JPS5852252A - ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の分解法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ジペプチドエステルとアミノ酸エステルとの
付加化合物の分解法に関するものである。

更に詳しくはジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
の付加化合物を酸で分解し、有機溶媒を用いて両成分を
分離する方法に関するものである。

ジペプチドエステル、例えばＮ−ベンジルオキシカルボ
ニル−α−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニン低
級アルキルエステルとアミノ酸エステル、例えばフェニ
ルアラニン低級アルキルエステルやバリン低級アルキル
エステルなどとの付加化合物は、甘味剤であるα−Ｌ−
アスパルチルーＬ−７エニルアラニン低級アルキルエス
テルへの中間体として、あるいはラセミ体アミノ酸エス
テルの光学分割の中間体などとして有用な化合物である
。

この様な付加化合物はＮ−保繰アミノジカルボン酸とア
ミノ酸エステルを水“性媒体中、蛋白分解酵素の存在下
で反応させることにより（特開昭５３−９２７２９．特
開昭５４−９２２６）　、あるいはジペプチドエステル
とアミノ酸エステルとを水などの溶媒中で反応させるこ
と（％開昭５５−１９２３４．特開昭５５−７３６４４
）などＫよシ得られる。

こうして得られる付加化合物は水に難溶性であるが水性
媒体中で酸で処理すると分解し、酸性水溶液にＪｌｌ溶
性のジペプチドエステルと、易溶性のアミノ酸エステル
塩を与える。そして系はアミノ酸エステル塩を溶質とし
て、かつジペプチドエステルを固相で含む水性混合液と
なる。この水性混合液から分離されるジペプチドエステ
ルはその保獲基を除去することにより直ちにそれ自体有
用な化合物１例えば前述したα−Ｌ−アスパルチルーＬ
−フェニルアラニン低級アルキルエステルなどに変換す
ることができるし、アミノ酸エステルは上述した付加化
合物調製の際にラセミ体を用いても、光学純度の高い状
態で得ることができるので。

この分解及び分離をいかに効率よく行うかは極めて重要
な課題である。

前述した刊行物中には固体の付加化合物を酸性水溶液と
混合反応させ：・□・反応混合液を固液分離し、ジペプ
チドエステルを固相として回収し、一方他方の成分であ
るアミノ参に垂撃酸エステルヲ水性溶液として分離回収
する方法（％開昭５４−９２２６）や付加化合物と酸性
水溶液の混合液中に酢酸エチルのようなジペプチドエス
テルをよく溶解し、かつ水と二相をなすような有機溶媒
を加え、ジペプチドエステルを有機相に他方の成分を酸
性水相中にそれぞれ均一溶液として分離し１回収する方
法（特開昭５３−９２７２９　）が開示されている。

しかしながらこの場合抽出を効率よく行うためには水と
二相を形成することができると同時にジペプチドエステ
ルに対する溶解力の大きい有機溶媒を使用する必要があ
るが、この様な有機溶媒は酢酸エチル等のエステル類や
クロロホルム、二塩化エタン等のノ・ロゲン化ア火キル
類等、比較的限られている。ところがエステル類につい
ては加水分解の問題があり、　ｆ７’ｔノ・ロダン化ア
ルキル類については近年発ガン性が問題になりている折
力・ら責品等の原料となるジペプチドエステルの処理工
程においては極力その使用を避けることが望ましい。一
方ジペプチドエステルに対する溶解力力Ｅｚｊ１さい有
機溶媒の場合は、大量に使用すること力！必要であり、
経済上も問題がある。

本発明者らは、この様な問題点を解決するため付加化合
物の分解法について工業的に有利な方法を鋭意検討した
結果、付加化合物を固相として含む水性混合液に酸及び
水と二相を形成することのできる有機溶媒を混合接触さ
せると意外にも付加化合物の分解によって生成するジペ
プチドエステルの実質的部分が有機溶媒相中にスラリー
の形でとり込まれアミノ酸エステルを含む均一水相から
効果的に分離することを見い出し、本発明を完成した。

