JPH08283281A - 新規抗腫瘍性抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ストレプトミセス属に属する微生物、例えば
ストレプトミセス・コエルレオルビダス３Ｔ−３７３株
（ＦＥＲＭ ＢＰ−１６５）の培養液を溶媒抽出、シリ
カゲルカラムクロマトグラフィーなどの精製手段を用い
て精製することにより製造されるアントラサイクリン抗
生物質ＤＲ４０。 【効果】 マウス白血病培養細胞（Ｌ１２１０）に対
し、増殖抑制作用を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ストレプトミセス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物が生産する
新規なアントラサイクリン系抗生物質に関する。

【０００２】

【従来の技術】アントラサイクリン系抗生物質として
は、従来から放線菌の培養液から得られるダウノマイシ
ン（米国特許第３，６１６，２４２号）およびアドリア
マイシン（米国特許第３，５９０，０２８号）が知られ
ており、これらの化合物は、実験腫瘍に対して広い抗癌
スペクトルを有し、癌化学療法剤として臨床的にも広く
利用されている。しかし、ダウノマイシンおよびアドリ
アマイシンはかなり強力な抗癌作用を示すが決して満足
できるものではない。そのため発酵法、半合成法、微生
物変換法など各種の手段により種々の類縁化合物を創製
する試みが行われており、さらにいくつかのアントラサ
イクリン抗生物質、例えばアクラシノマイシンＡおよび
Ｂ（特公昭５１−３４９１５号）、４−デメトキシ−１
１−デオキシダウノマイシン（特開昭５７−２６４９４
号）、ロドマイシン群抗生物質（特開昭５６−１５２９
９号）などが提案されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】抗腫瘍剤としてのアン
トラサイクリン抗生物質は、上述したように、各種の類
縁化合物が提案され、すでに一部は臨床的にも広く利用
されているものもあり、また臨床試験に供されているも
のもある。しかし、毒性、抗癌作用双方について共に満
足できるものはない。しかも抗腫瘍剤は、試験管内試
験、動物試験の結果が必ずしも人間の抗癌作用として反
映できないため、多角的な研究が要求される。そのた
め、抗腫瘍剤として一応の評価がされているアントラサ
イクリン系抗生物質について、さらに新たな部類に属す
る化合物の提案が望まれている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、より有用
なアントラサイクリン抗生物質またはその合成中間体と
なり得る新規化合物を提案するため鋭意研究を重ねたと
ころ、ストレプトミセス属に属する微生物の培養液中よ
り文献未載の新規なアントラサイクリン抗生物質の単離
に成功し、また該化合物が実験腫瘍に対して増殖阻止作
用を有することを見出し、本発明を完成した。

【０００５】本発明により提供される新規アントラサイ
クリン抗生物質は、下記の理化学的性質を有する抗生物
質である。 （１）外観：赤色粉末 （２）融点：１９３〜１９５℃（分解） （３）比旋光度：［α］_D ²⁰ −６７４゜（ｃ ０．０
２、ＣＨＣｌ₃） （４）ＦＡＢマススペクトル（ｍ／ｚ）：８９６（（Ｍ
＋Ｈ）⁺）、８９５（（Ｍ−Ｈ）^-） （５）ＵＶ吸収スペクトル：９０％メタノール溶液中で
測定した極大吸収は下記のとおりである（単位：ｎ
ｍ）。 λｍａｘ（Ｅ_1cm ^1%）：２３９（１４４）、２５７（ｓ
ｈ、１３４）、２９５（ｓｈ、１１２）、５１１（９
６） （６）ＩＲ吸収スペクトル（ＫＢｒ）：特徴的な吸収
は、下記のとおりである（単位：ｃｍ^-1）。 νｍａｘ：１７１５、１６１３、１５８２

【０００６】（７）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃）：主要な吸収は、下記のとおりであ
る。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：１．０７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
３Ｈｚ），１．３７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），
１．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ ＆Ｊ＝
３．６６Ｈｚ），１．６３（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈ
ｚ），１．７６（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ），１．
９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ），２．０２（１
Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．１９Ｈｚ ＆ Ｊ＝３．３０Ｈ
ｚ），２．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．６６Ｈｚ ＆
Ｊ＝４．０３Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
８．６９Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝１
１．７３Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１９．０６
Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．０１（３
Ｈ，ｓ），４．２４（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．２９（１
Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），４．６６（１Ｈ，ｓ），
５．３３（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝３．２９Ｈｚ），７．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．７７
Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４２Ｈｚ），
７．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ），７．７４
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６９Ｈｚ）

