LT3174B - Polyethylene glycol -interferon conjugates - Google Patents

Polyethylene glycol -interferon conjugates Download PDF

Info

Publication number
LT3174B
LT3174B LTIP888A LTIP888A LT3174B LT 3174 B LT3174 B LT 3174B LT IP888 A LTIP888 A LT IP888A LT IP888 A LTIP888 A LT IP888A LT 3174 B LT3174 B LT 3174B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
interferon
conjugate
cho
peg
compound
Prior art date
Application number
LTIP888A
Other languages
English (en)
Inventor
Robert Karasiewicz
Carlo Nalin
Perry Rosen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of LTIP888A publication Critical patent/LTIP888A/lt
Publication of LT3174B publication Critical patent/LT3174B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/56—IFN-alpha
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Įvairūs gamtiniai ir rekombinantiniai baltymai yra naudingi medicinoje ir farmacijoje. Išgryninti baltymai, kuriems surasta tinkama vaistinė forma, gali būti taikomi parenteraliai esant įvairioms terapinėms indikacijoms. Tačiau parenteraliai taikomi baltymai gali būti imunogeniški, gali prastai tirpti vandenyje bei turėti trumpą farmakologinį gyvavimo puslaikį. Dėl to gali būti sunku pasiekti pacientų kraujyje terapinę baltymo koncentraciją.
Šias problemas galima įveikti baltymus konjuguojant su polimerais, pavyzdžiui, polietilenglikoliu. Davis ir kt. JAV patente Nr. 4,179, 337 aprašytas polietilenglikolio (PEG) konjugavimas su baltymais, pavyzdžiui, su fermentais ir insulinu, siekiant gauti konjugatus, kuriuose baltymas būtų mažiau imunogeniškas, tačiau išlaikytų didžiąją dalį savo fiziologinio aktyvumo. Nakagawa ir kt. aprašo PEG konjugavimą su saleles aktyvuojančių baltymu, siekiant sumažinti šalutinius jo efektus ir imunogeniškumą. Veronese ir kt. (Applied Biochem. and Biotech., 11; 141-152 (1985) aprašo fenilchlorformiatų panaudojimą polietilenglikoliu aktyvavimui, siekiant modifikuoti ribonukleazę ir superoksiddismutazę. Katre ir kt. JAV patentuose Nr. 4,766,106 ir Nr. 4,917,888 taip pat aprašo baltymų soliubilizavimo būdą, konjuguojant juos su polimerais. PEG ir kiti polimerai konjuguojami su rekombinantiniais baltymais, siekiant sumažinti jų imunogeniškumą ir padidinti gyvavimo puslaikį. Žr. Nitecki ir kt., JAV patentą Nr. 4,902,502, Enzon, Ine., PCT/US90/03133, Nlshimura ir kt., paraišką Nr. 154,316 ir Tomasi, PCT/US85/02572.
Žinomi konjugatų PEG-baltymas gamybos metodai bei konjugatai, gaminami pagal šiuos metodus, pasižymi kai kuriais trūkumais. Vienas iš jų yra tas, kad kai kurie konjugatų gamybos būdai gali inaktyvuoti baltymą, todėl gaunamas konjugatas turi menką biologinį aktyvumą. Be to, kai kurie linkeriai, naudojami sintetinant PEG ir baltymo konjugatus, gali būti jautrūs hidrolizei in vivo. Kai toks skilimas įvyksta panaudojus vaistą, konjugatai netenka savo pranašumų, kuriuos jiems suteikia PEG.
Vienas šio išradimo pavyzdžių yra nauji interferono-PEG konjugatai, turintys unikalius linkerius, kurie jungia interferono (IFN) amino grupę su PEG. Šio išradimo pagrindinis tikslas yra susintetinti fiziologiškai aktyvius interferono konjugatus, turinčius tokią bendrą formulę:
RO-{CH2CHO)<(CH2ęHO)y-(CH2ęHO)z-CH2ęH-W
NH· interferonas I kurioje R yra žemesnysis alkilas; R1, arba žemesnysis alkilas;
R2, R3 ir R4 yra H m yra sveikas skaičius atitinkančio pasiekiamų interferone;
nuo 1 amino iki skaičiaus, grupių skaičių
W yra O arba NH;
x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra
sveiki skaičiai nuo 1 iki 1000, o x, y ir z suma yra
nuo 3 iki 1000;
su sąlyga, kad bent vienas iš R1, R2, R3 ir R4 yra
žemesnysis alkilas.
Akivaizdu, kad -NH grupė formulėje I yra iš pasiekiamų amino grupių interferono molekulėje.
Kalbant konkrečiau, du skirtingi interferono konjugatai turi tokias formules:
O
RO-(CH2CHO)x —(CH2CHO)— (CH2CHO)z-CH2CH-NH NH — interferonas IA
O interferonas (3 kuriose R yra žemesnysis alkilas; R1, R2, R3 ir R4 yra H arba žemesnysis alkilas;
m yra sveikas skaičius, atitinkantis pasiekiamų amino grupių skaičių interferone, ir x, y ir z yra parinkti iš įvairių skaičių kombinacijų taip, kad konjugatas išlaikytų bent dalį biologinio aktyvumo baltymo, kuris įeina į konjugato sudėtį, tačiau su sąlyga, kad bent vienas iš radikalų R1, R2, R3 ir R4 yra žemesnysis alkilas.
Trumpas figūrų aprašymas
Fig. 1.
Junginio iš 7 pavyzdžio modifikavimo PEG'u eiga. Interferonas (5 mg/ml) inkubuojamas su 10-, 20- ar 40kartiniu reagento pertekliumi baltymo atžvilgiu nurodytas laiko atkarpas tirpale, kuris sudarytas iš 25 mM Tricino (pH 10.0), 0.5 M KSCN ir 100 mM NaCl.
Įvairiais laiko tarpais imami mėginiai, reakcija sustabdoma glicinu ir analizuojama 15 % SDS-PAGE metodu (poliaklrilamidinio gelio elektroforezės metodu, dalyvaujant natrio dodecilsulfatui). Raide T žymimas interferonas.
Fig. 2.
Junginio iš 5 pavyzdžio modifikavimo PEG'u eiga. Interferonas inkubuojamas su 3- ar 10-kartiniu reagento pertekliumi laiko atkarpas, nurodytas fig. 1. Nurodytomis laiko atkarpomis imami mėginiai, reakcija sustabdoma glicinu ir analizuojama 15 % SDS-PAGE metodu. Raide S žymimi baltymų molekulinės masės standartai, o raide I žymimams interferonas.
Fig. 3.
Junginio iš 1 pavyzdžio (kairėje) ir junginio iš 3 pavyzdžio (dešinėje) modifikavimo PEG'u palyginimas. Interferonas inkubuojamas su 3-kartiniu reagento pertekliumi 0.25, 1.5 ar 24 valandas. Imami mėginiai, reakcija sustabdoma glicinu ir analizuojama 15 % SDSPAGE metodu. Raide S žymimi baltymų molekulinio svorio standartai, o raide I žymimas interferonas.
Pagal šį išradimą IFN konjugatai, turintys formules IA ir IB, gali būti susintetinti kondensuojant aktyvuotą PEG'ą, kurio galinė hidroksi- ar aminogrupė pakeista aktyvuotu linkeriu. Tokie reagentai gali reaguoti su viena arba keliomis IFN amino grupėmis. Labiau tinkamas šio išradimo Įgyvendinimas yra toks, kai kondensacija vyksta tik su viena amino grupe ir susidaro monoPEG'inis konjugatas. Todėl išradimas taip pat aprašo naujus aktyvuotus junginius (reagentus), kurie gali būti panaudoti šio išradimo interferono konjugatų sintezei. Šie junginiai turi tokią bendrą formulę:
,5
R'
kurioje R yra žemesnysis alkilas; R1, R2, R3, R4 ir R5 yra H arba žemesnysis alkilas;
W yra NH arba O;
x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 0 iki 1000, o x, y ir z suma yra nuo 3 iki 1000;
su sąlyga, kad jei W yra NH arba W yra O ir R5 yra H, bent vienas iš R1, R2, R3 ir R4 yra žemesnysis alkilas, ir
C=O
3 4 kurioje R yra žemesnysis alkilas; R , R , R , R yra arba metilas, x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 1 iki 1000, o x, y ir z suma yra nuo 3 iki 1000.
Kalbant konkrečiau, formulė II apima tokių dviejų tipų junginius:
RO-{CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CH-NH
R2
R3
IIA
R1
R4
Radikalų R, R1, R2, R3, R4 ir R5 reikšmės junginiuose IIA, IIB ir III nurodytos aukščiau, o x, y ir z yra parinkti iš įvairių skaičių kombinacijų taip, kad konjugatas išlaikytų bent dalį laisvojo baltymo, kuris įeina į konjugato sudėtį, biologinio aktyvumo, tačiau su išlyga, nurodyta po formule II.
Pagal šį išradimą konjugatų gaminimui naudojant aktyvuotus PEG konjugatus, turinčius formules IIA, IIB ir III, grupė, jungiančioji baltymo, pavyzdžiui, interferono (IFN), laisvas amino grupes ir PEG, suformuojama taip, kad gaunamas konjugatas išsaugo bent dalį baltymo biologinio aktyvumo ir yra mažiau imunogeniškas. Be to, jungiančioji grupė, kuri susidaro šio išradimo konjugatuose naudojant aktyvuotus polietilenglikolius, kurių formulė IIA, IIB ir III, suteikia baltymo konjugatui atsparumą hidrolizei in vivo ir konjugatas neturi trūkumų, būdingų ankstesniems PEG baltymams.
Pagal sį išradimą R, R , 7 2 3 R , R , R4 ir R5 gali būti bet
koks žemesnysis alkilas, labiau tinka metilas. Terminas
žemesnysis alkilas reiškia žemesniasias alkilo
grupes, turinčias nuo 1 iki 6 anglies atomų,
pavyzdžiui, metilo, etilo, n-propilo, izopropilo ir kt.
'grupes. Paprastai labiau tinka žemesnioji alk'’1'' ’~upė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomu, ..šiai
3'' tinka metilas. R, R , R , R , ...j. oūti ir
2 vandenilis, tačiau R, R , R , I ..egali vienu metu būti vandenilis.
Pagal ši išradimą x, y ir z gali būti bet kokia skaičių kombinacija, parinkta taip, kad gaunamas konjugatas išlaiko bent dalį IFN, sudarančio konjugatą, biologinio aktyvumo. Akivaizdu, kad x, y, z ir m suma atvirkščiai proporcinga IFN biologinio aktyvumo dydžiui, kuris išlieka konjugate. Skaičiai x, y ir z reiškia glikolio subvienetų, esančių konjugatą sudarančiame poliglikolyje, skaičių. Skaičius m reiškia laisvų arba prieinamų amino grupių, galinčių reaguoti su PEG mišiniu, skaičių interferone. Kuo didesnės m, x, y ir z reikšmės, tuo didesnė konjugato molekulinė masė. Pagal šą išradimą x, y ir z yra tokie skaičiai, kad konjugato molekulinė masė, atmetus baltymo molekulinę masę, yra nuo 300 iki 30000 daltonų. Labiau tinkamos interferono atveju m reikšmės yra nuo 1 iki 3. Ypač tinkamas pavyzdys yra monoPEG'o konjugatas, kai m lygus 1, pagamintas taip, kad IFN konjugatas su didele išeiga gaunamas reaguojant vienintelei laisvai amino grupei su PEG reagentu, turinčiu formulę II-A, II-B arba III. Šiame ypač tinkamame pavyzdyje, kai m lygus 1, x, y ir z yra tokie skaičiai, kad glikolis, kuris sudaro konjugatą, turi vidutinę molekulinę masę nuo maždaug 300 iki maždaug 30000 daltonų, labiau tinka molekulinė masė nuo maždaug 1000 iki maždaug 10000 daltonų, ypač nuo 1000 iki 5000 daltonų. Tinkamiausias atvejis, kai molekulinė masė yra maždaug 2000 daltonų.
Skaičius x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 0 iki 1000, o χβ y ir z suma yra skaičius nuo 3 iki 1000.
Labai tinkamas konjugato, turinčio formules IA ir IB, pavyzdys, kai x ir y yra nuo 5 iki 500 ir z yra nuo 0 iki 4.
Labiau tinkamas pavyzdys, kai naudojamas glikolis yra 10 glikolių mišinys, kai x yra nuo 10 iki 100, y yra nuo 1 iki 10 ir z yra lygus 0. Tinkamiausias yra interferono konjugatas, turintis formulę IA, kai m lygus 1, R, R2 ir R yra CH3; R yra H; x yra maždaug 19, y - maždaug 2 ir z lygus 0. Tai atitinka PEG subvieneto vidutinę
1.5 molekulinę masę 1000 daltonų.
Siekiant išvengti neaiškumų, nustatant subvienetų skaičių PEG molekulėje, polietilenglikolio polimeras charakterizuojamas pagal molekulinę masę, o ne pagal pasikartojančių subvienetų (PS) skaičius, žymimus x, y ir z. Šiuos dydžius gali būti keblu įvertinti dėl galimo pradinių PEG junginių nehomogeniškumo, paprastai apibūdinamų vidutine molekuline mase, o ne pasikartojančių subvienetų skaičiumi. Pradiniai PEG junginiai, turintys įvairią molekulinę masę, gali būti susintetinti pagal žinomus metodus arba gauti komerciniais keliais.
Tuo atveju, kai x, y ir z reikšmės, gautos 30 apskaičiuojant molekulinę masę arba nurodytos gamintojo, nėra sveiki skaičiai (paprastai taip ir būna), jas reikia standartiniu būdu suapvalinti iki didesnio arba mažesnio skaičiaus tam, kad polimero molekulėje, kuri sudaro didžiąją polimerų mišinio dalį, būtų sveiki skaičiai.
