KR20200041993A - 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법 - Google Patents

항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20200041993A
KR20200041993A KR1020207008823A KR20207008823A KR20200041993A KR 20200041993 A KR20200041993 A KR 20200041993A KR 1020207008823 A KR1020207008823 A KR 1020207008823A KR 20207008823 A KR20207008823 A KR 20207008823A KR 20200041993 A KR20200041993 A KR 20200041993A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound represented
formula
equation
antibody
manufacturing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
KR1020207008823A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102816741B1 (ko
Inventor
다츠야 야마구치
다카시 고우코
시게루 노구치
요헤이 야마네
후미카츠 곤도
다카히로 아오키
다다히로 다케다
고헤이 사카니시
히토시 사토
츠요시 우에다
신지 마츠우라
게이 구라하시
유타카 기타가와
다츠야 나카무라
Original Assignee
다이이찌 산쿄 가부시키가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 filed Critical 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤
Priority to KR1020257017894A priority Critical patent/KR20250084239A/ko
Publication of KR20200041993A publication Critical patent/KR20200041993A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102816741B1 publication Critical patent/KR102816741B1/ko
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/444—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having two doubly-bound oxygen atoms directly attached in positions 2 and 5
    • C07D207/448—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having two doubly-bound oxygen atoms directly attached in positions 2 and 5 with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. maleimide
    • C07D207/452—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having two doubly-bound oxygen atoms directly attached in positions 2 and 5 with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. maleimide with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, directly attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정, 및 그 제조 방법, 그리고, 그 결정을 사용한 항체-약물 콘주게이트의 제조 방법.
Figure pct00202