即ち本発明は、一般式 で表わされるジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
の付加化合物（式中Ｒ８及びＲ１は低級アルキル基、Ｒ
２及びＲ３はアミノ酸の側鎖基、ｘ社核に置換基を有す
ることのあるベンジルオキシカルボニル基であル、ｎは
１又Ｆｉ２である）を同相として含む水性混合液に水と
二相を形成することのできる有機溶媒及び酸を加えて混
合接触させてこの付加化合物を分解し、一般式 で表わされるジペプチドエステル（式中Ｒ３，Ｒ４。

Ｘ及びｎｔｉ前記同様である）の実質的部分を固相で含
む有機溶媒相と、一般式 ％式％） で表わされるアミノ酸エステル（式中Ｒ□及びへは前記
同様である）を含む水相との二液相を形成させ、有機溶
媒相と水相を分離することを特徴とするジペプチドエス
テルとアミノ酸エステルとの付加化合物の分解法を提供
するものである。

文 本発明で出発原料として用いる水性混合・中に含まれる
一般式（１）で表わされる付加化合物は、その式中Ｕが
１のときアスパラギン酸の、ｎが２のときグルタミン酸
の骨格を含むものである。

Ｒ１及びＲ４はそれぞれ共通の又は別異のメチル基、エ
チル基、プロピル基婢の低級アルキル基である。

Ｒ３及びＲｓ　Ｆｉそれぞれメチル基、イソプロピル基
、イソプデル基、イソアミル基、ベンジル基。

ｐ−ヒドロキシベンジル基等のアミノ酸の側鎖基で６９
．互に共通のときと別異のときを含む。Ｒｓとして扛ベ
ンジル基が特に好ましい。

）Ｉベンジルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジ
ルオキシカルボニル基の様な核Ｋｔ換基ヲ有することの
あるベンジルオキシカルボニル基である。

一般式（１）で表わされる付加化合物を同相で含む水性
混合＃ＬＦｉ、一般式 で表わされるアミノ酸エステルと、一般式で表わされる
Ｎ−保獲アミノジカルボン酸（式中Ｘ及びｕ杜前記同様
の意味を表わす）を水性媒体中、蛋白分解酵素の存在下
で反応させて、水性媒体中に一般式（１）で表わされる
付加化合物を析出させることによシ調製することができ
る。この場合Ｒ，ＦｉＲｌと、Ｒ４はＲ□と共通である
。ま九この場合。

一般式値）で表わされるアミノ酸エステル及び一般式■
で表わされるＮ−保護アミノジカルボン酸として、各々
のＬ一体を用いてもラセミ体を用いても得られる一般式
（１）で表わされる付加化合物のジペプチド部分は常Ｋ
ＬＬ−型である。アミノ酸エステル部分は用いる一般式
（Ｖで表わされるアミノ酸エステルがＬ一体のときはこ
れに従うが、ラセミ体のときはほとんどＤ−型である。

なお以下一般式（１）で表わされる付加化合物、同（幻
で表わされるジペノ°テドエステル、同（１）で表わさ
れるアミノ酸エステル及び同（２）で表わされるＮ−保
護アミノジカルボン酸はそれぞれ付加化合物ジペプチド
エステル、アミノ酸エステル及びＮ−保護アミノジカル
ボン酸と云う。

上述の方法による付加化合物の調製は特開昭５３−９２
７２９号公報等に記載されている公知の条件及び同５５
−７３６４４号公報等に開示されている様にジペプチド
エステルを水性溶媒中でアミノ酸エステルと反応させる
ことＫよっても調整できる。この場合、ジペプチドエス
テルのＬＬ一体を用いてラセミ体のアミノ＠［有］・＠
酸エステルと反応させると王にＤ＝体のアミノ・・＠０
酸エステルと付加化合物を形成する。このようＫして得
られた付加化合物を水性媒体中にｍ濁させ本発明の原料
とすることができる。この場合には、光学分割をうけた
アミン・・邪［相］酸エステルを水相から、有機相から
は、ジペプチドエステルをそれぞれ分離回収することが
できる。