Kai reagentas, turintis formulę IIA, IIB arba III, reaguoja su IFN, kuriame yra daugiau nei viena laisva amino grupė, gaunamas konjugatas yra įvairių IFN ir PEG'c reakcijos produktų mišinys. Šie reakcijos produktai susidaro reaguojant PEG'ui su viena ar “keliomis laisvomis amino grupėmis. Tą parodo m reikšmė formulėse IA ir IB. Pavyzdžiui, tuo atveju, kai IFN turi tris laisvas amino grupes, aktyvuotas PEG'as gali reaguoti su viena, dviem arba trim amino grupėmis. Šiuo atveju mišinyje yra konjugatai, atitinkantys visus tris variantus. Kadangi įvairių konjugatų molekulinės masės gerokai skiriasi priklausomai nuo m reikšmės, kuri gali būti lygi 1, 2 arba 3, šie reakcijos produktai atskiriami standartiniais metodais, pavyzdžiui, chromatografiškai. Norint nustatyti, ar m, x, y ir z reikšmės tinkamai parinktos, izoliuotų konjugavimo reakcijos produktų biologinis aktyvumas tiriamas tais pačiais metodais, kaip ir pradinio IFN - taip nustatoma, ar konjugate dar išlieka IFN, naudoto konjugatui gaminti, biologinis aktyvumas. Šitokiu būdu m, x, y ir z reikšmės gali būti taip suderintos, kad būtų gautas norimas aktyvumas.
Pagal tinkamiausią pavyzdį m yra lygus 1. Kai m lygus 1, konjugatą galima gauti ir esant dviems ar daugiau amino grupių. Aktyvuoto PEG'o reagentas iš pradžių reaguoja su viena iš laisvų amino grupių, esančių IFN. Reaguliuoj ant reagentų koncentraciją, pavyzdžiui, IFN koncentraciją, bei reakcijos sąlygas, atsižvelgiant į standartinius aminų kondensavimo metodus, galima reguliuoti laisvų amino grupių, esančių baltyme, reagavimo su PEG'u laipsnį. Kai baltymuose, turinčiuose vieną ar kelias laisvas amino grupes, viena amino grupė yra aktyvesnė už kitas, galima taip parinkti reakcijos sąlygas, kad baltymui reaguojant su PEG junginiu, gaunami reakcijos produktai, kurių formulė yra IA arba IB ir m yra lygus 1. Kitos laisvos amino rūgštys, 10 esančios baltymo molekulėje, gali taip pat reaguoti su PEG'u, jei kondensacijos reakcija vykdoma ilgiau arba esant griežtesnėms sąlygoms.
Terminai interferonas ir IFN, naudojami šiame aprašyme bei išradimo apibrėžtyje, reiškia visų tipų interferonus (t.y. molekules, pasižyminčias interferoniniu aktyvumu), pavyzdžiui, α, β, γ ir ω interferonai bei jų subtipai, pavyzdžiui, ai, a2, a2A, a2B arba a2C, arba įvairių tipų ir/arba subtipų hibridai arba chimeros. Interferonas gali būti bet kokios kilmės, gaunamas iš gamtinių šaltinių, audinių kultūrų arba susintetintas, naudojantis rekombinantinės DNR metodais. Natūralių ar rekombinantinių interferonų gamybos ir skyrimo būdai yra gerai žinomi specialistams ir yra aprašyti, pavyzdžiui, patentuose EP Nr. 43 980, EP Nr. 211 148, EP Nr. 140 127, DE Nr. 3 028 919, US Nr. 4,503,035 ir US Nr. 4,414,150.
Naudojant reagentus, turinčius formules IIA, IIB ir III, kai bent vienas iš R, R1, R2, R3 ir R4 yra žemesnysis alkilas, ypač metilas (reagentai, pakeisti alkilo grupe), pranašumai pasireiškia tuo, kad netikėtai padidėja konjugato išeiga, t.y. naudojant reakcijoje alkilpakeistus reagentus padidėja, lyginant su nepakeistais reagentais, PEG'o ir baltymo junginio išeiga. Naudojant alkilpakeistus reagentus per tą patį laiką gaunama dvigubai daugiau konjugato, negu naudojant nepakeistus reagentus.
Skiriant pacientų gydymui konjugatus, turinčius formulė IA ir IB, bei pagamintus naudojant aukščiau aprašytus pakeistus reagentus, pastebėta, kad šių konjųgatų in vivo gyvavimo paciento kraujo apytakoje puslaikis žymiai didesnis lyginant su konjugatais, susintetintais iš nepakeistų reagentų. Nors gyvavimo puslaikis in vivo tiesiog proporcingas konjugato molekuliniam svoriui, konjugatas, susintetintas iš pakeisto reagento, netikėtai pasirodė turįs tokį patį gyvavimo puslaikį, kaip ir didesnės molekulinės masės konjugatas, pagamintas iš nepakeisto reagento. Ilgesnis terapinio agento gyvavimo puslaikis paciento kraujyje reiškia ' didesnį agento efektyvumą paciento organizme. Pavyzdžiui, konjugatai, pagaminti iš alkilpakeistų reagentų, gali būti skiriami rečiau ir/arba mažesnėmis dozėmis, negu konjugatai, pagaminti iš atitinkamo nepakeisto reagento. Siekiant padidinti skiriamo biologiškai aktyvaus baltymo konjugato su polietilenglikoliu efektyvumą, konjugatų sintezei buvo naudojami didesnio molekulinio svorio polietilenglikoliai. Tačiau konjuguoto IFN biologinis efektyvumas mažėja didinant molekulinę masę. Nepaisant to, naudojant šio išradimo konjugatus, pagamintus vartojant pakeistus reagentus, terapinis efektyvumas didesnis, negu naudojant atitinkamus nepakeistus konjugatus, o molekulinė masė padidėja mažiau.
Kitame šio išradimo pavyzdyje aprašomas naujų konjugatų sintezės procesas.
Konjugatas, turintis formulę IA, gali būti susintetintas tokiu būdu:
RO-(CH2CHO)x —(CH2CHO) — R1 y (CH2(j:HO)z-CH2CHNH2 R2 R3 R4
IV
PEG- aminas
RO-(CH2CHO)
I1A
NH2- baltymas
RO-(CH2CHO)X —(CH2CHO)— (CH2CHO)z-CH2CHNH R1 R2 R3 R4
m baltymas f
I-A kai R, R1, R2, R3, R4 ir R5, m, x, y ir z turi aukščiau nurodytas reikšmes su sąlyga, kad bet kuris iš R1, R2, R3, R4 arba keli iš jų gali būti žemesnysis alkilas.
Šioje reakcijoje PEG-aminas maišomas su junginiu, 1 turinčiu formulę IV, angliavandeniliniame arba chlorinto angliavandenilio tirpiklyje ir gaunamas junginys, turintis formulę IIA. Junginys, turintis formulę HA, gali būti kondensuoj amas vandeninėje terpėje su viena arba keliomis laisvomis baltymo amino grupėmis - taip gaunamas konjugatas, turintis formulę IA. Ši reakcija atliekama pagal žinomas metodikas, skirtas aminų kondensacijai vandeninėje terpėje. Sintetinant konjugatą, turintį formulę IA, reakcija paprastai vykdoma standartiniame vandeniniame buferio tirpale, kurio pH yra nuo 7 iki 10. Reakcijos metu, priklausomai nuo laisvų amino grupių skaičiaus baltyme ir nuo reakcijos trukmės, susidaro PEG'o ir baltymo konjugatų, turinčių įvairias molekulines mišinys. PEG-baltymo konjugatų mišinys išfrakcionuotas iki individualių komponentų, naudojant standartinius metodus, pavyzdžiui, didelio efektyvumo skystinę chromatografiją (HPLC) arba gel-elektroforezę. Junginių atskyrimui pagal molekulinę masę, naudojant HPLC arba gel-elektroforezę, tinka bet kokios standartinės sąlygos. Mišinys frakcionuojamas pagal susidarančių produktų molekulinę masę.
mases, gali būti
IFN konjugatas, turintis formulę IB, gali būti pagamintas pagal tokią reakcijos schemą:
RCKCHjCHOk —(CH2CHO)y- (CHzCHO^^CHOH i i I
R1 R2 R3 R4
CI-C-CI
PEG-alkoholis
IV
RO-(CH2CHO)x
I
R1
H-B
NH2- interferonas f
A zNH
RO-(CH2CHO)X -(CH2CHO)y- (CH2CHO)7-CH2CH V l '2 I I O
R1 R2 R3 r4 υ interferonas l-B kai R, R1, R2, R3, R4 ir R5 m, x, y ir z reikšmės bei sąlyga apibrėžti aukščiau.
Junginys, turintis formulę IV, gaminamas kondensuojant fosgeną su 2-hidroksipiridinu (kuris pakeistas, jei R5 ‘yra žemesnysis alkilas), naudojant bet kurą standartiną rūgšties chloranhidrido ir alkoholio kondensacijos būdą.
PEG-alkoholio ir junginio, turinčio formulę IV, kondensacija, norint gauti junginius, turinčius formulę IIB, vykdoma esant standartinėms sąlygoms, kurios naudojamos kondensuojant alkoholius su karbonatais. Junginys, turintis formulę IIB, kondensuojamas su baltymu per jo vieną ar kelias laisvas amino grupes ir gaunamas junginys, turintis formulę IB.
vykdoma tomis pačiomis sąlygomis, kaip aprašyta junginio, turinčio formulę IIA, gaminant konjugatus, kurių formulė IA. Priklausomai nuo laisvų amino grupių skaičiaus baltyme, kuris reaguoja su junginiu, turinčiu formulę IIB, konjugatas, turintis formulę IB, gali būti sudarytas iš įvairios molekulinės masės konjugatų. Toks mišinys gali būti išfrakcionuotas aukščiau aprašytu būdu.
Ši reakcija ir aukščiau kondensacij a
Junginys, turintis formulę IB, taip pat gali būti susintetintas pagal tokią schemą:
RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHOH + R1 R2 R3 L
IV
RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO
I o J,3 14
R R R R
III
NH2- interferonas u
A.
RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2 CH- O NHR1 R2 R3 r*
C=0
-interferonas l-B
3 4 5 kai R, R , R , R , R ir R m, x ir y reikšmės apibrėžtos aukščiau.
Šioje reakcijos schemoje PEG-alkoholis kondensuojamas su junginiu, turinčiu formulę IV, ir gaunamas junginys, turintis formulę III. Šioje reakcijoje junginys, turintis formulę IIB, susidaro kaip tarpinis junginys, kuris po to reaguoja su antru PEG-alkoholio moliu ir gaunamas junginys, turintis formulę III. Vykdant šią reakciją, vienam moliui junginio, turinčio formulę IV, tenka mažiausiai 2 moliai PEG-alkoholio. Šiai procedūrai galima panaudoti bet kuri standartinį alkoholio ir karbonato kondensacijos būdą. Junginys, turintis formulę III, reaguodamas su interferonu tuo pačiu būdu, kaip tai aprašyta paverčiant junginį IIA į junginį IA, sudaro konjugatą, turintį formulę IB. Priklausomai nuo laisvų amino grupių skaičiaus baltyme, kondensuojant junginį, turintį formulę III, su baltymu, gaunamas mišinys, sudarytas iš įvairios molekulinės masės konjugatų. Toks mišinys gali būti išfrakcionuotas į atskirus komponentus būdu, aprašytu aukščiau konjugatams, turintiems formulę IA.
Nustatyta, kad šio išradimo interferono konjugatai tinka tam pačiam tikslui, kaip ir baltymas, kuris buvo panaudotas, gaminant konjugatą. Todėl šie konjugatai pasižymi tokiu pačiu terapiniu aktyvumu, kaip baltymas iš kurio jie pagaminti, ir gali būti naudojami taip pat, kaip ir pats baltymas, nesukeldami nepageidaujamo imuninio atsako, kuris gali būti susijęs su paties baltymo vartojimu. Todėl šis išradimas taip pat apima farmacines kompozicijas, sudarytas iš junginių, turinčių formulę I, arba jų druskų pagrindu, bei kokių kompozicijų gamybos būdus.
farmacinių kompozicijų, naudojamų arba profilaktikai, sudėtį įeina
Į šio išradimo susirgimų gydymui interferono terapiniu netoksiškas konjugatai, turintys formulę I, ir požiūriu priimtinas, inertiškas ir nešiklis. Vartojimui skirtos farmacinės kompozicijos sudaromos ir dozuojamos pagal procedūras, atitinkančias GMP (gera medicininė praktika) reikalavimus, atsižvelgiant i gydomą ligą, paciento būklę, baltymo konjugato taikymo vietą, taikymo būdą bei kitus žinomus specialistams faktorius.
Toliau pateikiami pavyzdžiai iliustruoja ši išradimą, tačiau jo neapriboja.
Šiuose pavyzdžiuose minimas Jeffamine M-2070 yra monometoksipolioksialkileno propilamino polimeras, kurio vidutinė molekulinė masė yra 2070, susintetintas iš propileno ir etileno oksido ir sudarytas iš polietilenglikolinės pagrindinės grandinės, kurioje yra maždaug 30 % atsitiktiniu būdu įterptų propilenoksido grupių.
Jeffaminas M-1000 yra monometoksipolialkileno propilamino polimeras, kurio vidutinė molekulinė masė yra 1000, susintetintas iš propileno ir etileno oksido ir sudarytas iš polietilenglikolinės pagrindinės grandinės, kurioje yra 14 % specifiškai Įterptų propileno oksido grupių, kai x vidurkis yra 18.6, y vidurkis yra 1,6 ir z yra 0 (x, y ir z reikšmės apibrėžtos aukščiau).
Visi šiuose pavyzdžiuose aprašyti reagentai, iki vartojimo saugomi sausai tamsios spalvos uždarytuose induose esant 4°C. Kiekvienam modifikavimui naudojamos šviežios reagentų porcijos.
pavyzdys a, a-oksometilen-bis [ ω-metoksipoli(oksi-1,2-etandiil)] PS 111 sintezė
