JPH10310535A

JPH10310535A - 多臓器不全予防及び／又は治療剤

Info

Publication number: JPH10310535A
Application number: JP9157645A
Authority: JP
Inventors: Hirohiko Arisawa; 広彦有沢; Hiroaki Masunaga; 博明升永; Hiromi Ogawa; 浩美小川; Kanji Too; 侃二東尾
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1997-03-11
Filing date: 1997-05-30
Publication date: 1998-11-24
Anticipated expiration: 2017-05-30
Also published as: US20010051146A1; JP4006058B2; WO1998040096A1; EP0914829A1; AU6309298A; EP0914829A4; AU725441B2; DE69839621D1; EP0914829B1; ES2308802T3; CA2252711A1; US20030153489A1; ATE398460T1; US7306791B2

Abstract

(57)【要約】【課題】多臓器不全予防及び／又は治療剤の提供。【解決手段】腫瘍細胞壊死因子−II (ＴＣＦ−II) ま
たは肝細胞増殖因子 (ＨＧＦ) を有効成分とする、多臓
器不全予防及び／又は治療剤。熱傷、播種性血管内凝固
（ＤＩＣ）、循環不全、出血性ショック、感染症、急性
膵炎、虚血性障害、肝腎症候群、消化管出血、栄養代謝
不全、末期癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、放
射線障害などによる全身状態の悪化、及びカへキシー
（悪液質）などからの多臓器不全への進行の予防及び／
又は治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な多臓器不全
予防及び／又は治療剤に関する。本発明により、熱傷、
播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、循環不全、出血性ショッ
ク、感染症、急性膵炎、虚血性障害、肝腎症候群、消化
管出血、栄養代謝不全、末期癌、後天性免疫不全症候群
（ＡＩＤＳ）、放射線障害などによる全身状態の悪化、
及びカヘキシー（悪液質）などからの多臓器不全への進
行を予防し、あるいは治療することができる。

【０００２】

【従来の技術】多臓器不全の発症あるいは増悪は、その
要因からみると、(1) 同一因子による、並列に数個の臓
器障害の誘発、(2) ある臓器の異常による、特定の臓器
異常の誘発、(3) 医源性因子の関与、の３様式に大きく
分類される。重度外傷や大きな手術による過度の侵襲、
感染症、ショックなどは直接あるいは各種のメディエー
ターを介して(1) の様式で多臓器不全の発症、増悪に関
与する。外傷による臓器障害や原発性の肝不全などに併
発してみられる多臓器不全には、臓器相関の機序が働い
た(2) の様式の関与が大きい。(3) は集中治療で行われ
る医療行為や、ある臓器障害への対応策が他の臓器へ障
害性に働く様式である。しかし、実際の症例において
は、これら３つの様式が絡み合いつつ病態の進行あるい
は悪化に関与しているのが実状である。一般に多臓器不
全の治療成績はきわめて不良であり、広範囲にわたる対
応策をとっても、救命率は２０〜３０％と低いのが実状
である。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】上述の状況に鑑み、本
発明者らは多臓器不全の予防及び／又は治療薬を求めて
鋭意探索した結果、ヒト線維芽細胞由来の糖蛋白質であ
る腫瘍細胞壊死因子−II（Tumor cytotoxic factor−I
I; ＴＣＦ−II) またはヒト血液、特に劇症肝炎患者の
血液由来の蛋白性物質である肝細胞増殖因子 (hepatocy
te growth factor;ＨＧＦ）に熱傷、播種性血管内凝固
（ＤＩＣ）、循環不全、出血性ショック、感染症、急性
膵炎、虚血性障害、肝腎症候群、消化管出血、栄養代謝
不全、末期癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、放
射線障害などによる全身状態の悪化、及びカへキシー
（悪液質）などを原因とする多臓器不全に対し、優れた
予防及び／又は治療効果があることを見いだした。従っ
て本発明は、ＴＣＦ−IIまたはＨＧＦを有効成分とする
多臓器不全予防及び／又は治療剤を提供することを課題
とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、ＴＣＦ−IIま
たはＨＧＦを有効成分とする多臓器不全予防及び／又は
治療剤に関する。本発明の多臓器不全予防及び／又は治
療剤は、熱傷、播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、循環不
全、出血性ショック、感染症、急性膵炎、虚血性障害、
肝腎症候群、消化管出血、栄養代謝不全、末期癌、後天
性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、放射線障害などによる
全身状態の悪化、及びカヘキシー（悪液質）などからの
多臓器不全への進行の予防及び／又は治療に有用であ
る。これらの多臓器不全は、熱傷、外科手術、化学物質
（医薬を含む）の投与、放射線の照射、他の疾病との併
発等によって生ずる。

