PT797437E

PT797437E - Imidas/amidas imunoterapeuticas e sua utilizacao para a reducao dos niveis de tnf alfa

Info

Publication number: PT797437E
Application number: PT95940063T
Authority: PT
Inventors: Mary Shire; George Muller; David I Stirling
Original assignee: Celgene Corp
Priority date: 1994-12-30
Filing date: 1995-11-20
Publication date: 2001-07-31
Also published as: CZ290372B6; DE69520750D1; FI972708A7; FI972708A0; ATE200621T1; CA2208672C; PL185101B1; HU226558B1; CZ203597A3; PL321071A1; AU696817B2; EP0797437B1; RU2164514C2; CA2208672A1; AU4166796A; DE69520750T2; SK86997A3; JPH10511678A; ES2155537T3; GR3036131T3

Description

t

DESCRIÇÃO "IMIDAS/AMIDAS IMUNOTERAPÊUTICAS E SUA UTILIZAÇÃO PARA A REDUÇÃO DOS NÍVEIS DE TNFa"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a um método para reduzir os níveis de TNFa num mamífero, e a compostos e composições úteis para esse fim. 0 TNFa, ou factor de necrose de tumor a, é uma citóquina que é essencialmente libertada pelos fagócitos mononucleares, em resposta a vários imuno-estimuladores. Quando administrado a animais ou humanos provoca inflamação, febre, efeitos cardiovasculares, hemorragia, coagulação e respostas de fase aguda, semelhantes às que se observam durante infecções agudas e estados de choque. A produção excessiva, ou desregulada, de TNFa tem sido implicada em várias condições de doença. Estas incluem endotoxémia e/ou síndrome de choque tóxico {Tracey et al-, Nature 330, 662-664 (1987) e Hinshaw et al., Circ. Shock 30, 279-292 (1990)}; caquéxia {Dezube et al., Lancet, 335(8690), 662 (1990)}; e síndrome de distúrbio respiratório adulto, em que se detectou uma concentração de TNFa num excesso de 12.000 pg/mililitro nos aspirados pulmonares de pacientes com ARDS {Millar et al., Lancet 2 (8665), 712-714 (1989)}. A infusão sistémica de TNFa recombinante também resultou em alterações 1 ç[ue se observam tipicamente em ARDS {Ferrai-Baliviera et al., Arch. Surg. 124 (12), 1400-1405 (1989)}. O TNFa parece estar envolvido em doenças de readsorção óssea, incluindo artrite, em que se determinou que, quando activados, os leucócitos irão produzir uma actividade de readsorção óssea e os dados sugerem que o TNFa contribui para esta actividade. {Bertolini et al., Nature, 319, 516-518 (1986) e Jonhson et al., Endocrinology 124(3), 1424-1427 (1989)}, Determinou-se que o TNFa estimula a readsorção óssea e inibe a formação óssea in vitro e in vivo, através do estimulo da formação de osteoclasto e activação combinada, com inibição da função dos osteoblastos. Embora o TNFa possa estar envolvido em muitas doenças de readsorção óssea, incluindo a artrite, o elo mais estreito com a doença é a associação entre a produção de TNFa pelo tumor, ou tecidos do hospedeiro e a hipercalcémia associada à malignidade {Calei. Tissue Int. (US) 46 (Suppl.), S3-10 (1990)}. Na reacção enxerto versus hospedeiro, têm-se associado níveis aumentados de TNFa no soro com complicações principais após transplantes alogénicos agudos de medula óssea {Holler et al., Blood, 75(4), 1011-1016 (1990)}. A malária cerebral é um síndrome neurológico hiperagudo, letal, associado com níveis elevados de TNFa no sangue e com as complicações mais graves que ocorrem nos pacientes com malária. Os níveis de TNFa no soro estão directamente correlacionados com a gravidade da doença e o prognóstico em pacientes com ataques agudos de malária {Grau et al., N. Engl. J. Med. 320 (24), 1586-1591 (1989)}.