Iš suspensijos, kurioje yra 1.5 g MPEG (metoksipolietilenglikolio) (mol.sv. 5000) ir 80 ml sauso toluolo, nudistiliuojama 50 ml tirpiklio. Tirpalas atšaldomas ir pridedama 30.5 mg di-2-piridilkarbonato. Gautas mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 24 valandas. Po to tirpalas atšaldomas, iškritusios nuosėdos nufiltruojamos ir perplaunamos mažu kiekiu toluolo bei dietilo eteriu. Kieta medžiaga džiovinama, esant geram vakuumui, ir gaunama 0.6 g baltų miltelių - a, aoksometilen-bis [ ω-metoksipoli(oksi-1,2-etandiii)] PS 111. PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas pagal būdą, kuris aprašytas žemiau.
a-INTERFERONO, MODIFIKUOTO PEG'u, SINTEZĖ.
būdas: Rekombinantinis a-interferonas (5 mg/ml) dializuoj amas prieš buferį, kuris sudarytas iš 5 mM natrio acetato, pH 5.0, 120 mM NaCl. Pridedama kalio tiocianato iki galutinės koncentracijos 0.5 M ir pH koreguojamas iki galutinės reikšmės 10.0, pridedant vieną dešimtąją tūrio 1 M tricino-natrio šarmo tūrio, pH 11.9. Kieto pavidalo arba ištirpintas DMSO (DMSO tūris sudaro mažiau nei 10 % bendro tūrio) PEGreagentas pridedamas į baltymą moliniu santykiu 3:1. Modifikacija vykdoma kambario temperatūroje nuo 30 minučių iki 4 valandų, po to, siekiant sustabdyti tolesnę modifikaciją, pridedamas 1 M L-glicinas (pH 6.3) iki galutinės koncentracijos 20 mM. PEGmodifikuotas baltymas buvo išsodintas pridedant 3.5 M amonio sulfato, 50 mM natrio fosfato, pH 7.0, kol pasiekiama galutinė 1.1 M amonio sulfato koncentracija (1.0 M amonio sulfato koncentracija PEG-10000 atveju), nuosėdos atskiriamos centrifuguoj ant, plaunamos ir vėl tirpinamos 25 mM amonio acetato tirpale, pH 5.0. PEG'u modifikuoti baltymai buvo gryninami chromatografiniu būdu per hidrofobinės sąveikos kolonėlę (pavyzdžiui, 75x7.5 mm), tokią, kaip BioRad TSK Phenyl-5-PW arba Toyopearl Phenyl-65OM, naudojant kaip eliuentą amonio sulfato gradientą 50 mM natrio 7.0. Arba: PEG-IFN gryninimas gelbūdu per Sephacryl cm x 3.2 cm) mažėj antį fosfate, pH filtracij os (pavyzdžiui,
S-200 kolonėlę (Pharmacia) , kuri nupusiausvirinama 25 mM natrio acetatu (pH 5.0), 200 mM NaCl. PEG'u modifikuotas baltymas identifikuojamas SDSPAGE metodu. Buvo surinktos iš kolonėlės ištekančio baltymo frakcijos, atitinkančios interferoną, sujungtą su viena (PEG1-IFN) arba dviem (PEG2-IFN) PEG'o molekulėmis. Apjungtos frakcijos sukoncentruotos, jose pagal absorbciją prie 280 nm arba kolorimetriškai (Pierce) nustatytas baltymo kiekis. PEG-IFN laikomas esant 4°C buferyje, sudarytame iš 50 mM natrio fosfato ir 0.3 M amonio sulfato, pH 7.0.
būdas: Interferonas a-2a (koncentracija maždaug 6 mg/ml) dializuojamas prieš tirpalą, sudarytą iš 5 mM natrio acetato, pH 5.0 bei 0.12 M natrio chlorido. Baltymo koncentracija nustatoma pagal absorbciją prie 280 nm, naudojant ekstinkcijos koeficientą 1.0 mg_1ml. Baltymo tirpalas sumaišomas su modifikuojančiu reagentu moliniu santykiu 1:3. Modifikacijos reakcija inicijuojama koreguojant pH reikšmę iki 10.0, naudojant vieną dešimtadalį tūrio 1.0 M Na2B4O7 - NaOH, pH 10.7. Po to 1 valandą reakcijos mišinys inkubuojamas kambario temperatūroje ir reakcija sustabdoma, pridedant vieną dvidešimtąją tūrio dalį 1 M glicino, pH 7.5. Po 3-5 minučių, pH sumažinamas iki 5.0-6.0, pridedant vieną dvidešimtąją tūrio dalį 1 M natrio acetato, pH 4.0.
Tirpalas, kuriame yra PEG-interferonas, neutralizuotas reagentas ir nemodifikuotas interferonas, praskiedžiamas keturiais tūriais 40 mM amonio acetato, pH 4.5, ir leidžiamas per CM-celiuliozės kolonėlę (Whatman CM-52, maždaug 0.5 ml sorbento 1 mg baltymo). Perplovus kolonėlę 5 tūriais 40 mM amonio acetato, pH 4.5, PEGinterferonas ir nemodifikuotas interferonas eliuojami, naudojant tiesinį natrio chlorido gradientą (0-0.5 M) 40 mM amonio acetate, pH 4.5. Frakcijos, kuriose yra baltymo, identifikuojamos pagal absorbciją prie 280 nm, PEG-interferoną turinčios frakcijos identifikuojamos SDS-PAGE metodu.
Toliau PEG-interferonas gryninamas gel-filtracinės chromatografijos metodu per kolonėlę, kuri užpildyta Sephacryl S-200 sorbentų (Pharmacia-LKB). Frakcijos, surinktos ištekant iš kolonėlės, analizuojamos SDS-PAGE metodu, surenkamas piko eliuatas, atitinkantis PEGinterferoną .
pavyzdys a, a-Oksometilen-bis [ ω-metoksipoli(oksi-1,2-etandiil)] PS 28.3 sintezė
Pagal metodiką, aprašytą 1 pavyzdyje, iš MPEG (molekulinis svoris 1300) buvo susintetintas a, aoksometilen-bis [ ω-metoksipoli(oksi-1,2-etandiil)] PS 28.3 ir, panaudojus šį reagentą, pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje, buvo pagamintas PEG'u modifikuotas interferonas.
pavyzdys a-Metil-o-[ 2-[ [ (2-piridiniloksi) karbonil] oksi] -etoksi] poli-(oksi-1,2-etandiil) PS 111.7 sintezė
Iš tirpalo, kuriame yra 1 g MPEG (mol. svoris 5000) ir 30 ml sauso metileno chlorido, nudistiliuojama 10 ml tirpiklio. Tirpalas atšaldomas iki kambario temperatūros ir į jį pridedama 132 mg (0.6 mM) di-2piridilkarbonato ir 4 mg DMAP. Tirpalas maišomas 14 valandų, po to tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje. Liekana ištrinama dietilo eteryje ir gautos nuosėdos nufiltruojamos. Produktas ištirpinamas 7 ml sauso glimo, pašildoma, kol viskas ištirpsta, ir tirpalas atvėsinamas ir paliekamas kambario temperatūroje keletą valandų. Iškritusios nuosėdos filtruojamos ir perplaunamos sausu glimu (2x5 ml). Kieta medžiaga džiovinama vakuuminėje krosnyje azoto srovėje ir gaunama 0.7 g ct-[ (2-piridiniloksi)karbonil]-ωmetoksipoli-(oksi-1,2-etandiil) PS 111.7
Analizė: C9HnNO4 (CH2CH2O) 111.7]
Apskaičiuota; %: C, 54.57; H, 9.02; N, 0.28.
Rasta; %: C, 54.51; H, 9.19; N, 0.28.
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
pavyzdys a-[ (2-piridiniloksi) karbonil] -ω-metoksipoli (oksi-1,2etandiil) PS 225 sintezė
Pagal metodiką, aprašytą 3 pavyzdyje, iš MPEG (molekulinė masė 10000) buvo susintetintas a-[ (2piridiniloksi)karbonil] -ω-metoksipoli(oksi-1,2etandiil) PS 225.
Analizė:
C9HuNO4 (CH2CH2O)225
Apskaičiuota;
54.54; H, 9.08; N, 0.14.
Rašte; %:
C, 54.54; H, 9.12; N,0.11.
PEG' u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
pavyzdys a-metil-©-[ 2-[ 2-[ [ 2--piridiniloksi) karbonil] oksi] -propoksi] propoksi] poli (oksi-1,2-etandiil) PS 64.7 sintezė
Iš tirpalo, kuriame yra 0.5 g a-2-[2-(hidroksipropoksi)propil] -ω-metoksipoli(oksi-1,2-etandiil) PS 64.7 ir 40 ml sauso metileno chlorido, nudistiliuojama 15 ml tirpiklio. Po to į tirpalą pridedama 108 mg di-2piridilkarbonato, 4 mg DMAP ir keli grūdeliai 4A molekulinio sieto. Mišinys maišomas per naktį, filtruojamas ir tirpiklis nudistiliuoj amas sumažintame slėgyje. Liekana gryninama gel-filtracinės chromatografijos metodu.
Šis reagentas atitinka junginiui, kurio formulė yra
/ \
N
IIB-1, kurioje n yra maždaug 64.
Tai atitinka polimero molekulinę masę apie 3000 daltonų.
24
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
pavyzdys oc-metil-a>-[ 2-[ 2-[ [ 2-piridiniloksi)karbonil] oksi] -propoksi] propoksi] poli (oksi-1, 2-etandiil) PS 110 sintezė a-2-[ 2-(hidroksipropoksi) propil] -ω-metoksipoli (oksi1,2-etandiil) PS 110 buvo paverstas a-metil-a>-[ 2-[ 2-[ [ 2piridiniloksi) karbonil] oksi] -propoksi] propoksi] poli (oksi-1, 2-etandiil) PS 110, naudojantis metodika, aprašyta 5 pavyzdyje.
Šis reagentas (IIB-2) atitinka junginį, aprašytą 5 pavyzdyje, išskyrus tai, kad n reikšmė yra maždaug 110, kas atitinka apytikriai 5000 daltonų.
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
pavyzdys
Metiloksirano, polimero su oksiranu, [2-[ [ (2-piridiniloksi)-karbonil] amino] propilmetilo eterio (MO/O=10/ 32) sintezė.
Iš tirpalo, kuriame yra 1 g Jeffamine M-2070 (Texaco Chemical Co.) ir 40 ml sauso metileno chlorido, nugarinama 15 ml tirpiklio. Tirpalas atšaldomas iki 0°C ir pridedama 215 mg di-2-piridinilkarbonato. Tirpalas maišomas dar 4 valandas, esant 0°C, po to tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje. Liekana gryninama sujungus iš eilės dvi Phenomenex gel-filtracines kolonėles (500 A ir 1000 A) . Produktas turi dvi UV absorbcijos juostas: 232 nm ir 310 nm.
Šis reagentas atitinka junginį, turintį tokią formulę:
(M
CH3OCH2CH2O(CH2CHO) -ch2ch— nh —C —O —
IIA-1
CH, • . 5 2 kurioje R yra H, R yra H arba metilas ir, skaičiuojant pagal vidutinį pasiskirstymą, n yra lygus 32, kai R2 yra H ir n yra lygus 10, kai R yra metilas.
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aparšytą 1 pavyzdyj e.
pavyzdys
Metiloksirano, polimero su oksiranu, [ 2-[ [ (3-metil-2piridiniloksi)-karbonil] amino] propilmetilo eterio (MO/0=10/32) sintezė.
Pagal metodiką, pateiktą 7 pavyzdyje, 0.1 g Jeffamine M-2070 reaguoja su bis (3-metil-2-piridinil) karbonatu ir gaunamas metiloksiranas, polimeras su oksiranu, [ 2[ [ (3-metil] -2-piridiniloksi)-karbonil] amino] propilmetilo eteris (MO/O=10/32).
Šis reagentas (IIA—2) atitinka junginį, aprašytą 7 pavyzdyje (IIA-1), išskyrus tai, kad R5 yra CH3.
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
pavyzdys
Metiloksirano, blokpolimero su oksiranu, [ 2-[ [ (2piridiniloksi)-karbonil] amino] propilmetilo eterio (MO/O=1.6/18.6) sintezė.
Pagal metodiką, pateiktą 7 pavyzdyje, 0.6 g Jeffamine M-1000 (Texaco Chemical Co.) reaguoja su 155.6 mg di-2piridinilkarbonatu ir gaunamas metiloksiranas, blokpolimeras su oksiranu, [ 2-[ [ (2-piridiniloksi)karbonil] amino] propilmetilo eteris (MO/O=1.6/18.6) .
Šis reagentas atitinka junginį, kurio formulė tokia:
CH3O(CH2CH2O) (CH2CHO)j 6ch2ch— n z x o
IIA-3.
18.6 -į «.u η H ch3 ch3 kurioje skaičiais nurodytas vidutinis subvienetų pasiskirstymas polimerinėje grandinėje.
PEG'u modifikuotas interferonas buvo pagamintas naudojant šį reagentą pagal 1 būdą, aprašytą 1 pavyzdyje.
Antivirusinis interferono aktyvumas.
Interferono ir PEG'u modifikuoto interferono antivirusinis aktyvumas nustatytas pagal Rubenstein, et ai., (1981) J.Virol. 37:755-758; Familletti, et ai., (1981) Methods Enzymol. 78:387-394. Visi bandymai buvo palyginami su kontrole. Naujojo bandymuose interferono standarto specifinis aktyvumas buvo 2x10 vienetų/mg baltymo.
Interferono modifikavimui naudotos aukščiau aprašytos optimizuotos metodikos. Siekiant nustatyti interferono konversijos į PEG-interferoną laispnį priklausomai nuo inkubavimo laiko (cheminis reaktingumas) ir įvairių PEG-interferono konjugatų pasiskirstymą (selektyvumas), PEG'u modifikuoti produktai buvo analizuoti SDS-PAGE metodu. SDS-PAGE gelyje PEG'u modifikuoti junginiai atitinka lėčiau judančias juostas. Tiek monoPEG, tiek diPEG-interferonas buvo susintetinti su pakankamai didele išeiga, todėl šiuos junginius buvo galima išskirti iš reakcijos mišinio naudojant hidrofobinės sąveikos chromatografiją. Buvo tiriamas išgrynintų PEGinterferonų antivirusinis aktyvumas ir lyginamas su nemodifikuoto interferono-a2a standartu. Tirtų polimerų molekulinė masė ir kai kurių PEG'o darinių antivirusinis aktyvumas pateikti lentelėje.
Lentelė
Fizikinės PEG-reagentų savybės ir jų konjugatų su baltymais biologinis aktyvumas
Antivirusinis aktyvumas (% nuo kontrolės)
Junginys iš Polimero
pavyzdžio mol. masė mono PEG diPEG
4 10000 25 2
3 5000 40 4
1 5000 40 nematuota
6 5000 40 nematuota
5 3000 60 nematuota
7 2070 45 nematuota
2 1300 70 nematuota
9 1000 100 40
IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