【０００７】本発明者らは、該抗生物質をＤＲ４０と命
名した。以後、本明細書において該化合物を上記名称を
用いて説明する。抗生物質ＤＲ４０は、その理化学的性
質、特にＮＭＲスペクトルからダウノマイシン骨格を有
するアントラサイクリン系抗生物質であることは明らか
であり、培養白血病細胞Ｌ１２１０に対して増殖阻止作
用を有し、それ自体制癌剤として有用である。

【０００８】（マウス白血病Ｌ１２１０培養細胞に対す
る増殖阻害作用）１０％仔牛血清を含むＲＰＭＩ１６４
０培地（ローズウエルバーグ研究所）へＬ１２１０細胞
を５×１０⁴個／ｍｌ接種し、同様に本発明の物質を
０．００１〜１０μｇ／ｍｌの濃度で添加し、３７℃に
て炭酸ガス培養器中で培養し、対照区に対する５０％増
殖阻害濃度を求めた。ＤＲ４０のマウス白血病Ｌ１２１
０培養細胞に対する５０％増殖阻害濃度（ＩＣ₅₀）は
０．２５μｇ／ｍｌであった。なお、本発明の化合物
は、０．０２Ｍ酢酸（ｐＨ３．０）中に１ｍｇ／ｍｌ濃
度で溶解した後、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ（−）（日
水製薬株式会社製）で希釈し、添加した。

【０００９】本発明の化合物ＤＲ４０の製造は、ストレ
プトミセスに属し、該化合物を生産する能力を有する菌
株を適当な栄養源からなる培地に培養することにより行
うことができる。これらの生産菌株のうち具体的なもの
としては、アントラサイクリン系抗生物質ダウノマイシ
ン（ダウノルビシン）生産菌として知られるストレプト
ミセス・コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕｓ）３Ｔ−３７３株
を挙げることができる。該菌株は、昭和５７年７月１３
日付で工業技術院微生物工業技術研究所（現、工業技術
院生命工学工業技術研究所）にＦＥＲＭ ＢＰ−１６５
として国際寄託されている。

【００１０】以下に３Ｔ−３７３株の菌学的性状を示
す。 （１）形態 分枝した基中菌糸より直線状あるいは鉤状の気中菌糸を
形成し、輪生枝は認められない。成熟した胞子鎖は１０
個以上で、胞子の大きさは０．４〜０．８×１．２〜
２．０μｍ位であり、胞子の表面はほとんど平滑であ
る。時に一部の胞子の表面に刺状突起の痕跡様の突起が
僅かに認められることがある。

【００１１】（２）各種培地における生育状態（２８
℃） 色の記載について（ ）内に示す標準は、Ｈ．Ｄ．Ｔｒ
ｅｓｎｅｒ ＆ Ｅ．Ｊ．Ｂａｃｋｕｓ，Ｓｙｓｔｅｍ
ｏｆ ｃｏｌｏｒ ｗｈｅｅｌｓ ｆｏｒ Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｔｅ ｔａｘｏｎｏｍｙ（Ｊ．Ａｐｐ
ｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．ｖｏｌ．１１，３３５〜３３
８（１９６３））を用い、補足的に日本色彩研究所出版
の「色の標準」を用いた。