I- 0 TNFa desempenha também um papel na área das doenças inflamatórias pulmonares crónicas. A deposição de particulas de silica conduz à silicose, uma doença de falha respiratória progressiva, provocada por uma reacção fibrótica. Os anticorpos contra TNFa bloquearam completamente a fibrose dos pulmões induzida por silica, em ratinhos {Pignet et al., Nature, 344:245-247 (1990)}. Foram demonstrados niveis elevados de produção de TNFa (no soro e em macrófagos isolados) em modelos animais de silica e fibrose induzida por asbestos {Bissonnette et al., Inflammation 13(3), 329-339 (1989)}. Também se verificou que os macrófagos alveolares de pacientes com sarcoidose pulmonar libertam espontaneamente quantidades massivas de TNFa, em comparação com os macrófagos de dadores normais (Baughman et al., J. Lab. Clin. Med. 115(1), 36-42 (1990)}.

O TNFa também está implicado na resposta inflamatória após a reperfusão, designada por dano de reperfusão, e é a causa principal do dano tecidular após a perda de fluxo, sanguíneo, {Vedder et al., PNAS, 87, 2643-2646 (1990)}. O TNFa também altera as propriedades das células endoteliais e tem várias actividades pró-coagulantes, tais como produzir iam aumento da actividade pró-coagulante do factor tecidular e suprimir a via da proteína C anticoagulante, bem como regular, diminuindo, a expressão da trombomodulina {Sherry et al., J. Cell Biol, 107, 1269-1277 (1988)}. O TFNa tem actividades pró-inflamatórias que, juntamente com a sua produção inicial (durante a fase inicial de um acontecimento inflamatório) fazem com que este seja um mediador possível do dano tecidular em várias desordens importantes, incluindo mas não se limitando a, enfarte de miocárdio, ataque apopléctico e choque circulatório. A

V

t expressão de moléculas de adesão induzida por TNFa, tais como a molécula de adesão intercelular (IGAM) ou a molécula de adesão de leucócito endotelial (ELAM) em células endoteliais, poderá ter uma importância especifica {Munro et al., Am. J. Path. 135(1),121-132 (1989)}.

Além disso, sabe-se agora que o TNFa é um activador potente da replicação de retrovirus, incluindo a activação de HIV-1. {Duh et al., Pro. Natl. Acad. Sei. 86, 5974-5978 (1989); Poli et al., Proc. Nat. Acad. Sei. 87, 782-785 (1990); Monto et al., Blood 79, 2670 (1990); Clouse et al., J. Immunol. 142, 431-438 (1989); Poli et al., AIDS Res. Hum. Retrovirus, 191-197 (1992)}. A SIDA resulta da infecção de linfócitos T pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) . Foram identificados pelo menos três tipos, ou estirpes de HIV, i.e., HIV-1, HIV-2 e HIV-3. Como consequência da infecção por HIV, a imunidade mediada por células T é danificada e os indivíduos infectados manifestam infecções oportunistas graves e/ou neoplasmas não usuais. A entrada do HIV no linfócito T requer a activação do linfócito T. Outros vírus, como o HIV-1, HIV-2 infectam os linfócitos T após a activação da célula T e esta a expressão e/ou replicação da proteína virai é mediada, ou mantida por esta activação da célula T. Após um linfócito T activado ter sido infectado com HIV, o linfócito T deve continuar a ser mantido num estado activado, para permitir a expressão do gene HIV e/ou a replicação de HIV. As citóquinas, em especial o TNFa, estão implicadas na expressão de proteínas e/ou replicação de virus de HIV mediada por células T activada3, desempenhando um papel na manutenção da activação do linfócito T. Assim, uma interferência com a actividade da citóquina, tal como prevenção ou inibição da produção de citóquinas, em particular de TNFa, nos indivíduos infectados com HIV, auxilia Δ

