JPS6024190A - インダンジオンカルボン酸の製造方法 - Google Patents
インダンジオンカルボン酸の製造方法Info
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- JPS6024190A JPS6024190A JP13209283A JP13209283A JPS6024190A JP S6024190 A JPS6024190 A JP S6024190A JP 13209283 A JP13209283 A JP 13209283A JP 13209283 A JP13209283 A JP 13209283A JP S6024190 A JPS6024190 A JP S6024190A
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- Japan
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- acid
- indandionecarboxylic
- propionic acid
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- simplex
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- Pending
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/44—Polycarboxylic acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
不発明は−３−（ヒドロキシまたはオキソ）−ステロイ
ドを出発物質とする式（１）で示される７ａβ−メチル
−】、５−ジオキソ−３ａα−へキサヒドロインダン−
４α−プロピオン酸（以下簡略化の為、単にインダンジ
オンプロピオン酸という）の微生物学的製造法に関する
： ＨＯＯＣ５ ＼／′ インダンジオンプロピオン酸（Ｉｌは公知の化合物であ
り、］］９−ノルステロイド抗アンドロゲン剤などの原
料として有用である。この化合物の微生物学的製造法も
既に知られており、例えば特開昭５３−６９８８５号お
よびＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ
Ａｃｔλ ５３１ ３０８頁【】９７ｆｏｒｔｕｉ
ｔｕｍ ＮＲＲＬ Ｂ −３１２ｇ株を作用させて式（
Ｉｌの化合物を製造する方法が開示されている。
ドを出発物質とする式（１）で示される７ａβ−メチル
−】、５−ジオキソ−３ａα−へキサヒドロインダン−
４α−プロピオン酸（以下簡略化の為、単にインダンジ
オンプロピオン酸という）の微生物学的製造法に関する
： ＨＯＯＣ５ ＼／′ インダンジオンプロピオン酸（Ｉｌは公知の化合物であ
り、］］９−ノルステロイド抗アンドロゲン剤などの原
料として有用である。この化合物の微生物学的製造法も
既に知られており、例えば特開昭５３−６９８８５号お
よびＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ
Ａｃｔλ ５３１ ３０８頁【】９７ｆｏｒｔｕｉ
ｔｕｍ ＮＲＲＬ Ｂ −３１２ｇ株を作用させて式（
Ｉｌの化合物を製造する方法が開示されている。
しかしながら、この先行技術の方法は収率が低く実用的
価値に乏しい。
価値に乏しい。
不発明者らは、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｉｍｐｌ
ｅｘ （アースロバフタ−・シンプレックス）ＩＦ０３
５３０株をＮ−メチル−Ｎ＋−ニトロ−Ｎ−二トロンク