Description

항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법
본 발명은, 항체-약물 콘주게이트의 약물 링커 중간체의 개량 제조 방법, 및 이것을 사용한 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법에 관한 것이다.
암세포 표면에 발현하고, 또한 세포에 내재화할 수 있는 항원에 결합하는 항체에, 세포 독성을 갖는 약물을 결합시킨 항체-약물 콘주게이트 (Antibody-Drug Conjugate ; ADC) 는, 암세포에 선택적으로 약물을 송달할 수 있는 것에 의해, 암세포 내에 약물을 축적시켜, 암세포를 사멸시키는 것을 기대할 수 있다 (비특허문헌 1 ∼ 5).
항체-약물 콘주게이트의 하나로서, 항체와 토포이소머라아제 I 저해제인 엑사테칸을 구성 요소로 하는 항체-약물 콘주게이트가 알려져 있다 (특허문헌 1 ∼ 5, 비특허문헌 6, 7). 이들 항체-약물 콘주게이트는, 우수한 항 종양 효과와 안전성을 갖는 것으로부터, 현재, 임상 시험이 진행 중이다.
상기의 항체-약물 콘주게이트를 제조하기 위한 약물 링커 중간체의 제조 방법으로서, 특허문헌 1 ∼ 4 에 기재된 방법이 알려져 있다.
국제 공개 제2014/057687호 국제 공개 제2015/098099호 국제 공개 제2015/115091호 국제 공개 제2015/155998호 국제 공개 제2018/135501호
Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5 - 13. Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529 - 537. Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445 - 1452. Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631 - 637. Howard A. et al., J Clin Oncol 29 : 398-405. Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research (2016) 22 (20), 5097 - 5108. Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039 - 1046.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 제조하기 위한 약물 링커 중간체는, 식 (1)
[화학식 1]
Figure pct00001
로 나타내는 화합물이다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 제조 방법으로서, 특허문헌 1 ∼ 4 에 기재된 방법이 알려져 있다. 그러나, 식 (1) 로 나타내는 화합물이 결정으로서 취득될 수 있다는 것은 알려져 있지 않고, 크로마토그래피로의 정제를 필요로 하는 등, 번잡한 조작을 실시할 필요가 있기 때문에, 공업적으로 보다 우수한 제조 방법의 개발이 요망된다.
본 발명의 하나의 과제는, 크로마토그래피로의 정제를 필요로 하지 않는, 공업적으로 우수한 약물 링커 중간체의 개량 제조 방법을 알아내는 것이다. 본 발명의 다른 하나의 과제는, 그 약물 링커 중간체의 개량 제조 방법을 사용한 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법을 구축하는 것이다.
본 발명자들은, 약물 링커 중간체의 제조 방법을 예의 검토한 결과, 놀랄 만한 일로, 식 (1) 로 나타내는 화합물을 결정으로서 취득할 수 있는 것을 알아냈다. 또한, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 제조 방법을 개량한 결과, 크로마토그래피로의 정제를 필요로 하지 않는, 공업적으로 우수한 제조 방법을 알아냈다. 또한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용한 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법을 구축하고, 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은,
[1]
식 (1)
[화학식 2]
Figure pct00002
로 나타내는 화합물의 결정.
[2]
동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 5.6 ± 0.2°, 15.5 ± 0.2°, 및 22.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, [1] 에 기재된 결정.
[3]
식 (1)
[화학식 3]
Figure pct00003
로 나타내는 화합물이 용해된 용액을 조제하는 공정, 이어서, 상기의 용액으로부터 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 제조 방법.
[4]
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 5.6 ± 0.2°, 15.5 ± 0.2°, 및 22.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, [3] 에 기재된 제조 방법.
[5]
식 (1) 로 나타내는 화합물이 용해된 용액이, 저급 케톤과 저급 알코올을 용매로서 포함하는, [3] 또는 [4] 에 기재된 제조 방법.
[6]
저급 케톤이 아세톤인, [5] 에 기재된 제조 방법.
[7]
저급 케톤이 메틸에틸케톤인, [5] 에 기재된 제조 방법.
[8]
저급 알코올이 1-프로판올인, [5] 내지 [7] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[9]
저급 알코올이 2-부탄올인, [5] 내지 [7] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[10]
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 종정을 첨가하는 공정을 포함하는, [3] 내지 [9] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[11]
식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (I) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [10] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (I) 은,
식 (B)
[화학식 4]
Figure pct00004
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호하여,
식 (8)
[화학식 5]
Figure pct00005
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (8) 로 나타내는 화합물과,
식 (C)
[화학식 6]
Figure pct00006
로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
식 (10)
[화학식 7]
Figure pct00007
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
[화학식 8]
Figure pct00008
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 9]
Figure pct00009
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[12]
식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (II) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [10] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (II) 는,
식 (B)
[화학식 10]
Figure pct00010
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (D)
[화학식 11]
Figure pct00011
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (D) 로 나타내는 화합물과,
식 (C)
[화학식 12]
Figure pct00012
로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
식 (E)
[화학식 13]
Figure pct00013
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (E) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (10)
[화학식 14]
Figure pct00014
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
[화학식 15]
Figure pct00015
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 16]
Figure pct00016
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[13]
1,2-디메톡시에탄을 포함하는 용매에, 식 (10) 으로 나타내는 화합물을 용해시키는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, [11] 또는 [12] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[14]
식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, [13] 에 기재된 제조 방법.
[15]
식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 황산나트륨 수용액과 테트라하이드로푸란의 2 상계 중에서 실시되는, [11] 내지 [14] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[16]
식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (III) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [10] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (III) 은,
식 (B)
[화학식 17]
Figure pct00017
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (F)
[화학식 18]
Figure pct00018
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (F) 로 나타내는 화합물과,
식 (11)
[화학식 19]
Figure pct00019
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (G)
[화학식 20]
Figure pct00020
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (16)
[화학식 21]
Figure pct00021
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과,
식 (C)
[화학식 22]
Figure pct00022
로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 23]
Figure pct00023
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[17]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[18]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서, m 은 0 ∼ 3 의 범위 내이다) 인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[19]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·무수물인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[20]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·1 수화물인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[21]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·2 수화물인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[22]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·3 수화물인, [11] 내지 [16] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[23]
식 (B) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (IV) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [11] 내지 [22] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (IV) 는,
식 (H)
[화학식 24]
Figure pct00024
로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타낸다) 을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
식 (J)
[화학식 25]
Figure pct00025
로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (J) 로 나타내는 화합물과,
식 (K)
[화학식 26]
Figure pct00026
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 [11] 내지 [22] 중 어느 한 항에 기재된 R2 와 동일한 의의를 나타낸다) 을, 산 또는 염기의 존재하에서 반응시킴으로써,
식 (L)
[화학식 27]
Figure pct00027
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 및 R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (M)
[화학식 28]
Figure pct00028
으로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과,
식 (N)
[화학식 29]
Figure pct00029
으로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 [11] 내지 [22] 중 어느 한 항에 기재된 R1 과 동일한 의의를 나타낸다) 을 축합함으로써,
식 (B)
[화학식 30]
Figure pct00030
로 나타내는 화합물 (여기서, R1 및 R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[24]
식 (H) 로 나타내는 화합물을 사아세트산납과 반응시킴으로써 식 (J) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 아세트산의 존재하에서 실시되는, [23] 에 기재된 제조 방법.
[25]
식 (J) 로 나타내는 화합물과 식 (K) 로 나타내는 화합물을 반응시켜, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 수산화나트륨 수용액의 존재하에서 실시되는, [23] 또는 [24] 에 기재된 제조 방법.
[26]
식 (J) 로 나타내는 화합물과 식 (K) 로 나타내는 화합물을 반응시켜, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 실시되는, [23] 또는 [24] 에 기재된 제조 방법.
[27]
식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정 후, 산을 첨가함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과 산의 염을 석출시키는 공정을 포함하는, [23] 내지 [26] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[28]
산이, 1-하이드록시벤조트리아졸인, [27] 에 기재된 제조 방법.
[29]
R1 이 벤질옥시카르보닐기로 보호된 아미노기인, [11] 내지 [28] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[30]
R1 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, [11] 내지 [28] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[31]
R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인, [11] 내지 [30] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[32]
R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, [23] 내지 [31] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[33]
X 가 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기인, [11] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[34]
식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (V) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [10] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (V) 는,
식 (2)
[화학식 31]
Figure pct00031
로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
식 (3)
[화학식 32]
Figure pct00032
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써,
식 (4)
[화학식 33]
Figure pct00033
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (5)
[화학식 34]
Figure pct00034
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (5) 로 나타내는 화합물과,
식 (6)
[화학식 35]
Figure pct00035
으로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (7)
[화학식 36]
Figure pct00036
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (7) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호하여,
식 (8)
[화학식 37]
Figure pct00037
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (8) 로 나타내는 화합물과,
식 (9)
[화학식 38]
Figure pct00038
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (10)
[화학식 39]
Figure pct00039
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
[화학식 40]
Figure pct00040
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 41]
Figure pct00041
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[35]
1,2-디메톡시에탄을 포함하는 용매에, 식 (10) 으로 나타내는 화합물을 용해시키는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, [34] 에 기재된 제조 방법.
[36]
식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, [35] 에 기재된 제조 방법.
[37]
식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 황산나트륨 수용액과 테트라하이드로푸란의 2 상계 중에서 실시되는, [34] 내지 [36] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[38]
식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (VI) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [10] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법 ;
(여기서, 제조 방법 (VI) 은,
식 (2)
[화학식 42]
Figure pct00042
로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
식 (3)
[화학식 43]
Figure pct00043
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써,
식 (4)
[화학식 44]
Figure pct00044
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (5)
[화학식 45]
Figure pct00045
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (5) 로 나타내는 화합물과,
식 (12)
[화학식 46]
Figure pct00046
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (13)
[화학식 47]
Figure pct00047
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (13) 으로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (14)
[화학식 48]
Figure pct00048
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (14) 로 나타내는 화합물과,
식 (11)
[화학식 49]
Figure pct00049
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (15)
[화학식 50]
Figure pct00050
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (15) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (16)
[화학식 51]
Figure pct00051
으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과,
식 (9)
[화학식 52]
Figure pct00052
로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 53]
Figure pct00053
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
[39]
식 (2) 로 나타내는 화합물을 사아세트산납과 반응시킴으로써 식 (3) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 아세트산의 존재하에서 실시되는, [34] 내지 [38] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[40]
식 (3) 으로 나타내는 화합물을 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 수산화나트륨 수용액의 존재하에서 실시되는, [34] 내지 [39] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[41]
식 (3) 으로 나타내는 화합물을 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 실시되는, [34] 내지 [39] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[42]
식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정 후, 산을 첨가함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물과 산의 염을 석출시키는 공정을 포함하는, [34] 내지 [41] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[43]
산이, 1-하이드록시벤조트리아졸인, [42] 에 기재된 제조 방법.
[44]
식 (6) 으로 나타내는 화합물이,
식 (23)
[화학식 54]
Figure pct00054
으로 나타내는 화합물과 N-하이드록시숙신이미드를 축합함으로써,
식 (24)
[화학식 55]
Figure pct00055
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (24) 로 나타내는 화합물과, L-페닐알라닌을 축합함으로써, 식 (6) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 것인, [34] 내지 [43] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[45]
식 (9) 로 나타내는 화합물이,
식 (17)
[화학식 56]
Figure pct00056
로 나타내는 화합물과, 무수 말레산을 반응시킴으로써,
식 (18)
[화학식 57]
Figure pct00057
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (18) 로 나타내는 화합물과, N-하이드록시숙신이미드, 및 2,6-루티딘을 포함하는 혼합 용액에, 염화티오닐을 첨가함으로써, 식 (9) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 것인, [34] 내지 [44] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[46]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[47]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서, m 은 0 ∼ 3 의 범위 내이다) 인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[48]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·무수물인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[49]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·1 수화물인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[50]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·2 수화물인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[51]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·3 수화물인, [34] 내지 [45] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[52]
식 (H)
[화학식 58]
Figure pct00058
로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타낸다) 을, 아세트산의 존재하에서, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
식 (J)
[화학식 59]
Figure pct00059
로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정을 포함하는, 식 (J) 로 나타내는 화합물의 제조 방법.
[53]
R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, [52] 에 기재된 제조 방법.
[54]
식 (J)
[화학식 60]
Figure pct00060
로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타낸다) 과,
식 (K)
[화학식 61]
Figure pct00061
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 을, 수산화나트륨 수용액 또는 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 반응시킴으로써,
식 (L)
[화학식 62]
Figure pct00062
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 및 R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정을 포함하는, 식 (L) 로 나타내는 화합물의 제조 방법.
[55]
수산화나트륨 수용액의 존재하에서 반응시키는 것을 특징으로 하는, [54] 에 기재된 제조 방법.
[56]
트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 반응시키는 것을 특징으로 하는, [54] 에 기재된 제조 방법.
[57]
R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인, [54] 내지 [56] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[58]
R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, [54] 내지 [57] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[59]
식 (L)
[화학식 63]
Figure pct00063
로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타낸다) 의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
식 (M)
[화학식 64]
Figure pct00064
으로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 산을 첨가함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과 산의 염을 석출시키는 공정을 포함하는, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과 산의 염의 제조 방법.
[60]
산이, 1-하이드록시벤조트리아졸인, [59] 에 기재된 제조 방법.
[61]
R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인, [59] 또는 [60] 에 기재된 제조 방법.
[62]
R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, [59] 내지 [61] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[63]
식 (18)
[화학식 65]
Figure pct00065
로 나타내는 화합물과, N-하이드록시숙신이미드, 및 2,6-루티딘을 포함하는 혼합 용액에, 염화티오닐을 첨가함으로써,
식 (9)
[화학식 66]
Figure pct00066
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는, 식 (9) 로 나타내는 화합물의 제조 방법.
[64]
식 (18) 로 나타내는 화합물이,
식 (17)
[화학식 67]
Figure pct00067
로 나타내는 화합물과 무수 말레산을 반응시키는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 것인, [63] 에 기재된 제조 방법.
[65]
1,2-디메톡시에탄을 포함하는 용매에,
식 (10)
[화학식 68]
Figure pct00068
으로 나타내는 화합물을 용해시키는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정의 제조 방법.
[66]
식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 피크를 나타내는, [65] 에 기재된 제조 방법.
[67]
식 (10)
[화학식 69]
Figure pct00069
으로 나타내는 화합물과,
식 (11)
[화학식 70]
Figure pct00070
로 나타내는 화합물을, 황산나트륨 수용액과 테트라하이드로푸란의 2 상계 중에서 축합함으로써,
식 (1)
[화학식 71]
Figure pct00071
로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 제조 방법.
[68]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[69]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서, m 은 0 ∼ 3 의 범위 내이다) 인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[70]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·무수물인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[71]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·1 수화물인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[72]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·2 수화물인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[73]
식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·3 수화물인, [67] 에 기재된 제조 방법.
[74]
크로마토그래피를 사용하지 않는 것을 특징으로 하는, [3] 내지 [73] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.
[75]
식 (10)
[화학식 72]
Figure pct00072
으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정.
[76]
동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, [75] 에 기재된 결정.
[77]
식 (5)
[화학식 73]
Figure pct00073
로 나타내는 화합물과 산의 염.
[78]
산이 1-하이드록시벤조트리아졸인, [77] 에 기재된 염.
[79]
[3] 내지 [51] 중 어느 한 항에 기재된 방법에 의해 제조된
식 (1)
[화학식 74]
Figure pct00074
로 나타내는 화합물의 결정을 출발 원료로서 사용하는 것을 특징으로 하고,
i) 항체를, 환원하는 공정, 이어서,
ii) 상기 방법으로 제조된 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정이 용해된 용액을 첨가하여, 환원된 항체와 반응시키는 공정,
을 포함하는,
식 (19)
[화학식 75]
Figure pct00075
(식 중, A 는 항체와의 결합 위치를 나타낸다)
로 나타내는 약물 링커와, 항체가 티오에테르 결합에 의해 결합한 항체-약물 콘주게이트의 제조 방법.
[80]
항체가, 항 HER2 항체, 항 HER3 항체, 항 TROP2 항체, 항 B7-H3 항체, 또는 항 GPR20 항체인, [79] 에 기재된 제조 방법.
[81]
항체가, 항 HER2 항체인, [80] 에 기재된 제조 방법.
[82]
항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [81] 에 기재된 제조 방법.
[83]
항체-약물 콘주게이트에 있어서의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [81] 또는 [82] 에 기재된 제조 방법.
[84]
항체가, 항 HER3 항체인, [80] 에 기재된 제조 방법.
[85]
항 HER3 항체가, 서열 번호 3 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 4 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체인, [84] 에 기재된 제조 방법.
[86]
항체-약물 콘주게이트에 있어서의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [84] 또는 [85] 에 기재된 제조 방법.
[87]
항체가, 항 TROP2 항체인, [80] 에 기재된 제조 방법.
[88]
항 TROP2 항체가, 서열 번호 5 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 470 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 6 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 234 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체인, [87] 에 기재된 제조 방법.
[89]
항체-약물 콘주게이트에 있어서의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수가 3 내지 5 개의 범위인, [87] 또는 [88] 에 기재된 제조 방법.
[90]
항체가, 항 B7-H3 항체인, [80] 에 기재된 제조 방법.
[91]
항 B7-H3 항체가, 서열 번호 7 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 8 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체인, [90] 에 기재된 제조 방법.
[92]
항체-약물 콘주게이트에 있어서의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수가 3 내지 5 개의 범위인, [90] 또는 [91] 에 기재된 제조 방법.
[93]
항체가, 항 GPR20 항체인, [80] 에 기재된 제조 방법.
[94]
항 GPR20 항체가, 서열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 472 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 10 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 234 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체인, [93] 에 기재된 제조 방법.
[95]
항체-약물 콘주게이트에 있어서의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [93] 또는 [94] 에 기재된 제조 방법.
에 관한 것이다.
본 발명에 의해, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 취득이 가능해져, 일정 품질의 식 (1) 로 나타내는 화합물을 제공할 수 있다. 또한, 크로마토그래피로의 정제를 필요로 하지 않는, 공업적으로 우수한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 제조 방법을 제공할 수 있다. 또한 이것을 사용한 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법을 제공할 수 있다.
도 1 은, 항 HER2 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 1) 을 나타낸다.
도 2 는, 항 HER2 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 2) 을 나타낸다.
도 3 은, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정의 분말 X 선 회절을 나타낸다.
도 4 는, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 분말 X 선 회절을 나타낸다.
도 5 는, 항 HER3 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 3) 을 나타낸다.
도 6 은, 항 HER3 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 4) 을 나타낸다.
도 7 은, 항 TROP2 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 5) 을 나타낸다.
도 8 은, 항 TROP2 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 6) 을 나타낸다.
도 9 는, 항 B7-H3 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 7) 을 나타낸다.
도 10 은, 항 B7-H3 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 8) 을 나타낸다.
도 11 은, 항 GPR20 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 9) 을 나타낸다.
도 12 는, 항 GPR20 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 10) 을 나타낸다.
이하, 본 발명을 실시하기 위한 바람직한 형태에 대하여 도면을 참조하면서 설명한다. 또한, 이하에 설명하는 실시형태는, 본 발명의 대표적인 실시형태의 일례를 나타낸 것으로, 이에 의해 본 발명의 범위가 좁게 해석되는 경우는 없다.
[항체-약물 콘주게이트]
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는,
식 (19)
