JPS6033824B2 - （ｒ，ｓ）−システインラセミ化合物の分離法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は（Ｒ，Ｓ）−システィンセラミ化合物の分離法
に関する。

（Ｒ）−システィン及びその対掌体である（Ｓ）−シス
ティンは、医薬又は化粧品の製造用中間体として、また
べプチド化学において重要である。

最近では、（Ｒ，Ｓ）−システィンはシスティンー塩酸
塩一１水和物の形で工業的規模で容易に入手しうるので
〔Ａｎ蟹ｗ．Ｃｈｅｍ．９３ ６８０（１９８１）参照
〕、いまや、（Ｒ，Ｓ）−システインラセミ化合物を簡
単に、廉価かつ効率よく分離する方法が特に求められて
いる。

本発明方法は、（Ｒ，Ｓ）ーシスティンを水、水と混和
しうる、、炭素原子数５個までのアルコール若しくはエ
ーテル又はこのような溶剤の混合物中で一般式（１）：
〔式中ｎは２〜５の整数を表し、＊ｃは不整炭素原子を
表し、不整炭素原子の絶対配置は同一又は異なっていて
よい〕のヱナンチオマーとして純粋な単糖類と縮合させ
て、一般式（ロ）〔式中ｎ及び＊ｃは前記のものを表す
〕の、２位が置換されたチァゾリジンー４ーカルボン酸
を生成させ、得られたジアステレオマ−混合物を相互に
分離し、単離した均一なジアステレオマーを水、水と混
和しうる、炭素原子数５個までのアルコール若しくはエ
ーテル又はこのような溶剤の混合物中で、基Ｎ比を含み
、カルボニル基と縮合しうる化合物と反応させて開環さ
せ、その都度得られたェナンチオマーとして純粋なシス
テインそのまま又は対応するシスチンとして単離するこ
とを特徴とする。

（Ｒ，Ｓ）ーシスティンと縮合させる一般式（１）のェ
ナンチオマーとして純粋な単糖類としては、例えば公知
のアルドース類、例えばＬ−アラビノール、Ｄーアラビ
ノース、Ｌ−ガラクトース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−グ
ルコース、Ｄ−グルコース、Ｌ−マンノース、Ｄーマン
ノース、Ｌーキシロース、Ｄーキシロースが適当である
。縮合は、水、水と混和しうる、炭素原子数５個までの
アルコール若しくはエーテル、例えばメタノール、エタ
ノール、プロパン一１−オール、プロパン−２ーオール
、ブタン一１−オール、ブタン一２ーオール、イソプタ
ノール、ｔｅれ−プタノール、ベンタン−１−オール、
テトラヒドロフラン又は１，４ージオキサン又はこのよ
うな溶剤の混合物中で行う。好ましい溶剤は水、メタノ
ール又はエタノールである。一般式（１）のェナンチオ
マーとして純粋な単糖類は、使用する（Ｒ，Ｓ）−シス
ティン１モルに対して１〜２．５モルの量で使用するの
が好ましい。

しかし、単糖類及び（Ｒ，Ｓ）−システィンを等モル量
で使用するが、特に有利である。添加の順柔は限定的な
ものではない。縮合を０℃〜反応混合物の還流温度、好
ましくは２０〜７０午○の温度で行うのが有利である。
遊離（Ｒ，Ｓ）−システインではなく、その酸付加塩、
例えば塩酸塩を使用する場合には、縮合前に、１〜１．
５当量の塩基、特に第三級アミン、例えばトリェチルア
ミン又はピリジンを添加することにより、含まれていた
酸を結合する必要がある。縮合させると、一般式（０）
の、２−位が遣された対応するチアゾリジンー４−カル
ボン酸が、相互にジアステレオマーであり、チアゾリジ
ン環の４一位の配置により異なり２種の立体異性体の混
合物の形で生成する。

これらの２種のジアステレオマーは、自体公３印の方法
で、例えば分別結晶またはクロマトグラフィー法により
相互に分離することができる。分離すると、場合により
、縮合反応のため挙げた溶剤または溶剤混合物から１回
または数回再結晶した後、立体的に均一な一般式（Ｄ）
の化合物が得られ、該化合物のうち一方は４位にＲ−配
置を有し、他方はＢ−配置を有する。

