JPS6317867A

JPS6317867A - 新規なアミノ酸誘導体

Info

Publication number: JPS6317867A
Application number: JP61162563A
Authority: JP
Inventors: Kinji Iizuka; 飯塚　欣二; Tetsukiyo Kamijo; 上條　哲聖; Tetsuhiro Kubota; 哲弘久保田; Kenji Akaha; 赤羽　健司; Hideaki Umeyama; 秀明梅山; Yoshiaki Kiso; 木曾　良明
Original assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1986-07-10
Filing date: 1986-07-10
Publication date: 1988-01-25
Also published as: JPH0564947B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は医薬品として有用なアミノ酸誘導体およびそれ
らの酸付加塩に関するものである。

さらに詳しく述べれば、本発明はヒトレニン（ｈｕｍａ
ｎ　ｒｅｎｉｎ）　阻害作用を有し、経口投与可能な高
血圧症治療剤として有用な、新規なアミノ酸誘導体およ
びそれらの酸付加塩を提供するものである。

〔従来の技術〕

レニンは腎臓の傍系球体細胞から遊離する蛋白分解酵素
の一種であり、血漿のα２グロブリン分画中にあるレニ
ン基質に反応してアンジオテンシンＩ　　（ａｎｇｉｏ
ｔｅｎｓｉｎ　　Ｉ）を生成させる。生成したアンジオ
テンシンエはアンジオテンシン変換酵素によりアンジオ
テンシンＩＩ　（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　　ＩＩ　）
に変換されるが、このアンジオテンシン■は、血管収縮
作用を有するとともに、副腎皮質に働き、ナトリウムや
水の代謝に影響するアルドステロン（ａｌｄｏｓｔｅｒ
ｏｎｅ）を分泌させるもので、高血圧症の一つの因子で
ある。

従って、このようなレニンとレニン基質との反応を阻害
し、アンジオテンシン■の生成を抑制する化合物は、新
しい作用機作による高血圧治療剤に応用できるものとし
て注目され、多くの研究がなされている。

今までにレニンとレニン基質との反応を阻害、すなわち
レニン活性阻害作用を有する化合物として、多くのペプ
チド誘導体が知られている（日本特許公告公報昭５８−
３９１４９号、日本特許公開公報昭５９−１１０６６１
号、ヨーロッパ特許公開公報７７０２９号、同７７０２
８号、同８１７８３号）。

しかしながら、これらの特許公報に開示されている化合
物群はほとんどポリペプチド類で、その合成が厄介であ
り、かつ体内の蛋白分解酵素、例えばキモトリプシン（
ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）などで分解され易（、経口
投与においてはその薬理効果を発揮することが期待でき
ないものである。

また、構造が比較的簡単なペプチド類でレニン活性阻害
作用を有するものも見出されている（日本特許公開公報
昭５９−１１５３４５号、同昭５９−２２７８５１号）
。これらの特許出願に開示されている化合物は、ジ、ト
リまたはテトラペプチド誘導体であり、前記のポリペプ
チド類に比べ製造は容易であるが、なお蛋白分解酵素に
対して不安定であり、医薬品として用いるには難点があ
る。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従来より知られているレニン活性阻害作用を有するペプ
チド誘導体は、いずれも蛋白分解酵素に対して不安定で
、経口投与においてその薬理効果を発揮することが期待
し難いものである。

本発明の目的は、このような問題を解決しうるような、
強いレニン活性阻害作用を有し、しかも経口投与可能な
新規化合物を提供することである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは強いレニン活性阻害作用を有し、しかも蛋
白分解酵素に対して安定で、経口投与においてもその薬
理効果をそこなうことなく、持続した血圧降下作用を発
現する高血圧治療剤を開発すべく検討した゛結果、ある
種のアミノ酸誘導体によりその目的が達成できることを
見出し、本発明を成すに至った。

（式中のＨＩＳはし一ヒスチジル基、Ａはシクロアルキ
ルオキシ基、ハロゲン化アルキルオキシ基またはモルホ
リフ基である）で表されるアミノ酸誘導体およびそれら
の酸付加塩を提供するものである。