Claims (21)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Interferono konjugatas, turintis formulę:
    RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CH-Wz x NH interferonas I kurioje R yra žemesnysis alkilas; R1, R2, R3 ir R4 yra H arba žemesnysis alkilas;
    m yra sveikas skaičius 1, neviršijantis pasiekiamų amino grupių interferone skaičiaus;
    W yra O arba NH;
    x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 0 iki 1000, o x, y ir z suma yra nuo 3 iki 1000;
    su sąlyga, kad bent vienas iš R1, R2, R3 ir R4 yra žemesnysis alkilas.
  2. 2. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad x, y ir z yra taip parinkti, kad konjugato polimerinio subvieneto molekulinė masė yra nuo maždaug 300 daltonų iki maždaug 30000 daltonų.
  3. 3. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad m lygus 1.
  4. 4. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad R yra metilas.
  5. 5. Interferono konjugatas pagal 2 punktą, k i r i a n t parinkti, kad molekulinė masė i s tuo, kad x, y ir konjugato polimerinio yra nuo maždaug 1000 b e s i s z yra taip subvieneto daltonų iki maždaug 5000 daltonų,
  6. 6. Interferono konjugatas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad x, y ir z yra taip parinkti, kad konjugato polimerinio subvieneto molekulinė masė yra maždaug 1000 daltonų iki maždaug 2200 daltonų.
  7. 7. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad x ir y yra nuo 5.0 iki 500.0 ir z yra nuo 0.0 iki 4.0.
  8. 8. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiski r i a n t i s tuo, kad x yra nuo 10.0 iki 100.0, y yra nuo 1.0 iki 10.0 ir z yra 0.
  9. 9. Interferono konjugatas pagal 1 punktą, besiski r i a n t i s tuo, kad interferonu naudojamas interferonas 2a.
  10. 10. Interferono konjugatas pagal 9 punktą, besiskiriantis tuo, kad W yra NH; m yra 1; R, R2 ir R4 yra metilas; R1 yra H; x yra 18.6, y yra 1.6 ir z yra
    0.
  11. 11. Junginys, turintis formulę:
    1 2 3 4.5 kurioje R yra žemesnysis alkilas, R , R , R , R ir R yra H arba žemesnysis alkilas;
    W yra NH arba O;
    x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 0 iki 1000, o x, y ir z suma yra nuo 3 iki 1000, su sąlyga, kad jei W yra NH arba jei W yra O ir R5 yra 12 3 4
    H, tai bent vienas iš R , R , R ir R yra žemesnysis alkilas.
    skirian;i taip, kad šio nuo 300 daltonų skirianskirian0, y yra nuo 1.0
  12. 12. Junginys pagal 11 punktą, besi t i s tuo, kad x, y ir z yra parinki junginio molekulinė masė yra maždaug iki maždaug 30000 daltonų.
  13. 13. Junginys pagal 11 punktą, besi t i s tuo, kad R yra metilas.
  14. 14. Junginys pagal 13 punktą, besi t i s tuo, kad x yra nuo 10.0 iki 100. iki 10.0 ir z yra nuo 0.0 iki 4.0.
  15. 15. Junginys, turintis formulę:
    RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO
    --C=O
    III, kurioje R yra žemesnysis alkilas, R1, R2, R3 ir R4 yra H arba metilas, x yra sveikas skaičius nuo 1 iki 1000, y ir z yra sveiki skaičiai nuo 0 iki 1000, o x, y ir z suma yra nuo 3 iki 1000.
  16. 16. Junginys pagal 15 punktą, besiskiriantis tuo, kad x, y ir z parinkti taip, kad šio junginio molekulinė masė yra nuo maždaug 300 daltonų iki maždaug 30000 daltonų.
    17. Junginys pagal 15 punktą, bes i s k i r i a n - t i s tuo, kad bent vienas iš R1 r R2, R3 ir „4 R yra žemesnysis alkilas. 18 . Junginys pagal 15 punktą, bes i s k i r i a n - t i s tuo, kad R yra metilas. 19. Interferono konjugatų pagal bet kurį iš 1-10 punktų
    panaudojimas kaip terapiškai aktyvių junginių ligų gydymui ir profilaktikai.
  17. 20. Interferono konjugatų pagal bet kurį iš 1-10 punktų gaminimo būdas, besiskiriantis tuo, kad bet kuri, jungini, pagal 11-18 punktus konjuguoja su interferonu arba jo druska ir interferono konjugatą išskiria iš reakcijos mišinio.
  18. 21. Farmacinės kompozicijos, turinčios terapiniu požiūriu inertiško nešiklio, besiskiriančios tuo, kad į jų sudėtį įeina interferono konjugatas pagal bet kurį iš 1-10 punktų.
  19. 22. Farmacinės kompozicijos, turinčios terapiniu požiūriu inertiško nešiklio, skirtos 'tokių imunomoduliatorinių sutrikimų, kaip neoplastinės arba infekcinės ligos gydymui arba profilaktikai, besiskiriančios tuo, kad į jų sudėtį įeina interferono konjugatas pagal bet kurį iš 1-10 punktų.
  20. 23. Interferono konjugatų pagal bet kurį iš 1-10 punktų panaudojimas gyvūnų susirgimų gydymui arba profilaktikai .
  21. 24. Interferono konjugatų pagal bet kurį iš 1-10 punktų panaudojimas vaistų, skirtų ligų gydymui arba profilaktikai, gamybai.
LTIP888A 1992-08-26 1993-08-25 Polyethylene glycol -interferon conjugates LT3174B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/935,770 US5382657A (en) 1992-08-26 1992-08-26 Peg-interferon conjugates

