JPH10512363A - 一又は複数種の競合イムノアッセイを実施するための器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 サンプル中の対応の分析物の存在を検出するための一又は複数のイムノアッセイを実施するための器具及び関連の方法。この器具は共通の起点と、対応の分析物の存在についての目視読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する複数の対応の試薬ゾーンとを有する一又は複数の流路を司るユニット式吸収材料の利用を包含する。

Description

【発明の詳細な説明】 一又は複数種の競合イムノアッセイを実施するための器具 技術分野 本発明は診断イムノアッセイ及びかかるアッセイを実施するための関連の器具 に関する。別の観点において、本発明は乱用薬物又はその代謝物の如き分析物に ついてのアッセイに関する。別の観点において、本発明は単一のサンプル内の様 々な分析物についてのマルチアッセイを同時に実施するための器具又は手段に関 する。 発明の背景 乱用薬物の存在を決定するために利用されるものを含む分析アッセイの利用は この10年で急速に広まってきた。1993年から、米国の検査薬市場だけでも少なく とも５億ドルと見積られている。検査薬産業は新たな連邦米国規制の結果更に拡 大し、これは薬剤及びアルコール乱用検査に従事する作業者の数を著しく増やす であろう。 現時点で、ほとんどの薬剤検査をサンプルの採取、それに次ぐ装置に基づく「 ウェットケミストリー」実験室分析を包含する。しかしながら、現場（on−site ）又は「看護時点」(point of care)市場はこの２年の間に急成長している。現 状の数字はわからないが、装置抜きのイムノアッセイに基づく乱用薬物検査キッ トは年間20〜40％の割合で成長しているようである。 現在、市場には数多くの単一分析物イムノアッセイを基礎とする乱用薬物診断 キットがある。これらには、Roche Diagnostic Systems，Hansen Hong Biomedic al Co．Ltd.，Drug Screening Systems, Editeck，Inc.，Hycor Biomedical，U ．S．Drug Testing Inc.，T hermedics Detection，Inc．及びFingerprint Biotekより製造された検査キット が含まれる。かかる器具は一般に特定の薬剤が予測されている状況では有用であ る。しかしながら、多くの場合、例えば緊急な状況では、一定の患者において存 在しうる一又は複数種の薬剤についての迅速な自己実施式アッセイが特に所望さ れるであろう。 診断アッセイを実施する能力を有する様々なアッセイキットが発表されている 。例えば、Olson の一連の特許（米国特許第4,959,307 ；4,963,468 ; 5,085,98 7 ; 及び 5,085,988号）は、吸収材料、非拡散式結合型の第一レセプター及び非 拡散式結合型の第二レセプターを有する免疫分離ストリップに関する。しかしな がら、各態様において、この器具を利用する方法はサンプル、分析用抗体、及び 分析物とラベルとのコンジュゲートを含む個別の検査溶液の第一準備段階を必要 とする。準備できたら、競合反応を溶液の中で所望の時間進行させる。次いでこ の溶液は分析器具の接触部まで使用者により移され、そこでそれらは流路伝いを 流れ始める。（例えば'987号特許の第13欄、第35〜38行及び第20欄、第10〜11行 を参照のこと）。 その他の者は、マルチ分析現場方式を含む２種以上のアッセイを実施できるキ ットの利用を開示している。Biosite（「Triage」ブランド）より入手できるキ ットでは単独の尿又は血清サンプル中のいくつかの汎用の乱用薬物の存在の示差 式検査が可能であるといわれている。例えばBuechlerら、Clin ．Chem. 38（9） ：1678-1684（1992）を参照のこと。この器具の少なくとも一の欠点は、凍結乾 燥試薬を含む領域にサンプルを個別に加え、そこでそのサンプルがその試薬を再 構築及び平衡にするために一定時間（例えば10分）放置させるということの必要 性にある。 現在市場にあるこれら及びその他の単一及びマルチ分析検査キットはいくつか の欠点を有する。現在の方式はかなり複雑であり、特異的な親和定数が競合結合 反応において重要な役割を果している。更に、これらの方式は患者が高い用量の 分析薬物に基づいているとき、偽結果に悩まされうる。また、現状の方式は一般 に正確な試薬濃度（即ち、分析物、対、抗分析物の比）を必要とし、これはリガ ンド−レセプターペアーの一方の構成員が劣化し始めると損われてしまいうる。 特にめんどうなのは固定化抗体又は結合試薬の利用を頼りとするキットであり 、それでは試薬の量は厳しく管理する必要がある。固定化レセプターの結合能力 は特定の固定化方法及び条件に非常に依存しうる。この依存性はかかるアッセイ の製造を予測できないものとし、且つ再現性を困難なものとしうる。棚寿命も影 響を受けうる。 なにが明確に必要とされているかというと、多種類の乱用薬物のために利用で きうる分析検査キット、そして特に製造し易く、且つ使用が簡単であり信頼性の あるような複数のアッセイを同時に、実施するのを利用できうるものである。 図面の簡単な説明 図において： 図１は単独分析物イムノアッセイに基づく現場検査方式を伴う本発明の好適な 態様の模式図を示す。 図２はマルチ分析物イムノアッセイに基づく現場検査方式を伴う本発明の好適 な態様の模式図を示す。 発明の概要 本発明はサンプル中の関連の分析物の存在を検出するための一又は複数種の競 合イムノアッセイを実施するための器具及び関連の方法を提供する。この器具は ユニット式器具として、即ち、各工程及び試薬が器具上に自蔵されているものと して提供されうる。好ましくは、各工程は、自己実施式、即ち、サンプルの適用 により自発式に進行するものである。特に好適な態様においては、サンプルを一 旦器具に適用したら、アッセイ全体（競合反応を含む）は、各部位から次のゾー ンに至る毛細流動を包括する段階により単独で進行する。その結果、かかる器具 は、溶液中の競合アッセイ反応を独立に実施する必要なく、又は溶液を非毛細方 式で別の器具又はゾーンへと物理的に移す必要なく、利用できうる。 