JPS597698B2 - フエガノマイシン群抗生物質 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般式（Ｉ） （式中、Ｒ１は水素原子または水酸基を、Ｒ２は水酸基
、アスパラギン酸残基、アスパルチル・アルギニン残基
またはアスパルチル・グリシル・プロリル・スレオニン
残基を示す。

）で表わされるフエガノマイシン群抗生物質に関するも
のである。本発明者らは上記一般式（１）において、Ｒ
１およびＲ２が共に水酸基で表わされる化合物をフエガ
ノマイシン（以下「ＰＨＧ］という。）、Ｒ１が水酸基
、Ｒ２がアスバラギン酸残基で表わされる化合物をフエ
ガノマイシンＤ（以下「ＰＨＧＤ」という。）、Ｒ１が
水酸基、Ｒ２がアスパルチル・アルギニン残基で表わさ
れる化合物をフエガノマイシンＤＲ（以下「ＰＨＧ−Ｄ
Ｒ］という。）、Ｒ１が水酸基、Ｒ２がアスパルチル・
グリシル・プロリル・スレオニン残基で表わされる化合
物をフＣエガノマイシンＤＧＰＴ（以下［ＰＨＧ−ＤＧ
ＰＴ」という。）、Ｒ１が水素原子、Ｒ２がアスバラギ
ン酸残基で表わされる化合物をデオキシフエガノマイシ
ンＤ（以下「デオキシＰＨＧ−Ｄ］という。）と命名し
た。これらはすべて新規抗生物質である。なお本発明で
はこれらの化合物を繰称してフエガノマイシン群抗生物
質という。次に本発明のフエガノマイシン群抗生物質の
理化学的性状を示す。１ 外観：無色の粉末 ２．元素分析値（％）： ３．分子量： ４．融点：フエガノマイシン群抗生物質は明瞭な融点ま
たは分解点を示さないがＰＨＧ−Ｄ、ＰＨＧ−ＤＲｌデ
オキシＰＨＧ−Ｄは２３０℃以上で、またＰＨＧ，．Ｐ
ＨＧ−ＤＧＰＴは２１０℃より徐々に分解する。

５．比旋光度： ６．紫外線吸収スベクトルリフエガノマイシン群抗生物
質の紫外線吸収スペクトルを第１図に示す。

ＰＨＧ，．ＰＨＧ−Ｄ，．ＰＨＧ−ＤＲｌＰＨＧ−ＤＧ
ＰＴは２８２ｎｍに肩を有し、２８２ｎｍに吸収極大を
有する。それらの１％ Ｅ はそれぞれ２７．２、２２．４１７．６１ｃｒｒ
Ｌ− ― ） ） ０ ）
１６．２である。

１またデオキシＰＨＧ−Ｄは２７７ｎｍ １％ １％ （Ｅｌ４．５）と２８３ｎｍ（Ｅｌ４．３）１ＣＴｒＬ
゜１ＣＴＩ１゛に二つの吸収極大を有している。

７．赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠として測淀
したＰＨＧ，．ＰＨＧ−Ｄ，．ＰＨＧ−ＤＲ，．乏ＰＨ
Ｇ−ＤＧＰＴおよびデオキシＰＨＧ−Ｄの赤外線吸収ス
ペクトルを第２図ないし第６図に示す。

各化合物の吸収極大値（波数ＣｒｒＬ−１ ）を以下に
示す。ＰＨＧ；３３５０、３０２７（Ｓｈ）、２９７０
，．シ１６６０１１６１０１１５３５、１４７５、１４
４５、１４０５、１３７５、１３３５、１２８５、１２
３５、１１９０１１０７０１９９０、９４０、９２５、
８５５、８２０。

