JPS635400B2

JPS635400B2 -

Info

Publication number: JPS635400B2
Application number: JP6033779A
Authority: JP
Inventors: Nobuyuki Yamatsugu; Motohiko Kato
Original assignee: Kikkoman Corp
Current assignee: Kikkoman Corp
Priority date: 1979-05-18
Filing date: 1979-05-18
Publication date: 1988-02-03
Also published as: JPS55153798A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、一般式（式中Ｒはカルバモイル基又はカルボキシル基
を意味する）で表わされる新規な２−置換−アデ
ノシン−3′，5′−環状リン酸（以下アデノシン−
3′，5′−環状リン酸をCAMPと略称する）に関す
る。

式の化合物は、抗アレルギー作用、中枢神経
興奮作用、血小板凝集作用、利尿作用、循環器系
に対する作用（例えば血圧降下作用、心筋抑制作
用等）、さらに制癌作用等の優れた薬理作用を有
し、医薬として有用である。

式の新規化合物は、一般式（式中R′はシアノ基、カルバモイル基又はカ
ルボキシル基を意味する）で表わされる２−置換
−１，N⁶−エテノ−アデノシン−3′，5′−環状リ
ン酸にハロゲン化剤を作用させることにより製造
することができる。Ｒがカルボキシル基である式
の化合物は、Ｒがカルバモイル基である式の
化合物のアルカリ水解によつても製造できる。

式の化合物は、例えば特願昭54−58006号明
細書に記載の方法により、一般式（式中Ｘはハロゲン原子を意味する）で表わさ
れる化合物をシアン化し、得られた２−シアノ−
１，N⁶−エテノ−アデノシン−3′，5′−環状リン
酸（以下１，N⁶−エテノ−アデノシン−3′，5′−
環状リン酸をεCAMPと略称する）をアルカリ水
解することにより得られる。

式の化合物は、例えば２−メルカプト−
εCAMPをハロゲン化することにより得られ（特
開昭53−12891号明細書参照）、例えば２−ヨード
−εCAMP、２−クロロ−εCAMP又は好ましく
は２−ブロモ−εCAMPが用いられる。

式の化合物のシアン化反応は、好ましくは極
性有機溶媒例えばＮ，N′−ジメチルホルムアミ
ド等の存在下に、シアン化アルカリ例えばシアン
化カリウム、シアン化ナトリウム等を用いて、一
般に室温ないし60℃の温度において数時間ないし
数日間行われる。

２−シアノ−εCAMPのアルカリ水解は、通常
は水、アルコール等の親水性溶媒の中で塩基性物
質、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、
アンモニア、有機アミン等を用いて行われる。

アルカリ水解条件、例えばアルカリ性の強さ
（PH）、反応時間などにより、２−シアノ−
εCAMPから２−カルバモイル−εCAMP、次い
で２−カルボキシ−εCAMPが、あるいは直接に
２−カルボキシ−εCAMPが得られる。例えば２
−シアノ−εCAMPをPH10〜13でアルカリ水解す
ると、一般に０〜40℃で数分ないし数時間で２−
カルバモイル−εCAMPが得られる。この反応混
合物をさら長時間反応させるか、あるいは追加量
の塩基性物質を添加してPH12〜13.5にすると、２
−カルボキシ−εCAMPが得られる。２−シアノ
−εCAMP、２−カルバモイル−εCAMP又は両
者の混合物をPH12〜13.5でアルカリ水解すると、
一般に０〜40℃で数分ないし数時間で２−カルボ
キシ−εCAMPが得られる。

本発明の化合物（）は、出発物質（）にハ
ロゲン化剤を作用させて脱エテノ化することによ
り得られる。脱エテノ反応は、出発物質（）を
好ましくは溶媒に溶解もしくは懸濁し、ハロゲン
化剤を添加して一般に０℃以上、好ましくは０〜
40℃において10時間以内、好ましくは１〜60分
間、好ましくは撹拌下に行われる。反応終了後、
塩基性物質好ましくは水酸化ナトリウム、水酸化
カリウム等を添加して、反応混合物をアルカリ性
にすることにより、目的物質（）の収量を著し
く増加させることができる。その際液性を一般に
PH10以上、好ましくはPH10〜13となし、数分ない
し数時間撹拌することが特に有利である。

