JPS6041490A - 抗生物質ｔａｎ−５４２およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、新規な抗生物質ＴＡＮ−５４２およぎその塩
、およびその製造法に関するものである。

従来の技術 従来バクテリアが産生ずるモノザイクリック・ρ−ラク
タム抗生物質として、スルフアゼシンおよびイソスルフ
アゼシンが知られてお９　（Ｎａｔｕｒｅ。

２８９巻、５９０〜５９１頁、１９８１年）、その後、
８Ｑ　２６１Ｂ０．２６７００，２６８２３．２６８７
５，２６９７０．２６８１２なども発見されている（　
Ｎａｔｕｒｅ、、２９１巻４８９〜４９１頁、１９８１
年）。これらは主としてグラム陰性菌に対して弱い抗菌
性を示す抗生物質として知られている。

発明が解決しようとする間ト）点 本発明は新規で吉川な抗生物ｆ１を提供することを目的
とするものである。

問題点を解決するだめの手段 木発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的として多数
の隙生物を土壌よシ分子ｉ化し、その頼生ずる抗生物質
を分離探索したところ、ある種の敵生物が新規な抗生物
質を産生ずること、該へ生物がフレキンバクター属に１
１すること、該微生物を適宜の培地に培養するととによ
ってグラム１：１１性ｆｆ、！Ｉｔ　Ｍ紐よびグラム陰
性創蔭に列して抗偵力を示す抗生物質を培地中に蓄拙し
うろことになどを知り、この抗生物質を単離し、その物
坤化学的および生物学的諸性質から、当該抗生１イη′
打が新規な抗生物質であることを確め、これを抗生物：
；−（ＴＡＮ−５４２と称することにした。

本発明者らは、これらの知見に基づいてさらにηｌ究を
重ねだ結果、本発明を完成した。

本発明は、（１）抗生物７（’ｌ’ＡＮ−５４２および
その塩（２）フレキシバクター１，１４に屈するｊＡ、
生物質ＴＡ　Ｎ−５４２生産萌を培地に培養し、装置物
中に抗生物質ＴＡＮ−５４２を生成ＭＪＪ’（ぜしめ、
これを採取することを特徴とする抗生物質ＴＡＮ−５４
２およびその塩のＩＡ造法である。

なお、本願では抗生物（’（Ｔ　Ａ　Ｎ　−５４２を単
に「ＴＡＮ−５４２」と称することもある。

本発明で使用される抗生物質’］、’　Ａ　Ｎ　−５４
２生産菌としては、フレキシバクター（Ｆ］、ｅｘｉｂ
ａ、ｃｔｅｒ）ｋｔｓに属し、抗生物質ＴＡＮ−５４２
を産生ずる能力を有するものであれば如何なるｒ・″々
生物でもよい。

抗生物５（ＴＡＮ−５４２生産６：ｆの例としては、た
とえば本発明者らによって三重！ｊｌ〜名張市の上控よ
り採取したフレキシバクター属ＹＫ−１１４株（以下、
ｌ’−ＹＫ−’１１４株」と略律することもある。）が
あげられる、、ＹＫ−１１４１’ｌ：の菌学的性状は下
記のとお）である。

（ＰＬ）形態 肉汁寒天−ヒで２４℃、５日間培善後の？ｐｌ祭で（は
、府１（胞は直径０．７〜０．９μｍ　、長さ２．４〜
９．６１１．ｍの桿状もしくは３５〜７５／Ｚｍ以上の
フィラメント状を呈する。グフィディングによる・と（
ＯＬＩ　ｌ主を有する。鞭毛は紹められない。胞子は形
成せず、またグラム染色は陰性で、抗酸１宝を示さない
。

（ｂ）　各種培地上での生育伏萌 ２４℃で培養し、工ないし１４日問にわたって観祭した
。

１、肉汁寒天平板＠養：コロニーは不透明でオレンジ色
で不規ｆ１１１伏　Ｑ”Ｓ、１ｌｊｌはフラットな１１
に起伏、周縁は切裂状を早する。１νＪｋ性色ポは生成
しない。

２、肉汁寒天斜面培養：（１叫′４度のイボ伏ないし拡
布状の生育を示し、’Ｆｉ；’Ｚ明でオレンジ色を呈す
る。

３、肉汁液体培５ｔ：うすｂ混灼状に生育し、少量の沈
みを生じ、＃ｔ　ｌ’ｊ−’、ｉを形成するつ４、肉汁
ゼラチン穿刺培タドう１モ而にり■い生育を示し、袋状
に液化される。