アニジンで処理してそのインダンジオンプロピオン酸代
謝（資イい系を破壊した変異株で３−（ヒドロキシまた
はオキソ）−ステロイドを処理したところ、高収率で式
（１）の化合物が得られることを見い出した。
ｅｘ （アースロバフタ−・シンプレックス）ＩＦ０３
５３０株をＮ−メチル−Ｎ＋−ニトロ−Ｎ−二トロンク
アニジンで処理してそのインダンジオンプロピオン酸代
謝（資イい系を破壊した変異株で３−（ヒドロキシまた
はオキソ）−ステロイドを処理したところ、高収率で式
（１）の化合物が得られることを見い出した。
即ち本発明は、インダンジオンプロピオン酸ｆＩ）を資
化する代謝系を欠損するアースロバフタ−・シンプレッ
クスの変異株を３−（ヒドロキシまたはオキソ）−ステ
ロイドに作用させ、次いで生成物を分離、採取すること
を特徴とするインダンジオンプロピオン酸（月の製造方
法を提供するものである。
化する代謝系を欠損するアースロバフタ−・シンプレッ
クスの変異株を３−（ヒドロキシまたはオキソ）−ステ
ロイドに作用させ、次いで生成物を分離、採取すること
を特徴とするインダンジオンプロピオン酸（月の製造方
法を提供するものである。
不発明方法の原料として使用される３−（ヒドロキシま
たはオキソ〕−ステロイドには、コレステロール、シト
ステロール、カンペステロール、】、４−アンドロスタ
ジエン−３，１７−ジオン、４−アンドロステン−３，
Ｉ７−ジオン、テストステロン、プロゲステロンおよび
胆汁酸などが含まれる。
たはオキソ〕−ステロイドには、コレステロール、シト
ステロール、カンペステロール、】、４−アンドロスタ
ジエン−３，１７−ジオン、４−アンドロステン−３，
Ｉ７−ジオン、テストステロン、プロゲステロンおよび
胆汁酸などが含まれる。
不発明で使用する菌株は、インダンジオンプロピオン酸
（Ｉ）代謝系を欠損したアースロバフタ−・シンプレッ
クスの変異株である。この様な菌株の代表的なものとし
て、既述したアースロバフタ−・シンプレックスＩＦＯ
−３５３０株をＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−二トロ
ングアニジンで処理して得られる変異株が挙げられる。
（Ｉ）代謝系を欠損したアースロバフタ−・シンプレッ
クスの変異株である。この様な菌株の代表的なものとし
て、既述したアースロバフタ−・シンプレックスＩＦＯ
−３５３０株をＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−二トロ
ングアニジンで処理して得られる変異株が挙げられる。
この菌株は、本発明者らによりアースロバククー・シン
プレックスＩＤ−３８−６と命名され一微生物工業技術
研究所に寄託されている（受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−２
６０）。
プレックスＩＤ−３８−６と命名され一微生物工業技術
研究所に寄託されている（受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−２
６０）。
この菌株は、アースロバフタ−・シンプレックスＩＦＯ
３５３０株の化学変異株であり、形態学的および栄養学
的特性は親株と全く同一である。
３５３０株の化学変異株であり、形態学的および栄養学
的特性は親株と全く同一である。
以下に、本発明に係る製造法を更に詳細に説明する。
適当な培地にアースロバフタ−・シンプレックス変異株
を接種して種菌培養する。次いて一原利（基質〕として
のステロイドを含有する培地に種菌を接種し、常法に従
って本培養を行なう。培養終了後、培養液から抽出など
常法により原料を除去し、水層を酸性にして生成物を常
法により抽出する。この抽出物を濃縮して得られる残留
