JPS6010720B2 - 抗生物質ｃ―１５００３ ｐ―４の製造法 - Google Patents
抗生物質ｃ―１５００３ ｐ―４の製造法Info
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- JPS6010720B2 JPS6010720B2 JP52139384A JP13938477A JPS6010720B2 JP S6010720 B2 JPS6010720 B2 JP S6010720B2 JP 52139384 A JP52139384 A JP 52139384A JP 13938477 A JP13938477 A JP 13938477A JP S6010720 B2 JPS6010720 B2 JP S6010720B2
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D498/18—Bridged systems
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/188—Heterocyclic compound containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen atoms and oxygen atoms as the only ring heteroatoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/365—Nocardia
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、抗生物質Ｃ−１５００が−４を工業的に有利
に製造する方法に関する。
に製造する方法に関する。
抗生物質Ｃ−１５００餌‐４〔以下、「Ｐ−４」と略称
することもある。
することもある。
〕は、土壌などの試料から分離された微生物ノカルディ
ア属菌の培養により得られた新規化合物であり、この抗
生物質およびその製造法についてはすでに出願されてい
る〔袴額昭５２一３７１６０持願昭５２−３７８６６〕
。上記の方法によると、使用された菌は抗生物質Ｃ−１
５００３の各成分の一種又はそれ以上を同時に生産蜜稗
するので、もしこのうちの特定成分のみを採取しようと
する場合には、その分離精製工程で収率が低下する。本
発明者らは、分離精製工程をできるだけ簡略化してＰ一
４を効率よく製造する方法について種々研究したところ
、培地中に特定物質を添加することにより、目的とする
Ｐ一４を極めて効率よく、または単独に近い状態で製造
し得る新知見を得、これに基づいてさらに研究した結果
、完成されたものである。
ア属菌の培養により得られた新規化合物であり、この抗
生物質およびその製造法についてはすでに出願されてい
る〔袴額昭５２一３７１６０持願昭５２−３７８６６〕
。上記の方法によると、使用された菌は抗生物質Ｃ−１
５００３の各成分の一種又はそれ以上を同時に生産蜜稗
するので、もしこのうちの特定成分のみを採取しようと
する場合には、その分離精製工程で収率が低下する。本
発明者らは、分離精製工程をできるだけ簡略化してＰ一
４を効率よく製造する方法について種々研究したところ
、培地中に特定物質を添加することにより、目的とする
Ｐ一４を極めて効率よく、または単独に近い状態で製造
し得る新知見を得、これに基づいてさらに研究した結果
、完成されたものである。
すなわち、本発明は／カルディア属に属する抗生物質Ｃ
‐１５００２生産菌を、イソバレロイルＣｏＡの前駆物
質を添加した培地に培養し、培養物中に抗生物質Ｃ−１
５００＊‐４を特異的に生成蓄積せしめ、これを採取す
ることを特徴とする抗生物質Ｃ−１５００坪−４の製造
法である。
‐１５００２生産菌を、イソバレロイルＣｏＡの前駆物
質を添加した培地に培養し、培養物中に抗生物質Ｃ−１
５００＊‐４を特異的に生成蓄積せしめ、これを採取す
ることを特徴とする抗生物質Ｃ−１５００坪−４の製造
法である。
本発明においては、「抗生物質Ｃ−１５００３」あるい
は「Ｃ−１５００３」とは、下記の一般式（１）におい
て示される四つの化合物の夫々あるいは１以上の混合物
を含めた総錦塚である。
は「Ｃ−１５００３」とは、下記の一般式（１）におい
て示される四つの化合物の夫々あるいは１以上の混合物
を含めた総錦塚である。
〔式中、Ｒは−ＣＯ−ＣＱ−ＣＨ３、
又は
を表わす。
〕一般式（１）においてＲが−ＣＯ−Ｃは一ＣＨ３の化
合物を「抗生物質Ｃ−１５００犯−２」あるし、は単に
「Ｐ−２」と、Ｒがの 化合物を「抗生物質Ｃ−１５００班−３」あるいは単に
「Ｐ−３」と「 Ｒが−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ比の
化合物を「抗生物質Ｃ−１５００箱‐３」あるいは単に
「Ｐ−３」と、Ｒが の化合物を「抗 生物費Ｃ−１５００犯−４」と、それぞれ称するものと
する。
合物を「抗生物質Ｃ−１５００犯−２」あるし、は単に
「Ｐ−２」と、Ｒがの 化合物を「抗生物質Ｃ−１５００班−３」あるいは単に
「Ｐ−３」と「 Ｒが−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ比の
化合物を「抗生物質Ｃ−１５００箱‐３」あるいは単に
「Ｐ−３」と、Ｒが の化合物を「抗 生物費Ｃ−１５００犯−４」と、それぞれ称するものと
する。
本発明の方法に用いることができる菌株としては、たと
えば土壌などから分離された放線菌ＮｏＣ−１５００３
珠〔以下、「Ｎｏ．Ｃ−１５００３株」と略称すること
もある。
えば土壌などから分離された放線菌ＮｏＣ−１５００３
珠〔以下、「Ｎｏ．Ｃ−１５００３株」と略称すること
もある。
〕などが挙げられる。Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠の菌学的
諸性質をシャーリングおよびゴットリープの方法〔イン
ターナショナル．ジヤーナル・オブ・システマテイツク
・バクテリオ ロ ジー（ｌｎｔｅｍａｔｊｏＭ】Ｊｏ
ｍＭ１ ｏｆＳ＄ｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ）、第１嶺筈、３１３頁〜乳０頁〜 １９６６モ〕
に準じて検討し、２蟹○、２１日間にわたって観察した
結果は下記の通りである。
諸性質をシャーリングおよびゴットリープの方法〔イン
ターナショナル．ジヤーナル・オブ・システマテイツク
・バクテリオ ロ ジー（ｌｎｔｅｍａｔｊｏＭ】Ｊｏ
ｍＭ１ ｏｆＳ＄ｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ）、第１嶺筈、３１３頁〜乳０頁〜 １９６６モ〕
に準じて検討し、２蟹○、２１日間にわたって観察した
結果は下記の通りである。
‘１１ 形態的特徴
基生菌糸は寒天塔地上および液体塔地中ともによく伸長
し、分枝する。
し、分枝する。
その直径の多くは０．８〜１．２山肌であり、時には樺
菌状または分枝した短い菌糸状に分断することがある。
種々の分類用塔地上でよく生育し、気菌糸は基生菌糸上
に発育するが、東状体（５０〜２００山ｍ×２００×ｌ
ｏｏ０ム肌）を形成し、それらの上に発育することが多
い。気菌糸の形状の多くは屈曲状または直線状を示し、
まれにゆるい螺旋状を示すものも見られる。成熟した培
養を検鏡すると胞子が連鎖状になっていると考えられる
ものは少なく「それらの培養表面から採取した菌懸濁液
について検鏡した所、長楕円形（０．８〜１．２ムｗ×
４．８〜６．８ム肌）および楕円形（０．８〜１．２×
１．０〜２．０〃ｍ）の分節胞子様のものが多く観察さ
れ、電子顕微鏡による観察ではその表面は平滑であった
。‘２’ 菌体組成 本菌株をＩＳＰＮｏ．１の改変塔地中で２８℃、６６〜
９０時間振麹培養して、黄体を集め、洗絶した。
菌状または分枝した短い菌糸状に分断することがある。
種々の分類用塔地上でよく生育し、気菌糸は基生菌糸上
に発育するが、東状体（５０〜２００山ｍ×２００×ｌ
ｏｏ０ム肌）を形成し、それらの上に発育することが多
い。気菌糸の形状の多くは屈曲状または直線状を示し、
まれにゆるい螺旋状を示すものも見られる。成熟した培
養を検鏡すると胞子が連鎖状になっていると考えられる
ものは少なく「それらの培養表面から採取した菌懸濁液
について検鏡した所、長楕円形（０．８〜１．２ムｗ×
４．８〜６．８ム肌）および楕円形（０．８〜１．２×
１．０〜２．０〃ｍ）の分節胞子様のものが多く観察さ
れ、電子顕微鏡による観察ではその表面は平滑であった
。‘２’ 菌体組成 本菌株をＩＳＰＮｏ．１の改変塔地中で２８℃、６６〜
９０時間振麹培養して、黄体を集め、洗絶した。
上記菌体をビー・ベッカーらの方法〔アプライド、マイ
クロバイオロジー（ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ）、１２蓋、４２１頁、１９６蟹王〕およびェム
・ビー・レヱヒバリェーの方法〔ジャーナル・オプ・ラ
ボラトリー・アンド・クリニカル・メデイシン（Ｊｏ川
船ｌｏｆＬａｂｏｒａｔｏひａＭＣｌｉｎｉｃａｌＭｅ
ｄｉｃｉｎｅ）７１巻、９３４頁、１９６洋王〕に従っ
