JPS6031B2 - 界面活性剤分解菌の培養方法 - Google Patents
界面活性剤分解菌の培養方法Info
- Publication number
- JPS6031B2 JPS6031B2 JP52085107A JP8510777A JPS6031B2 JP S6031 B2 JPS6031 B2 JP S6031B2 JP 52085107 A JP52085107 A JP 52085107A JP 8510777 A JP8510777 A JP 8510777A JP S6031 B2 JPS6031 B2 JP S6031B2
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- Japan
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- surfactant
- bacteria
- enzyme activity
- medium
- culture
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- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は界面活性剤分解活性の高い微生物の菌体を培地
中に蓄積させるために培地中に炭素の短鏡長の誘導剤及
び糖質を含有させることを特徴とする界面活性剤分解菌
の培養方法に関する。
中に蓄積させるために培地中に炭素の短鏡長の誘導剤及
び糖質を含有させることを特徴とする界面活性剤分解菌
の培養方法に関する。
各種界面活性剤の分解に関与する微生物は多く知られて
いる。これら界面活性剤を分解する酵素は誘導酵素であ
るために、分解活性を有する微生物を培養するには分解
菌に適合した誘導剤を選択し、これを培地に添加する必
要がある。誘導剤としては分解しようとする界面活性剤
そのものが最適であるが、これを培地に添加すると培養
時に発泡現象がおこり又界面活性剤は分解菌の生育を阻
止する作用があり、高濃度に界面活性剤を培地に添加す
ることは不可能であった。従って高い分解活性を有する
分解菌を多量に培養することは非常に困難であった。特
に通気境梓培養を行わねばなないときはこの発泡抑制は
大きな問題となっていた。従来行われていた培養方法の
一例を挙げると下記の如くである。
いる。これら界面活性剤を分解する酵素は誘導酵素であ
るために、分解活性を有する微生物を培養するには分解
菌に適合した誘導剤を選択し、これを培地に添加する必
要がある。誘導剤としては分解しようとする界面活性剤
そのものが最適であるが、これを培地に添加すると培養
時に発泡現象がおこり又界面活性剤は分解菌の生育を阻
止する作用があり、高濃度に界面活性剤を培地に添加す
ることは不可能であった。従って高い分解活性を有する
分解菌を多量に培養することは非常に困難であった。特
に通気境梓培養を行わねばなないときはこの発泡抑制は
大きな問題となっていた。従来行われていた培養方法の
一例を挙げると下記の如くである。
培地組成 Ｎ 源 ＮＨ４ＣＩ ３．０ ｇ無
機源 ＦｅＳ０４ ０．００２９ＭｇＳ０４
０．２５ ９ ＫＣＩ Ｉ．０ ９ Ｐ 源 Ｋ２ＨＰ０４ １．０ ９ビタミン イ
ーストエキス ０．８ ９ 上記組成の物質を１その水の溶解した。
機源 ＦｅＳ０４ ０．００２９ＭｇＳ０４
０．２５ ９ ＫＣＩ Ｉ．０ ９ Ｐ 源 Ｋ２ＨＰ０４ １．０ ９ビタミン イ
ーストエキス ０．８ ９ 上記組成の物質を１その水の溶解した。
これに誘導剤（炭素源）としてＣ，２のアルコールサル
フェートナトリウム塩（ＡＳ）８０倣ｐｍを添加し、こ
れにＡＳ分解菌、シュードモナスｎ０Ｖ・ＳＰ・ＬＦ２
１０１・ＦＥＲＭ−Ｐ３０６６を接種して、温度２５０
０、振濠速度１０比ｐｍで１日間振糧培養を行なった。
フェートナトリウム塩（ＡＳ）８０倣ｐｍを添加し、こ
れにＡＳ分解菌、シュードモナスｎ０Ｖ・ＳＰ・ＬＦ２
１０１・ＦＥＲＭ−Ｐ３０６６を接種して、温度２５０
０、振濠速度１０比ｐｍで１日間振糧培養を行なった。
菌体収量は３．７夕、酵素活性は７００Ｕ′そであった
。即ち誘導剤としてＣ，２のＡＳの添加量は８００〜１
００倣ｐｍ程度であり、これ以上添加すると発泡が激し
