項記載の徐放性製剤の製造
法、（２３）生体内分解性ポリマーと水に難溶性の生理
活性ペプチドとを、水と実質的に混和しない溶媒に溶解
し、得られる溶液を水相中に加えＯ／Ｗエマルションを
形成させる第１９項記載の徐放性製剤の製造法、（２
４）（Ａ）グリコール酸と一般式

【化２０】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸を混合した生体内分解性ポリマーと水に難溶性
の生理活性ペプチドまたはその塩とを、水と実質的に混
和しない溶媒にいったん溶解し、ついで溶媒を除去する
ことを特徴とする徐放性製剤の製造法、および（２５）
生体内分解性ポリマーと水に難溶性の生理活性ペプチド
またはその塩とを、水と実質的に混和しない溶媒に溶解
し、得られる溶液を水相中に加えＯ／Ｗエマルションを
形成させる第２４項記載の徐放性製剤の製造法に関す
る。

【０００５】本明細書中で使用される略号は次のような
意味を示す。 NAcD2Nal ：N-アセチル-D-3-(2-ナフチル)アラニル D4ClPhe ：D-3-(4-クロロフェニル)アラニル D3Pal ：D-3-(3-ピリジル)アラニル NMeTyr ：N-メチルチロシル DLys(Nic)：D-(イプシロン-N-ニコチノイル)リシル Lys(Nisp)：（イプシロン-N-イソプロピル）リシル DLys(AzaglyNic)：D-〔1-アザ-（N-ニコチノイル）グリ
シル〕リシル DLys(AzaglyFur)：D-〔1-アザ-（N-2-フロイル）グリシ
ル〕リシルその他のアミノ酸に関し、略号で表示する場合、 IUPAC
-IUB コミッション・オブ・バイオケミカル・ノーメン
クレーチュアー (Commission on BiochemicalNomenclat
ure) （ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・バイオケミ
ストリー (European Journal of Biochemistry) 第138
巻、９〜37頁、1984年）による略号あるいは該当分野に
おける慣用略号に基づくものとし、また、光学異性体が
ありうる場合は、特に明示しなければＬ体を示すものと
する。

【０００６】本発明において、ペプチド〔Ｉ〕は、ＬＨ
−ＲＨ拮抗作用を有し、前立腺癌，前立腺肥大症，子宮
内膜症，子宮筋腫，子宮線維腫，思春期早発症，乳癌等
のホルモン依存性疾患の疾病の治療および避妊に有効で
ある。

【０００７】一般式〔Ｉ〕中、Ｘで示されるアシル基
は、好ましくはカルボン酸から誘導されるアシル基であ
る。該アシル基としては、例えばそれぞれ置換されてい
てもよいＣ_2-7アルカノイル，Ｃ_7-15シクロアルケノイ
ル（例，シクロヘキセノイル等），Ｃ_1-6アルキルカル
バモイル（例，エチルカルバモイル等），５または６員
複素環カルボニル（例，ピペリジノカルボニル等）およ
びカルバモイル基等が挙げられる。アシル基は、好まし
くは置換されていてもよいＣ_2-7アルカノイル基（例，
アセチル，プロピオニル，ブチリル，イソブチリル，ペ
ンタノイル，ヘキサノイルまたはヘプタノイル等）、さ
らに好ましくは置換されていてもよいＣ_2-4アルカノイ
ル基（例，アセチル，プロピオニル，ブチリル，イソブ
チリル等）である。置換基としては、例えばＣ_1-6アル
キルアミノ基（例、メチルアミノ，エチルアミノ，ジエ
チルアミノ，プロピルアミノ等），Ｃ_1-3アルカノイル
アミノ基（例、ホルミルアミノ，アセチルアミノ，プロ
ピオニルアミノ等），Ｃ_7-15シクロアルケノイルアミノ
基（例，シクロヘキセノイルアミノ等），Ｃ_7-15アリル
カルボニルアミノ基（例，ベンゾイルアミノ等），５ま
たは６員複素環カルボキサミド基（例，テトラヒドロフ
リルカルボキサミド，ピリジルカルボキサミド，フリル
カルボキサミド等），水酸基，カルバモイル基，ホルミ
ル基，カルボキシル基，５または６員複素環基（例、ピ
リジル，モルホリノ等）等が挙げられる。該置換基は、
好ましくは５または６員複素環カルボキサミド基（例，
テトラヒドロフリルカルボキサミド，ピリジルカルボキ
サミド，フリルカルボキサミド等）等である。Ｘは、好
ましくは５または６員複素環カルボキサミド基で置換さ
れていてもよいＣ_2-7アルカノイル基である。Ｘは、さ
らに好ましくはテトラヒドロフリルカルボキサミド基で
置換されていてもよいＣ_2-4アルカノイル基である。Ｘ
の具体例を挙げれば、アセチル，

【化２１】等である。

【０００８】Ｒ₁，Ｒ₂またはＲ₄で示される芳香環基と
しては、例えば炭素数６〜１２の芳香環基が挙げられ
る。このような芳香環基としては、例えばフェニル，ナ
フチル，アントリルなどが挙げられる。好ましくは、炭
素数６〜１０の芳香環基、例えばフェニル，ナフチルな
どが挙げられる。これらの芳香環基は、芳香環基上の適
当な位置に１ないし５個、好ましくは、１ないし３個の
適当な置換基を有していてもよい。該置換基としては、
例えば水酸基，ハロゲン，アミノトリアゾリルで置換さ
れたアミノ基，アルコキシ基などが挙げられる。好まし
くは、例えば水酸基，ハロゲン，アミノトリアゾリルで
置換されたアミノ基などが挙げられる。ここにおいて、
ハロゲンとしては、例えばフッ素，塩素，臭素，ヨウ素
等が挙げられる。アミノトリアゾリルで置換されたアミ
ノ基におけるアミノトリアゾリル基としては、例えば３
-アミノ-１Ｈ-１,２,４-トリアゾール-５-イル，５-ア
ミノ-１Ｈ-１,３,４-トリアゾール-２-イル，５-アミノ
-１Ｈ-１,２,４-トリアゾール-３-イル，３-アミノ-２
Ｈ-１,２,４-トリアゾール-５-イル，４-アミノ-１Ｈ-
１,２,３-トリアゾール-５-イル，４-アミノ-２Ｈ-１,
２,３-トリアゾール-５-イルなどが挙げられる。アルコ
キシ基としては、好ましくは炭素数１〜６のアルコキシ
基（例、メトキシ，エトキシ，プロポキシ，イソプロポ
キシ，ブトキシ，イソブトキシなど）が挙げられる。Ｒ
₁は、さらに好ましくはナフチル基またはハロゲノフェ
ニル基である。Ｒ₂は、さらに好ましくはハロゲノフェ
ニルである。Ｒ₄は、さらに好ましくはヒドロキシフェ
ニル基またはアミノトリアゾリルアミノで置換されたフ
ェニル基である。

【０００９】Ｒ₃で示されるＤ-アミノ酸残基としては、
炭素数３〜１２のα-Ｄ-アミノ酸残基が好ましい。該ア
ミノ酸としては、例えばロイシン，イソロイシン，ノル
ロイシン，バリン，ノルバリン，２−アミノ酪酸，フェ
ニルアラニン，セリン、トレオニン，メチオニン，アラ
ニン，トリプトファン，アミノイソ酪酸などが挙げられ
る。これらのアミノ酸は適宜保護基（例、ｔ-ブチル、
ｔ-ブトキシ、ｔ-ブトキシカルボニルなどの当技術分野
で慣用される保護基）を有していてもよい。

【００１０】Ｒ₃'で示される複素環基としては、窒素原
子または硫黄原子のヘテロ原子を１〜２個を含み、ベン
ゼン環と縮合していてもよい５または６員の複素環基が
挙げられる。具体例としては、例えばチエニル，ピロリ
ル，チアゾリル，イソチアゾリル，イミダゾリル，ピラ
ゾリル，ピリジル，３-ピリジル，ピリダジニル，ピリ
ミジニル，ピラジニル，３-ベンゾ〔ｂ〕チエニル，３-
ベンゾ〔ｂ〕-３-チエニル，インドリル，２-インドリ
ル，イソインドリル，１Ｈ-インダゾリル，ベンゾイミ
ダゾリル，ベンゾチアゾリル，キノリル，イソキノリル
などが挙げられる。Ｒ₃'は、特に好ましくはピリジルま
たは３-ベンゾ〔ｂ〕チエニルである。

【００１１】Ｒ₅で示される芳香環基としては、上記
Ｒ₁，Ｒ₂またはＲ₄で定義した芳香環基と同様のものが
用いられる。該芳香環基は、芳香環基上の適当な位置に
１ないし５個、好ましくは、１ないし３個の適当な置換
基を有していてもよい。このような置換基としては、上
記Ｒ₁，Ｒ₂またはＲ₄で定義した置換基と同様のものが
用いられる。このうち特に好ましくは、アミノトリアゾ
リルで置換されたアミノ基である。Ｒ₅で示されるＯ−
グリコシル基におけるグリコシル基としては、好ましく
は、６単糖類およびその誘導体の基が挙げられる。該６
単糖類としては、例えばＤ−グルコース，Ｄ−フルクト
ース，Ｄ−マンノース，Ｄ−ガラクトース，Ｌ−ガラク
トースなどが挙げられる。また、誘導体としては、例え
ばデオキシ糖（Ｌ−およびＤ−フコース，Ｄ−キノボー
ス，Ｌ−ラムノースなど），アミノ糖（Ｄ−グルコサミ
ン，Ｄ−ガラクトサミンなど）が挙げられる。さらに好
ましくは、デオキシ糖（Ｌ−およびＤ−フコース，Ｄ−
キノボース，Ｌ−ラムノースなど）である。特に好まし
くはＬ−ラムノースである。

【００１２】Ｒ₅'で示される置換されていてもよいアミ
ノ基における置換基としては、例えばアシル基，カルバ
モイル基，アシル基で置換されていてもよいカルバゾイ
ル基またはアルキルでモノもしくはジ置換されていても
よいアミジノ基などが挙げられる。上記アシル基および
アシル基で置換されていてもよいカルバゾイル基におけ
るアシル基としては、例えばニコチノイル，フロイル，
テノイルなどが挙げられる。モノもしくはジアルキルア
ミジノ基におけるアルキル基としては、炭素数１から４
の直鎖もしくは分枝状のアルキル基が用いられる。該ア
ルキル基としては、例えばメチル、エチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert
-ブチルなどが挙げられる。特に好ましくはメチル基ま
たはエチル基が挙げられる。

【００１３】Ｒ₆'で示される置換されていてもよいアミ
ノ基における置換基としては、例えばアルキル基、アル
キルでモノもしくはジ置換されていてもよいアミジノ基
などが挙げられる。上記アルキル基およびモノもしくは
ジアルキルアミジノ基におけるアルキル基としては、上
記Ｒ₅'で定義したアルキル基と同様のものが用いられ
る。Ｒ₇で示されるＤ-アミノ酸残基としては、炭素数３
〜９のＤ-アミノ酸残基が好ましく、例えばＤ-アラニ
ル，Ｄ-ロイシル，Ｄ-バリル，Ｄ-イソロイシル，Ｄ-フ
ェニルアラニルなどが挙げられる。さらに好ましくは炭
素数３〜６のＤ-アミノ酸残基、例えばＤ-アラニル，Ｄ
-バリルなどが挙げられる。特に好ましくは、Ｒ₇は、Ｄ
-アラニルである。Ｑで示される低級アルキル基として
は、上記Ｒ₅'で定義したアルキル基と同様のものが用い
られる。Ｑは、特に好ましくはメチル基である。

【００１４】Ｒ₁の具体例を挙げれば、

【化２２】Ｒ₂の具体例を挙げれば、

【化２３】

【００１５】Ｒ₃の具体例を挙げれば、

【化２４】Ｒ₄の具体例を挙げれば、

【化２５】

【００１６】Ｒ₅の具体例を挙げれば、

【化２６】

【化２７】

【化２８】

【００１７】Ｒ₆の具体例を挙げれば、

【化２９】Ｒ₇の具体例を挙げれば、

【化３０】

【００１８】ペプチド〔Ｉ〕が１種以上の不斉炭素原子
を有する場合、２種以上の光学異性体が存在する。この
ような光学異性体およびこれらの混合物も本発明に含ま
れる。一般式〔Ｉ〕で表されるペプチドは、自体公知の
方法により製造できる。該ペプチドの製造法の具体例
は、例えば米国特許第５１１０９０４号などに記載され
ている。ペプチド〔Ｉ〕は塩として用いてもよく、好ま
しくは、薬理学的に許容される塩が用いられる。このよ
うな塩としては、該ペプチドがアミノ基などの塩基性基
を有する場合、無機酸（例、塩酸，硫酸，硝酸など），
有機酸（例、炭酸，重炭酸，コハク酸，酢酸，プロピオ
ン酸，トリフルオロ酢酸など）などとの塩が挙げられ、
ペプチドがカルボキシル基等の酸性基を有する場合、無
機塩基（例、ナトリウム，カリウム等のアルカリ金属、
カルシウム，マグネシウム等のアルカリ土類金属など）
や有機塩基（例、トリエチルアミン等の有機アミン類、
アルギニン等の塩基性アミノ酸類など）などとの塩が挙
げられる。また、該ペプチドは、金属錯体化合物（例、
銅錯体，亜鉛錯体等）を形成していてもよい。ペプチド
〔Ｉ〕の塩は、好ましくは有機酸（例、炭酸，重炭酸，
コハク酸，酢酸，プロピオン酸，トリフルオロ酢酸な
ど）との塩である。特に好ましくは酢酸との塩である。

【００１９】ペプチド〔Ｉ〕またはその塩の特に好まし
い例を以下に示す。（１）NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(Nic)-
Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂またはその酢酸塩（２）NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(Azagl
yNic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂またはその酢酸塩（３）NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(Azagl
yFur)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂またはその酢酸塩

【化３１】（５）NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-Tyr-DhArg(Et₂)-Le
u-hArg(Et₂)-Pro-DAlaNH₂またはその酢酸塩

【００２０】徐放性製剤において、ペプチド〔Ｉ〕の配
合量は、該ペプチドの種類、所望の薬理効果および効果
の持続期間などによって異なるが、基剤の生体内分解性
ポリマーに対して約０．０１から約５０％（ｗ/ｗ）用
いられる。好ましくは、約０．１から約４０％（ｗ/
ｗ）用いられる。特に好ましくは、約１から約３０％
（ｗ/ｗ）用いられる。

【００２１】以下に、末端に遊離のカルボキシル基を有
する生体内分解性ポリマーについて述べる。約１〜３ｇ
の生体内分解性ポリマーを、アセトン（２５ml）とメタ
ノール（５ml）の混合溶媒に溶解し、フェノールフタレ
インを指示薬としてこの溶液中のカルボキシル基を室温
（２０℃）での撹拌下０．０５Ｎアルコール性水酸化カ
リウム溶液で速やかに滴定して、末端基定量による数平
均分子量を次式で算出した。末端基定量による数平均分子量＝２００００×Ａ／ＢＡ：生体内分解性ポリマーの質量（ｇ）Ｂ：滴定終点までに添加した０．０５Ｎアルコール性水
酸化カリウム溶液の量（ml）以下、これを末端基定量による数平均分子量と表記す
る。例えば、１種類以上のα−ヒドロキシ酸類から無触
媒脱水重縮合法で合成され、末端に遊離のカルボキシル
基を有する重合体では、ＧＰＣ測定による数平均分子量
と末端定量による数平均分子量とがほぼ一致する。これ
に対し、環状二量体から触媒を用いて開環重合法で合成
され、末端に遊離のカルボキシル基を実質的には有しな
い重合体では、末端基定量による数平均分子量がＧＰＣ
測定による数平均分子量を大きく上回る。この相違によ
って、末端に遊離のカルボキシル基を有する重合体は、
末端に遊離のカルボキシル基を有しない重合体と明確に
区別することができる。末端に遊離のカルボキシル基を
有する生体内分解性ポリマーとは、ここにおいてＧＰＣ
測定による数平均分子量と末端基定量による数平均分子
量とがほぼ一致する生体内分解性重合体を意味する。

【００２２】末端基定量による数平均分子量が絶対値で
あるのに対してＧＰＣ測定による数平均分子量は各種分
析・解析条件（例えば移動相の種類，カラムの種類，基
準物質，スライス幅の選択，ベースラインの選択等）に
よって変動する相対値である。そのため、両者の一義的
な数値による関連づけは困難であるが、例えばＧＰＣ測
定による数平均分子量と末端基定量による数平均分子量
とがほぼ一致するとは、末端基定量による数平均分子量
がＧＰＣ測定による数平均分子量の約０．４倍から約２
倍、好ましくは約０．５倍から約２倍、さらに好ましく
は約０．８倍から約１．５倍の範囲であることをいう。
また、末端基定量による数平均分子量がＧＰＣ測定によ
る数平均分子量を大きく上回るとは、末端基定量による
数平均分子量がＧＰＣ測定による数平均分子量の約２倍
以上であることをいう。本発明において、ＧＰＣ測定に
よる数平均分子量と末端基定量による数平均分子量とが
ほぼ一致する重合体が好ましい。

【００２３】末端に遊離のカルボキシル基を有する生体
内分解性ポリマーの具体例としては、例えばα−ヒドロ
キシ酸類（例、グリコール酸，乳酸，ヒドロキシ酪酸
等），ヒドロキシジカルボン酸類（例、リンゴ酸等），
ヒドロキシトリカルボン酸（例、クエン酸等）等の１種
以上から無触媒脱水重縮合で合成された重合体、共重合
体、あるいはこれらの混合物、ポリ−α−シアノアクリ
ル酸エステル、ポリアミノ酸（例、ポリ−γ−ベンジル
−Ｌ−グルタミン酸等）、無水マレイン酸系共重合体
（例、スチレン−マレイン酸共重合体等）等が挙げられ
る。重合の形式は、ランダム、ブロック、グラフトのい
ずれでもよい。また、上記したα−ヒドロキシ酸類，ヒ
ドロキシジカルボン酸類，ヒドロキシトリカルボン酸類
が分子内に光学活性中心を有する場合、Ｄ−，Ｌ−，Ｄ
Ｌ−体のいずれも用いることができる。

【００２４】末端に遊離のカルボキシル基を有する生体
内分解性ポリマーは、好ましくは（Ａ）グリコール酸と
一般式

【化３２】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸を混合した生体内分解性ポリマーまたは乳酸と
グリコール酸との共重合体である。一般式〔II〕中、Ｒ
で示される炭素数２から８の直鎖もしくは分枝状のアル
キル基としては、例えばエチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、
ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、tert-ペンチ
ル、1-エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、1,1-
ジメチルブチル、2,2-ジメチルブチル、3,3-ジメチルブ
チル、2-エチルブチルなどが挙げられる。好ましくは、
炭素数２から５の直鎖もしくは分枝状のアルキル基が用
いられる。具体例としては、例えばエチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、イソブチルなどが挙げられる。
特に好ましくは、Ｒはエチルである。

【００２５】一般式〔II〕で示されるヒドロキシカルボ
ン酸としては、例えば2-ヒドロキシ酪酸、2-ヒドロキシ
吉草酸、2-ヒドロキシ-3-メチル酪酸、2-ヒドロキシカ
プロン酸、2-ヒドロキシイソカプロン酸、2-ヒドロキシ
カプリン酸などが挙げられる。このうち特に、2-ヒドロ
キシ酪酸、2-ヒドロキシ吉草酸、2-ヒドロキシ-3-メチ
ル酪酸、2-ヒドロキシカプロン酸が好ましい。一般式
〔Ｉ〕で示されるヒドロキシカルボン酸は、特に好まし
くは2-ヒドロキシ酪酸である。これらのヒドロキシカル
ボン酸はＤ-体、Ｌ-体およびＤ,Ｌ-体の何れでもよい
が、Ｄ-体／Ｌ-体（モル％）が約75/25ないし約25/75の
範囲のものが好ましい。さらに好ましくは、Ｄ-体／Ｌ-
体（モル％）が約60/40ないし約40/60の範囲のヒドロキ
シカルボン酸である。特に好ましくは、Ｄ-体／Ｌ-体
（モル％）が約55/45ないし約45/55の範囲のヒドロキシ
カルボン酸である。

【００２６】グリコール酸と一般式〔II〕で示されるヒ
ドロキシカルボン酸との共重合体（以下、グリコール酸
共重合体と略称する）において、共重合の形式は、ラン
ダム，ブロック，グラフトの何れでもよい。好ましく
は、ランダム共重合体である。一般式〔II〕で示される
ヒドロキシカルボン酸は、１種または２種以上適宜の割
合で用いてもよい。上記（Ａ）のグリコール酸共重合体
におけるグリコール酸と一般式〔II〕で示されるヒドロ
キシカルボン酸との組成比は、グリコール酸が約１０な
いし約７５モル％、残りがヒドロキシカルボン酸である
場合が好ましい。さらに好ましくは、グリコール酸が約
２０ないし約７５モル％、残りがヒドロキシカルボン酸
である場合である。特に好ましくは、グリコール酸が約
４０〜約７０モル％、残りがヒドロキシカルボン酸であ
る場合である。これらグリコール酸共重合体は、重量平
均分子量が約２，０００から約５０，０００のものが用
いられる。好ましくは、重量平均分子量が約３，０００
から約４０，０００の共重合体である。さらに好ましく
は、重量平均分子量が約８，０００から約３０，０００
の共重合体である。また、これらのグリコール酸共重合
体の分散度（重量平均分子量／数平均分子量）は約１．
２から約４．０が好ましい。特に好ましくは、分散度が
約１．５から約３．５の共重合体である。上記（Ａ）の
グリコール酸共重合体は、公知の製造法、例えば、特開
昭６１−２８５２１号公報に記載の方法に従って合成で
きる。

【００２７】ポリ乳酸としては、Ｌ-体、Ｄ-体およびこ
れらの混合物の何れでもよいが、Ｄ-体／Ｌ-体（モル
％）が約75/25ないし約20/80の範囲のものが好ましい。
さらに好ましくは、Ｄ-体／Ｌ-体（モル％）が約60/40
ないし約25/75の範囲のポリ乳酸である。特に好ましく
は、Ｄ-体／Ｌ-体（モル％）が約55/45ないし約25/75の
範囲のポリ乳酸である。該ポリ乳酸は、重量平均分子量
が約１，５００から約３０，０００の範囲のものが好ま
しい。さらに好ましくは、重量平均分子量が約２，００
０から約２０，０００の範囲のポリ乳酸である。特に好
ましくは、重量平均分子量が約３，０００から約１５，
０００の範囲のポリ乳酸である。また、ポリ乳酸の分散
度は約１．２から約４．０が好ましい。特に好ましく
は、分散度が約１．５から約３．５の場合である。ポリ
乳酸の合成法については、乳酸の二量体であるラクチッ
ドを開環重合する方法と乳酸を脱水重縮合する方法が知
られている。本発明で使用する比較的低分子量のポリ乳
酸を得るためには、乳酸を直接脱水重縮合する方法が好
ましい。該方法は、例えば特開昭６１−２８５２１号公
報に記載されている。

【００２８】本発明の製剤基剤におけるグリコール酸共
重合体（Ａ）とポリ乳酸（Ｂ）は、例えば（Ａ）／
（Ｂ）で表わされる混合比（重量％）が約10/90ないし
約90/10の範囲で使用される。好ましくは、混合比（重
量％）が約20/80ないし約80/20の範囲である。さらに好
ましくは、約30/70ないし約70/30の範囲である。
（Ａ），（Ｂ）のうち何れかの成分が多すぎると（Ａ）
もしくは（Ｂ）成分を単独で使用した場合とほとんど同
じ薬物放出パターンを有する製剤しか得られず、混合基
剤による放出後期の直線的な放出パターンが期待できな
い。グリコール酸共重合体およびポリ乳酸の分解・消失
速度は分子量あるいは組成によって大きく変化するが、
一般的にはグリコール酸共重合体の分解・消失速度の方
が速いため、混合するポリ乳酸の分子量を大きくする、
あるいは（Ａ）／（Ｂ）で表わされる混合比を小さくす
ることによって放出期間を長くすることができる。逆
に、混合するポリ乳酸の分子量を小さくする、あるいは
（Ａ）／（Ｂ）で表わされる混合比を大きくすることに
よって放出期間を短くすることもできる。さらに、一般
式〔II〕で示されるヒドロキシカルボン酸の種類や割合
を変化させることにより、放出期間を調節することもで
きる。

【００２９】生体内分解性ポリマーとして乳酸−グリコ
ール酸共重合体を用いる場合、その組成比（乳酸／グリ
コール酸）（モル％）は約100/0ないし約40/60が好まし
い。さらに好ましくは、組成比が約90/10ないし約50/50
の場合である。上記乳酸−グリコール酸共重合体の重量
平均分子量は約５，０００から約２５，０００が好まし
い。さらに好ましくは、約７，０００から約２０，００
０である。また、乳酸−グリコール酸共重合体の分散度
（重量平均分子量／数平均分子量）は約１．２から約
４．０が好ましい。さらに好ましくは、約１．５から約
３．５である。上記乳酸−グリコール酸共重合体は、公
知の製造法、例えば、特開昭６１−２８５２１号公報に
記載の方法に従って合成できる。

【００３０】乳酸−グリコール酸共重合体の分解・消失
速度は組成あるいは分子量によって大きく変化するが、
一般的にはグリコール酸分率が低いほど分解・消失が遅
いため、グリコール酸分率を低くするかあるいは分子量
を大きくすることによって放出期間を長くすることがで
きる。逆に、グリコール酸分率を高くするかあるいは分
子量を小さくすることによって放出期間を短くすること
もできる。長期間（例えば１〜４カ月）型徐放性製剤と
するには、上記の組成比および重量平均分子量の範囲の
乳酸−グリコール酸共重合体が好ましい。上記の組成比
および重量平均分子量の範囲の乳酸−グリコール酸共重
合体よりも分解が早い乳酸−グリコール酸共重合体を選
択すると初期バーストの抑制が困難であり、逆に上記の
組成比および重量平均分子量の範囲の乳酸−グリコール
酸共重合体よりも分解が遅い乳酸−グリコール酸共重合
体を選択すると有効量の薬物が放出されない期間を生じ
やすい。

【００３１】本明細書での重量平均分子量および分散度
とは、重量平均分子量が120,000、52,000、22,000、9,2
00、5,050、2,950、1,050、580、162の９種類のポリス
チレンを基準物質としてゲルパーミエーションクロマト
グラフィー（ＧＰＣ）で測定したポリスチレン換算の分
子量および算出した分散度をいう。測定は、ＧＰＣカラ
ムＫＦ８０４Ｌｘ２（昭和電工製）、ＲI モニターＬ−
３３００（日立製作所製）を使用、移動相としてクロロ
ホルムを用いた。

【００３２】本発明の徐放性製剤は、ペプチド〔Ｉ〕と
末端に遊離のカルボキシル基を有する生体内分解性ポリ
マーとを、水と実質的に混和しない溶媒にいったん溶解
し、ついで溶媒を除去することにより製造される。水と
実質的に混和しない溶媒は、水に実質的に混和せず、生
体内分解性ポリマーを溶解し、得られるポリマー溶液が
さらにペプチド〔Ｉ〕を溶解するものであればよい。好
ましくは、水に対する溶解度が常温（２０℃）で３％
（Ｗ／Ｗ）以下である溶媒である。また該溶媒の沸点は
１２０℃以下であることが好ましい。該溶媒としては、
例えばハロゲン化炭化水素（例、ジクロロメタン，クロ
ロホルム，クロロエタン，トリクロロエタン，四塩化炭
素など）、炭素数３以上のアルキルエーテル類（例、イ
ソプロピルエーテルなど）、脂肪酸のアルキル（炭素数
４以上）エステル（例、酢酸ブチルなど）、芳香族炭化
水素（例、ベンゼン，トルエン，キシレンなど）等が挙
げられる。これらは２種以上適宜の割合で混合して用い
てもよい。溶媒として、さらに好ましくはハロゲン化炭
化水素（例、ジクロロメタン，クロロホルム，クロロエ
タン，トリクロロエタン，四塩化炭素など）である。特
に好ましくはジクロロメタンである。

【００３３】溶媒を除去する方法は、自体公知の方法に
従って行うことができる。例えばプロペラ型撹拌機ある
いはマグネチックスターラーなどで撹拌しながら常圧も
しくは徐々に減圧にして溶媒を蒸発させる方法、ロータ
リーエバポレーターなどを用いて真空度を調節しながら
溶媒を蒸発させる方法などが挙げられる。

【００３４】本発明の徐放性製剤の製造法において、ペ
プチド〔Ｉ〕と末端に遊離のカルボキシル基を有する生
体内分解性ポリマーとを、水と実質的に混和しない溶媒
に溶解するとは、得られる溶液中において、常温（２０
℃）で目視観察する際に不溶のペプチドが認められない
状態を示す。このペプチド〔Ｉ〕，生体内分解性ポリマ
ー，溶媒の三者の組み合わせにおいて、ペプチドの溶解
量は生体内分解性ポリマーの単位重量あたりの末端の遊
離カルボキシル基数に依存する。ペプチドと末端遊離カ
ルボキシル基が１：１で相互作用するならば、末端遊離
カルボキシル基のモル数と当モルのペプチドが理論的に
溶解される。したがって、ペプチド，生体内分解性ポリ
マーの分子量および溶媒の組み合わせにより一概には言
えないが、徐放性製剤を製造する際、溶媒に溶解した生
体内分解性ポリマーに対して、ペプチドを約０．１ない
し約１００％（ｗ/ｗ），好ましくは約１ないし約７０
％（ｗ/ｗ），特に好ましくは約２ないし約５０％（ｗ/
ｗ）溶解する。

【００３５】本発明は、さらに（Ａ）グリコール酸と一
般式

【化３３】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸を混合した生体内分解性ポリマーと水に難溶性
の生理活性ペプチドまたはその塩とを、水と実質的に混
和しない溶媒にいったん溶解し、ついで溶媒を除去する
ことを特徴とする徐放性製剤の製造法に関する。水に難
溶性の生理活性ペプチドとしては天然物、合成物、半合
成物を含めて特に限定されないが、例えば、側鎖に芳香
属性基（例、ベンゼン、ナフタレン、フェナントレン、
アントラセン、ピリジン、ピロール、インドール等から
誘導される基）を１個以上有する生理活性ペプチドが好
ましい。さらに好ましくは、側鎖に芳香属性基を２個以
上有する生理活性ペプチドである。特に好ましくは、側
鎖に芳香属性基を３個以上有する生理活性ペプチドであ
る。なお、これらの芳香族基は置換基を有していてもよ
い。本発明で用いられる水に難溶性の生理活性ペプチド
は、水に対する溶解度が１％以下で、かつ２個以上のア
ミノ酸によって構成され、分子量約２００ないし３０，
０００のものが好ましい。さらに好ましくは、分子量が
約３００ないし２０，０００のペプチドである。特に好
ましくは、分子量約５００ないし１０，０００のペプチ
ドである。

【００３６】該生理活性ペプチドとしては、黄体形成ホ
ルモン放出ホルモン (LH-RH)拮抗物質（米国特許第4,08
6,219号、同第4,124,577号、同第4,253,997号、同第4,3
17,815号等参照），インスリン、ソマトスタチン、ソマ
トスタチン誘導体（米国特許第4,087,390号、同第4,09
3,574号、同第4,100,117号、同第4,253,998号参照）、
成長ホルモン、プロラクチン、副腎皮質刺激ホルモン
(ACTH)、メラノサイト刺激ホルモン (MSH)、甲状腺ホル
モン放出ホルモンの塩およびその誘導体（特開昭50-121
273号、特開昭52-116465号公報参照）、甲状腺刺激ホル
モン (TSH)、黄体形成ホルモン (LH)、卵胞刺激ホルモ
ン (FSH)、バソプレシン、バソプレシン誘導体、オキシ
トシン、カルシトニン、ガストリン、セクレチン、パン
クレオザイミン、コレシストキニン、アンジオテンシ
ン、ヒト胎盤ラクトーゲン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン
(HCG)、エンケファリン、エンケファリン誘導体（米国
特許第4,277,394号、ヨーロッパ特許出願公開第31567号
公報参照）、エンドルフィン、キョウトルフィン、タフ
トシン、サイモポイエチン、サイモシン、サイモスチム
リン、胸腺液性因子 (THF)、血中胸腺因子 (FTS) およ
びその誘導体（米国特許第4,229,438号参照）、および
その他の胸腺因子、腫瘍壊死因子 (TNF)、コロニー誘発
因子 (CSF)、モチリン、デイノルフィン、ボムベシン、
ニューロテンシン、セルレイン、ブラジキニン、心房性
ナトリウム排泄増加因子、神経成長因子、細胞増殖因
子、神経栄養因子、エンドセリン拮抗作用を有するペプ
チド類（ヨーロッパ特許公開第436189号、同第457195
号、同496452号、特開平3-94692号、同3-130299号公報
参照）など、さらにはこれらの生理活性ペプチドのフラ
グメントまたはそれらの誘導体などが挙げられる。