一般式（Ｄ）の２種のジアステレオマーのうち一方は、
縮合反応の終時に熱時に既に屡々晶出するが、一般に、
反応混合物を比較的長時間０〜４０℃の温度に保持し、
場合により、縮合を水中で行なった場合、前記溶剤の１
種を添加するのが有利である。

沈殿した結晶を櫨過または遠心分離によって母液から分
離する。

結晶は一般に完全に、またはほとんど一般式（Ｄ）の２
種のジアステレオマーの一方から成る。必要に応じ、再
結晶により更に精製することができる。母液は、通常、
分離されたジアステレオマーの残部をなお含むが、他方
のジアステレオマーが母液中に著しく富化されている。

母液を濃縮し、低温で長時間放置し、有機溶剤を添加す
るか、またはこれらの手段のいくつかを組合せることに
よって結晶させることができる。この場合、母液中のジ
アステレオマーは一般に、はじめに分離したジアステレ
オマ−より低い純度で存在する。従って、再結晶によっ
て更に精製するのが、多くの場合に有利である。また、
縮合反応の際に混合物として得られる。

一般式（Ｄ）の２種のジアステレオマーを、常用のクロ
マトグラフィー法によって分離することもできる。この
場合には、極めて完全に分離され、２種のジアステレオ
マーのいずれもが高い純度で単機することができる。単
機され、立体的に均一な一般式（Ｄ）の化合物を分離し
、縮合反応のため挙げた溶剤または溶剤混合物中で、初
めに使用したアルドースのカルボニル基と縮合しうるア
ミ／基を含む化合物と反応させて、チアゾリジン環を関
残させる。

従って、開環に適当な化合物は典型的カルポニル試薬例
えばヒドロキシルアミン（例えば塩酸塩の形）、ヒドラ
ジン（例えば水和物の形）、フヱニルヒドラジンまたは
アニリンである。

これらの化合物は、関環に使用した一般式（０）の化合
物に対して少なくとも当量で使用するが、過剰に使用す
ることもできる。開環は５０ｑｏ〜反応混合物の還流温
度までの温度で好適に行なわれる。

反応混合物を約０．虫時間〜約５時間加熱還流させる場
合に、関環は特に迅速かつ完全に進行する。関環させる
と、チアゾリジン環の４日位にＲ−配置を有する一般式
（ロ）のジアステレオマーかり、ェナンチオマーとして
純粋な（Ｒ）−システインが得られ、チアゾリジン環の
４位にＳ−配置を有するジアステレオマーから、対応す
るェナンチオマーとして純粋な（Ｓ）−システィンが得
られる。

使用したアルドース及び開環のため使用したカルポニル
試薬から同時に生成した縮合正成物がシスティンより鍵
溶性である場合には、この縮合正成物から、開環の際に
生成した、ェナンチオマーとして糸櫛粋なシステインを
分離するため、まずこの縮合正成物を猿別する。

次に源液から、濠液を濃縮し、及び／また柵を等露点付
近の値に調節することによってシステインを単離する。
これに反して、使用したアルドース及び関環のため使用
したカルボニル試薬から成る縮合生成物がシスティンよ
り容易に溶ける場合には、ｐＨを導電点付近の値に調節
することによってシスティンを沈殿させ、分離する。

システィンの溶解度に比べてシスティンの溶解度が低い
ので、関環の際に生成するェナンチオマ−として純粋な
（Ｒ）ーシスティンまたは（Ｓ）ーシスティンをそのま
ま単離しないで、適当な酸化剤、例えば過酸化水素で酸
化して（Ｒ，Ｒ）−システインまたは（Ｓ，Ｓ）ーシス
テインとし、これを単離するのが、多くの場合に有利で
ある。

この場合、ェナンチオマーとして純粋なシスティンは必
要に応じ自体公知の方法で対応するシスティンに容易に
還元することができる。しかし、関濠終了後、まず生成
した、ェナンチオマ−として純粋関環の大部分を得、引
続き母液中に残存する残部を対応するシステインに酸化
し、そのまま単離することも同機に良好に可能である。

次に、実施例に基づいて本発明を詳述する。

パーセントの記載は、特に記載しない限り重量％である
。例１ （Ｒ，Ｓ）ーシステインＸＨＣＩ×日２０８７．５夕（
０．５モル）及び○−（十）ーガラクトース９０夕（０
．５モル）をメチルアルコール３．７５そ、ピリジン５
０の【及び水５０の上中で２０分間煮沸還流する。