く培養が不可能となり、菌体収量も酵素活性も低かった
。本発明者等は譲導剤について研究を重ねた結果、親油
部分の炭素鎖長例えばＣ７のＡＳを添加して上記の如く
培養を行ったところ相当の酵素活性を有する菌体が得ら
れることが判明した。
。即ち誘導剤としてＣ，２のＡＳの添加量は８００〜１
００倣ｐｍ程度であり、これ以上添加すると発泡が激し
く培養が不可能となり、菌体収量も酵素活性も低かった
。本発明者等は譲導剤について研究を重ねた結果、親油
部分の炭素鎖長例えばＣ７のＡＳを添加して上記の如く
培養を行ったところ相当の酵素活性を有する菌体が得ら
れることが判明した。
その精果を下表に示す。量（ｐｐｍ） 菌体量（９）
酵素活性ＵレＺ８００ ２．８８
６００２０００ ２．２０
５００４０００ １．６０ ４
００この表に示す通り短炭素鎖長のＡＳを誘導剤として
添加した場合には、４０００ｐｐｍの高濃度でも発泡現
象を起さずに且つ分解酵素活性も従来法にさほど劣らな
い菌体が生産されていることがわかった。
酵素活性ＵレＺ８００ ２．８８
６００２０００ ２．２０
５００４０００ １．６０ ４
００この表に示す通り短炭素鎖長のＡＳを誘導剤として
添加した場合には、４０００ｐｐｍの高濃度でも発泡現
象を起さずに且つ分解酵素活性も従来法にさほど劣らな
い菌体が生産されていることがわかった。
即ち親油部分の短鎖長の界面活性剤が低泡性で低毒性の
ため誘導剤として添加量５００のｐｍまで充分利用でき
る可能性を見し、出した。上記の培養試験により菌体量
当りの酵素活性は充分認められたが「誘導剤の添加量が
増大すると繭体量が減少することがわかったので、本発
明者等は更に培地の研究を行い、菌体収量を上昇させる
ために誘導剤の他に炭素源として糠質を更に添加すると
、菌体量が著しく上昇し従って分解酵素活性も顕著に向
上することがわかった。
ため誘導剤として添加量５００のｐｍまで充分利用でき
る可能性を見し、出した。上記の培養試験により菌体量
当りの酵素活性は充分認められたが「誘導剤の添加量が
増大すると繭体量が減少することがわかったので、本発
明者等は更に培地の研究を行い、菌体収量を上昇させる
ために誘導剤の他に炭素源として糠質を更に添加すると
、菌体量が著しく上昇し従って分解酵素活性も顕著に向
上することがわかった。
即ち本発明者等は短鎖化界面活性剤と糖質との併用によ
り初めて分解活性の高い菌体を効率よく製造することに
成功したのである。本発明者等は糠質としてグルコース
を用い、譲導剤としてＣ６のＡＳＩＯＯ０ｐｐｍを添加
した培地にＡＳ菌を接種し培養した。
り初めて分解活性の高い菌体を効率よく製造することに
成功したのである。本発明者等は糠質としてグルコース
を用い、譲導剤としてＣ６のＡＳＩＯＯ０ｐｐｍを添加
した培地にＡＳ菌を接種し培養した。
その結果は下表の如くである。クルコース量（の 菌体
量（の 酵素活性（Ｕレの１０ １９．７
４６００２０ ２９．５
７３００３０ ３１．２
７５００即ちグルコースの添加量は３０夕で酵素活性７
５００Ｕ′そに達し、３０タ以下の添加で充分であり、
２０タ程度が最適添加量であった。
量（の 酵素活性（Ｕレの１０ １９．７
４６００２０ ２９．５
７３００３０ ３１．２
７５００即ちグルコースの添加量は３０夕で酵素活性７
５００Ｕ′そに達し、３０タ以下の添加で充分であり、
２０タ程度が最適添加量であった。
次に誘導剤の親油部分の炭素の鎖長と菌体量及び酵素活
性との関係について、培地１夕当り誘導剤としてＡＳＩ
ＯＯ０ｐｐｍ、グルコース２０夕を添加した培地を調製
しＡＳ菌を接種して培養試験を行った。
性との関係について、培地１夕当り誘導剤としてＡＳＩ
ＯＯ０ｐｐｍ、グルコース２０夕を添加した培地を調製
しＡＳ菌を接種して培養試験を行った。
その結果を下表に示す。
炭素鎖長 菌体量（９）酵素活性Ｕレ多６
２９．５ ７６００７ ２４．２
６４００８ ２９．３
７５００即ちＣ５〜８のＡＳを用いた場合菌体量、酵素
活性共に極めて優れたものが得られ殊にＣ６で充分実用
性のあることを見出した。
２９．５ ７６００７ ２４．２
６４００８ ２９．３
７５００即ちＣ５〜８のＡＳを用いた場合菌体量、酵素
活性共に極めて優れたものが得られ殊にＣ６で充分実用
性のあることを見出した。