[화학식 76]
Figure pct00076
(식 중, A 는 항체와의 결합 위치를 나타낸다)
로 나타내는 약물 링커와, 항체가 티오에테르 결합에 의해 결합한 항체-약물 콘주게이트이다.
본 발명에 있어서는, 항체-약물 콘주게이트 중, 링커 및 약물로 이루어지는 부분 구조를 「약물 링커」 라고 칭한다. 이 약물 링커는 항체의 사슬 사이의 디술파이드 결합 부위 (2 개 지점의 중사슬-중사슬 사이, 및 2 개 지점의 중사슬-경사슬 사이) 에 있어서 발생한 티올기 (다시 말하면, 시스테인 잔기의 황 원자) 에 결합하고 있다.
본 발명의 약물 링커는, 토포이소머라아제 I 저해제인 엑사테칸을 구성 요소로 하고 있다. 엑사테칸은,
식 (11)
[화학식 77]
Figure pct00077
로 나타내는, 항 종양 효과를 갖는 캠프토테신 유도체이다.
본 발명에 있어서 사용되는 항체-약물 콘주게이트는,
식 (20)
[화학식 78]
Figure pct00078
으로 나타낼 수도 있다.
여기서, 약물 링커는 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고 있다. 또한, n 은 이른바 평균 약물 결합수 (DAR ; Drug-to-Antibody Ratio) 와 동일한 의의이고, 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수를 나타낸다.
본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트는, 암세포 내로 이행한 후에
식 (22)
[화학식 79]
Figure pct00079
로 나타내는 화합물을 유리함으로써, 항 종양 효과를 발휘한다.
식 (22) 로 나타내는 화합물은, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트의 항 종양 활성의 본체인 것으로 생각되고, 토포이소머라아제 I 저해 작용을 갖는 것이 확인되어 있다 (Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research, 2016, Oct 15 ; 22 (20) : 5097 - 5108, Epub 2016 Mar 29).
식 (22) 로 나타내는 화합물은, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트의 링커 부분이 절단됨으로써 발생하는 것으로 생각되는,
식 (21)
[화학식 80]
Figure pct00080
로 나타내는 화합물의 아미날 구조가 분해됨으로써 발생하는 것으로 생각된다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는, 바이스탠더 효과를 갖는 것도 알려져 있다 (Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039 - 1046).
이 바이스탠더 효과는, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트가, 표적 발현 암세포에 내재화한 후, 유리된 식 (22) 로 나타내는 화합물이, 표적을 발현하고 있지 않은 근방의 암세포에 대해서도 항 종양 효과를 미치는 것에 의해 발휘된다.
[항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 약물 링커 중간체]
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 약물 링커 중간체는,
식 (1)
[화학식 81]
Figure pct00081
로 나타내는 화합물이다. 본 발명에 의해, 식 (1) 로 나타내는 화합물은 결정으로서 취득할 수 있고, 그 결정은 본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조를 위해서 바람직하게 사용할 수 있다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 품질은, 예를 들어, 불순물 함유율, 잔류 용매량, 및 외관 등을 지표로 평가할 수 있다. 또한, 예를 들어, 25 ℃/60 ％ RH 하, 또는 40 ℃/75 ％ RH 하와 같은 환경하에 있어서의, 3 개월간, 6 개월간, 12 개월간, 24 개월간, 및 36 개월간에서의 보존 안정성을 지표로 평가할 수 있다.
이들 품질 평가에 의해, 비정성의 식 (1) 로 나타내는 화합물에 대한 우위성을 확인할 수도 있다.
본 발명의 제조 방법은, 식 (1) 로 나타내는 화합물이 용해된 용액으로부터, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시킴으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 제조하는 것을 특징으로 한다. 이에 의해, 순도가 높고, 일정한 품질을 갖는 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 제조할 수 있다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정은, 바람직하게는, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 5.6°, 15.5°, 및 22.0°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는 것을 특징으로 한다. 일반적으로, 분말 X 선 회절에 있어서의 회절 각도 (2θ) 는, ± 0.2°의 범위 내로 오차가 생길 수 있기 때문에, 상기의 회절 각도의 값은 ± 0.2°의 범위 내의 수치도 포함하는 것으로 하여 이해될 필요가 있다 (분말 X 선 회절에 의한 측정·평가의 기술 상식에 대해서는, 예를 들어, 제 16 개정 일본 약국방 p64-68 (2.58 분말 X 선 회절 측정법), 또는 제 17 개정 일본 약국방 p71-74 (2.58 분말 X 선 회절 측정법) 등을 참조할 수 있다).
따라서, 상기의 회절 각도와 완전하게 일치하는 결정뿐만 아니라, 5.6 ± 0.2°, 15.5 ± 0.2°, 및 22.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 갖는 결정도 동일하게, 본 발명에 포함된다. 본 발명에 있어서, 「± 0.2°」 란, 특정한 수치에 대하여 -0.2° ∼ ＋0.2°의 범위의 수치인 것을 나타낸다. 예를 들어, 「5.6 ± 0.2°」 란, 5.4° ∼ 5.8°의 범위의 수치인 것을 나타낸다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시키기 위한 용액은, 바람직하게는, 아세톤과 저급 알코올을 용매로서 포함하는 용액이다. 동일하게, 저급 케톤과 저급 알코올을 용매로서 포함하는 용액도, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시키기 위한 용액으로서 바람직하게 사용할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「저급 케톤」 이란, 탄소수가 3 ∼ 6 개인 케톤류를 나타내고, 예를 들어, 아세톤, 메틸에틸케톤, 메틸프로필케톤, 메틸이소프로필케톤, 메틸부틸케톤, 메틸이소부틸케톤, 메틸tert-부틸케톤, 에틸에틸케톤, 에틸프로필케톤, 및 에틸이소프로필케톤을 들 수 있고, 바람직하게는, 아세톤, 및 메틸에틸케톤을 들 수 있고, 보다 바람직하게는, 아세톤을 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「저급 알코올」 이란, 탄소수가 1 ∼ 4 개인 알코올류를 나타내고, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-메틸-1-프로판올, 2-부탄올, 및 tert-부탄올을 들 수 있고, 바람직하게는, 1-프로판올, 및 2-부탄올을 들 수 있고, 보다 바람직하게는, 1-프로판올을 들 수 있다.
따라서, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시키기 위한 용액은, 바람직하게는, 아세톤과 1-프로판올을 포함하는 용액, 또는, 아세톤과 2-부탄올을 포함하는 용액이고, 보다 바람직하게는, 아세톤과 1-프로판올을 포함하는 용액이다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 석출은, 식 (1) 로 나타내는 화합물을 포함하는 용액에, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 종정을 첨가함으로써, 실시할 수도 있다.
식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 종정은, 상기의 방법을 직접 실시해도 취득할 수 있지만, 바람직하게는, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 소량을 크로마토그래피로 정제한 후에, 아세톤과 1-프로판올을 포함하는 용매, 또는 아세톤과 2-부탄올을 포함하는 용매에 용해시키고, 그 용액으로부터 정석시킴으로써 취득할 수 있다.
식 (1) 로 나타내는 화합물은, 국제 공개 제2014/057687호, 국제 공개 제2015/098099호, 국제 공개 제2015/115091호, 국제 공개 제2015/155998호 등의 기재를 참고로 제조할 수도 있지만, 바람직하게는, 이하의 제조 방법 (I), (II), (III), (V), (VI), 및 (IX) 에 의해 제조된 것을 사용할 수 있다. 이에 의해, 전체 공정에 있어서, 크로마토그래피를 사용하지 않고, 고수율로 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 제조할 수 있다.
[제조 방법 (I)]
제조 방법 (I) 은, 식 (B) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 1 ∼ 3 을 거쳐 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 1 ∼ 3 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 82]
Figure pct00082
[식 중, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, 바람직하게는, 벤질옥시카르보닐기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, 벤질기로 보호된 카르복시기를 나타내고, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기를 나타낸다.]
공정 1 :
본 공정은, 식 (B) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (8) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
R1 이 벤질옥시카르보닐기로 보호된 아미노기이고, R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 반응이 진행되는 한 방법은 제한되지 않지만, 바람직하게는, 수소 분위기하, 팔라듐 촉매, 백금 촉매, 니켈 촉매, 루테늄 촉매, 또는 로듐 촉매를 사용하여 실시할 수 있고, 보다 바람직하게는, 팔라듐 촉매를 사용하여 실시할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 팔라듐탄소를 사용하여 실시할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 5 ％ 팔라듐탄소를 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 5 ％ 팔라듐탄소의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (B) 로 나타내는 화합물에 대하여, 5 ∼ 40 중량％ 이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란과 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1 ∼ 5 시간이다.
공정 2 :
본 공정은, 식 (8) 로 나타내는 화합물과, 식 (C) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (10) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (C) 로 나타내는 화합물은 시판되는 것, 또는 공지된 방법에 의해 제조한 것, 또는, 하기의 제조 방법 (VII) 에 준한 방법에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. X 가 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
본 공정에 사용되는 식 (C) 로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (8) 로 나타내는 화합물에 대하여, 1 ∼ 4 당량이다.
본 공정은 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 트리에틸아민, 트리부틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피롤리딘, 및 N-메틸피페리딘 등을 들 수 있고, 바람직하게는, N,N-디이소프로필에틸아민을 들 수 있다. 본 공정에 사용되는 N,N-디이소프로필에틸아민의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (8) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴과 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 7 ∼ 30 시간이다.
식 (10) 으로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정으로서 취득할 수 있다.
식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정의 품질은, 예를 들어, 불순물 함유율, 잔류 용매량, 및 외관 등을 지표로 평가할 수 있다. 또한, 예를 들어, 25 ℃/60 ％ RH 하, 또는 40 ℃/75 ％ RH 하와 같은 환경하에 있어서의, 3 개월간, 6 개월간, 12 개월간, 24 개월간, 및 36 개월간에서의 보존 안정성을 지표로 평가할 수 있다. 이들 품질 평가에 의해, 비정성의 식 (10) 으로 나타내는 화합물에 대한 우위성을 확인할 수도 있다.
식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정은, 바람직하게는, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0°, 및 25.0°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는 것을 특징으로 한다. 일반적으로, 분말 X 선 회절에 있어서의 회절 각도 (2θ) 는, ± 0.2°의 범위 내로 오차가 생길 수 있기 때문에, 상기의 회절 각도의 값은 ± 0.2°의 범위 내의 수치도 포함하는 것으로 하여 이해될 필요가 있다 (분말 X 선 회절에 의한 측정·평가의 기술 상식에 대해서는, 예를 들어, 제 16 개정 일본 약국방 p64-68 (2.58 분말 X 선 회절 측정법), 또는 제 17 개정 일본 약국방 p71-74 (2.58 분말 X 선 회절 측정법) 등을 참조할 수 있다). 따라서, 상기의 회절 각도와 완전하게 일치하는 결정뿐만 아니라, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 갖는 결정도 동일하게, 본 발명에 포함된다.
공정 3 :
본 공정은, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (11) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 메탄술폰산염으로서 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서 m 은 0 ∼ 3 이다) 로서 사용할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 메탄술폰산염·무수물, 메탄술폰산염·1 수화물, 메탄술폰산염·2 수화물, 또는 메탄술폰산염·3 수화물로서 사용할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 메탄술폰산염·2 수화물로서 사용할 수 있는데, 모두 본 발명의 제조 방법에 사용할 수 있다. 또한, 상기의 수화물 수는, 결정 취득·건조시의 습도를 조정함으로써, 컨트롤할 수 있다.
본 공정에 사용되는 식 (11) 로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (10) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다.
식 (10) 으로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 활성 에스테르에 유도함으로써, 식 (11) 로 나타내는 화합물과 축합시킬 수 있다. 본 공정에 있어서의 활성 에스테르로의 유도는, 반응이 진행되는 한 방법은 제한되지 않지만, 예를 들어, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염 (WSCD·HCl), 또는 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (DCC) 등의 축합제를 사용하여, 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt), 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAt), N-하이드록시숙신이미드, 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸, 또는 p-니트로페놀 등의 첨가제와 반응시킴으로써 실시할 수 있고, 바람직하게는, 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염과 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (10) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다. 본 공정에 사용되는 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (10) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.02 ∼ 0.2 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 트리에틸아민, 트리부틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피롤리딘, 및 N-메틸피페리딘 등을 들 수 있고, 바람직하게는, N-메틸모르폴린을 들 수 있다. 본 공정에 사용되는 N-메틸모르폴린의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (10) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란과 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
또한, 식 (11) 로 나타내는 화합물의 메탄술폰산염은, 염기로 중화되어, 프리체가 된 후에 반응이 진행된다. 여기서, 식 (11) 로 나타내는 화합물의 메탄술폰산염이, 친수성인 한편, 식 (11) 로 나타내는 화합물의 프리체는, 친유성이기 때문에, 일련의 반응을 효율적으로 진행시키기 위해서는, 본 공정은 바람직하게는, 수층과 유기층의 2 상계에서 실시할 수 있다. 유기층이 테트라하이드로푸란인 경우, 여기에 혼화하기 어려운 수층으로서, 이온 강도가 높은 수용액, 예를 들어, 황산나트륨 수용액을 바람직하게 사용할 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 0.5 ∼ 2 시간이다.
[제조 방법 (II)]
제조 방법 (II) 는, 식 (B) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 4 ∼ 7 을 거쳐 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 4 ∼ 7 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 83]
Figure pct00083
[식 중, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기를 나타낸다.]
공정 4 :
본 공정은, 식 (B) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (D) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
공정 5 :
본 공정은, 식 (D) 로 나타내는 화합물과, 식 (C) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (E) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
본 공정은, 제조 방법 (I) 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 6 :
본 공정은, 식 (E) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (10) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
식 (10) 으로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 제조 방법 (I) 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정으로서 취득할 수 있다.
공정 7 :
본 공정은, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
본 공정은, 제조 방법 (I) 의 공정 3 과 동일한 방법에 의해 실시할 수 있다.
[제조 방법 (III)]
제조 방법 (III) 은, 식 (B) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 8 ∼ 11 을 거쳐 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 8 ∼ 11 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 84]
Figure pct00084
[식 중, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, 바람직하게는, (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, 벤질기로 보호된 카르복시기를 나타내고, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기를 나타낸다.]
공정 8 :
본 공정은, 식 (B) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (F) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
식 (B) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 반응이 진행되는 한 방법은 제한되지 않지만, 바람직하게는, 수소 분위기하, 팔라듐 촉매, 백금 촉매, 니켈 촉매, 루테늄 촉매, 로듐 촉매를 사용하여 실시할 수 있고, 보다 바람직하게는, 팔라듐 촉매를 사용하여 실시할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 팔라듐탄소를 사용하여 실시할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 팔라듐탄소-에틸렌디아민 착물을 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 팔라듐탄소-에틸렌디아민 착물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (B) 로 나타내는 화합물에 대하여, 34 ∼ 136 중량％ 이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란과 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이지만, 반응이 진행되는 한 이것에 제한되지 않는다. 본 공정의 반응 시간은, 바람직하게는, 1 ∼ 54 시간이지만, 반응이 진행되는 한 이것에 제한되지 않는다.
공정 9 :
본 공정은, 식 (F) 로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (G) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (F) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 활성 에스테르로 유도함으로써, 식 (11) 로 나타내는 화합물과 축합할 수 있다. 본 공정에 사용되는 식 (11) 로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (F) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다. 본 공정에 있어서의 활성 에스테르로의 유도는, 반응이 진행되는 한 방법은 제한되지 않지만, 예를 들어, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염 (WSCD·HCl), 또는 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (DCC) 등의 축합제를 사용하여, 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt), 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAt), N-하이드록시숙신이미드, 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸, 또는 p-니트로페놀 등의 첨가제와 반응시킴으로써 실시할 수 있고, 바람직하게는, 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염과 1-하이드록시벤조트리아졸을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (F) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다. 본 공정에 사용되는 1-하이드록시벤조트리아졸의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (F) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 트리에틸아민, 트리부틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피롤리딘, 및 N-메틸피페리딘 등을 들 수 있고, 바람직하게는, 트리에틸아민을 들 수 있다. 본 공정에 사용되는 트리에틸아민의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (F) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1 ∼ 4 시간이다.
공정 10 :
본 공정은, 식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (16) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
R1 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센, 트리메틸구아니딘, 1,5,7-트리아자비시클로[4,4,0]데카-5-엔, 또는 7-메틸-1,5,7-트리아자비시클로[4,4,0]데카-5-엔 1,5-디아자비시클로[4,3,0]-5-노넨을 사용하여 실시할 수 있고, 바람직하게는, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (15) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1 ∼ 5 시간이다.
공정 11 :
본 공정은, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과, 식 (C) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (C) 로 나타내는 화합물은 시판되는 것, 공지된 방법에 의해 제조한 것, 또는, 하기의 제조 방법 (VII) 에 준한 방법에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. X 가 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
본 공정에 사용되는 식 (C) 로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (16) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 트리에틸아민, 트리부틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피롤리딘, 및 N-메틸피페리딘 등을 들 수 있고, 바람직하게는, 트리에틸아민을 들 수 있다. 본 공정에 사용되는 트리에틸아민의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (16) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.75 ∼ 6 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는, 추가로, 피리디늄 p-톨루엔술포네이트를 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 피리디늄 p-톨루엔술포네이트의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (16) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 1 ∼ 4 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 피리딘, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 피리딘, 아세토니트릴, 및 테트라하이드로푸란의 혼합 용매를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1.5 ∼ 7 시간이다.
제조 방법 (I) ∼ (III) 에 있어서의, 식 (B) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 이하의 제조 방법 (IV) 에 의해 제조된 것을 사용할 수 있다.
[제조 방법 (IV)]
제조 방법 (IV) 는, 식 (H) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 12 ∼ 15 를 거쳐 식 (B) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 12 ∼ 15 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 85]
Figure pct00085
[식 중, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, 바람직하게는, 벤질옥시카르보닐기, 또는 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, 벤질기로 보호된 카르복시기를 나타내고, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, 바람직하게는, (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기를 나타내고, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기를 나타낸다.]
공정 12 :
본 공정은, 식 (H) 로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써, 식 (J) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (H) 로 나타내는 화합물은, 시판되는 것 또는 공지된 방법을 참고로 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 사아세트산납의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (H) 로 나타내는 화합물에 대하여, 1 ∼ 3 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는, 아세트산, 또는 피리딘의 존재하에서 실시할 수 있고, 보다 바람직하게는, 아세트산의 존재하에서 실시할 수 있다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 및 디메틸술폭시드, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 테트라하이드로푸란을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 45 ∼ 85 ℃ 이고, 보다 바람직하게는, 테트라하이드로푸란의 가열 환류하가 되는 온도이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 0.5 ∼ 3 시간이다.
공정 13 :
본 공정은, 식 (J) 로 나타내는 화합물과 식 (K) 로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하에서 반응시킴으로써, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정에 사용되는 식 (K) 로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (J) 로 나타내는 화합물에 대하여, 1 ∼ 4 당량이다.
본 공정은, 염기, 또는 산의 존재하에서 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 염기는, 바람직하게는, 수산화나트륨 수용액이다. 본 공정에 사용되는 수산화나트륨 수용액의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (J) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 2 당량이다. 본 공정에 사용되는 산은, 바람직하게는, 트리스(펜타플루오로페닐)보란이다. 본 공정에 사용되는 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (J) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.01 ∼ 0.1 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 및 1,4-디옥산을 들 수 있고, 바람직하게는, 1,2-디메톡시에탄을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, -10 ∼ 15 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 0.5 ∼ 6 시간이다.
공정 14 :
본 공정은, 식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인 경우, 본 공정은, 바람직하게는, 이하의 방법으로 실시할 수 있다.
식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센, 트리메틸구아니딘, 1,5,7-트리아자비시클로[4,4,0]데카-5-엔, 또는 7-메틸-1,5,7-트리아자비시클로[4,4,0]데카-5-엔 1,5-디아자비시클로[4,3,0]-5-노넨을 사용하여 실시할 수 있고, 바람직하게는, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (L) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.25 ∼ 1 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴, 및 N,N-디메틸아세트아미드를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 2 ∼ 8 시간이다.
식 (M) 으로 나타내는 화합물은, 산과의 염으로 함으로써, 반응 용액으로부터 석출시켜, 바람직하게 단리 정제할 수 있다. 이에 의해, 이후의 공정의 반응 저해 요인이 될 수 있는 부생성물을 제거할 수 있다.
상기의 산은, 바람직하게는, 1-하이드록시벤조트리아졸이다. 본 공정에서 사용한 1-하이드록시벤조트리아졸은, 다음의 공정 15 에 있어서, 축합제의 하나로서 기능할 수도 있다. 동일하게, 1-하이드록시벤조트리아졸 이외의 산도, 축합제의 하나로서 기능하는 것이면, 본 공정에 바람직하게 사용할 수 있다.
공정 15 :
본 공정은, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과, 식 (N) 으로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (B) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (N) 으로 나타내는 화합물은 시판되는 것, 공지된 방법에 의해 제조한 것, 또는, 하기의 제조 방법 (VIII) 에 준한 방법에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 식 (N) 으로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (M) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
식 (M) 으로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 활성 에스테르로 유도함으로써, 식 (N) 으로 나타내는 화합물과 축합시킬 수 있다. 활성 에스테르로의 유도는, 예를 들어, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염 (WSCD·HCl), 또는 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (DCC) 등의 축합제를 사용하여, 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt), 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAt), N-하이드록시숙신이미드, 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸, 또는 p-니트로페놀 등의 첨가제와 반응시킴으로써 실시할 수 있고, 바람직하게는, 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염과 1-하이드록시벤조트리아졸을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (5) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다. 본 공정에 사용되는 1-하이드록시벤조트리아졸의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (M) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
또한, 식 (M) 으로 나타내는 화합물이 1-하이드록시벤조트리아졸염인 경우에는, 본 공정은, 바람직하게는, 새로운 1-하이드록시벤조트리아졸을 첨가하지 않고 실시할 수 있다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴 및 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
또한, 공정 14 에 있어서, 식 (M) 으로 나타내는 화합물을 단리하지 않고, 연속해서 본 공정을 실시하는 경우, 본 공정의 용매는, 공정 14 에서 사용한 용매를 그대로 사용할 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, -10 ∼ 15 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1.5 ∼ 7 시간이다.
보다 구체적인 양태로서, 식 (1) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 이하의 제조 방법 (V) 또는 (VI) 에 의해 제조된 것을 사용할 수 있다.
[제조 방법 (V)]
제조 방법 (V) 는, 식 (2) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 16 ∼ 22 를 거쳐 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 16 ∼ 22 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 86]
Figure pct00086
공정 16 :
본 공정은, 식 (2) 로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써, 식 (3) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (2) 로 나타내는 화합물은, 시판되는 것 또는 공지된 방법을 참고로 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 12 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 17 :
본 공정은, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하에서, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써, 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 13 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 18 :
본 공정은, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 14 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 19 :