５、　リドマス・ミルク：リドマスを還元ぜす、ペプト
ン化、ゲと固も認められない。

（０）　生理的性質 １、硝酸塩の還元：＋ ２．脱窒反ｊ志ニー ３、ＭＲ（メチルレッド）テスト：±（６ｈ臓）４、ｖ
ｐ（フォーゲス・プロスカウエＡ／）テヌト二一 ５、　インドールの生成ニー ６、硫化水素の生成（ＴＳＩ寒天および酢酸鉛紙）ニー ７、　デンプンの加水分解ニー ８、クエン酸の利用（クーゼル・クリヌテンセンおよび
シモンズの各培地）ニー ９、無機窒素源の利用 ■）硝酸カリウムニー ｎ）　硫酸アンモニウム：＋ ■）グルタミン酸ナトリウム：＋ １０、色素の生成：キングＡ、Ｂおよびマンニット酵母
エキス寒天６培地中に拡散性色素の生成は認められない
。

１１、ウレアーゼ：培養初期には陰性であるが、１５８
目の観察では１性を示す。

１２、オキシダーゼ：＋ １３、カタラーゼニー １４、生育の１１へ聞 Ｉ）　ｐ　Ｈ：　ｐｌｌ　４．９〜７．１で生育するが
、ＪＩｉ適ｐ　Ｈは５．２〜６．６゜ ’ＩＩ）温度：１３〜３５℃で生育するが最１１３温度
は２３〜２９Ｃ０ １５、酸素に対する１ル度：好気的 １６、　０−　Ｆ　（オキシダテイプーフアーメンクテ
イフ）テスト〔ヒ二一・レイフソン（Ｉｌｕｇｈ・Ｌｅ
ｉｆａｏｎ　）法）　：　Ｆ＋ｈ’ｉ￥的。

１７　糖からの酸およびガスの生１・２と利用性：Ｌ−
アラビノーヌ　−−− Ｄ−キシロース　−　−− Ｄ−グルコース　士　−→− Ｄ−マンノース　−−＋ Ｄ−フラクトース　−　、−６ Ｄ−ガラクトース　−−士 麦　芽　糖　−−＋ シ　ョ　れ僅　−−半 孔　糖　−−＋ トレハロース　−　−＋ Ｄ−ツルピッＩ・　−−− Ｄ−マンニット　−−− イノジット　−−− グリセリン　−−− デンプン　４〜−　± １８寒天、セルロース、キチンの”ｌＬ化性：いずれも
資化あるいは分解しない。

１９、アクチノマイシンＤに対する感受′ｌｉ：高い。

以上の菌学的性質を有するＹＫ−１１４株をバーシーズ
・マニュアｐ・オブ・デクーミナテイブ・バクテリオロ
ジ−（Ｂｅｒｇｅｙｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒ
ｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）　ｆ
、γ５８ｊ」反の記ｉｊｔ％と照合した。ロンド状ない
し、フィラメント状のグラム陰性菌で、フィラメント状
態の１Ｙ１にのみブライディングによる運動性が認めら
れ、；ヅ天、セルロース、キチンを５Ｔ化せず、カロチ
ノイド系色素と思われるオレンジ色の菌体内色素を産生
ずることから、フレキシバクター（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔ
ｅｒ　）　属Ａ’ｆ、Ｊ菌と同定し、ＹＫ−１１４株を
フ１／キシバククーエスピーＹＫ−１１４株（Ｆｌｅｘ
ｉｂａｃｔｅｒ　ａｐＹＫ−１１４）と命名した。

なお、本阿株Ｙ　Ｋ　−１１４）、”＜ｔｔよ、＋ｌ：
’ｌ？’ｌｌ　！５８年７月１５日から通朗産二首省工
４３技術院Ｔｉ゛５生物工条技ｉｉ；ｉ？ｉ’ｆ究所（
Ｆ　ＲＩ　、　日本［ゴ１茨１％ＩＱ４．筑１ｕ　＋ｉ
ｉ−谷［、ｕ部町東１゛丁目１番３号）に受ｔ；ｅ看°
号Ｆ’　Ｅ　ＲＭ　−Ｐ　７１５５として、またト１′
１和５８乍７月６日から１１４団法人発酵研究所（ＩＦ
Ｏ，日本［］大阪府大（１゛・を市ｊ＋ｉ：Ｊｌ１区十
三本ＩＩ１．ｒ２丁目１７　’Ｆｔ？　８５　゛”；３
）にＩＰ”０　１４２６３としてそれぞれ寄託されてい
る６本発明に用いられるフレキシバククー１．にＫｆ！
’！　１ＴＪは一般にその性状が変化しやずく、だとえ
ｆ、Ｊ：　’、’ｉ臂外貌、Ｘｉ、化学条品（例、ニド
Ｔ、７ソグアニジン、エチルメタンスルホン酸）などを
用いる人工７ヲｙ７４手１フで容易に麗異しうるもので
あり、どの（・１）な変異株であっても本発明の対象と
するＴ　Ａ、　Ｎ　−５４２の生産能を有するものはす
べて本発明に使用することができる。

