RS62332B1 - Heterodimerna antitela koja vezuju cd3 i cd20 - Google Patents

Heterodimerna antitela koja vezuju cd3 i cd20

Info

Publication number
RS62332B1
RS62332B1 RS20211005A RSP20211005A RS62332B1 RS 62332 B1 RS62332 B1 RS 62332B1 RS 20211005 A RS20211005 A RS 20211005A RS P20211005 A RSP20211005 A RS P20211005A RS 62332 B1 RS62332 B1 RS 62332B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
domain
scfv
antibody
variants
binding
Prior art date
Application number
RS20211005A
Other languages
English (en)
Inventor
Gregory Moore
John Desjarlais
Matthew Bernett
Seung Chu
Rumana Rashid
Umesh Muchhal
Sung-Hyung Lee
Original Assignee
Xencor Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54834964&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS62332(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Xencor Inc filed Critical Xencor Inc
Publication of RS62332B1 publication Critical patent/RS62332B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/35—Valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/522—CH1 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/528—CH4 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] Terapeutici na bazi antitela uspešno su korišć eni za lečenje različitih bolesti, uključuju ć i rak i autoimune/inflamatorne poremeć aje. Ipak, poboljšanja ove klase lekova je i dalje potrebna, posebno s obzirom na poveć anje njihove kliničke efikasnosti. Jedan način koji se istražuje je inženjering dodatnih i novih mesta vezivanja antigena u lekove zasnovane na antitelima tako da jedan molekul imunoglobulina koengira dva različita antigena. Takvi strani ili alternativni formati antitela koji angažuju dva različita antigena često se nazivaju bispecifičnim. Pošto značajna raznolikost varijabilnog regiona antitela (Fv) omoguć ava proizvodnju Fv koji prepoznaje gotovo svaki molekul, tipičan pristup bispecifičnoj generaciji je uvođenje novih varijabilnih regiona u antitelo.
[0002] Postoji niz alternativnih formata antitela istraženih za bispecifično ciljanje (Chames & Baty, 2009, mAbs 1[6]:1-9; Holliger & Hudson, 2005, Nature Biotechnology 23[9]:1126-1136; Kontermann, mAbs 4(2):182 (2012) .
[0003] U početku, bispecifična antitela su napravljena spajanjem dve ć elijske linije od kojih je svaka proizvodila jedno monoklonsko antitelo (Milstein et al., 1983, Nature 305: 537-540). Iako su rezultujuć i hibridni hibridomi ili kvadromi zaista proizveli bispecifi čna antitela, oni su bili samo mala populacija, pa je bilo potrebno opsežno prečišć avanje da bi se izolovalo željeno antitelo. Inženjersko rešenje za ovo bilo je korišć enje fragmenata antitela za pravljenje bispecifičnih materija. Pošto takvim fragmentima nedostaje složena kvartarna struktura antitela pune dužine, promenljivi laki i teški lanci mogu se povezati u pojedinačne genetske konstrukte. Generisani su fragmenti antitela različitih oblika, uključujuć i diatela, jednolančana diatela, tandem scFv i Fab2 bispecifične (Chames & Baty, 2009, mAbs 1[6]:1-9; Holliger & Hudson, 2005, Nature Biotechnology 23[9]:1126-1136).
[0004] Iako se ovi formati mogu izraziti u visokim nivoima u bakterijama i mogu imati povoljne prednosti prodora zbog svoje male veličine, oni se brzo brišu in vivo i mogu predstavljati proizvodne prepreke vezane za njihovu proizvodnju i stabilnost. Glavni uzrok ovih nedostataka je to što fragmentima antitela tipično nedostaje konstantan region antitela sa povezanim funkcionalnim svojstvima, uključujuć i ve ć u veličinu, visoku stabilnost i vezivanje za različite Fc receptore i ligande koji održavaju dug period poluraspada u serumu (tj. neonatalni Fc receptor FcRn) ili slu že kao mesta vezivanja za prečišć avanje (tj. protein A i protein G).
[0005] Noviji rad je pokušao da se pozabavi nedostacima bispecifiksa zasnovanih na fragmentima inženjeringom dvostrukog vezivanja u formate slične antitelima u punoj dužini (Wu et al., 2007, Nature Biotechnology 25[11]:1290-1297; US2009-0311253; Michaelson et al., 2009, mAbs 1[2]:128-141; WO2008/032782; Zuo et al., 2000, Protein Engineering 13[5]:361-367; US2002-0103345; Shen et al., 2006, J Biol Chem 281[16]:10706-10714; Lu et al., 2005, J Biol Chem 280[20]:19665-19672; WO2006/020258). Ovi formati prevazilaze neke prepreke bispecifičnih fragmenata antitela, uglavnom zato što sadrže Fc region. Jedan značajan nedostatak ovih formata je to što grade nova mesta za vezivanje antigena na vrhu homodimernih konstantnih lanaca, vezivanje za novi antigen je uvek dvovalentno.
[0006] Za mnoge antigene koji su privlačni kao ko-mete u terapijskom bispecifičnom formatu, željeno vezivanje je monovalentno, a ne dvovalentno. Za mnoge imunolo ške receptore, ć elijska aktivacija se postiže umrežavanjem monovalentne vezivne interakcije. Mehanizam umrežavanja je tipično posredovan imunskim kompleksima antitela/antigena, ili preko efektorske ć elije do ciljane ć elijske interakcije. Na primer, Fc gama receptori niskog afiniteta (FciRs), kao što su FciRIIa, FciRIIb i FciRIIIa, vezuju se monovalentno za Fc region antitela. Monovalentno vezivanje ne aktivira ć elije koje eksprimiraju ove FciR; međutim, nakon imunološke kompleksacije ili kontakta ć elija- ć elija, receptori su umreženi i grupisani na ć elijskoj površini, što dovodi do aktivacije. Za receptore odgovorne za posredovanje u ć elijskom ubijanju, na primer FciRIIIa na ć elijama prirodnih ubica (NK), unakrsno povezivanje receptora i ć elijska aktivacija se javljaju kada efektorska ć elija angažuje ciljnu ć eliju u izrazito željenom formatu (Bowles & Weiner, 2005, J Immunol Methods 304:88-99).
[0007] Slično, na B ć elijama inhibitorni receptor FciRIIb snižava aktivaciju B ć elija samo kada se uključi u imunološki kompleks sa Bcell receptorom na ć elijskoj površini (BCR), mehanizmom koji je posredovan imunološkom kompleksacijom rastvorljivih IgG sa istim antigenom koji priznaje BCR (Heyman 2003, Immunol Lett 88[2]:157-161; Smith and Clatworthy, 2010, Nature Reviews Immunology 10:328-343).
[0008] Kao drugi primer, CD3 aktivacija T-ć elija javlja se samo kada njegov povezani receptor T-ć elija (TCR) angažuje MHC optere ć en antigenom na predstavljanju antigena ć elije u ć eliji do ć elijske sinapse (Kuhns et al., 2006, Imunitet 24: 133-139). Zaista nespecifično dvovalentno umrežavanje CD3 pomoć u antitela na CD3 izaziva citokinsku oluju i toksičnost (Perruche et al., 2009, J Immunol 183[2]:953-61; Chatenoud & Bluestone, 2007, Nature Reviews Immunology 7:622-632). Tako je za praktičnu kliničku upotrebu poželjan način zajedničkog angažovanja CD3 za preusmereno ubijanje ciljnih ć elija monovalentno vezivanje koje rezultira aktivacijom samo nakon angažovanja sa zajednički angažovanom metom.
[0009] CD38, takođe poznat kao ciklična ADP riboza hidrolaza, je transmembranski glikoprotein tipa II sa dugim C-terminalnim ekstrać elijskim domenom i kratkim N-terminalnim citoplazmatskim domenom. Među hematopoetskim ć elijama, niz funkcionalnih efekata pripisan je signalizaciji posredovanoj CD38, uključujuć i proliferaciju limfocita, oslobađanje citokina, regulaciju razvoja i preživljavanja B i mijeloidnih ć elija i indukciju sazrevanja dendriti čnih ć elija. CD38 nije regulisan u mnogim hematopoetičnim malignitetima i u ć elijskim linijama izvedenim iz različitih hematopoetskih malignih bolesti, uključujuć i Non-Hodgkinov limfom (NHL), Burkittov limfom (BL), multipli mijelom (MM), B hronična limfocitna leukemija (B-CLL), B i T akutna limfocitna leukemija (ALL), limfoma T ć elija (TCL), akutna mijeloična leukemija (AML), leukemija vlašastih ć elija (HCL), Hodgkinov limfom (HL) i hronična mijeloična leukemija (CML). S druge strane, najprimitivnije pluripotentne matične ć elije hematopoetskog sistema su CD38-. Uprkos nedavnom napretku u otkrivanju i razvoju lekova protiv raka, mnogi oblici raka koji uključuju tumore koji eksprimiraju CD38 i dalje imaju lošu prognozu. Dakle, postoji potreba za poboljšanim metodama za lečenje takvih oblika raka.
[0010] B-ć elijski antigen CD19 (CD19, takođe poznat kao Bcell površinski antigen B4, Leu-12) je površinski marker humanih pan-B-ć elija koji se eksprimira od ranih faza razvoja pre-B ć elija putem terminalne diferencijacije u plazmu ć elije. CD 19 promovi še proliferaciju i opstanak zrelih B ć elija. U kompleksu se povezuje sa CD21 na ć elijskoj površini. Takođe se povezuje sa CD81 i Leu-13 i potencira signalizaciju receptora B ć elija (BCR). Zajedno sa BCR, CD19 modulira unutra šnje i signalne pragove izazvane receptorima antigena koji su kritični za klonsko širenje B ć elija i humoralni imunitet. U saradnji sa CD21 povezuje adaptivni i urođeni imunološki sistem. Nakon aktivacije, citoplazmatski rep CD19 postaje fosforilisan što dovodi do vezivanja kinazama iz porodice Src i regrutovanja PI-3 kinaze. Poželjan je cilj imunoterapije za rak limfoidnog porekla, jer je takođe izražen na velikoj već ini NHL ć elija, kao i kod nekih leukemija.
[0011] Brojna antitela ili konjugati antitela koji ciljaju na CD19 su procenjeni u pretklini čkim studijama ili u kliničkim ispitivanjima za lečenje karcinoma. Ova anti-CD19 antitela ili konjugati antitela uključuju, ali nisu ograničeni na MT-103 (jednolančano bispecifično CD19/CD3 antitelo; Hoffman et al, 2005 Int J Cancer 115:98-104; Schlereth et al, 2006 Cancer Immunol Immunother 55:503-514), CD19/CD16 dijatelo (Schlenzka et al, 2004 Anti-cancer Drugs 15:915-919; Kipriyanov et al, 2002 J Immunol 169:137-144), BU12-saporin (Flavell et al, 1995 Br J Cancer 72:1373-1379) i antiCD19-idarubicin (Rowland et al, 1993 Cancer Immunol Immunother 55:503-514).
[0012] CD123, takođe poznat kao receptor interleukin-3 alfa (IL-3Ra), se eksprimira na dendritičkim ć elijama, monocitima, eozinofilima i bazofilima. CD123 se takođe konstitutivno eksprimira izvršenim hematopoetskim matičnim/progenitornim ć elijama, ve ć inom mijeloidne loze (CD13+, CD14+, CD33+, CD15lov) i nekimć elijama CD19+. Nema ga u ć elijama CD3+.
[0013] Prema tome, dok bispecifični proizvodi generisani iz fragmenata antitela trpe biofizičke i farmakokinetičke prepreke, nedostatak onih izgrađenih sa formatima sličnim antitelima u punoj dužini je taj što oni multivalentno deluju na ko -ciljane antigene u odsustvu primarnog ciljnog antigena, što dovodi do nespecifične aktivacije i potencijalno toksičnost. VO 2014/047231 otkriva bispecifična antitela koja sadrže krak za vezivanje CD3 i krak za vezivanje CD20.
[0014] U prvom aspektu, pronalazak obezbeđuje anti-CD3 x anti-CD20 heterodimerno antitelo koje sadrži HC1 (Fab-Fc), HC2 (scFv-Fc) i LC sa slike 74. Shodno tome, u jednom slučaju pronalazak predviđa heterodimerna antitela koja sadrže: a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi teški lanac koji sadrži: 1) prvi promenljiv teški domen; 2) prvi stalni teški lanac koji sadrži prvi Fc domen; 3) scFv koji sadrži scFv promenljiv laki domen, scFv povezivač I scFv promenljiv teški domen; pri čemu je pomenuti scFv kovalentno vezan za C-terminus pomenutog Fc domena koristeć i vezu domena- Er; b) drugi monomer koji sadrži drugi teški lanac koji sadrži drugi promenljivi teški domen i drugi stalni teški lanac koji sadrži drugi Fc domen; i c) zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena I konstantnog lakog domena.
[0015] U sledećem slučaju, pronalazak obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže: a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi teški lanac koji sadrži: 1) prvi promenljiv teški domen; 2) prvi konstantni teški domen koji sadrži prvi Fc domen; i 3) prvi promenljivi laki domen, gde je pomenuti prvi promenljivi laki domen kovalentno vezan za C-terminus pomenutog prvog Fc domena pomoć u povezivača domena; b) drugi monomer koji sadrži: i) drugi promenljivi teški domen; ii) drugi konstantan teški domen koji sadrži drugi Fc domen; i iii) treć i promenljivi teški domen, pri čemu je pomenuti drugi promenljivi teški domen je kovalentno vezan za C-terminus navedenog drugog Fc domena pomoć u povezivača domena; c) zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog glavnog lakog domena i konstantnog svetlosnog domena.
[0016] U dodatnom slučaju, otkrić e obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže: a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi teški lanac koji sadrži: 1) prvi promenljivi teški domen; 2) prvi konstantan težak lanac koji sadrži prvi CH1 domen I prvi Fc domen; 3) scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv povezivač i scFv promenljivi teški domen; u čemu pomenuti scFv je kovalentno vezan između C-terminusa pomenutog CH1 domena I N-terminue navedenog prvog Fc domen pomoć u povezivača domena; b) drugi monomer koji sadrži drugi teški lanac koji sadrži drugi promenljivi teški domen i drugi konstantan teški lanac koji sadrži drugi Fc domen; i c) zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantog lakog domena.
KRATAK SAŽETAK PRONALASKA
[0017] U sledeć em slučaju, otkri ć e obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže: a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi teški lanac koji sadrži: 1) prvi promenljivi teški domen; 2) prvi konstantan teški domen koji sadrži prvi Fc domen; i 3) prvi promenljivi laki domen, pri čemu je pomenuti drugi promenljivi laki domen kovalentno vezan između C-kraja CH1 domena navedenog prvog konstantnog teškog domena i Nterminusa pomenutog prvog Fc domena pomoć u povezivača domena; b) drugi monomer koji sadrži: i) drugi promenljivi teški domen; ii) drugi konstantan teški domen koji sadrži drugi Fc domen; i iii) treć i promenljivi teški domen, pri čemu je pomenuti drugi promenljivi teški domen kovalentno vezan za C-kraj navedenog drugog Fc domena pomoć u povezivača domena; c) zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena.
[0018] U dodatnom slučaju, otkrić e obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže: a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi teški lanac koji sadrži: 1) prvi promenljivi teški domen; 2) prvi konstantan težak lanac koji sadrži prvi CH1 domen i prvi Fc domen; 3) scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv povezivač i scFv promenljivi teški domen; u čemu pomenuti scFv je kovalentno vezan između C-kraja pomenutog CH1 domena i N-terminusa navedenog prvog Fc domena pomoć u povezivača domena; b) drugi monomer koji sadrži drugi Fc domen; i c) laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena I konstantnog lakog domena.
[0019] U nekim slučajevima, prvi i drugi Fc domen imaju set aminokiselinskih supstitucija izabranih iz grupe koju čine S364K/E357Q : L368D/K370S; L368D/K370S : S364K; L368E/K370S : S364K; T411T/E360E/Q362E : D401K; L368D/K370S : S364K/E357L i K370S : S364K/E357Q. Dalje promenljivi teški domeni i promenljivi laki domeni vezuju prvi ciljni tumorski antigen (TTA), scFv vezuje drugi TTA ili humani CD3. U nekim izvođenjima, TTA je izabran iz grupe koju čine CD19, CD20 I CD123.
[0020] U sledeć em slučaju, pronalazak predstavlja domene koji vezuju antigen CD3 imaju CDR i/ili promenljive domene i/ili scFv sekvence prikazane na slikama za H1.32_L1.47, H1.89_L1.47, H1.90_L1.47, H1.33_L.1.47 I H1.31_L1.47. Pronalazak dalje obezbeđuje kompozicije nukleinskih kiselina, kompozicije vektora ekspresije i ć elije doma ć ina.
[0021] U dodatnom slučaju, pronalazak obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi Fc domen; ii) anti-CD3 scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker i scFv promenljivi teški domen; pri čemu je pomenuti scFv kovalentno vezan za N-terminus navedenog Fc domena pomoću linkera domena; b) drugi monomer koji sadrži teški lanac koji sadrži: i) teški promenljivi domen; i ii) konstantan domen teškog lanca koji sadrži drugi Fc domen i c) laki lanac koji sadrži promenljivi laki domen i promenljivi konstantan laki domen; pri čemu je anti-CD3 scFv izabran iz grupe koju čine anti-CD3 H1.32_L1.47, anti-CD3 H1.89_L1.47, anti-CD3 H1.90_L1.47 i anti-CD3 H1.33_L1.47 (SEK ID BR: XX). Teški promenljivi domen i laki promenljivi domen vezuju TTA (uključuju ć i, ali ne ograničavaju ć i se na CD19, CD20, CD38 I CD123).
[0022] U dodatnom slučaju, pronalazak obezbeđuje domene za vezivanje anti-CD20 antitela koji sadrže: a) promenljivi laki domen koji sadrži vlCDR1 koji ima sekvencu RASVSVSIIH (SEK ID BR: XX), a vlCDR2 koji ima sekvencu ATSNLAS (SEK ID BR: XX), I vlCDR3 koji ima sekvencu KKVTHNPPT (SEK ID BR: XX); i b) promenljiv težak domen sadrži vhCDR1 koji ima sekvencu SINMH (SEK ID BR: XX), vhCDR2 koji ima sekvencu AIIPGNGATSISKKFKG (SEK ID BR: KSKS) i vhCDR3 ima sekvencu SIIMGGDVIFDV (SEK ID BR: KSKS). U nekim realizacijama, anti-CD20 antitelo vezujuć i domeni imaju sekvence C2B8 H1.202_L1.113.
[0023] U dodatnom slučaju, otkrić e obezbeđuje domene za vezivanje anti-CD20 antitela koji sadrže: a) promenljivi laki domen koji sadrži vlCDR1 koji ima sekvencu RASSSVSIIH (SEK ID BR: XX), vlCDR2 koji ima sekvencu ATSNLAS (SEK ID BR: XX), i vlCDR3 koji ima sekvencu KKVTSNPPT (SEK ID BR: XX) I b) promenljivi teški domen sadrži vhCDR1 koji ima sekvencu SINMH (SEK ID BR: XX), vhCDR2 koji ima sekvencu AIIPGNGDTSINKKFKG (SEK ID BR: XX) i vhCDR3 koji ima sekvencu STIIGGDVIFNV (SEK ID BR: XX).
[0024] U nekim izvođenjima, antitelo na CD20 vezuju ć i domeni imaju sekvence C2B8_H1L1.
[0025] U dodatnom slučaju, pronalazak obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi Fc domen; ii) anti-CD3 scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker i scFv promenljivi teški domen; pri čemu je pomenuti scFv kovalentno vezan za N-terminus navedenog Fc domena pomoću linkera domena; b) drugi monomer koji sadrži teški lanac koji sadrži: i) teški promenljivi domen; i ii) konstantan domen teškog lanca koji sadrži drugi Fc domen; i c) laki lanac koji sadrži promenljivi laki domen i promenljivi laki konstantan domen ; pri čemu promenljivi teški i laki lanci formiraju C2B8 H1.202_L1.113 ili C2B8_H1L1 vezuju ć i domen.
[0026] U dodatnom slučaju, pronalazak obezbeđuje heterodimerna antitela koja sadrže a) prvi monomer koji sadrži: i) prvi Fc domen; ii) anti-CD3 scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker I scFv promenljivi teški domen; pri čemu je pomenuti scFv kovalentno vezan za N-terminus navedenog Fc domena pomoću linkera domena; b) drugi monomer koji sadrži teški lanac koji sadrži: i) teški promenljivi domen; i ii) konstantan domen teškog lanca koji sadrži drugi Fc domen; i c) laki lanac koji sadrži promenljivi laki domen i promenljivi laki konstantan domen. U ovom izvođenju, promenljivi domeni vezuju CD123 i mogu imati sekvence 7G3_H1.109_L1.47. Antitelo KSENP13676 prikazano je na slici 74.
[0027] Nukleinske kiseline, vektori ekspresije i ć elije doma ć ini su takođe obezbeđene, pored metoda pravljenja ovih proteina i lečenja pacijenata sa njima.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0028]
Slike 1A i 1B prikazuju nekoliko formata ovog pronalaska. Prikazana su dva oblika formata "otvarača za boce", jedan sa domenom koji vezuje anti-CD3 antigen koji sadrži scFv i domen koji vezuje anti-TTA antigen koji sadrži Fab, a drugi obrnuto. Prikazani su formati mAb-Fv, mAb-scFv, Central-scFv i Central-Fv. Osim toga, prikazani su i "jednokraki" formati, gde jedan monomer sadrži samo Fc domen, i jednokraki Central-scFv i jedan krak Central-Fv. Prikazan je i dvostruki format scFv.
Slika 2 prikazuje sekvence konstrukcije "High CD3" anti-CD3_H1.30_L1.47, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR-ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR-ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruko podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 3 prikazuje sekvence "High-Int #1" Anti-CD3_H1.32_L1.47 konstrukta, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR-ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR-ove, kao i konstrukciju scFv sa nabijenim linkerom (dvostruko podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 4 prikazuje sekvence "High-Int #2" Anti-CD3_H1.89_L1.47 konstrukta, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR-ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR-ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruko podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 5 prikazuje sekvence "High-Int #3" Anti-CD3_H1.90_L1.47 konstrukta, uključujuć i promenljive teške i lake domene (CDR-i podvučeni), kao i pojedinačne vl i vhCDR-ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruko podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 6 prikazuje sekvence "Int" konstrukcije AntiCD3_H1.90_L1.47, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR -ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR -ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruki podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 7 prikazuje sekvence "niske" konstrukcije AntiCD3_H1.31_L1.47, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR -ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR -ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruki podvučeno). Kao što je tačno za sve sekvence prikazane na slikama, ovaj naelektrisani linker može se prema potrebi zameniti nenaelektrisanim ili drugim naelektrisanim linkerom.
Slika 8 prikazuje nizove High CD38: Konstrukcija OKT10_H1.77_L1.24, uključujuć i promenljive teške i lake domene (podvučeni CDR -ovi), kao i pojedinačne vl i vhCDR -ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruko podvučeno).
Slika 9 prikazuje sekvence intermedijarne konstrukcije CD38: OKT10_H1L1.24, uključujuć i promenljive teške i lake domene (CDR -i podvučeni), kao i pojedinačne vl i vhCDR -ove, kao i konstrukciju scFv sa naelektrisanim linkerom (dvostruko podvučeno).
Slika 10 prikazuje sekvence konstrukcije Lov CD38: OKT10_H1L1, uključujuć i promenljive teške i lake domene (CDR -i podvučeni), kao i pojedinačne vl i vhCDR -ove, kao i konstrukciju scFv sa nabijenim linkerom (dvostruko podvučeno).
Slika 11 prikazuje nizove XENP15331.
Slika 12 prikazuje nizove XENP13243.
Slika 13 prikazuje nizove XENP14702.
Slika 14 prikazuje nizove XENP15426.
Slika 15 prikazuje nizove XENP14701.
Slika 16 prikazuje redosled XENP14703.
Slika 17 prikazuje niz XENP13243.
Slika 18 prikazuje nizove XENP18967.
Slika 19 prikazuje nizove XENP18971.
Slika 20 prikazuje nizove XENP18969.
Slika 21 prikazuje nizove XENP18970.
Slika 22 prikazuje nizove XENP18972.
Slika 23 prikazuje nizove XENP18973.
Slika 24 prikazuje nizove XENP15055.
Slika 25 prikazuje nizove XENP13544.
Slika 26 prikazuje nizove XENP13694.
Slika 27 prikazuje redosled humanog CD3 ε.
Slika 28 prikazuje celu dužinu (SEK ID NO: 130) i ekstrać elijski domen (ECD; SEK ID NO: 131) od humanog proteina CD38.
Slika 29A -29E prikazuje korisne parove skupova varijanti heterodimerizacije (uklju čujuć i varijante iskrivljenosti i pI).
Slika 30 prikazuje spisak konstantnih regiona izosteričnih varijanti antitela i njihove odgovarajuć e supstitucije. pI _ (-) označava niže varijante pI, dok pI _ (+) označava više varijante pI. Oni se mogu opciono i nezavisno kombinovati sa drugim varijantama heterodimerizacije prema pronalasku (i drugim tipovima varijanti, kako je ovde navedeno).
Slika 31 prikazuje korisne varijacije ablacije koje ablatiraju vezivanje FcgR (ponekad se nazivaju i "knock out" ili "KO" varijante).
Slika 32 prikazuje dva naročito korisna izvođenja prema pronalasku.
Slika 33 prikazuje niz nabijenih scFv linkera koji se koriste u poveć anju ili smanjenju pI heterodimernih antitela koja koriste jednu ili vi še scFv kao komponentu. Pojedinačni scFv linker iz stanja tehnike sa jednim punjenjem se naziva "Whitlow", iz Whitlow et al., Protein Engineering 6(8):989-995 (1993). Treba napomenuti da je ovaj linker korišć en za smanjenje agregacije i poveć anje proteolitičke stabilnosti u scFvs.
Slika 34 prikazuje spisak projektovanih varijanti Fc heterodimerskih krivina sa prinosima heterodimera (određenim pomoć u HPLC-CIEKS) i termičkim stabilnostima (određenim pomo ć u DSC). Neodređena toplotna stabilnost označava se sa "n.d.".
Slika 35 Prinosi ekspresije bispecifika nakon afinitetnog prečišć avanja proteina A.
Slika 36 Hromatogrami za prečišć avanje katjonske izmene.
Slika 37 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24 h inkubacije, 10k RPMI8226 ć elija, 400k T ć elija. Uzorci su anti-CD38 k anti-CD3 bispecifični. Otkriveno pomoću LDH.
Slika 38 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24 h inkubacija, 10k RPMI8226 ć elija, 500k humanih PBMC. Uzorci su anti-CD38 k anti-CD3 bispecifični. Otkriveno pomoću LDH.
Slika 39 prikazuje nizove XENP14419,
Slika 40 prikazuje nizove XENP14420.
Slika 41 prikazuje nizove XENP14421.
Slika 42 prikazuje nizove XENP14422.
Slika 43 prikazuje nizove XENP14423.
Slika 44 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 96 h inkubacije, 40k RPMI8226 ć elija, 400k humane PBMC. Uzorci su anti-CD38 k anti-CD3 FabscFv-Fcs. Otkriveno pomoću protočne citometrije, konkretno nestankom CD38+ ć elija.
Slika 45 Dalja analiza preusmerenog testa citotoksičnosti T ć elija opisana na slici 1. Prvi red prikazuje srednji intenzitet fluorescencije (MFI) aktivacionog markera CD69 na CD4+ i CD8+ T ć elijama otkriven protočnom citometrijom. Drugi red prikazuje procenat CD4+ i CD8+ T ć elija koje su Ki-67+, mera ć elijske proliferacije. Tre ć i red prikazuje intra ć elijski srednji intenzitet fluorescencije (MFI) inhibitora granzima B PI-9 na CD4+ i CD8+ T ć elijama otkriven proto čnom citometrijom.
Slika 46 Dizajn studije miševa za ispitivanje antitumorske aktivnosti anti-CD38 k anti-CD3 Fab-scFv-Fc bispecifikanata.
Slika 47 Veličina tumora merena IVIS® -om u funkciji vremena i lečenja
Slika 48 IVIS® bioluminiscentne slike (10. dan)
Slika 49 Osiromašenje ć elija CD38+ kod majmuna cinomolgus nakon pojedinačnih doza navedenih ispitivanih proizvoda
Slika 50 Aktivacija T ć elija izmerena CD69 srednjim intenzitetom fluorescencije (MFI) kod majmuna cinomolgus, kodiranje boje kao na slici 49.
Slika 51 Nivoi IL-6 u serumu, nakon pojedinačnih doza navedenih proizvoda za testiranje.
Slika 52 prikazuje nizove XENP15427.
Slika 53 prikazuje nizove XENP15428.
Slika 54 prikazuje nizove XENP15429.
Slika 55 prikazuje nizove XENP15430.
Slika 56 prikazuje nizove XENP15431.
Slika 57 prikazuje nizove XENP15432.
Slika 58 prikazuje nizove XENP15433.
Slika 59 prikazuje nizove XENP15434.
Slika 60 prikazuje nizove XENP15435.
Slika 61 prikazuje nizove XENP15436.
Slika 62 prikazuje nizove XENP15437.
Slika 63 prikazuje nizove XENP15438.
Slika 64 prikazuje afinitete vezivanja u Biacore testu.
Slika 65 prikazuje čistoć u Heterodimera tokom stvaranja stabilnog bazena koriš ć enjem različitih odnosa lakog lanca, Fab-Fc i scFv-Fc.
Slika 66 Osiromašenje humanog IgM i IgG2 anti-CD38 k anti-CD3 bispecifičnim u modelu huPBMC miša.
Slika 67 prikazuje optimizovanu stabilnost, humanizovanu anti-CD3 varijantu scFvs. Zamene su date u odnosu na H1_L1.4 scFv sekvencu. Numeracija aminokiselina je Kabat numeracija.
Slika 68. Aminokiselinske sekvence optimizovane stabilnosti, humanizovane anti-CD3 varijante scFvs. CDR su podvučeni. Za svaku kombinaciju teškog lanca/lakog lanca navedene su četiri sekvence: (i) scFv sa C-terminalnom oznakom 6kHis, (ii) sam scFv, (iii) sam VH, (iv) samo VL.
Slika 69 Test preusmerene citotoksičnosti Tć elija, 24 h inkubacija, 10k RPMI8226 ć elija, 500k PBMC. Uzorci su anti-CD38 (OKT10_H1L1, OKT10_H1.77_L1.24) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Otkriveno pomoću LDH.
Slika 70 Studija o osiromašenju huPBL-SCID Ig-om. Testni artikli su dozirani 8 dana nakon presađivanja PBMC -a na 0,03, 0,3 ili 3 mg/kg. Način primene bio je intraperitonealni. Uzorci krvi uzeti su 14 dana nakon presađivanja PBMC, prerađeni u serum i testirani na humane IgM i IgG2. Slika 71 prikazuje nizove XENP15049.
Slika 72 prikazuje nizove XENP15051.
Slika 73 prikazuje nizove XENP15050.
Slika 74 prikazuje nizove XENP13676.
Slika 75 prikazuje nizove XENP14696.
Slika 76 prikazuje nizove XENP15629.
Slika 77 prikazuje nizove XENP15053.
Slika 78 prikazuje nizove XENP15630.
Slika 79 prikazuje nizove XENP15631.
Slika 80 prikazuje nizove XENP15632.
Slika 81 prikazuje nizove XENP15633.
Slika 82 prikazuje nizove XENP15634.
Slika 83 prikazuje nizove XENP15635.
Slika 84 prikazuje nizove XENP15636.
Slika 85 prikazuje nizove XENP15638.
Slika 86 prikazuje nizove XENP15639.