본 공정은, 식 (5) 로 나타내는 화합물과, 식 (6) 으로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (7) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (6) 으로 나타내는 화합물은, 시판되는 것, 공지된 방법에 의해 제조한 것, 또는 하기의 제조 방법 (VIII) 에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 15 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 20 :
본 공정은, 식 (7) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (8) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (I) 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 21 :
본 공정은, 식 (8) 로 나타내는 화합물과, 식 (9) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (10) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (I) 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 22 :
본 공정은, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (I) 의 공정 3 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
[제조 방법 (VI)]
제조 방법 (VI) 은, 식 (2) 로 나타내는 화합물로부터, 공정 23 ∼ 30 을 거쳐 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 방법이다. 이하, 공정 23 ∼ 30 에 대하여 상세하게 설명한다.
[화학식 87]
Figure pct00087
공정 23 :
본 공정은, 식 (2) 로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써, 식 (3) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (2) 로 나타내는 화합물은, 시판되는 것 또는 공지된 방법을 참고로 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 12 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 24 :
본 공정은, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하에서, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써, 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 13 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 25 :
본 공정은, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 14 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 26 :
본 공정은, 식 (5) 로 나타내는 화합물과, 식 (12) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (13) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (13) 으로 나타내는 화합물은 시판되는 것, 또는 공지된 방법에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 15 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 27 :
본 공정은, 식 (13) 으로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (14) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 8 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 28 :
본 공정은, 식 (14) 로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (15) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 9 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 29 :
본 공정은, 식 (15) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (16) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 10 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 30 :
본 공정은, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과, 식 (9) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 11 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
[제조 방법 (VII)]
식 (9) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 이하의 제조 방법 (VII) 에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다. 이에 의해, 이후의 공정으로 제조되는 화합물의 품질에 영향을 미칠 가능성이 있는 불순물을 억제할 수 있어, 고품질의 식 (1) 로 나타내는 화합물의 취득에 기여할 수 있다.
[화학식 88]
Figure pct00088
공정 31 :
본 공정은, 식 (17) 로 나타내는 화합물과 무수 말레산을 축합함으로써, 식 (18) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정에 사용되는 무수 말레산의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (17) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는, 아세트산 중에서 실시된다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 80 ∼ 120 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 8 ∼ 32 시간이다.
공정 32 :
본 공정은, 식 (18) 로 나타내는 화합물과 N-하이드록시숙신이미드를 축합함으로써, 식 (9) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정에 사용되는 N-하이드록시숙신이미드의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (17) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
식 (18) 로 나타내는 화합물은, 활성 에스테르, 혼합 산 무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도함으로써, N-하이드록시숙신이미드와 축합할 수 있고, 바람직하게는, 산 할로겐화물로 유도함으로써, N-하이드록시숙신이미드와 축합할 수 있다.
산 할로겐화물로의 유도는, 바람직하게는, 염화티오닐을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 염화티오닐의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (18) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.5 ∼ 1.5 당량이다. 본 공정에서는 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는 바람직하게는 2,6-루티딘이다. 본 공정에 사용되는 2,6-루티딘의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (18) 로 나타내는 화합물에 대하여, 1 ∼ 3 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 및 클로로벤젠, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, -25 ℃ ∼ 0 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 0.5 ∼ 2 시간이다.
[제조 방법 (VIII)]
식 (6) 으로 나타내는 화합물은, 이하의 제조 방법 (VIII) 에 의해 제조한 것을 사용할 수 있다.
[화학식 89]
Figure pct00089
공정 33 :
본 공정은, 식 (23) 으로 나타내는 화합물을 N-하이드록시숙신이미드와 축합함으로써, 식 (24) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정에 사용되는 식 (23) 으로 나타내는 화합물의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (23) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.5 당량이다.
식 (23) 으로 나타내는 화합물은, 활성 에스테르, 혼합 산 무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도함으로써, N-하이드록시숙신이미드와 축합할 수 있고, 바람직하게는, 활성 에스테르화물로 유도함으로써, N-하이드록시숙신이미드와 축합할 수 있다.
활성 에스테르화는, 바람직하게는, 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염을 사용하여 실시할 수 있다. 본 공정에 사용되는 3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (23) 으로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.5 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴을 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 10 ∼ 40 ℃ 이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 2 ∼ 8 시간이다.
공정 34 :
본 공정은, 식 (24) 로 나타내는 화합물을, L-페닐알라닌과 축합함으로써, 식 (6) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정에 사용되는 L-페닐알라닌의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (24) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
본 공정은, 바람직하게는 염기를 사용한다. 본 공정에 사용되는 염기는, 반응이 진행되는 한 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 트리에틸아민, 트리부틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피롤리딘, 및 N-메틸피페리딘 등을 들 수 있고, 바람직하게는, 트리에틸아민을 들 수 있다. 본 공정에 사용되는 트리에틸아민의 양은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (24) 로 나타내는 화합물에 대하여, 0.7 ∼ 1.3 당량이다.
본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 예를 들어, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 메탄올, 에탄올, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 2-메틸테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세트산에틸, 헥산, 펜탄, 헵탄, 시클로헥산, 에틸시클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 아세톤, 2-부타논, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 1-메틸-2-피롤리돈, 디메틸술폭시드, 및 물, 그리고 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 바람직하게는, 아세토니트릴과 물의 혼합 용매를 들 수 있다.
본 공정의 반응 온도는, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 식 (23) 으로 나타내는 화합물이다. 본 공정의 반응 시간은, 반응이 진행되는 한 제한되지 않지만, 바람직하게는, 1 ∼ 4 시간이다.
[제조 방법 (IX)]
식 (1) 로 나타내는 화합물은, 이하의 제조 방법 (IX) 에 의해 제조된 것을 사용할 수도 있다.
[화학식 90]
Figure pct00090
[식 중, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타내고, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타내고, 바람직하게는, (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기를 나타낸다.]
공정 35 :
본 공정은, 식 (H) 로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써, 식 (J) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 식 (H) 로 나타내는 화합물은, 시판되는 것 또는 공지된 방법을 참고로 제조한 것을 사용할 수 있다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 12 와 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 36 :
본 공정은, 식 (J) 로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하에서, 식 (K) 로 나타내는 화합물과 반응시킴으로써, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (IV) 의 공정 13 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 37 :
본 공정은, 식 (L) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (O) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (L) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
공정 38 :
본 공정은, 식 (O) 로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (P) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (O) 로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 활성 에스테르로 유도함으로써, 식 (11) 로 나타내는 화합물과 축합할 수 있다.
공정 39 :
본 공정은, 식 (P) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (25) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (P) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기의 탈보호는, 당업자에게 주지의 방법으로 실시할 수 있다 (예를 들어, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th Edition (2007), Wiley-Interscience 등을 참조).
공정 40 :
본 공정은, 식 (25) 로 나타내는 화합물과, 식 (N) 으로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (G) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다.
식 (N) 으로 나타내는 화합물은, 바람직하게는, 활성 에스테르로 유도함으로써, 식 (25) 로 나타내는 화합물과 축합할 수 있다.
공정 41 :
본 공정은, 식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (16) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 10 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
공정 42 :
본 공정은, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과, 식 (C) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이다. 본 공정은, 제조 방법 (III) 의 공정 11 과 동일한 방법에 의해, 실시할 수 있다.
[항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체]
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체는, 어느 종에서 유래해도 되지만, 바람직하게는, 인간, 래트, 마우스, 및 토끼에서 유래하는 항체이다. 항체가 인간 이외의 종에서 유래하는 경우에는, 주지의 기술을 사용하여, 키메라화 또는 인간화하는 것이 바람직하다. 본 발명의 항체는, 폴리클로날 항체여도 되고, 모노클로날 항체여도 되지만, 모노클로날 항체가 바람직하다.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체는, 바람직하게는 암세포를 표적으로 할 수 있는 성질을 갖는 것이고, 암세포를 인식할 수 있는 특성, 암세포에 결합할 수 있는 특성, 암세포 내에 삽입되어 내재화하는 특성, 및/또는 암세포에 대한 살세포 활성 등을 구비하고 있는 것이 바람직하다.
항체의 암세포에 대한 결합성은, 플로우 사이토메트리를 사용하여 확인할 수 있다. 암세포 내로의 항체의 삽입은, (1) 치료 항체에 결합하는 2 차 항체 (형광 표지) 를 사용하여 세포 내에 삽입된 항체를 형광 현미경으로 가시화하는 에세이 (Cell Death and Differentiation (2008) 15, 751 - 761), (2) 치료 항체에 결합하는 2 차 항체 (형광 표지) 를 사용하여 세포 내에 삽입된 형광량을 측정하는 에세이 (Molecular Biology of the Cell Vol. 15, 5268 - 5282, December 2004), 또는 (3) 치료 항체에 결합하는 이뮤노톡신을 사용하여, 세포 내에 삽입되면 독소가 방출되어 세포 증식이 억제된다고 하는 Mab-ZAP 에세이 (Bio Techniques 28 : 162 - 165, January 2000) 를 사용하여 확인할 수 있다. 이뮤노톡신으로는, 디프테리아 독소의 촉매 영역과 프로테인 G 의 리콤비넌트 복합 단백질도 사용 가능하다.
항체의 항 종양 활성은, in vitro 에서는, 세포의 증식의 억제 활성을 측정함으로써 확인할 수 있다. 예를 들어, 항체의 표적 단백질을 과잉 발현하고 있는 암세포주를 배양하고, 배양계에 다양한 농도로 항체를 첨가하여, 포커스 형성, 콜로니 형성 및 스페로이드 증식에 대한 억제 활성을 측정할 수 있다. in vivo 에서는, 예를 들어, 표적 단백질을 고발현하고 있는 암세포주를 이식한 누드 마우스에 항체를 투여하고, 암세포의 변화를 측정함으로써, 항 종양 활성을 확인할 수 있다.
항체 자체가 항 종양 효과를 갖는 것은, 바람직하지만, 항체-약물 콘주게이트는 항 종양 효과를 발휘하는 화합물을 결합시키고 있기 때문에, 항체 자체의 항 종양 효과는 필수는 아니다. 항 종양성 화합물의 세포 장해성을 암세포에 있어서 특이적·선택적으로 발휘시키는 목적으로부터는, 항체가 내재화하여 암세포 내로 이행하는 성질이 있는 것이 중요하고, 바람직하다.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체는, 공지된 수단에 의해 취득할 수 있다. 예를 들어, 이 분야에서 통상적으로 실시되는 방법을 사용하여, 항원이 되는 폴리펩티드를 동물에 면역하고, 생체 내에 산생되는 항체를 채취, 정제함으로써 얻을 수 있다. 항원의 유래는 인간에 한정되지 않고, 마우스, 래트 등의 인간 이외의 동물에서 유래하는 항원을 동물에 면역할 수도 있다. 이 경우에는, 취득된 이종 항원에 결합하는 항체와 인간 항원의 교차성을 시험함으로써, 인간의 질환에 적용 가능한 항체를 선별할 수 있다.
또한, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495 - 497 ; Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365 - 367, Plenum Press, N. Y. (1980)) 에 따라, 항원에 대한 항체를 산생하는 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 융합시키는 것에 의해 하이브리도마를 수립하고, 모노클로날 항체를 얻을 수도 있다.
또한, 항원은 항원 단백질을 코드하는 유전자를 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시키는 것에 의해 얻을 수 있다. 구체적으로는, 항원 유전자를 발현 가능한 벡터를 제작하고, 이것을 숙주 세포에 도입하여 그 유전자를 발현시키고, 발현한 항원을 정제하면 된다. 상기의 유전자 조작에 의한 항원 발현 세포, 혹은 항원을 발현하고 있는 세포주를 동물에 면역하는 방법을 사용하는 것에 의해서도 항체를 취득할 수 있다.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체는, 인간에 대한 이종 항원성을 저하시키는 것 등을 목적으로 하여 인위적으로 개변한 유전자 재조합형 항체, 예를 들어, 키메라 (Chimeric) 항체, 인간화 (Humanized) 항체인 것이 바람직하고, 또는 인간 유래의 항체의 유전자 서열만을 갖는 항체, 즉 인간 항체인 것이 바람직하다. 이들 항체는, 이미 알려진 방법을 사용하여 제조할 수 있다.
키메라 항체로는, 항체의 가변 영역과 정상 영역이 서로 이종인 항체, 예를 들어 마우스 또는 래트 유래 항체의 가변 영역을 인간 유래의 정상 영역에 접합한 키메라 항체를 들 수 있다 (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851 - 6855, (1984)).
인간화 항체로는, 이종 항체의 상보성 결정 영역 (CDR ; complementarity determining region) 만을 인간 유래의 항체에 삽입한 항체 (Nature (1986) 321, p.522 - 525), CDR 이식법에 의해, 이종 항체의 CDR 의 서열에 더하여, 이종 항체의 일부의 프레임 워크의 아미노산 잔기도 인간 항체에 이식한 항체 (국제 공개 제90/07861호), 유전자 변환 돌연변이 유발 (gene conversion mutagenesis) 스트래터지를 사용하여 인간화한 항체 (미국 특허 제5821337호) 를 들 수 있다.
인간 항체로는, 인간 항체의 중사슬과 경사슬의 유전자를 포함하는 인간 염색체 단편을 갖는 인간 항체 산생 마우스를 사용하여 제작한 항체 (Tomizuka, K. et al., Nature Genetics (1997) 16, p.133 - 143 ; Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res. (1998) 26, p.3447 - 3448 ; Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology : Basic and Applied Aspects vol.10, p.69 - 73 (Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999 ; Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p.722 - 727 등을 참조.) 를 들 수 있다. 혹은, 인간 항체 라이브러리로부터 선별한 파지 디스플레이에 의해 취득한 항체 (Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthalmology & Visual Science. (2002) 43 (7), p.2301 - 2308 ; Carmen, S. et. al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1 (2), p.189 - 203 ; Siriwardena, D. et. al., Ophthalmology (2002) 109 (3), p.427 - 431 등 참조.) 도 들 수 있다.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용되는 항체에는, 항체의 수식체도 포함된다. 당해 수식체란, 본 발명에 관련된 항체에 화학적 또는 생물학적인 수식이 실시되어 이루어지는 것을 의미한다. 화학적인 수식체에는, 아미노산 골격에 대한 화학 부분의 결합, N-결합 또는 O-결합 탄수화물 사슬에 대한 화학 부분의 결합을 갖는 화학 수식체 등이 포함된다. 생물학적인 수식체에는, 번역 후 수식 (예를 들어, N-결합 또는 O-결합형 당사슬의 부가, N 말단 또는 C 말단의 프로세싱, 탈아미드화, 아스파르트산의 이성화, 메티오닌의 산화 등) 된 것, 원핵 생물 숙주 세포를 사용하여 발현시키는 것에 의해 N 말단에 메티오닌 잔기가 부가된 것 등이 포함된다. 또한, 본 발명에 관련된 항체 또는 항원의 검출 또는 단리를 가능하게 하기 위해서 표지된 것, 예를 들어, 효소 표지체, 형광 표지체, 어피니티 표지체도 이러한 수식체의 의미에 포함된다. 이와 같은 본 발명에 관련된 항체의 수식체는, 항체의 안정성 및 혈중 체류성의 개선, 항원성의 저감, 항체 또는 항원의 검출 또는 단리 등에 유용하다.
또한, 본 발명에 관련된 항체에 결합하고 있는 당사슬 수식을 조절하는 것 (글리코실화, 탈푸코오스화 등) 에 의해, 항체 의존성 세포 상해 활성을 증강시키는 것이 가능하다. 항체의 당사슬 수식의 조절 기술로는, 국제 공개 제99/54342호, 국제 공개 제00/61739호, 국제 공개 제02/31140호 등이 알려져 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 관련된 항체에는 당해 당사슬 수식이 조절된 항체도 포함된다.
또한, 포유류 배양 세포로 생산되는 항체에서는, 그 중사슬의 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되는 것이 알려져 있고 (Journal of Chromatography A, 705 : 129 - 134 (1995)), 또한, 동일하게 중사슬 카르복실 말단의 글리신, 리신의 2 아미노산 잔기가 결실되고, 새롭게 카르복실 말단에 위치하는 프롤린 잔기가 아미드화되는 것이 알려져 있다 (Analytical Biochemistry, 360 : 75 - 83 (2007)). 그러나, 이들 중사슬 서열의 결실 및 수식은, 항체의 항원 결합능 및 이펙터 기능 (보체의 활성화나 항체 의존성 세포 장해 작용 등) 에는 영향을 미치지 않는다. 따라서, 본 발명에 관련된 항체에는, 당해 수식을 받은 항체 및 당해 항체의 기능성 단편도 포함되고, 중사슬 카르복실 말단에 있어서 1 또는 2 의 아미노산이 결실된 결실체, 및 아미드화된 당해 결실체 (예를 들어, 카르복실 말단 부위의 프롤린 잔기가 아미드화된 중사슬) 등도 포함된다. 단, 항원 결합능 및 이펙터 기능이 유지되고 있는 한, 본 발명에 관련된 항체의 중사슬의 카르복실 말단의 결실체는 상기의 종류에 한정되지 않는다. 본 발명에 관련된 항체를 구성하는 2 개의 중사슬은, 완전 길이 및 상기의 결실체로 이루어지는 군에서 선택되는 중사슬의 어느 1 종이어도 되고, 어느 2 종을 조합한 것이어도 된다. 각 결실체의 양 비는 본 발명에 관련된 항체를 산생하는 포유류 배양 세포의 종류 및 배양 조건에 영향을 받을 수 있지만, 본 발명에 관련된 항체는, 바람직하게는 2 개의 중사슬의 쌍방에서 카르복실 말단의 1 개의 아미노산 잔기가 결실되어 있는 것을 들 수 있다.
본 발명에 관련된 항체의 아이소 타입으로는, 예를 들어 IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) 등을 들 수 있지만, 바람직하게는 IgG1 또는 IgG2 를 들 수 있다.
본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 사용할 수 있는 항체는, 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 항 HER2 항체, 항 HER3 항체, 항 TROP2 항체, 항 B7-H3 항체, 항 CD3 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD37 항체, 항 CD56 항체, 항 CD98 항체, 항 DR5 항체, 항 EGFR 항체, 항 EPHA2 항체, 항 FGFR2 항체, 항 FGFR4 항체, 항 FOLR1 항체, 항 VEGF 항체, 및 항 GPR20 항체를 들 수 있고, 바람직하게는, 항 HER2 항체, 항 HER3 항체, 항 TROP2 항체, 항 B7-H3 항체, 및 항 GPR20 항체를 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 HER2 항체」 란, HER2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor Type 2 ; ErbB-2) 에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는, HER2 와 결합함으로써 HER2 발현 세포에 내재화하는 활성을 갖는 항체를 나타낸다.
항 HER2 항체로는, 예를 들어, 트라스투주맙 (trastuzumab) (미국 특허 제5821337호), 및, 페르투주맙 (pertuzumab) (국제 공개 제01/00245호) 을 들 수 있고, 바람직하게는 트라스투주맙을 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「트라스투주맙」 은, 서열 번호 1 (도 1) 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 (도 2) 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 인간화 항 HER2 모노클로날 항체이다.
본 발명에 있어서, 「항 HER3 항체」 란, HER3 (Human Epidermal Growth Factor Receptor Type 3 ; ErbB-3) 에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는, HER3 발현 세포 표면 상의 HER3 과 결합하여 그 HER3 발현 세포에 내재화하는 활성을 갖는 항체를 나타낸다.
항 HER3 항체로는, 예를 들어, 파트리투맙 (patritumab ; U3-1287), U1-59 (국제 공개 제2007/077028호), MM-121 (세리반투맙 (seribantumab)), 국제 공개 2008/100624호에 기재된 항 ERBB3 항체, RG-7116 (룸레투주맙 (lumretuzumab)), 및 LJM-716 (엘젬투맙 (elgemtumab)) 을 들 수 있고, 바람직하게는, 파트리투맙, 및 U1-59 를 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 TROP2 항체」 란, TROP2 (TACSTD2 : Tumor-associated calcium signal transducer 2 ; EGP-1) 에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는, TROP2 와 결합함으로써 TROP2 발현 세포에 내재화하는 활성을 갖는 항체를 나타낸다.
항 TROP2 항체로는, 예를 들어, hTINA1-H1L1 (국제 공개 제2015/098099호) 을 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 B7-H3 항체」 란, B7-H3 (B 세포 항원 ＃7 호모로그 3 (B cell antigen ＃7 homolog 3) ; PD-L3 ; CD276) 에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는, B7-H3 과 결합함으로써 B7-H3 발현 세포에 내재화하는 활성을 갖는 항체를 나타낸다.
항 B7-H3 항체로는, 예를 들어, M30-H1-L4 (국제 공개 제2014/057687호) 를 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 GPR20 항체」 란, GPR20 (G Protein-coupled receptor 20) 에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는, GPR20 과 결합함으로써 GPR20 발현 세포에 내재화하는 활성을 갖는 항체를 나타낸다.
항 GPR20 항체로는, 예를 들어, h046-H4e/L7 (국제 공개 제2018/135501호) 을 들 수 있다.
[항체와 약물 링커 중간체의 콘주게이션]
본 발명의 항체-약물 콘주게이트는, 식 (1) 로 나타내는 화합물과, 티올기 (또는 설프히드릴기라고도 한다) 를 갖는 항체를 반응시키는 것에 의해 제조할 수 있다.
본 발명의 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정은, 바람직하게는, 용매에 용해시켜, 식 (1) 로 나타내는 화합물을 포함하는 용액으로 한 후, 반응에 사용할 수 있다. 본 공정에 사용되는 용매로는, 반응을 저해하는 것이 아니면 특별히 한정은 되지 않지만, 바람직하게는, 디메틸술폭시드, 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈을 포함하는 용매를 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 디메틸술폭시드를 포함하는 용매를 사용할 수 있다.
설프히드릴기를 갖는 항체는, 당업자 주지의 방법으로 얻을 수 있다 (Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp.56 - 136, pp.456 - 493, Academic Press (1996)). 예를 들어, 트리스(2-카르복시에틸)포스핀 염산염 (TCEP) 등의 환원제를, 항체 내 사슬 간 디술파이드 1 개 당에 대하여 0.3 내지 3 몰 당량 이용하여, 에틸렌디아민사아세트산 (EDTA) 등의 킬레이트제를 포함하는 완충액 중에서, 항체와 반응시킴으로써, 항체 내 사슬 간 디술파이드가 부분적 혹은 완전하게 환원된 설프히드릴기를 갖는 항체를 얻을 수 있다.
또한, 설프히드릴기를 갖는 항체 1 개 당, 2 내지 20 몰 당량의 식 (1) 로 나타내는 화합물을 사용하여, 항체 1 개 당 2 개 내지 8 개의 약물이 결합한 항체-약물 콘주게이트를 제조할 수 있다.
제조한 항체-약물 콘주게이트의 항체 1 분자 당의 평균 약물 결합수의 산출은, 예를 들어, 280 ㎚ 및 370 ㎚ 의 2 파장에 있어서의 항체-약물 콘주게이트와 그 콘주게이션 전구체의 UV 흡광도를 측정함으로써 산출하는 방법 (UV 법) 이나, 항체-약물 콘주게이트를 환원제로 처리하여 얻어진 각 프래그먼트를 HPLC 측정에 의해 정량하여 산출하는 방법 (HPLC 법) 에 의해 실시할 수 있다.
항체와 약물 링커 중간체 (식 (1) 로 나타내는 화합물) 의 콘주게이션, 및 항체-약물 콘주게이트의 항체 1 분자 당의 평균 약물 결합수의 산출은, 국제 공개 제2014/057687호, 국제 공개 제2015/098099호, 국제 공개 제2015/115091호, 국제 공개 제2015/155998호, 및 국제 공개 제2018/135501호 등의 기재를 참고로 실시할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 HER2 항체-약물 콘주게이트」 란, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체가 항 HER2 항체인 항체-약물 콘주게이트를 나타낸다.
항 HER2 항체는, 바람직하게는, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체이다.
본 발명에 의해 제조되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수는, 바람직하게는 2 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 3 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7.5 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 약 8 이다.
그 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 본 발명의 제조 방법에 의해 제조한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용하여, 국제 공개 제2015/115091호 등의 기재를 참고로 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 HER3 항체-약물 콘주게이트」 란, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체가 항 HER3 항체인 항체-약물 콘주게이트를 나타낸다.
항 HER3 항체는, 바람직하게는, 서열 번호 3 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 4 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체이다.
본 발명에 의해 제조되는 항 HER3 항체-약물 콘주게이트의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수는, 바람직하게는 2 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 3 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7.5 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 약 8 이다.
그 항 HER3 항체-약물 콘주게이트는, 본 발명의 제조 방법에 의해 제조한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용하여, 국제 공개 제2015/155998호 등의 기재를 참고로 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 TROP2 항체-약물 콘주게이트」 란, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체가 항 TROP2 항체인 항체-약물 콘주게이트를 나타낸다.
항 TROP2 항체는, 바람직하게는, 서열 번호 5 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 470 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 6 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 234 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체이다.
본 발명에 의해 제조되는 항 TROP2 항체-약물 콘주게이트의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수는, 바람직하게는 2 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 3 내지 5 이고, 더욱 보다 바람직하게는 3.5 내지 4.5 이고, 더욱 보다 바람직하게는 약 4 이다.
그 항 TROP2 항체-약물 콘주게이트는, 본 발명의 제조 방법에 의해 제조한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용하여, 국제 공개 제2015/098099호 등의 기재를 참고로 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 B7-H3 항체-약물 콘주게이트」 란, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체가 항 B7-H3 항체인 항체-약물 콘주게이트를 나타낸다.
항 B7-H3 항체는, 바람직하게는, 서열 번호 7 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 8 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체이다.
본 발명에 의해 제조되는 항 B7-H3 항체-약물 콘주게이트의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수는, 바람직하게는 2 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 3 내지 5 이고, 더욱 보다 바람직하게는 3.5 내지 4.5 이고, 더욱 보다 바람직하게는 약 4 이다.
그 항 B7-H3 항체-약물 콘주게이트는, 본 발명의 제조 방법에 의해 제조한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용하여, 국제 공개 제2014/057687호 등의 기재를 참고로 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「항 GPR20 항체-약물 콘주게이트」 란, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체가 항 GPR20 항체인 항체-약물 콘주게이트를 나타낸다.