て菌体細胞中のジアミノピメリン酸および糖組成を検し
た結果、前者はメソ体であること、後者はガラクトース
およびアラビノースに相当するスポットの存在が認めら
れた。糊 分類用塔地上の諸性質本菌株は各種培地上で
、いずれも比較的よく発育し、その基生菌糸は培養初期
無色ないし淡黄色で、その後、淡黄褐色または黄褐色を
示す。
クロバイオロジー（ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ）、１２蓋、４２１頁、１９６蟹王〕およびェム
・ビー・レヱヒバリェーの方法〔ジャーナル・オプ・ラ
ボラトリー・アンド・クリニカル・メデイシン（Ｊｏ川
船ｌｏｆＬａｂｏｒａｔｏひａＭＣｌｉｎｉｃａｌＭｅ
ｄｉｃｉｎｅ）７１巻、９３４頁、１９６洋王〕に従っ
て菌体細胞中のジアミノピメリン酸および糖組成を検し
た結果、前者はメソ体であること、後者はガラクトース
およびアラビノースに相当するスポットの存在が認めら
れた。糊 分類用塔地上の諸性質本菌株は各種培地上で
、いずれも比較的よく発育し、その基生菌糸は培養初期
無色ないし淡黄色で、その後、淡黄褐色または黄褐色を
示す。
また種々の分類用培地中に黄色ないし黄褐色の可溶性色
素を生成する。気菌糸は粉状で、−匁史‘こは中程度に
発育し、白色ないし黄色または淡黄褐色を示す。本菌株
の各種分類用堵地上における諸性状は第１表に示した通
りである。第１表 Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠の分類用培
地上の諸性質｛ィ）藤糖・硝酸塩寒天塔地 生育（Ｇ）：豊富、黄色（３ｉａ）＊ ないし淡黄褐色
（乳ｃ）＊、東状体形成気菌糸（ＡＭ）：貧弱、白色 可溶性色素（ＳＰ）：なしまたは徴黄褐色‘０１ グリ
セロール・硝酸塩寒天培地 Ｇ：中程度「淡黄色（次ａ）＊、東状体形成ＡＭ：中程
度、白色ＳＰ：なし し一 ブドウ糖・ァスバラギン寒天塔地 Ｇ：中程度、淡明黄色（３ｐａ）＊ ないし明黄色（本
ａ）＊ＡＭ：貧弱、白色 ＳＰ：明黄色（本ａ＊ 臼 グリセロース・アスパラギン寒天培地Ｇ：中程度、
淡黄色（次ａ）＊、東状体形成ＡＭ：貧弱、白色ＳＰ：
なし 的 でん粉寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（松ａ）＊ ないし淡黄褐色（友ａ
）＊、東状体形成ＡＭ：豊富、淡黄色（父ａ）＊ ＳＰ：なし Ｎ 栄養寒天培地 Ｇ：中程度、淡黄色（本ａ）＊ ないし黄色（ａ交）＊
１、東状体形成ＡＭ：貧弱、白色 ＳＰ：なし 【トーリンゴ酸カルシウム寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（次ａ）＊ ないし淡黄褐色（友ａ
）＊１、東状体形成中程度、白色ないし淡黄色（父ａ）
＊ ＳＰ：なし 併 酵母エキス・麦芽エキス寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄褐色■ｃ）＊ ないし賜褐色（滋）＊
、東状体形成ＡＭ：中程度、白色ないし淡黄色（Ｚａ）
＊ＳＰ：なし肌 オートミール葵夫培地Ｇ：中程度、淡
黄色（幻ａ）＊ ないし黄色（ａ弦）＊、東状体形成Ａ
Ｍ：貧弱、白色ないし淡黄色 ＳＰ：なし 肉 べブトン・酵母エキス・鉄裏夫培地 Ｇ：中程度、黄色（ａ３）＊ ＡＭ：なし ＳＰ：黄色■３）＊ ０リ チロジン寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（本ａ）＊ ないし黄色（＄ａ）、
東状体形成ＡＭ：中程度、白色ないし淡黄色（松ａ）＊
ＳＰ：黄褐色（＄ｅ）＊＊：カラー・ハーモニー・マニ
ュアル、第４版、（コンテェイナー・コーボレ− ション・オブ・アメリカ、１９球年発 行）による色名記号 ４｝ 生理的性質 本菌株の生理的性質は第２表に示した通りである。
素を生成する。気菌糸は粉状で、−匁史‘こは中程度に
発育し、白色ないし黄色または淡黄褐色を示す。本菌株
の各種分類用堵地上における諸性状は第１表に示した通
りである。第１表 Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠の分類用培
地上の諸性質｛ィ）藤糖・硝酸塩寒天塔地 生育（Ｇ）：豊富、黄色（３ｉａ）＊ ないし淡黄褐色
（乳ｃ）＊、東状体形成気菌糸（ＡＭ）：貧弱、白色 可溶性色素（ＳＰ）：なしまたは徴黄褐色‘０１ グリ
セロール・硝酸塩寒天培地 Ｇ：中程度「淡黄色（次ａ）＊、東状体形成ＡＭ：中程
度、白色ＳＰ：なし し一 ブドウ糖・ァスバラギン寒天塔地 Ｇ：中程度、淡明黄色（３ｐａ）＊ ないし明黄色（本
ａ）＊ＡＭ：貧弱、白色 ＳＰ：明黄色（本ａ＊ 臼 グリセロース・アスパラギン寒天培地Ｇ：中程度、
淡黄色（次ａ）＊、東状体形成ＡＭ：貧弱、白色ＳＰ：
なし 的 でん粉寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（松ａ）＊ ないし淡黄褐色（友ａ
）＊、東状体形成ＡＭ：豊富、淡黄色（父ａ）＊ ＳＰ：なし Ｎ 栄養寒天培地 Ｇ：中程度、淡黄色（本ａ）＊ ないし黄色（ａ交）＊
１、東状体形成ＡＭ：貧弱、白色 ＳＰ：なし 【トーリンゴ酸カルシウム寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（次ａ）＊ ないし淡黄褐色（友ａ
）＊１、東状体形成中程度、白色ないし淡黄色（父ａ）
＊ ＳＰ：なし 併 酵母エキス・麦芽エキス寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄褐色■ｃ）＊ ないし賜褐色（滋）＊
、東状体形成ＡＭ：中程度、白色ないし淡黄色（Ｚａ）
＊ＳＰ：なし肌 オートミール葵夫培地Ｇ：中程度、淡
黄色（幻ａ）＊ ないし黄色（ａ弦）＊、東状体形成Ａ
Ｍ：貧弱、白色ないし淡黄色 ＳＰ：なし 肉 べブトン・酵母エキス・鉄裏夫培地 Ｇ：中程度、黄色（ａ３）＊ ＡＭ：なし ＳＰ：黄色■３）＊ ０リ チロジン寒天塔地 Ｇ：中程度、淡黄色（本ａ）＊ ないし黄色（＄ａ）、
東状体形成ＡＭ：中程度、白色ないし淡黄色（松ａ）＊
ＳＰ：黄褐色（＄ｅ）＊＊：カラー・ハーモニー・マニ
ュアル、第４版、（コンテェイナー・コーボレ− ション・オブ・アメリカ、１９球年発 行）による色名記号 ４｝ 生理的性質 本菌株の生理的性質は第２表に示した通りである。
すなわち生育温度範囲は１２０なＬ・し斑℃、また寒天
培地（ＩＳＰＮｏ．２）上で気菌糸をよく着生する温度
範囲は２び０ないし３５℃である。第２表 Ｎｏ．Ｃ−
１５００３珠の生理的性状生育温度：１が○〜３鷲○気
菌糸着生温度２０℃〜３５℃ ゼラチン液化：陽性 でん粉加水分解：腸性 硝酸塩還元館：陽性 ミルク・ベブトン化：腸性 ミルク・凝固：陰性 カゼイン分解館：腸性 メラニン様色素形成（ベプトン・酵母エキス鉄寒天培地
）：陰性、（チロジン寒天培地）：腸性チロジン分解館
：腸性 キサンチン分解館：陰性 ヒポキサンチン分解館：陰性 リゾチーム耐性：陽性 食塩耐性：２％ ‘５１各縄炭素源の利用性 プリーダムおよびゴツトリープの方法〔ジャーナル・オ
ブ・バクテリオロジ−（Ｊｏｕｍａｌｏｆ母ｃｔｅｒｉ
ｏｌｏ期）、５鏡蓋、１０７頁、１扱８王〕に記載され
ている培地およびとれに酵母エキスを０．１％添加した
基礎培地を用いて「各種炭素源の利用性を検し「それら
の結果を第３表に示した。
培地（ＩＳＰＮｏ．２）上で気菌糸をよく着生する温度
範囲は２び０ないし３５℃である。第２表 Ｎｏ．Ｃ−
１５００３珠の生理的性状生育温度：１が○〜３鷲○気
菌糸着生温度２０℃〜３５℃ ゼラチン液化：陽性 でん粉加水分解：腸性 硝酸塩還元館：陽性 ミルク・ベブトン化：腸性 ミルク・凝固：陰性 カゼイン分解館：腸性 メラニン様色素形成（ベプトン・酵母エキス鉄寒天培地
）：陰性、（チロジン寒天培地）：腸性チロジン分解館
：腸性 キサンチン分解館：陰性 ヒポキサンチン分解館：陰性 リゾチーム耐性：陽性 食塩耐性：２％ ‘５１各縄炭素源の利用性 プリーダムおよびゴツトリープの方法〔ジャーナル・オ
ブ・バクテリオロジ−（Ｊｏｕｍａｌｏｆ母ｃｔｅｒｉ
ｏｌｏ期）、５鏡蓋、１０７頁、１扱８王〕に記載され
ている培地およびとれに酵母エキスを０．１％添加した
基礎培地を用いて「各種炭素源の利用性を検し「それら
の結果を第３表に示した。
第３表 修Ｃ−１５００３株の炭素源利用性炭素源 生
育＊ 炭素源 生育＊Ｄーキシロース 十日 ラフ
イノース 士士Ｌーアラビノース＋＋ メリピオー
ス ＋＋Ｄ−グルコース 日什 ｉ−イノシトール
−−Ｄーガラクトース ＋＋ Ｄーマンニトール −
Ｄ−フラクトース州什 Ｄ−マンニトール ＨＨＬ−ラ
ムノース ＋十 グリセロール −±Ｄ−マンノース
州什可溶性澱粉 ＋十ンュークロース 什日 対
照ラクトース マルトース 士＋ トレハロース ＋什 ＊；酵母エキス０．１％添加基礎塔地 注；川；豊富な発育 什ミ比較的良好な発育 十三発育を認める ±：僅かに発育する −：発育しない ‘６’その他の諸性質 前記■に示した方法で菌体を集め、これらとジェー。
育＊ 炭素源 生育＊Ｄーキシロース 十日 ラフ
イノース 士士Ｌーアラビノース＋＋ メリピオー
ス ＋＋Ｄ−グルコース 日什 ｉ−イノシトール
−−Ｄーガラクトース ＋＋ Ｄーマンニトール −