ＴＡＮ−５４２生産レイの陪負にｌ”＋＋　しては、ノ
々素源としては、たとえばグルコース、シュークロ−ス
、マルトース、廃塘冒、グリセロール、油脂肩（例、大
豆油、オリーブ油など）、汀ｉ−１！　ｒ（’；＞項（
例、クエン酸、コハク酸、グルコン酸など）など昭が５
パ（化しうるものが適宜用いられるｎ　窒、＋ξ源とし
ては、たとえば大豆扮、棉尖扮、コーン・ステー（−プ
・リカー、乾頒酵母、酵母エキス、肉エキス、ペプトン
、尿素、硅酵アンモニワ１．、（ｉ山□・、々アンモニ
ウム　ウＡ　、塩化アンモニウム、リン１′、々アンモ
ニウム外との有機′？Ｕ素化合物や無（・ｊ）ζ（素化
合物が利１１１できる。また、熱鰻塩としては、たとえ
１づｊ塩化すトリウム、塩化カリウム、炭酸カルシウム
、ｌｉ’ｆ５［：Ｑマグネシウム、リント俊−カリウム
、リン自タ二ナトリウムなどの通常π（ＩＴ菌の培養に
必要な無（；・今塩ヅ、ｌが単独もしくは適宜、組合せ
て使用される。１だ、フレキシバクター属に属する抗生
物″６’ｔ　Ｔ　Ａ　ＰＩ　５４２生産口の責化しうる
硫ｔ：”Ｃ化合物、たとえば勧：酸ｋｊＡ（例、）覚醒
アンモニウムなど）、チオｌ；１ｉｉｉ　酸塩（例、チ
オｊｊｌｅ酸アンモニウムなど）、！ド１１ｃｉ５　Ｆ
ｉｇ　”１ｆｔ（例、加硫ト・（２アンモニウム）など
の無機６’、ｉ黄化合物、含硫アミノ酸（例、ンスチン
、シメテイン、Ｌ−チアゾリジン−４−カルポンド２）
、ヒポタウリン、含硫ペプチド（例、グルタチオン）な
どの有機硫黄化合物井たけ、これらの混会１；ηを培地
に添加すると目的物の生成段が嗜大する場合がある。

また、ｐｆｔ　ｔ’ｂｔ　イｓ　ｆ、ｓ、ｆｉｔ　（！
！ｌ　ＥｌＥなど１７Ｊｊｉ（金１７．４　川、ビタミ
ンＢ＋、ビオチンなどのビタミン；：ｔ’ｉなども必要
に応じて添加される０、さらにシリコーンオイルやポリ
アルキレングリコールニーデルなどの消泡ハ１ｊや界面
活性剤を培地に添加してもよい。その（１１１＋’μの
発育を助け、Ｔ　Ａ　Ｎ　−５４２の生産を１足進する
ような有機物や無ｔＡｉｉ物を適宜に添加してもよい。

培養方法としては、一般の抗生”＋’、）Ｊ　ｒ父の生
産方法と同様に行なえばよく、固体」で７作でも液体培
貸でもよい。液体培養のｊ、ｒ′！Ｊ合は、ｉＤ同Ｊｊ
″司”に、攪拌培う・Ｔ。

ｊ辰は培養、ｉ市気培イｒ）などいずれ衡突、？、ｊｉ
　してもよいが、とくに通気攪拌培９τか好ましい。又
、Ｊｉ’ｉつ温度は、およそ１５℃〜３５℃の１僅＋１
１＋がＨましく、翳地のｐＥは約４〜８の範囲でおよそ
８時間〜１６８時間、好ましくは２４時間〜１４４時間
培１ｔする。

培碕物から目的とする抗生物質’Ｊ’　Ａ　ＩＴ　−５
４２を深度するには微生物の生産するイ購１１物をその
ｊｉｔ生物の培”ＪＪ物から採取するのにｊ常使用され
る分４手段が１ａ宜利用される。たとえば抗生’ｊ′り
’、ｊ’（Ｔ　ＡＮ−５４２は水溶性酸性物質の性’Ｆ
ｔを示し、主として培養ｐ液中に含まれるので、まず培
テ９液にｆＪ″ｉ過補助剤を加えて濾過あるいは遠心分
離によって、菌体な除去する。得られた培養ｆ”Ａ’１
　′５Ｃ適宜の４ｔＩ体に接触させてｐ液中の有効成分
を吸Ｊηさせ、次いで適宜の溶媒で有効物質を説７．？
させ、分別４ヱ取する手段が有利に利用される。クロマ
トグラフィーの担体としては活性炭、シリカゲル、）ｎ
末セルロース、吸着性１８１脂など化合物の吸着ｉＡヒ
の一差をイー１１用、または陰イオン交換樹脂、陰イオ
ン交（；°訃ヒルロー７カど化合物の官能基の差を利用
、あるいは分子ふるい性ｊｊ１体頻など化合物の分子ｆ
ｆｌの差を利用するものが有利に用いられる。これら担
体から目的とする化合物を溶出するためには担体の４’
Ｊ　：Ａｒｌ、性質によって組み合せが異なるが、たと
えば水溶性有機溶ＩＬＭの含水溶液すなわち、含水アセ
トン、含水アルコール用など、あるい（・づ：’ｒ′２
、アルカリ、緩ｆζ・１面もしくは無（ツあるいはｒｊ
′ｉ″す（Ａを含む水溶液などが適宜組み合わせて用い
られる。