【００１２】（２−１）シュークロース・硝酸塩寒天培
地 うす橙あるいはにぶ橙、ないしは明るい茶（４ｅａ〜４
ｇｃ）の発育上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気中菌糸を
着生し、可溶性色素はほとんど認められない。 （２−２）グルコース・アスパラギン寒天培地 灰黄あるいは明るいオレンジ黄、ないしはうす橙（３ｅ
ｃ〜３ｅａ〜４ｅａ）の発育をする。気中菌糸は、ほと
んど形成されず、可溶性色素もほとんど生成されない。 （２−３）グリセリン・アスパラギン寒天培地 うす橙（４ｅａ）あるいは橙、ないしは暗い橙の発育上
に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気中菌糸を着生し、可溶性
色素は僅かに橙色を帯びる。 （２−４）スターチ・無機塩寒天培地 明るい橙黄あるいはうす橙（３ｅａ〜４ｅａ）、ないし
は赤味橙の発育上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気中菌糸
を着生し、可溶性色素はピンクを、あるいは僅かに橙色
を帯びる。 （２−５）チロシン寒天培地 うす橙（４ｅａ）あるいは黄茶、ないしは赤味橙の発育
上に、紫を帯びた白（１３ｂａ）ないしは灰黄味ピンク
（５ｃｂ）の気中菌糸を着生し、可溶性色素はほとんど
認められない。培養長期（約２０日）に及ぶと橙色を帯
びる。

【００１３】（２−６）栄養寒天培地 赤ないし暗い赤の発育上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）ない
し極うすい紫（１１ｃａ）の気中菌糸を着生し、可溶性
色素はピンクを帯びる。 （２−７）イースト・麦芽寒天培地 にぶ橙（４ｇｃ）あるいは黄茶、ないしは赤味茶の発育
上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気中菌糸をはじめはうっ
すらと、培養後１４日目頃より豊富に着生し、可溶性色
素は橙色を僅かに帯びる。 （２−８）オートミール寒天培地 明るい赤茶（５ｇｃ）あるいは赤茶、ないしは茶の発育
上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気中菌糸を着生し、可溶
性色素は極僅かにピンクを帯びる。 （２−９）グルコース・ペプトン・ゼラチン培地 黄茶ないしは暗い茶の発育上にうすく白色の気中菌糸を
僅かに着生し、可溶性色素は僅かに茶色を帯びる。 （２−１０）脱脂牛乳培地 表面に発育し、カゼインは凝固しないが、ペプトン化を
生ずる。可溶性色素は茶色味を呈する。

【００１４】（３）生理的性質 （３−１）生育温度範囲：イースト・麦芽寒天培地を使
用し、ｐＨ６．０において、２０℃、２５℃、３０℃、
３７℃、４６℃、５０℃の各温度で実験したところ、２
０℃から３７℃までの各温度で生育が認められ、４６℃
および５０℃では生育しなかった。最適温度は３０℃〜
３７℃付近と思われる。 （３−２）ゼラチンの液化：グルコース・ペプトン・ゼ
ラチン培地を使用し、２０℃で培養したところ、陽性で
あった。 （３−３）スターチの加水分解：スターチ・無機塩寒天
培地を使用して培養したところ、陽性であった。 （３−４）脱脂牛乳の凝固、ペプトン化：凝固はほとん
どしないが、ペプトン化する。 （３−５）メラニン様色素の生成：トリプトファン・イ
ースト・ブロス培地およびペプトン・イースト・鉄・寒
天培地では、明らかにメラニン様色素が生成する。チロ
シン寒天培地ではメラニン様色素はほとんど生成しない
か、あるいは痕跡程度生成する。

【００１５】（４）各種炭素源の利用性：フリドハム・
ゴトリーブ寒天培地上に各種の炭素源を加え、生育を見
たところ、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グ
ルコース、Ｄ−フルクトース、シュークロース、イノシ
トール、Ｄ−マンニットのいずれの炭素源も利用するこ
とができた。Ｌ−ラムノース、ラフィノースの利用は僅
かで疑わしい。

【００１６】本発明の抗生物質を生産する菌株の培養
は、放線菌の栄養源として通常使用されそれ自体公知の
培地組成物中で行うことができる。例えば、炭素源とし
ては、グルコース、グリセリン、シュークロース、澱
粉、マルトース、動植物油などが使用でき、窒素源とし
ては、大豆粉、肉エキス、酵母エキス、ペプトン、コー
ンステープリカー、綿実粕、魚粉などの有機物、ならび
に硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸ナトリウ
ム、リン酸アンモニウムなどの無機態窒素が使用でき
る。また必要に応じて食塩、塩化カリウム、リン酸塩、
その他Ｍｇ⁺⁺、Ｃａ⁺⁺、Ｃｏ⁺⁺、Ｚｎ⁺⁺、Ｆｅ⁺⁺、Ｃｕ
⁺⁺、Ｍｎ⁺⁺あるいはＮｉ⁺⁺などの二価金属塩類、さらに
はアミノ酸やビタミン類などを添加することができる。
また発酵中の発泡を抑制するため、例えばシリコーン−
ＫＭ７５（商品名：信越化学株式会社製）などの消泡剤
を添加することができる。

