JPS63241355A - ウロビリノ−ゲン検出用組成物およびそれを用いた検査体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、体液中など、特に尿中のウロビリノーゲンを
検出するための検出用組成物およびその検出用組成物を
用いて形成した検査体に関するものである。

〔従来の技術〕

尿中などのウロビリノーゲン濃度は、肝臓および胆のう
の疾患を診断するための重要な指標である。

従来から、ウロビリノーゲンを検出する方法として、ｐ
−ジメチルアミノベンズアルデヒドなどを指示薬とし用
いた、いわゆる「エールリッヒ反応」を利用した方法が
あり、このような指示薬を、強酸性緩衝剤と共に吸水性
担体に浸漬し、乾燥させた後、別の支持体上に貼り付け
て検査体とし、ウロビリノーゲンの検出に利用している
。このような検査体は、使用時の操作が筒車で判定が短
時間で行なえる利点がある反面、製造行程が複雑で、大
量生産には適さないという問題点がある。

大量生産に適したウロビリノーゲン検査体として、指示
薬、強酸性緩衝剤、結合材、および吸水性担体粉末を含
むインキ組成物を支持体上にパターン印刷し、乾燥させ
て得られるものが提案されている（特開昭６０−１７８
３５６号公報）、シかし、この検査体は反応速度が緩慢
であり、かつ、ウロビリノーゲンの濃度の高、低による
呈色の差異が明確でなく濃度判定が困難であるという問
題点がある。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明においては、従来、大量生産に適し、かつ、反応
に要する時間が短く、かつ、ウロビリノーゲンの濃度の
高低による呈色の差異が明確な検査体がなかった点を解
消しようとするものである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者等の研究の結果、エールリッヒ反応を利用した
検査体に更に反応賦活剤を添加し、特に、陰イオン性界
面活性剤および非イオン性界面活性剤を反応賦活剤とし
て添加することにより上記の従来の技術における問題点
が解決できることが明らかになり、これる基いて本発明
の完成を見たものである。

本発明は、 「エールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、吸水性担
体粉末、および反応賦活剤が非水溶媒中に溶解もしくは
分散されていることを特徴とするウロビリノーゲン検出
用組成物」 に関するものであり、また、 ｒエールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、吸水性担
体粉末、および反応賦活剤からなる組成物が支持体上に
塗布されていることを特徴とするとするウロビリノーゲ
ン検査体Ｊ に関するものである。

〔作用〕

本発明者等によれば、陽イオン性界面活性剤はエールリ
ッヒ反応を抑制するのに対し、陰イオン性界面活性剤は
検査体とウロビリノーゲンとの反応を促進し、また、非
イオン性界面活性剤のうち、ＨＬＢが６．０〜１１．０
の範囲にあるものは、検査体とウロビリノーゲンとの接
触を良好にする。

（実施例〕 以下に、本発明におけるウロビリノーゲン検出用組成物
、およびウロビリノーゲン検査体について、順を追って
説明する。

＋ａ＋原理 指示薬であるｐ−ジ（アルキル）−７ミノベンズアルデ
ヒドが酸性のｐＨに保たれた状態でウロビリノーゲンと
接すると複合体を形成し、被検査液中に存在するウロビ
リノーゲンの濃度に応じて黄桃色〜赤紫色を呈し、この
原理により被検査液中のウロビリノーゲンの検出が可能
になる。

山）エールリッヒ試薬（指示薬） 具体的なエールリッヒ試薬は、ｐ−ジメチルアミノベン
ズアルデヒド、ｐ−ジエチルアミノベンズアルデヒドな
どのｐ−ジ（低級アルキル）アミノベンズアルデヒドで
ある。これらのうちでｐ−ジエチルアミノベンズアルデ
ヒドが感度的に優れている。

