JPS5810546A - Ｎ−ホルミルペプチドエステルからホルミル基を除去する方法 - Google Patents
Ｎ−ホルミルペプチドエステルからホルミル基を除去する方法Info
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- JPS5810546A JPS5810546A JP57079805A JP7980582A JPS5810546A JP S5810546 A JPS5810546 A JP S5810546A JP 57079805 A JP57079805 A JP 57079805A JP 7980582 A JP7980582 A JP 7980582A JP S5810546 A JPS5810546 A JP S5810546A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
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- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
- C07K5/06121—Asp- or Asn-amino acid the second amino acid being aromatic or cycloaliphatic
- C07K5/0613—Aspartame
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- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
護基であるホルミル基を除去する方法に関する。
より詳細には、本発明は特定のｐＨ条件のもとでヒドラ
ジンまたはヒドラジン誘導体を用いてＮーホルミル化ペ
ブチドまたはそのエステルからホルミル基を除去する方
法に関する。
ジンまたはヒドラジン誘導体を用いてＮーホルミル化ペ
ブチドまたはそのエステルからホルミル基を除去する方
法に関する。
ペプチド合成の際に、アミノ酸のアミノ基上にホルミル
基を置換させてアミノ基を保護することは、多くの化学
文献にも示されているとおりよく知られている。このば
あい、当然ながら該合成の最終工程において、ホルミル
基を除去し、アミノ基をフリーにする必要がある。また
合成の最初の工程（すなわちホルミル化）は容易である
が、最終の段階すなわち一般的な方法による脱ホルミル
化によりえられる結果は満足のいくものではない。一般
的に適用される脱ホルミル化の条件は簡単であるが、え
られる結果はしばしば期待を裏切る。その理由は、かな
り強く結合しているペプチド分子内で変化が生じ、その
変化はペプチド結合にもおよぶためである。
基を置換させてアミノ基を保護することは、多くの化学
文献にも示されているとおりよく知られている。このば
あい、当然ながら該合成の最終工程において、ホルミル
基を除去し、アミノ基をフリーにする必要がある。また
合成の最初の工程（すなわちホルミル化）は容易である
が、最終の段階すなわち一般的な方法による脱ホルミル
化によりえられる結果は満足のいくものではない。一般
的に適用される脱ホルミル化の条件は簡単であるが、え
られる結果はしばしば期待を裏切る。その理由は、かな
り強く結合しているペプチド分子内で変化が生じ、その
変化はペプチド結合にもおよぶためである。
この変化は通常の脱ホルミル化の条件、すなわち水と炭
素数１〜５のアルコールの溶液中、Ｈｅ／ＳＨ２Ｓｏ４
、ＨＮＯ３、パラトルエンスルホン酸、トリフルオロ酢
酸などの強酸の存在下で反応させるときに生じる。
素数１〜５のアルコールの溶液中、Ｈｅ／ＳＨ２Ｓｏ４
、ＨＮＯ３、パラトルエンスルホン酸、トリフルオロ酢
酸などの強酸の存在下で反応させるときに生じる。
値上のごとき化学構造の変化はホルミル化されたペプチ
ドのかわりにホルミル化とエステル化されたペプチドか
らなる基質のばあいにもつとはつきりする。その理由は
、前記の困難性に加えてエステル基の加水分解がかなり
の程度認められ、ジケトピペラジンが生成するためであ
る。ペプチドの脱ホルミル化に関する主な参考文献をつ
ぎに示す。
ドのかわりにホルミル化とエステル化されたペプチドか
らなる基質のばあいにもつとはつきりする。その理由は
、前記の困難性に加えてエステル基の加水分解がかなり
の程度認められ、ジケトピペラジンが生成するためであ
る。ペプチドの脱ホルミル化に関する主な参考文献をつ
ぎに示す。
Ｚｅｈｒａ 、 Ａ．、Ｂｅｒ．２３ 、３６２５（１
８９０） ｉＨｉｌｌｍａｎｎ −Ｅｌｌｄｅｓ、Ａ．
、Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ． 、６Ｂ％ ３４０（１９
５１ ） ｉＷａｌｅｙ ＳＳ． Ｇ． 、Ｃｈｅｍ．
工ｎａ．、ｉ９５３、１０７ ；Ｂｏｉｓｓｏｎｎａｓ
、Ｒ． Ａ． 、Ｈｅｌｖ． Ｏｈｉｍ． Ａｃｔａ，
３（５、８７５（１９５５） ； Ｓｈｅｅｈａｎ
、 、Ｔ．Ｏ．、 Ｊ．Ａｍ．ｏｈｅｍ・Ｓａｃ． １
１ ５４（ １ ９５Ｂ） ｉほかに詳細な記述は多
少古典的であるが．ｒ． Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎ ：
Ｃｈｅｍｏｆ Ａｍ．Ａｃｉｄｓ、ＩＩ 、１２４４、
４６、４７などのペプチドに関する文献中にも見られる
。
８９０） ｉＨｉｌｌｍａｎｎ −Ｅｌｌｄｅｓ、Ａ．
、Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ． 、６Ｂ％ ３４０（１９
５１ ） ｉＷａｌｅｙ ＳＳ． Ｇ． 、Ｃｈｅｍ．
工ｎａ．、ｉ９５３、１０７ ；Ｂｏｉｓｓｏｎｎａｓ
、Ｒ． Ａ． 、Ｈｅｌｖ． Ｏｈｉｍ． Ａｃｔａ，
３（５、８７５（１９５５） ； Ｓｈｅｅｈａｎ
、 、Ｔ．Ｏ．、 Ｊ．Ａｍ．ｏｈｅｍ・Ｓａｃ． １
