JPS6326089B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPS6326089B2 JPS6326089B2 JP54044270A JP4427079A JPS6326089B2 JP S6326089 B2 JPS6326089 B2 JP S6326089B2 JP 54044270 A JP54044270 A JP 54044270A JP 4427079 A JP4427079 A JP 4427079A JP S6326089 B2 JPS6326089 B2 JP S6326089B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- filter
- blood cells
- leukocytes
- white blood
- blood
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は白血球の捕捉・採取用フイルターに関
する。
する。
更に詳しく述べると、血液、体液またはこれら
を処理して得られる血球浮遊液から白血球を簡単
な操作で短時間に捕捉・採取できるフイルターに
関するものである。
を処理して得られる血球浮遊液から白血球を簡単
な操作で短時間に捕捉・採取できるフイルターに
関するものである。
近年、血液学、免疫学の進歩に伴ない、従来の
全血輸血に代わる血液の成分輸血、白血球の機能
検査、白血球の表面抗原の検査等を行ない各種疾
患の治療、診断等に応用することが各地の病院、
研究機関で行なわれている。
全血輸血に代わる血液の成分輸血、白血球の機能
検査、白血球の表面抗原の検査等を行ない各種疾
患の治療、診断等に応用することが各地の病院、
研究機関で行なわれている。
この様な目的に使用可能な従来の白血球の捕
捉、採取技術としては、赤血球凝集剤を用いる方
法、遠心分離法、血球の繊維への粘着力を利用す
る方法等がある。
捉、採取技術としては、赤血球凝集剤を用いる方
法、遠心分離法、血球の繊維への粘着力を利用す
る方法等がある。
更に詳しく述べると、赤血球凝集剤を用いる方
法は血液にデキストランやヒドロキシエチルスタ
ーチなどの赤血球凝集剤を加え、一定時間放置後
に白血球に富んだ上清を得る方法であり、遠心分
離方法は血液を遠心分離して白血球に富むバツフ
イーコートを採取する方法、比重1.077の液体に
血液を重層後、遠心分離を行ないリンパ球層を回
収する密度勾配遠心分離方法等である。繊維への
粘着力を利用する既知の方法は繊維に単球・顆粒
球を付着させ、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩
水等により付着した血球を回収する方法、凝集剤
や遠心分離の使用により白血球に富む分画を得、
その後この白血球分画をナイロン、ガラスウール
等の繊維を詰めたカラムに入れ、37℃に保温し30
分位放置した後リンパ球を回収する方法である。
法は血液にデキストランやヒドロキシエチルスタ
ーチなどの赤血球凝集剤を加え、一定時間放置後
に白血球に富んだ上清を得る方法であり、遠心分
離方法は血液を遠心分離して白血球に富むバツフ
イーコートを採取する方法、比重1.077の液体に
血液を重層後、遠心分離を行ないリンパ球層を回
収する密度勾配遠心分離方法等である。繊維への
粘着力を利用する既知の方法は繊維に単球・顆粒
球を付着させ、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩
水等により付着した血球を回収する方法、凝集剤
や遠心分離の使用により白血球に富む分画を得、
その後この白血球分画をナイロン、ガラスウール
等の繊維を詰めたカラムに入れ、37℃に保温し30
分位放置した後リンパ球を回収する方法である。
しかし、これらの方法には次の様な欠点があつ
た。すなわち、赤血球凝集剤を用いる方法は比較
的簡便な操作により白血球の浮遊液が得られる
が、この浮遊液には、白血球の数倍の赤血球、数
十倍の血小板及び多量の血漿と赤血球凝集剤が含
まれており、輸血用にはもちろんのこと、検査用
としても、そのまま白血球浮遊液として使えるも
のではなかつた。実際に使用できる状態の白血球
浮遊液にする為には、数回の洗浄操作や混入不純
物除去の為の様々な操作が必要であり、結局、多
大な時間と手間がかかつてしまう。遠心分離法
は、輸血用に必要な血液量を処理する為には大型
の遠心分離器が必要であり、検査用程度の少量の
血液を処理するだけでも、かなり高価な遠心分離
器が必要となる。また、得られた白血球中の不純
物を除去する為には更に数回の遠心分離操作を必
要とし、これらの操作を行なう際、一部の白血球
は破壊され、白血球の回収率が悪くなつてしま
う。更に、非常に煩雑な操作である為、無菌的な
操作が難しく、熟練者でも多大な労力と時間を必
要とした。繊維への血球の粘着力を利用する従来
