JPS6019494A - I−2物質およびその製造法 - Google Patents

I−2物質およびその製造法

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JPS6019494A
JPS6019494A JP12925183A JP12925183A JPS6019494A JP S6019494 A JPS6019494 A JP S6019494A JP 12925183 A JP12925183 A JP 12925183A JP 12925183 A JP12925183 A JP 12925183A JP S6019494 A JPS6019494 A JP S6019494A
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tetramethylsilane
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JP12925183A
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Heiichi Sakai
酒井 平一
Yasuichi Nakakita
保一 中北
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  • Anti-Oxidant Or Stabilizer Compositions (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は優れた抗酸化作用を有する新規物質である1
−2物質およびその製造法に関するものである。
この発明のl−2物質の理化学的性質は次の通シである
1)分子量: 340,2586(高分解能マヌスベク
1ル法) 2)分子式:C25H620□ 3)融点:133−135°C 4)紫外線吸収スペクト/I/ニ ジKBr=550.0,2900,2850.1461
1)、1440゜aX 1310.1210.1170.8600116)水素
の核磁気共鳴スペクトルC溶媒二重クロロホルム、内部
標準:テトラメチルシラン):δ(pI)m)=1.4
(’18H,s) 、2.2(6H,s)、3.8(2
H。
S)、5.7(2H,s)、6.9(4H,5)7)炭
素16の核磁気共鳴スペクトル(溶媒二重クロロホルム
、内部標準(テトラメチルシラン):δ(I)])m)
=20.834(q) 、 29.972(q)、 3
2.141(t)。
34.310(S)、 126.349(d)、126
.59.5(S)、128.810(C1)、 129
.687(S)、 136.315(S)、 150.
059(S)8)溶媒に対する溶解性 不溶:水 可溶:エタノール、アセトン、酢酸エチル、ベンゼン、
ヘキサノ 9)呈色反応: インドフェノール反応 (+) 塩化第2鉄反応 ←) 過マンガン酸カリウム溶液の脱色反応 (+)この発明
の1−2物質は、例えばペニシリウム属に属するl−2
物質生産菌のようなl−2物質生産菌を培地に培養し、
得られる培養物か′らI−2物質を分離、採取すること
によシ製造することができる。この発明で使用するI−
2物質生産菌のうち、この発明者らが堺市内の土壌から
新たに分離した菌株(C−268株と番号を付−j)は
、次のような菌学的性質を有する。
1)形態学的性質 a)肉眼的観察 1)ツアペック寒天培地 生育は良好で、25°C,148間の培養で直径75f
ft以上に生育する。集落表面は羊毛状、白色の気生菌
糸で覆われ、分生子の形成部分でオリーブ色かかる。分
生子の形成は良好で、透明の分泌液を生ずる。裏面は白
色、茶色、黄茶色、茶褐色。
67°Cの条件下での生育は、14日間の培養で直径4
0Mの集落を形成する。集落表面は薄いピンクまたは白
色で、0・た状、セクターが生ずる。裏面は、黄味光か
ら明茶色。
)))麦芽抽出寒天培地 生育は良好で、25°C114日間の培養で直径80π
m以上の集落を形成する。集落表面はオリーブ灰色、灰
味緑色のフェルト状で、L@養7日目ごろから気生菌糸
が生ずる。分生子の形成は非常に良好、多くの集落でセ
クターが形成される。裏面は薄い黄橙色から明るい茶色
b)顕微鏡的観察 有性生殖器官の形成は観察されない。
無性生殖器官は多数形成され、分生子形成様式はフィア
ロ型。分生子柄は直立、分枝し、先端はフィアライドに
なり、分生子連鎖を生ず。
分生子柄は、長さ250 /Z以下、幅2−6.5/’
s滑面からやや粗面で無色。メトレ、フィアライドから
なるペニシリンを形成。
ペニシリンは非対称体−複輪生体で、顕著な散開型菌群
。まれにメトレを欠き、単輪生体が生ずる。分生子連鎖
はもつれ合って散開する。