（式中のｔ（ｉｓはし一ヒスチジル基、Ｘは−０−また
は−ＮＨ−１Ｒは炭素数１〜７の直鎖状または枝分かれ
状のアルキル基である）で表される化合物を含む一連の
アミノ酸誘導体およびそれらの酸付加塩が強いレニン活
性阻害作用を有し、しかも蛋白分解酵素に対し安定で、
経口投与可能な高血圧症治療剤として有用であることを
見出し、既に特許出願している（日本特許出願昭６０−
７９７２６号）。

本発明者らは、この一般式（ＩＩ）の化合物よりさらに
優れた化合物を見出すべく研究を重ねた結果、側鎖のイ
ソブチル基をシクロヘキシルメチル基に変換することに
よって、レニン活性阻害作用が増大し、しかも吸収およ
び持続性が高まることを見出し、本発明を完成させた。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体は
、文献未記載の新規化合物であり、例えば、式（式中のＣはＬ−配置の炭素原子である）で表される化
合物と、一般式（式中のＡは前記と同じ意味をもつ）で表される化合物
とをジフェニルリン酸アジドを用いて縮合させることに
より製造することができる。

これらの反応で出発原料として用いられる式（Ｉ）の化
合物は前記日本特許出願昭６０−７９７２６号に記載し
た方法あるいはそれに準じた方法に従って製造すること
ができる。

すなわち、コハク酸エチルと１−ナフトアルデヒドを塩
基、例えば水素化ナトリウムの存在下に反応させ、次い
で水酸化ナトリウムで加水分解して２−（１−ナフチル
メチレン）コハク酸を得る。これを無水酢酸で処理して
、２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸を得、つ
いでモルホリンと反応させて２−（ｌ−ナフチルメチレ
ン）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオン酸を得
、さらにパラジウム炭素を用いて水添を行い、２−（１
−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル）プ
ロピオン酸を得る。

（尋られたカルボン酸とＬ−ヒスチジンメチルエステル
２塩酸塩とをジフェニルリン酸アジドとトリエチルアミ
ンの存在下に反応させて、ＮＣ２−（１−ナフチルメチ
ル）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオニル〕−
Ｌ−ヒスチジンメチルエステルヲ？４　ル。

これを常法に従い、加水分解することにより目的物を得
る。本化合物は単離精製して使用してもよいが、特に単
離することなく、次の工程に使用してもよい。

また、もう一方の出発原料として用いられる一般式（ｒ
Ｖ）で表される化合物は、以下のようにして製造するこ
とができる。例えばＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル）フェニルアラニンを適当な触媒、例えば５％ロ
ジウムアルミナ等の存在下に水添して、Ｎ−（ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル）シクロへキシルアラニンを
得、これを適当な還元剤、例えばボラン等を用いて還元
して、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）シク
ロへキシルアラニノールを得る。次いで、これを塩基、
例えばトリエチルアミン存在下ベンゼン中、ジメチルホ
ルホシキドおよび二酸化イオウピリジン錯塩と処理する
ことによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）シクロヘキシルアラニナールを得る。これをシアン
化カリウムと反応させた後塩酸等を用いて加水分解して
、式で表されるアミノカルボン酸を得る。このカルボン酸（
Ｖ）を常法によりエステル化あるいはアミド化すること
により目的物を得る。

本発明の前記式（Ｉ［Ｉ）で表される化合物と一般式（
ＩＶ）で表される化合物との反応は常法に従って行うこ
とができる。本反応を好適に実施するには式（ＩＩＩ）
で表される化合物とこれと等モル量の一般式（ＩＶ）の
化合物をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、水冷
攪拌下にジフェニルリン酸アジドおよびトリエチルアミ
ンを加え、氷冷ないし室温で一夜攪拌する。反応混合物
を常法により処理、精製して目的物を得る。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体にはヒ
スチジン部分の不斉炭素を含め４個の不斉炭素があり、
個々の不斉炭素における置換基の立体配置により種々の
異性体が存在する。これらの不斉炭素における置換基の
立体配置と一般式（１）で表される化合物のもつレニン
阻害活性との相関において、例えば一般式（Ｉ）で表さ
れるアミノ酸誘導体中、一般式（■）で表される化合物
部分においてはアミノ基が置換されている炭素原子の立
体配置はＳ配置であることが好ましく、また水酸基が置
換されている炭素原子の立体配置は、Ｒ配置が好ましい
が、Ｓ配置とＲ配置の混合物でもよい。