【００３７】該生理活性ペプチドの具体例としては、黄
体形成ホルモン放出ホルモン (LH-RH) の拮抗薬であっ
て、前立腺癌、前立腺肥大症、子宮内膜症、子宮筋腫、
思春期早発症、乳癌等のホルモン依存性の疾病および避
妊に有効な生理活性ペプチドおよびその塩が挙げられ
る。本発明で用いられる生理活性ペプチドは塩として用
いてもよく、好ましくは薬理学的に許容される塩が用い
られる。このような塩としては、該ペプチドがアミノ基
などの塩基性基を有する場合、無機酸（例、塩酸，硫
酸，硝酸など），有機酸（例、炭酸，重炭酸，コハク
酸，酢酸，プロピオン酸，トリフルオロ酢酸など）など
との塩が挙げられる。ペプチドがカルボキシル基等の酸
性基を有する場合、無機塩基（例、ナトリウム，カリウ
ム等のアルカリ金属、カルシウム，マグネシウム等のア
ルカリ土類金属など）や有機塩基（例、トリエチルアミ
ン等の有機アミン類、アルギニン等の塩基性アミノ酸類
など）などとの塩が挙げられる。また、該ペプチドは、
金属錯体化合物（例、銅錯体，亜鉛錯体等）を形成して
いてもよい。生理活性ペプチドまたはその塩の具体例
は、例えば米国特許第5110904号、ジャーナル・オブ・
メディシナル・ケミストリー (Journal of Medicinal C
hemistry)第34巻 2395 〜 2402 頁（1991年）、リーセ
ント・リザルツ・イン・キャンサー・リサーチ（Recent
Results in Cancer Research）第124巻 113 〜 136 頁
（1992年）などに記載されている。

【００３８】さらに具体的には、例えば一般式〔Ｉ〕で
示される生理活性ペプチドおよびその塩が挙げられる。
また、生理活性ペプチド自体が水溶性であっても、誘導
体または水不溶性の酸（パモイン酸，タンニン酸，ステ
アリン酸，パルミチン酸など）との塩とすることにより
水に難溶性のペプチドとし、本発明の製造法に用いるこ
とができる。上記生理活性ペプチドの配合量は、ペプチ
ドの種類、所望の薬理効果および効果の持続期間などに
よって異なるが、基剤の生体内分解性ポリマーに対して
約０．００１ないし約５０％(w/w)用いられる。好まし
くは、約０．０１ないし４０％(w/w)用いられる。特に
好ましくは、約０．１ないし３０％(w/w)用いられる。

【００３９】水と実質的に混和しない溶媒は、前記と同
様の溶媒が用いられる。溶媒の除去は前記と同様にして
行われる。

【００４０】本発明の徐放性製剤の好ましい製造法は、
例えば以下のような水中乾燥法あるいは相分離法によっ
てマイクロカプセル化する方法またはこれに準ずる方法
である。以下に示す製造法は、ペプチド〔Ｉ〕またはペ
プチド〔Ｉ〕を含む水に難溶性の生理活性ペプチドを用
いて行われる。ペプチド〔Ｉ〕を上記の生理活性ペプチ
ドの配合量の定義で示した重量比率になるように生体内
分解性ポリマーの有機溶媒溶液に加え、ペプチド〔Ｉ〕
と生体内分解性ポリマーとの有機溶媒溶液を作る。この
際、生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液中の濃度は生
体内分解性ポリマーの分子量，有機溶媒の種類によって
異なるが、一般的には約０．０１ないし約８０％(w/w)
から選ばれる。さらに好ましくは約０．１ないし約７０
％(w/w)である。特に好ましくは約１ないし約６０％(w/
w)である。

【００４１】次いで、このペプチド〔Ｉ〕と生体内分解
性ポリマーとの有機溶媒溶液（油相）を水相中に加え、
Ｏ（油相）／Ｗ（水相）エマルションを形成させた後、
油相中の溶媒を蒸発させ、マイクロカプセルを調製す
る。この際の水相体積は一般的には油相体積の約１倍な
いし約１０，０００倍から選ばれる。さらに好ましく
は、約２倍ないし約５，０００倍から選ばれる。特に好
ましくは、約５倍〜約２，０００倍から選ばれる。上記
外水相中に乳化剤を加えてもよい。該乳化剤は、一般に
安定なＯ／Ｗエマルションを形成できるものであればい
ずれでもよい。具体的には、例えばアニオン性界面活性
剤（オレイン酸ナトリウム，ステアリン酸ナトリウム，
ラウリル硫酸ナトリウムなど）、非イオン性界面活性剤
（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル〔ツイ
ーン（Tween）８０，ツイーン（Tween）６０，アトラス
パウダー社〕，ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体〔HC
O-60，HCO-50，日光ケミカルズ〕など），ポリビニルピ
ロリドン，ポリビニルアルコール，カルボキシメチルセ
ルロース，レシチン，ゼラチン，ヒアルロン酸などが挙
げられる。これらの中の１種類か、いくつかを組み合わ
せて使用してもよい。使用の際の濃度は、約０．００１
から２０％（w/w）の範囲から適宜選択できる。さらに
好ましくは約０．０１から１０％（w/w）の範囲で用い
られる。特に好ましくは約０．０５から５％（w/w）の
範囲で用いられる。

【００４２】このようにして得られたマイクロカプセル
は遠心分離あるいは瀘過して分取した後、マイクロカプ
セルの表面に付着している遊離のペプチド、薬物保持物
質、乳化剤などを蒸留水で数回繰り返し洗浄し、蒸留水
などに再分散して凍結乾燥する。その後、必要であれ
ば、減圧下加温してマイクロカプセル中の水分および有
機溶媒の除去をさらに行う。好ましくは、毎分１０ない
し２０℃の昇温速度の条件下で示差走査熱量計で求めた
生体内分解性ポリマーの中間点ガラス転移温度よりも若
干（５℃以上）高い温度で、一般的にはマイクロカプセ
ル自体が所定の温度に達した後、１週間以内あるいは２
ないし３日、より好ましくは２４時間以内行う。

【００４３】相分離法によりマイクロカプセルを製造す
る場合は、上記の生理活性ペプチドと生体内分解性ポリ
マーとの有機溶媒溶液にコアセルベーション剤を一定速
度で撹拌下徐々に加え、生体内分解性ポリマーを析出、
固化させる。該コアセルベーション剤は、ペプチド
〔Ｉ〕と生体内分解性ポリマーとの有機溶媒溶液の体積
の約０．０１倍ないし約１，０００倍の体積量が加えら
れる。さらに好ましくは、約０．０５倍ないし約５００
倍の体積量である。特に好ましくは、約０．１倍ないし
約２００倍の体積量である。コアセルベーション剤とし
ては、生体内分解性ポリマーの溶媒に混和する高分子
系、鉱物油系または植物油系の化合物で、ポリマーを溶
解しないものであればよい。具体的には、例えばシリコ
ン油，ゴマ油，大豆油，コーン油，綿実油，ココナツ
油，アマニ油，鉱物油，ｎ-ヘキサン，ｎ-ヘプタンなど
が挙げられる。これらは２種以上混合して用いてもよ
い。このようにして得られたマイクロカプセルは、瀘過
して分取した後、ヘプタン等により繰り返し洗浄し、コ
アセルベーション剤を除去する。さらに、水中乾燥法と
同様の方法で遊離ペプチドおよび溶媒の除去を行う。水
中乾燥法およびコアセルベーション法での製造では、洗
浄中の粒子同士の凝集を防ぐために、洗浄液である蒸留
水に凝集防止剤を加えてもよい。該凝集防止剤として
は、例えばマンニトール，ラクトール，ブドウ糖，デン
プン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性多糖、グ
リシン，フィブリン，コラーゲン等のタンパク質、塩化
ナトリウム，リン酸水素ナトリウム等の無機塩類などが
挙げられる。

【００４４】噴霧乾燥法によってマイクロカプセルを製
造する場合には、上記のペプチド〔Ｉ〕と生体内分解性
ポリマーとの有機溶媒溶液を、ノズルを用いてスプレー
ドライヤー（噴霧乾燥器）の乾燥室内へ噴霧し、極めて
短時間に微粒化液滴内の有機溶媒を揮発させ、微粒状の
マイクロカプセルを調製する。該ノズルとしては、二流
体ノズル型、圧力ノズル型、回転ディスク型等が挙げら
れる。このとき、所望によってペプチド〔Ｉ〕と生体内
分解性ポリマーとの有機溶媒溶液と同時にマイクロカプ
セルの凝集防止を目的として前述の凝集防止剤の水溶液
を別ノズルより噴霧することも有効である。このように
して得られたマイクロカプセルは、必要であれば加温・
減圧下上述の条件でマイクロカプセル中の水分および有
機溶媒の除去をさらに行う。

【００４５】マイクロカプセルは、そのままあるいはマ
イクロカプセルを原料物質として種々の剤形に製剤化
し、非経口剤（例、筋肉内，皮下，臓器などへの注射剤
または埋め込み剤、鼻腔，直腸，子宮などへの経粘膜剤
等）、経口剤〔例、カプセル剤（例、硬カプセル剤，軟
カプセル剤等），顆粒剤，散剤等の固形製剤、シロップ
剤，乳剤，懸濁剤等の液剤等〕などとして投与すること
ができる。例えば、マイクロカプセルを注射剤とするに
は、マイクロカプセルを分散剤（例、Tween 80，HCO-6
0，カルボキシメチルセルロース，アルギン酸ナトリウ
ムなど）、保存剤（例、メチルパラベン，プロピルパラ
ベンなど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム，マンニト
ール，ソルビトール，ブドウ糖など）などと共に水性懸
濁剤とするか、ゴマ油，コーン油などの植物油と共に分
散して、油性懸濁剤として実際に使用できる徐放性注射
剤とする。マイクロカプセルの粒子径は、例えば懸濁注
射剤として使用する場合にはその分散度、通針性を満足
する範囲であればよく、例えば、粒子径として約０．１
から５００μmの範囲が挙げられる。好ましくは、約１
から３００μmの範囲の粒子径である。さらに好ましく
は、約２から２００μmの範囲の粒子径である。マイク
ロカプセルを無菌製剤にするには、例えば製造全工程を
無菌にする方法，ガンマ線で滅菌する方法，防腐剤を添
加する方法等が挙げられるが、特に限定されない。

【００４６】上記したマイクロカプセル以外にも、適当
な方法で薬物を分散させた生体内分解型高分子組成物を
溶解し、球状，棒状，針状，ペレット状，フィルム状等
に賦形して本発明の徐放性製剤を製造することもでき
る。該生体内分解型高分子組成物は、例えば特公昭５０
−１７５２５号公報に記載の方法にしたがって製造され
る。さらに具体的には、薬物および高分子重合物を溶媒
に溶かし、溶媒を適当な方法（例、噴霧乾燥，フラッシ
ュ蒸発等）によって除去することにより該生体内分解型
高分子組成物を製造できる。本発明の徐放性製剤は、筋
肉内，皮下，臓器などへの注射剤または埋め込み剤、鼻
腔，直腸，子宮などへの経粘膜剤、経口剤〔例、カプセ
ル剤（例、硬カプセル剤，軟カプセル剤等），顆粒剤，
散剤等の固形製剤、シロップ剤，乳剤，懸濁剤等の液剤
等〕などとして投与することができる。