Ｄ−フラクトース州什 Ｄ−マンニトール ＨＨＬ−ラ
ムノース ＋十 グリセロール −±Ｄ−マンノース
州什可溶性澱粉 ＋十ンュークロース 什日 対
照ラクトース マルトース 士＋ トレハロース ＋什 ＊；酵母エキス０．１％添加基礎塔地 注；川；豊富な発育 什ミ比較的良好な発育 十三発育を認める ±：僅かに発育する −：発育しない ‘６’その他の諸性質 前記■に示した方法で菌体を集め、これらとジェー。
マーマーらの方法〔ジャーナル・オブ・モレキユラー。
バイオロジー（ＪｏｕＭ１ｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉ
ｏｌｏｇｙ）、３巻、２０８頁、１９６１年〕に準じて
ＤＮＡを調製し、ＤＮＡのＧ−Ｃ（グアニンーシトシン
）含量を検すると約７１モル％であった。本菌株の栄養
菌糸をグラム染色すると陽性であった。
バイオロジー（ＪｏｕＭ１ｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉ
ｏｌｏｇｙ）、３巻、２０８頁、１９６１年〕に準じて
ＤＮＡを調製し、ＤＮＡのＧ−Ｃ（グアニンーシトシン
）含量を検すると約７１モル％であった。本菌株の栄養
菌糸をグラム染色すると陽性であった。
以上述べたＮｏ．Ｃ−１５００３珠の諸性質をェス卑ヱ
ー・ワックスマン著、ジ。
ー・ワックスマン著、ジ。
アクチゾミセテス（凡ｅ比ｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）、
第２巻、ザ母ウィリアム・アンド。ウイルキンス。カン
パニー発行、１９６１年、アール。ィーＱブッフアナン
もアンド・ヱヌ。イー・ギポンス糠、パージーズ・マニ
ュアル・オプ。デターミネーテイブ・バクテリオロジ‐
（Ｂｅｒ鉾ｙ′ｓ Ｍａｎ雌ｌ ｏｆ 戊ｔｅ肌ｉ雌
ｔｉＶｅ滋ｃにｎｏｌｏ勘）、第８版、１９７４羊およ
びその他の文献に従って検索した。本菌株はノカルディ
ァ（Ｎｗａｒｄｉａ）属のグループ囚に属すると考えら
れるが、既知菌株の中には上記諸性質を有する種は見出
されず、新菌鐘と同定された。本菌株Ｎｏ．Ｃ−１５０
０３株は、工業技術院微生物工業技術研究所にＦＥＲＭ
一ＰＮｏ．３９９２として〜財団法人発酵研究所にＩＦ
Ｏ−１３７２６として、ジ。
第２巻、ザ母ウィリアム・アンド。ウイルキンス。カン
パニー発行、１９６１年、アール。ィーＱブッフアナン
もアンド・ヱヌ。イー・ギポンス糠、パージーズ・マニ
ュアル・オプ。デターミネーテイブ・バクテリオロジ‐
（Ｂｅｒ鉾ｙ′ｓ Ｍａｎ雌ｌ ｏｆ 戊ｔｅ肌ｉ雌
ｔｉＶｅ滋ｃにｎｏｌｏ勘）、第８版、１９７４羊およ
びその他の文献に従って検索した。本菌株はノカルディ
ァ（Ｎｗａｒｄｉａ）属のグループ囚に属すると考えら
れるが、既知菌株の中には上記諸性質を有する種は見出
されず、新菌鐘と同定された。本菌株Ｎｏ．Ｃ−１５０
０３株は、工業技術院微生物工業技術研究所にＦＥＲＭ
一ＰＮｏ．３９９２として〜財団法人発酵研究所にＩＦ
Ｏ−１３７２６として、ジ。
アメリカン。タイプ・カルチヤー８コレクション（Ｔｈ
ｅ Ａｍｅｎｃａｎ ＴＷｅ Ｃｕｌｔｍｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ、ＮＥｒｙｉａｎｄｔＵ．Ｓ．Ａ）にＡＴ
ＣＣ‐３１２８１としてそれぞれ寄託されている。以上
に述べた様にＮｏ．Ｃ−１５００３株はノカルディア属
の新種であるが「微生物の一般的性質として自然的にま
たは変異剤によって変異を起し得る。
ｅ Ａｍｅｎｃａｎ ＴＷｅ Ｃｕｌｔｍｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ、ＮＥｒｙｉａｎｄｔＵ．Ｓ．Ａ）にＡＴ
ＣＣ‐３１２８１としてそれぞれ寄託されている。以上
に述べた様にＮｏ．Ｃ−１５００３株はノカルディア属
の新種であるが「微生物の一般的性質として自然的にま
たは変異剤によって変異を起し得る。
たとえばＸ線、ガンマ‐線、紫外線等の放射線の照射単
胞子分離、種々の薬剤を含有する培地上での培養「その
他の手段で変異させて得られる多くの変異株、あるいは
自然的に得られる突然変異株等であっても「上記した菌
学的性状または下記に示した様な菌学的性状の比較にお
いて実質的に別種とするに足らず、しかもＰ一２、Ｐ−
３、Ｐ−３および（または）Ｐ−４を生産する性質を有
するものはすべて本発明の方法に利用し得る。たとえば
Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠を種々の変異処理することによ
りｔ可溶性色素をほとんど生成しないものも基生菌糸が
無色のもの、黄緑色のもの〜赤褐色ないし燈赤色を示す
もの「菌糸が樺菌状または分枝した短い菌糸に分断し易
いものおよび気菌糸が多く白色または気菌糸をほとんど
着生しない変異株が得られる。本発明の方法において培
地に添加されるィソバレロィルＣｏＡの前駆物質とは、
抗生物質Ｃ−１５００２生産菌を培養している培地中に
添加した場合に、ィソバレロィルＣｏＡに変りうる物質
を意味し、その例としては、たとえば炭素数６のＱーア
ミノ酸「炭素数６のケトカルポン酸などが挙げられる。
胞子分離、種々の薬剤を含有する培地上での培養「その
他の手段で変異させて得られる多くの変異株、あるいは
自然的に得られる突然変異株等であっても「上記した菌
学的性状または下記に示した様な菌学的性状の比較にお
いて実質的に別種とするに足らず、しかもＰ一２、Ｐ−
３、Ｐ−３および（または）Ｐ−４を生産する性質を有
するものはすべて本発明の方法に利用し得る。たとえば
Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠を種々の変異処理することによ
りｔ可溶性色素をほとんど生成しないものも基生菌糸が
無色のもの、黄緑色のもの〜赤褐色ないし燈赤色を示す
もの「菌糸が樺菌状または分枝した短い菌糸に分断し易
いものおよび気菌糸が多く白色または気菌糸をほとんど
着生しない変異株が得られる。本発明の方法において培
地に添加されるィソバレロィルＣｏＡの前駆物質とは、
抗生物質Ｃ−１５００２生産菌を培養している培地中に
添加した場合に、ィソバレロィルＣｏＡに変りうる物質
を意味し、その例としては、たとえば炭素数６のＱーア
ミノ酸「炭素数６のケトカルポン酸などが挙げられる。
炭素数６のＱーアミ／酸としては「たとえばロィシンな
どが挙げられ、その塩（例、塩酸塩）、またはそのェス
テル（例、メチルェステル、エチルヱステル）でもよく
、Ｄ体、Ｌ体、ＤＬ体のいずれでもよい。炭素数６のケ
トカルボン酸としては、たとえばＱーケトィソカブリル
酸などが挙げられ、その塩（例、ナトリウム塩、カリウ
ム塩、カルシウム塩）またはそのェステル（例、メチル
ェステル、エチルェステル）でもよく、Ｄ体、Ｌ体、Ｄ
Ｌ体のいずれでもよい。上記の添加物の添加量は、培地
に対し、一般的には約０．０１〜１．０％Ｗ′Ｖ％）、
より好ましくは約０．１〜０．５％Ｗ／Ｖ％）である。
添加時間は、抗生物質Ｃ−１５００述−４の生産が継続
している限りいつでもよく、たとえば培養当初でもよく
、培養開始後の適宜の時期であってもよい。抗生物質Ｃ
−１５００２主産菌の培養に用いられる塔地は該菌株が
利用し得る栄養源を含むものなら、液状でも固状でもよ
いが、大量を処理するときには液体塔地を用いるのがよ
り適当である。
どが挙げられ、その塩（例、塩酸塩）、またはそのェス
テル（例、メチルェステル、エチルヱステル）でもよく
、Ｄ体、Ｌ体、ＤＬ体のいずれでもよい。炭素数６のケ
トカルボン酸としては、たとえばＱーケトィソカブリル
酸などが挙げられ、その塩（例、ナトリウム塩、カリウ
ム塩、カルシウム塩）またはそのェステル（例、メチル
ェステル、エチルェステル）でもよく、Ｄ体、Ｌ体、Ｄ
Ｌ体のいずれでもよい。上記の添加物の添加量は、培地
に対し、一般的には約０．０１〜１．０％Ｗ′Ｖ％）、
より好ましくは約０．１〜０．５％Ｗ／Ｖ％）である。
添加時間は、抗生物質Ｃ−１５００述−４の生産が継続
している限りいつでもよく、たとえば培養当初でもよく
、培養開始後の適宜の時期であってもよい。抗生物質Ｃ
−１５００２主産菌の培養に用いられる塔地は該菌株が
利用し得る栄養源を含むものなら、液状でも固状でもよ
いが、大量を処理するときには液体塔地を用いるのがよ
り適当である。
渚地には本発明で用いられる添加物を添加するほか、Ｎ
ｏ．Ｃ−１５００３珠が同化し得る炭素源、消化し得る
窒素源、無機物質、微量栄養素等が適宜配合される。炭
素源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、ショ糖、麦芽
糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、マンニトール
、ソルビトール等、油脂類（例、大豆油、ラード油、チ
キン油等）その他が、窒素源としては、たとえば肉エキ
ス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スチープ
・リカー、ベプトン、棉実粉、糠糖蜜、尿素、アンモニ