Slika 87 prikazuje nizove XENP13677.
Slika 88 prikazuje nizove XENP14388.
Slika 89 prikazuje nizove XENP14389.
Slika 90 prikazuje nizove XENP14390.
Slika 91 prikazuje nizove XENP14391.
Slika 92 prikazuje nizove XENP14392.
Slika 93 prikazuje nizove XENP14393.
Slika 94 prikazuje nizove XENP16366.
Slika 95 prikazuje nizove XENP16367
Slika 96 prikazuje nizove XENP16368.
Slika 97 prikazuje nizove XENP16369.
Slika 98 prikazuje nizove XENP16370.
Slika 99 prikazuje nizove XENP16371.
Slika 100 prikazuje nizove XENP16372.
Slika 101 prikazuje nizove XENP16373.
Slika 102 prikazuje nizove XENP16374.
Slika 103 prikazuje nizove XENP16375.
Slika 104 prikazuje nizove XENP16376.
Slika 105 prikazuje nizove XENP16377.
Slika 106 prikazuje sekvence antigena CD20 i CD123.
Slika 107 Određivanje površinske plazmonske rezonance za CD3 afinitet. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Ljudski CD3de-Fc (Sino Biological) je kovalentno vezan za površinu čipa. Uzorci su prebačeni na 3.125, 12.5, 50 i 200 nM.
Slika 108 Određivanje površinske plazmonske rezonancije za CD3 afinitet. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Cinomolgus majmun CD3de-Fc (Sino Biological) je kovalentno vezan za površinu čipa. Uzorci su prebačeni na 3.125, 12.5, 50 i 200 nM.
Slika 109 Određivanje površinske plazmonske rezonance za CD3 afinitet. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Ljudski CD3de-Fc (Sino Biological) je kovalentno vezan za površinu čipa. Uzorci su prebačeni na 31,25, 125, 500 i 2000 nM.
1
Slika 110 Određivanje površinske plazmonske rezonance za CD3 afinitet. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Cinomolgus majmun CD3de-Fc (Sino Biological) je kovalentno vezan za površinu čipa. Uzorci su prebačeni na 31,25, 125, 500 i 2000 nM.
Slika 111 Određivanje površinske plazmonske rezonance za CD3 afinitet. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Cinomolgus majmun CD3de-Fc (Sino Biological) je kovalentno vezan za površinu čipa. Uzorci su prebačeni na 31,25, 125, 500 i 2000 nM.
Slika 112 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24h inkubacije, 10k Ramos ć elija, 250k PBMC. Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Otkriveno pomoću LDH.
Slika 113 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24h inkubacija, 20k Jeko ć elija, 200k PBMC (osiromašeno CD19). Uzorci su anti-CD20
(C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Detektovala je protočna citometrija, konkretno nestanak CD19+ć elija.
Slika 114 Proizvodnja IL-6 nakon 24 sata za eksperiment opisan na slici 113.
Slika 115 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 5 h inkubacije, 20k Jeko ć elija, 500k PBMC (osiromašeno CD19). Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1L1) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Detektovala je protočna citometrija, konkretno nestanak CD19+ ć elija.
Slika 116 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24h inkubacija, 20k Jeko ć elija, 500k PBMC (osiromašeno CD19). Uzorci su anti-CD20 (C2B8_H1.202_L1.113) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Detekcija je bila protočna citometrija, konkretno nestanak CD19+ ć elija.
Slika 117 Proizvodnja IL-6 nakon 24 sata za eksperiment opisan na slici 113.
Slika 118 Test preusmerene citotoksičnosti T ć elija, 24 h inkubacija, 10k RPMI8226 ć elija, 500k PBMC. Uzorci su anti-CD38 (OKT10_H1L1, OKT10_H1.77_L1.24) x anti-CD3 Fab-scFv-Fcs. Otkriveno pomoću LDH.
Slika 119 Studija o osiromašenju huPBL-SCID Ig-om. Uzorci su dozirani 1 i 8 dana nakon presađivanja PBMC -a na 5 mg/kg. Način primene bio je intraperitonealni. Uzorci krvi uzeti su 14 dana nakon presađivanja PBMC, prerađeni u serum i testirani na humane IgM i IgG2.
Slika 120 Studija o osiromašenju huPBL-SCID Ig-om. Uzorci su dozirani 8 dana nakon presađivanja PBMC -a na 0,03, 0,3 ili 3 mg/kg. Način primene bio je intraperitonealni. Uzorci krvi uzeti su 14 dana nakon presađivanja PBMC, prerađeni u serum i testirani na humane IgM i IgG2.
Slika 121 prikazuje nizove visokog CD20 C2B8_H1.202_L1.113.
Slika 122 prikazuje nizove niskog CD20 C2B8_H1L1.
Slika 123 prikazuje sekvence CD1237G3_H1.109_L1.57.
Slika 124 prikazuje matricu moguć ih kombinacija za pronalazak. "A" znači da se CDR -ovi navedenih CD3 sekvenci mogu kombinovati sa CDR -ovima TTA na desnoj strani. Tako, vhCDR iz varijable CD3 H1.30 promenljivog teškog lanca i vlCDR iz promenljivog lakog lanca sekvence CD3 L1.57 mogu se kombinovati sa vhCDR iz CD38 sekvence OKT10 H1.77 i vlCDR iz sekvence OKT10L1.24. "B" znači da se CDR iz CD3 konstrukata mogu kombinovati sa promenljivim teškim i lakim domenima iz TTA. To jest, vhCDR iz varijable CD3 H1.30 promenljivog teškog lanca i vlCDR iz varijabilnog lakog lanca sekvence CD3 L1.57 mogu se kombinovati sa promenljivom teškom domenom CD38 OKT10 H1.77 sekvencom i OKT10L1.24 sekvencom. "C" je obrnuto, tako da se promenljivi teški domen i promenljivi lagani domen iz sekvenci CD3 koriste sa CDR -ovima TTA -a. "D" je mesto gde se kombinuju promenljivi teški i promenljivi laki lanci iz svakog. "E" je mesto gde se scFv CD3 koristi sa CDR -ovima TTA, a "F" je mesto gde se scFv CD3 koristi sa promenljivim teškim i promenljivim lakim domenima domena vezivanja TTA antigena.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
I.Definicije
[0029] Da bi se aplikacija mogla potpunije razumeti, dole je izneto nekoliko definicija. Takve definicije obuhvataju gramatičke ekvivalente.
[0030] Pod "ablacijom" ovde se podrazumeva smanjenje ili uklanjanje aktivnosti. Tako, na primer, "ablaciono vezivanje FcgR" znači da varijanta aminokiseline Fc regiona ima manje od 50% početnog vezivanja u poređenju sa Fc regionom koji ne sadrži specifičnu varijantu, sa manje od 70-80-90-95-98% gubitka aktivnost je poželjna, i uopšte, sa aktivnošć u koja je ispod nivoa detektovanog vezivanja u Biacore testu. Posebno se koriste u ablaciji vezivanja FcgR one prikazane na slici 16.
[0031] Pod "ADCC" ili "antitelo zavisno ć elijski posredovanom citotoksičnoš ć u", kako se ovde koristi, podrazumeva se ć elijski posredovana reakcija u kojoj nespecifične citotoksične ć elije koje eksprimiraju FciR prepoznaju vezano antitelo na ciljnoj ć eliji i kasnije izazivaju lizu ciljne ć elije. ADCC je u korelaciji sa vezivanjem za FciRIIIa; poveć ano vezivanje za FciRIIIa dovodi do pove ć anja aktivnosti ADCC.
[0032] Pod "ADCP" ili fagocitozom zavisnom od ć elija zavisnom od antitela, kako se ovde koristi, podrazumeva se reakcija posredovana ć elijama gde nespecifične citotoksične ć elije koje eksprimiraju FciR prepoznaju vezano antitelo na ciljnoj ć eliji i posledično izazivaju fagocitozu ciljneć elije.
[0033] Pod "modifikacijom" ovde se podrazumeva supstitucija, umetanje i/ili brisanje aminokiselina u polipeptidnoj sekvenci ili promena u delu koji je hemijski vezan za protein. Na primer, modifikacija može biti izmenjena struktura ugljenih hidrata ili PEG vezana za protein. Pod "modifikacijom aminokiselina" ovde se podrazumeva supstitucija, umetanje i/ili brisanje aminokiselina u polipeptidnoj sekvenci. Radi jasnoć e, osim ako nije druga čije naznačeno, modifikacija aminokiselina se uvek odnosi na aminokiselinu koju kodira DNK, npr. 20 aminokiselina koje imaju kodone u DNK i RNK.
[0034] Pod "supstitucijom aminokiselina" ili "supstitucijom" ovde se podrazumeva zamena aminokiseline na određenom položaju u matičnoj polipeptidnoj sekvenci sa drugom aminokiselinom. Konkretno, u nekim izvođenjima, supstitucija se odnosi na aminokiselinu koja se prirodno ne javlja na određenom položaju, ili se ne javlja prirodno u organizmu ili u bilo kom organizmu. Na primer, supstitucija E272I se odnosi na varijantu polipeptida, u ovom slučaju na varijantu Fc, u kojoj je glutaminska kiselina na položaju 272 zamenjena tirozinom. Radi jasnoć e, protein koji je konstruisan da promeni sekvencu kodiranja nukleinske kiseline, ali ne i da promeni po četnu aminokiselinu (na primer razmenu CGG (kodirajuć i arginin) u CGA (još uvek kodira arginin) da pove ć a nivo ekspresije organizma domać ina) nije " zamena aminokiselina “; to jest, uprkos stvaranju novog gena koji kodira isti protein, ako protein ima istu aminokiselinu na određenom položaju sa kojim je počeo, to nije supstitucija aminokiselina.
[0035] Pod "ubacivanjem aminokiselina" ili "umetanjem", kako se ovde koristi, podrazumeva se dodavanje aminokiselinske sekvence na određenom položaju u roditeljskoj sekvenci polipeptida. Na primer, -233E ili 233E označava umetanje glutaminske kiseline posle pozicije 233 i pre pozicije 234. Dodatno, -233ADE ili A233ADE označava umetanje AlaAspGlu posle pozicije 233 i pre pozicije 234.
[0036] Pod "delecijom aminokiseline" ili "delecijom", kako se ovde koristi, podrazumeva se uklanjanje aminokiselinske sekvence na određenom položaju u roditeljskoj sekvenci polipeptida. Na primer, E233- ili E233# ili E233 () označava brisanje glutaminske kiseline na poziciji 233. Dodatno, EDA233- ili EDA233# označava brisanje sekvence GluAspAla koja počinje na poziciji 233.
[0037] Pod "varijantnim proteinom" ili "varijantom proteina", ili "varijantom", kako se ovde koristi, podrazumeva se protein koji se razlikuje od proteina roditeljskog proteina na osnovu najmanje jedne modifikacije aminokiselina. Varijanta proteina mo že se odnositi na sam protein, kompoziciju koja sadrži protein ili amino sekvencu koja ga kodira. Poželjno, varijanta proteina ima najmanje jednu aminokiselinsku modifikaciju u poređenju sa roditeljskim proteinom, npr. od oko jedne do oko sedamdeset modifikacija aminokiselina, i poželjno od oko jedne do oko pet modifikacija aminokiselina u poređenju sa matičnim. Kao što je dole opisano, u nekim izvđenjima, matični polipeptid, na primer Fc roditeljski polipeptid, je sekvenca humanog humanog tipa, kao što je Fc region iz IgG1, IgG2, IgG3 ili IgG4, iako humane sekvence sa varijantama mogu poslužiti i kao "roditelj" polipeptidi ", na primer IgG1/2 hibrid sa slike 19. Varijantna sekvenca proteina ovde ć e poželjno imati najmanje oko 80% identiteta sa sekvencom roditeljskog proteina, a najpo željnije najmanje oko 90% identiteta, poželjnije najmanje oko 95-98-99% identiteta. Varijantni protein se može odnositi na samu varijantu proteina, kompozicije koje sadr že varijantu proteina ili DNK sekvencu koja ga kodira. Shodno tome, pod "varijantom antitela" ili "varijantom antitela", kako se ovde koristi, podrazumeva se antitelo koje se razlikuje od roditeljskog antitela na osnovu najmanje jedne aminokiselinske modifikacije, "varijanta IgG" ili "varijanta IgG", kako se ovde koristi, podrazumeva antitelo koje se razlikuje od roditeljskog IgG (opet, u mnogim slučajevima, od sekvence humanog IgG) zahvaljujuć i najmanje jednoj aminokiselinskoj modifikaciji, a "varijanta imunoglobulina" ili "varijanta imunoglobulina" kako se ovde koristi podrazumeva sekvencu imunoglobulina koja se razlikuje od roditeljske sekvence imunoglobulina zahvaljujuć i najmanje jednoj aminokiselinskoj modifikaciji. "Varijanta Fc" ili "varijanta Fc", kako se ovde koristi, ozna čava protein koji sadrži modifikaciju aminokiseline u Fc domenu. Varijante Fc ovog pronalaska definisane su prema modifikacijama aminokiselina koje ih čine. Tako je, na primer, N434S ili 434S Fc varijanta sa supstitucionim serinom na poziciji 434 u odnosu na roditeljski Fc polipeptid, pri čemu je numerisanje prema indeksu EU. Slično, M428L/N434S definiše varijantu Fc sa supstitucijama M428L i N434S u odnosu na roditeljski Fc polipeptid. Identitet VT aminokiseline može biti neodređen, u kom slučaju se gore pomenuta varijanta naziva 428L/434S. Napominje se da je redosled kojim se pružaju zamene proizvoljan, što znači da je, na primer, 428L/434S ista varijanta Fc kao M428L/N434S, itd. Za sve položaje razmatrane u ovom pronalasku koji se odnose na antitela, osim ako nije drugačije naznačeno, numerisanje položaja aminokiselina je prema indeksu EU. Indeks EU ili indeks EU kao u Kabatu ili šema numerisanja EU odnosi se na numerisanje antitela EU (Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63: 78-85). Modifikacija može biti dodavanje, brisanje ili zamena. Zamene mogu uključivati prirodne aminokiseline i, u nekim slučajevima, sintetičke aminokiseline. Primeri uključuju U.S. Pat. No. 6,586,207; WO 98/48032; WO 03/073238; US2004-0214988A1; WO 05/35727A2; WO 05/74524A2; J. W. Chin et al., (2002), Journal of the American Chemical Society 124:9026-9027; J. W. Chin, & P. G. Schultz, (2002), ChemBioChem 11:1135-1137; J. W. Chin, et al., (2002), PICAS United States of America 99:11020-1102.
[0038] Kako se ovde koristi, pod "proteinom" se podrazumevaju najmanje dve kovalentno vezane aminokiseline, koje uključuju proteine, polipeptide, oligopeptide i peptide. Peptidilna grupa mo že da sadrži prirodno prisutne aminokiseline i peptidne veze, ili sinteti čke peptidomimetičke strukture, tj. "Analoge", kao što su peptoidi (videti Simon et al., PNAS USA 89 (20): 9367 (1992)). Aminokiseline mogu biti prirodne ili sintetičke (npr. Ne aminokiselina za koju je kodirana DNK); kako ć e to ceniti stručnjaci. Na primer, homofenilalanin, citrulin, ornitin i noreleucin se smatraju sintetičkim aminokiselinama u smislu pronalaska, a mogu se koristiti i konfiguracije amino kiselina D- i L- (R ili S). Varijante ovog pronalaska mogu sadržati modifikacije koje uključuju upotrebu sintetičkih aminokiselina ugrađenih korišć enjem, na primer, tehnologija koje su razvili Schultz i kolege, uključujuć i, ali bez ograničenja, metode koje su opisali Cropp & Shultz, 2004, Trends Genet. 20(12):625-30, Anderson et al., 2004, Proc Natl Acad Sci USA 101 (2):7566-71, Zhang et al., 2003, 303(5656):371-3, and Chin et al., 2003, Science 301(5635):964-7.
[0039] Pored toga, polipeptidi mogu uključivati sintetičke derivatizacije jednog ili više bočnih lanaca ili krajeva, glikozilacije, PEGilacije, kružne permutacije, ciklizacije, linkere za druge molekule, fuzije sa proteinima ili proteinima domena i dodavanje peptidnih tagova ili oznaka.
[0040] Pod “ostatkom”, kao što se ovde koristi, podrazumeva se položaj u proteinu i njegovom povezanom indetitetu aminokiseline. Za na primer, Asparagin 297 (takođe se naziva Asn297 ili N297) je ostatak na položaju 297 u humanom antitelu IgG1.
1
[0041] Pod “Fab” ili “Fab region” kako se ovde koristi označava polipeptid koji sadrži VH, CH1, VL i CL imunoglobulinski domeni. Fab se može odnositi na ovaj region u izolaciji, ili ovaj region u kontekstu potpunog antitela dužine, fragmenta antitela ili Fab fuzionog proteina.Pod “Fv” ili “Fv fragment” ili “Fv region” kako se ovde koristi označava polipeptid koji sadrži VL i VH domene jednog antitela. Kao što ć e to ceniti stručnjaci, oni se generalno sastoje od dva lanca.
[0042] Pod “modifikacijom podklase IgG” ili “modifikacijom izotipa”, kako se ovde koristi, podrazumeva se aminokiselinska modifikacija koja pretvara jednu aminokiselinu jednog izotipa IgG u odgovarajuć u aminokiselinu u različitim, poravnatim izotipima IgG. Na primer, zato što IgG1 sadrži a tirozin I IgG2 fenilalanin na poziciji EU 296, a zamena F296I u IgG2 smatra se modifikacijom podklase IgG.
[0043] “Neprirodnom modifikacijom” kako se ovde koristi, označava modifikaciju aminokiselina koja nije izotipska. Na primer, pošto nijedan od IgG ne sadrži serin na poziciji 434, supstitucija 434S u IgG1, IgG2, IgG3 ili IgG4 (ili njihovim hibridima) smatraju se modifikacijom koja se ne javlja prirodno.
[0044] Pod “amino kiselini” I “aminokiselinskom identitetu” kako se ovde koristi označava jedan od 20 prirodno prisutnih aminokiselina koje kodiraju DNK i RNK.
[0045] Pod “efektorskom funkcijom”, kako se ovde koristi, podrazumeva se biohemijski događaj koji nastaje interakcijom Fc regiona antitela sa Fc receptorom ili ligandom. Funkcije efektora uključuju, ali nisu ograničene na, ADCC, ADCP I CDC.
[0046] Pod "IgG Fc ligandom", kako se ovde koristi, podrazumeva se molekul, poželjno polipeptid, iz bilo kog organizma koji se vezuje za Fc region IgG antitela da formira kompleks Fc/Fc liganda. Fc ligandi uključuju, ali nisu ograničeni na FciRI, FciRII, FciRIII, FcRn, C1k, C3, lektin koji vezuje manan, receptor za manozu, stafilokokni protein A, streptokokni protein G i virusni FciR. Fc ligandi takođe uključuju homologe Fc receptora (FcRH), koji su porodica Fc receptora koji su homologni FcgRs (Davis et al., 2002, Immunological Revievs 190: 123-136). Fc ligandi mogu uključivati neotkrivene molekule koji vezuju Fc. Posebni IgG Fc ligandi su FcRn i Fc gama receptori. Pod "Fc ligandom", kako se ovde koristi, podrazumeva se molekul, poželjno polipeptid, iz bilo kog organizma koji se vezuje za Fc region antitela da bi se formirao kompleks Fc/Fc liganda.
[0047] Pod "Fc gama receptor", "FcgR" ili "FckammaR", kako se ovde koristi, podrazumeva se svaki član porodice proteina koji vezuju Fc region IgG antitela i kodiran je genom FcgR. Kod ljudi ova porodica uključuje, ali nije ograničena na FciRI (CD64), uključujuć i izoforme FciRIa, FciRIb i FciRIc; FciRII (CD32), uključujuć i izoforme FciRIIa (uključuju ć i alotipove H131 i R131), FciRIIb (uključuju ć i FciRIIb-1 i FciRIIb-2) i FciRIIc; i FciRIII (CD16), uključujuć i izoforme FciRIIIa (uključuju ć i alotipove V158 i F158) i FciRIIIb (uključujuć i alotipove FciRIIb-NA1 i FciRIIb-NA2) (Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82: 57-65), kao i bilo koje neotkrivene ljudske FcgRs ili FcgR izoforme ili alotipove. FciR može biti iz bilo kog organizma, uključujuć i, ali bez ograničenja, ljude, miševe, pacove, zečeve i majmune. Mišji FciR uključuju, ali se ne ograničavaju na, FciRI (CD64), FciRII (CD32), FciRIII (CD16) i FciRIII-2 (CD16-2), kao i sve neotkrivene mišje FciR ili FcgR izoforme ili alotipove.
[0048] Pod "FcRn" ili "neonatalnim Fc receptorom", kako se ovde koristi, podrazumeva se protein koji vezuje Fc region IgG antitela i kodiran je bar delimično genom FcRn. FcRn može biti iz bilo kog organizma, uključujuć i, ali bez ograničenja, ljude, miševe, pacove, zečeve i majmune. Kao što je poznato u oblasti, funkcionalni protein FcRn sadrži dva polipeptida, koji se često nazivaju teškim i lakim lancem. Laki lanac je beta-2-mikroglobulin, a teški lanac kodiran genom FcRn. Osim ako ovde nije drugačije naznačeno, FcRn ili FcRn protein se odnosi na kompleks teškog lanca FcRn sa beta-2-mikroglobulinom. Različite varijante FcRn koje se koriste za poveć anje vezivanja za receptor FcRn, a u nekim slučajevima i za poveć anje poluvremena seruma, prikazane su na slici Legenda slike 83.
[0049] Pod "roditeljskim polipeptidom", kako se ovde koristi, podrazumeva se polazni polipeptid koji je naknadno modifikovan da generiše varijantu. Osnovni polipeptid može biti polipeptid koji se javlja u prirodi, ili varijanta ili konstruisana verzija prirodnog polipeptida. Mati čni polipeptid se može odnositi na sam polipeptid, na kompozicije koje sadrže osnovni polipeptid ili na aminokiselinsku sekvencu koja ga kodira. Shodno tome, pod "roditeljskim imunoglobulinom", kako se ovde koristi, podrazumeva se nemodifikovani polipeptid imunoglobulina koji je modifikovan da generiše varijantu, a pod "roditeljskim antitelom", kako se ovde koristi, podrazumeva se nemodifikovano antitelo koje je modifikovano da generi še varijantno antitelo. Treba napomenuti da "roditeljsko antitelo" uključuje poznata komercijalna, rekombinantno proizvedena antitela kako je dole navedeno.
[0050] Pod "Fc" ili "Fc region" ili "Fc domen" kao što se ovde koristi, podrazumeva se polipeptid koji sadrži konstantni region antitela isključujuć i prvi imunoglobulinski domen konstantnog regiona, a u nekim slučajevima i deo šarke. Tako se Fc odnosi na poslednja dva imunoglobulinska domena konstantne regije IgA, IgD i IgG, poslednja tri imunoglobulinska domena konstantne regije IgE i IgM i fleksibilni šarni N-terminal ovih domena. Za IgA i IgM, Fc može uključivati J lanac. Za IgG, Fc domen obuhvata domene imunoglobulina Cg2 i Cg3 (Cg2 i Cg3) i donji deo šarki između Cg1 (Cg1) i Cg2 (Cg2). Iako se granice Fc regiona mogu razlikovati, Fc region teškog lanca humanog IgG se obično definiše tako da uključuje ostatke C226 ili P230 na svom karboksilnom kraju, pri čemu je numerisanje prema indeksu EU kao u Kabatu. U nekim izvođenjima, kao što je dole detaljnije opisano, modifikacije aminokiselina se vrše u Fc regionu, na primer da bi se promenilo vezivanje za jedan ili više FciR receptora ili za FcRn receptor.
[0051] Pod "teškim konstantnim regionom" ovde se podrazumeva CH1-šarka-CH2-CH3 deo antitela.
[0052] Pod "Fc fuzionim proteinom" ili "imunoadhezinom" ovde se podrazumeva protein koji sadr ži Fc region, povezan (opciono preko linkerskog dela, kako je ovde opisano) sa različitim proteinom, kao što je vezujuć i deo za ciljni protein , kao što je ovde opisano. U nekim slučajevima, jedan monomer heterodimernog antitela sadrži teški lanac antitela (bilo uključujuć i scFv ili dalje uključujuć i laki lanac), a drugi monomer je Fc fuzija, koja sadrži varijantu Fc domena i ligand. U nekim izvođenjima, ovi "pola antitela-pola fuzionisani proteini" se nazivaju "fuziona tela".
[0053] Pod "položajem" koji se ovde koristi podrazumeva se mesto u sekvenci proteina. Pozicije mogu biti numerisane sekvencijalno ili prema utvrđenom formatu, na primer EU indeks za numerisanje antitela.
[0054] Pod "ciljnim antigenom", kako se ovde koristi, podrazumeva se molekul koji je specifično vezan za varijabilni region datog antitela. Ciljni antigen mo že biti protein, ugljeni hidrat, lipid ili drugo hemijsko jedinjenje. U nastavku je opisan veliki broj odgovarajuć ih ciljnih antigena.
[0055] Pod" ṕovezanošću" u kontekstu monomera heterodimernih antitela prema pronalasku ovde se podrazumeva da se, kao i kod dva lanca DNK koja se "podudaraju", varijante heterodimerizacije inkorporiraju u svaki monomer kako bi se očuvala sposobnost da se "podudaraju" i formiraju heterodimere. Na primer, ako su neke varijante pI projektovane u monomer A (npr. Poveć anje pI već e), onda steričke varijante koje su "parovi naboja" koje se takođe mogu koristiti ne ometaju varijante pI, npr. varijante naboja koje poveć avaju pI stavljaju se na isti "lanac" ili "monomer" radi očuvanja obe funkcionalnosti. Slično, za varijante "iskrivljenosti" koje dolaze u parovima kao što je dole detaljnije opisano, iskusni stručnjaci ć e razmotriti pI prilikom odlučivanja u koji ć e lanac ili monomer koji sadrži jedan skup para ić i tako da se razdvajanje pI maksimizira kori š ć enjem pI iskrivljenosti.
[0056] Pod "ciljnom ć elijom", kako se ovde koristi, podrazumeva se ć elija koja eksprimira ciljni antigen.
[0057] Pod "varijabilnim regionom", kako se ovde koristi, podrazumeva se region imunoglobulina koji sadrži jedan ili više Ig domena koji su u suštini kodirani bilo kojim od gena V.kappa., V.lamda. I/ili VH koji čine genetski lokusi imunoglobulina kappa, lambda i teškog lanca, ovim redosledom.
1
[0058] Pod "divljim tipom ili DT" ovde se podrazumeva aminokiselinska sekvenca ili nukleotidna sekvenca koja se nalazi u prirodi, uključujuć i alelne varijacije. DT protein ima aminokiselinsku sekvencu ili nukleotidnu sekvencu koja nije namerno modifikovana.
[0059] Antitela prema ovom pronalasku su generalno izolovana ili rekombinantna. "Izolovan", kada se koristi za opisivanje različitih ovde opisanih polipeptida, označava polipeptid koji je identifikovan i odvojen i/ili oporavljen iz ć elije ili ć elijske kulture iz koje je eksprimiran. Uobičajeno, izolovani polipeptid ć e se dobiti najmanje jednim korakom pre čiš ć avanja. "Izolovano antitelo" se odnosi na antitelo koje je suštinski bez drugih antitela koja imaju različite antigenske specifičnosti. "Rekombinantni" znači da se antitela stvaraju primenom tehnika rekombinantne nukleinske kiseline u egzogenim ć elijama doma ć inima.
[0060] "Specifično vezivanje" ili "specifično se vezuje za" ili je "specifično za" određeni antigen ili epitop znači vezivanje koje se merljivo razlikuje od nespecifične interakcije. Specifično vezivanje se može meriti, na primer, određivanjem vezivanja molekula u poređenju sa vezivanjem kontrolnog molekula, koji je generalno molekul slične strukture koji nema vezujuć u aktivnost. Na primer, specifično vezivanje se može odrediti konkurencijom sa kontrolnim molekulom koji je sličan meti.
[0061] Specifično vezivanje za određeni antigen ili epitop može se pokazati, na primer, antitelom koje ima KD za antigen ili epitop od najmanje oko 10-4 M, najmanje oko 10-5 M, najmanje oko 10-6 M, najmanje oko 10-7 M, najmanje oko 10-8 M, bar oko 10-9 M, alternativno najmanje oko 10-10 M, najmanje oko 10-11 M, najmanje oko 10-12 M ili više, gde se KD odnosi na brzinu disocijacije određene interakcije antitelo-antigen. Obično, antitelo koje se specifično vezuje za antigen imać e KD koji je 20-, 50-, 100-, 500-, 1000-, 5000-, 10.000- ili više puta već i za kontrolni molekul u odnosu na antigen ili epitop.
[0062] Takođe, specifično vezivanje za određeni antigen ili epitop može se pokazati, na primer, antitelom koje ima KA ili Ka za antigen ili epitop od najmanje 20-, 50-, 100-, 500-, 1000 -, 5.000-, 10.000- ili više puta već i za epitop u odnosu na kontrolu, gde se KA ili Ka odnosi na stopu asocijacije određene interakcije antitela-antigena.
[0063] Bispecifična antitela koja ko-angažuju CD3 i ciljani antigen tumora je dizajnirana i korišćena da preusmeri T ć elije da napadnu i liziraju ciljane ć elije tumora. Primeri uklju čuju formate BiTE I DART, koji monovalentno angažuju CD3 I tumorski antigen. Dok je pristup ciljanja CD3 pokazao značajno obećanje, uobičajeni neželjeni efekat takvih terapija je povezana proizvodnja citokina, što često dovodi do sindroma oslobađanja toksičnih citokina. Pošto domen vezivanja anti-CD3 bispecifičnog antitela zahvata sve T ć elije, regrutovan je podskup CD4 T ć elija sa visokim procentom citokina. Štaviše, podskup CD4 T ć elija uključuje regulatorne T ć elije, čije regrutovanje i širenje potencijalno mogu dovesti do potiskivanja imuniteta i mogu imati negativan uticaj na dugotrajnu supresiju tumora. Osim toga, ovi formati ne sadr že Fc domene i prikazuju veoma kratak period poluraspada seruma kod pacijenata.
[0064] Iako je pristup ciljanja CD3 pokazao značajno obeć anje, uobičajen sporedni efekat takvih terapija je povezana proizvodnja citokina, što često dovodi do sindroma oslobađanja toksičnih citokina. Zbog Anti-CD3 vezujuć eg domena bispecifičnog antitela zahvataju se sve T ć elije, CD4 T ć eliju koja proizvodi visoke citokine regrutuje se podskup.Štaviše, podskup CD4 T ć elija uključuje regulatorne T ć elije, čije regrutovanje i širenje potencijalno može dovesti do imunološke supresije i imaju negativan uticaj na dugotrajnu supresiju tumora. Jedan takav moguć i na čin za smanjenje proizvodnje citokina i eventualno smanjenje aktivacije CD4 T ć elija je za smanjenje afiniteta domena anti-CD3 za CD3.
[0065] Shodno tome, u nekim izvođenjima predstavljeni pronalazak obezbeđuje konstrukte antitela koji sadrže domene koji vezuju antigen anti-CD3 su „jaki“ ili „visokog afiniteta“ za vezivanje za CD3 (npr. jedan primer su teški I laki promenljivi domeni prikazani kao H1.30_L1.47 (opciono uključuju ć i naelektrisani linker prema potrebi)), a takođe se vezuje za CD38.
