JPH10130299A - Ｓ−（１，２− ジカルボキシエチル） グルタチオンの単離精製法 - Google Patents
Ｓ−（１，２− ジカルボキシエチル） グルタチオンの単離精製法Info
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- JPH10130299A JPH10130299A JP22496997A JP22496997A JPH10130299A JP H10130299 A JPH10130299 A JP H10130299A JP 22496997 A JP22496997 A JP 22496997A JP 22496997 A JP22496997 A JP 22496997A JP H10130299 A JPH10130299 A JP H10130299A
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 グルタチオン誘導体の優れた単離精製法を提
供する。 【解決手段】グルタチオン（またはその塩）とフマール
酸（またはその塩）またはマレイン酸（またはその塩）
とを反応させて、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタ
チオン（またはその塩）を合成する方法において、反
応液中に生成したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタ
チオン（またはその塩）を銅塩とした後、酢酸、ギ酸ま
たはプロピオン酸水溶液に溶かし、活性炭を加えて、溶
液中に混在するグルタチオン、酸化型グルタチオンおよ
びフマール酸の各銅塩を除去した後、さらに単離した
S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオンの銅塩を水
に溶解または懸濁し、これに硫化水素を通して銅を除去
することを特徴とする、S-(1,2- ジカルボキシエチル)
グルタチオンまたはその薬理学的に許容できる塩の単離
精製法。
供する。 【解決手段】グルタチオン（またはその塩）とフマール
酸（またはその塩）またはマレイン酸（またはその塩）
とを反応させて、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタ
チオン（またはその塩）を合成する方法において、反
応液中に生成したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタ
チオン（またはその塩）を銅塩とした後、酢酸、ギ酸ま
たはプロピオン酸水溶液に溶かし、活性炭を加えて、溶
液中に混在するグルタチオン、酸化型グルタチオンおよ
びフマール酸の各銅塩を除去した後、さらに単離した
S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオンの銅塩を水
に溶解または懸濁し、これに硫化水素を通して銅を除去
することを特徴とする、S-(1,2- ジカルボキシエチル)
グルタチオンまたはその薬理学的に許容できる塩の単離
精製法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、グルタチオン誘導
体の単離精製法に関する。さらに詳しくは、S-(1,2- ジ
カルボキシエチル) グルタチオンまたはその薬理学的に
許容できる塩の単離精製法に関する。
体の単離精製法に関する。さらに詳しくは、S-(1,2- ジ
カルボキシエチル) グルタチオンまたはその薬理学的に
許容できる塩の単離精製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチ
オン（略称：ＤＣＥ−ＧＳ）は、D.H.Calam およびS.G.
Waley らにより、牛水晶体から発見された酸性トリペプ
タイドである(Biochem. J., 86, 226(1963) ）。その
後、大森らの研究によって、肝臓や心臓にもＤＣＥ−Ｇ
Ｓが存在することが判った(Archives of Biochemistry
and Biophysics Vol.279, No.1，May 15, pp.146-150,
1990) 。また、その薬理作用については、本発明者ら
は、血液凝固阻止作用( 特開昭63-8337)、血小板凝集抑
制作用( 特開平1-79956)、抗炎症作用および/ または抗
アレルギー作用( 特開平3-48626)、ヒスタミン遊離抑制
作用および肝障害抑制作用( 特開平3-118334)などがあ
ることを見い出している。
オン（略称：ＤＣＥ−ＧＳ）は、D.H.Calam およびS.G.
