RS64759B1 - 3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion derivati i njihova primena u lečenju bolesti zavisnih od cink prsta 2 (ikzf2) iz porodice ikaros - Google Patents

3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion derivati i njihova primena u lečenju bolesti zavisnih od cink prsta 2 (ikzf2) iz porodice ikaros

Info

Publication number
RS64759B1
RS64759B1 RS20230980A RSP20230980A RS64759B1 RS 64759 B1 RS64759 B1 RS 64759B1 RS 20230980 A RS20230980 A RS 20230980A RS P20230980 A RSP20230980 A RS P20230980A RS 64759 B1 RS64759 B1 RS 64759B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
oxy
dione
oxoisoindolin
piperidine
cyclohexyl
Prior art date
Application number
RS20230980A
Other languages
English (en)
Inventor
Claire Adcock
Simone Bonazzi
Artiom Cernijenko
Philip Lam
Kathryn Taylor Linkens
Hasnain Ahmed Malik
Noel Marie-France Thomsen
Michael Scott Visser
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of RS64759B1 publication Critical patent/RS64759B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/113—Spiro-condensed systems with two or more oxygen atoms as ring hetero atoms in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Opis
POVEZANE PRIJAVE
[0001] Ova patentna prijava ističe benefite i prioritet američkih privremenih patentnih prijava br. 62/695.920, podnete 10. jula 2018. godine i 62/835.543, podnete 18. aprila 2019. godine.
OBLAST PRONALASKA
[0002] Ovaj pronalazak se odnosi na 3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionska jedinjenja i sastave i njihovu primenu u lečenju bolesti ili poremećaja zavisnih od cinkovog prsta 2 porodice IKAROS (IKZF2) ili stanja u kojima smanjenje nivoa proteina IKZF2 ili IKZF4 može ublažiti bolest ili poremećaj.
POZADINA PRONALASKA
[0003] Cinkov prst 2 porodice IKAROS (IKZF2) (poznat i pod nazivom Helios) jedan je od pet članova porodice transkripcionih faktora Ikaros kod sisara. IKZF2 sadrži četiri domena cinkovih prstiju u blizini N-terminusa koji su uključeni u vezivanje DNK i dva domena cinkovih prstiju na C-terminusu koji su uključeni u dimerizaciju proteina. IKZF2 je oko 50% identičan sa članovima porodice Ikaros, Ikaros (IKZF1), Aiolos (IKZF3) i Eos (IKZF4) sa najvišom homologijom u regijama cinkovih prstiju (identičnost 80%+). Ova četiri faktora transkripcije porodice Ikaros vezuju se za isto konsenzus mesto DNK i mogu međusobno da se heterodimerizuju prilikom ko-ekspresije u ćelijama. Peti protein porodice Ikaros, Pegasus (IKZF5), je samo 25% identičan sa IKZF2, vezuje se za različito mesto DNK u odnosu na druge članove porodice Ikaros i ne heterodimerizuje se lako sa drugim proteinima porodice Ikaros. IKZF2, IKZF1 i IKZF3 se eksprimiraju uglavnom u hematopoetskim ćelijama, dok se IKZF4 i IKZF5 eksprimiraju u širokom spektru tkiva. (John, L.B., et al., (2011), Mol.
Immunol. 48:1272-1278; Perdomo, J., et al., (2000), J. Biol. Chem.275:38347-38354.)
[0004] Smatra se da IKZF2 igra važnu ulogu u funkcionisanju i stabilnosti regulatornih T ćelija (Treg). IKZF2 je visoko eksprimiran na nivou mRNK i proteina u populacijama regulatornih T-ćelija. Pokazalo se da inaktivacija (knockdown) IKZF2 od strane siRNK dovodi do smanjenja regulacije FoxP3 i narušava sposobnost izolovanih humanih CD4+ CD25+ Treg ćelija da blokiraju aktivaciju T-ćelija in vitro. Štaviše, pokazalo se da prekomerna ekspresija IKZF2 u izolovanim mišjim Treg ćelijama povećava ekspresiju markera povezanih sa Treg ćelijama kao što su CD 103 i GITR, a prekomerna ekspresija ćelija IKZF2 pokazala je povećanu responder T-ćelija. Utvrđeno je da IKZF2 takođe vezuje promotera FoxP3, definišući transkripcioni faktor loze regulatornih T-ćelija, te da utiče na ekspresiju FoxP3.
[0005] Pokazalo se da inaktivacija (knockout) IKZF2 unutar Treg ćelija koje eksprimiraju FoxP3 kod miševa uzrokuje da aktivirane Treg ćelije izgube svoja inhibitorna svojstva, eksprimiraju citokine T-efektora i preuzimaju funkcije T-efektora. Mutirani miševi sa inaktiviranim IKZF2 razvijaju autoimunu bolest u dobi od 6-8 meseci, sa povećanim brojem aktiviranih CD4 i CD8 T ćelija, T folikularnih pomoćnih ćelija i B ćelija germinativnog centra. Veruje se da je ovaj uočeni efekat intrinzičan za ćelije, budući da Rag2-/- miševi kojima je data koštana srž miševa sa inaktiviranim IKZF2, ali ne i koštana srž iz IKZF2+/+ razvijaju autoimuna oboljenja. Direktni dokazi da IKZF2 utiče na funkciju regulatornih T-ćelija prikazani su u analizi miševa kod kojih je IKZF2 obrisan samo u ćelijama koje eksprimiraju FoxP3 (FoxP3-YFP-Cre Heliosfl/fl). Rezultati su pokazali da miševi takođe razvijaju autoimuno oboljenje sa sličnim karakteristikama kao što je uočeno kod potpune inaktivacije (knockout) IKZF2 kod životinje. Štaviše, analiza putanje eksperimenta CHIP-SEQ je takođe sugerisala da IKZF2 utiče na ekspresiju gena na putanji STAT5/IL-2Rα u regulatornim T-ćelijama. Pokazalo se da je ovaj efekat gubitka IKZF2 očigledniji nakon imunološkog izazova (virusna infekcija ili injekcija ovčje krvi), a primećeno je da su nakon imunološke stimulacije, IKZF2 negativne regulatorne T ćelije počele da preuzimaju karakteristike efektorskih T ćelija. (Getnet, D., et al., Mol. Immunol. (2010), 47: 1595-1600; Bin Dhuban, K., et al., (2015), J. Immunol.194 :3687-96; Kim, H-J., et al., (2015), Science 350 :334-339; Nakawaga, H., et al., (2016) PNAS, 113: 6248-6253)
[0006] Pokazalo se da je prekomerna ekspresija Ikaros izoforma kojima nedostaju regioni za vezivanje DNK povezana sa većim brojem humanih hematoloških maligniteta. U skorijim nalazima su mutacije u genu IKZF2, koje dovode do abnormalnih varijanti spajanja, identifikovane kod leukemije T-ćelija odraslih i akutne limfoblastne leukemije niske hipodiploide. Predloženo je da ove izoforme, koje su sposobne za dimerizaciju, imaju dominantan negativan uticaj na transkripcione faktore porodice Ikaros, čime se podstiče razvoj limfoma. Mutanti sa inaktiviranim IKZF2 koji prežive do odrasle dobi ne razvijaju limfome, čime je podržana ova hipoteza (Asanuma, S., et al., (2013), Cancer Sci.104: 1097-1106; Zhang, Z., et al., (2007), Blood 109:2190-2197; Kataoka, D., et al., (2015), Nature Genetics 47: 1304-1315.)
[0007] Trenutno se anti-CTLA4 antitela koriste u kliničkom okruženju za targetiranje Treg ćelija u tumorima. Međutim, targetiranje CTLA4 često izaziva sistemsku aktivaciju ćelija T-efektora, što dovodi do prekomerne toksičnosti i ograničava terapijsku korisnost. Do 3/4 pacijenata lečenih kombinacijom anti-PD1 i anti-CTLA4 prijavilo je neželjene događaje 3. ili višeg stepena (National Cancer Institute, Division of Cancer Treatment & diagnosis, Common Terminology for Adverse Events (CTCAE), https://ctep.cancer.gov/protocolDevelopment/electronic_applications/ctc.htm). Dakle, postoji velika potreba da se pronađu jedinjenja koja targetiraju Treg ćelije u tumorima bez izazivanja sistemske aktivacije ćelija T-efektora.
[0008] Degrader specifičan za IKZF2 ima potencijal da fokusira pojačani imuni odgovor na područja unutar ili u blizini tumora pružajući potencijalno podnošljivije i manje toksično terapijsko sredstvo za lečenje karcinoma.
[0009] WO 2014/039960 A1 otkriva supstituisane 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il) ftalimide i supstituisane 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindole za lečenje karcinoma dojke.
[0010] WO 2017/176958 A1 otkriva derivate ftamilida korisne u lečenju karcinoma.
[0011] EP 3202 461 A1 otkriva derivate arilmetoksi izoindolina za lečenje karcinoma.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0012] Jedinjenja pronalaska koriste se kao terapijska sredstva, posebno u lečenju karcinoma i povezanih oboljenja. U jednom aspektu, jedinjenja pronalaska imaju aktivnost degradera IKZF2, poželjno pokazuju takvu aktivnost na nivou od 50 µM ili ispod, a poželjnije pokazuju takvu aktivnost na nivou od 10 µM ili ispod. U drugom aspektu, jedinjenja pronalaska pokazuju aktivnost degradera za IKZF2 koja je selektivna u odnosu na jedan ili više IKZF1, IKZF3, IKZF4 i/ili IKZF5. U drugom aspektu, jedinjenja pronalaska pokazuju aktivnost degradera i za IKZF2 i za IKZF4. Jedinjenja pronalaska pokazuju korisnost u lečenju karcinoma i drugih oboljenja kod kojih bi takva aktivnost degradera bila korisna za pacijenta. Na primer, bez namere da budu vezani bilo kakvom teorijom, pronalazači veruju da smanjenje nivoa IKZF2 u Treg ćelijama u tumoru može omogućiti imunološkom sistemu pacijenta da efikasnije napadne bolest. Ukratko, ovaj pronalazak obezbeđuje nove degradere IKZF2 korisne za lečenje karcinoma i drugih oboljenja.
[0013] Prvi aspekt ovog pronalaska odnosi se na jedinjenje formule (I')
pri čemu:
X1i X2su svaki nezavisno H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2;
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili - NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R12; ili
R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri Rs; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH, -NR13R14, -NH2, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)arila ili -O-5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan jednim do tri R10a cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril su opciono supstituisani jednim do tri R11; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15; ili dva R8kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R8zajedno sa istim atomom za koji su vezani formiraju a =(O);
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, (C3-C6)cikloalkil, -OH, -CN, -NH2ili -NR13R14; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; ili dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R10je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R11je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C1-C6)alkoksija, (C1-C6)haloalkoksija, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2;
dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R13i R14su svaki nezavisno izabrani između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
m i m 1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera.
[0014] U jednom otelotvorenju, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I') koja imaju strukturu Formule (I):
pri čemu:
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili - NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili
R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH ili -NH2, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0015] U još jednom otelotvorenju, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), pri čemu:
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili - NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili
R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
m i m 1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0016] U jednom otelotvorenju pronalaska, vodonici u jedinjenju Formule (I') ili Formule (I) prisutni su u njihovim normalnim izotopskim sadržajima. U preferiranom otelotvorenju pronalaska, vodonici su izotopski obogaćeni deuterijumom (D), a u posebno preferiranom otelotvorenju pronalaska je vodonik na položaju Rxobogaćen sa D, kao što je detaljnije opisano u vezi sa izotopima i izotopskim obogaćivanjem u nastavku.
[0017] Još jedan aspekt ovog pronalaska odnosi se na farmaceutski sastav koji se sastoji od terapijski efikasne količine jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera i farmaceutski prihvatljivih nosača ili ekscipijenasa. Farmaceutski sastav je koristan u lečenju oboljenja ili poremećaja zavisnih od IKZF2. Farmaceutski sastav može dalje sadržati najmanje jedno dodatno farmaceutsko sredstvo.
[0018] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, za primenu u lečenju karcinoma.
[0019] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutski sastav koji sadrži terapijski efikasnu količinu jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijens, za primenu u lečenju karcinoma.
[0020] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, za primenu u terapiji.
[0021] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju koja sadrži jedinjenje Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, i jedan ili više terapijskih sredstava.
[0022] Dalja otelotvorenja su definisana patentnim zahtevima.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0023] Detalji pronalaska su navedeni u pratećem opisu u nastavku. Iako se metode i materijali slični ili ekvivalentni onima opisanim u ovom dokumentu mogu koristiti u praksi ili testiranju ovog pronalaska, ovde će biti opisane ilustrativne metode i materijali. Ostale karakteristike, predmeti i prednosti pronalaska postaće vidljivi iz opisa i iz patentnih zahteva. U specifikaciji i priloženim patentnim zahtevima, gramatički oblici u jednini takođe uključuju množinu, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se koriste ovde imaju isto značenje koje je obično jasno stručnjaku u oblasti kojoj ovaj pronalazak pripada.
Definicije korišćenih termina i konvencija
[0024] Terminima koji ovde nisu posebno definisani treba pripisati značenja koja bi im pripisao stručnjak u ovoj oblasti u svetlu pronalaska i konteksta. Međutim, na način na koji se koriste u specifikaciji i priloženim patentnim zahtevima, osim ako nije drugačije definisano, sledeći termini imaju naznačeno značenje i primenjuju se sledeće konvencije.
A. Hemijska nomenklatura, termini i konvencije
[0025] U grupama, radikalima ili delovima definisanim u nastavku, broj atoma ugljenika se često navodi ispred grupe, na primer, (C1-C10)alkil označava alkil grupu ili radikal koji ima 1 do 10 atoma ugljenika. U načelu, za grupe koje sadrže dve ili više podgrupa, poslednja imenovana grupa je tačka vezivanja radikala, na primer, „alkilaril“ označava monovalentni radikal formule alkil-aril-, dok „arilalkil“ označava monovalentni radikal formule aril-alkil-. Dalje, upotreba termina koji označava monovalentni radikal gde je dvovalentni radikal prikladan tumači se tako da označava odgovarajući dvovalentni radikal i obrnuto. Ukoliko nije drugačije naznačeno, konvencionalne definicije pojmova kontrola i konvencionalne stabilne valencije atoma se pretpostavljaju i postižu u svim formulama i grupama. Članovi „a“ i „an“ se (u verziji na engleskom jeziku) odnose na jedan ili više (npr. na najmanje jedan) gramatičkih objekata. Na primer, „an element“ označava jedan ili više od jednog elementa.
[0026] Termin „i/ili“ znači „i“ ili „ili“ ako nije drugačije naznačeno.
[0027] Termin „opciono supstituisan“ znači da dati hemijski deo (npr. alkilna grupa) može (ali nije potrebno) da bude vezan za druge supstituente (npr. heteroatome). Na primer, alkilna grupa koja je opciono supstituisana može biti potpuno zasićeni alkilni lanac (npr. čisti ugljovodonik). Alternativno, ista opciono supstituisana alkilna grupa može imati supstituente različite od vodonika. Na primer, ona može, u bilo kom trenutku duž lanca, biti vezana za atom halogena, hidroksilnu grupu ili bilo koji drugi supstituent opisan ovde. Dakle, termin „opciono supstituisan“ znači da dati hemijski deo ima potencijal da sadrži druge funkcionalne grupe, ali ne mora nužno da ima bilo kakve dalje funkcionalne grupe. Pogodni supstituenti koji se koriste u opcionoj supstituciji opisanih grupa uključuju, bez ograničenja, halogen, okso, -OH, -CN, -COOH, -CH2CN, -O-(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -O-(C2-C6)alkenil, -O-(C2-C6)alkinil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, -OH, - OP(O)(OH)2, -OC(O)(C1-C6)alkil, -C(O)(C1-C6)alkil, -OC(O)O(C1-C6)alkil, -NH2, -NH((C1-C6)alkil), - N((C1-C6)alkil)2, -NHC(O)(C1-C6)alkil, -C(O)NH(C1-C6)alkil, -S(O)2(C1-C6)alkil, -S(O)NH(C1-C6)alkil i S(O)N((C1-C6)alkil)2. Supstituenti se i sami mogu opciono supstituisati. Termin „opciono supstituisan“, na način na koji se koristi ovde, takođe se odnosi na supstituisane ili nesupstituisane čije je značenje opisano u nastavku.
[0028] Termin „supstituisan“ označava da određena grupa ili deo nosi jedan ili više pogodnih supstituenata pri čemu se supstituenti mogu povezati sa određenom grupom ili delom na jednom ili više pozicija. Na primer, aril supstituisan sa cikloalkilom može ukazivati na to da se cikloalkil povezuje sa jednim atomom arila vezom ili fuzionisanjem sa arilom i deljenjem dva ili više zajedničkih atoma.
[0029] Termin „nesupstituisan“ znači da navedena grupa ne nosi supstituente.
[0030] Osim ako nije drugačije definisano, „aril“ označava cikličnu, aromatičnu ugljovodoničnu grupu koja ima 1 do 3 aromatična prstena, uključujući monociklične ili biciklične grupe kao što su fenil, bifenil ili naftil. Kada sadrže dva aromatična prstena (biciklična, itd.), aromatični prstenovi arilne grupe su opciono spojeni u jednoj tački (npr. bifenil), ili fuzionisani (npr. naftil). Arilna grupa je opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata, npr. 1 do 5 supstituenata, na bilo kojoj tački vezivanja. Primeri supstituenata uključuju, bez ograničenja, -H, -halogen, -CN, -O-(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkil, -O-(C2-C6)alkenil, -O-(C2-C6)alkinil, (C2-C6)alkenil, (C2-C6)alkinil, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)(C1-C6)alkil, -C(O)(C1-C6)alkil, - OC(O)O(C1-C6) alkil, -NH2, -NH((C1-C6)alkil), -N((C1-C6)alkil)2, -S(O)2-(C1-C6)alkil, -S(O)NH(C1-C6)alkil i S(O)N((C1-C6)alkil)2. Sami supstituenti su opciono supstituisani. Štaviše, kada sadrže dva fuzionisana prstena, arilne grupe opciono imaju nezasićeni ili delimično zasićeni prsten fuzionisan sa potpuno zasićenim prstenom. Primeri sistema prstenova ovih arilnih grupa uključuju, bez ograničenja, fenil, bifenil, naftil, antracenil, fenalenil, fenantrenil, indanil, indenil, tetrahidronaftalenil, tetrahidrobenzoanulenil i slično.
[0031] Osim ako nije drugačije posebno definisano, „heteroaril“ označava monovalentni monociklični aromatični radikal sa 5 do 24 atoma u prstenu ili policiklični aromatični radikal koji sadrži jedan ili više heteroatoma u prstenu odabranih između N, O ili S, pri čemu su preostali atomi u prstenu C. Heteroaril, na način koji je definisan ovde, takođe označava bicikličnu heteroaromatičnu grupu u kojoj je heteroatom izabran između N, O ili S.
Aromatični radikal je opciono nezavisno supstituisan sa jednim ili više supstituenata opisanih ovde. Primeri obuhvataju, bez ograničenja, furil, tienil, pirolil, piridil, pirazolil, pirimidinil, imidazolil, izoksazolil, oksazolil, oksadiazolil, pirazinil, indolil, tiofen-2-il, hinolil, benzopiranil, izotiazolil, tiazolil, tiadiazol, indazol, benzimidazolil, tieno[3,2-b]tiofen, triazolil, triazinil, imidazo[1,2-b]pirazolil, furo[2,3-c]piridinil, imidazo[1,2-a]piridinil, indazolil, pirolo[2,3-c]piridinil, pirolo[3,2-c]piridinil, pirazolo[3,4-c] piridinil, tieno[3,2-c]piridinil, tieno[2,3-c]piridinil, tieno[2,3-b]piridinil, benzotiazolil, indolil, indolinil, indolinonil, dihidrobenzotiofenil, dihidrobenzofuranil, benzofuran, hromanil, tiohromanil, tetrahidrohinolinil, dihidrobenzotiazin, dihidrobenzoksanil, hinolinil, izohinolinil, 1,6-naftiridinil, benzo[de]izohinolinil, pirido[4,3-b][1,6]naftiridinil, tieno[2,3-b]pirazinil, hinazolinil, tetrazolo[1,5-a]piridinil, [1,2,4]triazolo[4,3-a]piridinil, izoindolil, pirolo[2,3-b]piridinil, pirolo[3,4-b]piridinil, pirolo[3,2-b]piridinil, imidazo[5,4-b]piridinil, pirolo[1,2-a]pirimidinil, tetrahidropirolo[1,2-a]pirimidinil, 3,4-dihidro-2H-1Δ<2>-pirolo[2,1-b]pirimidin, dibenzo[b,d]tiofen, piridin-2-on, furo[3,2-c]piridinil, furo[2,3-c]piridinil, 1H-pirido[3,4-b][1,4]tiazinil, benzooksazolil, benzoizoksazolil, furo[2,3-b]piridinil, benzotiofenil, 1,5-naftiridinil, furo[3,2-b]piridin, [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridinil, benzo[1,2,3]triazolil, imidazo[1,2-a]pirimidinil, [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazinil, benzo[c][1,2,5]tiadiazolil, benzo[c][1,2,5]oksadiazol, 1,3-dihidro-2H-benzo[d]imidazol-2-on, 3,4-dihidro-2H-pirazolo[1,5-b][1,2]oksazinil, 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridinil, tiazolo[5,4 d]tiazolil, imidazo[2,1-b][1,3,4]tiadiazolil, tieno[2,3-b]pirolil, 3H-indolil i njihovi derivati. Štaviše, kada sadrže dva fuzionisana prstena, aril grupe koje su ovde definisane mogu imati nezasićeni ili delimično zasićeni prsten fuzionisan sa potpuno zasićenim prstenom. Primerni sistemi prstenova ovih heteroarilnih grupa uključuju indolinil, indolinonil, dihidrobenzotiofenil, dihidrobenzofuran, hromanil, tiohromanil, tetrahidrohinolinil, dihidrobenzotiazin, 3,4-dihidro-1H-izohinolinil, 2,3-dihidrobenzofuran, indolinil, indolil i dihidrobenzoksanil.
[0032] Halogen ili „halo“ označava fluor, hlor, brom ili jod.
[0033] „Alkil“ označava zasićeni ugljovodonik ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži 1-12 atoma ugljenika. Primeri (C1-C6)alkilne grupe uključuju, bez ograničenja, metil, etil, propil, butil, pentil, heksil, izopropil, izobutil, sek-butil, terc-butil, izopentil, neopentil i izoheksil.
[0034] „Alkoksi“ označava zasićeni ugljovodonik ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži 1-12 atoma ugljenika sa terminalom „-O“ u lancu, npr. -O(alkil). Primeri alkoksi grupa uključuju, bez ograničenja, metoksi, etoksi, propoksi, butoksi, t-butoksi ili pentoksi grupe.
[0035] „Alkenil“ označava nezasićeni ugljovodonik ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži 2-12 atoma ugljenika. „Alkenil“ grupa sadrži najmanje jednu dvostruku vezu u lancu.
Dvostruka veza alkenilne grupe može biti nekonjugovana ili konjugovana sa drugom nezasićenom grupom. Primeri alkenil grupa uključuju etenil, propenil, n-butenil, izo-butenil, pentenil ili heksenil. Alkenil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana i može biti ravna ili razgranata.
[0036] „Alkinil“ označava nezasićeni ugljovodonik ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži 2-12 atoma ugljenika. „Alkinil“ grupa sadrži najmanje jednu trostruku vezu u lancu. Primeri alkinil grupa uključuju etinil, propargil, n-butinil, izo-butinil, pentinil ili heksinil. Alkinil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana.
[0037] „Cikloalkil“ ili „karbociklil“ označava monociklični ili policiklični zasićeni ugljenični prsten koji sadrži 3-18 atoma ugljenika. Primeri cikloalkilnih grupa uključuju, bez ograničenja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptanil, ciklooktanil, norboranil, norborenil, biciklo[2.2.2]oktanil ili biciklo[2.2.2]oktenil i njihove derivate. (C3-C8)cikloalkil je cikloalkilna grupa koja sadrži između 3 i 8 atoma ugljenika. Cikloalkilna grupa može biti fuzionisana (npr. dekalin) ili premošćena (npr. norbornan).
[0038] „Heterociklil“ ili „heterocikloalkil“ označava zasićeni ili delimično zasićeni monociklični ili policiklični prsten koji sadrži ugljenik i najmanje jedan heteroatom izabran između kiseonika, azota ili sumpora (O, N ili S) i pri čemu ne postoje delokalizovani n elektroni (aromatičnost) koji se dele između ugljenika prstena ili heteroatoma. Struktura heterocikloalkilni prstena može biti zamenjena sa jednim ili više supstituenata. Supstituenti se i sami mogu opciono supstituisati. Primeri heterociklil prstenova uključuju, bez ograničenja, oksetanil, azetadinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, pirolidinil, oksazolinil, oksazolidinil, tiazolinil, tiazolidinil, piranil, tiopiranil, tetrahidropiranil, dioksalinil, piperidinil, morfolinil, tiomorfolinil, tiomorfolinil S-oksid, tiomorfolinil S-dioksid, piperazinil, azepinil, oksepinil, diazepinil, tropanil, oksazolidinonil, 1,4-dioksanil, dihidrofuranil, 1,3-dioksolanil, imidazolidinil, imidazolinil, ditiolanil i homotropanil.
[0039] „Haloalkil“ označava alkilnu grupu supstituisanu sa jednim ili više halogena. Primeri haloalkilnih grupa uključuju, bez ograničenja, trifluorometil, difluorometil, pentafluoroetil, trihlorometil, itd.
[0040] „Haloalkoksi“ označava alkoksi grupu supstituisanu sa jednim ili više halogena.
Primeri haloalkilnih grupa uključuju, bez ograničenja, trifluorometoksi, difluorometoksi, pentafluoroetoksi, trihlorometoksi, itd.
[0041] „Cijano“ označava supstituent koji ima atom ugljenika spojen sa atomom azota trostrukom vezom, npr. C≡N.
[0042] „Amino“ označava supstituent koji sadrži najmanje jedan atom azota (npr. NH2).
[0043] „Hidroksialkil“ označava alkilnu grupu supstituisanu sa jednom ili više -OH grupa Primeri hidroksialkilnih grupa uključuju HO-CH2-, HO-CHzCHz- i CH2-CH(OH)-.
[0044] „Spirocikloalkil“ ili „spirociklil“ označava karbogeni biciklični sistem prstenova sa oba prstena povezana preko jednog atoma. Prstenovi se mogu razlikovati po veličini i prirodi, ili mogu biti i identični po veličini i prirodi. Primeri uključuju spiropentan, sprioheksan, spiroheptan, spirooktan, spirononan ili spirodekan. Jedan ili oba prstena u spirociklu mogu biti fuzionisana sa drugim karbocikličnim, heterocikličnim, aromatičnim ili heteroaromatičnim prstenom. (C3-C12)spirocikloalkil je spirocikl koji sadrži između 3 i 12 atoma ugljenika.
[0045] „Spiroheterocikloalkil“ ili „spiroheterociklil“ označava spirocikl u kome je najmanje jedan od prstenova heterocikl, jedan ili više atoma ugljenika mogu biti supstituisani heteroatomom (npr. jedan ili više atoma ugljenika mogu biti supstituisani heteroatomom u bar jednom od prstenova). Jedan ili oba prstena u spiroheterociklu mogu biti fuzionisana sa drugim karbocikličnim, heterocikličnim, aromatičnim ili heteroaromatičnim prstenom.
B. Termini i konvencije vezani za soli, derivate i solvate
[0046] „So“ označava jonski oblik matičnog jedinjenja ili produkt reakcije između matičnog jedinjenja sa odgovarajućom kiselinom ili bazom za pravljenje kisele soli ili bazne soli matičnog jedinjenja. Soli jedinjenja ovog pronalaska mogu se sintetizovati iz matičnih jedinjenja koja sadrže osnovni ili kiseli deo konvencionalnim hemijskim metodama. U načelu, soli se pripremaju reakcijom slobodne baze ili kiselinskog matičnog jedinjenja sa stehiometrijskim količinama ili sa viškom željene neorganske ili organske kiseline ili baze koja formira so u odgovarajućem rastvaraču ili različitim kombinacijama rastvarača.
[0047] „Farmaceutski prihvatljiva so“ označava so jedinjenja pronalaska koja je, u okviru razumne medicinske procene, pogodna za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i nižih životinja bez nepotrebne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i slično, sa razumno proporcionalnim odnosom rizika i koristi, generalno rastvorljiva u vodi ili ulju ili disperzibilna, i efikasna za postizanje svoje namene. Termin uključuje farmaceutski prihvatljive kiselinske adicione soli i farmaceutski prihvatljive bazne adicione soli. Pošto su jedinjenja iz ovog pronalaska korisna i u slobodnom baznom obliku i u obliku soli, u praksi, upotreba oblika soli jednaka je upotrebi baznog oblika. Spiskovi pogodnih soli nalaze se u, npr. S.M. Birge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, pp.1-19,.
[0048] „Farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so“ označava one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih baza i koje nisu biološki ili na bilo koji drugi način nepoželjne, formirane sa neorganskim kiselinama kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, jodovodonična kiselina, sumporna kiselina, sulfaminska kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično, i organske kiseline kao što su sirćetna kiselina, trihlorsirćetna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, adipinska kiselina, alginska kiselina, askorbinska kiselina, asparaginska kiselina, benzensulfonska kiselina, benzojeva kiselina, 2-acetoksibenzojeva kiselina, buterna kiselina, kamforna kiselina, kamforsulfonska kiselina, cimetna kiselina, limunska kiselina, diglukonska kiselina, etansulfonska kiselina, glutaminska kiselina, glikolna kiselina, glicerofosforna kiselina, hemisulfonska kiselina, heptanska kiselina, heksanska kiselina, mravlja kiselina, fumarna kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina (isetionska kiselina), mlečna kiselina, maleinska kiselina, hidroksimaleinska kiselina, jabučna kiselina, malonska kiselina, mandelična kiselina, mezitilensulfonska kiselina, metansulfonska kiselina, naftalen sulfonska kiselina, nikotinska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, oksalna kiselina, pamoična kiselina, pektinska kiselina, fenilsirćetna kiselina, 3-fenilpropionska kiselina, pikrinska kiselina, pivalinska kiselina, propionska kiselina, piruvinska kiselina, salicilna kiselina, stearinska kiselina, jantarna kiselina, sulfanilna kiselina, vinska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, undekanska kiselina i slično.
[0049] „Farmaceutski prihvatljiva bazna adiciona so“ označava one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih kiselina i koje nisu biološki ili na drugi način nepoželjne, formirane sa neorganskim bazama kao što su amonijak ili hidroksid, karbonat ili bikarbonat amonijuma ili metalnog katjona kao što su natrijum, kalijum, litijum, kalcijum, magnezijum, gvožđe, cink, bakar, mangan, aluminijum i slično. Posebno se preferiraju soli amonijuma, kalijuma, natrijuma, kalcijuma i magnezijuma. Soli izvedene iz farmaceutski prihvatljivih organskih netoksičnih baza uključuju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, jedinjenja kvaternarnih amina, supstituisane amine uključujući prirodno prisutne supstituisane amine, ciklične amine i bazične jonoizmenjivačke smole, kao što su metilamin, dimetilamin, TEA, etilamin, dietilamin, trietilamin, izopropilamin, tripropilamin, tributilamin, etanolamin, dietanolamin, 2-dimetilaminoetanol, 2-dietilaminoetanol, dicikloheksilamin, lizin, arginin, histidin, kofein, hidrabamin, holin, betain, etilendiamin, glukozamin, metilglukamin, teobromin, purini, piperazin, piperidin, N-etilpiperidin, jedinjenja tetraetilamonijuma, piridin, N,N-dimetilanilin, N-metilpiperidin, N-metilmorfolin, dicikloheksilamin, dibenzilamin, N,N-dibenzilfenetilamin, 1-efenamin, N,N'-dibenziletilendiamin, poliaminske smole i slično.
Posebno poželjne organske netoksične baze su izopropilamin, dietilamin, etanolamin, trimetilamin, dicikloheksilamin, holin i kofein.
[0050] „Solvat“ označava kompleks promenljive stehiometrije formiran od rastvorene supstance, na primer, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)) i rastvarača, na primer, vode, etanola ili sirćetne kiseline. Ova fizička veza može uključivati različite stepene jonske i kovalentne veze, uključujući vodoničnu vezu. U određenim slučajevima, solvat će biti sposoban za izolaciju, na primer, kada su jedan ili više molekula rastvarača inkorporirani u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. U načelu, takvi rastvarači izabrani za svrhu pronalaska ne ometaju biološku aktivnost rastvorene supstance. Solvati obuhvataju i solvate u fazi rastvora i solvate koji se mogu izolovati. Reprezentativni solvati uključuju hidrate, etanolate, metanolate i slično.
[0051] „Hidrat“ označava solvat u kome je (su) molekul(i) rastvarača voda.
[0052] Jedinjenja iz ovog pronalaska, kao što je navedeno u nastavku, obuhvataju njihove slobodne baze ili kiseline, njihove soli, solvate i mogu uključiti oksidisane atome sumpora ili kvaternizovane atome azota u svojoj strukturi, iako nisu eksplicitno navedeni ili prikazani, posebno njihove farmaceutski prihvatljive oblike. Takvi oblici, posebno farmaceutski prihvatljivi oblici, imaju za cilj da budu prihvaćeni na osnovu priloženih patentnih zahteva.
C. Termini i konvencije vezane za izomere
[0053] „Izomeri“ označavaju jedinjenja koja imaju isti broj i vrstu atoma, a time i istu molekularnu težinu, ali se razlikuju u odnosu na raspored ili konfiguraciju atoma u prostoru. Termin uključuje stereoizomere i geometrijske izomere.
[0054] „Stereoizomer“ ili „optički izomer“ označava stabilan izomer koji ima najmanje jedan hiralni atom ili ograničenu rotaciju što dovodi do perpendikularnih disimetričnih ravni (npr. određeni bifenili, aleni i spiro jedinjenja) i može da rotira svetlo polarizovano u ravni. Pošto u jedinjenjima pronalaska postoje asimetrični centri i druge hemijske strukture koje mogu dovesti do stereoizomerizma, pronalazak razmatra stereoizomere i njihove mešavine.
Jedinjenja pronalaska i njihove soli uključuju asimetrične atome ugljenika i stoga mogu postojati kao pojedinačni stereoizomeri, racemati i kao mešavine enantiomera i dijastereomera. Tipično, takva jedinjenja će biti pripremljena kao racemska smeša. Po želji, međutim, takva jedinjenja se mogu pripremiti ili izolovati kao čisti stereoizomeri, npr. kao pojedinačni enantiomeri ili dijastereomeri, ili kao mešavine obogaćene stereoizomerima. Kao što je detaljnije objašnjeno u nastavku, pojedinačni stereoizomeri jedinjenja se pripremaju sintezom iz optički aktivnih početnih materijala koji sadrže željene hiralne centre ili pripremom smeša enantiomernih proizvoda praćenih separacijom ili rezolucijom, kao što je konverzija u smešu dijastereomera praćena separacijom ili rekristalizacijom, hromatografskim tehnikama, upotrebom agenasa za hiralnu rezoluciju ili direktnom separacijom enantiomera na hiralnim hromatografskim kolonama. Početna jedinjenja određene stereohemije su ili komercijalno dostupna ili su napravljena metodama opisanim u nastavku sa rezolucijom u skladu sa tehnikama koje su dobro poznate u struci.
[0055] „Enantiomeri“ označavaju par stereoizomera čije ogledalne slike nisu međusobno superponirane.
[0056] „Dijastereoizomeri“ ili „dijastereomeri“ označavaju optičke izomere koji nisu ogledalne slike jedni drugih.
[0057] „Racemska smeša“ ili „racemat“ označava smešu koja sadrži jednake delove pojedinačnih enantiomera.
[0058] „Ne-racemska smeša“ označava smešu koja sadrži nejednake delove pojedinačnih enantiomera.
[0059] „Geometrijski izomer“ označava stabilni izomer koji je rezultat ograničene slobode rotacije oko dvostrukih veza (npr. cis-2-buten i trans-2-buten) ili u cikličkoj strukturi (npr. cis-1,3-dihlorociklobutan i trans-1,3-dihlorociklobutan). Pošto ugljenik-ugljenik dvostruke (olefinske) veze, C=N dvostruke veze, cikličke strukture i slično mogu biti prisutni u jedinjenjima pronalaska, pronalazak razmatra svaki od različitih stabilnih geometrijskih izomera i njihove mešavine koje proizilaze iz rasporeda supstituenata oko ovih dvostrukih veza i u ovim cikličkim strukturama. Supstituenti i izomeri su određeni korišćenjem cis/trans konvencije ili korišćenjem E ili Z sistema, pri čemu termin „E“ označava supstituente višeg reda na suprotnim stranama dvostruke veze, a termin „Z“ označava supstituente višeg reda na istoj strani dvostruke veze. Detaljna diskusija o E i Z izomerizmu je data u J. March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 4th ed., John Wiley & Sons, 1992. Nekoliko sledećih primera predstavljaju pojedinačne E izomere, pojedinačne Z izomere i smeše E/Z izomera. Određivanje E i Z izomera može se izvršiti analitičkim metodama kao što su rendgenska kristalografija,<1>H NMR, i<13>C NMR.
[0060] Neka od jedinjenja pronalaska mogu postojati u više od jednog tautomernog oblika. Kao što je gore navedeno, jedinjenja pronalaska uključuju sve takve tautomere.
[0061] U struci je dobro poznato da je biološka i farmakološka aktivnost jedinjenja osetljiva na stereohemiju jedinjenja. Tako, na primer, enantiomeri često pokazuju izrazito različitu biološku aktivnost, uključujući razlike u farmakokinetičkim svojstvima, uključujući metabolizam, vezivanje za proteine i slično, i farmakološka svojstva, uključujući vrstu prikazane aktivnosti, stepen aktivnosti, toksičnost i slično. Dakle, osoba stručna u ovoj oblasti će biti upoznata sa time da jedan enantiomer može biti aktivniji ili može pokazivati korisne efekte kada se obogati u odnosu na drugi enantiomer ili kada se odvoji od drugog enantiomera. Pored toga, osoba stručna u ovoj oblasti će znati kako da razdvoji, obogati ili selektivno pripremi enantiomere jedinjenja pronalaska iz ovog otkrića i prethodnih znanja iz struke.
[0062] Dakle, iako se može koristiti racemski oblik leka, često će on biti manje efikasan od primene jednake količine enantiomerno čistog leka; zaista, u nekim slučajevima, jedan enantiomer može biti farmakološki neaktivan i mogao bi služiti samo kao jednostavan razblaživač. Na primer, iako je ibuprofen prethodno primenjivan u obliku racemata, pokazalo se da je samo S-izomer ibuprofena efikasan kao antiinflamatorno sredstvo (u slučaju ibuprofena, međutim, iako je R-izomer neaktivan, on se in vivo konvertuje u S-izomer, tako da je brzina dejstva racemskog oblika leka manja od brzine dejstva čistog S-izomera). Pored toga, farmakološke aktivnosti enantiomera mogu pokazivati različitu biološku aktivnost. Na primer, S-penicilamin je terapijsko sredstvo za hronični artritis, dok je R-penicilamin toksičan. Zaista, neki prečišćeni enantiomeri imaju prednosti u odnosu na racemate, jer je prijavljeno da prečišćeni pojedinačni izomeri pokazuju brže stope transdermalne penetracije u poređenju sa racemskom smešom. Vidi američke patente br.5,114,946 i 4,818,541.
[0063] Dakle, ako je jedan enantiomer farmakološki aktivniji, manje toksičan ili pokazuje preferiranu dispoziciju u telu od drugog enantiomera, bilo bi terapijski korisnije primenjivati taj enantiomer preferencijalno. Na ovaj način, pacijent koji se leči bi bio izložen nižoj ukupnoj dozi leka i nižoj dozi enantiomera koji je potencijalno toksičan ili je potencijalno inhibitor drugog enantiomera.
[0064] Priprema čistih enantiomera ili smeša željenog enantiomernog viška (ee) ili enantiomerne čistoće postiže se primenom jedne ili više od brojnih metoda (a) separacije ili rezolucije enantiomera ili (b) enantioselektivne sinteze poznate struci, ili njihovom kombinacijom. Ove metode rezolucije se u načelu oslanjaju na hiralno prepoznavanje i uključuju, na primer, hromatografiju korišćenjem hiralnih stacionarnih faza, enantioselektivnu kompleksaciju domaćin-gost, rezoluciju ili sintezu pomoću hiralnih pomoćnih sredstava, enantioselektivnu sintezu, enzimsku i neenzimsku kinetičku rezoluciju ili spontanu enantioselektivnu kristalizaciju. Takve metode su načelno predstavljene u publikaciji Chiral Separation Techniques: A Practical Approach (2nd Ed.), G. Subramanian (ed.), Wiley-VCH, 2000; T.E. Beesley and R.P.W. Scott, Chiral Chromatography, John Wiley & Sons, 1999; and Satinder Ahuja, Chiral Separations by Chromatography, Am. Chem. Soc., 2000. Pored toga, postoje podjednako dobro poznate metode za kvantifikaciju enantiomernog viška ili čistoće, na primer, GC, HPLC, CE ili NMR, i dodeljivanje apsolutne konfiguracije i konformacije, na primer, CD ORD, rendgenska kristalografija ili NMR.
[0065] U načelu, svi tautomerni oblici i izomerni oblici i smeše, bilo da su pojedinačni geometrijski izomeri ili stereoizomeri ili racemske ili ne-racemske smeše, hemijske strukture ili jedinjenja su namerni, osim ako specifična stereohemija ili izomerni oblik nisu posebno naznačeni u nazivu ili strukturi jedinjenja.
D. Termini i konvencije vezani za farmaceutsku primenu i lečenje
[0066] „Pacijent“ ili „subjekt“ je sisar, npr. čovek, miš, pacov, zamorče, pas, mačka, konj, krava, svinja ili primat koji nije čovek, kao što su majmun, šimpanza, pavijan ili rezus. U određenim otelotvorenjima, subjekt je primat. U drugim otelotvorenjima, subjekt je čovek.
[0067] „Efikasna količina“ ili „terapijski efikasna količina“ kada se koristi u vezi sa jedinjenjem označava količinu jedinjenja ovog pronalaska koja se koristi u (i) tretmanu ili sprečavanju određenog oboljenja, stanja ili poremećaja, (ii) redukciji, poboljšavanju ili eliminaciji jednog ili više simptoma određenog oboljenja, stanja ili poremećaja, ili (iii) sprečavanju ili odlaganju početka jednog ili više simptoma određenog oboljenja, stanja ili poremećaja opisanih u ovom dokumentu.
[0068] Termini „farmaceutski efikasna količina“ ili „terapijski efikasna količina“ označavaju količinu jedinjenja u skladu sa pronalaskom koja je, kada se primenjuje kod pacijenta kome je to potrebno, dovoljna za lečenje oboljenja, stanja ili poremećaja kod kojih je jedinjenje pokazalo korisnost. Takva količina bi bila dovoljna da izazove biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema ili pacijenta koji želi da postigne istraživač ili kliničar. Količina jedinjenja prema pronalasku koja predstavlja terapijski efikasnu količinu varira u zavisnosti od faktora kao što su jedinjenje i njegova biološka aktivnost, sastav koji se koristi za primenu, vreme primene, put primene, stopa izlučivanja jedinjenja, trajanje lečenja, vrsta stanja oboljenja ili poremećaja koji se leči i njegova ozbiljnost, lekovi koji se koriste u kombinaciji ili čija primena koincidira sa primenom jedinjenja pronalaska, kao i starost, telesna težina, opšte zdravlje, pol i ishrana pacijenta. Takva terapijski efikasna količina može se rutinski odrediti od strane osobe koja je stručna u oblasti uzimajući u obzir njihovo znanje, prethodno stečeno iskustvo i ovaj pronalazak.
[0069] Na način na koji se koristi ovde, termin „farmaceutski sastav“ se odnosi na jedinjenje pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem, u obliku pogodnom za oralnu ili parenteralnu primenu.
[0070] „Nosač“ obuhvata nosače, ekscipijense i razblaživače i označava materijal, sastav ili vehikulum, kao što je tečno ili čvrsto punilo, razblaživač, ekscipijens, rastvarač ili materijal za kapsuliranje, koji su uključeni u prenos ili transport farmaceutskog sredstva iz jednog organa, ili dela tela, u drugi organ, ili deo tela subjekta.
[0071] Subjektu je „potreban“ tretman ako bi takav subjekt imao koristi od biološkog ili medicinskog dejstva ili poboljšanja kvaliteta života usled primene takvog tretmana (po mogućnosti čovek).
[0072] Na način na koji se koristi ovde, termin „inhibirati“, „inhibicija“ ili „inhibirajuće“ odnosi se na redukciju ili suzbijanje datog stanja, simptoma ili poremećaja ili bolesti, ili značajno smanjenje osnovne aktivnosti biološke aktivnosti ili procesa.
[0073] Na način na koji se koristi ovde, termin „tretirati“, „tretiranje“ ili „tretman“ bilo kog oboljenja ili poremećaja odnosi se na olakšavanje ili ublažavanje oboljenja ili poremećaja (odnosno usporavanje ili zaustavljanje razvoja oboljenja ili najmanje jednog od kliničkih simptoma oboljenja); ili olakšavanje ili ublažavanje najmanje jednog fizičkog parametra ili biomarkera povezanog sa oboljenjem ili poremećajem, uključujući one koje pacijent sam ne može uočiti.
[0074] Na način na koji se koristi ovde, termin „sprečiti“, „sprečavanje“ ili „prevencija“ bilo kog oboljenja ili poremećaja odnosi se na profilaktičko lečenje oboljenja ili poremećaja; ili odlaganje početka ili progresije oboljenja ili poremećaja.
[0075] Termin „farmaceutski prihvatljivo“ označava da supstanca ili sastav moraju biti hemijski i/ili toksikološki kompatibilni sa drugim sastojcima koji sadrže formulaciju i/ili sa subjektom koji se leče.
[0076] Termin „poremećaj“ označava i koristi se naizmenično sa terminima oboljenje, stanje ili bolest, osim ako nije drugačije naznačeno.
[0077] „Primena“, „primenjivanje“, „administracija“ ili „administrirati“ označava ili direktno davanje jedinjenja iz pronalaska ili farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja iz pronalaska subjektu ili davanje sastava koji može da formira ekvivalentnu količinu aktivnog jedinjenja u telu subjekta.
[0078] „Jedinjenja ovog pronalaska“, „Jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)“, „jedinjenja pronalaska“ i ekvivalentni izrazi (osim ako nije drugačije naznačeno) odnose se na jedinjenja Formula (I), (Ia ), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii), (Ij), (Ik), (Il), (1m) ( In), (Io), (Ip), (Ik), (Ir), (Is) i (It) kako je ovde opisano, uključujući tautomere, soli, posebno farmaceutski prihvatljive soli, i njihove solvate i hidrate, gde kontekst to dozvoljava, kao i sve stereoizomere (uključujući dijastereoizomere i enantiomere), rotamere, tautomere i izotopski obeležena jedinjenja (uključujući deuterijumske supstitucije), kao i inherentno formirane delove (npr. polimorfe, solvate i/ili hidrate). Za potrebe ovog otkrića, solvati i hidrati se generalno smatraju sastavima. U načelu i poželjno, smatra se da jedinjenja pronalaska i formule koje označavaju jedinjenja pronalaska uključuju samo njihova stabilna jedinjenja i isključuju nestabilna jedinjenja, čak i ako se nestabilno jedinjenje može smatrati doslovce obuhvaćenim formulom jedinjenja. Slično tome, pozivanje na intermedijere, bez obzira da li se oni sami navode u zahtevu ili ne, ima za cilj prihvatanje njihovih soli i solvata, u slučajevima u kojima kontekst to dozvoljava. Radi jasnoće, određeni slučajevi u kojima kontekst nešto dozvoljava ponekad su naznačeni u tekstu, ali ovi slučajevi su čisto ilustrativni i nisu navedeni sa namerom da se isključe drugi slučajevi u kojima kontekst nešto dozvoljava.
[0079] „Stabilno jedinjenje“ ili „stabilna struktura“ označavaju jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasno terapijsko ili dijagnostičko sredstvo. Na primer, jedinjenje koje bi imalo „viseću valentnost“ ili je karbanjon nije jedinjenje koje je predviđeno pronalaskom.
[0080] U određenom otelotvorenju, termin „oko“ ili „približno“ znači u okviru 20%, poželjno u okviru 10%, a poželjnije u okviru 5% date vrednosti ili opsega.
[0081] Prinos svake od ovde opisanih reakcija izražava se u vidu procenta teorijskog prinosa. „Karcinom“ označava bilo koji karcinom (rak) uzrokovan proliferacijom malignih neoplastičnih ćelija, kao što su tumori, neoplazme, karcinomi, sarkomi, leukemije, limfomi i slično. Na primer, karcinomi uključuju, bez ograničenja, mezoteliom, leukemije i limfome kao što su kutani limfomi T-ćelija (CTCL), ne-kutani periferni limfomi T-ćelija, limfomi povezani sa humanim limfotrofnim virusom T-ćelija (HTLV) kao što su leukemija/limfom T-ćelija odraslih (ATLL), limfom B-ćelija, akutne nelimfocitne leukemije, hronična limfocitna leukemija, hronična mijelogena leukemija, akutna mijelogena leukemija, limfomi i multipli mijelom, non-Hodžkinov limfom, akutna limfna leukemija (ALL), hronična limfna leukemija (CLL), Hodžkinov limfom, Burkitov limfom, Burkitov limfom, limfom leukemija T-ćelija odraslih, akutna mijeloična leukemija (AML), hronična mijeloična leukemija (CML) ili hepatocelularni karcinom. Dalji primeri uključuju mijelodisplastični sindrom, solidne tumore u detinjstvu kao što su tumori na mozgu, neuroblastom, retinoblastom, Vilmsov tumor, tumori kostiju i sarkomi mekog tkiva, uobičajeni solidni tumori odraslih kao što su karcinom glave i vrata (npr. oralni, laringealni, nazofarignealni i karcinom jednjaka), genitourinarni karcinomi (npr. prostate, bešike, bubrega, materice, jajnika, testisa), karcinom pluća (npr. malih ćelija i nemalih ćelija), karcinom dojke (npr. trostruko negativan karcinom dojke (TNBC)), karconom pankreasa, melanom i drugi karcinomi kože, karcinom želuca, tumori mozga, tumori povezani sa Gorlinovim sindromom (npr. meduloblastom, meningiom, itd.) i karcinom jetre. Dodatni reprezentativni oblici karcinoma koji se mogu lečiti predmetnim jedinjenjima uključuju, bez ograničenja, karcinom skeletnog sistema ili glatkih mišića, karcinom želuca, karcinom tankog creva, karcinom rektuma, karcinom pljuvačne žlezde, endometrijalni karcinom, karcinom nadbubrežne žlezde, analni karcinom, karcinom rektuma, paratiroidni karcinom i karcinom hipofize.
[0082] Dodatni karcinomi u čijem sprečavanju, lečenju i proučavanju ovde opisana jedinjenja mogu biti korisna su, na primer, karcinom debelog creva, porodična adenomatozna polipoza i nasledni nepolipozni kolorektalni karcinom ili melanom. Dalje, karcinomi uključuju, bez ograničenja, karcinom usana, karcinom larinksa, karcinom hipofarinksa, karcinom jezika, karcinom pljuvačne žlezde, karcinom želuca, adenokarcinom, karcinom tiroidne žlezde (medularni i papilarni karcinom tiroidne žlezde), karcinom bubrega, karcinom parenhima bubrega, karcinom grlića materice, karcinom tela materice, karcinom endometrijuma, karcinom horiona, karcinom testisa, urinarni karcinom, melanom, tumore mozga kao što je glioblastom, astrocitom, meningiom, meduloblastom i periferni neuroektodermalni tumori, karcinom žučne kese, bronhijalni karcinom, multipli mijelom, bazaliom, teratom, retinoblastom, melanom horoideje, seminom, rabdomiosarkom, kraniofaringeom, osteosarkom, hondrosarkom, miosarkom, liposarkom, fibrosarkom, Juingov sarkom, plazmocitom, karcinom pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanom, trostruko negativni karcinom dojke (TNBC), nazofaringealni karcinom (NPC), mikrosatelitski stabilan kolorektalni karcinom (mssCRC), timom, karcinoid, akutnu mijelogenu leukemiju i gastrointestinalni stromalni tumor (GIST).
[0083] „Istovremeno“ ili „simultano“, kada se odnosi na metod lečenja ili terapijsku primenu, znači sa kombinacijom jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera, i jednog ili više drugih agenasa označava primenu jedinjenja i jednog ili više drugih agenasa istim putem i u isto vreme.
[0084] „Odvojeno“ ili „zasebno“, kada se odnosi na metod lečenja ili terapijsku primenu, znači sa kombinacijom jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera, i jednog ili više drugih agenasa označava primenu jedinjenja i jednog ili više drugih agenasa različitim putevima primene i u otprilike isto vreme.
[0085] Pod terapijskom primenom „tokom vremenskog perioda“, kada se odnosi na metod lečenja ili terapijsku primenu sa kombinacijom jedinjenja Formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera i jednog ili više drugih agenasa, označava primenu jedinjenja i jednog ili više drugih agenasa istim ili različitim putem primene i u različito vreme. U nekim otelotvorenjima, primena jedinjenja ili jednog ili više drugih agenasa se odvija pre nego što počne primena drugog. Na ovaj način, moguće je da se primeni jedan od aktivnih sastojaka (tj. jedinjenje Formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, ili jedan ili više drugih agenasa) nekoliko meseci pre primene drugog aktivnog sastojka ili sastojaka. U tom slučaju ne dolazi do istovremene primene. Druga vrsta terapijske primene tokom određenog vremenskog perioda sastoji se od primene tokom određenog vremena dva ili više aktivnih sastojaka kombinacije koristeći različitu učestalost primene za svaki od aktivnih sastojaka, pri čemu se u određenim vremenskim tačkama istovremeno daje sve aktivne supstance, dok se u drugim vremenskim tačkama primenjuje samo deo aktivnih sastojaka iz kombinacije (npr. terapijska primena tokom određenog vremenskog perioda jedinjenja Formule (I) ili njene farmaceutski prihvatljive soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera i jednog ili više drugih agenasa izgledala bi tako da se jedinjenje Formule (I) ili njena farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, primenjuju jednom dnevno, dok se jedan ili više drugih agenasa primenjuje jednom svake četiri nedelje).
[0086] Jedinjenja se mogu davati istovremeno (u vidu pojedinačnog preparata ili zasebnih preparata), uzastopno, odvojeno ili tokom određenog vremenskog perioda u odnosu na drugi vid terapije lekovima ili modalitet lečenja. U načelu, kombinovana terapija predviđa primenu dva ili više medikamenta tokom jednog ciklusa ili kure lečenja.
[0087] „Oboljenje ili poremećaj zavisan od IKZF2“ označava bilo koje oboljenje ili poremećaj na koji direktno ili indirektno utiče modulacija nivoa proteina IKZF2.
[0088] „Oboljenje ili poremećaj zavisan od IKZF4“ označava bilo koje oboljenje ili poremećaj na koji direktno ili indirektno utiče modulacija nivoa proteina IKZF4.
D. Specifična otelotvorenja i metode za ispitivanje jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)
[0089] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, sposobne da moduliraju nivoe proteina IKZF2, što je korisno u lečenju oboljenja i poremećaja povezanih sa modulacijom nivoa proteina IKZF2. Pronalazak se dalje odnosi na jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, koji su korisni za redukciju ili smanjenje nivoa proteina IKZF2.
[0090] U jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ia):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0091] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ib):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0092] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (lc):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0093] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Id):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0094] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ie):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0095] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (If):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0096] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ig):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0097] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ih):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0098] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ii):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0099] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ij):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0100] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ik):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0101] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Il):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0102] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Im):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0103] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (In):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0104] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Io):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0105] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ip):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0106] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Iq):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0107] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Ir):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0108] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (Is):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0109] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) imaju strukturu Formule (It):
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0110] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula (npr. Formule (I), (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii), (Ij), (Ik), (Il), (Im), (In), (Io), (p), (Iq), (Ir), (Is) i (It)), R1je
U drugom otelotvorenju, R1je
[0111] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, X1je H, (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X1je H, (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X1je H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, X1je H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi ili halogen. U još jednom otelotvorenju, X1je H, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X1je H, (C1-C4)alkil, (C1-C4)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X1je H, (C1-C4)alkil, (C1-C4)haloalkil, halogen, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X1je H, (C1-C4)alkil, halogen, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X1je H, halogen, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X1je H.
[0112] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, X2je H, (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X2je H, (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X2je H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, X2je H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi ili halogen. U još jednom otelotvorenju, X2je H, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X2je H, (C1-C4)alkil, (C1-C4)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X2je H, (C1-C4)alkil, (C1-C4)haloalkil, halogen, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X2je H, (C1-C4)alkil, halogen, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, X2je H, halogen, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X2je H.
[0113] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, X1je H a X2je (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, X1je (C1-C3)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2a X2je H. U još jednom otelotvorenju, X1je H a X2je H.
[0114] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula Rxje D. U drugom otelotvorenju Rxje H.
[0115] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi ili halogen. U još jednom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci halogen, - CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil ili (C1-C3)haloalkoksi. U još jednom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili (C1-C3)haloalkil. U još jednom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili -CN. U drugom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil. U još jednom otelotvorenju, R2je nezavisno u svakoj instanci metil, etil, n-propil ili izopropil.
[0116] U nekim otelotvorenjima gore navedene formule, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno kada su na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0117] U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0118] U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 5-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0119] U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil, ili dva R2zajedno kada su na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0120] U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C3-C7)cikloalkil ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju fenil.
[0121] U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R2zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili dva R2zajedno kada se nalaze na susednim atomima ugljenika formiraju 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0122] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena.
[0123] U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0124] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi, halogen, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil, (C1-C3)haloalkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)alkoksi, (C1-C3)haloalkil ili (C1-C3)haloalkoksi. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, R3je halogen, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen ili -OH. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil ili (C1-C3)haloalkil. U drugom otelotvorenju, R3je (C1-C6)alkil.
[0125] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R4je -OR5. U drugom otelotvorenju, R4je -NR6R6'.
[0126] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R5je H, (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril, ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R5je (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloakil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril, ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranim između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0127] U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5-ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril, ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R5je (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloakil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril, ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranim između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0128] U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil ili (C1-C3)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranim između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R5je (C1-C6)alkil ili (C1-C3)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranim između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R5je (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0129] U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno odabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0130] U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno odabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0131] U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila. U još jednom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R5je H, (C1-C3)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri (C6-C10)arila.
[0132] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12.
[0133] U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5-ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7.
[0134] U drugom otelotvorenju, R6je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil i heterocikloalkil opciono supstituisani jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R12.
[0135] U drugom otelotvorenju, R6je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7.
[0136] U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C2-C6)hidroksialkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su heterocikloalkil i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12.
[0137] U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7.
[0138] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6'je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12.
[0139] U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5-ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7.
[0140] U drugom otelotvorenju, R6'je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12.
[0141] U drugom otelotvorenju, R6'je (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7.
[0142] U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C2-C6)hidroksialkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su heterocikloalkil i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do četiri R12. U još jednom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil, pri čemu je alkil supstituisan sa jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil.
[0143] U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H, (C1-C6)alkil, (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil, pri čemu je alkil supstituisan sa jednim do tri R7. U još jednom otelotvorenju, R6'je H ili (C1-C6)alkil.
[0144] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 5-do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 6- do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 7- ili 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0145] U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U još jednom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U još jednom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 5- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8.
[0146] U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 6- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U još jednom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U još jednom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8. U drugom otelotvorenju, R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do tri R8.
[0147] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2. U još jednom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U još jednom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0148] U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U još jednom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0149] U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U još jednom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila i halogena. U drugom otelotvorenju, R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0150] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil i heterocikloalkil opciono supstituisani sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su aril i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do tri R9.
[0151] U drugom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su heterocikloalkil i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil i heteroaril opciono supstituisani sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili (C6-C10)aril, pri čemu su heterocikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do tri R9.
[0152] U drugom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil supstituisan sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je (C3-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je (C6-C10)aril supstituisan sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je (C6-C10)aril.
[0153] U drugom otelotvorenju, svako R7je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, opciono supstituisana sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisana sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, svako R7je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, opciono supstituisana sa jednim do tri R9. U drugom otelotvorenju, svako R7je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, supstituisan sa jednim do tri R9. U još jednom otelotvorenju, svako R7je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0154] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, -CN, -OH, -NR13R14, -NH2, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)aril ili -O-5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri R10a cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril su opciono supstituisani sa jednim do tri R11. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, -CN, -OH, -NR13R14i -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci -NR13R14, -NH2, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)aril ili -O-5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, -CN, -OH, - NR13R14, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)aril ili -O-5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim ili dva R10a cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril su opciono supstituisani sa jednim do tri R11.
[0155] U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, -CN, -OH ili -NH2, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril i 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili - OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa (C3-C7)cikloalkilom, 4- do 7-članim heteroacikloalkilnim prstenom koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i (C6-C10)arila.
[0156] U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno odabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, i 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, - CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0157] U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila i 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0158] U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili -OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i 5-ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C4)alkil, (C1-C4)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C4)haloalkoksi, halogen, -CN ili - OH, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila i (C6-C10)arila.
[0159] U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen ili -OH. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, -CN, -OH ili -NH2. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen.
[0160] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil ili 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil ili 5-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil ili 6- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil ili 4-do 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15.
[0161] U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C6)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C7)cikloalkil.
[0162] U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. u drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C6)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C7)cikloalkil opciono supstituisan sa dva R15.
[0163] U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6- ili 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0164] U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6- ili 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U još jednom otelotvorenju, dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15.
[0165] U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na istom atomu ugljenika zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)spirocikloalkil ili 4- do 7-člani spiroheterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15. U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15.
[0166] U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril. U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R8kada se nalaze na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil.
[0167] U drugom otelotvorenju, dva R8zajedno sa istim atomom za koji su vezani formiraju =(O).
[0168] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, (C3-C6)cikloalkil, -OH, -CN, -NH2ili -NR13R14. U drugom otelotvorenju, R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, (C3-C6)cikloalkil, -OH, -CN ili NR13R14. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, halogen ili - CN. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci halogen, -OH, - CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili halogen. U još jednom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili (C1-C3)haloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili halogen. U još jednom otelotvorenju, svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)haloalkil.
[0169] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena i -CN. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5-člani do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1 do 2 heteroatoma izabrana između O, N i S, opciono supstituisana sa jednim do tri halogena. U još jednom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C6)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C7)cikloalkil.
[0170] U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6- ili 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0171] U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil ili 5-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0172] U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju fenil. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5-člani heteroarilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0173] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R10je (C3-C7)cikloalkil, 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R10je (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, svako R10je (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S
[0174] U drugom otelotvorenju, svako R10je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril. U još jednom otelotvorenju, svako R10je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R10je (C3-C7)cikloalkil ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, svako R10je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S ili (C6-C10)aril. U još jednom otelotvorenju, svako R10je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R10je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, svako R10je (C3-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R10je (C6-C10)aril.
[0175] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, - CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci halogen, -OH, -CN ili - NH2. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili halogen. U još jednom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili (C1-C3)haloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R11je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili halogen.
[0176] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, - CN ili -NH2. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, halogen ili -CN. U još jednom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci halogen, -OH, -CN ili - NH2. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil, (C1-C6)alkoksi ili halogen. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili halogen. U još jednom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil, (C1-C3)haloalkil ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili (C1-C3)haloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci halogen ili -CN. U drugom otelotvorenju, svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C3)alkil ili halogen.
[0177] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil ili 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0178] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 6- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0179] U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil.
[0180] U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6- ili 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0181] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R13je izabrano između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R13je izabrano između (C1-C6)alkila i (C1-C6)haloalkila. U drugom otelotvorenju, R13je izabrano između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R13je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, svako R13je izabrano između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S
[0182] u drugom otelotvorenju, R13je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i (C6-C10)arila. U još jednom otelotvorenju, R13je izabrano između 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R13je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R13je izabrano između 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i (C6-C10)arila. U još jednom otelotvorenju, R13je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R13je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R13je (C3-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, svako R13je (C6-C10)aril.
[0183] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R14je izabrano između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R14je izabrano između (C1-C6)alkila i (C1-C6)haloalkila. U drugom otelotvorenju, R14je izabrano između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R14je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R14je izabrano između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0184] u drugom otelotvorenju, R14je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i (C6-C10)arila. U još jednom otelotvorenju, R14je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R14je izabrano između (C3-C7)cikloalkila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U još jednom otelotvorenju, R14je izabrano između 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S i (C6-C10)arila. U još jednom otelotvorenju, R14je 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R14je 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R14je (C3-C7)cikloalkil. U još jednom otelotvorenju, R14je (C6-C10)aril.
[0185] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil ili 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0186] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 6- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0187] U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C7)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C6)cikloalkil. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C5)cikloalkil.
[0188] U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 6- ili 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju 4- ili 5-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S.
[0189] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m je 0, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, m je 0 ili 1. U još jednom otelotvorenju, m je 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, m je 0. U još jednom otelotvorenju, m je 1. U drugom otelotvorenju, m je 2.
[0190] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m1 je 0, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, m1 je 0 ili 1. U još jednom otelotvorenju, m1 je 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, m1 je 0. U još jednom otelotvorenju, m1 je 1. U drugom otelotvorenju, m1 je 2.
[0191] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 0, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, n1 je 1, 2 ili 3. U drugom otelotvorenju, n1 je 0 ili 1. U drugom otelotvorenju, n1 je 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, n1 je 2 ili 3. U drugom otelotvorenju, n1 je 0. U drugom otelotvorenju, n1 je 1. U drugom otelotvorenju, n1 je 2. U drugom otelotvorenju, n1 je 3.
[0192] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n jednako ≤ 4. U drugom otelotvorenju, svako s i n su nezavisno 1 ili 2, pri čemu je s n jednako ≤ 4. U drugom otelotvorenju, svako s i n su nezavisno 2 ili 3, pri čemu je s n jednako ≤ 4. U drugom otelotvorenju, s je 1 a n je 1. U drugom otelotvorenju, s je 2 a n je 2. U drugom otelotvorenju, s je 1 a n je 2. U drugom otelotvorenju, s je 2 a n je 1. U drugom otelotvorenju, s je 3 a n je 1. U drugom otelotvorenju, s je 1 a n je 3.
[0193] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a R4je -OR5.
[0194] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a R4je -NR6R6'.
[0195] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a n1 je 1 ili 2.
[0196] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, a R4je -OR5.
[0197] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, a R4je - NR6R6'.
[0198] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2 i R4je -OR5.
[0199] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2 a R4je -NR6R6'.
[0200] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, a m1 je 0.
[0201] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, m1 je 0, a R4je -OR5.
[0202] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, m1 je 0, a R4je -NR6R6'.
[0203] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m1 je 0 a R4je -NR6R6'.
[0204] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m1 je 0 a R4je -OR5.
[0205] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a m1 je 0.
[0206] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, m1 je 0 a R4je -OR5.
[0207] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0 a R4je - NR6R6'.
[0208] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2 a m1 je 0.
[0209] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2, m1 je 0 a R4je -OR5.
[0210] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2, m1 je 0 a R4je -NR6R6'.
[0211] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, a m1 je 2.
[0212] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, m1 je 2, a R4je -OR5.
[0213] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n1 je 1 ili 2, m1 je 2, a R4je -NR6R6'.
[0214] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a m1 je 2.
[0215] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 2 a R4je -OR5.
[0216] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, m1 je 2 a R4je - NR6R6'.
[0217] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2 a m1 je 2.
[0218] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2, m1 je 2 a R4je -OR5.
[0219] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n1 je 1 ili 2, m1 je 2 a R4je -NR6R6'.
[0220] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m1 je 2 a R4je -OR5.
[0221] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m1 je 2 a R4je -NR6R6'.
[0222] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, n je 2 a s je 1 ili 2.
[0223] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a R4je -OR5.
[0224] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a R4je -NR6R6'.
[0225] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n je 2, s je 1 ili 2, a m je 0 ili 1.
[0226] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -OR5.
[0227] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -NR6R6'.
[0228] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -OR5.
[0229] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -NR6R6'.
[0230] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
a m je 0 ili 1.
[0231] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0 ili 1, a R4je - OR5.
[0232] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0 ili 1, a R4je - NR6R6'.
[0233] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, m je 0 ili 1, a R4je - OR5.
[0234] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0 ili 1, a R4je - NR6R6'.
[0235] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n je 2, s je 1 ili 2, a m je 0 ili 1.
[0236] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -OR5.
[0237] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n je 2, s je 1 ili 2, m je 0 ili 1, a R4je -NR6R6'.
[0238] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n je 2, s je 1 ili 2 a R4je -OR5.
[0239] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, n je 2, s je 1 ili 2 a R4je -NR6R6'.
[0240] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m je 0 ili 1 i R4je -OR5.
[0241] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, m je 0 ili 1 a R4je -NR6R6'.
[0242] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0, R4je -OR5a R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -OR5a R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0243] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-Cio)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji
sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n1 0. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji
sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n1 1. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji
sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n1 2.
[0244] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n10. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n12.
[0245] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0, R4je -OR5a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -OR5a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0246] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n10. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata svaki nezavisno izabran između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, dok je n12.
[0247] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n10. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -OR5, R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila, dok je n12.
[0248] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', a R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0249] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8, dok je n10. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8, dok je n12.
[0250] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', a R6i P6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9.
[0251] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisan sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i P6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n10.
[0252] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisan sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n12.
[0253] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0254] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n10, 1 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n10.
[0255] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n12.
[0256] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, a R7je (C6-C10)aril.
[0257] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril, dok je n10, 1 ili 2.
[0258] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril, dok je n10.
[0259] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil ili (C1-C6)haloalkil, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono je supstituisana sa jednim do četiri R8, R7je (C6-C10)aril, dok je n12.
[0260] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', a R6je H, (C1-C6)haloalkil, ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7.
[0261] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0262] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n10, 1 ili 2.
[0263] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n10.
[0264] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim do dva R9, dok je n12.
[0265] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do dva R9.
[0266] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n10, 1 ili 2.
[0267] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do dva R9, dok je n10.
[0268] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim do dva R9, dok je n12.
[0269] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, P6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H, (C1-C6)haloalkil ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril, dok je n12.
[0270] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0271] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9, dok je n12.
[0272] U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9.
[0273] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili dva R9, dok je n12.
[0274] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril, dok je n11 ili 2. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril, dok je n11. U drugom otelotvorenju, R1je
, m1 je 0, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R7je (C6-C10)aril, dok je n12.
[0275] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 1, a s je 1. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 1, s je 1, a R4je -OR5. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 1, s je 1, R4je -OR5, a R5je H, (C6-C10)aril ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)aril. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 1, s je 1, R4je -OR5, a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0276] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 1, s je 1, a R4je -NR6R6'. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 1, s je 1, R4je -NR6R6'a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 1, s je 1, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 1, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0277] U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 1, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili više R9.
[0278] U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 1, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril.
[0279] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 2, a s je 1. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, a R4je -OR5. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, R4je -OR5, a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0280] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, a R4je -NR6R6'. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, R4je -NR6R6'a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0281] U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili više R9.
[0282] U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 1, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril.
[0283] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 2, a s je 2. U drugom otelotvorenju, R1je
n je 2, s je 2, a R4je -OR5. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 2, R4je -OR5, a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0284] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
, m je 0, n je 2, s je 2, a R4je -NR6R6'. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 2, R4je -NR6R6'a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 2, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0285] U drugom otelotvorenju R1je
m je 0, n je 2, s je 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili više R9.
[0286] U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril.