【０００５】

【発明の実施の形態】本発明の有効成分であるＴＣＦ−
IIは、本発明者らによって見出された、ヒト線維芽細胞
由来の公知の蛋白質であり、下記の特性を有する。ｉ) 分子量（ＳＤＳ電気泳動法）非還元下： 78,000±2,000 又は74,000±2,000 還元下： 52,000±2,000 （共通バンドＡ) 30,000±2,000 （バンドＢ） 26,000±2,000 （バンドＣ） ii) 等電点： 7.4 〜 8.6 上記ＴＣＦ−IIは、ヒト線維芽細胞培養液を濃縮しイオ
ン交換体に吸着させ、その溶出液をアフィニティークロ
マトグラフィーを用いて精製する方法（WO 90/10651 号
公報）、或いは遺伝子工学的手法（WO 92/01053 号公
報）によって得ることができる。

【０００６】本発明の有効成分であるＴＣＦ−IIは、線
維芽細胞由来のものを用いることが可能であり、又、WO
90/10651 号公報に記載された遺伝子配列に基づいて、
微生物や他の細胞より遺伝子組換え操作により生産され
たものでもよい。又、WO 92/01053 号公報に開示された
遺伝子工学的手法により得られたものを用いてもよい。
この時、宿主細胞又は微生物の違いによる糖鎖の異なっ
たものや、糖鎖の結合していないものであっても使用可
能である。しかし、糖鎖は生体内の代謝速度に関係して
いるため、糖鎖の結合しているものを用いることが望ま
しい。これらの方法により得られたＴＣＦ−IIは、通常
の単離精製法によってさらに濃縮、精製することができ
る。例えば、有機溶媒による沈殿法、塩析、ゲル濾過、
モノクローナル抗体を用いたアフィニティークロマト、
電気泳動法等が挙げられる。モノクローナル抗体を用い
たアフィニティークロマトによる精製は、特開平5-97号
公報に開示されているモノクローナル抗体を用いて精製
することができる。得られた精製ＴＣＦ−IIは、凍結乾
燥或いは凍結保存することができる。その他、ＴＣＦ−IIと同様の活性を有するものであれ
ば、本発明と同様の薬剤として利用可能である。例え
ば、ＴＣＦ−II蛋白質に５個のアミノ酸が挿入された肝
細胞増殖因子（ＨＧＦ；特開昭63-22526号）、あるいは
精製Scatter Factor(ＳＦ；Gherardi and Stocker, Nat
ure, 346, 228 (1990))などが挙げられる。

【０００７】また、本発明の有効成分のＨＧＦは、肝細
胞を増殖させる活性を有し、劇症肝炎患者の血液から単
離された、下記の特性を有する公知の蛋白性物質である
（特許第 2564486号明細書) 。 i) 分子量(SDS-PAGE)；非還元下；76,000〜92,000 ii) 前記活性は56℃、15分間の加熱では失活せず、80
℃、10分間の加熱により失活する、 iii) トリプシンあるいはキモトリプシン消化により前
記活性が失活する、 iv) ヘパリンに強い親和性を有する。このＨＧＦは、血漿を56℃程度で約15分間加熱し、硫安
濃度約 1.1〜1.2Mの沈澱区分を取得し、これをゲルろ
過、ＤＥＡＥ等陰イオン交換体によるイオン交換クロマ
トグラフィーで精製して得ることができる。また遺伝子
工学的手法によっても得ることができる。