物を常法により精製すればインダンジオンプロピオン酸
（Ｉ）が得られる。
を接種して種菌培養する。次いて一原利（基質〕として
のステロイドを含有する培地に種菌を接種し、常法に従
って本培養を行なう。培養終了後、培養液から抽出など
常法により原料を除去し、水層を酸性にして生成物を常
法により抽出する。この抽出物を濃縮して得られる残留
物を常法により精製すればインダンジオンプロピオン酸
（Ｉ）が得られる。
上記の製造法に於いて、本培養における培地中のステロ
イド濃度は０．１〜０．２重量係であるのが好ましい。
イド濃度は０．１〜０．２重量係であるのが好ましい。
この濃度範囲においては、インダンジオンプロピオン酸
［１１の収率は約８５〜９７％に達する。
［１１の収率は約８５〜９７％に達する。
以下に実施例を挙げる。
実施例］
バクトニュートリエントブロス（商品名：Ｄｉｆｃｏ
社製）０．０８ｇとバクトイ−ストエキス（商品名：Ｄ
ｉｆｃｏ社製）Ｏ，Ｏ］ Ｑ ニ脱イ、ｔ ７ＺＫを加
えて全容を１Ｏｔｓｌとし、１Ｎ−水酸化す） ＩＪウ
ム水でｐＨ７，０に調整したものを液体培地として大型
試験管に入れ、１２０℃で１５分間蒸気滅菌した。一方
、アースロバフタ−・シンプレックスＩＦＯ３５３０菌
株を２０％ポテト汁寒天斜面培地（ｐＨ７，Ｑ）で、３
日間２８℃で培養し−そ−の一白金耳の接種物を上記液
体培地に接種した。
社製）０．０８ｇとバクトイ−ストエキス（商品名：Ｄ
ｉｆｃｏ社製）Ｏ，Ｏ］ Ｑ ニ脱イ、ｔ ７ＺＫを加
えて全容を１Ｏｔｓｌとし、１Ｎ−水酸化す） ＩＪウ
ム水でｐＨ７，０に調整したものを液体培地として大型
試験管に入れ、１２０℃で１５分間蒸気滅菌した。一方
、アースロバフタ−・シンプレックスＩＦＯ３５３０菌
株を２０％ポテト汁寒天斜面培地（ｐＨ７，Ｑ）で、３
日間２８℃で培養し−そ−の一白金耳の接種物を上記液
体培地に接種した。
２８℃で２０時間振盪し１こものを種菌とし、その１
ｖｒｌを同じ組成の液体培地１０ｍｅに接種して２８℃
で４時間振盪培養した。培養後遠心分離（」２０００ｇ
、１０分間）して集菌し、Ｍ／２ＯＮａ ２ＨＰＯ４−
ＫＨ２ＰＯ４緩衝液（ｐＨ７，Ｑ 〕テ洗浄した。これ
を細胞数が約４．４ Ｘ ］ ０ ／ｍｔとなる様に同
じ緩衝液に懸濁し−Ｎ−メチルーＮ’−ニトローＮ−ニ
トロソグアニジンを最終濃度力月ＯＯＯμＱ／ｍｌとな
る様に加え、２８℃で４０分間振借した。この細胞懸濁
液を繰り返し遠心分離して生理食塩水で２回洗い、細胞
の生理食塩水懸濁液として、直径９ Ｃ１ｎのべ） Ｉ
Ｊ皿に分注し１こ普通寒天培地（田水製薬社製）平板に
分散させ１こ。この平板を２８℃で３日間培養し、出現
した集落を二種の組成の最小栄養培地の平板にレプリケ
ートした。
ｖｒｌを同じ組成の液体培地１０ｍｅに接種して２８℃
で４時間振盪培養した。培養後遠心分離（」２０００ｇ
、１０分間）して集菌し、Ｍ／２ＯＮａ ２ＨＰＯ４−
ＫＨ２ＰＯ４緩衝液（ｐＨ７，Ｑ 〕テ洗浄した。これ
を細胞数が約４．４ Ｘ ］ ０ ／ｍｔとなる様に同
じ緩衝液に懸濁し−Ｎ−メチルーＮ’−ニトローＮ−ニ
トロソグアニジンを最終濃度力月ＯＯＯμＱ／ｍｌとな
る様に加え、２８℃で４０分間振借した。この細胞懸濁
液を繰り返し遠心分離して生理食塩水で２回洗い、細胞
の生理食塩水懸濁液として、直径９ Ｃ１ｎのべ） Ｉ
Ｊ皿に分注し１こ普通寒天培地（田水製薬社製）平板に
分散させ１こ。この平板を２８℃で３日間培養し、出現
した集落を二種の組成の最小栄養培地の平板にレプリケ
ートした。
この培地平板は次の組成であって、一方は炭素源として
酢酸ナトリウムを、他方は７ａβ−メチル−１，５−ジ
オキソ−３ａα−へキサヒドロインダン−４α−プロピ
オン酸ナトリウムのみを含有する。二種のレプリカの生