Waley らにより、牛水晶体から発見された酸性トリペプ
タイドである(Biochem. J., 86, 226(1963) ）。その
後、大森らの研究によって、肝臓や心臓にもＤＣＥ−Ｇ
Ｓが存在することが判った(Archives of Biochemistry
and Biophysics Vol.279, No.1，May 15, pp.146-150,
1990) 。また、その薬理作用については、本発明者ら
は、血液凝固阻止作用( 特開昭63-8337)、血小板凝集抑
制作用( 特開平1-79956)、抗炎症作用および/ または抗
アレルギー作用( 特開平3-48626)、ヒスタミン遊離抑制
作用および肝障害抑制作用( 特開平3-118334)などがあ
ることを見い出している。
【０００３】ＤＣＥ−ＧＳは、たとえばグルタチオンと
フマール酸またはマレイン酸とを水溶液中で攪拌するだ
けで容易に生成する。しかしながら、生成したＤＣＥ−
ＧＳをその反応液から工業的に高純度で単離精製するこ
とは困難であった。グルタチオンとフマール酸またはマ
レイン酸とを反応させて生成したＤＣＥ−ＧＳを、その
反応液から単離精製する方法としては、従来から、次に
述べる３つの方法が知られている。
フマール酸またはマレイン酸とを水溶液中で攪拌するだ
けで容易に生成する。しかしながら、生成したＤＣＥ−
ＧＳをその反応液から工業的に高純度で単離精製するこ
とは困難であった。グルタチオンとフマール酸またはマ
レイン酸とを反応させて生成したＤＣＥ−ＧＳを、その
反応液から単離精製する方法としては、従来から、次に
述べる３つの方法が知られている。
【０００４】ＤＣＥ−ＧＳの単離精製の一つの方法とし
て、従来、生成した本化合物の遊離酸またはその塩を水
に溶かし、これにアルコールまたはアセトンなどの有機
溶媒を添加して沈澱させて、数回再結晶を繰り返して行
う方法( 特開平3-118334) があるが、この方法において
は溶液中に存在する原料物質であるグルタチオンおよび
フマール酸も一緒に沈澱し、ＤＣＥ−ＧＳと混在してし
まい、ＤＣＥ−ＧＳの単離精製が困難であるという欠点
があった。
て、従来、生成した本化合物の遊離酸またはその塩を水
に溶かし、これにアルコールまたはアセトンなどの有機
溶媒を添加して沈澱させて、数回再結晶を繰り返して行
う方法( 特開平3-118334) があるが、この方法において
は溶液中に存在する原料物質であるグルタチオンおよび
フマール酸も一緒に沈澱し、ＤＣＥ−ＧＳと混在してし
まい、ＤＣＥ−ＧＳの単離精製が困難であるという欠点
があった。
【０００５】つぎに、生成したＤＣＥ−ＧＳを一旦銅塩
とした後に、銅塩を水−エタノールから再結晶させる方
法があるが( 特開平3-118334) 、この再結晶によって
も、少量混在するグルタチオン、酸化型グルタチオン、
フマール酸の各銅塩を完全に除去することは困難であっ
た。
とした後に、銅塩を水−エタノールから再結晶させる方
法があるが( 特開平3-118334) 、この再結晶によって
も、少量混在するグルタチオン、酸化型グルタチオン、
フマール酸の各銅塩を完全に除去することは困難であっ
た。
【０００６】さらに、Waley らの方法は、上記の方法と
同様に、一旦ＤＣＥ−ＧＳを銅塩とした後に、これを水
に溶かし、オキシキノリンで銅を除去する方法がとられ
ている。しかしながら、この方法によっても、ＤＣＥ−
ＧＳの単離精製が不充分であることに加えて、オキシキ
ノリンが高価格であり、さらに操作が煩雑であるという
点で工業的に問題があった（Biochem. J. (1963)96,22
6) 。
同様に、一旦ＤＣＥ−ＧＳを銅塩とした後に、これを水
に溶かし、オキシキノリンで銅を除去する方法がとられ
ている。しかしながら、この方法によっても、ＤＣＥ−
ＧＳの単離精製が不充分であることに加えて、オキシキ
ノリンが高価格であり、さらに操作が煩雑であるという
点で工業的に問題があった（Biochem. J. (1963)96,22
6) 。
【０００７】このように、従来のいずれの方法によって