エールリッヒ試薬は検出用組成物中、好ましくは０．０
１〜５重世％の割合で使用される。

ｆｅ１強酸性緩衝剤 ウロビリノーゲンと指示薬との反応は酸性領域で進行す
るのでそのような反応環境を付与する目的、および副反
応を抑制する目的で、ｐＨを３以上に調整できる、好ま
しくは常温で固体の酸を使用する。具体的にはスルホサ
リチル酸、シュウ酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタリ
ン酸等が単独もしくは混合して使用される。

強酸性緩衝剤は、検出用組成物中、好ましくは２〜３０
重量％の割合で使用される。

＋ｄ＋結合材 結合材は、被検査液中の成分およびｐＨ等に影古を及ぼ
さず、かつ試薬類、特に指示薬に影響を及ぼさず、しか
も呈色反応を妨げないものであることが要求される。こ
のような条件を満たすことが確かめられた結合材として
は次のようなものがある。

（１）合成樹脂 ポリエステル樹脂、アルキッド樹脂、ポリウレタン樹脂
、ポリスチレン樹脂、アクリル樹脂、エポキシ樹脂、塩
化ビニル樹脂、塩化ビニル共重合体樹脂、ポリビニルブ
チラール樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリビニル
ピロリドン樹脂、もしくは無水マレイン酸系共重合体樹
脂など。

（２）セルロース誘導体 メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチ
ルセルロース、カルボキシメチルセルロースなど。

（３）天然高分子 デンプン、多ＰＲ、ゼラチン、カゼイン、もしくはアル
ギン酸ナトリウムなど。

結合材は検出用組成物中、好ましくは０．　２〜２０重
量％の割合で使用することが望ましい。

（ｅ）吸水性担体粉末 吸水性担体粉末は、被検査液と指示薬との接触を促進し
、指示薬の呈色反応を促進する働きを有するものである
。

このような吸水性担体粉末としては、水と接触した場合
に極端な酸性あるいはアルカリ性を示すものは好ましく
なり、シかも白色度の高いものが好ましい。具体的には
、次のようなものが挙げられる。

カオリン、合成シリカ、ガラス、セルロースブロック、
微結晶セルロース、イオン交換セルｏ−ス、イオン交換
樹脂、炭酸マグネシウム・ケイ酸アルミニウム、などが
使用できる。

吸水性担体粉末は、好ましくは検出用組成物中、１５〜
５０重ヱ％の割合で使用することが好ましい。

（ｆ）？容媒 溶媒としては、上記（ｂｌ〜ｔｅｌの成分、特に、結合
材を均一かつ安定に溶解もしくは分散させることができ
るものが好ましい、このような条件を満たす溶媒として
は、芳香族炭化水素、エステル類、アルコール類などの
非水溶媒もしくは水、または、これらの混合物が挙げら
れる。

しかしながら、ウロビリノーゲン検出用組成物としては
、支持体上に塗布した後の乾燥工程を低温で、かつ、短
時間で行なえるという点で非水溶媒を使用することか好
ましい、非水溶媒を使用すると、検査体上に塗布し乾燥
された組成物の残留水分に起因する変質劣化を防止でき
るという効果もある。

溶媒は、検出用組成物中、好ましくは３０〜８５重量％
の量で用いられる。

（明反応賦活剤 反応賦活剤としては、陰イオン性界面活性剤もしくは非
イオン性界面活性剤が使用され、これらは望ましくは併
用する。

陰イオン性界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウ
ム、もしくはドデシルスルホン酸ナトリウムがあり、横
出用組成物中、好ましくは１１．０範囲になるよう、単
独でもしくは混合して使用する。具体的には、ボ、リオ
キシエチレンエーテル類、ソルビタンの脂肪酸エステル
類、マクロゴールと脂肪酸のエステル類、もしくはマク
ロゴールとアルコールのエーテル類、などが、好ましく
は検出用組成物中、０．０５〜５重量％の割合で使用す
る。

（ｈ）その他の成分 本発明の組成物は上記の主成分に加えて、多くの補助成
分を含有させることができる。例えば、カフェインを加
えることにより呈色感度を高めることができるほか、技
術的に認められる成分としては酸化防止剤、キレート剤
などを含有させることができる。また、指示薬の呈色色
調を見やすくする目的で背景色素を添加してもよい。

