PL237135B1 - 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu - Google Patents

3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu Download PDF

Info

Publication number
PL237135B1
PL237135B1 PL426028A PL42602818A PL237135B1 PL 237135 B1 PL237135 B1 PL 237135B1 PL 426028 A PL426028 A PL 426028A PL 42602818 A PL42602818 A PL 42602818A PL 237135 B1 PL237135 B1 PL 237135B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
chloro
oxidoandrostane
dihydroxy
organic solvent
strain
Prior art date
Application number
PL426028A
Other languages
English (en)
Other versions
PL426028A1 (pl
Inventor
Ewa Kozłowska
Agata Matera
Edyta Kostrzewa-Susłow
Tomasz Janeczko
Original Assignee
Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wrocław University Of Environmental And Life Sciences filed Critical Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority to PL426028A priority Critical patent/PL237135B1/pl
Publication of PL426028A1 publication Critical patent/PL426028A1/pl
Publication of PL237135B1 publication Critical patent/PL237135B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07JSTEROIDS
    • C07J71/00Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
    • C07J71/0005Oxygen-containing hetero ring
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/06Hydroxylating
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/12Acting on D ring
    • C12P33/16Acting at 17 position
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/20Preparation of steroids containing heterocyclic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Zgłoszenie dotyczy 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu o wzorze 2. Zgodnie z rozwiązaniem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Mucor hiemalis KCh W2, następuje hydroliza grupy acetylowej przy C-3 i stereselektywna redukcja grupy karbonylowej przy węglu C-17 w substracie. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostanu.
Metoda, według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym jako prekursor leków antykoncepcyjnych.
Wprowadzenie mostka 6,19-oksiranowego w strukturze związków steroidowych powoduje ugięcie szkieletu pomiędzy pierścieniami A i B. (G. Burton, M. Galigniana, S. de Lavallaz, A. L. BrachetCota, E. M Sproviero, A. A. Ghini, C. P. Lantos and M. C. Damasco, Mol. Pharmacol., 1995, 47, 535543). Wykazano, że niektóre związki posiadające takie ugrupowanie mają interesujące aktywności biologiczne. Analog 21-hydroksyprogesteronu jest selektywnym antyglukokortykoidem pozbawionym mineralokortykoidowych i progestagenowych aktywności (G. P. Vicent, M. C. Monteserin, A. S. Veleiro, G. Burton, C. P. Lantos and M. D. Galigniana, Mol. Pharmacol., 1997, 52, 749-753), a analog pregnanolonu jest silnym środkiem przeciwdrgawkowym (A. S. Veleiro, R. Rosenstein, M. L. Grilli, C. Jaliffa, F. Speroni and G. Burton, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2003, 13, 343-346; M. Joselevich, A. A. Ghini, G. Burton 6,19-Carbon-bridged steroids. Synthesis of 6,19-methanoprogesterone. Org. Biomol. Chem. 2003, 1,939-943). Istnieją również doniesienia dotyczące działania zapobiegającego migotaniu komór serca C-19 steroidów posiadających mostek 6,19-oksiranowy. Z opisu patentowego US 3,001,989 znane są właściwości przeciwbólowe i są bakteriostatyczne wobec bakterii Gram-dodatnich. Związki steroidowe posiadające mostek 6,19-oksiranowy są prekursorami posiadających właściwości antykoncepcyjne 19-norsteroidów (B. Berkoz, E. Denot, A. Bowers. Steroids CCXXX. Conversion of 63,19-oxides and lactones into 19-nor steroids. Steroids. 1, 1963, 251-270).
Szczep Mucor hiemalis KCh W2 znany jest z opisu zgłoszenia wynalazku P.420193 ujawniony jest również w publikacji (Kozłowska E., Urbaniak M., Kancelista A., Dymarska M., Kostrzewa-Susłow E.; Stępień Ł., Janeczko T., (2017) Biotransformation of dehydroepiandrosterone (DHEA) by environmental strains of filamentous fungi. RSC Advances 2017, 7, 31493-31501).
W literaturze nie ma doniesień dotyczących 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostanu.
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Mucor hiemalis KCh W2. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 33-acetyloksyy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 24 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
W wyniku hydrolizy grupy acetylowej przy C-3 i stereselektywnej redukcji grupy karbonylowej przy węglu C-17, otrzymuje się 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostan, a reakcję prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Mucor hiemalis KCh W2.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 3 dni.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Mucor hiemalis KCh W2, następuje hydroliza grupy acetylowej przy C-3 i stereselektywna redukcja grupy karbonylowej przy węglu C-17 w substracie. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform). Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostanu, z wydajnością izolowaną na poziomie 20% (konwersja według GC = 54%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 5 g aminobaku i 15 g glukozy, wprowadza się szczep Mucor hiemalis KCh W2. Po 72 godzinach jego wzrostu dodaje się 100 mg 33-acetyloksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 DMSO. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 3 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan i aceton 2:1.
PL 237 135 B1
Na tej drodze otrzymuje się 20 mg 33,17a-dihydroksy-5a-chloro-6,19-oksidoandrostanu (konwersja według GC = 54%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (600 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 0.70 (s, 3H, 18-H); 1.20 (dt, 1H, J = 12.9, 3.9 Hz, 11-Hp); 1.28-1.37 (m, 1H, 7-Ha); 1.44-1.67 (m, 6H, 1-Ha, 2-Ha, 11-Ha, 14-H, 15-Κβ, 16-Ha); 1.58-1.73 (m, 6H, 1-Κβ, 7-Hβ, 8-H, 9-H, 12-Ha, 15-Ha); 1.84-1.98 (m, 3H, 2-Hβ, 12-Hβ, 16-Hβ); 2.04 (dd, 1H, J = 13.6, 1.13 Hz, 4-Ha); 2.19 (ddd, 1H, J = 13.5, 4.3, 2.4 Hz, 4Ήβ); 3.75 (d, 1H, J = 5.9 Hz, 17-Hβ); 3.81 (d, 1H, J = 8.5 Hz, one of 19-H); 3.91 (d, 1H, J = 8.3 Hz, one of 19-H); 4.00 (d, 1H, J = 4.4 Hz, 6-Ha); 4.07 (tt, 1H, J = 1.14, 4.2 Hz, 3-Ha).
13C NMR (151 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 23,91 (C-1); 30,89 (C-2); 66,53 (C-3); 44,14 (C-4); 76,31 (C-5); 82,36 (C-6); 31,59 (C-7); 33,60 (C-8); 46,92 (C-9); 45,82 (C-10); 22,15 (C-11); 32,23 (C-12); 46,02 (C-13); 46,93 (C-14); 23,71 (C-15); 32,69 (C-16); 79,71 (C-17); 17,55 (C-18); 68,70 (C-19).