I

provocada pela na limitação da manutenção do linfócito T, infecção por HIV. Os monócitos, macrófagos e células relacionadas, como as células de Kupffer e da glia, também foram implicadas na manutenção da infecção por HIV. Estas células, tais como as células T, são alvos para a replicação virai e o nível de replicação virai depende do estado de activação das células. {Rosenberg et al., The Immunopathogenessis of HIV infection, Advances in Immuology, 57 (1989)}. Verificou-se que as citóquinas, como o TNFa, activam a replicação de HIV em monócitos e/ou macrófagos {Poli et al. Proc. Natl. Acad. Sei., 87, 782-784 (1990)}, pelo que a prevenção ou inibição da produção ou actividade de citóquinas auxilia a limitar a progressão de HIV, como acima referido para as células T. Estudos adicionais identificaram o TNFa como um factor comum na activação de HIV in vitro e forneceram um mecanismo de acção claro através de uma proteína regulatória nuclear, que se encontra no citoplasma das células (Osborn et al., PNAS, 86, 2336-2340). Esta evidência sugere que a redução da síntese de TNFa pode ter um efeito antiviral nas infecções por HIV, reduzindo a transcrição e, assim, a produção de vírus. A replicação virai do HIV latente da SIDA, em células T e linhas de macrófagos pode ser induzida pelo TNFa {Folks et al., PNAS 86, 2365-2368 (1989)}. Um mecanismo molecular possível para a indução da actividade do vírus é sugerido pela capacidade do TNFa activar uma proteína regulatória de genes (NF%B), que se encontra no citoplasma das células, a qual promove a replicação de HIV através da ligação a uma sequência de genes regulatória, virai (LTR) {Osborn et al., PNAS 86, 2336-2340 (1989)}. O TNF na SIDA e caquéxia associada ao cancro é sugerido pelo TNFa elevado no soro e níveis elevados de =1 5

produção espontânea de TNFa em monócitos de sangue periférico de pacientes {Wrigth et al., J. Immunol. 141(1), 99-104 (1988)}. {Eur J. Gastroen Hepat, 6(9), 821-829 (1994)}.{J. Exp. Med, 1121-1227 (1988)}. O TNFa tem sido implicado em vários papéis noutras infecções virais, como as do vírus citomegalia (CMVj, vírus de influenza, adenovírus e vírus da família do herpes, por razões semelhantes às anteriormente referidas.

Prevê-se portanto, que a prevenção ou inibição da produção ou acção do TNFa seja uma estratégia terapêutica potente para muitas doenças inflamatórias, infecciosas, imunológicas ou malignas. Estas incluem, mas não se restringem a choque séptico, sépsia, choque endotóxico, choque hemodinâmico e síndrome de sépsia, dano de reperfusão após isquémia, malária, infecção micobacteriana, meningite, psoríase, deficiência cardíaca congestiva, doença fibrótica, caquéxia, rejeição de enxertos, cancro, doença auto-imune, infecções oportunistas na SIDA, artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, outras condições artríticas, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla, lupus eritematoso sistémico, ENL na lepra, dano de radiação e dano alveolar hiperóxico. Os esforços direccionados para a supressão dos efeitos do TNFa têm envolvido desde a utilização de esteróides, como a dexametasona e prednisolona, à utilização de anticorpos tanto policlonais como monoclonais {Beutler et al., Science 234, 470-474 (1985); WO 92/11383. (Clinicai and Experimental Kheumatology 1993, 11 (Supl. 8), 5173-5175). (PNAS 1992, 89, 9784-88). (Annals of the Rheumatic Diseases 1990, 49, 480-486). a 1 ί "* L.—j ^^ y 0 factor nuclear χΒ (NFxB) é um activador transcricional pleiotrópico (Lenardo et al., Cell 1989, 58, 227-29). 0 ΝΙΓχΒ tem sido implicado como um activador transcricional numa variedade de doenças e estados inflamatórios e pensa-se que regula os niveis de citóquinas, incluindo mas não se limitando a TNFa, e pensa-se que é também um activador da transcrição de HIV (Dbaibo, et al. J. Biol. Chem. 1993, 17762-66; Duh et al. Proc. Natl. Acad. Sei. 1989, 86, 5974-78; Bachelerie et al.

Nature 1991, 350, 709-12; Boswas et al. J. Acquired Immune

Deficiency Syndrome 1993, 6, 778-786; Suzuki et al. Biochem.

And Biophys. Res. Comm. 1993, 193, 277-83; Suzuki et al.

Biochem. And Biophys. Res Comm, 1992, 189, 1709-15; Suzuki et al. Biochem Mol. Bio. Int. 1993, 31(4), 693-700; Shakhov et al., 1990, 171, 35-47; e Staal et al. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1990, 87, 9943-47) . Assim, a inibição da ligação de ΝΙΓχΒ pode regular a transcrição do gene(s) de citóquina e através da sua modulação e outros mecanismos, pode ser útil na inibição de vários estados de doença. Os compostos reivindicados nesta patente podem inibir a acção de NFxB no núcleo e são assim úteis no tratamento de uma variedade de doenças, incluindo, mas não se limitando à artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, outras condições artriticas, choque séptico, sépsia, choque endotóxico, doença de enxerto versus hospedeiro, esgotamento, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla, lúpus eritematoso sistémico, ENL na lepra, HIV, SIDA e infecções oportunistas na SIDA.