また、これらのクロマトグラフィーによって得られた木
杭生物質の１旧ｔＪＪ質を分収用高１す（液体クロマト
グラフィーに付し、さらにｉ・“１ｆｌＪＪするＴＩも
できる。

さらに詳しくｊホベるならば、」１１１本としてト・）
・イオン交換ｊｌ’、’、ｌ庸たとえばダウエックス−
１（ダウ・アンド・ケミカル社刊、米国）、アンバーラ
イト■ＲＡ−６８，４００，４０２，４１０（ローム・
アンド・ハース社印、米国）、ダイヤイオン５Ａ−２１
ＡおよびＣ（三菱化、、、ｔｉ、社）”７＋、２、「１
本）などを用いると７１１液中の木抗生：！妃Ｙ　ｔｉ
ｔ　”／ｌ　ノｉ’ｆされ、９ノ′パＩあるいは酸含有
の水溶液あるいは＜Ｈ３Ｌｊ・ｆ　Ｉｋなどで浴出され
る。また陰イオン交」基セルロースたとえばＤＥ−３２
（ワットマン社ｓ；単、７＋％Ｈ１）、Ｄ　Ｆ；　Ａ　
Ｅ　−セ／１／ロース（ブラウン社製、！シイ独）など
、ちるいは陰イオン交換分子ふろいト１−；パ−、１ハ
１′Ｉ／ことえＩ；ｆ　Ｄ　ｚ　ＡＥ−あるいはＱＡＥ
−セファデックス（ファＡ／マシャ社ｆＵ、スウェーデ
ン）などの担体に本抗生物質を吸貯ぜしめ、塩類ちるい
は酸含有の水溶１ｆ）あるいは緩１３液などによって溶
出させることが出来る。これら溶出液中の塩類、着色物
質々とを取シ除くためにはり・〜ト用活性炭（弐田鍵・
仏社・・す、日本）あるいは吸着性樹脂だとえぽダイヤ
イオンＵｐ−２０（三菱化成社劇、日本）、アンバーラ
イトＸＡＤ−ＩＩ（ローム・アンド・ハース社ルν、米
国）などが有利に用いられる。分向された）容量１区分
は、Ｉ’：’３稲、＃ｉ■結、乾燥などの工ＩＵ、、４
を径で、粉末化される。かくして得られた粉末の純度が
悪いＪ５′）合さらにｆ＋’Ｊ製するためには高連ｔｆ
＆　（トクロマトグラフイー法が有利に利用される。用
いられる担体としては、たとえばＴＳＫゲ／Ｉ／（東洋
曹達社Ｌ′η、［１本）　Ｙ　１１　Ｃゲル（山村化学
研究所ｇ々、日本）などが挙げられ、移動ｊ―としては
メタノ−／Ｌ’　ｉ＜’）るいはアセトニトリルなどと
酸性水溶液あるいは（（コｉ・・ｊ液などとの混合液が
用いられる。

このようにして得られたＴ　Ａ　ＩＪ　−５４２は通常
精製に用いた塩４Ｊ１．緩衝液中の陽イオンたとえばナ
トリ゛ウム、カリウム、リチウム、カルシウム、アンモ
ニウムイオンなどと結合してこれらの瓜トして単へされ
る。ｒ外られ７′２１．Ｔ　ｈ　ＩＪ−５４２Ｊｆｉ２
：ｚｌを）Ｉαは体として１外るブこめには１ＩＩｊｔ
上ｈ５４のクロマトグラフィーを利用するのが１′１刊
である。ずなわらＴＡＮ　’−５４２ＪｉＸａ￥１を７
１ＣＩ・てｊ容かし、イ、１へｒ＋’２でＰ　１１１．
５〜４に調整し、？；ｔＴ　ｉ＋　Ｊ＝、＃のクロマト
グラフィーに付す。水洗後含水アルコールなどで活１″
ＪＥ部分をｔ、メ出し、２容／ｉｉ＋Ｔｔをン、ｓ？　
）ｊ：′ｊ、Ｉ”ｌ　ＩＹｊｊ　Ｅ・Ｅ　Ｙ”：’：す
ると’ｌ’　Ａ　Ｍ　−５４２のｊＪｔ澤体が得られる
っ 抗生４４グ７ゾＴ　Ａ　Ｎ　−５４２は金、１．・１嘉
およびアンモニウム塩を形成する。舎１□：、’：、＜
としで（ｌ°、たとえばす１−リウム塩、カリウムｊ）
′４、リチウムＪＪＡ％カルシウム塩などがそ（げられ
る。