ウム塩類（例、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、酢酸アンモニウム等）その他が用い
られる。さらにナトリウム、カリウム、カルシウム、マ
グネシウムなどを含む塩類、鉄、マンガン、亜鉛、コバ
ルト、ニッケルなどの金属塩類、リン酸、ホウ酸などの
塩類や酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用
いられる。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アス
パラギン酸、アラニン、グリシン、リジン、メチオニン
、プロリン等）、ベプチド（例、ジベプチド、トリベプ
チド等）、ビタミン額（例、耳、Ｂ２、ニコチン酸、耳
２、Ｃ、Ｅ等）、核酸類（例、プリン、ピリミジンおよ
びその誘導体等）等を含有させてもよい。もちろん培地
の餌を調節する目的で無機または有機の酸、アルカリ類
、緩衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類、表面
活性剤等の適量を添加してもよい。培養の手段は静贋培
養でも、振遼培養あるいは通気縄梓培養法等の手段を用
いてもよい。
ｏ．Ｃ−１５００３珠が同化し得る炭素源、消化し得る
窒素源、無機物質、微量栄養素等が適宜配合される。炭
素源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、ショ糖、麦芽
糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、マンニトール
、ソルビトール等、油脂類（例、大豆油、ラード油、チ
キン油等）その他が、窒素源としては、たとえば肉エキ
ス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スチープ
・リカー、ベプトン、棉実粉、糠糖蜜、尿素、アンモニ
ウム塩類（例、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、酢酸アンモニウム等）その他が用い
られる。さらにナトリウム、カリウム、カルシウム、マ
グネシウムなどを含む塩類、鉄、マンガン、亜鉛、コバ
ルト、ニッケルなどの金属塩類、リン酸、ホウ酸などの
塩類や酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用
いられる。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アス
パラギン酸、アラニン、グリシン、リジン、メチオニン
、プロリン等）、ベプチド（例、ジベプチド、トリベプ
チド等）、ビタミン額（例、耳、Ｂ２、ニコチン酸、耳
２、Ｃ、Ｅ等）、核酸類（例、プリン、ピリミジンおよ
びその誘導体等）等を含有させてもよい。もちろん培地
の餌を調節する目的で無機または有機の酸、アルカリ類
、緩衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類、表面
活性剤等の適量を添加してもよい。培養の手段は静贋培
養でも、振遼培養あるいは通気縄梓培養法等の手段を用
いてもよい。
大量の処理には、いわゆる深部通気鷹梓培養によるのが
望ましいことはいうまでもない。培養の条件は培地の状
態、組成、菌株の種類、培養の手段等によって一定しな
いのは当然であるが、それらは通常２ぴ○〜３５℃の温
度で初発ｐＨを中性附近に選択するのがよい。とりわけ
、培養中期の温度は２３℃〜３０℃、また初発斑は６．
５〜７．５ろ条件が望ましい。培養期間も前記の諸条件
により一定しないが、所望の抗生物質濃度が最大となる
まで培養するのがよい。これに要する時間は液体培地を
用いる振顔培養または通気蝿梓培養の場合は通常２〜１
０日間程度である。上記したＰ−４製造法の具体的な実
験例として、Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠を可溶性でんぷん
３％、塩化アンモニウム０．２％、硫酸マグネシウム０
．０５％、リン酸第１カリウム１．０９％、リン酸第２
カリウム２．０９％、硫酸第１鉄０．００１％からなる
培地（１）または、デキストリン５％、コーン・スチー
プ・リカー３％、ベプトン０．１％、炭酸カルシウム０
．５％からなる培地（ロ）に前記した種々の添加物を加
え、培養した結果を培地（１）の場合を第１表に、また
培地（０）の場合を第２表に示した。
望ましいことはいうまでもない。培養の条件は培地の状
態、組成、菌株の種類、培養の手段等によって一定しな
いのは当然であるが、それらは通常２ぴ○〜３５℃の温
度で初発ｐＨを中性附近に選択するのがよい。とりわけ
、培養中期の温度は２３℃〜３０℃、また初発斑は６．
５〜７．５ろ条件が望ましい。培養期間も前記の諸条件
により一定しないが、所望の抗生物質濃度が最大となる
まで培養するのがよい。これに要する時間は液体培地を
用いる振顔培養または通気蝿梓培養の場合は通常２〜１
０日間程度である。上記したＰ−４製造法の具体的な実
験例として、Ｎｏ．Ｃ−１５００３珠を可溶性でんぷん
３％、塩化アンモニウム０．２％、硫酸マグネシウム０
．０５％、リン酸第１カリウム１．０９％、リン酸第２
カリウム２．０９％、硫酸第１鉄０．００１％からなる
培地（１）または、デキストリン５％、コーン・スチー
プ・リカー３％、ベプトン０．１％、炭酸カルシウム０
．５％からなる培地（ロ）に前記した種々の添加物を加
え、培養した結果を培地（１）の場合を第１表に、また
培地（０）の場合を第２表に示した。
この場合、Ｃ‐１５００３の総生成量はタラロミセス・
アベラネウス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ａｖｅｌｌａ
ｎｅ船）ｍ０７７２１を試験菌とし、検定培地（リン酸
２ナトリウム３．５夕、リン酸１カリウム０．５夕、酵
母エキス（デイフコ）５夕、グルコース１０夕、寒天１
５夕、蒸留水１０００の‘、ｐＨ７．０）上で、Ｃ−１
５００蛇一３を標準とするペーパー・ディスク法で測定
した。また生成されたＰ−２、Ｐ−３および／またはＰ
‐４の分別確認は、これらを含む培養炉液に同量の酢酸
エチルを添加抽出し、濃縮、乾団後、元の炉液の１′１
００客の酢酸エチルに溶解し、薄層クロマトグラフィー
用の試料とした。
アベラネウス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ａｖｅｌｌａ
ｎｅ船）ｍ０７７２１を試験菌とし、検定培地（リン酸
２ナトリウム３．５夕、リン酸１カリウム０．５夕、酵
母エキス（デイフコ）５夕、グルコース１０夕、寒天１
５夕、蒸留水１０００の‘、ｐＨ７．０）上で、Ｃ−１
５００蛇一３を標準とするペーパー・ディスク法で測定
した。また生成されたＰ−２、Ｐ−３および／またはＰ
‐４の分別確認は、これらを含む培養炉液に同量の酢酸
エチルを添加抽出し、濃縮、乾団後、元の炉液の１′１
００客の酢酸エチルに溶解し、薄層クロマトグラフィー
用の試料とした。
薄層クロマトグラフィーは、シリカゲル６価滋（メルク
社製）のガラスプレートを用い展開溶媒として、水飽和
酢酸エチルを用いた。生成量および生成比率は、島津２
波長クロマトスキヤナーＣＳ−９１０を用い２鼠ｎ凧の
吸収の濃さと広さから測定した。この場合Ｐ一２、Ｐ‐
３およびＰ‐４の総検出量を１００％としてそれぞれの
比率を計算した。これらの結果を第４表および第５表に
示した。すなわち、Ｃ−１５００２生産菌を通常の培養
を行なった場合、Ｐ一４の生成量は２５Ｗ／Ｗ％であり
、それを単離する為には煩雑な精製を必要とし、その収
率も低下するが、実験例に示したように、たとえば塔地
中にロイシンを加えて培養することにより、その生成物
のほとんどは所望のＰ一４のみとなり、効率的に採取で
きる。第４表 （注）添加時間が０とは「培養当初の時を表わすものと
する）第５表（注）添加時間が０は、上記と同意費蓮。
社製）のガラスプレートを用い展開溶媒として、水飽和
酢酸エチルを用いた。生成量および生成比率は、島津２
波長クロマトスキヤナーＣＳ−９１０を用い２鼠ｎ凧の
吸収の濃さと広さから測定した。この場合Ｐ一２、Ｐ‐
３およびＰ‐４の総検出量を１００％としてそれぞれの
比率を計算した。これらの結果を第４表および第５表に
示した。すなわち、Ｃ−１５００２生産菌を通常の培養
を行なった場合、Ｐ一４の生成量は２５Ｗ／Ｗ％であり
、それを単離する為には煩雑な精製を必要とし、その収
率も低下するが、実験例に示したように、たとえば塔地
中にロイシンを加えて培養することにより、その生成物
のほとんどは所望のＰ一４のみとなり、効率的に採取で
きる。第４表 （注）添加時間が０とは「培養当初の時を表わすものと
する）第５表（注）添加時間が０は、上記と同意費蓮。
このように培養物中に特異的に蓄積生成されたＰ−４を
精製取得するには、かかる微生物代謝物を採取するのに
通常用いられる分離精製の方法が適宜利用される。
精製取得するには、かかる微生物代謝物を採取するのに
通常用いられる分離精製の方法が適宜利用される。
まず本物質が中性脂溶性であるため、水と混じらない有
機溶媒たとえば酢酸エチル、酢酸アミルなどの脂肪酸ヱ
ステル、ブタノ−ルなどのアルコール類、クロロホルム