Os niveis de TNFa e NFxB são influenciados por um ciclo de retro-informação reciproca. Como referido acima, os compostos da presente invenção afectam os niveis tanto de TNFa como de NFxB. Não se sabe de momento, no entanto, o modo como os 7

t compostos da presente invenção regulam os níveis de TNFa, ΝΙΓχΒ ou ambos.

Descrição Pormenorizada A presente invenção baseia-se na constatação de que uma classe de imidas/amidas não polipeptídicas, que serão aqui descritas em maior pormenor, inibem a acção do TNFa. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula:

em que R1 é (i) alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, linear, ramificado, ou cíclico, substituído ou não substituído, (ii) fenilo ou fenilo substituído com um ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente do outro de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono, ou halo; R2 é -H, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono; R3 é i) etileno, ii) vinileno, iii) alquileno de 3 a 10 átomos de carbono ramificado, iv) alquenileno de 3 a 10 átomos de carbono ramificado, v) cicloalquileno de 4 a 9 átomos de carbono, não substituído ou substituído com um ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, \! carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ou halo, vi) cicloalquenileno de 4 a 9 átomos de carbono não substituído, ou substituído com 1 ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ou halo, ou vii) o-fenileno não substituído ou substituído com 1 ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono ou halo; R4 é -CX ou CH2-; X é O ou S; e n é 0, 1, 2, ou 3.

Uma sub-classe preferida de fórmula II refere-se a compostos em que R3 é o-fenileno; R1 é 3,4-dietoxifenilo R4 é -CO-.

Os compostos típicos da presente invenção incluem 3-ftalimido-3-(3',4'-dimetoxifenil)propan-l-ol; 2- ftalimido-2-(3',4'-dimetoxifenil)etanol; 3- ftalimido-3-(3',4'-dietoxifenil)propan-l-ol;

Q 3-ftalimido-3-(3', 4’-dimetoxifenil)-1-metoxipropano; 2- ftalimido-2-(3',4'-dimetoxifenil)-1-metoxietano; 3- ftalimido-3-(3’,4'-dietoxifenil)-1-metoxipropano; 3-ftalimido-3-(3',4'-dimetoxifenil)-1-etoxipropano; 3-ftalimido-3-(3'.4'-dimetoxifenil)-1-(3-piridilmetoxi)propano; 3-ftalimido-3-(3',4'-dietoxifenil)-1-(3-piridilmetoxil)propano; 3-ftalimido3-naftilpropan-l-ol; 3-ftalimido-3-(3',4'-dietilfenil)propan-l-ol; 3-ftalimido-3-(3',4'-dipropilfenil)-propan-l-ol; 3-ftalimido-3-(3',4'-dietilfenil)-1-metoxipropano; 3-ftalimido-3-(3', 4'-dietoxifenil)-1-etoxipropano; 3-ftalimido-3-ciclohexil-l-metoxipropano; 3-ftalimido-3-(3', 4'-dietilciclohexil)-1-metoxipropano; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dimetoxifenil)propan-l-ol; 2- (1'-oxoisoindolinil)-2-(3',4'-dimetoxifenil)etanol; 3- (1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dietoxifenil)propan-l-ol; 3- (1'-oxoisoindolinil-3-(3',4'-dimetoxifenil)-1-metoxipropano; 2- (1'-oxoisoindolinil)-2-(3', 4'-dimetoxifenil)-1-metoxietano; 3- (1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dietoxifenil)-1-metoxipropano; 3-(1'-oxoindolinil-3-(3',4'-dimetoxifenil)-1-etoxipropano; 3-(1'-oxoisoindolinil-3-(3',4'-dimetoxifenil)-1-(3-piridilmetoxi)propano; 3- (1'-oxoindolinil)-3-(3',4'-dietoxifenil)-1-(3-piridilmetoxil)propano; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3-naftilpropan-l-ol; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3- (3',4'-dietilfenil)propan-l-ol; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dipropilfenil)propan-l-ol; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dietilfenil)-1-metoxipropano; 3-(1'-oxoisoindolinil)-3-(3',4'-dietoxifenil)-1-etoxipropano. O termo alquilo, tal como aqui utilizado, refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto univalente, saturada, ramificada ou linear. Salvo indicação em contrário, estas cadeias podem conter de 1 a 18 átomos de carbono. Exemplos representativos destes grupos alquilo são metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, terc-pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradecilo, pentadecilo, hexadecilo, heptadecilo, octadecilo e semelhantes. Quando classificado por "inferior", o grupo alquilo terá de 1 a 6 átomos de carbono. Aplica-se o mesmo teor em carbono ao temo "alcano" original e aos temos derivados, como "alcoxi".