【０００８】本発明の多臓器不全予防及び／又は治療剤
は、注射剤として静脈、筋肉内、及び皮下に投与するこ
とができる。これらの製剤は公知の製剤学的製法に準じ
製造され、必要に応じｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤等
を添加することができる。本発明の製剤を患者に投与す
る場合、投与患者の症状の程度、健康状態、年齢、体重
等の条件によって異なり、特に限定されないが、成人１
日当たり精製ＴＣＦ−IIとして 0.6mg〜600mg 、好まし
くは 6mg〜60mgを含有する製剤を１日１回若しくはそれ
以上投与すれば良い。また、同様にＨＧＦにおいてもこ
の程度の量を同様に投与すれば良い。このように投与す
ることにより、前記要因に基づく種々の多臓器不全を予
防、あるいは症状を軽減し、さらに治療することができ
る。

【０００９】以下に実施例を挙げて本発明を更に詳しく
説明する。しかし、これらは単に例示するのみであり、
本発明はこれらにより限定されるものではない。

【００１０】

【実施例１】ＴＣＦ−IIの精製 WO 90/10651 号公報に開示された方法及び東尾らの方法
（Higashio, K. et al, B.B.R.C., vol.170, pp397-404
(1990))に準じて細胞を培養し、精製ＴＣＦ−IIを得
た。即ち、ヒト繊維芽細胞ＩＭＲ−90 (ATCC CCL 186)
細胞を５％仔牛血清を含むＤＭＥＭ培地 100mlをいれた
ローラーボトルに 3×10⁶個移植し、 0.5〜２回転／分
の回転速度で回転させながら７日間培養を続けた。総細
胞数が 1×10⁷個になったところでトリプシンにより細
胞を剥離し細胞をボトル底面に集め、５〜９メッシュの
セラミック100g (東芝セラミック社）を殺菌して投入
し、24時間静置して培養した。その後、上記培養液を 5
00ml加え、培養を継続した。７〜10日ごとに培地を全量
回収し、新鮮培地を補給した。このようにして２ヵ月間
生産を継続し、ローラーボトル一本当たり4Lの培養液を
回収した。このようにして得た培養液当たりの比活性は
32μg/mlであった。培養液750Lをメンブランフィルター
(MW 6000カット；アミコン社）処理によりＵＦ濃縮し、
CMセファデックスC-50(ファルマシア社）、Con-A セフ
ァロース（ファルマシア社）、Mono Sカラム（ファルマ
シア社）、ヘパリンセファロース（ファルマシア社）に
よる５段階のクロマト精製を行い、精製ＴＣＦ−IIを得
た。この精製ＴＣＦ−IIは、前記した分子量、等電点を
示す。

【００１１】

【実施例２】遺伝子組換えＴＣＦ−IIの生産 WO 92/01053 号公報に開示された方法に従い、ＴＣＦ−
II遺伝子を組み込んだ細胞を培養し、精製ＴＣＦ−IIを
得た。即ち、形質転換ナマルワ(Namalwa) 細胞を培養
し、培養液20L を得た。この培養液を CM-セファデック
スC-50クロマト（ファルマシア社）、Con-A セファロー
ス CL-6Bクロマト（ファルマシア社）、Mono Sカラム
（ファルマシア社）を装着したＨＰＬＣの順に処理を行
い、約11mgの遺伝子組換え型ＴＣＦ−IIを得た。このＴ
ＣＦ−IIも前記と同様の分子量、等電点を示す。

【００１２】

【実施例３】遺伝子組換えＨＧＦの生産ＨＧＦｃＤＮＡの発現ベクターは、プラスミドpcDNA1の
NheI部位にマウスジヒドロ葉酸還元酵素（DHFR）転写単
位、2.4kb 断片を挿入し、さらにMiyazawaらによりクロ
ーニングされたＨＧＦｃＤＮＡ (BBRC 163, 967-973, 1
989) 2.3kbをサイトメガロウイルス（CMV)プロモーター
の下流に挿入して構築した。構築したＨＧＦｃＤＮＡ発
現ベクター10μg とpSV2 neo 1μg をリポフェチンによ
るリポソーム介在トランスフェクション法によりナマル
ワ（Namalwa)細胞にコトランスフェクションした。形質
転換した細胞をG418耐性により選別した後、続いてメト
レキセート（MTX)により遺伝子増幅した。ＨＧＦ高生産
株を2Lローラーボトルを用い、5 ％ウシ血清を含むＤＭ
ＥＭ培地1Lで37℃、 7日間培養した。約20本のローラー
ボトル培養（回転数約2 回／分) を実施し、約21L の培
養液を得た。このようにして得られた培養液は、4mg/L
のＨＧＦを含んでいた。ＨＧＦを含む培養液20L につい
て、東尾らの方法（Higashio et al., BBRC vol. 170,
397-404, 1990) を若干改変し、CMセファデックスC-50
（ファルマシア社) 、Mono Sカラム（ファルマシア
社）、ヘパリン5-PW（東ソー社）のFPLCによる3 段階の
クロマト精製を行い、SDS-電気泳動的に均一な精製ＨＧ
Ｆを約60％の収率で得た。