などのハロゲン化炭化水素、メチルィソブチルケトンな
どのケトン類が用いられる。抽出は中性付近で行なわれ
、好ましくはｐＨ７に調製された培養炉液から酢酸エチ
ルを用いて行なわれる。抽出液を水洗後、減圧下に濃縮
し、石油エーテル、ヘキサンのような非極Ｉ性溶媒を加
えて有効成分を含む粗物質を採取する。この中にはＴＬ
Ｃ上で抗生物質Ｃ−ｉ５００３以外の多数のスポットが
みとめられるため、つぎの精製工程が利用される。すな
わち、通常用いられる精製法として種々の吸着クロマト
グラフィーが有効であり、吸着剤としては一般に使用さ
れる担体たとえばシリカゲル、アルミナ、マクロポ−ラ
ス非イオン系吸着樹脂等が利用できる。シリカゲルを利
用する場合には、非樋性溶媒たとえば石油エーテル、ヘ
キサンから展開をはじめ、酢酸エチル、アセトン、エタ
／ール、メタノールなどの樋性溶媒を添加するかまたは
、ジクロルメタン、クロロホルムなどの含ハロゲン炭化
水素類から展開をはじめ、エタノール、メタノールなど
のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどの
ケトン類等の樋性溶媒を添加することにより、Ｐ一４を
溶出、分離、採取する。また、マクロポーラス吸着性樹
脂を用いる場合、Ｐ−４を溶出するには、低級アルコー
ル類あるいは低級ケトン額、ェステルと水との混合物が
用いられる。低級アルコール類としては、たとえばメタ
ノール、エタノール、プロパノール、ブタ／ールなど、
低級ケトン類としては、たとえばアセトン、メチルエチ
ルケトン、ェステル類としては、酢酸エチルなどが利用
できる。
機溶媒たとえば酢酸エチル、酢酸アミルなどの脂肪酸ヱ
ステル、ブタノ−ルなどのアルコール類、クロロホルム
などのハロゲン化炭化水素、メチルィソブチルケトンな
どのケトン類が用いられる。抽出は中性付近で行なわれ
、好ましくはｐＨ７に調製された培養炉液から酢酸エチ
ルを用いて行なわれる。抽出液を水洗後、減圧下に濃縮
し、石油エーテル、ヘキサンのような非極Ｉ性溶媒を加
えて有効成分を含む粗物質を採取する。この中にはＴＬ
Ｃ上で抗生物質Ｃ−ｉ５００３以外の多数のスポットが
みとめられるため、つぎの精製工程が利用される。すな
わち、通常用いられる精製法として種々の吸着クロマト
グラフィーが有効であり、吸着剤としては一般に使用さ
れる担体たとえばシリカゲル、アルミナ、マクロポ−ラ
ス非イオン系吸着樹脂等が利用できる。シリカゲルを利
用する場合には、非樋性溶媒たとえば石油エーテル、ヘ
キサンから展開をはじめ、酢酸エチル、アセトン、エタ
／ール、メタノールなどの樋性溶媒を添加するかまたは
、ジクロルメタン、クロロホルムなどの含ハロゲン炭化
水素類から展開をはじめ、エタノール、メタノールなど
のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどの
ケトン類等の樋性溶媒を添加することにより、Ｐ一４を
溶出、分離、採取する。また、マクロポーラス吸着性樹
脂を用いる場合、Ｐ−４を溶出するには、低級アルコー
ル類あるいは低級ケトン額、ェステルと水との混合物が
用いられる。低級アルコール類としては、たとえばメタ
ノール、エタノール、プロパノール、ブタ／ールなど、
低級ケトン類としては、たとえばアセトン、メチルエチ
ルケトン、ェステル類としては、酢酸エチルなどが利用
できる。
その一例を示すと６０％メタノール水に粗物質０をとか
し、ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化成）カラムに通過
させて吸着せして、７０％メタノール水で洗浄後９０％
メタノール水で綾出すると目的物Ｐ一４が溶出される。
いずれの方法でも、得られたＰ−４の画分を減圧濃縮し
、乾燥物に対して５〜８倍量の酢酸エチルを加え放置す
るとＰ−４の結晶が析出する。本発明の方法によると、
Ｐ一４の生成比率は、非常に高くなり、また、生成量も
数倍に増大するので、本発明方法は生産量の増大と分離
精製の容易さの点において工業上きわめて有利である。
実施例４で得られたＰ−４の物質化学的性状を第６表に
示す。第６表 抗性物質 Ｃ−１５００３ Ｐ−４ （Ｃ３３日４５ＣＩＮ２０９＝６４９．１９６）Ｐ−３
、Ｐ−３およびＰ−４は新規化合物と考えられるが、Ｐ
−２は、元素分析値、比旋光度、紫外線吸収スペクトル
、赤外線吸収スペクトル、マススベクトルなどから、カ
ブチャンらの報告〔ジヤーナル・オブ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサヱテイ（Ｊｏｍ岬ｌ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃ
ａｎ ＣｈｅｍｉｃａｌＳＭｉｅＶ）９７巻、５２製頁
、１９７９年〕に示されるメイタンシノール・プロピオ
ネートと同一の化合物と考えられる。
し、ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化成）カラムに通過
させて吸着せして、７０％メタノール水で洗浄後９０％
メタノール水で綾出すると目的物Ｐ一４が溶出される。
いずれの方法でも、得られたＰ−４の画分を減圧濃縮し
、乾燥物に対して５〜８倍量の酢酸エチルを加え放置す
るとＰ−４の結晶が析出する。本発明の方法によると、
Ｐ一４の生成比率は、非常に高くなり、また、生成量も
数倍に増大するので、本発明方法は生産量の増大と分離
精製の容易さの点において工業上きわめて有利である。
実施例４で得られたＰ−４の物質化学的性状を第６表に
示す。第６表 抗性物質 Ｃ−１５００３ Ｐ−４ （Ｃ３３日４５ＣＩＮ２０９＝６４９．１９６）Ｐ−３
、Ｐ−３およびＰ−４は新規化合物と考えられるが、Ｐ
−２は、元素分析値、比旋光度、紫外線吸収スペクトル
、赤外線吸収スペクトル、マススベクトルなどから、カ
ブチャンらの報告〔ジヤーナル・オブ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサヱテイ（Ｊｏｍ岬ｌ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃ
ａｎ ＣｈｅｍｉｃａｌＳＭｉｅＶ）９７巻、５２製頁
、１９７９年〕に示されるメイタンシノール・プロピオ
ネートと同一の化合物と考えられる。
生物活性
Ｗ 抗微生物活性
トリブティカーゼ・ソイ寒天塔地（ＢＢＬ製）を検定堵
地として、以下に示す微生物に対する発育阻止館をペー
パー・ディスク法で検した。
地として、以下に示す微生物に対する発育阻止館をペー
パー・ディスク法で検した。
すなわち、下記微生物含菌平板塔地上でＰ−４の３００
ムタ／の‘の溶液の０．０２の‘をペーパー・ディスク
（東洋製作所、薄型、直径８側）に含ませたものにより
生育阻止館を検した。その結果、下記微生物に対しては
活性を示さなかった。エシエリヒア・コリ、プロテウス
・ブルガリス、プロテウス・ミラビリス、シユウドモナ
ス・アエルギノサ、スタフイロコツクス・アウレウス、
バチルス・ズブチリス、バチルス・セレウス、クレプジ
エラ・ニユウモニエ、セラチア・マルセスセンス、ミコ
バクテリウム・アピウス一方、検定塔地〔燐酸二ナトリ
ウム３．５夕、燐酸ーカリウム０．５夕、酵母エキス（
ディフコ）５夕、グルコース１０夕、寒天１５夕、蒸留
水１０００凧‘、ｐＨ７．０〕の寒天平板を用い、タラ
ロマイセス・アベラ ネウス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ
ａｖｅｌｌａｎｅ雌）を試験菌としてその生育館を検す
るとＰ−４は１．０〜１．５ムタ／ｍ‘で生育阻止力を
示した。
ムタ／の‘の溶液の０．０２の‘をペーパー・ディスク
（東洋製作所、薄型、直径８側）に含ませたものにより
生育阻止館を検した。その結果、下記微生物に対しては
活性を示さなかった。エシエリヒア・コリ、プロテウス
・ブルガリス、プロテウス・ミラビリス、シユウドモナ
ス・アエルギノサ、スタフイロコツクス・アウレウス、
バチルス・ズブチリス、バチルス・セレウス、クレプジ
エラ・ニユウモニエ、セラチア・マルセスセンス、ミコ
バクテリウム・アピウス一方、検定塔地〔燐酸二ナトリ
ウム３．５夕、燐酸ーカリウム０．５夕、酵母エキス（
ディフコ）５夕、グルコース１０夕、寒天１５夕、蒸留
水１０００凧‘、ｐＨ７．０〕の寒天平板を用い、タラ
ロマイセス・アベラ ネウス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ
ａｖｅｌｌａｎｅ雌）を試験菌としてその生育館を検す
るとＰ−４は１．０〜１．５ムタ／ｍ‘で生育阻止力を
示した。
また、テトラヒメナ・ピリホルミス
（ＴｅｔｒａｈｙｍｅｎａｐＹｉわｒｍｉｓ）Ｗ株を試
験微生物とし、検定塔地〔トリプトース・ベプトン（デ
ィフコ）２０夕、酵母エキス１夕、グルコース２夕、蒸
留水ｌｏｏ０の‘、１モル燐酸緩衝液ｐＨ７．０、１０
の【〕を用い、２８二○、４独特間ないし４錨時間培養
して、液体稀釈検定法により該抗生物質の該微生物発育
阻止能を検した。
験微生物とし、検定塔地〔トリプトース・ベプトン（デ
ィフコ）２０夕、酵母エキス１夕、グルコース２夕、蒸
留水ｌｏｏ０の‘、１モル燐酸緩衝液ｐＨ７．０、１０