Os compostos podem ser utilizados sob a supervisão de profissionais qualificados, para inibir os efeitos indesejáveis do TNFa. Os compostos podem ser administrados oral, rectal ou parentericamente, sozinhos ou em combinação com outros agentes terapêuticos, incluindo antibióticos, esteróides, etc., a um mamífero em necessidade de tratamento. As formas de dosagem oral incluem comprimidos, cápsulas, drageias e formas farmacêuticas comprimidas, com formas semelhantes. Podem-se utilizar soluções salinas isotónicas contendo 20-100 miligramas/mililitro para administração parentérica, que inclui as vias de administração intramuscular, intratecal, intravenosa e intra-arterial. A administração rectal pode ser efectuada através da utilização de supositórios, formulados a partir de transportadores convencionais, como a manteiga de cacau.

Os regimes de dosagem deverão ser aferidos para a indicação particular, idade, peso- e condição física geral do paciente e a resposta desejada, mas normalmente as doses serão de cerca de 1 a cerca de 500 miligramas/dia, como necessário, em administrações diárias únicas ou múltiplas. Em geral, pode- se copiar um regime de tratamento inicial, para os compostos da presente invenção, a partir de outro, conhecido como sendo eficaz na interferência da actividade de TNFa para outros estados de doença mediados por TNFa. Os indivíduos tratados serão regularmente analisados quanto aos números de células T e razões T4/T8 e/ou medidas de virémia, tais como os níveis de transcriptase inversa, ou proteínas virais e/ou. quanto à progressão de problemas associados com doenças mediadas por citóquinas, tais como caquéxia ou degeneração muscular. Se não se observarem quaisquer efeitos após um regime de tratamento normal, então a quantidade administrada de agente que interfere na actividade de citóquinas é aumentada, e.g. em cinquenta por cento por semana.

Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados topicamente no tratamento ou profilaxia de estados de doença tópicos mediados ou exacerbados por uma produção excessiva de TNFa, respectivamente, tais como infecções virais, como as provocadas pelos vírus de herpes, ou conjuntivite virai, etc.

Os compostos também podem ser utilizados no tratamento veterinário de mamíferos, que não os humanos, em necessidade de prevenção ou inibição da produção de TNFa. As doenças mediadas por TNFa para tratamento terapêutico ou profilático em animais, incluem os estados de doença como os acima referidos, mas em particular as infecções virais. Exemplos são o vírus de imunodeficiência felina, vírus de anemia infecciosa equina, vírus de artrite caprina, vírus visna e vírus maedi, bem como outros lentivírus.

V

L·

Alguns destes compostos possuem centros de quiralidade e podem existir como isómeros ópticos. Ambos os racematos destes isómeros e os próprios isómeros individuais, bem como os diastereoisómeros quando existem dois centros quirais, estão dentro do âmbito da presente invenção. Os racematos podem ser utilizados como tal, ou podem ser separados nos seus isómeros individuais, mecanicamente, por exemplo por cromatografia utilizando um absorvente quiral. Alternativamente, os isómeros individuais podem ser preparados na forma quiral, ou podem ser separados quimicamente de uma mistura, formando sais com um ácido quiral, tal como os enantiómeros individuais de ácido 10-canforsulfónico, ácido canfórico, ácido alfa-bromocanfórico, ácido metoxiacético, ácido tartárico, ácido diacetiltartárico, ácido málico, ácido pirrolidona-5-carboxílico e semelhantes e libertando em seguida uma, ou ambas, as bases resolvidas, repetindo opcionalmente o processo, de modo a obter cada um, ou ambos, substancialmente isentos do outro; i.e. numa forma com uma pureza óptica > 95%. A prevenção ou inibição da produção de TNFa por estes compostos pode ser convenientemente testada utilizando anticorpos anti-TNFa. Por exemplo, tratam-se placas (Nunc Immunoplates Roskilde, DK) com 5 pg/mililitro de anticorpos anti-TNFa de coelho purificados, a 4°C, durante 12 a 14 horas. As placas são então bloqueadas durante 2 horas a 25°C com PBS/Tween 0,05% contendo 5 miligramas/mililitro de BSA. Após lavagem, aplicam-se 100 μΐ de desconhecidos, bem como de controlos e incubam-se as placas a 4°C, durante 12 a 14 horas. As placas são lavadas e testadas com um conjugado de peroxidase (de rábano) e anticorpos monoclonais anti-TNFa de ratinho e a cor é desenvolvida com o-fenilenodiamina em tampão fosfato- fi^ ^ ^ \f ' citrato contendo 0,012% de peróxido de hidrogénio e é lida a 492 ran.

