JPS6042328A - 多糖体ν９ｇｉの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ■１発明の背景 技術分野 本発明は多糖体Ｎ９ＧＩの製法に関するもので゛ある。

さらに詳しくは、本発明は、メリア・アザノラクタ樹皮
の熱水抽出物を特定の方法で精製することを特徴とする
多糖体Ｎ　９　Ｇ　Ｉの製法に関するものである。

本発明の製法によって得られる多糖体は抗腫瘍剤として
有用である。

先行技術 従来メリア・アザジラクタ抽出物が種々な薬理作用を有
することは知られている。即ち、メリア・アザジラクタ
の樹皮、葉部、花部、果部、枝部、根皮−または樹脂を
水または親水性溶媒で抽出するかあるいは微粉砕して皮
膚化粧料を得る方法（特公昭５２−２８８５３．同５２
−２８８５４および同５３−１０’１２５）、上記メリ
ア・アザジラクタ原料を親水性溶媒および（または）熱
水で抽出して抗菌作用、胃腸・肝臓機能改善作用を有す
る成分を得る方法（特公昭５３−１０１２４）および上
記メリア・アザジラクタ原刺を疎水性溶媒で抽出して皮
ｊ酢疾患およびリュウマチの治療に有効な成分を得る方
法（特公昭５２−１３６８９）が報告されている。

また、本発明者等は先にメリア・アザノラクタ樹皮の熱
水抽出液にアルコールを加え、生成した沈澱を採取する
（特開昭５７−１７６９１４）かあるいは上記熱水抽出
液を透析膜で処理し、透析内液から有効成分を採取する
（特開昭５７−１７６９１５）ことによシ抗腫瘍作用を
有する抽出物が得られることを報告した。

本発明者等はさらに研究を進めた結果、上記精製抽出物
を水に溶解し、該水溶液を分画分子量約１×１０３〜１
×１０５乃至ｌ×１０３〜２Ｘ１０５のケゝルろ層剤〔
例えはセフアゾ、クスＧ１００（商品名、ファルマンア
社製品〕、バイオヶゞルＰ−１００（商品名、バイオラ
ッド社製品）等〕を用いてケ゛ルろ過し、３つに分れる
多糖体画分のうち、最初の画分を採取することにより新
規な多糖体Ｎ９ＧＩが得られることを知った。この方法
は純度の高い多糖体Ｎ　９　ＣＩを得る点で曖れている
が、操作が煩雑なため大規模での実施が非常に困難であ
シ、また上記ケゝルろ層剤が機械的強度に欠けているた
め工業的実施にはあま９向いていない。

■９発明の目的 そこで本発明は、工業的な実施に適した多糖体Ｎ９ＧＪ
の製造法を提供することを目的とする。

即ち本発明は簡便な操作と大規模な実施が可能な装置を
用いて多糖体Ｎ　９　Ｇ　ｌを製造する方法を提ｇ（す
ることを目的とする。

本発明の目的は以下にＬα載する方法によって達成され
る。

メリア・アザジンクタ樹皮を熱水で抽出し、該抽出物を
アルコール沈澱法、透析膜法または限外ろ農法によシ精
製し、得られた抽出精製物にポウ酸またはその塩を作用
させてポウ酸錯化合物を形成させ、該錯ｆ′ｌＳ合物を
強塩基性陰イオン交換体に吸着させ、ボウ酸緩衝液で溶
出し、溶出液に陽イオン交換１δｊ脂を加え、アルコー
ルを加えた後減圧濃縮し、濃縮物を凍結乾燥することを
特徴とする下記の物理化学的特性を有する多糖体Ｎ９Ｇ
　Ｉの製法。

（イ）色と形状 凍結乾燥品は白色または淡黄配色粉末である。

（ｏ）赤外線吸収スペクトル ＩＲｖｍａｘＣＴＬ　：３／１００１２９２０．１６３
０１１４００１１３６０　、１１５０　、１０７０．１
０３０，９２０，８４０ｅウ　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極太を示さず末端吸収のみを示す
。

に）　溶解性 水に可溶でメタノール、エタルール、アセトン、エーテ
ル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキサ
ン等の有機溶媒に不溶である。