反応溶液を２．２虫時間以内に徐々に４ぴ０まで令却し
、析した結晶を吸引過渡する。メチルアルコールで洗浄
した後、（＄）−２−（Ｄーガラクト−１，２，３，４
，５−ペンタヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４
ーカルボン酸の無色の結晶４０．５夕（理論量の５７．
２％の収率に相当）。〔Ｑ〕答＝十８９．３ｏ（Ｃ＝０
．５比○）。

含水エタノールから再結晶することにより、旋光度は十
９１．３ｏに上昇する。ェナンチオマーとして純粋な（
Ｓ）ーシスティン及びＤ−（十）ーガラクトースから製
造した、確認された対照品の感光度は同様に十９１．３
０である。

融点：１７が（分解） 元素分析：Ｃ９日，７Ｎ０７Ｓ Ｃ（％） 日（％） Ｎ（％） 実測値 ３９．２５ ５．９３４．７９計算値
３９．１４ ６．０４４．地３日放置すると、櫨液か
ら高局い沈殿が析出する。

吸引猿遇し、メチルアルコールで洗浄し乾燥することに
よって、無色の結晶６１．５夕が得られ、この結晶には
（駅）−２‐（Ｄ−ガラクトー１，２，３，４，５ーベ
ンタヒドロキシベンチルーチアゾリジン−４ーカルボン
酸が著しく富化している。暖かいメチルアルコールで抽
出することによって、前記カルボン酸を純粋な形で単離
することができる。〔Ｑ〕容＝一７１．グ（Ｃ＝０．５
水）、融点 １４７〜１４功○。

含水エタノールから再結晶させることにより、旋光度は
−７８．？に上昇する。

ヱナンチオマーとして純粋な（Ｒ）ーシスティン及びＤ
−（十）−ガラクトースから製造した確認された対照品
の感光度は同様に−７８．２０である。

（億）−２−（Ｄーガラクト−１，２，３，４，５−ペ
ンタヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４ーカルボ
ン酸４０．５夕（０．１４５モル）及びヒドロキシアミ
ン塩酸塩１３ ３夕（０．１８５モル）をメチルアルコ
ール７００私と去に縄拝し、還流下に加熱沸騰させる。

２０分後、澄明な溶液が生じる。２時間後に、反応は終
了している。

反応溶液を冷却し、櫨過によりオキシムを除去する。滋
液をトリェチルアミンでＰＨ６に調節し、その際１２．
７夕の（Ｓ）システインが晶出する（収率：理論量の７
２．７％）。〔Ｑ〕啓＝−９‐５０（Ｃ＝８、ＩＮＨＣ
そ）。

（想）‐２‐（Ｄーガラクト‐１，２，３，４，５−ペ
ンタヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４ーカルポ
ン酸４０．５夕（０．１４５モル）及びヒドロキシルア
ミン塩酸塩１３，３夕（０．１８５モル）をメタノール
６００の‘と去に擁拝し、還流下に加熱沸騰する。２び
分後に、澄明な溶液が生じる。

３時間後に反応は終了している。

反応溶液を冷却し、猿過によりオキシムを除去する。猿
液をトリェチルアミンでｐＨ５．５に調節すると、１２
．７夕の（Ｒ）−システィンが晶出する（収率：理論量
の７２．７％）。

〔Ｑ〕奪＝十９．８０（Ｃ＝８、ＩＮＨＣそ）。

例２例１で得られた（億）−２一（Ｄーガラクトー１，
２，３，４，５−ペンタヒドロキシベンチル）ーチアゾ
リジンー４−カルボン酸７．１夕（０．０２５モル）を
水２０の‘と控和し、２４％ヒドロジン水和物溶液５．
２夕と共に鷹拝する。

混合物を１０分間６ぴ０に加溢する。室温に冷却した後
、３０％過酸化水素１．８夕を滴下すると、直ちに（Ｓ
，Ｓ）−システインが晶出する。吸引猿適し、水で洗浄
し、乾燥した後、純粋な（Ｓ，Ｓ）ーシスチン２．８夕
（理論量の９３．３％の収率に相当）が得られる。