1
[0066] Treba istaći da je „visoke, srednje,niske “anti-CD3 sekvence ovog pronalaska mogu se koristiti u različitim formatima heterodimerizacije. Dok već ina pronalaska ovde koristi „otvara č flaše “ format heterodimera, ove promenljive teške i lake sekvence, kao i scFv sekvence (I Fab sekvence koje sadrže ove promenljive teške i lake sekvence) mogu se koristiti u drugim formatima, kao što su prikazani na slici 2 VO publikacije br. 2014/145806.
[0067] Shodno tome, ovaj pronalazak obezbeđuje heterodimerna antitela koja se vezuju za dva različita antigena, na primer antitela su "bispecifična", po tome što se vezuju za dva različita ciljna antigena, generalno ciljana na tumorske antigene (TTA), kao što je dole opisano. Ova heterodimerna antitela mogu vezati ove ciljne antigene ili monovalentno (npr. Postoji jedan domen koji vezuje antigen, kao što je promenljivi par teških i promenljivih lakih domena) ili bivalentno (postoje dva domena za vezivanje antigena koji svaki nezavisno vezuju antigen). Heterodimerna antitela prema pronalasku su zasnovana na upotrebi različitih monomera koji sadrže aminokiselinske supstitucije koje "iskrivljuju" formiranje heterodimera nad homodimerima, kako je dole detaljnije opisano, zajedno sa "pI varijantama" koje omoguć avaju jednostavno pre čiš ć avanje heterodimera iz homodimera, kao što je slično dole navedeno. Za heterodimerna bispecifična antitela prema pronalasku, ovaj pronalazak se generalno oslanja na upotrebu projektovanih ili varijantnih Fc domena koji se mogu sami sastaviti u proizvodnim ć elijama za proizvodnju heterodimernih proteina, i metode za generisanje i prečišć avanje takvih heterodimernih proteina.
III. Antitela
[0068] Ovaj pronalazak se odnosi na stvaranje bispecifičnih antitela koja vezuju dva različita antigena, npr. CD3 i ciljni antigen tumora, kao što su CD20, CD38 i CD123, i generalno su terapijska antitela. Kao što je dole objašnjeno, termin "antitelo" se generalno koristi. Antitela koja pronađu upotrebu u ovom pronalasku mogu poprimiti brojne formate koji su ovde opisani, uklju čujuć i tradicionalna antitela, kao i ovde opisane derivate antitela, fragmente i mimetike.
[0069] Tradicionalne strukturne jedinice antitela tipično sadrže tetramer. Svaki tetramer se obično sastoji od dva identična para polipeptidnih lanaca, od kojih svaki par ima jedan "lagani" (obi čno ima molekulsku težinu od oko 25 kDa) i jedan "težak" lanac (obično ima molekulsku masu od oko 50-70 kDa) . Ljudski laki lanci se klasifikuju kao kapa i lambda lanci. Ovo otkrić e je usmereno na klasu IgG, koja ima nekoliko podklasa, uključujuć i, ali bez ograničenja, na IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4. Prema tome, "izotip" koji se ovde koristi podrazumeva bilo koju od podklasa imunoglobulina definisanih hemijskim i antigenim karakteristikama njihovih stalnih regiona. Treba razumeti da terapeutska antitela mogu takođe sadržati hibride izotipova i/ili podklasa. Na primer, kao što je prikazano u US Publication 2009/0163699, ovaj pronalazak pokriva pI inženjering IgG1/G2 hibrida.
[0070] Amino-terminalni deo svakog lanca uključuje varijabilnu regiju od oko 100 do 110 ili više aminokiselina prvenstveno odgovornih za prepoznavanje antigena, uglavnom se u struci naziva i "Fv domen" ili "Fv region". U varijabilnom regionu, tri petlje su sakupljene za svaki od V domena te škog lanca i lakog lanca kako bi se formiralo mesto za vezivanje antigena. Svaka petlja se naziva regionom za određivanje komplementarnosti (u daljem tekstu "CDR"), u kome je varijacija u aminokiselinskoj sekvenci najznačajnija. "Varijabla" se odnosi na činjenicu da se određeni segmenti varijabilnog regiona uveliko razlikuju u sekvenci među antitelima. Varijabilnost unutar promenljivog regiona nije ravnomerno raspoređena. Umesto toga, V regioni se sastoje od relativno invarijantnih delova koji se nazivaju okvirni regioni (FRs) od 15-30 aminokiselina odvojenih krać im regionima ekstremne promenljivosti koji se zovu "hipervarijabilni regioni" koji su svaki 9-15 aminokiselina dugački ili duži.
[0071] Svaki VH i VL sastavljen je od tri hipervarijabilna regiona ("komplementarno određujuć i regioni", "CDR") i četiri FR, raspoređena od amino-terminusa do karboksi-termina u sledeć em redosledu: FR1-CDR1-FR2-CDR2- FR3-CDR3-FR4.
[0072] Hipervarijabilna oblast generalno obuhvata aminokiselinske ostatke iz približno aminokiselinskih ostataka 24-34 (LCDR1; "L" označava laki lanac), 50-56 (LCDR2) i 89-97 (LCDR3) u
1
varijabilnom regionu lakog lanca i oko 31-35B (HCDR1; "H" označava teški lanac), 50-65 (HCDR2) i 95-102 (HCDR3) u varijabilnom regionu teškog lanca; Kabat et al., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991) i/ili oni ostaci koji formiraju hipervarijabilnu petlju (npr. Ostaci 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) i 91-96 (LCDR3) u varijabilni region lakog lanca i 26-32 (HCDR1), 53-55 (HCDR2) i 96-101 (HCDR3) u varijabilnom regionu teškog lanca; Chothia i Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917. Specifični CDR prema pronalasku su opisani u nastavku.
[0073] U ovoj specifikaciji, Kabat-ov sistem numerisanja se generalno koristi kada se odnosi na ostatak u promenljivom domenu (približno, ostaci 1-107 varijabilnog regiona lakog lanca i ostaci 1-113 varijabilnog regiona teškog lanca) i sistem numerisanja EU za regije Fc (npr. Kabat et al., supra (1991)).
[0074] Obezbeđen je veliki broj različitih CDR kompleta. U ovom slučaju, "kompletan CDR set" sadrži tri promenljiva laka i tri promenljiva teška CDR -a, npr. a v1CDR1, vlCDR2, vlCDR3, vhCDR1, vhCDR2 i vhCDR3. Oni mogu biti deo već eg promenljivog lakog ili promenljivog teškog domena, ovim redosledom. Osim toga, kako je ovde detaljnije opisano, promenljivi te ški i promenljivi laki domeni mogu biti na odvojenim polipeptidnim lancima, kada se koristi te ški i laki lanac (na primer kada se koriste Fabs), ili na jednom polipeptidnom lancu u slučaju scFv sekvence.
[0075] CDR-i doprinose stvaranju mesta za vezivanje antitela za antigen ili ta čnije epitop. "Epitop" se odnosi na odrednicu koja stupa u interakciju sa specifičnim mestom vezivanja antigena u varijabilnom regionu molekula antitela poznatom kao paratop. Epitopi su grupe molekula kao što su aminokiseline ili bočni lanci šeć era i obično imaju specifične strukturne karakteristike, kao i specifične karakteristike naelektrisanja. Pojedinačni antigen može imati više epitopa.
[0076] Epitop može sadržati aminokiselinske ostatke direktno uključene u vezivanje (takođe nazvane imunodominantna komponenta epitopa) i druge aminokiselinske ostatke, koji nisu direktno uključeni u vezivanje, kao što su aminokiselinski ostaci koji su efikasno blokirani peptidom koji se specifično vezuje za antigen; drugim rečima, aminokiselinski ostatak je unutar otiska peptida koji se specifično vezuje za antigen.
[0077] Epitopi mogu biti konformacioni ili linearni. Konformaconi epitop nastaje prostorno poredanim aminokiselinama iz različitih segmenata linearnog polipeptidnog lanca. Linearni epitop je onaj koji proizvode susedni aminokiselinski ostaci u polipeptidnom lancu. Konformacioni i nekonformacioni epitopi se mogu razlikovati po tome što se vezivanje za prve, ali ne i za poslednje, gubi u prisustvu denaturišuć ih rastvarača.
[0078] Epitop tipično uključuje najmanje 3, a češć e, najmanje 5 ili 8-10 aminokiselina u jedinstvenoj prostornoj konformaciji. Antitela koja prepoznaju isti epitop mogu se proveriti jednostavnim imunološkim testom koji pokazuje sposobnost jednog antitela da blokira vezivanje drugog antitela za ciljni antigen, na primer "binning".
[0079] Karboksi-terminalni deo svakog lanca definiše konstantan region prvenstveno odgovoran za efektorsku funkciju. Kabat i dr. prikupili su brojne primarne sekvence promenljivih regiona te ških i lakih lanaca. Na osnovu stepena očuvanosti sekvenci, oni su klasifikovali pojedinačne primarne sekvence u CDR i okvir i napravili njihovu listu (videti SEQUENCES OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th edition, NIH publication, No. 91-3242, E.A. Kabat et al.).
[0080] U IgG podklasi imunoglobulina, postoji nekoliko imunoglobulinskih domena u te škom lancu. Pod "domenom imunoglobulina (Ig)" ovde se podrazumeva region imunoglobulina koji ima razli čitu tercijarnu strukturu. U ovom pronalasku su od interesa domeni te škog lanca, uključujuć i i domene konstantnih teških (CH) i domena šarki. U kontekstu IgG antitela, svaki IgG izotip ima tri CH regiona. Shodno tome, "CH" domeni u kontekstu IgG su sledeć i: "CH1" se odnosi na pozicije 118-220 prema indeksu EU kao u Kabatu. "CH2" se odnosi na pozicije 237-340 prema indeksu EU kao u Kabatu, a "CH3" se odnosi na pozicije 341-447 prema indeksu EU kao u Kabatu. Kao što je ovde
1
prikazano i dole opisano, varijante pI mogu biti u jednoj ili vi še regija CH, kao i u oblasti šarki, o kojima se govori dole.
[0081] Treba napomenuti da sekvence prikazane ovde počinju u CH1 regionu, pozicija 118; varijabilne regije nisu uključene osim kako je navedeno. Na primer, prva aminokiselina SEK ID NO: 2, iako je označena kao pozicija "1" u listi sekvenci, odgovara poziciji 118 CH1 regiona, prema EU numerisanju.
[0082] Druga vrsta Ig domena teškog lanca je region šarki. Pod "šarkama" ili "zglobovima" ili "šarkama regiona antitela" ili "šarkama regiona imunoglobulina" ovde se podrazumeva fleksibilni polipeptid koji sadrži aminokiseline između prvog i drugog konstantnog domena antitela. Strukturno, IgG CH1 domen završava na poziciji EU 220, a domen IgG CH2 počinje na ostatku EU pozicije 237. Tako je za IgG šarka antitela ovde definisana tako da uključuje pozicije 221 (D221 u IgG1) do 236 (G236 u IgG1), pri čemu je numerisanje prema indeksu EU kao u Kabatu. U nekim izvođenjima, na primer u kontekstu Fc regiona, uključena je donja šarka, pri čemu se "donja šarka" generalno odnosi na položaje 226 ili 230. Kao što je ovde napomenuto, varijante pI se mogu napraviti i u regionu šarki. Vezni peptid može pretežno uključivati sledeć e aminokiselinske ostatke: Gli, Ser, Ala ili Thr. Vezni peptid treba da ima dužinu odgovarajuć u za povezivanje dva molekula na takav način da oni preuzmu ispravnu konformaciju jedan u odnosu na drugi, tako da zadr že željenu aktivnost. U jednom aspektu, linker ima dužinu od oko 1 do 50 aminokiselina, poželjno oko 1 do 30 aminokiselina. U jednom aspektu, mogu se koristiti linkeri dužine 1 do 20 aminokiselina, sa približno 5 do oko 10 aminokiselina u nekim izvođenjima. Korisni linkeri uključuju glicin-serinske polimere, uključujuć i na primer (GS) n, (GSGGS) n, (GGGGS) n i (GGGS) n, gde je n ceo broj od najmanje jednog (i generalno od 3 do 4), glicin-alanin polimeri, alanin-serin polimeri i drugi fleksibilni vezivači. Alternativno, različiti neproteinski polimeri, uključujuć i, ali bez ograničenja, polietilen glikol (PEG), polipropilen glikol, polioksialkilene ili kopolimeri polietilen glikola i polipropilen glikola, mogu se nać i u upotrebi kao povezivači, koji se mogu koristiti kao povezivači.
[0083] Laki lanac generalno sadrži dva domena, promenljivi laki domen (koji sadrži laki lanac CDR -a i zajedno sa promenljivim teškim domenima koji formiraju Fv region), i konstantan laki region lanca (često se naziva CL ili Ck).
[0084] Još jedan region od interesa za dodatne supstitucije, dole opisan, je Fc region.
[0085] Obezbeđeni su različiti domeni antitela. Kao što je ovde opisano i poznato u struci, heterodimerna antitela prema pronalasku sadrže različite domene unutar teških i lakih lanaca, koji se takođe mogu preklapati. Ovi domeni uključuju, ali nisu ograničeni na, Fc domen, CH1 domen, CH2 domen, CH3 domen, domen šarki, teški konstantan domen (CH1-šarka-Fc domen ili CH1-šarka-CH2-CH3), promenljivi teški domen, promenljivi laki domen, laki konstantan domen, Fab domeni i scFv domeni.
[0086] Prema tome, “Fc domen” uključuje -CH2 -CH3 domen i opciono domen sa šarkama. Teški lanac sadrži promenljivi teški domen i konstantan domen, koji uključuje CHI-opcioni domen šarki-Fc koji sadrži CH2-CH3. Laki lanac sadrži promenljivi laki lanac i konstantan laki domen.
[0087] Neka antitela sadrže najmanje jedan scFv domen, koji, iako se prirodno ne javlja, generalno uključuje promenljiv teški domen i promenljivu laki domen, povezan scFv linkerom. Kao što je ovde prikazano, postoji niz pogodnih scFv linkera, koji mogu biti kori šć eni, uključuju ć i tradicionalne peptidne veze, generisane rekombinantnim tehnikama.
[0088] Linker peptid može pretežno uključivati sledeć e aminokiselinske ostatke: Gli, Ser, Ala ili Thr. Linker peptid treba da ima dužinu odgovarajuć u za povezivanje dva molekula na takav način da oni preuzmu ispravnu konformaciju jedan u odnosu na drugi, tako da zadr že željenu aktivnost. U jednom aspektu, linker ima dužinu od oko 1 do 50 aminokiselina, poželjno oko 1 do 30 aminokiselina. U jednom aspektu, mogu se koristiti linkeri dužine 1 do 20 aminokiselina, sa približno 5 do oko 10 aminokiselina u nekim izvođenjima. Korisni linkeri uključuju glicin-serinske polimere, uključujuć i na primer (GS) n, (GSGGS) n, (GGGGS) n i (GGGS) n, gde je n ceo broj od
1
najmanje jednog (i generalno od 3 do 4), glicin-alanin polimeri, alanin-serin polimeri i drugi fleksibilni vezivači. Alternativno, različiti neproteinski polimeri, uključujuć i, ali bez ograničenja, polietilen glikol (PEG), polipropilen glikol, polioksialkilene ili kopolimeri polietilen glikola i polipropilen glikola, mogu se nać i u upotrebi kao linkeri.
[0089] Druge sekvence linkera mogu uključivati bilo koju sekvencu bilo koje dužine domena CL/CH1, ali ne i sve ostatke domena CL/CH1; na primer prvih 5-12 aminokiselinskih ostataka domena CL/CH1. Linkeri se mogu izvesti iz lakog lanca imunoglobulina, na primer Ck ili Cl. Linkeri se mogu izvesti iz teških lanaca imunoglobulina bilo kog izotipa, uključujuć i na primer Cg1, Ci2, Ci3, Ci4, Ca1, Ca2, Cd, Ce i Cm. Sekvence linkera takođe mogu biti izvedene iz drugih proteina kao što su proteini slični Ig (npr. TCR, FcR, KIR), sekvence regiona šarki druge prirodne sekvence iz drugih proteina.
[0090] Linker može biti "povezivač domena", koji se koristi za povezivanje bilo koja dva domena kako je ovde opisano zajedno. Iako se može koristiti bilo koji pogodan linker, mnoge realizacije koriste polimer glicin-serin, uključujuć i na primer (GS) n, (GSGGS) n, (GGGGS) n i (GGGS) n, gde je n ceo broj od najmanje jednog (i generalno od 3 do 4 do 5), kao i bilo koje peptidne sekvence koja omoguć ava rekombinantno vezivanje dva domena sa dovoljnom dužinom i fleksibilnoš ć u da omogu ć i svakom domenu da zadrži svoju biološku funkciju. U nekim slučajevima, i s obzirom na to da se pažnja posveć uje "nasukanosti", kako je dole navedeno, mogu se koristiti linkeri naelektrisanog domena, koji se koriste u nekim realizacijama scFv linkera.
[0091] Linker scFv može biti naelektrisan linker scFv, čiji je broj prikazan na Slici 33. Shodno tome, predviđeni su nabijeni linkeri scFv, kako bi se olakšalo razdvajanje u pI između prvog i drugog monomera. To jest, uključivanjem nabijenog linkera scFv, bilo pozitivnog ili negativnog (ili oboje, u slučaju skela koje koriste scFvs na različitim monomerima), to omoguć ava monomeru koji sadrži nabijeni linker da promeni pI bez dodatnih promena u Fc domenima. Ovi nabijeni linkeri mogu biti zamenjeni u bilo koji scFv koji sadrži standardne linkere. Opet, kao što ć e stručnjacima olakšati, nabijeni scFv linkeri se koriste na ispravnom "lancu" ili monomeru, u skladu sa željenim promenama u pI. Na primer, kao što je ovde diskutovano, da bi se napravilo trostruko F format heterodimerno antitelo, izračunava se originalni pI Fv regiona za svaki od željenih domena za vezivanje antigena, a jedan se bira da napravi scFv, a u zavisnosti od pI, bilo pozitivno ili se biraju negativni linkeri.
[0092] Linkeri sa naelektrisanim domenom se takođe mogu koristiti za poveć anje pI razdvajanja monomera iz pronalaska, pa se stoga oni koji su uključeni na slici 33 mogu koristiti u bilo kom izvođenju u kom se koristi linker.
[0093] Antitela mogu biti pune dužine. Pod "antitelom pune dužine" ovde se podrazumeva struktura koja sačinjava prirodni biološki oblik antitela, uključujuć i varijabilne i konstantne regione, uključujuć i jednu ili više modifikacija kako je ovde opisano, naročito u Fc domenima kako bi se omoguć ilo stvaranje heterodimerizacije ili prečiš ć avanje heterodimeria udaljenih od homodimera. Antitela pune dužine generalno uključuju Fab i Fc domene, a mogu dodatno da sadrže i dodatne domene koji vezuju antigen, kao što je scFvs, kao što je uglavnom prikazano na slikama.
[0094] Antitelo može biti fragment antitela, sve dok sadrži najmanje jedan konstantan domen koji se može projektovati za proizvodnju heterodimera, kao što je pI inženjering. Drugi fragmenti antitela koji se mogu koristiti uključuju fragmente koji sadrže jedan ili više domena CH1, CH2, CH3, šarki i CL prema pronalasku koji su konstruisani pomoć u pI. Na primer, Fc fuzije su fuzije Fc regiona (CH2 i CH3, opciono sa šarkama) spojene sa drugim proteinom. U struci je poznato vi še Fc fuzija koje se mogu poboljšati dodavanjem varijanti heterodimerizacije prema pronalasku. U ovom slučaju, mogu se napraviti fuzije antitela koja sadrže CH1; CH1, CH2 i CH3; CH2; CH3; CH2 i CH3; CH1 i CH3, bilo koji ili svi mogu biti proizvedeni opciono sa šarkama, koristeć i bilo koju kombinaciju ovde opisanih varijanti heterodimerizacije.
2
[0095] Konkretno, formati prikazani na slici 1 su antitela, koja se obično nazivaju “heterodimerna antitela”, što znači da protein ima najmanje dve povezane Fc sekvence koje su samostalno sastavljene u heterodimerni Fc domen.
Himerna i humanizovana antitela
[0096] Antitelo može biti mešavina različitih vrsta, npr. himerno antitelo i/ili humanizovano antitelo. Generalno, i „himerna antitela“ i „humanizovana antitela“ se odnose na antitela koja kombinuju regione iz više od jedne vrste. Na primer, "himerna antitela" tradicionalno obuhvataju promenljivu regiju (e) miša (ili pacova, u nekim slučajevima) i konstantnu regiju (e) čoveka. "Humanizovana antitela" se generalno odnose na ne-humana antitela koja su promenila okvirne regione promenljivog domena za sekvence pronađene u ljudskim antitelima. Generalno, u humanizovanom antitelu, celo antitelo, osim CDR -a, kodirano je polinukleotidom ljudskog porekla ili je identično takvom antitelu, osim u okviru njegovih CDR -a. CDR-ovi, od kojih su neki ili svi kodirani nukleinskim kiselinama poreklom iz organizma koji nije čovek, kalemljeni su u okvir beta lista varijabilne regije humanog antitela da bi se stvorilo antitelo, čija je specifičnost određena ugrađenim CDR-ovima. Stvaranje takvih antitela opisano je u, na primer, VO 92/11018, Jones, 1986, Nature 321: 522-525, Verhoeien et al., 1988, Science 239: 1534-1536. Često se zahteva "povratna mutacija" izabranih ostataka akceptorskog okvira na odgovarajuć e donorske ostatke da se povrati afinitet koji se izgubi u početnoj kalemljenoj konstrukciji (US 5530101; US 5585089; US 5693761; US 5693762; US 6180370; US 5859205; US 5821337; US 6054297; US 6407213). Humanizovano antitelo ć e takođe optimalno sadržati barem deo konstantne regije imunoglobulina, tipično one humanog imunoglobulina, pa ć e stoga tipično sadržavati humani Fc region. Humanizovana antitela se takođe mogu generisati pomoć u miševa sa genetski modifikovanim imunološkim sistemom. Rokue et al., 2004, Biotechnol. Prog.20: 639-654.
[0097] Različite tehnike i metode za humanizovanje i preoblikovanje ne-humanih antitela dobro su poznate u oblasti (vidi e Tsurushita & Vasquez, 2004, Humanization of Monoclonal Antibodies, Molecular Biology of B Cells, 533-545, Elsevier Science (USA), i tamo navedene reference). Metode humanizacije uključuju, ali nisu ograničene na metode opisane u Jones et al., 1986, Nature 321:522-525; Riechmann et al.,1988; Nature 332:323-329; Verhoeyen et al., 1988, Science, 239:1534-1536; Queen et al., 1989, Proc Natl Acad Sci, USA 86:10029-33; He et al., 1998, J. Immunol. 160: 1029-1035; Carter et al., 1992, Proc Natl Acad Sci USA 89:4285-9, Presta et al., 1997, Cancer Res. 57(20):4593-9; Gorman et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:4181-4185; O’Connor et al., 1998, Protein Eng 11:321-8.
[0098] Humanizacija ili drugi postupci za smanjenje imunogenosti varijabilnih regiona ne-humanih antitela mogu uključivati metode ponovnog nanošenja površine, kao što je opisano na primer u Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Akad. Sci. USA 91: 969-973.
[0099] Ponekad je roditeljsko antitelo sazrelo sa afinitetom, kao što je poznato u oblasti. Za humanizaciju i sazrevanje afiniteta mogu se koristiti metode zasnovane na strukturi, na primer kako je opisano u US2006-0008883. Metode zasnovane na selekciji mogu se koristiti za humanizovanje i/ili afinitet zrelih antitela varijabilnih regiona, uklju čujuć i, ali bez ograničenja, metode opisane u Wu et al., 1999, J. Mol. Biol. 294: 151-162; Baca i sar., 1997, J. Biol. Chem. 272 (16): 10678-10684; Rosok i sar., 1996, J. Biol. Chem. 271 (37): 22611-22618; Rader et al., 1998, Proc. Natl. Akad. Sci. USA 95: 8910-8915; Krauss et al., 2003, Protein Engineering 16 (10): 753-759. Druge metode humanizacije mogu uključivati kalemljenje samo delova CDR -a, uključujuć i, ali bez ograničenja, metode opisane u Tan et al., 2002, J. Immunol. 169: 1119-1125; De Pascalis i sar., 2002, J. Immunol. 169: 3076-3084.
IV. Heterodimerna antitela
[0100] Obezbeđena su heterodimerna antitela koja se oslanjaju na upotrebu dve razli čite varijante Fc sekvenci teškog lanca, koje ć e se same sastaviti da formiraju heterodimerne Fc domene i heterodimerna antitela.
[0101] Ovaj pronalazak je usmeren na nove konstrukte za obezbeđivanje heterodimernih antitela koja omoguć avaju vezivanje za više od jednog antigena ili liganda, npr. kako bi se omogu ć ilo bispecifično vezivanje. Konstrukti heterodimernih antitela zasnovani su na samo-sastavljajuć oj prirodi dva Fc domena teških lanaca antitela, npr. dva „monomera“ koji se sastavljaju u „dimer“. Heterodimerna antitela nastaju promenom aminokiselinske sekvence svakog monomera kao što je dole detaljnije objašnjeno. Prema tome, ovaj pronalazak je generalno usmeren na stvaranje heterodimernih antitela koja mogu koangažovati antigene na nekoliko načina, oslanjajuć i se na varijante aminokiselina u konstantnim regionima koje su različite na svakom lancu kako bi promovisale heterodimernu formaciju i/ili omoguć ile lakše prečiš ć avanje heterodimera nad homodimerima.
[0102] Obezbeđena su bispecifična antitela. Tekuć i problem u tehnologijama antitela je želja za "bispecifičnim" antitelima koja se vezuju za dva različita antigena istovremeno, generalno dozvoljavajuć i tako dovođenje različitih antigena u blizinu i rezultiraju ć i novim funkcionalnostima i novim terapijama. Generalno, ova antitela se proizvode uključivanjem gena za svaki teški i laki lanac u ć elije doma ć ina. Ovo generalno dovodi do stvaranja željenog heterodimera (A-B), kao i dva homodimera (A-A i B-B (ne uključujuć i heterodimerna pitanja lakog lanca)). Međutim, glavna prepreka u stvaranju bispecifičnih antitela je poteškoć a u prečiš ć avanju heterodimernih antitela dalje od homodimernih antitela i/ili podsticanju formiranja heterodimera u odnosu na formiranje homodimera.
[0103] Postoje brojni mehanizmi koji se mogu koristiti za generisanje heterodimera. Osim toga, kako ć e stručnjacima značiti, ovi mehanizmi se mogu kombinovati kako bi se obezbedila visoka heterodimerizacija. Tako se varijante aminokiselina koje dovode do proizvodnje heterodimera nazivaju „varijante heterodimerizacije“. Kao što je dole diskutovano, varijante heterodimerizacije mogu uključivati steričke varijante (npr. Dole opisane varijante "dugmadi i rupe" ili "iskrivljene" i dole opisane varijante "parova naboja"), kao i "pI varijante", što omoguć ava prečiš ć avanje homodimera dalje od heterodimera. VO2014/145806 koji se pominje u diskusiji ispod, opisuje „varijante heterodimerizacije“, korisni mehanizmi za heterodimerizaciju uklju čuju „dugmad i rupe“ („KIH“; ponekad ovde kao „varijante“ nakrivljenosti (vidi diskusiju u VO2014/145806), „elektrostatičko upravljanje "ili" parovi naboja "kako je opisano u VO2014/145806, varijante pI kako je opisano u VO2014/145806, i opšte dodatne varijante Fc kako je navedeno u VO2014/145806 i niže.
[0104] Postoji nekoliko osnovnih mehanizama koji mogu dovesti do lakšeg prečišć avanja heterodimernih antitela; jedna se oslanja na upotrebu pI varijanti, tako da svaki monomer ima različit pI, omoguć avaju ć i tako izoelektrično prečiš ć avanje dimernih proteina A-A, A-B i B-B. Alternativno, neki formati skela, kao što je format „trostruki F“, takođe dozvoljavaju razdvajanje na osnovu veličine. Kao što je dalje dole navedeno, takođe je moguć e "iskriviti" formiranje heterodimera nad homodimerima. Tako, kombinacija varijacija steri čke heterodimerizacije i varijanti pI ili naelektrisanog para pronalaze posebnu upotrebu u pronalasku.
[0105] Predviđeno je da one uključuju varijante iskrivljenosti, koje podstiču nastanak heterodimerizacije preko formacije homodimerizacije, zajedno sa varijantama pI, koje poveć avaju razliku pI između dva monomera.
[0106] Dodatno, kako je dole detaljnije opisano, mogu biti korišćene, a u zavisnosti od formata heterodimernog antitela, pI varijante mogu biti sadržane u konstantnim i/ili Fc domenima monomera, ili u naelektrisanim linkerima, bilo u domenskim linkerima, bilo u scFv linkerima. Odnosno, skele koje koriste scFv (ove) kao što je Triple F format mogu uključivati naelektrisane scFv linkere (bilo pozitivne ili negativne), koje daju dodatno poveć anje pI u svrhe pre čiš ć avanja. Kao što ć e stručnjacima značiti, neki formati Triple F su korisni sa samo naelektrisanim linkerima scFv i bez dodatnih podešavanja pI, iako pronalazak pruža varijante pI koje se nalaze na jednom ili oba monomera i/ili linkerima domena takođe. Pored toga, dodatni inženjering aminokiselina za alternativne funkcionalnosti takođe može doneti promene pI, kao što su Fc, FcRn i KO varijante.
[0107] Ako se pI koristi kao mehanizam za odvajanje kako bi se omoguć ilo prečiš ć avanje heterodimernih proteina, varijante aminokiselina se mogu uvesti u jedan ili oba monomerna polipeptida; to jest, pI jednog od monomera (ovde se radi jednostavnosti naziva "monomer A") može se projektovati dalje od monomera B, ili se promeniti oba monomera A i B, s poveć anjem pI monomera A i pI monomera B opada. Kao što je detaljnije opisano u nastavku, promene pI jednog ili oba monomera mogu se izvršiti uklanjanjem ili dodavanjem naelektrisanog ostatka (npr. Neutralna aminokiselina se zamenjuje pozitivno ili negativno naelektrisanim aminokiselinskim ostatkom, npr. Glicin u glutaminsku kiselinu), promena naelektrisanog ostatka iz pozitivnog ili negativnog u suprotno naelektrisanje (asparaginska kiselina u lizin) ili promena naelektrisanog ostatka u neutralni ostatak (npr. gubitak naelektrisanja; lizin u serin.). Nekoliko ovih varijanti prikazano je na slikama.
[0108] Dovoljna promena u pI u najmanje jednom od monomera je stvorena tako da se heterodimeri mogu odvojiti od homodimera. Kao što ć e stručnjacima značiti, i kao što je dole objašnjeno, ovo se može uraditi korišć enjem konstantnog regiona teškog lanca "divljeg tipa" i varijantnog regiona koji je projektovan da poveć a ili smanji svoj pI (vt A- B ili vt A - -B), ili poveć anjem jednog regiona i smanjenjem drugog regiona (A+-B- ili A- B+).
[0109] Obezbeđene su varijante aminokiselina u konstantnim regionima antitela koje su usmerene na promenu izoelektrične tačke (pI) najmanje jednog, ako ne i oba, monomera dimernog proteina u formiranje "pI antitela") uključivanjem aminokiselinske supstitucije ("pI varijante" ili "pI supstitucije") u jedan ili oba monomera. Kao što je ovde prikazano, odvajanje heterodimera od dva homodimera može se postić i ako se pI dva monomera razlikuju samo za 0,1 pH jedinicu, sa 0,2, 0,3, 0,4 i 0,5 ili već om upotrebom u ovom pronalasku.