[0287] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, a R4je -OR5. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -OR5, a R5je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri (C6-C10)arila.
[0288] U nekim otelotvorenjima gore navedenih formula, R1je
m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, a R4je -NR6R6'. U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -NR6R6'a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -NR6R6'R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7. U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C3-C7)cikloalkil ili (C6-C10)aril, pri čemu su cikloalkil i aril opciono supstituisani sa jednim ili dva R9.
[0289] U drugom otelotvorenju, R1je
, m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril opciono supstituisan sa jednim ili više R9.
[0290] U drugom otelotvorenju, R1je
m je 0, n je 2, s je 1 ili 2, R4je -NR6R6', R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, a R7je (C6-C10)aril.
[0291] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1, 2 ili 3, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 2 ili 3, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0292] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1 ili 2, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0293] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0294] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 2, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0295] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 3, R4je -NR6R6', a R6je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, R6'je H ili (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7, ili R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0296] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1, 2 ili 3 R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U još jednom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 2 ili 3, R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0297] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1 ili 2, R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U još jednom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 1, R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0298] U drugom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 2, R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8. U još jednom otelotvorenju, R1je
m1 je 0, n1 je 3, R4je -NR6R6', a R6i R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8.
[0299] Otelotvorenje 1: Jedinjenje Formule (I'), pri čemu je:
X1i X2su svaki nezavisno H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (Ci-Ce)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2;
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili - NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R12; ili
R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH, -NR13R14, -NH2, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)arila ili -O-5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan jednim do tri R10a cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril su opciono supstituisani jednim do tri R11; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15; ili dva R8kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R8zajedno sa istim atomom za koji su vezani formiraju a =(O);
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; ili dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R10je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R11je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C1-C6)alkoksija, (C1-C6)haloalkoksija, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2;
dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R13i R14su svaki nezavisno izabrani između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
[0300] Otelotvorenje 2. Jedinjenje iz Otelotvorenja 1 sa Formulom (I), pri čemu:
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, OH ili -NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili
R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH ili -NH2, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
[0301] Otelotvorenje 2A. Jedinjenje iz Otelotvorenja 1 sa Formulom (I), pri čemu:
Rxje H ili D;
R1je
svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili - NH2;
R4je -OR5ili -NR6R6';
R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S;
R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili
R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili
R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9;
svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili
dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S;
svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili
dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2;
m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2;
n1 je 0, 1, 2 ili 3; i
svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4;
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere i tautomere.
[0302] Otelotvorenje 3. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, pri čemu je R1
[0303] Otelotvorenje 4. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, pri čemu je n1 jednako 0, 1 ili 2.
[0304] Otelotvorenje 5. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1 do 3 i 2A, pri čemu je m 1 jednako 0.
[0305] Otelotvorenje 6. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1 do 3 i 2A, pri čemu je m 1 jednako 2.
[0306] Otelotvorenje 7. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, pri čemu je R1
[0307] Otelotvorenje 8. Jedinjenje iz Otelotvorenja 7, pri čemu je n jednako 2 a s je 1 ili 2.
[0308] Otelotvorenje 9. Jedinjenje iz Otelotvorenja 7 ili 8, pri čemu je m jednako 0 ili 1.
[0309] Otelotvorenje 10. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A sa Formulom (Ia) ili Formulom (Ib) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri i tautomeri.
[0310] Otelotvorenje 11. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, sa Formulom (Ic), Formulom (Id), Formulom (Ie), Formulom (If), Formulom (Ig), Formulom (Ih), Formulom (Ii) ili Formulom (Ij) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri i tautomeri.
[0311] Otelotvorenje 12. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, sa Formulom (Ik), Formulom (Il), Formulom (Im), Formulom (In), Formulom (Io) ili Formulom (Ip) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri i tautomeri.
[0312] Otelotvorenje 13. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1 do 12 i 2A, pri čemu je R4-OR5.
[0313] Otelotvorenje 14. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1 do 12 i 2A, pri čemu je R4- NR6R6'.
[0314] Otelotvorenje 15. Jedinjenje iz bilo kog od Otelotvorenja 1, 2 i 2A, sa Formulom (Iq), Formulom (Ir), Formulom (Is) ili Formulom (It) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri i tautomeri.
[0315] Otelotvorenje 16. Jedinjenje Otelotvorenja 1 izabrano između:
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
[0316] Otelotvorenje 17. Farmaceutski sastav koji sadrži terapijski efikasnu količinu jedinjenja prema bilo kom od Otelotvorenja 1-16 i 2A, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijens.
[0317] Otelotvorenje 18. Farmaceutski sastav prema Otelotvorenju 17 koje dalje sadrži bar jedno dodatno terapijsko sredstvo.
[0318] Otelotvorenje 19. Farmaceutski sastav prema Otelotvorenju 17 ili Otelotvorenju 18 za primenu u lečenju bolesti ili oboljenja na koje utiče redukcija nivoa proteina IKZF2.
[0319] Otelotvorenje 28. Jedinjenje prema bilo kom od Otelotvorenja 1-16 i 2A ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, za primenu u lečenju bolesti ili oboljenja na koje utiče redukcija nivoa proteina IKZF2.
[0320] Otelotvorenje 29. Jedinjenje prema bilo kom od Otelotvorenja 1-16 i 2A ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, za primenu u proizvodnji medikamenta za lečenje bolesti ili oboljenja na koje utiče redukcija nivoa proteina IKZF2.
[0321] Otelotvorenje 30. Jedinjenje iz Otelotvorenja 29, pri čemu je bolest ili oboljenje karcinom prostate, karcinom dojke, limfom, leukemija, mijelom, karcinom mokraćne bešike, karcinom debelog creva, kutani melanom, hepatocelularni karcinom, karcinom endometrijuma, karcinom jajnika, karcinom grlića materice, karcinom pluća, karcinom bubrega, multiformni glioblastom, gliom, karcinom tiroidne žlezde, karcinom paratiroidne žlezde, nazofaringealni karcinom, karcinom jezika, karcinom pankreasa, karcinom jednjaka, holangiokarcinom, karcinom želuca i sarkom mekih tkiva izabran između rabdomiosarkoma (RMS), sinovijalnog sarkoma, osteosarkoma, rabdoidnih karcinoma i Juingovog sarkoma.
[0322] Otelotvorenje 31. Jedinjenje prema Otelotvorenju 29, pri čemu je bolest ili oboljenje karcinom pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanom, trostruko negativni karcinom dojke (TNBC), nazofaringealni karcinom (NPC), mikrosatelitski stabilan kolorektalni karcinom (mssCRC), timom, karcinoid, akutna mijelogena leukemija i gastrointestinalni stromalni tumor (GIST).
[0323] U nekim otelotvorenjima jedinjenja su (S)-enantiomer. U drugim otelotvorenjima jedinjenja su (R)-enantiomer. U još nekim otelotvorenjima, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti (+) ili (-) enantiomeri.
[0324] Trebalo bi da bude jasno da su svi izomerni oblici uključeni u ovaj pronalazak, uključujući njihove smeše. Ako jedinjenje sadrži dvostruku vezu, supstituent može biti u konfiguraciji E ili Z. Ukoliko jedinjenje sadrži disupstituisani cikloalkil, cikloalkil supstituent može imati cis ili trans konfiguraciju. Takođe je predviđeno da budu uključeni i svi tautomerni oblici.
[0325] Jedinjenja pronalaska i njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati i stereoizomeri mogu postojati u njihovom tautomernom obliku (na primer, kao amid ili imino etar). Svi takvi tautomerni oblici ovde se razmatraju kao deo ovog pronalaska.
[0326] Jedinjenja pronalaska mogu sadržati asimetrične ili hiralne centre i stoga mogu postojati u različitim stereoizomernim oblicima. Namera je da svi stereoizomerni oblici jedinjenja pronalaska, kao i njihove smeše, uključujući racemske smeše, budu obuhvaćena ovim pronalaskom. Pored toga, ovaj pronalazak obuhvata sve geometrijske i pozicione izomere. Na primer, ako jedinjenje pronalaska uključuje dvostruku vezu ili fuzionisani prsten, i cis- i trans- oblici, kao i mešavine, obuhvaćeni su obimom ovog pronalaska. Svako ovde otkriveno jedinjenje obuhvata sve enantiomere koji odgovaraju opštoj strukturi jedinjenja. Jedinjenja mogu biti u racemskom ili enantiomerno čistom obliku, ili bilo kom drugom obliku u smislu stereohemije. Rezultati analize mogu odražavati podatke prikupljene za racemski oblik, enantiomerni čisti oblik ili bilo koji drugi oblik u smislu stereohemije.
[0327] Dijastereomerne smeše mogu se odvojiti u svoje pojedinačne dijastereomere na osnovu njihovih fizičkih hemijskih razlika metodama koje su dobro poznate u struci, kao što su, na primer, hromatografija i/ili frakciona kristalizacija. Enantiomeri se mogu odvojiti pretvaranjem enantiomerne smeše u dijastereomernu smešu reakcijom sa odgovarajućim optički aktivnim jedinjenjem (npr. hiralna pomoćna supstanca kao što je hiralni alkohol ili Mosher-ov kiseli hlorid), odvajanjem dijastereomera i pretvaranjem (npr. hidrolizom) pojedinačnih dijastereomera u odgovarajuće čiste enantiomere. Takođe, neka od jedinjenja pronalaska mogu biti atropizomeri (npr. supstituisani biarili) i smatraju se delom ovog otkrića. Enantiomeri se takođe mogu razdvojiti korišćenjem hiralne HPLC kolone.
[0328] Takođe je moguće da jedinjenja pronalaska mogu postojati u različitim tautomernim oblicima, a svi takvi oblici su prihvaćeni u okviru pronalaska i hemijskih struktura i imena. Takođe, na primer, svi keto-enolni i imin-enaminski oblici jedinjenja su uključeni u pronalazak.
[0329] Svi stereoizomeri (na primer, geometrijski izomeri, optički izomeri i slično) prisutnih jedinjenja (uključujući stereoizomere soli i solvata jedinjenja), kao što su oni koji mogu postojati zbog asimetričnih ugljenika na različitim supstituentima, uključujući enantiomerne oblike (koji mogu postojati čak i u odsustvu asimetričnih ugljenika), rotamerne oblike, atropizomere i dijastereomerne oblike, razmatraju se u okviru ovog pronalaska, kao i pozicioni izomeri (kao što su, na primer, 4-piridil i 3-piridil). (Na primer, ako jedinjenje Formule (I') ili Formule (I) sadrži dvostruku vezu ili fuzionisani prsten, i cis- i trans- oblici, kao i smeše, obuhvaćene su obimom pronalaska. Takođe, na primer, svi keto-enolni i iminenaminski oblici jedinjenja su uključeni u pronalazak). Pojedinačni stereoizomeri jedinjenja pronalaska mogu, na primer, biti suštinski oslobođeni drugih izomera, ili pomešani, na primer, kao racemati ili sa svim drugim, ili drugim odabranim, stereoizomerima.
[0330] Hiralni centri jedinjenja pronalaska mogu imati S ili R konfiguraciju kako je definisano u preporukama IUPAC 1974. U određenim otelotvorenjima, svaki asimetrični atom ima najmanje 50% enantiomernog viška, najmanje 60% enantiomernog viška, najmanje 70% enantiomernog viška, najmanje 80% enantiomernog viška, najmanje 90% enantiomernog viška, najmanje 95% enantiomernog viška ili najmanje 99% enantiomernog viška u (R)- ili (S)- konfiguraciji. Supstituenti atoma sa nezasićenim dvostrukim vezama mogu, ako je moguće, biti prisutni u obliku cis-(Z)- ili trans-(E).
[0331] Upotreba termina „so“, „solvat“ i slično, ima za cilj da se podjednako primenjuje na soli i solvate enantiomera, stereoizomera, rotamera, tautomera, pozicionih izomera i racemata inventivnih jedinjenja.
[0332] Jedinjenja pronalaska mogu formirati soli koje su takođe obuhvaćene ovim pronalaskom. Pozivanje na jedinjenje Formule ovde smatra se da u načelu uključuje i pozivanje na njegove soli, osim ako nije drugačije naznačeno.
[0333] Jedinjenja i intermedijeri se mogu izolovati i koristiti kao jedinjenje per se. Bilo koja formula data ovde takođe predstavlja neoznačene oblike kao i izotopski označene oblike jedinjenja. Izotopski označena jedinjenja imaju strukture prikazane formulama koje su date ovde, osim što su jedan ili više atoma zamenjeni atomom koji ima izabranu atomsku masu ili maseni broj. Primeri izotopa koji se mogu ugraditi u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fluora, kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>F, respektivno. Pronalazak obuhvata različita izotopski označena jedinjenja kao što su ovde definisana, na primer ona u kojima su prisutni radioaktivni izotopi, kao što su<3>H,<13>C i<14>C.
Takva izotropski označena jedinjenja su korisna u metaboličkim studijama (sa<14>C), reakcionim kinetičkim studijama (sa, na primer<2>H ili<3>H), tehnikama detekcije ili snimanja, npr. pozitronska emisiona tomografija (PET) ili kompjuterizovana tomografija sa jednom emisijom fotona (SPECT), uključujući testove distribucije lekova ili supstrata tkiva, ili u radioaktivnom lečenju pacijenata. Konkretno, jedinjenje<18>F,<11>C ili označeno jedinjenje može biti posebno poželjno za studije PET ili SPECT.
[0334] Dalje, supstitucija sa težim izotopima, posebno deuterijumom (odnosno<2>H ili D) može dati određene terapijske prednosti koje proizilaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećanog poluraspada in vivo, smanjenih zahteva za doziranjem, smanjene inhibicije CYP450 (kompetitivne ili vremenski zavisne) ili poboljšanja terapijskog indeksa. Na primer, supstitucija sa deuterijumom može modulirati neželjene efekte jedinjenja bez deuterijuma, kao što su kompetitivna inhibicija CYP450, vremenski zavisna inaktivacija CYP450, itd. Podrazumeva se da se deuterijum u ovom kontekstu smatra supstituentom u jedinjenjima ovog pronalaska. Koncentracija takvog težeg izotopa, posebno deuterijuma, može se definisati faktorom obogaćivanja izotopa. Termin „izotopni faktor obogaćivanja“ na način na koji se koristi ovde označava odnos između izotopskog obilja i prirodnog obilja određenog izotopa. Ako je supstituent u jedinjenju ovog pronalaska označen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima izotopni faktor obogaćivanja za svaki određeni atom deuterijuma od najmanje 3500 (52,5% inkorporacije deuterijuma kod svakog određenog atoma deuterijuma), najmanje 4000 (60% inkorporacije deuterijuma), najmanje 4500 (67,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5000 (75% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5500 (82,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6000 (90% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6333,3 (95% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6466,7 (97% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6600 (99% inkorporacije deuterijuma) ili najmanje 6633,3 (99,5% inkorporacije deuterijuma).
[0335] Izotopski označena jedinjenja ovog pronalaska se generalno mogu pripremiti konvencionalnim tehnikama koje su dobro poznate u struci ili sprovođenjem postupaka otkrivenih u šemama ili primerima i preparatima opisanim u nastavku koristeći odgovarajući izotopski označeni reagens umesto neizotopski označenog reagensa.
[0336] Farmaceutski prihvatljivi solvati u skladu sa pronalaskom uključuju one u kojima rastvarač kristalizacije može biti izotopski supstituisan, npr. D2O, d6-aceton, d6-DMSO.
[0337] „Selektivni modulator IKZF2 “, „selektivni razgrađivač IKZF2“ ili „selektivno jedinjenje IKZF2“ može se identifikovati, na primer, upoređivanjem sposobnosti jedinjenja da modulira nivoe proteina IKZF2 sa njegovom sposobnošću da modulira nivoe drugih članova porodice proteina Ikaros ili drugih proteina. Na primer, supstanca se može analizirati na njenu sposobnost da modulira nivoe proteina IKZF2, kao i IKZF1, IKZF3, IKZF4, IKZF5 i drugih proteina. U nekim otelotvorenjima, selektivnost se može identifikovati merenjem EC50jedinjenja. U nekim otelotvorenjima, selektivni razgrađivač IKZF2 se identifikuje upoređivanjem sposobnosti jedinjenja da razgradi IKZF2 sa njegovom sposobnošću da razgradi druge članove porodice Ikaros proteina ili druge proteine.
E. Metode sinteze jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)
[0338] Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti napravljena primenom različitih metoda, uključujući standardnu hemiju. Odgovarajuće sintetičke rute su prikazane u šemama koje su date u nastavku.
[0339] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se dobiti postupcima poznatim u struci organske sinteze kao što je delimično navedeno u sledećim sintetičkim šemama. U dole opisanim šemama jasno je da se zaštitne grupe za osetljive ili reaktivne grupe koriste tamo gde je to neophodno u skladu sa opštim principima ili hemijom. Zaštitne grupe se manipulišu u skladu sa standardnim metodama organske sinteze (T.W. Greene and P.G.M. Wuts, „Protective Groups in Organic Synthesis“, Third edition, Wiley, New York 1999). Ove grupe se uklanjaju u pogodnoj fazi sinteze jedinjenja primenom metoda koje su dobro poznate u struci. Procesi selekcije, kao i reakcioni uslovi i redosled njihovog izvođenja, moraju biti u skladu sa pripremom jedinjenja Formule (I') ili Formule (I).
[0340] Stručne osobe će prepoznati da li stereocentar postoji u jedinjenjima ovog pronalaska. Shodno tome, ovaj pronalazak uključuje sve moguće stereoizomere (osim ako nije navedeno u sintezi) i uključuje ne samo racemska jedinjenja, već i pojedinačne enantiomere i/ili dijastereomere. Kada se želi jedinjenje kao jedan enantiomer ili dijastereomer, ono se može dobiti stereospecifičnom sintezom ili rezolucijom konačnog proizvoda ili bilo kog pogodnog intermedijera. Na rezoluciju konačnog proizvoda, intermedijera ili početnog materijala može uticati bilo koji pogodan metod poznat u struci. Videti, na primer, „Stereochemistry of Organic Compounds“, E.L. Eliel, S.H. Wilen, and L.N. Mander (Wiley-Interscience, 1994).
[0341] Ovde opisana jedinjenja mogu biti napravljena od komercijalno dostupnih početnih materijala ili sintetizovana korišćenjem poznatih organskih, neorganskih i/ili enzimskih procesa.
Priprema jedinjenja
[0342] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se dobiti na više načina koji su dobro poznati stručnjacima u oblasti organske sinteze. Kao primer, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se sintetizovati korišćenjem metoda koje su opisane u nastavku, zajedno sa metodama sinteze koje su poznate u struci sintetičke organske hemije, ili njihovim varijacijama na osnovu procene stručnjaka u oblasti. Preferirane metode uključuju, bez ograničenja, metode opisane u nastavku.
[0343] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se sintetizovati praćenjem koraka koji su navedeni u Opštim šemama I, II, III, IV i V koje predstavljaju različite sekvence dobijanja intermedijera I-a, I-b, I-c, I-d, I-e, I-f, II-a, II-b, II-c, III-a, III-b, IV-a, IV-b, IV-c, IV-d1, IV-d2, IV-e1, IV-e2, IV-f, V-a, V-b, V-c1, V-c2, V-d1 i V-d2. Početni materijali su ili komercijalno dostupni ili dobijeni poznatim postupcima u objavljenoj literaturi ili kao što je ilustrovano.
pri čemu su Rx, R2, R6', R7, X1, X2, m1 i n1 definisani u Formuli (I').
[0344] Opšti način dobijanja jedinjenja Formule (I') pri čemu je R1
, R4je - NR6R6'a R6je alkil supstituisan sa R7ili opciono supstituisan alkil primenom intermedijera I-a, I-b, I-c, I-d, I-e i I-f naveden je u Opštoj šemi I. Spajanje I-a sa 1,2-aminoalkoholom I-b pomoću katalizatora (npr. Ni(dimetoksietan)Cl2sa 4,4-di-terc-butil-2,2'-dipiridilom (dtbbpi)) i fotokatalizatorom (npr.4,4'-bis(1,1-dimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinil-N]fenil-C]iridijum(III)heksafluorofosfat (Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6)), baza (npr.2,2,6,6-tetrametilpiperidin (TMP), kvinuklidin ili kalijum karbonat (K2CO3)), i u rastvaraču (npr. acetonitril (MeCN)), pod zračenjem plavom LED svetlošću daje I-c. Kada je P zaštitna grupa (npr. terc-butiloksikarbonil (Boc) ili 2-(trimetilsilil)etoksimetil (SEM)), intermedijer I-c se uklanja upotrebom jake kiseline kao što je trifluorosirćetna kiselina (TFA), metansulfonska kiselina (MsOH) ili hlorovodonična kiselina (HCl) u rastvaraču (npr. tetrahidrofuran (THF), MeCN ili dihlorometan (DCM)) opciono na povišenoj temperaturi da bi se obezbedio I-d.
Reduktivna aminacija I-d sa aldehidom ili ketonom I-f daje jedinjenja Formule (I') pri čemu je R6supstituisani alkil. Alternativno, jedinjenja Formule (I') pri čemu je R6opciono supstituisani alkil mogu se dobiti alkilacijom I-d sa alikil halidom, tozilatom ili mezilatom I-e u prisustvu baze (npr. trietilamin (Et3N), N,N-diizopropiletilamin (i-Pr2NEt), cezijum karbonat (Cs2CO3), itd.), u rastvaraču (npr. MeCN, N,N-dimetilformamid (DMF), itd.), i opciono na povišenoj temperaturi.
pri čemu su Rx, R3, R6', R7, X1, X2, m, n i s definisani u Formuli (I').
[0345] Opšti način dobijanja jedinjenja Formule (I') pri čemu je R1
R4je - NR6R6'i R6je alkil supstituisan sa R7ili opciono supstituisani alkil pomoću intermedijera I-a, II-a, II-b, II-c, I-e i I-f istaknut je u Opštoj šemi II. Spajanje I-a sa 1,2-aminoalkoholom II-a korišćenjem katalizatora (npr. Ni(dimetoksietan)Cl2sa 4,4-di-tercbutil-2,2'-dipiridilom (dtbbpi)) i fotokatalizatora (npr.4,4'-bis(1,1-dimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinil-N]fenil -C]Iridijum(III) heksafluorofosfat(Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6)), baze (npr. TMP, kvinuklidin ili K2CO3), u rastvaraču (npr. MeCN), pod zračenjem plavog LED svetla daje II-b. Kada je P zaštitna grupa (npr. Boc ili SEM), intermedijeru II-b se uklanja zaštita upotrebom jake kiseline kao što su TFA, MsOH ili HCl i u rastvaraču (npr. THF, MeCN ili DCM) opciono pri povišenoj temperaturi da bi se dobio II-c. Reduktivna aminacija II-c aldehidom ili ketonom I-f daje jedinjenja Formule (I') u kojima je R6supstituisani alkil. Alternativno, jedinjenja Formule (I') pri čemu je R6opciono supstituisani alkil koji se može dobiti alkilacijom II-c sa alkil halidom, tozilatom ili mezilatom I-e u prisustvu baze (npr. Et3N, i-Pr2NEt, Cs2CO3, itd.), u rastvaraču (npr. MeCN, DMF, itd.) i opciono pri povišenoj temperaturi.
pri čemu su Rx, R2, R5, X1, X2, m1 i n1 kao što su definisani u Formuli (I').
[0346] Opšti način dobijanja jedinjenja Formule (I') pri čemu je R1
a R4je -OR5'korišćenjem intermedijera I-a, III-a i III-b istaknut je u Opštoj šemi III.
Spajanje I-a sa 1,2-diolima ili 1,2-etaralkoholima III-a korišćenjem katalizatora (npr.
Ni(dimetoksietan)Cl2sa 4,4-di-terc-butil-2,2'-dipiridil (dtbbpi)) i fotokatalizatora (npr.4,4'-bis(1,1-dimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinil-N]fenil-C]iridijum(III)heksafluorofosfat(Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi] PF6)), baze (npr. TMP, kvinuklidin ili K2CO3), u rastvaraču (npr. MeCN), pod zračenjem plavog LED svetla daje III-b. Kada je P zaštitna grupa (npr. SEM), intermedijeru III-b se uklanja zaštita korišćenjem jake kiseline kao što su TFA, MsOH ili HCl u rastvaraču (npr. THF, MeCN ili DCM) opciono pri povišenim temperaturama da bi se dobila željena jedinjenja Formule (I') pri čemu je R5H ili
supstituisani alkil.
Opšta šema IV
[0347]
pri čemu su Rx, R3, R6', R7, X1, X2, m, n i s definisani u Formuli (I').
[0348] Opšti način dobijanja jedinjenja Formule (I') pri čemu je R1
R4je - NR6R6'a R6je alkil supstituisan sa R7ili opciono supstituisani alkil korišćenjem intermedijera IV-a, IV-b, IV-c, IV-d1, IV-d2, IV-e1, IV-e2, IV-f, I-e i I-f istaknut je u Opštoj šemi IV. Spajanje IV-a sa 1,2-aminoalkoholom II-a korišćenjem katalizatora (npr. Ni(dimetoksietan)Cl2sa 4,4-di-terc-butil-2,2'-dipiridil (dtbbpi)) i fotokatalizatora (npr.4,4'-bis(1,1-dimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinyl-N]fenil-C]iridijum(III)heksafluorofosfat(Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi] PF6)), baze (npr. TMP, kvinuklidin ili K2CO3), u rastvaraču (npr. MeCN), pod zračenjem plavog LED svetla daje IV-b. Kada je P zaštitna grupa (npr. Boc), intermedijeru IV-b je uklanja zaštita korišćenjem jake kiseline kao što je TFA ili HCl u rastvaraču (npr. THF ili DCM), opciono pri povišenoj temperaturi daje IV-c. Reduktivna aminacija IV-c aldehidom ili ketonom I-f daje IV-d.
Alternativno, jedinjenja IV-d se mogu dobiti alkilacijom IV-c sa alkil halidom, tozilatom ili mezilatom I-e u prisustvu baze (npr. Et3N, i-Pr2NEt, Cs2CO3, itd.), u rastvaraču (npr. MeCN, DMF, itd.), i opciono pri povišenoj temperaturi. Intermedijer IV-d se zatim može konvertovati u korespondentni haloestarski intermedijer IV-e korišćenjem SOCl2u rastvaraču (npr. EtOH) pri povišenoj temperaturi. Ciklizacija IV-e sa 3-aminopiperidin-2,6-dionom IV-f (ili njegovom HCl ili CF3CO2H solju) sa bazom (npr. i-Pr2NEt) u rastvaraču (npr. DMF) pri povišenim temperaturama daje jedinjenja Formule (I'), pri čemu je R6supstituisani alkil.
pri čemu su Rx, R3, R6', R7, X1, X2, m, n i s definisani u Formuli (I').
[0349] Opšti način dobijanja jedinjenja Formule (I') pri čemu je R1
R4je - NR6R6', a R6je alkil supstituisan sa R7ili opciono supstituisani alkil, korišćenjem intermedijera IV-a, IV-f, V-a, V-b, V-c1, V-c2, V-d1, V-d2, I-b, I-e i I-f istaknut je u Opštoj šemi V. Spajanje IV-a sa 1,2-aminoalkoholom I-b korišćenjem katalizatora (npr.
Ni(dimetoksietan)Cl2sa 4,4-di-terc-butil-2,2'-dipiridil (dtbbpi)) i fotokatalizatora (npr.4,4'-bis(1,1-cimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinila-N]fenil-C]iridijum(III)heksafluorofosfat(Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi] PF6)), baze (npr. TMP, kvinuklidin ili K2CO3), u rastvaraču (npr. MeCN), pod zračenjem plavim LED svetlom daje V-a. Kada je zaštitna grupa P (npr. Boc), intermedijeru V-a se uklanja zaštita korišćenjem jake kiseline kao što su TFA ili HCl u rastvaraču (npr. THF ili DCM) i opciono pri povišenim temperaturama daje V-b. Reduktivna aminacija V-b aldehidom ili ketonom I-f daje V-c2. Vc1 se može dobiti alkilacijom V-b sa alkil halidom, tozilatom ili mezilatom I-e u prisustvu baze (npr. Et3N, i-Pr2NEt, Cs2CO3, itd.), u rastvaraču (npr. MeCN, DMF, itd.), i opciono pri povišenoj temperaturi. Intermedijeri V-c1 i V-c2 se zatim mogu konvertovati u korespondirajući haloestarski intermedijer V-d1 i Vd2 korišćenjem SOCl2u rastvaraču (npr. EtOH) i opciono pri povišenim temperaturama. Ciklizacija V-d1 ili Vd2 sa 3-aminopiperidin-2,6-dionom IV-f (ili njegovom HCl ili CF3CO2H solju) korišćenjem baze (npr. i-Pr2NEt) u rastvaraču (npr. DMF) i opciono pri povišenim temperaturama daje jedinjenja Formule (I') pri čemu je R6supstituisani alkil ili opciono supstituisani alkil.
[0350] Smeša enantiomera, dijastereomera i cis/trans izomera koji proizilaze iz gore opisanog procesa može se odvojiti u njihove pojedinačne komponente tehnikom hiralne soli, hromatografijom sa normalnom fazom, reverznom fazom ili hiralnim stubom, u zavisnosti od prirode separacije.
[0351] Bilo koji rezultujući racemati jedinjenja ovog pronalaska ili intermedijera mogu se razdvojiti u optičke antipode poznatim metodama, npr. odvajanjem njihovih dijastereomernih soli, dobijenih sa optički aktivnom kiselinom ili bazom, i oslobađanjem optički aktivnog kiselog ili baznog jedinjenja. Konkretno, bazni deo se stoga može koristiti za razdvajanje jedinjenja iz ovog pronalaska u njihove optičke antipode, npr. frakcionom kristalizacijom soli formirane sa optički aktivnom kiselinom, npr. vinskom kiselinom, dibenzoil vinskom kiselinom, diacetil vinskom kiselinom, di-O,O'-p-toluoil vinskom kiselinom, mandeličnom kiselinom, maličnom kiselinom ili kamfor-10-sulfonskom kiselinom. Racemska jedinjenja ovog pronalaska ili racemski intermedijeri mogu takođe da se razdvoje hiralnom hromatografijom, npr. tečnom hromatografijom visokog pritiska (HPLC) korišćenjem hiralnog adsorbenta.
[0352] Sve rezultujuće smeše stereoizomera mogu se razdvojiti na osnovu fizičko-hemijskih razlika sastojaka, na čiste ili suštinski čiste geometrijske ili optičke izomere, dijastereomere, racemate, na primer, hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom.
[0353] Jasno je da su u gore prikazanom opisu i formuli različite grupe Rx, R2, R3, R5, R6', R7, X1, X2, m, m1, n, n1 i s i druge promenljive određene kao što je gore definisano, osim ako nije drugačije naznačeno. Dalje, za potrebe sinteze, jedinjenja Opštih šema I, II, III, IV i V služe samo u reprezentativne svrhe sa izabranim radikalima kako bi ilustrovala opštu metodologiju sinteze jedinjenja Formule (I') kao što je ovde definisano.
E. Metode primene jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)
[0354] Drugi aspekt ovog otrkića odnosi se na jedinjenje Formule (I') ili Formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere ili sastav koji se sastoji od jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere za primenu u lečenju bolesti povezanih sa modulacijom nivoa proteina IKZF2.
[0355] U drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I') ili Formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere ili sastav koji sadrži jedinjenje Formule (I') ili Formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere, za primenu u lečenju karcinoma.
[0356] U jednom otelotvorenju, karcinom je IKZF2-zavisni karcinom.
[0357] U drugom otelotvorenju, karcinom je pod uticajem modulacije, redukcije ili smanjenja u nivoima proteina IKZF2.
[0358] U jednom otelotvorenju, karcinom je IKZF2-zavisna ili IKZF4-zavisna bolest ili poremećaj.
[0359] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se koristiti u lečenju karcinoma uključujući, bez ograničenja, liposarkom, neuroblastom, glioblastom, karcinom bešike, adrenokortikalni karcinom, multipli mijelom, kolorektalni karcinom, karcinom pluća nemalih ćelija, cervikalni, orofaringealni karcinom, karcinom penisa, analni karcinom, karcinom tiroidne žlezde ili vaginalni karcinom izazvan humanim papiloma virusom ili nazofaringealni karcinom, karcinom želuca, rektalni karcinom, karcinom tiroidne žlezde izazvan virusom Epstin-Bar, Hodžkinov limfom ili difuzni B krupnoćelijski limfom. U jednom otelotvorenju, karcinom se bira između karcinoma prostate, karcinoma dojke, limfoma, leukemija, mijeloma, karcinoma bešike, karcinoma debelog creva, kutanog melanoma, hepatocelularnog karcinoma, karcinoma endometrijuma, karcinoma jajnika, cervikalnog karcinoma, karcinoma pluća, karcinoma bubrega, glioblastoma multiforme, glioma, karcinoma tiroidne žlezde, karcinoma paratiroidne žlezde, nazofaringealnog karcinoma, karcinoma jezika, karcinoma pankreasa, karcinoma jednjaka, holangiokarcinoma, karcinoma želuca i sarkoma mekih tkiva izabranih između rabdomiosarkoma (RMS), sinovijalnog sarkoma, osteosarkoma, rabdoidnih karcinoma, karcinoma sa slabim imunološkim odgovorom, imunogenog karcinoma, Juingovog karcinoma, karcinoma pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanoma, trostruko negativnog karcinoma dojke (TNBC), nazofaringealnog karcinoma (NPC), mikrosatelitski stabilnog kolorektalnog karcinoma (mssCRC), timoma, karcinoida, akutne mijelogene leukemije i gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST).
[0360] U nekim otelotvorenjima, bolest ili oboljenje zavisno od IKZF2 je bolest ili poremećaj koji uključuje, bez ograničenja, liposarkom, neuroblastom, glioblastom, karcinom bešike, adrenokortikalni karcinom, multipli mijelom, kolorektalni karcinom, karcinom pluća nemalih ćelija, cervikalni, orofaringealni karcinom, karcinom penisa, analni karcinom, karcinom tiroidne žlezde ili vaginalni karcinom izazvan humanim papiloma virusom ili nazofaringealni karcinom, karcinom želuca, rektalni karcinom, karcinom tiroidne žlezde izazvan virusom Epstin-Bar, Hodžkinov limfom ili difuzni B krupnoćelijski limfom. U jednom otelotvorenju, karcinom se bira između karcinoma prostate, karcinoma dojke, limfoma, leukemija, mijeloma, karcinoma bešike, karcinoma debelog creva, kutanog melanoma, hepatocelularnog karcinoma, karcinoma endometrijuma, karcinoma jajnika, cervikalnog karcinoma, karcinoma pluća, karcinoma bubrega, glioblastoma multiforme, glioma, karcinoma tiroidne žlezde, karcinoma paratiroidne žlezde, nazofaringealnog karcinoma, karcinoma jezika, karcinoma pankreasa, karcinoma jednjaka, holangiokarcinoma, karcinoma želuca i sarkoma mekih tkiva izabranih između rabdomiosarkoma (RMS), sinovijalnog sarkoma, osteosarkoma, rabdoidnih karcinoma, karcinoma sa slabim imunološkim odgovorom, imunogenog karcinoma, Juingovog karcinoma, karcinoma pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanoma, trostruko negativnog karcinoma dojke (TNBC), nazofaringealnog karcinoma (NPC), mikrosatelitski stabilnog kolorektalnog karcinoma (mssCRC), timoma, karcinoida, akutne mijelogene leukemije i gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST).
[0361] U nekim otelotvorenjima, bolest ili oboljenje na koje utiču modulacija, redukcija ili smanjenje nivoa proteina IKZF2 i/ili IKZF4 je bolest ili poremećaj koji uključuje, bez ograničenja, liposarkom, neuroblastom, glioblastom, karcinom bešike, adrenokortikalni karcinom, multipli mijelom, kolorektalni karcinom, karcinom pluća nemalih ćelija, cervikalni, orofaringealni karcinom, karcinom penisa, analni karcinom, karcinom tiroidne žlezde ili vaginalni karcinom izazvan humanim papiloma virusom ili nazofaringealni karcinom, karcinom želuca, rektalni karcinom, karcinom tiroidne žlezde izazvan virusom Epstin-Bar, Hodžkinov limfom ili difuzni B krupnoćelijski limfom. U jednom otelotvorenju, karcinom se bira između karcinoma prostate, karcinoma dojke, limfoma, leukemija, mijeloma, karcinoma bešike, karcinoma debelog creva, kutanog melanoma, hepatocelularnog karcinoma, karcinoma endometrijuma, karcinoma jajnika, cervikalnog karcinoma, karcinoma pluća, karcinoma bubrega, glioblastoma multiforme, glioma, karcinoma tiroidne žlezde, karcinoma paratiroidne žlezde, nazofaringealnog karcinoma, karcinoma jezika, karcinoma pankreasa, karcinoma jednjaka, holangiokarcinoma, karcinoma želuca i sarkoma mekih tkiva izabranih između rabdomiosarkoma (RMS), sinovijalnog sarkoma, osteosarkoma, rabdoidnih karcinoma, karcinoma sa slabim imunološkim odgovorom, imunogenog karcinoma, Juingovog karcinoma, karcinoma pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanoma, trostruko negativnog karcinoma dojke (TNBC), nazofaringealnog karcinoma (NPC), mikrosatelitski stabilnog kolorektalnog karcinoma (mssCRC), timoma, karcinoida, akutne mijelogene leukemije i gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST).
[0362] U nekim otelotvorenjima, karcinomi koji zavise od IKZF2 ili karcinomi koji zavise od IKZF2 i IKZF4, obuhvataju liposarkom, neuroblastom, glioblastom, karcinom bešike, adrenokortikalni karcinom, multipli mijelom, kolorektalni karcinom, karcinom pluća nemalih ćelija, cervikalni, orofaringealni karcinom, karcinom penisa, analni karcinom, karcinom tiroidne žlezde ili vaginalni karcinom izazvan humanim papiloma virusom ili nazofaringealni karcinom, karcinom želuca, rektalni karcinom, karcinom tiroidne žlezde izazvan virusom Epstin-Bar, Hodžkinov limfom ili difuzni B krupnoćelijski limfom. U jednom otelotvorenju, karcinom se bira između karcinoma prostate, karcinoma dojke, limfoma, leukemija, mijeloma, karcinoma bešike, karcinoma debelog creva, kutanog melanoma, hepatocelularnog karcinoma, karcinoma endometrijuma, karcinoma jajnika, cervikalnog karcinoma, karcinoma pluća, karcinoma bubrega, glioblastoma multiforme, glioma, karcinoma tiroidne žlezde, karcinoma paratiroidne žlezde, nazofaringealnog karcinoma, karcinoma jezika, karcinoma pankreasa, karcinoma jednjaka, holangiokarcinoma, karcinoma želuca i sarkoma mekih tkiva izabranih između rabdomiosarkoma (RMS), sinovijalnog sarkoma, osteosarkoma, rabdoidnih karcinoma, karcinoma sa slabim imunološkim odgovorom, imunogenog karcinoma, Juingovog karcinoma, karcinoma pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanoma, trostruko negativnog karcinoma dojke (TNBC), nazofaringealnog karcinoma (NPC), mikrosatelitski stabilnog kolorektalnog karcinoma (mssCRC), timoma, karcinoida, akutne mijelogene leukemije i gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST).
[0363] Jedna terapijska primena jedinjenja ili sastava iz ovog pronalaska koji moduliraju nivoe proteina IKZF2 i/ili IKZF4 razgradnjom IKZF2 i/ili IKZF4, jeste da se obezbedi lečenje pacijentima ili subjektima koji pate od karcinoma i metastaza.
[0364] Otkrivena jedinjenja pronalaska mogu se davati u efektivnim količinama za lečenje ili prevenciju poremećaja i/ili sprečavanje njihovog razvoja kod subjekata.
[0365] Jedinjenja izuma mogu se primenjivati u terapijski efikasnim količinama u kombinovanoj terapiji sa jednim ili više terapijskih sredstava (farmaceutske kombinacije) ili modaliteta, npr. nemedikamentozna terapija. Na primer, sinergijski efekti se mogu javiti sa drugim anti-proliferativnim, antikancerogenim, imunomodulatornim ili antiinflamatornim supstancama. Tamo gde se jedinjenja pronalaska primenjuju u kombinaciji sa drugim terapijama, doze jedinjenja koja se istovremeno primenjuju će se naravno razlikovati u zavisnosti od vrste primenjenog ko-leka, specifičnog leka koji se koristi, stanja koje se leči i tako dalje.
[0366] Kombinovana terapija uključuje primenu predmetnih jedinjenja u daljoj kombinaciji sa drugim biološki aktivnim sastojcima (kao što je, bez ograničenja, drugo i drugačije antineoplastično sredstvo ili drugo sredstvo koje targetira Helios ili drugi targetirani karcinom) i nemedikamentozne terapije (kao što su, bez ograničenja, operacije ili zračenje). Na primer, jedinjenja pronalaska se mogu koristiti u kombinaciji sa drugim farmaceutski aktivnim jedinjenjima, a poželjno sa jedinjenjima koja su u stanju da poboljšaju efekat jedinjenja pronalaska. Jedinjenja pronalaska mogu se primenjivati istovremeno (kao pojedinačni preparat ili posebni preparat) ili sekvencijalno sa drugom terapijom medikamentima ili modalitetom lečenja. U načelu, kombinovana terapija predviđa primenu dva ili više medikamenta tokom jednog ciklusa ili kure lečenja.
G. Primena, farmaceutski sastavi i doziranje jedinjenja Formule (I') ili Formule (I)
[0367] Primena otkrivenih jedinjenja može se postići bilo kojim načinom primene terapijskih sredstava. Ovi režimi uključuju sistemsku ili lokalnu primenu kao što su oralni, nazalni, parenteralni, transdermalni, potkožni, vaginalni, bukalni, rektalni ili topikalni režimi primene.
[0368] U zavisnosti od predviđenog načina primene, otkriveni sastavi mogu biti u čvrstom, polučvrstom ili tečnom obliku doziranja, kao što su, na primer, injekcije, tablete, supozitorije, pilule, kapsule sa vremenskim oslobađanjem, eliksiri, tinkture, emulzije, sirupi, prahovi, tečnosti, suspenzije ili slično, ponekad u jediničnim dozama i u skladu sa konvencionalnim farmaceutskim praksama. Na sličan način, oni se takođe mogu davati u intravenskom (i bolus i infuzija), intraperitonealnom, subkutanom ili intramuskularnom obliku, i u svim drugim oblicima primene koji su dobro poznati u farmaciji.
[0369] Ilustrativni farmaceutski sastavi su tablete i želatinske kapsule koje se sastoje od jedinjenja pronalaska i farmaceutski prihvatljivog nosača, kao što su a) razređivač, npr., prečišćena voda, trigliceridna ulja, kao što je hidrogenizovano ili delimično hidrogenizovano biljno ulje, ili njihove mešavine, kom ulje, maslinovo ulje, suncokretovo ulje, šafranovo ulje, riblje ulje, kao što su EPA ili DHA, ili njihovi estri ili trigliceridi ili njihove smeše, omega-3 masne kiseline ili njihovi derivati, laktoza, dekstroza, saharoza, manitol, sorbitol, celuloza, natrijum, saharin, glukoza i/ili glicin; b) lubrikant, npr. silicijum dioksid, talk, stearinska kiselina, njena magnezijumova ili kalcijumova so, natrijum oleat, natrijum stearat, magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid i/ili polietilen glikol; u slučaju tableta takođe; c) vezivo, npr. magnezijum aluminijum silikat, skrobna pasta, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, magnezijum karbonat, prirodni šećeri kao što su glukoza ili beta-laktoza, kukuruzni zaslađivači, prirodne i sintetičke gume kao što su akacija, tragakant ili natrijum alginat, voskovi i/ili polivinilpirolidon, po želji; d) dezintegrant, npr. skrob, agar, metil celuloza, bentonit, ksantan guma, algična kiselina ili njena natrijumova so, ili šumeće smeše; e) upijajuće sredstvo, boja, aroma i zaslađivač; f) emulgator ili disperzioni agens, kao što je Tween 80, Labrasol, HPMC, DOSS, kaproil 909, labrafak, labrafil, peceol, transkutol, kapmul MCM, kapmul PG-12, kapteks 355, gelucir, vitamin E TGPS ili drugi prihvatljivi emulgator; i/ili g) sredstvo koje poboljšava apsorpciju jedinjenja kao što je ciklodekstrin, hidroksipropil-ciklodekstrin, PEG400, PEG200.
[0370] Tečni, posebno injekcioni, sastavi se mogu, na primer, pripremiti rastvaranjem, disperzijom itd. Na primer, otkriveno jedinjenje se rastvara ili meša sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračem, kao što su, na primer, voda, fiziološki rastvor, vodena dekstroza, glicerol, etanol i slično, čime se formira izotonični rastvor ili suspenzija za ubrizgavanje. Proteini kao što su albumin, hilomikronske čestice ili serumski proteini mogu se koristiti za rastvaranje otkrivenih jedinjenja.
[0371] Otkrivena jedinjenja se takođe mogu formulisati kao supozitorija koja se može pripremiti od masnih emulzija ili suspenzija; korišćenjem polialkilen glikola kao što je propilen glikol, kao nosača.
[0372] Otkrivena jedinjenja se takođe mogu primenjivati u obliku lipozomalnih preparata, kao što su male unilamelarne vezikule, velike unilamelarne vezikule i multilamelarne vezikule. Lipozomi se mogu formirati od različitih fosfolipida koji sadrže holesterol, stearilamin ili fosfatidilholine.
[0373] U nekim otelotvorenjima, film lipidnih komponenti se hidrira vodenim rastvorom leka da bi se formirao lipidni sloj koji inkapsulira lek, kao što je opisano u američkom patentu br.
5,262,564.
[0374] Otkrivena jedinjenja se takođe mogu isporučiti upotrebom monoklonskih antitela kao pojedinačnih nosača na koje su otkrivena jedinjenja spojena. Otkrivena jedinjenja takođe mogu biti spojena sa rastvorljivim polimerima kao nosači leka koji se mogu targetirati. Takvi polimeri mogu uključivati polivinilpirolidon, piranski kopolimer, polihidroksipropilmetakrilamid-fenol, polihidroksietilaspanamidfenol ili polietilenoksidpolilizin supstituisan sa palmitoil ostacima. Štaviše, otkrivena jedinjenja mogu biti spojena sa klasom biorazgradivih polimera što je korisno za postizanje kontrolisanog oslobađanja leka, na primer, sa polilaktičnom kiselinom, poliepsilon kaprolaktonom, polihidroksi butirnom kiselinom, poliortoestrima, poliacetalima, polidihidropiranima, policijanoakrilatima i unakrsno spojenim ili amfipatskim blok kopolimerima hidrogelova. U jednom otelotvorenju, otkrivena jedinjenja nisu kovalentno vezana za polimer, npr. polimer polikarboksilne kiseline ili poliakrilat.
[0375] Matična injekciona administracija se generalno koristi za subkutane, intramuskularne ili intravenske injekcije i infuzije. Injekcije se mogu pripremiti u konvencionalnim oblicima, bilo kao tečni rastvori ili suspenzije ili čvrsti oblici pogodni za rastvaranje u tečnosti pre injekcije.
[0376] Drugi aspekt pronalaska je usmeren na farmaceutske sastave koji se sastoje od jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) i farmaceutski prihvatljivog nosača. Farmaceutski prihvatljiv nosač može dalje uključivati ekscipijens, razblaživač ili surfaktant.
[0377] Sastavi se mogu pripremiti konvencionalnim metodama mešanja, granulacije ili premazivanja, respektivno, a sadašnji farmaceutski sastavi mogu sadržati od oko 0,1% do oko 99%, od oko 5% do oko 90%, ili od oko 1% do oko 20% otkrivenog jedinjenja po težini ili zapremini.
[0378] U jednom otelotvorenju, otkriće pruža komplet koji se sastoji od dva ili više odvojenih farmaceutskih sastava, od kojih najmanje jedan sadrži jedinjenje ovog pronalaska. U jednom otelotvorenju, komplet se sastoji od sredstava za odvojeno zadržavanje navedenih sastava, kao što su posuda, podeljena boca ili podeljena folija. Primer takvog kompleta je blister pakovanje, koje se obično koristi za pakovanje tableta, kapsula i slično.
[0379] Komplet otkrića može se koristiti za administriranje različitih oblika doziranja, na primer, oralnih i parenteralnih, za administriranje odvojenih sastava u različitim intervalima doziranja ili za međusobnu titraciju odvojenih sastava. Da bi se pomoglo usklađivanju, komplet iz ovog otkrića obično sadrži uputstva za primenu.
[0380] Režim doziranja koji koristi otkriveno jedinjenje bira se u skladu sa različitim faktorima, uključujući tip, vrstu, starost, težinu, pol i zdravstveno stanje pacijenta; ozbiljnost stanja koje se leči; način primene; bubrežnu ili jetrenu funkciju pacijenta; i posebno otkriveno jedinjenje koje se koristi. Lekar ili veterinar adekvatnog nivoa stručnosti može lako odrediti i propisati efektivnu količinu leka potrebnu za sprečavanje, suzbijanje ili zaustavljanje progresije oboljenja.
[0381] Efikasne doze otkrivenih jedinjenja, kada se koriste za postizanje naznačenih efekata, kreću se od oko 0,5 mg do oko 5000 mg otkrivenog jedinjenja po potrebi za lečenje određenog stanja. Sastavi za in vivo ili in vitro primenu mogu sadržati oko 0,5; 5; 20; 50; 75; 100; 150; 250; 500; 750; 1000; 1250; 2500; 3500 ili 5000 mg otkrivenog jedinjenja, ili opseg od jedne do druge veličine doze sa spiska mogućih doza. U jednom otelotvorenju, sastavi su u obliku tablete koja se može podeliti.
H. Kombinovana terapija
[0382] Jedinjenja izuma mogu se primenjivati u terapijski efikasnim količinama u kombinovanoj terapiji sa jednim ili više terapijskih sredstava (farmaceutske kombinacije) ili modaliteta, npr. nemedikamentozna terapija. Na primer, mogu se javiti sinergijski efekti sa drugim agensima protiv karcinoma. Tamo gde se jedinjenja iz patentnog zahteva primenjuju u kombinaciji sa drugim terapijama, doze jedinjenja koja se istovremeno primenjuju će se naravno razlikovati u zavisnosti od vrste primenjenog ko-leka, specifičnog leka koji se koristi, stanja koje se leči i tako dalje.
[0383] Jedinjenja se mogu primenjivati istovremeno (kao pojedinačni preparat ili odvojeni preparat), sekvencijalno, odvojeno ili tokom određenog vremenskog perioda u odnosu na drugu terapiju lekovima ili modalitet lečenja. U načelu, kombinovana terapija predviđa primenu dva ili više medikamenta tokom jednog ciklusa ili kure lečenja. Terapijsko sredstvo je, na primer, hemijsko jedinjenje, peptid, antitelo, fragment antitela ili nukleinska kiselina, koja je terapijski aktivna ili poboljšava terapijsku aktivnost kada se primenjuje kod pacijenta u kombinaciji sa jedinjenjem iz ovog pronalaska.
[0384] U jednom aspektu, jedinjenje Formule (I') ili Formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, može se kombinovati sa drugim terapijskim agensima, kao što su druga sredstva protiv karcinoma, antialergijska sredstva, sredstva protiv mučnine (ili antiemetici), sredstva za ublažavanje bola, citoprotektivna sredstva i njihove kombinacije.
[0385] U nekim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, primenjuju se u kombinaciji sa jednim ili više drugih agenasa izabranih između PD-1 inhibitora, PD-L1 inhibitora, LAG-3 inhibitora, citokina, A2A antagonista, GITR agonista, TIM-3 inhibitora, STING agonista i TLR7 agonista, za lečenje bolesti, npr. karcinoma.
[0386] U drugom otelotvorenju, jedan ili više hemoterapijskih agenasa se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovom farmaceutski prihvatljivom solju, hidratom, solvatom, stereoizomerom ili tautomerom, za lečenje bolesti, npr. karcinoma, pri čemu navedeni hemoterapijski agensi uključuju, bez ograničenja, anastrozol (Arimidex<®>), bikalutamid (Casodex<®>), bleomicin sulfat (Blenoxane<®>), busulfan (Myleran<®>), injekciju busulfana (Busulfex<®>), kapecitabin (Xeloda<®>), N4-pentoksikarbonil-5-deoksi-5-fluorocitidin, karboplatin (Paraplatin<®>), karmustin (BiCNU<®>), hlorambucil (Leukeran<®>), cisplatin (Platinol<®>), kladribin (Leustatin<®>), ciklofosfamid (Cytoxan<®>ili Neosar<®>), citarabin, citozin arabinozid (Cytosar-U<®>), injekcija liposoma citarabina (DepoCyt<®>), dakarbazin (DTIC-Dome<®>), daktinomicin (Actinomycin D, Cosmegan), daunorubicin hidrohlorid (Cerubidine<®>), injekcija liposoma citrata daunorubicina (DaunoXome<®>), deksametazon, docetaksel (Taxotere<®>), doksorubicin hidrohlorid (Adriamycin<®>, Rubex<®>), etopozid (Vepesid<®>), fludarabin fosfat (Fludara<®>), 5-fluorouracil (Adrucil<®>, Efudex<®>), flutamid (Eulexin<®>), tezacitibin, gemcitabin (difluorodeoxycitidine), hidroksiureja (Hydrea<®>), idarubicin (Idamycin<®>), ifosfamid (IFEX<®>), irinotekan (Camptosar<®>), L-asparaginaza (ELSPAR<®>), leukovorin kalcijum, melfalan (Alkeran<®>), 6-merkaptopurin (Purinethol<®>), metotreksat (Folex<®>), mitoksantron (Novantrone<®>), milotarg, paklitaksel (Taxol<®>), feniks (Yttrium90/MX-DTPA), pentostatin, polifeprosan 20 sa karmustin implantom (Gliadel<®>), tamoksifen citrat (Nolvadex<®>), tenipozid (Vumon<®>), 6-tioguanin, tiotepa, tirapazamin (Tirazone<®>), topotekan hidrohlorid za injekcije (Hycamptin<®>), vinblastin (Velban<®>), vinkristin (Oncovin<®>), vinorelbin (Navelbine<®>), epirubicin (Ellence<®>), oksaliplatin (Eloxatin<®>), eksemestan (Aromasin<®>), letrozol (Femara<®>), i fulvestrant (Faslodex<®>).
[0387] U drugim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više drugih anti-HER2 antitela, npr. trastuzumabom, pertuzumabom, margetuksimabom ili HT-19 opisanim gore, ili sa drugim anti-HER2 konjugatima, npr. ado-trastuzumab emtanzinom (takođe poznatim kao Kadcyla<®>ili T-DM1).
[0388] U drugim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora tirozin kinaze, uključujući, bez ograničenja, inhibitore eGFR, inhibitore Her3, inhibitore IGFR i inhibitore Met, za lečenje bolesti, npr. karcinoma.
[0389] Na primer, inhibitori tirozin kinaze uključuju, bez ograničenja, erlotinib hidrohlorid (Tarceva<®>); linifanib (N-[4-(3-amino-1H-indazol-4-il)fenil]-N'-(2-fluoro-5-metilfenil)ureu, takođe poznatu kao ABT 869, dostupnu kod Genentech); sunitinib malat (Sutent<®>); bosutinib (4-[(2,4-dihloro-5-metoksifenil)amino]-6-metoksi-7-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propoksi]kinolin-3-karbonitril, takođe poznat kao SKI-606 i opisan u američkom patentu br.
6.780.996); dasatinib (Sprycel<®>); pazopanib (Votrient<®>); sorafenib (Nexavar<®>); Zactima (ZD6474); i imatinib ili imatinib mezilat (Gilvec<®>i Gleevec<®>).
[0390] Inhibitori receptora epidermalnog faktora rasta (eGFR) uključuju, bez ograničenja, erlotinib hidrohlorid (Tarceva<®>), gefitinib (Iressa<®>); N-[4- [(3-hloro-4-fluorofenil)amino]-7-[[(3"S") -tetrahidro-3-furanil] oksi]-6-kinazolinil]-4 (dimetilamino)-2-butenamid, Tovok<®>); vandetanib (Caprelsa<®>); lapatinib (Tykerb<®>); (3R,4R)-4-amino-1-((4-((3-metoksifenil)amino)pirolo[2,1-fJ[1,2,4]triazin-5-il)metil)piperidin-3- ol (BMS690514); kanertinib dihidrohlorid (CI-1033); 6-[4-[(4-etil-1-piperazinil)metil]fenil]-N-[(1R)-1-feniletil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin (AEE788, CAS 497839-62-0); mubritinib (TAK165); pelitinib (EKB569); afatinib (Gilotrif<®>); neratinib (HKI-272); N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]-1H-indazol-5-il]amino]-5-metilpirolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-6- il]-karbaminska kiselina, (3S)-3-morfolinilmetil estar (BMS599626); N-(3,4-dihloro-2-fluorofenil)-6-metoksi-7-[[(3aa,5p,6aa)-oktahidro-2-metilciklopenta[c]pirol-5-il]metoksi]-4-kinazolinamin (XSL647, CAS 781613-23-8); i 4-[4-[[(1R)-1-feniletil]amino]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-6-il]-fenol (PKI166, CAS187724-61-4).
[0391] EGFR antitela uključuju, bez ograničenja, cetuksimab (Erbitux<®>); panitumumab (Vectibix<®>); matuzumab (EMD-72000); nimotuzumab (hR3); zalutumumab; TheraCIM h-R3; MDX0447 (CAS 339151-96-1); i ch806 (mAb-806, CAS 946414-09-1).
[0392] Drugi HER2 inhibitori uključuju, bez ograničenja, neratinib (HKI-272, (2E)-N-[4-[[3-hloro-4-[(piridin-2-il)metoksi]fenil]amino]-3-cijano-7-etoksikinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamid, i opisanu PCT publikaciju br. WO 05/028443); lapatinib ili lapatinib ditozilat (Tykerb<®>); (3R,4R)-4-amino-1-((4-((3-metoksifenil)amino)pirolo[2,1f][1,2,4]triazin-5-il)metil)piperidin-3-ol (BMS690514); (2E)-N-[4-[(3-hloro-4-fluorofenil)amino]-7-[[(3S)-tetrahidro-3-furanil]oksi]-6-hinazolinil]-4-(dimetilamino)-2-butenamid (BIBW-2992, CAS 850140-72-6); N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]-1H-indazol-5-il]amino]-5-metilpirolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- il]-karbaminska kiselina, (3S)-3-morfolinilmetil estar (BMS 599626, CAS 714971-09-2); kanertinib dihidrohlorid (PD183805 ili CI-1033); i N-(3,4-dihloro-2-fluorofenil)-6-metoksi-7-[[(3aa,5p,6aa)-oktahidro-2-metilciklopenta[c]pirol-5-il]metoksi]-4-kinazolinamin (XSL647, CAS 781613-23-8).
[0393] Inhibitori HER3 uključuju, bez ograničenja, LJM716, MM-121, AMG-888, RG7116, REGN-1400, AV-203, MP-RM-1, MM-111 i MEHD-7945A.
[0394] MET inhibitori uključuju, bez ograničenja, kabozanitib (XL184, CAS 849217-68-1); foretinib (GSK1363089, prethodno XL880, CAS 849217-64-7); tivantinib (ARQ197, CAS 1000873-98-2); 1-(2-hidroksi-2-metilpropil)-N-(5-(7-metoksikinolin-4-iloksi)piridin-2-il)-5-metil-3-okso-2-fenil-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-karboksamid (AMG 458); krizotinib (Xalkori<®>, PF-02341066); (3Z)-5-(2,3-dihidro-1H-indol-1-ilsulfonil)-3-({3,5-dimetil-4-[(4-metilpiperazin-1-il)karbonil]-1H-pirol -2-il}metilen)-1,3-dihidro-2H-indol-2-on (SU11271); (3Z)-N-(3-hlorofenil)-3-({3,5-dimetil-4-[(4-metilpiperazin-1-il)karbonil]-1H-pirol-2-il}metilen)-N- metil-2-oksoindolin-5-sulfonamid (SU11274); (3Z)-N-(3-hlorofenil)-3-{[3,5-dimetil-4-(3-morfolin-4-ilpropil)-1H-pirol-2-il]metilen}-N-metil-2 -oksoindolin-5-sulfonamid (SU11606); 6-[difluoro[6-(1-metil-1Hpirazol-4-il)-1,2,4-triazolo[4,3-b]piridazin-3-il]metil]-kinolin (JNJ38877605, CAS 943540-75 -8); 2-[4-[1-(kinolin-6-ilmetil)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pirazin-6-il]-1H-pirazol-1-il]etanol (PF04217903, CAS 956905-27-4); N-((2R)-1,4-dioksan-2-ilmetil)-N-metil-N'-[3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5-okso-5H-benzo[ 4,5]ciklohepta[1,2-b]piridin-7-il]sulfamid (MK2461, CAS 917879-39-1); 6-[[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1,2,4-triazolo[4,3-b]piridazin 3-il]tio]-kinolin (SGX523, CAS 1022150-57 -7); i (3Z)-5-[[(2,6-dihlorofenil)metil]sulfonil]-3-[[3,5-dimetil-4-[[(2R)-2-(1-ppirolidinilmetil)-1-pirolidinil]karbonil]-1H-pirol-2-il]metilen]-1,3-dihidro-2H-indol-2-on (PHA665752, CAS 477575-56-7).
[0395] Inhibitori IGFR uključuju, bez ograničenja, BMS-754807, XL-228, OSI-906, GSK0904529A, A-928605, AXL1717, KW-2450, MK0646, AMG479, IMCA12, MEDI-573 i BI836845. Vidi npr. Yee, JNCI, 104; 975 (2012) za pregled.
[0396] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I) ovog pronalaska se koriste u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora signalnog puta proliferacije, uključujući, bez ograničenja, MEK inhibitore, BRAF inhibitore, PI3K/Akt inhibitore, SHP2 inhibitore, kao i mTOR inhibitore i CDK inhibitore, za lečenje bolesti, npr. karcinoma.
[0397] Na primer, inhibitori mitogen-aktivirane proteinske kinaze (MEK) uključuju, bez ograničenja, XL-518 (takođe poznat kao GDC-0973, CAS br.1029872-29-4, dostupan kod ACC Corp.); 2-[(2-hloro-4-jodofenil)amino]-N-(ciklopropilmetoksi)-3,4-difluoro-benzamid (takođe poznat kao CI-1040 ili PD184352 i opisan u PCT publikaciji br. WO2000035436); N-[(2R)-2,3-dihidroksipropoksi]-3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-jodofenil)amino]- benzamid (takođe poznat kao PD0325901 i opisan u PCT publikaciji br. WO2002006213); 2,3-Bis[amino[(2-aminofenil)tio]metilen]-butan dinitril (takođe poznat kao U0126 i opisan u američkom patentu br.2.779.780); N-[3,4-difluoro-2- [(2-fluoro-4-jodofenil)amino]-6-metoksifenil]-1-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-ciklopropan sulfonamid (takođe poznat kao RDEA119 ili BAY869766 i opisan u PCT publikaciji br. WO2007014011);
(3S,4R,SZ,8S,9S,11E)-14-(etilamino)-8,9,16-trihidroksi-3,4-dimetil-3,4,9,19-tetrahidro-1H-2-benzoksaciklotetradecin- 1,7(8H)-dion] (takođe poznat kao E6201 i opisan u PCT publikaciji br. WO2003076424); 2'-Amino-3'-metoksiflavon (poznat i kao PD98059 dostupan kod Biaffin GmbH & Co., KG, Nemačka); vemurafenib (PLX-4032, CAS 918504-65-1); (R)-3-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-5-(2-fluoro-4-jodofenilamino)-8-metilpirido[2,3-d]pirimidin-4,7(3H ,8H)-dion (TAK-733, CAS 1035555-63-5); pimasertib (AS-703026, CAS 1204531-26-9); i trametinib dimetil sulfoksid (GSK-1120212, CAS 1204531-25-80).
[0398] BRAF inhibitori uključuju, bez ograničenja, vemurafenib (ili Zelboraf<®>), GDC-0879, PLX-4720 (dostupno kod Symansis), dabrafenib (ili GSK2118436), LGX 818, CEP-32496, UI-152, Raf 265, regorafenib (BAY 73-4506), CCT239065 ili sorafenib (ili sorafenib tosilat ili Nexavar<®>) ili ipilimumab (ili MDX-010, MDX-101 ili Yervoy).
[0399] Inhibitori fosfoinozitida 3-kinaze (PI3K) uključuju, bez ograničenja, 4-[2-(1H-Indazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)piperazin-1-il]metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-il]morfolin (poznat i kao GDC0941, RG7321, GNE0941, piktrelisib ili piktilisib; i opisan u PCT publikaciji br. WO 09/036082 i WO 09/055730); tozasertib (VX680 ili MK-0457, CAS 639089-54-6); (5Z)-5-[[4-(4-piridinil)-6-hinolinil]metilen]-2,4-tiazolidindion (GSK1059615, CAS 958852-01-2); (1E,4S,4aR,5R,6aS,9aR)-5-(acetiloksi)-1-[(di-2-propenilamino)metilen]4,4a,5,6,6a,8,9,9a-oktahidro-11-hidroksi-4-(metoksimetil)-4a,6adimetilciklopenta[5,6]nafto[1,2-c]piran-2,7,10(1H)-trion (PX866, CAS 502632-66-8); 8-fenil-2-(morfolin-4-il)-hromen-4-on (LY294002, CAS 154447-36-6); (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirolidin-1,2-dikarboksamid (takođe poznat kao BYL719 ili alpelisib); 2-(4-(2-(1-izopropil-3-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)-5,6-dihidrobenzo[f]imidazo[1,2-d][1,4]oksazepin-9-il)-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropanamid (takođe poznat kao GDC0032, RG7604 ili taselisib).
[0400] Inhibitori mTOR uključuju, bez ograničenja, temsirolimus (Torisel<®>); ridaforolimus (prethodno poznat kao deferolimus, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2 [(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroksi-19,30-dimetoksi-15,17,21,23,29,35-heksametil-2,3,10,14,20-pentaokso-11,36-dioksa-4-azatriciklo [30.3.1.04,9] heksatriakonta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoksicikloheksil dimetilfosfinat, takođe poznat kao AP23573 i MK8669 i opisan u PCT publikaciji br. WO 03/064383); everolimus (Afinitor<®>ili RAD001); rapamicin (AY22989, Sirolimus<®>); simapimod (CAS 164301-51-3); (5-{2,4-bis[(3S)-3-metilmorfolin-4-il]pirido[2,3-d]pirimidin-7-il}-2-metoksifenil)metanol (AZD8055); 2-amino-8-[trans-4-(2-hidroksietoksi)cikloheksil]-6-(6-metoksi-3-piridinil) -4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-on (PF04691502, CAS 1013101-36-4) i N<2>-[1,4-diokso-4-[[4-(4-okso-8-fenil-4H-1-benzopiran-2-il)morfolinijum-4-il]metoksi]butil]-L-arginilglicil- L-□-aspartilL-serin-, unutrašnja so (SF1126, CAS 936487-67-1).
[0401] CDK inhibitori uključuju, bez ograničenja, palbociklib (takođe poznat kao PD-0332991, Ibrance<®>, 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2-{[5-(1-piperazinil)-2-piridinil]amino}pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-on).
[0402] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više pro-apoptotika, uključujući, bez ograničenja, IAP inhibitore, BCL2 inhibitore, MCL1 inhibitore, TRAIL agense, CHK inhibitore, za lečenje bolesti, npr. karcinoma.
[0403] Na primer, inhibitori IAP uključuju, bez ograničenja, LCL161, GDC-0917, AEG-35156, AT406 i TL32711. Drugi primeri inhibitora IAP uključuju, bez ograničenja, one koji su obelodanjeni u WO04/005284, WO 04/007529, WO05/097791, WO 05/069894, WO 05/069888, WO 05/094818, US2006/0014700, US2006/0025347, WO 06/069063, WO 06/010118, WO 06/017295 i WO08/134679.
[0404] Inhibitori BCL-2 uključuju, bez ograničenja, 4-[4-[[2-(4-hlorofenil) -5,5-dimetil-1-cikloheksen-1-il]metil]-1-piperazinil]-N-[[4-[[(1R)-3-(4-morfolinil)-1-[(feniltio)metil]propil]amino]-3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil]sulfonil]benzamid (takođe poznat kao ABT-263 i opisan u PCT publikaciji br. WO 09/155386); tetrokarcin A; antimicin; gosipol ((-)BL-193); obatoklaks; etil-2-amino-6-ciklopentil-4-(1-cijano-2-etoksi-2-oksoetil)-4Hhromon-3-karboksilat (HA14 -1); oblimersen (G3139, Genasense<®>); Bak BH3 peptid; (-)-gosipol sirćetnu kiselinu (AT-101); 4-[4-[(4'-hloro[1,1'-bifenil]-2-il)metil]-1-piperazinil]-N-[[4-[[(1R)-3-(dimetilamino)-1-[(feniltio)metil]propil]amino]-3-nitropenil]sulfonil]-benzamid (ABT-737, CAS 852808-04-9); i Navitoclax (ABT-263, CAS 923564-51-6).
[0405] Agonisti proapoptotičkih receptora (PARA), uključujući DR4 (TRAILR1) i DR5 (TRAILR2), uključujući, bez ograničenja, dulanermin (AMG-951, RhApo2L/TRAIL); mapatumumab (HRS-ETR1, CAS 658052-09-6); leksatumumab (HGS-ETR2, CAS 845816-02-6); apomab (Apomab<®>); konatumumab (AMG655, CAS 896731-82-1); i tigatuzumab (CS1008, CAS 946415-34-5, dostupno kod Daiichi Sankyo).
[0406] Inhibitori kinaze kontrolne tačke (CHK) uključuju, bez ograničenja, 7-hidroksistaurosporin (UCN-01); 6-bromo-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5-(3R)-3-piperidinilpirazolo[1,5-a]pinmidin-7-amin (SCH900776, CAS 891494-63-6); 5-(3-fluorofenil)-3-ureidotiofen-2-karboksilna kiselina N-[(S)-piperidin-3-il]amid (AZD7762, CAS 860352-01-8); 4-[((3S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)amino]-3-(1H-benzimidazol-2-il)-6-hlorokinolin-2(1H)-on (CHIR 124, CAS 405168-58-3); 7-aminodaktinomicin (7-AAD), izogranulatimid, debromohimenialdizin; N-[5-bromo-4-metil-2-[(2S)-2-morfolinilmetoksi]-fenil]-N'-(5-metil-2-pirazinil)urea (LY2603618, CAS 911222-45-2); sulforafan (CAS 4478-93-7, 4-metilsulfinilbutil izotiocijanat); 9,10,11,12-tetrahidro-9,12-epoksi-1H-diindolo[1,2,30-fg:3',2',1'-kl]pirolo[3,4-i][1,6]benzodiazocin-1,3(2H)-dion (SB-218078, CAS 135897-06-2) i TAT-S216A (YGRKKRRQRRRLYRSPAMPENL (SEQ ID NO: 33)) i CBP501 ((d-Bpa)sws(d-Phe-F5)(d-Cha)rrrqrr).
[0407] U daljem otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više imunomodulatora (npr. jednim ili više aktivatora kostimulatornog molekula ili inhibitora molekula imunološke kontrolne tačke), za lečenje bolesti, npr. karcinoma.
[0408] U određenim otelotvorenjima, imunomodulator je aktivator kostimulatornog molekula. U jednom otelotvorenju, agonist kostimulatornog molekula je izabran iz agonista (npr. agonističko antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen, ili rastvorljive fuzije) OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 ili CD83 liganda.
GITR agonisti
[0409] U nekim otelotvorenjima, GITR agonist se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomeroma ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, GITR agonist je GWN323 (Novartis), BMS-986156, MK-4166 ili MK-1248 (Merck), TRX518 (Leap Therapeutics), INCAGN1876 (Incyte/Agenus), AMG 228 (Amgen) ili INBRX-110 (Inhibrx).
