JPS6047689A - 微生物によるω―ハロカルボン酸の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ニル）ハライドからω−ハロカルボン酸を製造する方法
に関する。

従来、脂肪酸のω一末端のみを選択的に酸化することは
工業的には困難とされてきた。例えば、ラクトン系ムス
ク（じヤ香合成香料）の主成分であるヘキサデカノライ
ドの製造にはω一ヒドロキシバルミチン酸が使用される
が、ムスクが高価であるのは、この前駆体たるω−ヒド
ロキシパルミチン酸の製造が困難なことに起因する。即
ち、パルミチン酸のω一末端を選択的に酸化してω−ヒ
ドロキシパルミチン酸とすることは、合成化学上困難で
ある。

一方、ＩＥ物にノルマルパラフィンを’ＪＨＩＺサせて
ジカルボン酸を製造する際に副産物としてω−ヒドロキ
シ高級脂肪酸も得られることが報告されている（例えば
特公昭４８−２６２３８号）このようにω−ヒドロキシ
高級脂肪酸はノルマルパラフィンのアルカン資化性菌に
よるジカルボン酸への代謝中間体であるが、その著量生
産は困難とされている。その理由としてはω−ヒドロキ
シ高級脂肪酸の生成速度に比べて、そのジカルボン酸へ
の転化速度の方がずっと大きいためと推測される。

また、ω−ヒドロキシ脂肪酸と同様にラクトン系ムスク
の主成分である大環状ラ“りトンの有用な中間体として
はω−ノ＼ロカルポン酸がある。ω−ハロカルボン酸は
ハロゲンに官能基を導入することにより種々の誘導体に
も導びくこともできる。このω−ハロカルボン酸に関し
ては、アルスロへクター属、コリネバクテリウム属、メ
カルディア属に属し、アルキルハライドからω−ハロカ
ルボン酸を生産する能力を有する菌を培養し、ω−ハロ
カルボン酸を生産する方法が報告されている（特開昭５
７−５０８９３号）。

本発明者らは、斯かる現状に鑑みアルキル（又はアルケ
ニル）ハライドを対応するω−／＼ｐカルボン酸に変換
する能力を有する菌を広く検索した結果、ミクロコツカ
ス属に属する微生物中に斯かる能力を有するものがある
ことを見出し、本発明を完成した。

すなわち１本発明は炭素数６〜２２のアルキル（又はア
ルケニル）ハライドを添加した培地にミクロコツカス属
に属するω−へロカルポン酸生産菌を培養して、培地中
に炭素数６〜２２のω−ハロカルボン酸を生成蓄積せし
め、これを採取することを特徴とする微生物によるω−
ハロカルボン酸の製造法にある。

本発明で使用される微生物はミクロコツカス属に属し、
アルキル（又はアルケニル）ハライドのω−末端を選択
的に酸化してω−ハロカルボン酸を生成しうるちのであ
って、例として、ミクロコツカス・エスピーｅ　ＫＳＭ
−Ｂ−１（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ、ＫＳＭ−Ｂ
−１）及びミクロコツカス・エスピー＊　Ｋ！ｌｉＭ−
Ｂ−８（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ、ＫｓＭ−８−
８）及びミクロコツカス−エスピー拳ＫＳＭ−８−１ｆ
ｆ　（旧ｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ、　５Ｍ−８−１８
）が挙げられる。この３つの菌株は本発明者らが土壌よ
り分離したものであって、それぞれ微工研菌寄第７００
２号及び第７００３号及び第７００４号として工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されており、′以下の表
１に示す菌学的性質を有している。

余白 以上の菌学的性質を有する菌について、ノ＜−ジェイの
マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　
Ｄｅ−ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ）第８版（１９７５年）にもとづいて検索した結果
、上記３菌株はミクロコツカス属に属することが判明し
た。

本発明において原料として用いるアルキル（又はアルケ
ニル）ハライドは、炭素数６〜２２のアルキル（又はア
ルケニル）クロライド又はアルキル（又はアルケニル）
ブロマイドが適当である。例えばｎ−ヘキシルクロライ
ド、ｎ−へブチルクロライド、ｎ−オクチルクロライド
、ｎ−デシルクロライド、ｎ−ウンデシルクロライド、
ｎ−ドデシルクロライド（ラウリルクロライド）、ｎ−
テトラデシルクロライド（ミリスチルクロライド）、ｎ
−ペンタデシルクロライド、ｎ−ヘキサデシルクロライ
ド（セチルクロライド）、ｎ−オクタデシルクロライド
、ｎ−エイコシルクロライド、ｎ−トコジルクロライド
、ウンデセニルクロライド、オクタデセニルクロライド
（オレイルクロライド）、及びこれらの混合物等、更に
これらに対応するブロマイドを挙げることができる。