항 GPR20 항체는, 바람직하게는, 서열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 472 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 10 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 234 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체, 또는, 그 항체의 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 항체이다.
본 발명에 의해 제조되는 항 GPR20 항체-약물 콘주게이트의 1 항체 당의 약물 링커의 평균 결합수는, 바람직하게는 2 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 3 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 7.5 내지 8 이고, 더욱 보다 바람직하게는 약 8 이다.
그 항 GPR20 항체-약물 콘주게이트는, 본 발명의 제조 방법에 의해 제조한 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 사용하여, 국제 공개 제2018/135501호 등의 기재를 참고로 제조할 수 있다.
[의약 조성물]
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는, 1 종 이상의 약학적으로 적합성의 성분을 포함하여 투여될 수 있다. 약학적으로 적합성의 성분은, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트의 투여량이나 투여 농도 등에 따라, 이 분야에 있어서 통상적으로 사용되는 제제 첨가물 그 외로부터 적절히 선택하여 적용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는, 히스티딘 완충제 등의 완충제, 수크로오스 또는 트레할로스 등의 부형제, 그리고 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 20 등의 계면 활성제를 포함하는 의약 조성물로서 투여될 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 환자에 대해서는 전신 요법으로서 적용하는 것 외에, 암 조직에 국소적으로 적용하여 치료 효과를 기대할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 포유 동물에 대하여 바람직하게 사용할 수 있지만, 보다 바람직하게는 인간에 대하여 사용할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 바람직하게는, 주사제로서 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 수성 주사제 또는 동결 건조 주사제로서 사용할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 동결 건조 주사제로서 사용할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물이 수성 주사제인 경우, 바람직하게는, 적절한 희석액으로 희석한 후, 정맥 내에 점적 투여할 수 있다. 희석액으로는, 포도당 용액 (바람직하게는 5 ％ 포도당 용액) 이나, 생리 식염액 등을 들 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물이 동결 건조 주사제인 경우, 바람직하게는, 주사용수에 의해 용해시킨 후, 필요량을 적절한 희석액으로 희석한 후, 정맥 내에 점적 투여할 수 있다. 희석액으로는, 포도당 용액 (바람직하게는 5 ％ 포도당 용액) 이나, 생리 식염액 등을 들 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물을 투여하기 위해서 사용될 수 있는 도입 경로로는, 예를 들어, 정맥 내, 피내, 피하, 근육 내, 및 복강 내의 경로를 들 수 있고, 바람직하게는, 정맥 내의 경로를 들 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는, 인간에 대하여, 1 ∼ 180 일간에 1 회의 간격으로 투여할 수 있고, 바람직하게는, 1 주, 2 주, 3 주, 또는 4 주에 1 회의 간격으로 투여할 수 있고, 또한 보다 바람직하게는, 3 주에 1 회의 간격으로 투여할 수 있다. 또한, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트는, 1 회 당 약 0.001 ∼ 100 ㎎/㎏ 의 투여량으로 투여할 수 있고, 바람직하게는, 1 회 당 0.8 ∼ 12.4 ㎎/㎏ 의 투여량으로 투여할 수 있다. 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트가 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 경우, 바람직하게는, 1 회 당 5.4, 6.4, 또는 7.4 ㎎/㎏ 의 투여량으로 투여할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 1 회 당 5.4 ㎎/㎏ 또는 6.4 ㎎/㎏ 의 투여량으로 투여할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 암의 치료를 위해서 사용할 수 있고, 바람직하게는, 유방암, 위암 (위선암이라고 부르는 경우도 있다), 대장암 (결장 직장암이라고 부르는 경우도 있고, 결장암 및 직장암을 포함한다), 폐암 (소세포 폐암 및 비소세포 폐암을 포함한다), 식도암, 침샘암, 위 식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 자궁암 육종, 요로 상피암, 전립선암, 방광암, 위장 간질 종양, 소화관 간질 종양, 자궁 경부암, 편평 상피암, 복막암, 간장암, 간세포암, 결장암, 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 신경 상피 조직성 종양, 신경 초종 종양, 두경부암, 피부암, 인두암, 담낭암, 담관암, 중피종, 및 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암 치료를 위해서 사용할 수 있고, 예를 들어, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트가 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 경우, 보다 바람직하게는, 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위 식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위 식도 접합부 선암, 담관암, 및 파제트병으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용할 수 있고, 더욱 보다 바람직하게는, 유방암, 위암, 대장암, 또는 비소세포 폐암의 치료를 위해서 사용할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 암치료의 주요한 치료법인 약물 요법을 위한 약제로서 선택하여 사용할 수 있고, 그 결과로서, 암세포의 성장을 늦추어, 증식을 억제하고, 나아가서는 암세포를 파괴할 수 있다. 이들 작용에 의해, 암 환자에 있어서, 암에 의한 증상으로부터의 해방이나, QOL 의 개선을 달성할 수 있고, 암 환자의 생명을 유지하여 치료 효과가 달성된다. 암세포의 파괴에는 이르지 않는 경우에도, 암세포의 증식의 억제나 컨트롤에 의해 암 환자에 있어서 보다 높은 QOL 을 달성하면서 보다 장기의 생존을 달성시킬 수 있다.
이와 같은 약물 요법에 있어서의 약물 단독으로의 사용 외에, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 아쥬반트 요법에 있어서 다른 요법과 조합하여 사용할 수도 있고, 외과 수술이나, 방사선 요법, 호르몬 요법 등과 조합할 수 있다. 나아가서는 네오아쥬반트 요법에 있어서의 약물 요법으로서 사용할 수도 있다.
이상과 같은 치료적 사용 외에, 본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 미세한 전이 암세포의 증식을 억제하고, 나아가서는 파괴한다고 하는 예방 효과도 기대할 수 있다. 예를 들어, 전이 과정에서 체액 중에 있는 암세포를 억제하여 파괴하는 효과나, 어느 조직에 착상한 직후의 미세한 암세포에 대한 억제, 파괴 등의 효과를 기대할 수 있다. 따라서, 특히 외과적인 암의 제거 후에 있어서의 암 전이의 억제, 예방 효과를 기대할 수 있다.
본 발명에 의해 제조되는 항체-약물 콘주게이트를 포함하는 의약 조성물은, 다른 암치료제와 병용하여 투여할 수도 있고, 이에 의해 항 종양 효과를 증강시킬 수 있다. 이와 같은 목적으로 사용되는 다른 암치료제로서, 5-플루오로우라실 (5-FU), 페르투주맙 (Pertuzumab), 트라스투주맙 (Trastuzumab), 파클리탁셀 (Paclitaxel), 카르보플라틴 (Carboplatin), 시스플라틴 (Cisplatin), 겜시타빈 (Gemcitabine), 카페시타빈 (Capecitabine), 이리노테칸 (Irinotecan) (CPT-11), 도세탁셀 (Docetaxel), 페메트렉세드 (Pemetrexed), 소라페니브 (Sorafenib), 빈블라스틴 (Vinblastin), 비노렐빈 (Vinorelbine), 에베롤림스 (Everolims), 타네스피마이신 (Tanespimycin), 베바시주맙 (Bevacizumab), 옥살리플라틴 (Oxaliplatin), 라파티닙 (Lapatinib), 트라스투주맙 엠탄신 (Trastuzumab emtansine) (T-DM1) 및 국제 공개 제2003/038043호에 기재된 약제, 또한 LH-RH 아날로그 (류프로렐린 (Leuprorelin), 고세렐린 (Goserelin) 등), 에스트라무스틴·포스페이트 (Estramustine Phosphate), 에스트로겐 길항약 (타목시펜 (Tamoxifen), 랄록시펜 (Raloxifene) 등), 아로마타아제 저해제 (아나스트로졸 (Anastrozole), 레트로졸 (Letrozole), 및 엑세메스탄 (Exemestane) 등) 등을 들 수 있지만, 항종양 활성을 갖는 약제이면 한정되는 경우는 없다.
실시예
이하에 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 중의 「1H-NMR」 및 「13C-NMR」 은, 「핵 자기 공명 스펙트럼」 을 의미하고, 괄호 내의 CDCl3 은 측정 용매인 중클로로포름을 의미하고, DMSO-d6 은 측정 용매인 중디메틸술폭시드를 의미하고, D2O 는 측정 용매인 중수를 의미하고, MeOH-d4 는 측정 용매인 중메탄올을 의미한다. 내부 표준 물질로서 TMS (테트라메틸실란) 를 사용하였다. 1H-NMR 에 있어서의 다중도는, s = singlet, d = doublet, t = triplet, q = quartet, m = multiplet, 및 brs = broad singlet 을 의미한다.
(실시예 1)
2,5-디옥소피롤리딘-1-일 N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리시네이트
[화학식 91]
Figure pct00091
N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리신 (200.00 g, 0.751 ㏖) 의 아세토니트릴 (2.0 ℓ) 혼합물에, N-하이드록시숙신이미드 (95.10 g, 0.826 ㏖), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (172.80 g, 0.901 ㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 4 시간 교반하였다. 반응액을 1 ℃ 까지 냉각시키고, 약 3 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 아세토니트릴 (400 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리시네이트 (221.6 g, 0.610 ㏖, 수율 81.2 ％) 를 얻었다.
Figure pct00092
(실시예 2)
N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌
[화학식 92]
Figure pct00093
L-페닐알라닌 (80.0 g, 0.487 ㏖) 의 아세토니트릴 (400 ㎖), 물 (400 ㎖) 의 혼합물에, 트리에틸아민 (74.7 ㎖, 0.536 ㏖), 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리시네이트 (212.4 g, 0.585 ㏖) 를 첨가하고, 실온에서 약 2 시간 교반하였다. 반응액에 물 (800 ㎖), 진한 염산 (40.6 ㎖) 을 첨가한 후, N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (80 ㎎) 을 첨가하고, 실온에서 약 6 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 물 (160 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (157.2 g, 0.380 ㏖, 수율 78.0 ％) 을 얻었다.
Figure pct00094
Figure pct00095
(실시예 3)
({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트
[화학식 93]
Figure pct00096
N-[(9H-플루오렌-일메톡시)카르보닐]글리실글리신 (650.0 g, 1.834 ㏖) 에 테트라하이드로푸란 (9.75 ℓ), 아세트산 (1.95 ℓ) 을 첨가하고, 40 ℃ 로 가온하여 용해시켰다. 사아세트산납 (1301.3 g, 2.935 ㏖) 을 첨가하고, 약 1.5 시간 환류하였다. 실온으로 냉각시키고, 불용물을 여과 제거하고, 여과 분리한 불용물을 아세트산에틸 (3.25 ℓ) 로 세정하고, 여과액과 합치하였다. 얻어진 용액에 20 (w/v) ％ 시트르산삼나트륨 2 수화물 수용액 (3.25 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 얻어진 유기층을 20 (w/v) ％ 시트르산삼나트륨 2 수화물 수용액 (3.25 ℓ) 으로 2 회 세정하고, 그 후 유기층을 6.5 ℓ 까지 감압 농축하였다. 물 (1.95 ℓ) 을 첨가한 후, ({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트 (0.65 g) 를 첨가하여, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 물 (6.5 ℓ) 을 적하하고, 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시켜 약 3 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 30 (v/v) ％ 테트라하이드로푸란 수용액 (2.6 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, ({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트 (617.1 g, 1.675 ㏖, 수율 91.3 ％) 를 얻었다.
Figure pct00097
(실시예 4)
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트
[화학식 94]
Figure pct00098
({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트 (610.0 g, 1.656 ㏖) 의 1,2-디메톡시에탄 (9.15 ℓ) 혼합물에, 벤질글리콜레이트 (470 ㎖, 3.312 ㏖) 를 첨가하고, 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시켰다. 10 ㏖/ℓ 수산화나트륨 용액 (162.6 ㎖, 1.626 ㏖) 을 첨가하고, 약 1 시간 교반하였다. 아세트산 (47.4 ㎖) 을 첨가하고, 1 ℃ 에서 약 1 시간 교반한 후, 물 (2.0 ℓ) 을 적하하고, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (0.61 g) 를 첨가하여 0 ∼ 5 ℃ 에서 약 1 시간 교반하였다. 물 (4.7 ℓ) 을 적하하고, 0 ∼ 5 ℃ 에서 약 2.5 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 50 (v/v) ％ 1,2-디메톡시에탄 수용액 (2.44 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 습품 분말에 1,2-디메톡시에탄 (9.15 ℓ) 을 첨가하고, 실온에서 약 30 분간 교반하여 용해시켰다. 물 (3.66 ℓ) 을 첨가한 후, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (0.61 g) 를 첨가하고, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 물 (3.05 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시키고, 약 1 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 50 (v/v) ％ 1,2-디메톡시에탄 수용액 (2.44 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 습품 분말에 1,2-디메톡시에탄 (9.0 ℓ) 을 첨가하고, 실온에서 약 30 분간 교반하여 용해시켰다. 물 (3.6 ℓ) 을 첨가한 후, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (0.01 g) 를 첨가하여, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 물 (3.0 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시키고, 약 1 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 50 (v/v) ％ 1,2-디메톡시에탄 수용액 (2.4 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 습품 분말에 1,2-디메톡시에탄 (9.0 ℓ) 을 첨가하고, 실온에서 약 20 분간 교반하여 용해시켰다. 물 (3.6 ℓ) 을 첨가한 후, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (0.15 g) 를 첨가하고, 실온에서 약 2 시간 교반하였다. 물 (3.0 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 1 시간 교반하였다. 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시키고, 약 2 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 50 (v/v) ％ 1,2-디메톡시에탄 수용액 (2.4 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 미정제 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트를 얻었다. 얻어진 미정제 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트에 톨루엔 (12 ℓ) 을 첨가하고, 70 ℃ 로 가열하여, 용해시켰다. 0 ∼ 5 ℃ 까지 냉각시키고, 약 2 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 톨루엔 (2.4 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (575.5 g, 1.213 ㏖, 수율 73.2 ％) 를 얻었다.
Figure pct00099
(실시예 5)
글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 95]
Figure pct00100
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (340.0 g, 0.717 ㏖) 의 아세토니트릴 (10.2 ℓ) 혼합물에, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센 (53.6 ㎖, 0.358 ㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 2 시간 교반하였다. 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시키고, 1-하이드록시벤조트리아졸 1 수화물 (132.0 g, 0.862 ㏖), N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (311.0 g, 0.752 ㏖) 을 첨가한 후, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (158.0 g, 0.824 ㏖) 을 분할 첨가하여, 0 ∼ 5 ℃ 에서 약 1 시간 교반하였다. 10 (w/v) ％ 인산 완충액 (pH 3, 3.4 ℓ) 을 첨가하고, 실온까지 가온하였다. 분액하여 수층을 제거한 후, 3.7 ℓ 까지 감압 농축하였다. 아세트산에틸 (3.4 ℓ), 물 (1.7 ℓ) 을 첨가하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 10 (w/v) ％ 탄산수소칼륨 수용액 (3.4 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 10 (w/v) ％ 탄산수소칼륨 수용액 (3.4 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 물 (3.4 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거한 후, 1.5 ℓ 까지 감압 농축하였다. 2-메톡시에탄올 (3.74 ℓ) 을 첨가하고, 3.06 ℓ 까지 감압 농축하였다. 20 ℓ 오토클레이브에 옮겨, 테트라하이드로푸란 (1.36 ℓ), 물 (3.4 ℓ), 5 ％ 팔라듐탄소 (72.6 g, 수분 53.2 ％) 를 첨가하여, 분위기를 수소로 치환하였다. 실온에서 약 19 시간 교반한 후, 분위기를 질소로 치환하고, 물 (360 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 약 30 분간 교반하였다. 팔라듐탄소를 여과 분리하여, 팔라듐탄소를 물 (1.36 ℓ) 로 세정하고, 여과액과 합치하였다. 아세트산에틸 (0.85 ℓ), n-헵탄 (2.55 ℓ) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 유기층을 제거하고, 1.6 ℓ 까지 감압 농축하였다. 물 (221 ㎖), 2-메톡시에탄올 (126 ㎖) 을 첨가한 후, 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (0.34 g) 를 첨가하고, 40 ℃ 로 가열하여 약 19 시간 교반하였다. 에탄올 (3.4 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 18 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 에탄올 (1.02 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (243.7 g, 0.576 ㏖, 수율 80.3 ％) 를 얻었다.
Figure pct00101
(실시예 6)
벤질[(글리실아미노)메톡시]아세테이트 1H-벤조트리아졸-1-올
[화학식 96]
Figure pct00102
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (50.00 g, 105.4 m㏖) 의 아세토니트릴 (1.5 ℓ) 혼합물에, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센 (8.02 g, 52.7 m㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 4 시간 교반하였다. 실온에서 1-하이드록시벤조트리아졸 1 수화물 (35.51 g, 231.9 m㏖) 을 분할 첨가하고, 약 30 분 교반하였다. 1 ℃ 까지 냉각시키고, 약 11 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 아세토니트릴 (250 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 벤질[(글리실아미노)메톡시]아세테이트 1H-벤조트리아졸-1-올 (38.98 g, 100.6 ㏖, 수율 95.4 ％) 을 얻었다.
Figure pct00103
(실시예 7)
N-[(벤질옥시)카르복실]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-{[2-(벤질옥시)-2-옥소에톡시]메틸}글리신아미드
[화학식 97]
Figure pct00104
N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (10.99 g, 26.58 m㏖) 의 아세토니트릴 (120 ㎖), 물 (20 ㎖) 의 혼합물에, 벤질[(글리실아미노)메톡시]아세테이트 1H-벤조트리아졸-1-올 (10.00 g, 25.81 m㏖) 을 첨가하고, 2 ℃ 까지 냉각시키고, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (5.70 g, 29.73 m㏖) 을 첨가하여, 0 ∼ 5 ℃ 에서 약 3.5 시간 교반하였다. 반응액에 에탄올 (100 ㎖), 물 (150 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 14 시간 교반하였다. 물 (130 ㎖) 을 분할 첨가하여, 2 시간 교반한 후, 1 ℃ 까지 냉각시키고 약 1 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 아세토니트릴 : 물 = 1 : 2 (60 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, N-[(벤질옥시)카르복실]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-{[2-(벤질옥시)-2-옥소에톡시]메틸}글리신아미드 (15.34 g, 23.68 m㏖, 수율 91.7 ％) 를 얻었다.
Figure pct00105
(실시예 8)
글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 98]
Figure pct00106
N-[(벤질옥시)카르복실]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-{[2-(벤질옥시)-2-옥소에톡시]메틸}글리신아미드 (15.0 g, 23.16 m㏖) 의 테트라하이드로푸란 (315 ㎖), 물 (210 ㎖) 의 혼합물에, 5 ％ 팔라듐탄소 (3.31 g, 수분 54.7 ％) 를 첨가하여, 분위기를 수소로 치환하였다. 실온에서 약 2.5 시간 교반한 후, 분위기를 질소로 치환하고, 팔라듐탄소를 여과 분리하고, 팔라듐탄소를 물 (60 ㎖) 로 세정하고, 여과액과 합치하였다. 여과액을 240 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 에탄올 (150 ㎖) 을 첨가하고, 180 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 에탄올 (150 ㎖) 을 첨가하고, 135 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 에탄올 (150 ㎖) 을 첨가하고, 90 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 에탄올 (300 ㎖) 을 첨가하고, 17 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 에탄올 (75 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (8.95 g, 21.14 m㏖, 수율 91.3 ％) 를 얻었다.
Figure pct00107
Figure pct00108
(실시예 9)
6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산
[화학식 99]
Figure pct00109
6-아미노헥산산 (2.5 ㎏, 19.1 ㏖) 의 아세트산 (10 ℓ) 용액에, 무수 말레산 (1.87 ㎏, 19.1 ㏖) 의 아세트산 (10 ℓ) 용액을 25 ∼ 30 ℃ 하에서 1 시간에 걸쳐 적하하고, 동일 온도에서 2 시간 교반하였다. 얻어진 슬러리액에 황산 (0.93 ㎏, 9.55 ㏖) 을 적하하고, 100 ℃ 까지 승온 후, 16 시간 교반하였다. 반응액을 30 ℃ 까지 냉각 후, 7.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 0 ∼ 5 ℃ 의 냉수 (20 ℓ) 에 교반 조건하, 얻어진 농축액 (약 7.0 ℓ) 을 1 시간에 걸쳐 적하하고, 동일 온도에서 1 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉수 (5.0 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산 (1.46 ㎏, 6.95 ㏖, 수율 36.4 ％) 을 얻었다.
얻어진 6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산 (1.40 ㎏, 6.66 ㏖) 을 아세트산 (2.1 ℓ), 정제수 (1.4 ℓ) 의 혼합액에 25 ∼ 30 ℃ 에서 용해시키고, 정제수 (0.7 ℓ) 를 첨가한 후, 20 ∼ 25 ℃ 로 냉각 후, 2 시간 교반하였다. 얻어진 현탁액에 정제수 (7.0 ℓ) 를 1 시간에 걸쳐 적하하고, 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각 후, 1 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉수 (2.1 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산 (1.27 ㎏, 6.02 ㏖, 수율 90.4 ％) 을 얻었다.
Figure pct00110
(실시예 10)
1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온
[화학식 100]
Figure pct00111
6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산 (5.0 g, 23.6 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (3.0 g, 26.0 m㏖) 의 아세토니트릴 (50 ㎖) 혼합물에, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (5.45 g, 28.4 m㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 3.5 시간 교반하였다. 물 (100 ㎖), 톨루엔 (100 ㎖) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층을 물 (50 ㎖) 로 2 회 세정하고, 유기층을 25 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 실리카 겔 카트리지 (KP-sil 10 g) 에 차지하고, 톨루엔 : 아세톤 = 9 : 1 (100 ㎖) 로 통액하여 용출액을 회수하고, 25 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 1-부탄올 (50 ㎖) 을 첨가한 후, 1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온 (10 ㎎) 을 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반하였다. 1-부탄올 (50 ㎖) 을 적하하고, -10 ℃ 로 냉각시켜 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 1-부탄올 (20 ㎖) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온 (6.52 g, 21.1 m㏖, 수율 89.4 ％) 을 얻었다.
Figure pct00112
(실시예 11)
1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온
[화학식 101]
Figure pct00113
6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산산 (1.1 ㎏, 5.21 ㏖), N-하이드록시숙신이미드 (0.72 ㎏, 6.25 ㏖) 의 아세토니트릴 (11 ℓ) 혼합액을 -15 ℃ 까지 냉각시키고, 2,6-루티딘 (1.34 ㎏, 12.50 ㏖) 을 첨가한 후, 염화티오닐 (0.74 ㎏, 6.25 ㏖) 을 -15 ℃ ∼ -10 ℃ 에서 1 시간에 걸쳐 적하하였다. 물 (11 ℓ), 톨루엔 (11 ℓ) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층을 0 - 5 ℃ 의 냉수 (11 ℓ) 로 2 회, 0 - 5 ℃ 의 20 ％ 식염수 (11 ℓ) 로 세정하고, 유기층을 5.5 ℓ 까지 감압 농축한 후, 톨루엔 (5.5 ℓ) 을 첨가하고, 재차 5.5 ℓ 까지 감압 농축하였다. 톨루엔으로 습윤시킨 중성 실리카 겔 (Silicagel60N, 3.3 ㎏) 을 깔때기에 충전하고, 농축액을 통액하여, 톨루엔 : 아세톤 = 9 : 1 (29 ℓ) 로 세정하여 여과액을 얻었다. 얻어진 여과액을 5.5 ℓ 까지 감압 농축 후, 1-부탄올 (8.8 ℓ) 을 첨가한 후, 20 - 25 ℃ 에서 16 시간 교반하였다. 1-부탄올 (13.2 ℓ) 을 적하하고, -15 ℃ 로 냉각시켜 1 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 냉 1-부탄올 (4.4 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온 (1.45 ㎏, 4.72 ㏖, 수율 90.5 ％) 을 얻었다.
Figure pct00114
(실시예 12)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 102]
Figure pct00115
1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온 (291.3 g, 0.945 ㏖) 의 아세토니트릴 (1.8 ℓ) 용액에, 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (200.0 g, 0.472 ㏖), 물 (4.2 ℓ), N,N-디이소프로필에틸아민 (48.8 g, 0.378 ㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 9 시간 교반하였다. 아세트산이소프로필 (2.0 ℓ), 무수 인산이수소나트륨 (400.0 g), 무수 인산수소이나트륨 (26.0 g) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 유기층을 제거하였다. 테트라하이드로푸란 (1.0 ℓ), 아세트산에틸 (1.0 ℓ), 무수 인산이수소나트륨 (160.0 g) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 10 (w/v) ％ 인산 완충액 (pH 3.4, 0.6 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거한 후, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (4.0 ℓ) 을 첨가하고, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (4.0 ℓ), 아세토니트릴 (0.4 ℓ) 을 첨가하고, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 아세토니트릴 (20 ㎖) 을 첨가하고, 용액의 수분 측정한 결과 6.1 ％ (물 18.8 ㎖ 상당) 였다. 물 (19 ㎖) 을 첨가한 후, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (0.2 g) 를 첨가하고, 1,2-디메톡시에탄 (0.8 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 16 시간 교반하였다. 1,2-디메톡시에탄 (3.2 ℓ) 을 적하하고, 4.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (1.0 ℓ) 을 첨가하고, 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각시키고, 약 19.5 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 1,2-디메톡시에탄 (0.8 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (268.3 g, 0.435 ㏖, 수율 92.1 ％) 를 얻었다.
Figure pct00116
(실시예 13)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드의 1,2-디메톡시에탄 부가물
[화학식 103]
Figure pct00117
1-{6-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-6-옥소헥실}-1H-피롤-2,5-디온 (72.8 g, 0.236 ㏖) 의 아세토니트릴 (450.0 ㎖) 용액에, 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (50.0 g, 0.118 ㏖), 물 (1050.0 ㎖), N,N-디이소프로필에틸아민 (16.5 ㎖, 0.095 ㏖) 을 첨가하고, 실온에서 약 15 시간 교반하였다. 아세트산이소프로필 (500.0 ㎖), 무수 인산이수소나트륨 (100.0 g), 무수 인산수소이나트륨 (6.5 g) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 유기층을 제거하였다. 아세트산이소프로필 (500.0 ㎖) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 유기층을 제거하였다. 1,2-디메톡시에탄 (250.0 ㎖), 아세트산에틸 (250.0 ㎖), 아세토니트릴 (25.0 ㎖), 무수 인산이수소나트륨 (400.0 g) 을 첨가하여 교반한 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 아세토니트릴 (750.0 ㎖), 물 (113.0 ㎖), 염화나트륨 (30.0 g), 무수 인산이수소나트륨 (7.5 g), 인산 (85 ％, 1.5 g, 0.012 ㏖) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 물 (113.0 ㎖), 염화나트륨 (30.0 g), 무수 인산이수소나트륨 (7.5 g) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 물 (113 ㎖), 염화나트륨 (30.0 g), 무수 인산이수소나트륨 (7.5 g) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거한 후, 500.0 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (750.0 ㎖) 을 첨가한 후, 500.0 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 용액의 수분 측정한 결과 6.9 ％ (물 31.3 g 상당) 였다. 물 (9.5 ㎖), 1,2-디메톡시에탄 (1.0 ℓ) 을 첨가한 후, 실온에서 약 13 시간 교반하였다. 1,2-디메톡시에탄 (250.0 ㎖) 을 적하하고, 실온에서 약 5 시간 교반한 후, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (1.0 ℓ) 을 적하하고, 실온에서 약 1 시간 교반한 후, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (250.0 ㎖) 을 적하하고, 실온에서 약 16 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 1,2-디메톡시에탄 (250.0 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 습품 분말에 1,2-디메톡시에탄 (2.0 ℓ), 물 (65.0 ㎖) 을 첨가하고, 45 ℃ 로 승온하였다. 30 분간 교반한 후, 염화나트륨을 여과 분리하고, 염화나트륨을 1,2-디메톡시에탄/물 (97/3, 150 ㎖) 로 세정하여 여과액을 합치하고, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (1.0 ℓ) 을 첨가하고, 실온에서 약 3 시간 교반한 후, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (1.0 ℓ) 을 적하하고, 1.0 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1,2-디메톡시에탄 (250.0 ㎖) 을 적하하고, 실온에서 약 16 시간 교반한 후, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 1,2-디메톡시에탄 (250 ㎖) 으로 세정하였다. 얻어진 분말을 감압하 (4 ㎪) 25 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드의 1,2-디메톡시에탄 부가물 (65.7 g, 0.107 ㏖, 수율 90.3 ％) 을 결정으로서 얻었다.
Figure pct00118
Figure pct00119
분말 X 선 회절 :
표제 화합물의 결정에 대하여, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절을 실시하였다. 결과를 표 1 및 도 3 에 나타낸다. 19.0°, 및 25.0°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크가 확인되었다.
Figure pct00120
(실시예 14)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 104]
Figure pct00121