後述の実施例４で１１）られたＴ　Ａ　Ｎ　−５４２す
トリウム塩の物理化学的ｉ′、ｌ；ｆτはつ込゛のとお
りでちっだ。

（１）外　萌；白色）力木 （２）元；（ζ分析Ｉ！（へ）； （五酸化リン上４０℃で６時１１・ｊ乾’）ｊｒ’！　
Ｌ／た試′：ｌ”Ｉ）Ｃ，３５，３±２．０ Ｈ，５，０±１．０ ）Ｊ、１４．４±１．５ ０　、　３５．８” Ｓ、５．７±１．Ｏ Ｎａ、　３．３±１．０ ＊（ただし、酸素は他の元素をパし引いて計算）（３）
分子；＠　ｉ　Ｓ’　Ｉ　Ｍ　Ｓ法による分子イオンピ
ークは次のとおシでおる。

５７１．５４９，５２７，４６９，４４７，４２６゜（
４）分子式（分子３７ｘ　）　ｉ　Ｃ１６Ｈ２５Ｎ６０
１２Ｓ　・１１ａ。

（５４８−４５ＸＳ１ＭＳ法から計７ｃ　）（５）紫外
線吸収スベク１１’（水中）；２１０ｎｍ以上に特異な
吸収を示さない。

（６）赤外部吸収（工Ｒ）スペクトル；臭化カリウム錠
による吸収スペクト／’　（第１　ｌ：、”Ａ　）の主
な吸収（波数）は次のとおりである。

３４００．３０（１０，２９５０，１７６５，１７３０
゜１６７０．１５４０，１４６０．１４１０．１３５０
゜１２７０．１２５０．１２００．１１００．１０５０
゜９００、７８０．　（３５（１，５７０（ｃＦＩ−１
）（７）Ｃ−核磁気共鳴（ＣＭＲ）スペクトル（１００
ＭＨｚ、ポ、水中）；少なくとも下記のシグナルが認め
られる。

１７７．８（ｓ）、１７γ６（Ｒ）、１７４．４（ｎｌ
、１７２．６（８Ｌ１６８．９（Ｓ）、ｔ　６１．４（
帆　７５．２（ｄｌ　、　６６．２（ｔ）　＋６４．１
（ｔ）、　６０．７（ｄ、）、　５７．９（（］、）、
　５２．４（ｄ）。

５０．６（ｔ）、４４．＋１（ｔ、）、　３５．４（（
１１，１９，１（（１）（ｐｐｍ）、（た）γし、ａ　
：　ｑｉ、ｎｒＢｌｅｔ、、ｄ　：ｄｏｕｂｌｅｔ、ｔ
　：　ｔｒｉｐｌｅｔ、、　ｑ　：　ｑｕａｒｔｅｔｏ
）（ｓ）　ｒ＃　Ｍ□召二’ｂ。

可溶；水、ジメチルスルフォギ・す・イド。

すゞｆ溶ｉ酢酸エチμ、クロロフォルム、ジエチルエー
テル。

（９）　呈色反応； ト５性；ニンヒドリン反応。

１へ（１ミ；ブレイブ・リーバツク反応、板［１八と応
。

エールリッヒｄ代カバ、バートンＩＸ１．＋、＞　ｖド
ヲーゲンドルフＦｙ一応。

（＋ｒｊ　ｙミノｌｑＨ分１斤ｊ　６　Ｎ−１／ｉＪ、
：’９中、　２０　＋９間。

１０５℃で加水分解すると既知アミノ酸としてグリシン
、アラニンが検出される。

αＪ　安定性；水溶液中ｐ）１３．１１５では安定、ｐ
Ｈ７でや−や不安定、ｐＨ９では不安定。

（ＩＦ　？ｔ’７ＪｉＵクロマトグラフィー（セルロー
スｆ、東京化成社製９日本）９ Ｑｌ　’＋π対拌使体クロマトグラフィー（日立ｒ上農
、日本）；担体、　Ｙ　Ｍ　ＣＡ　−３０３（山村化学
研究所製１日本）、移動層１８％メタノ−／Ｉ／Ａ）、
ｏＩＭリンＩ’ｌｌＦ’１ｍ７Ｉｌ　（ｐ　Ｈ６，３）
　、　１　ｐｌ／　ｍｉｎ。

Ｒｔ　（ｍｉｎ）　−７，０ （ＩＪ　比旋光度；〔α〕甘せ３３°±１０°（ｃ＝０
．５゜ジメチルヌルフオギザイド）。

（１１＋代性、中訃、塩基性の区別＝中性物−ｓｒ　（
；ｒα離体のＴＡＮ−５４２は酸性物質）。

ＴＡＮ−５４２す）’）ラムＪ五（Ｄ生′１′、σ学的
１１ミ状について述べる。この化合物の各ｆａｔ　’Ｊ
生４ｉｊａに７１する抗Ｆ有ヌベクトルは第１餞に示す
とおりである。

第　１　褒 （注１）培地：バクトアンテイビオテイツクメデイム３
；１γ５９．バクトアガー２０９、蒸留水；１ｊ１．ｐ
Ｈ７，０゜ （注２）接４菌液として約ＩＱｃｅｌしｎを用いた。

