PL237710B1 - Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu - Google Patents

Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu Download PDF

Info

Publication number
PL237710B1
PL237710B1 PL426025A PL42602518A PL237710B1 PL 237710 B1 PL237710 B1 PL 237710B1 PL 426025 A PL426025 A PL 426025A PL 42602518 A PL42602518 A PL 42602518A PL 237710 B1 PL237710 B1 PL 237710B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
chloro
hydroxy
oxidoandrostan
oxidoandrostane
organic solvent
Prior art date
Application number
PL426025A
Other languages
English (en)
Other versions
PL426025A1 (pl
Inventor
Ewa Kozłowska
Agata Matera
Edyta Kostrzewa-Susłow
Tomasz Janeczko
Original Assignee
Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wrocław University Of Environmental And Life Sciences filed Critical Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority to PL426025A priority Critical patent/PL237710B1/pl
Publication of PL426025A1 publication Critical patent/PL426025A1/pl
Publication of PL237710B1 publication Critical patent/PL237710B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/06Hydroxylating
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07JSTEROIDS
    • C07J71/00Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
    • C07J71/0005Oxygen-containing hetero ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu o wzorze 2. Zgodnie z rozwiązaniem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Fusarium acuminatum KCh S1, następuje hydroliza grupy acetylowej przy C-3. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu.
Metoda, według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym jako prekursor leków antykoncepcyjnych.
Wprowadzenie mostka 6,19-oksiranowego w strukturze związków steroidowych powoduje ugięcie szkieletu pomiędzy pierścieniami A i B. (G. Burton, M. Galigniana, S. de Lavallaz, A. L. BrachetCota, E. M. Sproviero, A. A. Ghini, C. P. Lantos and M. C. Damasco, Mol. Pharmacol., 1995, 47, 535543). Wykazano, że niektóre związki posiadające takie ugrupowanie mają interesujące aktywności biologiczne. Analog 21- hydroksyprogesteronu jest selektywnym antyglukokortykoidem pozbawionym mineralokortykoidowych i progestagenowych aktywności (G. P. Vicent, M. C. Monteserin, A. S. Veleiro, G. Burton, C. P. Lantos and M. D. Galigniana, Mol. Pharmacol., 1997, 52, 749-753), a analog 2 pregnanolonu jest silnym środkiem przeciwdrgawkowym (A. S. Veleiro, R. Rosenstein, M. L. Grilli, C. Jaliffa, F. Speroni and G. Burton, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2003, 13, 343-346; M. Joselevich, A.A. Ghini, G. Burton 6,19- Carbon-bridged steroids. Synthesis of 6,19-methanoprogesterone. Org. Biomol. Chem. 2003, 1,939-943). Istnieją również doniesienia dotyczące działania zapobiegającego migotaniu komór serca C-19 steroidów posiadających mostek 6,19-oksiranowy. Z opisu patentowego US3001989 znane są właściwości przeciwbólowe i są bakteriostatyczne wobec bakterii Gram-dodatnich. Związki steroidowe posiadające mostek 6,19-oksiranowy są prekursorami posiadających właściwości antykoncepcyjne 19-norsteroidów (B. Berkoz, E. Denot, A. Bowers. Steroids CCXXX. Conversion of 6β,19-oxides and lactones into 19-nor steroids. Steroids. 1, 1963, 251-270).
Szczep Fusarium acuminatum KCh S1 znany jest z opisu zgłoszenia wynalazku P.420192 ujawniony jest również w publikacji (Kozłowska E., Urbaniak M., Kancelista A., Dymarska M., KostrzewaSusłow E.; Stępień Ł., Janeczko T., (2017) Biotransformation of dehydroepiandrosterone (DHEA) by environmental strains of filamentous fungi. RSC Advances 2017, 7, 31493-31501).
3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu znany jest ze stanu techniki. W zgłoszeniu patentowym US3141016 opisano sposób otrzymywania tego związku na drodze syntezy chemicznej, analogiczny sposób otrzymywania opisano w zgłoszeniu patentowym US3205227. Zgłoszenie patentowe CN102443038 również opisuje sposób otrzymywania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu w procesie syntezy chemicznej. W literaturze nie ma doniesień dotyczących otrzymywania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu na drodze biotransformacji.
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Fusarium acuminatum KCh S1. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 3β-acetyloksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 12 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
W wyniku hydrolizy grupy acetylowej przy C-3 otrzymuje się 3β- hydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-on, a reakcję prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Fusarium acuminatum KCh S1.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L. Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 3 dni.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Fusarium acuminatum KCh S1, następuje hydroliza grupy acetylowej przy C-3. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu, z wydajnością izolowaną na poziomie 50% (konwersja według GC=90%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d
Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 5 g aminobaku i 15 g glukozy, wprowadza się szczep Fusarium acuminatum KCh S1. Po 72 godzinach jego wzrostu dodaje się 100 mg 3β-acetyloksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu
PL 237 710 B1 o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 DMSO. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 3 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan i aceton 2:1.
Na tej drodze otrzymuje się 50 mg 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu (konwersja według GC=90%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (600 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 1.06 (qd, 1 H, J = 13.0, 3.5 Hz, 11 -Κβ); 1.34 (s, 3H, 18-H); 1.43 (qd, 1H, J = 11.3, 5.8 Hz, 8-H); 1.45-1.49 (m, 2H, 1 -Ha, 7-Ha); 1.54 (tt, 1H, J = 13.2, 8.6 Hz, 15-Κβ); 1.60-1.68 (m, 1H, 1 -Κβ, 11-Ha, 14-H); 1.72 (dd, 1H, J = 12.6, 3.5 Hz, 12-Ha); 1.75 (ddd, 1H, J = 13.3, 5.6, 5.1 Hz, 2-Ha); 1.82-1.92 (m, 3H, 2-Κβ, 9-H, 15-Ha); 1.96 (ddd, 1H, J = 10.0, 5.0, 2.4 Hz, 7-Κβ); 2.01 (dt, 1 H, J = 12.3, 3.2 Hz, 12-Κβ); 2.03 (dd, 1 H, J = 13.6, 11.3 Hz, 4-Ha); 2.21 (ddd, 1H, J = 13.7, 4.3, 2.3 Hz, 4- Hβ); 2.57 (ddd, 1H, J = 19.0, 9.1,8.4 Hz, 16-Ha); 2.68 (ddd, 1H, J = 19.0, 8.6, 2.4 Hz, 16Hβ); 3.72 (d, 1 H, J = 8.7 Hz, one of 19-H); 3.92 (dd, 1 H, J = 8.7, 0.9 Hz, one of 19-H); 4.04 (d, 1H, J = 4.8 Hz, 6-Ha); 4.07 (tt, 1H, J = 11.1, ,4.6 Hz, 3-Ha). 13C NMR (151 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 23,40 (C-1); 30,97 (C-2); 66,34 (C-3); 43,72 (C-4); 75,61 (C-5); 81,76 (C-6); 30,70 (C-7); 35,73 (C-8); 45,64 (C-9); 45,71 (C-10); 23,34 (C-11); 39,32 (C-12); 83,08 (C-13); 44,84 (C-14); 19,55 (C-15); 28,63 (C-16); 171,39 (C-17); 20,47 (C-18); 68,30 (C-19).