メトレは、長さ15’−19μ、幅2−′5.5p、6
−5本が頂部で輪生。
フィアライドは、長さ9−13μ、幅25−6μ、とっ
くり型で先端部が2μと長い。滑面、無き71−レから
生ずるものは比較的密に平行に並ぶが、単輪生体のもの
は、いくぶん散開する。
分生子は、面域形、両端に突起をもちレモン型に近い。
淡緑色で、2−3X3−4μの太きさ、やや粗面。
2)生理的性質 pH温度 生育しつる条件 20〜110 4〜68°C最適生育
条件 60 30°C 上記の菌学的諸性質を、レイパーら著[ア マニュアル
 オブ サ′ ベニシリア(A manua工of t
he Per11ci土1ia)J (ウィIJ7ムス
 7:/1−’ ウイルキンヌ社、1949年)および
宇田用俊−ら著「菌類図鑑」(講談柱、1975年)等
により検索すると、本菌株はペニシリウム・ヤンティネ
ルム・ビオルクに属する菌であると考えられる。
従って、とのC−268株をペニシリウム・ヤンティネ
ルム・ビオルク Q −26B (R:+n1cill
i −um janthine]−工um Biour
ge C−−268)と命名した。
このベニシリウムーヤンティネルム・ビオルクC−26
8は、工業技術院微生物工業技術研究所に漱工@菌寄第
7124号として、昭1;1158年7月1日に寄託さ
れ℃いる。
この発明で使用されるI−2物質生産菌、例えばペニシ
リウム属に属する1−2物質生産菌は、例えばX線、紫
外線などの照射処理、ナイトロジェン・マスタード・ア
ザセリン、亜fA酸、2−7ミノプリン、N−メチル−
N′−ニトロ−N//−ニトロソクアニジン(NTG)
などの変異誘起剤による処理、ファージ接触、形質転換
、形質導入、接合などの通常用いられる菌株変異処理方
法によシ、I−2物質の生産能を高めることができる。
この発明のI−2物質の生産は、例えばペニシリウム属
に属する1−2物質の生産菌を培地で培養することによ
り行われる。培養は、−殺微生物の培養法に準じ、表面
培養でも深部培養でも実施できるが、通常は液体培地に
よる深部通気攪拌培養で行うのが好ましい。培養に用い
られる培地は、ペニシリウム属に属する1−2物質生産
菌が利用できる栄養源を含有する培地であればよく、合
成培地、半合成培地または天然培地が用いられる。
培地組成は炭素源として、例えばグルコース、サッカロ
ース、マルトース、グリセリン、テン粉、液化でん粉な
どが用いられ、窒素源として、例えば肉エキヌ、カゼイ
ン加水分解物、ペプトン、グルテンミール、コーンミー
ル、IIB実粕、大豆粉、コーンスチープリカー、乾燥
酵母、酵母エキス、尿素、りん酸アンモニウムなどが用
いられる。このほか、例えばりん酸水素2すトリウム、
りん酸2水素カリウム、塩化マグネシウム、炭酸カルシ
ウム、塩化第2鉄、硫酸亜鉛などの無機塩も必要に応じ
て培地に添加される。
また、培養中に発泡の著しい時には、例えば大豆油、亜
麻仁油などの植物油、オクタデカノール、テトラデカノ
ール、オクタツール、へブタノールなどの高級アルコー
ル、シリコーン化合物などの消泡剤を適宜添加すればよ
い。
培養温度は通常30°C前後が適当であり、培養容量の
増大に従って適宜種i@養を行うと好結果が得られるこ
とが多い。本培養の培養時間は50〜100時間位が適
当であり、培地が濃厚になるにじてそれぞれの最適条件
を選択して適用される。
次に、培養により生成したI =2物質は通常、培養物
中から採取される。採取法は特に制限されず、生産され
た化合物の理化学的性状を利用した公知の各種方法がい
ずれも採用できる。例えば、菌体をろ別したろ液に、減
圧濃縮、溶媒抽出、液性変換、例えば陰イオン交換樹脂
、陽イオン交換樹脂、非イオン性吸着樹脂などの樹脂に
よる処理、例えば活性炭、けい酸、シリカゲル、アルミ
ナ、セルロースなどの吸着剤による処理、結晶化、再結
晶等の手段を任意の順序に組合せまたは反復して適用す
ることにより目的物質であるl−2物質を分離、精製す
ることができる。
公知化合物との理化学的性質を比較した結果を第1表に
示し、また1−2物質および公知化合物(A)の赤外線
吸収スペクト/I/を各々第1図および第2図に示した
(A) 2.2’−メチレンビヌ(4−メチ/し、76
−t−グチルフエノー/I/) @ 4.4’−メチレンビス(2−メチル−6−t−ブ
チルフェノール)および (C) 2.2’−メチレンビス(6−メチ/l/−6
−を−グチルフェノ−/I/) 第1表 せ八べ寸ンーベ、ぜン 鴫1;1 第1表ならびに第1図および第2図に示されるように1
−2物質は化合物(A)、◎および(qとは異なる物質
である。
この発明の1−2物質は抗酸化作用を有する。
次に、1−2物質ふζよび市販の各種抗酸化剤の抗酸化
試験データを示す、ヵ 1)試験法 リノール酸6グを容量501!I10ビーカーに精秤し