このように、不斉炭素上の置換基の立体配置は一般式（
Ｉ）で表される化合物のレニン阻害活性に影響を与える
が、本発明においてはこれらの異性体についてヒスチジ
ン部分以外の不斉炭素の立体配置を特に限定するもので
はない。

このような光学活性化合物の製造に用いられる光学活性
出発原料は常法により光学分割するか、または光学活性
な化合物を用いて不斉合成することにより得られる。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物は常法に従
い、酸付加塩とすることができ、これらの塩としては塩
酸塩、スルホン酸塩、叶トルエンスルホン酸塩、酢酸塩
、クエン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩等を
あげることができる。

これらの酸付加塩も強いレニン活性阻害作用を有し、蛋
白分解酵素に安定であり、経口投与によって高レニン状
態のサルの血漿中のレニン活性を低下させる。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
それらの酸付加塩は常法に従い医薬品組成物とすること
ができる。そのような医薬品組成物として例えば、錠剤
、カプセル剤、頚粒剤、注射剤、貼付剤、坐剤等をあげ
ることができる。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体ま
たはそれらの酸付加塩を含有する医薬品組成物を治療に
用いる場合、その投与量は疾病の程度、患者の性、年齢
、体重等により調整されるが、経口投与では概ね成人１
日当り５■〜５００ｆｉｇ。

非経口投与では１日当り１■〜１０００■の範囲内で投
与することができる。

〔発明の効果〕

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体＄よび
それらの酸付加塩は強いレニン活性阻害作用を有してい
る。

例えば、ヒトレニン−羊レニン基質系およびヒト高レニ
ン血漿でのレニン活性阻害実験における５０％阻害活性
（ＩＣ３゜）値は、それぞれ３．７　Ｘ　１０−７〜２
．５　Ｘ　１０−’Ｊヨび１．３　　Ｘ　１０−’　〜
４．Ｉ　　Ｘ　１０−ｇモル濃度程度であり、特に、（
２ＲＳ、　３Ｓ）−３−（Ｎ−（２−（１−ナフチルメ
チル）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオニル〕
−し−ヒスチジル）アミノー４−シクロへキシル−２−
ヒドロキシ酪酸シクロペンチルはヒトレニン−羊レニン
基質系およびヒト高レニン血漿での５０９６阻害活性値
（ＩＣ，。）はそれぞれ２．５　Ｘｌ０−’モル濃度お
よび６−８　Ｘ　１０−９モル濃度であった。

本発明の一般式（１）で表されるアミノ酸誘導体および
それらの酸付加塩は、経口投与によって高レニン状態の
サルの血漿中のレニン活性を低下させ、血圧も持続的に
降下させる。

このように、本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸
誘導体およびそれらの酸付加塩は、強いヒトレニン活性
阻害作用を有し、しかも蛋白分解酵素に安定で、経口投
与においても顕著な血漿レニン活性低下作用と持続性の
血圧降下作用を示すことから、経口投与可能な高血圧治
療剤として有用である。

〔実施例〕

本発明をさらに詳述するために以下に参考例および実施
例をあげる。なお、各参考例および実施例中の化合物の
融点は未補正である。また、各化合物のＮ　１．Ｉ　Ｒ
スペクトルは日本電子Ｊ　Ｎ　ｓｒ　−Ｇ　Ｘ　２７０
型窩分解能核磁気共鳴装置を用いて測定した。Ｍ　ａ　
ｓ　ｓスペクトルは日本電子ＪＭＳ　ＤＸ３００Ｈマス
スペクトロメーターを用いてＦＡＢ法により測定した。

薄１クロマトグラフィーはメルク社のプレコートプレー
トシリカゲル（ｐｒｅｃｏａｔｅｄ　ｐｌａｔｅｓ　５
ｉｌｉｃａ　ｇｅｌ）６０Ｆ２Ｓ４を、カラムクロマト
グラフィーはメルク社のキーゼ／ｌｚ−ゲル（Ｋｉｅｓ
ｅｌｇｅｌ）　６０　（２３０−４００メツンユ）を用
いて行った。また薄層クロマトグラフィーの展開溶媒は
クロロホルム／メタノール／水＝８／３／１の混合液の
下層およびクロロホルム／メタノール＝５／１の混合液
の２種類を用い、Ｒｆ値（Ｒｆ、およびＲｆ２）を算出
した。