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LTIP888A LTIP888A (lt) 1994-08-25
LT3174B true LT3174B (en) 1995-02-27

Family

ID=25467637

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LTIP888A LT3174B (en) 1992-08-26 1993-08-25 Polyethylene glycol -interferon conjugates

Country Status (37)

Country Link
US (1) US5382657A (lt)
EP (1) EP0593868B1 (lt)
JP (1) JP2859105B2 (lt)
KR (1) KR100295520B1 (lt)
CN (3) CN1183112C (lt)
AT (1) ATE165102T1 (lt)
AU (1) AU668742B2 (lt)
BG (1) BG98067A (lt)
BR (1) BR9303469A (lt)
CA (1) CA2103829C (lt)
CZ (1) CZ169393A3 (lt)
DE (1) DE69317979T2 (lt)
DK (1) DK0593868T3 (lt)
EE (1) EE9400151A (lt)
ES (1) ES2116376T3 (lt)
FI (1) FI109765B (lt)
HR (1) HRP931094A2 (lt)
HU (1) HUT67013A (lt)
IL (1) IL106750A0 (lt)
IS (1) IS4067A (lt)
LT (1) LT3174B (lt)
LV (1) LV10907B (lt)
MW (1) MW7693A1 (lt)
MX (1) MX9305146A (lt)
MY (1) MY131445A (lt)
NO (1) NO933028D0 (lt)
NZ (2) NZ248452A (lt)
OA (1) OA09850A (lt)
PH (1) PH30460A (lt)
PL (1) PL300194A1 (lt)
RO (1) RO112730B1 (lt)
SI (1) SI9300423A (lt)
SK (1) SK89893A3 (lt)
UY (1) UY23635A1 (lt)
YU (1) YU56693A (lt)
ZA (1) ZA936098B (lt)
ZW (1) ZW11193A1 (lt)