本発明の方法で用いる水性混合液は以上例示した方法に
よって調整された水性混合液に限定されるものでなく、
上記の方法又はその他の方法で得た付加化合物を水に懸
濁した混合液であってよい。

本発明で原料として用いる水性混合液の付加化合物の含
有量は、酸を加えた後の水相の量を後述する量とするこ
とのできる含有量の範囲である。

本発明の方法において使用される有機溶媒としては、ト
ルエン、ベンゼン等の芳香族炭化水素類。

ｎ−ヘキサン、ｎ−へブタン、シクロヘキサン等の脂肪
族系炭化水素類、ジェナルエーテル、ジイノプ口ピルエ
ーテル等のエーテル類、又は、これらの混合液を好適な
例として挙げることができる。

妨 これら以外の有機溶媒についても二相の形成を跨げない
程度であればこれらの有機溶媒と混合して使用してもさ
しつかえない。

本発明の方法において有機相中にスラリーとして分離さ
れたジペプチドエステルのうちＸがベンジルオキシカル
ボニル基の場合には、還元により脱ベンジルオキシカル
ボニルを行うとトルエンを生じる。従って上記溶媒のう
ちトルエンを用いると溶媒の置換を行うことなく還元反
応を行うことが可能でおり、特に有利である。

有！！＃媒の使用量は、水性混合液中の付加化合物１重
量部に対して一般的には約１ないし約２０重量部、好ま
しくは約２ないし約１５重量部、最も好ましくは約３な
いし約１０重量部である。

本発明の方法において化合物■と反応させる酸としては
無機又は有機のブロンステ、ド酸を用いる。無機のブロ
ンステッド酸の例としては塩酸。

臭化水素酸、硫酸、リン酸等を埜げることができる。有
機のブロンステッド酸の例としては、ギ酸。

酢酸、クエン酸、トルエンスルホン酸等を挙けることが
できる。これらの酸り水溶液の形で用いることができる
。その濃度には格別の限定はないので、後述水相の量か
ら他律的に定めてよい。

ま７’４．Ｈ−型陽イオン交換樹脂等の固体の酸も使用
できる。この場合この様な固体酸は系の最下部に沈降す
る。

本発明の酸の使用ｉ１は本発明が本質的に付加化合物の
アミノ≠＝≠；療エステルの部分を酸によって電離させ
、その塩の水□溶液とするものである（ただし固体酸を
用いるときはアミノ酸エステルは固体酸の水素イオンと
イオン交換されて液相系外に出る−から、化学量論量又
は、それ以上即ち付加化合物１モルに対して約１ないし
約１００当量。

好ましくは約１ないし約２０当量、最も好ましく必要と
しない場合もあり得るので、その様な場合は化学量論以
下の量を用いることを妨げるものでない。

本発明の方法は水性混合液の水性媒体及び酸咎に由来す
る水相の童が付加化合物１ｍ蓋部に対して通常的０．３
ないし約２０重量部、好ましくは約０．５ないし約１５
重量部、最も好ましくは約１ないし約１０１ｉ量部の範
囲内となる様にして行なう。

本発明の方法において付加化合物を分解し、相分離を行
なうときの温度は通常的Ｏないし約１００℃、好ましく
は約５ないし約８０℃である。付加化合物の分解反応は
攪拌が十分であれば１通常１０分以内程度で終結する。

但し保嚢基Ｘが比較的加水分解され易い基１例えばｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニル基の様な場合は、積
極的にこれらの基の離脱を同時に行なう場合及びその離
脱を許しても支障のない場合を除き、。これらの基の離
脱を起さない様１反応時間及び反応温度に注意する必要
がある。

付加化合物は、固体であるが酸（酸性水溶液）との接触
によって分解されてジペプチドエステルと、アミノ酸エ
ステルの酸との塩となる。ジペプチドエステルＩＩｉ、
酸性水浴液に対する溶解度が小さいのでその実質的部分
がスラリーとし゛Ｃ有機溶媒相に存在する。一方アミノ
酸エステルの塩は酸性水溶液によく溶解するので固体酸
を用いたとき以外は水相中に溶は込む。固体酸を用いた
ときはその塩として沈殿する。こうして反応系はジペプ
チドエステルのスラリーを含む有機相とアミノ酸うこと
ができる。アミノ酸エステル固体酸塩からの回収も慣用
の手段で容易にできる。