も、生成したＤＣＥ−ＧＳを高純度で反応液から単離精
製することは困難であった。そこで、本発明者らは、上
記のような欠点のない、工業的に優れたＤＣＥ−ＧＳの
単離精製法について鋭意検討した。その結果、生成した
ＤＣＥ−ＧＳを反応液から単離精製する際に、酢酸、ギ
酸またはプロピオン酸水溶液および活性炭を用いると、
高純度でＤＣＥ−ＧＳを単離精製することができること
を発見し、本発明を完成したものである。
も、生成したＤＣＥ−ＧＳを高純度で反応液から単離精
製することは困難であった。そこで、本発明者らは、上
記のような欠点のない、工業的に優れたＤＣＥ−ＧＳの
単離精製法について鋭意検討した。その結果、生成した
ＤＣＥ−ＧＳを反応液から単離精製する際に、酢酸、ギ
酸またはプロピオン酸水溶液および活性炭を用いると、
高純度でＤＣＥ−ＧＳを単離精製することができること
を発見し、本発明を完成したものである。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記のよう
な欠点のない、ＤＣＥ−ＧＳの優れた単離精製法を提供
するものである。
な欠点のない、ＤＣＥ−ＧＳの優れた単離精製法を提供
するものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、グ
ルタチオン（またはその塩）とフマール酸（またはその
塩）またはマレイン酸（またはその塩）とを反応させ
て、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン（また
はその塩）を合成する方法において、反応液中に生成
したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン（また
はその塩）を銅塩とした後、酢酸、ギ酸またはプロピオ
ン酸水溶液に溶かし、活性炭を加えて、溶液中に混在す
るグルタチオン、酸化型グルタチンおよびフマール酸の
各銅塩を除去した後、さらに単離したS-(1,2- ジカル
ボキシエチル) グルタチオンの銅塩を水に溶解または懸
濁し、これに硫化水素を通して銅を除去することを特徴
とする、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオンま
たはその薬理学的に許容できる塩の単離精製法に関す
る。
ルタチオン（またはその塩）とフマール酸（またはその
塩）またはマレイン酸（またはその塩）とを反応させ
て、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン（また
はその塩）を合成する方法において、反応液中に生成
したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン（また
はその塩）を銅塩とした後、酢酸、ギ酸またはプロピオ
ン酸水溶液に溶かし、活性炭を加えて、溶液中に混在す
るグルタチオン、酸化型グルタチンおよびフマール酸の
各銅塩を除去した後、さらに単離したS-(1,2- ジカル
ボキシエチル) グルタチオンの銅塩を水に溶解または懸
濁し、これに硫化水素を通して銅を除去することを特徴
とする、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオンま
たはその薬理学的に許容できる塩の単離精製法に関す
る。
【００１０】以下、本発明のＤＣＥ−ＧＳの単離精製法
についてさらに詳細に説明する。
についてさらに詳細に説明する。
【００１１】まず、たとえば、グルタチオン（またはそ
の塩）とフマール酸（またはその塩）またはマレイン酸
（またはその塩）とを水またはアルコール性水溶液中加
温または室温下で１〜２日間放置することによって、目
的化合物であるＤＣＥ−ＧＳ（またはその塩）を生成さ
せる。反応液中に生成したＤＣＥ−ＧＳ（またはその
塩）を酢酸銅（１水和物）などで銅塩とする。これを酢
酸、ギ酸またはプロピオン酸水溶液に溶かし、活性炭を
加えて、未反応または過剰のグルタチオンまたは酸化型
グルタチオンおよびフマール酸（マレイン酸とグルタチ