Os compostos podem ser preparados utilizando métodos que são conhecidos em geral para a preparação de imidas. Os esquemas reaccionais gerais incluem a reacção da amina substituída com qualquer, de entre anidrido ftálico, N-carbetoxiftalimida ou dicarboxaldeído ftálico, como ilustrado pelas fórmulas: A)

Pb-C-Q4-f RNHj

Ph-C-NR O B)

Pfr-C-NCQJEtLc-J IIo RNH, O II Pb-C-NRHHo C)

o II Ph-C-H Lç-H O RNBj

O II Pb-C-NR

Os exemplos seguintes servem para tipificar melhor a natureza da presente invenção, mas não deverão ser entendidos como uma limitação do seu âmbito, o qual é definido apenas pelas reivindicações anexas. 1 Δ I ! ..

I ^ i____

EXEMPLO 1 1-ftalimido-l-(3' ,4 '-dimetoxifenil)propan-l~ol a) 3-Amino-3-(3',41 -dimetoxifenil) propan-1-ol. Adicionou-se lentamente uma solução de propionato de 3-amino-3-(31,4'-dimetoxifenilo) (4,12 gramas, 17,2 mmol) em metanol (50 mililitros), a borohidreto de sódio (6,51 gramas, 17,2 mmol), com agitação. Após ter cessado a efervescência inicial, a mistura foi levada ao refluxo durante 1 hora. 0 progresso da reacção foi monitorizado por TLC (20% de acetato de etilo/hexano, uv) e estava completo após 1 hora. Deixou-se a mistura reaccional arrefecer e adicionaram-se 20 mililitros de água. Removeu-se o metanol in vácuo, resultando na formação de uma goma que foi extraída com cloreto de metileno (3 x 20 mililitros). Os extractos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio e concentrados para se obter um óleo que foi refrigerado. Formou-se um sólido de tipo cera que foi seco in vacuo (60°C, < lmm) para se obter 3,30 g (86%) do produto na forma de um sólido branco. 1H RMN (CDCI3) δ 6,91-6,78 (m, 3H) , 4,15-4,04 (m, 1H) , 3,89 (2, 3H) , 3,88 (s, 3H) , 3,84-3,71(s, 2H), 3,91-2,45 (m largo, 1H) , 1,95-1,78 (m, 2H). b) 1-ftalimido-l-(3 *,4'-dimetoxifenil)propan-l-ol. Fundiu-se uma mistura de 3-amino-3-(3',4'-dimetoxifenil)propan-l-ol (1,11 gramas, 5 mmol) e anidrido ftálico (0,74 gramas, 4 mmol) e agitou-se durante 5 minutos. Após arrefecimento, formou-se um semi-sólido vítreo verde/amarelo, que foi agitado em éter para se obter 1,62 g (95%) de produto bruto na forma de um sólido branco. O produto bruto foi purificado por cromatografia "flash" (sílica gel, 40% de acetato de etilo/cloreto de metileno), para se obter 1,25 g (73%) de produto na forma de um 1 ^ & wΜ, u

sólido branco. RMN (CDCI3) δ 7, 85-7, 63 (m, 4H) , 7,18-7,07 (m, 2H) , 6, 86-6,76 (m, 1H) , 5, 62-5,49 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,85 (s, 3H), 3,79-3, 63 (m, 2H), 2,89-2,71 (m, 1H) , 2,64-2,47 (m, 1H), 1, 87-1,73 (br m, 1H), 13C RMN (CDC13) δ 168,5, 148, 8, 133,9, 131,8, 131,7, 123,2, 120,7, 111,6, 110,8, 59,8, 55,0, 55,8, 51,4, 33,9. Anal.Cale. para C19H19NO5. Teórico: C 66,85; H, 5,61; N, 4,10. Encontrado: C, 66,70,; H, 5,60; N, 4,06. HPLC 100% EXEMPLO 2 50