育状況から判断して、該インダンカルボン酸資化能の欠
損する変異株を分離し、アースロバフタ−・シンプレッ
クスＩＤ−３８−６と命名した。
酢酸ナトリウムを、他方は７ａβ−メチル−１，５−ジ
オキソ−３ａα−へキサヒドロインダン−４α−プロピ
オン酸ナトリウムのみを含有する。二種のレプリカの生
育状況から判断して、該インダンカルボン酸資化能の欠
損する変異株を分離し、アースロバフタ−・シンプレッ
クスＩＤ−３８−６と命名した。
炭素源 １．００
（ＮＨ４）２ＳＯ４２，００
ＫＨ２ＰＯ４１，００
ＫＣ１０，５０
Ｍ ｇ Ｓ ０４・７Ｈ２００，５０
ＦｅＳＯａ−７Ｈ２００，０１
Ｂａｃｔｏ精製寒天（Ｄｉｆｃｏ社製１ １７．０’０
水でＩＩ！とする。
水でＩＩ！とする。
実施例２
ポリペプトン０５ｇ、トウモロコシ浸漬液０．５ダおよ
び酢酸ナトリウム０．１Ｆに脱イオン水を加えて全容を
１’００ｇＪとし、これに］Ｎ水酸化ナトリウム水をｍ
えてｐＨ７，０に調整し１こものを種菌培地として５０
０ゴ肩付フラスコに入れ、】２０℃で１５分間蒸気滅菌
し１このち、実施例】て得たアースロバフタ、−・シン
プレックスＩＤ−３８−６菌のｊ白金耳を接種し、２８
℃で４１時間振とうして種菌培養液を得た。一方、Ｎａ
２ＳＯ４０，４９、ＫＨ２ＰＯ４０，，２Ｑ、 １＜Ｃ
Ｉ ０．１１ｉ’、ＭｇＳＯ４７Ｉ−Ｉ２００．００２
１および酢酸ナトリウム１ｇを脱イオン水にとかし、全
容を２００ ｍｌとしたのち、】Ｎ−水酸化ナトリウム
水でＰＨ７，０に調整し１こものを液体培地として５０
０ゴ肩付フラスコ２木に１００ｍ１づつ分注し、１２０
℃で１５分間蒸気滅菌した後、】００メツシユ以下に粉
砕し１こコレステロール粉末０．１５１７をそれぞれの
培地に添加した。この各基質含有培地に上記の種菌培養
液】Ｏｍｌを接種し、２８℃で１２０時間振盪培養した
。
び酢酸ナトリウム０．１Ｆに脱イオン水を加えて全容を
１’００ｇＪとし、これに］Ｎ水酸化ナトリウム水をｍ
えてｐＨ７，０に調整し１こものを種菌培地として５０
０ゴ肩付フラスコに入れ、】２０℃で１５分間蒸気滅菌
し１このち、実施例】て得たアースロバフタ、−・シン
プレックスＩＤ−３８−６菌のｊ白金耳を接種し、２８
℃で４１時間振とうして種菌培養液を得た。一方、Ｎａ
２ＳＯ４０，４９、ＫＨ２ＰＯ４０，，２Ｑ、 １＜Ｃ
Ｉ ０．１１ｉ’、ＭｇＳＯ４７Ｉ−Ｉ２００．００２
１および酢酸ナトリウム１ｇを脱イオン水にとかし、全
容を２００ ｍｌとしたのち、】Ｎ−水酸化ナトリウム
水でＰＨ７，０に調整し１こものを液体培地として５０
０ゴ肩付フラスコ２木に１００ｍ１づつ分注し、１２０
℃で１５分間蒸気滅菌した後、】００メツシユ以下に粉
砕し１こコレステロール粉末０．１５１７をそれぞれの
培地に添加した。この各基質含有培地に上記の種菌培養
液】Ｏｍｌを接種し、２８℃で１２０時間振盪培養した
。
培養終了後、ｐＨ８，５の全培養物を酢酸エチル２００
耐で抽出し、抽出物は捨てた。次いて水層に２ＮＨＣＩ
！を加えて酸性（ｐＨ１，３）とし、酢酸エチル２００
１ｓｔづつで３回抽出を行なった。この抽出液を減圧下
で濃縮し、エキス２００’ｌｌ＆を得た。
耐で抽出し、抽出物は捨てた。次いて水層に２ＮＨＣＩ
！を加えて酸性（ｐＨ１，３）とし、酢酸エチル２００
１ｓｔづつで３回抽出を行なった。この抽出液を減圧下
で濃縮し、エキス２００’ｌｌ＆を得た。
このエキスを塩化メチレンに溶解し、菌体などの不溶物
を炉別した後濃縮した。残留物をエチルエーテルで結晶
化させるとインダンジオンプロピオン酸（Ｉ）１６１．
０ ’＋Ｉ！７が得られた（収率８７，１％）。
を炉別した後濃縮した。残留物をエチルエーテルで結晶
化させるとインダンジオンプロピオン酸（Ｉ）１６１．
０ ’＋Ｉ！７が得られた（収率８７，１％）。