好適な態様において、この器具は一又は複数の流路を司る吸収材料を含んで成 り、ここで各流路は： （ａ）流体サンプルの適用のための起点； （ｂ）この起点から放射し、そして対応の分析物の存在についての目視読出式 競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する多数の試薬ゾーン、こ こでこれらのゾーンは流路の順及び方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能な分析物−コンジュゲー ト及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこの コンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在している遊離分 析物が前記分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合 できるように拡散式に配置されている； （ii）前記競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路における 連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合でき る過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬 を含んで成る保持ゾーン； （iii）前記保持ゾーンと流体連絡しており、且つ分析物−コンジュゲート には結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合でき ない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る。 上記の器具の利用の際、サンプル中の遊離分析物量の増大の存在は、結合パー トナーへの分析物−コンジュゲートの結合の減少に対応する。換言すれば、増大 した量の遊離分析物−コンジュゲートは流路を下り続けることができる。最後に 、遊離の分析物−コンジュゲートは読取ゾーンの中の対応の結合パートナーに非 拡散式に結合し始め、そしてそこでもとのサンプル中の分析物の存在の陽性指標 を供するように検出される。 好適な態様において、この器具及び方法はサンプル中の対応の分析物の存在を 検出するための複数のイムノアッセイを同時に実施するのに利用できうる。かか る好適な「マルチ分析物」態様において、この装置は一又は複数の流路を司る吸 収材料を含んで成り、各流路は： （ａ）流体サンプルの同時適用のための前記吸収材料上の共通起点、 （ｂ）前記起点と能動的に又は遅延的に流体連絡している関連の複数の試薬ゾ ーン、ここで各流路の試薬ゾーンは対応の分析物の存在についての目視読出式競 合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供し、ここで各流路に関するこ れらのゾーンは流路順及び方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能な分析物− コンジュゲート及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン 、ここでこのコンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在し ている任意の遊離分析物が前記分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結 合パートナーに結合できるように拡散式に配置されている； （ii）対応の競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路におけ る連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合で きる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン；及び （iii）対応の保持ゾーンと流体連絡しており、且つ分析物−コンジュゲー トには結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合で きない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る。 これらの流路は好ましくは更にそれぞれ一又は複数の陽性及び／又は陰性手順 コントロールゾーン及び試薬を含んで成る。一の好適な態様において、この器具 は更に連続する試薬ゾーンの下流にあり、且つ対応のアッセイの完了を確認する ための指示薬を含んで成る末端部位を含んで成る。 特に好適な態様において、この器具は吸収材料を支持するための頂部及び底部 領域を含んで成る不活性ホルダーを含んで成り、ここでその頂部領域には共通の 起点に対する流体サンプルのアクセスのための開口部、並びに各流路伝いの対応 の読出及び末端指示薬部位を見るための複数の開口部が設けられている。 一の態様において、複数のアッセイのためのこれらの流路は重複及び／又は横 並び態様で、且つ吸収材料伝いと同一の方向で設けら れていてよい。別の態様において、この装置は各分析物のための個別の独立流路 を供し、それらの流路は共通起点から放射方向で広がるように配置されている。 特に好適な態様において、本発明は単一の尿又は血清サンプル中の１〜４種の 薬剤の存在を示差式に検出できるマルチ分析アッセイを提供する。かかる分析物 にはテトラヒドロカンナビノール(THC)、コカイン、アヘン及びアンフェタミン が含まれ、これらはその他の分析物により妨害されることなく検出される。 詳細な説明 本明細書において、以下の用語及び文言は下記の意味をもつものとみなされる であろう： 「ゾーン」とは、一又は複数種の試薬を含み、且つ特定のアッセイの流路に沿 って配置されている独立の部位を意味し、各ゾーン又は部位は吸収材料の表面積 よりも小さいそれを有する。 ゾーンに適用される「下流」とは、先行のゾーンから流動式に独立し、且つサ ンプルの流れの方向におけるゾーンを意味するであろう。典型的な態様において 、例えば、各ゾーンは互いと一又は数mmの程度離れているであろう。更に、ゾー ン内には、２以上の独立の領域、例えば競合ゾーンの中の分析物−コンジュゲー ト及び結合パートナーをそれぞれ担持する領域がありうる。他方、非妨害性試薬 、ゾーン、及び／又はゾーン内の領域は往々にして先行及び／又は後続ゾーンと の重複配置に位置しうる。 吸収材料に適用される「ユニット式」とは、単一の水性サンプルを起点に加え ることができ、そして対応の流路伝いで各ゾーンにわたって能動的又は遅延的な 毛細流により進行することを意味する。「吸収」とは、起点からの、及び各試薬 ゾーンにわたるサンプルの 毛細流を可能にするのに十分な材料又は材料の組合せを意味する。 「同時」とは、マルチ分析装置での複数のアッセイのそれぞれを、一度に、且 つ起点への単一のサンプルの適用により実施できることを意味する。 「競合」とは、遊離した結合パートナーに結合し始める分析物−コンジュゲー トの量がサンプル中の分析物の有無に依存及び相関することを意味する。 「非拡散式に結合」とは「固定化」と同義語として用い、使用条件下で試薬が 特定ゾーンに安定的に保持されていることを意味する。 