、試験化合物のエタノール溶液(1”?/wrt )0
.6ゴを添加後、通風装置例の恒温器内(66°C)に
留置する。一定時間ごとにリノール酸0.52を降取し
、生成した過酸化物の量(meCvkg )を測定する
。過酸化物の測定は、「農芸化学実験書」、@2巻、第
716ベー°ジ(京都大学農学部編、産業図書社)に従
った。
試験化合物 (i) 1−2物質 (11) σ−トコフェロール (IN) 2.6−ジーt−ブチル−p−クレゾール(
BHT)Ov) t−ブチル−4−ヒドロキシアニソー
ル(BHA) M 2.2’−メチレンビス(4−メチル−6−t−ブ
チルフェノール) (vl) 4.4’−メチレンビス(2−メチル−6−
t−)゛チルフェノール 2)試験結果 各経過時間におけろ過酸物量(meqAg)を第2表に
示す。
第2表 上記試験結果に示されるように、この発明の目的物質で
あるI−2物質は優れた抗酸化力を有し、抗酸化剤とし
て有用である。
次に実施例に基づいてこの発明を説明する。
実施例 (1)培養 1)種培養 内容5 0 0カlの振盪フラスコに下記の組成の液体
培地( pE(6.0 ) 1 0 0mlを仕込み、
殺菌後、ペニシリウムζヤンティネルム・ビオルグ−2
68の斜面培地から一白金耳を植菌し、5°Cで3日間
振盪培養を行い、本培養の種菌〜だ。
也:サッカロース 20g ポリペプトン 10y− リン酸二水素刀すウム 、12 硫酸マグネシウム・7水塩 0.5!i2塩化カリウム
 0.57 塩化第2鉄・6水塩 10〜 硫酸亜鉛・7水塩 10m2 水 1000gt 2)本培養 内容60eのジャーク1−ノンターに種培養と同じ組成
の液体培地20gを仕込み、殺菌後、上記の種培養を植
イ」け、攪拌速度毎分150回転、通気量2r)17m
in、培養温度25°cf、3日間培養した。
(2)12物質の分離、精製 上記培養1’M(401>をろ過し菌体を除去した@養
ろ液を等量の酢酸エチルで抽出し、該抽出液用いたカラ
ムクロマトグラフィーに(;tL、ヘキサンー酢酸エチ
ル混合溶媒で溶出する。ヘキサン−酢酸エチル(90:
10)混合溶媒のM出画分を濃縮し、残渣を再度シリカ
ゲルを用いたカラムクロマトグラフィに(t Lヘキサ
ン−ベンゼン(7:6)の混合溶媒で溶出した。目的物
質を含む分画を合せ、濃縮乾固した後、熱ヘキ勺ンより
再結晶し、無色結晶の1−2物質(15”P)を得た。
【図面の簡単な説明】
第1図はI−2物質の赤外線吸収スペクトル(KBr錠
)を、第2図H2,2’−メ+vンヒy、 (4−メチ
ル−6−t−ブチルフェノ−/I/)の赤外線吸収スベ
ク)/しくKBr錠)をそれぞれ示すものである。 特許出願人 酒 井 平 − 呂 2 呂 呂 8 8 8 呂 8 3(もl No
工5SI14SN■、L

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 (1)次の理化学的性質を有する1−2物質およびその
    塩。 1)分子量: 340.2383(高分解能マヌヌベク
    トル法) 2)カゴ式:C25H5202 6)融点:133−135°C 4)紫外線吸収スペクト/I/: H30H λmax =210.220(sh)、280nm5)
    赤外線吸収スペク) /l/ (第1図)ニジ誌互−3
    500,2900,2850,1460,1440゜−
    1゛ 1310.1210,1170.860an6)水素の
    核磁気共鳴ヌベクトル(溶媒:重クロロホルム、内部標
    準:テトラメチルシラン):δ(pl)m)=1.4(
    18H,s)、 2.2(6H,s) 、3B(2H,
    s)、5.7(2H,s)、6.9(4H,5)7)炭
    素16の核磁気共鳴スペクト/l/ (溶媒二重クロロ
    ホルム、内部標準:テトラメチルシラン): δ(ppm)= 20.834((1) 、29.97
    2 ((1) 、 32.141(t)、 34.31
    0(S)、 126.34惧)、 126.593(S
    )。 128.810 ((1)、 129.687(S)、
     136.315(S)。 −150,059(S) 8)溶媒に対する溶解性: 不溶:刀( 可溶:エタノール、アセトン、酢酸エチル、ベンゼン、
    ヘキサン 9)呈色反応: インドフェノール反応 ←) 塩化第2鉄反応 (→ 過マンガン酸カリウム溶液の脱色反応 (ト)(2)ペ
    ニシリウム属に属する1−2物質生産菌を培地に培養し
    、得られる培養物からI−2物質を分離、採取すること
    を特徴とするI−2物質の製造法。
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