参考例　１エステル。

コハク酸エチル３２．３ｇと１−ナフトアルデヒド２９
．０ｇを無水エタノール３２０ｍ１に溶解し、水冷下に
５０％水素化ナトリウム（油性）１０．７ｇを加えたの
ち、３０分加熱還流する。この溶液に１規定水酸化す１
．Ｕラム水溶液２３０ｍｇを加え、１時開加熱還流する
。減圧下に溶媒を留去し、残留物に水を加え中性部をエ
ーテルで抽出除去したのち、水層に濃塩酸を加え酸性と
し、エーテルで抽出する。ニーチル層を飽和食塩水で洗
ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に
溶媒を留去し、残留物にベンゼンを加え、析出結晶をろ
取し、黄色結晶の２−（１−ナフチルメチレン）コハク
酸２６．５ｇを得る。

２−（１−ナフチルメチレン）コハク酸２４．５ｇに無
水酢酸２６０Ｉｎｊ２を加え、６０℃で１時間加熱する
。減圧下に溶媒を留去し、残留物にベンゼン／ヘキサン
＝１／１の混液を加え、析出結晶をろ取し、橙黄色結晶
の２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸１６．０
ｇを得る。

２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸１．００ｇ
とモルホリン０．３７ｇを乾燥塩化メチレン３１ｍ１に
溶解し、室温で２時間攪拌する。減圧下に溶媒を留去し
、残留物を酢酸エチル／ベンゼン／ヘキサン＝１／１／
１の混液から結晶化し、無色結晶の２−（１−ナフチル
メチレン）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオン
酸１．１０ｇを得る。このプロピオン酸１、ＯＯｇをメ
タノール４０ｍ１に溶解し、１０％パラジウム炭素０．
１ｇを加えて常圧で水添する。触媒をろ去後減圧下に溶
媒を留去する。残留物にヘキサンを加え結晶化し、白色
粉末状の２−り１−ナフチルメチル）−３−（モルホリ
ノカルボニル）プロピオン酸０．９０ｇを得る。

Ｒｆ、　：　　０．６７Ｍ５　　：　　ＭＨ゛、３２８融　点二６４〜６８℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　　ｖｃｏ　　１７２０．１６４０
　　ａｍ−’ＮＭＲ（ＣＤＣ１３） δ：　２Ｊ５〜２．７（ｍ、　２）１）、　３．０５〜
３．８５（ｍ、　１１）１）。

７．２５〜８．２（ｍ、　７Ｈ）２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリフカルボ
ニル）プロピオン酸０．８９ｇとＬ−ヒスチジンメチル
エステル２塩酸塩０．７９ｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド２３ｍＮに懸濁し、水冷攪拌下にジフェニルリン
酸アジド０．７０ｆｆＬｉ２とトリエチルアミン１．５
０　ｍｇを加え、そのまま１６時間攪拌する。減圧下に
溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液
を加えて、酢酸エチルで抽出後、水で洗い、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、残留物
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ク
ロロホルム／メタノール＝　２０／　１　）　テＲｆｚ
が０．５６に相当する部分を単離精製し、白色粉末状の
Ｎ−Ｃ２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノ
カルボニル）プロピオニルクーシー　ヒスチジンメチル
エステル１．２５ｇを（尋る。

このメチルエステル１．２５ｇをベンゼンから再結晶し
、ベンゼン１分子を含む無色針状晶のＮ−（２−（１−
ナフチルメチル）−３−（モルホリフカルボニル）プロ
ビニオル）−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル１．２０ｇ
を得る。