オンとの反応においては、未反応のマレイン酸がフマー
ル酸に転移する）の各銅塩を活性炭に吸着させて、濾別
して除去する。つぎに、濾液にアルコールなどを加え
て、析出するＤＣＥ−ＧＳの銅塩を濾取する。
の塩）とフマール酸（またはその塩）またはマレイン酸
（またはその塩）とを水またはアルコール性水溶液中加
温または室温下で１〜２日間放置することによって、目
的化合物であるＤＣＥ−ＧＳ（またはその塩）を生成さ
せる。反応液中に生成したＤＣＥ−ＧＳ（またはその
塩）を酢酸銅（１水和物）などで銅塩とする。これを酢
酸、ギ酸またはプロピオン酸水溶液に溶かし、活性炭を
加えて、未反応または過剰のグルタチオンまたは酸化型
グルタチオンおよびフマール酸（マレイン酸とグルタチ
オンとの反応においては、未反応のマレイン酸がフマー
ル酸に転移する）の各銅塩を活性炭に吸着させて、濾別
して除去する。つぎに、濾液にアルコールなどを加え
て、析出するＤＣＥ−ＧＳの銅塩を濾取する。
【００１２】さらに、このようにして得られるＤＣＥ−
ＧＳの銅塩を水に溶解または懸濁させておき、これに硫
化水素を通じて、硫化銅として銅を濾別し、濾液を減圧
下で濃縮する。このようにして得られる残渣油状物にア
ルコールなどを加えて析出する白色結晶を濾取すると、
遊離酸のＤＣＥ−ＧＳが得られる。また、残渣油状物を
水酸化物、炭酸塩や炭酸水素塩などのアルカリ金属イオ
ンまたはアルカリ土類金属イオンを与える物質で中和す
れば、それぞれ対応する塩が得られる。塩への変換は、
ＤＣＥ−ＧＳを一旦反応液から単離した後に行ってもよ
く、反応液から単離することなく行ってもよい。目的化
合物であるＤＣＥ−ＧＳまたはその塩は、ラセミ体（Ｄ
ＣＥ−ＧＳは分子中に不斉炭素原子を有するので、光学
異性体が存在する）の形で得られ、その純度は98％以上
であった。
ＧＳの銅塩を水に溶解または懸濁させておき、これに硫
化水素を通じて、硫化銅として銅を濾別し、濾液を減圧
下で濃縮する。このようにして得られる残渣油状物にア
ルコールなどを加えて析出する白色結晶を濾取すると、
遊離酸のＤＣＥ−ＧＳが得られる。また、残渣油状物を
水酸化物、炭酸塩や炭酸水素塩などのアルカリ金属イオ
ンまたはアルカリ土類金属イオンを与える物質で中和す
れば、それぞれ対応する塩が得られる。塩への変換は、
ＤＣＥ−ＧＳを一旦反応液から単離した後に行ってもよ
く、反応液から単離することなく行ってもよい。目的化
合物であるＤＣＥ−ＧＳまたはその塩は、ラセミ体（Ｄ
ＣＥ−ＧＳは分子中に不斉炭素原子を有するので、光学
異性体が存在する）の形で得られ、その純度は98％以上
であった。
【００１３】ＤＣＥ−ＧＳの薬理学的に許容できる塩と
しては、たとえばナトリウム塩、カリウム塩などのアル
カリ金属塩が挙げられ、またカルシウム塩、マグネシウ
ム塩などのアルカリ土類金属塩が挙げられる。これらの
塩は、ＤＣＥ−ＧＳ中に存在するカルボキシル基のうち
の全部が塩を形成していてもよく、またその一部が塩型
となっていてもよい。ＤＣＥ−ＧＳは、遊離酸より塩類
の方が室温において長期間安定である。
しては、たとえばナトリウム塩、カリウム塩などのアル
カリ金属塩が挙げられ、またカルシウム塩、マグネシウ
ム塩などのアルカリ土類金属塩が挙げられる。これらの
塩は、ＤＣＥ−ＧＳ中に存在するカルボキシル基のうち
の全部が塩を形成していてもよく、またその一部が塩型
となっていてもよい。ＤＣＥ−ＧＳは、遊離酸より塩類
の方が室温において長期間安定である。
【００１４】本発明のＤＣＥ−ＧＳの単離精製法におい
ては、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させるために、アル
コールを加えて銅塩を結晶させる前に、酢酸、ギ酸また
はプロピオン酸を用いてＤＣＥ−ＧＳの銅塩を溶解させ
る。これらの酸を用いると、ＤＣＥ−ＧＳ銅塩の溶解度
が高まり、さらにアルコールなどを加えてＤＣＥ−ＧＳ
を結晶化させる際に、結晶化が容易であるという利点が
ある。これに対し、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させる