【００１３】

【実施例４】エンドトキシン誘発多臓器不全に対する防御効果７週齢のＩＣＲ系雄マウス（１群25匹）に実施例２で得
られたＴＣＦ−II(100μg/匹）を１日２回５日間（但し
最終日のみ１回投与）静脈内投与した。又、対照とし
て、溶媒（前記pH6.03のクエン酸緩衝液、以下同じ）の
みを投与した群をおいた。最終投与６時間後に、致死量
のエンドトキシン（LPS-E. coli; 20mg/kg、ディフコラ
ボラトリーズ社）を静脈内投与した。生存率を図１に示
す。溶媒投与群では４日以後の生存率が12％ (3/25匹）
であったのに対し、ＴＣＦ−II投与群では56％(14/25
匹）が生存した（図１）。この結果より、ＴＣＦ−IIが
エンドトキシンに誘発される多臓器不全に対し、優れた
防御効果を有することが確認された。

【００１４】

【実施例５】エンドトキシン誘発多臓器不全に対する防御効果７週齢のＩＣＲ系雄マウス（１群15匹）に実施例３で得
られたＨＧＦ(100μg/匹）を１日２回５日間（但し最終
日のみ１回投与）静脈内投与した。又、対照として、溶
媒（クエン酸緩衝液 pH 6.03 ）のみを投与した群をお
いた。最終投与６時間後に、致死量のエンドトキシン
（LPS-E. coli; 20mg/kg、ディフコラボラトリーズ社）
を静脈内投与した。生存率の結果を図２に示す。この結
果、溶媒投与群では４日目以降の生存率が13％（2/15
匹）であったのに対し、ＨＧＦ１mg/kg 投与群の生存率
は、33％（5/15匹）であった。この結果より、ＨＧＦが
エンドトキシンにより誘発される多臓器不全に対し、優
れた防御効果を有することが確認された。

【００１５】

【実施例６】エンドトキシン誘発多臓器不全に対する防御効果６週齢の Wistar 系雄ラットに浸透圧ポンプ（モデル I
2001、Alzet 社）を用いてエンドトキシン（LPS-E. co
li; 10mg/kg/日、ディフコラボラトリーズ社）を持続注
入し、多臓器不全を発症させた。発症後群分け（１群９
匹）し、溶媒又はＴＣＦ−II 1mg/kg を１日１回７日間
静脈内投与した。最終投与終了翌日のラットの臨床検査
値を表１に示す。溶媒投与群では総蛋白、アルブミン、
プラスミノーゲン及び総コレステロールが低下しカへキ
シー状態を示したが、ＴＣＦ−II投与群では有意にこれ
らの値が改善した（表１）。この結果より、ＴＣＦ−II
がエンドトキシンにより誘発されるカヘキシーを原因と
する多臓器不全に対し、優れた防御効果を有することが
確認された。

【００１６】

【表１】 ─────────────────────────────────── ＬＰＳ投与マウス検査項目健常マウス ───────────── 溶媒投与群ＴＣＦ投与群 ─────────────────────────────────── 総蛋白(g/dl) 5.4 ±0.1 4.5±0.1 5.5±0.1 ^** アルブミン(g/dl) 2.5 ±0.1 1.8±0.1 2.4±0.0 ^** プラスミノーゲン（％） 105.5±7.1 74.4±3.6 96.6±2.7 ^** 総コレステロール (mg/dl) 73.2 ±2.3 59.0±3.6 88.6±2.9 ^** ─────────────────────────────────── （^**：溶媒投与群に対する有意差（p<0.01) を表す。）