【００４７】本発明の徐放性製剤は、低毒性で哺乳動物
（例、ヒト，牛，豚，犬，ネコ，マウス，ラット，ウサ
ギ等）に対して安全に用いることができる。徐放性製剤
の投与量は、主薬である生理活性ペプチドの種類と含
量、剤形、生理活性ペプチド放出の持続時間、対象疾病
（例、前立腺癌，前立腺肥大症，子宮内膜症，子宮筋
腫，思春期早発症，乳癌等のホルモン依存性の疾病およ
び避妊など）、対象動物などによって種々異なるが、生
理活性ペプチドの有効量であればよい。主薬である生理
活性ペプチドの１回あたりの投与量としては、例えば徐
放性製剤が１カ月製剤である場合、好ましくは、成人１
人当たり約０．０１mgないし１００mg／kg体重の範囲か
ら適宜選ぶことができる。さらに好ましくは、約０．０
５mgないし５０mg／kg体重の範囲から適宜選ぶことがで
きる。特に好ましくは、約０．１mgないし１０mg／kg体
重の範囲から適宜選ぶことができる。１回あたりの徐放
性製剤の投与量は成人１人当たり好ましくは、約０．１
mgないし５００mg／kg体重の範囲から適宜選ぶことがで
きる。さらに好ましくは、約０．２mgないし３００mg／
kg体重の範囲から適宜選ぶことができる。投与回数は、
数週間に１回、１か月に１回、あるいは数か月に１回
等、主薬である生理活性ペプチドの種類と含量、剤形、
生理活性ペプチド放出の持続時間、対象疾病、対象動物
などによって適宜選ぶことができる。

【００４８】

【実施例】以下に参考例および実施例を挙げて本発明を
さらに具体的に説明するが、これらは本発明を限定する
ものではない。以下の参考例および実施例中、％は特記
しない限り重量％を示す。実施例中の下記略号は次のよ
うな意味を示す。 BOC ：tert-ブトキシカルボニル FMOC ：9-フルオレニルメトキシカルボニル Cbz ：ベンジルオキシカルボニル

【００４９】参考例１窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
に90％D,L-乳酸水溶液300gと90％L-乳酸水溶液100gを仕
込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHgま
で４時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、3〜5mmHg，150〜180℃で７時間減圧加熱した後冷却
し、琥珀色のポリ乳酸を得た。得られた重合体を1000ml
のジクロロメタンに溶解し、60℃の温水中に一定速度で
攪拌下注入した。分離してくる餅状の高分子重合体を集
め、30℃で真空乾燥した。得られたポリ乳酸の、ＧＰＣ
測定による重量平均分子量及び数平均分子量並びに末端
基定量による数平均分子量は、それぞれ3,000、1,790、
1,297であったことから末端に遊離のカルボキシル基を
有するポリマーであることを確認した。参考例２窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
に90％D,L-乳酸水溶液500gを仕込み、窒素気流下100
℃，500mmHgから150℃，30mmHgまで４時間かけて減圧加
熱して留出水を除去した。さらに、3〜5mmHg，150〜180
℃で１２時間減圧加熱した後冷却し、琥珀色のポリ乳酸
を得た。得られた重合体を1000mlのジクロロメタンに溶
解し、60℃の温水中に一定速度で攪拌下注入した。分離
してくる餅状の高分子重合体を集め、30℃で真空乾燥し
た。得られたポリ乳酸の、ＧＰＣ測定による重量平均分
子量及び数平均分子量並びに末端基定量による数平均分
子量は、それぞれ5,000、2,561、1,830であったことか
ら末端に遊離のカルボキシル基を有するポリマーである
ことを確認した。

【００５０】参考例３窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
に90％D,L-乳酸水溶液300gと90％L-乳酸水溶液100gを仕
込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHgま
で５時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、5〜7mmHg，１５０〜１８０℃で１８時間減圧加熱し
た後冷却し、琥珀色のポリ乳酸を得た。得られた重合体
を1000mlのジクロロメタンに溶解し、60℃の温水中に一
定速度で攪拌下注入した。分離してくる餅状の高分子重
合体を集め、30℃で真空乾燥した。得られたポリ乳酸
の、ＧＰＣ測定による重量平均分子量及び数平均分子量
並びに末端基定量による数平均分子量は、それぞれ7,50
0、3,563、2,301であったことから末端に遊離のカルボ
キシル基を有するポリマーであることを確認した。参考例４窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
に90％D,L-乳酸水溶液300gと90％L-乳酸水溶液100gを仕
込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHgま
で５時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、5〜7mmHg，150〜180℃で２６時間減圧加熱した後冷
却し、琥珀色のポリ乳酸を得た。得られた重合体を1000
mlのジクロロメタンに溶解し、60℃の温水中に一定速度
で攪拌下注入した。分離してくる餅状の高分子重合体を
集め、30℃で真空乾燥した。得られたポリ乳酸の、ＧＰ
Ｃ測定による重量平均分子量及び数平均分子量並びに末
端基定量による数平均分子量は、それぞれ9,000、3,80
3、2,800であったことから末端に遊離のカルボキシル基
を有するポリマーであることを確認した。

【００５１】参考例５窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
にグリコール酸182.5gとD,L-2-ヒドロキシ酪酸166.6gを
仕込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHg
まで３．５時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。
さらに、5〜7mmHg，150〜180℃で２６時間減圧加熱した
後冷却し、琥珀色のグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共
重合体を得た。得られた重合体を1000mlのジクロロメタ
ンに溶解し、60℃の温水中に一定速度で攪拌下注入し
た。分離してくる餅状の高分子重合体を集め、25℃で真
空乾燥した。得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸
共重合体のＧＰＣ測定による重量平均分子量は13,000で
あった。参考例６窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
にグリコール酸197.7gとD,L-2-ヒドロキシ酪酸145.8gを
仕込み、窒素気流下100℃，500mmHgから155℃，30mmHg
まで４時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、3〜6mmHg，150〜185℃で２７時間減圧加熱した後冷
却し、琥珀色のグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合
体を得た。得られた重合体を1000mlのジクロロメタンに
溶解し、60℃の温水中に一定速度で攪拌下注入した。分
離してくる餅状の高分子重合体を集め、25℃で真空乾燥
した。得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合
体のＧＰＣ測定による重量平均分子量は13,000であっ
た。

【００５２】参考例７窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
にグリコール酸212.9gとD,L-2-ヒドロキシ酪酸124.9gを
仕込み、窒素気流下100℃，500mmHgから160℃，30mmHg
まで３．５時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。
さらに、3〜6mmHg，160〜180℃で２７時間減圧加熱した
後冷却し、琥珀色のグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共
重合体を得た。得られた重合体を1000mlのジクロロメタ
ンに溶解し、60℃の温水中に一定速度で攪拌下注入し
た。分離してくる餅状の高分子重合体を集め、25℃で真
空乾燥した。得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸
共重合体のＧＰＣ測定による重量平均分子量は11,000で
あった。

【００５３】参考例８窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
に90％D,L-乳酸水溶液300gと90％L-乳酸水溶液100gを仕
込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHgま
で４時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、3〜5mmHg，１５０〜１８０℃で１０時間減圧加熱し
た後冷却し、琥珀色のポリ乳酸を得た。得られた重合体
を1000mlのジクロロメタンに溶解し、60℃の温水中に一
定速度で攪拌下注入した。分離してくる餅状の高分子重
合体を集め、30℃で真空乾燥した。得られたポリ乳酸
の、ＧＰＣ測定による重量平均分子量及び数平均分子量
並びに末端基定量による数平均分子量は、それぞれ4,20
0、2,192、1,572であったことから末端に遊離のカルボ
キシル基を有するポリマーであることを確認した。参考例９窒素導入管および冷却管を備えた1000mlの４口フラスコ
にグリコール酸182.5gとD,L-2-ヒドロキシ酪酸166.6gを
仕込み、窒素気流下100℃，500mmHgから150℃，30mmHg
まで３．５時間かけて減圧加熱して留出水を除去した。
さらに、5〜7mmHg，150〜180℃で３２時間減圧加熱した
後冷却し、琥珀色のグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共
重合体を得た。得られた重合体を1000mlのジクロロメタ
ンに溶解し、60℃の温水中に一定速度で攪拌下注入し
た。分離してくる餅状の高分子重合体を集め、25℃で真
空乾燥した。得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸
共重合体の、ＧＰＣ測定による重量平均分子量及び数平
均分子量並びに末端基定量による数平均分子量は、それ
ぞれ16,300、5,620、2,904であったことから末端に遊離
のカルボキシル基を有するポリマーであることを確認し
た。

【００５４】参考例１０ NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyFur)-
Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂の合成参考例１０および１１は、米国特許第５１１０９０４号
及び米国特許出願番号第０７／９８７，９２１号の記載
に準じて行った。ペプチド合成装置の反応容器内にD-Al
a-NH-樹脂（4-メチル-ベンズヒドリルアミン樹脂）１g
を入れた。ついでアミノ酸を以下の合成手順に従って順
番に添加し、上記ペプチドの合成を行った。１．脱保護反応ペプチドのアルファアミノ酸からBOC保護基を除去する
ために、45％トリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡと称する
こともある），2.5％アニソール，2.0％ジメチルフォス
ファイトおよび50.5％ジクロロメタンからなる溶液を用
いた。該溶液で樹脂を１分間予備洗浄後、脱保護反応を
２０分間行った。２．塩基性溶液による洗浄脱保護に使用されたトリフルオロ酢酸を除去及び中和す
るために、Ｎ,Ｎ'-ジイソプロピルエチルアミンを10％
含有するジクロロメタン溶液を使用した。樹脂は、脱保
護反応ごとに１分間，３回洗浄した。３．カップリング反応活性化剤としての３倍モル量の０．３Ｍジイソプロピ
ルカルボジイミド／ジクロロメタン溶液と３倍モル量の
０．３Ｍ BOCアミノ酸誘導体／ＤＭＦ（Ｎ,Ｎ'-ジメチ
ルホルムアミド）溶液を用いてカップリング反応を行っ
た。活性化されたアミノ酸は、樹脂上のペプチドの遊離
アルファアミノ基と結合する。反応時間は下記に記し
た。４．洗浄各反応過程終了後には、ジクロロメタン，ジクロロメタ
ン／ＤＭＦ及びＤＭＦでそれぞれ１分間づつ洗浄を行っ
た。