Primeri GITR agonista
[0410] U jednom otelotvorenju, GITR agonist je molekul anti-GITR antitela. U jednom otelotvorenju, GITR agonist je molekul anti-GITR antitela kako je opisano u WO 2016/057846, objavljenom 14. aprila 2016. godine, pod nazivom „Sastavi i metode upotrebe za pojačani imuni odgovor i terapiju karcinoma“ (Compositions and Methods of Use for Augmented Immune Response and Cancer Therapy).
[0411] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od najmanje jednog, dva, tri, četiri, pet ili šest regiona koji određuju komplementarnost (CDR) (ili kolektivno svih CDR-ova) iz varijabilnog regiona teškog i lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina prikazane u Tabeli 1 (npr. iz sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca MAB7 objavljenih u Tabeli 1), ili kodiranih nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 1. U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Kabat (npr. kako je navedeno u Tabeli 1). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 1). U jednom otelotvorenju, jedan ili više CDR-ova (ili kolektivno svi CDR-ovi) imaju jednu, dve, tri, četiri, pet, šest ili više promena, npr. supstitucije aminokiselina (npr. konzervativne supstitucije aminokiselina) ili delecije, u odnosu na sekvencu aminokiselina prikazanu u Tabeli 1, ili kodirane nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 1.
[0412] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 9, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 11, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 13; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 14, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 16, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 18, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 1.
[0413] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 1, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 1. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 2, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 2. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 1 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 2.
[0414] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 5, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 5. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 6, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 6. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 5 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 6.
[0415] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 3, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 3. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 4, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 4. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 3 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 4.
[0416] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 7, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 7. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 8, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 8. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 7 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 8.
[0417] Ovde opisani molekuli antitela mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u WO 2016/057846.
Tabela 1: Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primernog molekula anti-GITR antitela
[0418] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je BMS-986156 (Bristol-Myers Squibb), takođe poznat kao BMS 986156 ili BMS986156. BMS-986156 i druga anti-GITR antitela su obelodanjena, npr. u US 9.228.016 i WO 2016/196792. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca BMS-986156, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 2.
[0419] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je MK-4166 ili MK-1248 (Merck). MK-4166, MK-1248 i druga anti-GITR antitela su obelodanjena, npr. u US 8.709.424, WO 2011/028683, WO 2015/026684 i Mahne et al. Cancer Res.2017;
77(5):1108-1118. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca MK-4166 ili MK-1248.
[0420] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je TRX518 (Leap Therapeutics). TRX518 i druga anti-GITR antitela su otkrivena, npr. u US 7.812.135, US 8.388.967, US 9.028.823, WO 2006/105021 i Ponte J et al. (2010) Clinical Immunology, 135:S96. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca TRX518.
[0421] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je INCAGN1876 (Incyte/Agenus). INCAGN1876 i druga anti-GITR antitela su obelodanjena, npr. u US 2015/0368349 i WO 2015/184099. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca INCAGN1876.
[0422] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je AMG 228 (Amgen). AMG 228 i druga anti-GITR antitela su otkrivena, npr. u US 9.464.139 i WO 2015/031667. U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca AMG 228.
[0423] U jednom otelotvorenju, molekul anti-GITR antitela je INBRX-110 (Inhibrx).
INBRX-110 i druga anti-GITR antitela su obelodanjena, npr. u US 2017/0022284 i WO 2017/015623. U jednom otelotvorenju, GITR agonist obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca INBRX-110.
[0424] U jednom otelotvorenju, GITR agonist (npr. fuzioni protein) je MEDI 1873 (MedImmune), takođe poznat kao MEDI1873. MEDI 1873 i drugi GITR agonisti su obelodanjeni, npr. u US 2017/0073386, WO 2017/025610 i Ross et al. Cancer Res 2016; 76(14 Suppl): Abstract nr 561. U jednom otelotvorenju, GITR agonist se sastoji od jednog ili više IgG Fc domena, funkcionalnog domena multimerizacije i domena vezivanja receptora glukokortikoidom indukovanog liganda TNF receptora (GITRL) iz MEDI 1873.
[0425] Dalji poznati GITR agonisti (npr. anti-GITR antitela) uključuju one opisane, npr. u WO 2016/054638.
[0426] U jednom otelotvorenju, anti-GITR antitelo je antitelo koje se takmiči za vezivanje i/ili se vezuje za isti epitop na GITR-u kao i jedno od ovde opisanih anti-GITR antitela.
[0427] U jednom otelotvorenju, GITR agonist je peptid koji aktivira GITR signalni put. U jednom otelotvorenju, GITR agonist je fragment koji se vezuje za imunoadhezin (npr. fragment koji se vezuje za imunoadhezin koji se sastoji od ekstracelularnog ili GITR vezujućeg dela GITRL) fuzionisan sa konstantnim regionom (npr. Fc region sekvence imunoglobulina).
Tabela 2: Sekvenca aminokiselina drugih primernih molekula anti-GITR antitela
[0428] U određenim otelotvorenjima, imunomodulator je inhibitor molekula imunološke kontrolne tačke. U jednom otelotvorenju, imunomodulator je inhibitor PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD 160, 2B4 i/ili TGFRbeta. U jednom otelotvorenju, inhibitor molekula imunske kontrolne tačke suzbija PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 ili CTLA4, ili bilo konju kombinaciju navedenog. Termin „inhibicija“ ili „inhibitor“ uključuje smanjenje određenog parametra, npr. aktivnosti, datog molekula, npr. inhibitora imunološke kontrolne tačke. Na primer, inhibicija aktivnosti, npr. PD-1 ili PD-L1 aktivnosti, od najmanje 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50% ili više, uključena je ovim terminom. Stoga, suzbijanje ne mora da bude 100%.
[0429] Inhibicija inhibitornog molekula može se izvršiti na nivou DNK, RNK ili proteina. U nekim otelotvorenjima, inhibitorna nukleinska kiselina (npr. dsRNK, siRNK ili shRNK) može se koristiti za inhibiciju ekspresije inhibitornog molekula. U drugim otelotvorenjima, inhibitor inhibitornog signala je polipeptid, npr. a rastvorljivi ligand (npr. PD-1-Ig ili CTLA-4 Ig), ili antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, koji se vezuje za inhibitorni molekul; npr. antitelo ili njegov fragment (u daljem tekstu „molekul antitela“) koji se vezuje za PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 i/ili TGFR beta, ili njihovu kombinaciju.
[0430] U jednom otelotvorenju, molekul antitela je potpuno antitelo ili njegov fragment (npr. Fab, F(ab')2, Fv ili jednolančani Fv fragment (scFv)). U dodatnim otelotvorenjima, molekul antitela ima konstantni region teškog lanca (Fc) izabran između, npr. konstantnih regiona teškog lanca IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD i IgE; posebno izabran između, npr. konstantnih regiona teškog lanca IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4, tačnije, konstantnog regiona teškog lanca IgG1 ili IgG4 (npr. humani IgG1 ili IgG4). U jednom otelotvorenju, konstantni region teškog lanca je humani IgG1 ili humani IgG4. U jednom otelotvorenju, konstantni region se menja, npr. mutira, da bi se modifikovala svojstva molekula antitela (npr. da bi se povećalo ili smanjilo vezivanje jednog ili više Fc receptora, glikozilacija antitela, broj ostataka cisteina, funkcija efektorskih ćelija ili funkcija komplementa).
[0431] U određenim otelotvorenjima, molekul antitela je u obliku bispecifičnog ili multispecifičnog molekula antitela. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela ima specifičnost prvog vezivanja za PD-1 ili PD-L1 i specifičnost drugog vezivanja, npr. specifičnost drugog vezivanja za TIM-3, LAG-3 ili PD-L2. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 ili PD-L1 i TIM-3. U drugom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 ili PD-L1 i LAG-3. U drugom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 i PD-L1. U još jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 i PD-L2. U drugom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za TIM-3 i LAG-3. Svaka kombinacija gore navedenih molekula može se napraviti u molekulu multispecifičnog antitela, npr. trispecifično antitelo koje uključuje specifičnost prvog vezivanja za PD-1 ili PD-1, i specifičnost drugog i trećeg vezivanja za dva ili više TIM-3, LAG-3 ili PD-L2.
[0432] U određenim otelotvorenjima, imunomodulator je inhibitor PD-1, npr. humanog PD-1. U drugom otelotvorenju, imunomodulator je inhibitor PD-L1, npr. humanog PD-L1. U jednom otelotvorenju, inhibitor PD-1 ili PD-L1 je molekul antitela na PD-1 ili PD-L1.
Inhibitor PD-1 ili PD-L1 se može primenjivati sam ili u kombinaciji sa drugim imunomodulatorima, npr. u kombinaciji sa inhibitorom LAG-3, TIM-3 ili CTLA4. U primernom otelotvorenju, inhibitor PD-1 ili PD-L1, npr. molekul anti-PD-1 ili PD-L1 antitela, primenjuje se u kombinaciji sa inhibitorom LAG-3, npr. molekulom anti-LAG-3 antitela. U drugom otelotvorenju, inhibitor PD-1 ili PD-L1, npr. molekul anti-PD-1 ili PD-L1 antitela, primenjuje se u kombinaciji sa inhibitorom TIM-3, npr. molekulom anti-TIM-3 antitela. U još nekim otelotvorenjima, inhibitor PD-1 ili PD-L1, npr. molekul anti-PD-1 antitela, primenjuje se u kombinaciji sa inhibitorom LAG-3, npr. molekulom anti-LAG-3 antitela i inhibitorom TIM-3, npr. molekulom anti-TIM-3 antitela.
[0433] Ostale kombinacije imunomodulatora sa PD-1 inhibitorom (npr. jedan ili više PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 i/ili TGFR) su takođe u okviru ovog otkrića. Bilo koji od molekula antitela poznatih u struci ili otkrivenih ovde može se koristiti u gore navedenim kombinacijama inhibitora molekula kontrolne tačke.
PD-1 inhibitori
[0434] U nekim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa PD-1 inhibitorom za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, PD-1 inhibitor se bira između PDR001 (Novartis), nivolumaba (Bristol-Myers Squibb), pembrolizumaba (Merck & Co), pidilizumaba (CureTech), MEDI0680 (Medimmune), REGN2810 (Regeneron), TSR-042 (Tesaro), PF-06801591 (Pfizer), BGB-A317 (Beigene), BGB-108 (Beigene), INCSHR1210 (Incyte) ili AMP-224 (Amplimmune).
Primeri PD-1 inhibitora
[0435] U jednom otelotvorenju, PD-1 inhibitor je molekul anti-PD-1 antitela. U jednom otelotvorenju, PD-1 inhibitor je molekul anti-PD-1 antitela kako je opisano u US 2015/0210769, objavljeno 30. jula 2015. godine, pod nazivom „Molekuli antitela na PD-1 i njihove primene“ (Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof).
[0436] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela sadrži najmanje jedan, dva, tri, četiri, pet ili šest regiona koji određuju komplementarnost (CDR-ovi) (ili zajedno sve CDR-ove) iz teškog i lakog lanca varijabilnog regiona koji sadrže aminokiselinsku sekvencu prikazanu u Tabeli 3 (npr. iz sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca BAP049-klona-E ili BAP049-klona-B otkrivenih u Tabeli 3), ili su kodirani nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 3. U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Kabat (npr. kako je navedeno u Tabeli 3). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 3). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa kombinovanim CDR definicijama koje daju Kabat i Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 3). U jednom otelotvorenju, kombinacija CDR VH CDR1 koju daju Kabat i Chothia obuhvata sekvencu aminokiselina GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 213). U jednom otelotvorenju, jedan ili više CDR-ova (ili kolektivno svi CDR-ovi) imaju jednu, dve, tri, četiri, pet, šest ili više promena, npr. supstitucije aminokiselina (npr. konzervativne supstitucije aminokiselina) ili delecije, u odnosu na sekvencu aminokiselina prikazanu u Tabeli 3, ili kodirane nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 3.
[0437] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 22, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 23, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 24; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 31, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 32, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 286, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 3.
[0438] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH koji se sastoji od VHCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 45, VHCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 46, i VHCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 47; i VL koji se sastoji od VLCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 50, VLCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 51, i VLCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 52, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 3.
[0439] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 27, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 27. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 41, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 41. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 37, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 37. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 27 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 41. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 27 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 37.
[0440] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 28, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 28. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 42 ili 38, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 42 ili 38. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 28 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 42 ili 38.
[0441] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 29, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 29. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 43, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 43. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 39, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 39. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 29 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 43. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 29 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 39.
[0442] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 30, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 30. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 44 ili 40, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 44 ili 40. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 30 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 44 ili 40.
[0443] Ovde opisani molekuli antitela mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u US 2015/0210769.
Tabela 3. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primernih molekula anti-PD-1 antitela
Ostali primeri PD-1 inhibitora
[0444] U nekim otelotvorenjima, anti-PD-1 antitelo je nivolumab (CAS registarski broj: 946414-94-4). Alternativni nazivi za nivolumab uključuju MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558 ili OPDIVO<®>. Nivolumab je potpuno humano IgG4 monoklonsko antitelo, koje specifično blokira PD1. Nivolumab (klon 5C4) i druga ljudska monoklonska antitela koja se specifično vezuju za PD1 otkrivena su u američkom patentu br.8.008.449 i PCT publikaciji br. WO2006/121168. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca nivolumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 4.
[0445] U drugim otelotvorenjima, anti-PD-1 antitelo je pembrolizumab. Pembrolizumab (trgovački naziv KEYTRUDA ranije Lambrolizumab, takođe poznat kao Merck 3745, MK-3475 ili SCH-900475) je humanizovano IgG4 monoklonsko antitelo koje se vezuje za PD1. Pembrolizumab je obelodanjen, npr. kod Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, PCT publikaciji br. WO2009/114335 i američkom patentu br. 8,354,509. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca pembrolizumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 4.
[0446] U nekim otelotvorenjima, anti-PD-1 antitelo je pidilizumab. Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) je humanizovano IgGlk monoklonsko antitelo koje se vezuje za PD1. Pidilizumab i druga humanizovana anti-PD-1 monoklonska antitela su obelodanjena u PCT Publikaciji br. WO2009/101611. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca pidilizumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 4.
[0447] Druga anti-PD1 antitela su obelodanjena u američkom patentu br.8.609.089, američkoj publikaciji br.2010028330 i/ili američkoj publikaciji br.20120114649. Druga anti-PD1 antitela uključuju AMP 514 (Amplimmune).
[0448] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je MEDI0680 (Medimune), takođe poznat kao AMP-514. MEDI0680 i druga anti-PD-1 antitela su obelodanjena u US 9.205.148 i WO 2012/145493. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca MEDI0680.
[0449] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je REGN2810 (Regeneron). U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca REGN2810.
[0450] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je PF-06801591 (Pfizer). U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca PF-06801591.
[0451] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je BGB-A317 ili BGB-108 (Beigene). U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca BGB-A317 ili BGB-108
[0452] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je INCSHR1210 (Incyte), takođe poznat kao INCSHR01210 ili SHR-1210. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca INCSHR1210.
[0453] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela je TSR-042 (Tesaro), takođe poznat kao ANB011. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-1 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca TSR-042.
[0454] Dalja poznata anti-PD-1 antitela uključuju ona opisana, npr. u WO 2015/112800, WO 2016/092419, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2014/194302, WO 2014/209804, WO 2015/200119, US 8.735.553, US 7.488.802, US 8.927.697, US 8.993.731 i US 9.102.727.
[0455] U jednom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je antitelo koje se takmiči za vezivanje i/ili se vezuje za isti epitop na PD-1 kao i jedno od ovde opisanih anti-PD-1 antitela.
[0456] U jednom otelotvorenju, PD-1 inhibitor je peptid koji inhibira PD-1 signalni put, npr. kao što je opisano u US 8.907.053. U nekim otelotvorenjima, PD-1 inhibitor je imunoadhezin (npr. imunoadhezin koji se sastoji od ekstracelularnog ili PD-1 vezivnog dela PD-L1 ili PD-L2 fuzionisanog sa konstantnim regionom (npr. Fc region imunoglobulinske sekvence). U nekim otelotvorenjima, PD-1 inhibitor je AMP-224 (B7-DCIg (Amplimmune), npr. obelodanjen u WO 2010/027827 i WO 2011/066342.
Tabela 4. Aminokiselinske sekvence drugih primera molekula anti-PD-1 antitela
PD-L1 inhibitori
[0457] U nekim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa PD-L1 inhibitorom za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, PD-L1 inhibitor se bira između FAZ053 (Novartis), atezolizumaba (Genentech/Roche), avelumaba (Merck Serono i Pfizer), durvalumaba (MedImmune/AstraZeneca) ili BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb).
Primeri PD-L1 inhibitora
[0458] U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je molekul anti-PD-L1 antitela. U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je molekul anti-PD-L1 antitela kao što je obelodanjeno u US 2016/0108123, objavljeno 21. aprila 2016. godine, pod nazivom „Molekuli antitela na PD-L1 i njihove primene“ (Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof).
[0459] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela sadrži najmanje jedan, dva, tri, četiri, pet ili šest regiona koji određuju komplementarnost (CDR-ovi) (ili zajedno sve CDR-ove) iz teškog i lakog lanca varijabilnog regiona koji sadrže aminokiselinsku sekvencu prikazanu u Tabeli 5 (npr. iz sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca BAP058klona O ili BAP058-klona N otkrivenih u Tabeli 5), ili su kodirani nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 5. U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Kabat (npr. kako je navedeno u Tabeli 5). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 5). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa kombinovanim CDR definicijama koje daju Kabat i Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 5). U jednom izvođenju, kombinacija Kabat i Chothia CDR iz VH CDR1 obuhvata sekvencu amino kiseline GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 214). U jednom otelotvorenju, jedan ili više CDR-ova (ili kolektivno svi CDR-ovi) imaju jednu, dve, tri, četiri, pet, šest ili više promena, npr. supstitucije aminokiselina (npr. konzervativne supstitucije aminokiselina) ili delecije, u odnosu na sekvencu aminokiselina prikazanu u Tabeli 5, ili kodiranu nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 5.
[0460] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 62, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 63, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 64; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 70, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 71, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 72, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 5.
[0461] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od VHCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 89, VHCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 90, i VHCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 91; i VL koji se sastoji od VLCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 94, VLCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 95, i VLCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 96, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 5.
[0462] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 67, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 67. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 77, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 77. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 81, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 81. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 85, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 85. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 67 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 77. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 81 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 85.
[0463] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 68, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 68. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 78, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 78. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 82, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 82. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 86, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 86. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 68 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 78. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 82 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 86.
[0464] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 69, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 69. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 79, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 79. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 83, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 83. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 87, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 87. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 69 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 79. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 83 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 87.
[0465] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 76, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 76. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 80, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 80. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 84, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 84. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 88, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 88. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 76 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 80. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 84 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 88.
[0466] Ovde opisani molekuli antitela mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u US 2016/0108123.
Tabela 5. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primernih molekula anti-PD-L1 antitela
Ostali primeri PD-L1 inhibitora
[0467] U nekim otelotvorenjima, PD-L1 inhibitor je anti-PD-L1 antitelo. U nekim otelotvorenjima, inhibitor anti-PD-L1 je izabran između YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736 ili MDX-1105MSB-0010718C (takođe se naziva A09-246-2) kao što je obelodanjeno u, npr. WO 2013/0179174, i ima sekvencu koja je obelodanjena ovde (ili sekvencu koja je suštinski identična ili slična toj sekvenci, npr. sekvencu koja je najmanje 85%, 90%, 95% identična ili viša od navedene sekvence).
[0468] U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je MDX-1105. MDX-1105, takođe poznat kao BMS-936559, je anti-PD-L1 antitelo opisano u PCT publikaciji br. WO 2007/005874.
[0469] U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je YW243.55.S70. YW243.55.S70 antitelo je anti-PD-L1 opisano u PCT publikaciji br. WO 2010/077634.
[0470] U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je MDPL3280A (Genentech / Roche) takođe poznat kao atezolizumab, RG7446, RO5541267, YW243.55.S70 ili TECENTRIQ<™>.
MDPL3280A je humani Fc optimizovano IgG1 monoklonsko antitelo koje se veže na PD-L1. MDPL3280A i druga humana monoklonska antitela na PD-L1 su opisana u američkom patentu br.: 7.943.743 i američkoj publikaciji br.: 20120039906. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca atezolizumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 6.
[0471] U drugim otelotvorenjima, PD-L2 inhibitor je AMP-224. AMP-224 je PD-L2 Fc fuzioni rastvorljivi receptor koji blokira interakciju između PD1 i B7-H1 (B7-DCIg;
Amplimmune; npr. obelodanjeno u PCT publikaciji br. WO2010/027827 i WO2011/066342).
[0472] U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je molekul anti-PD-L1 antitela. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela je avelumab (Merck Serono i Pfizer), takođe poznat kao MSB0010718C. Avelumab i druga anti-PD-L1 antitela su obelodanjena u WO 2013/079174. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca avelumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 6.
[0473] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela je durvalumab (MedImmune/AstraZeneca), takođe poznat kao MEDI4736. Durvalumab i druga anti-PD-L1 antitela su obelodanjena u US 8.779.108. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca durvalumaba, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 6.
[0474] U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela je BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb), takođe poznat kao MDX-1105 ili 12A4. BMS-936559 i druga anti-PD-L1 antitela su obelodanjena u US 7.943.743 i WO 2015/081158. U jednom otelotvorenju, molekul anti-PD-L1 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca BMS-936559, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 6.
[0475] Dalja poznata anti-PD-L1 antitela uključuju ona opisana, npr. u WO 2015/181342, WO 2014/100079, WO 2016/000619, WO 2014/022758, WO 2014/055897, WO 2015/061668, WO 2013/079174, WO 2012/145493, WO 2015/112805, WO 2015/109124, WO 2015/195163, US 8.168.179, US 8.552.154, US 8.460.927 i US 9.175.082.
[0476] U jednom otelotvorenju, anti-PD-L1 antitelo je antitelo koje se takmiči za vezivanje i/ili se vezuje za isti epitop na PD-L1 kao i jedno od ovde opisanih anti-PD-L1 antitela.
Tabela 6. Aminokiselinske sekvence drugih primera molekula anti-PD-L1 antitela
LAG-3 inhibitori
[0477] U nekim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa LAG-3 inhibitorom za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, inhibitor LAG-3 je izabran između LAG525 (Novartis), BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb) ili TSR-033 (Tesaro).
Primeri LAG-3 inhibitora
[0478] U jednom otelotvorenju, LAG-3 inhibitor je molekul anti-LAG-3 antitela. U jednom otelotvorenju, inhibitor LAG-3 je molekul anti-LAG-3 antitela kao što je obelodanjeno u US 2015/0259420, objavljeno 17. septembra 2015. godine, pod nazivom „Molekuli antitela na LAG-3 i njihove primene“ (Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof).
[0479] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od najmanje jednog, dva, tri, četiri, pet ili šest regiona koji određuju komplementarnost (CDR) (ili kolektivno svih CDR-ova) iz varijabilnog regiona teškog i lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina prikazane u Tabeli 7 (npr. iz sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca BAP050-klona I ili BAP050-klona J objavljenih u Tabeli 7), ili kodiranih nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 7. U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Kabat (npr. kako je navedeno u Tabeli 7). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 7). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa kombinovanim CDR definicijama koje daju Kabat i Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 7). U jednom otelotvorenju, kombinacija CDR VH CDR1 koju daju Kabat i Chothia obuhvata sekvencu aminokiselina GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 173). U jednom otelotvorenju, jedan ili više CDR-ova (ili kolektivno svi CDR-ovi) imaju jednu, dve, tri, četiri, pet, šest ili više promena, npr. supstitucije aminokiselina (npr. konzervativne supstitucije aminokiselina) ili delecije, u odnosu na sekvencu aminokiselina prikazanu u Tabeli 7, ili kodirane nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 7.
[0480] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 108, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 109, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 110; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 117, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 118, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 119, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 7.
[0481] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od VHCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 143 ili 144, VHCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 145 ili 146, i VHCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 147 ili 148; i VL koji se sastoji od VLCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 153 ili 154, VLCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 155 ili 156, i VLCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 157 ili 158, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 7. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od VHCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 165 ili 144, VHCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 166 ili 146, i VHCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 167 ili 148; i VL koji se sastoji od VLCDR1 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 153 ili 154, VLCDR2 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 155 ili 156, i VLCDR3 kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 157 ili 158, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 7.
[0482] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 113, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 113. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 125, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 125. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 131, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 131. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 137, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 137. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 113 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 125. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 131 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 137.
[0483] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 114 ili 115, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 114 ili 115. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 126 ili 127, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 126 ili 127. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 132 ili 133, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 132 ili 133. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 138 ili 139, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 138 ili 139. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 114 ili 115 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 126 ili 127. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 132 ili 133 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 138 ili 139.
[0484] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 116, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 116. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 128, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 128. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 134, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 134. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 140, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 140. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 116 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 128. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 134 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 140.
[0485] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 123 ili 124, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 123 ili 124. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 129 ili 130, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 129 ili 130. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 135 ili 136, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 135 ili 136. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 141 ili 142, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 141 ili 142. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 123 ili 124 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 129 ili 130. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 135 ili 136 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 141 ili 142.
[0486] Ovde opisani molekuli antitela mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u US 2015/0259420.
Tabela 7. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primernih molekula anti-LAG-3 antitela
Ostali primeri LAG-3 inhibitora
[0487] U jednom otelotvorenju, LAG-3 inhibitor je molekul anti-LAG-3 antitela. U jednom otelotvorenju, inhibitor LAG-3 je BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb), takođe poznat kao BMS986016. BMS-986016 i druga anti-LAG-3 antitela su obelodanjena u WO 2015/116539 i US 9.505.839. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca BMS-986016, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 8.
[0488] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela je TSR-033 (Tesaro). U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca TSR-033.
[0489] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela je IMP731 ili GSK2831781 (GSK i Prima BioMed). IMP731 i druga anti-LAG-3 antitela su obelodanjena u WO 2008/132601 i US 9.244.059. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca IMP731, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 8. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca GSK2831781.
[0490] U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela je IMP761 (Prima BioMed). U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca IMP761.
[0491] Dalja poznata anti-LAG-3 antitela uključuju ona opisana, npr. u WO 2008/132601, WO 2010/019570, WO 2014/140180, WO 2015/116539, WO 2015/200119, WO 2016/028672, US 9.244.059, US 9.505.839.
[0492] U jednom otelotvorenju, anti-LAG-3 antitelo je antitelo koje se takmiči za vezivanje i/ili se vezuje za isti epitop na LAG-3 kao i jedno od ovde opisanih anti-LAG-3 antitela.
[0493] U jednom otelotvorenju, anti-LAG-3 inhibitor je rastvorljivi LAG-3 protein, npr. IMP321 (Prima BioMed), npr. kao što je obelodanjeno u WO 2009/044273.
Tabela 8. Aminokiselinske sekvence drugih primera molekula anti-LAG-3 antitela
TIM-3 inhibitori
[0494] U određenim otelotvorenjima, inhibitor molekula imunološke kontrolne tačke je inhibitor TIM-3. U nekim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa TIM-3 inhibitorom za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, inhibitor TIM-3 je MGB453 (Novartis) ili TSR-022 (Tesaro).
Primeri TIM-3 inhibitora
[0495] U jednom otelotvorenju, TIM-3 inhibitor je molekul anti-TIM-3 antitela. U jednom otelotvorenju, inhibitor TIM-3 je molekul anti-TIM-3 antitela kao što je obelodanjeno u US 2015/0218274, objavljeno 6. avgusta 2015. godine, pod nazivom „Molekuli antitela na TIM-3 i njihove primene“ (Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof).
[0496] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od najmanje jednog, dva, tri, četiri, pet ili šest regiona koji određuju komplementarnost (CDR) (ili kolektivno svih CDR-ova) iz varijabilnog regiona teškog i lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina prikazane u Tabeli 9 (npr. od sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca ABTIM3-hum11 ili ABTIM3-hum03 objavljenih u Tabeli 9), ili kodiranih nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 9. U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Kabat (npr. kako je navedeno u Tabeli 9). U nekim otelotvorenjima, CDR-ovi su u skladu sa definicijom koju daje Chothia (npr. kako je navedeno u Tabeli 9). U jednom otelotvorenju, jedan ili više CDR-ova (ili kolektivno svi CDR-ovi) imaju jednu, dve, tri, četiri, pet, šest ili više promena, npr. supstitucije aminokiselina (npr. konzervativne supstitucije aminokiselina) ili delecije, u odnosu na sekvencu aminokiselina prikazanu u Tabeli 9, ili kodirane nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 9.
[0497] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 174, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 175, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 176; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 183, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 184, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 185, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 9. U jednom otelotvorenju, molekul anti-LAG-3 antitela se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (VH) koji se sastoji od sekvence aminokiselina VHCDR1 sa SEQ ID NO: 174, VHCDR2 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 193, i VHCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 176; i promenljivi region lakog lanca (VL) obuhvata VLCDR1 sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 183, VLCDR2 sekvencu amino kiseline od SEK ID BR: 184, i VLCDR3 sekvence amino kiseline SEQ ID NO: 185, od kojih je svaka obelodanjena u Tabeli 9.
[0498] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 179, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 179. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 189, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 189. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 195, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 195. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 199, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 199. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 179 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 189. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od VH koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 195 i VL koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 199.
[0499] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 180, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 180. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 190, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 190. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 196, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 196. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 200, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 200. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 180 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 190. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od VH kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 196 i VL kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 200.
[0500] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 181, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 181. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 191, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 191. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 197, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 197. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od lakog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 201, ili sekvence aminokiselina koja je najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identična ili viša od SEQ ID NO: 201. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 181 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 191. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od teškog lanca koji se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 197 i laki lanac koji obuhvata sekvencu amino kiseline SEQ ID NO: 201.
[0501] U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 182, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 182. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 192, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 192. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 198, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 198. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 202, ili nukleotidnom sekvencom najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identičnom ili višom od SEQ ID NO: 202. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 182 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 192. U jednom otelotvorenju, molekul antitela se sastoji od teškog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 198 i lakog lanca kodiranog nukleotidnom sekvencom SEQ ID NO: 202.
[0502] Ovde opisani molekuli antitela mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u US 2015/0218274.
Tabela 9. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primernih molekula anti-TIM-3 antitela
Ostali primeri TIM-3 inhibitora
[0503] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela je TSR-022 (AnaptysBio/Tesaro). U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca TSR-022. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela se sastoji od jedne ili više CDR sekvenci (ili kolektivno svih CDR sekvenci), sekvence varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvence teškog lanca ili lakog lanca APE5137 ili APE5121, npr. kao što je obelodanjeno u Tabeli 10. APE5137, APE5121 i druga anti-TIM-3 antitela su obelodanjena u WO
2016/161270.
[0504] U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela je klon antitela F38-2E2. U jednom otelotvorenju, molekul anti-TIM-3 antitela obuhvata jednu ili više CDR sekvenci (ili kolektivno sve CDR sekvence), sekvencu varijabilnog regiona teškog lanca ili lakog lanca, ili sekvencu teškog lanca ili lakog lanca F38-2E2.
[0505] Dalja poznata anti-TIM-3 antitela uključuju ona opisana, npr. u WO 2016/111947, WO 2016/071448, WO 2016/144803, US 8.552.156, US 8.841.418 i US 9.163.087.
[0506] U jednom otelotvorenju, anti-TIM-3 antitelo je antitelo koje se takmiči za vezivanje i/ili se vezuje za isti epitop na TIM-3 kao i jedno od ovde opisanih anti-TIM-3 antitela.
Tabela 10. Aminokiselinske sekvence drugih primera molekula anti-TIM-3 antitela
Citokini
[0507] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više citokina, uključujući, bez ograničenja, interferon, IL-2, IL-15, IL-7 ili IL21. U određenim otelotvorenjima, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, primenjuju se u kombinaciji sa kompleksom IL-15/IL-15Ra. U nekim otelotvorenjima, kompleks IL-15/IL-15Ra je izabran između NIZ985 (Novartis), ATL-803 (Altor) ili CYP0150 (Cytune).
Primeri kompleksa IL-15/IL-15Ra
[0508] U jednom otelotvorenju, citokin je IL-15 kompleksiran rastvorljivim oblikom IL-15 receptora alfa (IL-15Ra). Kompleks IL-15/IL-15Ra može da sadrži IL-15 kovalentno ili nekovalentno vezan za rastvorljivi oblik IL-15Ra. U određenom otelotvorenju, humani IL-15 je nekovalentno vezan za rastvorljivi oblik IL-15Ra. U određenom otelotvorenju, humani IL-15 formulacije se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 207 u Tabeli 11 ili sekvence aminokiselina najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identične ili više od SEQ ID NO: 207, a rastvorljivi oblik humanog IL-15Ra se sastoji od sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 208 u Tabeli 11, ili sekvence aminokiselina najmanje 85%, 90%, 95% ili 99% identične ili više od SEQ ID NO: 208, kao što je opisano u WO 2014/066527. Molekuli opisani u ovom dokumentu mogu se napraviti vektorima, ćelijama domaćinima i metodama opisanim u WO 2007084342.
Tabela 11. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primera IL-15/IL-15Ra kompleksa
Drugi primeri kompleksa IL-15/IL-15Ra
[0509] U jednom otelotvorenju, IL-15/IL-15Ra kompleks je ALT-803, IL-15/IL-15Ra Fc fuzioni protein (IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc rastvorljiv kompleks). ALT-803 je opisan u WO 2008/143794. U jednom otelotvorenju, fuzioni protein IL-15/IL-15Ra Fc obuhvata sekvence kao što je obelodanjeno u Tabeli 12.
[0510] U jednom otelotvorenju, IL-15/IL-15Ra kompleks se sastoji od IL-15 fuzionisanog sa suši domenom IL-15Ra (CYP0150, Cytune). Suši domen IL-15Ra se odnosi na domen koji počinje na prvom cisteinskom ostatku nakon signalnog peptida IL-15Ra, a završava se na četvrtom cisteinskom ostatku nakon navedenog signalnog peptida. Kompleks IL-15 fuzionisan sa suši domenom IL-15Ra opisan je u WO 2007/04606 i WO 2012/175222. U jednom otelotvorenju, fuzija IL-15/IL-15Ra suši domena obuhvata sekvence kao što je obelodanjeno u Tabeli 12.
Tabela 12. Sekvence aminokiselina drugih primera IL-15/IL-15Ra kompleksa
[0511] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više agonista toličnih receptora (TLR, npr. TLR7, TLR8, TLR9) za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, jedinjenje iz ovog pronalaska može se koristiti u kombinaciji sa agonistom TLR7 ili konjugatom agonista TLR7.
[0512] U nekim otelotvorenjima, agonist TLR7 se sastoji od jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO2011/049677. U nekim otelotvorenjima, TLR7 agonist se sastoji od 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropoksi)etoksi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanojske kiseline. U nekim otelotvorenjima, agonist TLR7 sadrži jedinjenje formule:
[0513] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora angiogeneze za lečenje karcinoma, npr. bevacizumabom (Avastin<®>), aksitinibom (Inlyta<®>); brivanib alaninatom (BMS-582664, (S)-((R)-1-(4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloksi)-5-metilpirolo[2,1-ƒ][1,2,4]triazin-6-iloksi)propan-2-yl)2-aminopropanoat); sorafenibom (Nexavar<®>); pazopanibom (Votrient<®>); sunitinib malatom (Sutent<®>); cediranibom (AZD2171, CAS 288383-20-1); vargatefom (BIBF1120, CAS 928326-83-4); foretinibom (GSK1363089); telatinibom (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); apatinibom (YN968D1, CAS 811803-05-1); imatinibom (Gleevec<®>); ponatinibom (AP24534, CAS 943319-70-8); tivozanibom (AV951, CAS 475108-18-0); regorafenibom (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); vatalanib dihidrohloridom (PTK787, CAS 212141-51-0); brivanibom (BMS-540215, CAS 649735-46-6); vandetanibom (Caprelsa<®>ili AZD6474); motesanib difosfatom (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridinkarboksamid, opisanim u PCT publikaciji br. WO 02/066470); dovitinib dilaktičnom kiselinom (TKI258, CAS 852433-84-2); linfanibom (ABT869, CAS 796967-16-3); kabozantinibom (XL184, CAS 849217-68-1); lestaurtinibom (CAS 111358-88-4); N-[5-[[[5-(1,1-dimetiletil)-2-oksazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidinkarboksamid (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R,4R)-4-amino-1-((4-((3-metoksifenil)amino)pirolo[2,1-fJ[1,2,4]triazin-5-il)metil)piperidin-3-ol (BMS690514); N(3,4-dihloro-2-fluorofenil)-6-metoksi-7-[[(3aα,5β,6aα)-oktahidro-2-metilciklopenta[c]pirol-5-il]metoksi]- 4-kinazolinamin (XL647, CAS 781613-23-8); 4-metil-3-[[1-metil-6- (3-piridinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-il]amino]-N-[3-(trifluorometil)fenil]-benzamid (BHG712, CAS 940310-85-0); ili aflibercepta (Eylea<®>).
[0514] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora proteina toplotnog šoka za lečenje karcinoma, npr. tanespimicinom (17-alilamino-17-demetoksigeldanamicin, takođe poznat kao KOS-953 i 17-AAG, dostupan kod SIGMA, i opisan u američkom patentu br.4.261.989); retaspimicinom (IPI504), ganetespibom (STA-9090); [6-hloro-9-(4-metoksi-3,5-dimetilpiridin-2-ilmetil)-9H-purin-2-il]amin (BIIB021 ili -CNF2024, CAS 848695-25-0); trans-4-[[2-(aminokarbonil)-5-[4,5,6,7-tetrahidro-6,6-dimetil-4-okso-3-(trifluorometil)-1H-indazol-1-il]fenil ]amino]cikloheksil glicin estrom (SNX5422 ili PF04929113, CAS 908115-27-5); 5-[2,4-dihidroksi-5-(1-metiletil)fenil]-N-etil-4-[4-(4-morfolinilmetil)fenil]-3-izoksazolkarboksamidom (AUI922, CAS 747412-49-3); ili 17-dimetilaminoetilamino-17-demetoksigeldanamicinom (17-DMAG).
[0515] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više HDAC inhibitora ili drugih epigenetskih modifikatora. Primeri HDAC inhibitora uključuju, bez ograničenja, voninostat (Zolinza<®>); romidepsin (Istodax<®>); treihostatin A (TSA); oksamflatin; vorinostat (Zolinza<®>, suberoilanilid hidroksamska kiselina); piroksamid (siberoil-3-aminopiridinamid hidroksamska kiselina); trapoksin A (RF-1023A); trapoksin B (RF-10238); ciklo[(αS,2S)-α-amino-η-okso-2-oksiranoktanoil-O-metil-D-tirozil-L-izoleucil-L-prolil] (Cyl-1); ciklo[(αS,2S)-α-amino-ηokso-2-oksiranoktanoil-O-metil-D-tirozil-L-izoleucil-(2S)-2-piperidinkarbonil] (Cyl-2); ciklični[L-alanil-D-alanil-(2S)-η-okso-L-α-aminooksiranoktanoil-D-prolil] (HC-toksin); ciklični[(αS,2S)-α-amino-η-okso-2-oksiranoktanoil-D-fenilalanil-L-leucil-(2S)-2-piperidinkarbonil] (WF-3161); hlamidocin ((S)-ciklični(2-metilalanil-L-fenilalanil-D-prolilη-okso-L-α-aminooksiranoktanoil); apicidin (ciklo(8-okso-L-2-aminodekanoil-1-metoksi-L-triptofil-L-izoleucil-D-2-piperidinkarbonil); romidepsin (Istodax<®>, FR-901228); 4-fenilbutirat; spiruhostatin A; milproin (valproična kiselina); entinostat (MS-275, N-(2-aminofenil)-4-[N-(piridin-3-il-metoksikarbonil)-amino-metil]-benzamid); depudecin (4,5:8,9-dianhidro1,2,6,7,11-pentadeoksi- D-treo-D-ido-undeka-1,6-dienitol); 4- (acetilamino)-N-(2-aminofenil)-benzamid (takođe poznat kao CI-994); N1-(2-aminofenil)-N8-fenil-oktandiamid (takođe poznat kao BML-210); 4-(dimetilamino)-N-(7-(hidroksiamino)-7-oksoheptil)benzamid (takođe poznat kao M344); (E)-3-(4-(((2-(1H-indol-3-il)etil)(2-hidroksietil)amino)-metil)fenil)-N-hidroksiakrilamid; panobinostat (Farydak<®>); mocetinostat, i belinostat (takođe poznat kao PXD101, Beleodaq<®>ili (2E)-N-hidroksi-3-[3-(fenilsulfamoil)fenil]prop-2-enamid) ili hidamid (takođe poznat kao CS055 ili HBI-8000, (E)-N-(2-amino-5-fluorofenil)-4-((3-(piridin-3-il)akrilamido)metil)benzamid). Ostali epigenetski modifikatori uključuju, bez ograničenja, inhibitore EZH2 (pojačivač zeste homolog 2), EED (razvoj embrionskog ektoderma) ili LSD1 (histon demetilaza 1A ili KDM1A specifična za lizin).
[0516] U još jednom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska, koriste se u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora indolamin-pirola 2,3-dioksigenaze (IDO), na primer, indoksimodom (takođe poznat kao NLG-8189), α-cikloheksil-5H-imidazo [5,1-a] izoindol-5-etanolom (takođe poznat kao NLG919) ili (4E)-4-[(3-hloro-4-fluoroanilino)-nitrosometiliden]-1,2,5-oksadiazol-3-aminom (takođe poznat kao INCB024360), za lečenje karcinoma.
Himerni antigenski receptori
[0517] Ovo otkriće predviđa jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere za primenu u kombinaciji sa usvojenim metodama imunoterapije i reagensima kao što su imunološke efektorske ćelije himernih antigenskih receptora (CAR), npr. T ćelije, ili himerne imunološke efektorske ćelije transdukovane sa TCR, npr. T ćelije. Ovaj odeljak opisuje tehnologiju CAR koja je generalno korisna u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, i opisuje CAR reagense, npr. ćelije i sastave i metode.
[0518] U načelu, aspekti ovog otkrića odnose se ili uključuju izolovani molekul nukleinske kiseline koji kodira himerni antigenski receptor (CAR), pri čemu CAR obuhvata domen vezivanja antigena (npr. antitelo ili fragment antitela, TCR ili TCR fragment) koji se vezuje za tumorski antigen kako je ovde opisano, transmembranski domen (npr. transmembranski domen opisan ovde) i intracelularni signalni domen (npr. intracelularni signalni domen opisan ovde) (npr. intracelularni signalni domen koji se sastoji od kostimulatornog domena (npr. kostimulatorni domen opisan ovde) i/ili primarnog signalnog domena (npr. primarni signalni domen opisan ovde). U drugim aspektima, ovo otkriće uključuje: ćelije domaćine koje sadrže gore navedene nukleinske kiseline i izolovane proteine kodirane takvim molekulima nukleinske kiseline. Konstrukti CAR nukleinske kiseline, kodirani proteini, koji sadrže vektore, ćelije domaćina, farmaceutske sastave i metode primene i tretmana u vezi sa ovim otkrićem detaljno su obelodanjeni u publikaciji međunarodne patentne prijave br.
WO2015142675.
[0519] U jednom aspektu, ovo otkriće se odnosi na izolovani molekul nukleinske kiseline koji kodira himerni antigenski receptor (CAR), pri čemu CAR obuhvata domen vezivanja antigena (npr. antitelo ili fragment antitela, TCR ili TCR fragment) koji se vezuje za antigen koji podržava tumor (npr. antigen koji podržava tumor kako je ovde opisano), transmembranski domen (npr. transmembranski domen opisan ovde) i intracelularni signalni domen (npr. intracelularni signalni domen opisan ovde) (npr. intracelularni signalni domen koji se sastoji od kostimulatornog domena (npr. kostimulatorni domen opisan ovde) i/ili primarnog signalnog domena (npr. primarni signalni domen opisan ovde). U nekim otelotvorenjima, antigen koji podržava tumor je antigen prisutan na stromalnoj ćeliji ili supresorskoj ćeliji izvedenoj iz mijeloida (MDSC). U drugim aspektima, obelodanjivanje sadrži polipeptide kodirane takvim nukleinskim kiselinama i ćelije domaćina koje sadrže takve nukleinske kiseline i/ili polipeptide.
[0520] Alternativno, aspekti obelodanjivanja odnose se na izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira himerni T ćelijski receptor (TCR) koji se sastoji od TCR alfa i/ili TCR beta promenljivog domena sa specifičnošću za ovde opisani antigen karcinoma. Vidi na primer, Dembic et al., Nature, 320, 232-238 (1986), Schumacher, Nat. Rev. Immunol., 2, 512-519 (2002), Kershaw et al., Nat. Rev. Immunol., 5, 928-940 (2005), Xue et al., Clin. Exp.
Immunol., 139, 167-172 (2005), Rossig et al., Mol. Ther., 10, 5-18 (2004), and Murphy et al., Immunity, 22, 403-414 (2005); (Morgan et al. J. Immunol., 171, 3287-3295 (2003), Hughes et al., Hum. Gene Ther., 16, 1-16 (2005), Zhao et al., J. Immunol., 174, 4415-4423 (2005), Roszkowski et al., Cancer Res., 65, 1570-1576 (2005), and Engels et al., Hum. Gene Ther., 16, 799-810 (2005); US2009/03046557. Takvi himerni TCR-ovi mogu prepoznati, na primer, antigene karcinoma kao što su MART-1, gp-100, p53 i NY-ESO-1, MAG A3/A6, MAGEA3, SSX2, HPV-16 E6 ili HPV-16 E7. U drugim aspektima, obelodanjivanje sadrži polipeptide kodirane takvim nukleinskim kiselinama i ćelije domaćina koje sadrže takve nukleinske kiseline i/ili polipeptide. Sekvence neograničavajućih primera različitih komponenti koje mogu biti deo CAR-a navedene su u Tabeli 11a, gde „aa“ označava aminokiseline, a „na“ nukleinske kiseline koje kodiraju odgovarajući peptid.
Tabela 11a. Sekvence različitih komponenti CAR (aa - sekvenca aminokiselina, na -sekvenca nukleinskih kiselina).
Ciljevi
[0521] U ovom obelodanjivanju navedene su ćelije, npr. imunološke efektorske ćelije (npr. T ćelije, NK ćelije), koje sadrže ili su u bilo kom trenutku sadržale gRNK molekul ili CRISPR sistem kao što je ovde opisano, koje su dalje dizajnirane da sadrže jedan ili više CAR koje usmeravaju imunološke efektorske ćelije na neželjene ćelije (npr. ćelije karcinoma). To se postiže putem domena vezivanja antigena na CAR koji je specifičan za antigen povezan sa karcinomom. Postoje dve klase antigena povezanih sa karcinomom (tumorski antigeni) koji mogu biti ciljani CAR-ovima iz ovog otkrića: (1) antigeni povezani sa karcinomom koji se eksprimiraju na površini ćelija karcinoma; i (2) antigeni povezani sa karcinomom koji su sami po sebi unutarćelijski, međutim, fragment takvog antigena (peptid) predstavljen je na površini ćelija karcinoma putem MHC (glavni kompleks histokompatibilnosti).
[0522] U nekim otelotvorenjima, tumorski antigen se bira između jednog ili više od: CD19; CD123; CD22; CD30; CD171; CS-1 (takođe se naziva CD2 podskup 1, CRACC, SLAMF7, CD319 i 19A24); C-tip molekul sličan lektinu-1 (CLL-1 ili CLECL1); CD33; varijanta III receptora epidermalnog faktora rasta (EGFRvIII); gangliozid G2 (GD2); gangliozid GD3 (aNeuSAc(2-8)aNeuSAc(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); član receptorske porodice maturacije B ćelija (BCMA); Tn antigen ((Tn Ag) ili (GalNAcα-Ser/Thr)); membranski antigen specifičan za prostatu (PSMA); receptor siroče 1 sličan receptoru tirozin kinaze (ROR1); tirozin kinaza 3 nalik na fms (FLT3); glikoprotein 72 povezan sa tumorom (TAG72); CD38; CD44v6; karcinoembrionalni antigen (CEA); molekul adhezije epitelnih ćelija (EPCAM); B7H3 (CD276); KIT (CD117); interleukin-13 receptorska podjedinica alfa-2 (IL-13Ra2 ili CD213A2); mezotelin; interleukin 11 receptor alfa (IL-11Ra); antigen matičnih ćelija prostate (PSCA); proteaza serin 21 (testisin ili PRSS21); receptor 2 faktora rasta vaskularnog endotela (VEGFR2); Lewis(Y) antigen; CD24; receptor beta faktora rasta izveden iz trombocita (PDGFR-beta); stadijum-specifični embrionalni antigen-4 (SSEA-4); CD20; folat receptor alfa; receptor tirozin-protein kinaze ERBB2 (Her2/neu); mucin 1, povezan sa ćelijskom površinom (MUC1); receptor epidermalnog faktora rasta (EGFR); molekul adhezije neuralnih ćelija (NCAM); prostaza; fosfataza prostatne kiseline (PAP); faktor elongacije 2 mutiran (ELF2M); efrin B2; alfa protein aktivacije fibroblasta (FAP); receptor faktora rasta 1 sličan insulinu (IGF-I receptor), karboanhidraza IX (CAIX); proteazom (prozom, makropain) podjedinica, beta tip, 9 (LMP2); glikoprotein 100 (gp100); fuzioni protein onkogena koji se sastoji od regiona klastera tačke prekida (BCR) i homologa 1 virusnog onkogena mišje leukemije Abelson (Abl) (bcr-abl); tirozinaza; efrin tip-A receptor 2 (EphA2); fukozil GM1; sijalil Lewis adhezioni molekul (sLe); gangliozid GM3 (aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); transglutaminaza 5 (TGS5); antigen povezan sa melanomom visoke molekulske težine (HMWMAA); o-acetil-GD2 gangliozid (OAcGD2); folatni receptor beta; tumor endotelni marker 1 (TEM1/CD248); tumor endotelni marker 7 povezan (TEM7R); klaudin 6 (CLDN6); receptor stimulišućeg hormona tiroidne žlezde (TSHR); G protein-spregnuti receptor klase C grupa 5, član D (GPRC5D); hromozom X otvoren okvir čitanja 61 (CXORF61); CD97; CD179a; anaplastična limfomska kinaza (ALK); polisijalinska kiselina; placenta-specifičan 1 (PLAC1); heksasaharidni deo globoH glikoceramida (GloboH); antigen diferencijacije mlečne žlezde (NY-BR-1); uroplakin 2 (UPK2); ćelijski receptor 1 virusa hepatitisa A (HAVCR1); adrenoceptor beta 3 (ADRB3); paneksin 3 (PANX3); G protein-spregnut receptor 20 (GPR20); kompleks limfocitnog antigena 6, lokus K 9 (LY6K); olfaktorni receptor 51E2 (OR51E2); TCR gama alternativni protein okvira čitanja (TARP); Vilmsov tumorski protein (WT1); antigen karcinoma/testisa 1 (NY-ESO-1); antigen karcinoma/testisa 2 (LAGE-1a); antigen 1 povezan sa melanomom (MAGE-A1); ETS translokacioni varijantni gen 6, smešten na hromozomu 12p (ETV6-AML); protein sperme 17 (SPA17); porodica X antigena, član 1A (XAGE1); ćelijski površinski receptor 2 koji vezuje angiopoetin (Tie 2); antigen-1 melanoma karcinoma testisa (MAD-CT-1); antigen-2 melanoma karcinoma testisa (MAD-CT-2); Fos-srodni antigen 1; tumorski protein p53 (p53); p53 mutant; prostein; preživljavanje; telomeraza; tumorski antigen karcinoma prostate-1 (PCTA-1 ili Galektin 8), antigen melanoma koji prepoznaju T ćelije 1 (MelanA ili MART1); mutant sarkoma pacova (Ras); humana reverzna transkriptaza telomeraze (hTERT); prelomne tačke translokacije sarkoma; inhibitor apoptoze melanoma (ML-IAP); ERG (transmembranska proteaza, serin 2 (TMPRSS2) ETS fuzioni gen); N-acetil glukozaminiltransferaza V (NA17); upareni boks protein Pax-3 (PAX3); androgeni receptor; ciklin B1; v-myc ptičja mielocitomatoza virusni homolog izveden iz onkogenog neuroblastoma (MYCN); član C Ras porodice genskih homologa (RhoC); protein 2 povezan sa tirozinazom (TRP-2); citohrom P4501B1 (CYP1B1); CCCTC-vezujući faktor nalik (proteinu cinkovog prsta) (BORIS ili brat regulatora utisnutih mesta), antigen karcinoma skvamoznih ćelija prepoznat od strane T ćelija 3 (SART3); upareni boks protein Pax-5 (PAX5); proakrozin vezujući protein sp32 (OY-TES1); protein tirozin kinaza specifična za limfocite (LCK); sidreni protein kinaze 4 (AKAP-4); sinovijalni sarkom, X prelomna tačka 2 (SSX2); Receptor za napredne krajnje proizvode glikolacije (RAGE-1); bubrežni ubikvitarni 1 (RU1); bubrežni ubikvitarni 2 (RU2); legumain; humani papiloma virus E6 (HPV E6); humani papiloma virus E7 (HPV E7); intestinalna karboksil esteraza; protein toplotnog šoka 70-2 mutiran (mut hsp70-2); CD79a; CD79b; CD72; receptor 1 nalik imunoglobulinu povezan sa leukocitima (LAIR1); Fc fragment IgA receptora (FCAR ili CD89); podfamilija receptora A leukocitnog imunoglobulina, član 2 (LILRA2); član porodice f sličan molekulu CD300 (CD300LF); C-tip lektinskog domena član A porodice 12 (CLEC12A); antigen 2 stromalnih ćelija koštane srži (BST2); modul sličan EGF-u koji sadrži hormon sličan mucinu sličan receptoru 2 (EMR2); limfocitni antigen 75 (LY75); glipikan-3 (GPC3); Fc 5 nalik receptoru (FCRL5); i imunoglobulin polipeptid 1 sličan lambdi (IGLL1).
[0523] CAR opisan u ovom dokumentu može da sadrži domen vezivanja antigena (npr. antitelo ili fragment antitela, TCR ili fragment TCR-a) koji se vezuje za antigen koji podržava tumor (npr. antigen koji podržava tumor kako je ovde opisano). U nekim otelotvorenjima, antigen koji podržava tumor je antigen prisutan na stromalnoj ćeliji ili supresorskoj ćeliji izvedenoj iz mijeloida (MDSC). Stromalne ćelije mogu da luče faktore rasta kako bi promovisale deobu ćelija u mikrookruženju. MDSC ćelije mogu da inhibiraju proliferaciju i aktivaciju T ćelija. Bez namere vezivanja određenom teorijom, u nekim otelotvorenjima, ćelije koje eksprimiraju CAR uništavaju ćelije koje podržavaju tumor, čime indirektno inhibiraju rast ili preživljavanje tumora.
[0524] U otelotvorenjima, antigen stromalnih ćelija se bira između jednog ili više: antigena stromalnih ćelija koštane srži 2 (BST2), proteina aktivacije fibroblasta (FAP) i tenascina. U jednom otelotvorenju, FAP-specifično antitelo je, takmiči se za vezivanje sa, ili ima iste CDR kao, sibrotuzumab. U otelotvorenjima, MDSC antigen se bira između jednog ili više: CD33, CD11b, C14, CD15 i CD66b. Shodno tome, u nekim otelotvorenjima, antigen koji podržava tumor se bira između jednog ili više: antigena 2 stromalnih ćelija koštane srži (BST2), proteina aktivacije fibroblasta (FAP) ili tenascina, CD33, CD11b, C14, CD15 i CD66b.
Strukture domena koji se vezuju za antigen
[0525] U nekim otelotvorenjima, domen koji se vezuje za antigena kodiranog molekula CAR obuhvata antitelo, fragment antitela, scFv, Fv, Fab, (Fab')2, jednodomensko antitelo (SDAB), VH ili VL domen, kamelidni VHH domen ili dvofunkcionalno (npr. bi-specifično) hibridno antitelo (npr. Lanzavecchia et al., Eur. J. Imunol.17, 105 (1987)).
[0526] U nekim slučajevima, scFvs se može pripremiti prema metodi poznatoj u struci (videti, na primer, Bird et al., (1988) Science 242:423-426 i Huston et al., (1988) Proc. Natl. Akad. Sci. USA 85:5879-5883). ScFv molekuli se mogu proizvesti povezivanjem VH i VL regiona koristeći fleksibilne polipeptidne linkere. Molekuli scFv sadrže linker (npr. Ser-Gly linker) sa optimizovanom dužinom i/ili sastavom aminokiselina. Dužina linkera može u velikoj meri uticati na to kako se varijabilni regioni scFv savijaju i međusobno deluju. U stvari, ako se koristi kratki polipeptidni linker (npr. između 5-10 aminokiselina), sprečava se savijanje unutar lanca. Preklapanje između lanaca je takođe potrebno da bi se spojila dva promenljiva regiona kako bi se formiralo funkcionalno mesto vezivanja epitopa. Za primere orijentacije i veličine linkera pogledajte npr. Hollinger et al.1993 Proc Natl Acad. Sci. U.S.A.90:6444-6448, američka publikacija patentnih prijava br.2005/0100543, 2005/0175606, 2007/0014794, i publikacija PCT br. WO2006/020258 i WO2007/024715.
[0527] ScFv može da sadrži linker od najmanje 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 ili više aminokiselinskih ostataka između njegovih VL i VH regiona. Sekvenca linkera može da sadrži bilo koju prirodnu aminokiselinu. U nekim otelotvorenjima, sekvenca linkera obuhvata aminokiseline glicin i serin. U drugom otelotvorenju, sekvenca linkera se sastoji od skupova ponavljanja glicina i serina kao što su (Gly4Ser)n, gde je n pozitivan ceo broj jednak ili veći od 1 (SEQ ID NO: 217). U jednom otelotvorenju, linker može biti (Gly4Ser)4(SEQ ID NO: 215) ili (Gly4Ser)3(SEQ ID NO: 216). Varijacije u dužini linkera mogu zadržati ili poboljšati aktivnost, što dovodi do superiorne efikasnosti u studijama aktivnosti.
[0528] U drugom aspektu, domen vezivanja za antigen je receptor T ćelija („TCR“), ili njegov fragment, na primer, jednolančani TCR (scTCR). Metode za izradu takvih TCR poznate su u struci. Vidi, npr. Willemsen RA et al, Gene Therapy 7: 1369-1377 (2000);
Zhang T et al, Cancer Gene Ther 11: 487-496 (2004); Aggen et al, Gene Ther.19(4):365-74 (2012). Na primer, može se napraviti scTCR koji sadrži gene Vα i Vβ iz klona T ćelije povezanog linkerom (npr. fleksibilni peptid). Ovaj pristup je veoma koristan za cilj povezan sa rakom koji je sam po sebi intracelularni, međutim, fragment takvog antigena (peptida) na površini ćelija raka predstavlja MHC.
[0529] IU određenim otelotvorenjima, kodirani domen vezivanja antigena ima afinitet vezivanja KD od 10<-4>M do 10<-8>M.
[0530] U jednom otelotvorenju, kodirani molekul CAR obuhvata domen za vezivanje antigena koji ima afinitet vezivanja KD od 10<-4>M do 10<-8>M, npr.10<-5>M do 10<-7>M, npr.10<-6>M ili 10<-7>M, za ciljni antigen. U jednom otelotvorenju, domen za vezivanje antigena ima afinitet vezivanja koji je najmanje pet puta, 10 puta, 20 puta, 30 puta, 50 puta, 100 puta ili 1000 puta manji od referentnog antitela, npr. antitela opisanog u ovom dokumentu. U jednom otelotvorenju, kodirani domen za vezivanje antigena ima afinitet vezivanja najmanje 5 puta manji od referentnog antitela (npr. antitela iz kojeg je izveden domen za vezivanje antigena). U jednom aspektu, takvi fragmenti antitela su funkcionalni u smislu da pružaju biološki odgovor koji može uključivati, ali nije ograničen na, aktivaciju imunološkog odgovora, inhibiciju nastanka prenosa signala iz njegovog ciljnog antigena, inhibiciju aktivnosti kinaze i slično, što će razumeti stručnjak. U jednom aspektu, domen za vezivanje antigena CAR je fragment scFv antitela koji je humanizovan u poređenju sa mišjom sekvencom scFv iz koje je izveden.
[0531] U jednom aspektu, domen za vezivanje antigena CAR iz otkrića (npr. scFv) kodiran je molekulom nukleinske kiseline čija je sekvenca kodonski optimizovana za ekspresiju u ćeliji sisara. U jednom aspektu, cela konstrukcija CAR otkrića je kodirana molekulom nukleinske kiseline čija je cela sekvenca kodonski optimizovana za ekspresiju u ćeliji sisara.
Optimizacija kodona se odnosi na otkriće da je učestalost pojave sinonimnih kodona (tj. kodona koji kodiraju istu aminokiselinu) u kodiranju DNK pristrasna kod različitih vrsta. Takva degeneracija kodona omogućava da se identičan polipeptid kodira različitim nukleotidnim sekvencama. Različite metode optimizacije kodona su poznate u struci i uključuju, npr. metode obelodanjene najmanje u američkim patentima 5.786.464 i 6.114.148.
Domeni vezivanja antigena (i ciljani antigeni)
[0532] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD19 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR CAR, antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen opisan u, npr. publikaciji PCT WO2012/079000; publikaciji PCT WO2014/153270; kod Kochenderfer, J.N. et al., J. Imunother. 32 (7), 689-702 (2009); Kochenderfer, J.N., et al., Blood, 116 (20), 4099-4102 (2010); publikaciji PCT WO2014/031687; Bejcek, Cancer Research, 55, 2346-2351, 1995; ili američkom patentu br.7,446,190.
[0533] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na mezotelin je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u, npr. publikaciji PCT WO2015/090230. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na mezotelin je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u, npr. publikaciji PCT WO1997/025068, WO1999/028471, WO2005/014652, WO2006/099141, WO2009/045957, WO2009/068204, WO2013/142034, WO2013/040557 ili WO2013/063419. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na mezotelin je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u WO/2015/090230.
[0534] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD 123 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u, npr. publikaciji PCT WO2014/130635. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD123 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u, npr. publikaciji PCT WO2014/138805, WO2014/138819, WO2013/173820, WO2014/144622, WO2001/66139, WO2010/126066, WO2014/144622 ili US2009/0252742. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD 123 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u WO/2016/028896.
[0535] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na EGFRvIII je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u, npr. WO/2014/130657.
[0536] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD22 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Haso et al., Blood, 121(7): 1165-1174 (2013); Wayne et al., Clin Cancer Res 16(6): 1894-1903 (2010); Kato et al., Leuk Res 37(1):83-88 (2013); Creative BioMart (creativebiomart.net): MOM-18047-S(P).
[0537] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CS-1 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ovi elotuzumaba (BMS), vidi npr. Tai et al., 2008, Blood 112(4): 1329-37; Tai et al., 2007, Blood.110(5):1656-63.
[0538] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CLL-1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela dostupnog iz R&D, ebiosciences, Abcam, na primer, PE-CLL1-hu kat. br.353604 (BioLegend); i PE-CLL1 (CLEC12A) kat. br.562566 (BD). U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CLL-1 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u WO/2016/014535.
[0539] IU jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD33 je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela opisanog u, npr. Bross et al., Clin Cancer Res 7(6): 1490-1496 (2001) (Gemtuzumab Ozogamicin, hP67.6),Caron et al., Cancer Res 52(24):6761-6767 (1992) (Lintuzumab, HuM195), Lapusan et al., Invest New Drugs 30(3):1121-1131 (2012) (AVE9633), Aigner et al., Leukemia 27(5): 1107-1115 (2013) (AMG330, CD33 BiTE), Dutour et al., Adv hematol 2012:683065 (2012), and Pizzitola et al., Leukemia doi:10.1038/Lue.2014.62 (2014). U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD33 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u WO/2016/014576.
[0540] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GD2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela opisanog u, npr. Mujoo et al., Cancer Res.47(4):1098-1104 (1987); Cheung et al., Cancer Res 45(6):2642-2649 (1985), Cheung et al., J Clin Oncol 5(9):1430-1440 (1987), Cheung et al., J Clin Oncol 16(9):3053-3060 (1998), Handgretinger et al., Cancer Immunol Immunother 35(3):199-204 (1992). U nekim otelotvorenjima, domen vezivanja antigena u odnosu na GD2 je deo antitela koji se vezuje za antigen izabran između mAb 14.18, 14G2a, ch14.18, hu14.18, 3F8, hu3F8, 3G6, 8B6, 60C3, 10B8, ME36.1 i 8H9, vidi npr. WO2012033885, WO2013040371, WO2013192294, WO2013061273, WO2013123061, WO2013074916 i WO201385552. U nekim otelotvorenjima, domen vezivanja antigena u odnosu na GD2 je deo za vezivanje antigena antitela opisan u američkoj publikaciji br.20100150910 ili PCT publikaciji br. WO 2011160119.
[0541] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na BCMA je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. WO2012163805, WO200112812 i WO2003062401. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na BCMA je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela, fragmenta koji se vezuje za antigen ili CAR opisan u WO/2016/014565.
[0542] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na Tn antigen je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US8.440.798, Brooks et al., PNAS 107(22):10056-10061 (2010), and Stone et al., Oncolmmunology 1(6):863-873(2012).
[0543] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na PSMA je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Parker et al., Protein Expr Purif 89(2):136-145 (2013), US 20110268656 (J591 ScFv); Frigerio et al, European J Cancer 49(9):2223-2232 (2013) (scFvD2B); WO 2006125481 (mAbs 3/A12, 3/E7 i 3/F11) i jednolančani fragmenti antitela (scFv A5 i D7).
[0544] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na ROR1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Hudecek et al., Clin Cancer Res 19(12):3153-3164 (2013); WO 2011159847; i US20130101607.
[0545] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na FLT3 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. WO2011076922, US5777084, EP0754230, US20090297529 i nekoliko komercijalnih kataloških antitela (R&D, ebiosciences, Abeam).
[0546] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na TAG72 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Hombach et al., Gastroenterology 113(4):1163-1170 (1997); i Abeam ab691.
[0547] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na FAP je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Ostermann et al., Clinical Cancer Research 14:4584-4592 (2008) (FAP5), američkoj patentnoj publikaciji br.2009/0304718; sibrotuzumab (vidi npr. Hofheinz et al., Oncology Research and Treatment 26(1), 2003); i Tran et al., J Exp Med 210(6):1125-1135 (2013).
[0548] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD38 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, daratumumaba (videti, npr. Groen et al., Blood 116(21):1261-1262 (2010); MOR202 (vidi, npr. US 8.263.746); ili antitela opisana u US 8.362.211.
[0549] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD44v6 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Casucci et al., Blood 122(20):3461-3472 (2013).
[0550] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CEA je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Chmielewski et al., Gastoenterology 143(4):1095-1107 (2012).
[0551] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na EpCAM-a je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela izabranog između MT110, EpCAM-CD3 bispecifičnog At (vidi, npr. clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00635596); Edrecolomab;
3622W94; ING-1; i adekatumumab (MT201).
[0552] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na PRSS21 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u američkom patentu br.8.080.650.
[0553] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na B7H3 je deo za vezivanje antigena, npr. CDR, antitela MGA271 (Macrogenics).
[0554] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na KIT je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US7915391, US20120288506 i nekoliko komercijalnih kataloških antitela.
[0555] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na IL-13Ra2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. WO2008/146911, WO2004087758, nekoliko antitela komercijalnog kataloga i WO2004087758.
[0556] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD30 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US7090843 B1 i EP0805871.
[0557] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GD3 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US7253263; US 8.207.308; US 20120276046; EP1013761; WO2005035577; i US6437098.
[0558] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD171 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Hong et al., J Immunother 37(2):93-104 (2014).
[0559] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na IL-11Ra je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela dostupnog od Abeam (kat. br. ab55262) ili Novus Biologicals (kat. br. EPR5446). U drugom otelotvorenju, domen koji se vezuje za antigen ponovo IL-11Ra je peptid, vidi, npr. Huang et al., Cancer Res 72(1):271-281 (2012).
[0560] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na PSCA je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Morgenroth et al., Prostate 67(10):1121-1131 (2007) (scFv 7F5); Nejatollahi et al., J of Oncology 2013(2013), article ID 839831 (scFv C5-II); i američkoj patentnoj publikaciji br.20090311181.
[0561] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na VEGFR2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Chinnasamy et al., J Clin Invest 120(11):3953-3968 (2010).
[0562] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na LewisY-a je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Kelly et al., Cancer Biother Radiopharm 23(4):411-423 (2008) (hu3S193 Ab (scFvs)); Dolezal et al., Protein Engineering 16(1):47-56 (2003) (NC10 scFv).
[0563] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD24 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Maliar et al., Gastroenterology 143(5):1375-1384 (2012).
[0564] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na PDGFR-beta je deo koji vezuje antigen, npr. CDR, antitela Abeam ab32570.
[0565] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na SSEA-4 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela MC813 (ćelijska signalizacija) ili drugih komercijalno dostupnih antitela.
[0566] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD20 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela rituksimab, ofatumumab, okrelizumab, veltuzumab ili GA101.
[0567] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na folatni receptor alfa je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela IMGN853, ili antitela opisanog u US20120009181; US4851332, LK26: US5952484.
[0568] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na ERBB2 (Her2/neu) je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela trastuzumab ili pertuzumab.
[0569] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na MUC1 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela SAR566658.
[0570] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na eGFR je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela cetuksimab, panitumumab, zalutumumab, nimotuzumab ili matuzumab.
[0571] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na NCAM-a je deo vezivanja antigena, npr. CDR, klona antitela 2-2B: MAB5324 (EMD Millipore).
[0572] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na Ephrin B2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Abengozar et al., Blood 119(19):4565-4576 (2012).
[0573] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na IGF-I receptora je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US8344112 B2; EP2322550 A1; WO 2006/138315 ili PCT/US2006/022995.
[0574] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CAIX je deo vezivanja antigena, npr. CDR, klona antitela 303123 (R&D Systems).
[0575] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na LMP2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US7.410.640 ili US20050129701.
[0576] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na gp100 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela HMB45, NKIbetaB ili antitela opisanog u WO2013165940 ili US20130295007
[0577] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na tirozinazu je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US5843674; ili US 19950504048.
[0578] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na EphA2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Yu et al., Mol Ther 22(1):102-111 (2014).
[0579] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GD3 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US7253263; US 8.207.308; US 20120276046; EP1013761 A3; 20120276046; WO2005035577; ili US6437098.
[0580] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na fukozil GM1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US20100297138; ili WO2007/067992.
[0581] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na sLe je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela G193 (za lewis Y), vidi Scott AM et al, Cancer Res 60: 3254-61 (2000), takođe opisano kod Neeson et al, J Immunol May 2013190 (Meeting Abstract Supplement) 177.10.
[0582] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GM3 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela CA 2523449 (mAb 14F7).
[0583] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na HMWMAA je deo koji vezuje antigen, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Kmiecik et al., Oncoimmunology 3(1):e27185 (2014) (PMID: 24575382) (mAb9.2.27); US6528481; WO2010033866; ili US 20140004124.
[0584] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na o-acetil-GD2 je deo za vezivanje antigena, npr. CDR, antitela 8B6.
[0585] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na TEM1/CD248 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Marty et al., Cancer Lett 235(2):298-308 (2006); Zhao et al., J Immunol Methods 363(2):221-232 (2011).
[0586] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CLDN6 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela IMAB027 (Ganymed Pharmaceuticals), vidi npr. clinicaltrial.gov/show/NCT02054351.
[0587] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na TSHR je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr., US8.603.466; US8.501.415; ili US8.309.693.