１ ５４（ １ ９５Ｂ） ｉほかに詳細な記述は多
少古典的であるが．ｒ． Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎ ：
Ｃｈｅｍｏｆ Ａｍ．Ａｃｉｄｓ、ＩＩ 、１２４４、
４６、４７などのペプチドに関する文献中にも見られる
。
これら参考文献の著者らは酸性媒体中で脱ホルミル化を
行なうことを佃究しそいる。
行なうことを佃究しそいる。
近年では、ほかの研究者が、異なった条件のもとでの反
応、すなわち塩化アセチル、ヒドロキシルアミン、また
はヒドラジンなどの他の試薬を脱ホルミル化剤として用
いて高収率を達成している。しかしながらとくにヒドラ
ジンを用いるばあい、相当するヒドラジン誘導体を形成
するため、エステルの脱ホルミル化には不適当である（
Ｌｅｆｒａｎｃｉｅｒ， Ｂｕｌｌ． Ｓｏｃ． Ｃ
ｈｉｍ． Ｆｒａｎｏｅｓ１９６５、３６６８ ； Ｇ
ｅｉｇｅｒ， ＧＢ−ＰＳ １ １８２ ４５０参照）
。
応、すなわち塩化アセチル、ヒドロキシルアミン、また
はヒドラジンなどの他の試薬を脱ホルミル化剤として用
いて高収率を達成している。しかしながらとくにヒドラ
ジンを用いるばあい、相当するヒドラジン誘導体を形成
するため、エステルの脱ホルミル化には不適当である（
Ｌｅｆｒａｎｃｉｅｒ， Ｂｕｌｌ． Ｓｏｃ． Ｃ
ｈｉｍ． Ｆｒａｎｏｅｓ１９６５、３６６８ ； Ｇ
ｅｉｇｅｒ， ＧＢ−ＰＳ １ １８２ ４５０参照）
。
Ｈ２Ｏ２による醇化によってペプチドまたはペプチドエ
ステルを脱ホルミル化する方法（ Ｌｏｓｓｓ。
ステルを脱ホルミル化する方法（ Ｌｏｓｓｓ。
、ｒ， Ｐｒａｋｔ． ａｈｅｍ． １９６４、２４、
１１８参照）や水素化分解によって脱ホルミル化する方
法（ Ｌｏｇｇｅ 。
１１８参照）や水素化分解によって脱ホルミル化する方
法（ Ｌｏｇｇｅ 。
Ｊ，Ｐｒａｋｔ． ｃｈｅｍ． １９６４、２４、１１
８参照）も研究されている。
８参照）も研究されている。
ペプチド類やそれらのＮ−ホルミル化エステル類のＮ一
説ホルミル化の重要性は工業的見地からも明白である。
説ホルミル化の重要性は工業的見地からも明白である。
かかるペプチド類のうち工業的に重要な物質の一例とし
てアスパルテーム（ａｓｐａｒｔａｍ）として知られ、
特有の甘味的性質を有スルα−Ｌ−アスバルチルーＬ−
フェニルアラニンメチルエステルがある。この物質は
ペプチド合成の技術分野において用いられる通常の多く
の方法によって調製できる。たとえばアスパラギン酸の
アミノ基をブロックし、そのα−カルボキシル基を活性
なエステルまたは酸無水物の形で活性化し、ついでフェ
ニルアラニンメチルエステルと縮合反応させ、えられた
エステル化ペプチドのアミ７基の４＋ｉ％基を除去する
ことにより調製される。
てアスパルテーム（ａｓｐａｒｔａｍ）として知られ、
特有の甘味的性質を有スルα−Ｌ−アスバルチルーＬ−
フェニルアラニンメチルエステルがある。この物質は
ペプチド合成の技術分野において用いられる通常の多く
の方法によって調製できる。たとえばアスパラギン酸の
アミノ基をブロックし、そのα−カルボキシル基を活性
なエステルまたは酸無水物の形で活性化し、ついでフェ
ニルアラニンメチルエステルと縮合反応させ、えられた
エステル化ペプチドのアミ７基の４＋ｉ％基を除去する
ことにより調製される。
α−Ｌ−７スバルチルーＬ−フェニルアラニンのメチル
エステルの工業的製造法は現実的にはかなりの困難性を
伴う。すなわち実際に適用しうる合成方法は限られてお
り、しかもいずれの合成方法によってもホスゲンなどの
有毒な物質やカルボベンゾキシクロライドなどの取り扱
いが困難な物質を使用しなければならず、さらにはそれ
らの合成方法では、生成物が低い収率でしかえられない
という困難性もある。
エステルの工業的製造法は現実的にはかなりの困難性を
伴う。すなわち実際に適用しうる合成方法は限られてお
り、しかもいずれの合成方法によってもホスゲンなどの
有毒な物質やカルボベンゾキシクロライドなどの取り扱
いが困難な物質を使用しなければならず、さらにはそれ
らの合成方法では、生成物が低い収率でしかえられない
という困難性もある。
アスパルテームの合成が比較的実行しやすい工業的な方
法としては、Ｎ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物
をＬ−フェニルアラニンメチルエステルで縮合し、つぎ
にＮ−ホルミル−ａ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニンメチルエステルをＮ−説ホルミル化する方法で
ある。かかるに−説ホルミル化としては、特定の溶媒中
、強酸性の無機酸の存在下で行なう方法（タケモ）（Ｔ
ａｋｅｍｏｔｏ）、西独特許公開第２．６５５．９４６
号公報参照）、ヒドロキシルアミンを用いる方法（タケ
モト、西独特許公開第２．５５４．４２１号公報参照）
、水の存在下で加熱する方法（タケモト、特開昭５１−
３９６０２号公報参照）、メタノール中で塩醜を用いる
方法（西独特許公開第２．２５６．０５５号公報参照）
などが採用される。
法としては、Ｎ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物
をＬ−フェニルアラニンメチルエステルで縮合し、つぎ
にＮ−ホルミル−ａ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニンメチルエステルをＮ−説ホルミル化する方法で
ある。かかるに−説ホルミル化としては、特定の溶媒中
、強酸性の無機酸の存在下で行なう方法（タケモ）（Ｔ
ａｋｅｍｏｔｏ）、西独特許公開第２．６５５．９４６
号公報参照）、ヒドロキシルアミンを用いる方法（タケ
モト、西独特許公開第２．５５４．４２１号公報参照）
、水の存在下で加熱する方法（タケモト、特開昭５１−
３９６０２号公報参照）、メタノール中で塩醜を用いる