０ラ　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加によ’）　Ｗ緑色を呈する。

３、発明の詳細な説明 本発明方法の原料植物であるメリア・アザノラクタは学
名をメリア・アザジラクタ・リンネといい、熱帯地域に
自生する高さ１０　ｍ以上に達する木本植物である。本
発明の方法においては、メリア・アザノラクタの樹皮を
原料として使用する。該樹皮を熱水で抽出処理する操作
は常法に従りで行なわれる。即ち、細断した樹皮に熱水
を加えるか、あるいは、樹皮に水を加え、その混合物を
加熱沸騰させることによって実施される。加熱は沸謄水
浴中または直火で行うことができる。抽出時間は原料の
品質等に従って適宜決定されるが通常１乃至４８時間で
ある。抽出終了後、抽出混合物をろ過することにより熱
水抽出液が得られる。

このような熱水抽出に先立って、該樹皮を有機溶媒およ
び（または）常温の水で抽出前処理することにより、不
要成分を予め除去しておくことも望ましい。抽出前処理
に使用する溶媒としてはメタノール、エタノール、フロ
ノぐノール、ｅｌ）シン、アセトンのような極性有機溶
媒、ベンゼン、トルエン、キシレン、ｎ−ヘキサン、ク
ロロホルム、四塩化炭素、酸１亥エチルのような非極性
有機溶媒があげられる。

かくして得られた熱水抽出液にはなお多量の不純物が含
まれているのでアルコール沈澱法、透析膜法または限外
ろ過法により、該抽出液を精製する。アルコール沈澱法
で精製する場合には、上記抽出液にメタノール、エタノ
ール、グロ・ぐノールのようなアルコールを加え、生成
した沈澱を常法によシ、例えば遠心分離により採取する
。透析膜法により精製する場合は、該抽出液を透析膜に
入れ、水につけて透析し、透析内液を所望によシ濃縮乾
固するかまたは凍結乾燥して抽出物を得る。

透析膜としては分画分子量５０，０００以下のもの、例
えばスペクトラ・ボア１〜６（商品名、スペクトラム・
メディカル・インダストリーズ社製品）、ビスキング・
チューブ（商品名、ユニオンカー）Ｚイト社製品）が使
用される。あるいは、分画分子量力５，０００〜ｔｏ、
ｏｏｏａ度のホローファイノぐ一型透析器を用いてもよ
い。例えばテルモ株式会社製品のクリランスＴＥ−１５
（商品名）、アミコン社のＨｆＦ４（商品名、分画分子
量５，０００）またはＨＩＰＩＯ（商品名、分画分子量
１０，０００）を用いることができる。精製度を上げる
ために、上記透析膜法とアルコール沈澱法を組み合せる
こともできる。即ち、上記透析内液にアルコールを加え
、生成する沈澱を採取することによシ精製度の高い多’
ｊ！＋ｊｊ体が得られる。限外ろ過法で精製する場合は
分画分子量約１０．０００乃至５０，０００の限外ろ過
膜を用い、常法に従って別圧下に実施される。ろ過膜は
、上記の分画分子量を有するものであればよく拐質等に
特に制限は々いが、合成高分子を不織布等にキャスティ
ングしたものが好適に使用される。このようなろ過膜の
し１１としては東洋曹達工業（珠）製品のＴ　Ｓ　Ｋ　
−Ｕ　Ｆ膜：　ＴＳ−１０（分画分子量１０．０００）
、ＴＳ−３０（同３０，０００）、ＴＳ−５０（同５０
．０００）およびアミコン社製品の限外ろ過膜：ＹＭ１
０’（分画分子量１０，０００）、ＰＭＩＯ（同１０，
０００）、ＹＭ３０（同３０，０００）、ｐｒψ３０（
同３０，０００）およびＸＭ５０（同５０，０００）が
挙げられる。特にＴＳ−５０（東洋調達工業社製品）が
好ましい。ろ過に際しての加圧は約０．１〜２ｋｇ／ｃ
Ｂが適当である。限外ろ過により熱水抽出液の濃縮と低
分子夾スイ（物の除去が同時に達成されるａ　ａ　Ｋｎ
　７＆のｃ？！度は５〜２０　’ｎ９／ｍ１　％好適に
は１０〜ｌ　５１．’１９／ｍｅである。