際に、酸を存在させないと銅塩は微細な結晶となり、濾
取が困難であった。
ては、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させるために、アル
コールを加えて銅塩を結晶させる前に、酢酸、ギ酸また
はプロピオン酸を用いてＤＣＥ−ＧＳの銅塩を溶解させ
る。これらの酸を用いると、ＤＣＥ−ＧＳ銅塩の溶解度
が高まり、さらにアルコールなどを加えてＤＣＥ−ＧＳ
を結晶化させる際に、結晶化が容易であるという利点が
ある。これに対し、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させる
際に、酸を存在させないと銅塩は微細な結晶となり、濾
取が困難であった。
【００１５】また、本発明のＤＣＥ−ＧＳの単離精製法
において、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させる際に用い
られる酢酸、ギ酸またはプロピオン酸の代わりに、塩酸
や硫酸などの酸を使用すると、ＤＣＥ−ＧＳの一部が塩
化銅、硫酸銅などとなり、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を析出さ
せるためにアルコールを加えると、同時にそれらの塩も
析出してしまうという欠点があった。本発明のＤＣＥ−
ＧＳの単離精製法においては、次に、それらを硫化水素
ガスを通して硫化銅として銅を除去するが、銅を除去し
た濾液に塩酸または硫酸が残存し、濾液を濃縮していく
につれてその酸の濃度が高まり、濾液中に存在するＤＣ
Ｅ−ＧＳが一部分解してしまうことが判った。さらに、
濾液を中和すると塩酸および硫酸は無機塩となり、アル
コールを加えるとこれら無機塩は沈澱してしまうため、
除去するのが困難であった。これに対し、本発明のＤＣ
Ｅ−ＧＳの単離精製法のように、酢酸、ギ酸、プロピオ
ン酸を用いるとそのような欠点がなく、ＤＣＥ−ＧＳを
高純度で単離精製することができることが判った。
において、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を再結晶させる際に用い
られる酢酸、ギ酸またはプロピオン酸の代わりに、塩酸
や硫酸などの酸を使用すると、ＤＣＥ−ＧＳの一部が塩
化銅、硫酸銅などとなり、ＤＣＥ−ＧＳの銅塩を析出さ
せるためにアルコールを加えると、同時にそれらの塩も
析出してしまうという欠点があった。本発明のＤＣＥ−
ＧＳの単離精製法においては、次に、それらを硫化水素
ガスを通して硫化銅として銅を除去するが、銅を除去し
た濾液に塩酸または硫酸が残存し、濾液を濃縮していく
につれてその酸の濃度が高まり、濾液中に存在するＤＣ
Ｅ−ＧＳが一部分解してしまうことが判った。さらに、
濾液を中和すると塩酸および硫酸は無機塩となり、アル
コールを加えるとこれら無機塩は沈澱してしまうため、
除去するのが困難であった。これに対し、本発明のＤＣ
Ｅ−ＧＳの単離精製法のように、酢酸、ギ酸、プロピオ
ン酸を用いるとそのような欠点がなく、ＤＣＥ−ＧＳを
高純度で単離精製することができることが判った。
【００１６】本発明のＤＣＥ−ＧＳの単離精製法に用い
られる、酢酸、ギ酸またはプロピオン酸水溶液の濃度
は、ぞれぞれ１〜50（V/V)％程度が好ましい。
られる、酢酸、ギ酸またはプロピオン酸水溶液の濃度
は、ぞれぞれ１〜50（V/V)％程度が好ましい。
【００１７】また、本発明のＤＣＥ−ＧＳの単離精製方
法においては、未反応または過剰のグルタチオンまたは
酸化型グルタチオンおよびフマール酸の各銅塩を除去す
る目的で、活性炭を使用する。活性炭を用いないと、数
回再結晶しても、原料物質であるグルタチオンおよびフ
マール酸は除去することができなかった。なぜならば、
グルタチオンの銅塩およびフマール酸の銅塩は、ＤＣＥ
−ＧＳの銅塩よりも難溶性であるからである。本発明の
ＤＣＥ−ＧＳの単離精製法に用いられる活性炭の量は、
S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン銅塩に対
し、５〜20(W/W)％程度が好ましい。
法においては、未反応または過剰のグルタチオンまたは
酸化型グルタチオンおよびフマール酸の各銅塩を除去す
る目的で、活性炭を使用する。活性炭を用いないと、数
回再結晶しても、原料物質であるグルタチオンおよびフ
マール酸は除去することができなかった。なぜならば、
グルタチオンの銅塩およびフマール酸の銅塩は、ＤＣＥ
−ＧＳの銅塩よりも難溶性であるからである。本発明の
ＤＣＥ−ＧＳの単離精製法に用いられる活性炭の量は、
S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオン銅塩に対
し、５〜20(W/W)％程度が好ましい。
【００１８】
【実施例】以下、実施例を挙げて、本発明をさらに詳細
に説明する。
に説明する。
【００１９】［実施例１］S-(1,2- ジカルボキシエチ
ル) グルタチオン三ナトリウム塩の合成300ml 入りの三
角フラスコ中で水酸化ナトリウム9.5gを水200ml に溶か
し、これにフマール酸12.75g(0.11mol) およびグルタチ
オン30.7g(0.1mol) を加えて、密栓して、50℃、４時間
攪拌した。
ル) グルタチオン三ナトリウム塩の合成300ml 入りの三
角フラスコ中で水酸化ナトリウム9.5gを水200ml に溶か
し、これにフマール酸12.75g(0.11mol) およびグルタチ
オン30.7g(0.1mol) を加えて、密栓して、50℃、４時間
攪拌した。
【００２０】この反応液に酢酸50mlおよび酢酸銅(1水和
物)22.0g(0.11mol) を加えて攪拌して溶かし、さらに活
性炭約3gを加えて30分間攪拌し、濾過した。活性炭は少
量の水で洗った。濾液と洗液を合わせ冷却後、これにメ
タノール１リットルを一挙に加えて、均一になるまでか
き混ぜ、析出する淡青色の銅塩を濾取し、メタノールで
洗浄し乾燥させる。
物)22.0g(0.11mol) を加えて攪拌して溶かし、さらに活
性炭約3gを加えて30分間攪拌し、濾過した。活性炭は少
量の水で洗った。濾液と洗液を合わせ冷却後、これにメ
タノール１リットルを一挙に加えて、均一になるまでか
き混ぜ、析出する淡青色の銅塩を濾取し、メタノールで
洗浄し乾燥させる。
【００２１】次に、この銅塩を再結晶させるために、10
(V/ V)% の酢酸水溶液400ml に溶かし、活性炭約3gを加
えて、20〜30分間攪拌後、活性炭を濾別し、濾液を冷却
後、これにメタノール１リットルを一挙に加えて、析出
する銅塩を濾取し、メタノールで洗浄する。更に、同様
にして銅塩を再々結晶し、銅塩として40g を得た。
(V/ V)% の酢酸水溶液400ml に溶かし、活性炭約3gを加
えて、20〜30分間攪拌後、活性炭を濾別し、濾液を冷却
後、これにメタノール１リットルを一挙に加えて、析出
する銅塩を濾取し、メタノールで洗浄する。更に、同様
にして銅塩を再々結晶し、銅塩として40g を得た。
【００２２】さらに、得られた銅塩に水800ml を加えて
溶かし( 一部溶けない) 、攪拌下、硫化水素ガスを通じ
て硫化銅として濾別後、濾液を減圧下、40℃以下で濃縮
した。アメ状となった残渣を水200ml に溶かし、これに
10% 水酸化ナトリウム液を滴下してpH7.4 に調整した
後、40℃で濃縮し、アメ状残渣にエタノールを加えて結
晶化させ冷却後、これを濾取した。これを水−エタノー
ルから再結晶させた。得られた結晶を40℃、減圧乾燥さ
せると白色粉末結晶の目的化合物34g(収率：65.8%)を得
た。
溶かし( 一部溶けない) 、攪拌下、硫化水素ガスを通じ
て硫化銅として濾別後、濾液を減圧下、40℃以下で濃縮
した。アメ状となった残渣を水200ml に溶かし、これに
10% 水酸化ナトリウム液を滴下してpH7.4 に調整した
後、40℃で濃縮し、アメ状残渣にエタノールを加えて結
晶化させ冷却後、これを濾取した。これを水−エタノー
ルから再結晶させた。得られた結晶を40℃、減圧乾燥さ
せると白色粉末結晶の目的化合物34g(収率：65.8%)を得