[0588] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GPRC5D je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela FAB6300A (R&D Systems); ili LS-A4180 (Lifespan Biosciences).
[0589] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD97 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. US6.846.911; de Groot et al., J Immunol 183(6):4127-4134 (2009); ili antitela od R&D:MAB3734.
[0590] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na ALK je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Mino-Kenudson et al., Clin Cancer Res 16(5):1561-1571 (2010).
[0591] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na polisijalične kiseline je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Nagae et al., J Biol Chem 288(47):33784-33796 (2013).
[0592] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na PLAC1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela opisanog u, npr. Ghods et al., Biotechnol Appl Biochem 2013 doi:10.1002/bab.1177.
[0593] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GloboH je deo antitela koji se vezuje za antigen VK9; ili antitelo opisano u, npr. Kudryashov V et al, Glycoconj J.15(3):243-9 ( 1998), Lou et al., Proc Natl Acad Sci USA 111(7):2482-2487 (2014) ; MBr1: Bremer E-G et al. J Biol Chem 259:14773-14777 (1984).
[0594] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na NY-BR-1 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ovi antitela opisani u, npr. ager et al., Appl Immunohistochem Mol Morphol 15(1):77-83 (2007).
[0595] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na WT-1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. Dao et al., Sci Transl Med 5(176):176ra33 (2013); ili WO2012/135854.
[0596] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na MAGE-A1 je deo koji vezuje antigen, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. Willemsen et al., J Immunol 174(12):7853-7858 (2005) (TCR-like scFv).
[0597] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na protein sperme 17 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ova antitela opisanog u, npr. Song et al., Target Oncol 2013 Aug 14 (PMID: 23943313); Song et al., Med Oncol 29(4):2923-2931 (2012).
[0598] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na Tie 2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela AB33 (Cell Signalling Technology).
[0599] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na MAD-CT-2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. PMID: 2450952; US7635753.
[0600] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na antigen 1 povezan sa Fos-om je deo za vezivanje antigena, npr. CDR-ovi antitela 12F9 (Novus Biologicals).
[0601] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na MelanA/MART1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u EP2514766 A2; ili US 7.749.719.
[0602] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na tačke prekida translokacije sarkoma je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. Luo et al, EMBO Mol. Med.4(6):453-461(2012).
[0603] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na TRP-2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. Wang et al, J Exp Med.
184(6):2207-16 (1996).
[0604] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CYP1B1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela opisanog u, npr. Maecker et al, Blood 102 (9): 3287-3294 (2003).
[0605] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na RAGE-1 je deo koji vezuje antigen, npr. CDR-ovi antitela MAB5328 (EMD Millipore).
[0606] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na reverznu transkriptazu humane telomeraze je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ovi antitela, kat. br.: LS-B95-100 (Lifespan Biosciences)
[0607] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na intestinalnu karboksil esterazu je deo koji vezuje antigen, npr. CDRovi antitela 4F12, kat. br.: LS-B6190-50 (Lifespan Biosciences).
[0608] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na mut hsp70-2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela Lifespan Biosciences, monoklonalno, kat. br.: LS-C133261-100 (Lifespan Biosciences).
[0609] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD79a je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela Anti-CD79a [HM47/A9] (ab3121), dostupnog od Abcam-a; antitelo CD79A Antitelo br.3351 dostupno od Cell Signalling Technology; ili antitelo HPA017748 - Anti-CD79A antitelo proizvedeno kod zeca, dostupno od Sigma Aldrich.
[0610] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD79b je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ovi antitela polatuzumab vedotin, anti-CD79b opisanog u Doman et al., "Therapeutic potential of an anti-CD79b antibody-drug conjugate, anti-CD79bvc-MMAE, for the treatment of non-Hodgkin lymphoma" Blood.2009 Sep 24;114(13):2721-9. doi: 10.1182/blood-2009-02-205500. Epub 2009 Jul 24, ili biospecifično antitelo Anti-CD79b/CD3 opisano u "4507 Pre-Clinical Characterization of T Cell-Dependent Bispecific Antibody Anti-CD79b/CD3 As a Potential Therapy for B Cell Malignancies" Abstracts of 56th ASH Annual Meeting and Exposition, San Francisco, CA December 6-9 2014.
[0611] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD72 je deo vezivanja antigena, npr. CDR-ovi antitela J3-109 opisanog u Myers, and Uckun, "An anti-CD72 immunotoxin against therapy-refractory B-lineage acute lymphoblastic leukemia." Leuk Lymphoma. 1995 Jun; 18(1-2):119-22, ili anti-CD72 (10D6.8.1, mIgG1) opisano kod Polson et al., "Antibody-Drug Conjugates for the Treatment of Non-Hodgkin's Lymphoma: Target and Linker-Drug Selection" Cancer Res March 15, 200969; 2358. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na LAIR1 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ovi antitela ANT-301 LAIR1, dostupnog od ProSpec; ili antihumanog CD305 (LAIR1) antitela, dostupnog od BioLegend.
[0612] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na FCAR je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR antitela CD89/FCARAntibody (kat. br.10414-H08H), dostupno od Sino Biological Inc.
[0613] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na LILRA2 je deo vezivanja antigena, npr. CDR monoklonskog antitela LILRA2 (M17), klona 3C7, dostupnog od Abnove, ili mišjeg anti-LILRA2 antitela, monoklonskog (2D7), dostupnog od Lifespan Biosciences.
[0614] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CD300LF je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela mišjeg antitela molekula 1 sličnog Anti-CMRF35, monoklonalnog [UP-D2], dostupnog u kompaniji BioLegend, ili antitela pacova molekula 1 sličnog Anti-CMRF35, monoklonalnog [234903], dostupnog u kompaniji R&D Systems.
[0615] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na CLEC12A je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela Bispecific T cell Engager (BiTE) scFv-antitelo i ADC opisanog u Noordhuis et al., "Targeting of CLEC12A In Acute Myeloid Leukemia by Antibody-Drug-Conjugates and Bispecific CLL-1xCD3 BiTE Antibody" 53rd ASH Annual Meeting and Exposition, December 10-13, 2011, and MCLA-117 (Merus).
[0616] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na BST2 (takođe nazvan CD317) je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela miša Anti-CD317, monoklonalnog [3H4], dostupnog kod Antibodies-Online ili mišjeg anti-CD317 antitela, monoklonalnog [696739], dostupnog kod R&D Systems.
[0617] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na EMR2 (takođe nazvan CD312) je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela miša Anti-CD312, monoklonskog[LS-B8033] dostupnog od Lifespan Biosciences, ili antitela miša Anti-CD312, monoklonskog[494025] dostupnog od R&D Systems.
[0618] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na LY75 je deo vezivanja antigena, npr. CDR, antitela protiv limfocitnog antigena miša 75, monoklonalnog [HD30] dostupnog od EMD Millipore ili antitela protiv limfocitnog antigena miša 75, monoklonalnog [A15797] dostupnog od Life Technologies.
[0619] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na GPC3 je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela hGC33 opisanog u Nakano K, Ishiguro T, Konishi H, et al. Generation of a humanized anti-glypican 3 antibody by CDR grafting and stability optimization. Anticancer Drugs.2010 Nov;21(10):907-916, ili MDX-1414, HN3, ili YP7, pri čemu su sva tri opisana kod Feng et al., "Glypican-3 antibodies: a new therapeutic target for liver cancer." FEBS Lett.2014 Jan 21;588(2):377-82.
[0620] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na FCRL5 je deo vezivanja antigena, npr. CDR anti-FcRL5 antitela opisanog u Elkins et al., "FcRL5 as a target of antibody-drug conjugates for the treatment of multiple myeloma" Mol Cancer Ther.2012 Oct;11(10):2222-32. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na FCRL5 je deo vezivanja antigena, npr. CDR anti-FcRL5 antitela opisanog u, na primer, WO2001/038490, WO/2005/117986, WO2006/039238, WO2006/076691, WO2010/114940, WO2010/120561 ili WO2014/210064.
[0621] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena u odnosu na IGLL1 je deo vezivanja antigena, npr. CDR antitela mišjeg antiimunoglobulinskog polipeptida sličnog lambdi 1, monoklonalnog [AT1G4] dostupnog od Lifespan Biosciences, antitela mišjeg antiimunoglobulinskog polipeptida sličnog lambdi 1, monoklonalnog [HSL11] dostupnog od BioLegend.
[0622] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena obuhvata jedan, dva, tri (npr. sva tri) CDR-a teškog lanca, HC CDR1, HC CDR2 i HC CDR3, iz gore navedenog antitela, i/ili jedan, dva, tri (npr. sva tri) CDR-a lakog lanca, LC CDR1, LC CDR2 i LC CDR3, iz gore navedenog antitela. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena obuhvata varijabilni region teškog lanca i/ili varijabilni region lakog lanca gore navedenog antitela.
[0623] U drugom aspektu, domen vezivanja antigena obuhvata humanizovano antitelo ili fragment antitela. U nekim aspektima, neljudsko antitelo je humanizovano, gde su specifične sekvence ili regioni antitela modifikovani kako bi se povećala sličnost sa antitelima koja se prirodno proizvode u čoveku ili njihovim fragmentima. U jednom aspektu, domen vezivanja antigena je humanizovan.
[0624] U jednom otelotvorenju, antigen-vezujući domen CAR, npr. CAR eksprimiran ćelijom iz otkrića, vezuje se za CD19. CD19 se nalazi na B ćelijama tokom diferencijacije loze od pro/pre-B ćelijske faze do terminalno diferencirane plazma ćelijske faze. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je mišji scFv domen koji se vezuje za humani CD19, npr. domen vezivanja antigena CTL019 (npr. SEQ ID NO: 218). U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je humanizovano antitelo ili fragment antitela, npr. scFv domen, izveden iz mišjeg CTL019 scFv. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je humano antitelo ili fragment antitela koji se vezuje za humani CD19. Primerni scFv domeni (i njihove sekvence, npr. CDR, VL i VH sekvence) koji se vezuju za CD19 dati su u Tabeli 12a. Sekvence scFv domena date u Tabeli 12a uključuju varijabilni region lakog lanca (VL) i varijabilni region teškog lanca (VH). VL i VH su pričvršćeni linkerom koji se sastoji od sekvence GGGGSGGGGGGGS (SEQ ID NO: 216), npr. u sledećoj orijentaciji: VL-linker-VH.
Tabela 12a. Antigen vezujući domeni koji vezuju CD19
[0625] Sekvence CDR sekvenci scFv domena CD 19 antigen vezujućih domena date u Tabeli 12a prikazane su u Tabeli 12b za varijabilne domene teškog lanca i u Tabeli 12c za varijabilne domene lakog lanca. „ID“ označava odgovarajući SEQ ID NO za svaki CDR.
Tabela 12b. CDR-ovi varijabilnog domena teškog lanca
Tabela 12c. CDR-ovi varijabilnog domena lakog lanca
[0626] U jednom otelotvorenju, antigen vezujući domen obuhvata anti-CD19 antitelo ili njegov fragment, npr. scFv. Na primer, antigen vezujući domen obuhvata varijabilni teški lanac i varijabilni laki lanac naveden u Tabeli 12d. Sekvenca linkera koja spaja varijabilne teške i varijabilne lake lance može biti bilo koja od sekvenci linkera opisanih u ovom dokumentu, ili alternativno, može biti GSTSGSGKPGSGEGSTKG (SEQ ID NO: 233). Varijabilni region lakog lanca i varijabilni region teškog lanca scFv mogu biti, npr. u bilo kojoj od sledećih orijentacija: varijabilni region lakog lanca - linker - varijabilni region teškog lanca ili varijabilni region teškog lanca - linker - varijabilni region lakog lanca.
Tabela 12d. Dodatni domeni za vezivanje anti-CD 19 antitela
[0627] U jednom otelotvorenju, domen vezivanja CD19 obuhvata jedan ili više (npr. sva tri) regiona komplementarnog određivanja lakog lanca 1 (LC CDR1), regiona komplementarnog određivanja lakog lanca 2 (LC CDR2) i regiona komplementarnog određivanja lakog lanca 3 (LC CDR3) ovde opisanog domena vezivanja CD19, npr. u Tabelama 12a ili 15, i/ili jedan ili više (npr. sva tri) regiona komplementarnog određivanja teškog lanca 1 (HC CDR1), regiona komplementarnog određivanja teškog lanca 2 (HC CDR2) i regiona komplementarnog određivanja teškog lanca 3 (HC CDR3) ovde opisanog domena vezivanja CD19, npr. u Tabelama 12a ili 16. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja CD19 se sastoji od jednog, dva ili svih LC CDR1, LC CDR2 i LC CDR3 bilo kojih aminokiselinskih sekvenci kao što je predviđeno u Tabeli 12c, i jednog, dva ili svih HC CDR1, HC CDR2 i HC CDR3 bilo kojih aminokiselinskih sekvenci kao što je predviđeno u Tabeli 12b.
[0628] Bilo koji poznati CD 19 CAR, npr., domen za vezivanje antigena CD 19 bilo kog poznatog CD 19 CAR, u struci se može koristiti u skladu sa trenutnim otkrićem za konstruisanje CAR. Na primer, LG-740; CD19 CAR opisan u američkom patentu br.
8.399.645; američkom patentu br.7.446.190; Xu et al., Leuk Lymphoma. 2013 54(2):255-260(2012); Cruz et al., Blood 122(17):2965-2973 (2013); Brentjens et al., Blood, 118(18):4817-4828 (2011); Kochenderfer et al., Blood 116(20):4099-102 (2010);
Kochenderfer et al., Blood 122 (25):4129-39(2013); and 16th Annu Meet Am Soc Gen Cell Ther (ASGCT) (May 15-18, Salt Lake City) 2013, Abst 10. U jednom otelotvorenju, antigen vezujući domen u odnosu na CD19 je deo koji se vezuje za antigen, npr. CDR-ove CAR, antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen kao što je opisano, npr. u publikaciji PCT WO2012/079000; publikaciji PCT WO2014/153270; Kochenderfer, J.N. et al., J.
Imunother. 32 (7), 689-702 (2009); Kochenderfer, J.N., et al., Blood, 116 (20), 4099-4102 (2010); publikaciji PCT WO2014/031687; Bejcek, Cancer Research, 55, 2346-2351, 1995; ili američkom patentu br.7.446.190.
[0629] U jednom otelotvorenju, antigen-vezujući domen CAR, npr. CAR eksprimiran ćelijom iz otkrića, vezuje se za BCMA. BCMA je prvenstveno eksprimirana u zrelim B limfocitima. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je mišji scFv domen koji se vezuje za humani BCMA. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je humanizovano antitelo ili fragment antitela, npr. scFv domen koji vezuje humani BCMA. U jednom otelotvorenju, domen vezivanja antigena je humano antitelo ili fragment antitela koji se vezuje za humani BCMA. U otelotvorenjima, primerne BCMA konstrukcije CAR se generišu korišćenjem VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2012/0163805. U otelotvorenjima, dodatni primerni BCMA CAR konstrukti se generišu korišćenjem VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2016/014565. U otelotvorenjima, dodatni primerni BCMA CAR konstrukti se generišu korišćenjem VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2014/122144. U otelotvorenjima, dodatni primerni BCMA CAR konstrukti se generišu korišćenjem molekula CAR, i/ili VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2016/014789. U otelotvorenjima, dodatni primerni BCMA CAR konstrukti se generišu korišćenjem molekula CAR, i/ili VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2014/089335. U otelotvorenjima, dodatni primerni BCMA CAR konstrukti se generišu korišćenjem molekula CAR, i/ili VH i VL sekvenci iz publikacije PCT WO2014/140248.
[0630] Bilo koji poznati BCMA CAR, npr. BMCA antigen vezujući domen bilo kog poznatog BCMA CAR, u struci se može koristiti u skladu sa trenutnim otkrićem. Na primer, oni opisani u ovom dokumentu.
Primeri CAR molekula
[0631] U jednom aspektu, CAR, npr. CAR eksprimiran ćelijom otkrića, sastoji se od molekula CAR koji se sastoji od antigen vezujućeg domena koji se vezuje za antigen B ćelija, npr. kao što je ovde opisano, kao što je CD19 ili BCMA.
[0632] U jednom aspektu, CAR sadrži CAR molekul koji sadrži domen za vezivanje antigena CD19 (npr. mišje, humano ili humanizovano antitelo ili fragment antitela koji se specifično vezuje za CD 19), transmembranski domen i intracelularni signalni domen (npr. intracelularni signalni domen koji sadrži kostimulatorni domen i/ili primarni signalni domen).
[0633] Primerni molekuli CAR opisani u ovom dokumentu dati su u Tabeli 12e. Molekuli CAR u Tabeli 12e obuhvataju domen vezivanja antigena CD19, npr. sekvencu aminokiselina bilo kog domena vezivanja antigena CD19 predviđenog u Tabeli 12a.
Tabela 12e. Primeri CD19 CAR molekula
[0634] U jednom aspektu, CAR, npr. CAR eksprimiran u ćeliji iz otkrića, sadrži CAR molekul koji sadrži domen koji se vezuje za antigen koji se vezuje za BCMA, npr. sadrži domen za vezivanje BCMA antigena (npr. mišje, humano ili humanizovano antitelo ili fragment antitela koji se specifično vezuje za BCMA, npr., humani BCMA), transmembranski domen i intracelularni signalni domen (npr. intracelularni signalni domen koji sadrži kostimulatorni domen i/ili primarni signalni domen).
[0635] Primeri CAR molekula ovde opisanih CAR dati su u Tabeli 1 WO2016/014565.
Transmembranski domeni
[0636] Što se tiče transmembranskog domena, u različitim otelotvorenjima, CAR može biti projektovan tako da obuhvata transmembranski domen koji je vezan za ekstracelularni domen CAR. Transmembranski domen može uključivati jednu ili više dodatnih aminokiselina u blizini transmembranskog regiona, npr. jednu ili više aminokiselina povezanih sa ekstracelularnim regionom proteina iz kojeg je transmembranski protein izveden (npr.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 do 15 aminokiselina ekstracelularnog regiona) i/ili jednu ili više dodatnih aminokiselina povezanih sa intracelularnim regionom proteina iz kojeg je transmembranski protein izveden (npr.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 do 15 aminokiselina intracelularnog regiona).
U jednom aspektu, transmembranski domen je onaj koji je povezan sa jednim od drugih domena CAR, npr. u jednom otelotvorenju, transmembranski domen može biti iz istog proteina iz kojeg je izveden signalni domen, kostimulatorni domen ili domen šarke. U drugom aspektu, transmembranski domen nije izveden iz istog proteina iz kojeg je izveden bilo koji drugi domen CAR. U nekim slučajevima, transmembranski domen se može izabrati ili modifikovati supstitucijom aminokiselina kako bi se izbeglo vezivanje takvih domena za transmembranske domene istih ili različitih proteina površinske membrane, npr. da bi se smanjile interakcije sa drugim članovima kompleksa receptora. U jednom aspektu, transmembranski domen je sposoban za homodimerizaciju sa drugim CAR na ćelijskoj površini ćelije koja eksprimira CAR. U drugom aspektu, sekvenca aminokiselina transmembranskog domena može biti modifikovana ili supstituisana tako da se minimiziraju interakcije sa domenima vezivanja nativnog partnera za vezivanje prisutnog u istoj ćeliji koja eksprimira CAR.
[0637] Transmembranski domen može biti izveden ili iz prirodnog ili iz rekombinantnog izvora. Tamo gde je izvor prirodan, domen može biti izveden iz bilo kog proteina vezanog za membranu ili transmembranskog proteina. U jednom aspektu, transmembranski domen je sposoban da signalizira intracelularnom domenu (ili domenima) kad god se CAR veže za cilj. Transmembranski domen posebne primene u ovom otkriću može uključivati najmanje transmembranske regione npr. alfa, beta ili zeta lanca T-ćelijskog receptora, CD28, CD27, CD3 epsilon, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154. U nekim otelotvorenjima, transmembranski domen može uključivati najmanje transmembranski region (ili regione), npr. KIRDS2, OX40, CD2, CD27, LFA-1 (CD11a, CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD40, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD160, CD19, IL2R beta, IL2R gama, IL7R α, ITGA1, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, PAG/Cbp, NKG2D, NKG2C.
[0638] U nekim slučajevima, transmembranski domen može biti vezan za ekstracelularni region CAR, npr. domen vezivanja antigena CAR, preko šarke, npr. šarke humanog proteina.
Na primer, u jednom otelotvorenju, šarka može biti šarka humanog Ig (imunoglobulina) (npr. šarka IgG4, šarka IgD), GS linker (npr. ovde opisani GS linker), KIR2DS2 šarka ili CD8a šarka. U jednom otelotvorenju, šarka ili spejser sadrži (npr. sastoji se od) sekvencu aminokiselina SEQ ID NO: 250. U jednom aspektu, transmembranski domen sadrži (npr. sastoji se od) transmembranskog domena SEQ ID NO: 251.
[0639] U određenim otelotvorenjima, kodirani transmembranski domen obuhvata aminokiselinsku sekvencu CD8 transmembranskog domena koja ima najmanje jednu, dve ili tri modifikacije, ali ne više od 20, 10 ili 5 modifikacija aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 251, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 251. U jednom otelotvorenju, kodirani transmembranski domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 251.
[0640] U drugim otelotvorenjima, molekul nukleinske kiseline koji kodira CAR obuhvata nukleotidnu sekvencu CD8 transmembranskog domena, npr. obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 252 ili SEQ ID NO: 289, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta iste.
[0641] U određenim otelotvorenjima, kodirani domen vezivanja antigena je povezan sa transmembranskim domenom regionom šarke. U jednom otelotvorenju, kodirani region šarke obuhvata aminokiselinsku sekvencu CD8 šarke, npr. SEQ ID NO: 250; ili aminokiselinsku sekvencu IgG4 šarke, npr. SEQ ID NO: 253 ili sekvencu sa najmanje 95% identičnosti sa SEQ ID NO: 250 ili SEQ ID NO: 253. U drugim otelotvorenjima, sekvenca nukleinske kiseline koja kodira region šarke obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 254 ili SEQ ID NO: 255, koja odgovara šarki CD8 ili šarki IgG4, respektivno, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta SEQ ID NO: 254 ili 255.
[0642] U jednom aspektu, šarka ili spejser se sastoje od šarke IgG4. Na primer, u jednom otelotvorenju, šarka ili spejser sadrže šarku aminokiselinske sekvence ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFN WYVDGVE VHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKA KGQPREPQ VYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSF FLYSRLTV DKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKM (SEQ ID NO: 253). U nekim otelotvorenjima, šarka ili spejser se sastoje od šarke kodirane nukleotidnom sekvencom
[0643] U jednom aspektu, šarka ili spejser se sastoje od šarke IgD. Na primer, u jednom otelotvorenju, šarka ili spejser sadrže šarku aminokiselinske sekvence RWPESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEER ETKTPECP SHTQPLGVYLLTPAVQDLWLRDKATFTCFVVGSDLKDAHLTWEVAGKVPTGGVEE GLLERHSN GSQSQHSRLTLPRSLWNAGTSVTCTLNHPSLPPQRLMALREPAAQAPVKLSLNLLAS SDPPEAAS WLLCEVSGFSPPNILLMWLEDQREVNTSGFAPARPPPQPGSTTFWAWSVLRVPAPPS PQPATYTC VVSHEDSRTLLNASRSLEVSYVTDH (SEQ ID NO: 256). U nekim otelotvorenjima, šarka ili spejser se sastoje od šarke kodirane nukleotidnom sekvencom
[0644] U jednom aspektu, transmembranski domen može biti rekombinantan, u kom slučaju će se sastojati pretežno od hidrofobnih ostataka kao što su leucin i valin. U jednom aspektu, triplet fenilalanina, triptofana i valina može se naći na svakom kraju rekombinantnog transmembranskog domena.
[0645] Opciono, kratak oligo- ili polipeptidni linker, dužine između 2 i 10 aminokiselina, može formirati vezu između transmembranskog domena i citoplazmatskog regiona CAR. Glicin-serin dublet obezbeđuje posebno pogodan linker. Na primer, u jednom aspektu, linker se sastoji od aminokiselinske sekvence GGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 258). U nekim otelotvorenjima, linker je kodiran nukleotidnom sekvencom GGTGGCGGAGGTTCTGGAGGTGGAGGTTCC (SEQ ID NO: 259).
[0646] U jednom aspektu, šarka ili spejser se sastoje od šarke KIR2DS2.
Domeni signalizacije
[0647] U otelotvorenjima otkrića koja imaju intracelularni domen signalizacije, takav domen može sadržati, npr. jedan ili više primarnih domena signalizacije i/ili kostimulatornih domena signalizacije. U nekim otelotvorenjima, intracelularni signalni domen obuhvata sekvencu koja kodira primarni signalni domen. U nekim otelotvorenjima, domen intracelularne signalizacije obuhvata domen kostimulatorne signalizacije. U nekim otelotvorenjima, intracelularni signalni domen obuhvata primarni signalni domen i kostimulatorni signalni domen.
[0648] Intracelularne signalne sekvence unutar citoplazmatskog dela CAR iz otkrića mogu biti međusobno povezane nasumičnim ili određenim redosledom. Opciono, kratka oligo- ili polipeptidna veza, na primer, između 2 i 10 aminokiselina (npr.2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 aminokiselina) u dužini, može formirati vezu između intracelularnih signalnih sekvenci. U jednom otelotvorenju, glicin-serin dublet se može koristiti kao odgovarajući linker. U jednom otelotvorenju, pojedinačna aminokiselina, npr. alanin, glicin, može se koristiti kao odgovarajući linker.
[0649] U jednom aspektu, intracelularni signalni domen je dizajniran tako da obuhvata dva ili više, npr.2, 3, 4, 5 ili više, kostimulatornih signalnih domena. U jednom otelotvorenju, dva ili više, npr.2, 3, 4, 5 ili više, kostimulatornih signalnih domena, razdvojeni su molekulom linkera, npr. molekulom linkera opisanim u ovom dokumentu. U jednom otelotvorenju, intracelularni signalni domen se sastoji od dva kostimulatorna signalna domena. U nekim otelotvorenjima, molekul linkera je ostatak glicina. U nekim otelotvorenjima, linker je ostatak alanina.
Primarni domeni signalizacije
[0650] Primarni signalni domen reguliše primarnu aktivaciju TCR kompleksa bilo na stimulativan način ili na inhibitoran način. Primarni intracelularni signalni domeni koji deluju na stimulativan način mogu sadržati signalne motive, koji su poznati kao aktivacioni motivi na bazi imunoreceptora tirozina ili ITAM.
[0651] Primeri ITAM-a koji sadrže primarne intracelularne signalne domene koji su od posebne koristi u otkriću uključuju CD3 zeta, uobičajene FcR gama (FCER1G), Fc gama RIIa, FcR beta (Fc Epsilon R1b), CD3 gama, CD3 delta, CD3 epsilon, CD79a, CD79b, DAP10 i DAP12. U jednom otelotvorenju, CAR iz otkrića se sastoji od intracelularnog domena signalizacije, npr. primarnog domena signalizacije CD3-zeta.
[0652] U jednom otelotvorenju, kodirani primarni signalni domen obuhvata funkcionalni signalni domen CD3 zeta. Kodirani CD3 zeta primarni signalni domen može se sastojati od sekvence aminokiselina koja ima najmanje jednu, dve ili tri modifikacije, ali ne više od 20, 10 ili 5 modifikacija sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 260 ili SEQ ID NO: 261, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 260 ili SEQ ID NO: 261. U nekim otelotvorenjima, kodirani primarni signalni domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 260 ili SEQ ID NO: 261. U drugim otelotvorenjima, sekvenca nukleinske kiseline koja kodira primarni signalni domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 291 ili SEQ ID NO: 263, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta iste.
Domeni kostimulatorne signalizacije
[0653] U nekim otelotvorenjima, kodirani intracelularni signalni domen sadrži kostimulatorni signalni domen. Na primer, domen unutarćelijske signalizacije može se sastojati od primarnog domena signalizacije i kostimulatornog domena signalizacije. U nekim otelotvorenjima, kodirani kostimulatorni signalni domen obuhvata funkcionalni signalni domen proteina izabranog od jednog ili više sledećih CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, antigen-1 povezan sa funkcijom limfocita (LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, ligand koji se specifično vezuje sa CD83, CDS, ICAM-1, GITR, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), CD160, CD19, CD4, CD8 alfa, CD8 beta, IL2R beta, IL2R gama, IL7R alfa, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, NKp44, NKp30, NKp46 ili NKG2D.
[0654] U određenim otelotvorenjima, kodirani domen kostimulatorne signalizacije obuhvata sekvencu aminokiselina koja ima najmanje jednu, dve ili tri modifikacije, ali ne više od 20, 10 ili 5 modifikacija sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 264 ili SEQ ID NO: 265, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 264 ili SEQ ID NO: 265. U jednom otelotvorenju, kodirani kostimulatorni signalni domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 264 ili SEQ ID NO: 265. U drugim otelotvorenjima, sekvenca nukleinske kiseline koja kodira kostimulatorni signalni domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 290 ili SEQ ID NO: 267, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta iste.
[0655] U drugim otelotvorenjima, kodirani intracelularni domen obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 264 ili SEQ ID NO: 265 i sekvencu SEQ ID NO: 260 ili SEQ ID NO: 261, pri čemu su sekvence koje obuhvataju intracelularni signalni domen izražene u istom okviru i kao jedan polipeptidni lanac.
[0656] U određenim otelotvorenjima, sekvenca nukleinske kiseline koja kodira domen unutarćelijske signalizacije obuhvata sekvencu SEQ ID NO: 266, SEQ ID NO: 290 ili SEQ ID NO: 267, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta iste, i sekvencu SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 291 ili SEQ ID NO: 263, ili sekvencu sa najmanje 95% identiteta iste.
[0657] U nekim otelotvorenjima, molekul nukleinske kiseline dalje kodira vodeću sekvencu. U jednom otelotvorenju, sekvenca lidera se sastoji od sekvence SEQ ID NO: 268.
[0658] U jednom aspektu, intracelularni signalni domen je dizajniran tako da obuhvata signalni domen CD3-zeta i signalni domen CD28. U jednom aspektu, intracelularni signalni domen je dizajniran tako da obuhvata signalni domen CD3-zeta i signalni domen 4-1BB. U jednom aspektu, signalni domen 4-1BB je signalni domen SEQ ID NO: 264. U jednom aspektu, signalni domen CD3-zeta je signalni domen SEQ ID NO: 260.
[0659] U jednom aspektu, intracelularni signalni domen je dizajniran tako da obuhvata signalni domen CD3-zeta i signalni domen CD27. U jednom aspektu, signalni domen CD27 obuhvata aminokiselinsku sekvencu QRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREEEGSTIPIQEDYRKPEPACSP (SEQ ID NO: 265). U jednom aspektu, signalni domen CD27 je kodiran sekvencom nukleinske kiseline Caacgaaggaaatatagatcaaacaaaggagaaagtcctgtggagcctgcagagccttgtcgttacagctgccccagggaggagg agggcagcacc atccccatccaggaggattaccgaaaaccggagcctgcctgctccccc (SEQ ID NO: 267).
Vektori
[0660] U drugom aspektu, otkriće se odnosi na vektor koji se sastoji od sekvence nukleinske kiseline koja kodira CAR opisan u ovom dokumentu. U jednom otelotvorenju, vektor je izabran između DNK vektora, RNK vektora, plazmida, vektora lentivirusa, adenovirusnog vektora ili retrovirusnog vektora. U jednom otelotvorenju, vektor je vektor lentivirusa. Ovi vektori ili njihovi delovi mogu se, između ostalog, koristiti za kreiranje šablona nukleinskih kiselina, kao što je ovde opisano za upotrebu sa CRISPR sistemima kao što je ovde opisano.
Alternativno, vektori se mogu koristiti za isporuku nukleinske kiseline direktno u ćeliju, npr. imunološku efektorsku ćeliju, npr. T ćeliju, npr. alogenu T ćeliju, nezavisno od CRISPR sistema.
[0661] Ovo otkriće takođe navodi vektore u koje je umetnuta DNK iz ovog otkrića. Vektori izvedeni iz retrovirusa kao što je lentivirus su pogodni za postizanje dugoročnog prenosa gena jer omogućavaju dugoročnu, stabilnu integraciju transgena i njegovo razmnožavanje u ćelijama ćerkama. Lentivirusni vektori imaju dodatnu prednost u odnosu na vektore izvedene iz onko-retrovirusa kao što su virusi mišje leukemije jer mogu da transdukuju neproliferirajuće ćelije, kao što su hepatociti. Takođe imaju dodatnu prednost niske imunogenosti. Retrovirusni vektor takođe može biti, npr. gamaretrovirusni vektor.
Gamaretrovirusni vektor može uključivati, npr. promoter, signal pakovanja (ψ), mesto vezivanja prajmera (PBS), jedno ili više (npr. dva) duga terminalna ponavljanja (LTR) i transgen od interesa, npr. gen koji kodira CAR. Gamaretrovirusnom vektoru mogu nedostajati virusni strukturni geni kao što su gag, pol i env. Primeri gamaretrovirusnih vektora uključuju virus mišje leukemije (MLV), virus koji formira fokus u slezini (SFFV) i virus mijeloproliferativnog sarkoma (MPSV), i vektore izvedene iz njih. Drugi gamaretrovirusni vektori su opisani, npr. kod Tobias Maetzig et al., "Gammaretroviral Vectors: Biology, Technology and Application" Viruses. 2011 Jun; 3(6): 677-713.
[0662] U drugom otelotvorenju, vektor koji se sastoji od nukleinske kiseline koja kodira željeni CAR iz otkrića je adenovirusni vektor (A5/35). U drugom otelotvorenju, ekspresija nukleinskih kiselina koje kodiraju CAR može se postići korišćenjem transpozona kao što su uspavana lepotica, krisper, CAS9 i nukleaze cinkovih prstiju. Vidi u nastavku June et al. 2009Nature Reviews Immunology 9.10: 704-716.
[0663] Nukleinska kiselina se može klonirati u više tipova vektora. Na primer, nukleinska kiselina se može klonirati u vektor, uključujući, bez ograničenja, plazmid, fagemid, derivat faga, životinjski virus i kosmid. Vektori od posebnog interesa uključuju vektore ekspresije, vektore replikacije, vektore generisanja sonde i vektore sekvenciranja.
[0664] Ovde su obelodanjene metode za proizvodnju in vitro transkribovanog RNK CAR. Ovo otkriće takođe uključuje RNK konstrukt koji kodira CAR koji se može direktno transfektovati u ćeliju. Metoda za generisanje mRNK za upotrebu u transfekciji može uključivati in vitro transkripciju (IVT) šablona sa posebno dizajniranim prajmerima, nakon čega sledi dodavanje polyA, kako bi se proizveo konstrukt koji sadrži 3' i 5' neprevedenu sekvencu („UTR“), 5' ograničenje i/ili unutrašnje ribozomalno ulazno mesto (IRES), nukleinsku kiselinu koju treba eksprimirati i polyA rep, obično dužine 50-2000 baza (SEQ ID NO: 269). Tako proizvedena RNK može efikasno da transfektira različite vrste ćelija. U jednom aspektu, šablon uključuje sekvence za CAR.
Nevirusni načini isporuke
[0665] U nekim aspektima, nevirusne metode se mogu koristiti za isporuku nukleinske kiseline koja kodira CAR opisan u ovom dokumentu u ćeliju ili tkivo ili organizam subjekta.
[0666] U nekim otelotvorenjima, nevirusna metoda uključuje upotrebu transpozona (koji se naziva i transpozabilni element). U nekim otelotvorenjima, transpozon je deo DNK koji se može ubaciti na lokaciju u genomu, na primer, deo DNK koji je sposoban da se samoreplikuje i ubaci svoju kopiju u genom, ili deo DNK koji se može splajsovati iz duže nukleinske kiseline i umetnuti na drugo mesto u genomu. Na primer, transpozon sadrži DNK sekvencu sačinjenu od invertovanih ponavljanja koji prate gen za transpoziciju.
[0667] U nekim otelotvorenjima, generišu se ćelije, npr. T ili NK ćelije, koje eksprimiraju CAR opisan u ovom dokumentu korišćenjem kombinacije umetanja gena pomoću SBTS-a i genetskog uređivanja pomoću nukleaze (npr. nukleaze cinkovog prsta (ZFN), efektorske nukleaze nalik aktivatoru transkripcije (TALEN), CRISPR/Cas sistem ili projektovane meganukleaze ponovo projektovane homing endonukleaze).
[0668] U nekim otelotvorenjima, ćelije iz ovog otkrića, npr. T ili NK ćelije, npr. alogene Tćelije, npr. ovde opisane, (npr. koje eksprimiraju CAR opisan ovde), generišu se dovođenjem u kontaktćelija sa (a) sastavom koji sadrži jedan ili više molekula gRNK, npr. kao što je ovde opisano, i jedan ili više Cas molekula, npr. molekul Cas9, npr. kako je ovde opisano, i (b) nukleinska kiselina koja sadrži sekvencu koja kodira CAR, npr. ovde opisanu (kao što je šablonski molekul nukleinske kiseline kao što je ovde opisano). Bez vezivanja teorijom, navedeni sastav (a), gore, izazvaće prekid na ili u blizini genomske DNK ciljane ciljajućim domenom gRNK molekula, a nukleinska kiselina (b) će se uključiti, npr. delimično ili u potpunosti, u genom na ili u blizini navedenog prekida, tako da se nakon integracije, eksprimira kodirani molekul CAR. U otelotvorenjima, ekspresija CAR će biti kontrolisana promoterima ili drugim regulatornim elementima endogenim za genom (npr. promoter koji kontroliše ekspresiju iz gena u koji je umetnuta nukleinska kiselina iz (b)). U drugim otelotvorenjima, nukleinska kiselina iz (b) dalje obuhvata promoter i/ili druge regulatorne elemente, npr. kao što je ovde opisano, npr. promoter EF1-alfa, operativno povezan sa sekvencom koja kodira CAR, tako da nakon integracije, ekspresiju CAR kontroliše taj promoter i/ili drugi regulatorni elementi. Dodatne karakteristike otkrića koje se odnose na upotrebu CRISPR/Cas9 sistema, npr. kao što je ovde opisano, za direktno uključivanje sekvence nukleinske kiseline koja kodira CAR, npr. kao što je ovde opisano, opisane su na drugom mestu u ovoj aplikaciji, npr. u odeljku koji se odnosi na umetanje gena i homolognu rekombinaciju. U otelotvorenjima, sastav a) gore je sastav koji se sastoji od RNP koji sadrže jedan ili više gRNK molekula. U otelotvorenjima, RNP koji se sastoje od gRNK koji ciljaju jedinstvene ciljne sekvence uvode se u ćeliju istovremeno, npr. kao smeša RNP koja se sastoji od jedne ili više gRNK. U otelotvorenjima, RNP koji se sastoje od gRNK koje ciljaju jedinstvene ciljne sekvence uvode se u ćeliju sekvencijalno.
[0669] U nekim otelotvorenjima, upotreba nevirusnog metoda isporuke omogućava reprogramiranje ćelija, npr. T ili NK ćelija, i direktnu infuziju ćelija u organizam subjekta. Prednosti nevirusnih vektora uključuju, bez ograničenja, lakoću i relativno niske troškove proizvodnje dovoljnih količina potrebnih za zadovoljavanje populacije pacijenata, stabilnost tokom skladištenja i nedostatak imunogenosti.
Promoteri
[0670] U jednom otelotvorenju, vektor se dalje sastoji od promotera. U nekim otelotvorenjima, promoter se bira između EF-1 promotera, CMV IE promotera gena, EF-1α promotera, ubikvitin C promotera ili promotera fosfoglicerat kinaze (PGK). U jednom otelotvorenju, promoter je EF-1 promoter. U jednom otelotvorenju, EF-1 promoter se sastoji od sekvence SEQ ID NO: 270.
Ćelije domaćina za ekspreciju CAR
[0671] Kao što je gore navedeno, u nekim aspektima otkriće se odnosi na ćeliju, npr. imunološku efektorsku ćeliju (npr. populaciju ćelija, npr. populaciju imunoloških efektorskih ćelija) koja se sastoji od molekula nukleinske kiseline, molekula polipeptida CAR ili vektora, kako je ovde opisano.
[0672] U određenim aspektima ovog otkrića, imunološke efektorske ćelije, npr. T ćelije, mogu se dobiti iz jedinice krvi prikupljene od subjekta koristeći bilo koji broj tehnika poznatih kvalifikovanom stručnjaku, kao što je Ficoll<™>separacija. U jednom poželjnom aspektu, ćelije iz cirkulišuće krvi pojedinca dobijaju se aferezom. Proizvod afereze obično sadrži limfocite, uključujući T ćelije, monocite, granulocite, B ćelije, druga bela krvna zrnca sa jezgrom, crvena krvna zrnca i trombocite. U jednom aspektu, ćelije prikupljene aferezom mogu se isprati da bi se uklonila frakcija plazme i, opciono, da bi se ćelije stavile u odgovarajući pufer ili medijum za naredne korake obrade. U jednom otelotvorenju, ćelije se ispiraju fiziološkim rastvorom sa fosfatnim puferom (PBS). U alternativnom otelotvorenju, rastvoru za ispiranje nedostaje kalcijum i može nedostajati magnezijum ili može nedostajati mnogo, ako ne i svi dvovalentni katjoni.
[0673] Početni koraci aktivacije u odsustvu kalcijuma mogu dovesti do povećane aktivacije. Kao što bi moglo biti jasno stručnjacima sa prosečnim znanjem u oblasti, korak ispiranja može se postići metodama koje su poznate stručnjacima u oblasti, kao što je upotreba poluautomatizovane „protočne“ centrifuge (na primer, Cobe 2991 ćelijski procesor, Baxter CytoMate ili Haemonetics Cell Saver 5) u skladu sa uputstvima proizvođača. Nakon ispiranja, ćelije se mogu resuspendovati u različitim biokompatibilnim puferima, kao što su, na primer, PBS bez Ca, bez Mg, PlasmaLyte A ili drugi fiziološki rastvor sa ili bez pufera. Alternativno, nepoželjne komponente uzorka afereze mogu se ukloniti i ćelije direktno resuspendovati u medijumu kulture.
[0674] Prepoznato je da metode primene mogu da koriste uslove medija za kulturu koji se sastoje od 5% ili manje, na primer 2%, humanog AB seruma, i koriste poznate uslove i sastave medija za kulturu, na primer one opisane u Smith et al., "Ex vivo expansion of human T cells for adoptive immunotherapy using the novel Xeno-free CTS Immune Cell Serum Replacement" Clinical & Translational Immunology (2015) 4, e31; doi:10.1038/cti2014.31.
[0675] U jednom aspektu, T ćelije su izolovane iz limfocita periferne krvi liziranjem crvenih krvnih zrnaca i iscrpljivanjem monocita, na primer, centrifugiranjem kroz PERCOLL<™>gradijent ili centrifugalnom elutrijacijom protivstruja.
[0676] Metode opisane u ovom dokumentu mogu uključivati, npr. izbor specifične podpopulacije imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija, koje su T regulatorna populacija sa osiromašenim ćelijama, CD25+ sa osiromašenim ćelijama, koristeći, npr. negativnu tehniku selekcije, npr. opisanu u ovom dokumentu. Poželjno je da populacija T regulatornih osiromašenih ćelija sadrži manje od 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% CD25+ ćelija.
[0677] U jednom otelotvorenju, T regulatorne ćelije, npr. CD25+ T ćelije, uklanjaju se iz populacije korišćenjem anti-CD25 antitela, ili njegovog fragmenta, ili CD25-vezujućeg liganda, IL-2. U jednom otelotvorenju, anti-CD25 antitelo, ili njegov fragment, ili CD25-vezujući ligand je konjugovan sa supstratom, npr. zrncem, ili je na drugi način obložen na supstratu, npr. zrncu. U jednom otelotvorenju, anti-CD25 antitelo, ili njegov fragment, konjugovano je sa supstratom kao što je ovde opisano.
[0678] U jednom otelotvorenju, T regulatorne ćelije, npr. CD25+ T ćelije, uklanjaju se iz populacije pomoću CD25 reagensa za iscrpljivanje od Miltenyi<™>. U jednom otelotvorenju, odnos ćelija i CD25 reagensa za iscrpljivanje je 1e7 ćelija do 20 uL, ili 1e7 ćelija do 15 uL, ili 1e7 ćelija do 10 uL, ili 1e7 ćelija do 5 uL, ili 1e7 ćelija do 2,5 uL, ili 1e7 ćelija do 1,25 uL. U jednom otelotvorenju, npr. za T regulatorne ćelije, npr. iscrpljivanje CD25+, koristi se više od 500 miliona ćelija/ml. U daljem aspektu koristi se koncentracija ćelija od 600, 700, 800 ili 900 miliona ćelija/ml.
[0679] U jednom otelotvorenju, populacija imunoloških efektorskih ćelija koje se iscrpljuju uključuje oko 6 × 10<9>CD25+ T ćelija. U drugim aspektima, populacija imunoloških efektorskih ćelija koje treba iscrpiti uključuje oko 1 × 10<9>do 1× 10<10>CD25+ T ćelija, i svaku celobrojnu vrednost između. U jednom otelotvorenju, rezultirajuća populacija T regulatorno osiromašenih ćelija ima 2 × 10<9>T regulatornih ćelija, npr. CD25+ ćelija, ili manje (npr. 1 × 10<9>, 5 × 10<8>, 1 × 10<8>, 5 × 10<7>, 1 × 10<7>ili manje CD25+ ćelija).
[0680] U jednom otelotvorenju, T regulatorne ćelije, npr. CD25+ ćelije, uklanjaju se iz populacije koristeći CliniMAC sistem sa kompletom cevčica za iscrpljivanje, kao što je npr. cevčica 162-01. U jednom otelotvorenju, CliniMAC sistem se pokreće na podešavanju iscrpljivanja kao što je, npr. DEPLETION2.1.
[0681] Bez namere vezivanja određenom teorijom, smanjenje nivoa negativnih regulatora imunoloških ćelija (npr. smanjenje broja neželjenih imunoloških ćelija, npr.REGćelija), kod subjekta pre afereze ili tokom proizvodnje ćelijskog proizvoda koji eksprimira CAR može smanjiti rizik od recidiva kod subjekta. Na primer, metode iscrpljivanja TREGćelija su poznate u struci. Metode smanjenja TREGćelije uključuju, bez ograničenja, ciklofosfamid, anti-GITR antitelo (ovde opisano anti-GITR antitelo), smanjenje CD25 i njihove kombinacije.
[0682] U nekim otelotvorenjima, metode proizvodnje obuhvataju smanjenje broja (npr. iscrpljivanje) TREGćelija pre proizvodnje ćelije koja eksprimira CAR. Na primer, metode proizvodnje obuhvataju dovođenje uzorka, npr. uzorka afereze, u kontakt sa anti-GITR antitelima i/ili anti-CD25 antitelima (ili njihovim fragmentima ili CD25-vezujućim ligandom), npr. da bi se iscrpele TREGćelije pre proizvodnje proizvoda koji eksprimira CAR (npr. T ćelija, NK ćelija).
[0683] U jednom otelotvorenju, subjekat je prethodno tretiran jednom ili više terapija koje smanjuju TREGćelije pre prikupljanja ćelija za proizvodnju ćelijskog proizvoda koji eksprimira CAR, čime se smanjuje rizik od recidiva subjekta na tretman ćelija koje eksprimiraju CAR. U jednom otelotvorenju, metode smanjenja TREGćelija uključuju, bez ograničenja, primenu na subjektu jednog ili više ciklofosfamida, anti-GITR antitela, osiromašenja CD25 ili njihove kombinacije. Do primene jednog ili više ciklofosfamida, anti-GITR antitela, smanjenja CD25 ili njihove kombinacije može doći pre, tokom ili nakon infuzije ćelijskog proizvoda koji eksprimira CAR.
[0684] U jednom otelotvorenju, subjekat je prethodno tretiran ciklofosfamidom pre prikupljanja ćelija za proizvodnju ćelijskih proizvoda koji eksprimiraju CAR, čime se smanjuje rizik od recidiva subjekta na tretman ćelija koje eksprimiraju CAR. U jednom otelotvorenju, subjekat je prethodno tretiran anti-GITR antitelima pre prikupljanja ćelija za proizvodnju ćelijskog proizvoda koji eksprimira CAR, čime se smanjuje rizik od recidiva subjekta na tretman ćelija koje eksprimiraju CAR.
[0685] U jednom otelotvorenju, populacija ćelija koje treba ukloniti nisu ni regulatorne T ćelije ni tumorske ćelije, već ćelije koje na drugi način negativno utiču na ekspanziju i/ili funkciju ćelija CART, npr. ćelije koje eksprimiraju CD14, CD11b, CD33, CD15 ili druge markere eksprimirane potencijalno imunosupresivnim ćelijama. U jednom otelotvorenju, predviđeno je da se takve ćelije uklone istovremeno sa regulatornim T ćelijama i/ili tumorskim ćelijama, ili nakon navedenog iscrpljivanja, ili drugim redosledom.
[0686] Metode opisane u ovom dokumentu mogu uključivati više od jednog koraka odabira, npr. više od jednog koraka iscrpljivanja. Obogaćivanje populacije T ćelija negativnom selekcijom može se postići, npr. kombinacijom antitela usmerenih na površinske markere jedinstvene za negativno izabrane ćelije. Jedna metoda je sortiranje i/ili selekcija ćelija putem negativne magnetne imunoadherencije ili protočne citometrije koja koristi koktel monoklonskih antitela usmerenih na markere površine ćelije prisutne na negativno izabranim ćelijama. Na primer, za obogaćivanje CD4+ ćelija negativnom selekcijom, koktel monoklonskih antitela može uključivati antitela na CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR i CD8.
[0687] Ovde opisane metode mogu dalje uključivati uklanjanje ćelija iz populacije koje eksprimiraju tumorski antigen, npr. tumorski antigen koji ne obuhvata CD25, npr. CD19, CD30, CD38, CD123, CD20, CD14 ili CD11b, kako bi se time obezbedila populacija T regulatorno osiromašenih, npr. CD25+ osiromašenih i tumorskih antigenski osiromašenih ćelija koje su pogodne za ekspresiju CAR, npr. ovde opisanog CAR. U jednom otelotvorenju, ćelije koje eksprimiraju tumorski antigen uklanjaju se istovremeno sa T regulatornim ćelijama, npr. CD25+. Na primer, anti-CD25 antitelo, ili njegov fragment, i antitumorsko antigensko antitelo, ili njegov fragment, mogu se pričvrstiti na isti supstrat, npr. zrnce, koji se može koristiti za uklanjanje ćelija ili anti-CD25 antitela ili njihovog fragmenta ili se antitumorsko antigensko antitelo ili njegov fragment može pričvrstiti na odvojena zrnca, čija se smeša može koristiti za uklanjanje ćelija. U drugim otelotvorenjima, uklanjanje regulatornih ćelija T, npr. CD25+ ćelija i uklanjanje ćelija koje eksprimiraju tumorski antigen je sekvencijalno i može se desiti, npr. bilo kojim redosledom.
[0688] Takođe su navedene metode koje uključuju uklanjanje ćelija iz populacije koje eksprimiraju inhibitor kontrolne tačke, npr. inhibitor kontrolne tačke opisan u ovom dokumentu, npr. jedna ili više PD1+ ćelija, LAG3 ćelija i TIM3 ćelija, kako bi se time obezbedila populacija T regulatorno osiromašenih ćelija, npr. CD25+ osiromašenih ćelija, i inhibitor kontrolne tačke osiromašenih ćelija, npr. PD1+, LAG3 i/ili TIM3 osiromašenih ćelija. Primeri inhibitora kontrolne tačke uključuju B7-H1, B7-1, CD160, P1H, 2B4, PD1, TIM3, CEACAM (npr. CEACAM-1, CEACAM-3 i/ili CEACAM-5), LAG3, TIGIT, CTLA-4, BTLA i LAIR1. U jednom otelotvorenju, ćelije koje eksprimiraju inhibitor kontrolne tačke se uklanjaju istovremeno sa T regulatornim ćelijama, npr. CD25+. Na primer, anti-CD25 antitelo ili njegov fragment i antitelo inhibitora kontrolne tačke ili njegov fragment mogu biti pričvršćeni za isto zrnce koje se može koristiti za uklanjanje ćelija, ili anti-CD25 antitelo ili njegov fragment i antitelo inhibitora kontrolne tačke ili njegov fragment mogu biti pričvršćeni za odvojena zrnca, čija se smeša može koristiti za uklanjanje ćelija. U drugim otelotvorenjima, uklanjanje regulatornih ćelija T, npr. CD25+ ćelija i uklanjanje ćelija koje eksprimiraju inhibitor kontrolne tačke je sekvencijalno i može se desiti, npr. bilo kojim redosledom.
[0689] Ovde opisane metode mogu uključivati pozitivan korak selekcije. Na primer, T ćelije se mogu izolovati inkubacijom sa anti-CD3/anti-CD28 (npr.3x28) konjugovanim zrncima, kao što su DYNABEADS<®>M-450 CD3/CD28 T, u vremenskom periodu dovoljnom za pozitivan izbor željenih T ćelija. U jednom otelotvorenju, vremenski period je oko 30 minuta. U daljem otelotvorenju, vremenski period se kreće od 30 minuta do 36 sati ili duže i sve celobrojne vrednosti između. U daljem otelotvorenju, vremenski period je najmanje 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 sati. U još jednom otelotvorenju, vremenski period je 10 do 24 sata, npr.24 sata. Duža vremena inkubacije mogu se koristiti za izolaciju T ćelija u bilo kojoj situaciji u kojoj postoji malo T ćelija u poređenju sa drugim tipovima ćelija, kao što je izolacija tumorskih infiltrirajućih limfocita (TIL) od tumorskog tkiva ili kod imunokompromitovanih pojedinaca. Dalje, upotreba dužih vremena inkubacije može povećati efikasnost hvatanja CD8+ T ćelija. Dakle, jednostavnim skraćivanjem ili produžavanjem vremena vezivanja T ćelija za CD3/CD28 zrnca i/ili povećanjem ili smanjenjem odnosa zrnaca i T ćelija (kao što je opisano u daljem tekstu), pod-populacije T ćelija mogu se preferencijalno izabrati za ili protiv prilikom inicijacije kulture ili u drugim vremenskim tačkama tokom procesa. Pored toga, povećanjem ili smanjenjem odnosa anti-CD3 i/ili anti-CD28 antitela na zrncima ili drugoj površini, pod-populacije T ćelija mogu se preferencijalno izabrati za ili protiv prilikom inicijacije kulture ili u drugim željenim vremenskim tačkama.
[0690] U jednom otelotvorenju, može se izabrati populacija T ćelija koja eksprimira jedan ili više IFN-γ, TNFα, IL-17A, IL-2, IL-3, IL-4, GM-CSF, IL-10, IL-13, granzim B i perforin, ili druge odgovarajuće molekule, npr. druge citokine. Metode za skrining ekspresije ćelija mogu se odrediti, npr. metodama opisanim u PCT publikaciji br.: WO 2013/126712.
[0691] Za izolaciju željene populacije ćelija pozitivnom ili negativnom selekcijom, koncentracija ćelija i površine (npr. čestice kao što su zrnca) može se menjati. U određenim aspektima, može biti poželjno značajno smanjiti zapreminu u kojoj se zrnca i ćelije mešaju zajedno (npr. povećati koncentraciju ćelija), kako bi se osigurao maksimalni kontakt ćelija i zrnaca. Na primer, u jednom aspektu koristi se koncentracija od 10 milijardi ćelija/ml, 9 milijardi/ml, 8 milijardi/ml, 7 milijardi/ml, 6 milijardi/ml ili 5 milijardi/ml. U jednom aspektu koristi se koncentracija od 1 milijarde ćelija/ml. U jednom aspektu, koristi se koncentracija ćelija od 75, 80, 85, 90, 95 ili 100 miliona ćelija/ml. U daljim aspektima, mogu se koristiti koncentracije od 125 ili 150 miliona ćelija/ml.
[0692] Korišćenje visokih koncentracija može rezultirati povećanim prinosom ćelija, aktivacijom ćelija i ekspanzijom ćelija. Dalje, upotreba visokih koncentracija ćelija omogućava efikasnije hvatanje ćelija koje mogu slabo eksprimirati ciljne antigene od interesa, kao što su CD28-negativne T ćelije, ili iz uzoraka gde postoji mnogo tumorskih ćelija (npr. leukemijska krv, tumorsko tkivo itd.). Takve populacije ćelija mogu imati terapijsku vrednost i bilo bi poželjno da dobiti ih. Na primer, korišćenje visoke koncentracije ćelija omogućava efikasniji izbor CD8+ T ćelija koje normalno imaju slabiju ekspresiju CD28.
[0693] U srodnom aspektu, možda je poželjno koristiti niže koncentracije ćelija. Značajnim razređivanjem smeše T ćelija i površine (npr. čestica kao što su zrnca), interakcije između čestica i ćelija se minimiziraju. Ovim se bira da ćelije koje eksprimiraju velike količine željenih antigena budu vezane za čestice. Na primer, CD4+ T ćelije eksprimiraju veće nivoe CD28 i efikasnije se hvataju od CD8+ T ćelija u razblaženim koncentracijama. U jednom aspektu, koncentracija korišćenih ćelija je 5 × 10<6>/ml. U drugim aspektima, korišćena koncentracija može biti od oko 1 × 10<5>/ml do 1 × 10<6>/ml, kao i bilo koja celobrojna vrednost između.
[0694] U drugim aspektima, ćelije se mogu inkubirati na rotatoru u različitim periodima pri različitim brzinama na bilo 2-10°C ili na sobnoj temperaturi.
[0695] T ćelije za stimulaciju se takođe mogu zamrznuti nakon koraka ispiranja. Bez namere da se veže za određenu teoriju, zamrzavanje i naknadni korak odmrzavanja obezbeđuju ujednačeniji proizvod uklanjanjem granulocita i donekle monocita u ćelijskoj populaciji. Nakon koraka ispiranja kojim se uklanjaju plazma i trombociti, ćelije se mogu suspendovati u rastvoru za zamrzavanje. Iako su mnogi rastvori i parametri zamrzavanja poznati u struci i biće korisni u ovom kontekstu, jedna metoda uključuje upotrebu PBS-a koji sadrži 20% DMSO i 8% humanog serumskog albumina ili medijuma za kulturu koji sadrži 10% dekstrana 40 i 5% dekstroze, 20% humanog serumskog albumina i 7,5% DMSO ili 31,25% plazmalita-A, 31,25% dekstroze 5%, 0,45% NaCl, 10% dekstrana 40 i 5% dekstroze, 20% humanog serumskog albumina i 7,5% DMSO ili drugog pogodnog medijuma za zamrzavanje ćelija koji sadrži, na primer, Hespan i PlasmaLyte A, ćelije se zatim zamrzavaju na -80°C brzinom od 1° u minuti i čuvaju u parnoj fazi rezervoara za tečni azot. Mogu se koristiti i druge metode kontrolisanog zamrzavanja, kao i nekontrolisano momentalno zamrzavanje na -20°C ili u tečnom azotu.
[0696] U određenim aspektima, krioprezervisane ćelije se odmrzavaju i ispiraju kao što je ovde opisano i ostavljaju da odstoje jedan sat na sobnoj temperaturi pre aktivacije metodama iz ovog otkrića.
[0697] U kontekstu otkrića razmatra se i prikupljanje uzoraka krvi ili proizvoda afereze od subjekta u vremenskom periodu pre nego što bi ekspandirane ćelije, kako je ovde opisano, mogle biti potrebne. Kao takav, izvor ćelija za ekspandiranje može se prikupiti u bilo kom trenutku, a željene ćelije, kao što su T ćelije, mogu se izolovati i zamrznuti za kasniju primenu u terapiji imunološkim efektorskim ćelijama za bilo koji broj bolesti ili stanja koja bi imala koristi od terapije imunološkim efektorskim ćelijama, kao što su one opisane u ovom dokumentu. U jednom aspektu, uzorak krvi ili afereza se uzimaju od generalno zdravog subjekta. U određenim aspektima, uzorak krvi ili afereza se uzimaju od generalno zdravog subjekta koji je u riziku od razvoja bolesti, ali kod koga se još uvek nije razvila bolest, a ćelije od interesa se izoluju i zamrzavaju za kasniju upotrebu. U određenim aspektima, T ćelije se mogu ekspandirati, zamrznuti i koristiti kasnije. U određenim aspektima, uzorci se prikupljaju od pacijenta ubrzo nakon dijagnoze određene bolesti kako je ovde opisano, ali pre bilo kakvog tretmana. U daljem aspektu, ćelije su izolovane iz uzorka krvi ili afereze subjekta pre bilo kog broja relevantnih modaliteta lečenja, uključujući, bez ograničenja, lečenje agensima kao što su natalizumab, efalizumab, antivirusni agensi, hemoterapija, zračenje, imunosupresivna sredstva, kao što su ciklosporin, azatioprin, metotreksat, mikofenolat i FK506, antitela ili druga imunoablativna sredstva kao što su CAMPATH, anti-CD3 antitela, citoksan, fludarabin, ciklosporin, FK506, rapamicin, mikofenolna kiselina, steroidi, FR901228 i zračenje.
[0698] U daljem aspektu ovog otkrića, T ćelije se dobijaju od pacijenta neposredno nakon tretmana koji ostavlja subjekta sa funkcionalnim T ćelijama. S tim u vezi, uočeno je da nakon određenih tretmana karcinoma, posebno tretmana lekovima koji narušavaju imuni sistem, ubrzo nakon tretmana, tokom perioda kada bi se pacijenti normalno oporavljali od efekata tretmana, kvalitet dobijenih T ćelija može biti optimalan ili poboljšan zbog njihove sposobnosti ekspanzije ex vivo. Isto tako, nakon ex vivo manipulacije korišćenjem ovde opisanih metoda, ove ćelije mogu biti u poželjnom stanju za pojačano presađivanje i in vivo ekspanziju. Stoga se u kontekstu ovog otkrića razmatra prikupljanje krvnih ćelija, uključujući T ćelije, dendritske ćelije ili druge ćelije hematopoetske loze, tokom ove faze oporavka. Dalje, u određenim aspektima, mobilizacija (na primer, mobilizacija sa GM-CSF) i režimi kondicioniranja mogu se koristiti za stvaranje stanja kod subjekta u kojem se favorizuje repopulacija, recirkulacija, regeneracija i/ili ekspanzija određenih tipova ćelija, naročito tokom definisanog vremenskog perioda nakon terapije. Ilustrativni tipovi ćelija uključuju T ćelije, B ćelije, dendritske ćelije i druge ćelije imunog sistema.
[0699] U jednom otelotvorenju, imunološke efektorske ćelije koje eksprimiraju CAR molekul, npr. CAR molekul opisan ovde, dobijaju se od subjekta koji je primio nisku dozu mTOR inhibitora za poboljšanje imuniteta. U jednom otelotvorenju, populacija imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija, koje je potrebno projektovati tako da eksprimiraju CAR, sakuplja se nakon dovoljno vremena, ili nakon dovoljnog doziranja niske doze mTOR inhibitora za jačanje imuniteta, tako da su nivo PD 1 negativnih imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija, ili odnos PD1 negativnih imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelije/PD 1 pozitivne imunološke efektorske ćelije, npr. T ćelije, u organizmu subjektu ili sakupljene od subjekta, barem prolazno, povećani.
[0700] U drugim otelotvorenjima, populacija imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija, koje su projektovane ili će biti projektovane tako da eksprimiraju CAR, može se tretirati ex vivo kontaktom sa količinom mTOR inhibitora koji povećava broj PD1 negativnih imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija ili povećava odnos PD1 negativnih imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija/PD1 pozitivnih imunoloških efektorskih ćelija, npr. T ćelija.
[0701] U jednom otelotvorenju, populacija T ćelija ima deficit dijaglicerol kinaze (DGK). Ćelije sa deficitom DGK uključuju ćelije koje ne eksprimiraju DGK RNK ili protein, ili imaju smanjenu ili inhibiranu aktivnost DGK. Ćelije sa deficitom DGK mogu se generisati genetskim pristupima, npr. primenom agenasa koji ometaju RNK, npr. siRNK, shRNK, miRNK, kako bi se redukovala ili sprečila ekspresija DGK. Alternativno, ćelije sa deficitom DGK mogu se generisati lečenjem ovde opisanim inhibitorima DGK.
[0702] U jednom otelotvorenju, populacija T ćelija ima deficit Ikarosa. Ćelije sa deficitom Ikarosa uključuju ćelije koje ne eksprimiraju Ikaros RNK ili protein, ili imaju redukovanu ili inhibiranu aktivnost Ikarosa, ćelije sa deficitom Ikarosa mogu se generisati genetskim pristupima, npr. primenom agenasa koji ometaju RNK, npr. siRNK, shRNK, miRNK, kako bi se redukovala ili sprečila ekspresija Ikarosa. Alternativno, ćelije sa nedostatkom Ikarosa mogu se generisati lečenjem inhibitorima Ikarosa, npr. lenalidomidom.
[0703] U otelotvorenjima, populacija T ćelija ima deficit DGK i deficit Ikarosa, npr. ne eksprimira DGK i Ikaros ili ima redukovanu ili inhibiranu aktivnost DGK i Ikaros. Takve ćelije sa deficitom DGK i Ikarosa mogu se generisati bilo kojom od ovde opisanih metoda.
[0704] U jednom otelotvorenju, NK ćelije se dobijaju od subjekta. U drugom otelotvorenju, NK ćelije su NK ćelijska linija, npr. NK-92 ćelijska linija (Conkwest).
[0705] U nekim aspektima, ćelije iz otkrića (npr. imunološke efektorske ćelije iz otkrića, npr. ćelije koje eksprimiraju CAR iz otkrića) su indukovane pluripotentne matične ćelije („iPSC“) ili embrionalne matične ćelije (ESC), ili su T ćelije generisane iz (npr. diferencirane od) navedenih iPSC i/ili ESC. iPSC se mogu generisati, na primer, metodama koje su poznate u struci, iz T limfocita periferne krvi, npr. T limfocita periferne krvi izolovanih od zdravog dobrovoljnog davaoca. Takođe, takve ćelije se mogu diferencirati u T ćelije metodama koje su poznate u struci. Vidi npr. Themeli M. et al., Nat. Biotechnol., 31, pp.928-933 (2013); doi: 10.1038/nbt.2678; WO2014/165707.
[0706] U drugom otelotvorenju, jedinjenja Formule (I') ili Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri ili tautomeri, iz ovog pronalaska koriste se u kombinaciji sa jednim ili više terapijskih agenasa navedenih u Tabeli 13 ili navedenih u patentu i patentnim prijavama navedenim u Tabeli 13, za lečenje karcinoma.
Tabela 13.
Antagonisti estrogenskih receptora
[0707] U nekim otelotvorenjima, antagonist estrogenskog receptora (ER) se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovom farmaceutski prihvatljivom solju, hidratom, solvatom, stereoizomerom ili tautomerom, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, antagonist receptora estrogena je selektivni razgrađivač receptora estrogena (SERD). SERD su antagonisti receptora estrogena koji se vezuju za receptor i rezultiraju npr. degradacijom ili smanjenom regulacijom receptora (Boer K. et al., (2017) Therapeutic Advances in Medical Oncology 9(7): 465-479). ER je hormonski aktivirani transkripcioni faktor važan za npr. rast, razvoj i fiziologiju ljudskog reproduktivnog sistema. ER se aktivira, npr. hormonom estrogenom (17beta estradiolom). Ekspresija i signalizacija ER je uključena u karcinom (npr. karcinom dojke), npr. karcinom dojke pozitivan na ER (ER+). U nekim otelotvorenjima, SERD se bira između LSZ102, fulvestranta, brilanestranta ili elacestranta.
Primeri antagonista estrogenskih receptora
[0708] U nekim otelotvorenjima, agonist SERD se sastoji od jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2014/130310. U nekim otelotvorenjima, SERD sadrži LSZ102. LSZ102 ima hemijski naziv: (E)-3-(4-((2-(2-(1,1-difluoroetil)-4-fluorofenil)-6-hidroksibenzo[b]tiofen-3-il)oksi)fenil)akrilna kiselina.
Drugi primeri antagonista estrogenskih receptora
[0709] U nekim otelotvorenjima, SERD se sastoji od fulvestranta (CAS registarski broj:
129453-61-8), ili jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2001/051056. Fulvestrant je takođe poznat kao ICI 182780, ZM 182780, FASLODEX<®>, ili (7α,17β)-7-{9-[(4,4,5,5,5-pentafluoropentil)sulfinil]nonil}estra-1,3,5(10)-trien-3,17-diol. Fulvestrant je antagonist receptora estrogena visokog afiniteta sa IC50 od 0,29 nM.
[0710] U nekim otelotvorenjima, SERD se sastoji od elacestranta (CAS registarski broj:
722533-56-4) ili jedinjenja obelodanjenog u američkom patentu br.7.612.114. Elacestrant je takođe poznat kao RAD1901, ER-306323 ili (6R)-6-{2-[etil({4-[2-(etilamino)etil]fenil}metil)amino]-4-metoksifenil}-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-ol.
Elacestrant je oralno bioraspoloživi, nesteroidni kombinovani selektivni modulator receptora estrogena (SERM) i SERD. Elacestrant je takođe obelodanjen, npr. kod Garner F et al., (2015) Anticancer Drugs 26(9):948-56.
[0711] U nekim otelotvorenjima, SERD je brilanestrant (CAS registarski broj: 1365888-06-7), ili jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2015/136017. Brilanestrant je takođe poznat kao GDC-0810, ARN810, RG-6046, RO-7056118 ili (2E)-3-{4-[(1E)-2-(2-hloro-4-fluorofenil)-1-(1H-indazol-5-il)but-1-en-1-il]fenil}prop-2-enoična kiselina. Brilanestrant je oralno bioraspoloživi selektivni SERD sledeće generacije sa IC50 od 0,7 nM. Brilanestrant je takođe obelodanjen, npr. kod Lai A. et al. (2015) Journal of Medicinal Chemistry 58 (12): 4888-4904.
[0712] U nekim otelotvorenjima, SERD se bira između RU 58668, GW7604, AZD9496, bazedoksifena, pipendoksifena, arzoksifena, OP-1074 ili acolbifena, npr. kao što je obelodanjeno kod McDonell et al. (2015) Journal of Medicinal Chemistry 58(12) 4883-4887.
Drugi primeri antagonista estrogenskih receptora su obelodanjeni, npr. u WO 2011/156518, WO 2011/159769, WO 2012/037410, WO 2012/037411 i US 2012/0071535.
CDK4/6 inhibitori
[0713] U nekim otelotvorenjima, inhibitor ciklin-zavisnih kinaza 4 ili 6 (CDK4/6) koristi se u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 se bira između ribocikliba, abemacikliba (Eli Lilly) ili palbocikliba.
Primeri CDK4/6 inhibitora
[0714] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 se sastoji od ribocikliba (CAS registarski broj: 1211441-98-3) ili jedinjenja obelodanjenog u američkim patentima br.8.415.355 i 8.685.980.
[0715] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 se sastoji od jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2010/020675 i američkim patentima br. 8.415.355 i 8.685.980.
[0716] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 se sastoji od ribocikliba (CAS registarski broj: 1211441-98-3). Ribociklib je takođe poznat kao LEE011, KISQALI<®>ili 7-ciklopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-6-karboksamid.
Ostali primeri CDK4/6 inhibitora
[0717] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 obuhvata abemaciklib (CAS registarski broj: 1231929-97-7). Abemaciklib je takođe poznat kao LY835219 ili N-[5-[(4-etil-1-piperazinil)metil]-2-piridinil] -5-fluoro-4- [4-fluoro-2-metil-1-(1-metiletil)-1H-benzimidazol-6-il]-2-pirimidinamin. Abemaciklib je CDK inhibitor selektivan za CDK4 i CDK6 i obelodanjen je, npr. kod Torres-Guzman R et al. (2017) Oncotarget 10.18632/oncotarget. 17778.