前記アルコール沈澱法で得られた沈澱物または透析膜法
において透析内液を乾燥して得られた固形物は、水に溶
かして本発明の精製抽出液とする。

透析膜法または限外ろ過法における内液はそのまま本発
明の精製抽出液とする。

この精製抽出液にホウ酸またはその塩を加えて抽出物の
錯化合物を形成させる。この錯化合物は負の電荷をもつ
ホウ酸錯化合物であり、これを強塩基性陰イオン交換体
によりイオン交換クロマトグラフィー処理する。例えば
、Ｄｏｗｅｘ−１（商品名、ダウケミカル社製品）ホウ
酸塩形を充填したカラムに吸着させ、ホウ砂または四ホ
ウ酸カリウム溶液のようなホウ酸緩衝液で溶出する。溶
出液に陽イオン交換体、例えばＤｏｗｅｘ　−５０（商
品名、ダウケミカル社製品）Ｈ＋形を加えて脱イオンし
、次いでメタノールのようなアルコールを加えてホウ酸
をメチルエステルとしてこれを留去し、残留物を凍結乾
燥して所望ｐ多糖体ＮＱＧＩを得る。

本発明の方法により得られた多糖体Ｎ９Ｇｌは下記の物
理化学的特性を有する。

（イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末又は淡黄褐色粉末である。

（ロ）赤外線吸収ス波りトル ＫＢｒ−１゜ ＩＲν　ｃｍ　、３４００，２９２０，１，６３０，１
４００゜］、３６０　、１１５０　、１，０７０　、１
０３０．９２０．８４０（ハ）紫外線１及収ス深クトル 水溶（？り中の測定で吸収極大を示さず末端吸収のみを
示す。

に）　溶解性 水にｔ’］■６でメタノール、エタノール、アセトン、
エーテル、クロロホルム、ＤＩエチル、ベンゼンおよび
ヘキサン等の有機溶媒に不溶である。

（ホ）　Ｔ色反し＋’、１ フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性てヨウ
素の添加により育緑色を呈する。

参考までに、」二で得られた多糖体Ｎ　９　Ｇ　ｌを分
画分子量約１×１０〜２×１０　乃至１×１０〜８×１
０５の／ｒ’ルろ層剤を充、Ｊ　したカラムにかけ、蒸
留水で溶離すると多糖体が２つの両分に分画される。

最初に溶出する両分を多糖体Ｎ９Ｇｌａ、、後に溶出す
る多糖体をＮ９Ｇｌｂとする。上記ケ゛ルろ層剤として
はデキス）・ラング９ル、ポリアクリルアミドゲル、ポ
リビニル系のポリブーケ８ル、多孔性ガラスピーズ等が
使用される。これらは例えばセファデックスＧ−２００
’、七フアクリル５−３００（商品名、ファルマンア社
製品、スエーデン）、バイオケ８ルＰ−３００，（ｉ’
Ｔ５品名、バイオラッド社製品、米国）、トヨ・ぐ−ル
ＨＷ−６０（商品名、東洋曹達工業社製品、■本）等の
製品名で市販されている。

多糖体Ｎ　９　Ｇ　Ｉ　ａおよび多糖体Ｎ９Ｇｌｂの構
造および物理化学特開は下記の通りである。

イ）　構　造 α−（１→４）−グルカンの主鎖にアラビノースがα−
（１→６）結合し、グルコースとアラビノースの構成割
合が約５．１の中性多糖体。

口）色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

・・）溶解性 水に可溶で、メタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキ
サン等の有機溶媒に不溶である。

二）呈色反応 フェノール硫酸反応、アンメロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加によ、！ｌｌｌ青緑色を呈する。

ホ）分子量 セファデックスＧ−２００カラムヶ゛ルクロマトグラフ
ィで単一のピークを与え、分子量は約！１．１．　（＋
　００である。

へ）　Ｌヒ　１１星　光　月ｙ 〔α〕、、−１Ｎ３（３００（Ｃ＝０５　、Ｈ２Ｏ）１
・）赤り￥線吸収スペクトル ＩＲｖ””ｃｕｔ−’　：３４００，２９３０，１６２
０，１４１０゜１．３７０．１２Ｇ０，１１５０．１０
８０チ）　紫外線吸収スペクトル 水イ６液中の（μ（１定で吸収極太を示さず、末端吸収
のみを示す。

す）　Ｃ核磁気共１１βスーξクトル 重水中で外部基準にＴＭＳ　（テトラメチルシラン）を
使用して測定した１　００　ＭＨｚ　Ｃ核磁気共鳴スペ
クトル（ｄ次の通りである。

δＩ）ｐｍ　：　６２．］　、６２．７，６７．３，７
２．９，７４．８．７８．１　。

７８．７　、８２７１．８５．５　、９９．２　、１０
１．１　、１０８．９イ）構造 α−（１→４）−グルカン金主鎖とし、主鎖中にβ−（
１→３）フコースを含み、分枝としてα−（］→６）ア
ラビノースを有し、グルコース、アラビノースおよびフ
コースの構成割合が約５：２：１の中性多糖体。