又譲導剤として使用するＡＳはＣ６、グルコース２０タ
添加培地を用い上記と同様に培養試験を行った。
添加培地を用い上記と同様に培養試験を行った。
その結果は下表の通りである。ＡＳ濃度（ｐｐｍ）菌体
量（夕） 酵素活性（Ｕレの１０００ ２９
．５ ７６００２０００ ３２．
１ ９０００５０００ ３２．６
９２００既にＡＳの濃度は５００他ｐｍま
で上昇させることのできることは明らかにされていた力
ミ、グルコース２０夕の添加で菌体量は３０タ以上、酵
素活性９０００Ｕ／そ以上に達することがわかった。
量（夕） 酵素活性（Ｕレの１０００ ２９
．５ ７６００２０００ ３２．
１ ９０００５０００ ３２．６
９２００既にＡＳの濃度は５００他ｐｍま
で上昇させることのできることは明らかにされていた力
ミ、グルコース２０夕の添加で菌体量は３０タ以上、酵
素活性９０００Ｕ／そ以上に達することがわかった。
次に培養日数について試験を行った。培地１そ中グルコ
ース２０夕、Ｃ６のＡＳ２００岬ｐｍを含有させ上記と
同機に培養試験を行い、その日数毎の菌体量と酵素活性
を測定し下表の結果を得た。日 数 菌体量（９）
酵素活性（Ｕレの１ ９．５３ ２
８００３ １９．２９ ４３００５
２８．３７ ９２００８
２８．１０ ７５００１５
２８．０９ ６８００以上の結果から培養
日数は５日以内で充分であつた。
ース２０夕、Ｃ６のＡＳ２００岬ｐｍを含有させ上記と
同機に培養試験を行い、その日数毎の菌体量と酵素活性
を測定し下表の結果を得た。日 数 菌体量（９）
酵素活性（Ｕレの１ ９．５３ ２
８００３ １９．２９ ４３００５
２８．３７ ９２００８
２８．１０ ７５００１５
２８．０９ ６８００以上の結果から培養
日数は５日以内で充分であつた。
本発明における界面活性剤分解館を有する微生物は前記
した通りの多くのものが知られているが、例えば本発明
者等の分離したＰｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ２１０１、ＦＥ
ＲＭ−Ｐ３０６６（ＡＳ菌）、Ｐｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ
２１０２、ＦＥＲＭ−Ｐ３７９５（Ａ一６菌）、Ｐｓ・
．Ｎｏｖ・Ｓｐ ＬＦ３１０１、ＦＥＲＭ一Ｐ３２９
９（ＥＯ菌）、Ｐｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ４１０１、ＦＥ
ＲＭ−Ｐ４１０９（ＰＳ菌）等の分解菌がある。
した通りの多くのものが知られているが、例えば本発明
者等の分離したＰｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ２１０１、ＦＥ
ＲＭ−Ｐ３０６６（ＡＳ菌）、Ｐｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ
２１０２、ＦＥＲＭ−Ｐ３７９５（Ａ一６菌）、Ｐｓ・
．Ｎｏｖ・Ｓｐ ＬＦ３１０１、ＦＥＲＭ一Ｐ３２９
９（ＥＯ菌）、Ｐｓ・Ｎｏｖ・ＳｐＬＦ４１０１、ＦＥ
ＲＭ−Ｐ４１０９（ＰＳ菌）等の分解菌がある。
これらの微生物の多くはシュードモナス属に属し、これ
ら微生物の菌体はアルコールサルフェートナトリウム塩
（ＡＳ）、アルコールヱトキシサルフヱートナトリウム
塩（ＡＥＳ）、アルキルベンゼンスルホネートナトリウ
ム塩（ＬＡＳ）「Ｑ−オレフインスルフオネートナトリ
ウム塩（ＡＯＳ）、パラフィンスルホネートナトリウム
塩（ＰＳ〉等の界面活性剤に対し分解活性を有している
。
ら微生物の菌体はアルコールサルフェートナトリウム塩
（ＡＳ）、アルコールヱトキシサルフヱートナトリウム
塩（ＡＥＳ）、アルキルベンゼンスルホネートナトリウ
ム塩（ＬＡＳ）「Ｑ−オレフインスルフオネートナトリ
ウム塩（ＡＯＳ）、パラフィンスルホネートナトリウム
塩（ＰＳ〉等の界面活性剤に対し分解活性を有している
。
本発明者等がＰＳ菌についてグルコース２０９、Ｃ６の
パラフィンスルホネートナトリウム塩（凶）２００倣ｐ
ｍを添加した培地で培養したとき、菌体量は２５夕を得
、上記ＡＳ，ＰＳ，ＡＯＳ及びＬＡＳの各界面活性剤に
対し活発に分解活性を有することを確めた。
パラフィンスルホネートナトリウム塩（凶）２００倣ｐ