Families Citing this family (292)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990006952A1 (fr) * 1988-12-22 1990-06-28 Kirin-Amgen, Inc. Facteur de stimulation de colonies de granulocytes modifies chimiquement
US7264944B1 (en) * 1989-04-21 2007-09-04 Amgen Inc. TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them
DK0393438T3 (da) * 1989-04-21 2005-05-30 Amgen Inc TNF-receptor, TNF-bindende proteiner og DNAér, der koder herfor
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc Method for the production of a human recombinant tumor necrosis factor inhibitor
US6552170B1 (en) 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5880131A (en) * 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5919455A (en) 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
DE69430251T2 (de) * 1993-11-10 2002-11-07 Enzon, Inc. Verbesserte interferon-polymerkonjugate
DE69521880T2 (de) * 1994-02-08 2002-01-03 Amgen Inc., Thousand Oaks Orales verabreichungssystem von chemischmodifizierten proteinen g-csf
US5730990A (en) * 1994-06-24 1998-03-24 Enzon, Inc. Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates
US20030053982A1 (en) * 1994-09-26 2003-03-20 Kinstler Olaf B. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
DE4435087A1 (de) * 1994-09-30 1996-04-04 Deutsches Krebsforsch Konjugat zur Behandlung von Infektions-, Autoimmun- und Hauterkrankungen
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
TW426523B (en) * 1995-04-06 2001-03-21 Hoffmann La Roche Interferon solution
DE19514087A1 (de) * 1995-04-13 1996-10-17 Deutsches Krebsforsch Konjugat aus einem Wirkstoff, einem Polyether und ggfs. einem nicht als körperfremd angesehenen, nativen Protein
US5908621A (en) * 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
ES2214551T3 (es) 1995-11-02 2004-09-16 Schering Corporation Terapia de infusion continua de citocinas a baja dosis.
TW517067B (en) * 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
US7495087B2 (en) 1997-07-14 2009-02-24 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine muteins in the C-D loop of human interleukin-11
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
CN1269805A (zh) * 1997-07-14 2000-10-11 博尔德生物技术公司 生长激素和相关蛋白的衍生物
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
CN1276730A (zh) * 1997-09-18 2000-12-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 α－干扰素和金刚胺用于治疗慢性丙型肝炎的应用
US6180095B1 (en) * 1997-12-17 2001-01-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
JP4465109B2 (ja) 1997-12-17 2010-05-19 エンゾン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド アミノ及びヒドロキシル含有生物活性剤のポリマープロドラッグ
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
FR2774687B1 (fr) * 1998-02-06 2002-03-22 Inst Nat Sante Rech Med Lipopeptides contenant un fragment de l'interferon gamma, et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
US6180096B1 (en) 1998-03-26 2001-01-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
JP3643034B2 (ja) * 1998-03-26 2005-04-27 シェーリング コーポレイション ＰＥＧ−インターフェロンα結合体の保護のための処方物
TR200101751T2 (tr) * 1998-04-28 2002-05-21 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Poliol-IFN-beta konjugatları
TWI277424B (en) 1998-05-15 2007-04-01 Schering Corp Combination therapy for eradicating detectable NCV-RNA in antiviral treatment naive patients having chronic hepatitis C infection
ATE473759T1 (de) * 1998-05-22 2010-07-15 Univ Leland Stanford Junior Bifunktionelle moleküle sowie darauf basierende therapien.
ITMI981148A1 (it) * 1998-05-22 1999-11-22 Therapicon Srl Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie
CN1170543C (zh) * 1998-06-08 2004-10-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 PEG-IFN-α和三唑核苷在治疗慢性丙型肝炎中的用途
US20030143662A1 (en) * 1998-06-16 2003-07-31 Cummings Richard D. Glycosulfopeptide inhibitors of leukocyte rolling and methods of use thereof
US7223845B2 (en) 1998-06-16 2007-05-29 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Synthetic glycosulfopeptides and methods of synthesis thereof
AU773542B2 (en) * 1998-06-16 2004-05-27 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma, The Glycosulfopeptides and methods of synthesis and use thereof
CN100480266C (zh) 1998-10-16 2009-04-22 拜奥根Idec马萨诸塞公司 干扰素-β融合蛋白及用途
DK1656952T3 (da) * 1998-10-16 2014-01-20 Biogen Idec Inc Polyalkylenglycolkonjugater af interferon beta-1A og anvendelser deraf
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
JP2002534119A (ja) 1999-01-14 2002-10-15 ボルダー バイオテクノロジー， インコーポレイテッド 自由システイン残基を有するタンパク質の生産方法
HK1049673A1 (zh) * 1999-01-29 2003-05-23 霍夫曼-拉罗奇有限公司 Gcsf缀合物
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
CN1390132A (zh) 1999-04-08 2003-01-08 先灵公司 聚乙二醇化干扰素α在黑素瘤治疗中的应用
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
JO2291B1 (en) 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
DE60045931D1 (de) 1999-07-07 2011-06-16 Zymogenetics Inc Menschliches Rezeptor für Zytokine
WO2001005819A1 (en) * 1999-07-15 2001-01-25 Kuhnil Pharm. Co., Ltd. Novel water soluble-cyclosporine conjugated compounds
US7431921B2 (en) * 1999-08-27 2008-10-07 Maxygen Aps Interferon beta-like molecules
US6531122B1 (en) * 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
US7144574B2 (en) * 1999-08-27 2006-12-05 Maxygen Aps Interferon β variants and conjugates
WO2001026677A1 (fr) 1999-10-12 2001-04-19 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Complexe a base d'interferon et son utilisation en medecine
US7230081B1 (en) 1999-11-12 2007-06-12 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma conjugates
SK8292002A3 (en) * 1999-11-12 2002-12-03 Maxygen Holdings Ltd A conjugate exhibiting interferon gamma activity, nucleotide sequence encoding for a polypeptide fraction of conjugate, an expression vector and a host cell containing nucleotide sequence, pharmaceutical composition comprising the same and use thereof
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
US6887842B1 (en) 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
EP1229924A4 (en) 1999-11-19 2004-12-15 Univ Leland Stanford Junior TARGETED BIFUNCTIONAL MOLECULES AND THERAPIES BASED THEREON
CA2393369A1 (en) 1999-12-03 2001-06-07 Zymogenetics, Inc. Human cytokine receptor
CA2395713C (en) 2000-01-10 2012-04-10 Maxygen, Inc. G-csf conjugates
EP1908477A3 (en) * 2000-01-24 2008-06-11 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
EP1251866A1 (en) * 2000-01-24 2002-10-30 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
EP1982732A3 (en) 2000-02-11 2011-06-08 Bayer HealthCare LLC Factor VII or VIIA-like conjugates
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6777387B2 (en) 2000-03-31 2004-08-17 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Terminally-branched polymeric linkers containing extension moieties and polymeric conjugates containing the same
US6756037B2 (en) 2000-03-31 2004-06-29 Enzon, Inc. Polymer conjugates of biologically active agents and extension moieties for facilitating conjugation of biologically active agents to polymeric terminal groups
ATE421535T1 (de) * 2000-10-16 2009-02-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Peg-modifiziertes erythropoietin
US20020169290A1 (en) * 2000-11-02 2002-11-14 Claus Bornaes New multimeric interferon beta polypeptides
JP2004516826A (ja) 2000-11-07 2004-06-10 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド ヒト腫瘍壊死因子受容体
CA2438682A1 (en) 2001-02-20 2002-08-29 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both bcma and taci
MXPA03007392A (es) * 2001-02-20 2003-12-04 Enzon Inc Enlazantes polimericos ramificados terminalmente y conjugados polimericos que contienen los mismos.
PL367154A1 (en) 2001-02-27 2005-02-21 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
WO2002070655A2 (en) 2001-03-02 2002-09-12 Zymogenetics, Inc. Mouse cytokine receptor
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
WO2002083166A1 (en) * 2001-04-10 2002-10-24 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Interferon-polymer complexes and medicinal use thereof
EA010594B1 (ru) 2001-05-24 2008-10-30 Займодженетикс, Инк. Слитые белки taci-иммуноглобулина
WO2003000278A1 (en) * 2001-06-22 2003-01-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Ointments
MD2053C2 (ro) * 2001-07-10 2003-07-31 Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова Remediu cu acţiune interferonogenă
DE60223047T2 (de) 2001-08-22 2008-07-24 Bioartificial Gel Technologies Inc., Montreal Verfahren zur herstellung von aktivierten polyethylenglykolen
AU2002346686A1 (en) * 2001-12-07 2003-06-23 Intermune, Inc. Compositions and method for treating hepatitis virus infection
KR100888371B1 (ko) 2002-01-17 2009-03-13 동아제약주식회사 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
DK3025726T3 (da) * 2002-01-18 2019-12-09 Biogen Ma Inc Polyalkylenpolymerforbindelser og anvendelser deraf
WO2003076490A1 (en) * 2002-03-13 2003-09-18 Beijing Jiankai Technology Co., Ltd. Hydrophilic polymer derivate with y type branch and preparation method of it medical composite comprising above compound
JP2005535575A (ja) * 2002-04-11 2005-11-24 ザイモジェネティクス インコーポレイティッド 卵巣癌を治療するためのインターロイキン−２４の使用法
EP1497415B1 (en) 2002-04-19 2010-12-29 ZymoGenetics, L.L.C. Methods for detection or modulation of the interaction of a cytokine receptor with its ligand
BR0311978A (pt) 2002-06-21 2005-03-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Preparação, método para preparar a mesma, formulação farmacêutica, métodos para tratar de uma sìndrome responsiva ao fator vii, para prevenir hemorragias indesejáveis, para prevenir coagulação sanguìnea indesejável e para prevenir as reações mediadas pelo fator tecidual, e, uso de uma preparação
WO2004005341A2 (en) * 2002-07-03 2004-01-15 Maxygen Holdings Ltd. Full-length interferon gamma polypeptide variants
CN100337689C (zh) 2002-07-24 2007-09-19 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 聚亚烷基二醇酸加合物
US20040136955A1 (en) * 2002-09-05 2004-07-15 Barker Nicholas P Modified asialo-interferons and uses thereof
US20040136956A1 (en) * 2002-09-05 2004-07-15 Barker Nicholas P. Asialo-interferons and the treatment of liver cancer
DE60313786T2 (de) * 2002-09-27 2008-01-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Poly(ethylen glykol)-konjugate von insulinähnlichem wachstumfaktor bindenden protein-4
US20040175359A1 (en) * 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
US7314613B2 (en) * 2002-11-18 2008-01-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
CN102319437B (zh) * 2002-12-26 2017-10-13 山景医药公司 具有增强的生物学效用的干扰素‑β的聚合物缀合物
AU2003303636B2 (en) * 2002-12-26 2010-08-05 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity
EP1581260B1 (en) * 2002-12-31 2014-09-17 Nektar Therapeutics Polymeric reagents comprising a ketone or a related functional group
CA2515612A1 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Pharmacia Corporation Activated polyethylene glycol esters
WO2004076474A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Intermune, Inc. Polyethylene glycol modified interferon compositions and methods of use thereof
US20070077225A1 (en) * 2003-02-28 2007-04-05 Blatt Lawrence M Continuous delivery methods for treating hepatitis virus infection
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
JP2007525188A (ja) 2003-05-16 2007-09-06 インターミューン インコーポレイテッド 合成ケモカイン受容体リガンドおよびその使用方法
PT2251353E (pt) 2003-08-07 2013-05-07 Zymogenetics Inc Preparações homogéneas de il-28 e il-29
GB0320638D0 (en) 2003-09-03 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
EP2263684A1 (en) 2003-10-10 2010-12-22 Novo Nordisk A/S IL-21 derivatives
TW201245229A (en) 2003-10-14 2012-11-16 Hoffmann La Roche Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication
ES2428358T3 (es) 2003-10-17 2013-11-07 Novo Nordisk A/S Terapia de combinación
WO2005042563A2 (en) * 2003-10-22 2005-05-12 Akzo Nobel N.V. Process for incrasing protein pegylation reaction yields by diafiltration ultrafiltration
US7407973B2 (en) * 2003-10-24 2008-08-05 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
WO2005062949A2 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
CN103755800B (zh) 2004-02-02 2016-02-24 Ambrx公司 经修饰的人类生长激素多肽与其用途
AU2005319099B2 (en) * 2004-02-02 2010-09-16 Ambrx, Inc. Modified human growth hormone
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
RU2311930C2 (ru) * 2004-04-30 2007-12-10 Закрытое акционерное общество "ВЕРОФАРМ" Пэгилированный интерферон для борьбы с вирусной инфекцией
CA2566247A1 (en) * 2004-05-19 2005-12-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
US20060018875A1 (en) * 2004-06-14 2006-01-26 Blatt Lawrence M Interferon compositions and methods of use thereof
CN102532321B (zh) * 2004-06-18 2018-10-12 Ambrx公司 新颖抗原结合多肽和其用途
US7638299B2 (en) * 2004-07-21 2009-12-29 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
WO2006012644A2 (en) 2004-07-29 2006-02-02 Zymogenetics, Inc. Use of il-28 and il-29 to treat cancer
DE602005022895D1 (de) 2004-08-12 2010-09-23 Schering Corp Stabile pegylierte interferon-formulierung
CA2581423A1 (en) 2004-09-23 2006-03-30 Vasgene Therapeutics, Inc. Polipeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
AU2005323106B2 (en) 2004-12-22 2010-07-29 Ambrx, Inc. Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
KR101224781B1 (ko) * 2004-12-22 2013-01-21 암브룩스, 인코포레이티드 비천연적으로 코딩된 아미노산을 포함하는 인간 성장호르몬의 조제물
NZ555425A (en) 2004-12-22 2010-04-30 Ambrx Inc Compositions of aminoacyl-tRNA synthetase and uses thereof
EP2192132A3 (en) 2005-02-08 2010-08-18 ZymoGenetics, Inc. Anti-IL-20, anti-IL22 and anti-IL-22RA antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
JP2008544746A (ja) 2005-05-12 2008-12-11 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド 免疫応答を調節するための組成物および方法
MX2007014524A (es) * 2005-05-18 2008-02-07 Maxygen Inc Polipeptidos desarrollados de interferon-alfa.
WO2006133088A2 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
CA2611836A1 (en) * 2005-06-13 2006-12-21 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Transmucosal delivery of peptide derivatives
WO2006134173A2 (en) 2005-06-17 2006-12-21 Novo Nordisk Health Care Ag Selective reduction and derivatization of engineered proteins comprising at least one non-native cysteine
AR054778A1 (es) 2005-06-17 2007-07-18 Novartis Ag Uso de sangliferina en hcv
US7695710B2 (en) 2005-06-20 2010-04-13 Pepgen Corporation Antitumor and antiviral combination therapies using low-toxicity, long-circulating human interferon-alpha analogs
CN101257925A (zh) * 2005-06-20 2008-09-03 派普根公司 人干扰素α类似物和干扰素τ的低毒长循环的嵌合体
JP5208733B2 (ja) * 2005-06-29 2013-06-12 イエダ リサーチ アンド デベロップメント カンパニー リミテッド 組換えインターフェロンα２（ＩＦＮα２）変異体
JP5249028B2 (ja) 2005-07-25 2013-07-31 インターミューン・インコーポレーテッド Ｃ型肝炎ウイルス複製の新規大環状阻害剤