[0110] Kao što ć e stručnjaciima značiti, broj varijanti pI koje treba uključiti u svaki ili oba monomera (monomera) da bi se postiglo dobro razdvajanje zavisić e delimično od početnog pI komponenti, na primer u trojnom F format, početni pi interesantnog scFv -a i Fab -a. To jest, da bi se utvrdilo koji monomer da se inženjerira ili u kom „smeru“ (npr. Pozitivniji ili negativniji), izračunavaju se Fv sekvence dva ciljna antigena i odatle se donosi odluka. Kao što je poznato u oblasti, različiti Fv ć e imati različite početne pI koji se koriste u ovom pronalasku. Uopšteno, kako je ovdje opisano, pI su konstruisani tako da rezultiraju ukupnom razlikom u pI svakog monomera od najmanje oko 0,1 trupaca, pri čemu se preferira 0,2 do 0,5 kako je ovdje navedeno.
[0111] Štaviše, kakoć e ceniti stručnjaci u ovoj oblasti i koji je ovde opisano, u nekim izvođenjima, heterodimeri se mogu odvojiti od homodimera na osnovu veličine. Kao što je prikazano na slici 1, na primer, nekoliko formata dozvoljava razdvajanje heterodimera i homodimera na osnovu veli čine.
[0112] U slučaju kada se koriste varijante pI za postizanje heterodimerizacije, kori šć enjem konstantnih oblasti (a) teškog lanca, obezbeđen je modularniji pristup dizajniranju i prečišć avanju bispecifičnih proteina, uključujuć i antitela. Tako, u nekim izvođenjima, varijante heterodimerizacije (uključujuć i varijante heterodimerizacije iskrivljenja i prečiš ć avanja) nisu uključene u varijabilne regione, tako da svako pojedinačno antitelo mora biti projektovano. Osim toga, moguć nost imunogenosti koja proizilazi iz varijanti pI značajno se smanjuje uvozom varijanti pI iz različitih izotipa IgG tako da se pI menja bez uvođenja značajne imunogenosti. Dakle, dodatni problem koji treba rešiti je razjašnjenje niskih pI konstantnih domena sa visokim sadržajem humanih sekvenci, npr. minimiziranje ili izbegavanje ne-humanih ostataka na bilo kom odre đenom položaju.
[0113] Sporedna korist koja se može pojaviti sa ovim pI inženjeringom je takođe produženje vremena poluraspada seruma i poveć ano vezivanje FcRn. To, kao što je opisano u US20120028304, snižavanje pI konstante antitela domena (uključujuć i one koji se nalaze u antitelima i fuzijama Fc) može dovesti do dužeg zadržavanja seruma in vivo. Ove varijante pI za produženje vremena poluraspada seruma takođe olakšavaju promene pI radi prečišć avanja.
2
[0114] Pored toga, treba napomenuti da pI varijante varijanti heterodimerizacije daju dodatnu korist za analitiku i proces kontrole kvaliteta bispecifičnih antitela, jer je sposobnost da se eliminišu, minimiziraju i razlikuju kada su prisutni homodimeri značajna. Slično, važna je i sposobnost pouzdanog testiranja ponovljivosti proizvodnje heterodimernih antitela.
Varijante heterodimerizacije
[0115] Pod uslovom da su heterodimerni proteini, uključujuć i heterodimerna antitela u raznim formatima, koje koriste heterodimerne varijante kako bi omoguć ili heterodimerne formiranje i / ili prečiš ć avanje daleko od homodimera.
[0116] Postoje brojni pogodni parovi setova varijante kose heterodimerizacije. Ove varijante dolaze u “paru” “setova”. To jest, jedan set para je ugrađen u prvi monomer i drugi set para je ugrađen u drugi monomer. Treba napomenuti da se ovi skupovi ne pona šaju nužno kao varijante “dugmad i rupe”, sa korespondencijom jedne naspram druge između ostatka na jednom monomeru i ostatku na drugom monomeru; to jest, ovi parovi setova čine interfejs između dva monomera koji podstiču formaciju heterodimera i odvratiti formaciju homodimera, omoguć avaju ć i procenat heterodimetara koji spontano formiraju pod biološkim uslovima da budu preko 90%, više nego očekivanih 50% (25% homodimera A / a: 50% heterodimer A / B: 25% homodimer b / b).
Sterne varijante
[0117] Formiranje heterodimera se može olakšati dodavanjem sternih varijanti. Odnosno, promenom aminokiseline u svakom teškom lancu, različiti teški lanci imaju već e šanse da se udruže u heterodimerne strukture nego da formiraju homodimere sa istim Fc aminokiselinskim sekvencama. Uključene su odgovaraju ć e sterne varijante na slici 29.
[0118] Jedan mehanizam se generalno pominje u struci kao “rupice i rupe”, koja se odnosi na inženjering aminokiselina koji stvara sterne uticaje koji favorizuju heterodimernu formaciju, a famozna homodimerna formacija se takođe može opciono koristiti; ovo se ponekad naziva “dugmad i rupe”, kako je opisano u Ridgway et al., Protein Engineering 9(7):617 (1996); Atwell et al.,J. Mol. Biol. 1997 270:26; US Patent No. 8,216,805. Slike identifikuju brojne parove “monomere A – monomere B” koji se oslanjaju na „dugmad i rupe“. Osim toga, kako je opisano u Merchant et al., Nature Biotech. 16: 677 (1998), Ove mutacije “dugmeta I rupe” mogu se kombinovati sa disulfidnim vezama kako bi se iskosilo formiranje do heterodimerizacije.
[0119] Dodatni mehanizam koji nalazi primenu u formiranju heterodimera se ponekad naziva I „elektrostatičko upravljanje“ kako je opisano u Gunasekaran et al., J. Biol. Chem. 285(25):19637 (2010). Ovo se ponekad ovde naziva “parovi naelektrisanja”. U ovom izbvođenju, elektrostatika se koristi za iskrivljavanje formacije prema heterodimerizaciji. Kao štoć e stručnjaci ceniti, oni takođe mogu imati uticaja na pI, pa stoga na prečišć avanje, pa bi u nekim slučajevima takođe moglo biti razmatrane varijante pI. Međutim, pošto su oni generisani da bi se izvršila heterodimerizacija I nisu korišć eni kao alati za prečiš ć avanje, klasifikovani su kao „sterne varijante“. Ovo uključuje, ali nije ograničeno na, D221E/P228E/L368E uparen sa D221R/P228R/K409R (npr. Ovo su “monomerni odgovaraju ć ih setova”) I C220E/P228E/368E uparen sa C220R/E224R/P228R/K409R.
[0120] Dodatne varijante monomera A i monomera B koje se mogu kombinovati sa drugim varijantama, opciono i nezavisno u bilo kojoj količini, kao što su navedene varijante pI ovde ili druge sterne varijante koje su prikazane na slici 37 iz US 2012/0149876.
[0121] Sterne varijante navedene ovde mogu se opciono i nezavisno inkorporirati u bilo koju varijantu pI (ili druge varijante kao što su varijante Fc, varijante FcRn,Itd.) u jedan ili oba monomera, i mogu biti nezavisno i opciono uključeni ili isključeni iz proteina pronalaska.
[0122] Lista odgovarajuć ih kosih varijanti se nalazi na slici 29, sa slikom 34 koja prikazuje neke parove određene korisnosti mnogim izvođenjima. Naročito se koriste u mnogim izvođenjima parovi skupova koji uključuju, ali nisu ograničeni na, S364K/E357K: L368D/K370S; L368D/K370S: S364K; L368E/K370S: S364K; T411T/E360E/K362E: D401K; L368D/K370S: S364K/E357L I K370S: S364K/E357K. U smislu nomenklature, par „S364K/E357K: L368D/K370S“ znači da je jedan od monomera ima dvostruku varijantu set S364K/E357K i drugi ima dvostruku varijantu L368D/K370S.
pI (izoelektrična tačka) Varijante za heterodimere
[0123] Uopšteno, kako ć e stručnjacima značiti, postoje dve opšte kategorije varijanti pI: one koje poveć avaju pI proteina (bazne promene) i one koje smanjuju pI proteina (kisele promene). Kao što je ovde opisano, mogu se izvršiti sve kombinacije ovih varijanti: jedan monomer može biti divlji tip, ili varijanta koja ne pokazuje značajno drugačiji pI od divljeg tipa, a druga može biti ili bazičnija ili kiselija. Alternativno, svaki monomer se menja, jedan na vi še bazičnih i jedan na više kiselih.
[0124] Poželjne kombinacije varijanti pI prikazane su na slici 30. Kao što je ovde prikazano i prikazano na slikama, ove promene su prikazane u odnosu na IgG1, ali svi izotipovi se mogu promeniti na ovaj način, kao i izotipski hibridi. U slučaju kada je konstantan domen teškog lanca iz IgG2-4, mogu se takođe koristiti R133E i R133K.
Heterodimeri antitela Varijante lakih lanaca
[0125] U slučaju heterodimera zasnovanih na antitelima, npr. gde bar jedan od monomera sadr ži laki lanac pored domena teškog lanca, pI varijante se takođe mogu napraviti u lakom lancu. Zamene aminokiselina za snižavanje pI lakog lanca uključuju, ali nisu ograničene na, K126E, K126K, K145E, K145K, N152D, S156E, K169E, S202E, K207E i dodavanje peptida DEDE na c-kraju lakog lanca. Promene u ovoj kategoriji zasnovane na konstantnom lambda lakom lancu uklju čuju jednu ili više zamena na R108K, K124E, K126K, N138D, K145T i K199E. Osim toga, može se takođe poveć ati pI lakih lanaca.
Izotipske varijante
[0126] Pored toga, antitela se oslanjaju na "uvoz" pI aminokiselina na određenim položajima iz jednog izotipa IgG u drugi, čime se smanjuje ili eliminiše moguć nost da se u varijante unese neželjena imunogenost. Određeni broj njih prikazan je na slici 21 US Publ. 2014/0370013. To jest, IgG1 je uobičajen izotip za terapijska antitela iz različitih razloga, uključujuć i visoku efektorsku funkciju. Međutim, teški konstantni region IgG1 ima već i pI od IgG2 (8,10 naspram 7,31). Uvođenjem ostataka IgG2 na određenim pozicijama u okosnicu IgG1, pI rezultujuć eg monomera se smanjuje (ili poveć ava) i dodatno pokazuje duži period poluraspada u serumu. Na primer, IgG1 ima glicin (pI 5,97) na položaju 137, a IgG2 ima glutaminsku kiselinu (pI 3,22); uvoz glutaminske kiseline uticać e na pI rezultuju ć eg proteina. Kao što je dole opisano, generalno je potreban veliki broj aminokiselinskih supstitucija da bi značajno uticao na pI varijantnog antitela. Međutim, treba napomenuti kako je dole objašnjeno da čak i promene u molekulima IgG2 omoguć avaju produženje poluvremena seruma.
[0127] Alternativno, vrše se neizotipske promene aminokiselina, bilo da bi se smanjilo ukupno stanje naelektrisanja rezultujuć eg proteina (npr. Promenom ve ć e pI aminokiseline u ni žu pI aminokiselinu), ili da bi se omoguć ila prilagođavanja u strukturi radi stabilnosti itd., kako je dalje dole opisano.
[0128] Osim toga, pI inženjeringom i teških i lakih konstantnih domena, mogu se videti značajne promene u svakom monomeru heterodimera. Kao što je ovde diskutovano, razlikovanje pI dva monomera za najmanje 0,5 može omoguć iti razdvajanje jonoizmenjivačkom hromatografijom ili izoelektričnim fokusiranjem ili drugim metodama osetljivim na izoelektričnu tačku.
Izračunavanje pI
[0129] PI svakog monomera može zavisiti od pI varijantnog konstantnog domena teškog lanca i pI ukupnog monomera, uključujuć i varijantni konstantan domen teškog lanca i fuzionog partnera. Prema tome, u nekim rešenjima, promena u pI je izračunata na osnovu varijante konstantnog
2
domena teškog lanca, koristeć i grafikon na slici 19 US Pub -a. 2014/0370013. Kao što je ovde diskutovano, o tome koji monomer koristiti generalno odlučuju inherentni pI regiona Fv i skele. Alternativno, pI svakog monomera se može uporediti.
pI Varijante koje takođe daju bolje vezivanje FcRn in vivo
[0130] U slučaju kada varijanta pI smanjuje pI monomera, oni mogu imati dodatnu korist od poboljšanja zadržavanja seruma in vivo.
[0131] Iako se još uvek ispituje, veruje se da Fc regioni imaju duže vreme poluraspada in vivo, jer vezivanje za FcRn pri pH 6 u endozomu oduzima Fc (Ghetie i Vard, 1997 Immunol Todai. 18 (12): 592- 598). Endosomalni odeljak zatim reciklira Fc na ć elijsku površinu. Kada se odeljak otvori u van ć elijski prostor, viši pH, ∼7,4, indukuje oslobađanje Fc nazad u krv. Kod miševa, Dall ’Ackua et al. su pokazali da su Fc mutanti sa poveć anim vezivanjem FcRn pri pH 6 i pH 7,4 zapravo imali smanjene koncentracije u serumu i isto vreme poluraspada kao i Fc divljeg tipa (Dall ’Ackua et al.
2002, J. Immunol. 169: 5171-5180).
Smatra se da poveć ani afinitet Fc za FcRn pri pH 7,4 zabranjuje oslobađanje Fc nazad u krv. Prema tome, Fc mutacije koje ć e pove ć ati poluživot Fc in vivo idealno ć e pove ć ati vezivanje FcRn pri nižem pH, a istovremeno omoguć iti oslobađanje Fc pri višem pH. Aminokiselina histidin menja svoje stanje naelektrisanja u rasponu pH od 6,0 do 7,4. Stoga nije iznenađujuć e prona ć i njegove ostatke na važnim pozicijama u kompleksu Fc/FcRn.
[0132] Nedavno je predloženo da antitela sa promenljivim regionima koji imaju niže izoelektrične tačke takođe mogu imati duži period poluraspada u serumu (Igava et al., 2010 PEDS. 23 (5): 385-392). Međutim, mehanizam toga je još uvek slabo shvać en. Štaviše, varijabilne regije se razlikuju od antitela do antitela. Varijante konstantnog regiona sa smanjenim pI i produ ženim poluraspadom pružile bi modularniji pristup poboljšanju farmakokinetičkih svojstava antitela, kako je ovde opisano.
Dodatne varijante Fc za dodatnu funkcionalnost
[0133] Pored varijanti pI aminokiselina, postoji niz korisnih modifikacija Fc aminokiselina koje se mogu izvesti iz različitih razloga, uključujuć i, ali bez ograničenja, promenu vezivanja za jedan ili više receptora FciR, izmenjeno vezivanje za FcRn receptore itd.
[0134] Shodno tome, proteini mogu uključivati modifikacije aminokiselina, uključujuć i ovde iznete varijante heterodimerizacije, koje uključuju pI varijante i steričke varijante. Svaki skup varijanti može biti nezavisno i opciono uključen ili isključen iz bilo kog posebnog heterodimernog proteina.
Varijante FcgR
[0135] Shodno tome, postoji niz korisnih Fc supstitucija koje se mogu izvr šiti da bi se promenilo vezivanje za jedan ili više FciR receptora. Zamene koje rezultiraju poveć anjem ili smanjenim vezivanjem mogu biti korisne. Na primer, poznato je da poveć ano vezivanje za Fc RIIIa generalno rezultira poveć anjem ADCC (antitela zavisna od ć elija posredovana citotoksi čnost; reakcija posredovana ć elijom u kojoj nespecifične citotoksične ć elije koje eksprimiraju FciR prepoznaju vezano antitelo na ciljnoj ć eliji i kasnije izazivaju lizu ciljnih ć elija). Sli čno, smanjeno vezivanje za FciRIIb (inhibitorni receptor) takođe može biti korisno u nekim okolnostima. Zamene aminokiselina koje se koriste u ovom pronalasku uključuju one navedene u US2006-0024298 (naročito slika 41), US2006-0121032, US2006-0235208, US2007-014817. Posebne varijante koje se koriste uključuju, ali nisu ograničene na, 236A, 239D, 239E, 332E, 332D, 239D/332E, 267D, 267E, 328F, 267E/328F, 236A/332E, 239D/332E/330I, 239D, 332E /330L, 243A, 243L, 264A, 264V i 299T.
[0136] Pored toga, postoje dodatne zamene Fc koje pronalaze primenu u poveć anom vezivanju za receptor FcRn i poveć anom periodu poluraspada u serumu, kako je posebno otkriveno u US20090163699 uključujuć i, ali bez ograničenja na, 434S, 434A, 428L, 308F, 2591, 428L /434S, 259I/308F, 436I/428L, 4361 ili V/434S, 436V/428L i 259I/308F/428L.
2
Varijante ablacije
[0137] Slično, druga kategorija funkcionalnih varijanti su varijante "FcgR ablacije" ili "Fc knock out (FcKO ili KO)" varijante. U ovim izvođenjima, za neke terapeutske primene, poželjno je smanjiti ili ukloniti normalno vezivanje Fc domena za jedan ili više ili sve receptore Fcg (npr. radnje. To je, na primer, u mnogim izvođenjima, naročito u upotrebi bispecifičnih antitela koja se vezuju za CD3 monovalentno, generalno je poželjno ablatirati vezivanje FciRIIIa da bi se eliminisala ili značajno smanjila aktivnost ADCC, pri čemu jedan od Fc domena sadrži jednu ili više ablacija Fcg receptora varijante. Ove varijacije ablacije su prikazane na slici 31, i svaka mo že biti nezavisno i opciono uključena ili isključena, sa poželjnim aspektima koji koriste varijacije ablacije izabrane iz grupe koju čine G236R/L328R, E233P/L234V/L235A/G236del/S239K,
E233P/L234V/L235A/G236del/S267K,
E233P/L234V/L235A/G236del/S239K/A327G,|
E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/A327G i E233P/L234V/L235A/G236del. Treba napomenuti da varijante ablacije na koje se ovde poziva ablatiraju vezivanje FcgR, ali generalno ne vezuju FcRn.
Kombinacija heterodimernih i Fc varijanti
[0138] Kao što ć e značiti stručnjacima iz oblasti, sve navedene varijante heterodimerizacije (uključujuć i varijante iskrivljenosti i/ili pI) mogu se opciono i nezavisno kombinovati na bilo koji način, sve dok zadržavaju svoju "povezanost" ili "monomersku podela". Osim toga, sve ove varijante se mogu kombinovati u bilo koji od formata heterodimerizacije.
[0139] U slučaju pI mogu se stvoriti različite kombinacije, sledeć i osnovno pravilo promene pI razlike između dva monomera radi lakšeg prečišć avanja.
[0140] Pored toga, bilo koja od varijanti heterodimerizacije, iskrivljenost i pI, se tako đe nezavisno i opciono kombinuju sa varijantama ablacije Fc, varijantama Fc, varijantama FcRn, kako je ovde uopšteno naznačeno.
Korisni oblici pronalaska
[0141] Kao što ć e značiti stručnjacima iz oblasti i detaljnije ć e se raspravljati u nastavku, heterodimerni fuzioni proteini mogu poprimiti širok spektar konfiguracija, što je opć enito prikazano na slikama 1. Neke slike prikazuju konfiguracije sa "jednim završetkom", gde postoje je jedna vrsta specifičnosti na jednoj "ruci" molekula i drugačija specifičnost na drugoj "ruci". Druge figure prikazuju konfiguracije sa "dvostrukim krajem", gde postoji najmanje jedna vrsta specifi čnosti na "vrhu" molekula i jedna ili više različitih specifičnosti na "dnu" molekula. Prema tome, ovaj pronalazak je usmeren na nove kompozicije imunoglobulina koje se prvo međusobno angažuju i drugi antigen.
[0142] Kao što ć e značiti stručnjacima iz oblasti, heterodimerni mogu imati različite valencije, kao i bispecifične. To jest, heterodimerna antitela prema pronalasku mogu biti dvovalentna i bispecifična, pri čemu je jedan ciljni tumorski antigen (npr. CD3) vezan za jedan vezujuć i domen, a drugi ciljni tumorski antigen (npr. CD20, CD19, CD38, CD123, itd.) je vezan drugim domenom vezivanja. Heterodimerna antitela takođe mogu biti trovalentna i bispecifična, pri čemu je prvi antigen vezan za dva vezujuć a domena, a drugi antigen za drugi vezuju ć i domen. Kao što je ovde navedeno, kada je CD3 jedan od ciljnih antigena, poželjno je da se CD3 veže samo monovalentno, kako bi se smanjili potencijalni neželjeni efekti.
[0143] Obezbeđeni su domeni za vezivanje anti-CD3 antigena u kombinaciji sa domenima za vezivanje anti-ciljnih tumorskih antigena (TTA). Kao što ć e stručnjaci ceniti, bilo koja kolekcija anti-CD3 CDR-ova, promenljivih lakih i promenljivih teških domena protiv CD3, Fabs i scFvs kako je prikazano na bilo kojoj od slika (vidi posebno slike 2 do 7 i sliku 68) može se koristiti. Slično, može se koristiti bilo koji od domena za vezivanje anti-TTA antigena, npr. anti-CD38, anti-CD20, anti-
2
CD19 i anti-CD123 domeni koji vezuju antigen, bilo da se mogu koristiti CDR, promenljivi laki i promenljivi teški domeni, Fabs i scFvs kako je prikazano na bilo kojoj od slika, opciono i nezavisno kombinovani u bilo kojoj kombinaciji.
Format otvarača za flaše
[0144] Jedna heterodimerna skela koja ima posebnu upotrebu u ovom pronalasku je format skele "trostruki F" ili "otvarač za boce", kao što je prikazano na slikama 1A, A i B. U ovom izvođenju, jedan teški lanac antitela sadrži jedan lanac Fv ("scFv", kako je dole definisano), a drugi teški lanac je "običan" FAb format, koji sadrži promenljivi teški lanac i laki lanac. Ova struktura se ponekad ovde naziva "trostruki F" format (scFvFAb-Fc) ili format "otvarača za boce", zbog grube vizuelne sličnosti sa otvaračem za boce (videti slike 1). Dva lanca se spajaju korišć enjem aminokiselinskih varijanti u konstantnim regionima (npr. Fc domen, CH1 domen i/ili region šarki) koji promovišu stvaranje heterodimernih antitela kao što je detaljnije opisano u nastavku.
[0145] Postoji nekoliko različitih prednosti sadašnjeg "trostrukog F" formata. Kao što je poznato u tehnici, analozi antitela koji se oslanjaju na dva scFv konstrukta često imaju probleme sa stabilnošć u i agregacijom, koji se u ovom pronalasku mogu ublažiti dodavanjem "regularnog" uparivanja teškog i lakog lanca. Osim toga, za razliku od formata koji se oslanjaju na dva te ška lanca i dva laka lanca, nema problema sa pogrešnim uparivanjem teških i lakih lanaca (npr. Teško 1 uparivanje sa lakim 2 itd.).
[0146] Mnoga ovde predstavljena antitela oslanjaju se generalno na format otvara ča za flaše koji sadrži prvi monomer koji sadrži scFv, koji sadrži promenljivi teški i promenljivi laki domen, kovalentno vezan pomoć u scFv linkera (napunjen, u mnogim, ali ne u svim slučajevima) , gde je scFv kovalentno vezan za N-kraj prvog Fc domena obično preko linkera domena (koji, kako je ovde navedeno, može biti nenaelektrisan ili naelektrisan). Drugi monomer formata za otvaranje boca je teški lanac, a kompozicija dalje sadrži laki lanac.
[0147] Generalno, scFv je domen koji se vezuje za CD3, pri čemu se Fab teških i lakih lanaca vezuje za drugi TTA. Osim toga, domeni Fc prema pronalasku generalno sadrže kose varijante (npr. Skup supstitucija aminokiselina kao što je prikazano na slici 29 i slici 34, pri čemu su posebno korisne kose varijante izabrane iz grupe koju čine S364K/E357K: L368D/K370S; L368D/K370S: S364K; L368E/K370S: S364K; T411T/E360E/K362E: D401K; L368D/K370S: S364K/E357L i K370S: S364K/E357K), po želji varijacije sa ablacijom (prikazane na slici scF 31, uključujuć i i sl. linkeri (uključujuć i one prikazane na slici 33), a teški lanac sadrži varijante pI (uključuju ć i one prikazane na slici 30).
[0148] Obezbeđeni su formati otvarača za boce gde su sekvence anti-CD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do slika 7 i slici 68.
[0149] Dostavljeni su formati otvarača za boce sa domenima vezivanja CD38 antigena u kojima su sekvence anti-CD38 prikazane na slikama, uključujuć i slike 8 do 10.
[0150] Dostavljeni su formati otvarača za boce sa domenima vezivanja CD20 antigena u kojima su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0151] Dostavljeni su formati otvarača za boce sa domenima vezivanja CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0152] Obezbeđeni su formati otvarača za boce sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence anti-CD123 prikazane na slikama. mAb-Fv format.
[0153] Jedna heterodimerna skela je format mAb-Fv prikazan na slici 1. Ovaj format mo že biti upotreba C-terminalnog vezivanja „ekstra“ promenljivog teškog domena na jedan monomer i C-terminalnog dodatka „ekstra "promenljivi laki domen za drugi monomer, formirajuć i tako tre ć i domen za vezivanje antigena, pri čemu Fab delovi dva monomera vezuju TTA, a" ekstra "scFv domen vezuje CD3.
2
[0154] U jednom primeru, prvi monomer sadrži prvi teški lanac, koji sadrži prvi promenljivi teški domen i prvi konstantan teški domen koji sadrži prvi Fc domen, sa prvim promenljivim lakim domenom kovalentno vezanim za C-terminus prvog Fc domen pomoć u povezivača domena. Drugi monomer sadrži drugi promenljivi teški domen drugog konstantnog teškog domena koji sadrži drugi Fc domen i treć i promenljivi teški domen kovalentno vezan za C-terminus drugog Fc domena pomoć u povezivača domena. Dva C-terminalno povezana promenljiva domena čine scFv koji vezuje CD3. Ovaj primer dalje koristi zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena, koji se povezuje sa teškim lancima kako bi formirao dva identična Fab -a koji vezuju TTA. pI varijante, varijacije ablacije, dodatne Fc varijante itd. po želji i ovde opisane.
[0155] Obezbeđeni su formati mAb-Fv gde su sekvence antiCD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do slika 7 i slici 68.
[0156] Dostavljeni su formati mAb-Fv u kojima su sekvence antiCD38 kao što je prikazano na slikama 8 do 10.
[0157] Obezbeđeni su formati mAb-Fv sa domenima koji vezuju CD20 antigen, pri čemu su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0158] Dostavljeni su formati mAb-Fv sa domenima vezivanja CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0159] Dostavljeni su formati mAb-Fv sa domenima za vezivanje CD123 antigena gde su sekvence anti-CD123 prikazane na slikama.
[0160] Pruženi su formati mAb-Fv koji sadrže varijacije ablacije kako je prikazano na slici 31.
[0161] Obezbeđeni su formati mAb-Fv koji sadrže kose varijante kako je prikazano na slikama 29 i 34.
mAb-scFv
[0162] Jedna heterodimerna skela koja ima posebnu primenu je format mAb-Fv prikazan na slici 1. U ovom izvođenju, format se oslanja na upotrebu C-terminalnog vezivanja scFv na jedan od monomera, formirajuć i tako tre ć i domen za vezivanje antigena, pri čemu Fab delovi dva monomera vezuju TTA, a "ekstra" scFv domen vezuje CD3. Prema tome, prvi monomer sadrži prvi teški lanac (koji sadrži promenljivi teški domen i konstantan domen), sa C-terminalno kovalentno vezanim scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker i scFv promenljivi teški domen. Ovaj primer dalje koristi zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena, koji se povezuje sa teškim lancima u dva identična Fab-a koji vezuju TTA. Što se tiče mnogih primera ovde, ovi konstrukti uključuju kose varijante, varijante pI, varijacije ablacije, dodatne varijante Fc, itd. po želji i ovde opisane.
[0163] Obezbeđeni su formati mAb-Fv gde su sekvence anti-CD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do 7 i 68.
[0164] Obezbeđeni su formati mAb-Fv u kojima su sekvence antiCD38 kao što je prikazano na slikama 8 do 10.
[0165] Obezbeđeni su formati mAb-Fv sa domenima za vezivanje CD20 antigena u kojima su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0166] Obezbeđeni su formati mAb-Fv sa domenima za vezivanje CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0167] Obezbeđeni su formati mAb-Fv sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence anti-CD123 prikazane na slikama.
2
[0168] Obezbeđeni su formati mAb-Fv koji sadrže varijacije ablacije kako je prikazano na slici 31.
[0169] Obezbeđeni su formati mAb-Fv koji sadrže kose varijante prikazane na slikama 29 i 34. Centralna scFv
[0170] Jedna heterodimerna skela koja ima posebnu primenu u ovom pronalasku je format Centralna-scFv prikazan na slici 1. U ovom izvođenju, format se oslanja na upotrebu umetnutog domena scFv, formirajuć i tako tre ć i domen za vezivanje antigena, pri čemu Fab delovi dva monomera vezuju TTA, a "ekstra" scFv domen vezuje CD3. Domen scFv je umetnut između Fc domena i CH1-Fv regiona jednog od monomera, dajuć i tako tre ć i domen koji vezuje antigen.
[0171] U primeru, jedan monomer sadrži prvi teški lanac koji sadrži prvi promenljivi teški domen, CH1 domen i Fc domen, sa scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker i scFv promenljivi teški domen. ScFv je kovalentno vezan između C-terminusa CH1 domena teškog konstantnog domena i N-terminusa prvog Fc domena pomoć u linkera domena. Ovaj primer dalje koristi zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena, koji se povezuje sa teškim lancima u dva identična Fab-a koji vezuju TTA. Što se tiče mnogih primera ovde, ovi konstrukti uključuju kose varijante, varijante pI, varijacije ablacije, dodatne varijante Fc, itd. po želji i ovde opisane
[0172] Obezbeđeni su Central-scFv formati gde su sekvence anti-CD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do slika 7 i slici 68.
[0173] Obezbeđeni su Central-scFv formati u kojima su sekvence anti-CD38 prikazane na slikama 8 do 10.
[0174] Obezbeđeni su centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD20 antigena u kojima su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0175] Obezbeđeni su centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0176] Obezbeđeni su centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence anti-CD123 prikazane u v
[0177] Obezbeđeni su Central-scFv formati koji sadrže varijacije ablacije kako je prikazano na slici 31.
[0178] Obezbeđeni su Central-scFv formati koji obuhvataju kose varijante kako je prikazano na slikama 29 i 34.
Central-Fv format
[0179] Jedna heterodimerna skela koja ima posebnu upotrebu je format Central-Fv prikazan na slici 1. U ovom primeru format se oslanja na upotrebu umetnutog domena scFv, formirajuć i tako treć i domen za vezivanje antigena, pri čemu Fab delovi dva monomeri vezuju TTA, a "ekstra" scFv domen vezuje CD3. Domen scFv je umetnut između Fc domena i CH1-Fv regiona monomera, čime se obezbeđuje treć i domen koji vezuje antigen, pri čemu svaki monomer sadrži komponentu scFv (npr. Jedan monomer sadrži promenljivi teški domen, a drugi promenljiv laki domen).
[0180] U ovom primeru jedan monomer sadrži prvi teški lanac koji sadrži prvi promenljivi teški domen, CH1 domen i Fc domen i dodatni promenljivi laki domen. Laki domen je kovalentno vezan između C-kraja CH1 domena teškog konstantnog domena i N-terminusa prvog Fc domena pomoć u linkera domena. Drugi monomer sadrži prvi teški lanac koji sadrži prvi promenljivi teški domen, CH1 domen i Fc domen i dodatni promenljivi teški domen. Laki domen je kovalentno vezan između C-terminusa CH1 domena teškog konstantnog domena i N-terminusa prvog Fc domena pomoć u linkera domena.