エチルエーテルで再結晶したものは下記の理化学的性状
を示し、標品と一致した。
を示し、標品と一致した。
融点：】０８〜１０８５℃
ＩＲ＋ｖＣＩ（０１８ｃｍ−’ ）： ３６００〜２４
００−ａｘ １７４５、】７１１，１ 、〔α〕Ｄ ：９７３°（±１．４）（Ｃ＝１．００９
、ＣＨＣＡ’ ３ ） ＮＭＲ（ＣＤＣＪ ８ ）δ： １．１７ （３Ｈ−ｓ
）元素分析（Ｃ１８Ｈ１８０４として）：ＣＨ 計算値（チ］： ６５．５３ ７．６１実測値Ｃ％１：
６５．２５ ７．６４実施例３ （ＮＨ４）２ＳＯ４（１０９）＋ ＫＨ２ＰＯ４（０，
５９）・０．００５ｇ）＝酢酸ナトリウム（２，５ｇ）
およびバクトソイトン（商品名Ｄｉｆｃｏ 社製）（２
，５ｆ）に脱イオン水を加えて全容を４００ｍ１とし、
これにＩＮ水酸化ナトリウム水を加えてｐｉ（７，０と
し１こものを液体培地として５００ｍ／容肩付フラスコ
５本に８０ｄづつ分注し、１２０℃で１５分間蒸気滅ｉ
し１こ。コレステロール６ｇ、ツイーン２０（ポリエチ
レンソルビタンモノラウレート）１ｆおよび゛スパン８
０（ソルビタンモノオレエート）］ｇを無菌蒸留水に懸
濁し一水で１００ｍ１にうすめ、１５ＱＷの超音波破砕
器（２ＱＫ）Ｉｚ）で５分間ホモジナイズしたもの２０
ｍ１を上記液体培地のそれぞれに添加した。次いで実施
例２の種菌培養液各３０ｍ１を接種した後、２８℃で９
６時間振盪培養した。培養終了後、ｐ’Ｈ６，９の全培
養液にｌＮＮａＯＨを加えてｐＩ（４９，Ｑとし、酢酸
エチル５００ｒｌｔで抽出し、抽出液は捨てた。水層に
２ＮＨＣ／ を加えて酸性（ｐＨ１，８１とし、酢酸エ
チル５００ｍ（づつで３回抽出した。抽出液を合わせ、
減圧下に濃縮乾固し、残留エキス３．７ｇを得た。
００−ａｘ １７４５、】７１１，１ 、〔α〕Ｄ ：９７３°（±１．４）（Ｃ＝１．００９
、ＣＨＣＡ’ ３ ） ＮＭＲ（ＣＤＣＪ ８ ）δ： １．１７ （３Ｈ−ｓ
）元素分析（Ｃ１８Ｈ１８０４として）：ＣＨ 計算値（チ］： ６５．５３ ７．６１実測値Ｃ％１：
６５．２５ ７．６４実施例３ （ＮＨ４）２ＳＯ４（１０９）＋ ＫＨ２ＰＯ４（０，
５９）・０．００５ｇ）＝酢酸ナトリウム（２，５ｇ）
およびバクトソイトン（商品名Ｄｉｆｃｏ 社製）（２
，５ｆ）に脱イオン水を加えて全容を４００ｍ１とし、
これにＩＮ水酸化ナトリウム水を加えてｐｉ（７，０と
し１こものを液体培地として５００ｍ／容肩付フラスコ
５本に８０ｄづつ分注し、１２０℃で１５分間蒸気滅ｉ
し１こ。コレステロール６ｇ、ツイーン２０（ポリエチ
レンソルビタンモノラウレート）１ｆおよび゛スパン８
０（ソルビタンモノオレエート）］ｇを無菌蒸留水に懸
濁し一水で１００ｍ１にうすめ、１５ＱＷの超音波破砕
器（２ＱＫ）Ｉｚ）で５分間ホモジナイズしたもの２０
ｍ１を上記液体培地のそれぞれに添加した。次いで実施
例２の種菌培養液各３０ｍ１を接種した後、２８℃で９
６時間振盪培養した。培養終了後、ｐ’Ｈ６，９の全培
養液にｌＮＮａＯＨを加えてｐＩ（４９，Ｑとし、酢酸
エチル５００ｒｌｔで抽出し、抽出液は捨てた。水層に
２ＮＨＣ／ を加えて酸性（ｐＨ１，８１とし、酢酸エ
チル５００ｍ（づつで３回抽出した。抽出液を合わせ、
減圧下に濃縮乾固し、残留エキス３．７ｇを得た。
このエキスを塩化メチレンに溶解して不溶物を炉別し、
炉液を濃縮して得られる残留物をエチルエーテルから結
晶化させるとインダンジオンプロピオン酸（Ｉｌ２．８
６３ ｇが得られた（収率７７．４％）。
炉液を濃縮して得られる残留物をエチルエーテルから結
晶化させるとインダンジオンプロピオン酸（Ｉｌ２．８
６３ ｇが得られた（収率７７．４％）。
実施例４
［ＮＨ４）２ＳＯ４（０，４ｇ）、ＫＨ２ＰＯ４（０，
２９１，１（Ｃｌ（Ｑ、］ ９ ）−ＭｇＳＯ４７Ｈ２