[0718] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CDK4/6 obuhvata palbociklib (CAS registarski broj: 571190-30-2). Palbociklib je takođe poznat kao PD-0332991, IBRANCE<®>ili 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2-{[5-(1-piperazinil)-2-piridinil] amino }pirido [2,3-d]pirimidin-7(8H)-on. Palbociklib inhibira CDK4 sa IC50 od 11nM i inhibira CDK6 sa IC50 od 16nM i obelodanjen je, npr. kod Finn et al. (2009) Breast Cancer Research 11(5):R77.
CXCR2 inhibitori
[0719] U nekim otelotvorenjima, inhibitor receptor 2 hemokina (C-X-C motiv) (CXCR2) koristi se u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovom farmaceutski prihvatljivom solju, hidratom, solvatom, stereoizomerom ili tautomerom, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, inhibitor CXCR2 je izabran između 6-hloro-3-((3,4-diokso-2-(pentan-3-ilamino)ciklobut-1-en-1-il)amino)-2-hidroksi-N-metoksi-N-metilbenzensulfonamida, daniriksina, repariksina ili navariksina.
Primeri CXCR2 inhibitora
[0720] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CXCR2 se sastoji od jedinjenja obelodanjenog u američkim patentima br.7989497, 8288588, 8329754, 8722925, 9115087, publikacijama američkih prijava br. US 2010/0152205, US 2011/0251205 i US 2011/0251206, i publikacijama međunarodnih patentnih prijava br WO 2008/061740, WO 2008/061741, WO 2008/062026, WO 2009/106539, WO2010/063802, WO 2012/062713, WO 2013/168108, WO 2010/015613 i WO 2013/030803. U nekim otelotvorenjima, CXCR2 inhibitor se sastoji od 6-hloro-3-((3,4-diokso-2-(pentan-3-ilamino)ciklobut-1-en-1-il)amino)-2-hidroksi-N-metoksi-N-metilbenzensulfonamida ili njegove holinske soli. U nekim otelotvorenjima, CXCR2 inhibitor se sastoji od 6-hloro-3-((3,4-diokso-2-(pentan-3-ilamino)ciklobut-1-en-1-il)amino)-2-hidroksi-N-metoksi-N-metilbenzensulfonamid holinske soli. U nekim otelotvorenjima, CXCR2 inhibitor je 2-hidroksi-N,N,N-trimetiletan-1-aminijum 3-hloro-6-({3,4-diokso-2-[(pentan-3-il)amino]ciklobut-1-en-1-il}amino)-2-(N-metoksi-N-metilsulfamoil)fenolat (tj. 6-hloro-3- ((3,4-diokso-2-(pentan-3-ilamino)ciklobut-1-en-1il)amino)-2-hidroksi-N-metoksi-N-metilbenzensulfonamid holinska so) i ima sledeću hemijsku strukturu:
Ostali primeri CXCR2 inhibitora
[0721] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CXCR2 sadrži daniriksin (CAS registarski broj: 954126-98-8). Daniriksin je takođe poznat kao GSK1325756 ili 1-(4-hloro-2-hidroksi-3-piperidin-3-ilsulfonilfenil)-3-(3-fluoro-2-metilfenil)urea. Daniriksin je obelodanjen, npr. kod Miller et al. Eur J Drug Metab Pharmacokinet (2014) 39:173-181; and Miller et al. BMC Pharmacology and Toxicology (2015), 16:18.
[0722] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CXCR2 sadrži repariksin (CAS registarski broj: 266359-83-5). Repariksin je takođe poznat kao repertaksin ili (2R)-2-[4-(2-metilpropil)fenil]-N-metilsulfonilpropanamid. Repariksin je nekompetitivni alosterni inhibitor CXCR1/2.
Repariksin je obelodanjen, npr. kod Zarbock et al. Br J Pharmacol.2008; 155(3):357-64.
[0723] U nekim otelotvorenjima, inhibitor CXCR2 sadrži navariksin. Navariksin je takođe poznat kao MK-7123, SCH 527123, PS291822 ili 2-hidroksi-N,N-dimetil-3-[[2-[[(1R)-1-(5-metilfuran-2-il)propil]amino]-3,4-dioksociklobuten-1-il]amino]benzamid. Navariksin je obelodanjen, npr. kod Ning et al. Mol Cancer Ther.2012; 11(6):1353-64.
CSF-1/1R vezujući agensi
[0724] U nekim otelotvorenjima, CSF-1/1R vezujući agens se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovom farmaceutski prihvatljivom solju, hidratom, solvatom, stereoizomerom ili tautomerom, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R se bira između inhibitora faktora stimulacije kolonija makrofaga (M-CSF), npr. monoklonskog antitela ili Fab na M-CSF (npr. MCS110), inhibitora tirozin kinaze CSF-1R (npr.4-((2-(*(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)benzo[d] tiazol-6-il)oksi)-N-metilpikolinamida ili BLZ945), inhibitora tirozin kinaze receptora (RTK) (npr. peksidartinib) ili antitela koja ciljaju CSF-1R (npr. emaktuzumab ili FPA008). U nekim otelotvorenjima, inhibitor CSF-1/1R je BLZ945. U nekim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R je MCS110. U drugim otelotvorenjima, CSF-1/1R vezujući agens je peksidartinib.
Primeri CSF-1 vezujućih agenasa
[0725] U nekim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R sastoji se od inhibitora faktora stimulacije kolonija makrofaga (M-CSF). M-CSF je ponekad poznat i kao CSF-1. U određenim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R je antitelo na CSF-1 (npr. MCS110). U drugim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R je inhibitor CSF-1R (npr. BLZ945).
[0726] U nekim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R obuhvata monoklonsko antitelo ili Fab na M-CSF (npr. MCS110/H-RX1), ili vezujući agens za CSF-1 otkriven u publikacijama međunarodne patentne prijave br. WO 2004/045532 i WO 2005/068503, uključujući H-RX1 ili 5H4 (npr. molekul antitela ili Fab fragment u odnosu na M-CSF) i US9079956.
Tabela 13a. Aminokiselinske i nukleotidne sekvence primera molekula anti-M-CSF antitela (MCS110)
[0727] U drugom otelotvorenju, vezujući agens CSF-1/1R obuhvata inhibitor tirozin kinaze CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)benzo[d] tiazol-6-il)oksi)-N-metilpikolinamid (BLZ945), ili jedinjenje obelodanjeno u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2007/121484 i američkim patentima br.7.553.854, 8.173.689 i 8.710.048.
Ostali primeri CSF-1/1R vezujućih agenasa
[0728] U nekim otelotvorenjima, CSF-1/1R vezujući agens obuhvata peksidartinib (CAS registarski broj 1029044-16-3). Peksidrtinib je takođe poznat kao PLX3397 ili 5-((5-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-il)metil)-N-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)piridin-2-amin. Peksidartinib je inhibitor tirozin kinaze (RTK) receptora malih molekula KIT, CSF1R i FLT3. FLT3, CSF1R i FLT3 su prekomerno izraženi ili mutirani u mnogim tipovima ćelija karcinoma i igraju glavnu ulogu u proliferaciji i metastaziranju tumorskih ćelija. PLX3397 može da se veže za i inhibira fosforilaciju receptora faktora matičnih ćelija (KIT), receptora faktora 1 koji stimuliše kolonije (CSF1R) i FMS-slične tirozin kinaze 3 (FLT3), što može dovesti do inhibicije proliferacije tumorskih ćelija i down-modulacije makrofaga, osteoklasta i mastocita uključenih u osteolitičku metastatsku bolest.
[0729] U nekim otelotvorenjima, CSF-1/1R vezujući agens je emaktuzumab. Emaktuzumab je takođe poznat kao RG7155 ili RO5509554. Emaktuzumab je humanizovani IgG1 mAb koji targetira CSF1R. U nekim otelotvorenjima, vezujući agens CSF-1/1R je FPA008.
FPA008 je humanizovani mAb koji inhibira CSF1R.
A2aR antagonisti
[0730] U nekim otelotvorenjima, antagonist receptora adenozina A2a (A2aR) (npr. inhibitor puta A2aR, npr. inhibitor adenozina, npr. inhibitor A2aR ili CD-73) koristi se u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I), ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je izabran između PBF509 (NIR178) (Palobiofarma/Novartis), CPI444/V81444 (Corvus/Genentech), AZD4635/HTL-1071 (AstraZeneca/Heptares), vipadenanta (Redox/Juno), GBV-2034 (Globavir), AB928 (Arcus Biosciences), teofilina, istradefilina (Kyowa Hakko Kogyo), tozadenanta/SYN-115 (Acorda), KW-6356 (Kyowa Hakko Kogyo), ST-4206 (Leadiant Biosciences) i preladenanta/SCH 420814 (Merck/Schering).
Primeri A2aR antagonista
[0731] U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR se sastoji od PBF509 (NIR178) ili jedinjenja obelodanjenog u američkom patentu br.8.796.284 ili u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2017/025918. PBF509 (NIR178) je takođe poznat kao NIR178.
Ostali primeri antagonista A2aR
[0732] U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR se sastoji od CPI444/V81444. CPI-444 i drugi antagonisti A2aR su obelodanjeni u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2009/156737. U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je (S)-7-(5-metilfuran-2-il)-3-((6-(((tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)piridin-2-il)metil)-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-5-amin. U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je (R)-7-(5-metilfuran-2-il)-3-((6-(((tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)piridin-2-il)metil)-3H- [1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-5-amin, ili njegov racemat. U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je 7-(5-metilfuran2-il)-3-((6-(((tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)piridin-2-il)metil)-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-5-amin.
[0733] U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je AZD4635/HTL-1071. Antagonisti A2aR su obelodanjeni u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2011/095625. U određenim otelotvorenjima, A2aR antagonist je 6-(2-hloro-6-metilpiridin-4-il)-5-(4-fluorofenil)-1,2,4-triazin-3-amin.
[0734] U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je ST-4206 (Leadiant Biosciences). U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je antagonist A2aR opisan u američkom patentu br. 9.133.197.
[0735] U određenim otelotvorenjima, antagonist A2aR je antagonist A2aR opisan u američkim patentima br.8.114.845 i 9.029.393, publikacijama sa američkim patentnim prijavama br.2017/0015758 i 2016/0129108.
[0736] U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je istradefilin (CAS registarski broj:
155270-99-8). Istradefilin je takođe poznat kao KW-6002 ili 8-[(E)-2-(3,4-dimetoksifenil)vinil]-1,3-dietil-7-metil-3,7-dihidro-1H-purin-2,6-dion. Istradefilin je obelodanjen, npr. in LeWitt et al. (2008) Annals of Neurology 63 (3): 295-302).
[0737] U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je tozadenant (Biotie). Tozadenant je takođe poznat kao SYN115 ili 4-hidroksi-N-(4-metoksi-7-morfolin-4-il-1,3-benzotiazol-2-il)-4-metilpiperidin-1-karboksamid. Tozadenant blokira dejstvo endogenog adenozina na receptore A2a, što rezultira pojačavanjem dejstva dopamina na receptor D2 i inhibicijom dejstva glutamata na receptor mGluR5. U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je preladenant (CAS registarski broj: 377727-87-2). Preladenant je takođe poznat kao SCH 420814 ili 2-(2-furanil)-7-[2-[4-[4-(2-metoksietoksi)fenil]-1-piperazinil]etil]7H-pirazolo[4,3-e][1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-5-amin. Preladenant je razvijen kao lek koji je delovao kao potentan i selektivan antagonist na adenozin A2A receptoru.
[0738] U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je vipadenan. Vipadenan je takođe poznat kao BIIB014, V2006 ili 3-[(4-amino-3-metilfenil)metil]-7-(furan-2-il)triazolo[4,5d]pirimidin-5-amin. Ostali primeri antagonista A2aR uključuju, npr. ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412,348, SCH-442,416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943 i ZM-241,385.
[0739] U nekim otelotvorenjima, antagonist A2aR je antagonist A2aR puta (npr. inhibitor CD-73, npr. anti-CD73 antitelo) je MEDI9447. MEDI9447 je monoklonsko antitelo specifično za CD73. Ciljanje na ekstracelularnu proizvodnju adenozina putem CD73 može smanjiti imunosupresivne efekte adenozina. Prijavljeno je da MEDI9447 ima niz aktivnosti, npr. inhibiciju aktivnosti CD73 ektonukleotidaze, olakšanje od supresije limfocita posredovane AMP-om i inhibiciju rasta singenskog tumora. MEDI9447 može izazvati promene i u populacijama mijeloidnih i limfoidnih infiltrirajućih leukocita u mikrookruženju tumora. Ove promene uključuju, npr. povećanje efektorskih ćelija CD8 i aktiviranih makrofaga, kao i smanjenje udela supresorskih ćelija izvedenih iz mijeloida (MDSC) i regulatornih T limfocita.
IDO inhibitori
[0740] U nekim otelotvorenjima, inhibitor indolamin 2,3-dioksigenaze (iDO) i/ili triptofan 2,3-dioksigenaze (TDO) se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, ido inhibitor se bira između (4E)-4-[(3-hloro-4-fluoroanilino) -nitrosometiliden] -1,2,5-oksadiazol-3-amina (takođe poznatog kao epakadostat ili INCB24360), indoksimoda (), (1-metil-D-triptofana), αcikloheksil-5H-Imidazo [5,1-a] izoindol-5-etanola (takođe poznatog kao NLG919), indoksimoda i BMS-986205 (ranije poznatog kao F001287).
Primeri IDO inhibitora
[0741] U nekim otelotvorenjima, IDO/TDO inhibitor je indoksimod (New Link Genetics). Indoksimod, D izomer 1-metil-triptofana, je oralno primenjen inhibitor puta indolamin 2,3-dioksigenaze (IDO) malih molekula koji ometa mehanizme kojima tumori izbegavaju imunološki posredovano uništenje.
[0742] U nekim otelotvorenjima, IDO/TDO inhibitor je NLG919 (New Link Genetics). NLG919 je potentan inhibitor putanje IDO (indolamin-(2,3)-dioksigenaza) sa Ki/EC50 od 7 nM/75 nM u testovima bez ćelija.
[0743] U nekim otelotvorenjima, IDO/TDO inhibitor je epakadostat (CAS registarski broj: 1204669-58-8). Epakadostat je takođe poznat kao INCB24360 ili INCB024360 (Incyte). Epakadostat je potentan i selektivan inhibitor indolamin 2,3-dioksigenaze (IDO1) sa IC50 od 10 nM, visoko selektivan u odnosu na druge srodne enzime kao što su IDO2 ili triptofan 2,3-dioksigenaza (TDO).
[0744] U nekim otelotvorenjima, IDO/TDO inhibitor je F001287 (Flexus/BMS). F001287 je inhibitor malog molekula indolamin 2,3-dioksigenaze 1 (IDO1).
STING agonisti
[0745] U nekim otelotvorenjima, STRING agonist se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomeroma ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, STING agonist je ciklični dinukleotid, npr. ciklični dinukleotid koji se sastoji od purinskih ili pirimidinskih nukleobaza (npr. adenozin, guanin, uracil, timin ili citozin nukleobaze). U nekim otelotvorenjima, nukleobaze cikličkog dinukleotida se sastoje od iste nukleobaze ili različitih nukleobaza.
[0746] U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od adenozina ili guanozin nukleobaze. U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od jedne adenozin nukleobaze i jedne guanozin nukleobaze. U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od dve adenozin nukleobaze ili dve guanozin nukleobaze.
[0747] U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od modifikovanog cikličkog dinukleotida, npr. koji se sastoji od modifikovane nukleobaze, modifikovane riboze ili modifikovane fosfatne veze. U nekim otelotvorenjima, modifikovani ciklični dinukleotid se sastoji od modifikovane fosfatne veze, npr. tiofosfat.
[0748] U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od cikličkog dinukleotida (npr. modifikovanog cikličkog dinukleotida) sa 2',5' ili 3',5' fosfatnim vezama. U nekim otelotvorenjima, STING agonist se sastoji od cikličkog dinukleotida (npr. modifikovanog cikličkog dinukleotida) sa Rp ili Sp stereohemijom oko fosfatnih veza.
[0749] U nekim otelotvorenjima, STING agonist je MK-1454 (Merck). MK-1454 je ciklični dinukleotidni agonist stimulators gena za interferon (STING) koji aktivira STING putanju. Primeri STING agonista su obelodanjeni, npr. u PCT publikaciji br. WO 2017/027645.
Inhibitori galektina
[0750] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina, npr. galektina-1 ili galektina-3, koristi se u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, kombinacija se sastoji od inhibitora galektina-1 i inhibitora galektina-3. U nekim otelotvorenjima, kombinacija se sastoji od bispecifičnog inhibitora (npr. molekula bispecifičnog antitela) koji targetira i galektin-1 i galektin-3. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina se bira između molekula antigalektin antitela, GR-MD-02 (Galectin Therapeutics), Galektin-3C (Mandal Med), Anginex ili OTX-008 (OncoEthix, Merck). Galektini su porodica proteina koji se vezuju za šećere beta galaktozidaze.
[0751] Porodica proteina galektin obuhvata najmanje galektin-1, galektin-2, galektin-3, galektin-4, galektin-7 i galektin-8. Galektini se takođe nazivaju lektinima tipa S i rastvorljivi su proteini sa, npr. intracelularnim i ekstracelularnim funkcijama.
[0752] Galektin-1 i galektin-3 su visoko izraženi kod različitih tipova tumora. Galektin-1 i galektin-3 mogu promovisati angiogenezu i/ili reprogramirati mijeloidne ćelije prema protumorskom fenotipu, npr. poboljšati imunosupresiju iz mijeloidnih ćelija. Rastvorljivi galektin-3 se takođe može vezati za i/ili inaktivirati infiltraciju T ćelija.
Primeri inhibitora galektina
[0753] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je molekul antitela. U jednom otelotvorenju, molekul antitela je molekul monospecifičnog antitela i vezuje jedan epitop. Npr. molekul monospecifičnog antitela koji ima više sekvenci promenljivog domena imunoglobulina, od kojih svaka vezuje isti epitop. U jednom otelotvorenju, inhibitor galektina je anti-galektin, npr. anti-galektin-1 ili anti-galektin-3, molekul antitela. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je molekul antitela anti-galektin-1. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je molekul antitela anti-galektin-3.
[0754] U jednom otelotvorenju, molekul antitela je multispecifični molekul antitela, npr. sastoji se od mnoštva sekvenci varijabilnih domena imunoglobulina, pri čemu prva sekvenca varijabilnog domena imunoglobulina mnoštva ima specifičnost vezivanja za prvi epitop, a druga sekvenca varijabilnog domena imunoglobulina mnoštva ima specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop su na istom antigenu, npr. na istom proteinu (ili podjedinici multimernog proteina). U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop se preklapaju. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop se ne preklapaju. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop su na različitim antigenima, npr. na različitim proteinima (ili različitim podjedinicama multimernog proteina). U jednom otelotvorenju, multispecifični molekul antitela se sastoji od trećeg, četvrtog ili petog promenljivog domena imunoglobulina. U jednom otelotvorenju, multispecifični molekul antitela je bispecifični molekul antitela, trispecifični molekul antitela ili tetraspecifični molekul antitela.
[0755] U jednom otelotvorenju, inhibitor galektina je multispecifični molekul antitela. U jednom otelotvorenju, multispecifični molekul antitela je bispecifični molekul antitela.
Bispecifično antitelo ima specifičnost za ne više od dva antigena. Molekul bispecifičnog antitela karakteriše prva sekvenca promenljivog domena imunoglobulina koja ima specifičnost vezivanja za prvi epitop i druga sekvenca promenljivog domena imunoglobulina koja ima specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop su na istom antigenu, npr. na istom proteinu (ili podjedinici multimernog proteina). U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop se preklapaju. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop se ne preklapaju. U jednom otelotvorenju, prvi i drugi epitop su na različitim antigenima, npr. na različitim proteinima (ili različitim podjedinicama multimernog proteina). U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela obuhvata sekvencu promenljivog domena teškog lanca i sekvencu promenljivog domena lakog lanca koji imaju specifičnost vezivanja za prvi epitop i sekvencu promenljivog domena teškog lanca i sekvencu promenljivog domena lakog lanca koji imaju specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se sastoji od pola antitela koje ima specifičnost vezivanja za prvi epitop i pola antitela koje ima specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela se sastoji od polovine antitela, ili njegovog fragmenta, koji ima specifičnost vezivanja za prvi epitop i polovine antitela, ili njegovog fragmenta, koji ima specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela obuhvata scFv, ili njegov fragment, koji ima specifičnost vezivanja za prvi epitop, a scFv, ili njegov fragment, koji ima specifičnost vezivanja za drugi epitop. U jednom otelotvorenju, inhibitor galektina je molekul bispecifičnog antitela. U jednom otelotvorenju, prvi epitop se nalazi na galektinu-1, a drugi epitop se nalazi na galektinu-3.
[0756] Protokoli za generisanje bispecifičnih ili heterodimernih molekula antitela su poznati u struci; uključujući, bez ograničenja, na primer, pristup „ispupčenje u udubljenju“ opisan u, npr. US5731168; uparivanje Fc elektrostatičkog upravljanja kao što je opisano u, npr. WO 09/089004, WO 06/106905 i WO 2010/129304; Strand Exchange Engineered Domains (SEED) formiranje heterodimera kao što je opisano u, npr. WO 07/110205; razmena Fab kraka kako je opisano u, npr., WO 08/119353, WO 2011/131746 i WO 2013/060867; dvostruki konjugat antitela, npr. unakrsnim povezivanjem antitela da bi se generisala bispecifična struktura koristeći heterobifunkcionalni reagens koji ima amino-reaktivnu grupu i sulfhidrilnu reaktivnu grupu kao što je opisano u, npr. US4433059; bispecifične determinante antitela generisane rekombinacijom polovine antitela (parovi teških lakih lanaca ili Fabs) iz različitih antitela kroz ciklus redukcije i oksidacije disulfidnih veza između dva teška lanca, kao što je opisano u, npr. US 4444878; trifunkcionalna antitela, npr. tri Fab' fragmenta unakrsno povezana kroz sulfhidril reaktivne grupe, kao što je opisano u, npr. US5273743; biosintetički vezujući proteini, npr. par scFv koji su unakrsno povezani kroz C-terminalne repove po mogućnosti putem disulfidnog ili aminoreaktivnog hemijskog unakrsnog povezivanja, kao što je opisano u, npr. US5534254; bifunkcionalna antitela, npr. Fab fragmenti sa različitim specifičnostima vezivanja dimerizovani putem zipera sa leucinom (npr., c-fos i c-jun) koji su zamenili konstantni domen, kao što je opisano u, npr. US5582996; bispecifični i oligospecifični mono- i oligovalentni receptori, npr. VH-CH1 regioni dva antitela (dva Fab fragmenta) povezani polipeptidnim spejserom između CH1 regiona jednog antitela i VH regiona drugog antitela tipično sa povezanim lakim lancima, kao što je opisano u, npr. US5591828; bispecifični DNK-antitelo konjugati, npr. unakrsno povezivanje antitela ili Fab fragmenata kroz dvolančani deo DNK, kao što je opisano u, npr. US5635602; bispecifični fuzioni proteini, npr. ekspresijski konstrukt koji sadrži dva scFv sa hidrofilnom spiralnom peptidnom vezom između njih i punog konstantnog regiona, kao što je opisano u, npr. US5637481; multivalentni i multispecifični vezni proteini, npr. dimer polipeptida koji imaju prvi domen sa regionom vezivanja varijabilnog regiona Ig teškog lanca, i drugi domen sa regionom vezivanja varijabilnog regiona Ig lakog lanca, koji se generalno naziva diatelima (strukture višeg reda se takođe otkrivaju stvarajući bispecifične, trispecifične ili tetraspecifične molekule, kao što je opisano u, npr. US5837242; minibodi konstrukti sa povezanim VL i VH lancima koji su dalje povezani sa peptidnim odstojnicima sa regionom šarke antitela i CH3 regionom, koji se mogu dimerizovati kako bi se formirali bispecifični/multivalentni molekuli, kao što je opisano u, npr. US5837821; VH i VL domeni povezani sa kratkim peptidnim linkerom (npr. 5 ili 10 aminokiselina) ili bez linkera uopšte u bilo kojoj orijentaciji, koji mogu formirati dimere za formiranje bispecifičnih dijabetičara; trimera i tetramera, kao što je opisano u, npr. US5844094; niz VH domena (ili VL domena kod članova porodice) povezanih peptidnim vezama sa unakrsno povezljivim grupama na C-terminusu koji je dalje povezan sa VL domenima da bi se formirao niz FVs (ili scFvs), kao što je opisano u, npr. US5864019; i jednolančani vezujući polipeptidi sa VH i VL domenom povezanim preko peptidnog linkera kombinuju se u multivalentne strukture putem nekovalentnog ili hemijskog unakrsnog povezivanja kako bi se formirale, npr. homobivalentne, heterobivalentne, trovalentne i tetravalentne strukture koristeći i scFV ili format diatela, kao što je opisano u, npr. US5869620. Dodatni primeri multispecifičnih i bispecifičnih molekula i metode njihovog pravljenja mogu se naći, na primer, u US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002/004587A1, US2002/076406A1, US2002/103345A1, US2003/207346A1, US2003/211078A1, US2004/219643A1, US2004/220388A1, US2004/242847A1, US2005/003403A1, US2005/004352A1, US2005/069552A1, US2005/079170A1, US2005/100543A1, US2005/136049A1, US2005/136051A1, US2005/163782A1, US2005/266425A1, US2006/083747A1, US2006/120960A1, US2006/204493A1, US2006/263367A1, US2007/004909A1, US2007/087381A1, US2007/128150A1, US2007/141049A1, US2007/154901A1, US2007/274985A1, US2008/050370A1, US2008/069820A1, US2008/152645A1, US2008/171855A1, US2008/241884A1, US2008/254512A1, US2008/260738A1, US2009/130106A1, US2009/148905A1, US2009/155275A1, US2009/162359A1, US2009/162360A1, US2009/175851A1, US2009/175867A1, US2009/232811A1, US2009/234105A1, US2009/263392A1, US2009/274649A1, EP346087A2, WO00/06605A2, WO02/072635A2, WO04/081051A1, WO06/020258A2, WO2007/044887A2, WO2007/095338A2, WO2007/137760A2, WO2008/119353A1, WO2009/021754A2, WO2009/068630A1, WO91/03493A1, WO93/23537A1, WO94/09131A1, WO94/12625A2, WO95/09917A1, WO96/37621A2, WO99/64460A1.
[0757] U drugim otelotvorenjima, anti-galektin, npr. anti-galektin-1 ili anti-galektin-3, molekul antitela (npr. monospecifični, bispecifični ili multispecifični molekul antitela) je kovalentno povezan, npr. fuzionisan, sa drugim partnerom, npr. proteinom, npr. kao fuzioni molekul, na primer fuzioni protein. U jednom otelotvorenju, molekul bispecifičnog antitela ima prvu specifičnost vezivanja za prvi cilj (npr. za galektin-1), drugu specifičnost vezivanja za drugi cilj (npr., galektin-3).
[0758] Ovaj pronalazak navodi izolovani molekul nukleinske kiseline koji kodira gorenavedeni molekul antitela, njegove vektore i ćelije domaćina. Molekul nukleinske kiseline uključuje, bez ograničenja, RNK, genomsku DNK i cDNK.
[0759] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je peptid, npr. protein, koji se može vezati za funkciju galektina i inhibirati je, npr. galektin-1 ili galektin-3. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je peptid koji se može vezati za funkciju galektina-3 i inhibirati je. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je peptid galektin-3C. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je inhibitor galektina-3 otkriven u američkom patentu 6.770.622.
[0760] Galektin-3C je N-terminalni skraćeni protein galektina-3 i funkcioniše, npr. kao kompetitivni inhibitor galektina-3. Galektin-3C sprečava vezivanje endogenog galektina-3 za, npr. laminin na površini, npr. ćelija karcinoma, i druge beta-galaktozidazne glikokonjugate u ekstracelularnom matriksu (ECM). Galektin-3C i drugi primeri peptida koji inhibiraju galektin otkriveni su u američkom patentu 6.770.622.
[0761] U nekim otelotvorenjima, galektin-3C se sastoji od aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 279 ili aminokiseline koja joj je suštinski identična (npr.90, 95 ili 99%).
[0762] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je peptid koji se može vezati za funkciju galektina-1 i inhibirati je. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je peptid Anginex: Anginex je antiangiongeni peptid koji vezuje galektin-1 (Salomonsson E, et al., (2011) Journal of Biological Chemistry, 286(16):13801-13804). Vezivanje Anginex-a za galektin-1 može ometati, npr. proangiongene efekte galektina-1.
[0763] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina, npr. . galektina-1 ili galektina-3, je nepeptidni topomimetički molekul. U nekim otelotvorenjima, nepeptidni topomimetički inhibitor galektina je OTX-008 (OncoEthix). U nekim otelotvorenjima, nepeptidni topomimetik je nepeptidni topomimetik otkriven u američkom patentu 8.207.228. OTX-008, takođe poznat kao PTX-008 ili Calixarene 0118, je selektivni alosterički inhibitor galektina-1. OTX-008 ima hemijski naziv: N-[2-(dimetilamino)etil]-2-{[26,27,28-tris ({[2-(dimetilamino)etil]karbamoil}metoksi)pentaciklo[19.3.1.1,7.1,.15,]oktakoza-1(25),3(28),4,6,9(27),1012,15,17,19 (26),21,23-dodekaen-25-il]oksi}acetamid.
[0764] U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina, npr. galektina-1 ili galektina-3, je jedinjenje na bazi ugljenih hidrata. U nekim otelotvorenjima, inhibitor galektina je GR-MD-02 (Galectin Therapeutics).
[0765] U nekim otelotvorenjima, GR-MD-02 je inhibitor galektina-3. GR-MD-02 je polisaharid vezan za galaktozu koji se takođe naziva, npr. a galaktoarabino-ramnogalaturonat. GR-MD-02 i drugi polimeri usmereni na galaktozu, npr. galaktoarabino-ramnogalaturonati, otkriveni su u američkom patentu 8.236.780 i američkoj publikaciji 2014/0086932.
MEK inhibitori
[0766] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomeroma ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se bira između trametiniba, selametiniba, AS703026, BIX 02189, BIX 02188, CI-1040, PD0325901, PD98059, U0126, XL-518, G-38963 ili G02443714. U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor je trametinib.
Primeri MEK inhibitora
[0767] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor je trametinib. Trametinib je takođe poznat kao JTP-74057, TMT212, N-(3-{3-ciklopropil-5-[(2-fluoro-4-jodofenil)amino]-6,8-dimetil-2,4,7-triokso-3,4,6,7-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-1 (2H)-il}fenil)acetamid ili Mekinist (CAS broj 871700-17-3).
Ostali primeri MEK inhibitora
[0768] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od selametiniba koji ima hemijski naziv: (5-[(4-bromo-2-hlorofenil)amino]-4-fluoro-N-(2-hidroksietoksi)-1-metil-1H-benzimidazol-6-karboksamid. Selumetinib je takođe poznat kao AZD6244 ili ARRY 142886, npr. kao što je opisano u PCT publikaciji br. WO2003077914.
[0769] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od AS703026, BIX 02189 ili BIX 02188.
[0770] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od 2-[(2-hloro-4-jodofenil)amino]-N-(ciklopropilmetoksi)-3,4-difluoro-benzamida (poznat i kao CI-1040 ili PD184352), npr. kao što je opisano u PCT publikaciji br. WO2000035436).
[0771] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od N-[(2R)-2,3-dihidroksipropoksi]-3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-jodofenil)amino]- benzamida (takođe poznatog kao PD0325901), npr. kao što je opisano u PCT publikaciji br. WO2002006213).
[0772] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od 2'-amino-3'-metoksiflavona (takođe poznatog kao PD98059) koji je dostupan kod Biaffin GmbH & Co., KG, Nemačka.
[0773] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od 2,3-bis[amino[(2-aminofenil)tio]metilen]-butandinitrila (takođe poznatog kao U0126), npr. kao što je opisano u američkom patentu br.2.779.780).
[0774] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od XL-518 (takođe poznat kao GDC-0973) koji ima CAS broj 1029872-29-4 i dostupan je kod ACC Corp.
[0775] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od G-38963.
[0776] U nekim otelotvorenjima, MEK inhibitor se sastoji od G02443714 (takođe poznat kao AS703206)
[0777] Dodatni primeri MEK inhibitora objavljeni su u WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 i WO 2009/085983. Dalji primeri MEK inhibitora uključuju, bez ograničenja, 2,3-bis [amino[(2-aminofenil)tio]metilen]-butanedinitril (takođe poznat kao U0126 i opisan u američkom patentu br.2.779.780);
(3S,4R5Z,8S,9S,11E)-14-(etilamino) -8,9,16-trihidroksi-3,4-dimetil-3,4,9,19-tetrahidro-1H-2-benzoksacikotetradecin-1,7(8H)-dion] (takođe poznat kao E6201, opisan u PCT publikaciji br. WO2003076424); vemurafenib (PLX-4032, CAS 918504-65-1); (R)-3-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-5-(2-fluoro-4-jodofenilamino)-8-metilpirido [2,3-d] pirimidin-4,7(3H ,8H)-dion (TAK-733, CAS 1035555-63-5); pimasertib (AS-703026, CAS 1204531-26-9); 2-(2-fluoro-4-jodofenilamino)-N-(2-hidroksietoksi)-1,5-dimetil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-karboksamid (AZD 8330); i 3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-jodofenil)amino]-N-(2-hidroksietoksi)-5-[(3-okso-[1,2]oksinanazl-2-il)metil]benzamid (CH 4987655 ili Ro 4987655).
c-MET inhibitori
[0778] U nekim otelotvorenjima, inhibitor c-MET se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. c-MET, receptorska tirozin kinaza prekomerno izražena ili mutirana u mnogim tipovima tumorskih ćelija, igra ključnu ulogu u proliferaciji tumorskih ćelija, preživljavanju, invaziji, metastazama i angiogenezi tumora. Inhibicija c-MET-a može izazvati smrt ćelija u tumorskim ćelijama koje prekomerno eksprimiraju c-MET protein ili eksprimiraju konstitutivno aktivirani c-MET protein.
[0779] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor se bira između kapmatiniba (INC280), JNJ-3887605, AMG 337, LY2801653, MSC2156119J, krizotiniba, tivantiniba ili golvatiniba.
Primeri c-MET inhibitora
[0780] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor obuhvata kapmatinib (INC280) ili jedinjenje opisano u američkom patentu br.7.767.675 i američkom patentu br.8.461.330.
Ostali primeri c-MET inhibitora
[0781] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor se sastoji od JNJ-38877605. JNJ-38877605 je oralno dostupan inhibitor malog molekula c-Met. JNJ-38877605 se selektivno vezuje za c-MET, čime inhibira c-MET fosforilaciju i ometa puteve transdukcije c-Met signala.
[0782] U nekim otelotvorenjima, c-Met inhibitor je AMG 208. AMG 208 je selektivni inhibitor c-MET-a malog molekula. AMG 208 inhibira aktivaciju c-MET-a zavisnu od liganda i nezavisnu od liganda, inhibišući njegovu aktivnost tirozin kinaze, što može dovesti do inhibicije rasta ćelija kod tumora koji prekomerno eksprimiraju c-Met.
[0783] U nekim otelotvorenjima, c-Met inhibitor obuhvata AMG 337. AMG 337 je oralno bioraspoloživi inhibitor c-Met. AMG 337 se selektivno vezuje za c-MET, čime se ometaju putevi transdukcije c-MET signala.
[0784] U nekim otelotvorenjima, c-Met inhibitor se sastoji od LY2801653. LY2801653 je oralno dostupan inhibitor malog molekula c-Met. LY2801653 se selektivno vezuje za c-MET, čime inhibira c-MET fosforilaciju i ometa puteve transdukcije c-Met signala.
[0785] U nekim otelotvorenjima, c-Met inhibitor se sastoji od MSC2156119J. MSC2156119J je oralno bioraspoloživi inhibitor c-Met. MSC2156119J se selektivno vezuje za c-MET, koji inhibira c-MET fosforilaciju i remeti puteve transdukcije signala posredovane c-Met-om.
[0786] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor je kapmatinib. Kapmatinib je takođe poznat kao INCB028060. Kapmatinib je oralno bioraspoloživi c-MET inhibitor. Kapmatinib se selektivno vezuje za c-MET, čime inhibira c-MET fosforilaciju i ometa puteve transdukcije c-Met signala.
[0787] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor se sastoji od krizotiniba. Krizotinib je takođe poznat kao PF-02341066. Krizotinib je oralno dostupan inhibitor receptora anaplastične kinaze tirozin kinaze (ALK) i c-Met/receptora faktora rasta hepatocita (HGFR) na bazi aminopiridina. Krizotinib se, na ATP-konkurentan način, vezuje za i inhibira ALK kinazu i ALK fuzione proteine. Pored toga, krizotinib inhibira c-Met kinazu i remeti c-Met signalni put. Sve u svemu, ovaj agens inhibira rast tumorskih ćelija.
[0788] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor obuhvata golvatinib. Golvatinib je oralno bioraspoloživi dvostruki inhibitor kinaze c-MET i VEGFR-2 sa potencijalnom antineoplastičnom aktivnošću. Golvatinib se vezuje za i inhibira aktivnosti i c-MET i VEGFR-2, što može inhibirati rast tumorskih ćelija i preživljavanje tumorskih ćelija koje prekomerno eksprimiraju ove receptorske tirozin kinaze.
[0789] U nekim otelotvorenjima, c-MET inhibitor je tivantinib. Tivantinib je takođe poznat kao ARQ 197. Tivantinib je oralno bioraspoloživi inhibitor c-MET-a malog molekula.
Tivantinib se vezuje za c-MET protein i remeti puteve transdukcije c-Met signala, što može izazvati smrt ćelija u tumorskim ćelijama koje prekomerno eksprimiraju c-MET protein ili eksprimiraju konstitutivno aktivirani c-Met protein.
TGF-β inhibitori
[0790] U nekim otelotvorenjima, inhibitor transformacionog faktora rasta beta (takođe poznat kao TGF-β TGFβ, TGFb ili TGF-beta, koji se ovde koriste naizmenično), koristi se u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U određenim otelotvorenjima, ovde opisana kombinacija se sastoji od inhibitora transformacionog faktora rasta beta (takođe poznatog kao TGF-β TGFβ, TGFb ili TGF-beta, koji se ovde koriste naizmenično).
[0791] TGF-β pripada velikoj porodici strukturno povezanih citokina, uključujući npr. koštane morfogenetske proteine (BMP), faktore rasta i diferencijacije, aktivine i inhibine. U nekim otelotvorenjima, ovde opisani inhibitori TGF-β mogu da vežu i/ili inhibiraju jednu ili više izoformi TGF-β (npr. jednu, dve ili sve TGF-β1, TGF-β2 ili TGF-β3).
[0792] U normalnim uslovima, TGF-β održava homeostazu i ograničava rast epitelnih, endotelnih, neuronskih i hematopoetskih ćelijskih linija, npr. putem indukcije antiproliferativnih i apoptotičkih odgovora. Kanonski i nekanonski signalni putevi su uključeni u ćelijske odgovore na TGF-β. Aktivacija kanonskog puta TGF-β/Smad može posredovati u antiproliferativnim efektima TGF-β. Nekanonski TGF-β put može aktivirati dodatne unutarćelijske puteve, npr. proteinske kinaze aktivirane mitogenom (MAPK), fosfatidilinozitol 3 kinaze/proteinska kinaze B, ro-slične GTPaze (Tian et al. Cell Signal. 2011; 23(6):951-62; Blobe et al. N Engl J Med.2000; 342(18):1350-8), čime se modulira epitelna do mezenhimalna tranzicija (EMT) i/ili motilitet ćelija.
[0793] Promene signalnog puta TGF-β povezane su sa ljudskim bolestima, npr. karcinomima, kardiovaskularnim bolestima, fibrozom, reproduktivnim poremećajima i zarastanjem rana. Bez namere vezivanja određenom teorijom, veruje se da u nekim otelotvorenjima uloga TGF-β u karcinomu zavisi od okruženja bolesti (npr. stadijuma tumora i genetske promene) i/ili ćelijskog konteksta. Na primer, u kasnim stadijumima karcinoma, TGF-β može modulisati proces povezan sa karcinomom, npr. promovisanjem rasta tumora (npr. indukovanjem EMT-a), blokiranjem antitumorskih imunoloških odgovora, povećanjem fibroze povezane sa tumorom ili poboljšanjem angiogeneze (Wakefield i Hill Nat Rev Cancer.2013; 13(5):328-41). U određenim otelotvorenjima, kombinacija koja se sastoji od TGF-β inhibitora opisanog u ovom dokumentu koristi se za lečenje karcinoma u kasnoj fazi, metastatskog karcinoma ili uznapredovalog karcinoma.
[0794] Pretklinički dokazi ukazuju na to da TGF-β igra važnu ulogu u imunološkoj regulaciji (Wojtowicz-Praga Invest New Drugs.2003; 21(1):21-32; Yang et al. Trends Immunol.2010; 31(6):220-7). TGF-β može da smanji imunološki odgovor domaćina putem nekoliko mehanizama, npr. pomeranjem bilansa T-pomoćnika ka Th2 imunološkom fenotipu; inhibicijom antitumorskog odgovora tipa Th1 i makrofaga tipa M1; supresijom citotoksičnih CD8+ T limfocita (CTL), NK limfocita i funkcija dendritičkih ćelija, generisanjem CD4+CD25+ T-regulatornih ćelija; ili promocijom makrofaga tipa M2 sa pro-tumorskim delovanjem posredovanim sekrecijom imunosupresivnih citokina (npr. IL10 ili VEGF), proinflamatornih citokina (npr. IL6, TNFα ili IL1) i generisanjem reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) sa genotoksičnom aktivnošću (Yang et al. Trends Immunol. 2010; 31(6):220-7; Truty and Urrutia Pancreatology. 2007; 7(5-6):423-35; Achyut et al Gastroenterology. 2011; 141(4): 1167-78).
Primeri TGF-β inhibitora
[0795] U nekim otelotvorenjima, TGF-β inhibitor se sastoji od XOMA 089, ili jedinjenja obelodanjenog u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2012/167143.
[0796] XOMA 089 je takođe poznat kao XPA.42.089. XOMA 089 je potpuno humano monoklonsko antitelo koje se specifično vezuje i neutrališe TGF-beta 1 i 2 ligande.
[0797] Varijabilni region teškog lanca XOMA 089 ima aminokiselinsku sekvencu:
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGT ANYAQKF QGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVS
S (SEQ ID NO: 284) (obelodanjenu kao SEQ ID NO: 6 u WO 2012/167143). Varijabilni region lakog lanca XOMA 089 ima aminokiselinsku sekvencu:
SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLVVSEDIIRPSGIP ERISGSNSG NTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (SEQ ID NO: 285) (obelodanjenu kao SEQ ID NO: 8 u WO 2012/167143).
[0798] XOMA 089 se vezuje sa visokim afinitetom za humane izoforme TGF-β. U načelu, XOMA 089 se vezuje sa visokim afinitetom za TGF-β1 i TGF-β2, a u manjoj meri za TGFβ3. U Biacore testovima, KDXOMA 089 na humanom TGF-β je 14,6 pM za TGF-β1, 67,3 pM za TGF-β2 i 948 pM za TGF-β3. S obzirom na visok afinitet vezivanja za sve tri TGF-β izoforme, u određenim otelotvorenjima, očekuje se da se XOMA 089 vezuje za TGF-β1, 2 i 3 u dozi XOMA 089 kao što je ovde opisano. XOMA 089 unakrsno reaguje sa TGF-β kod glodara i cinomolgus majmuna i pokazuje funkcionalnu aktivnost in vitro i in vivo, čineći glodare i cinomolgus majmune relevantnim vrstama za toksikološka ispitivanja.
Ostali primeri TGF-β inhibitora
[0799] U nekim otelotvorenjima, TGF-β inhibitor se sastoji od frezolimumaba (CAS registarski broj: 948564-73-6). Frezolimumab je takođe poznat kao GC1008. Frezolimumab je humano monoklonsko antitelo koje se vezuje za TGF-beta izoforme 1, 2 i 3 i inhibira ih.
[0800] Teški lanac frezolimumaba ima aminokiselinsku sekvencu:
[0801] Laki lanac frezolimumaba ima aminokiselinsku sekvencu:
[0802] Frezolimumab je obelodanjen, npr. u publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2006/086469 i u američkim patentima br.8.383.780 i 8.591.901.
IL-1β inhibitori
[0803] Porodica citokina interleukin-1 (IL-1) je grupa izlučenih pleotropnih citokina sa centralnom ulogom u inflamatornom i imunološkom odgovoru. Povećanje IL-1 primećeno je u više kliničkih okruženja, uključujući karcinom (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p.
387-408; Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p.599-606). Porodica IL-1 obuhvata, između ostalog, IL-1 beta (IL-1b) i IL-1alfa (IL-1a). IL-1b je povišen kod karcinoma pluća, dojke i kolorektalnog karcinoma (Voronov et al. (2014) Front Physiol. p.114) i dovodi se u vezu sa lošom prognozom (Apte et al. (2000) Adv. Exp. Med. Biol. p.277-88). Bez namere vezivanja određenom teorijom, veruje se da u nekim otelotvorenjima, izlučeni IL-1b, izveden iz tumorske mikrookruženja i malignih ćelija, promoviše proliferaciju tumorskih ćelija, povećava invazivnost i prigušuje antitumorski imuni odgovor, delimično regrutovanjem inhibitornih neutrofila (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p.387-408; Miller et al. (2007) J. Immunol. p.6933-42). Eksperimentalni podaci ukazuju da inhibicija IL-1b rezultuje smanjenjem tumorskog opterećenja i metastaza (Voronov et al. (2003) Proc. Natl. Akad. Sci. U.S.A. p.2645-50).
[0804] U nekim otelotvorenjima, inhibitor interleukina-1 beta (IL-1β) se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, npr. karcinoma. U nekim otelotvorenjima, inhibitor IL-1β se bira između kanakinumaba, gevokizumaba, Anakinre ili Rilonacepta. U nekim otelotvorenjima, inhibitor IL-1β je kanakinumab.
Primeri inhibitora IL-1β
[0805] U nekim otelotvorenjima, inhibitor IL-1β je kanakinumab. Kanakinumab je takođe poznat kao ACZ885 ili ILARIS<®>. Kanakinumab je humano monoklonsko IgG1/κ antitelo koje neutrališe bioaktivnost ljudskog IL-1β.
[0806] Kanakinumab je obelodanjen, npr. u WO 2002/16436, US 7.446.175 i EP 1313769. Varijabilni region teškog lanca kanakinumaba ima aminokiselinsku sekvencu:
MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSVYGMNW VRQAPGK GLEWVAIIWYDGDNQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNGLRAEDTAVYYCAR DLRTGPFD YWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 282) (obelodanjenu kao SEQ ID NO: 1 u US 7.446.175). Varijabilni region lakog lanca kanakinumaba ima aminokiselinsku sekvencu: MLPSQLIGFLLLWVPASRGEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASQSIGSSLHWYQQKP DQSPKLLI KYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPFTFGPGTKVDIK
(SEQ ID NO: 283) (obelodanjenu kao SEQ ID NO: 2 u US 7.446.175).
[0807] Kanakinumab se koristi, npr. za lečenje periodičnih sindroma povezanih sa kriopirinom (CAPS), kod odraslih i dece, za lečenje sistemskog juvenilnog idiopatskog artritisa (SJIA), za simptomatsko lečenje akutnih napada uričnog artritisa kod odraslih i za druge inflamatorne bolesti izazvane IL-1β. Bez namere vezivanja određenom teorijom, veruje se da u nekim otelotvorenjima inhibitori IL-1β, npr. kanakinumab, mogu povećati antitumorski imuni odgovor, npr. blokiranjem jedne ili više funkcija IL-1b, uključujući, npr. regrutovanje imunosupresivnih neutrofila u mikrookruženje tumora, stimulaciju angiogeneze tumora i/ili promociju metastaza (Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p.599-606).
[0808] U nekim otelotvorenjima, ovde opisana kombinacija uključuje inhibitor IL-1β, kanakinumab ili jedinjenje otkriveno u WO 2002/16436 i inhibitor molekula imunološke kontrolne tačke, npr. inhibitor of PD-1 (npr. molekul anti-PD-1 antitela). IL-1 je izlučeni pleotropni citokin sa centralnom ulogom u zapaljenju i imunološkom odgovoru. Povećanje IL-1 primećeno je u više kliničkih okruženja, uključujući karcinom (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p.387-408; Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p.599-606). IL-1b je povišen kod karcinoma pluća, dojke i kolorektalnog karcinoma (Voronov et al. (2014) Front Physiol. p. 114) i dovodi se u vezu sa lošom prognozom (Apte et al. (2000) Adv. Exp. Med. Biol. p. 277-88). Bez namere vezivanja određenom teorijom, veruje se da u nekim otelotvorenjima, izlučeni IL-1b, izveden iz tumorske mikrookruženja i malignih ćelija, promoviše proliferaciju tumorskih ćelija, povećava invazivnost i prigušuje antitumorski imuni odgovor, delimično regrutovanjem inhibitornih neutrofila (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p.387-408; Miller etal. (2007) J. Immunol. p.6933-42). Eksperimentalni podaci ukazuju da inhibicija IL-1b rezultuje smanjenjem tumorskog opterećenja i metastaza (Voronov et al. (2003) Proc. Natl. Akad. Sci. U.S.A, p.2645-50). Kanakinumab može da veže IL-1b i inhibira signalizaciju posredovanu IL-1. Shodno tome, u određenim otelotvorenjima, inhibitor IL-1β, npr. kanakinumab, poboljšava ili se koristi za poboljšanje imunološki posredovanog antitumorskog efekta inhibitora PD-1 (npr. molekul anti-PD-1 antitela).
[0809] U nekim otelotvorenjima, inhibitor IL-1β, kanakinumab ili jedinjenje otkriveno u WO 2002/16436, i inhibitor molekula imunološke kontrolne tačke, npr. inhibitor PD-1 (npr. molekul anti-PD-1 antitela), svaki se primenjuje u dozi i/ili po vremenskom rasporedu, koji u kombinaciji postiže željenu antitumorsku aktivnost.
MDM2 inhibitori
[0810] U nekim otelotvorenjima, inhibitor mišjeg dvominutnog homologa (MDM2) se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima Formule (I') ili Formule (I) ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima, hidratima, solvatima, stereoizomerima ili tautomerima, za lečenje bolesti, na primer, karcinoma. Humani homolog MDM2 je takođe poznat kao HDM2. U nekim otelotvorenjima, ovde opisani inhibitor MDM2 je takođe poznat kao inhibitor HDM2. U nekim otelotvorenjima, inhibitor MDM2 se bira između HDM201 ili CGM097.
[0811] PAT058178-EP-EPT U jednom otelotvorenju, MDM2 inhibitor se sastoji od (S)-1-(4-hlorofenil)-7-izopropoksi-6-metoksi-2-(4-(metil (((1r,4S)-4-(4-metil-3-oksopiperazin-1-il)cikloheksil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroizokinolin-3 (4H)-ona (takođe poznat kao CGM097) ili jedinjenja obelodanjenog u PCT publikaciji br. WO 2011/076786 za lečenje poremećaja, npr. poremećaja opisanih u ovom dokumentu). U jednom otelotvorenju, ovde obelodanjeno terapijsko sredstvo se koristi u kombinaciji sa CGM097.
[0812] U jednom otelotvorenju, MDM2 inhibitor se sastoji od inhibitora p53 i/ili interakcije p53/Mdm2. U jednom otelotvorenju, MDM2 inhibitor se sastoji od (S)-5-(5-hloro-1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-hlorofenil)-2-(2,4-dimetoksipirimidin-5-il)-1-izopropil-5,6-dihidropirolo[3,4-d] imidazol-4 (1H)-ona (takođe poznatog kao HDM201) ili jedinjenja obelodanjenog u PCT publikaciji br. WO2013/111105 za lečenje poremećaja, npr. . poremećaja opisanih u ovom dokumentu. U jednom otelotvorenju, ovde obelodanjeno terapijsko sredstvo se koristi u kombinaciji sa HDM201. U nekim otelotvorenjima, HDM201 se primenjuje oralno.
[0813] U jednom otelotvorenju, ovde obelodanjena kombinacija je pogodna za lečenje karcinoma in vivo. Na primer, kombinacija se može koristiti za inhibiciju rasta kancerogenih tumora. Kombinacija se takođe može koristiti u kombinaciji sa jednim ili više: standardnih tretmana nege (npr. za karcinom ili zarazne poremećaje), vakcina (npr. terapijska vakcina protiv karcinoma), ćelijskih terapija, terapija zračenjem, operacijama ili bilo kojim drugim terapijskim agensima ili modalitetima, za lečenje poremećaja u ovom dokumentu. Na primer, da bi se postiglo poboljšanje imuniteta specifično za antigen, kombinacija se može primeniti zajedno sa antigenom od interesa.
PRIMERI
[0814] Pronalazak je dalje ilustrovan sledećim primerima i šemama sinteze. Podrazumeva se da su primeri ovde navedeni da ilustruju određena otelotvorenja i da se time ne nameće nikakvo ograničenje obima pronalaska.
[0815] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se dobiti postupcima koji su dobro poznati u oblasti organske sinteze. U svim metodama se podrazumeva da se zaštitne grupe za osetljive ili reaktivne grupe mogu koristiti kada je to potrebno u skladu sa opštim principima hemije. Zaštitnim grupama se manipuliše u skladu sa standardnim metodama organske sinteze (T. W. Green and P. G. M. Wuts (1999) Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons). Ove grupe se uklanjaju u pogodnoj fazi sinteze jedinjenja primenom metoda koje su dobro poznate u struci.
Analitičke metode, materijali i instrumentacija
[0816] Osim ako nije drugačije navedeno, korišćeni su reagensi i rastvarači pribavljeni od komercijalnih dobavljača. Spektri protonske nuklearne magnetne rezonance (NMR) su dobijeni ili na Bruker Avance spektrometru ili na Varian Oxford 400 MHz spektrometru, osim ako nije drugačije naznačeno. Spektri su dati u ppm (δ) dok su konstante spajanja, J, prijavljene u hercima. Tetrametilsilan ((CH3)4Si) je primenjen kao interni standard. Hemijski pomaci su prijavljeni u ppm u odnosu na dimetil sulfoksid (δ 2,50), metanol (δ 3,31), hloroform (δ 7,26) ili drugi rastvarač kao što je naznačeno u spektralnim podacima NMR. Mala količina suvog uzorka (2-5 mg) rastvorena je u odgovarajućem deuterisanom rastvaraču (1 ml). Hemijska imena su generisana pomoću ChemBioDraw Ultra v14 iz Cambridge Soft.
[0817] Maseni spektri (ESI-MS) su prikupljeni korišćenjem sistema Waters (Acquity UPLC i Micromass ZQ maseni spektrometar) ili Agilent-1260 Infinity (6120 Quadrupole); sve prijavljene mase su m/z protoniranih matičnih jona, osim ako nije drugačije zabeleženo.
Uzorak je rastvoren u raspoloživom rastvaraču kao što su MeCN, DMSO ili MeOH i ubrizgan direktno u kolonu korišćenjem automatizovanog uređaja za rukovanje uzorkom.
[0818] Skraćenice koje se koriste u sledećim primerima i na drugim mestima u dokumentu su:
AgOTf
srebro trifluorometansulfonat
AIBN
azobisizobutironitril
vod.
vodeni
Boc
terc-butiloksikarbonil
Bu
butil
Bu4NI ili TBAI
tetrabutilamonijum jodid
br
široki
DAST
dietilaminosumpor trifluorid DBAD
di-terc-butil azodikarboksilat DBU
1,8-diazabiciclo[5.4.0]undeka-7-en DCM
dihlorometan ili metilen hlorid d
dublet
dd
dublet dubleta
ddd
dublet dubleta dubleta
dddd
dublet dubleta dubleta dubleta DHP
dihidropiran
DIAD
diizopropil azodikarboksilat DMA
N,N-dimetilacetamid
DMAP
4-dimetilaminopiridin
DME
1,2-dimetoksietan (dimetoksietan) DMF
N,N-dimetilformamid
DMP
Des–Martinov perjodinan DMSO
dimetilsulfoksid
dq
dublet kvarteta
dt
dublet tripleta
dtd
dublet tripleta dubleta
dtbbpi
4,4'-di-terc-butil-2,2'-bipiridin
EC50
polovina maksimalne efektivne koncentracije (kvalifikovano) Et
etil
Et2O
dietil etar
EtOAc
etil acetat
EtOH
etanol
EtsSiH
trietilsilan
g
gram
h ili hr
sat
hept
heptet
heptd
heptet dubleta
HPLC
tečna hromatografija visokih performansi HRMS
masena spektrometrija visoke rezonancije i-Pr
izopropil
i-Pr2NEt ili DIPEA N,N-diizopropiletilamin
IPA
Izo-propanol
Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6
4,4'-bis(1,1-dimetiletil)-2,2'-bipiridin-N1,N1']bis[3,5-difluoro-2-[5-(trifluorometil)-2-piridinil-N]fenil -C]Iridijum(III) heksafluorofosfat
LCMS
tečna hromatografija sa masenom spektrometrijom
LDA
litijum diizopropilamid
LED
svetleća dioda
M
molar
m
multiplet
Me
metil MeCN acetonitril MeOH metanol mg miligram MHz megaherc min minuti
mL mililitar mmol milimol Ms
metansulfonil MsOH
metansulfonska kiselina MS
masena spektrometrija MTBE
metil terc-butil etar
µW
mikrotalasna NaBH(OAc)3
natrijum triacetoksiborohidrid NaHCOs
natrijum karbonat Na2SO4
natrijum sulfat
NBS
N-bromosukcinimid
NMP 1-metil-2-pirolidinon
NMR
nuklearna magnetna rezonanca O/N
preko noći
Ph
fenil
PhMe
toluen
Pyr
piridin
q
kvartet
qd
kvartet dubleta
quint
kvintet
quintd
kvintet dubleta
rt
sobna temperatura
Rt
retenciono vreme
RuPhos
2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksibifenil s
singlet
sat.
zasićeno
SFC
superkritična fluidna hromatografija
SPA
test scintilacione blizine
SOCl2
tionil hlorid
SEM
2-(trimetilsilil)etoksimetil
t
triplet
t-Bu ili tBu
terc-butil
TBAB
tetrabutilamonijum bromid
TBAF
tetrabutilamonijum fluorid
TBS
terc-butildimetilsilil
t-BuONa
natrijum terc-butoksidetd triplet dubleta tdd
triplet dubleta dubleta
TEA ili Et3N ili NEt3trietilamin
Tf
trifluorometansulfonat ili triflat THF
tetrahidrofuran
TFA ili CF3CO2H trifluorosirćetna kiselina TFE
2,2,2-trifluoroetanol
Ti(i-OPr)4
titanijum(IV) izopropoksid TLC
tankoslojna hromatografija TMP
2,2,6,6-tetrametilpiperidin
TMS
trimetilsilil
Ts
tosil
ttd
triplet tripleta dubleta
UPLC tečna hromatografija visokih performansi
Primer 1: So 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dionHCl ili so CF3CO2H (I-12)
[0819]
Korak 1. Etil 4-bromo-2-(hlorometil)benzoat (1-1b)
[0820] Mešana suspenzija 5-bromoftalida (1-1a; 1200 g; 5,633 mol) u EtOH (12 L) zagrejana je na 68-72°C. SOCl2(2,40 L; 33,0 mol) je zatim dodavana kap po kap tokom perioda od 7 sati. Reakciona smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom na oko 4 L, a zatim su dodati voda (5 L) i MTBE (5 L). Dobijena smeša je mešana 40 min. Faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana sa MTBE (1 x 5 L). Kombinovani organski slojevi su oprani sa 5% vod. NaHCOs (5 L), osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće da bi se dobilo 1-1b (1450 g; 5,25 mol; prinos 93%) u vidu čvrste supstance bledo smeđe boje. MS [M+Na]<+>= 298,9.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.38 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 2.3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (1-1d)
[0821] Mešanoj suspenziji 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c, 596,3 g; 3,623 mol) i i-Pr2NEt (2,50L; 14,3 mol) u DMF (5,0 L) dodat je 1-1b (1000 g; 3,623 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je mešana na 85-90 °C tokom 24 sata. Reakciona smeša je zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, dodata je voda (20 L), a dobijena smeša je mešana 12 sati. Formirani talog je filtriran i ispran vodom (5 L) i MeOH (2 L). Sirova čvrsta supstanca je razmućena u MeOH (5 L) tokom 1 sata, filtrirana i isprana sa MeOH (2 L). Dobijena čvrsta supstanca je zatim uzeta u EtOAc (10 L) i mešana 1 sat. Dobijena suspenzija je zatim filtrirana, isprana sa EtOAc (5 L) i osušena pod smanjenim pritiskom na 45-50°C da bi se dobio 1-1d (740 g; 2,29 mol; prinos 63%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+1]<+>= 323,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.99 (s, 1H), 7.91-7.88 (m, 1H), 7.72 (dd, J= 8.1, 1.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.11 (dd, J= 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.47 (d, J= 17.7 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 17.7 Hz, 1H), 2.98-2.83 (m, 1H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.45-2.29 (m, 1H), 2.01 (dtd, J= 12.7, 5.3, 2.3 Hz, 1H).
Korak 3. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (1-1f)
[0822] Mešanoj suspenziji 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1-1d; 2,65 g; 8,20 mmol), terc-butil ((1S,2S) -2-hidroksiciklopentil)karbamata (1-1e; 1,50 g; 7,45 mmol), NiCl2(dimetoksietana) (0,082 g; 0,37 mmol), dtbbpi (0,100 g; 0,373 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(0,083 g; 0,075 mmol) u MeCN (25 mL) pod azotnom atmosferom dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 1,90 mL; 11,2 mmol). Dobijena smeša je zatim snažno mešana 70 sati pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa DCM-om (20 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 12% EtOH:EtOAc (v/v = 1:3) u DCM da bi se dobio 1-1f (1,03 g; 2,11 mmol; prinos 28%) u vidu belog praha. MS [M-tBu+H]<+>= 388,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.02 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.11 (ddd, J = 13.1, 5.1, 2.8 Hz, 1H), 4.68-4.61 (m, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.40-4.25 (m, 2H), 4.04-3.97 (m, 1H), 2.95-2.71 (m, 2H), 2.41-2.24 (m, 1H), 2.21-1.98 (m, 3H), 1.89-1.70 (m, 3H), 1.53-1.44 (m, 1H), 1.41 (s, 9H).
Korak 4. Metoda A.3-(5- (((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-12)
[0823] Mešanom rastvoru terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il) -1-oksoizoindolin-5-il) oksi)ciklopentil)karbamata (1-1f; 1,50 g; 2,99 mmol) u THF (5 mL) dodato je 4 M HCl u dioksanu (2,0 mL; 8,0 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana 2 sata na 60°C. Uočeno je formiranje belog taloga. Reakciona smeša je zatim razblažena sa Et2O (15 mL) i filtrirana. Talog je ispran sa Et2O (4x) a zatim osušen pod smanjenim pritiskom da bi se dobila hloridna so I-12 (1,01 g; 2,66 mmol; prinos 89%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 344,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.98 (s, 1H), 8.36 (s, 2H), 7.68-7.63 (m, 1H), 7.34-7.18 (m, 1H), 7.08 (dt, J= 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.08 (dd, J= 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.95-4.82 (m, 1H), 4.41 (dd, J= 17.3, 3.5 Hz, 1H), 4.28 (dd, J= 17.3, 2.8 Hz, 1H), 3.62 (s, 1H), 2.99-2.83 (m, 1H), 2.69-2.54 (m, 1H), 2.47-2.31 (m, 1H), 2.31-2.21 (m, 1H), 2.18-2.06 (m, 1H), 2.04-1.94 (m, 1H), 1.89-1.62 (m, 4H).
Korak 5. Metoda B. So 3-(5- (((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion CF3CO2H (I-12)
[0824] Mešanom rastvoru terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata (1-1f; 573 mg; 1,29 mmol) u DCM (4,3 mL) dodat je CF3CO2H (1,1 mL; 13 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. Rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom i azeotropiran sa PhMe da bi se dobio željeni sirovi proizvod (TFA so I-12) u vidu svetlo žute pene (pretpostavljeni kvantitativni prinos). Sirovi proizvod je prešao na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 344,4.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7.74 (dd, J= 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.13-7.09 (m, 1H), 5.12 (ddd, J = 13.4, 5.2, 2.7 Hz, 1H), 4.86-4.76 (m, 1H), 4.50-4.37 (m, 2H), 3.77 (td, J = 8.1, 5.3 Hz, 1H), 2.90 (ddd, J = 17.6, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.78 (ddd, J = 17.6, 4.7, 2.4 Hz, 1H), 2.55-2.40 (m, 1H), 2.42-2.23 (m, 2H), 2.16 (dtd, J= 12.9, 5.3, 2.4 Hz, 1H), 1.99-1.87 (m, 2H), 1.87-1.74 (m, 1H), 1.79-1.65 (m, 1H).
Alternativno, konverzija 1-1d u I-12 postignuta je i sledećom sintetičkom procedurom:
[0825]
Korak 1.3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-dion (31-3a)
[0826] Mešanom rastvoru 1-1d (10,0 g; 30,9 mmol) i DBU (6,9 mL; 46 mmol) u DMF (95 mL) dodat je SEMCl (6,6 mL; 37 mmol) na 0°C i dobijena reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim je mešana 5 sati. Dodatna porcija DBU (3,5 mL; 23 mmol) i SEMCl (3,3 mL; 19 mmol) je dodata i mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 2 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena zasić. vod. NH4Cl (250 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (x 3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini EtOAc (~50 mL) i dodat je Et2O:heptan (v/v = 1:2; 400 mL). Dobijeni zamućeni rastvor je ostavljen da stoji na -5°C preko noći. Formirani talog je filtriran, ispran heptanom (x3) i osušen pod vakuumom da bi se dobilo 31-3a (11,53 g; 25,4 mmol; prinos 82%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 453,4.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.75 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.66-7.61 (m, 2H), 5.37-5.09 (m, 3H), 4.48 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.74-3.50 (m, 2H), 3.11-2.98 (m, 1H), 2.94-2.83 (m, 1H), 2.33 (qd, J= 13.2, 4.7 Hz, 1H), 2.24-2.15 (m, 1H), 0.97-0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 2. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (1-1g)
[0827] Mešanom rastvoru 31-3a (2,00 g; 4,41 mmol), 1-1e (0,888 g; 4,41 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (0,048 g; 0,22 mmol), dtbbpi (0,059 g; 0,22 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(0,049 g; 0,044 mmol) u degaziranom MeCN (16 ml) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,75 mL; 4,4 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana 24 sata pod zračenjem plavih LED svetala na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 1-1g (2,19 g; 3,82 mmol; prinos 87%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M-H]<->= 572,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.11-7.05 (m, 1H), 5.29-5.16 (m, 1H), 5.12-5.02 (m, 2H), 4.69-4.64 (m, 1H), 4.50-4.36 (m, 1H), 4.24 (dd, J= 17.0, 9.1 Hz, 1H), 3.95-3.85 (m, 1H), 3.64-3.47 (m, 2H), 3.13-3.01 (m, 1H), 2.87-2.74 (m, 1H), 2.49-2.31 (m, 1H), 2.12-1.97 (m, 3H), 1.86-1.60 (m, 3H), 1.59-1.47 (m, 1H), 1.40 (s, 9H), 0.90-0.83 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12)
[0828] Rastvoru 1-1g (6,85 g; 9,55 mmol) u DCM (53 mL) pod atmosferom azota dodata je metansulfonska kiselina (2,5 mL; 38 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i dodat je trietilamin (10,7 mL; 76 mmol) i N1, N2-dimetiletan-1,2-diamin (1,23 mL; 11,5 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Dodatna N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (0,51 mL; 4,8 mmol) je dodat i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je ugašena sa 50% zasićenim vodenim natrijum-hidrogenkarbonatom i ekstrahovana sa DCM:izopropanolom (v/v = 4:1, x4). Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane do suvoće. Materijal je suspendovan u minimalnom DCM i dodat je višak dietil etra. Dobijena suspenzija je sonikirana 1 sat, filtrirana i isprana dietil etrom (x3). Čvrsta supstanca je sakupljena i osušena u visokoj vakuumskoj rerni na 50°C preko noći da bi se dobio I-12 (3,02 g; 8,80 mmol; prinos 92%) u vidu čvrste supstance u obliku kreme. MS [M+H]<+>= 344,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.47 - 4.33 (m, 2H), 4.25 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 3H), 2.91 (ddd, J= 17.5, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.37 (qd, J= 13.1, 4.1 Hz, 1H), 2.26 - 2.11 (m, 1H), 2.03 - 1.84 (m, 2H), 1.82 - 1.58 (m, 3H), 1.42 - 1.32 (m, 1H).
Primer 2: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-13)
[0829]
[0830] Mešanom rastvoru HCl soli I-12 (500 mg; 1,24 mmol) i NaBH(OAc)3(787 mg; 3,71 mmol) u DMF (10 mL) dodat je acetaldehid (2-1; 0,21 mL; 3,7 mmol) u jednoj porciji i rezultujuća smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-13 (342 mg; 0,85 mmol; prinos 69%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 400,0.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.66 (s, 1H), 7.69-7.65 (m, 1H), 7.14-6.97 (m, 2H), 5.10 (ddd, J= 13.3, 5.2, 3.5 Hz, 1H), 4.71-4.52 (m, 1H), 4.39-4.18 (m, 2H), 3.40-3.23 (m, 1H), 2.89-2.72 (m, 2H), 2.66-2.47 (m, 4H), 2.41-2.19 (m, 1H), 2.20-2.07 (m, 1H), 2.02-1.87 (m, 2H), 1.83-1.62 (m, 3H), 1.58-1.45 (m, 1H), 1.05-0.94 (m, 6H).
Primer 3: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-32)
[0831]
[0832] Mešanom rastvoru HCl soli I-12 (400 mg; 1,05 mmol) i NaBH(OAc)3(670 mg; 3,16 mmol) u DMF (10 mL) dodato je 25% glutaraldehida u H2O (0,42 mL; 1,1 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 40 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-32 (298 mg; 0,717 mmol; prinos 68%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 412,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 9.23 (br s, 1H), 7.84-7.52 (m, 1H), 7.08-6.81 (m, 2H), 5.18-4.94 (m, 1H), 4.81-4.60 (m, 1H), 4.32 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.14 (q, J = 16.0 Hz, 1H), 3.10-2.71 (m, 3H), 2.57-2.25 (m, 4H), 2.20-2.05 (m, 2H), 2.04-1.88 (m, 2H), 1.79-1.62 (m, 3H), 1.60-1.46 (m, 5H), 1.45-1.34 (m, 2H).