の方法は、一般にリンパ球の繊維への粘着能が弱
い為白血球全体を一度に分離することはできなか
つた。
た。すなわち、赤血球凝集剤を用いる方法は比較
的簡便な操作により白血球の浮遊液が得られる
が、この浮遊液には、白血球の数倍の赤血球、数
十倍の血小板及び多量の血漿と赤血球凝集剤が含
まれており、輸血用にはもちろんのこと、検査用
としても、そのまま白血球浮遊液として使えるも
のではなかつた。実際に使用できる状態の白血球
浮遊液にする為には、数回の洗浄操作や混入不純
物除去の為の様々な操作が必要であり、結局、多
大な時間と手間がかかつてしまう。遠心分離法
は、輸血用に必要な血液量を処理する為には大型
の遠心分離器が必要であり、検査用程度の少量の
血液を処理するだけでも、かなり高価な遠心分離
器が必要となる。また、得られた白血球中の不純
物を除去する為には更に数回の遠心分離操作を必
要とし、これらの操作を行なう際、一部の白血球
は破壊され、白血球の回収率が悪くなつてしま
う。更に、非常に煩雑な操作である為、無菌的な
操作が難しく、熟練者でも多大な労力と時間を必
要とした。繊維への血球の粘着力を利用する従来
の方法は、一般にリンパ球の繊維への粘着能が弱
い為白血球全体を一度に分離することはできなか
つた。
そこで我々は、血液から簡単な操作で、純度、
収率良く白血球を捕捉、採取することを目的に鋭
意研究した結果、平均孔径が５から20μｍの多孔
質フイルターが白血球を良く捕捉し、捕捉された
白血球の回収も簡単な操作で行なえることを見出
し本発明を得るに至つた。
収率良く白血球を捕捉、採取することを目的に鋭
意研究した結果、平均孔径が５から20μｍの多孔
質フイルターが白血球を良く捕捉し、捕捉された
白血球の回収も簡単な操作で行なえることを見出
し本発明を得るに至つた。
すなわち本発明は、平均孔径が５から20μｍの
連続細孔を有する多孔質フイルターを主要部とす
る白血球の捕捉、採取用フイルターである。
連続細孔を有する多孔質フイルターを主要部とす
る白血球の捕捉、採取用フイルターである。
ここで、多孔質フイルターの材質は血球にダメ
ージを与えにくいものであれば何でも使えるが、
合成ゴム、合成樹脂の発泡体等が孔径を調節し易
く使い易い。
ージを与えにくいものであれば何でも使えるが、
合成ゴム、合成樹脂の発泡体等が孔径を調節し易
く使い易い。
以下図面を用いて本発明を説明する。第１図
は、本発明に用いる多孔質フイルターの断面の模
式図である。本発明で言う多孔質フイルターと
は、第１図の様に細孔１がランダムに開いてい
て、その細孔が多孔質構造物２の表面から他の表
面まで連続している物を言い、多孔質と言つても
必ずしもフレキシブルである必要は無い。平均孔
径とは、多孔質フイルターを任意に切断し断面全
体に分散している細孔の各々について直径を測定
して直径と細孔の数との関係を調べたときに、最
も数の多い細孔の円に換算した直径を表わすもの
である。すなわち、多孔質フイルターの任意の切
断面に分散する細孔はいろいろな形で、その直径
もさまざまであるが、個々の細孔をその細孔の断
面積と同じ面積の円に換算し、その直径を横軸に
とり、縦軸に細孔の数をとつてグラフを描くと一
般に正規分布に近い曲線となる。このとき細孔は
ランダムに1000個以上数えるのが好ましい。そし
て、その曲線のピークに当る直径が本発明で言う
平均孔径である。従つて多孔質フイルターに様々
な粒子を通した時に多孔質フイルターの平均直径
以上の直径の粒子は通過し難いという径を表わす
ものであつて、これ以上の直径の粒子は絶体に通
過しないというものでは無い。
は、本発明に用いる多孔質フイルターの断面の模
式図である。本発明で言う多孔質フイルターと
は、第１図の様に細孔１がランダムに開いてい
て、その細孔が多孔質構造物２の表面から他の表
面まで連続している物を言い、多孔質と言つても
必ずしもフレキシブルである必要は無い。平均孔
径とは、多孔質フイルターを任意に切断し断面全
体に分散している細孔の各々について直径を測定
して直径と細孔の数との関係を調べたときに、最
も数の多い細孔の円に換算した直径を表わすもの
である。すなわち、多孔質フイルターの任意の切
断面に分散する細孔はいろいろな形で、その直径
もさまざまであるが、個々の細孔をその細孔の断
面積と同じ面積の円に換算し、その直径を横軸に
とり、縦軸に細孔の数をとつてグラフを描くと一
般に正規分布に近い曲線となる。このとき細孔は
ランダムに1000個以上数えるのが好ましい。そし
て、その曲線のピークに当る直径が本発明で言う
平均孔径である。従つて多孔質フイルターに様々
な粒子を通した時に多孔質フイルターの平均直径
以上の直径の粒子は通過し難いという径を表わす
ものであつて、これ以上の直径の粒子は絶体に通
過しないというものでは無い。
また、多孔質フイルターは、多孔質構造物に比
べて細孔の空隙率が高い事が望ましく、細孔の孔
径分布も狭い方が望ましい。
べて細孔の空隙率が高い事が望ましく、細孔の孔