有機スラリー相からは慣用の方法１例えばｔ”過、遠心
沈降もしくＦｉ溶媒を留去する等のｊ５法によシジペグ
チドエステルを回収することができる。

ま良有機スラリー相は、そのまま次工程において脱係鏝
基反応等を行うことができる。特にジペプチドエステル
の一般式（鳳）のＸがベンジルオキシカル、ｆ？ニル基
で有機溶媒がトルエンの場合には、こに移るので効果的
にＮ−保護基の離脱を行なうことができると同時に、離
脱した保護基はトルエンとな夛、これは溶媒のトルエン
と共通であるので。

この離脱反応で溶媒を汚染することがない。それ故こう
して使用された溶媒トルエンは容品に回収され、再使用
できる。

この方法は付加化合物の一般式（１）中の８□及びへが
メデル基、ｎが１の場合に適用して低カロリー甘味剤で
めるアスパルテームを製造する工業的方法として特に有
効である。

本発明の方法において有機スラリー相から分離した酸性
水相からは慣用の方法１例えばこれを鏝縮してアミノ酸
エステルを塩の形で晶出させるとか、或は液性をアルカ
リ性とした後、適当な有機溶媒で抽出する等の方法によ
ってアミノ濠エステルを回収することができる。

なお本発明で用いる原料の成分である付加化合物を前述
した特開昭５３−９２７２９号の方法で得た場合にはそ
のジペプチドエステル部分は、ＬＬ−型であるが、アミ
ノ酸エステル部分はＬ−型の場合。

Ｄ−型の場合及び両者の混合型の場合があり得る。

本発明の方法はこのいずれの場合にも適用可能である。

またジペプチドエステル部分がＤＤ−型、ＤＬ−型又は
ＬＤ−型の場合にも適用可能である。

なお本発明の方法は付加化合物を有機溶媒中へ懸濁させ
て含む懸濁液から出発し、これに水と酸を加えることに
よっても達成できるので１本発明はこの様な方法をも含
むものである。このことはこの様な手法で原料の混合を
行な−）九とき１本発明の一般的に述べた手法で得られ
る状態と同一の状態が達成できることから自明である。

本発明で得られるジペプチドエステルは、ペグチド合成
での中間体としてそれ自体有用であるが。

そのアミノ基の保護基Ｘを離脱させて得られるジペプチ
ドエステルも分有用な化合物である。例えばすでに述べ
た様にα−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメ
チルエステルは甘味剤として有用である。また、ジペプ
チドエステルとラセミ体アミノ参社ホー酸エステルとを
混合して形成した付加化合物からは、光学分割を受けた
アミノ＃ｓａｃ＆＝酸エステルを得ることができるので
光学分チドエステルを溶解する必要がないので、少量の
有機溶媒を用いて効果的に付加化合物の分解並びに生成
するジペプチドエステル及びアミノ酸エステルの分離を
行うことができるので工業的に極めて有利である。

実施例１ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アスノ（ラギン酸
５３．４５ｆとＤＩ、−７エニルアラニンメテルエステ
ル塩酸塩１０７．８４Ｆを２１のフラスコにと夛蒸留水
４００ｄ、５Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液１００ｗＬ１
．および粗製サーモライシン（サーモアーゼＰｇ−１６
０，商標、大和化成■製）７．２１．酢酸力ルシクムー
水塩１．３ｔを加え、４０℃　で攪拌しながら反応させ
た。８時間後、懸濁状の水性混合液から固形物を一部サ
ンプリングし、冷水で充−ターと一致することから、Ｎ
−ベンジルオキシカルボニル−α−Ｌ　−−Ｔスパルテ
ルーＬ−フェニルアラニンメチルエステル（以下Ｚ−Ａ
ＰＭと云う）と主にＤ一体の７エニルアラニンメチルエ
ステルの１＝１付加付加物であることを確認した。