[0181] Ovaj primer izvođenja dalje koristi zajednički laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena, koji se povezuje sa teškim lancima da formira dva identična Fab-a koji vezuju TTA. Što se tiče mnogih primera ovde, ovi konstrukti uključuju kose varijante, varijante pI, varijacije ablacije, dodatne varijante Fc, itd. Po želji i ovde opisane.
[0182] Obezbeđeni su Central-Fv formati gde su antiCD3 scFv sekvence prikazane na slikama 2 do 7 i 68.
[0183] Obezbeđeni su Central-Fv formati u kojima su sekvence anti-CD38 prikazane na slikama 8 do 10.
[0184] Obezbeđeni su Central-Fv formati sa domenima za vezivanje CD20 antigena u kojima su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0185] Obezbeđeni su Central-Fv formati sa domenima za vezivanja CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0186] Obezbeđeni su Central-Fv formati sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence anti-CD123 kao što je prikazano na slikama.
[0187] Obezbeđeni su Central-Fv formati koji sadrže varijacije ablacije kako je prikazano na slici 31.
[0188] Obezbeđeni su Central-Fv formati koji sadrže kose varijante kako je prikazano na slikama 29 i 34.
Jednokraki centralni scFv
[0189] Jedna heterodimerna skela koja ima posebnu primenu je jednokraki centralni-scFv format prikazan na slici 1. U ovom izvođenju, jedan monomer sadrži samo Fc domen, dok drugi monomer koristi umetnuti scFv domen formirajuć i tako drugo vezivanje za antigen domen. U ovom formatu, ili Fab deo vezuje TTA, a scFv CD3 ili obrnuto. Domen scFv je umetnut između Fc domena i CH1-Fv regiona jednog od monomera.
[0190] U ovom primeru jedan monomer sadrži prvi teški lanac koji sadrži prvi promenljivi teški domen, CH1 domen i Fc domen, sa scFv koji sadrži scFv promenljivi laki domen, scFv linker i scFv promenljivi teški domen. ScFv je kovalentno vezan između C-terminusa CH1 domena teškog konstantnog domena i N-terminusa prvog Fc domena pomoć u linkera domena. Drugi monomer sadr ži Fc domen. Ovaj primer dalje koristi laki lanac koji se sastoji od promenljivog lakog domena i konstantnog lakog domena, koji se povezuje sa teškim lancem da formira Fab. Što se tiče mnogih primera ovde, ovi konstrukti uključuju kose varijante, varijante pI, varijacije ablacije, dodatne varijante Fc, itd. po želji i ovde opisane.
[0191] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati gde su sekvence anti-CD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do slika 7 i slici 68.
[0192] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv format u kome su sekvence anti CD38 prikazane na slikama 8 do 10.
[0193] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD20 antigena u kojima su sekvence antiCD20 kao što je prikazano na slikama.
[0194] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD19 antigena u kojima su sekvence antiCD19 kao što je prikazano na slikama.
[0195] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence antiCD123 kao što je prikazano na slikama.
1
[0196] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati koji sadrže varijacije ablacije kao što je prikazano na slici 31.
[0197] Obezbeđeni su jednokraki centralni-scFv formati koji sadrže kose varijante kako je prikazano na slikama 29 i 34.
Dvostruki scFv formati
[0198] Takođe su obezbeđeni dvostruki scFv formati poznati u struci i prikazani na slici 1.
[0199] Obezbeđeni su dvostruki scFv formati gde su sekvence antiCD3 scFv kao što je prikazano na slikama 2 do slika 7 i slici 68.
[0200] Obezbeđeni su dvostruki scFv formati u kojima su sekvence anti-CD38 kao što je prikazano na slikama 8 do 10.
[0201] Obezbeđeni su dvostruki scFv formati sa domenima za vezivanje CD20 antigena u kojima su sekvence anti-CD20 kao što je prikazano na slikama.
[0202] Obezbeđeni su dvostruki scFv formati sa domenima za vezivanje CD19 antigena u kojima su sekvence anti-CD19 kao što je prikazano na slikama.
[0203] Obezbeđeni su dvostruki scFv formati sa domenima za vezivanje CD123 antigena u kojima su sekvence anti-CD123 kao što je prikazano na slikama.
[0204] Predviđeni su dvostruki scFv formati koji sadrže varijacije ablacije kako je prikazano na slici 31.
[0205] Pruženi su dvostruki scFv formati koji sadrže kose varijante kako je prikazano na slikama 29 i 34.
Ciljani antigeni
[0206] Bispecifična antitela prema pronalasku imaju dva različita domena za vezivanje antigena: jedno koje se vezuje za CD3 (generalno monovalentno) i jedno koje se vezuje za ciljani antigen tumora (ovde se ponekad naziva "TTA"). Pogodni ciljni antigeni tumora uključuju, ali nisu ograničeni na, CD20, CD38, CD123; ROR1, ROR2, BCMA; PSMA; SSTR2; SSTR5, CD19, FLT3, CD33, PSCA, ADAM 17, CEA, Her2, EGFR, EGFR-vIII, CD30, FOLR1, GD-2, CA-IKS, Trop-2, CD70, CD38, mezotelin, EphA2, CD22, CD79b , GPNMB, CD56, CD138, CD52, CD74, CD30, CD123, RON, ERBB2 i EGFR.
[0207] "Triple F" format je posebno koristan za ciljanje dva (ili više) različitih antigena. (Kao što je ovde navedeno, ovo ciljanje može biti bilo koja kombinacija monovalentnog i dvovalentnog vezivanja, u zavisnosti od formata). Tako imunoglobulini ovde poželjno ko-angažuju dva ciljna antigena. Specifičnosti svakog monomera mogu se izabrati sa ovde navedenih lista. Dodatni korisni bispecifični formati za upotrebu sa domenom vezivanja protiv CD3 prikazani su na slici 1.
[0208] Posebno pogodne primene heterodimernih antitela ovde su ko-ciljni parovi za koje je korisno ili kritično angažovati svaki ciljni antigen monovalentno. Takvi antigeni mogu biti, na primer, imunološki receptori koji se aktiviraju imunološkom kompleksacijom. Ć elijska aktivacija mnogih imunoloških receptora se javlja samo unakrsnim povezivanjem, koje tipično postižu imunološki kompleksi antitela/antigena, ili preko efektorske ć elije do ciljane ć elijske interakcije. Za neke imunološke receptore, na primer CD3 signalni receptor na T ć elijama, aktivacija samo nakon angažovanja sa zajednički angažovanom metom je kritična, pošto nespecifično umrežavanje u kliničkom okruženju može izazvati oluju citokina i toksičnost. Terapeutski, monovalentnim angažovanjem takvih antigena, a ne multivalentno, upotrebom imunoglobulina ovde, do takve aktivacije dolazi samo kao odgovor na umrežavanje samo u mikrookruženju primarnog ciljnog antigena. Sposobnost ciljanja dva različita antigena sa različitim valencijama je nov i koristan aspekt ovog pronalaska. Primeri ciljnih antigena za koje bi moglo biti terapeutski korisno ili neophodno da se jednokratno angažuju uključuju, ali nisu ograničeni na receptore koji aktiviraju
2
imunološki sistem, kao što su CD3, FciRs, receptori slični putarini (TLRs) kao što suTLR4 i TLR9, citokin, hemokin, citokin receptori i receptori za hemokine. U mnogim izvo đenjima, jedno od mesta za vezivanje antigena vezuje se za CD3, a u nekim realizacijama to je monomer koji sadr ži scFv.
[0209] Praktično bilo koji antigen može biti na meti imunoglobulina ovde, uključujuć i, ali bez ograničenja, proteine, podjedinice, domene, motive i/ili epitope koji pripadaju sledeć oj listi ciljnih antigena, koja uključuje i rastvorljive faktore kao što su citokini i vezani za membranu faktori, uključujuć i transmembranske receptore: 17-IA, 4-1BB, 4Dc, 6-keto-PGFIa, 8-izo-PGF2a, 8-okso-dG A1 adenozinski receptor, A33, ACE, ACE-2, aktivin, aktivin A, Activin AB, Activin B, Activin C, Activin RIA, Activin RIA ALK-2, Activin RIB ALK-4, Activin RIIA, Activin RIIB, ADAM, ADAM10, ADAM12, ADAM15, ADAM17/TACE, ADAM8, ADAM9, ADAMTS, ADAMTS4, ADAMTS5, Addressins, aFGF, ALCAM, ALK, ALK-1, ALK-7, alfa-1-antitripsin, alfa-V/beta-1 antagonist, ANG, Ang, APAF1, APE, APJ, APP, APRIL, AR, ARC, ART, Artemin, antiId, ASPARTIC, atrijalni natriuretički faktor, av/b3 integrin, Akl, b2M, B7-1, B7-2, B7-H, stimulator B-limfocita (BliS), BACE, BACE-1, loš, BAFF, BAFF-R, vreć a-1, BAK, Bak, BCA-1, BCAM, Bcl, BCMA, BDNF, b-ECGF, bFGF, BID, Bik, BIM, BLC, BL-CAM, BLK, BMP, BMP-2 BMP-2a, BMP-3 Osteogenin, BMP-4 BMP-2b, BMP -5, BMP-6 Vgr-1, BMP-7 (OP-1), BMP-8 (BMP-8a, OP-2), BMPR, BMPR-IA (ALK-3), BMPR-IB (ALK-6 ), BRK-2, RPK-1, BMPR-II (BRK-3), BMP, b-NGF, BOK, Bombesin, neurotrofni faktor izveden iz kostiju, BPDE, BPDEDNA, BTC, faktor komplementa 3 (C3), C3a, C4, C5, C5a, C10, CA125, CAD-8, kalcitonin, cAMP, karcinoembrionski antigen (CEA), antigen povezan sa karcinomom, katepsin A, katepsin B, katepsin C/DPPI, katepsin D, kateps u E, katepsin H, katepsin L, katepsin O, katepsin S, katepsin V, katepsin Ks/Z/P, CBL, CCI, CCK2, CCL, CCL1, CCL11, CCL12, CCL13, CCL14, CCL15, CCL16, CCL17, CCL18, CCL19, CCL2, CCL20, CCL21, CCL22, CCL23, CCL24, CCL25, CCL26, CCL27, CCL28, CCL3, CCL4, CCL5, CCL6, CCL7, CCL8, CCL9/10, CCR, CCR1, CCR10, CCR10, CCR2, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CD1, CD2, CD3, CD3E, CD4, CD5, CD6, CD7, CD8, CD10, CD11a, CD11b, CD11c, CD13, CD14, CD15, CD16, CD18, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD27L, CD28, CD29, CD30, CD30L, CD32, CD33 (p67 proteins), CD34, CD38, CD40, CD40L, CD44, CD45, CD46, CD49a, CD52, CD54, CD55, CD56, CD61, CD64, CD66e, CD74, CD80 (B7-1), CD89, CD95, CD123, CD137, CD138, CD140a, CD146, CD147, CD148, CD152, CD164, CEACAM5, CFTR, cGMP, CINC, Clostridium botulinum toksin, Clostridium perfringens toksin, CKb8-1, CLC, CMV, CMV UL, CNTF, CNTN-1, COX, C-Ret, CRG-2, CT-1, CTACK, CTGF, CTLA-4, CX3CL1, CX3CR1, CXCL, CXCL1, CXCL2, CXCL3, CXCL4, CXCL5, CXCL6, CXCL7, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13, CXCL14, CXCL15, CXCL16, CXCR, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5, CXCR6, citokeratinski tumor povezan antigen, DAN, DCC, DcR3, DC-SIGN, faktor ubrzanja raspadanja, des (1-3) -IGF-I (moždani IGF-1), Dhh, digoksin, DNAM-1, Dnase, Dpp, DPPIV /CD26, Dtk, ECAD, EDA, EDA-A1, EDA-A2, EDAR, EGF, EGFR (ErbB-1), EMA, EMMPRIN, ENA, endotelinski receptor, enkefalinaza, eNOS, Eot, eotaksin1, EpCAM, Ephrin B2/ EphB4, EPO, ERCC, Eselectin, ET-1, faktor IIa, faktor VII, faktor VIIIc, faktor IKS, protein aktivacije fibroblasta (FAP), Fas, FcR1, FEN1, feritin, FGF, FGF-19, FGF-2, FGF3 , FGF-8, FGFR, FGFR-3, Fibrin, FL, FLIP, Flt-3, Flt-4, hormon za stimulaciju folikula, fraktalkin,, FZD1, FZD2, FZD3, FZD4, FZD5, FZD6, FZD7, FZD8, FZD9, FZD10, G250, Gas 6, GCP2, GCSF, GD2, GD3, GDF, GDF-1, GDF-3 (Vgr-2), GDF5 (BMP-14, CDMP-1), GDF-6 (BMP-13, CDMP-2), GDF7 (BMP-12, CDMP-3), GDF-8 (Myostatin), GDF-9, GDF15 (MIC-1), GDNF, GDNF, GFAP, GFRa-1, GFR-alfa1, GFR-alfa2, GFR-alfa3, GITR, glukagon, glut 4, glikoprotein IIb/IIIa (GP IIb/IIIa), GM-CSF, gp130, gp72, GRO, faktor oslobađanja hormona rasta, Hapten (NP-kapa) ili NIP-cap), HB-EGF, HCC, HCMV gB omotač glikoprotein, HCMV) gH glikoprotein omotača gH, HCMV UL, Hemopoetski faktor rasta (HGF), Hep B gp120, heparanaza, Her2, Her2/neu (ErbB-2), Her3 (ErbB-3), Her4 (ErbB-4), herpes simpleks virus (HSV) gB glikoprotein, glikoprotein HSV gD, HGFA, antigen visoke molekularne mase povezan sa melanomom (HMV-MAA), HIV gp120, HIV IIIB gp 120 V3 petlja, HLA, HLA-DR, HM1.24, HMFG PEM, HRG, Hrk, humani srčani miozin, humani citomegalovirus (HCMV), humani hormon rasta (HGH), HVEM, 1-309, IAP, ICAM, ICAM-1, ICAM-3, ICE, ICOS, IFNg, Ig, IgA receptori, IgE, IGF, proteini koji vezuju IGF, IGF-1R, IGFBP, IGF-I, IGF-II, IL, IL-1, IL-1R, IL-2, IL-2R, IL-4, IL-4R, IL-5, IL-5R, IL-6, IL-6R, IL-8, IL-9, IL-10, IL12, IL-13, IL-15, IL-18, IL-18R, IL-23, interferon (INF) -alfa, INF-beta, INF-gama, Inhibin, iNOS, Insulin Achain, Insulin B-lanac, Inzulinu sličan faktor rasta 1, integrin alfa2, integrin alfa3, integrin alfa4, integrin alfa4/beta1, integrin alfa4 /beta7, integrin alpha5 (alphaV), integrin alpha5/beta1, integrin alpha5/beta3, integrin alfa6, integrin beta1, integrin beta2, interferon gama, IP-10, I-TAC, JE, kalikrein 2, kalikrein 5, kalikrein 6 ,, kalikrein 11, kalikrein 12, kalikrein 14, kalikrein 15, kalikrein L1, kalikrein L2, kalikrein L3, kalikrein L4, KC, KDR, Faktor rasta keratinocita (KGF), laminin 5, LAMP, LAP, LAP (TGF-1), latentni TGF-1, latentni TGF-1 bp1, LBP, LDGF, LECT2, Lefti, Levis-I antigen, antigen povezan sa Levis-I , LFA-1, LFA-3, Lfo, LIF, LIGHT, lipoproteini, LIKS, LKN, Lptn, L-Selectin, LT-a, LTb, LTB4, LTBP-1, pluć no surfaktant, luteiniziraju ć i hormon, limfotoksin beta receptor Mac-1, MAdCAM, MAG, MAP2, MARC, MCAM, MCAM, MCK-2, MCP, M-CSF, MDC, Mer, METALLOPROTEASES, MGDF receptor, MGMT, MHC (HLA-DR), MIF, MIG, MIP, MIP-1-alpha, MK, MMAC1, MMP, MMP-1, MMP-10, MMP-11, MMP12, MMP-13, MMP-14, MMP-15, MMP-2, MMP-24, MMP-3, MMP-7, MMP-8, MMP-9, MPIF, Mpo, MSK, MSP, mucin (Muc1), MUC18, Supstanca inhibitora Muellerian-a, Šolja, MuSK, NAIP, NAP, NCAD, N-Kadherin, NCA 90, NCAM, NCAM, Neprilisin, Neurotrophin-3, -4 ili -6, Neurturin, Neuronalni faktor rasta (NGF), NGFR, NGF-beta, nNOS, NO, NOS, Npn, NRG-3, NT, NTN, OB, OGG1, OPG, OPN, OSM, OKS40L, OKS40R, p150, p95, PADPr, paratiroidni hormon, PARC, PARP, PBR, PBSF , PCAD, P-kadherin, PCNA, PDGF, PDGF, PDK1, PECAM, PEM, PF4, PGE, PGF, PGI2, PGJ2, PIN, PLA2, placentna alkalna fosfataza (PLAP), P1GF, PLP, PP14, proinsulin, prorelaksin, Proteini C, PS, PSA, PSCA, prostata specifični membranski antigen (PSMA), PTEN, PTHrp, Ptk, PTN, R51, RANK, RANKL, RANTES, RANTES, Relaksin A-lanac, Relaksin B-lanac, renin, respiratorni sincicijski virus (RSV) F, RSV Fgp, Ret, reumatoidni faktori, RLIP76, RPA2, RSK, S100, SCF/KL, SDF1, SERINE, Serum albumin, sFRP-3, Shh, SIGIRR, SK1, SLAM, SLPI, SMAC, SMDF, SMOH, SOD, SPARC, Stat, STEAP, STEAP-II, TACE, TACI, TAG-72 (tumora-povezani glikoprotein-72), TARC, TCA-3, receptori za T-ć elije (npr. T- ć elijski receptor alfa/beta), TdT, TECK, TEM1, TEM5, TEM7, TEM8, TERT, alkalna fosfataza slična PLAP-u, TfR, TGF, TGF-alfa, TGF-beta, TGF-beta specifični za Pan, TGF-beta RI (ALK-5), TGF-beta RII, TGF-beta RIIb, TGF-beta RIII, TGF-beta1, TGF-beta2 , TGF-beta3, TGF-beta4, TGF-beta5, trombin, timus Ck-1, hormon koji stimuliše štitnu žlezdu, Tie, TIMP, TIQ, Tissue Factor, TMEFF2, Tmpo, TMPRSS2, TNF, TNF-alpha, TNF-alpha beta, TNF-beta2, TNFc, TNF-RI, TNFRII, TNFRSF10A (TRAIL R1 Apo-2, DR4), TNFRSF10B (TRAIL R2 DR5, KILLER, TRICK-2A, TRICK-B), TNFRSF10C (TRAIL R3 DcR1, LIT, TRID), TNFRSF10D (TRAIL R4 DcR2, TRUNDD), TNFRSF11A (RANK ODF R, TRANCE R), TNFRSF11B (OPG OCIF, TR1), TNFRSF12 (TWEAK R FN14), TNFRSF13B (TACI), TNFRSF13C (BAFF R), TNFRSF14 (HVEM ATAR, HveA, LIGHT R, TR2), TNFRSF16 (NGFR p75NTR), TNFRSF17 (BCMA), TNFRSF18 (GITR AITR), TNFRSF19 (TROY TAJ, TRADE), TNFRSF19L (RELT), TNFRSF1A (TNF RI CD120a, p55-60), TNFRSF1B (TNF RII CD120b, p75-80), TNFRSF26 (TNFRH3), TNFRSF3 (LTbR TNF RIII, TNFC R), TNFRSF4 (OX40 ACT35, TXGP1 R), TNFRSF5 (CD40 p50), TNFRSF6 (Fas Apo1, APT1, CD95), TNFRSF6B (DcR3 M68, TR6), TNFRSF7 (CD27), TNFRSF8 (CD30), TNFRSF9 (4-1BB CD137, ILA), TNFRSF21 (DR6), TNFRSF22 (DcTRAIL R2 TNFRH2), TNFRST23 (DcTRAIL R1 TNFRH1), TNFRSF25 (DR3 Apo-3, LARD, TR-3, TRAMP, WSL-1), TNFSF10 (TRAIL Apo-2 Ligand, TL2), TNFSF11 (TRANCE/RANK Ligand ODF, OPG Ligand), TNFSF12 (TWEAK Apo-3 Ligand, DR3 Ligand), TNFSF13 (APRIL TALL2), TNFSF13B (BAFF BLYS, TALL1, THANK, TNFSF20), TNFSF14 (LIGHT HVEM Ligand, LTg), TNFSF15 (TL1A/VEGI), TNFSF18 (GITR Ligand AITR Ligand, TL6), TNFSF1A (TNF-a Conectin, DIF, TNFSF2), TNFSF1B (TNF-b LTa, TNFSF1), TNFSF3 (LTb TNFC, p33), TNFSF4 (OX40 Ligand gp34, TXGP1), TNFSF5 (CD40 Ligand CD154, gp39, HIGM1, IMD3, TRAP), TNFSF6 (Fas Ligand Apo-1 Ligand, APT1 Ligand), TNFSF7 (CD27 Ligand CD70), TNFSF8 (CD30 Ligand CD153), TNFSF9 (4-1BB Ligand CD137 Ligand), TP-1, t-PA, Tpo, TRAIL, TRAIL R, TRAIL-R1, TRAIL-R2, TRANCE, receptor za prenos, TRF, Trk, TROP-2, TSG, TSLP, tumor povezan sa antigenom CA 125, tumorasocirani antigen koji eksprimira ugljene hidrate povezane sa Levis I, TVEAK, TKSB2, Ung, uPAR, uPAR-1, Urokinaza, VCAM, VCAM-1, VECAD, VE-Kadherin, VE-kadherin-2, VEFGR-1 (flt-1), VEGF, VEGFR, VEGFR-3 (flt-4), VEGI, VIM, virusni antigeni, VLA, VLA-1, VLA-4, VNR integrin, von Villebrandsov faktor, VIF-1, VNT1, VNT2, VNT2B/13, VNT3, VNT3A, VNT4, VNT5A, VNT5B, VNT6, VNT7A, VNT7B, VNT8A, VNT8B, VNT9A,VNT9A, VNT9B, VNT10A, VNT10B, VNT11, VNT16, XCL1, XCL2, XCR1, XCR1, XDAR, XIAP, XPD, i receptore za hormone i faktore rasta.
[0210] Primeri antigena na koje imunoglobulini ovog pronalaska mogu posebno da budu ciljani, uključuju, ali nisu ograničeni na: CD20, CD19, Her2, EGFR, EpCAM, CD3, FciRIIIa (CD16), FciRIIa (CD32a), FciRIIb (CD32b), FcgRI (CD64), receptori slični putarinama (TLR) kao što su TLR4 i TLR9,
4
citokini poput IL-2, IL-5, IL-13, IL-12, IL-23 i TNFa, receptori citokina kao što je IL2R, hemokini, receptori za hemokine, faktori rasta kao što su VEGF i HGF i slično. Za formiranje bispecifičnih antitela prema pronalasku, mogu se napraviti antitela na bilo koju kombinaciju ovih antigena; to jest, svaki od ovih antigena može biti opciono i nezavisno uključen ili isključen iz bispecifičnog antitela prema ovom pronalasku.
[0211] Posebno poželjne kombinacije za bispecifična antitela su domen koji vezuje antigen za CD3 i domen koji vezuje antigen izabran iz domena koji vezuje CD19, CD20, CD38 i CD123, čije su sekvence prikazane na slikama.
Nukleinske kiseline prema pronalasku
[0212] Pronalazak dalje obezbeđuje kompozicije nukleinskih kiselina koje kodiraju bispecifična antitela prema pronalasku. Kao što ć e stručnjaci ceniti, sastavi nukleinskih kiselina ć e zavisiti od formata i okvira heterodimernog proteina. Tako, na primer, kada format zahteva tri aminokiselinske sekvence, na primer za trostruki F format (npr. prvi monomer aminokiseline koji sadr ži Fc domen i scFv, drugi monomer aminokiselina koji sadrži teški lanac i laki lanac), tri sekvence nukleinske kiseline mogu biti ugrađene u jedan ili više ekspresionih vektora za ekspresiju. Slično, neki formati (npr. dvostruki formati scFv, kao što je prikazano na slici 1) su potrebne samo dve nukleinske kiseline; opet, mogu se staviti u jedan ili dva vektora izraza.
[0213] Kao što je poznato u struci, nukleinske kiseline koje kodiraju komponente pronalaska mogu se inkorporirati u ekspresione vektore kao što je poznato u struci, i u zavisnosti od ć elija doma ć ina koje se koriste za proizvodnju heterodimernih antitela prema pronalasku. Uop šteno, nukleinske kiseline su operativno povezane sa bilo kojim brojem regulatornih elemenata (promotori, poreklo replikacije, selektivni markeri, mesta vezivanja ribozoma, induktori itd.). Ekspresioni vektori mogu biti ekstra-hromozomski ili integrirajuć i vektori.
[0214] Nukleinske kiseline i/ili vektori ekspresije se zatim transformišu u bilo koji broj različitih vrstać elija doma ć ina kao što je dobro poznato u struci, uključuju ć i ć elije sisara, bakterije, kvasce, insekte i/ili gljivice, sa ć elijama sisara (npr. CHO ć elije), pronalaze ć i primenu u mnogim izvođenjima.
[0215] U nekim primerima, nukleinske kiseline koje kodiraju svaki monomer i opciono nukleinska kiselina koja kodira laki lanac, zavisno od formata, svaka je sadržana u jednom ekspresionom vektoru, generalno pod različitim ili istim kontrolama promotera. U primerima posebne upotrebe u ovom pronalasku, svaka od ove dve ili tri nukleinske kiseline sadržana je na različitom vektoru ekspresije. Kao što je prikazano ovde i u US20150307629 različiti vektorski odnosi mogu se koristiti za pokretanje stvaranja heterodimera. To jest, iznenađujuć e, iako proteini sadrže prvi monomer: drugi monomer: laki lanac (u slučaju mnogih ovde izvedenih primera koji imaju tri polipeptida koji sadrže heterodimerno antitelo) u odnosu 1: 1: 2, to nisu odnosi koji daju najbolje rezultate.
[0216] Heterodimerna antitela prema pronalasku su dobijena kultivisanjem ć elija doma ć ina koje sadrže ekspresioni vektor (e) koji je dobro poznat u struci. Nakon što se proizvedu, rade se tradicionalni koraci prečišć avanja antitela, uključuju ć i korak jonoizmenjivačke hromatografije. Kao što je ovde diskutovano, razlikovanje pI dva monomera za najmanje 0,5 mo že omoguć iti razdvajanje jonoizmenjivačkom hromatografijom ili izoelektričnim fokusiranjem, ili drugim metodama osetljivim na izoelektričnu tačku. To jest, uključivanje pI supstitucija koje menjaju izoelektričnu tačku (pI) svakog monomera tako da svaki monomer ima različit pI, a heterodimer takođe ima različit pI, olakšavajuć i tako izoelektrično prečiš ć avanje "trostrukog F" heterodimera ( npr. kolone za anjonsku razmenu, kolone za katjonsku razmenu). Ove supstitucije takođe pomažu u određivanju i prać enju bilo kakvih kontaminiraju ć ih dvojnih scFv-Fc i mAb homodimera nakon prečišć avanja (npr. IEF gelovi, cIEF i analitičke IEKS kolone).
Tretmani
[0217] Jednom napravljene, kompozicije nalaze primenu u brojnim primenama. Svi CD20, CD38 i CD123 su neregulisani u mnogim hematopoeitnim malignitetima i u ć elijskim linijama izvedenim iz različitih hematopoetskih malignosti, prema tome, heterodimerna antitela prema pronalasku nalaze primenu u lečenju raka, uključujuć i, ali bez ograničenja, sve limfome B ć elija i leukemije, uključujuć i ali bez ograničenja na ne-Hodgkinov limfom (NHL), Burkittov limfom (BL), multipli mijelom (MM), B hroničnu limfocitnu leukemiju (B-CLL), B i T akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), limfom T ć elija (TCL) , akutna mijeloična leukemija (AML), leukemija vlašastih ć elija (HCL), Hodgkinov limfom (HL), hronična limfocitna leukemija (CLL), ne-Hodgkinov limfom i hronična mijeloidna leukemija (CML).
[0218] Shodno tome, heterodimerni sastavi nalaze primenu u lečenju ovih karcinoma.
Kompozicije antitela za administraciju In vivo
[0219] Formulacije upotrebljenih antitela se pripremaju za skladi štenje mešanjem antitela željenog stepena čistoć e sa opcionalnim farmaceutski prihvatljivim nosačima, pomoćnim supstancama ili stabilizatorima (Remington’s Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed.
[1980]), u obliku liofilizovanih formulacija ili vodenih rastvora. Prihvatljivi nosači, pomoć ne supstance ili stabilizatori su netoksični za primaoce u korišć enim dozama i koncentracijama, i uključuju pufere kao što su fosfat, citrat i druge organske kiseline; antioksidanti uključujuć i askorbinsku kiselinu i metionin; konzervansi (kao što su oktadecildimetilbenzil amonijum hlorid; heksametonijum hlorid; benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid; fenol, butil ili benzil alkohol; alkil parabeni kao što su metil ili propil paraben; katehol; resorcinol; cikloheksanol; 3-pentanol; i m-krezol); polipeptidi niske molekulske mase (manje od oko 10 ostataka); proteini, kao što su albumini u serumu, želatin ili imunoglobulini; hidrofilni polimeri kao što je polivinilpirolidon; aminokiseline kao što su glicin, glutamin, asparagin, histidin, arginin ili lizin; monosaharidi, disaharidi i drugi ugljeni hidrati uključujuć i glukozu, manozu ili dekstrine; helatni agensi kao što je EDTA; šeć eri kao što su saharoza, manitol, trehaloza ili sorbitol; kontra-joni koji formiraju so, poput natrijuma; kompleksi metala (npr. kompleksi Zn-proteina); i/ili nejonskih povr šinski aktivnih materija kao što su TVEEN ™, PLURONICS ™ ili polietilen glikol (PEG).
[0220] Formulacija ovde može takođe sadržati više od jednog aktivnog jedinjenja koliko je potrebno za određenu indikaciju koja se leči, poželjno one sa komplementarnim aktivnostima koje nemaju negativan uticaj jedni na druge. Na primer, mo že biti poželjno obezbediti antitela sa drugim specifičnostima. Alternativno, ili pored toga, kompozicija može sadržati citotoksično sredstvo, citokin, sredstvo za inhibiciju rasta i/ili antagonist malih molekula. Takvi molekuli su prikladno prisutni u kombinaciji u količinama koje su efikasne za predviđenu svrhu.
[0221] Aktivni sastojci se takođe mogu zahvaćene u pripremljene mikrokapsule, na primer, tehnikama konzerviranja ili polimerizacijom na površini, na primer, hidroksimetilceluloza ili želatinmikrokapsule i poli ((metilmetacilat) mikrokapsule, respektivno, u koloidnim sistemima za isporuku leka (za na primer, lipozomi, mikrosfere albumina, mikroemulzije, nanočestice i nanokapsule) ili u makroemulzijama. Takve tehnike su otkrivene u Remington’s Pharmaceutical Sciences 16. izdanje, Osol, A. izd. (1980).
[0222] Formulacije koje ć e se koristiti za in vivo primenu treba da budu sterilne, ili pribli žno tako. Ovo se lako postiže filtriranjem kroz sterilne membrane za filtriranje.