Primer 4: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-29)
[0833]
[0834] Rastvoru TFA soli I-12 (19 mg; 0,055 mmol) u DCM-d2(0,5 mL) dodati su acetaldehid (2-1; 0,02 mL; 0,3 mmol) i MgSO4(100 mg; 0,831 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Dobijeni materijal je uzet u DCM (0,5 mL) i dodat je NaBH(OAc)3(22 mg; 0,10 mmol). Nakon 30 min, reakcija je razblažena sa DCM i ugašena sa zasić. vod. NaHCO3. Faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (5 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 10 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (3 kapi) Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-29 (8 mg; 0,018 mmol; prinos 33%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 372,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 5.02 (dt, J = 13.3, 5.5 Hz, 1H), 4.76-4.70 (m, 1H), 4.31-4.15 (m, 2H), 3.33 (td, J = 7.4, 4.0 Hz, 1H), 2.83-2.66 (m, 5H), 2.31-2.17 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 3H), 1.79-1.63 (m, 3H), 1.63-1.52 (m, 1H), 1.11 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Primer 5: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-5)
[0835]
[0836] Mešanom rastvoru TFA soli I-12 (55 mg; 0,12 mmol) u MeCN (1 mL) dodati su i-Pr2NEt (0,07 mL; 0,4 mmol) i epihlorohidrin (5-1a; 11 mg; 0,12 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je zagrejana na 60°C. Nakon 5 sati temperatura je povećana na 70°C i reakciona smeša je mešana tokom noći. Smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je još jedna porcija epihlorohidrina (5-1a; 11 mg; 0,12 mmol) i dobijena smeša je grejana na 70°C tokom dva dana. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 10 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (3 kapi) Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-5 (11 mg; 0,023 mmol; prinos 19,5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 400,4.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.28 (s, 1H), 7.64 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.09-7.06 (m, 1H), 7.01 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.04 (ddd, J= 13.4, 5.2, 2.0 Hz, 1H), 4.67 (dt, J = 6.9, 4.0 Hz, 1H), 4.40-4.24 (m, 3H), 3.90 (dt, J= 15.2, 7.6 Hz, 2H), 3.47-3.27 (m, 3H), 2.86-2.75 (m, 1H), 2.71 (ddd, J= 17.6, 4.8, 2.6 Hz, 1H), 2.47-2.33 (m, 1H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.11 (dtd, J = 13.0, 5.3, 2.6 Hz, 1H), 1.82-1.65 (m, 3H), 1.57-1.47 (m, 1H).
Primer 6: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro [4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-17)
[0837]
Korak 1. (1,3-dioksolan-2,2-diil)bis(etan-2,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonat) (6-2a)
[0838] U mešani rastvor 2,2'-(1,3-dioksolan-2,2-diil)dietanol (6-1a; 300 mg; 1,85 mmol) i Et3N (0,65 mL; 4,6 mmol) u THF (6 mL) na -10°C dodat je rastvor TsCl (882 mg; 4,62 mmol) u THF (1 mL) i rezultujuća smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i zatim je mešana 6 dana. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 60% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 6-2a (426 mg; 0,905 mmol; prinos 49%) u vidu belog mutnog ulja koje se kristalizovalo nakon stajanja. MS [M+H]<+>= 471,3.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.77 (d, J= 8.3 Hz, 4H), 7.39-7.32 (m, 4H), 4.07 (t, J= 6.9 Hz, 4H), 3.84 (s, 4H), 2.45 (s, 6H), 1.95 (t, J = 6.9 Hz, 4H).
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2S)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro [4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-17)
[0839] Mešanom rastvoru TFA soli I-12 (25 mg; 0,055 mmol) i (1,3-dioksolan-2,2-diil)bis(etan-2,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonat) (6-2a; 25 mg; 0,053 mmol) u DMF (1 mL) dodat je i-Pr2NEt (0,05 mL; 0,3 mmol) i rezultujuća smeša je zagrevana na 70°C tokom dva dana. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i azeotropirana je sa PhMe. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 10 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (3 kapi) Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-17 (4 mg; 0,007 mmol; prinos 13,5%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.22 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13-7.09 (m, 1H), 7.01 (dd, J= 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.03 (ddd, J= 13.4, 5.2, 2.2 Hz, 1H), 4.70 (ddd, J= 7.6, 4.6, 2.7 Hz, 1H), 4.36 (dd, J= 16.8, 5.5 Hz, 1H), 4.28 (dd, J= 16.8, 2.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 4H), 3.03-2.96 (m, 1H), 2.86-2.75 (m, 1H), 2.71 (ddd, J = 17.7, 4.8, 2.5 Hz, 1H), 2.63-2.55 (m, 4H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.14-2.05 (m, 2H), 1.74-1.68 (m, 3H), 1.65 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 1.54 (dtd, J = 12.0, 9.4, 7.1 Hz, 1H).
Primer 7: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(8-oksa-3-azabiciklo [3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-18)
[0840]
Korak 1. (cis-tetrahidrofuran-2,5-diil)bis(metilen) bis(4-metilbenzensulfonat) (7-2a)
[0841] Mešanom rastvoru cis-2,5-bishidroksimetil-tetrahidrofurana (7-1a; 263 mg; 1,99 mmol) i DMAP (24 mg; 0,20 mmol) u THF (7 mL) dodat je Et3N (1,3 mL; 9,3 mmol) i dobijena smeša je ohlađena na 0°C. Dodat je tozil hlorid (835 mg; 4,38 mmol) i dobijena smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim je mešana preko noći.
Reakciona smeša je zatim razblažena vodom (25 mL) i dodat je EtOAc (150 mL). Organski sloj je zatim ispran vodom (25 mL), zasić. vod. NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 60% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 7-2a u vidu čvrste supstance bele boje (488,6 mg; 1,098 mmol; prinos 55%). MS [M+H2O]<+>= 458,4.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.87-7.73 (m, 4H), 7.48-7.37 (m, 4H), 4.10 (dddd, J = 11.1, 6.4, 4.3, 1.9 Hz, 2H), 4.02-3.85 (m, 4H), 2.49 (s, 6H), 2.07-1.91 (m, 2H), 1.76-1.61 (m, 2H).
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2S)-2-(8-oksa-3-azabiciklo [3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-18)
[0842] Mešanom rastvoru TFA soli I-12 (54,9 mg; 0,120 mmol) i (cis-tetrahidrofuran-2,5-diil) bis(metilen)bis(4-metilbenzensulfonat) (7-2a; 68,3 mg; 0,155 mmol) u DMF (2 mL) dodat je i-Pr2NEt (0,10 mL; 0,57 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana. Reakciona meša je zatim zagrejana na 85°C i mešana preko noći. Dobijena smeša je razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana sa zasić. vod. NaHCO3(2 x 20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Čiste frakcije su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-18 u vidu čvrste supstance bele boje (2,3 mg; 4,5 µmol; prinos 4%). MS [M+H]+ = 440,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 7.05 (dt, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 5.15-5.01 (m, 1H), 4.69 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.48-4.10 (m, 4H), 2.97-2.75 (m, 1H), 2.63-2.58 (m, 1H), 2.38 (dd, J= 13.0, 4.3 Hz, 1H), 2.35-2.24 (m, 3H), 2.10-2.03 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.81 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1.74-1.57 (m, 5H), 1.49 (d, J = 12.2 Hz, 1H).
Primer 8: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-25)
[0843]
[0844] Mešanoj suspenziji HCl soli I-12 (50 mg; 0,13 mmol), acetona (0,03 mL; 0,4 mmol) i MgSO4(32 mg; 0,26 mmol) u DMA (1,0 mL) dodat je NaBH(OAc)3(84 mg; 0,40 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat acetaldehid (2-1; 0,04 mL; 0,7 mmol) i rezultujuća smeša je mešana dodatna 4 sata. Reakciona smeša je razblažena sa DMSO (0,5 mL) i filtrirana kroz fritirani špric. Dobijeni rastvor je direktno prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Čiste frakcije su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-25 (6,1 mg; 0,013 mmol; prinos 10%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 414,2.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.79 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.54 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.95 (dd, J= 8.4, 2.2 Hz, 1H), 4.95 (ddd, J= 13.3, 5.2, 2.4 Hz, 1H), 4.91-4.84 (m, 1H), 4.27 (dd, J = 16.7, 4.1 Hz, 1H), 4.19 (dd, J= 16.7, 4.9 Hz, 1H), 3.56-3.44 (m, 1H), 3.29-3.17 (m, 1H), 2.85-2.57 (m, 4H), 2.31 (qd, J= 13.2, 4.8 Hz, 1H), 2.09-1.97 (m, 2H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.74-1.55 (m, 4H), 1.14-0.96 (m, 9H).
Primer 9: 3-(5-(((1S,2S)-2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-31)
[0845]
[0846] Mešanom rastvoru HCl soli I-12 (26 mg; 0,068 mmol) i NaBH(OAc)3(43,5 mg;
0,205 mmol) u DMF (1 mL) dodat je ciklopropankarbaldehid (9-1a; 0,02 mL; 0,2 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-31 (12,6 mg; 0,0272 mmol; prinos 40%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 452,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.24 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.10-7.00 (m, 1H), 5.22-5.02 (m, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.41-4.21 (m, 2H), 3.70-3.46 (m, 1H), 2.89-2.72 (m, 2H), 2.66-2.23 (m, 5H), 2.20-2.10 (m, 1H), 1.92 (s, 2H), 1.84-1.63 (m, 3H), 1.54 (s, 1H), 0.97-0.82 (m, 2H), 0.45 (s, 4H), 0.23-0.01 (m, 4H).
Primer 10: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-8)
[0847]
3,3-difluoropentan-1,5-diil dimetansulfonat 10-1a je pripremljen kao što je opisano u američkom patentu US2017/145026 A1.
[0848] Mešanom rastvoru HCl soli I-12 (26 mg; 0,068 mmol) i i-Pr2NEt (0,05 mL; 0,3 mmol) u DMF (0,7 mL) dodat je 10-1a (30,4 mg; 0,103 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 80°C 72 sata. Reakciona smeša je zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-8 (2,4 mg; 5,3 µmol; prinos 8%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 448,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.03 (s, 1H), 7.68-7.57 (m, 1H), 6.99-6.84 (m, 2H), 5.04 (ddd, J = 13.4, 5.3, 2.0 Hz, 1H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.31-4.17 (m, 2H), 3.03-2.89 (m, 1H), 2.84-2.68 (m, 2H), 2.63-2.47 (m, 4H), 2.34-2.18 (m, 1H), 2.15-2.07 (m, 1H), 2.03-1.79 (m, 5H), 1.75-1.62 (m, 3H), 1.53-1.41 (m, 2H).
Primer 11: 1-((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril (I-38)
[0849]
Korak 1.4-hidroksi-2-(2-hidroksietil)-2-metilbutannitril (11-3a)
[0850] Mešanom rastvoru propiononitrila (11-1a; 1,30 mLM 182 mmol) i Bu4NI (0,67 g; 1,8 mmol) u THF (30 mL) pod atmosferom azota dodata je LDA (12,1 mL; 18,2 mmol; 1,5M u cikloheksanu) kapanjem na -78°C i rezultujuća smeša je mešana 30 min na -78°C, zagrejana na sobnu temperaturu i zatim mešana dodatnih 30 min. Reakciona smeša je ohlađena na -78°C i (2-hloroetoksi)trimetilsilan (11-2a; 2,9 mL; 18 mmol) je dodat kapanjem i dobijena smeša je zatim zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 1 sat. Reakciona smeša je zatim ohlađena na -78°C i kapanjem je dodata još jedna porcija LDA (12,1 mL; 18,2 mmol; 1,5 M u cikloheksanu). Dobijena smeša je mešana 30 min na -78°C, a zatim zagrejana na sobnu temperaturu i mešana dodatnih 30 min. Reakciona smeša je ohlađena na -78°C i kapanjem je dodat drugi ekvivalent (2-hloroetoksi)trimetilsilana (11-2a; 2,9 mL; 18 mmol) i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i zatim je mešana 3 sata. Reakciona smeša je ugašena zasić. vod. NH4Cl i ekstrahovana sa Et2O (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je rastvoren u THF (10 mL) i dodato je 0,5 M HCl (5 mL). Dobijena smeša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasić. vod. NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 11-3a (250 mg; 1,75 mmol; prinos 10%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.95-3.84 (m, 4H), 2.23 (s, 2H), 2.05-1.95 (m, 2H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.43 (s, 3H).
Korak 2.3-cijano-3-metilpentan-1,5-diil dimetansulfonat (11-4a)
[0851] Mešanom rastvoru 11-3a (260 mg; 1,83 mmol) i i-Pr2NEt (1,3 mL; 7,3 mmol) u DCM (3 mL) dodat je metansulfonil hlorid (0,28 mL; 3,6 mmol) na 0°C i rezultujuća smeša je mešana 2 sata na 0°C, a zatim na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom (2 mL) i ekstrahovana sa DCM-om (x 2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće kako bi se dobilo sirovo ulje 11-4a u vidu ulja žute boje. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.36 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.01 (s, 6H), 2.12 (dt, J = 14.7, 6.5 Hz, 2H), 1.99 (dt, J = 14.7, 6.4 Hz, 2H), 1.41 (s, 3H).
Korak 3.1-((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril (I-38)
[0852] Mešanom rastvoru HCl soli I-12 (500 mg; 1,32 mmol), Bu4NI (49 mg; 0,13 mmol) i i-Pr2NEt (1,1 mL; 6,6 mmol) u DMF (3 mL) dodat je 11-4a (433 mg, 1,45 mmol) i reakciona smeša je mešana 5 dana na 80°C. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1) u DCM da bi se dobio I-38 (104,7 mg; 0,232 mmol; prinos 18%) u vidu čvrste supstance svetlo bež boje. MS [M+H]<+>= 451,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.23 (s, 1H), 7.71 - 7.66 (m, 1H), 7.09 - 6.90 (m, 2H), 5.10 (ddd, J= 13.3, 5.2, 3.1 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.41 - 4.19 (m, 2H), 3.10 - 2.75 (m, 4H), 2.48 - 2.22 (m, 3H), 2.21 - 2.11 (m, 1H), 2.11 - 1.96 (m, 2H), 1.95 - 1.81 (m, 2H), 1.80 - 1.64 (m, 3H), 1.63 - 1.40 (m, 4H), 1.34 (s, 3H).
Primer 12: 3-(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-20)
[0853]
[0854] U mešani rastvor HCl soli I-12 (50 mg; 0,13 mmol) i benzaldehida (0,02 mL; 0,2 mmol) u anhidrovanom 2,2,2-trifluoroetanolu (1,2 mL) pod atmosferom azota dodat je Ti(i-OPr)4(0,04 mL; 0,1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. NaBH4(7,5 mg; 0,20 mmol) i dobijena smeša je mešana dodatna 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena vod.1 M mravljom kiselinom (0,2 mL) i filtrirana. Dobijeni rastvor je direktno prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Čiste frakcije su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-20 (30,2 mg; 0,062 mmol; prinos 47%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 434,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 7.23-7.16 (m, 1H), 7.13 (dd, J= 6.6, 2.1 Hz, 1H), 7.00 (dt, J= 8.4, 2.6 Hz, 1H), 5.07 (ddd, J= 13.2, 5.1, 3.2 Hz, 1H), 4.71-4.55 (m, 1H), 4.43-4.16 (m, 2H), 3.80-3.67 (m, 2H), 3.14-3.04 (m, 1H), 2.91 (ddd, J= 17.4, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.45-2.31 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 1H), 1.93-1.83 (m, 1H), 1.81-1.59 (m, 3H), 1.57-1.45 (m, 1H).
Primer 13: 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-15)
[0855]
Korak 1. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)karbamat (13-2a)
[0856] U 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (1-1d; 1600 mg; 4,95 mmol), terc-butil ((1S,2S) -2-hidroksicikloheksil)karbamat (13-1a; 1066 mg; 4,95 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (54 mg; 0,25 mmol), dtbbpi (66 mg; 0,25 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(56 mg; 0,050 mmol), kvinuklidin (55 mg; 0,50 mmol) i K2CO3(684 mg; 4,95 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (30 mL) i rezultujuća smeša je zatim snažno mešana 70 sati pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi.
Reakciona smeša je zatim razblažena sa DCM-om (20 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 3% MeOH u DCM da bi se dobilo 13-2a (282 mg; 0,616 mmol; prinos 12%) u vidu belog praha. MS [M-tBu+H]<+>= 402,3.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.97 (s, 1H), 7.82-7.70 (m, 1H), 7.13-6.92 (m, 2H), 5.19 (dd, J= 13.2, 5.2 Hz, 1H), 4.56 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 3.78-3.66 (m, 1H), 2.95-2.74 (m, 2H), 2.33 (qd, J= 13.0, 5.0 Hz, 1H), 2.25-2.16 (m, 2H), 2.14-2.04 (m, 2H), 1.85-1.74 (m, 1H), 1.46-1.33 (m, 3H), 1.41 (s, 9H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-15)
[0857] Mešanom rastvoru terc-butila ((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il) oksi)cikloheksil)karbamata (13-2a; 282 mg; 0,616 mmol) u THF (2 mL) dodato je 4 M HCl u dioksanu (1,0 mL; 4,0 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 2 sata na 60°C. Uočeno je formiranje belog taloga. Reakciona smeša je zatim razblažena sa Et2O (10 mL) i filtrirana. Talog je ispran sa Et2O (x4) a zatim osušen pod smanjenim pritiskom da bi se dobila hloridna so I-15 (242 mg; 0,614 mmol; prinos 100%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 358,1.<1>H NMR (400 MHz, D2O) δ 7.75 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.17 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 17.7, 1.8 Hz, 1H), 4.51-4.38 (m, 2H), 3.45 (ddd, J = 12.1, 9.8, 4.3 Hz, 1H), 2.99-2.82 (m, 2H), 2.51 (qd, J = 13.0, 5.4 Hz, 1H), 2.39-2.14 (m, 3H), 1.84 (t, J= 10.1 Hz, 2H), 1.60 (qd, J= 12.5, 4.0 Hz, 1H), 1.49-1.29 (m, 3H).
Alternativno, konverzija 1-1d u I-15 postignuta je i sledećom sintetičkom procedurom:
[0858]
Korak 1.3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-dion (31-3a)
[0859] Mešanom rastvoru 1-1d (10,0 g; 30,9 mmol) i DBU (6,9 mL; 46 mmol) u DMFf (95 mL) dodat je SEMCl (6,6 mL; 37 mmol) na 0°C i dobijena reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim je mešana 5 sati. Dodata je dodatna porcija DBU (3,5 mL; 23 mmol) i SEMCl (3,3 mL; 19 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 2 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena zasić. vod. NH4Cl (250 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (x 3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini EtOAc (~50 mL) i dodat je Et2O:heptan (v/v = 1:2; 400 mL). Dobijeni zamućeni rastvor je ostavljen da stoji na -5°C preko noći. Formirani talog je filtriran, ispran heptanom (x3) i osušen pod vakuumom da bi se dobilo 31-3a (11,53 g; 25,4 mmol; prinos 82%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 453,4.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.75 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.66-7.61 (m, 2H), 5.37-5.09 (m, 3H), 4.48 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.74-3.50 (m, 2H), 3.11-2.98 (m, 1H), 2.94-2.83 (m, 1H), 2.33 (qd, J= 13.2, 4.7 Hz, 1H), 2.24-2.15 (m, 1H), 0.97-0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 2. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)karbamat (13-3a)
[0860] Mešanom rastvoru 31-3a (5,00 g; 11,0 mmol), 13-1a (2,37 g; 11,0 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (0,121 g; 0,551 mmol), dtbbpi (0,148 g; 0,551 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(0,124 g; 0,110 mmol) u degaziranom MeCN (24 ml) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 1,9 mL; 11 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana 18 sata pod zračenjem plavih LED svetala na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 13-3a (5,50 g; 9,36 mmol; prinos 85%) u vidu pene žute boje. MS [M-H]<->= 586,7.
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15)
[0861] Rastvoru 13-3a (4,88 g; 8,30 mmol) u DCM (60 mL) pod atmosferom azota dodata je metansulfonska kiselina (2,2 mL; 33 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i dodat je trietilamin (9,3 ml; 66 mmol) i N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (1,1 mL; 10 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, ugašena sa 50% zasićenim tečnim natrijumhidrogenkarbonatom i ekstrahovana sa DCM:izopropanolom (v/v = 5:1, x4). Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je suspendovan u minimalnoj količini MeCN, sonikiran i filtriran. Dobijena čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (x3) i osušena pod vakuumom da bi se dobio I-12 (1,92 g; 5,37; prinos 65%) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 358,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.19 (m, 2H), 4.05-3.98 (m, 1H), 2.90 (ddd, J = 17.3, 13.6, 5.5 Hz, 1H), 2.82-2.71 (m, 1H), 2.59 (ddd, J= 17.3, 4.4, 2.3 Hz, 1H), 2.46-2.30 (m, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 2.02-1.94 (m, 1H), 1.88-1.80 (m, 1H), 1.73-1.60 (m, 2H), 1.44-1.14 (m, 4H).
Primer 14: 3-(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-22) i 3-(5-(((1S,2S)-2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-34)
[0862]
[0863] Mešanom rastvoru HCl soli I-15 (30,2 mg; 0,073 mmol) u DMF (2 mL) i trifluoroetanolu (1 mL) dodat je benzaldehid (7 µl; 0,07 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat NaBH(OAc)3(46 mg; 0,22 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći. Reakciona smeša je ugašena dodavanjem jedne kapi mravlje kiseline, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobili I-22 i I-34 sa oko 90% čistoće. Oba jedinjenja su ponovo prečišćena HPLC-om reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-22 (6,1 mg; 0,012 mmol; prinos 17%) u vidu čvrste supstance bele boje i I-34 (7,1 mg; 0,012 mmol; prinos 17%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS od I-22 [M+H]<+>= 448,2.<1>H NMR od I-22 (400 MHz, MeCN-d3) δ 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 4H), 7.25-7.19 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.03 (ddd, J= 13.4, 5.2, 1.9 Hz, 1H), 4.42-4.16 (m, 3H), 3.88 (d, J= 13.5 Hz, 1H), 3.77 (d, J= 13.5 Hz, 1H), 2.88-2.64 (m, 3H), 2.42-2.32 (m, 2H), 2.18-2.02 (m, 3H), 1.79-1.64 (m, 2H), 1.46-1.21 (m, 4H). MS od I-34 [M+H]<+>= 538.4.<1>H NMR od I-34 (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.82 (s, 1H), 7.66 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.33-7.06 (m, 12H), 5.05 (dt, J = 13.4, 5.0 Hz, 1H), 4.54 (tt, J = 9.6, 4.4 Hz, 1H), 4.41-4.16 (m, 2H), 3.75 (d, J = 13.7 Hz, 2H), 3.62 (dd, J = 14.1, 4.4 Hz, 2H), 2.90-2.62 (m, 3H), 2.53-2.29 (m, 1H), 2.15-2.06 (m, 2H), 2.06-1.97 (m, 1H), 1.78-1.70 (m, 1H), 1.70-1.61 (m, 1H), 1.46 (qt, J = 12.8, 3.3 Hz, 1H), 1.39-1.25 (m, 1H), 1.24-1.06 (m, 2H).
Alternativni postupak za sintezu 3-(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-22)
[0864]
[0865] Mešanom rastvoru HCl soli I-15 (59 mg; 0,150 mmol) i benzaldehida (0,08 ml, 0,8 mmol) u TFE (1 mL) dodat je NaBH(OAc)3(159 mg; 0,749 mmol) u jednoj porciji i rezultujuća smeša je snažno mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u DCM da bi se dobio I-22 (43 mg, 0,096 mmol, prinos 64%) u vidu čvrste supstance bele boje.
Primer 15: 3-(5-(((1S,2S)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-36)
[0866]
Korak 1.3-(5-(((1S,2S)-2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-39)
[0867] Mešanom rastvoru I-22 (43 mg; 0,096 mmol) i NaBH(OAc)3(30,5 mg, 0,144 mmol) u TFE (1 mL) dodato je 37% formaldehida u H2O (0,014 mL, 0,19 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (5 mL), isprana sa zasić. vod. NaHCO3, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće da bi se dobio I-39 (44 mg; 0,094 mmol; prinos 98%) u vidu belog praha. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 462,1.
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-36)
[0868] Mešanom rastvoru I-39 (44 mg; 0,095 mmol) u DMF (1 mL) pod atmosferom azota dodat je Pd/C (10% wt; 10 mg; 9,5 µmol), zatim trietilsilan (0,05 mL; 0,3 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz podlogu Celite<®>i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u DCM da bi se dobio I-36 (14,7 mg, 0,039 mmol, prinos 41%) u vidu praha bele boje. MS [M+H]<+>= 372,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.67 (dd, J = 8.3, 1.6 Hz, 1H), 7.09-6.94 (m, 2H), 5.07 (dt, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.35-4.06 (m, 3H), 2.87-2.68 (m, 2H), 2.62 (dddd, J = 10.8, 8.7, 4.2, 2.0 Hz, 1H), 2.38 (d, J = 1.7 Hz, 3H), 2.32-2.18 (m, 1H), 2.16-2.01 (m, 3H), 1.80-1.65 (m, 2H), 1.42-1.10 (m, 5H).
Primer 16: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-14)
[0869]
[0870] Mešanom rastvoru HCl soli I-15 (80 mg; 0,18 mmol) i NaBH(OAc)3(115 mg; 0,542 mmol) u DMF (2 mL) dodat je acetaldehid (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-14 (30,1 mg; 0,073 µmol; prinos 29%) u vidu praha bele boje. MS [M+H]<+>= 414,0.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.78-8.37 (m, 1H), 7.73 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.16-6.93 (m, 2H), 5.18 (dd, J= 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.46-4.24 (m, 3H), 2.94-2.77 (m, 3H), 2.70-2.51 (m, 4H), 2.43-2.29 (m, 1H), 2.28-2.16 (m, 2H), 1.94-1.71 (m, 3H), 1.48-1.23 (m, 4H), 0.97 (t, J= 7.1 Hz, 6H).
Primer 17: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-7)
[0871]
[0872] Mešanom rastvoru HCl soli I-15 (50 mg; 0,13 mmol) i NaBH(OAc)3(40,4 mg; 0,190 mmol) u DMF (1,5 mL) pod atmosferom azota dodat je izobutiraldehid (17-1a; 0,014 mL; 0,15 mmol) u jednoj porciji i rezultujuća smeša je mešana 40 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 5 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (2 kapi) Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane kako bi se dobio format jedinjenja I-7 (17,3 mg; 0,037 mmol; prinos 29%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 414,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.32 (s, 1H), 7.97-7.39 (br s, 1H), 7.72-7.62 (m, 1H), 7.12-6.97 (m, 2H), 5.02 (dt, J= 13.2, 5.6 Hz, 1H), 4.56 (dtd, J = 13.9, 9.8, 4.1 Hz, 1H), 4.34-4.21 (m, 2H), 3.05-2.93 (m, 1H), 2.81-2.62 (m, 4H), 2.32-2.03 (m, 4H), 1.99-1.86 (m, 1H), 1.84-1.71 (m, 2H), 1.66-1.52 (m, 1H), 1.43-1.21 (m, 3H), 0.96-0.89 (m, 6H).
Primer 18: So 3-(5-(((3S,4S)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-21)
[0873]
Korak 1. Terc-butil ((3S,4S)-4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)tetrahidro-2H-piran-3-il)karbamat (18-2a)
[0874] U 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (1-1d, 550 mg, 1,70 mmol), terc-butil ((3S,4S)-4-hidroksitetrahidro-2H-piran-3-il) karbamat (18-1a; 499 mg; 2,30 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (19 mg; 0,085 mmol), dtbbpi (23 mg; 0,085 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(19 mg; 0,017 mmol), kvinuklidin (18,9 mg; 0,170 mmol) i K2CO3(235 mg; 1,70 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (15 mL) i rezultujuća smeša je degazirana mehurićima azota tokom sonikacije u trajanju od 40 min. Reakciona smeša je zatim mešana preko noći pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi 120 sati. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, filtrirana kroz kratku podlogu Celite<®>i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 3% MeOH u DCM da bi se dobilo 18-2a (143 mg; 0,305 mmol; prinos 18%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M-tBu+H]<+>= 404,2.
Korak 2. 3-(5-(((3S,4S)-3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-40)
[0875] Mešanom rastvoru 18-2a (143 mg; 0,311 mmol) u THF (2 ml) dodato je 4 M HCl u dioksanu (1,0 ml; 4,0 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 3 sata na 60°C. Uočeno je formiranje taloga bele boje. Reakciona smeša je zatim razblažena sa Et2O i filtrirana.
Dobijeni talog je ispran sa Et2O (4x) a zatim osušen pod smanjenim pritiskom da bi se dobila hidrohloridna so I-40 (127 mg; 0,305 mmol; prinos 96%) u vidu čvrste supstance bele boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja MS [M+H]<+>= 360.2.
Korak 3. So 3-(5-(((3S,4S)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-21)
[0876] U mešani rastvor HCl soli I-40 (40 mg; 0,10 mmol) i benzaldehida (0,015 mL; 0,15 mmol) u anhidrovanom TFE (1,2 mL) pod atmosferom azota dodat je Ti(i-OPr)4(0,03 mL; 0,1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. NaBH4(6 mg; 0,2 mmol) je zatim dodata u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana dodatna 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa H2O (0,1 mL), mešana 10 minuta, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-21 (4,4 mg; 0,0087 mmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 450,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34-7.28 (m, 4H), 7.25-7.18 (m, 2H), 7.09 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.53-4.45 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 17.2, 12.2 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 8.5 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 11.8, 4.5 Hz, 1H), 3.84-3.76 (m, 3H), 3.56-3.44 (m, 1H), 3.22 (dd, J = 11.4, 8.1 Hz, 1H), 2.91 (ddd, J = 17.2, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.67 (td, J = 7.8, 4.1 Hz, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.19-2.09 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 1H), 1.52 (dtd, J = 13.2, 9.2, 4.1 Hz, 1H).
Primer 19: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-11)
[0877]
Korak 1. Terc-butil ((1S,2S)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)cikloheksil)karbamat (19-2a)
[0878] U 5-bromoizobenzofuran-1 (3H)-on (19-1a; 500 mg; 2,35 mmol), terc-butil ((1S,2S) -2-hidroksicikloheksil)karbamat (13-1a; 505 mg; 2,35 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (26 mg; 0,12 mmol), dtbbpi (32 mg; 0,12 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(26 mg; 0,023 mmol), kvinuklidin (26 mg; 0,24 mmol) i K2CO3(324 mg; 2,35 mmol) dodat je MeCN (30 mL) i rezultujuća smeša je snažno mešana 22 sata pod zračenjem plavog LED svetla na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 19-2a (732 mg; 1,93 mmol; prinos 82%) u vidu praha bele boje. MS [M-tBu+H]<+>= 292,1.
Korak 2. So 5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on CF3CO2H (19-3a)
[0879] Mešanom rastvoru 19-2a (700 mg; 1,85 mmol) u DCM (0,6 mL) dodat je CF3CO2H (0,6 mL; 7,8 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće azeotropijim sa heptanom (3x) da bi se dobila so trifluoroacetata 19-3a (710 mg, 1,83 mmol, prinos 99%) u vidu viskoznog žutog ulja. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 247,9.
Korak 3.5-(((1S,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (19-5a)
[0880] Mešanom rastvoru 19-3a (300 mg; 0,830 mmol) i i-Pr2NEt (0,43 mL; 2,5 mmol) u DMF (2,0 mL) dodat je 1-(bromometil)-1-(trifluorometil)ciklopropan (19-4a; 0,2 mL; 1 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C tokom 5 sati. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc (sa 1% NEt3) u heptanu da bi se dobio 19-5a (53 mg; 0,14 mmol; prinos 17%) u vidu praha bele boje. MS [M+H]<+>= 370,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.73 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.10 (ddd, J= 10.0, 8.4, 4.2 Hz, 1H), 2.84 (q, J= 13.1 Hz, 2H), 2.71 (ddd, J= 10.6, 8.6, 4.1 Hz, 1H), 2.19-2.06 (m, 1H), 2.04-1.95 (m, 1H), 1.82-1.59 (m, 3H), 1.42-1.23 (m, 3H), 1.21-1.09 (m, 1H), 0.92-0.85 (m, 2H), 0.69-0.61 (m, 2H).
Korak 4. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)benzoat (19-6a)
[0881] Mešanom rastvoru 19-5a (53 mg; 0,14 mmol) u EtOH (0,5 mL) dodat je SOCh (0,06 mL; 0,9 mmol) i rezultujuća smeša je mešana preko noći na 70°C. Dodatna porcija SOCl2(0,02 mL; 0,3 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana još 7 sati na 70°C. Reakciona smeša je zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i koncentrovana je do suvoće azeotropijom sa heptanom (2 x) da bi se dobio sirovi 19-6a u vidu smeđeg ulja koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 435,7.
Korak 5.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-11)
[0882] Mešanom rastvoru sirovog (19-6a) (∼0,14 mmol) i i-Pr2NEt (0,10 mL; 0,57 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 47 mg; 0,29 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C tokom 48 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-11 (8,3 mg; 0,017 mmol; prinos 12% u 2 koraka) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 480,0.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.29 (s, 1H), 7.79-7.55 (m, 1H), 7.04-6.95 (m, 2H), 5.11 (ddd, J = 13.3, 5.2, 2.9 Hz, 1H), 4.40-4.23 (m, 2H), 4.09 (td, J = 9.2, 4.3 Hz, 1H), 2.91-2.77 (m, 4H), 2.77-2.65 (m, 1H), 2.32 (qd, J = 12.8, 5.8 Hz, 1H), 2.22-2.07 (m, 2H), 2.05-1.94 (m, 1H), 1.81-1.63 (m, 3H), 1.44-1.13 (m, 4H), 0.94-0.86 (m, 2H), 0.70-0.64 (m, 2H).
Primer 20: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-23)
[0883]
Korak 1.5-(((1S,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (20-2a)
[0884] (S)-1-feniletil metansulfonat 20-1a je pripremljen iz (S)-1-feniletanola kako je navedeno u američkom patentu US2018/9796 A1, 2018. godine (takođe videti Primer 19, Koraci 1 i 2).
[0885] Mešanom rastvoru 19-3a (170 mg; 0,471 mmol) i i-Pr2NEt (0,41 mL; 2,35 mmol) u MeCN (1 mL) dodat je rastvor (S)-1-feniletil metansulfonata 20-1a (451 mg; 2,25 mmol) u MeCN (1 mL) i rezultujuća smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc (sa 1% Et3N) u heptanu da bi se dobio 20-2a (60 mg; 0,17 mmol; prinos 36%) u vidu praha bele boje. MS [M+H]<+>= 352,0.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.38-7.22 (m, 5H), 6.98 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.17 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 4.13 (ddd, J = 9.3, 7.8, 4.0 Hz, 1H), 3.91 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 2.54 (ddd, J = 9.2, 7.8, 4.1 Hz, 1H), 2.11-2.00 (m, 2H), 1.86 (s, 1H), 1.75-1.59 (m, 2H), 1.41-1.12 (m, 4H) 1.27 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Korak 2. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)benzoat (20-3a)
[0886] Mešanom rastvoru 20-2a (60 mg; 0,17 mmol) u EtOH (1,0 mL) dodat je SOCh (0,074 mL; 1,0 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 3) da bi se dobio sirovi 20-3a u vidu čvrste supstance bledo smeđe boje, koja je preneta u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 416,1. Korak 3.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-23)
[0887] Mešanom rastvoru sirovog 20-3a (∼0,17 mmol) i i-Pr2NEt (0,149 mL; 0,855 mmol) u DMF (1 mL) dodat je 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 37,2 mg; 0,291 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći, a zatim na 110°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i koncentrovana je do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-23 (33,3 mg; 0,071 mmol; prinos 42% u 2 koraka) u vidu praha prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 462,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37-7.19 (m, 5H), 6.98-6.90 (m, 2H), 5.09 (ddd, J = 13.4, 5.2, 2.6 Hz, 1H), 4.34-4.20 (m, 2H), 4.15-4.04 (m, 1H), 3.94-3.84 (m, 1H), 2.88-2.72 (m, 2H), 2.54-2.45 (m, 1H), 2.37-2.22 (m, 1H), 2.20-2.09 (m, 1H), 2.08-1.96 (m, 2H), 1.70-1.55 (m, 2H), 1.36-1.09 (m, 4H), 1.25 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 21: 3-(5-(((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-27)
[0888]
Korak 1. Metil 2-(bromometil)-4-jodobenzoat (21-2a)
[0889] U balon od 3 L sa okruglim dnom i tri grlića, pročišćen i održavan pod inertnom atmosferom azota, sipan je metil 4-jodo-2-metilbenzoat (21-1a;170 g; 616 mmol), MeCN (1,0 L), AIBN (10,1 g; 61,5 mmol) i NBS (131,6 g; 739,2 mmol). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 80°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrste supstance su filtrirane i dobijena smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% EtOAc/petroletrom. Prikupljene frakcije su koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 21-2a (50,0 g; 141 mmol; prinos 23%) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.04-8.01 (m, 1H), 7.88-7.81 (m, 1H), 7.67-7.59 (m, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.87 (s, 3H).
Korak 2.3-(5-jodo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (21-3a)
[0890] Balon od 1 L sa okruglim dnom sa tri grlića napunjen je sa 21-2a (50 g; 141 mmol), 3 aminopiperidin-2,6-dion CF3CO2H solju (1-1c; 34,18 g; 141,2 mmol), DMF (500 mL) i Et3N (42,4 g; 419 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 48 sati na 60°C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i ugašena dodavanjem 500 mL vode/leda. PH vrednost rastvora je podešena na pH = 5 sa 1 M vod. HCl. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, isprane sa 3 x 500 mL EtOAc i osušene pod vakuumom da bi se dobio 21-3a (13 g; 35 mmol; prinos 25%) u vidu čvrste supstance sive boje. [M+H]<+>= 371,0.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.00 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.90 (d, J = 7.8Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.14-5.08 (m, 1H), 4.47-4.28 (m, 2H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.73-2.01 (m, 2H), 1.98-1.20 (m, 1H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-27)
[0891] Mešanoj suspenziji 3-(5-jodo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (21-3a; 30 mg; 0,081 mmol), kvinuklidin (1 mg; 8 µmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(1 mg; 0,8 µmοl) i K2CO3(11,2 mg; 0,09 mmol) u MeCN (1,5 mL) dodat je (1S; 2S)-cikloheksan-1,2-diol (21-4a; 24 mg; 0,20 mmol), praćeno alikvotom rastvora Ni katalizatora (0,025 M; 0,16 mL; 4 µmol), pripremljenim rastvaranjem NiCl2(dimetoksietan) (22 mg; 0,1 mmol) i dtbbpi (27 mg; 0,1 mmol) u MeCN (4 mL). Dobijena smeša je degazirana mehurićima azota u rastvor pod sonikacijom 30 minuta, a zatim snažno mešana 5 dana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa MeCN (4 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-27 (3,2 mg; 0,0089 mmol; prinos 11%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 359,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.31-7.14 (m, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.37 (dd, J = 17.1, 4.9 Hz, 1H), 4.24 (dd, J = 17.1, 4.4 Hz, 1H), 4.20-4.06 (m, 1H), 3.62-3.50 (m, 1H), 2.90 (ddd, J = 17.4, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.65-2.52 (m, 1H), 2.37 (qd, J = 13.2, 4.3 Hz, 1H), 2.10-1.91 (m, 2H), 1.91-1.82 (m, 1H), 1.71-1.57 (m, 2H), 1.42-1.18 (m, 4H).
Primer 22: 3-(5-(((1R*, 2S*)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-37)
[0892]
[0893] Mešanoj suspenziji 3-(5-jodo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (21-3a; 30 mg; 0,081 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(1 mg; 0,8 µmol), kvinuklidina (1 mg; 8 µmol), K2CO3(11,2 mg; 0,09 mmol) u MeCN (1,5 mL) dodat je cis-cikloheksan-1,2-diol (22-1a; 24 mg; 0,20 mmol), praćen alikvotom rastvora katalizatora Ni (0,025 M; 0,16 mL; 4 µmol), pripremljenog rastvaranjem NiCl2(dimetoksietana) (22 mg; 0,1 mmol) i dtbbpi (27 mg; 0,1 mmol) u MeCN (4 mL). Dobijena smeša je degazirana mehurićima azota kroz smešu pod sonikacijom 30 minuta, a zatim je snažno mešana 4 dana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su liofilizovane da bi se dobio I-37 (2,1 mg, 0,0056 mmol, prinos 7%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 359,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.95 (s, 1H), 7.80 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 5.20 (dd, J = 13.1, 5.2 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 15.8 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 2.98-2.75 (m, 2H), 2.34 (qd, J = 13.1, 5.0 Hz, 1H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.07-1.85 (m, 2H), 1.79-1.68 (m, 2H), 1.68-1.62 (m, 2H), 1.46-1.32 (m, 3H).
Primer 23: So 3-(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-35)
[0894]
Korak 1. Terc-butil ((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil) karbamat (23-2a)
[0895] U 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (1-1d; 800 mg; 2,48 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (27 mg; 0,12 mmol), dtbbpi (33 mg; 0,12 mmol), kvinuklidin (28 mg; 0,25 mmol), terc-butil ((1S,2R) -2-hidroksicikloheksil)karbamat (23-1a; 533 mg; 2,48 mmol) i K2CO3(342 mg; 2,48 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (15 mL). Dobijena smeša je degazirana mehurićem azota kroz smešu pod sonikacijom 30 minuta, a zatim energično mešana 100 sati pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi.
Reakciona smeša je razblažena sa DCM, filtrirana kroz podlogu Celite<®>, i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 3% MeOH u DCM da bi se dobio 23-2a (121 mg; 0,16 mmol; prinos 6,5%) u vidu čvrste supstance bele boje čistoće oko 60%. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M-tBu+H]<+>= 402,3.
Korak 2.3-(5-(((1R,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-41)
[0896] Mešanom rastvoru 23-2a (121 mg; 0,161 mmol; -60% čistoće) u THF (2 ml) dodato je 4 M HCl u dioksanu (1,0 mL; 4,0 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 2 sata na 60°C.
Uočeno je formiranje taloga bele boje. Reakciona smeša je zatim razblažena sa Et2O i filtrirana. Beli talog je ispran sa Et2O (4x) a zatim osušen pod vakuumom da bi se dobila hidrohloridna so I-41 (64 mg; 0,16 mmol; prinos 94%) u vidu čvrste supstance bele boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 358,1.
Korak 3.3-(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-35)
[0897] Mešanom rastvoru I-41 (50 mg; 0,13 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol) u anhidrovanom TFE (2 mL) pod atmosferom azota dodat je NaBH(OAc)3(103 mg; 0,487 mmol) u jednoj porciji i rezultujuća smeša je mešana 5 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće, ponovo rastvorena u DMF (2 mL) i dodati su dodatni NaBH(OAc)3(103 mg; 0,487 mmol) i acetaldehid (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana 2,5 h i zatim ugašena sa 1 M vod. HCOOH (0,2 mL). Smeša je direktno prečišćena HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-35 (10,9 mg; 0,023 mmol; prinos 14%) u vidu praha bele boje. MS [M+H]<+>= 414,3.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.37 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19-7.17 (m, 1H), 7.12 (dt, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.10-5.01 (m, 2H), 4.37 (dd, J = 16.8, 2.9 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 16.8, 3.8 Hz, 1H), 3.18 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.08-2.90 (m, 4H), 2.88-2.65 (m, 2H), 2.40 (qd, J = 13.2, 4.9 Hz, 1H), 2.18-1.99 (m, 3H), 1.92-1.82 (m, 2H), 1.63-1.37 (m, 4H), 1.14 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
Primer 24: 3-(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-43)
Korak 1. Terc-butil ((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (24-2a)
[0899] Mešanoj suspenziji 1-1d (263 mg; 0,813 mmol), terc-butil ((1R,2R) -2-hidroksiciklopentil)karbamata (24-1a; 149 mg; 0,740 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (9 mg; 0,04 mmol), dtbbpi (11 mg; 0,042 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(10 mg; 9,1 µmοl) u MeCN (2,5 mL)pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,13 mL; 0,77 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana preko noći pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc, filtrirana kroz Celite<®>, i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio 24-2a u vidu čvrste supstance bele boje (30,8 mg; 0,067 mmol; prinos 9%). MS [M+H]<+>= 444,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.11-6.99 (m, 2H), 5.07 (ddd, J = 13.4,5.2, 1.9 Hz, 1H), 4.72-4.56 (m, 1H), 4.52-4.16 (m, 2H), 3.88 (s, 1H), 2.90 (ddd, J= 18.3, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.60 (dd, J= 3.8, 1.8 Hz, 1H), 2.38 (dd, J= 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.14-1.83 (m, 3H), 1.83-1.58 (m, 3H), 1.50 (dq, J= 13.5, 7.1, 6.5 Hz, 1H), 1.38 (s, 9H).
Korak 2.3-(5-(((1R,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-42)
[0900] Mešanom rastvoru 24-2a (30 mg; 0,068 mmol) u THF (1 mL) dodato je 4 M HCl u dioksanu (0,1 mL; 0,4 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 sati.
Reakciona smeša je zatim filtrirana i dobijeni beli talog je ispran sa EtOAc više puta. Čvrsta supstanca je zatim sakupljena da bi se dobila hidrohloridna so I-42 u vidu žute čvrste supstance (10 mg; 0,025 mmol; prinos 37%). MS [M+H]<+>= 344,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 8.31 (s, 3H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 4.6, 2.2 Hz, 1H), 7.08 (dt, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.14-5.02 (m, 1H), 4.85 (dt, J = 7.3, 4.2 Hz, 1H), 4.47-4.23 (m, 2H), 3.68-3.62 (m, 1H), 2.91 (ddd, J = 17.3, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.66-2.56 (m, 1H), 2.44-2.34 (m, 1H), 2.31-2.22 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 1H), 2.06-1.92 (m, 1H), 1.90-1.62 (m, 4H).
Korak 3.3-(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-43)
[0901] Mešanom rastvoru I-42 (10 mg; 0,026 mmol) i acetaldehida (2-1; 4 µL; 0,08 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (17 mg; 0,079 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 8 sati. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-43 u vidu čvrste supstance bele boje (7,8 mg; 0,017 mmol; prinos 65%). MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.05 (dt, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.12-5.00 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.47-4.19 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.3, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.38 (dd, J = 13.1, 4.5 Hz, 1H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.89 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 1.76-1.58 (m, 3H), 1.55-1.44 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
Primer 25: 3-(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-10)
[0902]
Korak 1. Terc-butil ((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (25-2a)
[0903] Mešanoj suspenziji 1-1d (280 mg; 0,868 mmol), terc-butil ((1R,2S) -2-hidroksiciklopentil)karbamata (25-1a; 167 mg; 0,828 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (9,5 mg; 0,043 mmol), dtbbpi (11,5 mg; 0,043 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(10 mg; 8,8 µmοl) u MeCN (2,5 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,15 mL; 0,89 mmol) i rezultujuća smeša je mešana preko noći pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc, filtrirana kroz Celite<®>, i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio 25-2a u vidu čvrste supstance bele boje (78,1 mg; 0,174 mmol; prinos 21%). MS [M-H]<->= 442,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.81 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.45-4.17 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 2.90 (ddd, J= 18.3, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.60 (s, 1H), 2.38 (dd, J= 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.07-1.91 (m, 2H), 1.91-1.80 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 3H), 1.62-1.45 (m, 1H), 1.30 (d, J = 2.8 Hz, 9H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (I-28)
[0904] Mešanom rastvoru 25-2a (78,1 mg; 0,176 mmol) u THF (1 mL) dodato je 4 M HCl u dioksanu (0,15 mL; 0,60 mmol) i dobijena smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 36 sati. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc više puta i osušena pod vakuumom da bi se dobila hidrohloridna so I-28 u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 344,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 8.10 (s, 3H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 7.13 (dt, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.50-4.22 (m, 2H), 3.69 (s, 1H), 2.91 (ddd, J = 17.7, 13.4, 5.3 Hz, 1H), 2.65-2.57 (m, 1H), 2.38 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.16-1.92 (m, 3H), 1.88-1.73 (m, 3H), 1.73-1.59 (m, 1H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-10)
[0905] Mešanom rastvoru I-28 (50 mg; 0,13 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,02 mL; 0,4 mmol) u DMF (1 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (85 mg; 0,40 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-10 u vidu čvrste supstance bele boje (23,1 mg; 0,049 mmol; prinos 37%). MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.50-4.16 (m, 2H), 3.09 (s, 1H), 2.96-2.80 (m, 1H), 2.75-2.62 (m, 5H), 2.64-2.53 (m, 1H), 2.39 (dd, J = 13.2, 8.7 Hz, 1H), 2.03-1.67 (m, 5H), 1.67-1.57 (m, 1H), 0.95 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Primer 26: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-24)
[0906]
Korak 1. Terc-butil ((1S,2S)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (26-1a)
[0907] U 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (19-1a; 1,12 g; 5,26 mmol), terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksiciklopentil)karbamat (1-1e; 1,06 g; 5,26 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (55 mg; 0,25 mmol), dtbbpi (67 mg; 0,25 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(56 mg; 0,050 mmol), kvinuklidin (55 mg; 0,50 mmol) i K2CO3(688 mg; 4,98 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (25 mL) i rezultujuća smeša je snažno mešana 30 sati pod zračenjem plavog LED svetla na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa DCM (20 mL), filtrirana kroz podlogu Celite<®>, i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 26-1a (1,38 g; 3,89 mmol; prinos 74%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M-tBu+H]<+>= 278,1.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.24-7.03 (m, 2H), 5.23 (s, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.09-3.99 (m, 1H), 2.22-2.02 (m, 2H), 1.91-1.75 (m, 3H), 1.59-1.48 (m, 1H), 1.43 (s, 9H).
Korak 2. So 5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on CF3CO2H (26-2a)
[0908] Mešanom rastvoru 26-1a (1,9 g; 5,70 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (2,18 mL; 28,5 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 2) da bi se dobila so trifluoroacetata 26-2a (1,97 g; 5,45 mmol; prinos 96%) u vidu čvrste supstance bele boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 234,3.
Korak 3.5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (26-3a)
[0909] Mešanom rastvoru 26-2a (155,6 mg; 0,448 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (2 mL) pod atmosferom azota dodat je NaBH(OAc)3(199 mg; 0,939 mmol) u jednoj porciji i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok nije primećena potpuna potrošnja početnog materijala. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL) i bazifikovana sa zasić. vod. NaHCO3. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 25 mL) i kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 10% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 26-3a (79,5 mg; 0,283 mmol; prinos 63%) u vidu gume svetlo žute boje. MS [M+H]<+>= 262,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.79 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.01-6.99 (m, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.57 (dt, J = 6.4, 3.4 Hz, 1H), 3.31 (td, J= 6.7, 3.7 Hz, 1H), 2.82-2.61 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 2H), 1.86-1.73 (m, 3H), 1.54-1.45 (m, 2H), 1.13 (t, J= 7.1 Hz, 3H).
Korak 4.5-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (26-4a)
[0910] Mešanom rastvoru 26-3a (79,5 mg; 0,304 mmol) i 1-fluoro-2-jodoetana (140 mg; 0,805 mmol) u DMF (1 mL) dodat je i-Pr2NEt (0,15 mL; 0,86 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i isprana sa 0,5 M vod. rastvora LiCl (10 mL), zasić. vod. NaHCOs (10 mL) i slanog rastvora (10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 5% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 26-4a u vidu bezbojne gume (39,8 mg; 0,128 mmol; prinos 42%). MS [M+H]<+>= 308,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22-7.05 (m, 2H), 5.26 (s, 2H), 4.75-4.30 (m, 2H), 3.41 (s, 1H), 2.93-2.74 (m, 2H), 2.73-2.56 (m, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.85 (dd, J = 25.5, 11.3 Hz, 3H), 1.55 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 1.08 (s, 3H).
Korak 5. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)benzoat (26-5a)
[0911] Mešanom rastvoru 26-4a (39,8 mg; 0,129 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je SOCl2(0,05 mL; 0,7 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL), neutralizovana zas. vod. NaHCOs, i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su zatim isprane sa 5% vod. rastvorom NaHCOs (10 mL), slanim rastvorom (10 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće kako bi se dobio sirovi 26-5a u vidu gume smeđe-crvene boje (45,9 mg; 0,114 mmol; prinos 88%). MS [M+H]<+>= 372,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.64 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.54 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.42 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.40 (td, J = 8.4, 4.1 Hz, 1H), 2.84 (dt, J = 24.5, 5.3 Hz, 2H), 2.68 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.10-1.95 (m, 2H), 1.88-1.73 (m, 2H), 1.57 (d, J = 16.7 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.08 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 6.3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-24)
[0912] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 26 mg; 0,16 mmol) i i-Pr2NEt (0,07 mL; 0,38 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je rastvor 26-5a (45,9 mg; 0,123 mmol) u DMF (0,5 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C dok nije primećena potpuna potrošnja početnog materijala pomoću LC-MS analize. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL), isprana sa zas. vod. NaHCO (3 x 10 mL), slanim rastvorom (10 mL), osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-24 u vidu čvrste supstance bele boje (6,5 mg; 0,015 mmol; prinos 12%). MS [M+H]<+>= 418,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.06 (dt, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.48 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.44-4.19 (m, 3H), 2.98-2.71 (m, 3H), 2.64-2.56 (m, 3H), 2.38 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.11-1.85 (m, 4H), 1.79-1.56 (m, 3H), 1.54-1.42 (m, 1H), 0.98 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Primer 27: 3-(5-(((1S,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-1)
[0913]
Korak 1.5-(((1S,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (27-2a)
[0914] Mešanom rastvoru 27-1a (47,1 mg; 0,180 mmol) i 1,1-difluoro-2-jodoetana (32 mg; 0,17 mmol) u DMF (1 mL) dodat je i-Pr2NEt (0,07 mL, 0,4 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim zagrejana na 85°C i mešana sve dok nije primećena potpuna potrošnja početnog materijala pomoću LC-MS analize. Rastvor je razblažen sa EtOAc (40 mL) i ispran sa 0,5 M vod. rastvora LiCl (10 mL), zasić. vod. rastvora NaHCOs (10 mL) i slanog rastvora (10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 5% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 27-2a u vidu bezbojne gume (28,2 mg; 0,077 mmol; prinos 43%). MS [M+H]<+>= 326,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.79 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.13-7.06 (m, 2H), 5.79 (tt, J= 56.4, 4.3 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.72-4.56 (m, 1H), 3.42 (dt, J= 13.5, 9.0 Hz, 1H), 2.97-2.82 (m, 3H), 2.78-2.64 (m, 1H), 2.23-1.97 (m, 2H), 1.92-1.74 (m, 3H), 1.55 (d, J= 11.9 Hz, 2H), 1.09 (t, J = 7.1 Hz, 2H).
Korak 2. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)-ciklopentil)oksi)benzoat (27-3a)
[0915] Mešanom rastvoru 27-2a (28,2 mg; 0,087 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je SOCl2(0,04 mL; 0,55 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70 °C preko noći. Reakciona smeša je zatim razblažena vodom (10 mL), neutralizovana zas. vod. NaHCOs, i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su zatim isprane sa 5% vod. NaHCOs (10 mL), slanim rastvorom (10 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio sirovi 27-3a u vidu gume crne boje koja je preneta u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja (29,7 mg; 0,061 mmol; prinos 70%). MS [M+H]<+>= 390,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.00 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 5.80 (tt, J = 56.4, 4.3 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.63 (dt, J = 7.6, 3.5 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.42 (ddd, J = 9.6, 7.5, 4.5 Hz, 1H), 2.98-2.84 (m, 2H), 2.81-2.64 (m, 2H), 2.04 (dddd, J = 12.4, 10.8, 6.8, 2.5 Hz, 2H), 1.89-1.74 (m, 2H), 1.61-1.48 (m, 2H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.10 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-1)
[0916] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 17 mg; 0,10 mmol) i i-Pr2NEt (0,04 mL; 0,24 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je rastvor 27-3a (29,7 mg; 0,076 mmol) u DMF (0,5 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc (40 mL), isprana sa zasić. vod. NaHCO (3 x 10 mL), slanim rastvorom (10 mL), osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane. Proizvod je ponovo prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 10% Et3N u EtOAc da bi se dobio I-1 u vidu čvrste supstance bele boje (1,7 mg; 3,79 µmol; prinos 5%). MS [M+H]<+>= 436,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.09-7.02 (m, 1H), 6.16-5.78 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.48-4.16 (m, 2H), 2.97-2.78 (m, 2H), 2.64-2.59 (m, 1H), 2.42-2.36 (m, 2H), 2.10-2.03 (m, 3H), 2.01-1.89 (m, 3H), 1.74-1.56 (m, 3H), 1.48 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 0.99 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Primer 28: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-16)
[0917]
Korak 1.5-(((1S,2S)-2-(3-azabieciklo [3.2.1] oktan-3-il)eiklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (28-2a)
Ciklopentan-1,3-dikarbaldehid 28-1a je pripremljen na način koji je objavljen u European Journal of Organic Chemistry, 2007, 1, 53-61
[0918] Mešanom rastvoru 26-2a (186 mg; 0,537 mmol) i NaBH(OAc)s (243 mg; 1,15 mmol) u DMF (3 mL) pod atmosferom azota dodat je rastvor ciklopentan-1,3-dikarbaldehida 28-1a (79 mg; 0,63 mmol) u DMF (2,5 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL) i bazifikovana sa zas. vod.
NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su zatim isprane sa 0,5 M vod. LiCl, zasić. vod. NaHCOs i slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 20% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 28-2a u vidu bezbojne gume (76,1 mg; 0,181 mmol; prinos 34%). MS [M+H]<+>= 328,6.
Korak 2. Etil 4-(((1S,2S)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-2-(hlorometil)benzoat (28-3a)
[0919] Mešanom rastvoru 28-2a (76,1 mg; 0,232 mmol) u EtOH (2,5 mL) dodat je SOCl2(0,085 mL; 1,16 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je zatim razblažena vodom (10 mL), neutralizovana sa zasić. vod. NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa 5% rastvorom NaHCOs (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 15% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 28-3a u vidu gume žute boje (56,2 mg; 0,122 mmol; prinos 52%). MS [M+H]<+>= 392,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.00 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.72-4.63 (m, 1H), 4.36 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.93 (td, J = 8.0, 3.7 Hz, 1H), 2.75-2.61 (m, 2H), 2.31-1.96 (m, 6H), 1.96-1.85 (m, 1H), 1.85-1.46 (m, 9H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-16)
[0920] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 29 mg; 0,17 mmol) u DMF (0,7 mL) i i-Pr2NEt (0,07 mL; 0,4 mmol) dodat je rastvor 28-3a (56,2 mg; 0,122 mmol) u DMF (0,7 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa EtOAc da bi se dobila smeša početnih materijala i proizvoda. Smeša je zatim rastvorena u DMF (1 mL) i zagrejana na 120°C dok LC-MS nije primetio potpunu potrošnju početnih materijala. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio I-16 u vidu čvrste supstance bele boje (7,3 mg; 0,016 mmol; prinos 11%). MS [M+H]<+>= 438,5.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.88 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.09 (dt, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.23 (dd, J = 13.2, 5.2 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 7.1, 3.4 Hz, 1H), 4.54-4.25 (m, 2H), 3.01-2.77 (m, 4H), 2.62 (dd, J = 18.5, 10.9 Hz, 2H), 2.37 (qd, J = 13.1, 5.1 Hz, 1H), 2.30-2.14 (m, 4H), 2.11 (s, 1H), 2.07-1.93 (m, 1H), 1.93-1.58 (m, 8H), 1.52-1.44 (m, 1H), 1.37 (d, J = 10.9 Hz, 1H).
Primer 29: 3-(5-(((1S,2S)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-33)
Korak 1.5-(((1S,2S) -2-morfolinociklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (29-1a)
[0922] Mešanom rastvoru 26-2a (145 mg; 0,42 mmol) i 1-bromo-2-(2-bromoetoksi)etana (29-1; 111 mg; 0,479 mmol) u DMF (2 mL) dodat je i-Pr2NEt (0,30 mL; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80°C preko noći Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana sa 0,5 M vod. rastvora LiCl (20 mL), zas. vod. NaHCOs (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 20% MeOH u DCM (sa 0,1% Et3N modifikatora) da bi se dobio 29-1a u vidu čvrste supstance smeđe boje (35,7 mg; 0,113 mmol; prinos 27%). MS [M+H]<+>= 304,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.80 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.70 (s, 1H), 3.68 (s, 4H), 3.03-2.88 (m, 1H), 2.63-2.39 (m, 4H), 2.22-2.00 (m, 2H), 1.81 (d, J= 9.7 Hz, 2H), 1.55 (d, J= 11.9 Hz, 2H).
Korak 2. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S)-2-morfolinociklopentil)oksi)benzoat (29-2a)
[0923] Mešanom rastvoru 29-1a (35,7 mg; 0,113 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je SOCh (0,04 mL; 0,5 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL), neutralizovana zas. vod. NaHCOs, i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su zatim isprane sa 5% vod. NaHCO3(10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 29-2a u vidu gume boje ćilibara (25,6 mg; 0,068 mmol; prinos 58%). MS [M+H]<+>= 368,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.00 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.36 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.68 (s, 4H), 2.93 (s, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.18-1.96 (m, 2H), 1.87-1.71 (m, 3H), 1.64-1.49 (m, 2H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-33)
[0924] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 14 mg; 0,086 mmol) i i-Pr2NEt (0,030 mL; 0,17 mmol) u DMF (0,7 mL) dodat je rastvor 29-2a (25,6 mg; 0,068 mmol) u DMF (0,7 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL), isprana sa zasić. vod. NaHCOs (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranje sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-33 u vidu čvrste supstance bele boje (3,5 mg; 8,3 µmol; prinos 12%). MS [M+H]<+>= 414,4.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.46-4.16 (m, 2H), 3.55 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.99-2.78 (m, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 2.04-1.83 (m, 4H), 1.77-1.53 (m, 3H), 1.53-1.41 (m, 1H).
Primer 30: Enantiomer soli 1- 3-(5-((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-44) i enantiomer 2- 3-(5-((1R,2R)-2-(benzilamino) ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-45)
[0925]
Korak 1. Racemski trans-terc-butil2-hidroksiciklobutil)karbamat (30-2a)
[0926] Mešanoj suspenziji racemskog trans-2-aminociklobutanol hidrohlorida (30-1a; 500 mg; 4,05 mmol) i di-terc-butil dikarbonata (971 mg; 4,45 mmol) u THF (15 mL) dodat je K2CO3(615 mg; 4,45 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana na sobnoj temperaturi 48 sati. Reakciona smeša je razblažena slanim rastvorom (5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (x 3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane da bi se dobio 30-2a (440 mg; 2,35 mmol; prinos 58%) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.82 (s, 1H), 3.95-3.81 (m, 1H), 3.73-3.53 (m, 1H), 2.13-1.90 (m, 2H), 1.58-1.45 (m, 1H), 1.40 (s, 10H), 1.33-1.19 (m, 1H).
Korak 2. Racemski terc-butil (trans-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklobutil)karbamat (30-3a)
[0927] U 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (19-1a; 300 mg; 1,41 mmol), racemski trans-tercbutil-3-hidroksiciklopentil)karbamat (30-2a; 440 mg; 2,35 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (15,5 mg; 0,070 mmol), dtbbpi (18,9 mg; 0,070 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(15,8 mg; 0,014 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (4,7 mL) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 286 µl; 1,69 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana 16 sati pod zračenjem plavog LED svetla na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana kroz kratku podlogu Celite<®>i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc (sa 1% Et3N modifikatora) u heptanu da bi se dobio 30-3a (445 mg; 1,39 mmol; prinos 99%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M-tBu H]<+>= 320,3.
Korak 3. Racemska so 5-(trans-2-aminociklobutoksi)izobenzofuran-1(3H)-on CF3CO2H (30-4a)
[0928] Mešanom rastvoru 30-3a (660 mg; 2,67 mmol) u DCM (7 mL) dodat je TFA (1,59 mL; 20,7 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 3) da bi se dobila so trifluoroacetata 30-4a (1,97 g; 5,45 mmol; prinos 96%) u vidu ulja smeđe boje. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 220,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.89-4.81 (m, 1H), 3.96-3.84 (m, 1H), 2.12-2.03 (m, 1H), 1.94-1.85 (m, 1H), 1.60-1.50 (m, 1H), 1.48-1.36 (m, 1H).
Korak 4.5-((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)izobenzofuran-1(3H)-on (30-5a) i 5-((1R,2R)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)izobenzofuran-1(3H)-on (30-5b)
[0929] Rastvoru racemskog 30-4a (85 mg; 0,388 mmol) u DCM (2 mL) dodat je benzaldehid (0,039 mL; 0,39 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
NaBH(OAc)3(82 mg, 0,39 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je zatim ugašena zasić. vod. NaHCO3i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa 0% do 10% MeOH u DCM kako bi se dobio željeni racemski trans proizvod (48 mg; 0,155 mmol; prinos 40%) u vidu ulja žute boje. Enantiomeri su razdvojeni pomoću hiralnog SFC (kolona: 2,1 × 25,0 cm Chiralpak AD-H; CO2ko-rastvarač: MeOH/MeCN (v/v = 1:3) sa 0,25% izopropilamina; Izokratska metoda: 25% ko-rastvarač pri 80 g/min; Sistemski pritisak: 125 bar; Temperatura kolone: 25°C; Razblaživač uzorka: MeOH) da bi se dobio enantiomer 1 (prva vršna vrednost; Rt = 2,70 min; 16,9 mg; 0,055 mmol) i enantiomer 2 (druga vršna vrednost; Rt = 3,39 min; 14,9 mg; 0,048 mmol). Apsolutna stereohemija dva enantiomera koji odgovaraju dvema vršnim vrednostima proizvoda nije poznata i dodeljena je proizvoljno. MS [M+H]<+>= 310,3.
Koraci 5 i 6. So enantiomera 1- 3-(5-((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-44)
[0930] Mešanom rastvoru enantiomera 1 (30-5a; 16,9 mg; 0,055 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je SOCl2(0,04 mL; 0,55 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 70°C preko noći. Rastvor je ostavljen da se ohladi na sobnu temperaturu, a zatim koncentrovan do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 3) da bi se dobio sirovi 30-6a u vidu gume smeđe-crvene boje. MS [M+H]<+>= 374,4.
[0931] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 9,0 mg; 0,055 mmol) i i-Pr2NEt (0,05 mL; 0,3 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je rastvor sirovog 30-6a (∼0,055 mmol) u DMF (0,5 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći, a zatim na 110°C tokom 5 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe i dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 10 mM NH4OH). Prečišćeni materijal je sakupljen u epruvete koje su sadržale nekoliko kapi mravlje kiseline. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane liofilizatorom da bi se dobila formatna so I-44 (enantiomer 1; 3 mg; 6,1 µmol; prinos 11%) u vidu praha svetlo smeđe boje. Apsolutna stereohemija je nepoznata i dodeljena je proizvoljno. MS [M+H]<+>= 420,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34-7.27 (m, 4H), 7.24-7.17 (m, 2H), 7.06 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.07 (ddd, J = 13.3, 5.1, 1.5 Hz, 1H), 4.50 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 4.38 (dd, J= 17.2, 10.5 Hz, 1H), 4.25 (dd, J= 17.2, 6.4 Hz, 1H), 3.76-3.66 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 18.0, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.63-2.59 (m, 1H), 2.04-1.94 (m, 2H), 1.50 (kvint, J = 9.9 Hz, 1H), 1.36 (kvint, J = 9.5 Hz, 1H).
Koraci 7 i 8. Enantiomer 2- 3-(5-((1R,2R)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-45)
[0932] Mešanom rastvoru enantiomera 2 (30-5b; 14,9 mg; 0,048 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je SOCl2(0,07 mL; 0,96 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je mešana na 70°C preko noći. Rastvor je ostavljen da se ohladi na sobnu temperaturu i koncentrovan j do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 3) da bi se dobio sirovi 30-6b u vidu gume smeđe-crvene boje. MS [M+H]<+>= 374,4.
[0933] Mešanom rastvoru 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 7,9 mg; 0,048 mmol) i i-Pr2NEt (0,04 mL; 0,2 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je rastvor sirovog 30-6b (∼0,048 mmol) u DMF (0,5 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C preko noći, a zatim na 110°C tokom 5 sati. Reakcija je koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe i dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 10 mM NH4OH). Prečišćeni materijal je sakupljen u epruvete koje su sadržale nekoliko kapi mravlje kiseline. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane liofilizatorom da bi se dobio I-45 (enantiomer 2; 3 mg; 6 µmol; prinos 13%) u vidu praha svetlo smeđe boje. Apsolutna stereohemija je nepoznata i dodeljena je proizvoljno. MS [M+H]<+>= 420,4.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28-7.21 (m, 2H), 7.19-7.13 (m, 2H), 7.12-7.05 (m, 2H), 6.98 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.03 (ddd, J= 13.3, 5.2, 1.2 Hz, 1H), 4.43 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.36-4.23 (m, 2H), 3.75-3.64 (m, 2H), 3.31-3.22 (m, 1H), 2.64 (ddd, J = 17.5, 4.5, 2.4 Hz, 1H), 2.47-2.33 (m, 1H), 2.30-2.19 (m, 1H), 2.09-1.99 (m, 2H), 1.49 (tdd, J = 10.8, 9.4, 7.9 Hz, 1H), 1.37-1.27 (m, 1H).
Primer 31: So 3-(5-(((3aR*,6S*,6aS*)-1-metiloktahidrociklopenta[b]pirol-6-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-3)
[0934]
Korak 1. Racemski terc-butil (3aR*,6S*,6aS*)-6-hidroksiheksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilat (31-2a)
[0935] Mešanom rastvoru racemskog (3aR*,6S *,6aS*)-oktahidrociklopenta[b] pirol-6-ol hidrohlorida (31-1a; 1,00 g; 6,11 mmol) i di-terc-butil dikarbonata (1,60 g; 7,33 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Na2CO3(0,777 g; 7,33 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana na sobnoj temperaturi 48 sati. Reakciona smeša je zatim razblažena slanim rastvorom (25 mL) i ekstrahovana sa DCM (x 3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 31-2a (1,32 g; 5,81 mmol; prinos 95%) u vidu viskoznog ulja žute boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 3.95 (dt, J = 9.0, 4.9 Hz, 1H), 3.74 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 3.42-3.28 (m, 2H), 2.87-2.73 (m, 1H), 1.98-1.87 (m, 3H), 1.64-1.48 (m, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.37-1.27 (m, 1H).
Korak 2.3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-dion (31-3a)
[0936] Mešanom rastvoru 1-1d (10,0 g; 30,9 mmol) i DBU (6,9 mL; 46 mmol) u DMF (95 mL) dodat je SEMCl (6,6 mL; 37 mmol) na 0°C i dobijena reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim je mešana 5 sati. Dodata je dodatna porcija DBU (3,5 mL; 23 mmol) i SEMCl (3,3 mL; 19 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom dodatna 2 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena zasić. vod. NH4Cl (250 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (x 3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini EtOAc (~50 mL) i dodat je Et2O:heptan (v/v = 1:2, 400 mL). Dobijeni zamućeni rastvor je ostavljen da stoji na -5°C preko noći. Formirani talog je filtriran, ispran heptanom (x3) i osušen pod vakuumom da bi se dobilo 31-3a (11,53 g; 25,4 mmol; prinos 82%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 453,4.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.75 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.66-7.61 (m, 2H), 5.37-5.09 (m, 3H), 4.48 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.74-3.50 (m, 2H), 3.11-2.98 (m, 1H), 2.94-2.83 (m, 1H), 2.33 (qd, J = 13.2, 4.7 Hz, 1H), 2.24-2.15 (m, 1H), 0.97-0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 3. Racemski terc-butil (3aR*,6S*,6aS*)-6-((2-(2,6-diokso-1- ((2-(trimetilsilil)etoksi)-metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi) heksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilat (31-4a)
[0937] Mešanom rastvoru 31-3a (1396 mg; 3,08 mmol), 31-2a (700 mg; 3,08 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (34 mg; 0,15 mmol), dtbbpi (41 mg; 0,15 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(34,5 mg; 0,031 mmol) u MeCN (5 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,52 mL; 3,1 mmol) i rezultujuća smeša je snažno mešana preko noći pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa DCM-om (20 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 31-4a (840 mg; 1,40 mmol; prinos 45,5%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M-H]<->= 598,6.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47-6.91 (m, 2H), 5.23-5.06 (m, 3H), 5.00-4.76 (m, 1H), 4.37-4.22 (m, 2H), 4.14-4.09 (m, 1H), 3.65-3.49 (m, 3H), 3.17 (br s, 1H), 3.01-2.79 (m, 3H), 2.37-2.01 (m, 3H), 2.00-1.68 (m, 3H), 1.65-1.57 (m, 1H), 1.45-1.35 (m, 10H), 0.93-0.85 (m, 2H), -0.02 (s, 9H).