反応混合液である水性混合液にトルエン６０ｒｌｉｕお
よび濃塩酸１００１Ｌｌを加え６０℃で１時間攪拌混合
した。約２０分間静置したのち固形分を含むトルエン相
を均一透明な水相から分離した。トルエン相は、２００
１１Ｊの蒸留水を用いて６０℃で２回洗浄後、室温まで
冷却し、トルエン相の結晶をガラスフィルターによル減
圧下に１取し、乾燥後２−ＡＰＭ７４．４５２　（原料
からの総合収率８６．３チ、純度９９．３１を得た。

実施例２ 実施例１においてＤＬ−７エニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩のかわシにＬ−フェニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩を用い粗製サーモライシン７．２ｔのかわシに
同３．６ｔ、酢陵カルシウムー水塩１．３ｔのかわりに
同０．６Ｆを使用し九以外は実施例１と同様にして反応
を行った。８時間後懸濁状の水性混合液から固形物を一
部サンプリングし。

ｄご オキシカルボニルサζ−アスパルチル−Ｌ−７ｚニルア
ラニンメチルエステル（Ｚ−ＡＰＭ）とＬ−フェニルア
ラニンメチルエステルとのｘ：ｉ付加化合物であること
を確認した。

反応混合液である水性混合液は、実施例１と同様に処理
しトルエン相から濾過によりＺ−ＡＰＭを乾燥後収量７
４．　ｓ６ｙ　（原料からの総合収率８６，４％純度９
９．３チ）１に得た。

実施例３ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−ａ−Ｌ−７スパルチル
ーＬ−フェニルアラニンメチルエステル（２−ＡＰＭ）
　とＤ−フェニル７ラーＬンメチルエステル（以下Ｄ−
ＰＭと云う）との１：１付加化合物和Ｏ２を蒸留水２０
１１１１に懸濁させた液にトルエン３５−とＩＮ−塩酸
水溶液ｉｏｙを加え６０℃で３０分間攪拌した。約２０
分間静置後固形分を含むトルエン相を均一透明な水相か
ら分離した。トルエン相は２ＯＮｌの蒸留水で２回洗浄
後ロータリーエバポレーターで溶媒を留出させｚ−Ａｐ
Ｍ３，４９ｒ（純度９９．５チ）を得た。

実施例４ トルエンのかわりにジイソプロピルエーテルを用いた以
外は、実施例３と同様にして操作を行った。Ｚ−ＡＰＭ
３．３６ｔＣ７ｉＩＪＡ度９７．４％）ヲ４１１゜実施
例５ 付加化合物の懸濁水溶液とトルエンおよび塩酸水溶液と
の攪拌混合の温度および時間を２５℃および６０分に変
更した以外は実施例３と同様にして操作を行った。Ｚ−
ＡＰＭ３．４！Ｖ（純度９９．７慢）を得た。

実施例６ 塩酸のかわりに９５１硫酸１０１１１ｊを用い、蒸留水
２０１Ｌｔのかわりに同３０−を使用した以外は実施例
３と同様にして操作を行った。Ｚ−ＡＰＭ３，４２ｆ（
純度９９．５％）を得た。

実施例７ ９５チ硫酸のかわりに酢酸ｘ、０＋ｊを用いた以外は実
施例６と同様にして操作を行った。Ｚ−ＡＰＭを３．２
１ｆ　（純度９１．８９６）を％ｆｂ実施例８ トルエンのかわりにｎ−ヘプタンを用いた以外は実施例
３と同様にして操作を行った。Ｚ−ＡＰＭを３．２１ｒ
（純度９１．８チ）を得た。

実施例９ Ｚ−ＡＰＭとＤ−ＰＭの１：１付加化合物のかわりにＮ
−ベンジルオキシカルボニル−、−Ｌ−アスパルチル−
Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル（Ｚ−ＡＰＲ）と
Ｄ−ＰＭの１：１付加化合物を５．００？用いた以外は
、実施例３と同様の操作を行ッｆｃ。Ｚ−ＡＰＥ　ｉ　
３，３８９　（純度９９．１％）ｉた。