【００１７】温度、ｐＨ、通気撹拌および発酵時間など
の発酵条件は、使用する菌株が最大量の該化合物を蓄積
するように選択すればよい。例えば温度は、２０〜４０
℃、好ましくは２８℃、ｐＨは５〜９、好ましくは６〜
７において、発酵時間は１〜１０日間、好ましくは６日
間で発酵を行うのが有利である。

【００１８】該培養物から抗生物質ＤＲ４０を単離、採
取するには、発酵終了後の培養物を遠心分離によるか、
珪藻土のような適当な濾過助剤の存在下で濾過すること
により、菌体と上澄みまたは濾液に分離する。上澄みか
らはｐＨ７〜９でクロロホルム、トルエン、酢酸エチル
などの有機溶媒で抽出する。菌体からは、必要により、
アセトン、メタノール、エタノールもしくはブタノール
などの有機溶媒を用いて抽出する。それぞれ濃縮乾固し
て赤色の粗粉末を得る。これを吸着担体、例えば非イオ
ン性の多孔性スチレン系樹脂、シリカゲルを用いたクロ
マトグラフィーにより処理するか、陰イオン交換樹脂、
陽イオン交換樹脂を用いる処理などを単独あるいは適宜
組合せて使用することにより、抗生物質ＤＲ４０を純粋
な形で採取できる。

【００１９】以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細
に説明する。

【００２０】

【実施例】

実施例１ ストレプトミセス・コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕｓ）３Ｔ
−３７３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１６５）のＹＳ（酵母エ
キス０．３％、可溶性澱粉１．０％、寒天１．５％、ｐ
Ｈ７．２）斜面培養より１白金耳を採り、種母培地（可
溶性澱粉０．５％、グルコース０．５％、エスサンミー
ト（商品名：味の素株式会社製）１．０％、酵母エキス
０．１％、食塩０．１％、第二リン酸カリウム０．１
％、硫酸マグネシウム・７水和物０．１％、ｐＨ７．４
に調整、１２０℃、１５分加熱殺菌）１００ｍｌを含む
５００ｍｌ三角フラスコに接種した。これを２８℃にて
２日間振とう培養して種母を作成した。

【００２１】次いで生産培地（台湾酵母５．０％、可溶
性澱粉７．５％、酵母エキス０．３％、食塩０．２％、
炭酸カルシウム０．３％、ミネラル混液０．１２５％、
ｐＨ８．０に調整、１２０℃、１５分加熱殺菌）を１０
０ｌに入れた２００ｌ容タンクに上記種母２ｌ添加接種
した。但し、ミネラル混液は、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏを
２．８ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏを０．４ｇ、ＭｎＣｌ₂
・４Ｈ₂Ｏを３．２ｇ、ＺｎＳＯ₄・２Ｈ₂Ｏを０．８ｇ
を蒸留水５００ｍｌに溶解したものである。

【００２２】通気量５０ｌ／分、攪拌１００ｒｐｍ、２
８℃で６日間振とう培養すると生産物のため培養液は濃
赤褐色を呈するので、発酵を中止し培養液を集め、水で
４倍希釈し、リン酸でｐＨ２．０とした後、遠心分離に
より菌体と上澄に分離した。上澄中の生産物をダイヤイ
オンＨＰ−２０（合成吸着樹脂、三菱化成株式会社製）
１０ｌのカラムに通した。ｐＨ２の酸性水で洗浄し、次
いで６０％アセトン水（ｐＨ２．０）で溶出した。溶出
液をおよそ１／２量まで濃縮し、ｐＨを４Ｎ水酸化ナト
リウムを用いてｐＨ８．５に調整し、２０ｌのクロロホ
ルムで抽出した。クロロホルム層に０．１Ｎ酢酸２０ｌ
を加え、酸転し、水層をクロロホルム１０ｌで洗浄し
た。水層のｐＨをｐＨ８．５に調整し、再び２０ｌのク
ロロホルムで抽出し、少量まで濃縮した後、ｎ−ヘキサ
ンを添加して沈殿を得た。この沈殿をクロロホルムに溶
解後、生産物とほぼ等モル量となるように１Ｎ塩酸−メ
タノールを徐々に添加した。沈殿を除去し、上澄を濃縮
乾固し、抗生物質ＤＲ４０の粗粉末を９２ｇ得た。

【００２３】得られた粗粉末の９２ｇをｐＨ２．５に調
整した水８ｌに溶解し、ダイヤイオンＨＰ−２０（合成
吸着樹脂、三菱化成株式会社製）３ｌのカラムに通し、
吸着させた。これをメタノール−クエン酸緩衝液（０．
１Ｎ、ｐＨ３．５）（４０：６０〜７０：３０）および
６０％アセトン水（ｐＨ２．５）で段階的に溶出させる
ことにより、抗生物質ＤＲ４０を含む画分を得た。得ら
れた画分をｐＨ８．０に調整した後、クロロホルムで抽
出し、濃縮乾固することにより抗生物質ＤＲ４０の部分
精製粉末０．５９ｇを得た。

【００２４】得られた抗生物質ＤＲ４０の部分精製粉末
０．５９ｇをシリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−２００
（和光純薬株式会社製）、５０ｇ）に吸着させ、クロロ
ホルム−メタノール−ギ酸−水（１００：５：０．２：
０．１および１００：１０：０．２：０．１）で段階的
に溶出させ、抗生物質ＤＲ４０を含む画分を得た。この
画分を１％炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、濃縮乾
固した。

【００２５】これを分取用シリカゲル薄層プレート（Ｐ
Ｆ₂₅₄、２０×２０ｃｍ：メルク社製）を用い、溶媒系
としてクロロホルム−メタノール−濃アンモニア水
（５：１：０．１）を用いて精製した。抗生物質ＤＲ４
０に相当する赤色バンドををかき取り、クロロホルム−
メタノール（５：１）で抽出し、水洗後、溶媒層を濃縮
乾固した。

【００２６】この乾固物を３５％アセトニトリル水（ｐ
Ｈ２．０、リン酸でｐＨ調整）に溶解し、この溶媒を移
動相として、分取用高速液体クロマトグラフィー（本
体：ＬＣ−９０８、日本分析工業株式会社製；カラム：
カプセルパック Ｃ１８（φ３０×２５０ｍｍ）、資生
堂株式会社製）を用いて分取を行い、抗生物質ＤＲ４０
の画分を得た。抗生物質ＤＲ４０の画分をクロロホルム
で抽出し、抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、少量
まで減圧濃縮した。これに過剰のｎ−ヘキサンを添加し
て生成した沈殿を濾過集積し、真空乾燥して抗生物質Ｄ
Ｒ４０の精製粉末２７ｍｇを得た。

【００２７】なお、精製中における抗生物質ＤＲ４０の
分析は、下記する高速液体クロマトグラフィーを用いて
行った。このときＤＲ４０の保持時間は、３９．８分で
あった。 （高速液体クロマトグラフィー条件） カラム：Ｚｏｒｂａｘ ＴＭＳ（φ４．６×２５０ｍ
ｍ） 移動相：水−アセトニトリル−メタノール−リン酸（５
４０：２９０：１７０：２）１ｌにＳＤＳ１ｇを溶解
し、２Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ３．６に調整する。 流速：１．５ｍｌ／分

【００２８】以下に本発明の抗生物質ＤＲ４０の理化学
的性状を示す。 （１）外観：赤色粉末 （２）融点：１９３〜１９５℃（分解） （３）比旋光度：［α］_D ²⁰ −６７４゜（ｃ ０．０
２、ＣＨＣｌ₃） （４）ＦＡＢマススペクトル（ｍ／ｚ）：８９６（ポジ
ティブ）、８９５（ネガティブ） （５）ＵＶ吸収スペクトル：９０％メタノール溶液中で
測定した極大吸収は下記のとおりである（単位：ｎ
ｍ）。 λｍａｘ（Ｅ_1cm ^1%）：２３９（１４４）、２５７（ｓ
ｈ、１３４）、２９５（ｓｈ、１１２）、５１１（９
６） （６）ＩＲ吸収スペクトル（ＫＢｒ）：特徴的な吸収
は、下記のとおりである（単位：ｃｍ^-1）。 νｍａｘ：１７１５、１６１３、１５８２