ｍを添加した培地で培養したとき、菌体量は２５夕を得
、上記ＡＳ，ＰＳ，ＡＯＳ及びＬＡＳの各界面活性剤に
対し活発に分解活性を有することを確めた。
又同じくＰＳ菌についてグルコース２０夕、Ｃ６のアル
コールサルフエートナトリウム塩（ＡＳ）２０００ｐｐ
ｍを添加した培地に培養したとき得られた菌体量は２３
夕で、同様にＡＳ，ＰＳ，ＡＯＳ及びＬＡＳに対して優
れた分解活性を有していた。この事実は多量培養を考え
る上において、ＰＳをＡＳに代替することができ極めて
安価に分解活性の高い菌体を得るという優れた効果のあ
ることを示している。培地の栄養素は上記分解菌の生育
に必要な通常の栄養素であるが、前記した従来の培養方
法で用いられていたＮ源、無機源、Ｐ源、ビタミン類の
量は、グルコース添加により菌の成育が旺盛となるため
当然増量され、実施例に示された程度まで増量する必要
がある。
コールサルフエートナトリウム塩（ＡＳ）２０００ｐｐ
ｍを添加した培地に培養したとき得られた菌体量は２３
夕で、同様にＡＳ，ＰＳ，ＡＯＳ及びＬＡＳに対して優
れた分解活性を有していた。この事実は多量培養を考え
る上において、ＰＳをＡＳに代替することができ極めて
安価に分解活性の高い菌体を得るという優れた効果のあ
ることを示している。培地の栄養素は上記分解菌の生育
に必要な通常の栄養素であるが、前記した従来の培養方
法で用いられていたＮ源、無機源、Ｐ源、ビタミン類の
量は、グルコース添加により菌の成育が旺盛となるため
当然増量され、実施例に示された程度まで増量する必要
がある。
これらの栄養素に糠質及び短炭素鎖長の界面活性剤を誘
導体として添加すればよい。糠質についてはグルコース
、シュクロース、でんぷん加水分解物、糖蜜等の炭水化
物で上記分解菌が資化することのできる炭水加物であれ
ば何れも利用することができる。
導体として添加すればよい。糠質についてはグルコース
、シュクロース、でんぷん加水分解物、糖蜜等の炭水化
物で上記分解菌が資化することのできる炭水加物であれ
ば何れも利用することができる。
実施例 １
（Ｎ比 ）２ＨＰ０４２０ 夕 、Ｆｅ２Ｓ０４０．０
１夕 、ＭｇＳ０４０．５夕、ＭｎＳ０４０．０１夕、
ＺｎＳ０４０．０１夕、Ｋ２ＨＰ０４５．０夕、イース
トエキス２．０夕を１その水に熔解し、炭素源としてグ
ルコース２０夕、Ｃ６アルコールサルフェートナトリウ
ム塩２００倣ｐｍを添加して培地とする。
１夕 、ＭｇＳ０４０．５夕、ＭｎＳ０４０．０１夕、
ＺｎＳ０４０．０１夕、Ｋ２ＨＰ０４５．０夕、イース
トエキス２．０夕を１その水に熔解し、炭素源としてグ
ルコース２０夕、Ｃ６アルコールサルフェートナトリウ
ム塩２００倣ｐｍを添加して培地とする。
これにＰｓｎｏｖ・Ｓｐ−ＬＦ２１０１菌を接種し、２
５℃、振遼遠度１０仇ｐｍで５日間振濠培養を行った。
生成した菌体を集め、常法により分解酵素活性を測定し
たところ、菌体収量３０夕、酵素活性９０００Ｕ′そで
あった。実施例 ２ 糖質の利用性 炭素源としてグルコースに替えて糖蜜またはシュークロ
−スを用いる以外実施例１と同じ組成の培地を使用し、
これにＰｓ・ｎｏｖ・ＳｐＬＦ２１０１菌を接種し、２
５午０振遼遠度１０びｐｍで５日間振濠培養を行った。
５℃、振遼遠度１０仇ｐｍで５日間振濠培養を行った。
生成した菌体を集め、常法により分解酵素活性を測定し
たところ、菌体収量３０夕、酵素活性９０００Ｕ′そで
あった。実施例 ２ 糖質の利用性 炭素源としてグルコースに替えて糖蜜またはシュークロ
−スを用いる以外実施例１と同じ組成の培地を使用し、
これにＰｓ・ｎｏｖ・ＳｐＬＦ２１０１菌を接種し、２
５午０振遼遠度１０びｐｍで５日間振濠培養を行った。
生成した菌体を集め、常法により分解酵素活性を測定し
たところ下記のの結果を得た。この結果よりグルコース
以外に各種の糠質も本目的に利用可能であることが判明
した。糖 質 菌体収量（２ソの酵素活性（Ｕレの糖
蜜 ２５ ８０００シユークロース
２８ ・８８００実施例 ３Ｐｓ・ｎｏ
ｖ・ＳｐＬＦ４１０１菌（ＰＳ菌）の培養方法。
たところ下記のの結果を得た。この結果よりグルコース
以外に各種の糠質も本目的に利用可能であることが判明
した。糖 質 菌体収量（２ソの酵素活性（Ｕレの糖
蜜 ２５ ８０００シユークロース