메탄술폰산(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-아미늄 2 수화물 (그로스량 154.6 g, 수분치 2.95 ％ 보정 후 내용량 150.0 g, 0.282 ㏖) 의 테트라하이드로푸란 (1.8 ℓ) 현탁액에, 5 (w/v) ％ 황산나트륨 수용액 (1.5 ℓ), N-메틸모르폴린 (28.5 g, 0.282 ㏖) 을 첨가하고, 32 ℃ 에서 약 1 시간 교반하였다. 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸 (8.0 g, 56.3 m㏖), N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (그로스량 232.0 g, 1,2-디메톡시에탄 2.50 ％ 환산 후 내용량 226.2 g, 0.367 ㏖), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (108.2 g, 0.564 ㏖) 을 첨가하고, 29 ∼ 32 ℃ 에서 약 1 시간 교반한 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 아세트산에틸 (1.8 ℓ), 5 (v/v) ％ 아세트산 수용액 (0.45 ℓ) 을 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 활성탄 (15.0 g, 쿄료쿠 시라사기 (오사카 가스 케미컬 주식회사 제조)) 를 첨가하여 실온에서 약 30 분간 교반한 후, 활성탄을 여과 분리하여, 활성탄을 테트라하이드로푸란 (0.45 ℓ) 으로 세정하여 여과액을 합치하고, 0.75 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1-프로판올 (1.5 ℓ) 을 첨가하고, 0.75 ℓ 까지 감압 농축하고, 아세톤 : 1-프로판올 = 1 : 1 (3.0 ℓ) 을 첨가하였다. N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (0.15 g) 를 첨가하고, 실온에서 약 45 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 아세톤 : 1-프로판올 = 1 : 1 (0.6 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 습품 분말에 테트라하이드로푸란 (1.5 ℓ), 물 (0.3 ℓ) 을 첨가하여 용해시키고, 0.75 ℓ 까지 감압 농축하였다. 1-프로판올 (1.5 ℓ) 을 첨가하고, 0.75 ℓ 까지 감압 농축하고, 아세톤 : 1-프로판올 = 1 : 1 (3.0 ℓ) 을 첨가하였다. N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (0.15 g) 를 첨가하고, 실온에서 약 24 시간 교반하였다. 석출물을 여과하고, 여과 분리한 결정을 아세톤 : 1-프로판올 = 1 : 1 (0.6 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (254.6 g, 수율 87.3 ％) 를 결정으로서 얻었다.
Figure pct00122
분말 X 선 회절 :
표제 화합물의 결정에 대하여, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절을 실시하였다. 결과를 표 2 및 도 4 에 나타낸다. 5.6°, 15.5°, 및 22.0°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크가 확인되었다.
Figure pct00123
(실시예 15)
({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트
[화학식 105]
Figure pct00124
질소 분위기하, N-9-플루오레닐메톡시카르보닐글리실글리신 (2.85 ㎏, 8.04 ㏖) 의 무수 테트라하이드로푸란 (38.0 ㎏) 현탁액에, 아세트산 (2.41 ㎏, 40.1 ㏖), 사아세트산납 (IV) (5.35 ㎏, 12.0 ㏖) 을 첨가하고, 1.5 시간 환류하였다. 실온까지 냉각시킨 후, 석출되어 있는 고체를 여과 분리하고, 여과 분리한 고체를 테트라하이드로푸란 (10.1 ㎏) 으로 세정하였다. 얻어진 여과 세정액을 감압하, 액량이 16 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 얻어진 농축액에 아세트산에틸 (26 ㎏), 10 ％ 시트르산 수용액 (17.1 ℓ), 20 ％ 식염수 (5.7 ℓ) 를 첨가하고, 교반 후 분액하였다. 얻어진 유기층을 10 ％ 시트르산 수용액 (17.1 ℓ), 9 ％ 탄산수소나트륨 수용액 (28.5 ℓ), 20 ％ 식염수 (14.3 ℓ) 로 순차적으로 분액 세정하였다. 얻어진 유기층에 실리카 겔 60 (5.7 ㎏), 아세트산에틸 (10.3 ㎏) 을 첨가하여 1 시간 교반한 후, 고체를 여과 분리하고, 여과 분리한 고체를 아세트산에틸 (7.7 ㎏) 로 세정하였다. 얻어진 여과 세정액을 감압하, 액량이 5 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 시클로펜틸메틸에테르 (24.5 ㎏) 를 첨가하였다. 재차 감압하, 액량이 5 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 얻어진 농축액에 시클로펜틸메틸에테르 (14.7 ㎏) 를 첨가하고, 5 ℃ 정도에서 1 시간 교반하였다. 석출된 고체를 여과하고, 얻어진 결정을 5 ℃ 정도로 냉각시킨 시클로펜틸메틸에테르 (4.9 ㎏) 로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (2.01 ㎏, 수율 68 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.
(실시예 16)
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트
[화학식 106]
Figure pct00125
질소 분위기하, ({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메틸아세테이트 (2.01 ㎏, 5.46 ㏖) 의 무수 1,2-디메톡시에탄 (21 ㎏) 현탁액에 글리콜산벤질 (1.81 ㎏, 10.9 ㏖) 을 첨가하고, 0 ℃ 정도로 냉각시켰다. 트리스(펜타플루오로페닐)보란 (142 g, 0.27 ㏖) 을 첨가하고, 동 온도에서 3 시간 교반 후, 아세트산에틸 (27.1 ㎏), 10 ％ 탄산수소칼륨 수용액을 첨가하고, 실온으로 승온하여, 분액하였다. 얻어진 유기층에 10 ％ 식염수 (20.1 ℓ) 를 첨가하고 분액 세정하였다. 얻어진 유기층을 감압하, 액량이 4 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 메탄올 (15.7 ㎏) 을 첨가하였다. 감압하, 액량이 4 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 얻어진 농축액에 메탄올 (7.8 ㎏) 을 첨가하였다. 감압하, 액량이 4 ℓ 정도가 될 때까지 농축하였다. 얻어진 농축액에 메탄올 (12.5 ㎏) 을 첨가하여, 5 ℃ 정도로 냉각시키고, 1 시간 교반하였다. 석출된 결정을 여과하고, 얻어진 결정을 5 ℃ 정도로 냉각시킨 메탄올 (4.7 ㎏) 로 세정하였다. 얻어진 고체를 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (2.28 ㎏, 수율 88 ％) 을 얻었다.
(실시예 17)
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐아라닐}아미노)메톡시]아세테이트
[화학식 107]
Figure pct00126
질소 분위기하, 벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실}아미노)메톡시]아세테이트 (2.28 ㎏, 4.81 ㏖) 의 N,N-디메틸아세트아미드 (15.0 ㎏) 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (0.37 ㎏, 2.4 ㏖) 을 첨가하고, 실온하 30 분 교반하였다. 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (0.60 ㎏, 2.4 ㏖), 1-하이드록시벤조트리아졸 1 수화물 (0.74 ㎏, 4.8 ㏖), N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (2.19 ㎏, 4.37 ㏖), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카르보디이미드 염산염 (0.84 ㎏, 4.37 ㏖) 을 첨가하고, 실온하 3 시간 교반하였다. 아세트산에틸 (21.0 ㎏), 10 ％ 식염수 (34 ℓ) 를 첨가하고, 교반 후 분액하였다. 얻어진 유기층을 10 ％ 시트르산 수용액 (11.4 ℓ) 으로 분액 세정하였다. 얻어진 유기층에 테트라하이드로푸란 (20 ㎏), 15 ％ 탄산수소칼륨 수용액 (22.8 ℓ) 을 첨가하고, 교반 분액하였다. 얻어진 유기층을 10 ％ 식염수 (22.8 ℓ) 로 분액 세정하였다. 얻어진 유기층을 감압하, 액량이 6.8 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 2-프로판올 (12.4 ㎏) 을 첨가하였다. 감압하, 재차 액량이 6.8 ℓ 정도가 될 때까지 농축하고, 얻어진 농축액에 약 50 ℃ 의 가온하, 2-프로판올 (30.2 ㎏) 을 첨가하였다. 동 온도에서 1 시간 교반 후, 5 ℃ 정도까지 냉각시키고 추가로 2 시간 교반하였다. 석출된 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 5 ℃ 정도로 냉각시킨 2-프로판올 (14.2 ㎏) 로 세정하였다. 얻어진 결정 2 를 2-프로판올 (36 ㎏) 에 현탁시켜, 5 ℃ 정도에서 1 시간 교반한 후에, 석출되어 있는 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 5 ℃ 정도로 냉각시킨 2-프로판올 (28.5 ㎏) 로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 50 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (3.34 ㎏, 수율 94 ％) 을 얻었다.
Figure pct00127
Figure pct00128
(실시예 18)
N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 108]
Figure pct00129
벤질[({N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐}아미노)메톡시]아세테이트 (367 g, 0.499 ㏖) 의 테트라하이드로푸란 (5.88 ㎏), 물 (1.61 ℓ) 현탁액에 팔라듐탄소-에틸렌디아민 착물 (28 g) 을 첨가하고, 상압의 수소 가스 분위기, 실온하 1 시간 내지 3 시간 교반하였다. 촉매를 여과 분리하고, 여과 분리한 촉매를 테트라하이드로푸란 (1.63 ㎏) 으로 세정하고, 여과 세정액을 얻었다. 상기, 반응과 촉매의 여과 분리 조작을 9 회 반복하고, 얻어진 9 회 분의 여과 세정액을 합치하였다. 감압하, 액량이 17 ℓ 정도가 될 때까지 농축하였다. 얻어진 농축액에 2-프로판올 (39 ㎏) 을 첨가하고, 감압하, 액량이 17 ℓ 정도가 될 때까지 농축시키는 조작을 3 회 반복하였다. 얻어진 농축액에 아세트산에틸 (45 ㎏) 을 첨가하고, 실온하에서 6 시간 교반하였다. 이 현탁액을 5 ℃ 정도에서 추가로 1 시간 교반하였다. 석출된 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 5 ℃ 정도로 냉각시킨 2-프로판올과 아세트산에틸의 1 : 3 혼합액 (23.1 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물의 미정제체 (2.18 ㎏, 수율 75 ％) 를 얻었다. 얻어진 미정제체 (400 g, 0.62 ㏖) 에 테트라하이드로푸란 (2.4 ℓ), 아세트산에틸 (5.6 ℓ) 에 현탁시키고, 1 ％ 황산수소칼륨 수용액 (4 ℓ) 을 첨가하여 32 ℃ 정도까지 가온 교반하여, 용해시켰다. 분액하고, 얻어진 유기층을 물 (2 ℓ) 로 분액 세정하였다. 얻어진 유기층을 감압하 액량 2 ℓ 정도까지 농축하였다. 얻어진 농축액에 아세토니트릴 (6 ℓ) 을 첨가하고, 감압하 액량 2.8 ℓ 정도까지 농축시킨 결과 고체가 석출되었다. 아세트산에틸 (6 ℓ) 을 첨가하고, 실온에서 18 시간 교반한 후, 5 ℃ 정도로 냉각시키고, 3 시간 교반하였다. 석출되어 있는 고체를 여과하고, 여과 분리한 결정을 아세토니트릴과 아세트산에틸의 1 : 2 혼합액 (7 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 고체를 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (356 g, 수율 89 ％) 을 얻었다.
Figure pct00130
Figure pct00131
(실시예 19)
N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 109]
Figure pct00132
질소 분위기하, 메탄술폰산 (1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-아미늄 2 수화물 (260 g, 0.458 ㏖) 의 디메틸술폭시드 (1.8 ℓ), 테트라하이드로푸란 (1.3 ℓ) 현탁액에 트리에틸아민 (55.6 g, 0.549 ㏖), 1-하이드록시벤조트리아졸 1 수화물 (84.2 g, 0.549 ㏖), N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (325 g, 0.503 ㏖), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카르보디이미드 염산염 (114 g, 0.595 ㏖) 을 첨가하고, 실온하 2 시간 교반하였다. 테트라하이드로푸란 (3.9 ℓ), 아세트산에틸 (2.6 ℓ), 11 ％ 탄산수소칼륨 수용액 (5.2 ℓ) 을 첨가하고, 교반 분액하였다. 얻어진 유기층을 19 ％ 시트르산 수용액 (3.9 ℓ), 22 ％ 탄산수소칼륨 수용액 (2.6 ℓ), 18 ％ 식염수 (0.78 ℓ) 로 순차적으로 세정하였다. 얻어진 유기층에 활성탄 (52 g) 을 첨가하고, 30 분 교반한 후, 테트라하이드로푸란 (0.78 ℓ), 무수 황산마그네슘 (0.78 g) 을 첨가하고, 30 분 교반하였다. 고체를 여과 분리하고, 여과 분리한 고체를 테트라하이드로푸란 (0.78 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 여과 세정액을 감압하 액량 200 ㎖ 정도까지 농축하였다. 얻어진 농축액에 아세트산에틸 (1.3 ℓ) 을 첨가하고, 감압하 액량 200 ㎖ 정도까지 농축하였다. 얻어진 농축액에 테트라하이드로푸란 (1.8 ℓ) 을 첨가하였다. 얻어진 용액을 다른 용기에 준비한 아세트산에틸 (1.3 ℓ), 시클로펜틸메틸에테르 (1.3 ℓ) 혼합액에 12 분에 걸쳐 적하하였다. 이 현탁액에 시클로펜틸메틸에테르 (2.6 ℓ) 를 첨가하고, 18 시간 교반한 후, 5 ℃ 정도로 냉각시키고, 추가로 1 시간 교반하였다. 석출되어 있는 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 테트라하이드로푸란과 시클로펜틸메틸에테르의 1 : 3 혼합액 (1.3 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 고체를 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (408 g, 수율 84 ％) 을 얻었다.
Figure pct00133
Figure pct00134
(실시예 20)
글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 110]
Figure pct00135
질소 기류하, N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (400 g, 0.376 ㏖) 의 탈수 테트라하이드로푸란 (8 ℓ) 현탁액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (51.6 g, 0.339 ㏖) 을 5 분 마다, 8 회로 분할하여 첨가하고, 2.5 시간 교반하였다. 질소 기류하, 석출되어 있는 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 테트라하이드로푸란 (2.4 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 고체를 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물을 포함하는 혼합물 (363 g, 수율 115 ％) 을 얻었다.
Figure pct00136
Figure pct00137
(실시예 21)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드의 종정의 조제
[화학식 111]
Figure pct00138
글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (200 ㎎, 0.24 m㏖) 의 피리딘 (0.2 ㎖), 테트라하이드로푸란 (2.0 ㎖), 아세토니트릴 (0.6 ㎖) 현탁액에 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (120 ㎎, 0.48 m㏖), 트리에틸아민 (100 ㎕, 0.72 m㏖), 6-말레이미드헥산산 N-숙신이미딜 (73 ㎎, 0.24 m㏖) 을 첨가하고, 실온하 3 시간 교반하였다. 반응액을 실리카 겔 플래시 칼럼 크로마토그래피 (Biotage AB) [테트라하이드로푸란 : 아세톤 = 3 : 7 ∼ 7 : 3 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물을 유상물로서 얻었다. 얻어진 유상물 19.5 ㎎ 에 아세톤 (0.4 ㎖), 2-부탄올 (0.2 ㎖) 을 첨가하고, 약 60 ℃ 로 가온하고, 석출된 고체를 실온에서 여과하고, 여과 분리한 고체를 2-부탄올 (약 0.2 ㎖) 로 세정하여, 표기 화합물 (14.3 ㎎) 을 무색 분말로서 얻었다. 얻어진 분말은 종정으로서 다음 반응에 사용하는 것으로 하였다.
(실시예 22)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 112]
Figure pct00139
질소 분위기하, 피리딘 (0.35 ℓ), 아세토니트릴 (1.1 ℓ), 테트라하이드로푸란 (3.5 ℓ) 에 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (209 g, 0.832 ㏖), 6-말레이미드헥산산 N-숙신이미딜 (128 g, 0.415 ㏖), 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (350 g, 0.416 ㏖) 를 용해시킨 후, 트리에틸아민 (63.2 g, 0.625 ㏖) 을 첨가하고, 실온하 3.5 시간 교반하였다. 테트라하이드로푸란 (3.5 ℓ), 19 ％ 시트르산 수용액 (3.5 ℓ), 아세트산에틸 (2.5 ℓ), 18 ％ 식염수 (2.5 ℓ) 를 첨가하고, 교반 후 분액하였다. 얻어진 유기층에 19 ％ 시트르산 수용액 (2.5 ℓ), 18 ％ 식염수 (2.5 ℓ) 를 첨가하고, 교반 후 분액하였다. 얻어진 유기층을 22 ％ 탄산수소칼륨 수용액 (2.1 ℓ) 이어서 18 ％ 식염수 (1.8 ℓ) 로 분액 세정하였다. 얻어진 유기층을 다른 용기에 준비한 활성탄 (35 g) 의 아세토니트릴 (35 ℓ) 현탁액에 적하하고, 30 분 교반한 후, 활성탄을 여과 분리하고, 여과 분리한 활성탄을 아세토니트릴 (1.8 ℓ) 로 세정하였다. 얻어진 여과 세정액을 감압하 바깥 온도 40 ℃ 정도에서 용매가 유출되지 않게 될 때까지 농축하였다. 얻어진 농축 잔류물에 아세톤 (1.8 ℓ), 1-프로판올 (3.5 ℓ) 을 순차적으로 첨가하고, 55 ℃ 로 가온하여 용해시킨 후, 실온까지 냉각시켰다. 실시예 21 에서 얻은 분말 (0.2 g) 을 종정으로서 첨가하고, 86 시간 교반한 후, 석출되어 있는 고체를 여과하고, 여과 분리한 고체를 아세톤 (1.1 ℓ) 으로 세정하였다. 얻어진 고체를 감압하 40 ℃ 에서 건조시켜, 표기 화합물 (191 g, 수율 44 ％) 을 결정으로서 얻었다.
(실시예 23)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 113]
Figure pct00140
무수 황산나트륨 (1.8 g), 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸 (0.16 g, 1.13 m㏖), N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (그로스량 5.76 g, 1,2-디메톡시에탄 12.40 ％ 환산 후 내용량 5.05 g, 8.18 m㏖) 를 포함하는 정제수와 테트라하이드로푸란 (24 ㎖ 및 18 ㎖) 의 혼합액에 대하여, 20 ∼ 30 ℃ 에서 메탄술폰산(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-아미늄 (3.0 g, 5.64 m㏖) 을 포함하는 정제수와 테트라하이드로푸란 (9 ㎖ 및 15 ㎖) 의 혼합 현탁액을 첨가하였다. 혼합액에 테트라하이드로푸란 (9 ㎖) 및 N-메틸모르폴린 (0.63 g, 6.23 m㏖) 을 포함하는 테트라하이드로푸란 7.5 ㎖ 의 용액을 첨가하고, 동일 온도에서 15 분 교반 후, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (2.16 g, 11.27 m㏖) 및 정제수와 테트라하이드로푸란 (1.5 ㎖ 및 1.5 ㎖) 의 혼합액을 첨가하였다. 혼합액을 20 ∼ 30 ℃ 에서 30 분 이상 교반하고, 반응 종료를 확인 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층을 15 ∼ 25 ℃ 로 온도 조정하고, 아세트산에틸 (36 ㎖) 및 무수 황산나트륨 (1.26 g), N-메틸모르폴린 (0.14 g, 1.38 m㏖) 을 포함하는 정제수 (24 ㎖) 를 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층에 정제수 (9 ㎖) 를 첨가하여 교반, 분액하고, 추가로, 아세트산 (0.45 ㎖) 을 포함하는 정제수 (9 ㎖) 를 첨가하여 교반, 분액하여, 유기층을 얻었다. 활성탄 (0.30 g, 쿄료쿠 시라사기 (오사카 가스 케미컬 주식회사 제조)) 을 첨가하여 실온에서 약 15 분간 교반한 후, 활성탄을 여과 분리하고, 활성탄을 테트라하이드로푸란 (9 ㎖) 으로 세정하여 여과액을 합치하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 농축액에 테트라하이드로푸란 (75 ㎖) 을 첨가하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하고, 추가로 테트라하이드로푸란 (45 ㎖) 을 첨가하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 농축액 중의 수분량이 8.0 ％ (v/v) 이하인 것을 확인 후, 아세톤과 1-프로판올 (30 ㎖ 및 71 ㎖) 의 혼합액을 첨가하였다. N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (30 ㎎) 를 첨가하고, 20 ∼ 30 ℃ 에서 12 시간 이상 교반하였다. 현탁액을 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각 후, 추가로 24 시간 이상 교반하여, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 0 ∼ 5 ℃ 에서 아세톤과 1-프로판올의 1 : 1 혼합액 (30 ㎖) 으로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 35 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드의 미정제 결정 (5.23 g, 수율 89.6 ％) 을 얻었다.
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드의 미정제 결정 (4.50 g, 4.35 m㏖) 에 아세트산 (15 ㎕) 을 포함하는 아세톤과 정제수 (10.6 ㎖ 및 2.9 ㎖) 의 혼합액을 첨가하고, 34 ∼ 38 ℃ 에서 1 시간 이상 교반하여, 용해를 확인 후, 20 ∼ 25 ℃ 로 냉각시켰다. 아세톤과 1-프로판올 (31.5 ㎖ 및 64.8 ㎖) 의 혼합액을 첨가하고, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 (27 ㎎) 를 첨가하고, 20 ∼ 25 ℃ 에서 24 시간 이상 교반하였다. 현탁액을 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각 후, 추가로 12 시간 이상 교반하여, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 0 ∼ 5 ℃ 아세톤과 1-프로판올의 1 : 1 혼합액 (27 ㎖) 으로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 35 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드의 정제 결정 (4.37 g, 수율 93.0 ％) 을 얻었다.
기기 데이터는, 실시예 14 에 기재된 화합물과 동일하였다.
(실시예 24)
N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드
[화학식 114]
Figure pct00141
무수 황산나트륨 (1.8 g), 시아노(하이드록시이미노)아세트산에틸 (0.16 g, 1.13 m㏖), N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 (그로스량 5.76 g, 1,2-디메톡시에탄 12.40 ％ 환산 후 내용량 5.05 g, 8.18 m㏖) 를 포함하는 정제수와 테트라하이드로푸란 (24 ㎖ 및 18 ㎖) 의 혼합액에 대하여, 20 ∼ 30 ℃ 에서 메탄술폰산(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-아미늄 (3.0 g, 5.64 m㏖) 을 포함하는 정제수와 테트라하이드로푸란 (9 ㎖ 및 15 ㎖) 의 혼합 현탁액을 첨가하였다. 혼합액에 테트라하이드로푸란 (9 ㎖) 및 N-메틸모르폴린 (0.63 g, 6.23 m㏖) 을 포함하는 테트라하이드로푸란 7.5 ㎖ 의 용액을 첨가하고, 동일 온도에서 15 분 교반 후, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 (2.16 g, 11.27 m㏖) 및 정제수와 테트라하이드로푸란 (1.5 ㎖ 및 1.5 ㎖) 의 혼합액을 첨가하였다. 혼합액을 20 ∼ 30 ℃ 에서 30 분 이상 교반하고, 반응 종료를 확인 후, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층을 15 ∼ 25 ℃ 로 온도 조정하고, 아세트산에틸 (36 ㎖) 및 무수 황산나트륨 (1.26 g), N-메틸모르폴린 (0.14 g, 1.38 m㏖) 을 포함하는 정제수 (24 ㎖) 를 첨가하여 교반하고, 분액하여 수층을 제거하였다. 유기층에 정제수 (9 ㎖) 를 첨가하여 교반, 분액하고, 추가로, 아세트산 (0.45 ㎖) 을 포함하는 정제수 (9 ㎖) 를 첨가하여 교반, 분액하여, 유기층을 얻었다. 활성탄 (0.30 g, 쿄료쿠 시라사기 (오사카 가스 케미컬 주식회사 제조)) 을 첨가하여 실온에서 약 15 분간 이상 교반한 후, 활성탄을 여과 분리하여, 활성탄을 테트라하이드로푸란 (9 ㎖) 으로 세정하여 여과액을 합치하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 농축액에 테트라하이드로푸란 (75 ㎖) 을 첨가하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하고, 추가로 테트라하이드로푸란 (45 ㎖) 을 첨가하고, 30 ㎖ 까지 감압 농축하였다. 농축액 중의 수분량이 8.0 ％ (v/v) 이하인 것을 확인 후, 아세톤과 1-프로판올 (30 ㎖ 및 71 ㎖) 의 혼합액을 첨가하고, 20 ∼ 30 ℃ 에서 22 시간 교반하였다. 현탁액을 0 ∼ 5 ℃ 로 냉각 후, 추가로 24 시간 이상 교반하여, 석출물을 여과하고, 여과 분리한 분말을 0 ∼ 5 ℃ 아세톤과 1-프로판올의 1 : 1 혼합액 (30 ㎖) 으로 세정하였다. 얻어진 결정을 감압하 35 ℃ 에서 건조시켜, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드의 결정 (5.08 g, 수율 87.0 ％) 을 얻었다.
기기 데이터는, 실시예 14 에 기재된 화합물과 동일하였다.
서열표 프리텍스트
서열 번호 1 : 항 HER2 항체 중사슬의 아미노산 서열
서열 번호 2 : 항 HER2 항체 경사슬의 아미노산 서열
서열 번호 3 : 항 HER3 항체의 중사슬의 아미노산 서열
서열 번호 4 : 항 HER3 항체의 경사슬의 아미노산 서열
서열 번호 5 : 항 TROP2 항체 중사슬의 아미노산 서열
서열 번호 6 : 항 TROP2 항체 경사슬의 아미노산 서열
서열 번호 7 : 항 B7-H3 항체 중사슬의 아미노산 서열
서열 번호 8 : 항 B7-H3 항체 경사슬의 아미노산 서열
서열 번호 9 : 항 GPR20 항체 중사슬의 아미노산 서열
서열 번호 10 : 항 GPR20 항체 경사슬의 아미노산 서열
<110> DAIICHI SANKYO COMPANY, LIMITED <120> IMPROVED MANUFACTURING METHOD OF ANTIBODY-DRUG CONJUGATE <130> DSPCT-FP1824 <150> JP2017-167691 <151> 2017-08-31 <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain of anti-HER2 antibody <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 2 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain of anti-HER2 antibody <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 3 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain of anti-HER3 antibody <400> 3 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Glu Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Asp Lys Trp Thr Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 4 <211> 220 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain of anti-HER3 antibody <400> 4 Asp Ile Glu Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Ser Asn Arg Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Asn Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Tyr Tyr Ser Thr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 5 <211> 470 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain of anti-TROP2 antibody <400> 5 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Thr Ala Gly Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr His Ser Gly Val Pro Lys Tyr Ala 65 70 75 80 Glu Asp Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Phe Gly Ser Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp 115 120 125 Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 145 150 155 160 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 210 215 220 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro 225 230 235 240 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 245 250 255 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 305 310 315 320 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 6 <211> 234 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain of anti-TROP2 antibody <400> 6 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 20 25 30 Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp 35 40 45 Val Ser Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 50 55 60 Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr 100 105 110 Ile Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 7 <211> 471 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain of anti-B7-H3 antibody <400> 7 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Asn Tyr Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Asp Val Lys Tyr Asn 65 70 75 80 Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Trp Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Tyr Tyr Phe 115 120 125 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 145 150 155 160 Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys 210 215 220 Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu 225 230 235 240 Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 260 265 270 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 275 280 285 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 290 295 300 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 305 310 315 320 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 325 330 335 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 340 345 350 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 355 360 365 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys 370 375 380 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 385 390 395 400 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 405 410 415 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 420 425 430 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 435 440 445 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 450 455 460 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 8 <211> 233 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain of anti-B7-H3 antibody <400> 8 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Arg 35 40 45 Leu Ile Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg 50 55 60 Pro Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg 65 70 75 80 Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser 85 90 95 Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Asn Ser 100 105 110 Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 130 135 140 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 145 150 155 160 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 165 170 175 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 180 185 190 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 195 200 205 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 210 215 220 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 9 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain of anti-GPR20 antibody <400> 9 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Tyr Ile Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Lys Tyr Met Gly Phe Ile Asn Pro Gly Ser Gly His Thr Asn Tyr Asn 65 70 75 80 Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Thr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Gly Gly Phe Leu Arg Ile Ile Thr Lys 115 120 125 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 130 135 140 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 145 150 155 160 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 165 170 175 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 180 185 190 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 195 200 205 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 210 215 220 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val 225 230 235 240 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 305 310 315 320 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 340 345 350 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 10 <211> 234 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain of anti-GPR20 antibody <400> 10 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Thr Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 20 25 30 Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Ser 35 40 45 Val Ser Thr Tyr Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Gln Pro 50 55 60 Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Gly Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Asn 100 105 110 Glu Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230