ＰＨＧ−Ｄ；３４００１３２３０（Ｓｈ）、 Ｊ
３Ｏ８Ｏ（Ｓｈ）、２９７０１１６６０１１６１０１１
５３５、１４７５、１４４５、１４００、１３３０１１
３００１１２３５、１１９０、１０７０１９９０、９４
０、９２５、８５５、８２００− ＰＨＧ−ＤＲ：３３５０、３１７０（Ｓｈ）、３０７０
（Ｓｈ）、２９３０、１６５０１１５３０、１４６５、
１４３５、１４００、１３３０、１２８５、１２３５、
１１７０、１０７０、９９０１９４０、９３０、８５５
、ＰＨＧ−ＤＧＰＴ；３４３０、３０５０（Ｓｈ）、２
９７０、１６５０、１５５０１１５３０、１４４０１１
３９５、１３３０、１２３５、１１９０１１０７５、９
９５、９２５、８５５、８２００ デオキシＰＨＧ−Ｄ；３４３０、３２３０（Ｓｈ）、３
０７０（Ｓｈ）、２９５０１１６６０、１５３０、１４
３０１１４００１１３３０１１３００１１２３０、１１
８０、１０９０、９９０、９３０、８５０、８１５０ ３．溶剤に対する溶解性：フエガノマイシン群抗生物質
はメタノール、エタノール、プロパノール、アセトン、
酢酸エチル、酢酸ブチル、エーテルおよびベンゼンなど
の有機溶媒にはほとんど溶けない。

またＰＨＧ，．ＰＨＧ−ＤＲｌＰＨＧ−ＤＧＰＴは水に
よく溶けるがＰＨＧ−ＤおよびデオキシＰＨＧ−Ｄはこ
れらに比して溶解度が小さい。→．呈色反応：フエガノ
マイシン群抗生物質は、ニンヒドリン反応、ライドンス
ミス反応、ペンタシアノアクオフエリエイト反応、パウ
リ反応は陽性、テトラゾリウムクロライド反応、工ール
リツヒ反応は陰性を示す。

坂口反応はＰＨＧＤＲのみ陽性で他は疑陽性を示す。１
０，酸加水分解生成物：フエガノマイシン群抗生物質を
６規定塩酸、１０５℃、１７時間封管中で加水分解後ア
ミノ酸分析を行いそのモル比をもとめた。

その結果を第２表に示す。以上のことから本発明のフエ
ガノマイシン群抗生物質は新規化合物であると判断した
。

逐※ 次に本発明のフエガノマイシン群抗生物
質の抗菌スペクトルを第３表および第４表に示す。フエ
ガノマイシン群抗生物質は、第３表および第４表に示す
如くグラム陽性菌および陰性菌、カビ、酵母類に対して
ぱほとんど活性を示さない。しかし抗酸性菌に抗菌活性
を示し、そのうちでＰＨＧ−ＤＲは最も強く阻止した。
また既知抗生物質耐性マイコバクテリウム６０７に対し
交差耐性を示さなかつた。フエガノマイシン ＤＲのマ
ウンに対する毒性（ＬＤ５Ｏ）は４００η／Ｋ９（１．
ｖ．）以上で、毒性の弱いことを示した。

フエガノマイシン群抗生物質は以上の結果から明らかな
ように抗結核剤として期待できるものである。本発明の
フエガノマイシン群抗生物質は例えばストレプトミセス
属に属するフエガノマイシン群抗生物質生産菌を培地に
培養し、フエガノマイシン群抗生物質を生成蓄積せしめ
、これを採取することによつて製造することができる。

ストレプトミセス属に属するフエガノマイシン群抗生物
質生産菌の代表的なものとしては、財団法人微生物化学
研究所において昭和４７年９月、山梨県河口湖の土壌か
ら分離したストレプトミセス・シラートウスＭＤ２２７
−Ａ９（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｃｉｒｒａｔｕｓＭ
Ｄ２２７−Ａ９）（以下「ＭＤ２２７−Ａ９株」という
。

）（工業技術院微生物工業技術研究所受託番号第３５８
６号、ＦＥＲＭ−ＰＳ）．３５８６）があげられる。以
下にＭＤ２２７−Ａ９株の菌学的性状を示す。１．形態 ＭＤ２２７−Ａ９株は顕微鏡下で分枝した基中菌糸より
螺旋状の気菌糸を形成し、輪生枝はみとめられない。

成熟した胞子鎖は１０個以上の胞子の連鎖をみとめ、胞
子の大きさは０．６〜０．８×１．０〜１．２ミクロン
位で胞子の表面は平滑である。２．各種培地における生
育状態 色の記載について〔〕内に示す標準はコンテイナ一・コ
ーポレーシヨン・オブ・アメリカのカラー・ハーモニイ
・マニユアル（ＣＯｎｔａｉｎｅｒＣＯｒｐＯｒａｔｉ
ＯｎＯｆ飾ＥｒｉｃａのＣＯｌＯｒＨａｒｍＯｎｙｌｌ
ａｎｌｌａｌ）を用いた０１）シユクロース・硝酸塩寒
天培地（２７゜Ｃ培養）無色の発育上に、茶白〜ピック
白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素はみとめら
れない。

２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃培養）
発育は無色〜うす黄、気菌糸は着生せず、溶解性色素も
みとめられない。

３）グリセリン・アスパラギン寒天培地 （ＩＳＰ一培地５、２７０℃培養） よす黄茶の発育上に、うすピック〔６ｅｃ、ＰＯｗｄｅ
ｒＲＯｓｅ′）ゝピック灰〔６ｇｅ１Ｒ０ｓｅＧｒａｙ
〕〜赤昧灰の気菌糸を着生し、溶解性色素はかすかに茶
色味をおびる程度である。

４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ一培地４、２７
０℃培養）無色〜うす黄の発育上に、うすピック〔５ｅ
ｃ．ＤｕｓｔｙＰｅａｃｈ〕〜うす赤茶の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに茶色昧をおびる程度である。

５）チロシン寒天培地（ＩＳＰ一培地７、２７゜Ｃ培養
）灰昧黄茶〜黄茶の発育上に、うすピック 〔７ｅｃ１Ｒ０ｓｅＭｉｓｔ〕〜ピック灰〔６ｇｅ１Ｒ
０ｓｅＧｒａｙ〕 の気菌糸を着生し、暗い茶の溶解性
色素を産生する。

３）栄養寒天培地（２７℃培養） 発育は灰昧黄茶〜茶色、気菌糸は着生せず、茶色の溶解
性色素を産生する。

１）イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ一培地２、２７０
℃培養）うす黄茶〜黄茶の発育上に、うすピック〔〔７
ｅｃ１Ｒ０ｓｅＭｉｓｔ〕〜ピック灰〔６ｇｅ１Ｒ０ｓ
ｅＧｒａｙ〕 〜赤味灰の気菌糸を着生し、溶解性色素
はみとめられない。

３）オートミール寒天培地（ＩＳＰ一培地３、２７゜Ｃ
培養）無色の発育上に、うすピック〔６ｅｃ、 ＰＯｗｄｅｒＲＯｓｅ〕〜うす赤茶の気菌糸を着生し、
溶解性色素はみとめられない。

（９）グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）無色
の発育上に、茶白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性
色素はみとめられない。

（代）スターチ寒天培地（２７゜Ｃ培養）無色〜うす黄
、あるいはうすオリーブの発育上にうすピック〜うす赤
茶の気菌糸を着生し、溶解性色素はかすかに黄色味をお
びる程度である。

（自） リンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）無色の発
育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素は
みとめられない。

（代）セルロース（２７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素もみとめら
れない。

（自）ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（２０℃培養）では、無色〜うす黄茶
の発育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、茶の溶解
性色素を産生する。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（２７℃培養）で
は、発育は灰味黄茶、気菌糸は着生せず、溶解性色素は
暗い茶を呈する。（自）脱脂牛乳（３７℃培養） 発育はうす黄茶〜黄茶、わずかな白色の気菌糸を着生し
、明るい茶〜茶色の溶解性色素を産生する。

３．生理的性質 （１）生育温度範囲 グルコース・アスパラギン寒天を用い、 ２０℃、２４℃、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各
温度で試験の結果、５０℃を除いて、何れの温度でも生
育するが、最適温度は２７℃〜３０℃と思われる。

（２）ゼラチンの液化（グルコース・ペプトン・ゼラチ
ン培地、２７℃培養および１５％単純ゼラチン培地、２
０℃培養）単純ゼラチン培地の場合は液化はみとめられ
ない。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、培養後１４
日目頃から液化が始まり、その作用は中等度〜弱い方で
ある。（３）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒
天培地およびスターチ寒天培地、何れも２７℃培養）培
養後５日目頃から水解性がみとめられ、その作用は中等
度〜強い方である。

（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養）凝固しないで培養後１０日目頃からペプトン化が
始まり、１４日目頃には完了する。

その作用は中等度〜強い方である。（５）メラニン様色
素の生成（トリフトン・イースト・プロス、ＩＳＰ一培
地１、ペプトン・イースト・鉄寒天、ＩＳＰ一培地６；
チロシン寒天１ＳＰ一培地７、何れも２７℃培養）何れ
の培地でもみとめられる。

（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ＩＳＰ一培地９、２７℃培養）グルコース、Ｌ−ア
ラビノース、Ｄ−フラグドーズを利用し，て発育し、シ
ユクロース、イノシトール、ラムノース、ラフイノース
、Ｄ−マンニトールは利用しない。

Ｄ−キシロースはおそらく利用しない。（７） リンゴ
酸石灰の溶５解（リンゴ酸石灰寒天、２７℃培養）培養
後１０日目頃から発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し、そ
の作用は中等度〜強い方である。

（８）硝酸塩の還元反応（１．０％硝酸ソーダ含有ペプ
トン水、ＳＰ一培地８、２７℃培養）陽性である。

以上の性状を要約するとＭＤ２２７−Ａ９株はストレプ
トミセス属に属し、気菌糸は螺旋形成をみとめ、輪生枝
はみられず、胞子の表面は平滑である。

種々の培地で無色〜うす黄茶あるいは黄茶の発育上に、
うすピック〜ピック灰あるいはうす赤茶の気菌糸を着生
し、溶解性色素はほとんどみとめられない。

メラニン様色素は陽性、蛋白分解力、スターチの水解性
は中等度〜強い方である。これらの性状よりＭＤ２２７
−Ａ９株に近縁の既知菌種を検索するとＩＳＰ記載から
ストレプトミセス●シラートウス（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙ
ｃｅｓｃｉｒｒａｔｕｓｌ文献１）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｎａｌＪＯｕｒｎａｌＯｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃ
ｔｅｒｌＯｌＯｇｙｌ２２巻、２８４頁、１９７２年；
文献２）ＴｈｅＪＯｕｒｎａｌＯｆＡｎｔｉｂｌＯｔｉ
ｃｓ，．Ｓｅｒ．Ａｌｌ６巻、黒２、５９頁、１９６３
年）とストレプトミセス・グリゼオラベンドウス（Ｓｔ
ｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｇｒｉｓｅＯｌａｖｅｎｄｕｓｌ
ＩｎｔｅｒｎａｔｉＯｎａｌＪＯｕｒｎａｌＯｆＳｙｓ
ｔｅｍａｔｉｃＢＡｃｔｅｒｌＯｌＯｇｙｌｌ９巻、４
３４頁、１９６９年）＊があげられる。次に実際にこれ
ら２種の菌株を入手し、ＭＤ２２７−Ａ９株と比較検討
した成績の大要を示すと次の如くである。表にみられる
如くＭＤ２２７−Ａ９株とストレプトミセス・シラート
ウスＳＰ５４７９株とは、硝酸塩の還元反応、牛乳の凝
固およびＤ−キシロースの利用性を除いてほぼ一致して
いる。

ストレプトミセス・シラートウスの牛乳の凝固性は文献
（２）にぱ陰性と記載されている如く極く弱いもので、
又硝酸塩の還元反応の相異は一般的に余り重要とはみと
め難く、Ｄ−キシロースの利用性が一番大きな相異点と
判断される。