【００５５】合成プロトコールアミノ基が保護されたアミノ酸は、以下の順序，結合回
数，反応時間で樹脂に結合させた。順序アミノ酸回数−時間１ BOC-Pro ２回−１時間２ BOC-Lys(N-イプシロン-Cbz,イソプロピル) ２回−１時間３ BOC-Leu ２回−１時間４ BOC-D-Lys(N-イプシロン-FMOC) ２回−１時間５ BOC-NMeTyr(O-2,6-diCl-Bzl) ２回−１時間６ BOC-Ser(OBzl) ２回−１時間７ BOC-D-3Pal ２回−６時間８ BOC-D-4ClPhe ２回−２時間９ BOC-D2Nal ２回−２時間１０酢酸２回−２時間合成反応終了後の樹脂を３０％濃度のピペリジンのＤＭ
Ｆ溶液で４〜２４時間処理し、ＦＭＯＣ保護基を除去し
た。得られる樹脂をジクロロメタンで数回洗浄後、ＤＭ
Ｆ（18ml）に溶解したカルボニルジイミダゾール（0.9
g）と１５分間反応させ、ついでジクロロメタンで３回
洗浄後、ＤＭＦ（18ml）に溶解した２−フランカルボン
酸ヒドラジド（2-furoic hydrazide）（0.53g）と１夜
反応させた。得られるペプチド−樹脂をジクロロメタン
で３回洗浄後、五酸化燐共存下１夜乾燥させ、ついでペ
プチドを樹脂から切断するためにアニソール存在下、０
℃で１時間乾燥フッ化水素処理した。過剰の反応試薬は
真空条件で除去した。得られる樹脂を最初エーテルで洗
浄し、ついで水／アセトニトリル／酢酸（1：1：0.1）
混液５０ml中、室温で１５分間撹拌後、瀘過した。瀘液
を凍結乾燥することにより、綿毛状の粉末として未精製
のペプチドを得た。該ペプチドを、以下の条件で高速液
体カラムクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて精製
した。（１）カラム；ダイナマックスＣ−１８（25X2.5cm，8
ミクロン）（２）溶媒；８９％水／１１％アセトニトリル／０．１
％ＴＦＡからアセトニトリルを２０分間にわたり上昇さ
せるグラディエント法（３）検出波長；２６０nm（ＵＶ法）

【００５６】保持時間２５．７分に単一ピークとして検
出されたペプチドを分取後、凍結乾燥し、NAcD2Nal-D4C
lPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyFur)-Leu-Lys(Nis
p)-Pro-DAlaNH₂の精製品をトリフルオロ酢酸塩として得
た。精製品の物性値は次のとおりであった。ＦＡＢ〔ファスト・アトム・ボンバードメント（Fast A
tom Bombardment）、以下同意義を示す〕質量分析：ｍ
／ｅ１５９１（Ｍ＋Ｈ）⁺ アミノ酸分析値：0.98Ala，1.02Pro，1.58Lys，1.00Le
u，1.12NMeTyr，０．５２Ｓｅｒ上記したペプチドのトリフルオロ酢酸塩を、１規定濃度
の酢酸で平衡化したゲル瀘過カラムを用いて酢酸塩とし
た。ゲル瀘過の条件を以下に示す。（１）充填剤；セファデックスＧ−２５（カラムの内
径：１６ｍｍ，充填剤の高さ：４０mm）（２）溶媒；１規定酢酸（３）検出波長；２５４nm（ＵＶ法）最初に溶出するピークの分画を集めて凍結乾燥し、NAcD
2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyFur)-Leu-
Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂の精製品を酢酸塩として得た。

【００５７】参考例１１ NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyNic)-
Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂の合成２−フランカルボン酸ヒドラジド（2-furoic hydrazid
e）を２−ニコチン酸ヒドラジド（2-nicotinic hydrazi
de）（0.575g）に変えること以外は参考例１０と同様に
して上記ペプチドの合成を行った。得られる精製品のＨ
ＰＬＣでの保持時間は、１６．０分であった。また、精
製品の物性値は次のとおりであった。ＦＡＢ質量分析：ｍ／ｅ１５９２（Ｍ＋Ｈ）⁺ アミノ酸分析値：1.02Ala，1.01Pro，1.61Lys，0.99Le
u，1.12NMeTyr，0.48Ser さらに参考例１０と同様にして、上記したペプチドのト
リフルオロ酢酸塩を、酢酸塩とした。

【００５８】参考例１２窒素導入管および冷却管を備えた1000ml容の４口フラス
コに90％Ｄ,Ｌ−乳酸水溶液322gとグリコール酸133gと
を加え、マントルヒーター（相互理化学硝子製作所製）
を用いて、窒素気流下100℃，500mmＨgから150℃，30mm
Ｈgまで４時間減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、３〜30mmＨg，150〜185℃で２３時間減圧加熱した
後冷却し、乳酸−グリコール酸共重合体を得た。得られ
た重合体をジクロロメタン1000mlに溶解し、60℃の温水
中に一定速度で攪拌下注入した。分離してくる餅状の高
分子重合体を集め、30℃で真空乾燥した。得られた乳酸
−グリコール酸共重合体の、ＧＰＣ測定による重量平均
分子量及び数平均分子量並びに末端基定量による数平均
分子量は、それぞれ10,000、4,000、4,000であったこと
から末端に遊離のカルボキシル基を有するポリマーであ
ることを確認した。

【００５９】参考例１３窒素導入管および冷却管を備えた1000ml容の４口フラス
コに90％Ｄ,Ｌ−乳酸水溶液347gとグリコール酸266gと
を加え、マントルヒーター（相互理化学硝子製作所製）
を用いて、窒素気流下100℃，500mmＨgから150℃，30mm
Ｈgまで５時間減圧加熱して留出水を除去した。さら
に、３〜30mmＨg，150〜180℃で２３時間減圧加熱した
後冷却し、乳酸−グリコール酸共重合体を得た。得られ
た重合体をジクロロメタン1000mlに溶解し、60℃の温水
中に一定速度で攪拌下注入した。分離してくる餅状の高
分子重合体を集め、30℃で真空乾燥した。得られた乳酸
−グリコール酸共重合体の、ＧＰＣ測定による重量平均
分子量及び数平均分子量並びに末端基定量による数平均
分子量は、それぞれ10,000、3,700、3,900であったこと
から末端に遊離のカルボキシル基を有するポリマーであ
ることを確認した。参考例１４酢酸リュープロレリン（武田薬品工業製）400mgを、実
施例１２と同一の乳酸−グリコール酸共重合体3.6gをジ
クロロメタン8.0gに溶解した液に加え、透明な均一溶液
とした。この溶液を15℃に冷却した後、予め15℃に調節
しておいた0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中
に注入し、以下実施例１１と同様にしてマイクロカプセ
ルを得た。

【００６０】実施例１ NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(Nic)-Leu-Ly
s(Nisp)-Pro-DAlaNH₂（ＴＡＰ社製、以下生理活性ペプ
チドＡと略記する）の酢酸塩 200mgを、参考例５で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
１で得られたポリ乳酸の等量混合物3.8gをジクロロメタ
ン 5.3 g（4.0 ml）に溶解した液に加えて溶解した。こ
の溶液を17℃に冷却した後、予め10℃に調節しておいた
0.1％ポリビニルアルコール（ＥＧ−４０、日本合成化
学製）水溶液1000ml中に注入し、タービン型ホモミキサ
ーを用い、7000 rpm でＯ／Ｗエマルションとした。こ
のＯ／Ｗエマルションを室温で3時間撹拌してジクロロ
メタンを揮散させ、油相を固化させた後、遠心分離機
（０５ＰＲ−２２、日立製作所）を用いて 2000 rpmで
捕集した。これを蒸留水に再分散後、さらに遠心分離を
行い、遊離した薬物等を洗浄除去した。得られたマイク
ロカプセルは少量の蒸留水に再分散した後、D-マンニト
ール0.3gを加え、凍結乾燥すると粉末が得られた。マイ
クロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中の生理活
性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜60μm、4.7％（w/
w）であった。上記と同様にして、下記の(1)および(2)
の生理活性ペプチドの製剤が製造された。 (1) NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyN
ic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂ (2) NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(AzaglyF
ur)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂

【００６１】実施例２生理活性ペプチドＡの酢酸塩 200mgを、参考例５で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
２で得られたポリ乳酸との等量混合物3.8gをジクロロメ
タン 6.7 g（5.0 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め17℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜65 μm、
5.0％（w/w）であった。実施例３生理活性ペプチドＡの酢酸塩 200mgを、参考例５で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
３で得られたポリ乳酸との等量混合物3.8gをジクロロメ
タン 6.7 g（5.0 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め17℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 10〜60 μ
m、4.8％（w/w）であった。

【００６２】実施例４生理活性ペプチドＡの酢酸塩 200mgを、参考例５で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
４で得られたポリ乳酸との等量混合物3.8gをジクロロメ
タン 6.7 g（5.0 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め17℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 10〜75 μ
m、4.6％（w/w）であった。実施例５生理活性ペプチドＡの酢酸塩 200mgを、参考例６で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
２で得られたポリ乳酸との等量混合物3.8gをジクロロメ
タン 6.0 g（4.5 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め10℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜60 μm、
4.9％（w/w）であった。

【００６３】実施例６生理活性ペプチドＡの酢酸塩 200mgを、参考例７で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
２で得られたポリ乳酸との等量混合物3.8gをジクロロメ
タン 6.0 g（4.5 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め17℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 10〜65 μ
m、4.9％（w/w）であった。

【００６４】実施例７生理活性ペプチドＡの酢酸塩 400mgを、参考例９で得ら
れたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体と参考例
８で得られたポリ乳酸との等量混合物3.6gをジクロロメ
タン 7.0 g（5.3 ml）に溶解した液に加えて溶解した。
この溶液を17℃に冷却した後、予め17℃に調節しておい
た0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜65 μm、
7.2％（w/w）であった。

【００６５】実施例８参考例１１で得られたNAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMe
Tyr-DLys(AzaglyNic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂（以
下生理活性ペプチドＢと略記する）の酢酸塩 240mgを、
参考例９で得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共
重合体と参考例８で得られたポリ乳酸との等量混合物1.
76gをジクロロメタン 3.2 g（2.4 ml）に溶解した液に
加えて溶解した。この溶液を18℃に冷却した後、予め16
℃に調節しておいた0.1％ポリビニルアルコール水溶液4
00ml中に注入し、以下実施例１と同様にしてマイクロカ
プセルを得た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロ
カプセル中の生理活性ペプチドＢの含有率はそれぞれ 5
〜70 μm、10.3％（w/w）であった。実施例９参考例１０で得られたNAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-NMe
Tyr-DLys(AzaglyFur)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂（以
下生理活性ペプチドＣと略記する）の酢酸塩 240mgを、
参考例９で得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ酪酸共
重合体と参考例８で得られたポリ乳酸との等量混合物1.
76gをジクロロメタン 3.2 g（2.4 ml）に溶解した液に
加えて溶解した。この溶液を18℃に冷却した後、予め16
℃に調節しておいた0.1％ポリビニルアルコール水溶液4
00ml中に注入し、以下実施例１と同様にしてマイクロカ
プセルを得た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロ
カプセル中の生理活性ペプチドＣの含有率はそれぞれ 5
〜65 μm、10.9％（w/w）であった。