[0223] Mogu se pripremiti preparati sa produženim oslobađanjem. Pogodni primeri preparata sa produženim oslobađanjem uključuju polupropusne matrice čvrstih hidrofobnih polimera koji sadrže antitelo, čije su matrice u obliku oblikovanih predmeta, npr. filmovi ili mikrokapsule. Primeri matrica sa produženim oslobađanjem uključuju poliestere, hidrogelove (na primer, poli (2-hidroksietilmetakrilat) ili poli (vinilalkohol)), polilaktide (US patent br. 3,773,919), kopolimere L-glutaminske kiseline i gama etil-L-glutamat, nerazgradivi etilen-vinil acetat, razgradivi kopolimeri mlečne kiseline i glikolne kiseline kao što je LUPRON DEPOT ™ (injekcione mikrosfere sastavljene od kopolimer mlečne kiseline-glikolne kiseline i leuprolid acetata) i poli-D-(-)-3-hidroksi-buterna kiselina. Dok polimeri poput etilen-vinil acetata i glikolne kiseline-mlečne kiseline omoguć avaju oslobađanje molekula preko 100 dana, određeni hidrogelovi oslobađaju proteine u krać im vremenskim periodima.
[0224] Kada inkapsulirana antitela ostanu u telu duže vreme, mogu se denaturisati ili agregirati kao rezultat izlaganja vlagi na 37°C, što dovodi do gubitka biološke aktivnosti i moguć ih promena u imunogenosti. Mogu se osmisliti racionalne strategije za stabilizaciju u zavisnosti od uklju čenog mehanizma. Na primer, ako se otkrije da je mehanizam agregacije međumolekularno formiranje S-S veze kroz razmenu tio-disulfida, stabilizacija se može postić i modifikovanjem sulfhidrilnih ostataka, liofilizacijom iz kiselih rastvora, kontrolom sadržaja vlage, korišć enjem odgovaraju ć ih aditiva i razvijanjem specifičnog polimera matriks kompozicije.
Administrativni modaliteti
[0225] Antitela i hemoterapeutski agensi se daju subjektu, u skladu sa poznatim metodama, kao što je intravenozna primena kao bolus ili kontinuiranom infuzijom tokom određenog vremenskog perioda, intramuskularno, intraperitonealno, intracerobrospinalno, potko žno, intraartikularno, intrasinovijalno, intratekalno, oralno, topikalno ili inhalacijskim putevima. Po željna je intravenozna ili potkožna primena antitela.
Modaliteti lečenja
[0226] U metodama se terapija koristi za pružanje pozitivnog terapijskog odgovora u odnosu na bolest ili stanje. Pod "pozitivnim terapijskim odgovorom" podrazumeva se pobolj šanje bolesti ili stanja i/ili poboljšanje simptoma povezanih sa bolešć u ili stanjem. Na primer, pozitivan terapijski odgovor odnosio bi se na jedno ili više od sledeć ih poboljšanja bolesti: (1) smanjenje broja neoplastičnih ć elija; (2) pove ć anje neoplastične ć elijske smrti; (3) inhibicija preživljavanja neoplastičnihć elija; (5) inhibicija (tj. Usporavanje do određene mere, poželjno zaustavljanje) rasta tumora; (6) poveć ana stopa preživljavanja pacijenata; i (7) izvesno olakšanje od jednog ili više simptoma povezanih sa bolešć u ili stanjem.
[0227] Pozitivni terapijski odgovori kod bilo koje bolesti ili stanja mogu se odrediti standardizovanim kriterijumima odgovora specifičnim za tu bolest ili stanje. Odgovor tumora može se procijeniti radi promjene u morfologiji tumora (tj. Ukupnog optereć enja tumora, veli čine tumora i slično) pomoć u tehnika skrininga, kao što su snimanje magnetnom rezonancom (MRI), rendgensko snimanje, kompjuterizovana tomografija (CT), kosti skeniranje, endoskopija i uzorkovanje biopsije tumora, uključujuć i aspiraciju koštane srži (BMA) i prebrojavanje tumorskih ć elija u cirkulaciji.
[0228] Pored ovih pozitivnih terapijskih odgovora, subjekt na terapiji mo že doživeti blagotvorni efekat poboljšanja simptoma povezanih sa bolešć u.
[0229] Poboljšanje bolesti može se okarakterisati kao potpuni odgovor. Pod "potpunim odgovorom" podrazumeva se odsustvo klinički otkrivene bolesti sa normalizacijom svih prethodno abnormalnih radiografskih studija, koštane srži i cerebrospinalne tečnosti (CSF) ili abnormalnog monoklonalnog proteina u slučaju mijeloma.
[0230] Takav odgovor može trajati najmanje 4 do 8 nedelja, ili ponekad 6 do 8 nedelja, nakon tretmana prema postupcima prema pronalasku. Alternativno, pobolj šanje bolesti može se klasifikovati kao delimičan odgovor. Pod „delimičnim odgovorom“ se misli na najmanje oko 50% smanjenja svih merljivih optereć enja tumora (tj. Broja malignih ć elija prisutnih kod subjekta, ili izmerene mase tumorskih masa ili količine abnormalnog monoklonalnog proteina) u odsustvu novih lezija koje mogu trajati 4 do 8 nedelja ili 6 do 8 nedelja.
[0231] Tretman uključuje "terapeutski efikasnu količinu" upotrebljenih lekova. "Terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu efikasnu, u dozama i za vremenski period neophodan, za postizanje željenog terapijskog rezultata.
[0232] Terapeutski efikasna količina može varirati u zavisnosti od faktora kao što su stanje bolesti, starost, pol i težina pojedinca, i sposobnost lekova da izazovu željeni odgovor kod pojedinca. Terapeutski efikasna količina je takođe ona u kojoj terapeutski korisni efekti nadmašuju bilo koji toksični ili štetni efekat antitela ili dela antitela.
[0233] "Terapeutski efikasna količina" za terapiju tumora može se takođe meriti njenom sposobnošć u da stabilizuje progresiju bolesti. Sposobnost jedinjenja da inhibira rak mo že se proceniti u sistemu životinjskog modela koji predviđa efikasnost kod humanih tumora.
[0234] Alternativno, ovo svojstvo kompozicije može se proceniti ispitivanjem sposobnosti jedinjenja da inhibira rast ć elija ili da indukuje apoptozu pomo ć u in vitro testova koji su poznati strucima iz oblasti. Terapeutski efikasna količina terapijskog jedinjenja može smanjiti veličinu tumora ili na drugi način ublažiti simptome kod subjekta. Stručnjak u ovoj oblasti mogao bi da odredi takve količine na osnovu faktora kao što su veličina subjekta, ozbiljnost simptoma subjekta i odabrani sastav ili način primene.
[0235] Režimi doziranja su prilagođeni da obezbede optimalni željeni odgovor (npr. Terapijski odgovor). Na primer, može se primeniti jedan bolus, može se primeniti nekoliko podeljenih doza tokom vremena ili se doza može proporcionalno smanjiti ili poveć ati na što ukazuje potreba terapijske situacije. Parenteralni preparati se mogu formulisati u jedini čnom obliku doziranja radi lakše primene i ujednačenosti doze. Jedinični oblik doziranja koji se ovde koristi odnosi se na fizički odvojene jedinice prilagođene kao jedinstvene doze za subjekte koji se leče; svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu aktivnog jedinjenja proračunatu da proizvede željeni terapeutski efekat zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem.
[0236] Specifikacija jediničnih oblika doziranja diktirana je i direktno zavisi od (a) jedinstvenih karakteristika aktivnog jedinjenja i posebnog terapijskog efekta koji se želi postić i, i (b) ograničenja svojstvenih tehnici sastavljanja takvog aktivno jedinjenje za le čenje osetljivosti kod pojedinaca.
[0237] Efikasne doze i režimi doziranja za bispecifična antitela zavise od bolesti ili stanja koje treba lečiti i mogu ih odrediti stručnjaci u ovoj oblasti.
[0238] Na primer, neograničavajuć i opseg za terapeutski efikasnu količinu bispecifičnog antitela korišć enog u ovom pronalasku je oko 0,1-100 mg/kg, kao što je oko 0,1-50 mg/kg, na primer oko 0,1-20 mg /kg, kao što je oko 0,1-10 mg/kg, na primer oko 0,5, približno kao što je 0,3, oko 1 ili oko 3 mg/kg. U drugom izvođenju, antitelo se primenjuje u dozi od 1 mg/kg ili više, kao što je doza od 1 do 20 mg/kg, npr. doza od 5 do 20 mg/kg, npr. doza od 8 mg/kg.
[0239] Medicinski stručnjak sa običnim iskustvom u oblasti može lako odrediti i propisati efikasnu količinu potrebne farmaceutske kompozicije. Na primer, lekar ili veterinar mogu zapo četi doze leka koji se koristi u farmaceutskoj kompoziciji na nivoima nižim od onog potrebnog da bi se postigao željeni terapeutski efekat i postepeno poveć avati dozu dok se ne postigne željeni efekat.
[0240] U jednom primeru, bispecifično antitelo se primenjuje infuzijom u nedeljnoj dozi od 10 do 500 mg/kg, kao što je od 200 do 400 mg/kg. Takva primena se može ponoviti, npr. 1 do 8 puta, kao što je 3 do 5 puta. Davanje se može vršiti kontinuiranom infuzijom u periodu od 2 do 24 sata, na primer od 2 do 12 sati.
[0241] U jednom primeru, bispecifično antitelo se primenjuje sporom kontinuiranom infuzijom tokom dužeg perioda, kao što je više od 24 sata, ako je potrebno za smanjenje nuspojava, uključujuć i toksičnost.
[0242] U jednom primeru, bispecifično antitelo se primenjuje u nedeljnoj dozi od 250 mg do 2000 mg, kao što je na primer 300 mg, 500 mg, 700 mg, 1000 mg, 1500 mg ili 2000 mg, do 8 puta , na primer od 4 do 6 puta. Davanje se može vršiti kontinuiranom infuzijom u periodu od 2 do 24 sata, na primer od 2 do 12 sati. Takav režim se može ponoviti jednom ili više puta po potrebi, na primer, nakon 6 meseci ili 12 meseci. Doziranje se može odrediti ili prilagoditi merenjem količine jedinjenja ovog pronalaska u krvi nakon primene, na primer, uzimanjem biolo škog uzorka i upotrebom anti-idiotipskih antitela koja ciljaju na region za vezivanje antigena bispecifi čnog antitela.
[0243] U sledeć em primeru, bispecifično antitelo se primenjuje jednom nedeljno tokom 2 do 12 nedelja, na primer tokom 3 do 10 nedelja, na primer tokom 4 do 8 nedelja.
[0244] U jednom primeru, bispecifično antitelo se primenjuje terapijom održavanja, kao što je, na primer, jednom nedeljno u periodu od 6 meseci ili više.
[0245] U jednom primeru, bispecifično antitelo se primenjuje prema režimu koji uključuje jednu infuziju bispecifičnog antitela, nakon čega sledi infuzija bispecifičnog antitela konjugovanog sa radioizotopom. Režim se može ponoviti, na primer, 7 do 9 dana kasnije.
[0246] Kao neograničavajuć i primeri, tretman prema ovom pronalasku može se obezbediti kao dnevna doza antitela u količini od oko 0,1-100 mg/kg, kao što je 0,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,5, 2 , 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100 mg/kg, dnevno, najmanje jedan dan 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 ili 40, ili alternativno, najmanje jednu nedelju 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 , 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 nakon početka lečenja, ili bilo koje njihove kombinacije, koristeć i pojedinačne ili podeljene doze na svaka 24, 12, 8, 6, 4 ili 2 sata, ili bilo koju kombinaciju od toga.
[0247] U nekim primerima, njegov molekul bispecifičnog antitela se koristi u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih sredstava, npr. hemoterapeutski agens. Neograni čavajuć i primeri hemoterapeutskih agenasa koji ošteć uju DNK uključuju inhibitore topoizomeraze I (npr. Irinotekan, topotekan, kamptotecin i analoge) ili njihovi metaboliti i doksorubicin); inhibitori topoizomeraze II (npr. etopozid, tenipozid i daunorubicin); sredstva za alkilovanje (npr. melfalan, hlorambucil, busulfan, tiotepa, ifosfamid, karmustin, lomustin, semustin, streptozocin, dekarbazin, metotreksat, mitomicin C i ciklofosfamid); Interkalatori DNK (npr. Cisplatin, oksaliplatin i karboplatin); Interkalatori DNK i generatori slobodnih radikala kao što je bleomicin; i nukleozidni mimetici (npr.
5-fluorouracil, kapecitibin, gemcitabin, fludarabin, citarabin, merkaptopurin, tioguanin, pentostatin i hidroksiurea).
[0248] Hemoterapeutski agensi koji ometaju replikaciju ć elija uključuju: paklitaksel, docetaksel i srodne analoge; vinkristin, vinblastin i srodni analozi; talidomid, lenalidomid i srodni analozi (npr. CC-5013 i CC-4047); inhibitori proteinske tirozin kinaze (npr. imatinib mezilat i gefitinib); inhibitori proteasoma (npr. bortezomib); Inhibitori NF-kB, uključujuć i inhibitore IKB kinaze; antitela koja se vezuju za proteine prekomerno eksprimirana u raku i na taj način snižavaju ć elijsku replikaciju (npr. trastuzumab, rituksimab, cetuksimab i bevacizumab); i drugi inhibitori proteina ili enzima za koje je poznato da su pojačano regulisani, prekomerno izraženi ili aktivirani kod raka, čija inhibicija smanjuje regulaciju ć elija.
[0249] U nekim primerima, antitela se mogu koristiti pre, istovremeno sa ili nakon tretmana sa Velcade® (bortezomib).
PRIMERI
[0250] Dole su dati primeri koji ilustruju ovaj pronalazak. Ovi primeri nemaju nameru da ograni če ovaj pronalazak bilo kojom posebnom primenom ili teorijom rada. Za sve pozicije stalnih regiona o kojima se govori u ovom pronalasku, numerisanje je prema indeksu EU kao u Kabatu (Kabat et al., 1991, Sekvence proteina od imunološkog interesa, 5. izdanje, Služba za javno zdravlje Sjedinjenih Država, Nacionalni instituti za zdravlje , Bethesda). Stručnjaci u oblasti antitela ć e ceniti da se ova konvencija sastoji od nesekvencijalnog numerisanja u specifičnim regionima sekvence imunoglobulina, omoguć avaju ć i normalizovanu referencu na očuvane položaje u porodicama imunoglobulina. Shodno tome, položaji bilo kog imunoglobulina definisani EU indeksom neć e nužno odgovarati njegovom sekvencijalnom nizu.
[0251] Opšte i posebne naučne tehnike navedene su u publikacijama SAD 2015/0307629, 2014/0288275 i VO2014/145806.
PRIMERI PRIMER 1: ALTERNATIVNI FORMATI
Bispecifična proizvodnja
[0252] Nacrtane šeme za anti-CD38 k anti-CD3 bispecifične supstance prikazane su na slikama 1. Sekvence aminokiselina za anti-CD38 k anti-CD3 bispecifere alternativnog formata navedene su na slici 39 do slike 43. DNK koja kodira tri lanca potrebna za bispecifičnu ekspresiju generisana je sintezom gena (Blue Heron Biotechnologi, Bothell, Wash.) i subklonirana kori šć enjem standardnih tehnika molekularne biologije u ekspresioni vektor pTT5. Supstitucije su uvedene bilo usmerenom mutagenezom (QuikChange, Stratagene, Cedar Creek, Tex.) Ili dodatnom sintezom gena i subkloniranjem. DNK je transfektovana u ć elije HEK293E radi ekspresije, a nastali proteini su prečišć eni iz supernatanta pomo ć u afiniteta prema proteinu A (GE Healthcare) i hromatografijom sa katjonskom izmenom. Prinosi nakon afinitetnog prečišć avanja proteina A prikazani su na Slici 35. Hromatografsko prečišć avanje katjonske izmene je izvedeno koriš ć enjem kolone HiTrap SP HP (GE Healthcare) sa puferom za ispiranje/uravnoteženje od 50 mM MES, pH 6,0 i puferom za eluciju od 50 mM MES, pH 6,0 1 M NaCl linearni gradijent (videti sliku 36 za hromatograme).
Preusmerena citotoksičnost Tć elija
[0253] Anti-CD38 k anti-CD3 bispecifični agensi su in vitro okarakterisani za preusmerenu citotoksičnost T ć elija (RTCC) ć elijske linije CD38+ RPMI8266 mijeloma. 10 k ć elija RPMI8266 je inkubirano 24 sata sa 500 k humanih PBMC. RTCC je meren pomoć u LDH fluorescencije kako je naznačeno (videti sliku 37).
PRIMER 2
Preusmerena citotoksičnost Tć elija
[0254] Anti-CD38 x anti-CD3 bispecifični fab-scFv-Fc su in vitro okarakterisani zbog preusmerene citotoksičnosti T ć elija (RTCC) ć elijske linije CD38+ RPMI8266 mijeloma. 40k RPMI8266 ć elija inkubirane su 96 h sa 400k humanih PBMC. RTCC je meren protočnom citometrijom kako je naznačeno (vidi sliku 44). CD4+ i CD8+ T ć elijska ekspresija CD69, Ki-67 i PI-9 takođe je okarakterisana protočnom citometrijom i prikazana je na slici 45.
Mišji model antitumorske aktivnosti
[0255] U četiri grupe od po pet NOD scid gama (NSG) miševa presađeno je 5k106 RPMI8226TrS tumorskih ć elija (multipli mijelom, koji eksprimira luciferazu) intravenoznom injekcijom u repnu venu na Dan -23. Dana 0, miševima je intraperitonealno presađeno 10k106 humanih PBMC. Nakon presađivanja PBMC -a na Dan 0, uzprci se doziraju nedeljno (Dani 0, 7) intraperitonealnom injekcijom pri nivoima doza navedenim na Slici 4. Dizajn studije je dalje sa žet na Slici 46. Rast tumora prać en je merenjem ukupnog fluksa po mišu pomo ć u in vivo sistem za snimanje (IVIS®). I KsmAb13551 i KsmAb15426 pokazali su značajne antitumorske efekte (videti Sliku 47 i Sliku 48). Studije na majmunu Cinomolgus
[0256] Majmuni Cinomolgus dobili su jednu dozu bispecifikanata anti-CD38 k anti-CD3. Uključena je i bispecifična kontrola protiv RSV k antiCD3. Nivoi doze su bili: 20 mg/kg XmAb13551 (n = 2), 0,5 mg/kg XmAb15426 (n = 3), 3 mg/kg XmAb14702 (n = 3) ili 3 mg/kg XmAb13245 (anti-RSV k anti-Kontrola CD3, n = 3) (u 3 nezavisne studije). Anti-CD38 k anti-CD3 bispecifični brzo iscrpljujuć e CD38+ ć elije u perifernoj krvi (videti sliku 49). Anti-CD38 k anti-CD3 bispecifični proizvodi
4
rezultirali su aktivacijom T ć elija mereno ekspresijom CD69 (videti sliku 50). Mereni su i serumski nivoi IL-6 (videti sliku 51). Imajte na umu da je, u poređenju sa XmAb13551, XmAb15426 imao poveć ano trajanje iscrpljivanja ć elija CD38+ i niže nivoe aktivacije T ć elija i produkciju IL-6.
[0257] XmAb15426 i XmAb14702 su testirani na pojedinačnim dozama od 0,5 mg/kg i 3 mg/kg, respektivno. Oba antitela su se dobro podnosila kod ovih viših doza, u skladu sa umerenim nivoima IL6 koji su primeć eni u serumu od tretiranih majmuna. Štaviše, XmAb15426, sa srednjim afinitetom prema CD3, efikasnije je osiromašio CD38+ ć elije pri 0,5 mg/kg u poređenju sa originalnim XmAb13551 visokog afiniteta doziranim pri 2, 5 ili 20 mg/kg. Osiromašenje XmAb15426 je bilo održivije u poređenju sa najveć om dozom XmAb13551 u prethodnoj studiji (7 naspram 2 dana, respektivno). Značajno je da je iscrpljivanje ciljnih ć elija ve ć e za XmAb15426, ali je aktivacija T ć elija (indukcija CD69, CD25 i PD1) bila mnogo niža kod majmuna tretiranih sa XmAb15426 čak i 25 puta već om nego u grupi od 20 mg/kg XmAb13551. XmAb14702, sa vrlo niskim afinitetom prema CD3, imao je mali uticaj na CD38+ ć elije i aktivaciju T ć elija.
[0258] Ovi rezultati pokazuju da je moduliranje aktivacije T ć elija slabljenjem afiniteta prema CD3 obeć avaju ć i metod za poboljšanje terapeutskog prozora bispecifičnih antitela koja angažuju T ć elije. Ova strategija ima potencijal da proširi skup antigena podložnih ciljanoj imunoterapiji T ć elija poboljšanjem podnošljivosti i omogu ć avanjem ve ć eg doziranja da se prevaziđe fenomen sinka antigena sa ciljevima kao što je CD38. Pokazali smo da smanjenjem afiniteta za CD3, XmAb 15426 efikasno iscrpljuje ć elije CD38+ dok minimizira efekte CRS-a u poređenju sa uporednim dozama njegovog visokoafinitetnog XmAb13551.

Claims (11)

Patentni zahtevi
1. Anti-CD3 x anti-CD20 heterodimerno antitelo obuhvatajući svaki od polipeptida HC1 (Fab-Fc), HC2 (scFv-Fc) i LC sa slike 74.
2. Heterodimerno antitelo prema patentnom zahtevu 1, obuhvataju ći HC1 (Fab-Fc), HC2 (scFv-Fc) i LC sa slike 74.
3. Kompozicija nukleinske kiseline obuhvatajući tri nukleinske kiseline koje kodiraju heterodimerno antitelo prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2.
4. Kompozicija vektora ekspresije obuhvatajući tri ekspresiona vektora od kojih svaki sadrži nukleinsku kiselinu, tako da tri ekspresiona vektora kodiraju heterodimerno antitelo prema patentnom zahtevu 1 ili 2.
5.Ć elija doma ć ina obuhvatajući kompoziciju nukleinske kiseline prema patentnom zahtevu 3.
6.Ć elija doma ć ina obuhvatajući kompoziciju ekspresionog vektora prema patentnom zahtevu 4.
7. Postupak za dobijanje heterodimernog antitela prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, pri čemu sadrži kultivisanje ć elije doma ć ina prema patentnom zahtevu 5 ili patentnom zahtevu 6 pod uslovima u kojima je navedeno antitelo eksprimirano, i pod uslovima oporavka navedenog antitela.
8. Heterodimerno antitelo prema patentnom zahtevu 1 ili 2, za upotrebu u lečenju raka.
9. Heterodimerno antitelo za upotrebu prema patentnom zahtevu 8, pri čemu je navedeni rak hematopoetski rak.
10. Heterodimerno antitelo za upotrebu prema patentnom zahtevu 9, pri čemu je navedeni hematopoetski rak Bć elijski limfom ili leukemija.
11. Heterodimerno antitelo za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, pri čemu je navedeni B ć elijski limfom ili leukemija odabrana iz grupe koju čine ne-Hodgkinov limfom (NHL), Burkitov limfom (BL), multipla mijelom (MM), B hronična limfocitna leukemija (B-CLL), B i T akutna limfocitna leukemija (ALL), akutna mijeloidna leukemija (AML), leukemija vla šastih ć elija (HCL), Hodgkinov limfom (HL), hronična limfocitna leukemija (CLL) i hronična mijeloidna leukemija (CML).
RS20211005A 2014-11-26 2015-11-25 Heterodimerna antitela koja vezuju cd3 i cd20 RS62332B1 (sr)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462084908P 2014-11-26 2014-11-26
US201462085027P 2014-11-26 2014-11-26
US201462085117P 2014-11-26 2014-11-26
US201462085106P 2014-11-26 2014-11-26
US201562159111P 2015-05-08 2015-05-08
US201562250971P 2015-11-04 2015-11-04
US201562251005P 2015-11-04 2015-11-04
EP15805722.4A EP3223845B1 (en) 2014-11-26 2015-11-25 Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
PCT/US2015/062772 WO2016086189A2 (en) 2014-11-26 2015-11-25 Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS62332B1 true RS62332B1 (sr) 2021-10-29

Family

ID=54834964

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211005A RS62332B1 (sr) 2014-11-26 2015-11-25 Heterodimerna antitela koja vezuju cd3 i cd20

Country Status (37)

Country Link
US (7) US10889653B2 (sr)
EP (2) EP3928788A1 (sr)
JP (5) JP6696982B2 (sr)
KR (2) KR102689285B1 (sr)
CN (4) CN110894240B (sr)
AU (5) AU2015353409B2 (sr)
BR (1) BR112017011092A2 (sr)
CA (1) CA2967426A1 (sr)
CL (1) CL2017001328A1 (sr)
CO (1) CO2017005388A2 (sr)
CU (1) CU24597B1 (sr)
CY (1) CY1124993T1 (sr)
DK (1) DK3223845T3 (sr)
EA (1) EA201791139A1 (sr)
EC (1) ECSP17040521A (sr)
ES (1) ES2886523T3 (sr)
GT (1) GT201700112A (sr)
HR (1) HRP20211273T1 (sr)
HU (1) HUE055115T2 (sr)
IL (1) IL252480B2 (sr)
LT (1) LT3223845T (sr)
MA (1) MA55043A (sr)
MD (1) MD3223845T2 (sr)
MX (2) MX384025B (sr)
MY (1) MY184268A (sr)
NZ (1) NZ732144A (sr)
PE (1) PE20171324A1 (sr)
PH (1) PH12017500968B1 (sr)
PL (1) PL3223845T3 (sr)
PT (1) PT3223845T (sr)
RS (1) RS62332B1 (sr)
SA (1) SA517381604B1 (sr)
SG (1) SG11201704283PA (sr)
SI (1) SI3223845T1 (sr)
SM (1) SMT202100521T1 (sr)
TN (1) TN2017000223A1 (sr)
WO (1) WO2016086189A2 (sr)

Families Citing this family (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3029066B1 (en) 2010-07-29 2019-02-20 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
TWI679212B (zh) 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US10131710B2 (en) * 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
CN105051069B (zh) 2013-01-14 2019-12-10 Xencor股份有限公司 新型异二聚体蛋白
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
EP3421495A3 (en) 2013-03-15 2019-05-15 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
KR102497443B1 (ko) 2014-03-28 2023-02-08 젠코어 인코포레이티드 Cd38 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
BR112017011166A2 (pt) 2014-11-26 2018-02-27 Xencor, Inc. anticorpos heterodiméricos que se ligam a cd3 e cd38
CA2967426A1 (en) 2014-11-26 2016-06-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
EP3237449A2 (en) 2014-12-22 2017-11-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
MA41279A (fr) * 2015-05-08 2021-04-28 Xencor Inc Anticorps hétérodimériques se liant aux antigènes cd3 et tumoraux
PE20221007A1 (es) 2015-06-24 2022-06-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-receptor de transferrina con afinidad disenada
TWI829617B (zh) 2015-07-31 2024-01-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｆｌｔ３及ｃｄ３抗體構築體
TWI796283B (zh) 2015-07-31 2023-03-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｍｓｌｎ及ｃｄ３抗體構築體
TWI744242B (zh) 2015-07-31 2021-11-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Egfrviii及cd3抗體構築體
EA039859B1 (ru) 2015-07-31 2022-03-21 Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3
WO2017055542A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-human cd20/human transferrin receptor antibodies and methods of use
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
CN108699136B (zh) 2015-12-07 2022-03-18 Xencor股份有限公司 结合cd3和psma的异二聚抗体
IL313507A (en) 2016-02-03 2024-08-01 Amgen Res Munich Gmbh Constructs of bispecific antibodies to BCMA and CD3 that bind to T cells, preparations containing the same and uses thereof
TN2018000266A1 (en) 2016-02-03 2020-01-16 Amgen Res Munich Gmbh Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs.
EP3464370A1 (en) * 2016-06-01 2019-04-10 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3 for use in the treatment of lymphoma
CA3026151A1 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Xencor, Inc. Bispecific checkpoint inhibitor antibodies
MX2018016265A (es) 2016-06-28 2019-07-04 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen al receptor 2 de somatostatina.
EP3484516A4 (en) * 2016-07-14 2020-03-18 Fred Hutchinson Cancer Research Center MULTIPLE SPECIFIC BINDING DOMAIN CONSTRUCTS WITH DIFFERENT EPITOP BINDING FOR TREATING CANCER
TWI790206B (zh) * 2016-07-18 2023-01-21 法商賽諾菲公司 特異性結合至ｃｄ３和ｃｄ１２３的雙特異性抗體樣結合蛋白
CN117143247A (zh) * 2016-07-19 2023-12-01 伊班绰斯有限责任公司 双特异性蛋白质及其制备方法
WO2018022957A1 (en) * 2016-07-29 2018-02-01 Tarveda Therapeutics, Inc. T cell binding conjugates and methods of use
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
PE20240950A1 (es) 2016-10-14 2024-05-06 Xencor Inc PROTEINAS DE FUSION FC HETERODIMERICAS IL 15/IL 15R(alfa)
SG11201909160WA (en) * 2017-04-11 2019-10-30 Inhibrx Inc Multispecific polypeptide constructs having constrained cd3 binding and methods of using the same
US20200179511A1 (en) 2017-04-28 2020-06-11 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
KR20200041834A (ko) 2017-06-01 2020-04-22 젠코어 인코포레이티드 Cd123 및 cd3에 결합하는 이중특이성 항체
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
UY37758A (es) 2017-06-12 2019-01-31 Novartis Ag Método de fabricación de anticuerpos biespecíficos, anticuerpos biespecíficos y uso terapéutico de dichos anticuerpos
CN110785187B (zh) 2017-06-22 2024-04-05 诺华股份有限公司 针对cd73的抗体分子及其用途
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018237341A1 (en) * 2017-06-22 2018-12-27 Development Center For Biotechnology A TARGET CELL-DEPENDENT T CELL ENGAGING AND ACTIVATION ASYMMETRIC HETERODIMERIC Fc-ScFv FUSION ANTIBODY FORMAT FOR CANCER THERAPY
AU2018291497A1 (en) 2017-06-30 2020-01-16 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra and antigen binding domains
WO2019023097A1 (en) * 2017-07-26 2019-01-31 Smet Pharmaceutical Inc ASYMMETRIC BISPECIFIC ANTIBODIES AND THEIR USE
EP3661555B1 (en) * 2017-08-01 2025-04-16 Ab Therapeutics, Inc. Bispecific antibodies and uses thereof
PE20200849A1 (es) * 2017-10-10 2020-08-20 Numab Therapeutics AG Anticuerpo multiespecifico
AU2018347607B2 (en) 2017-10-14 2025-08-21 Cytomx Therapeutics, Inc. Antibodies, activatable antibodies, bispecific antibodies, and bispecific activatable antibodies and methods of use thereof
KR20200085828A (ko) 2017-11-08 2020-07-15 젠코어 인코포레이티드 신규의 항-pd-1 서열을 사용한 이중특이적 및 단일특이적 항체
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CA3083949A1 (en) 2017-11-30 2020-06-06 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
EP3728302A1 (en) 2017-12-19 2020-10-28 Xencor, Inc. Engineered il-2 fc fusion proteins
EP4495142A3 (en) * 2017-12-22 2025-05-07 Argenx BVBA Bispecific antigen binding construct
WO2019160904A1 (en) 2018-02-15 2019-08-22 Macrogenics, Inc. Variant cd3-binding domains and their use in combination therapies for the treatment of disease
GB201802487D0 (en) 2018-02-15 2018-04-04 Argenx Bvba Cytokine combination therapy
EP3773911A2 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
WO2019200022A1 (en) * 2018-04-11 2019-10-17 Inhibrx, Inc. Multispecific polypeptide constructs having constrained cd3 binding and related methods and uses
KR20210003814A (ko) * 2018-04-18 2021-01-12 젠코어 인코포레이티드 IL-15/IL-15Rα Fc-융합 단백질 및 TIM-3 항원 결합 도메인을 함유하는 TIM-3 표적화 이종이량체 융합 단백질
MX2020010910A (es) 2018-04-18 2021-02-09 Xencor Inc Proteinas de fusion heterodimericas dirigidas a pd-1 que contienen proteinas de fusion il-15 / il-15ra fc y dominios de union al antigeno pd-1 y usos de los mismos.