Koraci 4 i 5. Racemska so 3-(5-(((3aR*,6S*,6aS*)-1-metiloktahidrociklopenta[b]pirol-6-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-3)
[0938] Mešanom rastvoru 31-4a (210 mg; 0,350 mmol) u DCM (1 mL) dodat je TFA (1 mL; 13,07 mmol) a rezultujuća reakciona smeša mešana je 2 sata na sobnoj temperaturi.
Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće azeotropijom sa PhMe (x 3) da bi se dobila smeša 31-5a i 31-5b na osnovu NMR analize sirovog<1>H. Sirova smeša je preneta u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
[0939] Sirovoj smeši 31-5a i 31-5b (~0,35 mmol) u DMF (1 mL) dodat je acetaldehid (2-1; 0,06 mL; 1,1 mmol), nakon čega je dodat NaBH(OAc)3(148 mg; 0,700 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 6 sati na sobnoj temperaturi. LC-MS analiza je ukazala na formiranje I-3 (MS [M+H]<+>= 384,1, koja je formirana reduktivnom aminacijom sa formaldehidom koji je oslobođen od strane 31-5b i 31-6b (MS [M+H]<+>= 398,3) u odnosu 2:1, respektivno.
Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 5 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (2 kapi) Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so racemskog I-3 (10,1 mg; 0,023 mmol; prinos 7%). MS I-3 [M+H]<+>= 384,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.26 (s, 1H), 7.80-7.62 (m, 1H), 7.08-6.92 (m, 2H), 5.11 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.38-4.23 (m, 2H), 3.00-2.70 (m, 5H), 2.53 (s, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.38-2.12 (m, 3H), 2.04-1.93 (m, 3H), 1.89-1.81 (m, 1H), 1.53-1.35 (m, 2H).
Primer 32: 3-(5-(((3R,4S)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-47)
[0940]
Korak 1. Terc-butil ((3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il)karbamat (32-2a)
[0941] Mešanom rastvoru (3R,4S)-4-aminotetrahidrofuran-3-ola (32-1a; 482 mg; 4,67 mmol) i di-terc-butil dikarbonata (1122 mg; 5,14 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Et3N (1,6 mL; 11,48 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok nije uočena potpuna potrošnja početnog materijala. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je tretiran vodom (6 mL), a dobijena čvrsta supstanca je zatim filtrirana i isprana vodom da bi se dobio željeni proizvod 32-2a (838,1 mg; 4,08 mmol; prinos 87%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M-tBu+H]<+>= 148,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.71 (s, 1H), 4.32 (dq, J= 5.7, 2.9 Hz, 1H), 4.10 (ddd, J= 16.0, 9.7, 5.6 Hz, 2H), 3.97 (dt, J= 6.4, 3.2 Hz, 1H), 3.71 (dd, J= 10.0, 3.3 Hz, 1H), 3.63 (dd, J= 9.5, 3.4 Hz, 1H), 2.82 (s, 1H), 1.48 (s, 9H).
Korak 2. Terc-butil ((3S,4R)-4-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)tetrahidrofuran-3-il)karbamat (32-3a)
[0942] Mešanom rastvoru (31-3a; 934,6 mg; 2,061 mmol), terc-butil((3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il)karbamata (32-2a; 395,4 mg; 1,946 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (25 mg; 0,11 mmol), dtbbpi (30 mg; 0,11 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(20 mg; 0,018 mmol) u MeCN (5 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,35 mL; 2,1 mmol) i rezultujuća smeša je mešana preko noći pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz podlogu Celite<®>. Filtrat je zatim razblažen sa EtOAc (150 mL), ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom (20 mL), osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 32-3a u vidu čvrste supstance bele boje (1,02 g; 1,59 mmol; prinos 82%). MS [M+18]<+>= 593,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.11 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 5.30-5.00 (m, 3H), 4.88 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 4.52-4.20 (m, 2H), 4.05 (qd, J = 6.2, 5.2, 3.4 Hz, 4H), 3.84 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.64-3.50 (m, 3H), 3.08 (ddd, J = 18.4, 13.6, 5.5 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.10-2.02 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.20 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 0.94-0.75 (m, 2H). Napomena: Vršna vrednost TMS SEM grupe se preklapa sa referentnim Me4Si.
Korak 3.3-(5-(((3R,4S)-4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-46)
[0943] Mešanom rastvoru 32-3a (102 mg; 0,177 mmol) u MeCN (1 mL) dodat je 1 M HCl u sirćetnoj kiselini (0,9 mL; 0,9 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok nije uočena potpuna potrošnja početnih materijala. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće azeotropijom sa DCM da bi se dobio sirovi proizvod I-46 u vidu bele pene koja je preneta na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 346,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.96 (s, 1H), 8.38 (s, 3H), 7.70 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 7.4, 2.3 Hz, 1H), 7.17-7.09 (m, 1H), 5.30-4.94 (m, 2H), 4.54-4.20 (m, 2H), 4.08 (dd, J = 10.2, 5.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.87-3.76 (m, 2H), 3.05 (ddd, J = 18.2, 13.5, 5.4 Hz, 1H), 2.88-2.71 (m, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.07-2.00 (m, 1H).
Korak 4.3-(5-(((3R,4S)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-47)
[0944] Rastvoru sirovog I-46 (65 mg; -0.17 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol) u DMF (1 mL) dodat je NaBH(OAc)3(108 mg; 0,511 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi na otvorenom tokom 4 sata. Zatim je dodata dodatna porcija acetaldehida (2-1; 0,03 mL; 0,5 mmol) i NaBH(OAc)3(69 mg; 0,32 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok nije primećena potpuna potrošnja početnog materijala.
Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen reverznom fazom HPLC (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 5 mM NH4OH) i sakupljen u epruvetama sa mravljom kiselinom (2 kapi) Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-47 u vidu čvrste supstance bele boje (39,7 mg; 0,087 mmol; prinos 51%). MS [M+H]<+>= 402,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.09 (ddd, J = 8.5, 2.3, 1.1 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 3.7 Hz, 1H), 4.48-4.19 (m, 2H), 4.08 (dd, J = 10.5, 5.4 Hz, 1H), 3.99 (dd, J = 9.2, 7.0 Hz, 1H), 3.72 (dt, J = 10.4, 2.0 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 9.2, 6.5 Hz, 1H), 3.47 (td, J = 6.8, 2.5 Hz, 1H), 2.91 (ddd, J = 17.3, 13.7, 5.5 Hz, 1H), 2.56 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 2.39 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.05-1.91 (m, 1H), 0.97 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Primer 33: 3-(5-(((1S,2S)-2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-4)
[0945]
[0946] Suspenziji 1-1d (200 mg; 0,619 mmol) i (1S,2S) -2-metoksicikloheksan-1-ola (33-1a; 121 mg; 0,928 mmol) u MeCN (5 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodati su Ir[dF(CF3)ppi)2dtbbpi)]PF6(7 mg; 6 µmol), NiCl2(dimetoksietan) (7 mg; 0,03 mmol), dtbbpi (8 mg; 0,03 mmol), kvinuklidin (7 mg; 0,06 mmol) i K2CO3(128 mg; 0,928 mmol). Dobijena suspenzija je sonikirana i snažno promešana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa viškom EtOAc i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc (x 3). Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 25% EtOH:EtOAc (v/v = 1:3) u DCM, isparavajući odgovarajuće frakcije do suvoće. Izolovani materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane pomoću liofilizatora da bi se dobio I-4 (7,0 mg; 0,018 mmol; prinos 3%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 373,3.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.1, 5.0 Hz, 1H), 4.41-4.21 (m, 3H), oslonjeno na H2O signal pri 3,30 (3H), 2.96-2.84 (m, 1H), 2.64-2.56 (m, 3H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.69-1.57 (m, 2H), 1.45-1.22 (m, 4H)
Primer 34: 3-(5-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-26)
[0947]
[0948] Suspenziji 1-1d (200 mg; 0,619 mmol) i (1S,2S) -2-metoksiciklopentan-1-ola (34-1a; 108 mg; 0,928 mmol) u MeCN (5 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodati su Ir[dF(CF3)ppi)2dtbbpi)]PF6(7 mg; 6 µmol), NiCl2(dimetoksietan) (7 mg; 0,03 mmol), dtbbpi (8 mg; 0,03 mmol), kvinuklidin (7 mg; 0,06 mmol) i K2CO3(128 mg; 0,928 mmol). Dobijena suspenzija je sonikirana i snažno promešana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa viškom EtOAc i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc (x 3). Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane pomoću liofilizatora da bi se dobio I-26 (38 mg; 0,10 mmol; prinos 16%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 359,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.76-4.71 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 17.2, 4.5 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.3, 3.3 Hz, 1H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.98-2.83 (m, 1H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.43-2.33 (m, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 2.03-1.88 (m, 2H), 1.74-1.58 (m, 4H).
Primer 35: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion i 3-(1-okso-5- (((1R,2R)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-19)
[0949]
Korak 1. (1S,2S)-2-fenoksicikloheksan-1-ol i (1R,2R)-2-fenoksicikloheksan-1-ol (35-2a)
[0950] Cikloheksen oksid (35-1a; 1,96 g; 20 mmol), fenol (0,94 g; 10 mmol) i tetra-n-butil amonijum jodid (0,37 g; 1 mmol) mešani su na 80°C tokom 70 sati. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa 10% vod. NaHCO3(3 x 20 mL) i vode (2 x 15 mL). Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa PhMe:EtOAc (v/v = 10:1) da bi se dobio 35-2a (1,76 g; 8,98 mmol; prinos 90%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+Na]<+>= 215,1.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.27-7.22 (m, 2H), 6.98-6.91 (m, 3H), 4.05-3.96 (m, 1H), 3.88-3.84 (m, 1H), 2.54 (br s, 1H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.43-1.22 (m, 4H).
Korak 2.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion i 3-(1-okso-5- (((1R,2R)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-19)
[0951] Suspenziji 1-1d (200 mg; 0,619 mmol) i 2-fenoksicikloheksan-1-ola (35-2a; smeša trans izomera) (178 mg; 0,928 mmol) u MeCN (5 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodat je Ir[dF(CF3)ppi)2dtbbpi)]PF6(7 mg; 6 µmol), NiCl2(dimetoksietan) (7 mg; 0,03 mmol), dtbbpi (8 mg; 0,03 mmol), kvinuklidin (7 mg; 0,06 mmol) i K2CO3(128 mg; 0,928 mmol). Dobijena suspenzija je sonikirana, a zatim snažno mešana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona smeša je razblažena sa viškom EtOAc i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc (3x). Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane pomoću liofilizatora da bi se dobio I-19 (6,0 mg; 0,013 mmol; prinos 2%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 435,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.05-7.01 (m, 1H), 6.95-6.87 (m, 3H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.62-4.55 (m, 1H), 4.51-4.42 (m, 1H), 4.42-4.18 (m, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.64-2.54 (m, 2H), 2.42-2.32 (m, 1H), 2.19-2.10 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.75-1.64 (m, 2H), 1.58-1.38 (m, 4H).
Primer 36: 3-(5-(((1S,2S)-2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-9)
[0952]
[0953] Suspenziji 1-1d (200 mg; 0,619 mmol) i (1S,2S)-2-(benziloksi)ciklopentan-1-ola (36-1a; 268 mg; 1,39 mmol) u MeCN (5 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodati su Ir[dF(CF3)ppi)2dtbbpi)]PF6(7 mg; 6 µmol), NiCl2(dimetoksietan) (7 mg; 0,03 mmol), dtbbpi (8 mg; 0,03 mmol), kvinuklidin (7 mg; 0,06 mmol) i K2CO3(128 mg; 0,928 mmol). Dobijena suspenzija je sonikirana, a zatim snažno mešana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona smeša je razblažena sa viškom EtOAc i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc (x 3). Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 20% THF u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su koncentrovane i dalje prečišćene HPLC metodom reverznih faza (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline).
Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane pomoću liofilizatora da bi se dobio I-9 (21 mg; 0,046 mmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 435,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37-7.32 (m, 4H), 7.31-7.25 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.05-7.01 (m, 1H), 5.12-5.02 (m, 1H), 4.83-4.79 (m, 1H), 4.54 (qd, J = 12.0, 1.6 Hz, 2H), 4.43-4.30 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 8.7 Hz, 1H), 4.02-3.98 (m, 1H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.20-2.12 (m, 1H), 2.02-1.91 (m, 2H), 1.78-1.64 (m, 4H).
Primer 37: 3-(5-(((1R,2R)-2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-6)
[0954]
[0955] Suspenziji 1-1d (200 mg; 0,619 mmol) i ((1R,2R) -ciklopentan-1,2-diola (37-1a; 95 mg; 0,93 mmol) u MeCN (5 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodati su Ir[dF(CF3)ppi)2dtbbpi)]PF6(7 mg; 6 µmol), NiCl2(dimetoksietan) (7 mg; 0,03 mmol), dtbbpi (8 mg; 0,03 mmol), kvinuklidin (7 mg; 0,06 mmol) i K2CO3(128 mg; 0,928 mmol). Dobijena suspenzija je sonikirana, a zatim snažno mešana pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona smeša je razblažena sa viškom EtOAc i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc (x 3). Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverzne faze (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i koncentrovane pomoću liofilizatora da bi se dobio I-6 (17 mg; 0,047 mmol; prinos 8%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 345,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.3, 2.01 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.5, 5.1 Hz, 1H), 5.01 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 4.58-4.52 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 17.2, 5.1 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.0, 3.9 Hz, 1H), 4.11-4.05 (m, 1H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.64-2.51 (m, 1H), 2.44-2.33 (m, 1H), 2.20-2.09 (m, 1H), 2.02-1.94 (m, 1H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.81-1.50 (m, 4H).
Primer 38. 3-(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-2)
[0956]
Korak 1. Terc-butil ((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)karbamat (38-2a)
[0957] Suspenziji 1-1d (432 mg; 1,34 mmol)), terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil) karbamat (38-1a; 1066 mg; 4,95 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (54 mg; 0,25 mmol), dtbbpi (66 mg; 0,2548 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(15 mg; 0,013 mmol) u MeCN (4,5 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 226 µL; 1,34 mmol) i rezultujuća smeša je zatim snažno mešana 16 sati pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc (20 mL), filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0% do 100% EtOAc u heptanima da bi se dobio 38-2a (115 mg; 0,251 mmol; prinos 19%) au vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 458,3.
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2R)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion CF3CO2H (I-30)
[0958] Mešanom rastvoru 38-2a (115 mg; 0,251 mmol) u DCM (2,5 mL) dodata je TFA (194 µL; 2,51 mmol) i rezultujuća smeša je mešana 48 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline) da bi se dobila so trifluoracetata I-30 (54 mg; 0,152 mmol; prinos 60%). MS [M+H]<+>= 358,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de) δ 10.97 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.17 (dt, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.41 (dd, J = 17.4, 2.4 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 17.3, 4.2 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 2.91 (ddd, J = 18.0, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.06-1.93 (m, 2H), 1.75 (d, J = 23.0 Hz, 3H), 1.64-1.49 (m, 1H), 1.40 (s, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-2)
[0959] Rastvor I-30 (54,2 mg; 0,152 mmol) i benzaldehida (15 µL, 0,15 mmol) u DMF (0,7 mL) mešan je 3 sata. NaBH(OAc)3(31 mg; 0,15 mmol) je zatim dodat u jednoj porciji i rezultujuća reakciona smeša je snažno mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (eluiranjem sa MeCN/H2O sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-2 (13,2 mg; 0,029 mmol; prinos 20%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 448,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28-7.14 (m, 4H), 7.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.37 (dd, J = 17.1, 6.7 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.5, 4.8 Hz, 1H), 3.72 (q, J = 13.1 Hz, 2H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.76 (s, 1H), 1.99 (s, 2H), 1.91 (s, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.49 (s, 2H), 1.42-1.21 (m, 1H).
Primer 39: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-48)
[0960]
Postupak A: Korak 1.1,3-dibromo-2-etoksipropan (39-2)
[0961] Mešanom rastvoru N1,N1,N8,N8-tetrametilnaftalen-1,8-diamina (80,0 g; 372 mmol) i 1,3-dibromopropan-2-ola (39-1; 20,0 mL; 196 mmol) u DCM (150 mL) dodat je trietiloksonijum tetrafluoroborat (63,3 g; 333 mmol), rastvoren u DCM (50 mL) na 0°C pod pozitivnim pritiskom azota. Nakon završetka dodavanja, reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Smeša je filtrirana kroz podlogu od silikagela eluiranjem sa DCM (5x 350 mL). Svaka frakcija je sakupljena odvojeno i frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane. Ulje žute boje je prečišćeno filtracijom kroz drugu podlogu od silika gela eluiranjem sa 20% DCM u pentanu da bi se dobio 39-2 (43,4 g; 159 mmol; prinos 81%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.62 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.55 (d, J = 5.2 Hz, 4H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-48)
[0962] Mešanoj suspenziji 3-(5- (((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 7,10 g; 17,9 mmol) i DIPEA (12,5 mL; 71,5 mmol) u DMA (100 mL) dodat je 39-2 (8,31 g; 30,4 mmol) i rezultujuća smeša je zagrevana na 85°C tokom 24 sata pod atmosferom azota. Dodati su dodatni 39-1 (4,0 g; 15 mmol) i DIPEA (6,0 mL; 34 mmol) i mešanje je nastavljeno pri 85°C tokom dodatnih 24 sata. Dodati su dodatni 39-2 (0,80 g; 2,9 mmol) i DIPEA (1,2 mL; 6,9 mmol) i mešanje je nastavljeno pri 85°C tokom dodatnih 24 sata. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi i koncentrovana je do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-48 (3,37 g; 7,63 mmol; prinos 43%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 442,5.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.39-8.20 (m, 1H), 7.67 (dd, J = 8.7, 1.7 Hz, 1H), 7.02 - 6.93 (m, 2H), 5.09 (ddd, J = 13.3, 6.7, 5.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.14 (m, 3H), 4.06 - 3.87 (m, 1H), 3.59 (s, 2H), 3.34 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.14 (s, 1H), 3.03 - 2.71 (m, 3H), 2.50 - 2.22 (m, 2H), 2.20 -2.11 (m, 1H), 2.09 - 1.95 (m, 1H), 1.91 - 1.80 (m, 1H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.45 - 1.14 (m, 4H), 1.10 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Postupak B:
Intermedijer 54-1 je pripremljen prema postupku koji je opisan u Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2003, 13, 1729-1732.
[0963] Suspenziji 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 100 mg; 0,28 mmol) u MeCN (3 mL), dodat je 2-etoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (54-1; 180 mg; 0,42 mmol) i DIPEA (0,36 mL; 1,7 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 6% MeOH u DCM da bi se dobio I-48 (20 mg; 0,045 mmol; 16%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. Analitički podaci su bili identični onima koji su navedeni u ovom dokumentu za Primer 39, Korak 2.
Primer 40: 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (Int-40-5)
[0964]
Korak 1. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheptil)karbamat (40-3)
[0965] U suspenziju 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-trimetilsilil)etoksi)metil) piperidin-2,6-diona (31-3a) (5,00 g; 11,0 mmol) u MeCN (35 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodat je terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksicikloheptil)karbamat (40-1; 2,66 g; 11,6 mmol), 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 1,95 mL; 11,6 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (0,121 g; 0,551 mmol), dtbbpi (0,148 g; 0,551 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(0,124 g; 0,110 mmol). Suspenzija je sonikirana, a zatim mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota.
Dobijeni rastvor je mešan pod plavim LED svetlima 48 sati. Zatim je dodato 50% zasićenog natrijum-hidrogenkarbonata u vodi i dobijena smeša je ekstrahovana sa 20% i-ProH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza, koncentrovane su pod smanjenim pritiskom, a zatim osušene pod visokim vakuumom kako bi se dobio sirovi 40-3, u vidu čvrste supstance tamno crvene boje, koja je preneta u sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M-H]<->= 600,5.
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (INT-40-5)
[0966] Rastvoru sirovog terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il) oksi) cikloheptil)karbamata (40-3; 6,64 g; 11,0 mmol) u DCM (80 mL) pod atmosferom azota dodata je metansulfonska kiselina (2,9 mL; 44 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je dodatna metansulfonska kiselina (2,9 mL; 44 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata, a zatim ohlađena pomoću ledenog kupatila. Trietilamin (18,5 mL; 132 mmol) je dodat kapanjem, pod atmosferom azota, praćeno N1,N2-dimetiletan-1,2-diaminom (40-4; 1,4 mL; 13 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Dobijenom ostatku je dodat 50% zasićeni natrijum-hidrogenkarbonat u vodenom rastvoru (250 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x4). Kombinovane supstance su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su pod smanjenim pritiskom. Sirovi materijal je tretiran sa MeCN da bi se obezbedila suspenzija, koja je sonikirana i filtrirana. Prikupljena čvrsta supstanca je isprana sa MeCN (x3) i zatim osušena pod vakuumom da bi se dobio INT-40-5 (2,17 g; 5,84 mmol; prinos 53%) u vidu čvrste supstance bež boje. MS [M+H]<+>= 372,3. Alternativno, sirovi materijal je tretiran viškom dietil etra da bi se obezbedila suspenzija, koja je sonikirana i filtrirana. Prikupljena čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (x3), a zatim osušena pod vakumom da bi se dobio INT-40-5 (1,42 g; 3,82 mmol; prinos 35%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 372,3.
Primer 41: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-57)
[0967]
[0968] Rastvoru 3-(5- (((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 92 mg; 0,25 mmol) u TFE (3 mL) dodat je acetaldehid (2-1; 0,02 mL; 0,4 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (157 mg; 0,743 mmol). Mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 3 sata, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-57 (64 mg; 0,15 mmol; prinos 61%), u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.44-4.20 (m, 3H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.70-2.53 (m, 2H), 2.44-2.29 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.84-1.73 (m, 3H), 1.72 -1.39 (m, 8H), 0.99 (t, J= 7.1 Hz, 3H).
Primer 42: 3-(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-58)
[0969]
[0970] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 46 mg; 0,12 mmol) u MeCN (2 mL) dodati su DIPEA (0,07 mL; 0,4 mmol) i benzil bromid (42-1; 0,015 mL; 0,12 mmol). Dobijena smeša je mešana na 65°C preko noći. Mešanje je nastavljeno i zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijumhidrogenkarbonata (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N). Dobijeni materijal je rastvoren u minimalnoj količini DCM-a u koju je dodat višak dietil etra. Dobijena suspenzija je sonikirana, filtrirana i isprana dietil etrom (x3). Dobijeni filtrat je sakupljen i koncentrovan. Sirovi materijal je dalje prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH (sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts) da bi se dobio I-58 (11 mg; 0,02 mmol; prinos 18%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 462,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm); 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33-7.24 (m, 4H), 7.23-1.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.00 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.48-4.20 (m, 3H), 3.853.63 (m, 2H), 2.96-2.82 (m, 2H), 2.59 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 2.38 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.88-1.37 (m, 10H).
Primer 43: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-59)
[0971]
[0972] U bočicu su dodati 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (INT-40-5; 100 mg; 0,27 mmol), acetaldehid (2-1; 76 µL; 1,4 mmol) i DMF (2,7 mL). Dobijena smeša je mešana 15 minuta pod atmosferom N2i zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (285 mg; 1,35 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, dodata je zasićenom vodenom rastvoru bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (x3). Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; eluiranjem sa vodom/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline; 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN tokom 3,5 min.) da bi se dobila formatna so I-59 (11 mg; 0,023 mmol; prinos 36%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 8.4, 2.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.02 (dt, J = 8.4, 2.8 Hz, 1H), 5.11-5.01 (m, 1H), 4.63-4.58 (m, 1H), 4.43-4.19 (m, 2H), 2.97-2.85 (m, 2H), 2.64-2.52 (m, 2H), 2.43-2.31 (m, 3H), 2.02-1.79 (m, 3H), 1.76-1.64 (m, 3H), 1.61-1.23 (m, 6H), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Primer 44: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-60)
[0973]
Korak 1.3-hidroksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (44-2)
[0974] DMAP (60 mg; 0,49 mmol) i TEA (2,4 mL; 17 mmol) su dodati rastvoru 3-metilpentan-1,3,5-triola (44-1; 580 mg; 4,32 mmol) u MeCN (20 mL) i dobijeni rastvor je stavljen u inertnu atmosferu i ohlađen na 0°C. Zatim je dodat rastvor TsCl (1813 mg; 9,51 mmol) u MeCN (5 mL) i reakciona smeša je mešana na 0°C 1 sat, zatim je zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 44-2 (1,40 g; 3,16 mmol; prinos 73%) u vidu ulja svetlo smeđe boje. MS [M+H2O]<+>= 460,3.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.75 (m, 4H), 7.38-7.32 (m, 4H), 4.16 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 2.46 (s, 6H), 1.88-1.75 (m, 4H), 1.17 (s, 3H).
Korak 2.3-metoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (44-3)
[0975] Trimetiloksonijum tetrafluoroborat (334 mg; 2,26 mmol) je dodat u rastvor 3-hidroksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (44-2; 500 mg; 1,13 mmol) i Proton-Sponge<®>(484 mg; 2,26 mmol) u DCM i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 44-3 (300 mg; 0,657 mmol; prinos 58%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H2O]<+>= 474,5.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.75 (m, 4H), 7.37-7.32 (m, 4H), 4.11-4.00 (m, 4H), 3.02 (s, 3H), 2.45 (s, 6H), 1.87-1.75 (m, 4H), 1.08 (s, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-60)
[0976] DIPEA (0,18 mL; 1,0 mmol) je dodat u rastvor 3-metoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (44-3; 184 mg; 0.404 mmol) i 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 75 mg; 0,20 mmol) u MeCN (1,5 mL) i rezultujuća smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi ostatak je uzet u DCM i ispran zasićenim vodenim NaHCOs i faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana sa DCM-om i kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-80% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-60 (39 mg; 0,073 mmol; prinos 36%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 484,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21-7.15 (m, 1H), 7.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.37 (dd, J = 17.1, 6.8 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 5.3 Hz, 1H), 3.00 (s, 3H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.80-2.71 (m, 1H), 2.62-2.55 (m, 2H), 2.48-2.31 (m, 4H), 2.02-1.87 (m, 2H), 1.84-1.60 (m, 4H), 1.60-1.39 (m, 5H), 1.39-1.20 (m, 4H), 0.98 (s, 3H).
Primer 45: 3-(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-61)
[0977]
[0978] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u TFE (2 mL) dodat je izobutiraldehid (17-1a; 0,03 mL; 0,3 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (171 mg; 0,808 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i organski rastvarač je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobila čvrsta supstanca žute boje. Dobijena čvrsta supstanca je ponovo prečišćena silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u DCM (sa 0,1% NEts) da bi se dobila čvrsta supstanca žute boje koja je ponovo prečišćena silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) da bi se dobio I-61 (24 mg; 0,053 mmol; prinos 20%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 428,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.06-6.99 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.44-4.19 (m, 3H), 2.90 (ddd, J = 18.1, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.83-2.77 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.44-2.27 (m, 3H), 2.02-1.94 (m, 1H), 1.87-1.38 (br multipleta, 11H), 0.83 (dd, J = 6.6, 2.3 Hz, 6H).
Primer 46: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-62)
[0979]
[0980] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT 40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u TFE (3 mL) dodat je propionaldehid (46-1; 0,02 mL; 0,3 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (171 mg; 0,808 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati, a zatim je dodata zasićenom vodenom rastvoru natrijumhidrogenkarbonata (20 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3).
Kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts) da bi se dobio I-62 (49 mg; 0,11 mmol; prinos 42%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 414,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.06-6.99 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.44-4.20 (m, 3H), 2.89 (ddd, J = 27.1, 14.0, 7.1 Hz, 1H), 2.88-2.80 (m, 1H), 2.65-2.52 (m, 2H), 2.48-2.28 (m, 2H), 2.04 -1.92 (m, 1H), 1.86-1.43 (m, 10H), 1.42-1.31 (m, 2H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Primer 47: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro [3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-63)
[0981]
[0982] U µW bočici, 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (INT-40-5; 101,8 mg; 0,274 mmol) i 3,3-bis(bromometil)oksetan (47-1;
85 mg; 0,35 mmol) rastvoreni su u MeCN (1 mL) i DIPEA (0,15 mL; 0,86 mmol). Dobijena smeša je mešana u µW reaktoru na 120°C tokom 6 sati, prebačena u reakcionu bočicu sa MeCN, a zatim je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc: EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Dobijena čvrsta supstanca je zatim prečišćena putem HPLC metode reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline; 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-63 (38 mg; 0,075 mmol; prinos 27%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 454,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.05-6.96 (m, 1H), 5.14-5.01 (m, 1H), 4.53 (s, 4H), 4.47-4.14 (m, 3H), 3.35 (d, J = 7.24 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.7, 13.4, 5.2 Hz, 1H), 2.71-2.56 (m, 1H), 2.42-2.29 (m, 1H), 2.04-1.92 (m, 1H), 1.87-1.31 (m, 11H).
Primer 48: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-64)
[0983]
Korak 1. ((1R,4R)-4-metoksicikloheksil)metanol (48-2)
[0984] Rastvoru trans-4-metoksicikloheksan-1-karboksilne kiseline (48-1; 1,00 g; 6,32 mmol) u suvom THF (10 mL), pod atmosferom azota i ohlađenog pomoću ledenog kupatila, dodat je litijum aluminijum hidrid 1M u THF (9,5 mL; 9,5 mmol) kapanjem. Dobijena smeša je mešana korišćenjem ledenog kupatila 2 sata, zatim ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana 16 sati. Zatim je dodat rastvor zasićenog vodenog kalijum natrijum tartrata (Rošelova so) (150 mL) uz mešanje. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM (x4) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobilo 48-2 (903 mg; 6,26 mmol; prinos 99%) u vidu bezbojnog ulja.
Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.36 (s, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.19 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.02 (tt, J = 10.7, 4.1 Hz, 1H), 2.07-1.91 (m, 2H), 1.80-1.66 (m, 2H), 1.36-1.21 (m, 1H), 1.11-0.96 (m, 2H), 0.87 (tdd, J = 13.2, 11.6, 3.1 Hz, 2H).
Korak 2. (1R,4R)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (48-3)
[0985] ((1R,4R)-4-metoksicikloheksil)metanol (48-2; 100 mg; 0,693 mmol) je rastvoren u DCM (3 mL) i ohlađen pomoću ledenog kupatila. Zatim je dodat DMP (412 mg; 0,971 mmol) praćen dodatkom H2O (0,02 mL; 0,9 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Dodata je smeša u odnosu 1:1 zasićenog vodenog rastvora natrijum tiosulfata (10 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i smeša je ekstrahovana sa DCM-om (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće kako bi se dobila čvrsta supstanca bele boje. Sirovi materijal je suspendovan u višku dietil etra, sonikiran i filtriran. Dobijena čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (x2). Filtrat je zatim sakupljen i koncentrovan do suvoće da bi se dobio 48-3 (104 mg; 0,585 mmol; prinos 84%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 9.57 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.12-2.99 (m, 1H), 2.31-2.16 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 4H), 1.33-1.09 (m, 4H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-64)
[0986] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u TFE (2 mL) dodat je (1r,4r)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (48-3; 42,1 mg; 0,296 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (171 mg; 0,808 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL). Smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-64 (50 mg; 0,095 mmol; prinos 36%), u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 498,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.02 (dt, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 5.11-5.02 (m, 1H), 4.43-4.21 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.05-2.84 (m, 2H), 2.83-2.74 (m, 1H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.45-2.27 (m, 3H), 2.02-1.90 (m, 3H), 1.85-1.58 (m, 7H), 1.58-1.38 (m, 5H), 1.33-1.21 (s, 1H), 1.02 (q, J = 12.2 Hz, 2H), 0.93-0.76 (m, 2H).
Primer 49: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-65)
[0988] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u DCE (2 mL) dodat je tetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (49-1; 34 mg; 0,30 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (171 mg; 0,808 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrisane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline; 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-65 (43 mg; 0,075 mmol; prinos 28%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17-7.09 (m, 1H), 7.02 (dt, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.4, 4.9 Hz, 1H), 4.42-4.19 (m, 3H), 3.79 (dd, J = 11.5, 4.0 Hz, 2H), 3.27-3.17 (m, 2H), 2.96-2.79 (m, 2H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.47-2.31 (m, 3H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.85-1.38 (m, 13H), 1.16-0.99 (m, 2H).
Primer 50: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-66)
[0989]
[0990] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u DCE (3 mL) dodat je 3-metiloksetan-3-karbaldehid (50-1; 32 mg; 0,32 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (171 mg; 0,808 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrisane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline; 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-66 (18 mg; 0,034 mmol; prinos 13%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 456,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.09-6.98 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.45-4.20 (m, 5H), 4.13 (dd, J = 5.5, 2.9 Hz, 2H), 2.98-2.84 (m, 1H), 2.84-2.54 (m, 5H), 2.37 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.02-1.92 (m, 1H), 1.86-1.40 (m, 9H), 1.18 (s, 3H).
Primer 51: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-67)
[0991]
Korak 1.3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metanol (51-2)
[0992] Rastvoru 3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-karboksilne kiseline (51-1; 1000 mg; 7,69 mmol) u THF (3 mL) pod azotnom atmosferom na 0°C dodat je 1M BH3u THF ( 9,2 mL, 9,2 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ugašena sa MeOH (2 mL) i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 51-2 (890 mg; 7,66 mmol; prinos 100%) u vidu bezbojnog ulja koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 3.84 (s, 2H), 2.02 (d, J = 2.7 Hz, 6H).
Korak 2.3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-karbaldehid (51-3)
[0993] Rastvoru (3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metanola (51-2; 890 mg; 7,66 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DMP (4,87 g; 11,5 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 sati. Reakciona smeša je razblažena sa Et2O i filtrirana. Filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio 51-3, koji je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja (pretpostavljeni kvantitativni prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.29 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.91 (d, J = 2.7 Hz, 6H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (51-4)
[0994] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 102 mg; 0,275 mmol) u DCE (0,9 mL) dodat je prethodno filtrirani 3-fluorobiciklo [1.1.1] pentan-1-karbaldehid (51-3; 38 mg; 0,33 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (87 mg; 0,41 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, a zatim ugašena zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovani organski slojevi su prošli kroz separator faza i koncentrovani na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu da bi se dobio I-67 (52,4 mg; 0,107 mmol; prinos 39%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (ddd, J= 13.2,5.2, 1.8 Hz, 1H), 4.50-4.18 (m, 3H), 2.99-2.72 (m, 4H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.04-1.93 (m, 1H), 1.89 (d, J = 2.6 Hz, 6H), 1.82-1.39 (m, 10H).
Primer 52: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-68)
[0995]
Korak 1.2-metoksipropan-1,3-diol (52-2)
[0996] Rastvoru dimetil 2-metoksimalonata (52-1; 1,7 mL; 12 mmol) u suvom THF (70 mL), pod atmosferom azota i ohlađenog u ledenom kupatilu, kapanjem je dodat litijum aluminijum hidrid 1M u THF (14,8 mL; 14,8 mmol). Dobijena smeša je mešana u ledenoj kupki, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena pomoću ledenog kupatila i natrijum sulfat dekahidrat (4,77 g, 14,8 mmol) je dodat u porciji pod strujom azota uz snažno mešanje da bi se obezbedila granulirana suspenzija. Suspenzija je filtrirana i dobijena čvrsta supstanca je isprana sa THF (x3). Filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio 52-2 (629 mg; 12,3 mmol; prinos 48%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.47 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.50-3.33 (m, 4H), 3.31 (s, 3H), 3.12 (kvint, J = 5.1 Hz, 1H).
Korak 2.2-metoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (52-3)
[0997] DMAP (77 mg; 0,63 mmol) i TEA (1,05 mL; 7,54 mmol) su dodati rastvoru 2-metoksipropan-1,3-diola (52-2; 200 mg; 1,89 mmol) u MeCN (5 mL). Dodat je TsCl (898 mg; 4,71 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pod atmosferom azota. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i dobijeni ostatak je tretiran dietil etrom. Dobijena suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (x3). Filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće da bi se dobio 52-3 (771 mg, 1,86 mmol, prinos 99%) u vidu bledo žutog ulja. MS [M+H]<+>= 415,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.78-7.74 (m, 4H), 7.35 (dd, J = 8.7, 0.7 Hz, 4H), 4.07-3.97 (m, 4H), 3.59 (kvint, J = 5.0 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.46 (s, 6H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-68)
[0998] U zamućeni rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 100 mg; 0,269 mmol) u MeCN (2 mL) dodat je 2-metoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (52-3; 167 mg; 0,404 mmol) i DIPEA (0,28 mL; 1,6 mmol). Dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 2 sata, a zatim na 140°C tokom 1 sata pod µW. Zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (20 mL) i vode (20 mL) i dobijena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3).
Kombinovani organski sastojci su propušteni kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovani su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts) da bi se dobio I-68 (40 mg; 0,09 mmol; prinos 32%), u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 442,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.00 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 5.13-4.99 (m, 1H), 4.44-4.20 (m, 3H), 3.84 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.53-3.46 (m, 1H), 3.39-3.33 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.96-2.85 (m, 2H), 2.80-2.73 (m, 1H), 2.64-2.52 (m, 2H), 2.46-2.28 (m, 1H), 2.04-1.93 (m, 1H), 1.88-1.34 (m, 10H).
Primer 53: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-69)
[0999]
Korak 1. (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (53-2)
[1000] Rastvoru (3,3-difluorociklobutil)metanola (53-1; 100 mg; 0,82 mmol) u DCM (3 mL) dodati su DIPEA (0,29 mL; 1,6 mmol), 1-metil-1H-imidazol (0,13 mL; 1,6 mmol) i nakon toga TsCl (234 mg; 1,23 mmol) kapanjem, pod strujom azota. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim razblažena sa DCM (ukupno 30 mL). Organska faza je odvojena i isprana sa 1M HCl (vod.) (x2), zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (x2) i slanim rastvorom (x1). Organska faza je prošla kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovana je do suvoće da bi se dobio sirovi 53-2 (236 mg) u vidu čvrste supstance bele boje. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H2O]<+>= 294,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.83-7.77 (m, 2H), 7.53-7.47 (m, 2H), 4.09 (dt, J = 6.6, 0.9 Hz, 2H), 2.67-2.53 (m, 2H), 2.48-2.38 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.37-2.21 (m, 2H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-69)
[1001] U suspenziju 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 112 mg; 0,302 mmol) u MeCN (2 mL), uz ispuštanje mehurića azota, dodat je sirovi (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (53-2; 92 mg; 0,33 mmol) i DIPEA (0,26 mL; 1,5 mmol). Dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 2 sata, a zatim na 140°C tokom 9 sati pod µW. Reakciona smeša je razblažena vodom (15 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (15 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH u DCM koristeći 0,1% NEts kao modifikator, da bi se dobio I-69 (39 mg; 0,078 mmol; prinos 26%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 476,3.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.20 (m, 3H), 2.90 (ddd, J = 18.1, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.84-2.78 (m, 1H), 2.71-2.52 (m, 5H), 2.44-2.30 (m, 1H), 2.27-2.12 (m, 3H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.84-1.39 (m, 10H).
Primer 54: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-55)
[1002]
Korak 1.2-etoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (54-1)
[1003] TsCl (1368 mg; 7,18 mmol) je dodat u rastvor 2-etoksipropan-1,3-diola (54-2; 392 mg; 3,26 mmol), DMAP (40 mg; 0,33 mmol) i TEA (1,8 mL; 13 mmol) u MeCN (10 mL).
Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim filtrirana. Filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 54-1 (220 mg; 0,513 mmol; prinos 16%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H2O]<+>= 446,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.78-7.72 (m, 4H), 7.38-7.32 (m, 4H), 4.05-3.96 (m, 4H), 3.68 (kvint, J = 5.1 Hz, 1H), 3.46 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.46 (s, 6H), 1.07 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-55)
[1004] DIPEA (0,17 mL; 0,97 mmol) je dodata u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (INT-40-5; 60 mg; 0,16 mmol) i 2-etoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (54-1; 220 mg; 0,51 mmol) u MeCN (2 mL). Dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 3 sata, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi ostatak je trituriran dietil etrom (3x). Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts). Dobijeni materijal je tretiran sa 1: 1 voda/zasić. vodenim Na2CO3i ekstrahovan sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i rastvarač je koncentrovan do suvoće da bi se dobio I-55 (17 mg; 0,035 mmol; prinos 22%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 456,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.00 (dd, J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 17.1, 7.4 Hz, 2H), 4.25 (dd, J = 17.2, 5.5 Hz, 1H), 3.91 (kvint, J = 5.9 Hz, 1H), 3.54-3.46 (m, 1H), 3.38-3.33 (m, 1H), 3.30-3.26 (m, 2H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.75 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 2.63-2.53 (m, 2H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.00-1.93 (m, 1H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.76-1.55 (m, 4H), 1.56-1.34 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Primer 55: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-71)
[1005]
[1006] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-15; 121,8 mg; 0,34 mmol) i propionaldehid (46-1; 0,04 mL; 0,6 mmol) su rastvoreni u 2,2,2-trifluoroetanolu (1 mL). Natrijum triacetoksiborohidrid (108 mg, 0,511 mmol) je dodat u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je zatim razblažena etil acetatom (45 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min gradijent; frakcije su sakupljene u epruvete koje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-71 (36 mg; 0,078 mmol; prinos 23%), u vidu čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.08 (ddd, J = 8.5, 2.3, 1.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.46-4.15 (m, 3H), 2.90 (ddd, J = 17.2, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.64-2.56 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.74-1.59 (m, 2H), 1.48-1.14 (m, 6H), 0.84 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Primer 56: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-72)
[1007]
[1008] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-15; 121,8 mg; 0,341 mmol) i propionaldehid (46-1; 0,04 mL; 0,6 mmol) su rastvoreni u 2,2,2-trifluoroetanolu (1 mL). Natrijum triacetoksiborohidrid (108 mg, 0,511 mmol) je dodat u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (45 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5 µm 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN; 3,5 min gradijent; frakcije su sakupljene u epruvete sa ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobio sirovi materijal. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) da bi se dobio I-72 (26 mg; 0,060 mmol; prinos 18%) u vidu čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 442,6 m/z.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.99 (dd, J = 8.5, 2.3, 1.1 Hz, 1H), 5.06 (ddd, J = 13.2, 5.1, 2.4 Hz, 1H), 4.44 (q, J = 5.0 Hz, 1H), 4.41-4.19 (m, 2H), 2.90 (ddd, J= 17.3, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.69-2.55 (m, 2H), 2.48-2.36 (m, 5H), 2.14 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.05-1.91 (m, 1H), 1.83-1.57 (m, 3H), 1.44-1.20 (m, 8H), 0.76 (t, J = 7.3 Hz, 6H).
Primer 57: So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-73)
[1009]
[1010] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-15; 109,1 mg; 0,305 mmol) i izonikotinaldehid (57-1; 0,03 mL; 0,3 mmol) su rastvoreni u 2,2,2-trifluoroetanolu (1 mL), a natrijum triacetoksiborohidrid (83,2 mg, 0,393 mmol) je dodat u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-70% EtOAc:EtOH ((v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N). Dobijeni materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-73 (21 mg; 0,042 mmol; prinos 14%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 449,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.50-8.43 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.39-7.29 (m, 2H), 7.23-7.16 (m, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (ddd, J = 13.1, 5.0, 1.5 Hz, 1H), 4.47-4.19 (m, 3H), 3.91-3.75 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.1, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.67-2.55 (m, 2H), 2.44-2.34 (m, 1H), 2.07 (s, 1H), 2.03-1.89 (m, 2H), 1.64 (s, 2H), 1.45-1.13 (m, 4H).
Primer 58: 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro [3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-74)
[1011]
[1012] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-15; 90,3 mg; 0,253 mmol) rastvoren u DMF (2 mL) dodata je DIPEA (0,11 mL; 0,63 mmol), nakon čega i rastvor 3,3-bis(bromometil)oksetana (47-1; 73,6 mg; 0,302 mmol) u DMF (1 mL). Dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 40 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) da bi se dobio I-74 (10 mg; 0,022 mmol; prinos 9%), u vidu bledo žute čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 440,5.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.08-6.97 (m, 1H), 5.07 (dd, J= 13.0, 5.0 Hz, 1H), 4.54 (t, J = 4.9 Hz, 4H), 4.45-4.32 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 25.4, 8.3 Hz, 2H), 3.37 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.25 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.91 (ddd, J = 18.5, 13.6, 5.3 Hz, 1H), 2.59 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.25 (s, 1H), 1.99 (s, 2H), 1.82-1.70 (m, 1H), 1.61 (d, J = 9.9 Hz, 2H), 1.39-1.26 (m, 2H), 1.19 (s, 1H), 1.07-0.99 (m, 1H).
Primer 59: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-75)
[1013]
[1014] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-15; 96,6 mg; 0,270 mmol) i 3-(bromometil)piridin hidrobromid (59-1; 79,8 mg; 0,315 mmol) rastvoren u MeCN (2 mL) dodata je DIPEA (0,15 mL; 0,87 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 60°C tokom 4 dana. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL;
Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min. gradijent; epruvete za prikupljanje sa ~ 3 kapi mravlje kiseline). Dobijeni materijal je dalje prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) da bi se dobio I-75 (17 mg; 0,039 mmol; prinos 14%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 449,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.41 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 7.7, 4.7 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.13-5.01 (m, 1H), 4.44-4.18 (m, 3H), 3.82 (q, J = 14.2 Hz, 2H), 2.90 (ddd, J = 17.1, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.70-2.55 (m, 2H), 2.46-2.29 (m, 1H), 2.10-2.03 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.74-1.57 (m, 2H), 1.46-1.17 (m, 4H).
Primer 60: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-76)
[1015]
[1016] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 118,3 mg; 0,331 mmol) i 1-etil-1H-pirazol-4-karbaldehid (60-1; 46.1 mg; 0.371 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1,5 mL) je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (98 mg; 0.46 mmol) u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, a zatim razblažena etil acetatom (80 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je zatim osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-76 (54 mg; 0,10 mmol; prinos 32%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 466,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.15 (s, 2H), 7.68-7.53 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.08 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.47-4.19 (m, 3H), 4.06 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.80-3.62 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.2, 13.7, 5.5 Hz, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.59 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.41-2.33 (m, 1H), 2.08 (s, 1H), 2.06-1.93 (m, 2H), 1.67 (s, 2H), 1.46-1.17 (m, 7H).
Primer 61: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-77)
[1017]
[1018] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 113,3 mg; 0,317 mmol) i 1-etil-1H-pirazol-4-karbaldehid (61-1; 47,2 mg; 0,342 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1,5 mL) je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (85,7 mg; 0.404 mmol) u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverzbilnih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-77 (57 mg; 0,104 mmol; prinos 33%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 480,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 7.66-7.54 (m, 2H), 7.32 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.50-4.17 (m, 4H), 3.79-3.60 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 17.2, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.78 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 2.63-2.57 (m, 1H), 2.42-2.33 (m, 1H), 2.10-2.06 (m, 1H), 2.05-1.94 (m, 2H), 1.67 (s, 2H), 1.43-1.15 (m, 10H).
Primer 62: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-78)
[1020] Paraformaldehid (6,23 mg; 0,207 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (44,5 mg; 0,210 mmol) dodani su uzastopno u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-79; 54 mg; 0,14 mmol) u DCM (1 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Zatim je dodata sirćetna kiselina (2 µL; 0,03 mmol), a zatim dodatna porcija natrijum triacetoksiborohidrida (44,5 mg; 0,210 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati i zatim je dodat zasićeni vodeni NaHCOs (2 mL). Smeša je ekstrahovana sa DCM (x3) i kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH u DCM koristeći 0,1% TEA kao modifikator, da bi se dobio I-78 (38 mg; 0,090 mmol; prinos 64%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.55-4.44 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.0, 9.4 Hz, 1H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.74-2.64 (m, 1H), 2.63-2.52 (m, 3H), 2.44-2.34 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 2.15-2.06 (m, 1H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.79-1.58 (m, 3H), 1.43-1.20 (m, 4H), 0.91 (t, J = 6.3 Hz, 3H).
Primer 63: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-80)
[1021]
[1022] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 75 mg; 0,18 mmol) u DCE (1 mL) je dodat paraformaldehid (14 mg; 0,47 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (111 mg; 0,524 mmol) i sirćetna kiselina (2 µL; 0,04 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona smeša je sipana u zas. vod. NaHCOs (2 mL) i ekstrahovana sa DCM (x4). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH u DCM koristeći 0,1% Et3N kao modifikator. Dobijeni materijal je dalje prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) da bi se dobio I-80 (32 mg; 0,079 mmol; prinos 43%), u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 386,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.11-6.99 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.55-4.44 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.1, 8.8 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 8.2 Hz, 1H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 2H), 2.43-2.35 (m, 1H), 2.27 (s, 6H), 2.14-2.06 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.84-1.74 (m, 1H), 1.74-1.60 (m, 2H), 1.43-1.20 (m, 4H).
Primer 64: 3-(5-(((1S,2S)-2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-81)
[1023]
[1024] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 102,7 mg; 0.287 mmol) i 3-(bromometil)oksetan (64-1; 55 mg; 0,36 mmol) u DMF (1 mL) je dodat DIPEA (0,13 mL; 0.72 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 46 sati. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (80 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (15 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-81 (32 mg; 0,066 mmol; prinos 23%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 7.4, 5.9 Hz, 2H), 4.38 (dd, J = 17.2, 7.4 Hz, 1H), 4.31-4.14 (m, 4H), 3.04-2.82 (m, 4H), 2.77-2.66 (m, 1H), 2.59 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 2.38 (dd, J = 13.2, 4.4 Hz, 1H), 2.10-2.03 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 2H), 1.71-1.62 (s, 2H), 1.40-1.17 (m, 4H).
Primer 65: So 3-(5-(((1S,2S)-2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH ( I-82)
[1025]
[1026] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 103 mg; 0,287 mmol) i 2- jodoetanol (65-1; 26 µL; 0,33 mmol) u DMF (1 mL) je dodat DIPEA (125 µL; 0,718 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 44 sata. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (80 mL) i isprana slanim rastvorom (2 x 15 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min gradijent) i zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent; Epruvete za sakupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-82 (18 mg; 0,038 mmol; prinos 13%) u vidu bele čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 402,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 6.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.2, 5.7 Hz, 2H), 3.47 (dt, J = 10.5, 5.2 Hz, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.1, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.76-2.67 (m, 2H), 2.65-2.57 (m, 1H), 2.38 (dd, J = 13.2, 4.4 Hz, 1H), 2.07 (s, 1H), 2.03-1.92 (m, 2H), 1.66 (s, 2H), 1.26 (ddt, J = 53.3, 21.2, 11.1 Hz, 4H).
Primer 66: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so ( I-83)
[1027]
[1028] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 101 mg; 0,282 mmol) u DMF (2 mL) i DIPEA (0,12 mL; 0,69 mmol) je dodat rastvor 1,4-dibromobutana (66-1; 67,2 mg, 0,311 mmol) u DMF (1 mL) i dobijena smeša je mešana na 80°C tokom 69 sata. Reakciona smeša je zatim razblažena etil acetatom (80 mL) i isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-80% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM (sa 1% Et3N) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-83 (23 mg; 0,049 mmol; prinos 18%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 412,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.60 (td, J = 6.9, 3.4 Hz, 1H), 4.45-4.18 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.5, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.76-2.54 (m, 6H), 2.42-2.33 (m, 1H), 1.98 (td, J = 7.2, 6.5, 2.7 Hz, 2H), 1.93-1.84 (m, 1H), 1.74-1.57 (m, 6H), 1.56-1.44 (m, 2H), 1.43-1.26 (m, 2H).
Primer 67: 3-(5-(((1S,2S)-2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-84)
[1029]
[1030] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 75 mg; 0,183 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,16 mL; 0,91 mmol), a zatim 1-bromo-2-(2-bromoetoksi)etan (29-1; 127 mg; 0,548 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80° C tokom 16 časova. Sirova reakciona smeša je filtrirana, razblažena sa nekoliko kapi vode i prečišćena direktnim ubrizgavanjem na preparativnu HPLC metodu reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-84 (23 mg; 0,046 mmol; prinos 25%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,6.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.4, 4.9 Hz, 1H), 4.55-4.46 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 17.0, 10.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 11.2 Hz, 1H), 3.46-3.34 (m, 4H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.70-2.54 (m, 4H), 2.43-2.35 (m, 3H), 2.16-2.07 (m, 1H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.82-1.74 (m, 1H), 1.72-1.58 (m, 2H), 1.46-1.20 (m, 4H).
Primer 68: So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-85)
[1031]
[1032] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 63,5 mg; 0,18 mmol) i pikolinaldehid (68-1; 20 mg; 0,18 mmol) u 2,2,2trifluoroetanolu (1 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (53 mg; 0,25 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcioni rastvor je razblažen etil acetatom (80 mL) i ispran zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min gradijent) i zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-85 (35 mg; 0,070 mmol; prinos 39%) u vidu čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 449,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.48 (ddd, J = 4.9, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.72 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.26-7.17 (m, 2H), 7.08 (dd, J = 8.6, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.45-4.19 (m, 3H), 4.01-3.79 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 18.1, 13.6, 5.5 Hz, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.59 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 2.40 (td, J = 13.1, 4.4 Hz, 1H), 2.11-2.07 (m, 1H), 2.04-1.96 (m, 2H), 1.75-1.57 (m, 2H), 1.42-1.20 (m, 4H).
Primer 69: 3-(5-(((1S,2S)-2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I- 86)
[1033]
[1034] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 80 mg; 0,22 mmol) u MeCN (3 mL) je dodat 4-bromo-2-metilbutan-2-ol (69-1; 37,4 mg; 0,22 mmol) i DIPEA (0,12 mL, 0,67 mmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C tokom 16 sati, na 100°C 30 minuta na µW, na 120°C 30 minuta na µW i na 140°C tokom 2 sata i 30 minuta na µW. Reakciona smeša je zatim dodata u zasićeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL) i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije reverzne faze na koloni C-18, eluiranjem sa 0-100% MeCN u vodi (sa 0,1% mravlje kiseline kao modifikatorom). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-86 (16 mg; 0,031 mmol; prinos 14%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 444,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 10.95 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.08 (d, J= 8.5Hz, 1H), 5.07 (dd, J= 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.44-4.20 (m, 3H), 2.96-2.69 (m, 4H), 2.66-2.53 (m, 1H), 2.39 (td, J = 13.2, 4.4 Hz, 1H), 2.10 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.06-1.94 (m, 2H), 1.72-1.64 (m, 2H), 1.52 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.42-1.19 (m, 4H), 1.07 (s, 6H).
Primer 70: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-87)
[1035]
[1036] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 100 mg; 0,280 mmol) u DMF (1 mL) dodat je 3-metiloksetan-3-karbaldehid (50-1; 34 mg; 0,34 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta.
Zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (71 mg; 0,34 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, razblažena sa DCM i dodat je Celite<®>. Dobijena suspenzija je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu, a zatim sa 0 do 100% EtOAc/EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEts) u DCM i dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona:
Xbridge C18 OBD 5µm 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-87 (40 mg; 0,080 mmol; prinos 29%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 442,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.24 (s, 2H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 17.1, 8.6 Hz, 1H), 4.30-4.17 (m, 4H), 4.11 (dd, J = 5.4, 2.7 Hz, 2H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.68-2.53 (m, 2H), 2.35 (dd, J= 15.9, 11.3 Hz, 1H), 2.11-2.04 (m, 1H), 2.02-1.92 (m, 2H), 1.71-1.62 (m, 2H), 1.41-1.19 (m, 4H), 1.15 (s, 3H).
Primer 71: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -88)
[1037]
[1038] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 29,7 mg; 0,083 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,09 mL; 0,5 mmol), a zatim 3-metoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (44-3; 38 mg; 0,083 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 2 sata, zatim na 130°C tokom 1 sat pod µW. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je rastvoren u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-88 (15 mg; 0,029 mmol; prinos 35%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.52-4.42 (m, 1H), 4.37 (dd, J = 17.2, 3.7 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 3.8 Hz, 1H), 3.33-3.31 (m, 2H, oslonjen na H2O signal), 2.97-2.93 (m, 3H), 2.93-2.85 (m, 1H), 2.63-2.55 (m, 3H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.15-2.08 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 1H), 1.79-1.58 (m, 3H), 1.53-1.42 (m, 2H), 1.40-1.04 (m, 6H), 0.92 (s, 3H)
Primer 72: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-89)
[1039]
[1040] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 50 mg; 0,14 mmol) u MeCN (1,5 mL) je dodat DIPEA (0,15 mL; 0,84 mmol), a zatim 2-metoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (52-3; 174 mg; 0,42 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće, dobijeni ostatak rastvoren je u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM.
Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-89 (32 mg; 0,067 mmol; prinos 48%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.33 (m, 1H), 4.30-4.19 (m, 2H), 3.90-3.76 (m, 1H), 3.50-3.40 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.02-2.79 (m, 3H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.43-2.27 (m, 2H), 1.98 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 1.83-1.73 (m, 1H), 1.69-1.58 (m, 2H), 1.35 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 1.31-1.21 (m, 1H), 1.13-1.03 (m, 1H).
Primer 73: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-90)
[1041]
Korak 1.2-(bromometil)-6-metilpiridin (73-2)
[1042] U 2,6-lutidin (73-1; 23 mL; 0,20 mol) u ugljen-tetrahloridu (250 mL) dodat je NBS (35,6 g; 0,20 mol) i AIBN (0,5 g) da bi se dobila žuta suspenzija. Dobijena suspenzija je mešana na refluksu 8 sati da bi se dobio rastvor, a zatim je ohlađena do sobne temperature. Dobijena suspenzija je filtrirana i dobijena čvrsta supstanca je isprana ugljenik tetrahloridom. Filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće da bi se dobio 73-2 (33,7 g; 0,18 mol; prinos 91%) kao ulje ljubičaste boje koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 185,6.
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-90)
[1043] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 88,7 mg; 0,25 mmol) i 2-(bromometil)-6-metilpiridin (73-2; 50 mg; 0,269 mmol) u DMF (1 mL) je dodat DIPEA (0,12 mL, 0,69 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 3 dana. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts). Dobijeni materijal je zatim prečišćen putem HPLC metode reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-90 (4,0 mg; 7,47 µmol; prinos 3%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 463,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.65-7.55 (m, 2H), 7.23-7.16 (m, 2H), 7.11-7.04 (m, 2H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.47-4.18 (m, 3H), 3.90-3.74 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 17.8, 13.5, 5.4 Hz, 1H), 2.72-2.64 (m, 1H), 2.59 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 2.45-2.34 (m, 4H), 2.11-2.04 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.72-1.61 (m, 2H), 1.45-1.15 (m, 4H).
Primer 74: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-91)
[1044]
[1045] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 106 mg; 0,30 mmol) i 2-formil-5-metoksipiridin (74-1; 43 mg; 0,32 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1,5 mL) je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (88 mg; 0,42 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta i zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min gradijent) i zatim dalje prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEts) da bi se dobio I-91 (54,5 mg; 0.112 mmol; prinos 38%) kao čvrsta supstanca bele boje. MS [M+H]<+>= 479,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.19 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.07 (dt, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.48-4.16 (m, 3H), 3.92-3.83 (m, 1H), 3.83-3.75 (m, 4H), 2.91 (ddd, J = 17.2, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.79-2.65 (m, 1H), 2.59 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.45-2.28 (m, 1H), 2.11-1.95 (m, 3H), 1.74-1.59 (m, 2H), 1.45-1.21 (m, 4H).
Primer 75: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-92)
[1046]
[1047] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 75 mg; 0,210 mmol) i 6-metoksi-3-piridinkarboksaldehid (75-1; 30,5 mg; 0,222 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1 mL) je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (58 mg; 0,27 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5 µm 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-92 (34 mg; 0,063 mmol; prinos 30%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 479,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.10-8.04 (m, 1H), 7.68-7.58 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 8.4, 0.7 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.1, 5.1 Hz, 1H), 4.49-4.17 (m, 3H), 3.83-3.69 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.91 (ddd, J = 18.2, 13.7, 5.5 Hz, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.46-2.28 (m, 2H), 2.09-2.03 (m, 1H), 1.98 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 1.65 (d, J = 9.9 Hz, 2H), 1.29 (dt, J = 37.1, 9.2 Hz, 4H).
Primer 76: So 3-(5-(((1S,2S)-2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O )OH (I-93)
[1048]
[1049] 2,2-dimetiloksiran (76-1; 0,015 mL; 0,17 mmol) i DIPEA (0,04 mL; 0,2 mmol) su dodati u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 50 mg; 0,14 mmol) u EtOH (1,5 mL) i dobijeni rastvor je mešan na 140°C pod µW zračenjem tokom 1 sat. Dodato je još 2,2-dimetiloksirana (50 uL) i mešanje je nastavljeno pod µW na 140°C tokom 21 sat. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su nekoliko kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-93 (12 mg; 0,023 mmol; prinos 17%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 430,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 8.7 Hz, 1H), 4.30-4.19 (m, 3H), 2.96-2.84 (m, 1H), 2.66-2.54 (m, 1H), 2.47-2.35 (m, 3H), 2.12-2.03 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.73-1.60 (m, 2H), 1.42-1.12 (m, 4H), 1.03 (d, J = 5.4 Hz, 6H).
Primer 77: (1S,3r)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril i (1R,3s)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5 -il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril (I-94 i I-95)
[1050]
Korak 1.3-(metoksimetilen)-1-metilciklobutan-1-karbonitril (77-3)
[1051] U mešanu suspenziju (metoksimetil)trifenilfosfonijum hlorida (77-2; 1828 mg; 5,33 mmol) u THF (30 mL) na 0°C u atmosferi azota dodat je n-BuLi (2,3 mL; 6,1 mmol; 2,7 M rastvor u heptanu) i dobijeni tamnocrveni rastvor je mešan na 0°C tokom 40 minuta. Zatim je dodat rastvor 1-metil-3-oksociklobutan-1-karbonitrila (77-1; 582 mg; 5,33 mmol) u THF (4 mL) i reakciona smeša je mešana preko noći, dozvoljavajući da se reakcija polako zagreje do sobne temperature. Smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gelu hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u dietil etru da bi se dobio 77-3 (459 mg; 3,35 mmol; prinos 63%) kao bledo narandžasto braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.10-5.94 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.19-2.97 (m, 2H), 2.81-2.57 (m, 2H), 1.47 (s, 3H).
Korak 2.3-formil-1-metilciklobutan-1-karbonitril (77-4)
[1052] U 3-(metoksimetilen)-1-metilciklobutan-1-karbonitril (77-3; 118 mg; 0,860 mmol) u DCM (2 mL) na sobnoj temperaturi dodata je trifluorosirćetna kiselina (0,70 mL; 9,1 mmol) i voda (100 µL; 5,6 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 minuta, a zatim zasićenim natrijum bikarbonatom. Vodeni rastvor je ekstrahovan pomoću DCM, faze su razdvojene i organska faza je propuštena kroz kolonu za separaciju faza. Organski rastvarač je uparen do suvoće da se dobije 77-4 u obliku ulja, koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.66 (dd, J = 10.5, 1.3 Hz, 1H), 3.45-3.30 (m, 1H), 2.75-2.56 (m, 2H), 2.39-2.11 (m, 2H), 1.53 (s, 3H).
Korak 3.3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril (I-94)
[1053] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 300 mg; 0,336 mmol) u TFE ( 1 mL) je dodat rastvor 3-formil-1-metilciklobutan-1-karbonitrila (77-4; 108 mg; 0,873 mmol) u TFE (1 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta, a zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (213 mg; 1,00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N kao modifikatorom) u DCM da bi se dobila smeša I-94 i I-95 (40 mg; 0,082 mmol) kao mešavina dijastereoizomera u odnosu 66:34. MS [M+H]<+>= 465,2.
[1054] Dijastereomerna smeša I-94 i I-95 (30 mg) je odvojena korišćenjem hiralne SFC (Kolona: Chiralpak IH 21x250 mm; Protok: 80 g u minuti; Korastvarač: 30% IPA sa 10 mM NH3) da bi se izolovala dva dijastereomera. Vršna vrednost 1: dijastereomer 1 (I-94; 13 mg; 0,026 mmol; prinos 8%). Hiralna SFC Rt = 2,39 min; MS [M+H]<+>= 465,5.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.71 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.11-6.89 (m, 2H), 5.11 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.40-4.23 (m, 2H), 4.21-4.05 (m, 1H), 2.85-2.77 (m, 2H), 2.74-2.47 (m, 4H), 2.32 (qd, J= 12.8, 6.0 Hz, 1H), 2.25-2.17 (m, 2H), 2.17-2.04 (m, 4H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.49 (s, 2H), 1.40 (s, 1H), 1.38-1.22 (m, 5H), 1.20 (s, 1H). Vršna vrednost 2: dijastereomer 2 (I-95; 14 mg; 0,028 mmol; prinos 8%). Hiralna SFC Rt = 2,70 min; MS [M+H]<+>= 465,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.70 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.17-6.92 (m, 2H), 5.11 (dd, J= 13.5, 5.2 Hz, 1H), 4.34-4.24 (m, 2H), 4.24-4.16 (m, 1H), 2.88-2.65 (m, 5H), 2.62-2.52 (m, 1H), 2.41-2.03 (m, 7H), 1.80-1.71 (m, 2H), 1.49 (s, 2H), 1.40 (s, 1H), 1.37-1.24 (m, 5H), 1.21 (s, 1H). Relativna stereohemija supstituenata ciklobutana nije određena i bila je proizvoljno dodeljena.
Primer 78: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-96)
[1055]
Korak 1.1,5-dihloropentan-3-ol (78-2)
[1056] U rastvor 1,5-dihloropentan-3-ona (78-1; 260 mg; 1,68 mmol) u MeOH (2 mL) i ohlađen na -10°C dodat je natrijum borohidrid (64 mg; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana u ledenom kupatilu 4 sata. Reakciona smeša je zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa DCM (x 3). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 78-2 (267 mg; 1,55 mmol; prinos 92%) u obliku bledo žutog ulja. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.14 (kvint, J = 6.2 Hz, 1H), 3.77-3.63 (m, 4H), 1.97-1.87 (m, 4H).
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-96)
[1057] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-12; 52 mg; 0,11 mmol) rastvoren u DMF (1 mL) dodat je DIPEA (0,10 mL; 0,57 mmol), nakon čega i rastvor 1,5-dihloropentan-3-ol (78-2; 19 mg; 0,11 mmol) u DMF (1 mL) i dobijena smeša je mešana na 85°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodat je dodatni 1,5-dihloropentan-3-ol (78-2; 19 mg; 0,11 mmol) i mešanje je nastavljeno na 85°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, azeotropirana sa toluenom (x2) i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona metode: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; frakcije su sakupljene u epruvete koje sadrže nekoliko kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-96 (9 mg; 0,018 mmol) u obliku čvrste supstance bledo braon boje. MS [M+H]<+>= 428,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.07-6.98 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 13.0, 4.9 Hz, 1H), 4.73-4.67 (m, 1H), 4.53-4.47 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 9.8 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 8.3 Hz, 1H), 3.46-3.38 (m, 1H), 2.96-2.81 (m, 2H), 2.81-2.69 (m, 2H), 2.64-2.56 (m, 1H), 2.40-2.34 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 2H), 2.04-1.84 (m, 3H), 1.75-1.56 (m, 5H), 1.53-1.42 (m, 1H), 1.41-1.29 (m, 2H).
Primer 79: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-97)
[1058]
[1059] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 80 mg; 0,22 mmol) u DMF (3 mL) je dodat DIPEA (0,098 mL; 0,56 mmol) i 1,5-dibromopentan (79-1; 0,03 mL; 0,2 mmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su isprane vodom i slanim rastvorom, propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-97 (25 mg; 0,056 mmol; prinos 25%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 426,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.47 (br s, 1H), 4.42-4.18 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 17.8, 13.2, 5.3 Hz, 1H), 2.69-2.44 (m, 6H), 2.39 (td, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.11 (s, 1H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.81-1.56 (m, 3H), 1.47-1.12 (m, 10H).
Primer 80: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-98)
[1060]
[1061] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,15 mg; 0,17 mmol) u DMF (1 mL) dodat je tetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (49-1; 0,021 mL; 0,21 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (55 mg; 0,26 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Dodato je još tetrahidro-2H-piran-4-karbaldehida (49-1; 0,01 mL; 0,1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodatna količina natrijum triacetoksiborohidrida (36 mg; 0,17 mmol) je dodata uz mešanje na sobnoj temperaturi 1,5 sati. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom i koncentrovana na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu da bi se dobio I-98 (72,8 mg; 0,160 mmol; prinos 93%) u vidu čvrste supstance bele boje. LCMS [M+H]<+>= 456,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 7.06 (dt, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 8.2 Hz, 1H), 4.32-4.15 (m, 2H), 3.86-3.68 (m, 2H), 3.29-3.18 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.5, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.69-2.55 (m, 2H), 2.48-2.31 (m, 3H), 2.12-2.02 (m, 1H), 2.02-1.92 (m, 2H), 1.69-1.48 (m, 5H), 1.38-0.99 (m, 6H).
Primer 81: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion i 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-99 i I-100)
[1062]
Korak 1. (3-metoksiciklobutil)metanol (81-2)
[1063] U rastvor 3-metoksiciklobutan-1-karboksilne kiseline (81-1; 444 mg; 3,41 mmol) u THF (10 mL) na 0°C dodat je BH3u THF (10,2 mL; 10,2 mmol; 1M) i dobijena smeša je puštena da se polako zagreje do sobne temperature i zatim je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. MeOH je polako dodat, a zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor bikarbonata. Vodena smeša je ekstrahovana sa DCM i organska faza je propuštena kroz kolektor faza i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 81-2. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2. (3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (81-3)
[1064] U rastvor (3-metoksiciklobutil)metanola (81-2; 411 mg; 3,54 mmol) u piridinu (8 mL) dodat je TsCl (1012 mg; 5,31 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata, a zatim je razblažena sa DCM i isprana zasićenim vodenim rastvorom bikarbonata. Organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanima da bi se dobio 81-3 (300 mg; 1,11 mmol; prinos 31%), kao mešavina dijastereomera u odnosu 2:1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6, glavni dijastereoizomer) δ 7.81-7.76 (m, 2H), 7.51-7.47 (m, 2H), 3.97 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.71-3.57 (m, 1H), 3.06 (s, 3H), 2.50 (kvint, J = 1.8 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.22-2.15 (m, 2H), 1.48 (m, 2H).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6, sporedni dijastereoizomer) δ 7.81-7.76 (m, 2H), 7.51-7.47 (m, 2H), 4.06-4.00 (m, 2H), 3.87-3.79 (m, 1H), 3.06 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.13-2.04 (m, 2H), 1.93-1.89 (m, 3H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion i 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-99 i I-100)
[1065] U bočicu koja sadrži 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 322 mg; 0,369 mmol) dodat je rastvor (3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonata (81-3; 300 mg; 1,11 mmol) u DMF (3 mL), a zatim je dodat DIPEA (0,32 mL; 1,85 mmol). Reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 16 sati, zatim na 80°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena acetonom, apsorbovana na Celite<®>i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanima i zatim 0-100% EtOAc/EtOH (v/v = 3:1) u DCM. Dobijeni materijal je dalje prečišćen pomoću HPLC metode reverznih faza (10-30% MeCN; 3,5 min gradijent; X-bridge C18 OBD 30 x 50 mm 5 um; kolona MeCN/H2O v/ 0,1% mravlja kiselina 75 ml/min 1,5 mL ubrizgavanje) da bi se dobila formatna so mešavine dijastereomera I-99 i I-100 (87 mg; 0,17 mmol; prinos 3%) u obliku ulja. MS [M+H]<+>= 456,5
[1066] Smeša I-99 i I-100 (81 mg) je odvojena korišćenjem hiralne SFC (Kolona: Chiralpak AD 21x250 mm; Protok: 80 g u minuti; Korastvarač: 25% EtOH sa 10 mM NH3) da bi se dobili I-99 i I-100 kao Vršna vrednost 1 i Vršna vrednost 2. Vršna vrednost 1 (I-99):
Materijal iz SFC Vršna vrednost 1 je ponovo prečišćen pomoću HPLC metode reverznih faza (Metoda: eluiranje sa 5-20% MeCN tokom 3,5 min; Uslovi: MeCN/H2O 0,1% mravlja kiselina pri 75 mL/min; 1,5 mL ubrizgavanje; Kolona: XBridge C18 OBD 30 x 50 mm) i zatim je prečišćen pomoću HPLC metode reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL;
Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su nekoliko kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so Vršne vrednosti 1 (I-99; 9 mg; 0,028 mmol). Hiralna SFC Rt = 1,67 min. MS [M+H]<+>= 456,5.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.70 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.06-6.95 (m, 2H), 5.12 (dd, J= 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.43-4.25 (m, 2H), 4.21-4.09 (m, 1H), 3.87 (kvint, J = 6.6 Hz, 1H), 3.14 (s, 3H), 2.88-2.79 (m, 2H), 2.76-2.68 (m, 2H), 2.68-2.59 (m, 1H), 2.38-2.24 (m, 2H), 2.23-2.03 (m, 5H), 2.01-1.87 (m, 5H), 1.77-1.70 (m, 2H), 1.37-1.33 (m, 2H). Relativna stereohemija supstituenata ciklobutana nije određena i dodeljena je proizvoljno.
