JPS62164657A - （Ｓ）−α−シアノ−３−フエノキシ−ベンジルアセテ−トおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、光学活性（Ｓ）−α−シアノ−６−フエツキ
シーベンジルアセテート、ならびに（Ｒ，Ｓ）−α−シ
アノ−３−７二ノキシーペンシルアセテートのラセミ混
合物ｔ１ラセミ混合物中の（Ｒ）アルコールのエステル
を不斉加水分解して（Ｒ）−α−シフ／−３−フェノキ
シ−ペンゾルアルコールおよび（Ｓ）−α−シアノ−３
−フェノキシ−ベンシルアセテート２与えうる微生物か
ら生成されたリパーゼと反応させること全特徴とする該
化合物の生物学的製造法に関する。

ラセミ混合物における（Ｒ，Ｓ）−α−シアノ−６−フ
ニノキシーペンシルアセテートは、公知である。

ヨーロッパ特肝出願第８４３０００２４．１号ｉＣは、
ラセミ（Ｒ，Ｓ）−α−シアノ−６−フニノキシーペン
ゾルアルコールのエステル’ｋ、（Ｓ）−α−シアノ−
３−フェノキシ−ペンシルアルコールのエステルを優先
的に塀水分解し得るエステラーゼと反応させ、それによ
ってその対掌体のエステルから（Ｓ）−異性体アルコー
ルの光学分割を行なうことによる、ある橿のピレスロイ
ドのアルコール部分である九学活！　（８）−α−シア
ノ−６−フニノキシーベンジルアルコールの生物学的製
造法が開示されている。従って、この技術分野において
、（Ｒ）−α−シアノ−６−フエツキシーベンジルアセ
テー）ｋ製造しうる生物学的方法は、すでに提供されて
いる。しかしながら、本発明者らによる本発明以前には
、α−シアノ−６−フエツキシーベンゾアセテートの（
Ｓ）−異性体を製造する方法は、本発明者らの知る限り
においては存在していない。従って、本発明によジその
（Ｒ）体を含有していない（Ｓ）−α−シアノ−６−フ
ニノキシーベンジルアセテートが始めて提供される。更
に（Ｓ）−α−シアノ−６−フニノキシーベンジルアセ
テートの新規製造法が提供される。

本発明の新規生成物は、仄式 ％式％ アセテートであり、それはベンゼン中、１０％の濃度に
おいて測定したとき、〔α〕０−約０−約、１゜の正の
比旋光度値金有する。（Ｓ）−α−シアノ−６−フエツ
キシーペンシルアセテートの製造法は、（Ｅｌ、Ｓ）−
α−シアノ−６−７二ノキシーペンシルアセテー）　ｋ
、（Ｒ）−α−シアノ−３−フェノキシ−ベンジルアセ
テートを不斉加水分解して光学活１１ｉ　（Ｒ）−α−
シアノ−６−７二ノキシーペンシルアルコールおよび（
８）−α−シアノ−６−フニノキシーベンゾルアセテー
トヲ与えうる、微生物由来のリパーゼと反応させること
からなる。（Ｓ）アルコールのエステルおよヒ（Ｒ）　
フルコールは、ついで反工６混合物から分離され、その
後（Ｓ）アルコールのエステルｉ　（Ｒ）　フルコー”
　カラ分１．ＩＩｉ　サレそして回収される。

本発明において便用し９るリパーゼは、（Ｒ）−α−シ
アノ−６−フエツキシーベンジルアルコールのエステル
を不斉加水分解しうるものであり、そしてそれらは微生
物から生成される。使用しつるリパーゼの１例は、キャ
ンデイダ属（ｇｅｎｕｓＣａｎｄｉｄａ　）　、そして
将にキャンデイダ・ルイーサ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｒｕｇ
ｏｓａ　）としてまた知られているキャンデイダ・シリ
ンーリセ株（ｓｔｒａｉｎ　Ｃａｎｄｉｄａｃｙｌｉｎ
ｄｒｉｃａｅ　）から生成されるカルボン酸ヒドロラー
ゼである。木酢系は、シグマ・ケミカル・カンパニー　
（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ　）
　［セントルイス、ミズーリ州、６３１７８］から商業
的に入手しうる。

本発明の方法の実施において、（Ｒ）エステルの不斉加
水分解は、（Ｒ，８）−、α−シアノ−６−７二ノキシ
ーベｙゾルアセテートのラセミ混合物、およびリパーゼ
含有液体、たとえば該微生物の培養液、その濾液、リパ
ーゼ佃出液体お工ひその鑓縮物、微生物細胞の憑濁液、
あるいは粗製または精製リパーゼ製剤全官有する水静液
を攪拌または振盪することにより行われる。

本方法は、型温条件下に２いて行いうるけれども、高め
られた温度において反応速度がより速いので、反応は４
００から５０℃ｌでの間の高められた温度に２いて行う
のが好ましい。反応時間は、典型的には１０から４０時
間までである。しかしながら、反応時間は反応温度を増
加するかまたは酵素の濃度を増那することにより短紬で
きる。