本発明で使用する培地の組成は、使用する菌株が良好に
生育し、アルキル（又はアルケニル）ハライドからのω
−ハロカルボン酸の生産をｌ１ｌｊｉ調に行なわしめる
ために適当な炭素源、窒素源あるいは有機栄養源、無＃
１ａ１などからなる。炭素源としては、炭水化物（例え
ば、グルコース、フラクトース、シュクロース、ソルビ
トール等）、有機＃（例えば、クエン酸、コハク酸等）
、炭化水素（例えば、ｎ−ドデカン、ｎ−ヘキサテカン
等）など資化されるものならばいずれも使用できる。ま
た、窒素源あるいは有機栄養源としては、例えば、硝酸
ナトリウム、硝酸カリウム、硝酸アンモニウム等の硝酸
塩類、酵母エキス、肉エキス、ペプトンが挙げられる。

また、無機塩としては各種リン酸塩、硫酸ヤグネシウム
などが使用できる。さらに微量の重金属塩類が使用され
るが、天然物を含む培地では必ずしも添加を必要としな
い。また栄養要求を必要とする変異株を用いる場合には
、その栄養要求を満たす物質を培地に添加しなけれはな
らない。

培養は培地を加熱等により殺菌後、菌を接種し、２８〜
３５°Ｃで３〜５日振盪又は通気攪拌すれば良い。ｐＨ
は６．５〜８程度に調整すると良い結果か得られる。水
に難溶性の炭素源等を使用する場合には、ポリオキシエ
チレンンルビタン等の各種界面活性剤を培地に添加する
ことも可能である。

これらの培養液から目的物質であるω−ハロカルボン酸
の採取および精製は、一般の有機化合物の採取および精
製の手段に準じて行うことができる。たとえば培養液か
ら菌体等を除去したろ液もしくは培養液そのものを酸性
とし、エチルエーテル、酢酸エチル又はクロロホルム−
メタノール泥液等の有機溶媒で抽出する。この抽出物を
カラムクロマトグラフィーあるいは再結晶などの方法を
用いてω−ハロカルボン酸を単離することができる。

以下、実施例により本発明を更に詳しく説明するが、本
発明はこれらによって限定されるものではない。

実施例１ セチルクロライド５０ｇ、リン酸ニアンモニウム１０ｇ
、リン酪−カリウム２ｇ、硫酸マグネシウム（７水塩）
０．２ｇ、硫酸第一鉄（７水塩）０．０２ｇ、硫酸亜鉛
（７水塩）　０．０１８ｇ　、硫酸マンガン（４〜６水
塩）　０．０１６ｇ、酵母エキス２ｇを水道水１文に溶
かしｐＨを７．０に調製した。この液体培地５　ｍｌ　
を５０ｍ１容振盪試験管に仕込み、１２０°Ｃで１５分
間蒸気絨菌した後、ミクロコツカス・エスピー・ＫＳＭ
−Ｂ−１（Ｍｉｃｒｏｃｏ−ｃｃｕｓ　ｓｐ、ＫＳＭ−
８−１）を−白金耳接種し、３０℃でノール（２：　ｌ
）混液２０ｍ１　で抽出した。この抽出液を減圧下濃縮
した後メタノール−ＢＦ３触媒でメチル化し、ガスクロ
マトグラフィーにて生成物のω−クロルパルミチン酸の
定量を行なった。その結果を第２表に示す。

なお生成物はガス−マス（ＧＣ−ＭＳ）によりω−クロ
ルパルミチン酸であることが確認された。図１にω−ク
ロルパルミチン酸のメチルエステル（測定にあたってエ
ステル化したもの）のマスパターンを示した。

第２表 実施例２〜３ 菌株としてミクロコツカス・エスピー・ＫＳＭ−Ｂ−１
（Ｍｉｃｒｏｃｏ−ｃｃｕｓｓｐ、ＫＳＭ−８＝ｌ）の
代わりにミクロコツカスｏｘスビーａ　ＫＳＭ−Ｂ−８
（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ、ＫＳＭ−Ｂ−８）及
びミクロコツカス・エスピーａ　Ｋ、５Ｎ−Ｂ−１ｆｌ
　（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐ　ＫＳＭ−Ｂ−１８
）を用い、それぞれ実施例１と同様の条件で培養を行な
った。その結果を第３表に示す。

第３表 ■事件の表示 昭和５８年特許願第５３８５１、 発明の名称 微生物によるω−・・ロカルポン酸の製造〃３補正をす
る者 事件との関係　特許出願人 明細書および図面 ６補正の内容 別紙のとおり 明細書１２頁の第３表の後に次のとおり挿入する。

「４、図面の簡単な説明

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、炭素数６〜２２のアルキル（又はアルケニル）ハラ
   イドを添加した培地にミクロコツカス属に属するω−ハ
   ロカルボン酸生産菌を培養して、培地中に炭素数６〜２
   ２のω−ハロカルボン酸を生成蓄積せしめ、これを採取
   することを特徴とする微生物によるω−ハロカルボン酸
   の製造法。