の【〕を用い、２８二○、４独特間ないし４錨時間培養
して、液体稀釈検定法により該抗生物質の該微生物発育
阻止能を検した。
その結果、Ｐ−４は０．５仏タ′の‘で該微生成の発育
を阻止することを認めた。抗カビ性を第７表に示す。
を阻止することを認めた。抗カビ性を第７表に示す。
第７表から明らかなように、Ｐ一４は、植物病源菌の発
育を阻止する。Ｐ一４の１０００ムタ／泌溶液０．０２
の‘を浸した円形炉紙を、第７表の微生物をそれぞれ移
植した培地に置き、阻止円の直径を測定した。第７表抗
菌スベクトラム試 験 菌 ＩＦＯ
塔地 時 間 阻止径番 号
（肌）Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ Ｋｉｋｕｃｈｉａ
ｎａ ７５１５ ＰＳＡ＊ ４８
３８Ｆｕｓｉｃｌａｄｉｍｍ ｌｅｖｉｅｒｉ
６４７７ ＰＳＡ＊ ９０
６８Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒ・ｍｍ
５２７３ ＰＳＡ＊ ４８ ５
５Ｓｉｇｈｏｉｄｅｕｍ Ｖａｒｌｒｒｅｇｕｌａｒｅ Ｐｚｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ
− ＰＳＡ＊ ４８ ５３８１ｓ
ｉｎｏｅ ｆａｗｃｅｔｔｉ ８４
１７ ＰＳＡ＊ ９０ ５５Ｆｕｓａｒ
ｉｍｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ −
ＰＳＡ＊ ４８ ２０ｆ．ｃｕｃＵ
ｍｅｒｌｎ山ｍＧｕｉｇｎａｒｄｉａ ｌａｒｉｃｉｎ
ａ ７８８８ ＰＳＡ＊ ４８
１２Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｒｕｓ ｍｉｙａｂ
ｅａｎｕｓ ５２７７ ＰＳＡ＊ ４８
６０Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉ
９１７０ ＰＳＡ＊ ４８ ５
５Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ
８８５０ ＰＳＡ＊ ４８ ３７Ｓｃ
ｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ
９３９５ ＰＳＡ＊ ９ｏ ６５Ｖｅｎ
ｔｕｒｉａ ｐｉｒｉｎａ ６１
８９ ＰＳＡ＊ ４８ ５０Ｐｅｌｌｉｃ
ｕｌａｒｉａ ｓａｓａｋｉｉ ９２５３
ＰＳＡ＊ ４８ ５０Ｐｙｔｈｉｕｍ ａ
ｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｍｈ ７０３０
ＰＳＡ＊ ４８ ５８Ｂｏｔｒｙｔｉｓ
ｃｉｎｅｒｅａ
ＰＳＡ＊ ４８ ４８Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ４０６６ Ｐ
ＳＡ＊ ４８ ０ＰｅｎｉＣｉ１１ｉｕ
ｍ ＣｈｒｙＳ。
育を阻止する。Ｐ一４の１０００ムタ／泌溶液０．０２
の‘を浸した円形炉紙を、第７表の微生物をそれぞれ移
植した培地に置き、阻止円の直径を測定した。第７表抗
菌スベクトラム試 験 菌 ＩＦＯ
塔地 時 間 阻止径番 号
（肌）Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ Ｋｉｋｕｃｈｉａ
ｎａ ７５１５ ＰＳＡ＊ ４８
３８Ｆｕｓｉｃｌａｄｉｍｍ ｌｅｖｉｅｒｉ
６４７７ ＰＳＡ＊ ９０
６８Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒ・ｍｍ
５２７３ ＰＳＡ＊ ４８ ５
５Ｓｉｇｈｏｉｄｅｕｍ Ｖａｒｌｒｒｅｇｕｌａｒｅ Ｐｚｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ
− ＰＳＡ＊ ４８ ５３８１ｓ
ｉｎｏｅ ｆａｗｃｅｔｔｉ ８４
１７ ＰＳＡ＊ ９０ ５５Ｆｕｓａｒ
ｉｍｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ −
ＰＳＡ＊ ４８ ２０ｆ．ｃｕｃＵ
ｍｅｒｌｎ山ｍＧｕｉｇｎａｒｄｉａ ｌａｒｉｃｉｎ
ａ ７８８８ ＰＳＡ＊ ４８
１２Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｒｕｓ ｍｉｙａｂ
ｅａｎｕｓ ５２７７ ＰＳＡ＊ ４８
６０Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉ
９１７０ ＰＳＡ＊ ４８ ５
５Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ
８８５０ ＰＳＡ＊ ４８ ３７Ｓｃ
ｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ
９３９５ ＰＳＡ＊ ９ｏ ６５Ｖｅｎ
ｔｕｒｉａ ｐｉｒｉｎａ ６１
８９ ＰＳＡ＊ ４８ ５０Ｐｅｌｌｉｃ
ｕｌａｒｉａ ｓａｓａｋｉｉ ９２５３
ＰＳＡ＊ ４８ ５０Ｐｙｔｈｉｕｍ ａ
ｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｍｈ ７０３０
ＰＳＡ＊ ４８ ５８Ｂｏｔｒｙｔｉｓ
ｃｉｎｅｒｅａ
ＰＳＡ＊ ４８ ４８Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ４０６６ Ｐ
ＳＡ＊ ４８ ０ＰｅｎｉＣｉ１１ｉｕ
ｍ ＣｈｒｙＳ。
ｇｅｎ山ｍ ４６２６ ＰＳＡ＊ ４８
３５Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｎｉｇｒｉｃａｎｓ
６１８８ ＰＳＡ＊ ４８
２５Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｌ
ａｅ ０２０９ ＰＳＡ＊ ４８
０Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｒｕｂｒａ
ｏ９０７ ＰＳＡ＊ ４８
２８Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ
５４６７ ＧＢ＊＊ ４８ ３８
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ７
５２２ ＧＢ＊＊ ４８ ３８ｍａｎｔａ
ｇｒｏｐｈｙｔｅｓｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ
０５８３ ＧＢ＊＊ ４８
０Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ
０６１９ ＧＢ＊＊ ４８
０Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
０４１０ ＧＢ＊＊ ４８ ４３ｎｅｏ
ｆｏｎｈａｎＳ＊ ＰＳＡ：ポテト・ンュークロース・
寒天塔地＊＊ＧＢ ：グルコース栄養寒天培地【Ｂー
抗腫場活性 種蕩細胞Ｐ３磯（１×１ぴ細胞／匹、マウス、腹腔移植
）に対するＰ−４の治療効果（９日間連続腹腔内投与）
を調べた。
３５Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｎｉｇｒｉｃａｎｓ
６１８８ ＰＳＡ＊ ４８
２５Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｌ
ａｅ ０２０９ ＰＳＡ＊ ４８
０Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｒｕｂｒａ
ｏ９０７ ＰＳＡ＊ ４８
２８Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ
５４６７ ＧＢ＊＊ ４８ ３８
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ７
５２２ ＧＢ＊＊ ４８ ３８ｍａｎｔａ
ｇｒｏｐｈｙｔｅｓｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ
０５８３ ＧＢ＊＊ ４８
０Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ
０６１９ ＧＢ＊＊ ４８
０Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
０４１０ ＧＢ＊＊ ４８ ４３ｎｅｏ
ｆｏｎｈａｎＳ＊ ＰＳＡ：ポテト・ンュークロース・
寒天塔地＊＊ＧＢ ：グルコース栄養寒天培地【Ｂー
抗腫場活性 種蕩細胞Ｐ３磯（１×１ぴ細胞／匹、マウス、腹腔移植
）に対するＰ−４の治療効果（９日間連続腹腔内投与）
を調べた。
その効果、これらの物質によるマウスの延命率は対照に
比し、０．００６２５の２′ｋ９日投与で２００％を示
す抗腫擬作用が認められた。‘Ｃ｝ 毒性 マウスを供試動物とした急性毒性試験で、Ｐ−４を腹腔
注射した場合、ＬＤ，ｏｏ値が０．６２５雌′ｋ９、ま
たＬＤｏ値は０．３１３の９／ｋ９であった。
比し、０．００６２５の２′ｋ９日投与で２００％を示
す抗腫擬作用が認められた。‘Ｃ｝ 毒性 マウスを供試動物とした急性毒性試験で、Ｐ−４を腹腔