実施例１０ Ｚ−ＡＰＭとＤ−ＰＭのｌ二１付加化合物の懸濁液のか
わりにＮ−ｐ−メトキシベンジルオキ７カルボニルーα
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエス
テル（ＰＭＺ−ＡＰＭ）とＤ−ＰＭの１：１付加化合物
５，００１の懸濁液を用い、この懸濁水溶液とトルエン
および塩酸水溶液との接触温度を２０℃にした以外は実
施例３と同様にして操作を行った。ＰＭＺ−ＡＰＭを３
．４１　ｆ　（Ｎ度９８．４チ）得た。

実施例１１ １）Ｌ−フェルアラニンメチルエステル６．６６ｇの８
０ｍｔ熱酢酸エチル溶液とＮ−べ／ジルオキシカルボニ
ルーα−Ｌ−７スパルチルーＬ−フェニルアラニンメチ
ルエステル’１．７２９の２００ｄ熱酢酸エチル溶液と
を混合し、−夜室温に放置した後生成した付加化合物を
濾過、分離乾燥して付加化合物を得た。こうして得た付
加化合物５，００１を蒸留水２０１に懸濁でせて水性混
合液を得た。この水性混合液にトルエｙ３５ｍ／とＩＮ
−塩酸水溶液１０１１を加え、６０℃で３０分間攪拌し
、２０分間靜装置た。

固形分を含むトルエン相を均一透明な水相から分離した
。トルエン相を２０ｄの蒸留水で２回洗浄した後、ロー
タリーエバポレーターで溶媒を留去し、Ｚ−ＡＰＭ３．
４７Ｆ　（純度９９．６％）を得た。

一方トルエン相と分離した水相とトルエン相の洗液を合
併し、炭酸ナトリウムを加えて液性をｐＨ８としたのち
、ジクロルメタンで抽出した。ジクロルメタン相は無水
硫酸マグネシウムで乾燥し、塩化水素カスを吹込んだの
ち濃縮した。更にこれにジエチルエーテルを加えて結晶
を析出させこれｔＰ取シｆｌニー。Ｄ−７エニルアラニ
ンメチルエステル塩酸塩の結晶１．５８　ｆ　（光学純
度９７ｓ）を得た。

実施例１２〜１５ Ｚ−ＡＰＭとＤ−ＰＭ（７）１：１付加化合物のかわ、
Ｄ　Ｋ、　Ｚ　−ＡＰＭとフェニルアラニンメチルエス
テル以外の他のアミノ酸エステルとの１＝１付加化合物
５．０Ｏｆを用い実施例３と同様にして操作を行った。