径分布も狭い方が望ましい。
以下、例を上げて本発明白血球の捕捉・採取用
フイルターを説明する。第２図は本発明白血球の
捕捉、採取用フイルターの一例を示す模式図であ
り、第３図は本発明白血球の捕捉・採取用フイル
ターを使用する際の装置の一例を示す模式図であ
る。
フイルターを説明する。第２図は本発明白血球の
捕捉、採取用フイルターの一例を示す模式図であ
り、第３図は本発明白血球の捕捉・採取用フイル
ターを使用する際の装置の一例を示す模式図であ
る。
本発明白血球の捕捉・採取用フイルターは例え
ば第２図の様に入口３、出口４を持つ容器５内に
多孔質フイルター６が収容されて構成される。こ
のフイルターを実際に使用する際には例えば第３
図の様な実験装置が用いられる。血液から白血球
を採取する実験を例にとつて説明すると、先ず血
液７はポンプ８により白血球の捕捉・採取用のフ
イルター９に送られ、ここで白血球が捕捉され、
赤血球、血漿等はフイルター９では捕捉されずに
容器１０に送られる。
ば第２図の様に入口３、出口４を持つ容器５内に
多孔質フイルター６が収容されて構成される。こ
のフイルターを実際に使用する際には例えば第３
図の様な実験装置が用いられる。血液から白血球
を採取する実験を例にとつて説明すると、先ず血
液７はポンプ８により白血球の捕捉・採取用のフ
イルター９に送られ、ここで白血球が捕捉され、
赤血球、血漿等はフイルター９では捕捉されずに
容器１０に送られる。
フイルター９で白血球が選択的に捕捉される理
由は白血球の粘着性によるものと、細孔による
過の２種類によるもので、赤血球は粘着能が低い
事と変形能が高いことから、このフイルター９に
は殆んど捕捉されない。また、白血球の粘着性と
細孔による過の２種類によつて白血球を捕捉し
ている為、一般のメンブレンフイルターによくみ
られる目詰まりを起こすことが非常に少なく、ま
た、白血球の粘着性だけを利用するフイルターの
様にリンパ球が多量に洩れ出してしまうことも殆
んど無い。
由は白血球の粘着性によるものと、細孔による
過の２種類によるもので、赤血球は粘着能が低い
事と変形能が高いことから、このフイルター９に
は殆んど捕捉されない。また、白血球の粘着性と
細孔による過の２種類によつて白血球を捕捉し
ている為、一般のメンブレンフイルターによくみ
られる目詰まりを起こすことが非常に少なく、ま
た、白血球の粘着性だけを利用するフイルターの
様にリンパ球が多量に洩れ出してしまうことも殆
んど無い。
次に容器１１内の血液７が空になつた時点で血
液の導入管１２を洗浄液１３に入れ、フイルター
９内に残存する赤血球、血漿等を洗い流してや
り、その後フイルター９内に捕捉された白血球を
適当な方法で回収してやることにより、白血球が
純度、収率良く採取される。ここで洗浄液１３
は、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水等で良
い。また、血液７の代わりに何らかの方法で単
球・顆粒球を除去した血液を用いれば、フイルタ
ー９に捕捉される血球はリンパ球のみであり、リ
ンパ球が純度収率良く採取できることは言うまで
も無い。
液の導入管１２を洗浄液１３に入れ、フイルター
９内に残存する赤血球、血漿等を洗い流してや
り、その後フイルター９内に捕捉された白血球を
適当な方法で回収してやることにより、白血球が
純度、収率良く採取される。ここで洗浄液１３
は、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水等で良
い。また、血液７の代わりに何らかの方法で単
球・顆粒球を除去した血液を用いれば、フイルタ
ー９に捕捉される血球はリンパ球のみであり、リ
ンパ球が純度収率良く採取できることは言うまで
も無い。
この様に本発明白血球の捕捉・回収用フイルタ
ーを使用することにより、簡単な操作で、短時間
のうちに、純度、収率良く白血球を捕捉・採取す
ることができる様になつた。
ーを使用することにより、簡単な操作で、短時間
のうちに、純度、収率良く白血球を捕捉・採取す
ることができる様になつた。
ここで、多孔質フイルターの平均孔径は５から
20μｍの範囲であり、白血球の純度・収率の両面
からみて、10〜15μｍが好ましい。平均孔径が5μ
ｍ以下になると、フイルターに残存する赤血球が
急激に増えて来るとともにフイルターが目詰まり
を起こし易くなり、事実上、白血球の捕捉・採取
を目的とするフイルターとして使い難くなつてし
まい、また平均孔径が20μｍを越えると、今度は
粘着能が低いリンパ球がフイルターから洩れ易く
なつてしまい、白血球全体を捕捉・回収するのが
難かしくなつてしまう。
20μｍの範囲であり、白血球の純度・収率の両面
からみて、10〜15μｍが好ましい。平均孔径が5μ
ｍ以下になると、フイルターに残存する赤血球が
急激に増えて来るとともにフイルターが目詰まり
を起こし易くなり、事実上、白血球の捕捉・採取
を目的とするフイルターとして使い難くなつてし