方法（西独特許公開第２．２５６．０５５号公報参照）
などが採用される。
成上の刊行物に記載されている方法には、いずれも欠点
があり、一般に、Ｎ−ホルミル化ペプチドやそれに対応
するエステルの脱ホルミル反応においていくつかの欠点
がある。なかんづく合成の最終段階でえられる生成物の
収率が低いこと、中間体がきわめて高価なものであるこ
となどが大きな欠点である。さらには最終段階でえられ
た低収率の生成物に不純物が混在しており、これを精製
するために付加的なコストが必要となる。
があり、一般に、Ｎ−ホルミル化ペプチドやそれに対応
するエステルの脱ホルミル反応においていくつかの欠点
がある。なかんづく合成の最終段階でえられる生成物の
収率が低いこと、中間体がきわめて高価なものであるこ
となどが大きな欠点である。さらには最終段階でえられ
た低収率の生成物に不純物が混在しており、これを精製
するために付加的なコストが必要となる。
本発明者らは、ペプチドまたはそのエステル中、のに−
ホルミル基の除去がヒドラジンまたはとドラジン誘導体
の存在下、ｐＨを１〜３．５に維持することにより、非
常に簡単な方法で、しかもおどろくほど高収率で行なう
ことができることを見出し、本発明を完成するにいたっ
た。このｐＨの範囲はこの反応に決定的な意味をもつ。
ホルミル基の除去がヒドラジンまたはとドラジン誘導体
の存在下、ｐＨを１〜３．５に維持することにより、非
常に簡単な方法で、しかもおどろくほど高収率で行なう
ことができることを見出し、本発明を完成するにいたっ
た。このｐＨの範囲はこの反応に決定的な意味をもつ。
すなわち本発明は、Ｎ−ホルミルペプチドまたはＮ−ホ
ルミルペプチドエステルにヒドラジンまたけ一般式（■
）： Ｒ−ｃ−ＮＨ−１！Ｈ２（Ｉ） １ （式中、Ｒは炭素数１〜５の飽和もしくは不飽和、直鎖
もしくは分岐鎖、置換もしくは未置換のアルキル基、ま
たは置換もしくは未置換のシクロアルキル基、または置
換もしくは未置換のアリール基、またはアミノ基を表わ
す）で表わされるヒドラジン誘導体をｐＨ１〜５．５の
範囲に保ちながら反応させることを特徴とするＮ−ホル
ミルペプチドまたはそのエステルからホルミル基を除去
する方法に関する。
ルミルペプチドエステルにヒドラジンまたけ一般式（■
）： Ｒ−ｃ−ＮＨ−１！Ｈ２（Ｉ） １ （式中、Ｒは炭素数１〜５の飽和もしくは不飽和、直鎖
もしくは分岐鎖、置換もしくは未置換のアルキル基、ま
たは置換もしくは未置換のシクロアルキル基、または置
換もしくは未置換のアリール基、またはアミノ基を表わ
す）で表わされるヒドラジン誘導体をｐＨ１〜５．５の
範囲に保ちながら反応させることを特徴とするＮ−ホル
ミルペプチドまたはそのエステルからホルミル基を除去
する方法に関する。
本発明の方法によれば、反応はヒドラジンまたはヒドラ
ジン誘導体の存在下に、ｐＨ１〜３．５の範囲で行なわ
れなければならない。事実、ヒドラジンもしくはヒドラ
ジン誘導体の不存在下、酸を加えて反応を行なったり、
ｐＨを１未満にして反応を行なえば、反応温度６０％の
条件のもとて１時間後には、出発物質であるホルミルエ
ステルが完全に消失し、少量（約１５％）の脱ホルミル
化生成物しか生成せず、しかもそれは、ＴＬＣ（・薄層
クロマ・トゲラフイー）によればジケトピペラジンであ
る。
ジン誘導体の存在下に、ｐＨ１〜３．５の範囲で行なわ
れなければならない。事実、ヒドラジンもしくはヒドラ
ジン誘導体の不存在下、酸を加えて反応を行なったり、
ｐＨを１未満にして反応を行なえば、反応温度６０％の
条件のもとて１時間後には、出発物質であるホルミルエ
ステルが完全に消失し、少量（約１５％）の脱ホルミル
化生成物しか生成せず、しかもそれは、ＴＬＣ（・薄層
クロマ・トゲラフイー）によればジケトピペラジンであ
る。
一方、ｐＨを３．５よりも高くして反応を行なうと脱ホ
ルミル化は非常に少量しか起らず、反応時間を長くして
行なっても殆んど目的生成物が認められない程度である
。ｐＨ１〜３．５の範囲内で反応を行なうことは本発明
の必須の要件である。この反応は、反応中にｐＨが高く
なる傾向にあるため、反応過程全般においてｐＨを一定
に維持する必要がある。このｐＨの調節は反応液中に、
徐々に無機酸溶液を加えることにより行ないうる。この
無機酸溶液としては、塩酸や硫酸の１０％溶液が一例と
してあげられ、ｐ−）ルエンスルホン酸を用いることも
可能である。このほか適当な緩衝溶液を１■いることも
できる。
ルミル化は非常に少量しか起らず、反応時間を長くして
行なっても殆んど目的生成物が認められない程度である
。ｐＨ１〜３．５の範囲内で反応を行なうことは本発明
の必須の要件である。この反応は、反応中にｐＨが高く
なる傾向にあるため、反応過程全般においてｐＨを一定
に維持する必要がある。このｐＨの調節は反応液中に、
徐々に無機酸溶液を加えることにより行ないうる。この
無機酸溶液としては、塩酸や硫酸の１０％溶液が一例と
してあげられ、ｐ−）ルエンスルホン酸を用いることも
可能である。このほか適当な緩衝溶液を１■いることも
できる。
Ｎ−ホルミルペプチドエステルの脱ホルミル化にヒドラ
ジンを用いることは、相当するヒドラジドが生じるため
に不適当であることは前述した（Ｐ、 Ｌｅｆｒａｎｏ
ｉｅｒ、 ｅｔ ａｌ、Ｂｕｌｌ、 Ｓｏａ、 Ｃｈｉ
ｎ、 Ｆ’ｒａｎｏｅ １９６５．３６６８参照）。し
かしながら本発明によればこの欠点はｐＨを１〜３．５
の範囲に維持して反応をおこなうことにより、最小限度
にすることができる。また本発明の方法によれば、ヒド
ラジンの量は脱ホルミル化されるペプチドまたはそのエ
ステル１モルに対して１〜３モルの範囲が適当であり、
一方溶媒はメタノール、メタノール−水混合溶媒または
そのほかの溶媒を用いることができ、溶媒の構造や使用
量は殆んど問題とならない。
ジンを用いることは、相当するヒドラジドが生じるため
に不適当であることは前述した（Ｐ、 Ｌｅｆｒａｎｏ
ｉｅｒ、 ｅｔ ａｌ、Ｂｕｌｌ、 Ｓｏａ、 Ｃｈｉ