２８ ・８８００実施例 ３Ｐｓ・ｎｏ
ｖ・ＳｐＬＦ４１０１菌（ＰＳ菌）の培養方法。
実施例１に示した培地組成又は同培地中のＣ６アルコー
ルサルフェート・ナトリウム塩２０００ｐｐｍの代わり
にＣ６パラフィンスルホネートナトリウム塩２０００ｐ
ｐｍを添加した組成の培地を使用し、実施例１の培養条
件でＰｓ・ｎｏｖ・ＳｐＬＦ４１０１菌、ＦＥＲＭ−Ｐ
４１０９（ＰＳ菌）の培養を行なった。
ルサルフェート・ナトリウム塩２０００ｐｐｍの代わり
にＣ６パラフィンスルホネートナトリウム塩２０００ｐ
ｐｍを添加した組成の培地を使用し、実施例１の培養条
件でＰｓ・ｎｏｖ・ＳｐＬＦ４１０１菌、ＦＥＲＭ−Ｐ
４１０９（ＰＳ菌）の培養を行なった。
生成した菌体を集め菌体収量及び各種界面活性剤に対す
る分解能を菌体の音波破砕物を用いて調べた。下記に示
した通り菌体収量、界面活性剤分解態とも十分であるこ
とを認め、各種界面活性剤分解菌の培養に応用可能なこ
とを確認した。
る分解能を菌体の音波破砕物を用いて調べた。下記に示
した通り菌体収量、界面活性剤分解態とも十分であるこ
とを認め、各種界面活性剤分解菌の培養に応用可能なこ
とを確認した。
誘 導 剤 菌体収 分解活性 ※量（９）Ａ
Ｓ ＰＳ ＡＯＳ ＬＡＳ ‐Ｎａ ‐Ｎａ ‐Ｎａ ‐Ｎａ Ｃ８パラフインスルホネー ２５９ 十 十 十
十ト・ナトリウム塩Ｃ６アルコールサルフエ一 ２
３９ 十 十 十 十ト・ナトリウム塩※ 分
解活性の測定に使用した基質（界面活性剤）は全て炭素
鎖長１２である。
Ｓ ＰＳ ＡＯＳ ＬＡＳ ‐Ｎａ ‐Ｎａ ‐Ｎａ ‐Ｎａ Ｃ８パラフインスルホネー ２５９ 十 十 十
十ト・ナトリウム塩Ｃ６アルコールサルフエ一 ２
３９ 十 十 十 十ト・ナトリウム塩※ 分
解活性の測定に使用した基質（界面活性剤）は全て炭素
鎖長１２である。
Claims (1)
- １ 界面活性剤分解能を有する微生物を、誘導剤として
親油部分の炭素鎖長が５〜８の界面活性剤並びに糖質を
含有する培地に培養し、培地中に分解活性の高い菌体を
多量に生成させることを特徴とする界面活性剤分解菌の
培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52085107A JPS6031B2 (ja) | 1977-07-18 | 1977-07-18 | 界面活性剤分解菌の培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52085107A JPS6031B2 (ja) | 1977-07-18 | 1977-07-18 | 界面活性剤分解菌の培養方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5420189A JPS5420189A (en) | 1979-02-15 |
| JPS6031B2 true JPS6031B2 (ja) | 1985-01-05 |
Family
ID=13849386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP52085107A Expired JPS6031B2 (ja) | 1977-07-18 | 1977-07-18 | 界面活性剤分解菌の培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6031B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0691290A (ja) * | 1991-10-11 | 1994-04-05 | Kobe Steel Ltd | パルプ漂白廃水の処理方法 |
| JPWO2021132304A1 (ja) * | 2019-12-26 | 2021-07-01 |
-
1977
- 1977-07-18 JP JP52085107A patent/JPS6031B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5420189A (en) | 1979-02-15 |
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