本発明はサンプル中の対応の分析物の存在を検出するための一又は複数種のイ ムノアッセイを同時に実施するための器具及び方法を提供する。適当な分析物に はコンジュゲート形態で提供できるものが含まれる。他方、この分析物は注目の 化合物の誘導体又は代謝物の形態であってよい。 一般に、分析物は、レセプターに結合でき、且つコンジュゲーションでき、そ してサンプル分析物及びレセプターとの競合アッセイにおいて使用できるのに足 りる合成及び／又は精製形態で回収できる検出すべき任意の化合物である。これ らの化合物には比較的小分子量(例えば約 100〜2,000)のモノエピトープ分析物 及び高分子量（例えば約 2,000以上）のポリエピトープ抗原が含まれる。代表的 な分析物は例えば米国特許第 4,299,916及び 4,275,149号に記載されており、双 方の開示内容は引用することで本明細書に組入れる。 適当な分析物の例には、限定することなく、殺虫剤並びにその代謝物及び誘導 体（例えば、ポリハロゲン化ビフェニル、リン酸エステル、チオホスフェート、 カルバメート、ポリハロゲン化スルホンアミド）、並びに薬剤並びにその代謝物 及び誘導体（例えばアルカ ロイド、ステロイド、ラクタム、アミノアルキルベンゼン、ベンズ複素環、プリ ン、ビタミン、抗生物質、ヌクレオシド及びヌクレオチド、マリファナ由来の薬 物、及び雑多薬）が含まれる。 本発明の装置及び方法は任意の適当なサンプルに利用できうる。一般に、且つ 好ましくは、このサンプルは起源から直接獲得できる水性のものである（例えば 尿又は血液）。他方、このサンプルは非水性サンプル（例えば組織）を水性溶媒 （例えば緩衝溶液）と混合又はそれで抽出することにより調製されうる。一般に 、サンプルは注目の一又は複数種の化合物を含むものと予測される任意の物質で ある。これには汚染についての地下水の分析、アフラトキシン等の如き天然毒素 についての農産物の分析が含まれる。 往々にして、このタイプの分析は抽出段階を必要とし、それにおいてはサンプ ルを、水性、有機又は水性／有機混合物でありうる液体抽出媒体と混合する。注 目の材料の抽出後、抽出溶液自体をサンプルとして利用することができ、そして 直接評価するか、もしくは本器具での評価前に、濃縮、希釈、エバポレーション 及び再構築して評価してよい。 抽出を必要とする他の評価例には食肉又は海産物中の殺虫剤残渣、細菌代謝物 、又はその他の汚染物、並びに土壌サンプル中の除草剤又はその他の汚染物が含 まれる。 本発明の好適な装置は一又は複数の流路を司るユニット式吸収材料を含んで成 る。好ましくは、必須ではないが、この吸収材料は事実上単独の一体式材料の形 態で提供されるであろう。他方、この材料は本来独立である材料を重ねる又は接 触させることにより形成できる。適当な吸収材料の例にはニトロセルロース膜、 ナイロン膜又はその他の市販の膜が含まれる。 本装置において有用な吸収材料には毛細現象力に応答して水性媒 質が横断し易い孔質材料が含まれる。かかる材料は一般に親水性であるか、又は 親水性にすることができるものであり、そして無機粉末、例えばシリカ及びアル ミナ；天然ポリマー材料、特にセルロース材料、例えば濾紙、クロマトグラフィ ー紙等；合成又は改良天然ポリマー、例えばニトロセルロース、セルロースアセ テート、ポリ（ビニルクロリド）、ポリアクリルアミド、架橋化デキストリン、 アガロース、等；が含まれ、それらは単独で、又はその他の材料と一緒に利用さ れうる。好適な吸収材料にはガラスファイバー濾紙が含まれる。この吸収材料は 支持体に付着させるか、又はそれ自体で供されてよい。吸収材料は官能基を含み うるか、又はその他の成分へのレセプターの共有結合を可能にするように官能化 されうる。 単一の器具において２以上の流路を採用する場合、好ましくは、各流路は流体 サンプルの同時適用のために吸収材料の上に共通起点を含んで成る。見ての通り 、この起点は、単一のサンプルの適用で各流路におけるサンプルの流れを同時に 始まるようにする点で「共通」している。 本発明の器具における各流路は更に、その起点部位に又はその下流に複数の対 応の試薬ゾーンを含んで成る。各イムノアッセイの試薬ゾーンは対応の分析物の 存在についての目視読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を提 供する。好適な態様において、この試薬ゾーンは必要な試薬のそれぞれを提供し 、即ち、流路伝いで又はアッセイ中に（例えばピペットを用いて）試薬を物理的 に除去及び再適用する必要がない。 特定の流路のゾーンは、流れの順及び方向で、分析物−コンジュゲート及び分 析物に対する結合パートナーを含んで成り、その双方共サンプル中に存在する任 意の遊離分析物が分析物コンジュゲートと競合式の態様で結合パートナーに結合 できるように拡散式に配置 されている。 この競合ゾーン自体がサンプルの適用のための起点を担うか、又は起点自体の 下流にあってよい。更に、競合ゾーンの中に存在する様々な試薬は競合反応の反 応速度を変える又は影響を及ぼすために、任意の適切な態様で配置又は配備され ていてよい。 例えば、結合パートナーは、結合パートナーを分析物コンジュゲートに曝露す る前に分析物が結合パートナーと反応できるために分析物コンジュゲートの上流 に位置してよい。この手法は、結合パートナー上の結合部位に対する、コンジュ ゲートに勝る競合利点を分析物に供するであろう。換言すれば、この手法は特定 の分析物についての検出感度を高めるために利用できる。 この結合パートナーは好ましくは分析物に対するレセプターである。レセプタ ーは注目の分析物の特定の立体的及び極性的組織を認識できる任意の化合物又は 組成物である。例示的なレセプターには天然レセプター、例えば抗体、酵素、レ クチン等が含まれる。分析物に対する好適なレセプターは分析物に対する抗体で ある。抗体は表層の上に又は空腔の中に別の分子の特定の立体的及び極性的組織 に特異的に結合し、それ故それに相補性である定義される領域を有するイムノグ ロブリン又はその誘導体もしくはフラグメントである。この抗体はモノクローナ ル又はポリクローナルであってよく、そして当業界に公知の技術、例えば宿主の 免疫及び血清の回収又はハイブリド細胞系技術により調製できる。 他方、結合試薬自体分子の複合体の形態をとってよく、例えば、分析物に対す る第一抗体とこの第一抗体に特異的な第二抗体との複合体の形態をとってよい。 かかる複合体の成分は競合ゾーンにおける及び／又は保持ゾーンへとつながる任 意の適当な箇所において個別に施されうる。かかる複合体は、例えば、そのサイ ズ又は捕獲試 薬に対する親和力を高めることにより保持ゾーンにおける結合試薬の除去性を高 めるうえで有用でありうる。 この分析物−コンジュゲートは一般にラベル又はトレーサー、例えば触媒、通 常は分析物にコンジュゲーションされた酵素の形態で供される。