その結果を次表に示した。

実施例　　付加化合物　　　回収Ｚ−ＡＰＭ（純度）１
２　　Ｌ−バリンエテルエステル　　　３．５８ｆ（９
９，２Ｕ１３　　Ｄ−７う＝ンｌｆルｘｘチル　　３．
９２ｆ（９９，３％）１４　　Ｌ−ロイシンエチルエス
テル　　３．４１ｆ（９９，１％）１５　　Ｄ−チロシ
ンメチルエステル　　３．１３ｆ（９８，８チ）特許出
願人　東洋曹達工業株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 中　一般式 で表わされるジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
   の付加化合物（式中Ｂ、及びＲ４は低級アルキル基、Ｂ
   、及びＲ１はアミノ酸の側鎖基、Ｘは核に置換基を有す
   ることのあるベンジルオキシカルボニル基でＴｏｎ、ｍ
   は１又は２である）を固相として含む水性混合液に水と
   二相を形成することのできる有機溶媒及び酸を加えて混
   合接触させてこの付加化合物を分解し、一般式 で表わされるジペプチドエステル（式中Ｒ，。 Ｒ４，Ｘ及びｎＦｉ前記同様である）の実質的部分を同
   相で含む有機溶媒相と、一般式 で表わされるアミノ酸エステル（式中８□及びＲ２は前
   記同様である）を含む水相との二液相全形成させ、有機
   溶媒相と水相を分離することを特徴とするジペプチドエ
   ステルとアミノ酸エステルとの付加化合物の分解法。 （２）　　水と二相を形成することのできる有機溶媒が
   脂肪族系もしくは芳香族系の炭化水素類又はエーテル類
   である特許請求の範囲第１項記載の分解法。 （３）水と二相を形成することのできる有機溶媒として
   トルエンを用いる特許請求の範囲第１項記載の分解法 （４）水と二相を形成することのできる有機溶媒を、付
   加化合物を完全に溶解できる量未満の量で用いる特許請
   求の範囲第１項ないし第３項のいずれかの項記載の分解
   法。 （５）水と二相を形成することので睡る有機溶媒を付加
   化合物１重量部に対して約１ないし約２０重量部用いる
   特許請求の範囲第１項表いし第３項のいずれかの項記載
   の分解法。 （６）酸として無機のプロンステ、ド酸を用いる特許請
   求の範囲第１項表いし第５項のいずれかの項記載の分解
   法。 （７）酸として有機のプロンステ、ド酸を用いる特許請
   求の範囲第１項ないし第６項のいずれかの項記載の分解
   法。 （８）　　酸の使用量が付加化合物１モル当夛約１ない
   し約１０当量である特許請求の範囲第１項ないし第７項
   のいずれかの項記載の分解法。 （９）酸を水溶液の形で用いる特許請求の範囲第６項な
   いし第８項のいずれかの項記載の分解法。 （６）水相の量が付加化合物１重量部に対して約１ない
   し約１０重量部となる量の水性混合液及び酸を用いる特
   許請求の範囲第１項ないし第９項のいずれかの項記載の
   分解法。 Ｉ　付加化合物のジペプチドエステル部分がＬＬ−型で
   ある特許請求の範囲第１項ないし第１０項のいずれかの
   項記載の分解法。 Ｑ３　　Ｒ□及びＲ４がメチル基又はエチル基、町がベ
   ンジル基＆　Ｒ，がメチル基、イソブチル基。 イソブチル基、ベンジル基又＃′ｉｐ−ヒドロギシヘ：
   ／’）ＩＬ’−＃　Ｘがベンジルオキシカルボニル基又
   ＃′ｉｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル基であＬ
   ｍが１である特許請求の範囲第１項ないし第１１項のい
   ずれかの項記載の分解法。 ０　水性混合液が、一般式 ％式％ で表わされるアミノ酸エステル（式中Ｒ１は低級アルキ
   ル基、Ｒ２はアミイ酸の側鎖基である）と　一般式 ％式％ で表わされるＮ−保護アミノジカルボン酸式中Ｘは置換
   基を有することのあるベンジルオキシカルボニル基であ
   りｎは１又は２である）を水性媒体中、蛋白分解酵素の
   存在下で反応させて一般式 で表わされるジペプチドエステルとアミノ酸エステルと
   の付加化合物（式中Ｒ１，Ｒ２，Ｘ及びｍは前記同様で
   めシ％　Ｒ３及びＲ４はそれぞれＲ１及びＲ８と同一め
   基である）ｔ−生成させた反応生成液である特許請求の
   範囲第１項ないし第１１項のいずれかの項記載分解法。 Ｉ　付加化合物、ジペプチドエステル、アミノ酸エステ
   ル及びＮ−保護アミノジカルボン酸の一般式中のＲ１及
   びＲ４がメチル基又はエチル基、Ｒ２及びＲ３がベンジ
   ル基、Ｘがベンジルオキシカルボニル基又はｐ−メトキ
   シベンジルオキシカルボニル基であり、ｎが１である特
   許請求の範囲第１３項記載の分解法。 ａθ　用いるアミノ酸エステル及びＮ−保護アミノジカ
   ルボン酸がそれぞれ独立にＬ−型又はＬ−型とＤ−型一
   の混合物である特許請求の範囲第１１項又扛第１２項記
   載の分解法。 α０　分離した有機溶媒相をジペプチドエステルの脱離
   反応に用いる特許請求の範囲第１項なｉし第１３項のい
   ずれかの項記載の分解法、Ｊ（ロ）分離した水相からア
   ミノ酸エステルを回収する特許請求の範囲第１項ないし
   第１４項のいずれかの項記載の分解法