Claims (52)

  1. 식 (1)
    Figure pct00142

    로 나타내는 화합물의 결정.
  2. 제 1 항에 있어서,
    동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 5.6 ± 0.2°, 15.5 ± 0.2°, 및 22.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, 결정.
  3. 식 (1)
    Figure pct00143

    로 나타내는 화합물이 용해된 용액을 조제하는 공정, 이어서, 상기의 용액으로부터 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 제조 방법.
  4. 제 3 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 5.6 ± 0.2°, 15.5 ± 0.2°, 및 22.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, 제조 방법.
  5. 제 3 항 또는 제 4 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이 용해된 용액이, 저급 케톤과 저급 알코올을 용매로서 포함하는, 제조 방법.
  6. 제 5 항에 있어서,
    저급 케톤이 아세톤인, 제조 방법.
  7. 제 5 항에 있어서,
    저급 케톤이 메틸에틸케톤인, 제조 방법.
  8. 제 5 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    저급 알코올이 1-프로판올인, 제조 방법.
  9. 제 5 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    저급 알코올이 2-부탄올인, 제조 방법.
  10. 제 3 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정의 종정을 첨가하는 공정을 포함하는, 제조 방법.
  11. 제 3 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (I) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (I) 은,
    식 (B)
    Figure pct00144

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호하여,
    식 (8)
    Figure pct00145

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (8) 로 나타내는 화합물과,
    식 (C)
    Figure pct00146

    로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
    식 (10)
    Figure pct00147

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
    Figure pct00148

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (1)
    Figure pct00149

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  12. 제 3 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (II) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (II) 는,
    식 (B)
    Figure pct00150

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (D)
    Figure pct00151

    로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (D) 로 나타내는 화합물과,
    식 (C)
    Figure pct00152

    로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
    식 (E)
    Figure pct00153

    로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (E) 로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (10)
    Figure pct00154

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
    Figure pct00155

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (1)
    Figure pct00156

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  13. 제 11 항 또는 제 12 항에 있어서,
    1,2-디메톡시에탄을 포함하는 용매에, 식 (10) 으로 나타내는 화합물을 용해시키는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, 제조 방법.
  14. 제 13 항에 있어서,
    식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, 제조 방법.
  15. 제 11 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 황산나트륨 수용액과 테트라하이드로푸란의 2 상계 중에서 실시되는, 제조 방법.
  16. 제 3 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (III) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (III) 은,
    식 (B)
    Figure pct00157

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타내고, R2 는 보호기로 보호된 카르복시기를 나타낸다) 의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (F)
    Figure pct00158

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (F) 로 나타내는 화합물과,
    식 (11)
    Figure pct00159

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (G)
    Figure pct00160

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (G) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (16)
    Figure pct00161

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과,
    식 (C)
    Figure pct00162

    로 나타내는 화합물 (여기서, X 는 활성 에스테르기, 또는 카르복시기를 나타낸다) 을 축합함으로써,
    식 (1)
    Figure pct00163

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  17. 제 11 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염인, 제조 방법.
  18. 제 11 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서, m 은 0 ∼ 3 의 범위 내이다) 인, 제조 방법.
  19. 제 11 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·2 수화물인, 제조 방법.
  20. 제 11 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (B) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (IV) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (IV) 는,
    식 (H)
    Figure pct00164

    로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 보호기로 보호된 아미노기를 나타낸다) 을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
    식 (J)
    Figure pct00165

    로 나타내는 화합물 (여기서, R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (J) 로 나타내는 화합물과,
    식 (K)
    Figure pct00166

    로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 제 11 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 기재된 R2 와 동일한 의의를 나타낸다) 을, 산 또는 염기의 존재하에서 반응시킴으로써,
    식 (L)
    Figure pct00167

    로 나타내는 화합물 (여기서, R2 및 R3 은 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (M)
    Figure pct00168

    으로 나타내는 화합물 (여기서, R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정, 이어서, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과,
    식 (N)
    Figure pct00169

    으로 나타내는 화합물 (여기서, R1 은 제 11 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 기재된 R1 과 동일한 의의를 나타낸다) 을 축합함으로써,
    식 (B)
    Figure pct00170

    로 나타내는 화합물 (여기서, R1 및 R2 는 상기와 동일한 의의를 나타낸다) 로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  21. 제 20 항에 있어서,
    식 (H) 로 나타내는 화합물을 사아세트산납과 반응시킴으로써 식 (J) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 아세트산의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  22. 제 20 항 또는 제 21 항에 있어서,
    식 (J) 로 나타내는 화합물과 식 (K) 로 나타내는 화합물을 반응시켜, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 수산화나트륨 수용액의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  23. 제 20 항 또는 제 21 항에 있어서,
    식 (J) 로 나타내는 화합물과 식 (K) 로 나타내는 화합물을 반응시켜, 식 (L) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  24. 제 20 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (L) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정 후, 산을 첨가함으로써, 식 (M) 으로 나타내는 화합물과 산의 염을 석출시키는 공정을 포함하는, 제조 방법.
  25. 제 24 항에 있어서,
    산이, 1-하이드록시벤조트리아졸인, 제조 방법.
  26. 제 11 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1 이 벤질옥시카르보닐기로 보호된 아미노기인, 제조 방법.
  27. 제 11 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, 제조 방법.
  28. 제 11 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2 가 벤질기로 보호된 카르복시기인, 제조 방법.
  29. 제 20 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3 이 (9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐기로 보호된 아미노기인, 제조 방법.
  30. 제 11 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항에 있어서,
    X 가 (2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시카르보닐기인, 제조 방법.
  31. 제 3 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (V) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (V) 는,
    식 (2)
    Figure pct00171

    로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
    식 (3)
    Figure pct00172

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써,
    식 (4)
    Figure pct00173

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (5)
    Figure pct00174

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (5) 로 나타내는 화합물과,
    식 (6)
    Figure pct00175

    으로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (7)
    Figure pct00176

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (7) 로 나타내는 화합물의 아미노기 및 카르복시기의 보호기를 탈보호하여,
    식 (8)
    Figure pct00177

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (8) 로 나타내는 화합물과,
    식 (9)
    Figure pct00178

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (10)
    Figure pct00179

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11)
    Figure pct00180

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (1)
    Figure pct00181

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  32. 제 31 항에 있어서,
    1,2-디메톡시에탄을 포함하는 용매에, 식 (10) 으로 나타내는 화합물을 용해시키는 공정, 이어서, 식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정을 석출시키는 공정을 포함하는, 제조 방법.
  33. 제 32 항에 있어서,
    식 (10) 으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정이, 동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, 제조 방법.
  34. 제 31 항 내지 제 33 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (10) 으로 나타내는 화합물과, 식 (11) 로 나타내는 화합물을 축합함으로써, 식 (1) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 황산나트륨 수용액과 테트라하이드로푸란의 2 상계 중에서 실시되는, 제조 방법.
  35. 제 3 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (1) 로 나타내는 화합물이, 제조 방법 (VI) 에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 제조 방법 ;
    (여기서, 제조 방법 (VI) 은,
    식 (2)
    Figure pct00182

    로 나타내는 화합물을, 사아세트산납과 반응시킴으로써,
    식 (3)
    Figure pct00183

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (3) 으로 나타내는 화합물을, 산 또는 염기의 존재하, 글리콜산벤질과 반응시킴으로써,
    식 (4)
    Figure pct00184

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (5)
    Figure pct00185

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (5) 로 나타내는 화합물과,
    식 (12)
    Figure pct00186

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (13)
    Figure pct00187

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (13) 으로 나타내는 화합물의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (14)
    Figure pct00188

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (14) 로 나타내는 화합물과,
    식 (11)
    Figure pct00189

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (15)
    Figure pct00190

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (15) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써,
    식 (16)
    Figure pct00191

    으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (16) 으로 나타내는 화합물과,
    식 (9)
    Figure pct00192

    로 나타내는 화합물을 축합함으로써,
    식 (1)
    Figure pct00193

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 제조 방법이다).
  36. 제 31 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (2) 로 나타내는 화합물을 사아세트산납과 반응시킴으로써 식 (3) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 아세트산의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  37. 제 31 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (3) 으로 나타내는 화합물을 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 수산화나트륨 수용액의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  38. 제 31 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (3) 으로 나타내는 화합물을 식 (4) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정이, 트리스(펜타플루오로페닐)보란의 존재하에서 실시되는, 제조 방법.
  39. 제 31 항 내지 제 38 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (4) 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기를 탈보호함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정 후, 산을 첨가함으로써, 식 (5) 로 나타내는 화합물과 산의 염을 석출시키는 공정을 포함하는, 제조 방법.
  40. 제 39 항에 있어서,
    산이, 1-하이드록시벤조트리아졸인, 제조 방법.
  41. 제 31 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (6) 으로 나타내는 화합물이,
    식 (23)
    Figure pct00194

    으로 나타내는 화합물과 N-하이드록시숙신이미드를 축합함으로써,
    식 (24)
    Figure pct00195

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (24) 로 나타내는 화합물과, L-페닐알라닌을 축합함으로써, 식 (6) 으로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 것인, 제조 방법.
  42. 제 31 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (9) 로 나타내는 화합물이,
    식 (17)
    Figure pct00196

    로 나타내는 화합물과 무수 말레산을 반응시킴으로써,
    식 (18)
    Figure pct00197

    로 나타내는 화합물로 변환하는 공정, 이어서, 식 (18) 로 나타내는 화합물과, N-하이드록시숙신이미드, 및 2,6-루티딘을 포함하는 혼합 용액에, 염화티오닐을 첨가함으로써, 식 (9) 로 나타내는 화합물로 변환하는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 것인, 제조 방법.
  43. 제 31 항 내지 제 42 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염인, 제조 방법.
  44. 제 31 항 내지 제 42 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·m 수화물 (여기서, m 은 0 ∼ 3 의 범위 내이다) 인, 제조 방법.
  45. 제 31 항 내지 제 42 항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (11) 로 나타내는 화합물이, 메탄술폰산염·2 수화물인, 제조 방법.
  46. 제 3 항 내지 제 45 항 중 어느 한 항에 있어서,
    크로마토그래피를 사용하지 않는 것을 특징으로 하는, 제조 방법.
  47. 식 (10)
    Figure pct00198

    으로 나타내는 화합물의 1,2-디메톡시에탄 부가물의 결정.
  48. 제 47 항에 있어서,
    동의 Kα 선의 조사로 얻어지는 분말 X 선 회절에 있어서, 19.0 ± 0.2°, 및 25.0 ± 0.2°의 회절 각도 (2θ) 에 주요한 피크를 나타내는, 결정.
  49. 식 (5)
    Figure pct00199

    로 나타내는 화합물과 산의 염.
  50. 제 49 항에 있어서,
    산이 1-하이드록시벤조트리아졸인, 염.
  51. 제 3 항 내지 제 46 항 중 어느 한 항에 기재된 방법에 의해 제조된
    식 (1)
    Figure pct00200

    로 나타내는 화합물의 결정을 출발 원료로서 사용하는 것을 특징으로 하고,
    i) 항체를, 환원하는 공정, 이어서,
    ii) 상기 방법으로 제조된 식 (1) 로 나타내는 화합물의 결정이 용해된 용액을 첨가하여, 환원된 항체와 반응시키는 공정
    을 포함하는,
    식 (19)
    Figure pct00201

    (식 중, A 는 항체와의 결합 위치를 나타낸다)
    로 나타내는 약물 링커와, 항체가 티오에테르 결합에 의해 결합한 항체-약물 콘주게이트의 제조 방법.
  52. 제 51 항에 있어서,
    항체가, 항 HER2 항체, 항 HER3 항체, 항 TROP2 항체, 항 B7-H3 항체, 또는 항 GPR20 항체인, 제조 방법.
KR1020207008823A 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법 Active KR102816741B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020257017894A KR20250084239A (ko) 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JPJP-P-2017-167691 2017-08-31
JP2017167691 2017-08-31
PCT/JP2018/032056 WO2019044947A1 (ja) 2017-08-31 2018-08-30 抗体－薬物コンジュゲートの改良製造方法

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020257017894A Division KR20250084239A (ko) 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20200041993A true KR20200041993A (ko) 2020-04-22
KR102816741B1 KR102816741B1 (ko) 2025-06-04

Family

ID=65525614

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207008823A Active KR102816741B1 (ko) 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법
KR1020257017894A Pending KR20250084239A (ko) 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020257017894A Pending KR20250084239A (ko) 2017-08-31 2018-08-30 항체-약물 콘주게이트의 개량 제조 방법

Country Status (13)

Country Link
US (2) US11945882B2 (ko)
EP (2) EP4714956A2 (ko)
JP (3) JP7366745B2 (ko)
KR (2) KR102816741B1 (ko)
CN (1) CN111051330A (ko)
AU (2) AU2018327171B2 (ko)
BR (1) BR112020003646A2 (ko)
CA (1) CA3073924C (ko)
ES (1) ES3057444T3 (ko)
IL (2) IL324591A (ko)
SG (1) SG11202000997YA (ko)
TW (1) TWI843705B (ko)
WO (1) WO2019044947A1 (ko)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6679762B2 (ja) * 2017-01-17 2020-04-15 第一三共株式会社 抗ｇｐｒ２０抗体及び抗ｇｐｒ２０抗体−薬物コンジュゲート
AU2018320470B2 (en) * 2017-08-23 2025-04-24 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate preparation and lyophilization for same
IL324591A (en) * 2017-08-31 2026-01-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Improved antibody-drug conjugate production methods
SG11202100653YA (en) 2018-07-25 2021-02-25 Daiichi Sankyo Co Ltd Effective method for manufacturing antibody-drug conjugate
CA3108044A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Daiichi Sankyo Company, Limited Treatment of metastatic brain tumor by administration of antibody-drug conjugate
EA202190471A1 (ru) 2018-08-06 2021-05-24 Дайити Санкио Компани, Лимитед Комбинация конъюгата антитела-лекарственного средства и ингибитора тубулина
WO2020059772A1 (ja) 2018-09-20 2020-03-26 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ３抗体－薬物コンジュゲート投与によるｈｅｒ３変異がんの治療
KR102905497B1 (ko) 2018-12-11 2025-12-30 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항체-약물 컨쥬게이트와 parp 저해제의 조합
US20220040324A1 (en) 2018-12-21 2022-02-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of antibody-drug conjugate and kinase inhibitor
CN111686259B (zh) * 2019-05-26 2023-08-08 成都百利多特生物药业有限责任公司 一种含sn38的抗体药物偶联物
IL288485B2 (en) * 2019-05-29 2026-04-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Anti-TROP2 antibody conjugates - a drug for use in cancer treatment
US20230181749A1 (en) * 2020-05-20 2023-06-15 Bicycle TX Limited Bicyclic peptide ligands specific for nectin-4 and uses thereof
AU2021289927A1 (en) 2020-06-08 2023-01-19 Systimmune, Inc. Camptothecin drug having high-stability hydrophilic connecting unit and conjugate thereof
WO2021260583A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and dna-pk inhibitor
IL299368A (en) 2020-06-24 2023-02-01 Astrazeneca Uk Ltd A combination of an antibody-drug conjugate and an ATR inhibitor
WO2021260582A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and aurora b inhibitor
EP4171654A1 (en) 2020-06-24 2023-05-03 AstraZeneca UK Limited Combination of antibody-drug conjugate and cdk9 inhibitor
US20230256110A1 (en) 2020-06-24 2023-08-17 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and atm inhibitor
IL299803A (en) 2020-07-17 2023-03-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Production method for antibody-drug conjugate
JP2023545096A (ja) 2020-10-09 2023-10-26 アストラゼネカ ユーケー リミテッド 抗体－薬物コンジュゲート及びｐａｒｐ１選択的阻害薬の組み合わせ
AU2021378152A1 (en) 2020-11-11 2023-06-22 Daiichi Sankyo Company, Limited COMBINATION OF AN ANTIBODY-DRUG CONJUGATE WITH ANTI-SIRPα ANTIBODY
CN116615250A (zh) 2020-11-12 2023-08-18 第一三共株式会社 通过施用抗b7-h3抗体-药物缀合物的间皮瘤治疗
CN117015549A (zh) * 2021-03-17 2023-11-07 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种喜树碱衍生物的制备方法
WO2022218415A1 (zh) * 2021-04-15 2022-10-20 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种依喜替康类似物的结晶形式及其制备方法
CN113264983A (zh) * 2021-05-20 2021-08-17 联宁（苏州）生物制药有限公司 一种用于抗体偶联药物的连接子lnd1088的合成方法
CN113336823A (zh) * 2021-05-28 2021-09-03 联宁（苏州）生物制药有限公司 一种用于抗体偶联药物连接子lnd1067的合成方法
CN113402584A (zh) * 2021-07-06 2021-09-17 联宁（苏州）生物制药有限公司 一种抗体偶联药物连接子的中间体lnd1067-l1的合成方法
CN113527418B (zh) * 2021-07-16 2022-05-03 成都普康唯新生物科技有限公司 一种ADC linker的制备方法
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
TW202320858A (zh) 2021-07-19 2023-06-01 美商薩諾管理公司 免疫接合物及方法
WO2023083381A1 (zh) 2021-11-15 2023-05-19 成都百利多特生物药业有限责任公司 双特异性抗体-喜树碱类药物偶联物及其医药用途
AU2022392822A1 (en) 2021-11-18 2024-05-02 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and parp1 selective inhibitor
US20240335558A1 (en) 2021-12-02 2024-10-10 Glyco-Therapy Biotechnology Co., Ltd. Isolated polypeptide and use thereof
WO2023098889A1 (zh) 2021-12-03 2023-06-08 成都百利多特生物药业有限责任公司 抗人Trop2抗体-喜树碱类药物偶联物及其医药用途
CA3240724A1 (en) 2021-12-28 2023-07-06 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and atr inhibitor
EP4456899A1 (en) 2021-12-28 2024-11-06 AstraZeneca UK Limited Combination of antibody-drug conjugate and rasg12c inhibitor
CN118891525A (zh) 2022-03-16 2024-11-01 阿斯利康(英国)有限公司 用于抗trop2抗体-药物缀合物疗法的评分方法
AU2022447933A1 (en) 2022-03-25 2023-11-09 Systimmune, Inc. Dna toxic dimer compound and conjugate thereof
EP4514391A1 (en) 2022-04-27 2025-03-05 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of antibody-drug conjugate with ezh1 and/or ezh2 inhibitor
CN119403829A (zh) 2022-05-11 2025-02-07 第一三共株式会社 对于肿瘤抗原特异性的抗体和cd47抑制剂的组合
TW202412859A (zh) 2022-07-28 2024-04-01 英商阿斯特捷利康英國股份有限公司 抗體-藥物結合物及雙特異性檢查點抑制劑之組合
CN117752813A (zh) 2022-09-26 2024-03-26 成都百利多特生物药业有限责任公司 抗cd33抗体和抗cd33抗体-药物偶联物及其用途
IL319811A (en) * 2022-09-30 2025-05-01 Systimmune Inc Auristatin drug with a highly stable hydrophilic linking unit and its conjugation
TW202440169A (zh) 2022-11-30 2024-10-16 日商第一三共股份有限公司 抗體-藥物結合物與dnmt抑制劑之組合
CN118356507A (zh) 2023-01-17 2024-07-19 成都百利多特生物药业有限责任公司 一种艾日布林类药物的偶联物
WO2024190815A1 (ja) 2023-03-14 2024-09-19 第一三共株式会社 抗ｃｄｈ６抗体－薬物コンジュゲートとｖｅｇｆ阻害剤の組み合わせ
AU2024248799A1 (en) 2023-03-31 2025-10-23 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of anti-CDH6 antibody-drug conjugate and HIF-2alpha inhibitor
JPWO2024214685A1 (ko) 2023-04-10 2024-10-17
EP4737483A1 (en) 2023-06-30 2026-05-06 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate production method including purification step using activated carbon material
WO2025088496A1 (en) 2023-10-24 2025-05-01 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and anti-pd-1/tim-3 bispecific binding protein
TW202535479A (zh) 2023-12-05 2025-09-16 英商阿斯特捷利康英國股份有限公司 抗體藥物結合物與血腦屏障穿透性ｐａｒｐ１選擇性抑制劑之組合
WO2025180999A1 (en) 2024-02-26 2025-09-04 Lonza Ltd Electrochemical oxidative decarboxylation of alpha-amino acids
WO2025238587A1 (en) 2024-05-16 2025-11-20 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of anti-b7-h3 antibody-drug conjugate and androgen receptor signaling inhibitor
WO2026052764A1 (en) 2024-09-06 2026-03-12 Astrazeneca Uk Limited A scoring method for an anti-trop2 antibody drug conjugate therapy