（ム）ウロビリノーゲン検出用組成物の調製上記の各成
分はまず、吸水性担体粉末を５０μｍ以下の直径の粒子
になるよう粉砕する。次いで得られた粒子を、指示薬、
強酸性緩衝剤、結合材、および反応賦活剤が溶媒に予め
溶解もしくは分散された液中に加え、高速攪拌機、サン
ドミル、ボールミル、３木ロール、超音波分散機なとに
よって分散ならびに混合すればよい。

（」）検査体の製造 上記のようなウロビリノーゲン検出用組成物は、これを
インキ組成物として用い、支持体上に塗布し、続いて乾
燥することによりウロビリノーゲン検出用領域が形成さ
れ、検査体が得られる。

塗布方法としては、印刷法、コーティング法（例エバ、
ロールコーティング法、スプレーコーティング法、ディ
ップコーティング法、ベタコーティング法、などが用い
られる。

本発明においては、ウロビリノーゲン検出用組成物の塗
布量が比較的多く、しかも、その塗布量は一定であるこ
とが好ましいため、シルクスクリーン印刷法、凹版印刷
法、グラビア印刷法、などによってウロビリノーゲン検
出用組成物を支持体上に塗布するのが好ましい。

ウロビリノーゲン検出用組成物の支持体上への塗布量は
、組成物の種類にもよるが、−ａに２〜１５０ｇ／ｎ？
（乾燥時）であることが好ましい。

＋に＋支持体 支持体としては、ウロビリノーゲン検出用組成物と反応
せず、しかも、指示薬の呈色を阻害しないものであるこ
とが好ましい。

具体的には、紙、合成紙、不織布、もしくは合成樹脂フ
ィルム、または、これらの複合体である紙と合成樹脂フ
ィルムの組み合わせ等の積層体等である。

このような支持体上にウロビリノーゲン検出用領域を形
成した検査体は、スティック状、ロール状、テープ状、
などの形態に形成されていてもよい。あるいは、支持体
自身が被検査液を採取できる形態、例えば、コツプ状、
試験管状、皿状、トレイ状、スポイト状、に形成されて
いてもよい。

〔発明の効果〕

本発明のウロビリノーゲン検出用組成物は、反応賦活剤
として、陰イオン性界面活性剤およびＨＬＢが６．０〜
１１．０の範囲にある非イオン性界面活性剤を使用して
いるので、従来のものにくらべて、反応速度が高められ
、その結果、呈色時間が短縮され、呈色感度が増大し、
更に、呈色の経時的な褪色が抑えられ、簡便性および迅
速性が要求される臨床検査に有用である。

〔具体的な実施例〕

スＪＬＬＬ 高速攪拌機で微細分散させることにより下記組成のウロ
ビリノーゲン検出用組成物を調製した後、スクリーン印
刷法により、厚み３００μｍの白色ポリスチレンシート
上に一辺が５１ＩＩＩＯの正方形を印刷し、印刷後４０
’Ｃの温度で３０分間乾燥した。印刷に使用した版の線
数は８ｏメツシユ、レジストおよびスクリーン紗の厚み
の合計は１８０μｍであった。乾燥後、所定の寸法に裁
断して検査用試験片を得た。