〔Ｑ〕客＝十２１８‐で（Ｃ＝１、ＩＮＨＣ〆）。

例３１７．５夕（０．１モル）の（Ｒ，Ｓ）ーシステイ
ン×ＨＣＺ×日２０及び１８夕（０．１モル）のＤ一（
十）マンノースを３００肌のメチルアルコール中に懸濁
し、１０の上のピリジンを添加した後、１時間煮沸還流
する。還流中に生成物は結晶し始める。６００００まで
冷却した後、吸引櫨過し、メチルアルコールで洗浄する
。

９．４夕（理論量の６６４％）の（舵）−２−（Ｄーマ
ンノ−１，２，３，４，５−ペンタヒドロキシベンチル
）−チアゾリジンー４ーカルボン酸が無色の結晶として
得られる。

〔Ｑ〕色ｏ＝−６３．４ｏ（Ｃ＝０．ふ水）。

含水エタノールから再結晶することによって旋光度は−
６３．がに上昇する。ェナンチオマーとして純粋な（Ｒ
）−システィン及びＤ−（十）−マンノースから製造し
た、確認された対照品の旋光度は同様に一６３．が で
ある。

融点：１７７０（分解）。

元素分析：Ｃ９日，７Ｎ０７Ｓ Ｃ（％）日（％）Ｎ（％） 実測値 ３９．０２ ６．０８ ４．聡計算
値 ３９．１４ ６．０４ ４．９４猿過を
２び０に冷却する。

その後析出する２種のジアステレオマーの混合物を櫨週
により分離し、捨てる。残留する猿液に、結晶が析出す
る限り、酢酸ェステルを添加する。エチルアルコールか
ら再結晶することによって、４．７夕（理論量の３３２
％）の（４Ｓ）一２−（Ｄーマンノー１，２，３，４，
５ーベンタヒドロキシベンチル）−チアゾリジン−４ー
カルボン酸が純粋な形で得られる。〔Ｑ〕段＝十ｌ００
．５０（Ｃ＝０．ふ水）。ェナンチオマ−として純粋な
（Ｓ）システィン及びＤ一（十）ーマンノースから製造
された、確認された対照品の旋光度は十１０１．１０で
ある。融点：１５３℃（分解）９．４夕（０．０３３モ
ル）の（想）‐２‐（Ｄ‐マンノ−１，２，３，４，５
ーベンタヒドロキシベンチル）−チアゾリジン−４−カ
ルボン酸及び６．総夕（０．０３３モル）の２４％とヒ
ドラジン水和物水溶液を９５の‘のメチルアルコールと
共に３０分間煮沸還流する。

得られた懸濁液を熱時櫨過し、残糖を熱い９５％メチル
アルコールで洗浄する。（Ｒ）−システィン２．７８夕
（理論量の６９．４％）が得られる。〔Ｑ〕客＝十９‐
？（Ｃ＝８、ＩＮＨＣそ）。猿液を水７０机‘で希釈し
、１．５の‘の３．０％過酸化水素を添加した後、（Ｒ
，Ｒ）−シスチン２．２夕が晶出する〔使用した（凪）
−２−（Ｄ−マン／−１，２，３，４，５−ペンタヒド
ロキシベンチル）ーチアゾリジン−４−カルボン酸に対
して理輪量の２６．６％〕。〔Ｑ〕客：−２１７（Ｃ＝
１、‐‐ＩＮＨＣそ）。

元素分析：Ｃ６日，２０４Ｎ２Ｓ２Ｃ（％）日（％）Ｎ
（％）Ｓ（％） 実測値： ２９．斑 ５．０７ １１．８２ ２
６．６３計算値： ２９．９９ ５．０３ １１．
６６ ２６．６９４．７夕（０．００１６５モル）の
（億）一２−（Ｄーマンノー１，２，３，４，５ーベン
タヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４ーカルボン
酸及び３．４４夕（０．００１６５モル）の２４％ヒド
ラジン水和物水溶液を５０泌のメタノールと共に４５分
間煮沸還流する。

得られた懸濁液を熱時櫨過し、残澄を９５％熱メタノー
ルで洗浄する。（Ｓ）ーシスティン１．５夕（理論量の
７４．９％）の収率に相当）が得られる。〔Ｑ〕客＝一
９．７（Ｃ＝８、ＩＮＨＣ夕）例４３５夕（０．２モル
）の（Ｒ，Ｓ）ーシステイン×ＨＣぞ×日２０、３９．
６夕（０．２モル）のＤ一（十）ーゲルコース×比０及
び２０．２夕（０．２モル）のトリヱチルアミンを８０
の‘の水及び２０の‘のメチルアルコール中に６ぴ０に
溶かす。