【００６６】実施例１０ N-Tetrahydrofur-2-oyl-Gly-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-
NMeTyr-DLys(Nic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂（ＴＡＰ
社製、以下生理活性ペプチドＤと略記する）の酢酸塩
〔ＦＡＢ質量分析：ｍ／ｅ１６４７（Ｍ＋Ｈ）⁺〕 240
mgを、参考例９で得られたグリコール酸・2-ヒドロキシ
酪酸共重合体と参考例８で得られたポリ乳酸との等量混
合物1.76gをジクロロメタン 3.2g（2.4ml）に溶解した
液に加えて溶解した。この溶液を18℃に冷却した後、予
め16℃に調節しておいた0.1％ポリビニルアルコール水
溶液400ml中に注入し、以下実施例１と同様にしてマイ
クロカプセルを得た。マイクロカプセルの粒度分布、マ
イクロカプセル中の生理活性ペプチドＤの含有率はそれ
ぞれ 5〜70 μm、10.5％（w/w）であった。

【００６７】実施例１１生理活性ペプチドＡの酢酸塩200mgを、乳酸−グリコー
ル酸共重合体〔乳酸／グリコール酸＝75/25（モル
％）、ＧＰＣ測定による重量平均分子量5,000及び数平
均分子量2,000、末端基定量による数平均分子量2,200、
和光純薬工業製（lot.920729)〕3.8gをジクロロメタン
5.3g（4.0ml）に溶解した液に加えて溶解した。この溶
液を17℃に冷却した後、予め16℃に調節しておいた0.1
％ポリビニルアルコール（ＥＧ−４０、日本合成化学
製）水溶液1000ml中に注入し、タービン型ホモミキサー
を用い、7000rpmでＯ／Ｗエマルションとした。このＯ
／Ｗエマルションを室温で３時間撹拌してジクロロメタ
ンを揮散させ、油相を固化させた後、遠心分離機（０５
ＰＲ−２２、日立製作所）を用いて2000rpm で捕集し
た。これを蒸留水に再分散後、さらに遠心分離を行い、
遊離した薬物等を洗浄除去した。得られたマイクロカプ
セルは少量の蒸留水を加えて再分散した後、Ｄ−マンニ
トール0.3gを加え、凍結乾燥すると粉末が得られた。マ
イクロカプセルの粒度、マイクロカプセル中の生理活性
ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜60μm、4.7％（w/
w）であった。上記と同様にして、下記の(1)および(2)
のペプチドの製剤が製造される。 (1) 生理活性ペプチドＢの酢酸塩 (2) 生理活性ペプチドＣの酢酸塩

【００６８】実施例１２生理活性ペプチドＡの酢酸塩200mgを、乳酸−グリコー
ル酸共重合体（乳酸／グリコール酸＝75/25（モル
％）、ＧＰＣ測定による重量平均分子量10,000及び数平
均分子量4,400、末端基定量による数平均分子量4,300、
和光純薬工業製（lot. 880530)）3.8gをジクロロメタン
6.7g（5.0ml）に溶解した液に加えて溶解した。この溶
液を17℃に冷却した後、予め11℃に調節しておいた0.1
％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入し、以下
実施例１１と同様にしてマイクロカプセルを得た。マイ
クロカプセルの粒度、マイクロカプセル中の生理活性ペ
プチドＡの含有率はそれぞれ 5〜65μm、4.5％（w/w）
であった。

【００６９】実施例１３生理活性ペプチドＡの酢酸塩400mgを、参考例１２で得
られた乳酸−グリコール酸共重合体3.6gをジクロロメタ
ン8.0g（6.0ml）に溶解した液に加えて溶解した。この
溶液を15℃に冷却した後、予め14℃に調節しておいた0.
1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入し、以
下実施例１１と同様にしてマイクロカプセルを得た。マ
イクロカプセルの粒度、マイクロカプセル中の生理活性
ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜65μｍ、8.2％（w/
w）であった。実施例１４生理活性ペプチドＡの酢酸塩400mgを、参考例１３で得
られた乳酸−グリコール酸共重合体3.6gをジクロロメタ
ン8.0g（6.0ml）に溶解した液に加えて溶解した。この
溶液を15℃に冷却した後、予め15℃に調節しておいた0.
1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入し、以
下実施例１１と同様にしてマイクロカプセルを得た。マ
イクロカプセルの粒度、マイクロカプセル中の生理活性
ペプチドＡの含有率はそれぞれ 5〜65μm、8.4％（w/
w）であった。

【００７０】実験例１実施例１で得られたマイクロカプセル約 30 mg を分散
溶媒（2.5 mgのカルボキシメチルセルロース、0.5 mg
のポリソルベート 80、25 mg のマンニトールを溶解し
た蒸留水）0.5 ml に分散して１０週齢雄性ＳＤラット
の背部皮下に２２Ｇ注射針で投与した（マイクロカプセ
ルとしての投与量 60 mg/kg）。投与後一定時間毎にラ
ットを屠殺して投与部位に残存するマイクロカプセルを
取り出し、この取り出したマイクロカプセル中の生理活
性ペプチドＡを定量した結果を表１に示す。

【００７１】実験例２〜６実施例２〜６で得られたマイクロカプセルを用い、実験
例１と同様にして残存生理活性ペプチドＡを定量した結
果を表１に示す。

【表１】 ------------------------------------------------------------- 生理活性ペプチドＡ残存率（％） ------------------------------------------------------------- 1日 1週 2週 3週 4週 5週 6週 8週 ------------------------------------------------------------- 実験例1 88.0 66.5 42.3 15.2 実験例2 92.8 76.6 62.6 48.7 38.6 26.5 実験例3 96.5 90.5 77.5 64.9 59.2 46.9 38.7 20.3 実験例4 99.4 94.5 87.2 76.3 66.0 − 46.6 30.7 実験例5 92.9 75.0 45.7 − 17.5 実験例6 92.3 61.3 33.5 ６．４ −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 表１の結果に示されるように、本発明のマイクロカプセ
ルではいずれも初期バーストがほとんどなく、各期間に
わたり生理活性ペプチドがほぼ一定に放出されている。

【００７２】表２には、表１の結果から生物検定法（佐
久間昭著, 東京大学出版会, 1978年6月5日発行, 111
頁）に記載の方法に従って算出した直線回帰式、相関係
数およびＸ切片として求まる放出期間を示す。

【表２】 ----------------------------------------------------------------------- ホ゜リ乳酸の直線回帰式相関係数放出期間重量平均分子量 ----------------------------------------------------------------------- 実験例1 3000 残存率(％)=95.4-(26.9 X 週数) (R² = 0.992) 3.5週実験例2 5000 残存率(％)=94.4-(14.2 X 週数) (R² = 0.975) 6.6週実験例3 7500 残存率(％)=98.4-(10.0 X 週数) (R² = 0.996) 9.8週実験例4 9000 残存率(％)=102.1-(8.9 X 週数) (R² = 0.995) 11.5週 ----------------------------------------------------------------------- 表２の結果に示されるように、グリコール酸・2-ヒドロ
キシ酪酸共重合体と混合するポリ乳酸の重量平均分子量
を変化させることにより、放出期間を約3.5週間から約1
1.5週間までの各期間に調節することができる。

【００７３】表３には、表２と同様の方法に従って表１
の結果から算出した直線回帰式、相関係数およびＸ切片
として求まる放出期間を示す。

【表３】 ----------------------------------------------------------------------- ク゛リコール酸直線回帰式相関係数放出期間共重合体中のク゛リコール酸のモル分率 ----------------------------------------------------------------------- 実験例2 60％残存率(％)=94.4-(14.2 X 週数) (R² = 0.975) 6.6週実験例5 65％残存率(％)=95.7-(20.6 X 週数) (R² = 0.976) 4.6週実験例6 70％残存率(％)=96.6-(30.9 X 週数) (R² = 0.994) 3.1週 ----------------------------------------------------------------------- 表３の結果に示されるように、ポリ乳酸と混合するグリ
コール酸・2-ヒドロキシ酪酸共重合体中のグリコール酸
の割合を変化させることにより、放出期間を約3.1週間
から約6.6週間までの各期間に調節することができる。

【００７４】実験例７〜９実施例７〜９で得られたマイクロカプセルを用い、マイ
クロカプセルとしての投与量が約 30 mg/kgであること
以外は実験例１と同様にして、残存生理活性ペプチドを
定量した結果を表４に示す。さらに、表２と同様にして
表４の結果から算出した直線回帰式、相関係数およびＸ
切片として求まる放出期間を表５に示す。

【表４】 ------------------------------------------------------------- 生理活性ペプチド残存率（％） ------------------------------------------------------------- 生理活性 1日 1週 2週 3週 4週ヘ゜フ゜チト゛ ------------------------------------------------------------- 実験例7 Ａ 99.3 74.5 51.4 33.2 24.1 実験例8 Ｂ 87.4 75.0 52.3 32.8 25.1 実験例9 Ｃ 89.4 73.6 54.9 37.7 23.4 -------------------------------------------------------------

【表５】 ----------------------------------------------------------------------- 生理活性直線回帰式相関係数放出期間ヘ゜フ゜チト゛ ----------------------------------------------------------------------- 実験例7 Ａ残存率(％)=97.8-(20.1 X 週数) (R² = 0.975) 4.9週実験例8 Ｂ残存率(％)=93.5-(18.6 X 週数) (R² = 0.971) 5.0週実験例9 Ｃ残存率(％)=94.4-(18.5 X 週数) (R² = 0.987) 4.9週 ----------------------------------------------------------------------- 表４および表５の結果に示されるように、本発明のマイ
クロカプセルでは、いずれも生理活性ペプチドの初期バ
ーストがほとんどなく、各期間にわたり生理活性ペプチ
ドがほぼ一定に放出されている。

【００７５】実験例１０実施例１０で得られたマイクロカプセルを用い、実施例
７と同様にして残存生理活性ペプチドを定量した結果を
表６に示す。さらに、表２と同様にして表６の結果から
算出した直線回帰式、相関係数およびＸ切片として求ま
る放出期間を表７に示す。

【表６】 ------------------------------------------------------------------- 生理活性ペプチドＤ残存率（％） ------------------------------------------------------------------- 1日 1週 2週 3週 4週 ------------------------------------------------------------------- 実験例１０ 93.5±0.5 69.9±3.6 37.3±1.6 17.0±1.4 7.9±0.5 -------------------------------------------------------------------

【表７】 ----------------------------------------------------------------------- 直線回帰式相関係数放出期間 ----------------------------------------------------------------------- 実験例１０残存率(％)=95.0-(24.1 X 週数) (R² = 0.969) 3.9週 ----------------------------------------------------------------------- 表６および表７の結果に示されるように、本発明のマイ
クロカプセルでは、いずれも生理活性ペプチドの初期バ
ーストがほとんどなく、各期間にわたり生理活性ペプチ
ドがほぼ一定に放出されている。

【００７６】実験例１１実施例１１で得られたマイクロカプセル約30mgを分散溶
媒（カルボキシメチルセルロース（2.5mg），ポリソル
ベート80（0.5mg），マンニトール25mgを溶解した蒸留
水）0.5mlに分散して、１０週齢雄性ＳＤラットの背部
皮下に２２Ｇ注射針で投与した（マイクロカプセルとし
ての投与量60mg/kg）。投与後一定時間毎にラットを屠
殺して投与部位に残存するマイクロカプセルを取り出
し、この取り出したマイクロカプセル中の生理活性ペプ
チドＡを定量した結果を表８に示す。

【００７７】実験例１２実施例１２で得られたマイクロカプセルを用い、実験例
１１と同様にして残存生理活性ペプチドＡを定量した結
果を表８に示す。実験例１３実施例１３で得られたマイクロカプセルを用い、実験例
１１と同様にして残存生理活性ペプチドＡを定量した結
果を表８に示す。実験例１４実施例１４で得られたマイクロカプセルを用い、実験例
１１と同様にして残存生理活性ペプチドＡを定量した結
果を表８に示す。

【００７８】

【表８】 ────────────────────────────── 生理活性ペプチドＡ残存率（％） ────────────────────────────── １日１週２週３週４週６週８週 ────────────────────────────── 実験例１１ 82.8 21.8 − − − − − 実験例１２ 96.7 91.7 79.5 69.2 59.2 − 22.8 実験例１３ 100.0 84.3 43.9 31.9 − − − 実験例１４ 96.3 67.5 38.0 23.5 − − − ────────────────────────────── （−は未測定）

【００７９】表９には、表２と同様にして表８の結果か
ら算出した直線回帰式、相関係数およびＸ切片として求
める放出期間を示す。

【表９】 ─────────────────────────────────── 直線回帰式相関係数放出期間 ─────────────────────────────────── 実験例１１残存率(％)＝97.1−(75.7 X 週数) (R²＝0.994) 1.3週実験例１２残存率(％)＝92.2−(9.7 X 週数) (R²＝0.998) 10.3週実験例１３残存率(％)＝102.4−(24.8 X 週数) (R²＝0.982) 4.1週実験例１４残存率(％)＝97.7−(26.5 X 週数) (R²＝0.989) 3.7週 ─────────────────────────────────── 表８および表９の結果に示されるように、本発明の徐放
性製剤ではいずれも各期間にわたりほぼ一定にペプチド
が放出されている。

【００８０】比較例１生理活性ペプチドＡの酢酸塩400mgを、乳酸−グリコー
ル酸共重合体（乳酸／グリコール酸＝50/50（モル
％）、ＧＰＣ重量平均分子量58,000、ＧＰＣ数平均分子
量14,000、末端基定量による数平均分子量45,000、ベー
リンガーインゲルハイム社製（lot.RG505-05077））3.6
gをジクロロメタン33.2g（25.0ml）に溶解した液に加え
たが、生理活性ペプチドＡの酢酸塩を溶解できなかっ
た。比較例２生理活性ペプチドＡの酢酸塩400mgを、乳酸−グリコー
ル酸共重合体（乳酸／グリコール酸＝75/25（モル
％）、ＧＰＣ重量平均分子量18,000、ＧＰＣ数平均分子
量8,400、末端基定量による数平均分子量30,000、ベー
リンガーインゲルハイム社製（lot.RG752-15057））3.6
gをジクロロメタン8.0g（6.0ml）に溶解した液に加えた
が、生理活性ペプチドＡの酢酸塩を溶解できなかった。
この分散液を17℃に冷却した後、予め15℃に調節してお
いた0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に注入
し、以下実施例１１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセル中
の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ、10〜90μ
m、2.5％（w/w）であった。

【００８１】比較例３生理活性ペプチドＡの酢酸塩400mgを、乳酸−グリコー
ル酸共重合体（乳酸／グリコール酸＝75/25（モル
％）、ＧＰＣ重量平均分子量58,000、ＧＰＣ数平均分子
量15,000、末端基定量による数平均分子量53,000、ベー
リンガーインゲルハイム社製（lot.RG755-05019））3.6
gをジクロロメタン21.2g（16.0ml）に溶解した液に加え
たが、生理活性ペプチドＡの酢酸塩を溶解できなかっ
た。この分散液を17℃に冷却した後、予め16℃に調節し
ておいた0.1％ポリビニルアルコール水溶液1000ml中に
注入し、以下実施例１１と同様にしてマイクロカプセル
を得た。マイクロカプセルの粒度分布、マイクロカプセ
ル中の生理活性ペプチドＡの含有率はそれぞれ10〜90μ
m、3.6％（w/w）であった。比較例１〜３で示したよう
に、末端にカルボキシル基を有しない乳酸−グリコール
酸共重合体では、本発明のペプチド〔Ｉ〕を溶解できな
かった。比較例４酢酸リュープロレリン（武田薬品工業製）400mgを、比
較例２と同一の乳酸−グリコール酸共重合体3.6gをジク
ロロメタン8.0g（6.0ml）に溶解した液に加えたが、酢
酸リュープロレリンを溶解できなかった。

【００８２】

【発明の効果】本発明の徐放性製剤は、薬物、特にペプ
チド〔Ｉ〕の長期間にわたる定常的な放出を示し、持続
的で安定な効果が得られる。しかも、薬物の放出期間は
容易に制御でき、投与直後における過剰量の薬物放出を
抑制し得る。特に、徐放性製剤投与後ペプチド〔Ｉ〕に
おけるヒスタミン遊離作用が抑制される。また、徐放性
製剤は、優れた分散性を有する。さらに、徐放性製剤は
安定（例、光，熱，湿気，着色等に対して安定）でかつ
低毒性で、安全に投与できる。本発明の製造法によれ
ば、生理活性ペプチドを含有する徐放性製剤が容易かつ
好収率で得られる。このようにして得られた徐放性製剤
は、表面が滑らかであり、流動性に優れる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】〔式中、Ｘはアシル基を、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₄は芳香環基
を、Ｒ₃はＤ-アミノ酸残基または式【化２】（式中、Ｒ₃'は複素環基を示す）で表される基を、Ｒ₅
は式 -（ＣＨ₂）_n-Ｒ₅'（式中、ｎ＝２または３を、
Ｒ₅'は置換されていてもよいアミノ基を示す）で表され
る基，芳香環基またはＯ−グリコシル基を、Ｒ₆は式-
（ＣＨ₂）_n-Ｒ₆'（式中、ｎ＝２または３を、Ｒ₆'は置
換されていてもよいアミノ基を示す）で表される基を、
Ｒ₇はＤ-アミノ酸残基またはアザグリシル基を、Ｑは水
素原子または低級アルキル基を示す〕で表される生理活
性ペプチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル基
を有する生体内分解性ポリマーとからなる徐放性製剤。
【請求項２】Ｘが５または６員複素環カルボキサミド基
で置換されていてもよいＣ_2-7アルカノイル基である請
求項１記載の徐放性製剤。
【請求項３】Ｘがテトラヒドロフリルカルボキサミド基
で置換されていてもよいＣ_2-4アルカノイル基である請
求項２記載の徐放性製剤。
【請求項４】Ｘがアセチルである請求項１記載の徐放性
製剤。
【請求項５】生体内分解性ポリマーが（Ａ）グリコール
酸と一般式【化３】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項６】Ｘがアセチルであり、生体内分解性ポリマ
ーが（Ａ）グリコール酸と一般式【化４】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項７】共重合体がＧＰＣ測定法で２，０００から
５０，０００の重量平均分子量を有する請求項５記載の
徐放性製剤。
【請求項８】共重合体が１．２から４．０の分散度を有
する請求項５記載の徐放性製剤。
【請求項９】ポリ乳酸がＧＰＣ測定法で１，５００から
３０，０００の重量平均分子量を有する請求項５記載の
徐放性製剤。
【請求項１０】ポリ乳酸が１．２から４．０の分散度を
有する請求項５記載の徐放性製剤。
【請求項１１】生体内分解性ポリマーが乳酸−グリコー
ル酸共重合体である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１２】共重合体がＧＰＣ測定法で５，０００か
ら２５，０００の重量平均分子量を有する請求項１１記
載の徐放性製剤。
【請求項１３】共重合体が１．２から４．０の分散度を
有する請求項１１記載の徐放性製剤。
【請求項１４】生理活性ペプチドの配合量が生体内分解
性ポリマーに対して０．０１から５０％（Ｗ／Ｗ）であ
る請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１５】生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴ
ニストである請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１６】生理活性ペプチドが【化５】またはその酢酸塩である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１７】生理活性ペプチドがNAcD2Nal-D4ClPhe-D
3Pal-Ser-NMeTyr-DLys(Nic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH
₂またはその酢酸塩である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１８】生理活性ペプチドがNAcD2Nal-D4ClPhe-D
3Pal-Ser-Tyr-DhArg(Et₂)-Leu-hArg(Et₂)-Pro-DAlaNH₂
またはその酢酸塩である請求項１記載の徐放性製剤。
【請求項１９】一般式【化６】〔式中、Ｘはアシル基を、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₄は芳香環基
を、Ｒ₃はＤ-アミノ酸残基または式【化７】（式中、Ｒ₃'は複素環基を示す）で表される基を、Ｒ₅
は式 -（ＣＨ₂）_n-Ｒ₅'（式中、ｎ＝２または３を、
Ｒ₅'は置換されていてもよいアミノ基を示す）で表され
る基，芳香環基またはＯ−グリコシル基を、Ｒ₆は式-
（ＣＨ₂）_n-Ｒ₆'（式中、ｎ＝２または３を、Ｒ₆'は置
換されていてもよいアミノ基を示す）で表される基を、
Ｒ₇はＤ-アミノ酸残基またはアザグリシル基を、Ｑは水
素原子または低級アルキル基を示す〕で表される生理活
性ペプチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル基
を有する生体内分解性ポリマーとを水と実質的に混和し
ない溶媒にいったん溶解し、ついで溶媒を除去すること
を特徴とする徐放性製剤の製造法。
【請求項２０】生体内分解性ポリマーが（Ａ）グリコー
ル酸と一般式【化８】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である請求項１９記載の徐放性製剤の
製造法。
【請求項２１】Ｘがアセチルであり、生体内分解性ポリ
マーが（Ａ）グリコール酸と一般式【化９】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸の混合物である請求項１９記載の徐放性製剤の
製造法。
【請求項２２】生体内分解性ポリマーが乳酸−グリコー
ル酸共重合体である請求項１９記載の徐放性製剤の製造
法。
【請求項２３】生体内分解性ポリマーと水に難溶性の生
理活性ペプチドとを、水と実質的に混和しない溶媒に溶
解し、得られる溶液を水相中に加えＯ／Ｗエマルション
を形成させる請求項１９記載の徐放性製剤の製造法。
【請求項２４】（Ａ）グリコール酸と一般式【化１０】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸を混合した生体内分解性ポリマーと水に難溶性
の生理活性ペプチドまたはその塩とを、水と実質的に混
和しない溶媒にいったん溶解し、ついで溶媒を除去する
ことを特徴とする徐放性製剤の製造法。
【請求項２５】生体内分解性ポリマーと水に難溶性の生
理活性ペプチドまたはその塩とを、水と実質的に混和し
ない溶媒に溶解し、得られる溶液を水相中に加えＯ／Ｗ
エマルションを形成させる請求項２４記載の徐放性製剤
の製造法。