CA2618878C (en) * 2005-08-18 2016-06-28 Ambrx, Inc. Compositions of trna and uses thereof
EP1931697B1 (en) 2005-09-28 2010-09-15 ZymoGenetics, Inc. Il-17a and il-17f antagonists and methods of using the same
GEP20104956B (en) 2005-10-11 2010-04-12 Array Biopharma Inc Compounds for inhibiting hepatitis c viral replication and use thereof
US20080171696A1 (en) * 2005-10-21 2008-07-17 Avigenics, Inc. Pharmacodynamically enhanced therapeutic proteins
AU2006304856A1 (en) * 2005-10-21 2007-04-26 Synageva Biopharma Corp. Glycolated and glycosylated poultry derived therapeutic proteins
SI1954710T1 (sl) * 2005-11-08 2011-08-31 Ambrx Inc Pospeĺ evala za modifikacijo nenaravnih aminokislin in nenaravnih peptidov aminokislin
EP1951890A4 (en) * 2005-11-16 2009-06-24 Ambrx Inc PROCESSES AND COMPOSITIONS WITH NON-NATURAL AMINO ACIDS
KR101423898B1 (ko) * 2005-12-14 2014-07-28 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 함유하는 조성물, 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 포함하는 방법, 및 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드의 용도
DK1985303T3 (da) 2006-01-12 2013-02-25 Kitasato Daiichi Sankyo Vaccine Co Ltd Oral sammensætning indeholdende interferon-alpha
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
CA2643680A1 (en) 2006-04-11 2007-11-22 Novartis Ag Hcv/hiv inhibitors and their uses
EP2581450B1 (en) * 2006-05-02 2018-08-15 MedImmune Limited Non-natural amino acid substituted polypeptides
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
US20090252720A1 (en) 2006-05-24 2009-10-08 Novo Nordisk Health Care Ag Prolonged FIX Analogues and Derivatives
JP5031827B2 (ja) 2006-06-01 2012-09-26 程云 予防或いは肝損傷を治療するペプチッド
CN1911447B (zh) * 2006-06-30 2010-05-12 复旦大学 转铁蛋白-聚乙二醇-药物分子复合物及其制备药物的用途
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
JP2010510171A (ja) * 2006-08-21 2010-04-02 ユナイテッド セラピューティクス コーポレーション ウイルス感染症の治療のための併用療法
WO2008030558A2 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
ES2457527T3 (es) * 2006-09-08 2014-04-28 Ambrx, Inc. ARNt Supresor hibrido en células de vertebrados
PT2064333E (pt) * 2006-09-08 2014-06-09 Ambrx Inc Supressor híbrido arnt para células de vertebrados
JP5537946B2 (ja) 2006-11-22 2014-07-02 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｉｇｆ−ｉｒを含むチロシンキナーゼ受容体に対する改変タンパク質に基づく標的治療薬
CN101219219B (zh) * 2007-01-10 2013-02-13 北京普罗吉生物科技发展有限公司 包含血管抑素或其片段的复合物、其制备方法及应用
US20100144599A1 (en) 2007-02-02 2010-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Vegf pathway blockade
KR101476472B1 (ko) * 2007-03-30 2015-01-05 암브룩스, 인코포레이티드 변형된 ｆｇｆ-21 폴리펩티드 및 그 용도
KR20100019467A (ko) * 2007-05-02 2010-02-18 암브룩스, 인코포레이티드 변형된 인터페론 베타 폴리펩티드 및 그의 용도
CA2707840A1 (en) * 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
CN101636411B (zh) * 2007-09-04 2013-01-09 厦门伯赛基因转录技术有限公司 聚乙二醇修饰的干扰素α2a及其制备方法和应用
CA2698173C (en) * 2007-09-04 2015-02-03 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Interferon alpha 2b modified by polyethylene glycol, the preparation and use thereof
WO2009046407A2 (en) 2007-10-04 2009-04-09 Zymogenetics, Inc. B7 FAMILY MEMBER zB7H6 AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS
US8216571B2 (en) 2007-10-22 2012-07-10 Schering Corporation Fully human anti-VEGF antibodies and methods of using
ES2632504T3 (es) 2007-11-20 2017-09-13 Ambrx, Inc. Polipéptidos de insulina modificados y sus usos
KR101603109B1 (ko) 2007-12-07 2016-03-25 지모제넥틱스, 인코포레이티드 Ｉｌ-31에 특이적인 인간화된 항체 분자
NZ602170A (en) 2008-02-08 2014-03-28 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
JP5458416B2 (ja) 2008-04-03 2014-04-02 バイオスティード ジーン エクスプレッション テック． カンパニー リミテッド 二本鎖ポリエチレングリコール化成長ホルモン、その製造方法およびその使用
PE20091931A1 (es) 2008-05-22 2009-12-31 Bristol Myers Squibb Co Proteinas de dominio de armazon basadas en fibronectina multivalentes
US8658766B2 (en) 2008-06-27 2014-02-25 Zymogenetics, Inc. Soluble hybrid Fcγ receptors and related methods
MX2011000859A (es) 2008-07-23 2011-02-24 Ambrx Inc Polipeptidos g-csf bovinos modificados y sus usos.
PL2342223T3 (pl) 2008-09-26 2017-09-29 Ambrx, Inc. Zmodyfikowane polipeptydy zwierzęcej erytropoetyny i ich zastosowania
NO2337846T3 (lt) 2008-09-26 2018-06-16
WO2010039801A2 (en) 2008-10-02 2010-04-08 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating hepatitis c virus infection
US8975247B2 (en) 2009-03-18 2015-03-10 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junion University Methods and compositions of treating a flaviviridae family viral infection
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
PT2437785E (pt) 2009-06-04 2015-04-20 Novartis Ag Método de identificação de sítios para conjugação de igg
US20110027229A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Medtronic, Inc. Continuous subcutaneous administration of interferon-alpha to hepatitis c infected patients
BR112012010110A2 (pt) 2009-10-30 2019-09-24 Boehringer Ingelheim Int regimes de dosagem para terapia combinada para hcv compreendendo bi201335, interferon alfa e ribavirina
NZ600361A (en) 2009-12-21 2014-06-27 Ambrx Inc Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
EP2516455A4 (en) 2009-12-21 2013-05-22 Ambrx Inc MODIFIED SWINE SOMATOTROPIN POLYPEPTIDES AND THEIR USES
US20120135912A1 (en) 2010-05-10 2012-05-31 Perseid Therapeutics Llc Polypeptide inhibitors of vla4
US8765737B1 (en) 2010-05-11 2014-07-01 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US9394294B2 (en) 2010-05-11 2016-07-19 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US8362007B1 (en) 2010-05-11 2013-01-29 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9562089B2 (en) 2010-05-26 2017-02-07 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins having improved stability
CN102711871A (zh) 2010-06-16 2012-10-03 麦德托尼克公司 用于稳定药物递送装置中的药物的阻尼系统
US8741891B1 (en) 2010-06-22 2014-06-03 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8637648B1 (en) 2010-06-22 2014-01-28 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US8802832B2 (en) 2010-06-22 2014-08-12 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US9586954B2 (en) 2010-06-22 2017-03-07 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
BR112012033022A2 (pt) 2010-06-24 2016-12-20 Genosciense Pharma Sas tratamento de vírus de hepatite c relacionado a doenças utilizando hidroxicloroquina ou uma combinação de hidroxicloroquina e um agente antiviral
JP6049615B2 (ja) 2010-07-23 2016-12-21 デマークス・インコーポレイテッドＤｅｍｅｒｘ，Ｉｎｃ． ノリボガイン組成物
SMT201900495T1 (it) 2010-08-17 2019-11-13 Ambrx Inc Polipeptidi di relaxina modificati e loro usi
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
KR20140035305A (ko) 2010-10-05 2014-03-21 노파르티스 아게 C형 간염 바이러스 감염의 새로운 치료법
EP2624826B1 (en) 2010-10-08 2018-07-18 Novartis AG Vitamin e formulations of sulfamide ns3 inhibitors
BR112013013166A2 (pt) 2010-11-30 2016-09-06 Novartis Ag tratamentos da infecção pelo vírus da hepatite c
EP2481740B1 (en) 2011-01-26 2015-11-04 DemeRx, Inc. Methods and compositions for preparing noribogaine from voacangine
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
CN105749246A (zh) 2011-03-31 2016-07-13 诺华股份有限公司 治疗丙肝病毒感染的阿拉泊韦
PL2694087T3 (pl) 2011-04-01 2015-06-30 Novartis Ag Leczenie zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B samego lub w połączeniu z zakażeniem wirusem zapalenia wątroby typu delta i towarzyszącymi chorobami wątroby
SG10201602184TA (en) 2011-04-13 2016-04-28 Novartis Ag Treatment of hepatitis c virus infection with alisporivir
US20140187488A1 (en) 2011-05-17 2014-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
US9422338B2 (en) 2011-05-19 2016-08-23 Epodose Llc Compounds that bind to the erythropoietin receptor
US9382305B2 (en) 2011-07-01 2016-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Relaxin fusion polypeptides and uses thereof
EP2734640A1 (en) 2011-07-20 2014-05-28 INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
EP2748328A4 (en) * 2011-08-25 2015-03-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-INTERFERON LAMBDA 1 CONJUGATES
US9617274B1 (en) 2011-08-26 2017-04-11 Demerx, Inc. Synthetic noribogaine
KR20140070565A (ko) 2011-09-27 2014-06-10 노파르티스 아게 C형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 알리스포리비르
JP2015504038A (ja) 2011-10-31 2015-02-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 低減した免疫原性を有するフィブロネクチン結合ドメイン
AU2012347785B2 (en) 2011-12-06 2017-03-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for treating viral diseases
EP2788003A4 (en) 2011-12-09 2015-05-27 Demerx Inc PHOSPHATESTER OF NORIBOGAIN
CA2858820C (en) 2012-01-25 2021-08-17 Demerx, Inc. Synthetic voacangine
US9150584B2 (en) 2012-01-25 2015-10-06 Demerx, Inc. Indole and benzofuran fused isoquinuclidene derivatives and processes for preparing them
US8454947B1 (en) 2012-03-01 2013-06-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-interferon lambda 1 conjugates
JP2015509980A (ja) 2012-03-14 2015-04-02 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｈｃｖ−ｈｉｖ同時感染患者集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
WO2013143581A1 (en) 2012-03-28 2013-10-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in specific patient subgenotype sub-population
WO2013149219A2 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Sorrento Therapeutics Inc. Fully human antibodies that bind to vegfr2
US9844582B2 (en) 2012-05-22 2017-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-PK IL-2 and therapeutic agents
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
AU2013267161A1 (en) 2012-05-31 2014-11-20 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind PD-L1
JP6498600B2 (ja) 2012-06-08 2019-04-10 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド 部位特異的な非天然アミノ酸残基を含む抗体、その調製方法、及びその使用方法
JP6429771B2 (ja) 2012-06-21 2018-11-28 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＳｏｒｒｅｎｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． ｃ−Ｍｅｔに結合する抗原結合タンパク質
WO2013192596A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 Sorrento Therapeutics Inc. Antigen binding proteins that bind ccr2
EP2863955B1 (en) 2012-06-26 2016-11-23 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
DK2890402T3 (da) 2012-08-31 2019-07-15 Sutro Biopharma Inc Modificerede aminosyrer omfattende en azidogruppe
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
US9045481B2 (en) 2012-12-20 2015-06-02 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US8940728B2 (en) 2012-12-20 2015-01-27 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
CA2896133A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
WO2014120891A2 (en) 2013-02-01 2014-08-07 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
US9676853B2 (en) 2013-05-31 2017-06-13 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind PD-1
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
US9388239B2 (en) 2014-05-01 2016-07-12 Consejo Nacional De Investigation Cientifica Anti-human VEGF antibodies with unusually strong binding affinity to human VEGF-A and cross reactivity to human VEGF-B
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
KR102686313B1 (ko) 2014-05-01 2024-07-17 아이거 바이오파마슈티컬스 인코포레이티드 델타 간염 바이러스 감염의 치료
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
WO2015195673A2 (en) 2014-06-18 2015-12-23 Demerx, Inc. Halogenated indole and benzofuran derivatives of isoquinuclidene and processes for preparing them
WO2016025647A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine
WO2016025642A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
EP3183000A4 (en) 2014-08-22 2018-04-25 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind cxcr3
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
BR112017008157A2 (pt) 2014-10-24 2017-12-19 Bristol Myers Squibb Co polipeptídeos de fgf-21 modificados e usos dos mesmos
CA2964390A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Pharmaessentia Corporation Dosage regimen for pegylated interferon
WO2016148179A1 (ja) * 2015-03-17 2016-09-22 国立大学法人信州大学 Ｉｆｎを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法
US10835496B2 (en) 2015-04-21 2020-11-17 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising lonafarnib and ritonavir
HK1255463A1 (zh) 2015-11-03 2019-08-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Hbv衣壳组装抑制剂和干扰素的组合疗法
EP3370723B1 (en) 2015-11-04 2020-12-16 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
KR102927822B1 (ko) 2016-01-29 2026-02-13 주식회사유한양행 Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US10603358B2 (en) 2017-01-10 2020-03-31 Nodus Therapeutics Combination tumor treatment with an integrin-binding-Fc fusion protein and immune stimulator
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
EP3570849B1 (en) 2017-01-18 2024-12-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
US10266578B2 (en) 2017-02-08 2019-04-23 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
WO2019020593A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR MODULATION OF MONOCYTOPOISIS
WO2020032951A1 (en) 2018-08-09 2020-02-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
US11485781B2 (en) 2017-08-17 2022-11-01 Massachusetts Institute Of Technology Multiple specificity binders of CXC chemokines
MX2021002575A (es) 2018-09-11 2021-06-08 Ambrx Inc Conjugados de polipeptidos de interleucina-2 y sus usos.
AU2019346335B2 (en) 2018-09-28 2024-07-25 Massachusetts Institute Of Technology Collagen-localized immunomodulatory molecules and methods thereof
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
WO2020154032A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
CN119455003A (zh) 2019-02-12 2025-02-18 Ambrx公司 包含抗体-tlr激动剂缀合物的组合物、方法和用途
AU2020312735A1 (en) 2019-07-18 2021-12-16 Enyo Pharma Method for decreasing adverse-effects of interferon
US20210285000A1 (en) 2020-03-05 2021-09-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
WO2021183832A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
EP3912627B1 (en) 2020-05-20 2022-09-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of coronavirus infections
WO2021263271A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treatment of hepatitis d virus infection
AU2021327396A1 (en) 2020-08-20 2023-03-23 Ambrx, Inc. Antibody-TLR agonist conjugates, methods and uses thereof
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
MX2023011480A (es) 2021-04-03 2023-12-06 Ambrx Inc Conjugados anticuerpo anti-her2-fármaco y usos de estos.
JP2026505416A (ja) 2023-02-09 2026-02-13 シェ、ヤンホイ ポリエチレングリコール修飾インターロイキン２、グルココルチコイドおよびヒアルロン酸によるアトピー性皮膚炎の治療
WO2025006676A2 (en) 2023-06-27 2025-01-02 Firecyte Therapeutics, Inc. Insulin-like growth factor binding protein like 1 (igfbpl1) compositions and methods of use thereof
WO2026043823A2 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of preparation and uses thereof