α−シアノ−６−７二ノキシーベンジルアルコールは塩
基性物質にさらされたとき分解する傾向があるので、不
斉加水分解の間、反応媒質の重金制御することが必須で
ある。従って、加水分解反応は、ＰＩ″１８より高くな
いＰＨにおいて行わなければならない。更に、あまりに
低すぎるＰＩ″ｉは、酵素の不活性化音生じる。従って
、反応は、好ましくはｐＨ４から−８までの範囲内に３
いて、最も好ましくはＰＨ５からｐＨ６までの範囲内に
おいて行われる。

加水分解の間の有機ばの形成に起因するＰＨ値の低下を
防止するために、バッファー浴液茫使用しうる。無機塩
丑たは有機塩バッファーのいずれかが、バッファー浴液
として使用できる。

不斉加水分解反応の後に、（Ｓ）−α−シアノ−６−７
二ノキシーペンシルアセテートおよび（Ｒ）〜アルコー
ルは、反応混合物から、浴媒抽出、放直による液体層分
離、カラムクロマトグラフィ、または他Ｑ通ｇの分離技
術によυ分離される。エステルは、ついで、アルコール
から、クロマトグラフィ、好ましくはシリカゲル上のク
ロマトグラフィにより分離される。本発明の方法により
（Ｓ）−α−シアノ−６−フニノキシーベ／ゾルアセテ
ートが得られる。（Ｒ，Ｓ）−α−シアノ−３−フェノ
キシ−ベンジルアセテートのラセミ混合物の製造法は、
この技術分野において知られている。たトエば、アルカ
リ金属シアナイド、たとえばナトリウムシアナイドを、
テトラブチルアンモニウムブロマイドを言付するメチレ
ンクロライド中の３−フェノキシ−ペンゾルアルデヒド
およびアセチルクロライドと反応させて、ラセミ混合吻
茫得ることがでさる〔ケミカル・アブストラクツ（Ｃｈ
ｅｍ。

Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　）、９６（２５）：２１７５０４
Ｊ　）。

（８）−α〜シアノー３−フェノキシーペンゾルアセテ
ートは、合成ピレスロイドたとえはフェンバＬ／　ｖ−
）　（ｆｅｎｖａｌｅｒａｔｅ　）、ジベルメトリン（
ｃｙｐｅｒｍｅｔｈｒｙｎ　）およびデカメトリン（ｄ
ｅｃａｍｅｔｈｒｉｎ　）の製造のための中間体として
有用であり、またそれ自体殺虫、除草２工び殺凶活性を
有すると思われる。

本発明全以下の実施例により史に説明する。しかしなが
ら、本発明がそれら実施例により限定式れるものでない
ことは理解されなけれはならない。

例　　１ ０．２Ｍｄ度の酢酸ナトリウムバッファー溶液（ｐ）（
５，０）　１２３ｔｎｌに、（Ｒ，Ｓ）　−（！　−’
ｙ７／　−３−フェノキシ−ペンシルアセテート３０ｇ
およびキャンディダ・シリンドリセリパーゼ２．２５　
ｇｋ加えた。混合物？５０″Ｃで攪拌しつつ２６時間イ
ンキュベートした。、険体全周期的に採取し、そしてガ
スクロマトグラフィにより分析した。２６時間の反応期
間の終りにおいて、混合物は、５３％α−シアノ−６−
７二ノキシーペンシルアルコールおよび４７％α−シア
ノ−６−フエツキシーペンシルアセテー［−含有してい
ることが決定されたＯ 反応混合＊についで、トルエンで抽出シタ。トルエン抽
出Ｎｉ、金真空蒸留により磯縮して、黄色前が生成した
。Ａ色油’ｋ　Ｏ，２Ｍ濃度の酢酸ナトリウムハフ７７
　　＃１（ｐＨ５−０）　１２３ｍｌおよびキャンデイ
ダ・シリンドリセリパーゼ２．２５　、Ｖと混合した。

混合換金、上記の如＜　２５　’０で攪拌しつつ１８時
間インキユベートシ、そしてトルエンで佃出して、ガス
クロマトグラフィにより決定して３７％α−シアノ−３
−フェノキシ−ベンジルアセテート、４５４α−シアノ
−３−７二ノキシーベンジルアルコールおよび１５％ｍ
−フェノキシベンズアルデヒド金含有する黄色前が生成
した。

油をついで１５回の等しい容竜の石油エーテル（Ｓ点６
５〜６０°Ｃ）で佃出した。それら画分て合せ、そして
真空蒸留によりｌｌ＃縮して、６７係α−シフ／−３−
７二ノキシーベンゾルアセテート、１５％α−シアノ−
６−フニノキシーペンシルアルコールおよび１７％ｍ−
フェノキシベンズアルデヒド金含有する黄色前が生成し
た。この油を、キラル転位試’Ａ　（Ｅｕ（Ｃ１２Ｈ１
４Ｆｅ３０２）　〕ｆ使川して、ＮＭＥＬで分析した。