またＴＡＮ−５４２ナトリウム塩の失１：發的マウス感
染症における治療効果は第２表に示すとおシである。

第２表 さらに、ＴＡＮ−５４２ナトリウム塩を１ｑ／ｋｑでマ
ウヌに皮下投与しても急性毒性は全く認められなかった
。

これらのデータから明らかなように’１’ＡＮ−５４２
はグラムＫＧ性菌およびグラム陰性Ｓ（に対して抗菌性
を示し、ｌ’ｉｔｉ乳動物などに毒性を示さない抗生物
質であると云える。したがってＴＡＮ５４２はヒトおよ
び家畜、家きんなとのｌ１ｆｌｉ′￥（感染症の治療に
用いることが出来る。

ＴＡＮ−５４２をたとえば黄色ブドウ伏線１−１感染症
の治療薬として用いるには、たとえばＴＡＮ−５４２を
生理的食塩水にｒ’ｔｆ　ｌ仔して注ｆｌｌｌ剤として
非経口的に皮下または筋肉内に１〜５０　ｒ’／／／：
’１／日、好ましくは５〜２　（１”／／　＋會／日役
ｊ：ｉｉ−る。また経口剤として、抗生物質Ｔ　ＡＮ　
−５４２を乳で、！とン昆合してカブセルハ１１とし、
”ｒ　Ａ　Ｉｉ　−５１１２として１〜１００だｉ　／
　ｋｇ／日好宜しくは５〜５０１・、７／ｋｑ／日投与
する。

また、本発明によって１１−）られるＴＡＩ・Ｊ−５，
４２ｔ」：、殺Ｃ，イ／１１１として用いることができ
る。たとえばＴＡＮ−５４２を０．０１〜０．１　Ｗ／
Ｖ％の’ｒ７！Ｌ！”；で蒸留水に溶解した（５ｙ剤、
また（・よりセリン、フッリンを〕ａ　７＋’ｊとし、
ＩＱあだり　’ｌ’　Ａ　Ｍ　−５４２７Ｃ０，２〜ｚ
ｏｍｙ、好ましくハ１〜１０１５ｇ含有するＱ’Ｓ＜　
’Ｉｒ／’７１１として、ヒトおよび動物の手９足、　
１ｔｆｊ、、　、耳などの殺ｒ′Ｉ：ｆ　＋消ｆ４に用
いることができる。

抗生物質ＴＡＮ−５４２はまた所しい医し３品の合成中
間体としても極めて有望な化合物である。

以上述べた諸性質から抗生物質Ｔ　Ａ　Ｎ　−５４２は
モノサイクリックβ−ツクタム糸ヨル生物質と思われる
が、これらに昼する既知抗生物？蓮のうち４でηりＩ！
化学的注状が比較的類似しているものとして、ヌルファ
ゼシ７　（５ｕｌｆａｚｅｃｉｎ　）が姑げらｈる。

しかし、抗生物質Ｔ　Ａ　Ｎ　−５４２の赤外部吸収ス
ペクト／Ｌ／、ＣＭＲヌベクトルおよび抗ｒ、“１ヌベ
クトルをヌｐファゼシンのそれらと比１険すると明らか
に異るので、ＴＡＮ−５４２１”、を玉Ｊｉス見モノサ
イクリックβ−ラクタムフｉ抗生物・頁である。

くＪ６　ノ１９１　イノ１］ 次に実施（９１１をもってさらに詳創に本発明の内′ｉ
）γを説明するが、これによって本発明が１：［）定さ
れるものではない。パーセントは、（１，νにことわり
のないかぎシ重Ｑ／容量％を示す。

実施例１ 栄めで寒天〈、：１面上に生育させたフレキシバククー
・エヌピーＹ　Ｋ　１１４　（Ｆ　Ｅ　ＲＭ　Ｐ　−７
１５５；ＩＦＯ１４２６３）の菌株を、グルコ−７２％
、ソρグル・ヌクーチ３％、生大豆扮１％。

廃糖密１％、ポリペプトン（大五栄＝Ｘ化学社製、日本
）０．５％９食塩０，３％を含有する水ｉ′ｄ液（ｐＨ
７，０）に沈降性炭酸カルシウム０５％を添加した培地
４０訂ｔを含む２００Ｆ−を容三ｊ〕フフメコに］ンイ
：ｌシテ、２４℃で２４時間１’ｉｌＰ　Ｆ：＞　ｊｌ
ｉ’ｆ　〕Ｙ、：　シそｏ　＋７′ｆ　響物をＪＪλ菌
としだ。

次ニ、クリセロ−７ｖ３％、グルコース０１％。

肉エキス（和光λｉ３・１．゛Ｓ社１トす、ｓ　＊　）
０．５　ｖち、ボリベプ°トン（大五栄首化′８ｊ”　
’ｊ、ｆ：　’、！す、日本）０５％、」こε」′４０
．５％、チオ断シ酸ナトリウム１）Ｃ３５’／Ｓ　ｌ　
＞ｊｌ化コバルト２ｐｐｍ　（Ｉ）Ｈ７，０）を含イ゛
了する培地６００　（１ｐｉを２００ｒ／の三角フラス
コに各々４０ｒ／ずつ分注し、１２０℃、２０分間１′
、’ｑ＋よ”イしたものに（］保“ｆを１ｒｇｌずつ接
種して、１７℃で、２３０回転／分の条件下で７２時間
４・テ（ζり培養した。