０（０，１９１、ＦｅＳＯ４７Ｈ２０（０，、ＯＯ２ｆ
）および酢酸ナトリウム（０，２１に脱イオン水を加
えて全容を２００ｍ１としたのち、１Ｎ水酸化ナトリウ
ム水を加えてｐＩ−Ｉ ７．Ｑに調整したものを液体培
地として５００ｘ！容肩付フラスコ２本に１００Ｊ＋ｌ
づつ分注し、１２０℃で１５分間蒸気滅菌した。それぞ
れの培地に４−アンドロステン−３，１７−ジオンの粉
末０２ｇづつを添加した後、実施例２の種菌培養波谷５
ｖｒｌを接種し、２８℃で２３時間振盪培養した。
２９１，１（Ｃｌ（Ｑ、］ ９ ）−ＭｇＳＯ４７Ｈ２
０（０，１９１、ＦｅＳＯ４７Ｈ２０（０，、ＯＯ２ｆ
）および酢酸ナトリウム（０，２１に脱イオン水を加
えて全容を２００ｍ１としたのち、１Ｎ水酸化ナトリウ
ム水を加えてｐＩ−Ｉ ７．Ｑに調整したものを液体培
地として５００ｘ！容肩付フラスコ２本に１００Ｊ＋ｌ
づつ分注し、１２０℃で１５分間蒸気滅菌した。それぞ
れの培地に４−アンドロステン−３，１７−ジオンの粉
末０２ｇづつを添加した後、実施例２の種菌培養波谷５
ｖｒｌを接種し、２８℃で２３時間振盪培養した。
この様にして得た全培養物約２００ ｍｌ ニ、２ Ｎ
ＨＣＩを加えて酸ｕ（ＰＨ１，８１とし、酢酸エチル
２０Ｏｔｎｌづつで３回抽出した。この抽出液を実施例
３と同様に処理するとインダンジオンプロピオン酸（Ｉ
ｌの結晶３２０■が得られた（収率９６．２％１゜この
結晶を塩化メチレンに溶解し一活性炭処理して脱色し、
エチルエーテルで再結晶すると精製品２６９．０■が得
られた。
ＨＣＩを加えて酸ｕ（ＰＨ１，８１とし、酢酸エチル
２０Ｏｔｎｌづつで３回抽出した。この抽出液を実施例
３と同様に処理するとインダンジオンプロピオン酸（Ｉ
ｌの結晶３２０■が得られた（収率９６．２％１゜この
結晶を塩化メチレンに溶解し一活性炭処理して脱色し、
エチルエーテルで再結晶すると精製品２６９．０■が得
られた。
融点＝１０９℃
ＩＲ（シＣＨＣｌ８ｃｍ−１）：３６００〜２４００、
ａＸ ］７４５、】７】１゜ 〔α’） ：９９．７°（±１４）ｔＣ＝ １．０ ］
５、ＣＨＣＪ８） ＮＭＲ［ＣＤＣｌ！ａ）δ： １．１７ （３Ｈ，ｓ〕
＋ Ｍａｓｓ （ｍｌｅ）： ２３ Ｂ （Ｍ ）元素分析
（Ｃ１８Ｈ１８０４として）：ＣＨ 計算値Ｃ％）： ６５．５３ ７．６１実測値（％１：
６５．５９ ７．６６実施例５ 基質コレステロールの代りにプロゲステロンの粉末０．
４Ｆを使用し、液体培地の量を１００ｍ１とし、これに
０５ｇのツイーン２０を添加するほかは実施例２と同様
にして９６時間培養した。生成物を酢酸エチル１００ｍ
１で３回抽出するほかは実施例２と同様にして培養物を
処理し、インダンジオンプロピオン酸（Ｉ］１３７．０
■を得り（収率４５゜２％）。
ａＸ ］７４５、】７】１゜ 〔α’） ：９９．７°（±１４）ｔＣ＝ １．０ ］
５、ＣＨＣＪ８） ＮＭＲ［ＣＤＣｌ！ａ）δ： １．１７ （３Ｈ，ｓ〕
＋ Ｍａｓｓ （ｍｌｅ）： ２３ Ｂ （Ｍ ）元素分析
（Ｃ１８Ｈ１８０４として）：ＣＨ 計算値Ｃ％）： ６５．５３ ７．６１実測値（％１：
６５．５９ ７．６６実施例５ 基質コレステロールの代りにプロゲステロンの粉末０．
４Ｆを使用し、液体培地の量を１００ｍ１とし、これに
０５ｇのツイーン２０を添加するほかは実施例２と同様
にして９６時間培養した。生成物を酢酸エチル１００ｍ
１で３回抽出するほかは実施例２と同様にして培養物を
処理し、インダンジオンプロピオン酸（Ｉ］１３７．０
■を得り（収率４５゜２％）。
実施例６
基質プロゲステロンの代りに１００メツシユ以下に粉砕
し１こβ−シトステロールの粉末０．４９を使用するほ
かは実施例５と同様にして１６８時間培養し、酢酸エチ
ルによる抽出を行なった。この抽出エキスをシリカゲル