ハロゲン化剤としては、例えば臭素、塩素、Ｎ
−クロロサクシンイミド、Ｎ−ブロモサクシンイ
ミド等が用いられ、収率及び取り扱いの点でＮ−
ブロモサクシンイミドが好ましい。ハロゲン化剤
の使用量は、式の化合物に対し一般に等モル以
上であり、１〜６倍モル量が好ましい。

溶媒としては、出発物質（）及びハロゲン化
剤を溶解もしくは懸濁し、しかもこれらの反応関
与体と化学的に反応しないものであればすべて使
用でき、例えば水、酸性溶液、緩衝液、有機溶剤
等が用いられる。酸性溶液としては、PH4.0以下
好ましくはPH0.1〜1.0の溶液、緩衝液としては、
PH0.1〜８好ましくはPH0.1〜4.0のもの、有機溶剤
としては、水と混合しうる任意の溶剤、例えばア
ルコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセ
トアミド、アセトン、ジオキサン等があげられ
る。これらの溶媒は単独で又は２種以上組合わせ
て使用することができる。

２−カルバモイル−CAMPは、２−シアノ−
εCAMPを脱エテノ化したのち、アルカリ水解す
ることによつても得られる。２−カルボキシ−
CAMPは、２−シアノ−εCAMPを脱エテノ化し
たのち、より高いPH範囲でアルカリ水解するか、
あるいは２−カルバモイル−CAMPをアルカリ
水解することによつても得られる。

２−シアノ−εCAMPの脱エテノ反応は、前記
と同様にして行われる。これに続くアルカリ水解
又は２−カルバモイル−CAMPのアルカリ水解
は、通常は水、アルコール等の親水性溶媒の中で
塩基性物質、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム、アンモニア、有機アミン等を用いて行わ
れる。

２−シアノ−εCAMPを脱エテノ化したのち、
反応混合物に塩基性物質を加えてPH10以上、好ま
しくはPH10〜13となし、一般に０〜40℃の温度に
おいて数分ないし数時間アルカリ水解すると、２
−カルバモイル−CAMPが得られる。２−シア
ノ−εCAMPの脱エテノ化反応混合物をPH12〜
13.5において、前記と同様の条件でアルカリ水解
すると、２−カルボキシ−CAMPが得られる。
また２−カルバモイル−CAMPをPH12〜13.5にお
いてアルカリ水解すると、一般に０〜40℃で数分
ないし数時間で２−カルボキシ−CAMPが得ら
れる。最後のアルカリ水解をより低いPHにおいて
行う場合には、２−カルボキシ−CAMPの生成
により長い反応時間を要する。

なお式の化合物の製造に用いられる出発物質
（例えば式及び式の化合物）は、いずれも環
状リン酸部が遊離酸ならびに塩の形であつてよ
い。塩としては、例えばアルカリ金属塩、アンモ
ニウム塩又は有機アンモニウム塩が用いられる。
またカルボキシル基をも有する出発物質の場合に
は、同様に遊離カルボン酸又はその塩として使用
できる。

式の目的物質の単離精製は常法により行わ
れ、操作条件により環状リン酸部及び／又はカル
ボキシル基における遊離酸又はその塩の形の式
の化合物が得られる。例えば活性炭、イオン交換
樹脂、アルミナ、シリカゲル等を用いるカラムク
ロマトグラフイー、例えばアルコール類、アセト
ン、ジオキサン等を用いる有機溶媒沈殿法、PH調
整による析出法などを単独で又は組合わせて用い
ることができる。

遊離酸型目的物質を塩に導き、あるいは塩を遊
離酸に導くには常法が用いられ、塩としては、例
えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属
塩、ならびにアンモニウム塩又は有機アンモニウ
ム塩例えばトリエチルアンモニウム塩、トリブチ
ルアンモニウム塩等があげられる。

出発物質の製造：例Ａ２−シアノ−εCAMP：２−ブロモ−εCAMP2.0ｇをジメチルホルムア
ミド500mlに懸濁し、これにシアン化カリウム1.0
ｇを添加し、充分混和したのち室温で16時間撹拌
下に反応させる。

反応終了後、反応混合物にダウエツクス50−
X8（H⁺型）を添加して中和したのち過し、
液を蒸発乾固する。残査を少量の水に溶解し、こ
れをダウエツクス50−X8（H⁺型、100〜200メツ
シユ）の充填されたカラム（1.4φ×30cm）を通過
させ、水で溶出し、次いで目的化合物を含有する
溶出区分を濃縮し、５℃に放置すると、２−シア
ノ−εCAMPが結晶化し、これを別して乾燥す
ると、２−シアノ−εCAMPの結晶1.11ｇが得ら
れる。

