LU84814A1 - Procede en vue d'evaluer des additifs alimentaires - Google Patents

Description

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ί :! 1 Procédé en vue dévaluer des additifs alimentaires,

La présente invention concerne un procédé j en vue d'évaluer des additifs dans une nourriture j·1 pour animaux, de même qu'une trousse d'essai utilisée 5 dans ce procédé.

Il est de pratique courante d'incorporer, dans des nourritures pour animaux, des additifs alimentaires contribuant à assurer les qualités nutri-* tives de l'aliment ou favorisant la croissance. Un 10 additif alimentaire de ce type est la monensine qui ' est un produit largement employé à la fois dans les aliments pour le bétail et la volaille, ce produit étant décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Améri-! que n° 3.501.568, D'autres additifs d'une nature t 15 semblable que l'on désigne d'une manière générique par l'appellation "ionophores", englobent, par exemple, la narasine et la salinomycine,

La Demanderesse a découvert une méthode commode permettant d'évaluer la teneur de ces addï— 20 tifs alimentaires dans le procédé de fabrication ou dans des conditions pratiques d'utilisation.

L'invention fournit un procédé en vue .. d'évaluer la quantité d'un ionophore dans une nour riture pour animaux, ce procédé comprenant les étapes y. 2 5 consistant à mélanger la nourriture avec un solvant alcoolique, ajouter, à la solution obtenue, un acide ayant une valeur pKa inférieure à 4 et an aldéhyde arylique chromogène, tous deux sous forme solide et à une température suffisante pour engendrer une réac-30 tion chromogène, puis comparer la couleur ainsi obtenue avec un étalon.

* On a trouvé que l'utilisation d'ingrédients i “ d'essai solides et, en particulier, d'un acide sous forme solide dans le procédé d'essai apportait des } ! 35 améliorations pratiques. Parmi les aldéhydes aryli- ! .i

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/ » 2 ques chromogènes, il y a, par exemple, la vanilline, 1’éthyl—vanilline, le 2,4-diméthoxybenzaldéhyde, le 3,4-diméthoxybenzaldéhyde, le 2,4,5-triinéthox3rbenzal-déhyde, le 4-diméthylaniinobenzaldéhyde, le cinnamaldé-5 hyde et d'autres aldéhydes arj-liques comportant des substituants donneurs d'électrons, la vanilline étant l'aldéhyde de loin préféré. Comme tel, l'aldéhyde ne doit pas nécessairement être un solide, pour autant qu’il soit utilisé sous forme solide, par exem-10 pie, lorsqu'il est absorbé sur un support solide.

Lorsqu'on utilise des ingrédients liquides dans des essais d'évaluation d’un ionophore, par exemple, des solutions de vanilline et d’un acide liquide, qui sont nécessaires pour catalyser la réac-15 tion de la vanilline avec 1’ionophore, on se heurte à des inconvénients considérables lorsqu'une évaluation rapide doit être effectuée dans des conditions pratiques et l'on a constaté que les résultats obtenus n’étaient pas fiables. De façon étonnante, le 20 procédé de la présente invention est non seulement plus commode, mais il offre également une plus grande fiabilité. Le procédé de l'invention peut également être adopté pour confirmer l'absence d'un ionophore dans une nourriture lorsque, par exemple, celle-ci " 25 est destinée à des animaux tels que des chevaux, les quels réagissent défavorablement aux ionophores.

Le procédé de l'invention est applicable ; à l'évaluation d'ionophores tels que, par exemple, la narasine, la salinomycine et, en particulier, la 30 monensine. Parmi les acides solides que l’on peut I utiliser, il y a, par exemple, l'acide 5-sulfosali- J » ! cylique, l'acide suifamique, l'acide 0-sulfonique | d'hydroxylamine et l'acide p-toluène-sulfonique, } l'acide 5—sulfosalicylique étant la matière préférée.

35 , Le solvant préféré qui est destiné à être mélangé I i

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’ / « 3 avec la nourriture, est le méthane1, mais on peut utiliser d’autres solvants alcooliques tels que, par exemple, l’éthanol, seuls ou sous forme d’un mélange alcoolique aqueux contenant l’alcool en une 5 quantité suffisante pour extraire efficacement le composant ionophore.

La couleur produite par l’interaction de 1’ionophore contenu dans la nourriture avec l’aldéhyde arylique et l’acide est évaluée par comparaison 10 avec un étalon qui peut être, par exemple, une solution colorée préparée en mélangeant une quantité connue d'un ionophore avec un aldéhyde et un acide ou en utilisant une échelle calibrée de teintes. Afin de produire une couleur, il est nécessaire de veiller 15 à ce que la réaction ait lieu à une température ap- propriée se situant, de préférence, dans l'intervalle de 50 a 70°C, en particulier, à une température de 60°C, cette température étant obtenue, par exemple, en plongeant un récipient contenant la solution dans 20 un bain-marie chauffé.