他方ストレプトミセス・グリゼオラベンドウスＩＳＰ５
３８５株とは、螺旋形成の有無、牛乳の凝固、さらにＬ
−アラビノースおよびＤ−フラグドーズの利用性でも相
異点をみとめる。これらの相異点の中、螺旋形成につい
てはストレプトミセス・グリゼオラベンドウスは文献に
よると気菌糸の先端が鉤状あるいはループ状になる場合
が記載されているが、この比較実験ではＩＳＰの培地上
では螺旋形成は全くみとめられず、牛乳の凝固、Ｌ−ア
ラビノースの利用と併せてＭＤ２２７−Ａ９株との大き
な相異点と判断される。これらの点からＭＤ２２７−Ａ
９株はストレプトミセス・シラートウスに最も近縁の種
と考えられ、ストレプトミセス・シラートウスＭＤ２２
７一Ａ９と同定した。

放線菌は人工的に、又自然界で変異をおこし易いが、こ
こにいうＭＤ２２７一Ａ９はそれらの変異菌のすべてを
包括する。これらの菌種はまたフエガノマイシン群抗生
物質を生産し、本菌種およびその変質菌と明確に区別さ
れない菌はすべてこれを包含する。フエガノマイシン群
抗生物質生産菌によりフエガノマイシン群抗生物質を製
造するには、先ず前記菌株を放線菌が利用し得る栄養物
を含有する培地で好気的に培養する。

栄養源としては、従来から放線菌の培養に利用されてい
る公知のものが使用でき、例えば、炭素源としてはグル
コース、デンブン、マルトース、デキストリン、シェー
クロース、水飴（デンプン麦芽糖化物）、大豆油などを
単独または組み合わせて用いることができる。

無機および有機窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ソーダ、
ペプトン、肉工キズ、酵母工キズ、乾燥酵母、コーンス
チープリカ一、大豆粉、綿実油ガス、カザミノ酸、バク
トソイトン、ソリユブルベジタブルプロテインなどを単
独または組み合わせて用いることができる。その他必要
に応じて食塩、硫酸マグネシウム、硫酸銅、硫酸鉄、硫
酸亜鉛、塩化マンガン、炭酸カルシウム、燐酸塩などの
無機塩類を加えることができるほか本菌の生育やフエガ
ノマイシン群抗生物質の生産を促進する有機物、たとえ
ばアミノ酸類や無機物を適当に添加することができる。
培養法としては液体培養法、特に深部攪拌培養法が最も
適している。培養温度は２５℃〜４０℃、ＰＨは中性な
いし微酸性で培養を行うことが望ましい。液体培養では
通常３日ないし１０日間培養を行うとフエガノマイシノ
群抗生物質が培養液中に生成蓄積される。培養液中の生
成量が最大に達したとき培養を停止し、菌体を沢別し、
得られる培養沢液中より目的物を精製単離する。培養沢
液から本物質の精製単離には一般に微生物代謝生産物を
その培養液から単離するために用いられる分離精製の方
法が利用される。

フエガノマイシ７群抗生物質は水によく溶けるがメタノ
ール、エタノール、アセトンをはじめとする一般有機溶
媒には不溶ないし、溶けにくい物質で、その精製はいわ
ゆる水溶性塩基性物質の精製に用いられる方法により行
われる。すなわちカチオン交換樹脂、アンバーライト８
ＸＡＤ−２および活性炭末による吸脱着法、セフアデツ
クス Ｇ−１０、ＣＭセフアデツクス８Ｃ−２５のカラ
ムクロマトグラフイ一などの方法を適当に組み合わせて
用いることができる。例えば培養沢液をＰＨ６．５に調
整した後、アンバーライト８ＸＡＤ−２に吸着さノ せ
、水洗後５０％メタノールで溶出し、活性区分を濃縮後
凍結乾燥する。得られた茶褐色の粗粉末をメタノールで
可溶部分を除去し、不溶物を乾燥後水に溶解し、活性炭
末カラムに吸着後水洗し、０．１規定塩酸：アセトン（
１容：１容）で溶出し、一
、 ９τ 得られた活性区分を弱塩基性
樹脂ダウエツクス４４（０Ｈタイプ）で中和した後濃縮
凍結乾燥し、灰褐色のフエガノマイシン群抗生物質（混
合物）を含有する粗粉末を得る。これを少量の０．０５
Ｍ食塩水に溶かし、ＣＭセフアデツクス Ｃ−２５９の
カラムに吸着させ、０．０５Ｍ〜１．０Ｍの食塩水で濃
度勾配溶出を行うと、０．０５Ｍ〜０．１Ｍの濃度でＰ
ＨＧ−ＤＧＰＴ．．ＰＨＧ−Ｄ１デオキシＰＨＧ−Ｄが
、０．４Ｍ付近でＰＨＧが、また０．５Ｍ付近でＰＨＧ
−ＤＲがそれぞれ溶出される。これらをアンバーライト
８ＸＡＤ−２に吸着させ、水洗後５０％メタノール水で
溶出することにより脱塩し、凍結乾燥する。ここに得ら
れたそれぞれの粗粉末を少量の水に溶かし、セフアデツ
クスＧ−１０カラムに吸着させ水で展開し、着色物質を
除去し、活性区分を濃縮し凍結乾燥する。淡黄色のＰＨ
Ｇ−ＤＧＰＴ，．ＰＨＧ−Ｄ１デオキシＰＨＧ−Ｄの混
合物を少量の水に溶かし、ＣＭセフアデツクス Ｃ−２
５のカラムを用い、０．０５Ｍ食塩水で溶出するとＰＨ
Ｇ−ＤＧＰＴｌＰＨＧ−Ｄ１デオキシＰＨＧ−Ｄの順で
溶出される。各活性区分を前述の方法で脱塩を行い、そ
れぞれの無色粉末を得る。以下に実施例により本発明の
フエガノマイシン群抗生物質の製造法について述べる。

実施例 １ ０ータリ一型振盪機用５００ｍ１容バツフル付き三角フ
ラスコに、デンプン１％、グルコース１％、大豆粉１．
５％、第２燐酸カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０
．１％、食塩０．３％、硫酸銅０．０００７％、硫酸鉄
０．０００１３％、塩化マンガン０．０００８％、硫酸
亜鉛０．０００２％、消泡剤としてシリコンＫＭ−７０
（信越化学製）：大豆油（局法）（１：１）０．０５％
、ＰＨ６．８、１２０℃、２０分間オートクレーブ滅菌
した培地１２０ｍ１をとり、これにＭＤ２２７−Ａ９株
（微工研菌寄第３５８６号）の１白金耳を接種し、２８
℃、１８０回転／分、２日間振盪培養した。

これとは別に前記同様の三角フラスコに水飴５％、ポリ
ペプトン０，５％、肉工キズ０．５％、酵母工キズ０．
３％、食塩０．３％、硫酸マグネシウム０．１％、硫酸
銅０．０００７％、硫酸鉄０，０００１３％、塩化マン
ガン０．０００８％、硫酸亜鉛０．０００２％、消泡剤
としてシリコンＫＭ−７０：大豆油（局法）（１：１）
０．０５％ＰＨ６．８、１２０℃、２０分間、オートク
レーブ滅菌した培地１２０ｍ１をとり、これに前記培養
液２〜３ｍ１を移植し、前記と同じ条件下で５日間振盪
培養した。培養液はＰＨ６．５で沢過し、沢液１０ｆ！
を得た（培養力価２５ｍｃｇ力価／ｍｌ：但しＰＨＧ−
ＤＲｌＯＯＯｍｃｇ力価／Ｔｆｌ９）。アンバーライト
９ＸＡＤ−２１１を充填したカラムにこの沢液を通し、
フエガノマイシン群抗生物質（混合物）を吸着させ、水
洗後５０％メタノール水で溶出した，活性区分を集め、
減圧下で濃縮し、凍結乾燥し、焦茶色の粉末５，９０１
（３８ｍｃｇ／〜）を得た。これを２５０ｍ１のメタノ
ールで処理し、可溶部を除去した後、不溶部を減圧下で
乾燥し、３．８２ｙ（５５ｍｃｇ力価／Ｔｆ！９）の褐
色粗粉末を得た。これを水３８２ｍ１に溶かし、活性炭
末１００ｍ１のカラムに吸着させ、水洗した後、０．１
規定塩酸：アセトン（１：１）で溶出し、活性区分をダ
ウエツクス ４４（０Ｈ−）で中和し、減圧下で濃縮凍
結乾燥した。得られた灰色粗粉末１．４０７（９０ｍｃ
ｇ／Ｔｒｌ９）を０．０５Ｍ食塩水５０ｍ１に溶かし、
予め０．０５Ｍ食塩水で平衡化したＣＭセフアデツクス
Ｃ−２５、５００ｍ１のカラムに吸着させ、０．０５
Ｍ食塩水５００ｍ１で溶出した後、０．３および０．７
Ｍの食塩水各２１の直線濃度勾配法で溶出した。０．０
５Ｍ（′ＰＨＧ一ＤＧＰＴ，．ＰＨＧ−Ｄ１デオキシＰ
ＨＧ−Ｄの混合物、０．４Ｍ付近でＰＨＧｌＯ．５Ｍ付
近でＰＨＧ一ＤＲの順序で溶出された。