口）色と形状 凍結乾燥品は白色、粉末である。

・・）溶解性 水に可溶で、メタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢Ｈエチル、ベンゼンおよびヘキ
サン等の有機溶媒に不溶である。

二）呈色反応 フェノール硫、酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨ
ウ素の添加により青緑色を呈する。

月つ　分子量 セファデックスＧ−２００カラムダルクロマトグラフイ
で単一のピークを与え、分子量は約２１．０００である
。

へ）比旋光度 〔α〕ｏ、　＋１４３．７°（ｃ＝０５．Ｈ２Ｏ）ト）
赤外線吸収スペクトル ＩＲ４暦ｃｍ−’　：　３４００　、２９３０　、１６
３０　、１４２０　。

１２６０．１０８０，１０２０．８１０チ）紫外線吸収
スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを示
す。

す）１３Ｃ核磁気共鳴ス４クトル 重水中で外部基準にＴＭＳ　（テトラメチルシラン）を
使用して測定した１　００　ＭＨｚ　１３Ｃ核磁気共鳴
スー々クトルは次の通シである。

δｐｐｍ　：　１８．２，６２．３，６２．７，６７．
４，７１．１，７２．０゜７３．２　、７４．９　、７
８．３　、７８．９　、８２．９　、８３．９　。

８５．６，９９．４，１０１．２，１０５．０．１０９
．１本発明の多糖体Ｎ９Ｇｌは上記多糖体Ｎ９ＧＩａお
よび多糖体Ｎ９Ｇｌｂの混合物とみることができ、薬理
試験の結果、ザルコーマ１８０マウス移植腫瘍およびメ
スＡ固形型マウス移植腫瘍に対して顕著な阻止作用を有
することが確認された。

また上記多糖体Ｎ　９　Ｇ　Ｉ　ａおよびＮ９Ｇｌｂも
同様の薬理活性を示した。

従って抗腫瘍剤として使用する場合には、本発明の多糖
体Ｎ９Ｇ［をさらに多糖体Ｎ９ＧＩａと多１賭体Ｎ９Ｇ
ｌｂとに分離する必要はなく、両者の混合物の状態で、
即ち、本発明に多；：ｓ体Ｎ９Ｇｌの状態で使用するの
が実際的である。

次に、本発明の多糖体Ｎ９Ｇｌの試験例を示す。

試験例１ （試料調製） リン酸緩衝食塩水（ギブコ社製、リン酸９．５ｍＭを含
む；　ＰＢＳ　）に０．５チカルボキシメチルセルロー
ス（ＣＭＣ）を懸濁させた溶液に所定０度になるように
各両分試料を溶解させた。

（ザルコーマ１８０ガン細胞移植） ＩＣＲマウス腹腔中で継代培養したザルコーマ１８０ガ
ン細胞を腹水とともにとり出し、生理食」（１Ｍ水で適
当に希釈して細胞数が１．０Ｘ１０８飼／ｍｅとなるよ
うに調製した。この懸濁液の０．１　ｍｅを、１週令、
雄ＩＣＲマウス背部皮下に注射器を用いて１１、ｔｌｌ
　ｌｌ１Ｗ全　（多イ１μシ／こ　。

（試料役力） ザルコーマ１８０ガン糸田胞を移イ直した６日日より１
１］１回連続１０日間、上に調製した試料を注射器を用
いて腹腔に０．１　ｍｅ投与した。１試料１倭度につき
６匹のマウスを使用した。対照は試料の溶剤として用い
た上記ＣＭＣ入りＰＢＳを同様に投与したものとした。

投４　殴の表示はマウス体＠ｌ　ｋｇ、ちたりの？・ｌ
り数とした。

（効果刊定広） ガン細胞移植後２１白目に成長したガン組織を１〆］出
し、その重かを測定した（　１１Ｊ’　６匹の平均値）
。

この市川と対照のものとの比（１／Ｃ）をとって効果判
定を行なった。対照のガン組織重置は１５〜３．５７−
であった。比の１直が１００〜７１係のもの′ｆ：力ｉ
（効（−）、７０〜５１％ｃＤ　モ（７）　ヲヤヤ有効
（＋）、５０〜２１％のものを有効（甘）、２０−Ｑ％
のものを著効（州）とした。結果を表１に示す。