融点：191〜193℃（分解）元素分析：C₁₃H₁₁N₆O₆P・0.5H₂OとしてＣＨＮ理論値（％） 40.37 3.03 21.66 実測値（％） 40.31 3.10 21.71 紫外部吸収スペクトル： λ^0.1N-HCl _nax 242.5、249.0（肩）273.0（肩）、28
1.0、
294.0、333.5nm 例Ｂ２−カルバモイル−εCAMP：２−シアノ−εCAMP1.0ｇを0.7N水酸化ナト
リウム水溶液10mlに溶解し（PH12.9）、室温で５
分間撹拌下に反応させる。反応混合物のPHを濃塩
酸を用いて1.0に調整し、析出した結晶を取し、
少量の水で水洗して乾燥すると、２−カルバモイ
ル−εCAMPの結晶793mgが得られる。

融点：196〜199℃（分解）元素分析：C₁₃H₁₃N₆O₇P・H₂OとしてＣＨＮ理論値（％） 37.65 3.34 20.12 実測値（％） 37.68 3.62 20.29 紫外部吸収スペクトル： λ^0.1N-HCl _nax 239.5、278.0、308.5nm 例Ｃ２−カルボキシ−εCAMP：２−カルバモイル−εCAMP1.0ｇを1.3N−水
酸化ナトリウム水溶液10.0mlに溶解し（PH13.2）、
室温で20分間撹拌下に反応させたのち、反応混合
物のPHを濃塩酸を用いて1.0に調製する。析出し
た結晶を別したのち乾燥すると、２−カルボキ
シ−εCAMPの結晶843mgが得られる。

融点：200〜202℃（分解）元素分析：C₁₃H₁₂N₅O₈P・1.5H₂OとしてＣＨＮ理論値（％） 36.57 3.47 16.61 実測値（％） 36.79 3.54 16.51 紫外部吸収スペクトル： λ^0.1N-HCl _nax 237.5、276.5、284.0（肩）、306.0
（肩）
nm λ^0.1N-NaOH _nax 237.5、270.0（肩）、322.0nm 前記と同様に操作し、ただし２−カルバモイル
−εCAMPの代わりに２−シアノ−εCAMPを用
いると、２−カルボキシ−εCAMPが得られる。

実施例１２−カルバモイル−CAMP： (a) ２−カルバモイル−εCAMP500mgを0.1N−
塩酸500mlに溶解し、Ｎ−ブロモコハク酸イミ
ド250mgを添加し、室温で５分間撹拌下に反応
させる。

次いで反応混合物を、カラム（1.6φ×30cm）
に充填された活性炭に吸着させ、水洗したのち
エタノール／水／28％水酸化アンモニウム（容
量比10：10：１）を用いて溶出し、目的化合物
を含有する溶出区分を濃縮する。得られた濃縮
物をダウエツクス50−X8（H⁺型、100〜200メ
ツシユ）の充填されたカラムを通過させ、水で
溶出する。目的化合物を含有する溶出区分を濃
縮し、５℃に冷却すると、２−カルバモイル−
CAMPが結晶化し、これを別して乾燥する
と、２−カルバモイル−CAMPの結晶10mgが
得られる。

融点：213〜216℃（分解）元素分析：C₁₁H₁₃N₆O₇P・H₂OとしてＣＨＮ理論値（％） 33.85 3.85 21.54 実測値（％） 33.82 3.65 21.50 紫外部吸収スペクトル： λ^0.1N-HCl _nax 258.5（肩）265.0、295.0nm λ^0.1N-NaOH _nax 258.5（肩）、265.0、293.0nm (b) ２−カルバモイル−εCAMP500mgを0.1N−
塩酸500mlに溶解し、Ｎ−ブロモコハク酸イミ
ド250mgを添加し、室温で５分間撹拌下に反応
させたのち、6N−水酸化ナトリウム水溶液を
添加して反応混合物のPHを12.0に調整し、１時
間撹拌する。

次いで混合物のPHを濃塩酸を用いて2.0とな
し、カラム（1.6φ×30cm）に充填された活性炭
に吸着させ、水洗したのちエタノール／水／28
％水酸化アンモニウム（容量比10：10：１）を
用いて溶出し、目的化合物を含有する溶出区分
を濃縮する。以下(a)と同様に操作して精製する
と、２−カルバモイル−CAMPの結晶140mgが
得られる。