ザ（施例２ 実施例１で得られたＪ’７’ｒ　”Ｘ−茸成（５，５７
１をｐＨ６に調整し、アセトン（２２１を加えて１・・
Ｌ拌、ハ、（フロスーパーセ／Ｌ／（ジョン・マンビ／
Ｉ／仕口、米「〔１）を加えて、ン用１’Ａｏ　Ｆ’？
ｔ２　（２７，５１３）をｔｖ圧下η“ぴ′１゛１、濃
縮液Ｃ５，５１）をｐＨ５に補１Ｅ後、ダウ、−ｃ７ク
スー１×２（ＣＩＱＱ）（３５０ｈ／、）のクロマトグ
ラフィーに付した。カラムを水ルシ失、４％食塩水（１
７５０πｔ）で活性部分をｎＩ出した。ｉ宕出液をｐＨ
６に’；：３　Ｍｌ後活性炭（１００πｔ）のクロマト
グラフィーに付した。カラムを水洗後７　’ｉ’ｏイソ
ーブタノーｐ水（５００ｗＪ）で抗生”ｉ’ｉｖ　質を
溶出した。溶出液中のイソ−ブタノールを留去後、γ今
縮液をＱＡＥ−セファデツクヌＡ２５　（ＩＪｌ型）（
５０Ｆ！りのクロマトグラフィーに付した。カラムを０
．０２　Ｍ食塩水（２５０＊／）で洗つノＣ後、Ｑ、　
ｌ　１，１食塩水（２５０＊／’）ｆ溶出分＋ｉＥｉ　
Ｉ、たつ抗生Ｉｉ′り質を含む両分（Ｌｏｏｐ／）を活
性（・で（１０がｔ）した。溶出液をイ′展翻し、沼ｆ
１？１液をＴ　３　Ｋゲルを用いた分ｊｉ’ｌｉ用高５
１！液体クロマトグラフィーに付し、２％メタノ−／’
／　０．　ＯＩ　Ｍリン１疫ジナトリウム−リン酸（ｐ
Ｈ６，３）テ抗生物ｑｔｆをＡ’＃出分１ｊ′Ｔｉシた
。

有効画分（１２０＊／）中の、憔慶塩頬を活性炭（５ガ
ｔ）のクロマトグラフィーで除き、溶出液を濃縮、凍結
乾ｊ・■すると、ＴＡＮ−５４２ナトリウム塩の白色粉
末（２０ｆｆｇ）が１１もれた。

実施例３ 栄養寒天斜面上に生育させたフレキシバククー−ｘ７．
ピーｙＫ−ｘ１４Ａ′に（Ｆ’　ｎ　ＲＰＩ　Ｐ　−７
１５５；工Ｆ０　１４２（３３）をグｌし：１−７２％
。

ソμプル・スターチ３％。生犬Ｃ１χ（；）１％、１帥
Ｊｌ　’ｔ＜？１％、ポリペプトン０．５％９食Ｊ、３
ｊ　Ｏ，３％を含０する水溶液（ｐＨ７，０）に沈降性
トマ１ウカルシウム０．５％を添加した培地５００イを
含む２ｊ容版［コフフスコに接種して、２４℃で４８時
間柱車重゛、（肖培養した。この培−１１？液全（）（
を＋、記培１）１；にアクトコ−／１１０．０５％を添
加した培地３０６を含むヤ１；１）５０１　ツタ７９　
ＫＪ’ｒ２４”、’ｉｌ　Ｌ、２４℃テ”’気（−ｋ　
３　（ｌ　８７分、２００回転／分の条件下で４８時間
培ｑ４＠　した。この培イω成金世をグリセロ−Ｊｌｚ
３％、グルコ−７０，１％、肉エキス（：）１＋光純ミ
・１１５社ド゛シ、日本）０．５％、ポリペプトン０．
５　’／Ｇ　１食塩０５％、チオｖ＜ｌ’ｔ＞ナトリウ
ムｏ、　０５　、／、　ｌ　鳴化コバｚｌｚ）２ＰＰｍ
。

アクトコ−／Ｖ０．０５％（ｐＨ７，０）を含有する培
地１２０１を含む容量２００４のタンクに接シｚイし、
１７℃で通気ｆ）　６０　Ｊ　／分、１７０回（〉部分
の条仕丁で６６時間培養し／こ。

実施例４ すさ施例３で得られた培５ｃ？［ｔ（１１２Ａ　）をハ
イクロスーパーセ）ｖ（７，５ｋｇ）を用いて炉ｉ１３
゜炉液（１１０ｊ　）ヲｐＨ６，５に；ＩＩＭＪ！’を
後、ダウエックス−ＩＸ２（７Ｊ）にバッチ法で吸ｉ：
マナしめ、４５９食塩水（３５Ｊ）で抗生物質を溶出し
プこ。溶出液を活性炭（３１）のクロマトグラフィーに
付し、７％イソ−ブタノール水で有効部分を溶出した。