注射した場合、ＬＤ，ｏｏ値が０．６２５雌′ｋ９、ま
たＬＤｏ値は０．３１３の９／ｋ９であった。
上託したようにＰ−４は糸状菌および原虫に対し、強い
発育阻止館を有するので、防徴剤または抗原虫剤として
も有用なものである。また、Ｐ−４は、種湯をもつ噸乳
動物（例、マウスなど）に対し延命効果を示すので、抗
腫場剤としても有用であると期待される。Ｐ−４を防徽
剤および抗原虫剤として使用するには、たとえば土壌、
活性汚泥または動物体液などの細菌生態を検する際に有
利に使用し得る。
発育阻止館を有するので、防徴剤または抗原虫剤として
も有用なものである。また、Ｐ−４は、種湯をもつ噸乳
動物（例、マウスなど）に対し延命効果を示すので、抗
腫場剤としても有用であると期待される。Ｐ−４を防徽
剤および抗原虫剤として使用するには、たとえば土壌、
活性汚泥または動物体液などの細菌生態を検する際に有
利に使用し得る。
すなわち、土壌から有用な細菌類を分離する場合、また
は癖水処理に用いられている活性汚泥法の運転、解析に
原虫または轍以外の細菌類の作用を検する場合、試料中
に生存する鰍または原虫に発育させず、細菌生態を選択
的に発育させることが出来る。具体的には被検試料を液
体または固体培地に添加し、その培地１の‘当りに本抗
生物質１０なし、し１００山夕／凧【の１％メタノール
含有水溶液を０．１舷添加し、培養する。Ｐ−４は、表
７に示した微生物によってひきおこされる植物病の処置
に用いる抗菌剤としても用いることができる。その具体
的な応用例としては、Ｐ−４を１％メタノール水に０．
５ムタ′泌〜５ムタ／地となるように溶解した液剤とし
て、たとえばィネ小黒菌核病、ィネゴマ藁枯病、ィネ紋
枯病などの処置に用いることができる。以下に実施例を
挙げて、本発明をさらに詳しく説明する。
は癖水処理に用いられている活性汚泥法の運転、解析に
原虫または轍以外の細菌類の作用を検する場合、試料中
に生存する鰍または原虫に発育させず、細菌生態を選択
的に発育させることが出来る。具体的には被検試料を液
体または固体培地に添加し、その培地１の‘当りに本抗
生物質１０なし、し１００山夕／凧【の１％メタノール
含有水溶液を０．１舷添加し、培養する。Ｐ−４は、表
７に示した微生物によってひきおこされる植物病の処置
に用いる抗菌剤としても用いることができる。その具体
的な応用例としては、Ｐ−４を１％メタノール水に０．
５ムタ′泌〜５ムタ／地となるように溶解した液剤とし
て、たとえばィネ小黒菌核病、ィネゴマ藁枯病、ィネ紋
枯病などの処置に用いることができる。以下に実施例を
挙げて、本発明をさらに詳しく説明する。
パーセントは、とくにことわりのないかぎり、重量／容
量％を示す。実施例 １ 種培地（グルコース１．０％、バクトートリプトン２．
０％、バクトー酵母エキス１．２％、ｐＨ７．０）４０
凧【を２００の【ェルレンマィャーフラスコに分注し、
滅菌後、ノカルディア・スベシーズ・Ｃ−１５００３（
ＩＦＯ１３７２６；ＡＴＣＣ３１２８１：ＦＥＲＭ一
ＰＮｏ．３９９２）を接種した。
量％を示す。実施例 １ 種培地（グルコース１．０％、バクトートリプトン２．
０％、バクトー酵母エキス１．２％、ｐＨ７．０）４０
凧【を２００の【ェルレンマィャーフラスコに分注し、
滅菌後、ノカルディア・スベシーズ・Ｃ−１５００３（
ＩＦＯ１３７２６；ＡＴＣＣ３１２８１：ＦＥＲＭ一
ＰＮｏ．３９９２）を接種した。
このものを２洋○で回転振鶴機上（２０瓜ｐｍ）で４８
時間培養し種培養とした。この培養物を滅菌した蒸留水
で３回洗菌後、洗菌体を滅菌蒸留水で元の量に戻し、こ
の１泌を主塔地（可溶性でんぷん３％、塩化アンモニウ
ム０．２％、硫酸マグネシウム０．０５％、リン酸第１
力リウム１．０９％、リン酸第２カリウム２．０９％、
硫酸第１鉄０．００１％、Ｌーロィシン０．３％）に接
種して主培養を行なった。主培養は、培地の４０地を２
００の‘のェルレンマィャーフラスコに分注、滅菌、接
種後、回転振函機上で（２０仇ｐｍ）、２８℃で８日間
行った。Ｃ−１５００３の総生産量１２Ａ夕／私で、そ
の８０Ｗ／Ｗ％がＰ−４であった。実施例 ２ 実施例１に示した種培地を調製し、その５００の‘を２
０００泌坂口コルベンに分注、滅菌した。
時間培養し種培養とした。この培養物を滅菌した蒸留水
で３回洗菌後、洗菌体を滅菌蒸留水で元の量に戻し、こ
の１泌を主塔地（可溶性でんぷん３％、塩化アンモニウ
ム０．２％、硫酸マグネシウム０．０５％、リン酸第１
力リウム１．０９％、リン酸第２カリウム２．０９％、
硫酸第１鉄０．００１％、Ｌーロィシン０．３％）に接
種して主培養を行なった。主培養は、培地の４０地を２
００の‘のェルレンマィャーフラスコに分注、滅菌、接
種後、回転振函機上で（２０仇ｐｍ）、２８℃で８日間
行った。Ｃ−１５００３の総生産量１２Ａ夕／私で、そ
の８０Ｗ／Ｗ％がＰ−４であった。実施例 ２ 実施例１に示した種培地を調製し、その５００の‘を２
０００泌坂口コルベンに分注、滅菌した。
これに、実施例１と同じ菌株を接種し、２８午０で往復
振函機上（１１仇ｐｍ）で４斑時間培養し接種用種培養
を調整した。２００そ客ステンレススチール醗酵タンク
に種培地（グルコース２．０％、可溶性でんぷん３．０
％、コーンスチープリカー１．０％、生大豆粉１．０％
、ポリベプトン０．５％、食塩０．３％、炭酸カルシュ
ウム０．５％、ｐＨ７．０）１００〆を調製し、１２１
℃、２粉ご間滅菌し冷却後、接種用種培養５００のと接
種した。温度、２８ｑｏ、通気量１００Ｚ／分、２０Ｍ
副転／分で４錨時間種培養を行なった。この種培養１０
そを２００メステンレススチール醗酵タンクに主塔地（
デキストリン５％、コーン・スチープ・リカー３％、ベ
プトン０．１％、Ｌ−ロイシン０．５％、炭酸カルシュ
ウム０．５％、ｐＨ７．０）１００のこ移植し、２８℃
で、通気量１００そ／分、蝿梓１５ｑ団転／分で４日間
培養を行なった。Ｃ−１５００３の総生産量１２Ａ夕／
叫で生成されたＣ−１５００３のうちＰ−４は約８５Ｗ
／Ｗ％であった。実施例 ３ 実施例２で得られた培養物９５Ｚ‘こァセトン５０そを
加え３０分間燈拝し、／・ィフロスーパーセル（米国ジ
ョンズ マンヴィル プロダクト社）２【９を加えよく
かきまぜる。
振函機上（１１仇ｐｍ）で４斑時間培養し接種用種培養
を調整した。２００そ客ステンレススチール醗酵タンク
に種培地（グルコース２．０％、可溶性でんぷん３．０
％、コーンスチープリカー１．０％、生大豆粉１．０％
、ポリベプトン０．５％、食塩０．３％、炭酸カルシュ
ウム０．５％、ｐＨ７．０）１００〆を調製し、１２１
℃、２粉ご間滅菌し冷却後、接種用種培養５００のと接
種した。温度、２８ｑｏ、通気量１００Ｚ／分、２０Ｍ
副転／分で４錨時間種培養を行なった。この種培養１０
そを２００メステンレススチール醗酵タンクに主塔地（
デキストリン５％、コーン・スチープ・リカー３％、ベ
プトン０．１％、Ｌ−ロイシン０．５％、炭酸カルシュ
ウム０．５％、ｐＨ７．０）１００のこ移植し、２８℃
で、通気量１００そ／分、蝿梓１５ｑ団転／分で４日間
培養を行なった。Ｃ−１５００３の総生産量１２Ａ夕／
叫で生成されたＣ−１５００３のうちＰ−４は約８５Ｗ
／Ｗ％であった。実施例 ３ 実施例２で得られた培養物９５Ｚ‘こァセトン５０そを
加え３０分間燈拝し、／・ィフロスーパーセル（米国ジ
ョンズ マンヴィル プロダクト社）２【９を加えよく
かきまぜる。
混合物を加圧式炉過機で炉過し、炉液１３５そを得る。
炉液に水５０そ、酢酸エチル９０夕を加え蝿梓抽出し、
この操作を２回くり返す。酢酸エチル層を合せて水８０
そ宛で２回水洗し、無水硫酸ナトリウムｌｋ９を加えて
乾燥後２００羽まで減圧濃縮し、石油エーテルを加え、
析出する沈澱を炉取する（３５夕）。得られた粗物質に
酢酸エチル５０舷を加えかきまぜ、不溶物を炉去し炉液
にシリカゲル（西独メルク社０．０５〜０．２豚）１０
夕を加えてかきまぜた後酢酸エチルを減圧下に留去し、
あらかじめ用意したシリカゲルカラム（５００の‘）の
上端におき、ｎ一へキサン５００の‘、ｎ−へキサン酢
酸エチル（３：１）５００叫、ｎーヘキサン酢酸エチル
（１：１）、水飽和酢酸エチル２そを流し、溶出液を５
０Ｍあて分画する。
炉液に水５０そ、酢酸エチル９０夕を加え蝿梓抽出し、
この操作を２回くり返す。酢酸エチル層を合せて水８０
そ宛で２回水洗し、無水硫酸ナトリウムｌｋ９を加えて
乾燥後２００羽まで減圧濃縮し、石油エーテルを加え、
析出する沈澱を炉取する（３５夕）。得られた粗物質に
酢酸エチル５０舷を加えかきまぜ、不溶物を炉去し炉液
にシリカゲル（西独メルク社０．０５〜０．２豚）１０
夕を加えてかきまぜた後酢酸エチルを減圧下に留去し、
あらかじめ用意したシリカゲルカラム（５００の‘）の
上端におき、ｎ一へキサン５００の‘、ｎ−へキサン酢
酸エチル（３：１）５００叫、ｎーヘキサン酢酸エチル
（１：１）、水飽和酢酸エチル２そを流し、溶出液を５
０Ｍあて分画する。
各フラクショソの１の‘宛を膿縦乾園し０．１の‘の酢
酸エチルを加え、シリカゲルカラスプレート（西独 メ
ルク社 キ−ゼルゲル６価２鼠０．２５柳２０×２０）
の下端から２．＆スの位置にスポットし、展開溶媒水飽
和酢酸エチルで約１７の展開する。