ラベルは分析物 に結合又はコンジュゲーションされた感知できる信号を生成できる、任意の分子 又は分子の系であってよい。好適なラベルはコロイド状の金属粒子、又は有色の ゾル粒子より成る。当業者は、多くの元素がラベルとして機能できることを認識 し、それには限定することなく、放射性抗種、蛍光物質、リン光物質、ケミルミ ネッセント物質、色素、酵素、ゾル粒子、有色ポリマー材料等が含まれる。モノ クローナル抗薬剤抗体の既知の結合反応速度に基づき、抗体結合を獲得できる適 切なエピトープをもつ薬剤コンジュゲートを調製するために標準の技術が利用で きうる。 流路は競合ゾーンと遅延的に流体連絡した保持ゾーンを更に含んで成る。「遅 延的に流体連絡」とは、競合反応を所望の程度にまで進行させるため、競合ゾー ンと保持ゾーンとの流体連絡が十分に遅くなっていること、及び／又は反応速度 が十分に長いことを意味する。競合ゾーン内での反応時間を長めることに加えて 、反応の程度は同様にその他の手段、例えば結合反応温度を高めることにより及 び／又は試薬の混合特性を改良することにより（例えば発泡を介して）向上でき うる。 遅延的な毛細流を達成せしめる遅延手段は受動的な種類（即ち、使用時に自発 式に生ずるもの）又は能動的な種類（使用者側の何らかの作業を必要とするもの ）であってよい。本詳細な説明により、当業者は本発明の器具においてどのよう に遅延手段を施し、且つ利用するかの態様を認識しているであろう。例えば、そ の開示内容を引用することで本明細書に組入れるPCT 出願第WO92/21434及びWO92 /24231を参照のこと。 適当な手法において、競合ゾーン中の溶液の保持時間は、対応の競合及び保持 ゾーン（及び／又はその間の界面）を、競合ゾーンからの溶液の流れが調節式に 遅延できるような態様となるように形状化することにより延長できる。適切な遅 延手段の例には、限定することなく、溶解可能な物理バリヤー、浸透性物理バリ ヤー、又は膨張性橋渡し材料が含まれる。 例えば、孔質又は溶解可能なバリヤーをゾーン間にはさみ込み、バリヤー自体 が浸透を受ける又は溶解する前に溶液が十分な時間にわたって競合ゾーンに保持 されるようにすることができる。同様に、毛細流路自体がゾーン間で曲りくねっ たハートをとるようにして、アッセイのための有効反応時間を長めることができ る。更なる別の例として、水和可能な膨張性（例えばスポンジ様）材料を競合ゾ ーンにおいて、その材料が当初は保持ゾーンと物理的に接触していない態様とな るように採用できうる。検査溶液による水和後、及び競合反応を行わさせる間、 この材料はそれが保持ゾーンと物理的に接触して流体連絡できるようになる点に まで膨張又は膨潤できる。 別の態様において、競合と保持ゾーンとの間の遅延的毛細流は、例えばゾーン 間のバリヤーを操作する又は外し、それらの間に毛細橋を形成することにより、 又はゾーンを物理的に束ねる（例えば締めつけにより）ことにより、使用者によ り能動的に開始させることができる。例えば、米国特許第 4,826,759号を参照の こと。その開示内容は引用することで本明細書に組入れる。 保持ゾーンは、遊離又は結合した結合パートナーを流路中の連続流から除去す るためにそれらに結合できる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る 。この捕獲試薬は一般に結合パートナーに結合できるレセプターである。好適な 捕獲試薬は結合パートナー に結合できる抗体である。 結合パートナーは分析物に対する抗体が好ましいため、捕獲試薬は優先的には 分析物に対する抗体に結合できる抗体である。それは、例えば、分析物に対する 抗体を生起するのに用いた種以外の種において生起させた抗体である。この捕獲 試薬はレセプター、例えばプロテインＡであって、イムノグロブリン分子上の特 定の部位に結合するものであってもよい。別の態様において、この結合パートナ ーはビオチンの如き分子に複合させてよく、そしてその捕獲試薬は例えばアンチ ビオチン又はアビジンの如き分子に特異的なものであってよい。 本発明の手法は固定化レセプターを採用する数多くの慣用のアッセイに勝る特 定の利点を供する。上記の通り、かかる固定化レセプターの結合能力は固定化方 法及び条件に依存し得、従ってかかるアッセイの製造は予測がつかなく、且つ再 現が困難である。本発明において、この固定化捕獲試薬は過剰量において存在し ており、それ故予測のつく性能特性をもつアッセイの開発を可能にする。 捕獲試薬の固定化は、偽結果につながる材料からの試薬の解離を防ぐのに十分 に安定である。解離した捕獲試薬により生ずる誤差に対する更なる安全対策とし て、当業者はそれ自体が解離する捕獲試薬と結合して保持するために追加の試薬 を採用することのできる態様を歓迎するであろう。一の適切な手法は、第一捕獲 試薬（即ち、保持ゾーンにおいて供される捕獲試薬）に対して特異的な固定化さ れた第二捕獲試薬を有する、第一保持ゾーン及び読出ゾーンのそれぞれにある又 はそれらの間にある第二保持ゾーンの利用を含む。 最後に、流路は、分析−コンジュゲートに結合できるが、非コンジュゲーショ ン分析物には検出される状況で結合しない非拡散式に結合したレセプターを含ん で成る読出ゾーンを更に含んで成る。 非拡散式に結合したレセプターは分析物−コンジュゲートには結合できるが、 単独の分析物に対しては結合できない。このレセプターは従って、コンジュゲー トのラベル部分か、又は分析物単独では存在しないがコンジュゲートにより供さ れる追加の成分（分析物とラベルとの結合による）に対して結合する。好適な非 拡散式に結合したレセプターは分析物をラベルに対してコンジュゲーションする のに用いるスペーサー成分に結合できる抗体である。 極めて好適な態様において、読出は分析物の存在を示唆するプラス（「＋」） の信号の完了の形態で供される。かかる態様において、読出のマイナス（「−」 ）部分は任意の適当な手段により供される。 一の態様において、このマイナス部分は流路伝いに配置された追加の試薬の利 用により供される。例えば、検出可能なコンジュゲートを流路伝いに、そして好 ましくは起点自体に配置する。読出のマイナス部分は検出可能なコンジュゲート に対する非拡散式に結合した抗体の形態で供される。例えば、金−KLH のコンジ ュゲートが拡散形態において存在しているとき、非拡散式に結合した抗−KLH 抗 体により、読出ゾーンのマイナス部分を形成する。 最後に、この流路は好ましくは連続する試薬ゾーンの下流にあり、且つ対応の アッセイの完了を確認するための指示差を含んで成る末端部位を更に含んで成る 。この指示薬は一般にサンプルの存在に対して感受性である物質とする。一般に 、それはサンプル溶液中のある種の成分の存在に対して応答して変色するであろ う物質であろう。かかる試薬の例にはpH指示色素、タンパク質の存在に対して感 受性である色素、及び水和状態に対して感受性である色素である。 