各活性区分をアンバーライト９ＸＡＤ−２３０ｍ１に吸
着せしめ、水洗した後、５０％メタノール水で溶出する
脱塩操作により得られた活性区分を減圧下で濃縮凍結乾
燥し、それぞれ淡黄白色をおびた粉末８７η（２８７ｍ
ｃｇ力価／Ｗｌ９）、無色の粉末１０η（１００ｍｃｇ
力価／Ｔｎ９）、無色の粉末５０η（１０００ｍｃｇ力
価／即）を得た。淡黄色を有するＰＨＧ−ＤＧＰＴ．Ｐ
ＨＧ−Ｄ、デオキシＰＨＧ−Ｄを含有する混合物８７Ｔ
！１９を水３〜５ｍ１に溶かし、予め水で膨潤化したセ
フアデツクス８Ｇ−１０３００ｍ１のカラムを通過させ
着色物質を除去し、活性区分を集め３〜５ｍ１に減圧下
で濃縮し、直ちに予め０．０５Ｍ食塩水で平衡化した［
株］ＣＭセフアデツクス Ｃ−２５２００ｍｅのカラム
に吸着させ、０．０５Ｍ食塩水で溶出し、ＰＨＧ一ＤＧ
ＰＴ．．ＰＨＧ−Ｄ１デオキシＰＨＧ−Ｄの順序で溶性
区分を得た。

次に前述した脱塩操作により脱塩し、純粋のＰＨＧ−Ｄ
ＧＰＴ２Ｏｍｇ（２５０ｍｃｇ力価／７ｎ９）、ＰＨＧ
−Ｄ２ＯＴＩｉ９（５００ｍｃｇ力価／１Ｔ１９）、デ
オキシＰＨＧ−ＤｌＯη（５００ｍｃｇ力価／η）の無
色粉末を得た。実施例 ２実施例１と同様にしてＭＤ２
２７−Ａ９株（微工研菌寄第３５８６号）を培養して得
た前培養液３１？を実施例１記載の生産培地１２０，ｅ
を仕込んだ２００１容ステンレス製発酵槽に移植し、２
８℃、４日間通気攪拌方式（回転数３８０回／分通気量
１２０１／分）により培養を行つた。

フエガノマイシン群抗生物質（混合物）の生成濃度、１
５ｍｃｇ力価／ｍｌ（ＰＨＧ−ＤＲｌＯＯＯｍｃｇ力価
／〜）を含む培養液１００１に沢過助剤ダイ− ８力
ライト 〔ダイカライト・オリエント（株）〕３ｋ９を
加え、菌体を沢別した。