EP3781597A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Lag-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and lag-3 antigen binding domains
EP3781596A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Il-15/il-15ra heterodimeric fc fusion proteins and uses thereof
US20210230281A1 (en) 2018-04-27 2021-07-29 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that bind cd123 and cd3
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
KR20250151605A (ko) 2018-06-01 2025-10-21 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
TW202035451A (zh) 2018-07-24 2020-10-01 美商英伊布里克斯公司 含有受限cd3結合域及受體結合區之多重特異性多肽構築體及其使用方法
US20210380684A1 (en) * 2018-09-28 2021-12-09 Kyowa Kirin Co., Ltd. Antibody composition
WO2020062155A1 (en) * 2018-09-29 2020-04-02 Mab-Legend Biotech Co., Ltd. Dual targeting antigen binding molecule
MX2021003765A (es) * 2018-10-03 2021-07-15 Xencor Inc Proteínas il-12 de fusión a fc heterodimérico.
US20210340273A1 (en) * 2018-10-11 2021-11-04 Inhlbrx, inc. 5t4 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof
CA3115082A1 (en) * 2018-10-11 2020-04-16 Inhibrx, Inc. B7h3 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof
WO2020076977A2 (en) 2018-10-11 2020-04-16 Inhibrx, Inc. Dll3 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof
BR112021006783A2 (pt) 2018-10-12 2021-07-13 Xencor, Inc. proteína de fusão fc heterodimérica de il-15/r¿ direcionada, composição de ácido nucleico, composição de vetor de expressão, célula hospedeira, e, métodos de produção da proteína de fusão fc heterodimérica de il-15/r¿ direcionada e de tratamento de um câncer.
CA3121699A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Morphosys Ag Multispecific antigen-binding molecules
CN113438961A (zh) 2018-12-20 2021-09-24 Xencor股份有限公司 含有IL-15/IL-15Rα和NKG2D抗原结合结构域的靶向异二聚体Fc融合蛋白
US12463463B2 (en) 2019-01-28 2025-11-04 Ab Therapeutics, Inc. Bispecific antibodies and uses thereof
US12331119B2 (en) * 2019-02-22 2025-06-17 Wuhan Yzy Biopharma Co., Ltd. Modified Fc fragment, antibody comprising same, and application thereof
AU2020232605A1 (en) 2019-03-01 2021-10-21 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3
KR102239781B1 (ko) 2019-04-08 2021-04-13 주식회사 녹십자 Gpnmb 및 cd3에 특이적으로 결합하는 이중특이적 항체 및 이의 용도
TWI905099B (zh) 2019-05-21 2025-11-21 瑞士商諾華公司 Cd19 結合分子及其用途
US12037378B2 (en) 2019-05-21 2024-07-16 Novartis Ag Variant CD58 domains and uses thereof
KR20220010743A (ko) 2019-05-21 2022-01-26 노파르티스 아게 Bcma에 대한 삼중특이적 결합 분자 및 이의 용도
AU2020307471A1 (en) * 2019-06-24 2022-01-27 Novartis Ag Dosing regimen and combination therapies for multispecific antibodies targeting B-cell maturation antigen
WO2021026387A2 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Xencor, Inc. HETERODIMERIC IgG-LIKE BISPECIFIC ANTIBODIES
WO2021053559A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
EP4032274A4 (en) * 2019-09-19 2023-11-01 Telefonaktiebolaget Lm Ericsson (Publ) METHOD ALLOWING AN INTRA PREDICTION BLOCK BASED ON A MATRIX TO COMPRISE MULTIPLE TRANSFORMATION BLOCKS
TWI841790B (zh) * 2019-09-30 2024-05-11 大陸商和鉑醫藥（上海）有限責任公司 靶向cd3的抗體、雙特異性抗體及其用途
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
CN113185611A (zh) * 2019-12-05 2021-07-30 启愈生物技术(上海)有限公司 含有肿瘤相关抗原taa抗体的三功能融合蛋白及其应用
KR20220148175A (ko) 2020-01-29 2022-11-04 인히브릭스, 인크. Ｃｄ28 단일 도메인 항체 및 이의 다가 및 다중특이적 구조체
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
US11365239B2 (en) 2020-03-20 2022-06-21 Tsb Therapeutics (Beijing) Co., Ltd. Anti-SARS-COV-2 antibodies and uses thereof
CN116249549A (zh) 2020-03-27 2023-06-09 诺华股份有限公司 用于治疗增殖性疾病和自身免疫病症的双特异性组合疗法
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
JP7773528B2 (ja) 2020-08-19 2025-11-19 ゼンコア インコーポレイテッド 抗ｃｄ２８組成物
CN112062855B (zh) * 2020-08-26 2024-08-30 北京天诺健成医药科技有限公司 一种含有衔接器的药物治疗剂的开发和应用
CN114106195B (zh) * 2020-08-27 2024-09-17 盛禾(中国)生物制药有限公司 一种多功能融合蛋白及其用途
EP4232478A1 (en) * 2020-10-23 2023-08-30 Xencor, Inc. Anti-cd20 antibodies and therapeutic uses thereof
IL302569A (en) 2020-11-06 2023-07-01 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
WO2022097061A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Anti-cd19 agent and b cell targeting agent combination therapy for treating b cell malignancies
SI4284512T1 (sl) 2021-01-28 2025-06-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sestavki in postopki za zdravljenje sindroma sproščanja citokinov
CA3212665A1 (en) 2021-03-09 2022-09-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6
KR20230154311A (ko) 2021-03-10 2023-11-07 젠코어 인코포레이티드 Cd3 및 gpc3에 결합하는 이종이량체 항체
JP7734994B2 (ja) * 2021-06-02 2025-09-08 クレ バイオテクノロジ （シャンハイ） カンパニー リミテッド 抗ｃｄ３抗体変異体、融合タンパク質および適用
JP2024520739A (ja) * 2021-06-04 2024-05-24 ゼンコア， インク． Ｃｄ２０及びｃｄ３に結合する二重特異性抗体の投与
WO2022262959A1 (en) * 2021-06-15 2022-12-22 Astellas Pharma Europe Bv Bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3
CA3227537A1 (en) * 2021-07-27 2023-02-02 Morphosys Ag Combinations of antigen binding molecules
AU2022392829A1 (en) * 2021-11-22 2024-07-11 Janssen Biotech, Inc. Compositions comprising enhanced multispecific binding agents for an immune response
CA3240046A1 (en) 2021-12-14 2023-06-22 Cdr-Life Ag Dual mhc-targeting t cell engager
US20230357446A1 (en) 2022-04-11 2023-11-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for universal tumor cell killing
US12161673B2 (en) 2022-09-14 2024-12-10 Cdr-Life Ag MAGE-A4 peptide dual T cell engagers
WO2024089551A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Janssen Biotech, Inc. Msln and cd3 binding agents and methods of use thereof
IL322545A (en) 2023-02-17 2025-10-01 Regeneron Pharma Induced NK cells responding to bispecific CD3/TAA antibodies
WO2025032508A1 (en) 2023-08-07 2025-02-13 Janssen Biotech, Inc. Enpp3 and cd3 binding agents and methods of use thereof
WO2025041836A1 (ja) * 2023-08-23 2025-02-27 Meiji Seika ファルマ株式会社 新規抗切断型変異ｃａｌｒ－ｃｄ３二重特性抗体及び医薬組成物
WO2025210181A1 (en) 2024-04-04 2025-10-09 Cdr-Life Ag Antigen binding proteins targeting an hla-restricted kk-lc-1 peptide
WO2025209593A1 (zh) * 2024-04-06 2025-10-09 华深智药生物科技(苏州)有限公司 一种多特异性抗体t细胞衔接器
WO2025215160A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Cdr-Life Ag Antigen binding proteins targeting an hla-restricted prame peptide

Family Cites Families (445)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US459007A (en) 1891-09-08 Porte
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
CU22545A1 (es) 1994-11-18 1999-03-31 Centro Inmunologia Molecular Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4169888A (en) 1977-10-17 1979-10-02 The Upjohn Company Composition of matter and process
US4307016A (en) 1978-03-24 1981-12-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Demethyl maytansinoids
US4256746A (en) 1978-11-14 1981-03-17 Takeda Chemical Industries Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use
JPS55102583A (en) 1979-01-31 1980-08-05 Takeda Chem Ind Ltd 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound
JPS55162791A (en) 1979-06-05 1980-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Antibiotic c-15003pnd and its preparation
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
JPS5645483A (en) 1979-09-19 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd C-15003phm and its preparation
JPS5645485A (en) 1979-09-21 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd Production of c-15003pnd
EP0028683A1 (en) 1979-09-21 1981-05-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic C-15003 PHO and production thereof
US4364935A (en) 1979-12-04 1982-12-21 Ortho Pharmaceutical Corporation Monoclonal antibody to a human prothymocyte antigen and methods of preparing same
WO1982001188A1 (en) 1980-10-08 1982-04-15 Takeda Chemical Industries Ltd 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same
US4450254A (en) 1980-11-03 1984-05-22 Standard Oil Company Impact improvement of high nitrile resins
US4315929A (en) 1981-01-27 1982-02-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of controlling the European corn borer with trewiasine
US4313946A (en) 1981-01-27 1982-02-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora
JPS57192389A (en) 1981-05-20 1982-11-26 Takeda Chem Ind Ltd Novel maytansinoid
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4943533A (en) 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US4970198A (en) 1985-10-17 1990-11-13 American Cyanamid Company Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex)
EP0206448B1 (en) 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
EP0272253A4 (en) 1986-03-07 1990-02-05 Massachusetts Inst Technology METHOD FOR IMPROVING GLYCOPROTE INSTABILITY.
JPH0684377B2 (ja) 1986-04-17 1994-10-26 協和醗酵工業株式会社 新規化合物ｄｃ―８８ａ及びｄｃ―８９ａ１
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4880935A (en) 1986-07-11 1989-11-14 Icrf (Patents) Limited Heterobifunctional linking agents derived from N-succinimido-dithio-alpha methyl-methylene-benzoates
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5053394A (en) 1988-09-21 1991-10-01 American Cyanamid Company Targeted forms of methyltrithio antitumor agents
WO1989006692A1 (en) 1988-01-12 1989-07-27 Genentech, Inc. Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function
IL106992A (en) 1988-02-11 1994-06-24 Bristol Myers Squibb Co Acylhydrazone derivatives of anthracycline and methods for their preparation
US5084468A (en) 1988-08-11 1992-01-28 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Dc-88a derivatives
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
JP2598116B2 (ja) 1988-12-28 1997-04-09 協和醗酵工業株式会社 新規物質ｄｃ１１３
JP2510335B2 (ja) 1989-07-03 1996-06-26 協和醗酵工業株式会社 Ｄｃ―８８ａ誘導体
US5187186A (en) 1989-07-03 1993-02-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Pyrroloindole derivatives
CA2026147C (en) 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
CA2082152C (en) 1990-05-07 1997-11-18 Kyriacos C. Nicolaou Intermediates in the formation of the calicheamicin and esperamicin oligosaccharides
US5968509A (en) 1990-10-05 1999-10-19 Btp International Limited Antibodies with binding affinity for the CD3 antigen
KR100240308B1 (ko) 1991-03-06 2000-01-15 플레믹 크리스티안 인간화된단클론성항체및혼성단클론성항체
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
EP0940468A1 (en) 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
US5264586A (en) 1991-07-17 1993-11-23 The Scripps Research Institute Analogs of calicheamicin gamma1I, method of making and using the same
US5622929A (en) 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
GB9206422D0 (en) 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
DK0563475T3 (da) 1992-03-25 2000-09-18 Immunogen Inc Konjugater af cellebindende midler og derivater af CC-1065
ZA932522B (en) 1992-04-10 1993-12-20 Res Dev Foundation Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens
US6329507B1 (en) 1992-08-21 2001-12-11 The Dow Chemical Company Dimer and multimer forms of single chain polypeptides
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
DK0672142T3 (da) 1992-12-04 2001-06-18 Medical Res Council Multivalente og multispecifikke bindingsproteiner samt fremstilling og anvendelse af disse
SG55079A1 (en) 1992-12-11 1998-12-21 Dow Chemical Co Multivalent single chain antibodies
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
CA2173150C (en) 1993-10-01 2004-11-30 Kyoichi Sakakibara Novel peptide derivatives
GB9401182D0 (en) 1994-01-21 1994-03-16 Inst Of Cancer The Research Antibodies to EGF receptor and their antitumour effect
US5641780A (en) 1994-04-22 1997-06-24 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Pyrrolo-indole derivatives
JPH07309761A (ja) 1994-05-20 1995-11-28 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd デュオカルマイシン誘導体の安定化法
US5945311A (en) 1994-06-03 1999-08-31 GSF--Forschungszentrumfur Umweltund Gesundheit Method for producing heterologous bi-specific antibodies
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5550246A (en) 1994-09-07 1996-08-27 The Scripps Research Institute Calicheamicin mimics
US5541087A (en) 1994-09-14 1996-07-30 Fuji Immunopharmaceuticals Corporation Expression and export technology of proteins as immunofusins
US5663149A (en) 1994-12-13 1997-09-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
EP0831880A4 (en) 1995-06-07 2004-12-01 Imclone Systems Inc ANTIBODIES AND FRAGMENTS OF ANTIBODIES INHIBITING TUMOR GROWTH
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US7696338B2 (en) 1995-10-30 2010-04-13 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Immunotoxin fusion proteins and means for expression thereof
ATE234635T1 (de) 1995-12-22 2003-04-15 Bristol Myers Squibb Co Verzweigte hydrazongruppen enthaltende kuppler
WO1997024373A1 (en) 1995-12-29 1997-07-10 Medvet Science Pty. Limited Monoclonal antibody antagonists to haemopoietic growth factors
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
AUPN999096A0 (en) 1996-05-22 1996-06-13 Northstar Biologicals Pty Ltd Peptides, antibodies, vaccines & uses thereof
EP0915987A2 (en) 1997-04-21 1999-05-19 Donlar Corporation POLY-($g(a)-L-ASPARTIC ACID), POLY-($g(a)-L-GLUTAMIC ACID) AND COPOLYMERS OF L-ASP AND L-GLU, METHOD FOR THEIR PRODUCTION AND THEIR USE
DK0979281T3 (da) 1997-05-02 2005-11-21 Genentech Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multispecifikke antistoffer med heteromultimere og fælles bestanddele
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
DK1049787T3 (da) 1998-01-23 2005-04-04 Vlaams Interuniv Inst Biotech Antistofderivater med flere anvendelsesmuligheder
ES2434961T5 (es) 1998-04-20 2018-01-18 Roche Glycart Ag Ingeniería de glicosilación de anticuerpos para mejorar la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
DK1071752T3 (da) 1998-04-21 2003-10-20 Micromet Ag CD19xCD3-specifikke polypeptider og anvendelsen deraf
US6455677B1 (en) 1998-04-30 2002-09-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh FAPα-specific antibody with improved producibility
US7074405B1 (en) 1998-06-22 2006-07-11 Immunomedics, Inc. Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy
GB9815909D0 (en) 1998-07-21 1998-09-16 Btg Int Ltd Antibody preparation
US6723538B2 (en) 1999-03-11 2004-04-20 Micromet Ag Bispecific antibody and chemokine receptor constructs
EP1176195B1 (en) 1999-04-09 2013-05-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
US6939545B2 (en) 1999-04-28 2005-09-06 Genetics Institute, Llc Composition and method for treating inflammatory disorders
NZ517202A (en) 1999-08-24 2004-05-28 Medarex Inc Human CTLA-4 antibodies and their uses
US7303749B1 (en) 1999-10-01 2007-12-04 Immunogen Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
HK1049787B (en) 1999-10-01 2014-07-25 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
AU7950400A (en) 1999-10-19 2001-04-30 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Process for producing polypeptide
US6716410B1 (en) 1999-10-26 2004-04-06 The Regents Of The University Of California Reagents and methods for diagnosing, imaging and treating atherosclerotic disease
RU2317999C2 (ru) 2000-02-25 2008-02-27 Те Гавернмент Оф Те Юнайтед Стейтс, Эз Репризентед Бай Те Секретари Оф Те Департмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисез SCFV ПРОТИВ EGFRvIII С УЛУЧШЕННОЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬЮ И ВЫХОДОМ, ИММУНОТОКСИНЫ НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
US7449443B2 (en) 2000-03-23 2008-11-11 California Institute Of Technology Method for stabilization of proteins using non-natural amino acids
US20010035606A1 (en) 2000-03-28 2001-11-01 Schoen Alan H. Set of blocks for packing a cube
JP2003533187A (ja) 2000-05-03 2003-11-11 アムジエン・インコーポレーテツド 治療薬としてのＦｃドメインを含む修飾ペプチド
BR0110927A (pt) 2000-05-19 2003-03-11 Scancell Ltd Anticorpo, ácido nucléico, vetor, célula, método de fabricar um anticorpo, composição farmacêutica, uso de um anticorpo ou de um ácido nucleico, e, método para o tratamento ou profilaxia do câncer
JP2004511430A (ja) 2000-05-24 2004-04-15 イムクローン　システムズ　インコーポレイティド 二重特異性免疫グロブリン様抗原結合蛋白および製造方法
US6586207B2 (en) 2000-05-26 2003-07-01 California Institute Of Technology Overexpression of aminoacyl-tRNA synthetases for efficient production of engineered proteins containing amino acid analogues
ATE545703T1 (de) 2000-07-25 2012-03-15 Immunomedics Inc Multivalentes zielbindendes protein
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
DE10043437A1 (de) 2000-09-04 2002-03-28 Horst Lindhofer Verwendung von trifunktionellen bispezifischen und trispezifischen Antikörpern zur Behandlung von malignem Aszites
CN102311986B (zh) 2000-10-06 2015-08-19 协和发酵麒麟株式会社 产生抗体组合物的细胞
CA2424977C (en) 2000-10-06 2008-03-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
AU2002251913A1 (en) 2001-02-02 2002-08-19 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies and uses thereof
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
JP2005500018A (ja) 2001-04-02 2005-01-06 アイデック ファーマスーティカルズ コーポレイション ＧｎＴＩＩＩと同時発現する組換え抗体
US6884869B2 (en) 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US7129261B2 (en) 2001-05-31 2006-10-31 Medarex, Inc. Cytotoxic agents
JP4298498B2 (ja) 2001-06-13 2009-07-22 ゲンマブ エー／エス 上皮成長因子受容体（ｅｇｆｒ）に対するヒトモノクローナル抗体
JP2003111595A (ja) * 2001-06-25 2003-04-15 Kyogo Ito 腫瘍抗原
WO2003002144A1 (en) 2001-06-26 2003-01-09 Imclone Systems Incorporated Bispecific antibodies that bind to vegf receptors
US6513428B1 (en) 2001-07-23 2003-02-04 Heidelberger Druckmaschinen Ag Device and method for attaching a printing web to a webbing sail and device and method for webbing-up a printing machine
US20030157108A1 (en) 2001-10-25 2003-08-21 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
CA2476166C (en) * 2002-02-14 2011-11-15 Immunomedics, Inc. Anti-cd20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use
EP1490677A4 (en) 2002-02-27 2006-01-18 California Inst Of Techn COMPUTER METHOD FOR DESIGNING ENZYMES FOR THE INCORPORATION OF AMINO ACID ANALOGUES INTO PROTEINS
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20080219974A1 (en) 2002-03-01 2008-09-11 Bernett Matthew J Optimized antibodies that target hm1.24
US7332580B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The University Of California Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
NZ571508A (en) 2002-05-24 2010-05-28 Schering Corp Neutralizing human anti-IGFR antibody
WO2005056606A2 (en) 2003-12-03 2005-06-23 Xencor, Inc Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
DK1545613T3 (da) 2002-07-31 2011-11-14 Seattle Genetics Inc Auristatinkonjugater og deres anvendelse til behandling af cancer, en autoimmun sygdom eller en infektiøs sygdom
US8946387B2 (en) 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US20060235208A1 (en) 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
US7820166B2 (en) 2002-10-11 2010-10-26 Micromet Ag Potent T cell modulating molecules
WO2004043493A1 (en) 2002-11-14 2004-05-27 Syntarga B.V. Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers
NZ540555A (en) 2002-11-15 2008-04-30 Genmab As Antibody therapeutics for treatingand/or preventing diseases associated with cells expressing CD25, including autoimmune diseases, inflammatory and hyperproliferative skin disorders
CN1753912B (zh) 2002-12-23 2011-11-02 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US7610156B2 (en) 2003-03-31 2009-10-27 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
CR20170291A (es) 2003-05-20 2017-07-27 Immunogen Inc Agentes citotoxicos mejorados que comprenden nuevos maitansinóides
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
WO2004106383A1 (en) 2003-05-31 2004-12-09 Micromet Ag Pharmaceutical composition comprising a bispecific antibody for epcam
JP2008501621A (ja) 2003-05-31 2008-01-24 マイクロメット アクツィエン ゲゼルシャフト Ｂ細胞関連疾患を処置するための二重特異性抗ｃｄ３、抗ｃｄ１９抗体構築物を含む薬学的組成物
US7888134B2 (en) 2003-06-05 2011-02-15 Oakland University Immunosensors: scFv-linker design for surface immobilization
US20050100543A1 (en) 2003-07-01 2005-05-12 Immunomedics, Inc. Multivalent carriers of bi-specific antibodies
US20150071948A1 (en) 2003-09-26 2015-03-12 Gregory Alan Lazar Novel immunoglobulin variants
US20060134105A1 (en) 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
ES2737837T3 (es) 2003-10-09 2020-01-16 Ambrx Inc Derivados poliméricos
US20050176028A1 (en) 2003-10-16 2005-08-11 Robert Hofmeister Deimmunized binding molecules to CD3
CN107213469A (zh) 2003-11-06 2017-09-29 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
JP2007512846A (ja) 2003-12-04 2007-05-24 ゼンコー・インコーポレイテッド 増加した宿主ストリング含有量を有する変異体タンパク質の生成方法およびその組成物
KR100956913B1 (ko) 2003-12-19 2010-05-11 제넨테크, 인크. 치료제로서 유용한 일가 항체 단편
US7235641B2 (en) 2003-12-22 2007-06-26 Micromet Ag Bispecific antibodies
US8778880B2 (en) 2004-02-02 2014-07-15 Ambrx, Inc. Human growth hormone modified at position 35
NZ548990A (en) 2004-02-06 2009-06-26 Morphosys Ag Anti-CD38 human antibodies and uses therefor
US7276585B2 (en) 2004-03-24 2007-10-02 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the Fc region
AU2005244751A1 (en) * 2004-04-16 2005-12-01 Genentech, Inc. Method for augmenting B cell depletion
US7850962B2 (en) 2004-04-20 2010-12-14 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against CD20
WO2005112919A2 (en) 2004-05-19 2005-12-01 Medarex, Inc. Self-immolative linkers and drug conjugates
RU2402548C2 (ru) 2004-05-19 2010-10-27 Медарекс, Инк. Химические линкеры и их конъюгаты
CA2569509C (en) 2004-06-03 2014-08-12 Novimmune S.A. Anti-cd3 antibodies and methods of use thereof
WO2006004910A2 (en) 2004-06-28 2006-01-12 Transtarget Inc. Improved bispecific antibodies
PL1674111T3 (pl) 2004-07-09 2011-04-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Przeciwciała anty-glipikan 3
JP2008512352A (ja) 2004-07-17 2008-04-24 イムクローン システムズ インコーポレイティド 新規な四価の二重特異性抗体
AU2005282720B2 (en) 2004-09-02 2011-08-04 Genentech, Inc. Anti-FC-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
KR101270829B1 (ko) 2004-09-23 2013-06-07 제넨테크, 인크. 시스테인 유전자조작 항체 및 접합체
CN101103045B (zh) 2004-09-24 2015-11-25 安姆根有限公司 修饰的Fc分子
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
US8066989B2 (en) 2004-11-30 2011-11-29 Trion Pharma Gmbh Method of treating tumor growth and metastasis by using trifunctional antibodies to reduce the risk for GvHD in allogeneic antitumor cell therapy
KR20130105885A (ko) 2005-01-05 2013-09-26 에프-스타 비오테크놀로기쉐 포르슝스 운드 엔트비클룽스게스.엠.베.하. 상보성 결정부위와 다른 분자의 부위에서 처리된 결합성을 갖는 합성 면역글로불린 영역
JP4986633B2 (ja) 2005-01-12 2012-07-25 協和発酵キリン株式会社 安定化されたヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ３抗体
TWI671403B (zh) 2005-03-31 2019-09-11 中外製藥股份有限公司 控制組裝之多肽的製造方法
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
US9284375B2 (en) 2005-04-15 2016-03-15 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
EP1885758A2 (en) 2005-05-12 2008-02-13 The Government of the United States of America as Represented by The Department of Health and Human Services Anti-mesothelin antibodies useful for immunological assays
JP5089582B2 (ja) 2005-06-07 2012-12-05 エスバテック、アン アルコン バイオメディカル リサーチ ユニット、エルエルシー ＴＮＦαを阻害する安定な可溶性抗体
EP1899477A4 (en) 2005-07-01 2010-01-20 Medimmune Inc INTEGRATED APPROACH FOR GENERATING MULTIDOMAIN PROTEIN THERAPEUTIC APPLICATIONS
DE602006020577D1 (de) 2005-07-01 2011-04-21 Dako Denmark As Monomere und polymere linker zur konjugierung von biologischen molekülen und anderen stoffen
CA2616386A1 (en) 2005-07-25 2007-02-01 Trubion Pharmaceuticals Inc. Single dose use of cd20-specific binding molecules
ES2460517T3 (es) 2005-07-25 2014-05-13 Emergent Product Development Seattle, Llc Reducción de células b mediante el uso de moléculas de unión específica a cd37 y de unión específica a cd20
CA2617907A1 (en) 2005-08-05 2007-02-15 Syntarga B.V. Triazole-containing releasable linkers and conjugates comprising the same
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EA014025B1 (ru) 2005-09-12 2010-08-30 Новиммун С.А. Композиции антитела против cd3
AU2006299429B2 (en) 2005-10-03 2012-02-23 Xencor, Inc. Fc variants with optimized Fc receptor binding properties
EP1940881B1 (en) 2005-10-11 2016-11-30 Amgen Research (Munich) GmbH Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof
KR20150139636A (ko) 2005-10-12 2015-12-11 모르포시스 아게 인간 ｃｄ38에 특이적인 완전 인간 ｈｕｃａｌ ｇｏｌｄ-유도 치료 항체들의 생성 및 프로파일링
JP2009511067A (ja) 2005-10-14 2009-03-19 メディミューン，エルエルシー 抗体ライブラリーの細胞提示
WO2007047829A2 (en) 2005-10-19 2007-04-26 Laboratoires Serono S.A. Novel heterodimeric proteins and uses thereof
EP1777294A1 (en) 2005-10-20 2007-04-25 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) IL-15Ralpha sushi domain as a selective and potent enhancer of IL-15 action through IL-15Rbeta/gamma, and hyperagonist (IL15Ralpha sushi -IL15) fusion proteins
TW200732350A (en) 2005-10-21 2007-09-01 Amgen Inc Methods for generating monovalent IgG
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
EP1957541A2 (en) 2005-11-21 2008-08-20 Laboratoires Serono SA Compositions and methods of producing hybrid antigen binding molecules and uses thereof
RU2008129827A (ru) 2005-12-21 2010-01-27 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи (US) МОЛЕКУЛЫ EphA2-BiTE И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
MX357691B (es) 2006-01-13 2018-07-19 The Government Of The United States As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Il-15 y il-15r-alfa mejoradas para expresion en celulas mamiferas.
CN101415679A (zh) 2006-02-02 2009-04-22 辛塔佳有限公司 水溶性cc-1065类似物及其缀合物
EP1820513A1 (en) 2006-02-15 2007-08-22 Trion Pharma Gmbh Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies
EP1829895A1 (en) 2006-03-03 2007-09-05 f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. Bispecific molecule binding TLR9 and CD32 and comprising a T cell epitope for treatment of allergies
GEP20135917B (en) 2006-03-17 2013-09-10 Biogen Idec Inc Stabilized polypeptide compositions
ES2395969T3 (es) 2006-03-24 2013-02-18 Merck Patent Gmbh Dominios de proteínas heterodiméricas genéticamente modificados
WO2007114325A1 (ja) 2006-03-31 2007-10-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 二重特異性抗体を精製するための抗体改変方法
IN2014DN10515A (sr) 2006-03-31 2015-08-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd
CA2647282A1 (en) 2006-04-05 2007-10-11 Pfizer Products Inc. Ctla4 antibody combination therapy
EP2035456A1 (en) 2006-06-22 2009-03-18 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
AT503861B1 (de) 2006-07-05 2008-06-15 F Star Biotech Forsch & Entw Verfahren zur manipulation von t-zell-rezeptoren
AT503889B1 (de) 2006-07-05 2011-12-15 Star Biotechnologische Forschungs Und Entwicklungsges M B H F Multivalente immunglobuline
AT503902B1 (de) 2006-07-05 2008-06-15 F Star Biotech Forsch & Entw Verfahren zur manipulation von immunglobulinen
CN101548034B (zh) 2006-10-02 2013-11-13 航道生物技术有限责任公司 多样性合成肽和多肽文库的设计和构建
US7795411B2 (en) 2006-10-05 2010-09-14 Fred Hutchinson Cancer Research Center Vectors for expressing in vivo biotinylated recombinant proteins
PL2076535T3 (pl) 2006-10-16 2013-08-30 Salk Inst Biological Studies Antagoniści somatostatyny selektywni względem receptora (SSTR2)
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
GB0624500D0 (en) 2006-12-07 2007-01-17 Istituto Superiore Di Sanito A novel passive vaccine for candida infections
US7862825B2 (en) 2007-02-21 2011-01-04 Mladen Vranic Method of controlling tight blood glucose by somatostatin receptor antagonists
EP2132312B1 (en) 2007-03-27 2016-01-27 Sea Lane Biotechnologies,llc. Constructs and libraries comprising antibody surrogate light chain sequences
EP1975178A1 (en) 2007-03-30 2008-10-01 f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. Transcytotic modular antibody
RU2769948C2 (ru) 2007-04-03 2022-04-11 Эмджен Рисерч (Мьюник) Гмбх CD3-Эпсилон-связывающий домен с межвидовой специфичностью
AU2008234019B2 (en) 2007-04-03 2014-05-29 Amgen Research (Munich) Gmbh Cross-species-specific bispecific binders
WO2008124858A2 (en) 2007-04-11 2008-10-23 F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges. M.B.H. Targeted receptor
JP5575636B2 (ja) 2007-05-07 2014-08-20 メディミューン，エルエルシー 抗ｉｃｏｓ抗体ならびに、腫瘍、移植および自己免疫疾患の治療におけるその使用
KR20100021601A (ko) 2007-05-14 2010-02-25 바이오겐 아이덱 엠에이 인코포레이티드 단일-쇄 Ｆｃ(ＳｃＦｃ) 부분, 이를 포함하는 결합 폴리펩타이드, 및 이에 관련된 방법
DK2176298T3 (en) 2007-05-30 2018-02-12 Xencor Inc Methods and compositions for inhibiting CD32B-expressing cells
EP2666787B1 (en) 2007-05-31 2022-02-09 Genmab A/S STABLE IgG4 ANTIBODIES
EP2164871A2 (en) 2007-06-12 2010-03-24 Wyeth a Corporation of the State of Delaware Anti-cd20 therapeutic compositions and methods
JP5191537B2 (ja) 2007-06-18 2013-05-08 エム・エス・ディー・オス・ベー・フェー ヒトのプログラムされたデスレセプターｐｄ−１に対する抗体
ES2627223T3 (es) 2007-06-26 2017-07-27 F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H Presentación de agentes de unión
WO2009017823A2 (en) 2007-08-01 2009-02-05 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health Of Human Services, National Institutes Of Health A fold-back diabody diphtheria toxin immunotoxin and methods of use
WO2009017394A1 (en) 2007-08-01 2009-02-05 Syntarga B.V. Substituted cc-1065 analogs and their conjugates
US20090130105A1 (en) 2007-08-28 2009-05-21 Biogen Idec Ma Inc. Compositions that bind multiple epitopes of igf-1r
EP2033657A1 (de) 2007-09-04 2009-03-11 Trion Pharma Gmbh Intraoperative trifunktionale Antikörper-Applikation zur Prophylaxe intraperitonealer Tumorzelldissemination
MX2010002683A (es) 2007-09-14 2010-03-26 Amgen Inc Poblaciones de anticuerpos homogeneos.