本発明の装置は所望の目的を達成するために任意の適当な形態及び寸法のもの であってよい。好適な態様において、この装置は吸収 材料を支持するための頂部及び底部領域を含んで成る不活性ホルダーの形態で提 供され、この頂部領域には共通起点への流体サンプルのアクセスのための開口部 並びに各流路伝いの対応の読出及び末端指示部位を見るための複数の開口部が設 けられている。 本検査方式の典型的なデザインの製造を図１（単独分析物方式）及び図２（マ ルチ分析物方式）を含む図面を参照しながら説明する。使用者にとって、図２の 検査は４方向のそれぞれにおいて放射する及び読出する流路12を有する単一の検 査器具10であることがわかるであろう。サンプルを中央ウェル14に加え、そして 検査は４つの完了指示窓16が変色したときに完了するであろう。アッセイが適正 に行われると、信号の陰性部分18は各分析物の変色として出現する。患者が任意 の分析に関して薬剤陽性であるなら、読出信号20の対応のプラス部分が同様にし て出現する。 図１及び２の器具は単一の分析物又は複数の分析物のそれぞれの検出のための 好適な方式を示す。かかる器具は以下のようにして調製及び使用できる。 金−KLH 。様々な商業起源からキーホール・リンペット・ヘモシアニン（「KL H 」）及びコロイド金を入手し、そして標準の方法に従ってコンジュゲーション する。 金−オブアルブミン−薬剤。オブアルブミンを商業起源から入手し、そして所 望の分析物及びコロイド金に複合させる。コロイド金による担体タンパク質のラ ベリングは標準の方法によって実施する。コロイド金が抗薬剤抗体に対する薬剤 ハプテンの結合反応を妨害しないことを確実にするために反応条件をモニターす る。同様の化学的方法を、THC(マリファナ)、ベンゾイルエクゴニン（コカイン ）、アヘン（モルヒネ、モルヒネグルクロニド）、アンフェタミン（アンフェタ ミン及びメタアンフェタミン）のためのコンジュゲー トを調製するために用いる。 非拡散式結合型試薬。試薬は当業者に明らかな任意の適当な技術を介して吸収 材料に固定化できる。直接付加方法には非拡散式収着、非拡散式吸着、それ自体 適当な位置に捕促されている微粒子への付着、及びシアン化臭素、カルボニルジ イミダゾール又はグルタルアルデヒドの利用を介する共有結合が含まれる。この 観点において用いている「非拡散式」とは、その試薬がアッセイ条件下でその位 置において十分に安定であることを意味している。 拡散式配置型試薬。紙の如き基材にドライケミストリー生体分子を含浸するた めの慣用の方法を利用する。これらの方法は：１）基材能の最適化；２）ドライ 試薬の湿潤性の最適化；及び３）ドライ試薬の安定性の向上；のために有用であ る。 指示ストリップ。例えば尿が存在しているときに変色するであろうpH指示薬の 利用により、末端指示部の調製のための慣用の方法を利用する。 この器具の一の態様において、拡散式配置型試薬を完了ゾーンに、起点部位に 適用するサンプルが所定の濃度以上の分析物を含むときにのみ視覚により感知で きる信号が読出ゾーンにおいて発生するような適切な濃度で適用する。同一のサ ンプルから多重の分析物を検出するとき、この所定の濃度は各分析物に関して異 なりうる。 この器具の作用は例えば各薬剤の様々な濃度を用い、バッファーの中の投入し た単一の薬剤サンプルを調製することにより評価できる。他の乱用物質及び様々 な一般的な認定薬に対する限界交差反応性を検査すべきである。投入したマルチ 薬剤サンプルも、信号発生の特定の増強及び考えられる信号妨害を伴って試験す る。信号発生は標準カラーチャートに対して目視「評価」する。 一の態様において、正常ヒト尿に様々な用量の４種類の乱用薬を 投入する。全部で５つの起源を使用する。評価には、１）目視評価した信号発生 ；２）検査完了のための時間；及び３）非特異的結合の存在；の対比を含む。 本発明の方法は、下記のようにして、吸収材料を含んで成る上記のタイプの装 置を提供する工程を含んで成る： （ａ）水性サンプルを前記吸収材料に、一又は複数の流路の起点において適用 する； （ｂ）各流路にわたり、そしてそれに続き対応の分析物の存在についての目視 読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する複数の対応の試 薬ゾーンにわたりサンプルが同時に流れるようにする、ここでこのゾーンは流路 順及び方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能な分析物−コンジュゲー ト及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこの コンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在している任意の 遊離分析物が前記分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合パートナー に結合できるように拡散式に配置されている； （ii）対応の競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路におけ る連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合で きる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン；及び （iii）対応の保持ゾーンと流体連絡しており、且つ分析物−コンジュゲー トには結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合で きない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； （ｃ）連続する試薬ゾーンの下流にあり、且つ対応のアッセイの 完了を確認するための指示薬を含んで成る末端部位にサンプルが流れるようにす る； （ｄ）各読出ゾーンにおける対応の分析物−コンジュゲートの存在を検出する ことによりサンプル中の各分析物の存在を決定し、そして対応のアッセイの適正 な性能を決定するために各流路における陽性及び陰性コントロールを評価する。