【００１７】

【実施例７】ジメチルニトロサミン誘発多臓器不全に対する防御効果７週齢のＩＣＲ系雄マウス（１群25匹）にＴＣＦ−II(1
00μg/匹）を１日２回５日間（但し最終日のみ１回投
与）静脈内投与した。又、対照として、溶媒のみを投与
した群をおいた。最終投与６時間後に、致死量の0.15％
ジメチルニトロサミン（ＤＭＮ)(溶媒：生理食塩水、0.
1ml/10g 体重、東京化成工業社）を静脈内投与した。発
症２４時間後のマウスの臨床検査値の結果を表２に、及
び生存率の結果を図３に示す。溶媒投与群はＧＯＴ及び
ＧＰＴの異常な上昇、及び血液凝固時間の延長がみられ
たが、ＴＣＦ−II投与群では有意にこれを抑制した（表
２）。又、溶媒投与群では４日以後は全例が死亡したの
に対し、ＴＣＦ−II投与群では全例が生存した（図
３）。この結果より、ＴＣＦ−IIがジメチルニトロサミ
ンに誘発される多臓器不全に対し、優れた防御効果を有
することが確認された。

【００１８】

【表２】 ───────────────────────────────── ＤＭＮ投与マウス検査項目健常マウス ─────────────── 溶媒投与群ＴＣＦ投与群 ───────────────────────────────── ＧＯＴ (U/L) 42 ± 2 810 ± 252 51 ± 8^** ＧＰＴ (U/L) 28 ± 3 1580 ± 506 97 ± 21 ^** 血液凝固時間（秒） 17 ± 0.0 22 ± 2.2 17 ± 0.1^** ───────────────────────────────── (^**：溶媒投与群に対する有意差（ｐ＜0.01) を表す。)

【００１９】

【実施例８】薬物中毒を原発とした多臓器不全に対する防御効果７週齢のＩＣＲ系雄マウス（１群25匹）に、ＴＣＦ−II
(100μg/匹）を１日２回５日間（但し最終日のみ１回投
与）静脈内投与した。又、対照として、溶媒のみを投与
した群をおいた。最終投与６時間後に、致死量のチオア
セタミド (600mg/kg、和光純薬工業社）、及びアセトア
ミノフェン (800mg/kg、シグマ社）を投与した。生存率
の結果を図４及び図５に示す。この結果、チオアセタミ
ド試験において、溶媒投与群ではチオアセタミド処置４
日以降の生存率は12％ (3/25匹）であったのに対し、Ｔ
ＣＦ−II投与群では92％(23/25匹）が生存した。又、ア
セトアミノフェン試験において、溶媒投与群ではアセト
アミノフェン処置翌日に68％(17/25匹）が死亡したのに
対し、ＴＣＦ−II投与群では全例が生存した。この結果
より、ＴＣＦ−IIがチオアセタミド、及びアセトアミノ
フェンなどの薬物により誘発される多臓器不全に対し、
優れた防御効果を有することが確認された。

【００２０】

【実施例９】塩化第二水銀による腎不全を原発障害とする多臓器不全
に対する防御効果７週齢のＩＣＲ系雄マウス（１群25匹）にＴＣＦ−II(1
00μg/匹）を１日２回５日間（但し最終日のみ１回投
与）静脈内投与した。又、対照として、溶媒のみを投与
した群をおいた。最終投与６時間後に、致死量の塩化第
二水銀（和光純薬工業社）を静脈内投与した。生存率の
結果を図６に示す。溶媒投与群では４日以後の生存率は
８％ (2/25匹）であったのに対し、ＴＣＦ−II投与群で
は全例が生存した（図６）。この結果より、ＴＣＦ−II
が塩化第二水銀による腎不全に誘発される多臓器不全に
対し、優れた防御効果を有することが確認された。