ｔｕ、：　　０．６１Ｒｆ２：　　０．５６ＩＲ（にＢｒ）：　　　ｖｃｏ　　１７５５．１６３０
．１６１０　　ｃｍ−’参考例　２Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−し−フェ
ニルアラニン１３．２５ｇをメタノール２５ｍ１に溶解
し、５％ロジウムアルミナ１．２ｇを加え、３．５ｋｇ
／ｃｍ２　の加圧下で水添する。触媒をろ去後減圧下に
溶媒を留去し、白色粉末状のＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオ
キシカルボニル）−Ｌ−シクロへキシルアラニン１３．
４ｇヲ？Ｆｐル。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−シーシク
ロへキシルアラニン２．７１ｇを乾燥テトラヒドロフラ
ン５−に溶かし、この混合物をアルゴン気流中１Ｍボラ
ンテトラヒドロフラン溶液２０ｒｎｌに、内温５〜８℃
を保ちつつ滴下し、そのまま３時間攪拌する。

反応液に１０％酢酸メタノール溶液を加えてｐＨ４とし
、減圧下に溶媒を留去する。残留物にエーテルを加え、
この溶液をクエン酸水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液
および飽和食塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥
後、減圧下に溶媒を留去し、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオ
キシカルボニル）−Ｌ−シクロヘキシルアラニノール２
．４２ｇを得る。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−シク
ロへキシルアラニノール２．４ｇ、乾燥トリエチルアミ
ン５．５ｍｇ、乾燥ベンゼン３ｄおよび乾燥ジメチルス
ルホキシド５．５＋ｎ４！の混合物を１５℃（内温）に
冷却し、この混合物に、三酸化イオウピリジン錯塩７．
４ｇを内温１５〜２５℃を保ちつつ加え、そのまま１０
分間攪拌する。反応液を水にあけ、酢酸エチルで抽出し
、酢酸エチル層を飽和炭酸水素す）　＋Ｊウム水溶液お
よび水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下
に溶媒を留去して、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル）−Ｌ−シクロへキシルアラニナール２．９ｇを
得る。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−シク
ロへキシルアラニナール２．９ｇに亜硫酸水素ナトリウ
ム２．９ｇの水２０ｍ１溶液を加え水冷下に１４時間攪
拌する。この反応液にシアン化カリウム１．８２ｇの水
５−溶液と酢酸エチル４０ｍ１２を加え室温で４時間攪
拌する。酢酸エチル層を飽和食塩水で洗ったのち、無水
硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、
残留物に２３％塩酸２１ｍｇを加え、１２時間加熱還流
する。反応液をエーテルで洗い、水層を減圧下に濃縮し
、白色粉末状の（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４−シ
クロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩２．５ｇを得
る。次いで、（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−アミノ−４−シ
クロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩３００■をシ
クロペンタノール５ｄに溶解し、水冷攪拌下に塩化水素
ガスを吹き込み、９０℃で５時間加熱する。反応液を減
圧下に濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（溶出溶媒：クロロホルム／メタノール＝１５／
１）で精製し、塩酸酸性とした後濃縮乾固し、白色粉末
状の（２ＲＳ、　３Ｓ）−３〜アミノ−４−シクロへキ
シル−２−ヒドロキシ酪酸シクロペンチル塩酸塩３８０
■を得る。

ＩＲ（ＫＢｒ）：　　　ｖｃｏ　　１７３０　　Ｃ［Ｉ
！−’ＮＭＲ（０２０） δ：　０．８〜２．０（ｍ、　２１Ｈ）、　３．６〜４
．０（ｍ、　１）１）。

４Ｊ　〜４．７（ｍ、　１）１）、　５．２〜５．４（
ｎ＋、　１）１）参考例　３参考例２と同様にして次のカルボン酸エステルを合成し
た。

無色粘性油状物質ＩＲ（ｎｅａｔ）：　　ｖｃｏ　　１７３０　　Ｃｍ−
’ＮＭＲ（Ｄ２０） δ：　０．８〜２．０（ｍ、　２３Ｈ）、　３．５〜４
．０（ｍ、　ＩＨ）。

４．３〜４．７（＋＋＋、　ＩＨ）、　４．８〜５．０
（ｍ、　ＩＨ）白色粉末ＩＲ（ＫＢｒ）：　　　Ｉ’ＣＯ１７３５Ｃｍ−’ＮＭ
Ｒ（ＣＤＣｌ２） δ：０．８〜２．０（＋ｍ、　１３）１）、　３Ｊ〜３
．９（＋ｎ、　ＩＨ）。