ｎ、 Ｆ’ｒａｎｏｅ １９６５．３６６８参照）。し
かしながら本発明によればこの欠点はｐＨを１〜３．５
の範囲に維持して反応をおこなうことにより、最小限度
にすることができる。また本発明の方法によれば、ヒド
ラジンの量は脱ホルミル化されるペプチドまたはそのエ
ステル１モルに対して１〜３モルの範囲が適当であり、
一方溶媒はメタノール、メタノール−水混合溶媒または
そのほかの溶媒を用いることができ、溶媒の構造や使用
量は殆んど問題とならない。
本発明の方法をさらに詳細に述べれば、最初の反応混合
物のｐＨを１〜３．５の範囲に調節し、反応中はこのｐ
Ｈ範囲を維持する。そして温度は２０〜１００°Ｃの範
囲で行なうが、反応時間は温度に依存する。用いる酸は
塩酸、硫酸、硝酸などの強酸性の無機酸などがあげられ
、そのほかトルエンスルホン酸も使用可能である〇 本発明の方法にかかわる反応は高収率で進行する。すな
わち該反応は、前記特定条件下で容易に進行し、生成物
は７５〜９０％またはそれ以上の高収率でえられるが、
この収率は用いられるヒドラジン試薬の種類に依存する
。かかるヒドラジン試薬脱ホルミル止剤としての活性度
は、たとえばもつとも簡単な試薬であるアセチルヒドラ
ジン、ベンゾイルヒドラジン、塩化トリメチルアミノア
セチルヒドラジド（いわゆるジラードＴ （Ｇｉｒａｒ
ａ Ｔ ）とよばれ、複雑な構造を有し、付加的な官能
基やセミカルバジドを有するものである）などがあげら
れる。
物のｐＨを１〜３．５の範囲に調節し、反応中はこのｐ
Ｈ範囲を維持する。そして温度は２０〜１００°Ｃの範
囲で行なうが、反応時間は温度に依存する。用いる酸は
塩酸、硫酸、硝酸などの強酸性の無機酸などがあげられ
、そのほかトルエンスルホン酸も使用可能である〇 本発明の方法にかかわる反応は高収率で進行する。すな
わち該反応は、前記特定条件下で容易に進行し、生成物
は７５〜９０％またはそれ以上の高収率でえられるが、
この収率は用いられるヒドラジン試薬の種類に依存する
。かかるヒドラジン試薬脱ホルミル止剤としての活性度
は、たとえばもつとも簡単な試薬であるアセチルヒドラ
ジン、ベンゾイルヒドラジン、塩化トリメチルアミノア
セチルヒドラジド（いわゆるジラードＴ （Ｇｉｒａｒ
ａ Ｔ ）とよばれ、複雑な構造を有し、付加的な官能
基やセミカルバジドを有するものである）などがあげら
れる。
脱ホルミル化剤として一般式（Ｉ）で表わされるとドラ
ジン誘導体を用いるばあい、その使用量は、脱ホルミル
化されるペプチドまたはそのエステルの１モルに対して
１〜５モルが適当である。ただし経済性を考慮しなくて
もよいばあいは、この試薬の量を多くす乞ことも可能で
ある。
ジン誘導体を用いるばあい、その使用量は、脱ホルミル
化されるペプチドまたはそのエステルの１モルに対して
１〜５モルが適当である。ただし経済性を考慮しなくて
もよいばあいは、この試薬の量を多くす乞ことも可能で
ある。
溶媒はペプチド類のばあいメタノールまたはメタノール
−水混合溶媒が好ましく、ペプチドエステル類のばあい
にはペプチドとエステルを形成しているアルコール残基
と同じアルコール化合物が好ましい。ただし溶媒の構造
糺は、ここでは重要ではなく、シたがって炭素数２〜５
の他のアルコールまたは他の水溶性の溶媒、たとえばジ
オキサン、アセトン、アセトニトリル、ジメチルホルム
アミドなどを用いることができる。また非水溶性の他の
溶媒、たとえば炭化水素、塩素付加炭化水素、エーテル
、ケトン、エステル、それらの混合物も用いることが可
能である。これらすべての溶媒は水の存在下または不存
在下で用いられるため、単一層また番ま二層になること
がある。反応温度はとくに重要でＧｌなく、反応時間に
影響があるだけである。すなわち反応温度は用いる溶媒
に応じて異なり、通常２０〜１５０°Ｏの範囲であり、
また反応時間Ｇマ反応温度により３０分から３０時間の
範囲で変動する。
−水混合溶媒が好ましく、ペプチドエステル類のばあい
にはペプチドとエステルを形成しているアルコール残基
と同じアルコール化合物が好ましい。ただし溶媒の構造
糺は、ここでは重要ではなく、シたがって炭素数２〜５
の他のアルコールまたは他の水溶性の溶媒、たとえばジ
オキサン、アセトン、アセトニトリル、ジメチルホルム
アミドなどを用いることができる。また非水溶性の他の
溶媒、たとえば炭化水素、塩素付加炭化水素、エーテル
、ケトン、エステル、それらの混合物も用いることが可
能である。これらすべての溶媒は水の存在下または不存
在下で用いられるため、単一層また番ま二層になること
がある。反応温度はとくに重要でＧｌなく、反応時間に
影響があるだけである。すなわち反応温度は用いる溶媒
に応じて異なり、通常２０〜１５０°Ｏの範囲であり、
また反応時間Ｇマ反応温度により３０分から３０時間の
範囲で変動する。
つぎに実施例をあげて本発明をより詳細に説明するが、
本発明はそれらの実施例のみに限定されるものではない
Ｏ 反応の進行はＴＬＯ（薄層クロマトグラフィー）により
追跡され、反応過程中に生じた化学構造１１ の変化も
ＴＬＯにより証明しうる。脱ホルミルイヒ生成物には少
量のジケトピペラジンが存在する。
本発明はそれらの実施例のみに限定されるものではない
Ｏ 反応の進行はＴＬＯ（薄層クロマトグラフィー）により
追跡され、反応過程中に生じた化学構造１１ の変化も
ＴＬＯにより証明しうる。脱ホルミルイヒ生成物には少
量のジケトピペラジンが存在する。
この物質、特に２−ベンジル−３，６−シケトー５−ピ
ペラジニル−酢酸は市販のアスパルテーム中に２％程度
存在する。ｔｈ＠ＩＦｏｏａ ａｎａ １）ｒｕｇ 紬
−１ｓｔｒａｔｉｔＴｉｔｌ＠ ２１、Ｃｏｄ＠ ｏｆ
Ｆ＠ｄｅｒａｌ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ 。
ペラジニル−酢酸は市販のアスパルテーム中に２％程度
存在する。ｔｈ＠ＩＦｏｏａ ａｎａ １）ｒｕｇ 紬