Dans la pratique, il est souvent préférable de décanter la solution formée à la suite du mélange de la nourriture avec le solvant alcoolique, puis de mélanger le produit surnageant avec un aldé-25 hyde et un acide sur un milieu support tel que, par exemple, un disque d'une matière filtrante ou, mieux encore, avec des comprimés d'un aldéhyde arylique et d'un acide. Etant donné que l'on peut se heurter à des difficultés pour formuler le composant acide et 30 l'aldéhyde arylique ensemble sous une forme stable, il est préférable d'utiliser deux comprimés séparés , comprenant chacun un des composants. L’acide et l'aldéhyde arylique solides peuvent être aisément préparés tous deux sous forme de comprimés. Dans le 35 î cas d'aldéhydes liquides, la matière peut être adsor-

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i « 4 • % t| bée sur des supports appropriés dans la formulation i de comprimés. En conséquence, un procédé préféré de I 1*invention est celui comprenant les étapes consis- 'i 1 tant à : I 5 (a) mélanger une nourriture contenant un | ionophox^e positif vis-à-vis de la vanilliixe avec un ! solvant alcoolique, (b) décanter une portion du produit surna- i * : * géant, .1 j 10 (c) ajouter, à cette portion du produit j sui'nageant, un ou plusieurs comprimés comprenant un j acide solide ayant une valeur pKa inférieure à 4; | ainsi qu'un ou plusieux^s comprimés comprenant de la vanilline, à une température suffisante pour engen-15 di^er une réaction chromogène, et """ (d) comparer la couleur ainsi formée avec

Iun étalon choisi suivant les quantités et les volumes spécifiques des matières d'essai utilisées.

» Il est entendu que la quantité de nourri- 1 20 ture, le volume de solvant et d'autres quantités I utilisées doivent être choisis minutieusement pour concorder avec les conditions requises de l'étalon.

| . Pour des conditions pratiques, la quantité de nour riture sera, de préférence, réglée à une valeur de 3* , 25 4 ou 5 g, valeur que l'on peut mesurer, par exemple, en remplissant un récipient tel qu'une bouteille ou : un tube jusqu'à un repère spécifié. Le volume spé- | cifié de solvant, par exemple, S à 12 ml, peut alors ! être ajouté et le mélange peut être chauffé pendant | 30 une période de 1 à 2 minutes. On décante ensuite \ , l ! une portion spécifiée du produit surnageant (par ; exemple, 1,5 à 2,5 ml) dans un deuxième récipient | dans lequel on ajoute les compi-imés de l'acide et de l'aldéhyde arylique (généralement, un de chacun de 35 ( ces deux composants). Les comprimés contiennent le ß Λ- / / / 4 5 • « ' catalyseur acide ou la vanilline en une quantité appropriée pour produire une réaction chromogène 1 quantifiable en concordance avec la solution colorée étalon ou l’échelle calibrée de teintes. De préfé-5 rence, on utilise un excès de l’acide et de la vanil line et, par exemple, par comprimé, la quantité d’aci-1 de peut être de 40 à 60 mg, tandis que la quantité de vanilline peut être de 40 mg à 60 mg. On peut préparer la solution colorée étalon en mélangeant un ; 10 comprimé comprenant, par exemple, une quantité spé— I cifiée d’ionophore (100, 200 ou 300 mcg) avec une i quantité appropriée du solvant, 1 Comme on l’a indiqué ci-dessus, l’essai ! . doit être effectué à une température suffisante pour 15 produire une réaction chromogène entre les composants. La Demanderesse a trouvé que la température optimale était de 60°C et qu’il était de loin plus commode d’appliquer la chaleur après avoir ajouté l’aldéhyde arylique et l’acide à la solution alcoolique. Toute-20 fois, en variante, on peut tout d’abord chauffer le solvant à 6o°C avant de le mélanger avec la nourriture ou on peut ensuite le chauffer immédiatement avant l’addition de l’acide et de l’aldéhyde.

Les comprimés utilisés peuvent être préparés 25 par des moyens classiques selon lesquels on mélange k.

l’acide ou l’aldéhyde solide avec une quantité appropriée d’une charge et d’un agent tensio-actif.

On donnera ci-après des formulations spécifiques | pour ces comprimés : , 30 Comprimé 1

Acide 5-sulfosalicylique 50 mg

Stéarate de magnésium 0,25 mg i “ * / Aerosil 0,25 mg

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« t 6 I 1 Comprimé 2 I r I | Vanilline 50 mg | Stéarate de magnésium 0,25 mg ! i | I Aerosil 0,25 mg iS L*invention englobe également une trousse d’essai conçue pour être utilisée dans le procédé de l’invention, cette trousse comprenant un récipient d'extraction, de préférence, gradué suivant la quantité de la nourriture à extraire, le volume de sol-10 vant à ajouter et le volume de produit surnageant à décanter, un récipient d’essai en vue d’observer la couleur du produit surnageant, un récipient contenant un solvant, des comprimés contenant des quantités étalons d’un acide solide et d’un aldéhyde arylique 15 chromogène, ainsi qu’une échelle de teintes ou un ou plusieurs comprimés contenant une quantité étalon d’un ionophore.

L’invention sera illustrée plus en détail par l’exemple suivant.

20 EXEMPLE

On a tout d’abord préparé une solution colorée étalon en mélangeant un comprimé contenant lOOmcg de monensine avec 2 ml de méthanol dans un tube d’essai, en ajoutant 50 mg d’acide 5-sulfo-25 salicylique et 50 mg de vanilline sous forme de comprimés séparés, ainsi qu’en maintenant le mélange à 60°C par immersion dans un bain-marie. Lorsque les composants se sont dissous, il s’est formé une coloration rouge.

30 Pour effectuer la comparaison avec cette

Solution étalon, on a déposé 5 g de nourriture pour bétail contenant une quantité connue, soit 50 parties par million, de monensine dans une bouteille d’extraction, on y a ajouté 10 ml de méthanol, on a agité 35^ le mélange et on a soumis le produit surnageant à un * « 7 « l essai de réaction chromogène. On a versé une certaine quantité (2 ml) du produit surnageant dans un tube d'essai, puis on a ajouté 50 mg d'acide 5-sulfo-salicylique et 50 mg de vanilline sous forme de com-5 primés séparés. On a plongé le tube d'essai dans un bain-marie à 60°C et on l'a maintenu à cette température jusqu'à ce que les deux comprimés se soient dissous.

Il s'est formé une coloration rouge et, lorsqu'on l'a * comparée avec la solution colorée étalon, on a observé 10 que la couleur était moins intense. D'après ces deux conclusions, on a pu déduire que : (a) l'ionophore était présent dans lçi nourriture et (b) l'ionophore I étant présent à raison de moins de 100 parties par j · Λ million,

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Claims (7)

1. Procédé en vue d'évaluer la quantité j d'un ionophore dans une nourriture, caractérisé en ! ce qu'il consiste à mélanger la nourriture avec un i| j 5 solvant alcoolique, ajouter, à la solution obtenue, j! un acide ayant une valeur pKa inférieure à 4 et un jj aldéhyde arylique chromogène, tous deux sous forme solide, à une température suffisante pour produire ’ - une réaction chromogène, puis comparer la couleur ‘ 10 ainsi obtenue avec un étalon.

2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'aldéhyde arylique chromogène ;j est la vanilline.

| ’ 3. Procédé suivant l'une quelconque des il5 revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'acide est l'acide 5-sulfosalicylique. i

4· Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes qui con- b j sistent à : 20 (a) mélanger une nourriture contenant un S ionophore positif vis—à—vis de la vanilline avec tin j solvant alcoolique, I . o>) décanter une portion du produit surna- ] géant, j 25 (c) ajouter, à cette portion du produit j surnageant, un ou plusieurs comprimés comprenant un j acide solide ayant une valeur pKa inférieure à 4 et un ou plusieurs comprimés comprenant de la vanilline, à une température suffisante pour provoquer une réac-30 tion chromogène, et (d) comparer la couleur ainsi formée avec un étalon en relation avec les quantités et les volumes spécifiques des matières d'essai utilisées.

5. Procédé suivant l’une quelconque des 35 * revendications 1 à 4 en vue d'évaluer la quantité de 1 / ! / 9 ί é ' - iiionensine dans une nourriture,

6. Trousse d'essai conçue pour être utilisée dans un procédé suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5? caractérisée en ce qu'elle 5 comprend un récipient d'extraction, un récipient d'essai en vue d'observer la couleur du produit surnageant, un récipient contenant un solvant, des comprimés de quantités étalons d'un acide solide et d'un aldéhyde arylique chromogène, ainsi qu'une échelle de 10 teintes ou un ou plusieurs comprimés d'une quantité étalon d'ionophore.

||7· Trousse d'essai suivant la revendication 6, caractérisée en ce que le récipient d'extraction est gradué suivant la quantité de nourriture à extrai— 15 re, le volume de solvant à ajouter et le volume de produit surnageant à décanter. ^ _.