表　１ ザルコーマ１８０移植ガンに対する効果（マウス） （注） 比較例Ａ：特開昭５７７１７６９１４に記載の方法によ
り、メリア・アザジラクタ制皮の熱水抽出液にアルコー
ルを加え、生成した沈澱を採取して得られた熱水抽出物
。

比較例Ｂ：特開昭５７−１７６９１５に記載の方法によ
り、メリア・アザノラクタ樹皮の熱水抽出液を透析膜で
処理し、透析内液から有効成分を採取して得られた熱水
抽出物。

試、験例２ メスＡ繊維肉１１ｎに対する効果 Ｂａ１ｂ／　Ｃマウス腹腔中で継代培養したメスＡ鐵糾
肉腫（ＩＶ］ｅｔｈ　Ａ　ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ　
）　Ａ１１ｌ胞を腹水とともにと９出し、生理食塩水で
適当に希釈し、細胞政が１．ＯＸ　Ｊ−（１６個／ｍｅ
となるように調製した。この細胞懸濁液の０．１　ｍｅ
を５週令）北Ｂａ１ｂ　／　Ｃマウス背部皮下に注射器
を用いて移植した。−匹当りの移植Ａ４１１胞数は１．
０　Ｘ　１０”個である。試料は、試ｊ５・延例１と１
司様にして３周製し、１１日目上り１日１回、１０日間
連続してマウス腹腔内に投与した。判定は腫Ｊ’ｌｉ　
＋１’！Ｉｆ胞移植２１日目に腫瘍組織を切り出し、そ
の重用を１ｌｌｌｌ定することによって行なった。結果
を表２に示す。

表　２ （注） 比較例Ａ、比較例Ｂは表１に同じ。

表１および２から明らかなように、本発明の多糖体Ｎ９
Ｇ　［は、ザルコーマ１８０固形ガンならひにメスＡ繊
維肉腫に対して強い抑制効果を有している。またその効
力は比較（＋ｌ　ＡおよびＢに比べて、１０５〜６倍強
くなっており有効成分の純腹が高くなっていることを示
している。

試験例３ 急性毒性 本発明の多糖体Ｎ　９　Ｇ　ｌを体重２０±１ｇ−の工
ＣＲ雄マウスに投Ｊ４　して急性毒性試験を行なった糸
吉果、ＬＤ５ｏ１直＆よ、腹腔内膜力で６００ｍり／に
９以上であった。

上記の薬理試験の結果からも明らかなように、本発明の
多糖［本Ｎ９Ｇ）は顕著な抗腫瘍性を有し、ＴＩＪ性は
極めて低いので、制ソ１１す剤として優れた回置をイｊ
する。定着固形ガンに対して強い抑制効果をイアするこ
とから本発明の多糖体は免疫賦活型の抗腫鳩作用を有す
ると考えられる。

本発明の多糖体＋ｄ、各種の癌疾碧、に対して有効であ
り、役馬量は、症状、年令、体重などによって１１゛ル
なるが、通常は成人に対して１日］、００〜２，５００
ＩｎＬ：／であり、１〜・１回に分けて役、！うするこ
とができ乙。

本発明の多糖体Ｎ　！Ｉ　Ｇ　ｌは汗フは所要の製剤用
相体１．Ｉこは賦形剤を用いて経口または非１１イＩコ
投−り用に製剤化される。

経口投与用の錠剤、散剤、カプセル剤、顆粒剤等（・ま
慣用の賦形剤例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム
、とうもろこしでんぷん、馬鈴薯でんぷん、砂糖、ラク
トース、タルク、ステアリン酸マグネシウム、アラビア
ゴム等を含有していてもよい。経口投与用液体製剤は水
性−または油性懸濁液、溶液、シロ、プ、エリキシル剤
その他であってもよい。

注射用製剤は溶液または懸濁液の形態であり、懸濁化剤
、安定削性たは分散剤のような処方剤をＳ゛んでいても
よく、滅菌蒸留水、精油／ヒとえはビーナツツ油、とう
もろこし油あるいは非水溶媒、ポリエチレングリコール
、ポリゾロピレノグリコール等を含有していてもよい。