ウロビリノーゲン　　用 ｐ−ジエチルアミノベンズアルデヒド −・・・−一一一−−−−−−−・・・−−−−−一−
・２．４５重量部スルホサリチル酸−・・・・・・−−
−一−−・・・−−−−−−一・・−１２５重量部ラウ
リル酸ナトリウム・−・・・−・−・−２、４０Ｍ１部
ソルビタンモノラウレート（ＨＬＢ８．６）−・−・−
・−・・・・−・−・−・・・・・・・−１，３重量部
カフェイン−・・・−・−・・・−・・・−・−・・−
・・−・−・・−−−一一−−−曲一曲１６ｍｆｆｔ部
メチルビニルエーテル／無水マレイン酸共重合体（ＧＡ
Ｆ社製、ガントレンツＡＮ−１６９）のアミルアルコー
ルハーフェステル・−・−・−・−・・・−・・−・・
−・−・・−・・・−−−−一・−・−・−・・・−７
５重量部エチレングリコールモノメチルエーテル・・・
−〜・・−・・・・−−−−−−・・−・・−・−・・
−４２１Ｎ部エチレングリコールモノメチルエーテルア
セテート−・−・・・・・−・・−・−−−−一−・−
・・・−・・・・・・・−・−１２５量部カルボキシメ
チルセルロースナトリウムー−−−−一〜−−−−−−
−・・・・−・・・・−・−・−・・・・・・−・・３
１量部微結晶セルロース（脂化成製、アビセルＴ　Ｇ　
−Ｄ　）−−−・・・・−・−・−−−−−−−−・−
−−一−−・−−−一−−・１５６重量部被検査液とし
て、 ■　正常尿 ■　Ｉ　ＥＵ／ａ　ｔｔウロビリノーゲン含有尿■　５
ＥＵ／ｄ６ウロビリノーゲン含有尿（いずれも、ＥＵは
エールリッヒ単位を意味する。・） の３種類を準備し、上記で得られた検査用試験片を■〜
■の被検査液中に浸漬し、浸漬後直ちに取り出して６０
秒間静置した後の呈色を観察し、下記の結果を得た。

■・・・・−・・・淡黄色 ■−・・・−・・・−・淡桃色 ■−・・・−・−赤橙色 また、上記の呈色は１２０秒後も変化しなかった。

！ＪＬｆＬＬ 実施例１で準備したウロビリノーゲン検出用組成物中、
ソルビタンモノラウレートに代えてソルビタンモノオレ
エート（ＨＬＢ４．３）およびポリオキシエチレン（２
０）ソルビタンモノオレエート（ＨＬＢ１５．Ｏ＞を混
合して使用し、その他は実施例１と同様にして、ＨＬＩ
３９．０のインキを調製し、検査用試験片を製造し、被
検査液■〜■を使用して呈色させた結果は次のとおりで
あった。

■−−−−−−−−−−淡黄色 ■−・・・・−・淡桃色 ■−・・・・・・−赤橙色 また、上記の呈色は１２０秒後も変化しなかった。

上Ｊえ貫１１ 実施例１で準備したウロビリノーゲン検出用組成物中、
ソルビタンモノラウレートに代えてソルビタンモノオレ
エート　（ＨＬＢ４．３）およびポリオキシエチレン（
２０）ソルビタンモノオレエート（ＨＬＢ１５．Ｏ）を
混合して使用し、その他は実施例Ｉと同様にして、ＨＬ
Ｂ５．０のインキを調製し、検査用試験片を製造し、被
検査液■〜■を使用して呈色させた結果は次のとおりで
あった。

■・・−・・・・−淡黄色（変わらず）■−・・−・・
・・淡黄色（淡黄桃色）■・・−・−・・・・淡黄桃色
（濃赤橙色）また、１２０秒後には、ウロビリノーゲン
を検出したものは色が変化した。

■〜■共（）内は１２０秒後の色を示す。

、工Ｊし医」工 実施例１の組成中、ソルビタンモノラウレートのみを除
いたウロビリノーゲン検出用組成物を１！備し、実施例
１と同様に呈色を行なわせた結果は次のとおりであった
。

■・・−・−・−淡黄色（変わらず） ■・−・・−・・淡黄色（淡黄桃色） ■・・−・・−・−・淡黄桃色（淡桃色）また、１２０
秒後には、ウロビリノーゲンを検出したものは色が変化
した。

Φ〜■共（）内は１２０秒後の色を示す。

上皿■↓ 実施例１の組成中、ラウリル硫酸ナトリウムのみを除い
たウロビリノーゲン検出用組成物を準備し、実施例１と
同様に呈色を行なわせた結果は次のとおりであった。