Claims (5)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan o wzorze 2.
  2. 2. Sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Mucor hiemalis KCh W2, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 3β-acetyloksyy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17-onu o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najwyżej 24 godziny, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
  3. 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
  4. 4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
  5. 5. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 3 dni.
PL426028A 2018-06-22 2018-06-22 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu PL237135B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426028A PL237135B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426028A PL237135B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL426028A1 PL426028A1 (pl) 2020-01-02
PL237135B1 true PL237135B1 (pl) 2021-03-22

Family

ID=69160774

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL426028A PL237135B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL237135B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL426028A1 (pl) 2020-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Choudhary et al. Biotransformation of (20S)-20-hydroxymethylpregna-1, 4-dien-3-one by four filamentous fungi
Zhu et al. New approaches to the structural modification of olean-type pentacylic triterpenes via microbial oxidation and glycosylation
Wang et al. Biocatalytic allylic hydroxylation of unsaturated triterpenes and steroids by Bacillus megaterium CGMCC 1.1741
PL237135B1 (pl) 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu
Hsu et al. Biotransformation of gallic acid by Beauveria sulfurescens ATCC 7159
PL237134B1 (pl) 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17- on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19- oksidoandrostan-17-onu
PL239563B1 (pl) 3β-Hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan- 17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17aoksa- D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu
PL237710B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
Baydoun et al. Microbial-catalysed derivatization of anti-cancer drug exemestane and cytotoxicity of resulting metabolites against human breast adenocarcinoma cell line (MCF-7) in vitro
PL237709B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
PL237711B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu
CN104352505B (zh) 原人参三醇及其衍生物在制备治疗肝病药物中的应用
PL239564B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-Dhomo- 6,19-oksidoandrostan-17-onu
Atif et al. Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum
PL228764B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu
PL236834B1 (pl) 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19- oksidoandrostan-17-on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy- 5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu
PL238288B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksy-16α, 17α-epoksyprogesteronu
Sultan et al. Microbial metabolism of an anti-HIV and anti-malarial natural product andrographolide
PL235020B1 (pl) Sposób wytwarzania 3β,7α,17α-trihydroksyandrost-5-enu
PL237127B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu
PL241536B1 (pl) Sposób wytwarzania 9α-hydroksyoksandrolonu
PL246071B1 (pl) Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-19-nortestosteronu
PL246161B1 (pl) Sposób wytwarzania 19-nortestololaktonu
PL237128B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu
PL235018B1 (pl) Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3,17-dionu