【００２９】（７）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ（２０：１））：主要な吸
収は、下記のとおりである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：１．０７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
３Ｈｚ），１．３７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），
１．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ ＆Ｊ＝
３．６６Ｈｚ），１．６３（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈ
ｚ），１．７６（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ），１．
９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ），２．０２（１
Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．１９Ｈｚ ＆ Ｊ＝３．３０Ｈ
ｚ），２．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．６６Ｈｚ ＆
Ｊ＝４．０３Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
８．６９Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝１
１．７３Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１９．０６
Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．０１（３
Ｈ，ｓ），４．２４（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．２９（１
Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），４．６６（１Ｈ，ｓ），
５．３３（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝３．２９Ｈｚ），７．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．７７
Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４２Ｈｚ），
７．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ），７．７４
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６９Ｈｚ） （８）１３Ｃ−NMRスペクトル（１００ＭＨｚ、ＣＤＣ
ｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ（２０：１））：主要な吸収は、下記の
とおりである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：６．４８，１６．８８，２４．８
９，２８．４９，２８．９９，３１．００，３３．１
９，３５．０８，４５．８９，５６．８２，６６．２
０，６８．４９，７０．３０，７０．９４，７２．５
１，１０１．８１，１１０．７０，１１１．１２，１１
１．３４，１１１．３９，１１５．４７，１１８．６
９，１１９．７１，１１９．８１，１２０．５０，１２
４．８５，１３２．９２，１３４．３４，１３４．６
４，１３５．２２，１３５．９０，１３６．２８，１３
７．２９，１４０．０３，１５５．１４，１５５．５
９，１５６．２９，１５６．９７，１６１．０１，１６
２．０５，１８５．４４，１８６．３９，１８７．０
０，１８９．９４，２１２．３１

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記の理化学的性質を有する抗生物質Ｄ
   Ｒ４０。 （１）外観：赤色粉末 （２）融点：１９３〜１９５℃（分解） （３）比旋光度：［α］_D ²⁰ −６７４゜（ｃ ０．０
   ２、ＣＨＣｌ₃） （４）ＦＡＢマススペクトル（ｍ／ｚ）：８９６（（Ｍ
   ＋Ｈ）⁺）、８９５（（Ｍ−Ｈ）^-） （５）ＵＶ吸収スペクトル：９０％メタノール溶液中で
   測定した極大吸収は下記のとおりである（単位：ｎ
   ｍ）。 λｍａｘ（Ｅ_1cm ^1%）：２３９（１４４）、２５７（ｓ
   ｈ、１３４）、２９５（ｓｈ、１１２）、５１１（９
   ６） （６）ＩＲ吸収スペクトル（ＫＢｒ）：特徴的な吸収
   は、下記のとおりである（単位：ｃｍ^-1）。 νｍａｘ：１７１５、１６１３、１５８２ （７）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、ＣＤＣ
   ｌ₃）：主要な吸収は、下記のとおりである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：１．０７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
   ３Ｈｚ），１．３７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），
   １．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ ＆Ｊ＝
   ３．６６Ｈｚ），１．６３（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈ
   ｚ），１．７６（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ），１．
   ９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２９Ｈｚ），２．０２（１
   Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．１９Ｈｚ ＆ Ｊ＝３．３０Ｈ
   ｚ），２．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．６６Ｈｚ ＆
   Ｊ＝４．０３Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
   ８．６９Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝１
   １．７３Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１９．０６
   Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．０１（３
   Ｈ，ｓ），４．２４（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．２９（１
   Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），４．６６（１Ｈ，ｓ），
   ５．３３（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ
   ＝３．２９Ｈｚ），７．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．７７
   Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４２Ｈｚ），
   ７．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ），７．７４
   （１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０６Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，
   ｄ，Ｊ＝７．６９Ｈｚ）