Podem-se preparar comprimidos, contendo cada um miligramas de ingrediente activo, da seguinte maneira:

Constituintes (para 1000 comprimidos) 50,0 g 50,7 g 7,5 g 5.0 g 5.0 g 1,8 g q.b. ingrediente activo lactose amido de trigo polietilenoglicol 6000 talco estearato de magnésio água desmineralizada

Os ingredientes sólidos são primeiro forçados através de um crivo com uma malha de 0,6 mm de abertura. 0 ingrediente activo, a lactose, o talco, o estearato de magnésio e metade do amido são então misturados. A outra metade do amido é suspendida em 40 mililitros de água e esta suspensão é adicionada a uma solução fervente do polietilenoglicol, em 100 mililitros de água. A pasta resultante é adicionada às substâncias pulverulentas e a mistura é granulada, se 1

necessário com a adição de água. O granulado é seco durante a noite a 35°C, forçado através de um crivo com uma malha de 1,2 mm de abertura e comprimido para formar comprimidos de aproximadamente 6 mm de diâmetro, que são côncavos de ambos os lados. EXEMPLO 3

Podem-se preparar comprimidos contendo cada um 100 miligramas de ingrediente activo, da seguinte maneira:

Constituintes (para 1000 comprimidos) 100.0 g 100.0 g 47,0 g 3,0 g ingrediente activo lactose amido de trigo estearato de magnésio

Todos os ingredientes sólidos são primeiro forçados através de um crivo com uma malha de 0,6 mm de abertura. O ingrediente activo, a lactose, o estearato de magnésio e metade do amido são então misturados. A outra metade do amido é suspendida em 40 mililitros de água e esta suspensão é adicionada a 100 mililitros de água a ferver. A pasta resultante é adicionada às substâncias pulverulentas e a mistura é granulada, se necessário com a adição de água. O granulado é seco durante a noite a 35°C, forçado através de um crivo com uma malha de 1,2 mm de abertura e comprimido para formar comprimidos de aproximadamente 6 mm de diâmetro, que são côncavos de ambos os lados. 1 i EXEMPLO 4

Podem-se preparar comprimidos para mastigar, contendo cada um 75 miligramas de ingrediente activo, do seguinte modo:

Composição (para 1000 comprimidos) ingrediente activo 75,0 g manitol 230,0 g lactose 150,0 g talco 21,0 g glicina 12,5 g ácido esteárico 10,0 g sacarina 1,5 g solução de gelatina a 5% q.b.

Todos os ingredientes sólidos são primeiro forçados através de um crivo com uma malha de 0,25 mm de abertura. O manitol e a lactose são misturados, granulados com a adição de solução de gelatina, forçados através de um crivo com uma malha de 2 mm, secos a 50°C e forçados mais uma vez através de um crivo com uma malha de 1,7 mm de abertura. 0 ingrediente activo, a glicina e a sacarina são cuidadosamente misturados, o manitol, o granulado de lactose, o ácido esteárico e o talco são adicionados e o todo é misturado e comprimido para formar comprimidos de aproximadamente 10 mm de diâmetro, que são côncavos de ambos os lados e têm uma ranhura para partir, no lado superior. u

EXEMPLO 5

Podem-se preparar comprimidos, contendo cada um 10 miligramas de ingrediente activo, da seguinte maneira:

Composição (para 1000 comprimidos) ingrediente activo 10,0 g lactose 328,5 g amido de milho 17,5 g polietilenoglicol 6000 5,0 g talco 25,0 g estearato de magnésio 4,0 g água desmineralizada q.b.