溶出液を）層線し、濃酪ｉ夜をアンバーライトＩＲＡ−
６８（Ｃ１型）（ＩＪ）のクロマトグラフィーにイ＝ｔ
　Ｌ、０．　Ｉ　Ｍ食塩水（６１）で溶出分画した。

有効区分Ｃ２，５１）を活性炭（１５０＋＋＋？）のク
ロマトグラフィーに付し、７％イソ−ブタノール水で溶
出した。溶出液を濃ａａｔ、、７農精１液（１５０づ）
をＱＡＥ−セファデックスＡ−２５（Ｃ１０（！ジ）（
１００＊／）のクロマトグラフィーに付した。カラムを
００２Ｍ食塩水（５００πｔ）でｊ；ｔ３つだ後、０．
１Ｍ食塩水で溶出分画した。有効区分を活性炭で脱塩操
作後、濃縮、凍結乾燥すると、ＴＡＮ−５４２ナトリウ
ム塩（６４０ｖｌりが１゛）られた。

発明の効果 抗生物ｆｆ（ＴＡＮ−５４２およびそのｊ２は、グラム
陽性菌および陰性菌に抗「Ｓ作用を示し、たとえばヒト
、家畜、家禽等に経口的または非経口的に投与すること
によってこれらのｉｔ’ｌｌ閾感染症の治泣に用いるこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は抗生物質Ｔ　Ａ　Ｎ　−５４２ナトリウムｊ汀
の赤外部吸収スベク）／１ｚ（ＫＢｒ法）を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔１〕　モノナトリウム塩として次の物ｊ、ｌｌｉ化学
   的性状を有する抗生物質ＴＡＮ−５４２−１？よびその
   塩１）元累分析１ｉＹｆＡ、　五酸化リン上テ４（ｉｔ
   　Ｇｔｒ２間乾燥した試料： Ｃ，３５，３±２．０ Ｈ，５，０±１．Ｏ Ｎ　、１４．４±１．５ Ｓ　＊　５４　７±１．Ｏ Ｎａ、　：Ｌ８±１．０ ２）分子式（分子徴）　：　Ｃ１６Ｈ２５Ｎ６０１２８
   　・Ｈａ（５４８，４５）（Ｓ工λ１８法から計算）３
   ）紫外部吸収スベク）／しく水中）：２１０ｒ１ｍ以上
   に特異な吸収を示さない。 ４）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠による吸収
   スベク）／しの主な吸収（波３ζ々）は次のとおυであ
   る。 ３４００．３０００，２９５０．１７６５．１７３０゜
   １６７０．１５４０．１４６０，１４１０．１３５０゜
   １２７０．１２５（１，１２００，１１（）０．１ｔＪ
   ５０゜９００．７８０，６５０．５７０（Ｃゝｔ−１）
   。 ５）　ｒｔ’ｒ　解性：水、ジメチルスルフォキサイド
   には可゛溶。ｅｊ’ｐ　峻エチ／Ｌ／、り１：【マスフ
   ォルム、ジエチμエーテｐには喰浴。 ６）呈色反応：ニンヒドリン反応に１訃。ブレイブ・リ
   ーバツク反応、１！えロ反応、エールリッヒ試擾、バー
   トン反応、ドラーゲンドルフ反１１−ζに１へ１生。 ７）　’３Ｃ−核イは気共１１ｊ％　（ＣＦ４　Ｒ）ス
   ペクトル（１００ＭＨ２，Ｍ水中）：少なくとも下記の
   シグナルが認められる。 １７７、８（Ｑ几　１７７．６（８）、１７４．４（８
   ）、１７２．６（ｆｌ）。 １６８．９（ｓ）、１６．１．４（ｓ）、　７５．２ｆ
   ｄ１．　６６．２（す。 ６４．１（ｔ）、　ＣｉＯ，７（ｄ）、　５７．≦１（
   （すｅ　５２４（ｄ）＋５０．６（ｔ）、　４４．（）
   （ｔ）、　３５．４（ｑ）、　１９．１（ｑ）（ｐｐｍ
   ）、（ただし、ａ　：　ｏｉｎ３１ｅｔ、　ｄ　：ｄｏ
   ｕｂｌｅｔ、　ｔ　：　ｔｒｉｐｌｅｔ、　（１：　ｑ
   ｕａｒｔｅｔ、　）〔２〕　プレキシバクター属に属す
   る抗生物ヱ′ｆＴＡＮ−５４２生産菌を培地に培養し、
   培養物中に抗生物質ＴＡＩＪ−５４２を生成蓄積せしめ
   、これを採取することを特徴とする抗生物質Ｔ　Ａ　Ｎ
   　−５４２またはその塩の製造法。