まい、また平均孔径が20μｍを越えると、今度は
粘着能が低いリンパ球がフイルターから洩れ易く
なつてしまい、白血球全体を捕捉・回収するのが
難かしくなつてしまう。
尚、多孔質フイルターの細孔孔径の不均一性に
起因する捕捉したい血球の洩れ過ぎを防ぐ為、多
孔質フイルターの厚み、すなわち、多孔質フイル
ターの血液の入口から出口までの直線距離を10mm
以上とする。
起因する捕捉したい血球の洩れ過ぎを防ぐ為、多
孔質フイルターの厚み、すなわち、多孔質フイル
ターの血液の入口から出口までの直線距離を10mm
以上とする。
実施例 １
平均孔径が15μｍのポリエステル発泡体を内径
20mm、長さ100mmの容器に入れて、白血球の捕
捉・採取用のフイルターとして用いた。また実験
装置としては第３図に示すものを用いた。このフ
イルターに健康人のヘパリン加血液50mlを５ml／
minの流速で流し、次に生理食塩水を同じ流速で
流して血液を洗浄し、合計150mlの液を得た。
この液には白血球はもとの血液の７％しか含ま
れていなかつたが赤血球は99.7％含まれていた。
この後フイルターに血漿を含む生理的溶液50mlを
流速５ml／minの流速で流し、フイルターに振動
を与えながら、フイルター内の白血球を回収し
た。回収した液を調べたところ、白血球はもとの
血液の55％が回収されており、赤血球は0.2％、
血小板は７％であつた。
20mm、長さ100mmの容器に入れて、白血球の捕
捉・採取用のフイルターとして用いた。また実験
装置としては第３図に示すものを用いた。このフ
イルターに健康人のヘパリン加血液50mlを５ml／
minの流速で流し、次に生理食塩水を同じ流速で
流して血液を洗浄し、合計150mlの液を得た。
この液には白血球はもとの血液の７％しか含ま
れていなかつたが赤血球は99.7％含まれていた。
この後フイルターに血漿を含む生理的溶液50mlを
流速５ml／minの流速で流し、フイルターに振動
を与えながら、フイルター内の白血球を回収し
た。回収した液を調べたところ、白血球はもとの
血液の55％が回収されており、赤血球は0.2％、
血小板は７％であつた。
実施例 ２
平均孔径が10μｍのポリエーテルウレタン発泡
材を内径10mm、長さ25mmの容器に入れて白血球の
捕捉・採取用フイルターとして用いた。このフイ
ルターに健康人のヘパリン加血液からポリアミド
繊維により、単球・顆粒球のほとんどを除いた血
液（白血球中のリンパ球の比率は95％であつた）
２mlを流速４mlで流し、その後15mlの生理食塩水
を同じ流速で流し、フイルター内の赤血球を洗浄
した。この後、フイルターに２mlの生理食塩水を
急速に流し、フイルター内の白血球を回収した。
回収した液を検査したところ、白血球中のリンパ
球の比率は95％、すなわち、純度95％のリンパ球
が単球、顆粒球のほとんどを除いた血液に対して
60％の回収率で得られた。また、このときの混入
赤血球はもとの血液に対して0.5％、混入血小板
は0.8％であつた。
材を内径10mm、長さ25mmの容器に入れて白血球の
捕捉・採取用フイルターとして用いた。このフイ
ルターに健康人のヘパリン加血液からポリアミド
繊維により、単球・顆粒球のほとんどを除いた血
液（白血球中のリンパ球の比率は95％であつた）
２mlを流速４mlで流し、その後15mlの生理食塩水
を同じ流速で流し、フイルター内の赤血球を洗浄
した。この後、フイルターに２mlの生理食塩水を
急速に流し、フイルター内の白血球を回収した。
回収した液を検査したところ、白血球中のリンパ
球の比率は95％、すなわち、純度95％のリンパ球
が単球、顆粒球のほとんどを除いた血液に対して
60％の回収率で得られた。また、このときの混入
赤血球はもとの血液に対して0.5％、混入血小板
は0.8％であつた。
以上述べた様に、本発明白血球の捕捉・採取用
フイルターを用いる事により、簡便な操作で、短
時間のうちに、純度、収率ともに良く白血球を捕
捉・採取できる様になつた。また、本発明白血球
捕捉・採取用フイルターは密閉回路を構成するこ
とが容易で無菌的操作も非常に簡便になつた。
フイルターを用いる事により、簡便な操作で、短
時間のうちに、純度、収率ともに良く白血球を捕
捉・採取できる様になつた。また、本発明白血球
捕捉・採取用フイルターは密閉回路を構成するこ
とが容易で無菌的操作も非常に簡便になつた。
第１図は本発明における多孔質フイルターの断
面の模式図であり第２図は本発明白血球の捕捉・
採取用フイルターの一例を示す模式図であり、第
３図は本発明白血球の捕捉・採取用フイルターを
使用する際の装置の一例を示す模式図である。 １……細孔、２……多孔質構造物、３……入
口、４……出口、５，１０，１１……容器、６…
…多孔質フイルター、７……血液、８……ポン
プ、９……白血球の捕捉・採取用フイルター、１
２……血液の導入管、１３……洗浄液。
面の模式図であり第２図は本発明白血球の捕捉・
採取用フイルターの一例を示す模式図であり、第