沢液８０１を１規定の苛性ソーダーでＰＨ６．５に調整
し、アンバーライト ＸＡＤ−２１０１のカラムに通し
、目的成分混合物を吸着させた。カラムを水洗後５０％
メタノール水で溶出し、活性区分を集め、減圧下で濃縮
凍結乾燥し、８０ｙの焦茶色の粗粉末（１３ｍｃｇ力価
／ワ）を得た。次にこの粗粉末８０７をメタノール３１
で処理し可溶部を除去した後、不溶部を減圧下で乾燥し
、焦茶色の粗粉末４０ｙ（２０ｍｃｇ力価／ワ）を得た
。この粉末を８００ｍｊの水に溶かし、活性炭末１／？
のカラムに通し、フエガノマイシン群抗生物質（混合物
）を吸着させ、水洗後、０．１規定塩酸：アセトン（１
．、 ８容：１容）で溶出し、活性区分をダウエツク
ス４４（０Ｈ）で中和し、濃縮凍結乾燥した。

得られた褐色粗粉末１３ｙ（５０ｍｃｇ力価／Ｍ９）を
０．０５Ｍ食塩水２００Ｔ！１１に溶かし、予め０．０
５Ｍ食塩水で平衡化したＣＭセフアデツクス８Ｃ２５３
１のカラムに吸着させ、０．０５Ｍ食塩水６１で溶出し
た後、０．３Ｍ１０．４Ｍｓ０，５Ｍの食塩水各６１で
ステップワイスに溶出した。０．０５Ｍ濃度でＰＨＧ−
ＤＧＰＴ．ＰＨＧ−Ｄ、デオキシＰＨＧ−Ｄの混合物、
０．３〜０．４Ｍ濃度付近にＰＨＧ、０．５Ｍ濃度でＰ
ＨＧ−ＤＲの各成分が溶出された。

各活性区分を実施例１と同様の脱塩法ＺＺで脱塩し、減
圧下で濃縮、凍結、乾燥し、ＰＨＧＤＧＰＴ．ＰＨＧ−
Ｄ、デオキシＰＨＧ−Ｄの淡黄白色をおびた混合物４５
０ワ（３６６ｍｃｇ力価／Ｔｌ９）、ＰＨＧの無色粉末
５０労（１００ｍｃｇ力価／ｍク）およびＰＨＧ−ＤＲ
無色粉末２５０ｍク（１０００ｍｃｇ力価／ワ）を得た
。

次に淡黄色をおびた混合物４５０ワを水２０ｍ１に溶−
、 ９かし、予め水で膨潤化したセフアデツクス Ｇ
ｌＯｌ．５ｌのカラムを通過させ着色物質を除去し、活
性区分を減圧下で１０〜１５ｍ１に濃縮し、それを直ち
に０，０５Ｍ食塩水で平衡化したＣＭセフアデツクス
Ｃ−２５１１のカラムに吸着させ、０．０５Ｍ食塩水で
溶出するとＰＨＧＤＧＰＴ．ＰＨＧ−Ｄ、デオキシＰＨ
Ｇ−Ｄの順に溶出された。

それぞれの活性区分を前述の脱塩操作により脱塩し、純
粋のＰＨＧ−ＤＧＰＴｌ５Ｏｍ′（２５０ｍｃｇ力価／
ワ）、ＰＨＧ−Ｄｌ５Ｏ即（５００ｍｃｇ力価／η）、
およびデオキシＰＨＧ−Ｄ５Ｏη（５００ｍ０ｇ力価／
ヮ）の無色粉末を得た。

【図面の簡単な説明】

第１図は、フエガノマイシン、フエガノマイシンＤ１フ
エガノマイシンＤＲｌフエガノマイシンＤＧＰＴおよび
デオキシフエガノマイシンＤの紫外線吸収スペクトルを
、第２図ないし第６図は臭化カリウム錠として測定した
フエガノマイシン、フエガノマイシンＤ１フエガノマイ
シンＤＲｌフエガノマイシンＤＧＰＴ、デオキシフエガ
ノマイシンＤのそれぞれの赤外線吸収スペクトルを示し
たものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１は水素原子または水酸基を、Ｒ＿２は水
   酸基、アスパラギン酸残基、アスパルチル・アルギニン
   残基またはアスパルチル・グリシル・プロリル・スレオ
   ニン残基を示す。 ）で表わされるフエガノマイシン群抗生物質。