この生成物は、(a)で得られた化合物と同じ理
化学的性質を有する。

(c) ２−シアノ−εCAMP500mgを0.1N−塩酸500
mlに溶解し、Ｎ−ブロモコハク酸イミド250mg
を添加し、室温で５分間撹拌下に反応させたの
ち、6N−水酸化ナトリウム水溶液を添加して
反応混合物のPHを12.0に調整し、３時間撹拌す
る。

次いで混合物のPHを濃塩酸を用いて2.0とな
し、カラム（1.6φ×30cm）に充填された活性炭
に吸着させ、水洗したのちエタノール／水／28
％水酸化アンモニウム（容量比10：10：１）を
用いて溶出し、目的化合物を含有する溶出区分
を濃縮する。以下(a)と同様に操作して精製する
と、２−カルバモイル−CAMPの結晶103mgが
得られる。

得られた化合物の理化学的性質は、(a)は生成
物と一致した。

実施例２２−カルボキシ−CAMP： (a) ２−カルボキシ−εCAMP500mgを0.1N−塩
酸500mlに溶解し、これに、Ｎ−ブロモコハク
酸イミド250mgを添加し、室温で５分間撹拌下
に反応させたのち、反応混合物のPHを6N−水
酸化ナトリウム水溶液を用いて12.0に調製し、
１時間撹拌する。

次いで混合物のPHを濃塩酸を用いて2.0とな
し、カラム（1.6φ×30cm）に充填された活性炭
に吸着させ、水洗したのちエタノール／水／28
％水酸化アンモニウム（容量比10：10：１）を
用いて溶出し、目的化合物を含有する溶出区分
を濃縮する。得られた濃縮物をダウエツクス50
−X8（H⁺型、100〜200メツシユ）の充填され
たカラムを通過させ、水で溶出する。目的化合
物を含有する溶出区分を濃縮し、５℃に冷却す
ると、２−カルボキシ−CAMPが結晶化する。
この結晶を別して乾燥すると、２−カルボキ
シ−CAMPの結晶108mgが得られる。

融点：190〜193℃（分解）元素分析：C₁₁H₁₂N₅O₈P・1.5H₂OとしてＣＨＮ理論値（％） 33.00 3.75 17.50 実測値（％） 33.02 3.75 17.50 紫外部吸収スペクトル： λ^0.1N-HCl _nax 258.0（肩）、264.5、289.5nm λ^0.1N-NaOH _nax 258.0（肩）、263.5、290.0（肩
）nm (b) ２−カルバモイル−CAMP1.0ｇを1.3N−水
酸化ナトリウム水溶液10mlに溶解し（PH13.2）、
室温で20分間撹拌しつつ反応させたのち、反応
混合物のPHを濃塩酸を用いて1.0に調整する。
析出した結晶を別して乾燥すると、２−カル
ボキシ−CAMPの結晶450mgが得られる。

この生成物は、(a)で得られた化合物と同じ理化
学的性質を有する。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中Ｒはカルバモイル基又はカルボキシル基
を意味する）で表わされる２−置換−アデノシン
−3′，5′−環状リン酸。２一般式（式中R′はシアノ基、カルバモイル基又はカ
ルボキシル基を意味する）で表わされる２−置換
−１，N⁶−エテノ−アデノシン−3′，5′−環状リ
ン酸にハロゲン化剤を作用させることを特徴とす
る、一般式（式中Ｒはカルバモイル基又はカルボキシル基
を意味する）で表わされる２−置換−アデノシン
−3′，5′−環状リン酸の製法。３ハロゲン化剤を作用させたのち、反応混合物
をアルカリ性にすることを特徴とする、特許請求
の範囲第２項に記載の方法。４２−シアノ−１，N⁶−エテノ−アデノシン
−3′，5′−環状リン酸にハロゲン化剤を作用さ
せ、次いでアルカリ水解することを特徴とする、
特許請求の範囲第２項に記載の製法。５アルカリ水解をPH10以上で行うことを特徴と
する、特許請求の範囲第４項に記載の方法。６２−カルバモイル−アデノシン−3′，5′−環
状リン酸をアルカリ水解することを特徴とする、
２−カルボキシ−アデノシン−3′，5′−環状リン
酸の製法。７アルカリ水解をPH12〜13.5の範囲で行うこと
を特徴とする、特許請求の範囲第６項に記載の製
法。