溶液を室温で２餌時間放置する。生成した結晶を猿別し
、メチルアルコールで洗浄する。１夕（理論量の３６０
％）の（凪）‐２−（Ｄーグルコー１，２，３，４，５
ーベンタヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４ーカ
ルボン酸が得られる。

〔Ｑ〕客＝−８４．６０（Ｃ＝０．ふ水）。含水エタノ
ールから再結晶することによって旋光度は−８９．６０
に上昇する。ェナンチオマーとして純粋な（Ｒ）−シス
ティン及びＤ−（十）ーグルコースから製造され、確認
された対照品の旋光度は同様に−８９．６０である。

融点：１６２０（分解） 元素分析：Ｃ９日．７Ｎ０７Ｓ Ｃ（％）日（％）Ｎ（％） 実測値 ３９．２０ ６．０２ ４．８３計
算値 ３９．１４ ６．０４ ４．９４（岬
）‐２‐（０ーグルコ‐１，２，３，４，５ーベンタヒ
ドロキシベンチル）−チアゾリジン−４−カルボン酸を
分離する際に生じた猿液を減圧下に９０の‘に濃縮する
。

１５ｑｏで−夜放置した後、晶出した（侭）−及び（公
）−２‐（Ｄ−グルコー１，２，３，４，５ーベンタヒ
ドロキシベンチル）−チアゾリジン−４−カルボン酸の
混合物を吸引櫨過する。

その際生じた猿液を回転蒸発器で２軌的ａｒで、また水
浴で加溢して濃縮乾燥する。残澄を水から再結晶する。
純粋な（傘）一２一（Ｄ−グルコー１，２，３，４，５
−ペンタヒドロキシベンチル）ーチアゾリジンー４ーカ
ルボン酸が無色の結晶の形で得られる。収量：４．８夕
（理論量の鉢％）。融点：１総００（分解） 〔Ｑ〕彰＝十８５．ｒ（Ｃ＝０．５水） ェナンチオマーとして純粋なくＳ）−システィン及びＤ
−（十）−グルコースから製造され、確認された対照品
の旋光度は十８５．グ‐である。

５１夕（０．０１８モル）の（岬）−２‐（Ｄーグルコ
−１，２，３，４，５ーベンタヒドロキシベンチル）ー
チアゾリジンー４ーカルボン酸及び１．８７夕（０．０
２７モル）のヒドロシルアミン塩酸塩を１０の‘の水及
び４０の‘のメチルアルコールの混合物中で３．虫時間
還流下に加熱還流する。

冷却後、僅かな混濁を猿趣により除去し、猿液をトリェ
チルアミンでｐＨ６に調節し、その際（Ｒ）−システイ
ン１．６２夕（理輪量の７４．３％の収率に相当）が晶
出する。〔Ｑ〕客＝十９．８ｏ（Ｃ＝８、ＩＮＨＣ〆）
。

４．８夕（０．０１７モル）の（渡）−２一（Ｄーグル
コ−１，２，３，４，５−ペンタヒドロキシベンチル）
ーチアゾリジンー４ーカルポン酸及び１．８７夕（０．
０２７モル）のヒドロキシルアミン塩酸塩を１０ｗ‘の
水及び４０の上のメタノールの混合物中で４時間煮沸還
流する。

２０つ０に冷却した後、混濁を櫨過により除去し、猿液
をトリェチルアミンでＰＨ５．５に調節すると、１．６
夕（理論量の７９％）の（Ｓ）ーシステインが晶出する
。

〔Ｑ〕容＝−９‐７０（Ｃ＝８、ＩＮＨＣそ）例５１．
２夕（０．０１モル）の（Ｒ，Ｓ）−システイン及び１
．５夕（０．０１モル）のＬ−（十）ーアラビノースを
水５泌中で３び分８ぴ０に刀増勢、する。