■・−・・・−・−・淡黄色（変わらず）■・−・−・
・・−淡黄桃色（淡桃色）■−・・−・・・・濃赤橙色
（赤橙色）また、１２０秒後には、ウロビリノーゲンを
検出したものは色が変化した。

■〜■共（）内は１２０秒後の色を示す。

手　　続　　補　　正　　書く自発） 昭和６２年１２月２２日 １、事件の表示 昭和６２年特許願第　７５６７７号 ２、発明の名称 ウロビリノーゲン検出用組成物およびそれを用いた検査
体３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所　　　菫罪酋輩貿笛暫ｙＩＯ秘緒牌晋１港１芽名称
　（２８９）龍梨砧ｋ”ｊ好間柱 代表者　　１ｒ　　鼠　装　掟 ４、代理人〒１６２ 住所　　東京都新宿区市谷加賀町−丁目１番１号（自発
） ６、補正により増加する発明の数 Ｔｌ）特許請求の範囲を別紙のとおり補正する。

（２）明細書第６頁最下行の「以上」をｒ以下」と補正
する。

（３）明細書第１Ｏ頁第７行目の「ドデシル」と「スル
ホン酸」との間に［ベンゼン」を挿入する。

以　　上 特許請求の範囲 （１）　　エールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、
吸水性担体粉末、および反応賦活剤が非水溶媒中に溶解
もしくは分散されていることを特徴とするウロビリノー
ゲン検出用組成物。

（２）　　反応賦活剤が陰イオン性界面活性剤およびＨ
ＬＢ６．０〜１１．０の非イオン性界面活性剤であるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載のウロビ
リノーゲン検出用組成物。

（３）　　陰イオン性界面活性剤がラウリル硫酸ナトリ
ウム、もしくはドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム
であることを特徴とする特許請求の範囲第（２）項記載
のウロビリノーゲン検出用組成物。

（４）　　エールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、
吸水性担体粉末、および反応賦活剤からなる組成物が支
持体上に塗布されていることを特徴とするとするウロビ
リノーゲン検査体。

（５）　　反応賦活剤が陰イオン性界面活性剤およびＨ
ＬＢ６．０〜１１．０の非イオン性界面活性剤であるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第（４）項記載のウロビ
リノーゲン検査体。

（６）　　陰イオン性界面活性剤がラウリル硫酸ナトリ
ウム、もしくはドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム
であることを特徴とする特許請求の範囲第（５）項記載
のウロビリノーゲン検査体。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）エールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、吸水
   性担体粉末、および反応賦活剤が非水溶媒中に溶解もし
   くは分散されていることを特徴とするウロビリノーゲン
   検出用組成物。
2. （２）反応賦活剤が陰イオン性界面活性剤およびＨＬＢ
   ６．０〜１１．０の非イオン性界面活性剤であることを
   特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載のウロビリノ
   ーゲン検出用組成物。
3. （３）陰イオン性界面活性剤がラウリル硫酸ナトリウム
   、もしくはドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムであ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第（２）項記載のウ
   ロビリノーゲン検出用組成物。
4. （４）エールリッヒ試薬、強酸性緩衝剤、結合材、吸水
   性担体粉末、および反応賦活剤からなる組成物が支持体
   上に塗布されていることを特徴とするとするウロビリノ
   ーゲン検査体。
5. （５）反応賦活剤が陰イオン性界面活性剤およびＨＬＢ
   ６．０〜１１．０の非イオン性界面活性剤であることを
   特徴とする特許請求の範囲第（４）項記載のウロビリノ
   ーゲン検査体。
6. （６）陰イオン性界面活性剤がラウリル硫酸ナトリウム
   、もしくはドデシルスルホン酸ナトリウムであることを
   特徴とする特許請求の範囲第（５）項記載のウロビリノ
   ーゲン検査体。