−１ｓｔｒａｔｉｔＴｉｔｌ＠ ２１、Ｃｏｄ＠ ｏｆ
Ｆ＠ｄｅｒａｌ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ 。
Ｐａｒａｇｒａｐｈ １２１．１２５８にはアスノぐル
テーム中のこの物質の最大量を２％と定めてＩ／）る。
テーム中のこの物質の最大量を２％と定めてＩ／）る。
゛本発明の方法によりえられたアスノずルテームの純度
試験番マＨＰＬ（７（高速液体クロマトグラフィー）に
より行なわれ前述のジケトピペラジンが最大限０．６〜
０．７％しか含まれていないことが判明した。またアス
パルテーム中の他の不純物としてａ−アスパルチル−フ
ェニルアラニンがあるが、市販のアスパルテーム試薬中
には１％程度存在するのに対し、本発明によりえられた
アスパルテーム中には最大限０．３％しか存在せずこの
点でも改善されている。反応生成物の定結分析にはＧＬ
Ｏ（ガス、液体クロマトグラフィー）を用いた。
試験番マＨＰＬ（７（高速液体クロマトグラフィー）に
より行なわれ前述のジケトピペラジンが最大限０．６〜
０．７％しか含まれていないことが判明した。またアス
パルテーム中の他の不純物としてａ−アスパルチル−フ
ェニルアラニンがあるが、市販のアスパルテーム試薬中
には１％程度存在するのに対し、本発明によりえられた
アスパルテーム中には最大限０．３％しか存在せずこの
点でも改善されている。反応生成物の定結分析にはＧＬ
Ｏ（ガス、液体クロマトグラフィー）を用いた。
実施例１
５−２ｇ （１０ミリモル）のＮ−ホルミル−α−Ｌ−
アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエステルを
３２ｍ／のメタノールに溶解した。これに５．２ｍｚの
水を加え、さらに３％の塩酸水溶液をｏ、ｓｍｔ加えて
ｐＨを２に調節した。溶液を７０°Ｏに加熱し、この温
度を１０時間維持し、この間、ｐＨが常に１．５〜′５
．０の範囲になるように逐次６％の塩酸水溶液を加えて
調節した。 ゛ ＴＬＯ分析（ｍｌ ：メチルエチルヶトン／酢酸／ピリ
ジン／水＝３２／４／２／６、ニンヒドリン発色）：ｎ
ｒＤ、３５（もつとも大きなスポット、アスパルテーム
）ＲｔＤ、１（謝昏ミル化および脱メチル化されたペプ
チド）ＲｔＯ，９（未同定） ＧＬＯ分析：α−Ｌ−アスパルチルーｔ−フェニルアラ
ニンメチルエステル１．９ｉ、（収率６５％） 実施例２ ３．２．（１０ミリモル）のトホルミルーａ−４＋−ア
スパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを６
２ｍ／のエタノールに溶解した。別途、５ｍｔの水に１
、ｓ、 （３０ミリモル）のヒドラジン・１水和物を
溶解した溶液を調製し、これに１５％塩酸水溶液を加え
てｐＨを１．５に調節した。後者の溶液に前者の溶液を
加え、１５％塩酸水溶液を加えてｐＨを１．５に調節し
た。この混合液を７０°Ｏに加熱し、この温度を７．５
時間保持した。この間、１５％塩酸水溶液を逐次加えて
ｐＨをつねに１．５〜６．５の範囲に調節した。
アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエステルを
３２ｍ／のメタノールに溶解した。これに５．２ｍｚの
水を加え、さらに３％の塩酸水溶液をｏ、ｓｍｔ加えて
ｐＨを２に調節した。溶液を７０°Ｏに加熱し、この温
度を１０時間維持し、この間、ｐＨが常に１．５〜′５
．０の範囲になるように逐次６％の塩酸水溶液を加えて
調節した。 ゛ ＴＬＯ分析（ｍｌ ：メチルエチルヶトン／酢酸／ピリ
ジン／水＝３２／４／２／６、ニンヒドリン発色）：ｎ
ｒＤ、３５（もつとも大きなスポット、アスパルテーム
）ＲｔＤ、１（謝昏ミル化および脱メチル化されたペプ
チド）ＲｔＯ，９（未同定） ＧＬＯ分析：α−Ｌ−アスパルチルーｔ−フェニルアラ
ニンメチルエステル１．９ｉ、（収率６５％） 実施例２ ３．２．（１０ミリモル）のトホルミルーａ−４＋−ア
スパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを６
２ｍ／のエタノールに溶解した。別途、５ｍｔの水に１
、ｓ、 （３０ミリモル）のヒドラジン・１水和物を
溶解した溶液を調製し、これに１５％塩酸水溶液を加え
てｐＨを１．５に調節した。後者の溶液に前者の溶液を
加え、１５％塩酸水溶液を加えてｐＨを１．５に調節し
た。この混合液を７０°Ｏに加熱し、この温度を７．５
時間保持した。この間、１５％塩酸水溶液を逐次加えて
ｐＨをつねに１．５〜６．５の範囲に調節した。
ＧＬ（ｌ析：α−Ｉ、−７スバルチルーＬ−フェニルア
ラニンメチルエステル２．ｉ（収率７０％） 実施例３ ３．２． （１０ミリモル）のＮ−ホルミル−α−Ｌ−
アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエステル’
ｅ ！１２１１１／のメタノールに溶解し、これに３．
２膳ｌの水と２．２． （３０ミリモル）のアセチルヒ
ドラジンを加えた。１０％塩酸水溶液を加えてｐＨを２
．５に調節した。反応液を５４°Ｏに加熱し、この温度
を８時間保持した。この間、ｐＨは１．５〜６．５の範
囲に調節した。
ラニンメチルエステル２．ｉ（収率７０％） 実施例３ ３．２． （１０ミリモル）のＮ−ホルミル−α−Ｌ−
アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエステル’
ｅ ！１２１１１／のメタノールに溶解し、これに３．
２膳ｌの水と２．２． （３０ミリモル）のアセチルヒ
ドラジンを加えた。１０％塩酸水溶液を加えてｐＨを２
．５に調節した。反応液を５４°Ｏに加熱し、この温度
を８時間保持した。この間、ｐＨは１．５〜６．５の範
囲に調節した。
ＴＬＣ分析（展開溶媒：メチルエチルケトン／酢酸／ピ
リジン水＝３２／４／２／６、ニンヒドリン発色）：ｘ
ｔ Ｏ，３５（アスパルテーム） Ｒｒｏ、１（脱ホルミル脱メチルペプチド）ＧＬＯ分析