薄層クロマトグラフィーにかけ、シクロヘキサン：酢酸
エチル：酢酸（容量比＝］Ｑ：１０：２）混液で展開し
一濃硫酸を噴霧し１こ後加熱し１こところ、１ｆ（ｉｏ
、３１こインダンジオンプロピオン酸（Ｉｌが認められ
几・実施例７ ポリペプトン０．０５ｇ、トウモロコシ浸漬液０゜０５
ｆ、酢酸ナトリウム０．０１９および胆汁酸ナトリウム
０．０１ｇに脱イオン水を加えて全容を１００ ｔｉｅ
としたのち、ＩＮ水酸化ナトリウム水でｐＨ７，０に調
整した大型試験管に入れ、１２０℃て］５分間蒸気滅菌
したのち、実施例２の種菌培養液０５ｍ１を接種した。
し１こβ−シトステロールの粉末０．４９を使用するほ
かは実施例５と同様にして１６８時間培養し、酢酸エチ
ルによる抽出を行なった。この抽出エキスをシリカゲル
薄層クロマトグラフィーにかけ、シクロヘキサン：酢酸
エチル：酢酸（容量比＝］Ｑ：１０：２）混液で展開し
一濃硫酸を噴霧し１こ後加熱し１こところ、１ｆ（ｉｏ
、３１こインダンジオンプロピオン酸（Ｉｌが認められ
几・実施例７ ポリペプトン０．０５ｇ、トウモロコシ浸漬液０゜０５
ｆ、酢酸ナトリウム０．０１９および胆汁酸ナトリウム
０．０１ｇに脱イオン水を加えて全容を１００ ｔｉｅ
としたのち、ＩＮ水酸化ナトリウム水でｐＨ７，０に調
整した大型試験管に入れ、１２０℃て］５分間蒸気滅菌
したのち、実施例２の種菌培養液０５ｍ１を接種した。
次いで２８℃で２日間振盪培養し、培養液を２ＮＨＣＡ
’ で酸性（ｐＨ１，８）として酢酸エチルで抽出した
。この抽出液を実施例６と同様にして薄層クロマトグラ
フィーにかけたところ、Ｒｆ値０．３７にインダンジオ
ンプロピオン酸（Ｉ）が、ＲＥ値０．５．２に下記の構
造式叫で示される（４Ｒ）−４−Ｃ４α−（２−カルボ
キシエチル）−７ａβ−メチル−５−オキソ〜３ａα−
へキサヒドロインダン−】β−イル〕吉草酸が認められ
た。
’ で酸性（ｐＨ１，８）として酢酸エチルで抽出した
。この抽出液を実施例６と同様にして薄層クロマトグラ
フィーにかけたところ、Ｒｆ値０．３７にインダンジオ
ンプロピオン酸（Ｉ）が、ＲＥ値０．５．２に下記の構
造式叫で示される（４Ｒ）−４−Ｃ４α−（２−カルボ
キシエチル）−７ａβ−メチル−５−オキソ〜３ａα−
へキサヒドロインダン−】β−イル〕吉草酸が認められ
た。
代理人 弁理士 青白 葆 外１名
Claims (2)
- １．７ａβ−メチル−１，５−ジオキソ−３ａα−へ＋
サビドロインダン−４α−プロピオン酸を資化する代謝
本を欠損するアースロバフタ−・シンフレックスの変異
株を３−（ヒドロキシまたはオキソ）−ステロイドに作
用させ、次いで生成物を分離、採取することを特徴とす
る７ａβ−メチル−〕、〕５−ジオキソー３ａαへキサ
ヒドロインダン−４α−プロピオン酸の製造方法。 - ２．７ａβ−メチル−】、５−ジオキソ−３ａα−へキ
サヒドロインダン−４α−プロピオン酸を資化する代謝
系を欠損する了−スロバクター・シンプレックスの変異
株であって、親株と形態学的および栄養学的特性が同じ
である変異株。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13209283A JPS6024190A (ja) | 1983-07-19 | 1983-07-19 | インダンジオンカルボン酸の製造方法 |
| EP84304915A EP0135297A3 (en) | 1983-07-19 | 1984-07-18 | Synthesis of indanedionepropionic acids and products therefrom, microorganisms for use therein and their production |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13209283A JPS6024190A (ja) | 1983-07-19 | 1983-07-19 | インダンジオンカルボン酸の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6024190A true JPS6024190A (ja) | 1985-02-06 |