４．１〜５．０（ｍ、　５Ｈ）、　５．２〜５．６（ｍ
、　ＬＨ）参考例　４（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキシル−
２−ヒドロキシ醋酸塩酸塩１．４ｇとトリエチルアミン
１．６４ｍ１を水１０ｍ１とジオキサン１０ｄに溶解し
、ジーｔｅｒｔ−プチルジカルボネイト３．２ｇを加え
たのち室温で１６時間攪拌する。反応液に水２０［ｌＬ
１２を加え、中性部をエーテルで抽出除去したのち、水
層にクエン酸水溶液を加え酸性とし、エーテルで抽出す
る。エーテル層を飽和食塩水で洗ったのち無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、無色油状
の（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカ
ルボニルアミノ−４−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ
酪酸０．９ｇを得る。

この酪酸２００ｍｇ、モルホリン０．０６ｄおよび１−
ヒドロキシベンゾトリアゾール１３０ｍｇを酢酸エチル
６ｍｌに溶かし、水冷攪拌下にジシクロへキシルカルボ
ジイミド１５０　ｍｇを加え、室温で１６時間攪拌する
。反応液を氷冷し、不溶物をろ去したのち、クエン酸水
溶液、５％炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水
で順次洗ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。

減圧下に溶媒を留去し、（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−（ｔ
ｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ−４−シクロ
へキシル−２−ヒドロキシブチリルモルホリノアミド２
９６ｍｇを得る。

上記アミド２９０ｍｇをメタノール５ｍｊ２に溶解し、
２規定塩酸１ｉを加え、５０℃で３時間加熱還流する。

減圧下に溶媒を留去し、白色粉末状の（２ＲＳ。

３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロ
キシブチリルモルホリノアミド塩酸塩２０６ｍｇを得る
。

ＩＲ（にＢｒ）：　　　ｖｃｏ　　１６２０　　ａｍ−
’ＮＭＲ（Ｄ２０）） δ：　０．８〜１．９（［１１，１３ｔｌ）、　３．４
〜３．９（ｍ、　９Ｈ）。

４、４〜４．７　（ｍ、、　ＩＨ）実施例　１キシ酪酸シクロペンチル　（化合物　Ａ）Ｎ、−Ｃ２−
（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル
）プロピオニル）　−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル１
００ｍｇをメタノール１ｍｌに溶かし、氷冷攪拌下１規
定水酸化す）　ＩＪウム水溶液０．２０ｍｍ！を加え、
水冷下で１時間、次いで室温で１４時間攪拌する。減圧
下に溶媒を留去し、（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４
−シクロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸シクロペンチル
塩酸塩５５ｍｇを加え、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド
２ｄに溶解する。この溶液に水冷攪拌下ジフェニルリン
酸アジド０．０４６−およびトリエチルアミン０．０３
０　ｍ１２を加え、水冷下１４時間攪拌する。減圧下に
溶媒を留去し、５％炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、
酢酸エチルで抽出する。抽出液を飽和食塩水で洗い、無
水硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し
、残留物をプレバラティブシリカゲル薄層クロマトグラ
フィー（展開溶媒：クロロホルム／メタノール＝５／１
）でＲｆ２が０．５８に相当する部分を単離精製し、白
色粉末状の（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−（Ｎ−〔２−（１
−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル）プ
ロピオニル）−Ｌ−ヒスチジル）アミノ−４−シクロへ
キシル−２−ヒドロキシ酪酸シクロペンチル４１ｍｇを
得る。