酸エチルを加え、シリカゲルカラスプレート（西独 メ
ルク社 キ−ゼルゲル６価２鼠０．２５柳２０×２０）
の下端から２．＆スの位置にスポットし、展開溶媒水飽
和酢酸エチルで約１７の展開する。
展開後紫外線（２５３７Ａ）下で吸収像をしらべＲｆｏ
．４野付近に吸収のあるフラクションを集め約２の‘ま
で減圧濃縮後、濃縮液に石油エーテル２０の‘を加え粗
結晶１．雌夕を得た。これを酢酸エチル２０の‘に加温
溶解後、冷却し、析出する結晶を炉取すると舵０のｏの
Ｐ−４糟結晶が得られた。鷲＆点１７８一１８０午○（
Ｐ一４；９４Ｗ／Ｗ％）実施例 ４ 実施例３で得られた粗物質２０夕をメタノール２００の
【にとかし、水２００の‘を加えて溶解する。
．４野付近に吸収のあるフラクションを集め約２の‘ま
で減圧濃縮後、濃縮液に石油エーテル２０の‘を加え粗
結晶１．雌夕を得た。これを酢酸エチル２０の‘に加温
溶解後、冷却し、析出する結晶を炉取すると舵０のｏの
Ｐ−４糟結晶が得られた。鷲＆点１７８一１８０午○（
Ｐ一４；９４Ｗ／Ｗ％）実施例 ４ 実施例３で得られた粗物質２０夕をメタノール２００の
【にとかし、水２００の‘を加えて溶解する。
Claims (1)
- １ ノカルデイア属に属する抗生物質Ｃ−１５００３生
産菌を、イソバレロイルＣｏＡの前駆物質を添加した培
地に培養し、培養物中に抗生物質Ｃ−１５００３Ｐ−４
を特異的に生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴
とする抗生物質Ｃ−１５００３Ｐ−４の製造法。
Priority Applications (13)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52139384A JPS6010720B2 (ja) | 1977-11-18 | 1977-11-18 | 抗生物質ｃ―１５００３ ｐ―４の製造法 |
| US05/959,471 US4229533A (en) | 1977-11-18 | 1978-11-13 | Method for producing antibiotic C-15003 P-4 |
| CH1170078A CH640269A5 (de) | 1977-11-18 | 1978-11-14 | Verfahren zur herstellung des antibiotikums c-15003 p-4. |
| SU782691551A SU882414A3 (ru) | 1977-11-18 | 1978-11-16 | Способ получени антибиотика с-15003 р-4 |
| DE19782849666 DE2849666A1 (de) | 1977-11-18 | 1978-11-16 | Verfahren zur herstellung des antibiotikums c-15003 p 4 |
| NL7811324A NL7811324A (nl) | 1977-11-18 | 1978-11-16 | Werkwijze ter bereiding van antibioticum c-15003 p-4. |
| IT29921/78A IT1160087B (it) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Procedimento per la produzione dell'antibiotico ottenuto coltivando un microorganismo del genere nocardia |
| FR7832576A FR2409306A1 (fr) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Procede de production de l'antibiotique c-15003 p-4 par culture d'un micro-organisme du genre nocardia |
| HU78TA1499A HU179599B (en) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Process for producing antibioticum c-15--3 p-4 |
| PL1978211027A PL122365B1 (en) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Process for preparing c-15003 p-4 antibiotic |
| DK514478A DK144658C (da) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Fremgangsmaade til fremstilling af antibiotikum c-15003 p-4 |
| ES475179A ES475179A1 (es) | 1977-11-18 | 1978-11-17 | Un metodo mejorado para producir antibiotico c-15003 p-4. |
| GB7845283A GB2011384B (en) | 1977-11-18 | 1978-11-20 | Method for producing antibiotic |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52139384A JPS6010720B2 (ja) | 1977-11-18 | 1977-11-18 | 抗生物質ｃ―１５００３ ｐ―４の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5473193A JPS5473193A (en) | 1979-06-12 |
| JPS6010720B2 true JPS6010720B2 (ja) | 1985-03-19 |
Family
ID=15244048
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP52139384A Expired JPS6010720B2 (ja) | 1977-11-18 | 1977-11-18 | 抗生物質ｃ―１５００３ ｐ―４の製造法 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4229533A (ja) |
| JP (1) | JPS6010720B2 (ja) |
| CH (1) | CH640269A5 (ja) |
| DE (1) | DE2849666A1 (ja) |
| DK (1) | DK144658C (ja) |
| ES (1) | ES475179A1 (ja) |
| FR (1) | FR2409306A1 (ja) |
| GB (1) | GB2011384B (ja) |
| HU (1) | HU179599B (ja) |
| IT (1) | IT1160087B (ja) |
| NL (1) | NL7811324A (ja) |
| PL (1) | PL122365B1 (ja) |
| SU (1) | SU882414A3 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55162791A (en) * | 1979-06-05 | 1980-12-18 | Takeda Chem Ind Ltd | Antibiotic c-15003pnd and its preparation |
| JPS5645483A (en) * | 1979-09-19 | 1981-04-25 | Takeda Chem Ind Ltd | C-15003phm and its preparation |
| JPS56102793A (en) * | 1979-12-28 | 1981-08-17 | Takeda Chem Ind Ltd | Preparation of antibiotic c-15003 p-3 |
| GB8712752D0 (en) * | 1987-05-30 | 1987-07-01 | Tioxide Group Plc | Particulate material |
| GB8829402D0 (en) * | 1988-12-16 | 1989-02-01 | Tioxide Group Plc | Dispersion |
| CN102586153A (zh) * | 2012-03-06 | 2012-07-18 | 福州大学 | 一种高密度培养枯草芽孢杆菌的方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| JPS58876B2 (ja) * | 1975-11-19 | 1983-01-08 | 藤沢薬品工業株式会社 | Ｆｒ −１９２３ ブツシツノ セイゾウホウホウ |
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