DK3059246T3 (en) 2007-09-26 2018-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Modified constant region of an antibody
JP5592792B2 (ja) 2007-09-26 2014-09-17 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム 二重特異性抗体の融合体
MX336725B (es) 2007-09-26 2016-01-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Metodo de modificacion del punto isoelectrico de anticuerpos medinate la sustitucion de aminoacidos en region de determinacion de complementariedad (cdr).
PL2808343T3 (pl) 2007-12-26 2019-11-29 Xencor Inc Warianty Fc ze zmienionym wiązaniem do FcRn
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
WO2009106096A1 (en) 2008-02-27 2009-09-03 Fresenius Biotech Gmbh Treatment of resistant tumors with trifunctional antibodies
PT2132228E (pt) 2008-04-11 2011-10-11 Emergent Product Dev Seattle Imunoterapia de cd37 e sua combinação com um quimioterápico bifuncional
US8314213B2 (en) 2008-04-18 2012-11-20 Xencor, Inc. Human equivalent monoclonal antibodies engineered from nonhuman variable regions
ES2458541T5 (en) 2008-05-02 2025-08-04 Seagen Inc Methods and compositions for making antibodies and antibody derivatives with reduced core fucosylation
JP2011523853A (ja) 2008-06-03 2011-08-25 アボット・ラボラトリーズ 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
CN101628940B (zh) * 2008-07-15 2011-11-23 中国科学院生物物理研究所 一种单克隆抗体及其应用
BRPI0917148A2 (pt) 2008-08-29 2015-12-01 Symphogen As anticorpos anti-cd5
WO2010028796A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Trispecific hexavalent antibodies
AU2009290543B2 (en) 2008-09-12 2015-09-03 Oxford University Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
US20170247470A9 (en) 2008-09-17 2017-08-31 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
WO2010033736A1 (en) 2008-09-17 2010-03-25 Xencor, Inc. Novel compositons and methods for treating ige-mediated disorders
BRPI0919382A2 (pt) 2008-09-26 2016-01-05 Roche Glycart Ag anticorpos bi-específicos anti-egfr/anti-igf-1r
AU2009299794B2 (en) 2008-10-01 2015-08-13 Amgen Research (Munich) Gmbh Cross-species-specific single domain bispecific single chain antibody
AU2009299793B2 (en) 2008-10-01 2016-03-10 Amgen Research (Munich) Gmbh Bispecific single chain antibodies with specificity for high molecular weight target antigens
RU2547600C2 (ru) 2008-10-01 2015-04-10 Эмджен Рисерч (Мьюник) Гмбх Pscaxcd3, cd19xcd3, c-metxcd3, эндосиалинxcd3, epcamxcd3, igf-1rxcd3 или fap-альфаxcd3 биспецифическое одноцепочечное антитело с межвидовой специфичностью
EP3106468A1 (en) 2008-10-01 2016-12-21 Amgen Research (Munich) GmbH Cross-species-specific psmaxcd3 bispecific single chain antibody
EA032828B1 (ru) 2008-10-10 2019-07-31 Аптево Рисёрч Энд Девелопмент Ллс Иммунотерапевтические средства против комплекса tcr
CA2742568C (en) 2008-11-03 2017-09-26 Syntarga B.V. Novel cc-1065 analogs and their conjugates
WO2010085682A2 (en) 2009-01-23 2010-07-29 Biogen Idec Ma Inc. Stabilized fc polypeptides with reduced effector function and methods of use
ES2629337T3 (es) 2009-02-09 2017-08-08 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Anticuerpos contra PD-1 y anticuerpos contra PD-L1 y usos de los mismos
AU2010221156A1 (en) 2009-03-06 2011-09-22 Genentech, Inc. Antibody formulation
EP2233500A1 (en) 2009-03-20 2010-09-29 LFB Biotechnologies Optimized Fc variants
PE20120591A1 (es) 2009-04-02 2012-05-23 Roche Glycart Ag Anticuerpos multiespecificos que comprenden anticuerpos de longitud completa y fragmentos fab de cadena sencilla
CN102369214B (zh) 2009-04-07 2019-04-12 罗氏格黎卡特股份公司 三价、双特异性抗体
KR20110126748A (ko) 2009-04-07 2011-11-23 로슈 글리카트 아게 이중특이적 항-ｅｒｂｂ-1/항-ｃ-ｍｅｔ 항체
MX2011010166A (es) 2009-04-07 2011-10-11 Roche Glycart Ag Anticuerpos biespecificos anti-erbb-3/anti-c-met.
EP2241576A1 (en) 2009-04-17 2010-10-20 Trion Pharma Gmbh Use of trifunctional bispecific antibodies for the treatment of tumors associated with CD133+/EpCAM+ cancer stem cells
EP2435473B1 (en) 2009-05-27 2013-10-02 F.Hoffmann-La Roche Ag Tri- or tetraspecific antibodies
KR101747103B1 (ko) 2009-06-26 2017-06-14 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 천연 면역글로불린 포맷을 가지는 용이하게 분리된 이중특이성 항체
US8969082B2 (en) 2009-06-26 2015-03-03 Sea Lane Biotechnologies, Llc Expression of surrogate light chains
AU2010270844A1 (en) 2009-07-08 2011-12-22 Amgen Inc. Design of stable and aggregation free antibody Fc molecules through CH3 domain interface engineering
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
DE102009045006A1 (de) 2009-09-25 2011-04-14 Technische Universität Dresden Anti-CD33 Antikörper und ihre Anwendung zum Immunotargeting bei der Behandlung von CD33-assoziierten Erkrankungen
NZ598732A (en) 2009-10-27 2014-09-26 Amgen Res Munich Gmbh Dosage regimen for administering a cd19xcd3 bispecific antibody
AU2010321720B2 (en) 2009-11-23 2017-03-02 Amgen Inc. Monomeric antibody Fc
EP2504028A4 (en) 2009-11-24 2014-04-09 Amplimmune Inc SIMULTANEOUS INHIBITION OF PD-L1 / PD-L2
PL2506871T3 (pl) 2009-11-30 2017-03-31 Janssen Biotech, Inc Przeciwciała ze zmutowanymi regionami Fc i utraconymi funkcjami efektorowymi
RU2606264C2 (ru) 2009-12-25 2017-01-10 Чугаи Сеияку Кабушики Каиша Способ полипептидной модификации для очистки полипептидных мультимеров
SG181952A1 (en) 2009-12-29 2012-07-30 Emergent Product Dev Seattle Heterodimer binding proteins and uses thereof
US20130129723A1 (en) 2009-12-29 2013-05-23 Emergent Product Development Seattle, Llc Heterodimer Binding Proteins and Uses Thereof
US20110189178A1 (en) 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
US10143186B2 (en) 2010-02-08 2018-12-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common light chain mouse
MX341925B (es) 2010-03-29 2016-09-07 Zymeworks Inc Anticuerpos con funcion efectora suprimida o mejorada.
TWI653333B (zh) 2010-04-01 2019-03-11 安進研究（慕尼黑）有限責任公司 跨物種專一性之ＰＳＭＡｘＣＤ３雙專一性單鏈抗體
PL2560993T3 (pl) 2010-04-20 2024-11-04 Genmab A/S Heterodimeryczne białka zawierające region FC przeciwciała i sposoby ich wytwarzania
US9637557B2 (en) 2010-04-23 2017-05-02 Genentech, Inc. Production of heteromultimeric proteins
CA2797981C (en) 2010-05-14 2019-04-23 Rinat Neuroscience Corporation Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them
EP3613774A1 (en) 2010-06-09 2020-02-26 Genmab A/S Antibodies against human cd38
WO2011159877A2 (en) 2010-06-18 2011-12-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
EP3029066B1 (en) 2010-07-29 2019-02-20 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
CA2807127C (en) 2010-08-02 2019-02-12 Leslie S. Johnson Covalent diabodies and uses thereof
RU2013110875A (ru) * 2010-08-24 2014-09-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА, СОДЕРЖАЩИЕ СТАБИЛИЗИРОВАННЫЙ ДИСУЛЬФИДОМ ФРАГМЕНТ Fv
WO2012032080A1 (en) 2010-09-07 2012-03-15 F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H Stabilised human fc
AU2011325833C1 (en) 2010-11-05 2017-07-13 Zymeworks Bc Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the Fc domain
SMT201700250T1 (it) 2010-11-10 2017-07-18 Amgen Res Munich Gmbh Prevenzione di effetti avversi provocati da domini leganti cd3 specifici
JP2014502262A (ja) 2010-11-12 2014-01-30 ザ ロックフェラー ユニバーシティ Ｈｉｖ治療用の融合タンパク質
PT3434767T (pt) 2010-11-30 2026-01-23 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente terapêutico indutor de citotoxicidade
US9266938B2 (en) 2011-02-10 2016-02-23 Roche Glycart Ag Mutant interleukin-2 polypeptides
AU2012222833B2 (en) 2011-03-03 2017-03-16 Zymeworks Inc. Multivalent heteromultimer scaffold design and constructs
EP2686682A4 (en) 2011-03-11 2015-03-11 Amgen Inc METHOD FOR CORRELATED MUTATION ANALYSIS TO IMPROVE THERAPEUTIC ANTIBODIES
ES2668895T3 (es) 2011-03-16 2018-05-23 Amgen Inc. Variantes de Fc
CN103429619B (zh) 2011-03-17 2017-07-28 雷蒙特亚特特拉维夫大学有限公司 双特异性和单特异性、不对称抗体和其制备方法
US9683052B2 (en) 2011-03-25 2017-06-20 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Hetero-dimeric immunoglobulins
TWI588156B (zh) 2011-03-28 2017-06-21 賽諾菲公司 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白
BR112013024574B1 (pt) 2011-03-29 2022-08-09 Roche Glycart Ag Anticorpo e uso do anticorpo
CN103596985B (zh) 2011-04-19 2016-06-08 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 对磷脂酰肌醇蛋白聚糖3特异的人单克隆抗体及其用途
CA2832360C (en) 2011-04-28 2022-05-03 Amgen Research (Munich) Gmbh Dosage regimen for administering a cd19xcd3 bispecific antibody to patients at risk for potential adverse effects
EA201892619A1 (ru) 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
CN107827985A (zh) 2011-05-21 2018-03-23 宏观基因有限公司 能够与人和非人cd3结合的cd3结合分子
WO2012162277A1 (en) 2011-05-25 2012-11-29 Merck Sharp & Dohme Corp. METHOD FOR PREPARING Fc-CONTAINING POLYPEPTIDES HAVING IMPROVED PROPERTIES
EP2729488A4 (en) 2011-07-06 2015-01-14 Medimmune Llc PROCESS FOR PREPARING MULTIMANT POLYPEPTIDES
EP2736928B1 (en) 2011-07-28 2019-01-09 i2 Pharmaceuticals, Inc. Sur-binding proteins against erbb3
RU2624049C2 (ru) 2011-08-04 2017-06-30 Торэй Индастриз, Инк. Фармацевтическая композиция для лечения и профилактики злокачественной опухоли
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
ES2682254T3 (es) 2011-08-18 2018-09-19 Affinity Biosciences Pty Ltd Polipéptidos solubles
PH12013502531A1 (en) 2011-08-23 2014-01-20 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
MX2014002289A (es) 2011-08-26 2015-03-20 Merrimack Pharmaceuticals Inc Anticuerpos fc especificos en tandem.
JP6322411B2 (ja) 2011-09-30 2018-05-09 中外製薬株式会社 複数の生理活性を有する抗原の消失を促進する抗原結合分子
CA2851534C (en) 2011-10-10 2023-02-14 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
US10851178B2 (en) * 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
CN109608543A (zh) 2011-10-20 2019-04-12 艾斯巴技术-诺华有限责任公司 稳定的多抗原结合抗体
EP3559049B1 (en) 2011-10-28 2025-06-11 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Polypeptide constructs and uses thereof
EP2787078B1 (en) 2011-10-31 2019-05-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule having regulated conjugation between heavy-chain and light-chain
AU2012332021B8 (en) 2011-11-04 2017-10-12 Zymeworks Bc Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the Fc domain
EP2776061B1 (en) * 2011-11-07 2019-08-14 MedImmune, LLC Multispecific and multivalent binding proteins and uses thereof
US20140212425A1 (en) * 2011-12-05 2014-07-31 Immunomedics, Inc. Therapeutic use of anti-cd22 antibodies for inducing trogocytosis
EP2794658B1 (en) 2011-12-19 2017-03-15 Synimmune GmbH Bispecific antibody molecule
EP2793940B1 (en) 2011-12-22 2018-11-14 i2 Pharmaceuticals, Inc. Surrogate binding proteins
TW202500756A (zh) 2012-02-24 2025-01-01 日商中外製藥股份有限公司 經FcγRIIB促進抗原消失之抗原結合分子
DK2838917T3 (da) 2012-04-20 2019-08-26 Merus Nv Fremgangsmåder og midler til frembringelse af heterodimere ig-lignende molekyler
MY174248A (en) 2012-04-30 2020-04-01 Biocon Ltd Targeted/immunomodulatory fusion proteins and methods for making same
EP4053162A1 (en) * 2012-05-18 2022-09-07 Aptevo Research and Development LLC Bispecific scfv immunofusion (bif) binding to cd123 and cd3
EP3892638A1 (en) 2012-05-30 2021-10-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule for eliminating aggregated antigens
US9499634B2 (en) 2012-06-25 2016-11-22 Zymeworks Inc. Process and methods for efficient manufacturing of highly pure asymmetric antibodies in mammalian cells
US20140154253A1 (en) 2012-07-13 2014-06-05 Zymeworks Inc. Bispecific Asymmetric Heterodimers Comprising Anti-CD3 Constructs
AU2013293092A1 (en) 2012-07-23 2015-02-26 Zymeworks Inc. Immunoglobulin constructs comprising selective pairing of the light and heavy chains
US9682143B2 (en) * 2012-08-14 2017-06-20 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for inducing immune response to disease
JOP20200236A1 (ar) * 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
CA2886433C (en) 2012-10-04 2022-01-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Human monoclonal anti-pd-l1 antibodies and methods of use
BR112015007120A2 (pt) 2012-10-08 2017-12-12 Roche Glycart Ag anticorpo biespecífico, composição farmacêutica, uso, célula hospedeira e método de produção de um anticorpo
US20140161790A1 (en) 2012-11-19 2014-06-12 Xencor, Inc. Engineered immunoglobulins with extended in vivo half-life
CN112079929A (zh) 2012-11-21 2020-12-15 武汉友芝友生物制药有限公司 双特异性抗体
EP2927321B1 (en) * 2012-11-27 2021-02-17 Ajou University Industry-Academic Cooperation Foundation Ch3 domain variant pair inducing formation of heterodimer of heavy chain constant region of antibody at high efficiency, method for preparing same, and use thereof
EP2934577A1 (en) 2012-12-19 2015-10-28 Adimab, LLC Multivalent antibody analogs, and methods of their preparation and use
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
CN105051069B (zh) 2013-01-14 2019-12-10 Xencor股份有限公司 新型异二聚体蛋白
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) * 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) * 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
EP2762497A1 (en) * 2013-02-05 2014-08-06 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
MX2015011712A (es) 2013-03-06 2016-04-04 Merrimack Pharmaceuticals Inc Anticerpos biespecificos fc en fila anti-c-met.
AU2014249243C1 (en) 2013-03-13 2019-08-08 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to CD8
EP3421495A3 (en) 2013-03-15 2019-05-15 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
EP2970484B2 (en) 2013-03-15 2022-09-21 Amgen Inc. Heterodimeric bispecific antibodies
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
PL3587448T3 (pl) * 2013-03-15 2021-11-29 Xencor, Inc. Białka heterodimeryczne
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014209804A1 (en) 2013-06-24 2014-12-31 Biomed Valley Discoveries, Inc. Bispecific antibodies
GB201311487D0 (en) 2013-06-27 2013-08-14 Alligator Bioscience Ab Bispecific molecules
CN105612175B (zh) 2013-08-08 2023-05-09 赛腾制药 基于IL-15和IL-15Rαsushi结构域的调节因子
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
EP2839842A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof
US10258887B2 (en) 2013-10-25 2019-04-16 Voyetra Turtle Beach, Inc. Method and system for a headset with parental control
EP3066133A1 (en) 2013-11-04 2016-09-14 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Production of t cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins
MX2016007885A (es) 2013-12-17 2017-01-11 Genentech Inc Metodos de tratamiento de cancer usando antagonistas de union del eje de pd-1 y un anticuerpo anti-cd20.
CA2934028A1 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
KR102225489B1 (ko) 2013-12-17 2021-03-10 제넨테크, 인크. 항-cd3 항체 및 이의 사용 방법
NZ720353A (en) 2013-12-30 2019-12-20 Epimab Biotherapeutics Inc Fabs-in-tandem immunoglobulin and uses thereof
RU2689717C2 (ru) 2014-01-08 2019-05-28 Шанхай Хэнжуй Фармасьютикал Ко., Лтд. Гетеродимерный белок il-15 и его применения
ES2716685T3 (es) 2014-01-24 2019-06-14 Dana Farber Cancer Inst Inc Moléculas de anticuerpo para PD-1 y usos de las mismas
GB201402631D0 (en) 2014-02-14 2014-04-02 Alligator Bioscience Ab Library
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
TWI701042B (zh) 2014-03-19 2020-08-11 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
KR102497443B1 (ko) 2014-03-28 2023-02-08 젠코어 인코포레이티드 Cd38 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체
RU2577226C2 (ru) 2014-04-10 2016-03-10 Общество с ограниченной ответственностью, "Международный биотехнологический центр "Генериум" ("МБЦ "Генериум") Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих
JP7348708B2 (ja) 2014-04-30 2023-09-21 プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ 組み合わせワクチン装置および癌細胞を殺滅する方法
TWI742423B (zh) 2014-05-29 2021-10-11 美商宏觀基因股份有限公司 特異性結合多種癌症抗原的三特異性結合分子和其使用方法
CA2956178A1 (en) 2014-07-24 2016-01-28 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
US9982053B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
RU2020117196A (ru) 2014-08-19 2020-10-15 Новартис Аг Химерный антигенный рецептор (car) против cd123 для использования в лечении злокачественных опухолей
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3191187B1 (en) 2014-09-09 2021-07-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
MA40764A (fr) 2014-09-26 2017-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité
UY36351A (es) 2014-10-14 2016-06-01 Novartis Ag Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas
MA40894A (fr) 2014-11-04 2017-09-12 Glenmark Pharmaceuticals Sa Immunoglobulines hétéro-dimères reciblant des lymphocytes t cd3/cd38 et leurs procédés de production
RU2753902C2 (ru) 2014-11-20 2021-08-24 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Комбинированная терапия на основе активирующих т-клетки биспецифических антигенсвязывающих молекул против cd3 и фолатного рецептора 1 (folr1) и антагонистов, связывающихся с осью pd-1
BR112017011166A2 (pt) 2014-11-26 2018-02-27 Xencor, Inc. anticorpos heterodiméricos que se ligam a cd3 e cd38
US20160176969A1 (en) 2014-11-26 2016-06-23 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies including binding to cd8
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
CA2967426A1 (en) * 2014-11-26 2016-06-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
CA2874083C (en) 2014-12-05 2024-01-02 Universite Laval Tdp-43-binding polypeptides useful for the treatment of neurodegenerative diseases
EP3237449A2 (en) 2014-12-22 2017-11-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
RS63384B1 (sr) 2015-01-08 2022-08-31 BioNTech SE Agonistička sredstva za vezivanje tnf receptora
US20180318417A1 (en) 2015-01-14 2018-11-08 Compass Therapeutics Llc Multispecific immunomodulatory antigen-binding constructs
MA41414A (fr) 2015-01-28 2017-12-05 Centre Nat Rech Scient Protéines de liaison agonistes d' icos
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
MA41279A (fr) 2015-05-08 2021-04-28 Xencor Inc Anticorps hétérodimériques se liant aux antigènes cd3 et tumoraux
PE20181090A1 (es) 2015-06-24 2018-07-09 Janssen Biotech Inc Modulacion y tratamiento inmunes de tumores solidos con anticuerpos que se unen especificamente a cd38
HUE055207T2 (hu) 2015-07-30 2021-11-29 Macrogenics Inc PD-1 és LAG-3 kötõ molekulák és eljárások azok alkalmazására
JOP20160154B1 (ar) 2015-07-31 2021-08-17 Regeneron Pharma أجسام ضادة مضاد لل psma، وجزيئات رابطة لمستضد ثنائي النوعية الذي يربط psma و cd3، واستخداماتها
TWI796283B (zh) 2015-07-31 2023-03-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｍｓｌｎ及ｃｄ３抗體構築體
TW202346349A (zh) 2015-07-31 2023-12-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Dll3及cd3抗體構築體
CN117964732A (zh) 2015-08-07 2024-05-03 Alx肿瘤生物技术公司 具有SIRP-α结构域或其变体的构建体
US10793641B2 (en) 2015-08-21 2020-10-06 Carsgen Therapeutics Co., Ltd. Fully human anti-mesothelin antibodies and immune effector cells targeting mesothelin
HK1251158A1 (zh) 2015-09-29 2019-01-25 细胞基因公司 Pd-1结合蛋白及其使用方法
US20170096485A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific t cell activating antigen binding molecules
WO2017072366A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Nbe-Therapeutics Ag Anti-mesothelin antibodies
US20180305465A1 (en) 2015-11-25 2018-10-25 Amgen Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd38
CN108699136B (zh) 2015-12-07 2022-03-18 Xencor股份有限公司 结合cd3和psma的异二聚抗体
MA44146B1 (fr) 2015-12-22 2023-10-31 Regeneron Pharma Combinaison d'anticorps anti-pd-1 et d'anticorps bispécifiques anti-cd20/anti-cd3 pour traiter le cancer
TN2018000266A1 (en) 2016-02-03 2020-01-16 Amgen Res Munich Gmbh Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs.
TWI781934B (zh) 2016-05-27 2022-11-01 美商艾吉納斯公司 抗-tim-3抗體及其使用方法
EP3464370A1 (en) 2016-06-01 2019-04-10 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3 for use in the treatment of lymphoma
WO2017210443A1 (en) 2016-06-01 2017-12-07 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd123 and cd3
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
US20200255524A1 (en) 2016-06-07 2020-08-13 Macrogenics, Inc. Combination therapy
CA3026151A1 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Xencor, Inc. Bispecific checkpoint inhibitor antibodies
TWI640536B (zh) 2016-06-20 2018-11-11 克馬伯有限公司 抗體
MX2018016265A (es) 2016-06-28 2019-07-04 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen al receptor 2 de somatostatina.
US20190309092A1 (en) 2016-07-21 2019-10-10 Development Center For Biotechnology Modified antigen-binding fab fragments and antigen-binding molecules comprising the same
IL303187A (en) 2016-08-29 2023-07-01 Akamis Bio Ltd Adenovirus with bispecific T cell activator
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107840891A (zh) 2016-09-19 2018-03-27 上海吉倍生物技术有限公司 高亲和力的抗msln抗体及其应用
PE20240950A1 (es) 2016-10-14 2024-05-06 Xencor Inc PROTEINAS DE FUSION FC HETERODIMERICAS IL 15/IL 15R(alfa)
KR102617264B1 (ko) 2016-10-19 2023-12-29 인벤라 인코포레이티드 항체 구조물
WO2018129522A1 (en) 2017-01-09 2018-07-12 Torch Therapeutics Conditionally effective bispecific therapeutics
CN115028727A (zh) 2017-05-12 2022-09-09 哈普恩治疗公司 靶向msln的三特异性蛋白质及使用方法
KR20200041834A (ko) * 2017-06-01 2020-04-22 젠코어 인코포레이티드 Cd123 및 cd3에 결합하는 이중특이성 항체
WO2018223004A1 (en) * 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
US20210061911A1 (en) 2017-09-07 2021-03-04 Macrogenics, Inc. Dosing Regiments of Bi-Specific CD123 x CD3 Diabodies in the Treatment of Hematologic Malignancies
CN120058938A (zh) 2017-10-10 2025-05-30 赛诺菲 抗cd38抗体及与抗cd3和抗cd28抗体的组合
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
KR20200085828A (ko) 2017-11-08 2020-07-15 젠코어 인코포레이티드 신규의 항-pd-1 서열을 사용한 이중특이적 및 단일특이적 항체
WO2019104075A1 (en) 2017-11-21 2019-05-31 Novartis Ag Trispecific binding molecules against tumor-associated antigens and uses thereof
CN112119157B (zh) 2018-03-06 2025-01-14 宾夕法尼亚大学董事会 前列腺特异性膜抗原car及其使用方法
EP3773911A2 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
US10869888B2 (en) 2018-04-17 2020-12-22 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expansion and uses thereof
EP3781597A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Lag-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and lag-3 antigen binding domains
KR20210003814A (ko) 2018-04-18 2021-01-12 젠코어 인코포레이티드 IL-15/IL-15Rα Fc-융합 단백질 및 TIM-3 항원 결합 도메인을 함유하는 TIM-3 표적화 이종이량체 융합 단백질
PE20211916A1 (es) 2018-05-24 2021-09-28 Janssen Biotech Inc Agentes aglutinantes del psma y usos de estos
US11530274B2 (en) 2018-07-02 2022-12-20 Amgen Inc. Anti-STEAP1 antigen-binding protein
TW202035451A (zh) 2018-07-24 2020-10-01 美商英伊布里克斯公司 含有受限cd3結合域及受體結合區之多重特異性多肽構築體及其使用方法
CN112789291A (zh) 2018-08-08 2021-05-11 蜻蜓疗法股份有限公司 结合nkg2d、cd16和肿瘤相关抗原的蛋白质
AU2020232605A1 (en) 2019-03-01 2021-10-21 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3
US12037378B2 (en) 2019-05-21 2024-07-16 Novartis Ag Variant CD58 domains and uses thereof
WO2021026387A2 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Xencor, Inc. HETERODIMERIC IgG-LIKE BISPECIFIC ANTIBODIES
KR20230008197A (ko) 2020-05-13 2023-01-13 화이자 인코포레이티드 암을 치료하기 위한 방법, 요법 및 용도
JP7773528B2 (ja) 2020-08-19 2025-11-19 ゼンコア インコーポレイテッド 抗ｃｄ２８組成物
CN115769181B (zh) 2021-04-23 2025-10-10 京东方科技集团股份有限公司 一种解锁控制方法、装置、电子设备和计算机可读存储介质
WO2023196905A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Xencor, Inc. Lag-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and lag-3 antigen binding domains

Also Published As

Publication number Publication date
PE20171324A1 (es) 2017-09-11
MX2021003704A (es) 2021-06-04
PL3223845T3 (pl) 2021-11-22
US20210102003A1 (en) 2021-04-08
EP3223845B1 (en) 2021-05-19
EP3223845A2 (en) 2017-10-04
TN2017000223A1 (en) 2018-10-19
JP7527833B2 (ja) 2024-08-05
AU2015353409B2 (en) 2019-05-09
IL252480B2 (en) 2023-12-01
ECSP17040521A (es) 2019-02-28
DK3223845T3 (da) 2021-08-16
US20170081420A1 (en) 2017-03-23
AU2017216517A1 (en) 2017-08-31
CU24597B1 (es) 2022-05-11
HUE055115T2 (hu) 2021-10-28
SMT202100521T1 (it) 2021-11-12
NZ732144A (en) 2020-04-24
HRP20211273T1 (hr) 2021-11-12
US10889653B2 (en) 2021-01-12
US11673972B2 (en) 2023-06-13
MA55043A (fr) 2021-12-29
EP3928788A1 (en) 2021-12-29
CY1124993T1 (el) 2023-01-05
CN110894240A (zh) 2020-03-20
US20230365717A1 (en) 2023-11-16
US9850320B2 (en) 2017-12-26
JP2017536829A (ja) 2017-12-14
LT3223845T (lt) 2021-08-25
PT3223845T (pt) 2021-08-20
US12359002B2 (en) 2025-07-15
US20250304724A1 (en) 2025-10-02
CN107207610A (zh) 2017-09-26
AU2015353409A1 (en) 2017-06-15
MX384025B (es) 2025-03-14
KR20170084326A (ko) 2017-07-19
EA201791139A1 (ru) 2018-04-30
US20220041757A1 (en) 2022-02-10
CN110894240B (zh) 2022-04-15
CN113735976A (zh) 2021-12-03
MD3223845T2 (ro) 2021-11-30
CO2017005388A2 (es) 2017-10-31
US10913803B2 (en) 2021-02-09
KR20240116967A (ko) 2024-07-30
AU2017216517B2 (en) 2019-09-26
CL2017001328A1 (es) 2018-03-23
MX2017006966A (es) 2018-05-02
JP6696982B2 (ja) 2020-05-20
JP7117434B2 (ja) 2022-08-12
JP2024028928A (ja) 2024-03-05
US11859011B2 (en) 2024-01-02
CN107207610B (zh) 2022-09-09
GT201700112A (es) 2018-11-27
AU2019201923B2 (en) 2021-01-07
JP2022169664A (ja) 2022-11-09
CU20170074A7 (es) 2017-11-07
WO2016086189A2 (en) 2016-06-02
CN116333153A (zh) 2023-06-27
ES2886523T3 (es) 2021-12-20
SA517381604B1 (ar) 2023-07-03
IL252480B1 (en) 2023-08-01
AU2019201923A1 (en) 2019-04-11
SI3223845T1 (sl) 2021-11-30
AU2021202061B2 (en) 2024-07-25
US20160229924A1 (en) 2016-08-11
JP2022008537A (ja) 2022-01-13
IL252480A0 (en) 2017-07-31
PH12017500968B1 (en) 2022-06-03
BR112017011092A2 (pt) 2017-12-26
PH12017500968A1 (en) 2017-11-20
AU2021202061A1 (en) 2021-04-29
AU2024204760A1 (en) 2024-08-01
MY184268A (en) 2021-03-30
CA2967426A1 (en) 2016-06-02
SG11201704283PA (en) 2017-06-29
US20180282432A1 (en) 2018-10-04
WO2016086189A3 (en) 2016-09-09
JP2020124209A (ja) 2020-08-20
KR102689285B1 (ko) 2024-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12359002B2 (en) Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
US11945880B2 (en) Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
JP2023113868A (ja) Ｃｄ３および腫瘍抗原に結合するヘテロ二量体抗体
HK40066082A (en) Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
HK40093127A (zh) 结合cd3和肿瘤抗原的异二聚体抗体
EA044325B1 (ru) ГЕТЕРОДИМЕРНОЕ АНТИ-CD3xCD20 АНТИТЕЛО, ЕГО ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ
HK1242566A1 (en) Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
HK1242566B (en) Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20