Family
ID=15073297
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13209283A Pending JPS6024190A (ja) | 1983-07-19 | 1983-07-19 | インダンジオンカルボン酸の製造方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0135297A3 (ja) |
| JP (1) | JPS6024190A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4748550A (en) * | 1986-03-07 | 1988-05-31 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Pulse width modulator used for a power converter with a transformer |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1793427A1 (de) * | 1968-07-11 | 1972-02-24 | Akad Wissenschaften Ddr | Verfahren zur Herstellung von neuen ss-Substituierten Propionsaeuren |
| US4177106A (en) * | 1977-02-14 | 1979-12-04 | The Upjohn Company | Process for preparing 3aα-H-4α-[3'-propanol]-7aβ-methylhexahydro-1,5-indanedione hemiketal |
| US4211841A (en) * | 1977-09-08 | 1980-07-08 | The Upjohn Company | Process for microbial transformation of steroids |
-
1983
- 1983-07-19 JP JP13209283A patent/JPS6024190A/ja active Pending
-
1984
- 1984-07-18 EP EP84304915A patent/EP0135297A3/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4748550A (en) * | 1986-03-07 | 1988-05-31 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Pulse width modulator used for a power converter with a transformer |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0135297A2 (en) | 1985-03-27 |
| EP0135297A3 (en) | 1987-04-08 |
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