： ａ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチ
ルエステル２．６５．（収率９ｏ％）実施例４ ３．２ｐ（１０ミリモル）のトホルミルーα−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを５２
ｍ１のメタノールに溶解し、これに−３，２１１７の水
と５． （５０ミリモル）のジラードＴを加え、１０％
塩酸水溶液を加えてｐＨを２．５に調節した。
リジン水＝３２／４／２／６、ニンヒドリン発色）：ｘ
ｔ Ｏ，３５（アスパルテーム） Ｒｒｏ、１（脱ホルミル脱メチルペプチド）ＧＬＯ分析
： ａ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチ
ルエステル２．６５．（収率９ｏ％）実施例４ ３．２ｐ（１０ミリモル）のトホルミルーα−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを５２
ｍ１のメタノールに溶解し、これに−３，２１１７の水
と５． （５０ミリモル）のジラードＴを加え、１０％
塩酸水溶液を加えてｐＨを２．５に調節した。
この溶液す７０°’ａに加熱し、この温度を７時間保持
し、この間ｐＨを１．５〜３．５の範囲に調節した。
し、この間ｐＨを１．５〜３．５の範囲に調節した。
ＴＬＯ分析（展開溶媒：メチルエチルケトン／酢酸／ピ
リジン／水＝５２／４／２／６、ニンヒドリン発色）＝
Ｒｔ ０．３５ （アスパルテーム） Ｒｒｏ、１（脱ホルミル脱メチルペプチド）ＧＬＣ分析
：α−Ｌ−アスパルチルーＬ−７エニルアラニンメチル
エステル２．２．（収率７６％）実施例５ ３．２２（１０ミリモル）のＮ−ホルミル−α−Ｌ−ア
スパルチルーＬ−７エエルアラニンメチルエステルｔｔ
３２ｍ／ ｆ）エタノールに溶解し、３．２ミリモル
の水と３．３３． （３０ミリモル）のセミカルバジド
塩酸塩を加えた。ｐＨは２となり、ｐＨの調節は不要で
あった。この溶液を７０°０に加熱し、この温度で８時
間維持し、この間ｐＨを１．５〜３．５に保った。
リジン／水＝５２／４／２／６、ニンヒドリン発色）＝
Ｒｔ ０．３５ （アスパルテーム） Ｒｒｏ、１（脱ホルミル脱メチルペプチド）ＧＬＣ分析
：α−Ｌ−アスパルチルーＬ−７エニルアラニンメチル
エステル２．２．（収率７６％）実施例５ ３．２２（１０ミリモル）のＮ−ホルミル−α−Ｌ−ア
スパルチルーＬ−７エエルアラニンメチルエステルｔｔ
３２ｍ／ ｆ）エタノールに溶解し、３．２ミリモル
の水と３．３３． （３０ミリモル）のセミカルバジド
塩酸塩を加えた。ｐＨは２となり、ｐＨの調節は不要で
あった。この溶液を７０°０に加熱し、この温度で８時
間維持し、この間ｐＨを１．５〜３．５に保った。
ＧＬＯ分析： ａ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルア
ラニンメチルエステル２．４． （収率８３優） 実施例６ ３．２２（１０ミリモル）のトホルミルーａ−Ｌ−アス
パルチル−フェニルアラニンメチルエステルを３２ｍ１
のエタノ−ルに溶解し、３．２の水と４９ （３０ク ミリモル）のベンゾイルヒドラジドを加え、ｐＨを１．
５〜３．５に調節した。この溶液を７０°Ｃ３に加熱し
、この温度で４時間保持し、この間ｐＨを同範囲に保っ
た。反応物を４０°Ｃ以下の温度で真空乾燥させた。こ
れに１０ｍＩ！の水を加え、ｐＨを等電点（ｐＨ＝ ５
．２ ＞に調節し、０°Ｃまで冷却して吸引濾過した。
ラニンメチルエステル２．４． （収率８３優） 実施例６ ３．２２（１０ミリモル）のトホルミルーａ−Ｌ−アス
パルチル−フェニルアラニンメチルエステルを３２ｍ１
のエタノ−ルに溶解し、３．２の水と４９ （３０ク ミリモル）のベンゾイルヒドラジドを加え、ｐＨを１．
５〜３．５に調節した。この溶液を７０°Ｃ３に加熱し
、この温度で４時間保持し、この間ｐＨを同範囲に保っ
た。反応物を４０°Ｃ以下の温度で真空乾燥させた。こ
れに１０ｍＩ！の水を加え、ｐＨを等電点（ｐＨ＝ ５
．２ ＞に調節し、０°Ｃまで冷却して吸引濾過した。
生成物は２．５りのアスパルテームであり、分析の結果
はぼ純粋物であった。
はぼ純粋物であった。
（収率８５．４％）
実施例７
１２．８２５に、のトホルミルーα−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルヲ３０７のジク
ロロエタンに溶解し、これに１０−の氷酢酸、１０１の
メタノールおよび１４に、のアセチルヒドラジンとを加
えた。温度を６４°Ｏまで上昇させ、濃塩酸溶液を加え
てｐＨをつねに２．２〜２．６に保持した。脱ホルミル
化反応は５時間後に完了した。最終容積は８０ｔであっ
た。反応液をＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）
により分析したところ、α−Ｌ−アスパルチルーＬ−７
エ二ルアラニンメチルエステルを含有していた。またそ
の濃度は１３２ｒｍＰ／ｍｌであった。該ＨＰＬ（３の
分析条件はつぎのとおりである。
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルヲ３０７のジク
ロロエタンに溶解し、これに１０−の氷酢酸、１０１の
メタノールおよび１４に、のアセチルヒドラジンとを加
えた。温度を６４°Ｏまで上昇させ、濃塩酸溶液を加え
てｐＨをつねに２．２〜２．６に保持した。脱ホルミル
化反応は５時間後に完了した。最終容積は８０ｔであっ
た。反応液をＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）
により分析したところ、α−Ｌ−アスパルチルーＬ−７
エ二ルアラニンメチルエステルを含有していた。またそ
の濃度は１３２ｒｍＰ／ｍｌであった。該ＨＰＬ（３の
分析条件はつぎのとおりである。