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
WO1985002572A1 (fr) 1983-12-14 1985-06-20 Fanuc Ltd Procede d'usinage de surfaces
US4766106A (en) 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4902502A (en) 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
WO1990003133A1 (en) 1988-09-27 1990-04-05 Sirkka Koistinen Improvement in table constructions
US4917888A (en) 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation

Family Cites Families (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2651657A (en) * 1949-05-21 1953-09-08 Standard Oil Dev Co Synthetic lubricating oil
SE337223B (lt) * 1967-05-23 1971-08-02 Pharmacia Ab
US3619371A (en) * 1967-07-03 1971-11-09 Nat Res Dev Production of a polymeric matrix having a biologically active substance bound thereto
SE343210B (lt) * 1967-12-20 1972-03-06 Pharmacia Ab
DK132327A (lt) * 1968-07-16
US3632828A (en) * 1968-12-16 1972-01-04 Dow Chemical Co Polyethylene glycol monomethyl ether carbonates
BE758425A (fr) * 1969-12-02 1971-04-16 Baxter Laboratories Inc Streptokinase liee chimiquement a une matrice en carbohydrate (
DE2247163A1 (de) * 1972-09-26 1974-03-28 Merck Patent Gmbh Traegermatrix zur fixierung biologisch wirksamer stoffe und verfahren zu ihrer herstellung
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4100271A (en) * 1976-02-26 1978-07-11 Cooper Laboratories, Inc. Clear, water-miscible, liquid pharmaceutical vehicles and compositions which gel at body temperature for drug delivery to mucous membranes
GB1578348A (en) * 1976-08-17 1980-11-05 Pharmacia Ab Products and a method for the therapeutic suppression of reaginic antibodies responsible for common allergic
US4094744A (en) * 1976-11-18 1978-06-13 W. R. Grace & Co. Water-dispersible protein/polyurethane reaction product
EP0000938B1 (en) * 1977-08-22 1984-10-17 National Research Development Corporation Macromolecular covalent conjugates, methods for preparing and pharmaceutical compositions containing them
JPS55110105A (en) * 1979-02-19 1980-08-25 Japan Atom Energy Res Inst Preparation of polymer composition containing physiologically active material
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4609546A (en) * 1982-06-24 1986-09-02 Japan Chemical Research Co., Ltd. Long-acting composition
WO1985003934A1 (fr) * 1984-03-06 1985-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Proteine modifiee chimiquement et son procede de preparation
US4486344A (en) * 1983-03-28 1984-12-04 Miles Laboratories, Inc. Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method
JPS6098988A (ja) * 1983-11-01 1985-06-01 Chemo Sero Therapeut Res Inst Ｌｐｆ−ｈａの精製法
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
EP0154316B1 (en) * 1984-03-06 1989-09-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4732863A (en) * 1984-12-31 1988-03-22 University Of New Mexico PEG-modified antibody with reduced affinity for cell surface Fc receptors
DE3676670D1 (de) * 1985-06-26 1991-02-07 Cetus Corp Solubilisierung von proteinen fuer pharmazeutische zusammensetzungen mittels polymerkonjugierung.
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US5100664A (en) * 1985-09-20 1992-03-31 Cetus Corporation Human IL-2 as a vaccine adjuvant
US5102872A (en) * 1985-09-20 1992-04-07 Cetus Corporation Controlled-release formulations of interleukin-2
US4818769A (en) * 1985-09-20 1989-04-04 Cetus Corporation Method of controlling stress-related disease in livestock by administration of human IL-2
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4851220A (en) * 1986-11-26 1989-07-25 Schering Corporation Stable oleaginous gel
US4871538A (en) * 1987-07-13 1989-10-03 Schering Corporation Insoluble copper-alpha interferon complex
AU611932B2 (en) * 1987-08-21 1991-06-27 Wellcome Foundation Limited, The Novel complex
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
JPH04502011A (ja) * 1988-11-23 1992-04-09 ジェネンテク，インコーポレイテッド ポリペプチド誘導体
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
ES2136595T5 (es) * 1989-04-19 2004-04-01 Enzon, Inc. Carbonatos activos de oxidos de polialquileno para la modificacion de polipeptidos.
EP0400472B1 (en) * 1989-05-27 1996-04-03 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Process for preparing polyethylene glycol derivatives and modified protein.
JP2978187B2 (ja) * 1989-11-02 1999-11-15 日本ケミカルリサーチ株式会社 修飾スーパーオキサイドディスムターゼの製造法
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
CA2067224C (en) * 1989-12-01 2001-02-13 Manfred Kurfuerst Hirudin/polyalkylene glycol conjugates
JPH04202293A (ja) * 1990-11-29 1992-07-23 Tonen Corp 作動油
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
WO1985002572A1 (fr) 1983-12-14 1985-06-20 Fanuc Ltd Procede d'usinage de surfaces
US4766106A (en) 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4917888A (en) 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
WO1990003133A1 (en) 1988-09-27 1990-04-05 Sirkka Koistinen Improvement in table constructions
US4902502A (en) 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate

Also Published As

Publication number Publication date
FI933740L (fi) 1994-02-27
YU56693A (sh) 1997-01-08
AU4478093A (en) 1994-03-03
LV10907A (lv) 1995-12-20
CN1088936A (zh) 1994-07-06
CZ169393A3 (en) 1994-04-13
HUT67013A (en) 1995-01-30
CN1183112C (zh) 2005-01-05
EE9400151A (et) 1996-02-15
EP0593868B1 (en) 1998-04-15
HRP931094A2 (en) 1997-06-30
LV10907B (en) 1996-04-20
JP2859105B2 (ja) 1999-02-17
CN1155618C (zh) 2004-06-30
BG98067A (en) 1994-12-02
UY23635A1 (es) 1994-03-01
DE69317979D1 (de) 1998-05-20
FI933740A0 (fi) 1993-08-25
CN1173500A (zh) 1998-02-18
MY131445A (en) 2007-08-30
CA2103829C (en) 2003-04-08
CN1039015C (zh) 1998-07-08
KR940003969A (ko) 1994-03-14
CN1211578A (zh) 1999-03-24
AU668742B2 (en) 1996-05-16
RO112730B1 (ro) 1997-12-30
NO933028D0 (no) 1993-08-25
PL300194A1 (en) 1994-04-05
US5382657A (en) 1995-01-17
JPH06192300A (ja) 1994-07-12
ES2116376T3 (es) 1998-07-16
DE69317979T2 (de) 1998-08-20
ZW11193A1 (en) 1994-03-23
DK0593868T3 (da) 1999-02-08
ZA936098B (en) 1994-03-01
SI9300423A (en) 1994-03-31
KR100295520B1 (ko) 2001-09-17
CA2103829A1 (en) 1994-02-27
NZ248452A (en) 1995-12-21
NZ264872A (en) 1996-01-26
MX9305146A (es) 1994-03-31
FI109765B (fi) 2002-10-15
IL106750A0 (en) 1993-12-08
OA09850A (fr) 1994-08-15
HU9302366D0 (en) 1993-11-29
LTIP888A (lt) 1994-08-25
IS4067A (is) 1994-02-27
MW7693A1 (en) 1994-06-08
SK89893A3 (en) 1994-04-06
ATE165102T1 (de) 1998-05-15
EP0593868A1 (en) 1994-04-27
BR9303469A (pt) 1994-03-22
PH30460A (en) 1997-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2859105B2 (ja) インターフエロン抱合体
EP1496076B1 (en) Hydrophilic polymer derivate with y type branch and preparation method of it medical composite comprising above compound
AU2008226823B2 (en) Oligomer-protease inhibitor conjugates
CN100548386C (zh) 基于脂肪族生物可降解连接体的可释放的聚合物结合体
PL186949B1 (pl) Fizjologicznie czynny koniugat PEG-IFN-alfa, sposób jego wytwarzania oraz zawierające go kompozycjefarmaceutyczne
US20040106747A1 (en) Polyalkylene glycol acid additives
US7829074B2 (en) Hydroxypatite-targeting poly(ethylene glycol) and related polymers
JP2005514505A (ja) マルチアーム樹枝状および機能的なｐｅｇの調製法および用途
CN109589415B (zh) 一种聚乙二醇-多肽和蛋白类药物的结合物
EP1279405A1 (en) Drugs retained in target tissue over long time
WO2010144869A2 (en) Protease inhibitors
US20060014666A1 (en) Targeted hydrophilic polymer, binders with interferon and medical composite comprising above binders
KR100480432B1 (ko) Ｇ-ｃｓｆ와 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
KR100480423B1 (ko) 에리트로포이에틴과 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
AU2014200906A1 (en) Oligomer-protease inhibitor conjugates

Legal Events

Date Code Title Description
MM9A Lapsed patents

Effective date: 19970825