Os ingredientes sólidos são primeiro forçados através de um crivo com uma malha de 0,6 mm de abertura. Em seguida, o ingrediente activo, a lactose, talco, estearato de magnésio e metade do amido são intimamente misturados. A outra metade do amido é suspendida em 65 mililitros de água e esta suspensão é adicionada a uma solução fervente do polietilenoglicol, em 260 mililitros de água. A pasta resultante é adicionada às substâncias pulverulentas e o todo é misturado e granulado, se necessário com adição de água. O granulado é seco durante a noite a 35°C, forçado através de um crivo com uma malha de 1,2 mm de abertura e comprimido para formar comprimidos de aproximadamente 10 mm de diâmetro, que são côncavos em ambos os lados e têm um entalhe para partir, no lado superior.

EXEMPLO 6

Podem-se preparar cápsulas de gelatina, cheias a seco, contendo cada uma 100 miligramas de ingrediente activo, como se segue:

Composição (para 1000 cápsulas) 100,0 g 30, 0 g 2, 0 g 8,0 g ingrediente activo celulose microcristalina laurilsulfato de sódio estearato de magnésio O laurilsulfato de sódio é crivado no ingrediente activo através de um crivo com uma malha de 0,2 mm de abertura e os dois componentes são intimamente misturados durante 10 minutos. A celulose microcristalina é adicionada em seguida através de um crivo com uma malha de 0,9 mm de abertura e o todo é mais uma vez intimamente misturado, durante 10 minutos. Finalmente, adiciona-se o estearato de magnésio através de um crivo de 0,8 mm de abertura e, após mistura por mais 3 minutos, a mistura é introduzida em porções de 140 miligramas cada em cápsulas de gelatina de enchimento seco de tamanho 0 (alongadas). EXEMPLO 7

Pode-se preparar uma solução para injecção ou infusão a 0,2%, por exemplo, do seguinte modo: ingrediente activo cloreto de sódio tampão fosfato pH 7,4 água desmineralizada 5,0 g 22,5 g 300,0 g para 2500,0 mililitros ?fi O ingrediente activo é dissolvido em 1000 mililitros de água e filtrado através de um microfiltro. Adiciona-se a solução tampão e perfaz-se o todo para 2500 mililitros com água. Para preparar formas de dosagem unitária, introduzem-se porções de 1,0 ou 2,5 mililitros cada, em ampolas de vidro (contendo cada uma, respectivamente, 2,0 ou 5,0 miligramas de ingrediente activo).

Lisboa, 19 de Abril de 2001.

O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

91

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula Rj-C-N-ÇH-ÍCH^O-Rj LR,-I Ra em que R1 é (i) alquilo de 1 a 12 átomos de carbono linear, ramificado ou ciclico, não substituído; (ii) alquilo de 1 a 12 átomos de carbono linear, ramificado ou cíclico, substituído; (iii) fenilo; ou (iv) fenilo substituído com um ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente do outro, de entre o grupo constituído por nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono, ou halo; R2 é -H ou alquilo de 1 a 8 átomos de carbono; R3 é i) etileno, ii) vinileno, iii) alquileno de 3 a 10 átomos de carbono, ramificado, iv) alquenileno de 3 a 10 átomos de carbono ramificado, v) cicloalquileno de 4 a 9 átomos de carbono não substituído ou substituído com 1 ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acctilo, carbamoilo, 1 t Γ acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ou halo, vi) cicloalquenileno de 4 a 9 átomos de carbono não substituído ou substituído com 1 ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ou halo, ou vii) o-fenileno não substituído ou substituído com 1 ou mais substituintes, sendo cada um seleccionado independentemente de entre nitro, ciano, trifluorometilo, carbetoxi, carbometoxi, carbopropoxi, acetilo, carbamoilo, acetoxi, carboxi, hidroxi, amino, amino substituído, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono substituído, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ou halo; R1 é -CX ou -CH2-; X é 0 ou S; e n é 0, 1, 2, ou 3
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é -C0- e R1 é 3, 4-dietoxifenilo.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é 3, 4-dimetoxifenilo. 2 1 Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é -CO- e R1 é fenilo substituído.
5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, para utilização como medicamento.
6. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, para a produção de um medicamento para o tratamento de condições associadas com niveis elevados de TNFa, num mamifero.
7. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, para a produção de um medicamento como um inibidor, em condições associadas com a replicação de retrovírus activada por TNFa, num mamifero.
8. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4.
9. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, eficaz, numa dosagem única ou múltipla, em inibir o TNFa. Lisboa, 19 de Abril de 2001. O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

3