カラム：ＲＰ８１０μ、カラムの温度４５°０１流速２
０Ｑ ／分、２１５ｎｍの紫外線で発色 展開溶媒：ｐＨ７，５のリン酸緩衝液、０．０１Ｍ／ア
セトニトリル ・ リクロソルブ＝９７１α−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの滞留
時間＝５．２分 α−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエ
ステルの収量： １０．５５にバ収率９０％）つぎに反
応液からジクロロエタンとメタノールを真空下で除去し
、５０／の水を加え、ｐＨを５．２に調節した。このｐ
Ｈ値はアスパルテームの沈殿物が生ずる等電点である。
０Ｑ ／分、２１５ｎｍの紫外線で発色 展開溶媒：ｐＨ７，５のリン酸緩衝液、０．０１Ｍ／ア
セトニトリル ・ リクロソルブ＝９７１α−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの滞留
時間＝５．２分 α−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエ
ステルの収量： １０．５５にバ収率９０％）つぎに反
応液からジクロロエタンとメタノールを真空下で除去し
、５０／の水を加え、ｐＨを５．２に調節した。このｐ
Ｈ値はアスパルテームの沈殿物が生ずる等電点である。
飽和食塩水の水浴上にて一５°０で１０時間冷却し、ア
スパルテームを遠心分離し、充分に洗浄した。４５°Ｃ
の循環乾燥器内で乾燥後、つぎの定性分析値を有するア
スパルテームが９ｋｇえられた。
スパルテームを遠心分離し、充分に洗浄した。４５°Ｃ
の循環乾燥器内で乾燥後、つぎの定性分析値を有するア
スパルテームが９ｋｇえられた。
滴定（ＨＰＬＯ）： ９９．３乾燥（９９，５む了）ジ
ケトピペラジン（２−ベンジル−己６−シケトー５−ピ
ペラジニル酢酸）： ０．５％ Ｎ−Ｌ−（１−７スパルチルーＩ、−フェニルアラニン
（脱メチル化したアスパルテーム）： ０．１％ 約１−５ｋｐのアスパルテームを含む母液についてさら
に同じ操作を繰り返すことより、はぼ定量的にアスパル
テームを回収することができた。
ケトピペラジン（２−ベンジル−己６−シケトー５−ピ
ペラジニル酢酸）： ０．５％ Ｎ−Ｌ−（１−７スパルチルーＩ、−フェニルアラニン
（脱メチル化したアスパルテーム）： ０．１％ 約１−５ｋｐのアスパルテームを含む母液についてさら
に同じ操作を繰り返すことより、はぼ定量的にアスパル
テームを回収することができた。
２つの市販のアスパルテームはつぎの分析値を有する。
サンプルＡのＷの分析：純度兇、４％、ジケ） ２−＜
ラジン０．７％、脱メチルアスパルテーム２．１％ サンプルＢのＨＰＬＣの分析：純度９７．０％、ジケト
がラジン２．７４％％脱メチルアスパルテーム ０．４
５％ ＨＰＬＯ分析の条件はつぎの通りである。
ラジン０．７％、脱メチルアスパルテーム２．１％ サンプルＢのＨＰＬＣの分析：純度９７．０％、ジケト
がラジン２．７４％％脱メチルアスパルテーム ０．４
５％ ＨＰＬＯ分析の条件はつぎの通りである。
カラム： １ｉｏｈｒｏｓｏｒｂ ＲＰ１８．１０μ、
長さ２５（至）、内径−展開溶媒：メタノール甲声４の
リン酸緩衝液、流速：２ｗｎｔ１分 発色：２１０ｎｍのＵＶ光 滞留時間 アスパルテーム： １２．８分（純度の決定 ３．６分
）ジケトピペラジン：５．１分 脱メチルアスパルテーム：３．３分
長さ２５（至）、内径−展開溶媒：メタノール甲声４の
リン酸緩衝液、流速：２ｗｎｔ１分 発色：２１０ｎｍのＵＶ光 滞留時間 アスパルテーム： １２．８分（純度の決定 ３．６分
）ジケトピペラジン：５．１分 脱メチルアスパルテーム：３．３分
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １Ｎ−ホルミルペプチドまたはＮ−ホルミルペプチドエ
ステルにヒドラジンまたは一般式（Ｉ）：Ｒ−Ｃ−薦一
皿２（Ｉ） 八 （式中、Ｒは炭素数１〜５の飽和もしくは不飽和、直鎖
もしくは分岐鎖、置換もしくは未置換アルキル基、また
は置換もしくは未置換シクロアルキル基、または置換も
しくは未置換アリール基、またはアミノ基を表わす）で
表わされるヒドラジン誘導体をｐＨ１〜３．５の範囲に
保ちながら反応させることを特徴とするＮ−ホルミルペ
プチドまたはそのエステルからホルミル基を除去する方
法。 ２ ｐＨを１〜′５．５の範囲に保つことが無機酸ま
たは緩衝液を反応液に加えることにより行なわれる特許
請求の範囲第１項記載の方法０６ 前記ヒドラジンまた
は一般式（Ｉ）で表わされるヒドラジン誘導体が前記Ｎ
−ホルミルペプチドまたはそのエステルの１モルに対し
て１〜５モルの割合で使用されることを特徴とする特許
請求の範囲第１項記載の方法。 ４一般式（Ｉ）で示される化合物がアセチルヒドラジド
、ベンゾイルヒドラジド、ジラードＴおよびセミカルバ
ジドよりなる群から選ばれた１種であることを特徴とす
る特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５ 前記反応の反応温度が２０〜１５０°Ｃであること
を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 ６ 前記反応が炭素数１〜５のアルコール溶媒中で行な
われることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ７ 前記アルコール溶媒中に水が加えられていることを
特徴とする特許請求の範囲第６項記載の方法。 ８ 前記反応がケトン類、ジメチルホルムアミド、ジメ
チルスルホキシド、アセトニトリル、脂肪族エステル類
、炭化水素、塩素含有炭化水素およびそれらの混合物よ
りなる群から選ばれた１種の溶媒中で行なわれることを
特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 ９ 前記Ｎ−ホルミルペプチドエステルがＮ−ホルミ
ル−α−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチ
ルエステルであり、ホルミル基除去後ノ生成物がアスパ
ルテームであることを特徴とする特許請求の範囲第１項
記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT21674A/81 | 1981-05-13 | ||
| IT21674/81A IT1194795B (it) | 1981-05-13 | 1981-05-13 | Procedimento per la eliminazione del gruppo n-formile da peptidi n-formilati e da esteri di peptidi n-formilati |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5810546A true JPS5810546A (ja) | 1983-01-21 |
| JPS616080B2 JPS616080B2 (ja) | 1986-02-24 |
Family
ID=11185195
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57079805A Granted JPS5810546A (ja) | 1981-05-13 | 1982-05-11 | Ｎ−ホルミルペプチドエステルからホルミル基を除去する方法 |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4434097A (ja) |
| JP (1) | JPS5810546A (ja) |
| KR (1) | KR840001342B1 (ja) |
| AT (1) | ATA183082A (ja) |
| AU (1) | AU537275B2 (ja) |
| BE (1) | BE893074A (ja) |
| CA (1) | CA1244406A (ja) |
| CH (1) | CH648566A5 (ja) |
| DE (1) | DE3216512C2 (ja) |
| DK (1) | DK208082A (ja) |
| ES (1) | ES511760A0 (ja) |
| FI (1) | FI821412L (ja) |
| FR (1) | FR2505829B1 (ja) |
| GB (1) | GB2098220B (ja) |
| GR (1) | GR75497B (ja) |
| IT (1) | IT1194795B (ja) |
| NL (1) | NL8201821A (ja) |
| NO (1) | NO821585L (ja) |
| NZ (1) | NZ200583A (ja) |
| PT (1) | PT74892B (ja) |
| SE (1) | SE8202787L (ja) |
| YU (1) | YU93882A (ja) |
| ZA (1) | ZA823232B (ja) |
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|---|---|---|---|---|
| US4555362A (en) * | 1983-06-20 | 1985-11-26 | G. D. Searle & Co. | Method and intermediates for producing α-L-aspartyl-L-phenylalanine |
| IT1190395B (it) * | 1985-09-30 | 1988-02-16 | Lark Spa | Procedimento per la rimozione del gruppo formile da un estere di n-formil peptide o di n-formil amminoacido |
| AU2003276835A1 (en) * | 2002-05-24 | 2004-02-16 | Restoragen, Inc. | Polypeptide cleavage process |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1543610A1 (de) | 1966-08-27 | 1969-07-31 | Hoechst Ag | Verfahren zur Herstellung von Aminosaeuren und Peptiden und deren Derivaten |
| US3933781A (en) * | 1973-11-05 | 1976-01-20 | Monsanto Company | Process for the preparation of α-L-aspartyl-L-phenylalanine alkyl esters |
| JPS5823380B2 (ja) * | 1974-12-05 | 1983-05-14 | 味の素株式会社 | ホルミルキノ ダツリホウ |
| JPS5223001A (en) * | 1975-08-14 | 1977-02-21 | Ajinomoto Co Inc | Process for elimination of formyl group |
-
1981
- 1981-05-13 IT IT21674/81A patent/IT1194795B/it active
-
1982
- 1982-04-23 FI FI821412A patent/FI821412L/fi not_active Application Discontinuation
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