た。
【００２３】 元素分析 C14H18O10N3SNa3 ・1.5H2O(516.366) として、 理論値（％）：Ｃ，３２．５６； Ｈ，４．１０； Ｎ，８．１４ 実測値（％）：Ｃ，３２．６７； Ｈ，４．２６； Ｎ，８．１３
【００２４】
【発明の効果】本発明の単離精製法によって、グルタチ
オン（またはその塩）とフマール酸（またはその塩）ま
たはマレイン酸（またはその塩）との反応液から目的化
合物であるＤＣＥ−ＧＳ（またはその塩）を高純度で得
ることができる。したがって、本発明のＤＣＥ−ＧＳ
（またはその塩）の単離精製法は、工業的に優れた方法
である。
オン（またはその塩）とフマール酸（またはその塩）ま
たはマレイン酸（またはその塩）との反応液から目的化
合物であるＤＣＥ−ＧＳ（またはその塩）を高純度で得
ることができる。したがって、本発明のＤＣＥ−ＧＳ
（またはその塩）の単離精製法は、工業的に優れた方法
である。
Claims (2)
- 【請求項１】 グルタチオン（またはその塩）とフマー
ル酸（またはその塩）またはマレイン酸（またはその
塩）とを反応させて、S-(1,2- ジカルボキシエチル) グ
ルタチオン（またはその塩）を合成する方法において、
反応液中に生成したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グ
ルタチオン（またはその塩）を銅塩とした後、酢酸、ギ
酸またはプロピオン酸水溶液に溶かし、活性炭を加え
て、溶液中に混在するグルタチオン、酸化型グルタチン
およびフマール酸の各銅塩を除去した後、さらに単離
したS-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチオンの銅塩
を水に溶解または懸濁し、これに硫化水素を通して銅を
除去することを特徴とする、S-(1,2- ジカルボキシエチ
ル) グルタチオンまたはその薬理学的に許容できる塩の
単離精製法。 - 【請求項２】 S-(1,2- ジカルボキシエチル) グルタチ
オン銅塩に対する活性炭の量が５〜20(W/W) ％であっ
て、酢酸、ギ酸またはプロピオン酸水溶液の濃度が１〜
50(V/V) ％である請求項１記載の単離精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22496997A JPH10130299A (ja) | 1996-09-04 | 1997-08-21 | Ｓ−（１，２− ジカルボキシエチル） グルタチオンの単離精製法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8-233755 | 1996-09-04 | ||
| JP23375596 | 1996-09-04 | ||
| JP22496997A JPH10130299A (ja) | 1996-09-04 | 1997-08-21 | Ｓ−（１，２− ジカルボキシエチル） グルタチオンの単離精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10130299A true JPH10130299A (ja) | 1998-05-19 |
Family
ID=26526352
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22496997A Withdrawn JPH10130299A (ja) | 1996-09-04 | 1997-08-21 | Ｓ−（１，２− ジカルボキシエチル） グルタチオンの単離精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10130299A (ja) |
-
1997
- 1997-08-21 JP JP22496997A patent/JPH10130299A/ja not_active Withdrawn
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20041102 |