得られる反応溶液を薄層クロマトグラフィー〔シリカゲ
ル６０（ダルムシュタットのェー・メルク社製）、層厚
２欄〕により分離し、その際展開剤としてｎ−プタノー
ル５容量部、エタノール２容量部及び水４容量部から成
る混合物を使用する。こうしてジァステレオマ一対を分
離する（Ｒｆ＝０．１７及び０．２９）。Ｒｆ＝０．１
７の帯域を薄層プレートから溶離し、水で抽出し、その
後シリカゲルを櫨去し、濃縮乾燥することにより、（岬
）‐２一（Ｌーアラビノー１，２，３，４，ーテトラヒ
ドロキシブチル）−チアゾＩＪジン−４−カルボン酸が
得られる。

残澄を含水エタノールから再結晶し、（奴）−２−（Ｌ
ーアラビノー１，２，３，４ーテトラヒド。キシプチル
）−チアゾリジンー４ーカルボン酸から成る。融点：１
６１００ こうして縛られた生成物を０．５２夕（０．００７５モ
ル）のヒドロキシルアミンー塩酸塩と共に、５の【の水
と１５の‘のメタノールとの混合物中で３即時間還流下
に加熱沸騰する。

２ぴ０に冷却した後、猿過により混濁を除去し、猿液を
トリェチルアミンでｐＨ６に調節すると、（Ｒ）−シス
ティン０．４夕（理輪量の６７％）が晶出する。

〔ｏ〕客＝十９．ｙ（Ｃ＝１２、がＨＣ〆）。

Ｒｆ＝０．２９の帯域を薄層プレートから溶離し、水で
抽出する。シリカゲルを瀦去し、猿液を濃縮乾燥する。
融点を測定するため、残澄の少違憲を含水エタノールか
ら再結晶させる。鷲匁点：１私℃こうして得られた（４
Ｒ）−２−（Ｌ−アラビ／−１，２，３，４ーテトラヒ
ドロキシブチル）ーチアゾリジン−４ーカルボン酸を０
．５２夕（０．００７５モル）のヒドロキシルアミン塩
酸塩と共に４の‘の水と１０の‘のメタノールとの混合
物中で還流器を付けて煮沸する。２ぴ０に冷却し、２枚
のひだ付濠紙で猿過し、猿液のｐＨ値を６に調節する。

これは、トリェチルアミンの添加により行なう。（Ｓ）
−システィン０．３６夕（理輪量の６０％に相当）が晶
出する。〔Ｑ〕客＝‐９．４ｏ（Ｃ＝１２．州ＨＣ〆）
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ （Ｒ，Ｓ）−シスラインを水、水と混和しうる、炭
   素原子数５個までのアルコール若しくはエーテル又はこ
   のような溶剤の混合物中で一般式（I）：▲数式、化学
   式、表等があります▼ 〔式中ｎは２〜５の整数を表し、＊ｃは不整炭素原子
   の絶対配置は同一又は異なつていてよい〕のエナンチオ
   マーとして純粋な単糖類と縮合させて、一般式（II）：
   ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎ及び＊ｃ
   は前記のものを表す〕の、２位が置換されたチアゾリジ
   ン−４−カルボン酸を生成させ、得られたジアステレオ
   マー混合物を相互に分離し、単離した均一なジアステレ
   オマーを水、水と混和しうる、炭素原子数５個までのア
   ルコール若しくはエーテル又はこのような溶剤の混合物
   中で、基ＮＨ＿２を含み、カルボニル基と縮合しうる化
   合物と反応させて開環させ、その都度得られたエナンチ
   オマーとして純粋なシステインそのまま又は対応するシ
   スチンとして単離することを特徴とする（Ｒ，Ｓ）−シ
   ステインラセミ化合物の分離法。 ２ （Ｒ，Ｓ）−システインと一般式（I）の単糖類と
   の縮合を水、メタノール若しくはエタノール、又は水と
   メタノール若しくはエタノールとの混合物中で行う特許
   請求の範囲第１項記載の分離法。 ３ （Ｒ，Ｓ）−システインと一般式（I）の単糖類と
   の縮合を２０〜７０℃の温度で行う特許請求の範囲第１
   項又は第２項記載の分離法。 ４ 一般式（II）の化合物の開環を水、メタノール若し
   くはエタノール、又は水とメタノール若しくはエタノー
   ルとの混合物中で行う特許請求の範囲第１項〜第３項の
   いずれか１項に記載の分離法。 ５ 一般式（II）の化合物の開環を、反応混合物の環流
   温度に加熱することにより行う特許請求の範囲第１項〜
   第４項のいずれか１項に記載の分離法。