Claims (4)

1. Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Fusarium acuminatum KCh S1, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 3β-acetyloksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najwyżej 12 godzin, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 3 dni.
PL426025A 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu PL237710B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426025A PL237710B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426025A PL237710B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL426025A1 PL426025A1 (pl) 2020-01-02
PL237710B1 true PL237710B1 (pl) 2021-05-17

Family

ID=69160763

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL426025A PL237710B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL237710B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL426025A1 (pl) 2020-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Choudhary et al. Biotransformation of (20S)-20-hydroxymethylpregna-1, 4-dien-3-one by four filamentous fungi
Shingate et al. Synthesis and antimicrobial activity of novel oxysterols from lanosterol
HUT70524A (en) Novel makrolides and their use
Zhu et al. New approaches to the structural modification of olean-type pentacylic triterpenes via microbial oxidation and glycosylation
PL237710B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
PL237711B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
PL239563B1 (pl) 3β-Hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan- 17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17aoksa- D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu
PL237709B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
PL237135B1 (pl) 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu
PL239564B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-Dhomo- 6,19-oksidoandrostan-17-onu
Hsu et al. Biotransformation of gallic acid by Beauveria sulfurescens ATCC 7159
PL237134B1 (pl) 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17- on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19- oksidoandrostan-17-onu
Baydoun et al. Microbial-catalysed derivatization of anti-cancer drug exemestane and cytotoxicity of resulting metabolites against human breast adenocarcinoma cell line (MCF-7) in vitro
CN104352505B (zh) 原人参三醇及其衍生物在制备治疗肝病药物中的应用
PL236834B1 (pl) 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19- oksidoandrostan-17-on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy- 5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu
Atif et al. Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum
Jastrzębska et al. On reactions of steroidal 23-oxo and 23, 24-epoxysapogenins with Lewis acids
PL228764B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu
PL235018B1 (pl) Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3,17-dionu
PL235020B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β,7α,17α-trihydroksyandrost-5-enu
Lu et al. Stereospecific synthesis and rearrangement of 22S-23-acetylsapogenins
PL235399B1 (pl) Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3, 17-dionu
PL235287B1 (pl) Sposób wytwarzania androst-1,4-dien-3,17-dionu
PL222711B1 (pl) Sposób wytwarzania 15α-hydroksy-androst-1,4-dien-3,17-dionu
PL235022B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu