PL208812B1 - Sposób wytwarzania 1,4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dionu - Google Patents

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 1,4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dionu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym. Eliminacja wodorów z pozycji C1 i C2 wykorzystywana jest w przemyśle farmaceutycznym, gdyż produkty 3-keto-1,4-dienowe mają silne właściwości antyalergiczne i przeciwreumatyczne.

Znane są mikrobiologiczne metody otrzymywania 1-dehydropochodnych 3-ketosteroidów z zastosowaniem np. bakterii: Cylindrocarpon radicicola, Pseudomonas testosteroni, Arthrobacter simplex, Nocardia sp. (Itagaki E., Wakabayashi T., Hatta T., 1990, Biochim. Biophys.Acta, 1038, s. 60-67).

Znana jest metoda otrzymywania 1-dehydrokorteksolonów na drodze biotransformacji z użyciem bakterii, np. Corynebacterium simplex ATCC 6946 (Herzog H. L., Payne CC. i wsp., 1962, Tetrahedron, 18(5), s. 581 -589).

Reakcje takie zachodzą rzadko przy zastosowaniu do biotransformacji kultur grzybowych.

Nie znaleziono w literaturze opisu sposobu 1-dehydrogenacji korteksolonu przez Trichoderma hamatum.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat, którym jest 4-pregnen-17,21-diol-3,20-dion, o wzorze 1, poddaje się biotransformacji kulturą szczepu z gatunku Trichoderma hamatum.

Korzystnie jest, gdy reakcję prowadzi się kulturą wodną, przy ciągłym mieszaniu reagentów i w temperaturze 283-313 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w ż ywych komórkach kultury Trichoderma hamatum, następuje wprowadzenie wiązania podwójnego (1-dehydrogenacja) do substratu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury drobnoustroju, znanym sposobem, przez ekstrakcję chloroformem.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 1,4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dionu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 70-89 %.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d. Do kolby o pojemnoś ci 2 dm³, w której znajduje się 300 cm³ sterylnej poż ywki zawierającej 9 g glukozy i 3 g aminobaku, wprowadza się szczep Trichoderma hamatum. Po 2 dniach wzrostu w temperaturze około 300 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 100 mg 4-pregnen-17,21-diol-3,20-dionu, o wzorze 1, rozpuszczonym w 3 cm³ acetonu. Reakcję prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 14 dni. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się około 90 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan-aceton, w stosunku 2:1.

Na tej drodze otrzymuje się 72 mg 1,4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dionu (wydajność 72 %).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi: ¹H NMR (CDCl3) δ: 0,72 (3H, s H-18); 1,22 (3H, s, H-19); 2,68 (1H, m, Wh = 28,8 Hz, H-16); 3,08 (1H, t, J = 4,7 Hz, H-16); 4,28 (1H, dd, J = 4,6 i 19,9 Hz, H-21); 4,56 (1H, dd, J = 4,6 i 19,8 Hz, H-21); 6,06 (1H, s, H-4); 6,22 (1H, dd, J = 1,5 i 10,1 Hz, H-2); 7,03 (1H, d, J = 10,1 Hz, H-1).

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 1,4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dionu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej, znamienny tym, że substrat, którym jest 4-pregnadien-17,21-diol-3,20-dion, o wzorze 1, poddaje się biotransformacji kulturą szczepu Trichoderma hamatum.
2. 2. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że reakcję prowadzi się wodną kulturą przy ciągłym mieszaniu.
3. 3. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w temperaturze 283 - 313 K.