【手続補正書】 【提出日】１９９８年５月１５日 【補正内容】 請求の範囲 １．サンプル中のモノエピトープ分析物の存在の陽性読取を供する競合イムノ アッセイを実施するための器具であって、一又は複数の流路を司る吸収材料を含 んで成り、ここで各流路は： （ａ）流体サンプルの適用のための前記吸収材料上の起点； （ｂ）この起点から放射し、そして対応の分析物の存在についての目視読取式 競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する多数の試薬ゾーン、こ こでこれらのゾーンは流路の順及び方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能なラベル化分析物−コン ジュゲート及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、こ こでこのコンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在してい る遊離分析物が前記ラベル化分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合 パートナーに結合できるように拡散式に配置されている； （ii）前記競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路における 連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合でき る過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン； （iii）前記保持ゾーンと流体連絡しており、且つラベル化分析物−コンジ ュゲート及びラベルに検出可能な状況で結合できるが、非コンジュゲーション分 析物には結合しない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る器具。 ２．一又は複数の陽性及び／又は陰性手順コントロールゾーン及び試薬を更に 含んで成る、請求項１記載の器具。 ３．前記陽性コントロールゾーンが、前記連続する試薬ゾーンの下流にあり、 且つ対応のアッセイの完了を確認するための指示薬を含んで成る陽性コントロー ルゾーンを含んで成る、請求項２記載の器具。 ４．前記吸収材料を支持するための頂部及び底部領域を含んで成る不活性ホル ダーを更に含んで成り、前記頂部領域には、共通の起点への流体サンプルのアク セスのための開口部並びに各流路伝いの対応の読出及び末端指示部位を見るため の開口部が設けられている、請求項１記載の器具。 ５．前記競合ゾーンから前記保持ゾーンに至るサンプルの毛細流を遅延するた めの手段を更に含んで成る、請求項１記載の器具。 ６．前記遅延手段が溶解可能な物理バリヤー、浸透性物理バリヤー及び膨張性 材料より成る群から選ばれる、請求項５記載の器具。 ７．前記分析物がテトラヒドロカンナビノール、コカイン、アヘン及びアンフ ェタミンより成る群から選ばれる、請求項１記載の器具。 ８．サンプル中のモノエピトープ分析物の存在の陽性読取を供する競合イムノ アッセイを実施する方法であって、 （ａ）起点と、対応の分析物の存在についての目視読取式競合イムノアッセイ を実施するために必要な試薬を供する対応の試薬ゾーンをそれぞれが含んで成る 一又は複数の流路とを有する吸収材料を含んで成る器具を用意する、 （ｂ）そして、水性サンプルを前記起点に適用する； （ｃ）各流路にわたり、そしてそれに続き対応の分析物の存在についての目視 読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する対応の試薬ゾー ンにわたりサンプルが同時に流れるようにする、ここでこのゾーンは流路順及び 方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能なラベル化分析物−コン ジュゲート及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、こ こでこのコンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在してい る任意の遊離分析物が前記ラベル化分析物−コンジュゲートと競合する態様で前 記結合パートナーに結合できるように拡散式に配置されている； （ii）対応の競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路におけ る連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合で きる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン；及び （iii）前記保持ゾーンと流体連絡しており、且つラベル化分析物−コンジ ュゲート及びラベルには検出可能な状況で結合できるが、非コンジュゲーション 分析物には結合できない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン ： を含んで成るものである； （ｄ）連続する試薬ゾーンの下流にあり、且つ対応のアッセイの完了を確認す るための指示薬を含んで成る末端部位にサンプルが流れるようにする； （ｅ）各読取ゾーンにおける対応のラベル化分析物−コンジュゲートの存在を 検出することによりサンプル中の各分析物の存在を決定し、そして対応のアッセ イの適正な性能を決定するために各流路における陽性及び陰性コントロールを評 価する； 工程を含んで成る方法。 ９．サンプル中の対応の分析物の陽性読取を供する複数の競合イムノアッセイ を同時に実施するための器具であって、一又は複数の流路を司るユニット式吸収 材料を含んで成り、ここで前記流路がそれぞれ： （ａ）流体サンプルの同時適用のための前記吸収材料上の共通起点、 （ｂ）前記起点の下流にある対応の複数の試薬ゾーン、ここでこの各試薬ゾー ンは対応の分析物の存在についての目視読取式競合イムノアッセイを実施するた めに必要な試薬を供し、ここでこれらのゾーンは流路順及び方向で： （ｉ）検出可能なラベル化分析物−コンジュゲート及び前記分析物に対する 結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこのコンジュゲート及び結合パ ートナーは双方共、サンプル中に存在している任意の遊離分析物が前記ラベル化 分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合できるよう に拡散式に配置されている； （ii）前記流路における連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去 するためにそれらに結合できる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成 る保持ゾーン；及び （iii）ラベル化分析物−コンジュゲート及びラベルには検出可能な状況で 結合できるが、非コンジュゲート分析物には検出可能な状況で結合できない非拡 散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る器具。 10．一又は複数の陽性及び／又は陰性手順コントロールゾーン及び試薬を更に 含んで成る、請求項９記載の器具。 11．