直腸内投Ｊうの／ζめには坐剤用、咀成物の形で提供さ
れ、周知の製剤担体たとえばポリエチレングリコール、
ラノリン、ココナツツ油等を含有していてもよい。

次に実施例不二示して本発明をさらに具体的に説明する
。

実施例］ （１）　メリア・アザノラクタ樹皮乾燥品５０５’をベ
ンゼン（５００＋＋＋ｌＸ３　）およびメタノール（５
００ｍｌＸ３）を用いて室温で２４時間抽出前処理し、
得られた抽出残渣を熱水：２００　ｍｅで３回抽出処理
した。得られた抽出液を合し、ロータリーエバ月？レー
タ−で濃縮乾固し、１９６０．５ｍ夕の粉末を得た。

（２）上記（１）で得られた粉末１０００１ｉ１りを水
２０〇−に溶解し、得られた水溶液に純エタノールを攪
拌しながら室温で除々に加え、水溶液中のエタノール濃
度が８０％になったときに添加をやめ、生成した沈澱を
遠心分離によシ採取し、５９４５ｍｇの褐色、粉末を得
た。

（３）上記（１）で得られた粉末５０．０　ｍｇを水５
０　ｍｌにとかし、この水溶液をスペクトラ　ポア６（
分画分子量５０，０００）に入れ、水に対して透析した
。

透析内液をロータリーエバ、Ｉ？レータ−を用いて濃縮
乾固して褐色の粉末３１０　ｍ９を肖た。

（４）」二１；己（２）または（３）でイ丑られた粉末
１００ｍｇを２０ｍｅの蒸留水に溶かしＯ，ＯＯＩＭと
なるようにホウ酸塩を加えた後、Ｄｏｗｅｘ　−Ｉ　Ｘ
■を充填したカラムに注いだ。このとき使用するＤｏｗ
ｅｘ−Ｉ　Ｘ■カラムは２００〜４００メツシユ、０．
８５　ｃｍ２Ｘ　３．５　ｃｍＯカラムで、Ｉ　ＮＨＣ
ｔで洗い次に０．１．　Ｍ四ホウ酸ナトリウムでＣＡ−
がほとんど陰性になるまで洗い、さらに水で洗って過剰
のＮａ２Ｂ４０．を除き最後に溶出剤（ホウ砂水溶液）
で洗ったものである。

次階で流速１１ｎｌ／ｍｉｎでホウ砂水溶液によシ溶出
した。溶出液についてフェノール硫酸法により糖の定Ｎ
を行ない、糖両分を集め、適当に減圧濃縮後Ｄｏｗｅｘ
　−５０Ｗ　Ｘ■（Ｈ＋形）でバッチ法により脱イオン
を行なった。さらに減圧濃縮し、残留物にメタノールを
加え、減圧濃縮をくり返しホウ酸をホウ酸メチルとして
留去し、残留物を凍結乾燥すると所望の多糖体Ｎ９ＧＩ
　３１：５ｉ１ｊりが得られた。

■０発明の具体的効果 上に詳述したように、本発明によれば多糖体Ｎ９ＧＩの
工業的製造法が提供される。

多糖体Ｎ９Ｇｌは試験例で示したように、ザルコーマ１
８０移植ガンおよびメスＡ繊維肉腫に対して強い抑制活
性を示し、毒性は非常に低いので抗腫瘍剤として有用で
ある。本発明によればかかる多糖体ＮＡＧ　Ｉを工柔的
に有利に製造する方法が提供さ、１１．る。

特ａ′１出願人　テルモ株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　メリア・アザジラクタ樹皮を熱水で抽出し、該
   抽出物をアルコール沈澱法、透析膜法または限外ろ過法
   により精製し、得られた抽出精製物にホウ酸またはその
   塩を作用させてホウ酸錯化合物を形成させ、該錯化合物
   を強塩基性陰イオン交換体に吸着させ、ホウ酸緩衝液で
   溶出し、溶出液に陽イオン交換樹脂を加え、アルコール
   を加えた後減圧濃縮し、濃縮物を凍結乾燥することを特
   徴とする下記の物理化学的特性を有する多糖体Ｎ９ＧＩ
   の製法。 （イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色または淡黄褐色粉末である。 （ロ）赤外線吸収スペクトル ＩＲｖＫＢｒ（：ｍ−’　：　３４００．２９２０　、
   １６３０　、１４００゜ａＸ １３６０．１１５０，１０７０，１０３０，９２０，８
   ４０ｅウ　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず末端吸収のみを示す
   。 に）　溶解性 水に可溶でメタノール、エタノール、アセトン、エーテ
   ル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキサ
   ン等の有機溶媒に不溶である。 （ホ）呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
   素の添加によシ青緑色を呈する。