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005343837A (ja) * 2004-06-04 2005-12-15 Fuji Photo Film Co Ltd １，３−ジオキソラン−４，６−ジオン化合物の製造方法
WO2014057687A1 (ja) 2012-10-11 2014-04-17 第一三共株式会社 抗体－薬物コンジュゲート
WO2015098099A1 (ja) 2013-12-25 2015-07-02 第一三共株式会社 抗ｔｒｏｐ２抗体－薬物コンジュゲート
WO2015115091A1 (ja) 2014-01-31 2015-08-06 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ２抗体－薬物コンジュゲート
WO2015155998A1 (en) 2014-04-10 2015-10-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-her3 antibody-drug conjugate
WO2018135501A1 (ja) 2017-01-17 2018-07-26 第一三共株式会社 抗ｇｐｒ２０抗体及び抗ｇｐｒ２０抗体－薬物コンジュゲート

Family Cites Families (100)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3040121B2 (ja) 1988-01-12 2000-05-08 ジェネンテク，インコーポレイテッド 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5183884A (en) 1989-12-01 1993-02-02 United States Of America Dna segment encoding a gene for a receptor related to the epidermal growth factor receptor
US5658920A (en) 1991-01-16 1997-08-19 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Substituted 1H,12H-benz-[DE]pyrano[3',4':6,7] indolizino[1,2-B]quinoline-10,13(9H,15H)-dione compound
JP3008226B2 (ja) 1991-01-16 2000-02-14 第一製薬株式会社 六環性化合物
EP1400536A1 (en) 1991-06-14 2004-03-24 Genentech Inc. Method for making humanized antibodies
JP3091774B2 (ja) * 1991-07-04 2000-09-25 三井化学株式会社 フルオラン化合物の結晶性プロパノール和物およびその製造法ならびに該結晶性プロパノール和物を含有する記録材料
JP3359955B2 (ja) 1992-07-16 2002-12-24 第一製薬株式会社 抗腫瘍剤
JPH0680091A (ja) * 1992-09-01 1994-03-22 Honda Motor Co Ltd ドアサッシュ部の色替え方法とこの方法に用いるテープ材
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US6504029B1 (en) 1995-04-10 2003-01-07 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Condensed-hexacyclic compounds and a process therefor
JPH08337584A (ja) 1995-04-10 1996-12-24 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 縮合六環式アミノ化合物、これを含有する医薬及びその製法
SG50747A1 (en) 1995-08-02 1998-07-20 Tanabe Seiyaku Co Comptothecin derivatives
CA2192725C (en) 1995-12-28 2004-04-20 Kenji Tsujihara Camptothecin derivatives
JPH1095802A (ja) 1995-12-28 1998-04-14 Tanabe Seiyaku Co Ltd カンプトテシン誘導体
US5968511A (en) 1996-03-27 1999-10-19 Genentech, Inc. ErbB3 antibodies
TW527183B (en) 1996-06-06 2003-04-11 Daiichi Seiyaku Co Drug complex
TW409058B (en) 1996-06-06 2000-10-21 Daiichi Seiyaku Co Method for preparation of a drug complex
JPH1171280A (ja) 1997-06-26 1999-03-16 Tanabe Seiyaku Co Ltd 医薬組成物
JPH1192405A (ja) 1997-09-19 1999-04-06 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 薬物複合体
US6071719A (en) 1998-03-11 2000-06-06 Smithkline Beecham Corporation DNA encoding ECR 673: A 7-transmembrane G-protein coupled receptor
DK1071700T3 (da) 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
EA003398B1 (ru) 1998-05-22 2003-04-24 Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. Лекарственный комплекс c полимерным носителем
CN1191093C (zh) 1998-10-30 2005-03-02 第一制药株式会社 Dds化合物及其测定方法
CA2704600C (en) 1999-04-09 2016-10-25 Kyowa Kirin Co., Ltd. A method for producing antibodies with increased adcc activity
BR0012196A (pt) 1999-06-25 2002-03-19 Genentech Inc Método de tratamento de um tumor em mamìferos através do uso de conjugados de maitansinóide e anticorpo receptor anti-erbb e artigo industrializado
CN100340575C (zh) 1999-06-25 2007-10-03 杰南技术公司 人源化抗ErbB2抗体及其在制备药物中的应用
JP2002060351A (ja) 2000-03-22 2002-02-26 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 水酸基を有する薬物を含むｄｄｓ化合物
US20030166513A1 (en) 2000-06-29 2003-09-04 Akihiro Imura Dds compound and process for the preparation thereof
AU2001271037A1 (en) 2000-07-13 2002-01-30 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical compositions containing dds compounds
CA2953239A1 (en) 2000-10-06 2002-04-18 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Antibody composition-producing cell
US20030018989A1 (en) 2001-03-29 2003-01-23 Brennan Thomas J. Transgenic mice containing GPCR5-1 gene disruptions
EP1283053A1 (en) 2001-08-09 2003-02-12 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Inhibitors of HER3 activity
TWI313609B (en) 2001-08-21 2009-08-21 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Pharmaceutical composition for inhibiting the metastasis or preventing the recurrence of malignant tumor
IL161686A0 (en) 2001-11-01 2004-09-27 Uab Research Foundation Combinations of antibodies selective for a tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor and other therapeutic agents
CA2467242A1 (en) 2001-11-20 2003-05-30 Seattle Genetics, Inc. Treatment of immunological disorders using anti-cd30 antibodies
US8877901B2 (en) 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US9745380B2 (en) 2002-03-01 2017-08-29 Immunomedics, Inc. RS7 antibodies
CA2478047C (en) 2002-03-01 2014-01-21 Immunomedics, Inc. Rs7 antibodies
EP1581648A2 (en) 2002-09-09 2005-10-05 Nura, Inc. G protein coupled receptors and uses thereof
US20080260744A1 (en) 2002-09-09 2008-10-23 Omeros Corporation G protein coupled receptors and uses thereof
CA2508831C (en) 2002-12-13 2012-05-01 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US20040202666A1 (en) 2003-01-24 2004-10-14 Immunomedics, Inc. Anti-cancer anthracycline drug-antibody conjugates
WO2005040825A2 (en) 2003-10-24 2005-05-06 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with g protein-coupled receptor 20 (gpr20)
US20050228007A1 (en) 2004-02-26 2005-10-13 Prakash Jagtap Isoquinoline derivatives and methods of use thereof
JP4942643B2 (ja) 2004-03-02 2012-05-30 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 部分的に付加された抗体およびそれらの結合体化方法
JP4806680B2 (ja) 2004-05-19 2011-11-02 メダレックス インコーポレイテッド 自己犠牲リンカー及び薬剤複合体
NZ579482A (en) 2004-06-01 2011-02-25 Genentech Inc Antibody drug conjugates and methods
DK1771482T3 (da) 2004-07-22 2014-10-20 Genentech Inc HER2-antistofsammensætning
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
JP2008521828A (ja) 2004-11-29 2008-06-26 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 操作された抗体およびイムノコンジュゲート
US20060135546A1 (en) * 2004-12-16 2006-06-22 Jagadevappa Basavaraja Methods for the purification of 20(S)- camptothecin
CN102580084B (zh) 2005-01-21 2016-11-23 健泰科生物技术公司 Her抗体的固定剂量给药
DE102005009099A1 (de) 2005-02-28 2006-08-31 Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh Proteinbindende Camptothecin-Peptid-Derivate und diese enthaltende Arzneimittel
DE102005009084A1 (de) 2005-02-28 2006-08-31 Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh Proteinbindende Anthrazyklin-Peptid-Derivate und diese enthaltende Arzneimittel
ES2569409T3 (es) 2005-03-08 2016-05-10 Pfizer Products Inc. Composiciones de anticuerpo anti-CTLA-4
US7833979B2 (en) 2005-04-22 2010-11-16 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
WO2007019232A2 (en) 2005-08-03 2007-02-15 Immunogen, Inc. Immunoconjugate formulations
AR056857A1 (es) 2005-12-30 2007-10-24 U3 Pharma Ag Anticuerpos dirigidos hacia her-3 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano-3) y sus usos
US20080131428A1 (en) 2006-02-24 2008-06-05 Arius Research, Inc. Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of TROP-2
EP2032606B1 (en) 2006-05-30 2013-11-27 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
CN101490087B (zh) 2006-05-30 2013-11-06 健泰科生物技术公司 抗体和免疫偶联物及其用途
ITMI20061473A1 (it) 2006-07-26 2008-01-27 Indena Spa Derivati della camptotecina ad attivita antitumorale
CA2673410A1 (en) 2006-12-21 2008-07-03 Schering Corporation Pyrrolo [3, 2-a] pyridine derivatives for inhibiting ksp kinesin activity
KR101598229B1 (ko) 2007-02-16 2016-02-26 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. Ｅｒｂｂ3에 대한 항체 및 이의 용도
US20100143245A1 (en) 2007-03-22 2010-06-10 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Uses of monoclonal antibody 8h9
CN101687927B (zh) 2007-05-15 2013-10-30 霍夫曼-拉罗奇有限公司 针对g蛋白偶联的受体（gpcr）的抗体
NZ610239A (en) 2008-04-30 2014-11-28 Immunogen Inc Cross-linkers and their uses
WO2009140242A1 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Genentech, Inc. Analysis of antibody drug conjugates by bead-based affinity capture and mass spectrometry
KR101814186B1 (ko) 2008-09-17 2018-03-14 키아스마 인코포레이티드 약제학적 조성물 및 연관된 투여방법
WO2010059315A1 (en) 2008-11-18 2010-05-27 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Human serum albumin linkers and conjugates thereof
ES3000111T3 (en) 2009-02-13 2025-02-27 Immunomedics Inc Intermediates for preparing conjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US20120171201A1 (en) 2009-07-22 2012-07-05 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating her2 positive cancer with her2 receptor antagonist in combination with multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin
JP5829520B2 (ja) 2009-08-20 2015-12-09 国立大学法人 千葉大学 コルヒチン誘導体
JP2013505944A (ja) 2009-09-24 2013-02-21 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド Ｄｒ５リガンド薬物結合体
EP2896632B1 (en) 2009-11-13 2017-10-25 Daiichi Sankyo Europe GmbH Material and methods for treating or preventing HER-3 associated diseases
ES2978177T3 (es) 2009-12-02 2024-09-06 Immunomedics Inc Combinación de radio inmunoterapia y conjugados anticuerpo-fármaco para mejorar la terapia contra el cáncer
MX2012013001A (es) 2010-05-13 2013-02-26 Univ Indiana Res & Tech Corp Peptidos de la superfamilia de glucagon que presentan actividad del receptor nuclear de hormonas.
EA201500220A1 (ru) 2010-05-17 2015-10-30 Ливтех, Инк. Антитело против trop-2 человека, обладающее противоопухолевой активностью in vivo
US20110300150A1 (en) 2010-05-18 2011-12-08 Scott Eliasof Compositions and methods for treatment of autoimmune and other disease
WO2011155579A1 (ja) 2010-06-10 2011-12-15 北海道公立大学法人札幌医科大学 抗Ｔｒｏｐ－２抗体
RU2012157167A (ru) 2010-07-12 2014-08-20 КовЭкс Текнолоджиз Айэлэнд Лимитед Полифункциональные антительные конъюгаты
WO2012019024A2 (en) 2010-08-04 2012-02-09 Immunogen, Inc. Her3-binding molecules and immunoconjugates thereof
WO2012018404A2 (en) 2010-08-06 2012-02-09 U3 Pharma Gmbh Use of her3 binding agents in prostate treatment
WO2012064733A2 (en) 2010-11-09 2012-05-18 Medimmune, Llc Antibody scaffold for homogenous conjugation
US20120121615A1 (en) 2010-11-17 2012-05-17 Flygare John A Alaninyl maytansinol antibody conjugates
CN102786418B (zh) * 2011-05-18 2016-05-18 中国医学科学院药物研究所 绿原酸晶ii型表征及制备方法与在药品和保健品中应用
TWI495644B (zh) 2011-11-11 2015-08-11 Rinat Neuroscience Corp 營養層細胞表面抗原（Ｔｒｏｐ－２）之專一性抗體類及彼等之用途
US9427464B2 (en) 2011-11-22 2016-08-30 Chiome Bioscience Inc. Anti-human TROP-2 antibody having an antitumor activity in vivo
SG11201403085PA (en) 2011-12-14 2014-10-30 Seattle Genetics Inc Fgfr antibody drug conjugates (adcs) and the use thereof
US20130280282A1 (en) 2012-04-24 2013-10-24 Daiichi Sankyo Co., Ltd. Dr5 ligand drug conjugates
CN104619350A (zh) 2012-06-14 2015-05-13 Ambrx公司 结合到核受体配体多肽的抗psma抗体
WO2014061277A1 (ja) 2012-10-19 2014-04-24 第一三共株式会社 親水性構造を含むリンカーで結合させた抗体－薬物コンジュゲート
MX2015012549A (es) 2013-03-15 2016-06-21 Abbvie Deutschland Formulaciones de conjugado anticuerpo anti-egfr-farmaco.
US20170335281A1 (en) 2014-03-15 2017-11-23 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
CN105085529A (zh) * 2014-05-15 2015-11-25 广东东阳光药业有限公司 依鲁替尼新晶型及其制备方法
CN107406480B (zh) * 2015-03-04 2022-06-24 Jitsubo株式会社 肽合成方法
CN116059395A (zh) * 2015-06-29 2023-05-05 第一三共株式会社 用于选择性制造抗体-药物缀合物的方法
CA3074208C (en) * 2017-08-31 2023-10-03 Daiichi Sankyo Company, Limited Novel method for producing antibody-drug conjugate
IL324591A (en) * 2017-08-31 2026-01-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Improved antibody-drug conjugate production methods

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005343837A (ja) * 2004-06-04 2005-12-15 Fuji Photo Film Co Ltd １，３−ジオキソラン−４，６−ジオン化合物の製造方法
WO2014057687A1 (ja) 2012-10-11 2014-04-17 第一三共株式会社 抗体－薬物コンジュゲート
KR20150067149A (ko) * 2012-10-11 2015-06-17 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항체-약물 콘주게이트
WO2015098099A1 (ja) 2013-12-25 2015-07-02 第一三共株式会社 抗ｔｒｏｐ２抗体－薬物コンジュゲート
WO2015115091A1 (ja) 2014-01-31 2015-08-06 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ２抗体－薬物コンジュゲート
WO2015155998A1 (en) 2014-04-10 2015-10-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-her3 antibody-drug conjugate
WO2018135501A1 (ja) 2017-01-17 2018-07-26 第一三共株式会社 抗ｇｐｒ２０抗体及び抗ｇｐｒ２０抗体－薬物コンジュゲート

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529 - 537.
Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445 - 1452.
Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5 - 13.
Howard A. et al., J Clin Oncol 29 : 398-405.
Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039 - 1046.
Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research (2016) 22 (20), 5097 - 5108.
Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631 - 637.

Also Published As

Publication number Publication date
AU2023203615A1 (en) 2023-07-06
US11945882B2 (en) 2024-04-02
AU2018327171B2 (en) 2023-03-09
EP3677589A1 (en) 2020-07-08
IL272965A (en) 2020-04-30
TWI843705B (zh) 2024-06-01
TW202506195A (zh) 2025-02-16
AU2018327171A1 (en) 2020-03-26
BR112020003646A2 (pt) 2020-09-01
EP3677589B1 (en) 2025-11-26
TW201918263A (zh) 2019-05-16
EP4714956A2 (en) 2026-03-25
SG11202000997YA (en) 2020-03-30
US12503489B2 (en) 2025-12-23
CN111051330A (zh) 2020-04-21
CA3073924A1 (en) 2019-03-07
JPWO2019044947A1 (ja) 2020-10-15
US20240376147A1 (en) 2024-11-14
US20200385422A1 (en) 2020-12-10
IL324591A (en) 2026-01-01
EP3677589A4 (en) 2021-04-21
KR20250084239A (ko) 2025-06-10
AU2023203615B2 (en) 2024-12-19
JP7366745B2 (ja) 2023-10-23
KR102816741B1 (ko) 2025-06-04
CA3073924C (en) 2023-10-17
JP2023126890A (ja) 2023-09-12
IL272965B2 (en) 2026-04-01
JP7728821B2 (ja) 2025-08-25
WO2019044947A1 (ja) 2019-03-07
IL272965B1 (en) 2025-12-01
ES3057444T3 (en) 2026-03-02
JP2025169338A (ja) 2025-11-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7728821B2 (ja) 抗体－薬物コンジュゲートの改良製造方法
JP7488389B2 (ja) 抗体－薬物コンジュゲートの新規製造方法
TWI915810B (zh) 抗體-藥物結合物之改良製造方法
HK40021868A (en) Improved method for producing antibody-drug conjugate
HK40021326A (en) Novel method for producing antibody-drug conjugate

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20200326

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
A201 Request for examination
PA0201 Request for examination

Patent event code: PA02012R01D

Patent event date: 20210827

Comment text: Request for Examination of Application

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20230731

Patent event code: PE09021S01D

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20240228

Patent event code: PE09021S01D

E701 Decision to grant or registration of patent right
PE0701 Decision of registration

Patent event code: PE07011S01D

Comment text: Decision to Grant Registration

Patent event date: 20250227

GRNT Written decision to grant
PR0701 Registration of establishment

Comment text: Registration of Establishment

Patent event date: 20250530

Patent event code: PR07011E01D

PR1002 Payment of registration fee

Payment date: 20250530

End annual number: 3

Start annual number: 1

PG1601 Publication of registration