【００２１】

【実施例１０】トリプシン誘発多臓器不全に対する防御効果８週齢の Wistar 系雄ラットに、溶媒（１群55匹）又は
ＴＣＦ−II 1mg/kg(１群35匹）を１日２回５日間（計10
回）静脈内投与し、最終投与翌日に致死量のトリプシン
（シグマ社；50000U/ml)とタウロコール酸（三光純薬
社；100mg/ml) との混合液0.16mlを総胆管より膵臓に向
けて注入した。生存率の結果を図７に示す。溶媒投与群
では６日以後の生存率は、５％ (3/55匹）であったのに
対し、ＴＣＦ−II投与群の生存率は29％(10/35匹）であ
った（図７）。この結果より、ＴＣＦ−IIがトリプシン
に誘発される多臓器不全に対し、優れた防御効果を有す
ることが確認された。

【００２２】

【実施例１１】熱傷誘発多臓器不全に対する防御効果７週齢の Wistar 系雄ラット（１群50匹）に、溶媒又は
ＴＣＦ−II 1mg/kg を１日２回６日間（但し最終日のみ
１回投与）静脈内投与した。最終投与６時間後、剃毛し
た背部に加熱プレート（岩城硝子社）で25％熱傷(250
℃、30秒）を作製した。生存率を図８に示す。又、熱傷
処置４時間後のラットの臨床検査値を表３に示す。25％
熱傷を受けたラット（熱傷処置４時間後）において、循
環血漿量の減少（Ｈｔ値上昇、総蛋白減少、アルブミン
減少）、肝腎障害（ＧＰＴ上昇、ＢＵＮ上昇）が見ら
れ、熱傷ショックによる多臓器不全が起きていることが
確認された（表３）。又、溶媒投与群の６日以後の生存
率は、12％ (6/50匹）であったのに対し、ＴＣＦ−II投
与群の生存率は、40％(20/50匹）であった（図８）。こ
れらの結果より、ＴＣＦ−IIが熱傷により誘発される多
臓器不全に対し、優れた防御効果を有することが確認さ
れた。

【００２３】

【表３】 ──────────────────────────────── 検査項目熱傷処置前熱傷処置４時間後 ──────────────────────────────── ヘマトクリット値（％） 44.8 ± 1.8 53.9 ± 3.6 総蛋白（g/dl) 7.2 ± 0.5 5.8 ± 0.7 アルブミン（g/dl) 3.1 ± 0.2 2.4 ± 0.3 ＧＰＴ (U/L) 20.5 ± 5.8 150.0 ± 30.4 尿素窒素 (mg/dl) 21.5 ± 1.9 43.5 ± 7.3 ────────────────────────────────

【００２４】

【実施例１２】熱傷誘発多臓器不全に対する防御効果９週齢の Wistar 系雄ラットに85℃の熱湯で40％熱傷を
作製した。熱傷後、１群27匹に群分けし、溶媒又はＴＣ
Ｆ−II 1mg/kg を１日３回３日間（計９回）静脈内投与
した。生存率を図９に示す。溶媒投与群の８日以後の生
存率は37％(10/27匹）であったのに対し、ＴＣＦ−II投
与群の生存率は67％ (18/27 匹）であった。これらの結
果より、ＴＣＦ−IIが熱傷により誘発される多臓器不全
に対し、優れた防御効果を有することが確認された。

【００２５】

【実施例１３】熱傷誘発多臓器不全に対する防御効果９週齢のWistar系雄ラットに85℃の熱湯で40％熱傷を作
製した。熱傷後、１群10匹に群分けし、溶媒又はＨＧＦ
1mg/kg を１日３回３日間（計９回）静脈内投与した。
生存率を図10に示す。溶媒投与群の11日目以降の生存率
は20％（2/10匹）であったのに対し、ＨＧＦ 1mg/kg 投
与群の生存率は40％（4/10匹）であった。この結果よ
り、ＨＧＦが熱傷により誘発される多臓器不全に対し、
優れた防御効果を有することが確認された。

【００２６】

【実施例１４】ＴＣＦ−II製剤の製造実施例２により得られた遺伝子組換えＴＣＦ−IIの注射
剤の製造例を示す。上記組成をpH6.03のクエン酸緩衝液(10mM クエン酸ナト
リウム、0.3M食塩、0.03％ポリソルベートより構成され
る）に溶解し全量を20mlに調製し、滅菌後バイアル瓶に
２mlづつ分注したものを凍結乾燥後密封した。