３図は本発明白血球の捕捉・採取用フイルターを
使用する際の装置の一例を示す模式図である。 １……細孔、２……多孔質構造物、３……入
口、４……出口、５，１０，１１……容器、６…
…多孔質フイルター、７……血液、８……ポン
プ、９……白血球の捕捉・採取用フイルター、１
２……血液の導入管、１３……洗浄液。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 平均孔径が５から20ミクロンメートル（μ
ｍ）の連続細孔を有する多孔質フイルターを主要
部とする白血球の捕捉・採取用フイルター。 ２ 多孔質フイルターの厚みが10mm以上である特
許請求の範囲第１項記載の白血球の捕捉・採取用
フイルター。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4427079A JPS55136955A (en) | 1979-04-13 | 1979-04-13 | Filter for catching and gathering leucocyte |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4427079A JPS55136955A (en) | 1979-04-13 | 1979-04-13 | Filter for catching and gathering leucocyte |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS55136955A JPS55136955A (en) | 1980-10-25 |
| JPS6326089B2 true JPS6326089B2 (ja) | 1988-05-27 |
Family
ID=12686815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4427079A Granted JPS55136955A (en) | 1979-04-13 | 1979-04-13 | Filter for catching and gathering leucocyte |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS55136955A (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6475014A (en) * | 1987-09-18 | 1989-03-20 | Terumo Corp | Filter for separating leukocytes |
| JPS6475015A (en) * | 1987-09-18 | 1989-03-20 | Terumo Corp | Filter for separating leukocytes |
| IL88081A0 (en) * | 1987-10-20 | 1989-06-30 | Pall Corp | Device and method for depletion of the leucocyte content of blood and blood components |
| US7169547B2 (en) | 1994-12-05 | 2007-01-30 | New York Blood Center, Inc. | High concentration white blood cells as a therapeutic product |
| IL137077A (en) | 2000-06-28 | 2003-05-29 | Teva Medical Ltd | Leukoreduction filter |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3765536A (en) * | 1970-11-10 | 1973-10-16 | Pall Corp | Blood filter cascade |
| JPS5444007A (en) * | 1977-09-12 | 1979-04-07 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Heamtocyte separator |
| JPS5936886B2 (ja) * | 1977-09-12 | 1984-09-06 | 旭化成株式会社 | 白血球の分離方法 |
-
1979
- 1979-04-13 JP JP4427079A patent/JPS55136955A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS55136955A (en) | 1980-10-25 |
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