前記陽性コントロールゾーンが、前記連続する試薬ゾーンの下流にあり、 且つ対応のアッセイの完了を確認するための指示薬を含んで成る陽性コントロー ルゾーンを含んで成る、請求項10記載の器具。 12．前記吸収材料を支持するための頂部及び底部領域を含んで成る不活性ホル ダーを更に含んで成り、前記頂部領域には、共通の起点への流体サンプルのアク セスのための開口部並びに各流路伝いの対応の読取及び末端指示部位を見るため の開口部が設けられている、請求項９記載の器具。 13．前記器具が、各分析物のための個別の独立流路を供し、これらの流路が共 通の起点から放射方向に広がるように配置されている、請求項９記載の器具。 14．前記アッセイが尿又は血清中の単一のサンプル中の２種以上の薬剤の存在 を示差式に検出することができる、請求項９記載の器具。 15．前記分析物がテトラヒドロカンナビノール、コカイン、アヘン及びアンフ ェタミンより成る群から選ばれる、請求項14記載の器具。 16．サンプル中の対応のモノエピトープ分析物の存在を検出するための複数の 競合イムノアッセイを同時に実施するための方法であって、前記のタイプの器具 を用意し、そしてこの器具を以下の態様： （ａ）水性サンプルをユニット式吸収材料に、一又は複数の流路の共通の起点 において適用する； （ｂ）各流路にわたり、そしてそれに続き対応の分析物の存在についての目視 読取式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する複数の対応の試 薬ゾーンにわたりサンプルが同時に流れるようにする、ここでこのゾーンは流路 順及び方向で： （ｉ）検出可能なラベル化分析物−コンジュゲート及び前記分析物に対する 結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこのコンジュゲート及び結合パ ートナーは双方共、サンプル中に存在している任意の遊離分析物が前記ラベル化 分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合できるよう に拡散式に配置されている； （ii）前記流路における連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去 するためにそれらに結合できる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成 る保持ゾーン；及び （iii）ラベル化分析物−コンジュゲート及びラベルには検出可能な状況で 結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合できない 非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； において利用する工程を含んで成る方法。 17．前記方法がサンプル中の対応の分析物の存在を検出する複数のイムノアッ セイを同時に実施できるものであり、ここでサンプル中の遊離分析物の量の増大 の存在は前記結合パートナーに対する抗原−コンジュゲートの結合の減少をもた らすものである、請求項16記載の方法。 18．前記分析物をラベルにコンジュゲーションするのにスペーサー成分を使用 し、そして前記非拡散式に結合したレセプターがこのスペーサー成分に結合でき るものである、請求項９記載の器具。 19．前記ラベルがコロイド状金属粒子を含んで成る、請求項18記載の器具。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，Ｕ Ｇ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，Ｂ Ｙ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ， ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 チャッパ，ラルフ，エー. アメリカ合衆国，ミネソタ 55372，プラ イアー レイク，スエル レーン 16260

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．競合イムノアッセイを実施するための器具であって、一又は複数の流路を 司る吸収材料を含んで成り、ここで各流路は： （ａ）流体サンプルの適用のための前記吸収材料上の起点； （ｂ）この起点から放射し、そして対応の分析物の存在についての目視読出式 競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する多数の試薬ゾーン、こ こでこれらのゾーンは流路の順及び方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能な分析物−コンジュゲー ト及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこの コンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプル中に存在している遊離分 析物が前記分析物−コンジュゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合 できるように拡散式に配置されている； （ii）前記競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路における 連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合でき る過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン； （iii）前記保持ゾーンと流体連絡しており、且つ分析物−コンジュゲート には結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合でき ない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る器具。 ２．一又は複数の陽性及び／又は陰性手順コントロールゾーン及び試薬を更に 含んで成る、請求項１記載の器具。 ３．前記陽性コントロールゾーンが、前記連続する試薬ゾーンの下流にあり、 且つ対応のアッセイの完了を確認するための指示薬を含んで成る陽性コントロー ルゾーンを含んで成る、請求項２記載の器具。 ４．前記吸収材料を支持するための頂部及び底部領域を含んで成る不活性ホル ダーを更に含んで成り、前記頂部領域には、共通の起点への流体サンプルのアク セスのための開口部並びに各流路伝いの対応の読出及び末端指示部位を見るため の開口部が設けられている、請求項１記載の器具。 ５．前記競合ゾーンから前記保持ゾーンに至るサンプルの毛細流を遅延するた めの手段を更に含んで成る、請求項１記載の器具。 ６．前記遅延手段が溶解可能な物理バリヤー、浸透性物理バリヤー及び膨張性 材料より成る群から選ばれる、請求項５記載の器具。 ７．前記分析物がTHC 、コカイン、アヘン及びアンフェタミンより成る群から 選ばれる、請求項１記載の器具。 ８．競合イムノアッセイを実施する方法であって、 （ａ）起点と、対応の分析物の存在についての目視読出式競合イムノアッセイ を実施するために必要な試薬を供する対応の試薬ゾーンをそれぞれが含んで成る 一又は複数の流路とを有する吸収材料を含んで成る器具を用意する、 （ｂ）そして、水性サンプルを前記起点に適用する； （ｃ）各流路にわたり、そしてそれに続き対応の分析物の存在についての目視 読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する対応の試薬ゾー ンにわたりサンプルが同時に流れるようにする、ここでこのゾーンは流路順及び 方向で： （ｉ）前記起点と流体連絡しており、且つ検出可能な分析物−コンジュゲー ト及び前記分析物に対する結合パートナーを含んで成 る競合ゾーン、ここでこのコンジュゲート及び結合パートナーは双方共、サンプ ル中に存在している任意の遊離分析物が前記分析物−コンジュゲートと競合する 態様で前記結合パートナーに結合できるように拡散式に配置されている； （ii）対応の競合ゾーンと遅延的に流体連絡しており、且つ前記流路におけ る連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去するためにそれらに結合で きる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成る保持ゾーン；及び （iii）前記保持ゾーンと流体連絡しており、且つ分析物−コンジュゲート には結合できるが、非コンジュゲーション分析物には検出可能な状況で結合でき ない非拡散式に結合したレセプターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； （ｄ）連続する試薬ゾーンの下流にあり、且つ対応のアッセイの完了を確認す るための指示薬を含んで成る末端部位にサンプルが流れるようにする； （ｅ）各読出ゾーンにおける対応の分析物−コンジュゲートの存在を検出する ことによりサンプル中の各分析物の存在を決定し、そして対応のアッセイの適正 な性能を決定するために各流路における陽性及び陰性コントロールを評価する； 工程を含んで成る方法。 ９．サンプル中の対応の分析物の存在を検出するための複数のイムノアッセイ を同時に実施するための器具であって、一又は複数の流路を司るユニット式吸収 材料を含んで成り、ここで前記流路がそれぞれ： （ａ）流体サンプルの同時適用のための前記吸収材料上の共通起点、 （ｂ）前記起点の下流にある対応の複数の試薬ゾーン、ここでこの各試薬ゾー ンは対応の分析物の存在についての目視読出式競合イムノアッセイを実施するた めに必要な試薬を供し、ここでこれらのゾーンは流路順及び方向で： （ｉ）検出可能な分析物−コンジュゲート及び前記分析物に対する結合パー トナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこのコンジュゲート及び結合パートナー は双方共、サンプル中に存在している任意の遊離分析物が前記分析物−コンジュ ゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合できるように拡散式に配置さ れている； （ii）前記流路における連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去 するためにそれらに結合できる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成 る保持ゾーン；及び （iii）分析物−コンジュゲートには結合できるが、非コンジュゲート分析 物には検出可能な状況で結合できない非拡散式に結合したレセプターを含んで成 る読取ゾーン： を含んで成るものである； を含んで成る器具。 10．一又は複数の陽性及び／又は陰性手順コントロールゾーン及び試薬を更に 含んで成る、請求項９記載の器具。 11．前記陽性コントロールゾーンが、前記連続する試薬ゾーンの下流にあり、 且つ対応のアッセイの完了を確認するための指示薬を含んで成る陽性コントロー ルゾーンを含んで成る、請求項10記載の器具。 12．前記吸収材料を支持するための頂部及び底部領域を含んで成る不活性ホル ダーを更に含んで成り、前記頂部領域には、共通の起点への流体サンプルのアク セスのための開口部並びに各流路伝いの対応の読出及び末端指示部位を見るため の開口部が設けられている 、請求項９記載の器具。 13．前記器具が、各分析物のための個別の独立流路を供し、これらの流路が共 通の起点から放射方向に広がるように配置されている、請求項９記載の器具。 14．前記アッセイが尿又は血清中の単一のサンプル中の２種以上の薬剤の存在 を示差式に検出することができる、請求項９記載の器具。 15．前記分析物がTHC 、コカイン、アヘン及びアンフェタミンより成る群から 選ばれる、請求項14記載の器具。 16．サンプル中の対応の分析物の存在を検出するための複数のイムノアッセイ を同時に実施するための方法であって、前記のタイプの器具を用意し、そしてこ の器具を以下の態様： （ａ）水性サンプルをユニット式吸収材料に、一又は複数の流路の共通の起点 において適用する； （ｂ）各流路にわたり、そしてそれに続き対応の分析物の存在についての目視 読出式競合イムノアッセイを実施するために必要な試薬を供する複数の対応の試 薬ゾーンにわたりサンプルが同時に流れるようにする、ここでこのゾーンは流路 順及び方向で： （ｉ）検出可能な分析物−コンジュゲート及び前記分析物に対する結合パー トナーを含んで成る競合ゾーン、ここでこのコンジュゲート及び結合パートナー は双方共、サンプル中に存在している任意の遊離分析物が前記分析物−コンジュ ゲートと競合する態様で前記結合パートナーに結合できるように拡散式に配置さ れている； （ii）前記流路における連続流から遊離又は結合した結合パートナーを除去 するためにそれらに結合できる過剰量の非拡散式に結合した捕獲試薬を含んで成 る保持ゾーン；及び （iii）分析物−コンジュゲートには結合できるが、非コンジュ ゲーション分析物には検出可能な状況で結合できない非拡散式に結合したレセプ ターを含んで成る読取ゾーン： を含んで成るものである； において利用する工程を含んで成る方法。 17．前記方法がサンプル中の対応の分析物の存在を検出する複数のイムノアッ セイを同時に実施できるものであり、ここでサンプル中の遊離分析物の量の増大 の存在は前記結合パートナーに対する抗体−コンジュゲートの結合の減少をもた らすものである、請求項16記載の方法。