分析は、α−シアノ−６−フエツキシーペンゾルアセテ
ートが（Ｓ）−α−シアノ−６−フニノキシーベンゾル
アセテートのみからなることｔ示した。

（Ｓ）−α−シアノ−６−フニノキシーベンゾルアセテ
ートｔ１カラムクロマトグラフィにより構製した。油を
、キーゼルデル４０（６０〜２３０メツシュ）全含有す
るカラムに入れ、そしてヘプタンおよび酢酸エチルのへ
ブタン８５部対酢酸エチル１５部の比率の混合物で溶出
した。（Ｓ）−α−シアノ−６−フエツキシーベンゾル
アセテートのみを含有する両分を合せ、そして真空蒸留
によ＃）＃縮して、黄色油が生成した。油（１１６〜）
金、総容量に１．１６ｍ１とするのに光分な量のベンゼ
ンと合せた。ベンゼン溶液をパーキン・エルマー・モデ
ル２４１ポーラリメータ−（Ｐｅｒｋｉｎ　−Ｅｌｍｅ
ｒ　Ｍｏｄｅｌ　２４１Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ　）で
分析し、そして２０℃に２いて＋１７．１°の正の旋光
が生じた。

例　　２ ０．２属娘度の酢酸ナトリウムバッファー浴液（ｐ）４
５．０　）　８８６属に、（Ｒ，Ｓ）−α−シアノ−ろ
−７二ノキシーペンシルアセテー）１００．ｌｉ’およ
びキャンデイダ・シリントリセリパーゼロ、０ｇを加え
た。混合物を、型温で急速に攪拌しつつ１８時間インキ
ュベートした。撹拌全停止して、混合物は２層に分離し
た。下の油／ｄを採取し、そして遠心分離して酵素を除
去した。蛋白質をトルエンで洗滌し、そしてトルエン画
分を上澄油に加えた。合せた両分をＮａＣｌ飽和水溶液
で洗滌し、ついで無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ト
ルエンを真空蒸留により除去して、黄色油６８．９　＆
が生成した。

黄色油を、キーゼルデル４０（６Ｌ）〜２６０メツシュ
）を含有するカラムに入れ、七してヘプタン：酢酸エテ
ル（６５：３５）で浴出した。両分を採取し、そして真
空蒸留にエフ凝縮した。６つの画分を得友。それらは、
それぞれ、α−シアノ−フェノキシ−ペンゾルアセテー
ト２６．２　ｆＩ、α−シアノ−３−７二ノキシーペン
シルアルコール４．５　、！ｉ’　、ならびにα−シア
ノ−６−７二ノキシーベ／ゾルアセテートとα−シアノ
−６−フニノキシーペンシルアルコールとの混合吻ｋＭ
有していたＯ α−シアノ−６−フニノキシーベンジルアセテート画分
を、キラル転移試４　（Ｅｕ（Ｃ１２Ｈ１４Ｆ３０）３
）を使用するＮＭＲで分析した。分析は、α−シアノ−
３−７二ノキシーベンジルアセテートが７５〜８５％（
Ｓ）−α−シアノ−３−フェノキシ−ペンゾルアセテー
トおよび１５〜２５％（Ｒ）−α−シアノ−６−フニノ
キシーペンシルアセテートヲ含有する混合物からなるこ
とを示した。

α−シアノ−６−フエツキシーベンジルアルコール１−
分ケ、例１に記載した如くに高速液体クロマトグラフィ
により分析した。α−シアノ−６−フニノキシーベンゾ
ルアルコール画分は、専ら（Ｒ）−α−シアノ−６−フ
ニノキシーペンシルアルコールからなるものであった。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）その（Ｒ）体を含有していない、次式▲数式、化
   学式、表等があります▼ の（Ｓ）−α−シアノ−３−フェノキシベンジルアセテ
   ート。
2. （２）ベンゼン中１０％の濃度で測定して〔α〕＾２＾
   ０＿Ｄ＝＋１７．１°の比旋光度を有する、特許請求の
   範囲第１項記載のアセテート。
3. （３）（Ｒ，Ｓ）−α−シアノ−３−フェノキシベンジ
   ルアセテートを、（Ｒ）−α−シアノ−３−フェノキシ
   −ベンジルアセテートを不斉加水分解し得る微生物由来
   のリパーゼと、ｐＨ８以下で反応せしめて、該エステル
   を不斉加水分解し、（Ｒ）体を含有していない光学活性
   （Ｓ）−α−シアノ−３−フェノキシ−ベンジルアセテ
   ートを回収することからなる、光学活性（Ｓ）−α−シ
   アノ−３−フェノキシ−ベンジルアセテートの生物工学
   的製造法。
4. （４）該リパーゼがカルボン酸ヒドロラーゼである、特
   許請求の範囲第３項記載の製造法。
5. （５）リパーゼがキャンディダ・シリンドリセ（Ｃａｎ
   ｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｅ）から生成したもの
   である、特許請求の範囲第３項記載の製造法。