【００２７】上記組成を注射用生理食塩水に溶解し全量を20mlに調製
し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを凍結乾
燥後密封した。

【００２８】上記組成をpH6.03のクエン酸緩衝液に溶解し全量を20ml
に調製し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを
凍結乾燥後密封した。

【００２９】上記組成を注射用生理食塩水に溶解し全量を20mlに調製
し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを凍結乾
燥後密封した。

【００３０】上記組成を注射用生理食塩水に溶解し全量を20mlに調製
し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを凍結乾
燥後密封した。

【００３１】上記組成をpH6.03のクエン酸緩衝液に溶解し全量を20ml
に調製し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを
凍結乾燥後密封した。

【００３２】上記組成を注射用生理食塩水に溶解し全量を20mlに調製
し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを凍結乾
燥後密封した。

【００３３】上記組成をpH6.03のクエン酸緩衝液に溶解し全量を20ml
に調製し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを
凍結乾燥後密封した。

【００３４】

【実施例１５】ＨＧＦ製剤の製造実施例３により得られた遺伝子組換えＨＧＦの注射剤の
製造例を示す。上記組成をpH6.08のクエン酸緩衝液に溶解し全量を20ml
に調製し、滅菌後バイアル瓶に２mlづつ分注したものを
凍結乾燥後密封した。

【００３５】上記組成を注射用生理食塩水に溶解し全量を20mlに調製
し、滅菌後バイアル瓶に2 mlづつ分注したものを凍結乾
燥後密封した。

【００３６】上記組成を pH7.0の 0.01Mリン酸緩衝液に溶解し全量を
20mlに調製し、滅菌後バイアル瓶に20mlづつ分注したも
のを凍結乾燥後密封した。

【００３７】

【発明の効果】本発明によりＴＣＦ−IIあるいはＨＧＦ
を有効成分とする多臓器不全予防及び／又は治療剤が提
供される。本発明の、多臓器不全予防及び／又は治療剤
は、熱傷、播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、循環不全、出
血性ショック、感染症、急性膵炎、虚血性障害、肝腎症
候群、消化管出血、栄養代謝不全、末期癌、後天性免疫
不全症候群（ＡＩＤＳ）、放射線障害などによる全身状
態の悪化、及びカヘキシー（悪液質）などからの多臓器
不全への進行を予防及び／又は治療するのに有用であ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＴＣＦ−IIのエンドトキシン誘発多臓器不全に
対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図２】ＨＧＦのエンドトキシン誘発多臓器不全に対す
る防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＨＧＦ投与群 ●：溶媒投与群

【図３】ＴＣＦ−IIのジメチルニトロサミン誘発多臓器
不全に対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図４】ＴＣＦ−IIの薬物中毒（チオアセタミド）を原
発とした多臓器不全に対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図５】ＴＣＦ−IIの薬物中毒（アセトアミノフェン）
を原発とした多臓器不全に対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図６】ＴＣＦ−IIの塩化第二水銀による腎不全を原発
障害とする多臓器不全に対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図７】ＴＣＦ−IIのトリプシン誘発多臓器不全に対す
る防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図８】実施例９のＴＣＦ−IIの熱傷誘発多臓器不全に
対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図９】実施例１４のＴＣＦ−IIの熱傷誘発多臓器不全
に対する防御効果を示す。

【符号の説明】

○：ＴＣＦ−II投与群 ●：溶媒投与群

【図１０】ＨＧＦの熱傷誘発多臓器不全に対する防御効
果を示す。

【符号の説明】

○：ＨＧＦ投与群 ●：溶媒投与群

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】腫瘍細胞壊死因子−II（Tumor cytotoxi
c factor−II; ＴＣＦ−II) または肝細胞増殖因子(hep
atocyte growth factor;ＨＧＦ) を有効成分とする多臓
器不全予防及び／又は治療剤。
【請求項２】多臓器不全が化学物質の投与に基づく多
臓器不全である請求項１記載の剤。
【請求項３】多臓器不全が、熱傷に基づく多臓器不全
である請求項１記載の剤。