融　点：９５〜１００℃ Ｒｆ、　：　、　　０．５９ＲＬ２：　　０．５８Ｍ５　　：　　ＭＨ”　、　７１６実施例　２実施例１と同様にして次の化合物を合成した。

白色粉末融　点：１１０〜１１５℃ ＲＬ　：　　０．５９Ｒｈ　：　　０．５８Ｍ５　　：　　ＭＨ”、７３０（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｎ−（２−（１−ナフチルメ
チル）−３−白色粉末融　　点：　　１１８〜１２５℃ Ｒｆ＋　：　　ｏ、５７ＲＬ２　：　　０．５１Ｍ５　　：　　ＭＨ′″、７１７Ｄ）白色粉末融　点＝１１６〜１２２℃ Ｒｆｌ：　　０．５７ＲＬ２　：　　０．５３Ｍ５　　：　　Ｍ）Ｉ＝、７２６実施例　３ヒトレニン−羊レニン基質でのレニン活（１阻害作用ｐＨ７，４の１２５　ｍＭ　ピロフォスフェート媛衡液
（ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ）　２Ｑ
ＱＪとアンジオテンシン変換酵素阻害剤として２９ｍＭ
のし一フェニルアラニルーＬ−アラニル−Ｌ−プロリン
の水溶液２５　Ｊ、２０００　ｎｇアンジオテンシンＩ
当！／ｄの部分精製羊レニン基質５０ｉ、脱イオン水１
５０通と本発明の化合物のジメチルスルホキシド溶液５
０成またはコントロール群としてジメチルスルホキシド
５０成の溶液中に２０〜３０　ｎｇ　アンジオテンシン
Ｉ　／ｒｄ／時間のＭ’３１ヒトレニン２５μを加え、
３７℃の水浴中で１５分間インキュベート（ｉｎｃｕｂ
ａｔｅ）　したのち、この反応液を１００℃の水浴中に
５分間入れ、反応を停止する。冷却後２００　ｄを分取
し、レニン添加によって生成されたアンジオテンシン■
の量をラジオイムノアッセイ　（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎ
ｏ　ａｓｓａｙ）法で定量し、下式により阻害活性を求
めた。

阻害活性　（％）＝コントロール　　　本発明の化合物上式により求められた阻害活性から５０％阻害活性モル
濃°度（ＩＣｓ。）を求めた。

化合　物　　　　　　　　ＩＣｓ。値化合物　Ａ　　　　　　　　２．５　Ｘ　１０−ｇＭ化
合物　Ｂ　　　　　　　　６．６　　Ｘ　１０−’　Ｘ
＋化合物　Ｃ３，７Ｘ　１０−’　！、１化合物　Ｄ　
　　　　　　　２．９　Ｘ　１０−９！Ｊ実施例　４ヒト高レニン血漿におけるレニン活性阻害作用ヒト高レ
ニン血漿５ｏｏａに１４　ｍＭ　ＥＤＴＡ　・２Ｎａ　
と０．３％ネオマイシン硫酸を含むｐＨ７，０の０．５
Ｍ　リン酸援衡液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ
）　３５０ｍ、アンジオテンシン変換酵素阻害剤として
２０　ｍＭのし一フェニルアラニルーＬ−アラニル−し
−プロリンの水溶液５０属、および本発明の化合物のジ
メチルスルホキシド溶液１００ｄまたはコントロール群
としてジメチルスルホキシド１００通を加える。この反
応液のうち、２００　ｄを４℃の水浴中に入れ、残った
８００成を３７℃の水浴中で６０分間インキュベートす
る。

３７℃でインキュベートした反応液より２００４を分取
し、ただちに氷冷し、水浴中でインキュベートした反応
液と共にアンジオテンシン■量をラジオイムノアッセイ
法で定量する。

血漿レニン活性は３７℃でインキュベートした反応液中
のアンジオテンシンＩＩから４℃でインキュベートした
反応液中のアンジオテンシンＩｔを差し引くことにより
算出する。阻害活性（％）は下式により求めた。

阻害活性　（％）；コントロール　　　本発明の化合物上式により求められた阻害活性から５０％阻害活性モル
濃度（ＩＣ３゜）を求めた。

化　　合　　物　　　　　　　　　　　　　　ＩＣ５ｏ
渣化合物　Ａ　　　　　　　　６．８　　Ｘ　１０−”
　！Ｊ化合物　Ｂ　　　　　　　　３．ＯＸ　１０−”
　！Ｊ化合物　Ｃ１，３ｘ　１０−’　）４化合物　Ｄ　　　　　　　　４．Ｉ　　Ｘ　１０−’　
）Ａ実施例　５コモンマーモセットの血漿レニン活性（ＰＲＡ）低下作
用ホフバウア−（Ｋ、Ｇ、）Ｉｏｆｂａｕｅｒ）らにより
クリニカル　アンド　エクスベリメンタル　ハイパーテ
ンシーａ　ン（ＣＩｉｎ、　Ｅｘｐ、　）ｌｙｐｅｒｔ
ｅｎｓ、）　Ａ５巻、７＆８号、１２３７〜１２４７ペ
ージ、（１９８３年）に報告されているコモンマーモセ
ット　（ｃｏｍｍｏｎ　ｍａｒｍｏｓｅｔ）を用い、減
塩食下で経口的にフロセミド１５　ｍｇ　／　ｋｇ　／
　ｄａｙを１日おきに３回投与して人為的な高レニン状
態を作り出す。フロセミド投与中止後３ヨ目に実験を行
う。

測定方法体重３２５ｇの雄性コモンマーモセットを小型サル用の
固定台に有意識下に固定し、大腿静脈に挿入したカテー
テルより経時的に採血し、血漿レニン活性を測定する。

血漿レニン活性は０．２ｄの血漿を３７℃、６０分間イ
ンキュベートして生ずるアンジオテンシンＩの量をダイ
ナボット社のレニンリアビーズ　キ？）を用いて測定す
る。本発明の化合物は希塩酸に溶かし、胃ゾンデを用い
て経口的に投与する。３０　ｍｇ　／　ｋｇ投与例の結
果を以下に示す。

ＰＲＡ　　　　　　阻害％コントロール　　　　６．９２投与後１時間　　　　１．９６　　　　　７１．７２時
間　　　　０．０５　　　　　９９．３３時間　　　　
３．６３　　　　　４７．５５時間　　　　６．６５　
　　　　３．９実施例　６コモンマーモセツトに対する血圧下降作用ホフバウアー
（Ｋ、　Ｇ、Ｈｏｆｂａｕｅｒ）らによりクリニカル　
アンド　エクスペリメンタル　ハイパーテンシーａ　ン
（ＣＩｉｎ、ＥＸＩＴ、　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ、）　Ａ
５巻、７＆８号、１２３７〜１２４７ページ、（１９８
３年）に報告されているコモンマーモセット　（ｃｏｍ
ｍｏｎ　ｍａｒｍｏｓｅｔ）を用い、経口的にフロセミ
ド１５　ｍｇ　／　ｋｇ　／　ｄａｙ　を１日おきに３
回投与して人為的な高レニン状態を作り出す。フロセミ
ド投与中止後３ヨ目に有意識下に血圧を測定する。

測定方法体重４６０ｇの雄性コモンマーモセブトを小型サル用の
固定台に有意識下に固定し、運動脈圧を非観血的血圧測
定装置を用いて測定する。本発明の化合物は希塩酸に溶
かし、胃ゾンデを用いて経口的に投与する。３０■／　
ｋｇ投与例の結果を以下に示す。

血圧（ｍｍＨｇ）コントロール　　　　　８９．３投与後３０分　　　　　　７８．０１時間　　　　　　７３．３２時間　　　　　　６６．０３時間　　　　　　７１．０５時間　　　　　　７１．８７時間　　　　　　７１．７

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、Ａはシクロアルキ
ルオキシ基、ハロゲン化アルキルオキシ基またはモルホ
リノ基である）で表されるアミノ酸誘導体およびそれら
の酸付加塩。
（２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、Ａはシクロアルキ
ルオキシ基、ハロゲン化アルキルオキシ基またはモルホ
リノ基、■はＳ配置の炭素原子である）で表される特許
請求の範囲第１項記載のアミノ酸誘導体およびそれらの
酸付加塩。
（３）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、■はＳ配置の炭素
原子である）で表される特許請求の範囲第２項記載のア
ミノ酸誘導体およびその酸付加塩。
（４）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、■はＳ配置の炭素
原子である）で表される特許請求の範囲第２項記載のア
ミノ酸誘導体およびその酸付加塩。
（５）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、ＣはＳ配置の炭素
原子である）で表される特許請求の範囲第２項記載のア
ミノ酸誘導体およびその酸付加塩。
（６）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基、ＣはＳ配置の炭素
原子である）で表される特許請求の範囲第２項記載のア
ミノ酸誘導体およびその酸付加塩。