[1067] Vršna vrednost 2 (I-100): Materijal iz SFC Vršna vrednost 2 je prečišćen pomoću HPLC metode reverznih faza (Metoda: eluiranje sa 5-20% MeCN tokom 3,5 min; Uslovi: MeCN/H2O 0,1% mravlja kiselina pri 75 mL/min; 1,5 mL ubrizgavanje; Kolona: XBridge C18 OBD 30 x 50 mm) da bi se dobila formatna so Vršne vrednosti 2 (I-100; 14 mg; 0,027 mmol). Hiralna SFC Rt = 2,52 min. MS [M+H]<+>= 456,6.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.70 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.08-6.98 (m, 2H), 5.23-5.01 (m, 1H), 4.36-4.24 (m, 2H), 4.15 (s, 1H), 3.76-3.62 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.86-2.69 (m, 3H), 2.64-2.60 (m, 1H), 2.36-2.26 (m, 2H), 2.22-2.10 (m, 3H), 2.09-2.02 (m, 1H), 2.00-1.85 (m, 2H), 1.79-1.68 (m, 2H), 1.54-1.43 (m, 1H), 1.38-1.31 (m, 2H), 1.31-1.22 (m, 3H). Relativna stereohemija supstituenata ciklobutana nije određena i dodeljena je proizvoljno.
Primer 83: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (1-101)
[1068]
[1069] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,16 mg; 0,18 mmol) u DMF (1 mL) dodat je (1r,4r)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (48-3; 37 mg; 0,26 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (58 mg; 0.28 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodat je dodatni (1r,4r)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (48-3; 7,3 mg; 0,051) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (25 mg; 0,12 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je ugašena sa zas. vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana je sa 20% izopropanola u DCM (x3). Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N kao modifikatorom) u heptanu, a zatim dalje prečišćen HPLC metodo reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio 1-101 (57 mg; 0,10 mmol; prinos 55%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 484,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.06 (dt, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.3, 7.9 Hz, 1H), 4.31-4.14 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.05-2.84 (m, 2H), 2.70-2.55 (m, 2H), 2.46-2.29 (m, 3H), 2.13-1.88 (m, 5H), 1.82-1.59 (m, 4H), 1.40-1.10 (m, 5H), 1.07-0.95 (m, 2H), 0.91-0.75 (m, 2H).
Primer 84: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-102)
[1070]
[1071] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,16 mg; 0,45 mmol) u DMF (0,92 mL) dodat je 4-metiltetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (84-1; 28 mg; 0,22 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (58 mg; 0,28 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodat je 4-metiltetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (4,7 mg;
0,037 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodatna količina natrijum triacetoksiborohidrida (19 mg; 0,092 mmol) je dodata uz mešanje na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa MeCN i koncentrovana na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N kao modifikatorom) u heptanu da bi se dobio I-102 (99 mg; 0,21 mmol; prinos 47%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (dt, J = 8.7, 1.7 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 9.0 Hz, 1H), 4.31-4.16 (m, 2H), 3.53 (dt, J = 11.9, 4.7 Hz, 2H), 3.44 (ddd, J = 11.8, 9.0, 3.2 Hz, 2H), 2.90 (ddd, J = 17.2, 13.6, 5.5 Hz, 1H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.48-2.29 (m, 3H), 2.15-2.02 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 2H), 1.72-1.60 (m, 2H), 1.48-1.08 (m, 8H), 0.87 (s, 3H).
Primer 85: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-103)
[1072]
[1073] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,16 mg; 0,184 mmol) u DMF (2 mL) dodat je pirimidin-5-karbaldehid (85-1, 0,02 mL, 0,26 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (58 mg; 0,28 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Dodato je još pirimidin-5-karbaldehida (85-1; 12 mg; 0,11 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (25 mg; 0.12 mmol) uz mešanje koje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodata je dodatna količina pirimidin-5-karbaldehida (85-1; 12 mg; 0,11 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (25 mg; 0,12 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana je sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N kao modifikatorom) u heptanu da bi se dobio I-103 (67 mg; 0,14 mmol; prinos 79%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 450,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.18 (m, 3H), 3.92-3.76 (m, 1H), 3.14-3.03 (m, 1H), 2.91 (ddd, J = 17.9, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.44-2.31 (m, 1H), 2.29 (s, 1H), 2.13-1.93 (m, 3H), 1.73-1.59 (m, 2H), 1.42-1.13 (m, 4H).
Primer 86: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-104)
[1074]
[1075] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,16 mg; 0,18 mmol) u DMF (2 mL) dodat je tetrahidropiranil-4-acetaldehid (86-1; 0,034 mL; 0,26 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (58 mg; 0,275 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodato je još tetrahidropiranil-4-acetaldehida (86-1; 8 µL, 0,06 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (25 mg; 0,12 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana je sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N kao modifikatorom) u heptanu da bi se dobio I-104 (87 mg; 0,18 mmol; prinos 99%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 7.1 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.0, 6.1 Hz, 2H), 3.77 (dd, J = 11.3, 4.2 Hz, 2H), 3.23-3.12 (m, 2H), 2.98-2.82 (m, 1H), 2.74-2.55 (m, 4H), 2.38 (qd, J = 13.2, 3.9 Hz, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 2.02-1.92 (m, 2H), 1.72-1.59 (m, 2H), 1.54-1.44 (m, 3H), 1.40-0.98 (m, 8H).
Primer 87: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion HC(O)OH (I-105)
[1076]
Korak 1. Dietil 2-(3-(2-etoksi-2-oksoetil)oksetan-3-il)malonat (87-3)
[1077] Suspenzija od 60% natrijum hidrida u mineralnom ulju (4,21 g, 105 mmol) u THF (70 mL), u atmosferi azota, ohlađena je na 0°C i dietil malonat (87-2; 18,5 mL; 122 mmol) je dodato kap po kap. Dobijena smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi 20 minuta. Zatim je dodat TBAI (5,17 g; 14,0 mmol), a zatim kap po kap rastvor etil 2-(oksetan-3-iliden)acetata (87-1; 4,96 g; 34,9 mmol) u THF (8,5 mL).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, ohlađena na 0°C, ugašena sirćetnom kiselinom (7,5 mL), ostavljena da se zagreje do sobne temperature, i mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Rastvor je razblažen dietil etrom (250 mL) i organska faza je isprana slanim rastvorom (50 mL), osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-40% EtOAc u heptanu da bi se dobio 87-3 (7,98 mg; 25,1 mmol; prinos 72%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 303,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.20 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 4.11 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 1H), 2.94 (s, 2H), 1.30-1.24 (m, 9H).
Korak 2. Dietil 2,2'-(oksetan-3,3-diil)diacetat (87-4)
[1078] U rastvor dietil 2-(3-(2-etoksi-2-oksoetil)oksetan-3-il)malonata (87-3; 7,98 g; 26,4 mmol) u DMSO (100 mL) i vodi (1,5 mL; 83 mmol) dodat je natrijum hlorid (3,09 g; 52,8 mmol). Dobijena smeša je mešana na 160°C tokom 2 sata, ohlađena do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena dietil etrom (300 mL) i isprana slanim rastvorom (2 x 80 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je razblažen sa DMSO (50 mL) i dodat je voda (1,5 mL; 83 mmol) i natrijum hlorid (3,09 g; 52.8 mmol). Rastvor je zatim mešan na 160°C tokom 2 dana. Rastvor je razblažena dietil etrom (300 mL) i isprana slanim rastvorom (80 mL). Organski sloj je zatim osušen iznad magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobio 87-4 (4,28 mg; 18,6 mmol; prinos 70%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 231,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.54-4.48 (m, 2H), 4.28-4.16 (m, 2H), 4.16-4.06 (m, 4H), 2.87 (s, 4H), 1.33-1.21 (m, 6H).
Korak 3.2,2'-(oksetan-3,3-diil)bis(etan-1-ol) (87-5)
[1079] U LiAlH4(2,15 g; 56,6 mmol) rastvorenom u THF (75 mL) pod atmosferom azota i ohlađenom na 0°C, dodat je rastvor dietil 2,2'-(oksetan-3,3-diil)diacetata (87-4; 4,28 g; 18,6 mmol) u THF (10 mL). Dobijena smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i dodata je voda (4.2 mL) i 1M NaOH (vod.) (8,4 mL). Rastvor je filtriran kroz Celite<®>, a Celite<®>podloga je isprana sa EtOAc Rastvor je koncentrovan, razblažen etil acetatom (150 mL) i ispran slanim rastvorom (40 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 87-5 (434 mg; 2,97 mmol; prinos 16%) u obliku čvrste supstance žute boje, koja je preneta u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 4. Oksetan-3,3-diilbis(etan-2,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonat) (87-6)
[1080] U 2,2'-(oksetan-3,3-diil)bis(etan-1-ol) (87-5; 434 mg; 2,97 mmol) i tozil hlorid (1,43 g; 7,52 mmol) rastvoren u MeCN (15 mL) dodat je TEA (1,5 mL; 12 mmol) i DMAP (36 mg; 0,30 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je razblažen sa EtOAc (250 mL) i ispran vodom (50 mL) i slanim rastvorom (40 mL). Organska faza je zatim osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 87-6 (170 mg; 0,26 mmol; prinos 9%). MS [M+H]<+>= 455,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.83-7.71 (m, 4H), 7.46-7.35 (m, 4H), 4.39-4.33 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 4.05 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 2.46 (s, 6H), 2.04-1.96 (m, 4H).
Korak 5. So 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion HC(O)OH (I-105)
[1081] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 101,8 mg; 0,29 mmol) i oksetan-3,3-diilbis(etan-2,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonat) (87-6; 169,7 mg; 0,37 mmol) rastvoreni su u MeCN (2 mL) i DIPEA (0,15 mL; 0,86 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C u µW reaktoru 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u DCM (sa 0,1% Et3N), a zatim dalje prečišćen preparativnom HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-105 (18 mg; 0,035 mmol; prinos 12%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 468,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.02 (dt, J = 8.4, 2.9 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.50-4.19 (m, 3H), 4.19-4.04 (m, 4H), 2.90 (ddd, J = 18.0, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.63-2.53 (m, 3H), 2.46-2.34 (m, 3H), 2.16-2.08 (m, 1H), 2.05-1.91 (m, 1H), 1.78-1.45 (m, 7H), 1.42-1.12 (m, 5H).
Primer 88: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-106)
[1082]
Korak 1.4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (88-2)
[1083] U (4-metoksioksan-4-il)metanol (88-1; 0,200 g; 1,37 mmol) rastvoren u DCM (6,8 mL) i ohlađen na 0°C dodat je DMP (812 mg; 1,92 mmol), a zatim 2 kapi vode. Dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 1 sat, a zatim na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je ugašena sa 1: 1:2 zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata: zasićenim vodenim rastvorom natrijum tiosulfata: dietil etra i mešana dok mutna smeša ne postane bistra.
Organska faza je razdvojena, i vodena faza je ekstrahovana pomoću dietil etra (x2).
Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane da bi se dobio 88-2 u vidu bezbojnog ulja, koje je preneto u sledeću reakciju bez prečišćavanja.
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-dion (I-106)
[1084] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,10 mg; 0,12 mmol) u DMF (1,5 mL) dodat je 4-metiltetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (88-2; 31 mg; 0,16 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (36 mg; 0.17 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakciona smeša je koncentrovana, dodat je magnezijum sulfat (14 mg; 0,12 mmol) i mešanje je nastavljeno na 45°C tokom 16 sati. Dodat je 4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (88-2; 22 mg; 0,12 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (29 mg; 0,14 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1 sati. Dodato je još 4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-karbaldehida (88-2; 22 mL; 0,12 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodat je ponovo natrijum triacetoksiborohidrid (29 mg; 0,14 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sati, a zatim ugašena zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u heptanu da bi se dobio I-106 (57 mg; 0,11 mmol; prinos 97%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 486,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.6, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 11.5 Hz, 1H), 4.32-4.15 (m, 2H), 3.55-3.42 (m, 4H), 3.04 (s, 3H), 2.91 (ddd, J = 17.1, 13.5, 5.3 Hz, 1H), 2.69-2.53 (m, 4H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 2.01-1.93 (m, 2H), 1.75-1.11 (m, 10H), .
Primer 89: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion (I-107)
[1085]
[1086] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 100 mg; 0,280 mmol) u DCE (2 mL) dodat je 2,2-metiltetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (89-1; 42 mg; 0,29 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (178 mg; 0,839 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 2 dana. Reakciona smeša je zatim dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa 20% i-PrOH/DCM (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% Et3N) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-107 (42 mg; 0,083 mmol; prinos 30%), u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 484,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 10.95 (s, 1H), 7.65-7.55 (m, 1H), 7.20 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 5.06 (dd, J= 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.18 (m, 3H), 3.58-3.51 (m, 1H), 3.51-3.42 (m, 1H), 2.90 (ddd, J= 17.2, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.68-2.54 (m, 2H), 2.47-2.31 (m, 3H), 2.10-2.01 (m, 1H), 2.01-1.90 (m, 2H), 1.75-1.60 (m, 3H), 1.59-1.11 (m, 6H), 1.11-1.01 (m, 6H), 1.01-0.78 (m, 2H).
Primer 90: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I- 54)
[1087]
[1088] Rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 50 mg; 0,14 mmol), (((1,3-dibromopropan-2-il)oksi)metil)benzena (120-1; 129 mg; 0,42 mmol) i DIPEA (0,12 mL, 0,70 mmol) u MeCN (1 mL) je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 3 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće, tretirana sa DCM, i isprana sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u DCM (sa 0,1% Et3N) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN; 3,5 min. gradijent. Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-54 (7 mg; 0,012 mmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 504,5.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.21 (br s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28-7.16 (m, 5H), 6.93 (s, 1H), 6.91-6.85 (m, 1H), 5.10-4.94 (m, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.29-4.16 (m, 3H), 4.12-4.02 (m, 1H), 3.61 (s, 2H), 3.31-2.93 (m, 2H), 2.84-2.65 (m, 2H), 2.58-2.34 (m, 1H), 2.33-2.17 (m, 1H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.97 (s, 1H), 1.81 (s, 1H), 1.64 (s, 2H), 1.36-1.05 (m, 4H).
Primer 91: So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion HC(O)OH (I-204)
[1089]
Korak 1.3-hloro-6-((2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-il)oksi)piridazin (182-2)
[1090] U rastvor 2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-ola (116-2; 2,00 g; 6,25 mmol ) u THF (50 mL) dodat je NaH (0,370 g; 9,37 mmol) u porcijama na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, dodat je 3,6-dihloropiridazin (182-1; 0,920 g; 6,25 mmol) i zatim je refluksovana 16 sati. Reakciona smeša je ugašena hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL).
Kombinovane organske faze su isprane vodom, slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 10% EtOAc u heksanu da bi se dobio 182-2 (2,20 g; 5,08 mmol; prinos 81%) u vidu bezbojne tečnosti.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.35 (d, J = 9.2 z, 1H), 6.95-6.94 (m, 1H), 3.94-3.91 (m, 4H), 3.65-3.64 (m, 1H), 0.86 (s, 18H), 0.02 (s, 12H).
Korak 2.3-((2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-il)oksi)piridazin (182-3)
[1091] U balon koji sadrži deoksigenisani rastvor 182-2 (2,20 g; 5,03 mmol) u EtOAc-THF (1:1) (40 mL) u inertnoj atmosferi dodat je Et3N (2,2 mL; 15 mmol) i 10% Pd-C (0,55 g; 25% tež/tež) i balon je pročišćen vodonikom i zatim mešan u atmosferi vodonika korišćenjem balona na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite<®>, podloga je isprana sa EtOAc, a filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio sirovi 182-3 (2,0 g), u vidu tečnosti bledo žute boje. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 399,3.
Korak 3.2-(piridazin-3-iloksi)propan-1,3-diol (182-5)
[1092] U mešani rastvor 182-3 (2,00 g; 5,02 mmol) u MeOH (30 mL) dodata je u kapima koncentrovana HCl (4,0 mL) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je razblažen sa ohlađenom vodom, bazifikovan sa NaHCOs i koncentrovan do suvoće. Dobijeni ostatak je mešan sa 10% MeOH u DCM, filtriran i filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio sirovi 182-4 (0,60 g), u vidu tečnosti smeđe boje. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.38 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 7.73-7.39 (m, 1H), 7.06 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 4.68-4.63 (m, 2H), 4.16-4.13 (m, 1H), 3.81-3.68 (m, 2H).
Korak 4.2-(piridazin-3-iloksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (182-5)
[1093] U rastvor 182-4 (0,60 g; 3,50 mmol) u DCM (30 mL) dodat je Et3N (2,02 mL; 14,10 mmol), DMAP (0,017 g; 0,14 mmol) i TsCl (1,40 g; 7,70 mmol) na 0 °C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je ugašena ohlađenom vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom, slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 50% EtOAc u heksanu da bi se dobio 182-5 (0,80 g; 1,67 mmol; prinos 50%) u vidu bezbojne tečnosti. MS [M+H]<+>= 479,1.
Korak 5. So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion HC(O)OH (I-204)
[1094] U rastvor I-15 (200 mg; 0,56 mmol) u MeCN (5 mL) dodat je 182-5 (168 mg; 0,66 mmol) i DIPEA (0,72 mL; 3,36 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. rastvor natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: LUNA C18 (250 mm x 21.2 mm), 5,0µ, Mobilna faza A: 0.01% HCOOH (vod.), Mobilna faza B: MeCN, Metoda: 0-75% MeCN tokom 6 minuta. Protok: 20 ml/min) da bi se dobila formatna so I-204 (12 mg; 0,02 mmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 492,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 8.01-7.99 (m, 1H), 7.90-7.89 (m, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.05 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.93-6.90 (m, 1H), 6.35-6.34 (m, 1H), 5.31-5.26 (m, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 4.30-4.23 (m, 4H), 3.85-3.75 (m, 1H), 2.91-2.89 (m, 2H), 2.66-2.60 (m, 1H), 2.36-2.32 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 3H), 1.90-1.85 (m, 1H), 1.70-1.65 (m, 2H), 1.37-1.31 (m, 4H).
Primer 92: 3-(5-(((1S,2S)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-110)
[1095]
Korak 1.7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il 4-metilbenzensulfonat (92-2)
[1096] TsCl (174 mg; 0,914 mmol) je dodat u rastvor 7-oksaspiro[3,5]nonan-2-ola (92-1; 100 mg; 0,703 mmol), DMAP (9 mg; 0,07 mmol) i TEA (0,20 mL; 1,4 mmol) u MeCN (3 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sata, a zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je tretiran dietil etrom i dobijena čvrsta supstanca je isprana dietil etrom nekoliko puta. Filtrat je zatim sakupljen i koncentrovan do suvoće da bi se dobio sirovi 92-2 (240 mg) u obliku ulja zlatne boje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.75 (m, 2H), 7.36-7.32 (m, 2H), 4.88-4.77 (m, 1H), 3.59-3.50 (m, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.31-2.21 (m, 2H), 1.98-1.89 (m, 2H), 1.58-1.55 (m, 2H), 1.53-1.49 (m, 2H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-110)
[1097] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 100 mg; 0,280 mmol) i sirovog 7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il 4-metilbenzensulfonata (92-2; 134 mg; 0.420 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,15 mL; 0.84 mmol) i dobijena smeša je mešana na 160°C pod µW zračenjem tokom 18 sati.
Reakciona smeša je koncentrovana, stavljena u DCM (10 mL) i ekstrahovana sa 1M HCl (vod.) (3 x 10 mL). Kombinovane vodene faze su isprane sa DCM (3 x 10 mL). Faze su razdvojene, a vodena faza je ohlađena i bazifikovana do pH od 9-10 korišćenjem čvrstog NaHCO3. Bazni sloj je ekstrahovan sa DCM (4 x 20 mL) i kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su nekoliko kapi mravlje kiseline) i zatim tretiran sa DCM i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO Faze su razdvojene i organska faza je koncentrovana do suvoće da bi se dobio 1-110 (6 mg; 0,01 mmol; prinos 4%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 482,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.62 (dd, J = 8.1, 0.9 Hz, 1H), 6.96-6.91 (m, 2H), 5.07-4.98 (m, 1H), 4.32-4.17 (m, 2H), 4.04-3.96 (m, 1H), 3.52-3.35 (m, 4H), 3.28 (kvint, J = 7.7 Hz, 1H), 2.78-2.57 (m, 3H), 2.32-2.16 (m, 1H), 2.16-1.99 (m, 4H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.68-1.57 (m, 2H), 1.50-0.99 (m, 11H)
Primer 93: 1-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril (I-111)
[1098]
Korak 1.1-(Hidroksimetil)ciklobutan-1-karbonitril (93-2)
[1099] U rastvor 1-cijanociklobutan-1-karboksilne kiseline (93-1; 450 mg; 3,6 mmol) u THF (18 mL) na 0°C je dodat 1M BH3u THF (11 mL; 11 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i zatim je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati.
MeOH je zatim polako dodat, praćen zasićenim vodenim rastvorom bikarbonata do neutralizacije. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa DCM, faze su razdvojene, a organska faza je propuštena kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovana da bi se dobio 93-2 (540 mg; 3,55 mmol; prinos 99%) u vidu sirovog ulja koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.31 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.35-3.29 (m, 2H), 1.54-1.47 (m, 2H), 1.45-1.24 (m, 4H).
Korak 2.1-formilciklobutan-1-karbonitril (93-3)
[1100] U rastvor 1-(hidroksimetil)ciklobutan-1-karbonitrila (93-2; 360 mg; 2,34 mmol) u DCM (6 mL) dodat je DMP (1,50 g; 3,55 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Dodato je DMP (280 mg; 0,66 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa 20% natrijum tiosulfatom (vod.) i ekstrahovana sa EtOAc (x2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 93-3 (272 mg; 2,34 mmol; kvantitativni prinos) u vidu sirovog ulja narandžasto žute boje koje je korišćeno u sledećem koraku bez prečišćavanja.
Korak 3.1-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril (I-111)
[1101] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 200 mg; 0,560 mmol) u TFE (3 mL) dodat je 1-formilciklobutan-1-karbonitril (93-3, 183 mg; 1.68 mmol; u DCM (3 mL), a zatim natrijum triacetoksiborhidrid (356 mg; 1,68 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana.
Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (225 mg, 1,06 mmol) i mešanje je nastavljeno na 40°C, a zatim na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana preko Celite<®>eluiranjem sa DCM i filtrat je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen C-18 hromatografijom reverznih faza eluiranjem sa 10-100% MeCN/voda sa 0,1% mravlja kiselina i dalje prečišćen korišćenjem HPLC metodom reverznih faza (Kolona; Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min. gradijent; epruvete za prikupljanje sadrže nekoliko kapi mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-111 (0,7 mg; 1 mmol; prinos 0,2%). MS [M+H]<+>= 451,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.95 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.13 (dt, J = 13.5, 4.3 Hz, 1H), 4.48-4.23 (m, 2H), 4.17-4.10 (m, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.89-2.73 (m, 3H), 2.47-2.31 (m, 2H), 2.24-1.91 (m, 7H), 1.77 (m, 4H), 1.44-1.22 (m, 4H).
Primer 94: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-112)
[1102]
Korak 1.2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diol (94-2)
[1103] Natrijum borohidrid (189 mg; 5,00 mmol) je dodat u rastvor dimetil 2-(2-hlorofenoksi)malonata (94-1; 259 mg; 1,0 mmol) u THF (4 mL) i MeOH (1,0 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta i zatim ugašena vodom. Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću EtOAc (x3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće da bi se dobio 94-2 (105 mg; 0,518 mmol; prinos 52%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.20-7.15 (m, 2H), 6.89-6.81 (m, 2H), 4.31 (kvint, J = 4.8 Hz, 1H), 3.89-3.76 (m, 4H).
Korak 2.2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (94-3)
[1104] TsCl (350 mg; 1,84 mmol) je dodat u rastvor 2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diola (94-2; 105 mg; 0,52 mmol), DMAP (6 mg; 0,05 mmol) i TEA (0,3 mL; 2 mmol) u MeCN (2 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata, a zatim filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 94-3 (160 mg; 0,313 mmol; prinos 60%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H2O]<+>= 528,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.75-7.70 (m, 4H), 7.34-7.29 (m, 4H), 7.17-7.13 (m, 2H), 6.68-6.63 (m, 2H), 4.52 (kvint, J = 5.0 Hz, 1H), 4.22-4.12 (m, 4H), 2.45 (s, 6H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-112)
[1105] DIPEA (0,10 mL; 0,57 mmol) je dodata u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 50 mg; 0,14 mmol) i 2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (94-3; 71,5 mg; 0,14 mmol) u MeCN (0,75 mL). Dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata, a zatim je koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% Et3N) da bi se dobio I-112 (30 mg; 0,054 mmol; prinos 39%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 524,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32-7.26 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.88-6.80 (m, 2H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.70 (kvint, J = 5.6 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 7.0 Hz, 1H), 4.32-4.21 (m, 2H), 3.76-3.64 (m, 2H), 3.22-3.14 (m, 1H), 3.09-3.01 (m, 1H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.44-2.34 (m, 2H), 2.04-1.94 (m, 2H), 1.89-1.79 (m, 1H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.42-1.32 (m, 2H), 1.31-1.05 (m, 2H).
Primer 95: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-113)
[1106]
Korak 1.2-(2-metoksifenoksi)propan-1,3-diol (95-2)
[1107] Natrijum borohidrid (189 mg; 5,00 mmol) je dodat u rastvor dimetil 2-(2-metoksifenoksi)malonata (95-1; 254 mg; 1 mmol) u THF (4 mL) i MeOH (1 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta i zatim ugašena vodom. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (x3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 95-2 (103 mg; 0,520 mmol; prinos 52%), koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2.2-(2-metoksifenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (95-3)
[1108] TsCl (248 mg; 1,30 mmol) je dodat u rastvor 2-(2-metoksifenoksi)propan-1,3-diola (95-2; 103 mg; 0,520 mmol), DMAP (6 mg; 0,05 mmol) i TEA (0,3 mL; 2 mmol) u MeCN (2 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, a zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 95-3 (100 g; 0,20 mmol; prinos 38%) u vidu ulja svetlo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 507,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.78-7.72 (m, 4H), 7.35-7.30 (m, 4H), 7.01 (ddd, J = 8.2, 6.6, 2.5 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1H), 6.81-6.74 (m, 2H), 4.44 (kvint, J = 5.0 Hz, 1H), 4.26-4.15 (m, 4H), 3.76 (s, 3H), 2.45 (s, 6H)
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-113)
[1109] DIPEA (0,05 mL; 0,3 mmol) je dodata u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 35,3 mg; 0,1 mmol) i 2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (95-3; 50 mg; 0,1 mmol) u MeCN (0,75 mL). Dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 8 sati, a zatim je koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-65% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% Et3N) da bi se dobio I-113 (20 mg; 0,037 mmol; prinos 37%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 520,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 6.88 (td, J = 7.7, 1.6 Hz, 1H), 6.81 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 6.70 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.69-4.59 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 6.4 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 5.2 Hz, 2H), 3.76-3.64 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.25-3.17 (m, 1H), 3.05 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 2.97- 2.84 (m, 1H), 2.64- 2.55 (m, 1H), 2.45-2.33 (m, 2H), 2.05-1.93 (m, 2H), 1.90-1.78 (m, 1H), 1.70-1.59 (m, 2H), 1.42-1.05 (m, 4H).
Primer 96: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-114)
[1110]
[1111] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,10 mg; 0,28 mmol) u DMF (0,93 mL) dodat je pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-karbaldehid (96-1; 49 mg; 0,34 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (89 mg; 0,42 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i zatim razblažena sa DCM (1 mL) i MeCN (2 mL). Dodat je pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-karbaldehid (96-1; 20 mg; 0,14 mmol) i reakciona smeša je sonikirana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (50 mg; 0,24 mmol) i dobijena smeša je sonikirana još 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana na Celite<®>i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u heptanu i zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min gradijent) da bi se dobila formatna so 1-114 (9 mg; 0,02 mmol; prinos 6%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 489,4<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 9.00-8.95 (m, 1H), 8.53 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 4.3, 2.1 Hz, 1H), 7.07 (ddd, J = 8.4, 3.6, 2.2 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.39-4.15 (m, 3H), 3.89 (q, J = 14.3 Hz, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.1, 13.5, 5.4 Hz, 1H), 2.71-2.55 (m, 2H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.13-1.92 (m, 3H), 1.65 (d, J = 10.1 Hz, 2H), 1.42-1.23 (m, 4H).
Primer 97: 3-(5-(((1S,2S)-2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-115)
[1112]
[1113] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 50 mg; 0,14 mmol), 4,4-difluorocikloheksan-1-on (97-1; 375 mg; 2,8 mmol) i MgSO4(51 mg; 0,42 mmol) u DMF (0,5 mL) je dodat NaBH(OAc)s (59 mg; 0,28 mmol) u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 16 sati, a zatim razblažena sa DCM (2 mL), filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-115 (36 mg; 0,08 mmol; prinos 55%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 476,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.10-6.86 (m, 2H), 5.10 (ddd, J = 13.3, 5.2, 2.4 Hz, 1H), 4.43-4.21 (m, 2H), 4.13-3.96 (m, 1H), 2.93-2.70 (m, 4H), 2.31 (qd, J = 12.9, 5.9 Hz, 1H), 2.21-2.09 (m, 2H), 2.07-1.89 (m, 5H), 1.88-1.64 (m, 6H), 1.42-1.24 (m, 5H).
Primer 98: 3-(5-(((1S,2S)-2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-116)
[1114]
[1115] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 100 mg; 0,28 mmol) u DMF (2 mL) pod atmosferom azota je dodat 2,4-difluorobenzaldehid (98-1; 0,03 mL; 0,31 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dodan je natrijum triacetoksiborohidrid (178 mg; 0,839 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (30 mL). Dobijena suspenzija je sonikirana, filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana vodom (x3). Filtrat je ekstrahovan sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane. Izolovana čvrsta supstanca i proizvod ekstrakcije su kombinovani i prečišćeni silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-116 (22 mg; 0,04 mmol; prinos 15%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>484,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (td, J = 8.7, 6.8 Hz, 1H), 7.20-7.10 (m, 2H), 7.08-6.98 (m, 2H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.42-4.19 (m, 3H), 3.87-3.73 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.0, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.39 (td, J = 13.0, 4.3 Hz, 1H), 2.10-2.02 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 2H), 1.70-1.61 (m, 2H), 1.41-1.16 (m, 4H).
Primer 99: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-53)
[1116]
Korak 1.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (99-2)
[1117] Epihlorohidrin (99-1; 0,12 mL; 1,5 mmol) i DIPEA (0,12 mL; 0,70 mmol) su dodati u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolina-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 50 mg; 0,14 mmol) u MeCN (4 mL) i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 1 sat, a zatim mešana na 130°C pod µW zračenjem tokom 1 sat. Reakciona smeša je koncentrovana, stavljena u DCM i ekstrahovana sa 1M HCl (vod.) (x3) Kombinovane vodene faze su isprane sa DCM. Faze su razdvojene, a vodena faza je ohlađena i bazifikovana do pH od 9-10 korišćenjem čvrstog NaHCO3. Bazna vodena faza je ekstrahovana sa DCM (x4) i kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio sirovi 99-2 (80 mg) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 414,3, koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-53)
[1118] 2-bromopropan (165-1; 0,16 mL; 1,7 mmol) je dodat u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1 -oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (99-2; 70 mg; 0,17 mmol) i AgOTf (217 mg; 0,85 mmol) u DCM (0,5 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i filtrirana. Filtrat je ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.) i faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana sa DCM i kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO3, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEts) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-53 (9 mg; 0,02 mmol; prinos 11%), u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 456,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.02 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 5.8 Hz, 1H), 4.28-4.18 (m, 2H), 4.01-3.91 (m, 1H), 3.54-3.42 (m, 3H), 2.98-2.84 (m, 2H), 2.77 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.42-2.35 (m, 1H), 2.31-2.24 (m, 1H), 2.02-1.91 (m, 2H), 1.78 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.68-1.55 (m, 2H), 1.40-1.19 (m 4H), 1.02 (d, J = 6.1 Hz, 6H).
Primer 100: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion i 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-118 i I-119)
[1119]
Korak 1. (1S,2S)-2-metoksiciklopentil 4-nitrobenzensulfonat (100-3)
[1120] U (1S,2S)-2-metoksiciklopentan-1-ol (100-1; 110 mg; 0,95 mmol) i 1-metil-1H-imidazol (0,38 mL; 4,7 mmol) u DCM (10 mL) dodat je 4- nitrobenzensulfonil hlorid (100-2; 210 mg; 0,95 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO i ekstrahovana sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 100-3 (128 g; 0,43 mmol; prinos 45%). Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ili 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-118 i I-119)
[1121] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 50 mg; 0,14 mmol) u DIPEA ( 0,15 mL, 0,84 mmol) i MeCN (0,5 mL) dodat je (1S,2S)-2-metoksiciklopentil 4-nitrobenzensulfonat (100-3; 105 mg; 0,35 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm;
Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio jedan
dijastereomer 1-118 (4,5 mg; 8,6 µmol; prinos 6%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 456,3.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17-7.10 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.03 (ddd, J = 13.4, 5.2, 2.5 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 16.7, 3.8 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.51-3.33 (m, 1H), 3.22 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 3.14-3.05 (m, 1H), 2.89-2.66 (m, 3H), 2.39 (qd, J= 13.2, 4.9 Hz, 1H), 2.12-2.04 (m, 4H), 1.91-1.84 (m, 1H), 1.80-1.67 (m, 3H), 1.64-1.46 (m, 3H), 1.42-1.35 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 2H). Relativna stereohemija supstituenata na ciklopentanskom prstenu nije određena i dodeljena je proizvoljno.
[1122] Izolovan je drugi nečisti proizvod koji je dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-40% MeCN, 3,5 min gradijent; frakcije za sakupljanje sadržale su ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so drugog dijastereomera (I-119; 4,4 mg; 8,8 µmol; prinos 6%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 456,3.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3+ kap D2O) δ 8.29 (s, 1H), 7.60 (dd, J = 8.4, 2.9 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03-6.94 (m, 1H), 4.96 (ddd, J = 13.4, 5.2, 1.4 Hz, 1H), 4.35-4.17 (m, 3H), 3.71-3.54 (m, 1H), 3.27 (s, 2H), 3.25-3.17 (m, 1H), 3.10 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 2.91-2.81 (m, 1H), 2.80-2.72 (m, 1H), 2.67-2.59 (m, 1H), 2.32 (qd, J = 13.2, 4.9 Hz, 1H), 2.17-2.00 (m, 3H), 1.82-1.44 (m, 7H), 1.42-1.16 (m, 5H). Relativna stereohemija supstituenata na ciklopentanskom prstenu nije određena i dodeljena je proizvoljno.
Primer 101: 3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril (I-120)
[1123]
Korak 1.3-formilbiciklo[1.1.1]pentan-1-karbonitril (101-2)
[1124] 3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-karbonitril (101-1; 124 mg; 1,01 mmol) rastvoren je u DCM (5,0 mL) i ohlađen na 0°C. Dodat je DMP (540 mg; 1,27 mmol), a zatim 2 kapi vode. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata, ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata: zasićenim vodenim rastvorom natrijum tiosulfata:dietil etra (v/v/v = 1:1:2) i zatim mešana dok mutna smeša nije postala bistra. Organska faza je razdvojena, i vodena faza je ekstrahovana pomoću dietil etra (x2).
Kombinovane organske faze su propuštene kroz fazni separator i koncentrovane. Sirovi materijal je rastvoren u DCM (5,0 mL) i ohlađen na 0°C. Dodat je DMP (780 mg; 1,84 mmol), a zatim 3 kapi vode. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, ugašena je sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, zasićenim vodenim rastvorom natrijum tiosulfata:dietil etra (v/v/v = 1: 1:2), a zatim je mešana dok mutna smeša nije postala bistra. Organska faza je razdvojena, i vodena faza je ekstrahovana pomoću dietil etra (x2). Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane da bi se dobio sirovi 101-2 u vidu ulja krem boje. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2.3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril (I-120)
[1125] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,15 g; 0,42 mmol) u DMF (1 mL) je dodat 3-formilbiciklo[1.1.1]pentan-1-karbonitril (101-2; 61 mg; 0,50 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (133 mg; 0,630 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 1,5 sati. Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3).
Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u heptanu da bi se dobio I-120 (67,7 mg; 0,14 mmol; prinos 34%) u vidu čvrste supstance krem boje. MS [M+H]<+>= 463,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 17.1, 8.5 Hz, 1H), 4.32-4.14 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.1, 13.6, 5.3 Hz, 1H), 2.70-2.55 (m, 4H), 2.40 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 1H), 2.11-2.02 (br s, 6H), 2.02-1.94 (m, 1H), 1.94-1.85 (m, 1H), 1.70-1.59 (m, 2H), 1.39-1.08 (m, 5H).
Primer 102: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-121)
[1126]
[1127] U rastvor di-terc-butil (E)-diazen-1,2-dikarboksilata (16,7 mg; 0,073 mmol) u THF (0,25 mL) dodat je rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (99-2; 20 mg; 0,048 mmol), trifenilfosfin (19 mg; 0,073 mmol), DIPEA (0,013 mL; 0,073 mmol) i 3-fluorofenol (102-1; 4 µL; 0,05 mmol) u THF (0,25 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati, a zatim razblažena sa DCM i isprana sa 50% zasićenim Na2CO3(vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: XBridge C18 OBD 30 x 50 mm; 15-40% MeCN u H2O 0.1% mravlja kiselina preko 3.5 min pri 75 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-121 (8 mg; 0,01 mmol; prinos 27%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 508,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28 (q, J = 8.2 Hz, 1H), 7.21-7.13 (m, 2H), 7.04 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.79-6.72 (m, 1H), 6.71-6.63 (m, 2H), 6.62-6.53 (m, 2H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 6.8 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 5.5 Hz, 2H), 3.79-3.65 (m, 1H), 3.22-3.12 (m, 1H), 3.05 (t, J= 6.5 Hz, 1H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.63-2.53 (m, 1H), 2.04-1.92 (m, 2H), 1.88-1.77 (m, 1H), 1.69-1.54 (m, 2H), 1.45-1.22 (m, 4H).
Primer 103: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -122)
[1128]
[1129] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 200 mg; 0,56 mmol) u MeCN (10 mL) je dodat (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (53-2; 262 mg; 0,95 mmol) i DIPEA (0,49 mL; 2,8 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-122 (80 mg; 0,17 mmol; 31%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 462,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.197 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.40-4.23 (m, 4H), 2.95-2.86 (m, 1H), 2.66-2.61 (m, 3H), 2.56-2.33 (m, 2H), 2.19-2.16 (m, 3H), 2.08-1.92 (m, 3H), 1.75-1.64 (m, 3H), 1.35-1.14 (m, 5H).
Primer 104: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-123 )
[1130]
Korak 1. cis-metil 4-metoksicikloheksan-1-karboksilat (104-2)
[1131] U rastvor cis-4-hidroksicikloheksan-1-karboksilne kiseline (104-1; 2,00 g; 13,9 mmol) u DMF (20 mL) dodat je NaH (1,38 g; 34,7 mmol) u malim porcijama na 0°C i dobijena smeša je mešana 30 min. Dodan je metil jodid (2,6 mL; 42 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 4 sata. Nakon potpunog trošenja polaznog materijala, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 100 mL) Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 20% EtOAc u heptanima da bi se dobilo jedinjenje 104-2 (1,20 g; 6,97 mmol; prinos 52%) u obliku ulja.<1>H NMR (600 MHz, CDCl3): δ 3.65 (s, 3H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.36-2.32 (m, 1H), 1.88-1.79 (m, 4H), 1.65-1.61 (m, 2H), 1.58-1.47 (m, 2H).
Korak 2. cis-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (104-3)
[1132] U rastvor cis-metil 4-metoksicikloheksan-1-karboksilata (104-2; 1,2 g, 6,97 mmol) u THF (15 mL) dodat je LiAlH4(387 mg; 10,46 mmol) u kapima na 0°C i dobijena smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 4 sata. Nakon potpunog trošenja polaznog materijala, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Ovaj materijal je uzet u DCM (10 mL), dodat je DMP (1,30 g; 6.25 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Nakon potpunog trošenja početnog materijala, reakciona smeša je razblažena sa DCM (10 mL), filtrirana kroz malu podlogu Celite<®>i isprana sa DCM (10 mL). Kombinovani filtrat je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 10% EtOAc u heksanima da bi se dobio 104-3 (450 g; 3,17 mmol; prinos 76%) u vidu bezbojne tečnosti.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.61 (s, 1H), 3.37-3.35 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.29-2.21 (m, 1H), 1.82-1.57 (m, 8H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-123 )
[1133] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 0,20 g; 0,56 mmol) i cis-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (104-3; 0,12 g; 0,84 mmol) u DCE-DMF (9:1) (10 mL) je dodat NaBH(OAc)s (0,18 g; 0,84 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-123 (50 mg; 0.10 mmol; prinos 18%). MS [M+H]<+>= 484,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.197 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.41-4.22 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 2.95-2.86 (m, 2H), 2.61-2.33 (m, 5H), 2.08-1.98 (m, 3H), 1.72-1.64 (m, 4H), 1.45-1.29 (m, 7H), 1.27-1.14 (m, 4H).
Primer 105: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I- 51)
[1134]
[1135] (Bromometil)ciklopropan (105-1; 123 µL; 1,27 mmol) je dodat u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)- 1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (99-2; 70 mg; 0,10 mmol) i AgOTf (163 mg; 0,63 mmol) (pomešan sa Celite<®>1:1) u DCM (1 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim razblažena sa DCM, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je stavljen u 1M HCl (vod.) i ispran sa EtOAc (x3). Kiseli sloj je bazifikovan korišćenjem NaHCO3i ekstrahovan sa DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u DCM (sa 0,1% Et3N) da bi se dobio I-51 (13 mg; 0,026 mmol; prinos 26%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 468,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07 (dd, J= 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J= 17.2, 5.5 Hz, 1H), 4.25 (dd, J= 17.3, 5.0 Hz, 2H), 3.98-3.84 (m, 1H), 3.51-3.38 (s, 2H), 3.11 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 3.04-2.77 (m, 2H), 2.59 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 2.43- 2.34 (m, 2H), 2.12-2.02 (m, 1H), 2.02-1.89 (m, 2H), 1.86-1.70 (m, 2H), 1.67-1.50 (m, 2H), 1.48-1.00 (m, 6H), 0.49-0.38 (m, 1H), 0.15- 0.08 (m, 1H).
Primer 106: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-49)
[1136]
Korak 1. Dimetil 2-diazomalonat (106-3)
[1137] U rastvor 4-acetamidobenzensulfonil azida (106-2; 6,47 g; 26,1 mmol), TEA (5,8 mL; 42 mmol) i MeCN (80 mL) dodat je dimetil malonat (106-1; 2,0 mL; 17 mmol) kap po kap na 0°C i dobijena smeša je snažno mešana preko noći. Reakciona smeša je zatim razblažena sa Et2O (200 mL) i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini DCM i dodat je višak heptana sve dok nije došlo do precipitacije bele čvrste supstance. Čvrste materije su filtrirane i filtrat je koncentrovan. Ova sekvenca je ponovljena još tri puta da se dobije 106-3 (1,92 g; 12,1 mmol; prinos 70%) u obliku bledo žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.86 (s, 6H).
Korak 2. Dimetil 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)malonat (106-5)
[1138] U rastvor dimetil 2-diazomalonata (106-3; 500 mg; 3,16 mmol), TFE (106-4; 1,04 mL; 15,8 mmol) i DCM (4 mL) pod atmosferom azota dodat je rodijum (II) acetat (12,5 mg; 0,032 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 100% DCM da bi se dobio 106-5 (640 mg; 2,80 mmol; prinos 88%) u obliku žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.73 (s, 1H), 4.11 (q, J = 8.5 Hz, 2H), 3.84 (s, 6H).
Korak 3.2-(2,2,2-trifluoroetoksi)propan-1,3-diol (106-6)
[1139] U rastvor dimetil 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)malonata (106-5; 640 mg; 2,8 mmol) u THF (10 mL) pod atmosferom azota dodat je 2M LiAlH4u THF (2,8 mL; 5,7 mmol) kap po kap na 0°C. Dobijena smeša je mešana 30 minuta na 0°C, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, razblažena sa THF (20 mL), i Na2SO4•10H2O (900 mg) je dodavan polako u porcijama. Posle mešanja od 10 minuta, dodat je Na2SO4(približno 300 mg), mešanje je snažno nastavljeno tokom 10 minuta, a zatim je dodat ostatak Na2SO4•10H2O (444 mg) u porcijama. Dodat je Na2SO4(približno 300 mg) i mešanje je nastavljeno 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana kroz podlogu Celite<®>(isprana sa minimalnom količinom EtOAc). Filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobilo 106-6 (273 mg; 1,57 mmol; prinos 56%) u vidu bezbojnog ulja, koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.04 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 3.77-3.66 (m, 4H), 3.65-3.58 (m, 1H).
Korak 4.2-(2,2,2-trifluoroetoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonat (106-7)
[1140] U rastvor 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)propan-1,3-diola (106-6; 273 mg; 1,57 mmol), DIPEA (0,68 mL; 3,9 mmol), DMAP (19 mg; 0,16 mmol) u DCM (5 mL) je dodat MsCl (0,27 mL; 3,5 mmol) kap po kap na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3na 0°C i ekstrahovana sa DCM (x2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 106-7. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 5.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-dion (I-49)
[1141] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 380 mg; 1,06 mmol) i DIPEA (1,1 mL; 6,3 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat rastvor 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonata (106-7; 527 mg; 1,60 mmol) u MeCN (1 mL). Dobijena smeša je mešana na 140°C tokom 14 sati pri µW i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-49 (41,6 mg; 0,081 mmol; prinos 8%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 496,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.75 (s, 1H), 7.70 (dd, J = 8.7, 4.4 Hz, 1H), 7.03-6.86 (m, 2H), 5.11 (ddd, J = 13.5, 8.5, 5.2 Hz, 1H), 4.39-4.18 (m, 3H), 4.13 (kvint, J = 5.9 Hz, 1H), 3.75 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 3.62 (dq, J = 14.7, 6.6 Hz, 2H), 3.24 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.04 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 2.91-2.74 (m, 2H), 2.49-2.38 (m, 1H), 2.37-2.25 (m, 1H), 2.22-2.13 (m, 1H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.92-1.83 (m, 1H), 1.79-1.66 (m, 2H), 1.45-1.10 (m, 4H).
Primer 107: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-50)
[1142]
Korak 1. Dimetil 2-(2,2-difluoroetoksi)malonat (107-2)
[1143] U dimetil 2-diazomalonat (106-3; 500 mg; 3,16 mmol), 2,2-difluoroetan-1-ol (107-1; 1297 mg; 15,8 mmol) i DCM (4 mL) pod atmosferom azota dodat je rodijum ( II) acetat (12,5 mg; 0,032 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na RT preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 100% DCM da bi se dobio 107-2 (470 mg; 2.22 mmol; prinos 70%) u obliku žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 6.00 (tt, J = 55.2, 4.2 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.96-3.87 (m, 2H), 3.85 (s, 6H).
Korak 2.2-(2,2-difluoroetoksi)propan-1,3-diol (107-3)
[1144] U dimetil 2-(2,2-difluoroetoksi)malonat (107-2; 470 mg; 2,22 mmol) u THF (5 mL) pod atmosferom azota dodat je LiAlH4u THF (2,2 mL; 4,4 mmol) u kapima na 0°C.
Reakciona smeša je mešana 30 min na 0°C i na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, razblažena sa THF (20 mL), i Na2SO4•10H2O (1071 mg) je dodavan polako u porcijama. Reakciona smeša je snažno mešana tokom 1 sat. Celite<®>je dodat u reakcionu smešu dok čvrste materije nisu postale slobodno teče i reakciona smeša je mešana 40 minuta na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana, isprana sa THF (minimalno) i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 107-3 (147 mg; 0,942 mmol; prinos 43%) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 6.17-5.78 (m, 1H), 3.97-3.82 (m, 2H), 3.81-3.57 (m, 5H).
Korak 3.2-(2,2-difluoroetoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonat (107-4)
[1145] U 2-(2,2-difluoroetoksi)propan-1,3-diol (107-3; 147 mg; 0,942 mmol), DIPEA (0,41 mL; 2,4 mmol) i DMAP (11,5 mg; 0,094 mmol) u DCM ( 5 mL) je dodat MsCl (0,16 mL; 2,07 mmol) kap po kap na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata.
Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim NaHCO3na 0°C i zatim ekstrahovana sa DCM (x2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 107-4, koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 4.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-50)
[1146] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 220 mg; 0,62 mmol), DIPEA (0,64 mL; 3,7 mmol) i MeCN (1 mL) je dodat rastvor 2-(2,2-difluoroetoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonata (107-4; 288 mg; 0,92 mmol) u MeCN (1 mL). Dobijena smeša je mešana 14 sati na 140°C pod µW. Reakciona smeša je zatim koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom silika gel eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DCM da bi se dobio I-50 (20 mg; 0,04 mmol; prinos 7%) u obliku bele čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 478,5.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.31 (s, 1H), 7.86-7.46 (m, 1H), 7.08-6.81 (m, 2H), 5.81 (tt, J = 55.3, 3.9 Hz, 1H), 5.22-5.01 (m, 1H), 4.39-4.14 (m, 3H), 4.06 (kvint, J = 5.8 Hz, 1H), 3.68-3.45 (m, 4H), 3.33-3.09 (m, 1H), 3.06-2.93 (m, 1H), 2.89-2.72 (m, 2H), 2.46-2.35 (m, 1H), 2.35-2.24 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 1H), 2.07-1.99 (m, 1H), 1.92-1.81 (m, 1H), 1.76-1.65 (m, 2H), 1.45-1.22 (m, 3H), 1.19-1.07 (m, 1H).
Primer 108: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-56)
[1147]
Korak 1. Dimetil 2-(3,3-difluorociklobutoksi)malonat (108-2)
[1148] U dimetil 2-diazomalonat (106-3; 500 mg; 3,16 mmol), 3,3-difluorociklobutan-1-ol (108-1; 513 mg; 4,74 mmol) i DCM (4 mL) pod atmosferom azota dodat je rodijum (II) acetat (12,5 mg; 0,032 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 100% DCM da bi se dobio 108-2 (649 mg; 2.72 mmol; prinos 86%) u obliku žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.47 (s, 1H), 4.19-4.12 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 2.95-2.84 (m, 2H), 2.77-2.66 (m, 2H).
Korak 2.2-(3,3-difluorociklobutoksi)propan-1,3-diol (108-3)
[1149] U dimetil 2-(3,3-difluorociklobutoksi)malonat (108-2; 744 mg; 3,10 mmol) u THF (6 mL) pod atmosferom azota je dodat 2M LiAlH4u THF (3,1 mL; 6,3 mmol) kap po kap na 0.°C. Dobijena smeša je mešana 30 minuta na 0°C, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, razblažena sa THF (20 mL), i Na2SO4•10H2O (1071 mg) je dodavan polako u porcijama. Dobijena smeša je mešana energično 1 sat i Celite<®>je dodavan sve dok čvrsta materija nije počela slobodno da teče. Reakciona smeša je mešana 40 minuta na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana, isprana sa THF (minimalno) i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 108-3 (499 mg; 2,74 mmol; prinos 88%) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.35-4.12 (m, 1H), 3.86-3.75 (m, 1H), 3.71-3.59 (m, 4H), 3.48-3.39 (m, 1H), 2.91-2.81 (m, 2H), 2.60-2.46 (m, 2H), 2.26-2.11 (m, 1H).
Korak 3.2-(3,3-difluorociklobutoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonat (108-4)
[1150] U 2-(3,3-difluoroetoksi)propan-1,3-diol (108-3; 483 mg; 2,65 mmol), DIPEA (1,2 mL; 6,6 mmol) i DMAP (32 mg; 0,27 mmol) u DCM (5 mL) je dodat MsCl (0,45 mL; 5,8 mmol) kap po kap na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata, a zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO na 0°C i ekstrahovana sa DCM (x2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 108-4, koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 4.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-56)
[1151] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 450 mg; 1,26 mmol), DIPEA (1,3 mL; 7,5 mmol) i MeCN (2,5 mL) je dodat rastvor 2-(3,3-difluoroetoksi)propan-1,3-diil dimetansulfonata (108-4; 852 mg; 2,52 mmol) u MeCN (1 mL). Dobijena smeša je mešana 14 sati na 140°C pod µW i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-56 (30 mg; 0,058 mmol; prinos 5%) u vidu bele čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 504,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.79 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.18-6.69 (m, 2H), 5.11 (ddd, J= 13.5, 8.6, 5.1 Hz, 1H), 4.39-4.16 (m, 3H), 4.05-3.93 (m, 1H), 3.92-3.81 (m, 1H), 3.61 (s, 2H), 3.29-3.13 (m, 1H), 3.07-2.91 (m, 1H), 2.91-2.72 (m, 4H), 2.57-2.39 (m, 3H), 2.39-2.24 (m, 1H), 2.21-2.13 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 1H), 1.92-1.83 (m, 1H), 1.77-1.68 (m, 2H), 1.48-1.12 (m, 4H).
Primer 109: So 4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril HC(O) OH (I-129) i 4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)( metil)amino)metil)benzonitril HC(O)OH (I-130)
[1152]
Korak 1.3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-1-(hidroksimetil)piperidin-2,6-dion (109-2)
[1153] U mešani rastvor terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1- oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)karbamat (109-1; 860 mg; 1,46 mmol) u THF (4 mL) je dodat 4M hlorovodonik u dioksanu (8,0 mL; 32 mmol) i dobijena smeša je mešana 8 sati na 60°C. Reakciona smeša je filtrirana i dobijena čvrsta supstanca je isprana sa Et2O (x3) i osušena u vakuumu preko noći da bi se dobila sirova hidrohloridna so 109-2 (525 mg; 1,08 mmol; prinos 74%) u vidu čvrste supstance bele boje. Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS [M+2H]<+>= 389,3.
Korak 2. So 4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril HC(O) OH (I-129) i 4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)( metil)amino)metil)benzonitril HC(O)OH (I-130)
[1154] U mešani rastvor sirovog 109-2 (180 mg; 0,425 mmol), NaBH(OAc)3(135 mg; 0,637 mmol) i DMF (1 mL) pod atmosferom azota dodat je 4-formilbenzonitril (109-3; 58,5 mg; 0,446 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona:
Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min gradijent; sakupljene frakcije su sadržale ~ 2 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-129 (31 mg; 0,060 mmol; prinos 14%) u obliku bele čvrste supstance i formatna so I-130 (25 mg; 0,048 mmol; prinos 11 %) u vidu čvrste supstance bele boje. Podaci za I-129: MS [M+H]<+>= 473,1.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.88 (br s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.71-7.58 (m, 3H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.13-7.07 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 5.04 (ddd, J = 13.4, 5.2, 2.1 Hz, 1H), 4.37-4.18 (m, 3H), 3.94 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 2.88-2.67 (m, 3H), 2.18-1.98 (m, 3H), 1.77-1.66 (m, 2H), 1.48-1.16 (m, 4H). Podaci za I-130: MS [M+H]<+>= 487.1.
<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.28 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.3, 2.5 Hz, 2H), 7.39 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 7.08-6.92 (m, 2H), 5.19-5.05 (m, 1H), 4.42-4.23 (m, 3H), 3.86 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 3.77 (dd, J = 14.6, 3.8 Hz, 1H), 2.97-2.72 (m, 3H), 2.41-2.25 (m, 1H), 2.22 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.25-2.14 (m, 2H), 2.02-1.91 (m, 1H), 1.83-1.67 (m, 2H), 1.53-1.20 (m, 4H).
Primer 110: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-205)
[1155]
Korak 1.2-izopropoksipropan-1,3-diol i 3-izopropoksipropan-1,2-diol (183-2 i 183-3)
[1156] U rastvor (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanola (183-1; 3,00 g; 22,7 mmol) u DCM (100 mL) dodat je trietil silan (4,39 g; 27,2 mmol) i etil aluminijum dihlorid (25% u toluenu (25,4 mL; 49,9 mmol)) na -30°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je ugašena sa vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM (3 x 100 mL) Kombinovane organske faze su osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobila smeša sirovog 183-2 i 183-3 (1,3 g, sirovo) u vidu bezbojne tečnosti. Sirovi materijal je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2.2-izopropoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) i 3-izopropoksipropan-1,2-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (183-4 i 183-5)
[1157] U rastvor smeše 183-2 i 183-3 (1,3 g; 9,6 mmol) u CH3CN (30 mL) dodat je Et3N (5,3 mL; 38 mmol), DMAP (0,04 g; 0,3 mmol) i TsCl (4,00 g; 21,1 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je zatim filtrirana i filtrat je koncentrovan do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 10% EtOAc u heksanu da bi se dobila smeša 183-4 i 183-5 (3,1 g; 7,0 mmol; prinos 73%) u vidu bezbojne tečnosti. MS [M+H+18]<+>= 460,1.
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-205)
[1158] U rastvor I-12 (400 mg; 1,2 mmol) u MeCN (10 mL) dodata je smeša 183-4 i 183-5 (670 mg; 1,5 mmol) i DIPEA (0,62 mL; 3,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC u 3% MeOH u DCM kao eluentu da bi se dobilo jedinjenje I-205 (20 mg; 0,05 mmol; prinos 4%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 442,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.80-4.69 (m, 1H), 4.40-4.22 (m, 2H), 3.61-3.49 (m, 1H), 3.15-2.85 (m, 2H), 2.60-2.31 (m, 3H), 2.25-1.98 (m, 3H), 1.95-1.66 (m, 5H), 1.50-1.49 (m, 2H), 1.07-1.01 (m, 7H).
Primer 111: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-79) HC(O)OH
[1159]
[1160] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 103 mg; 0,25 mmol), acetaldehid (2-1; 0,021 mL; 0,37 mmol) i trifluoroetanol (1 mL) pod atmosferom azota su dodati NaBH(OAc)3(78 mg; 0,37 mmol) u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, a zatim je razblažena sa DCM i koncentrovana na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% Et3N) u DCM nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobila formatna so I-79 (30 mg; 0,067 mmol; prinos 30%). MS [M+H]<+>= 386,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.29 (s, 2H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.43-4.33 (m, 1H), 4.30-4.19 (m, 2H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.70 (ddd, J = 18.2, 7.7, 3.3 Hz, 2H), 2.63-2.55 (m, 2H), 2.42-2.26 (m, 1H), 2.08-2.04 (m, 1H), 2.02-1.90 (m, 2H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.41-1.15 (m, 4H), 1.00 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Primer 112: 3-(5-(((1S,2S)-2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-131)
[1161]
[1162] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 90 mg; 0,25 mmol), aceton ( 0,09 mL; 1 mmol) i MgSO4(61 mg; 0,50 mmol) u DMF (1,0 mL) je dodat NaBH(OAc)3(107 mg; 0,50 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-131 (95 mg; 0,24 mmol; prinos 94%) u vidu bele čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 400,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.07-6.87 (m, 2H), 5.30 (br s, 1H), 5.04 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.29-4.21 (m, 1H), 4.15 (tt, J = 9.3, 4.6 Hz, 1H), 2.98 (heptd, J = 6.3, 1.8 Hz, 1H), 2.87-2.80 (m, 1H), 2.78-2.67 (m, 2H), 2.30-2.14 (m, 1H), 2.13-1.99 (m, 3H), 1.91 (s, 1H), 1.76-1.62 (m, 2H), 1.41-1.16 (m, 4H), 1.11-0.99 (m, 6H).
Primer 113: 3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril (I-132)
[1163]
[1164] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 30 mg; 0,074 mmol) u DMF (0,5 mL) je dodat 3-formilbenzonitril (113-1; 10 mg; 0,076) i natrijum triacetoksiborohidrid (32 mg; 0,15 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Dodato je još 3-formilbenzonitrila (113-1; 5 mg) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 4 sata. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (40 mg) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Dodato je još natrijum triacetoksiborohidrida (30 mg) i mešanje je nastavljeno na 60°C tokom 2 sata. Sirova reakciona smeša je razblažena sa DMSO (1 mL) i prečišćena HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-132 (9,0 mg; 0,017 mmol; prinos 23%). MS [M+H]<+>= 473,3.
<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.83 (s, 1H), 7.68 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.65-7.53 (m, 3H), 7.44 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.11-7.08 (m, 1H), 7.06-7.01 (m, 1H), 5.04 (ddd, J = 13.4, 5.2, 2.7 Hz, 1H), 4.40-4.27 (m, 2H), 4.26-4.15 (m, 1H), 3.90 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.83 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 2.88-2.64 (m, 3H), 2.40 (qd, J = 13.2, 4.9 Hz, 1H), 2.07-2.01 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 2H), 1.47-1.17 (m, 4H).
Primer 114: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion (I-133)
[1165]
[1166] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-15; 80 mg; 0,22 mmol) i 3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-karbaldehid (51-3; 38,3 mg; 0,34 mmol) u TFE (1,0 mL) je dodat NaBH(OAc)3(316 mg; 0,45 mmol) u jednoj porciji.
Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati, a zatim je filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOH:EtOAc (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u DMC da bi se dobio I-133 (72 mg; 0,16 mmol; prinos 70%) u vidu bele čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 456,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.68 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.02-6.96 (m, 2H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.37-4.20 (m, 2H), 4.18-4.06 (m, 1H), 2.97 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.79-2.59 (m, 3H), 2.36-2.17 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 2H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.89 (d, J = 2.7, Hz, 6H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.36-1.13 (m, 4H).
Primer 115: 3-(5-((2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-134)
[1167]
Korak 1.5-((2-oksocikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (115-3)
[1168] 5-hidroksiizobenzofuran-1(3H)-on (115-2; 415 mg, 2,76 mmol), 2-bromocikloheksanon (115-1; 508 mg; 2,87 mmol) i kalijum karbonat (807 mg, 5,84 mmol) tretirani su sa DMF (10 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana.
Reakciona smeša je zatim razblažena etil acetatom (150 mL) i isprana sa 0,5 M LiCl (vod.) (2 x 20 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i slanim rastvorom (25 mL). Organska faza je prikupljena, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heksanu da bi se dobio 115-3 (471 mg; 1,72 mmol; prinos 62%) u vidu čvrste supstance bež boje. MS [M+H]<+>= 247,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.29 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 4.87 (dd, J = 10.7, 5.7 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.52 (t, J = 13.7 Hz, 2H), 2.26-2.00 (m, 3H), 1.87 (q, J = 12.5 Hz, 2H).
Korak 2.5-(((1R,2R)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on ili 5-(((1S,2S)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (115-5)
[1169] 5-((2-oksocikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (115-3; 151 mg; 0,613 mmol), 3,3-difluoropirolidin hidrohlorid (115-4; 101 mg; 0,704 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (194 mg; 0,915 mmol) rastvoren je u DMF (2 mL) pod atmosferom azota i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim razblažena etil acetatom (80 mL) i vodom (20 mL). Smeša je bazifikovana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je ispran sa 0,5 M rastvorom litijum hlorida (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), osušen iznad magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (sa 0,1% NEt3) u heptanu (sa 0,1% NEt3) da bi se dobila smeša trans proizvoda (58 mg; 0,17 mmol; prinos 28%) u vidu bezbojnog ulja. Izolovani trans proizvodi su razdvojeni hiralnom SFC (Metod 2,1 x 25,0 cm Chiralpak AD-H, CO2Ko-rastvarač:
MeOH/i-PrOH (1:1); Izokratska metoda: 10% Ko-rastvarač pri 80 g/min; 100 bara, 25°C). Vršna vrednost 1 je izolovana da bi se dobio jedan enantiomer 115-5 (20 mg; 0,059 mmol; prinos 10%). MS [M+H]<+>= 338,5.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.52-4.31 (m, 1H), 3.10 (dq, J = 37.3, 12.1 Hz, 2H), 2.99-2.82 (m, 2H), 2.79-2.62 (m, 1H), 2.30-2.09 (m, 3H), 2.09-1.94 (m, 1H), 1.86-1.71 (m, 2H), 1.51-1.30 (m, 4H). Vršna vrednost hiralne SFC 1: Rt = 1.91 min.
Apsolutna stereohemija nije određena.
Korak 3. Pojedinačni enantiomer etil 2-(hlorometil)-4-((-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)benzoata (115-6)
[1170] pojedinačnom enantiomeru 5-((-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (115-5; Vršna vrednost 1; 20 mg; 0,060 mmol) rastvorenom u EtOH (1 mL) je dodat tionil hlorid (30 µL; 0,41 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C tokom 16 sati. Dodato je još tionil hlorida (50 µL; 0,69 mmol) i mešanje je nastavljeno na 70°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i neutralizovana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodena smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 x 15 mL) i kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (10 mL), osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 115-6 (20 mg; 43 µmol, prinos 71%) u vidu gume boje ćilibara. MS [M+H]<+>= 402,5.
Korak 4. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-134)
[1171] Smeša pojedinačnog enantiomera etil 2-(hlorometil)-4-((-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)benzoata (115-6; 20,4 mg; 0,051 mmol) u DMF (0,5 mL) i DIPEA (40 µL; 0,23 mmol) je tri puta pročišćena azotom. Zatim je u jednoj porciji dodat 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 14 mg; 0,083 mmol) i reakciona smeša je ponovo pročišćena azotom i mešana na 80°C tokom 2 sata, a zatim na 110°C tokom 27 sati. Reakciona smeša je zatim razblažena etil acetatom (40 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-134 (6,0 mg; 0,014 mmol; prinos 27%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 448,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.58-4.50 (m, 1H), 4.44-4.20 (m, 2H), 3.20-3.06 (m, 1H), 3.06-2.88 (m, 2H), 2.88-2.80 (m, 2H), 2.66-2.55 (m, 2H), 2.38 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.24-2.08 (m, 2H), 2.05-1.93 (m, 2H), 1.93-1.82 (m, 1H), 1.63 (s, 2H), 1.52-1.18 (m, 4H).
Primer 116: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (I-135)
[1172]
Korak 1: 2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-ol (116-2)
[1173] U rastvor propan-1,2,3-triola (116-1; 5,00 g, 54,3 mmol) u THF (120 mL), dodati su imidazol (8,13 g; 119 mmol) i TBS hlorid (16,4 g; 109 mmol) na 0°C i mešani su na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je razblažena hladnom vodom, ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom, slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 15% EtOAc u heksanu da bi se dobio 116-2 (14,0 g; 43,7 mmol; prinos 80%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 4.59-4.61 (m, 1H), 3.52-3.32 (m, 5H), 0.86 (s, 18H), 0.03 (s, 12H).
Korak 2: 3-((2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-il)oksi)piridin (116-4)
[1174] U mešani rastvor 2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-ola (116-2; 4,05 g; 12,6 mmol), piridin-3-ola (116-3; 1,00 g; 10,5 mmol) i PPh3(3,30 g; 12,6 mmol) u THF (50 mL), na 0°C dodat je DIAD (2,55 g; 12,6 mmol) u kapima i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je ugašena hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su isprane vodom, slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće.
Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 20-40% EtOAc u heksanu da bi se dobio 116-4 (1,60 g; 4,02 mmol; prinos 38%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.35-8.31 (m, 1H), 8.21-8.18 (m, 1H), 7.30-7.15 (m, 2H), 4.39-4.35 (m, 1H), 3.87-3.76 (m, 4H), 0.88 (s, 18H), 0.02 (s, 12H).
Korak 3: 2-(piridin-3-iloksi)propan-1,3-diol (116-5)
[1175] U mešani rastvor 3-((2,2,3,3,9,9,10,10-oktametil-4,8-dioksa-3,9-disilaundekan-6-il)oksi)piridina (116-4; 1,60 g; 4,02 mmol) u MeOH (30 mL) na 0°C dodata je u kapima koncentrovana HCl (3,20 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata.
Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je razblažen sa hladnom vodom, bazifikovan sa NaHCOs i vodena smeša je koncentrovana do suvoće.
Dobijeni ostatak je mešan sa 10% MeOH u DCM, filtriran i filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio 116-5 (0,800 g), u vidu bledo braon ulja. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. [M+H]<+>=170,20.
Korak 4: 2-(piridin-3-iloksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (116-6)
[1176] U rastvor 2-(piridin-3-iloksi)propan-1,3-diola (116-5; 0,80 g; 4,73 mmol) u DCM (40 mL), Et3N (1,91 g; 18,9 mmol) na 0°C dodat je DMAP (0,190 g; 1,56 mmol) i tozil hlorid (2,25 g; 11,8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je ugašena hladnom vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane vodom, slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 50% EtOAc u heksanu da bi se dobio 116-6 (1,30 g; 2,72 mmol; prinos 58%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 478,10.
Korak 5.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (I-135)
[1177] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-15; 200 mg; 0,56 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je dodat 2-(piridin-3-iloksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (116-6; 401 mg; 0,84 mmol) i DIPEA (0,43 g; 3,36 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: LUNA C18 (250 mm x 21,2 mm), 5,0µ, Mobilna faza A: 0,01% HCOOH (vod.), Mobilna faza B: acetonitril; Metoda: 0/10, 2/10, 8/50. Protok: 20 ml/min). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-135 (25 mg; 0,05 mmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 491,20.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96 (s, 1H), 8.18-8.13 (m, 2H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31-7.23 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.41-4.22 (m, 3H), 3.78-3.73 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 2H), 3.09-3.08 (m, 1H), 2.94-2.87 (m, 1H), 2.85-2.32 (m, 4H), 2.07-1.98 (m, 2H), 1.98-1.81 (m, 1H), 1.66-1.64 (m, 2H), 1.36-1.23 (m, 2H).
Primer 117: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-136)
[1178]
[1179] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-29; 12 mg; 0,032 mmol) u DCM (0,5 mL) je dodat 3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-karbaldehid (51-3; 7,4 mg; 0,065 mmol). Natrijum triacetoksiborhidrid (21 mg; 0,097 mmol) je dodat i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC metode reverznih faza (Metoda Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL;
Gradijent: 35-60% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže nekoliko kapi mravlje kiseline). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-136 (6,0 mg; 11 mmol; prinos 34%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.01 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.04 (ddd, J = 13.3, 5.1, 2.2 Hz, 1H), 4.60-4.48 (s, 1H), 4.32-4.17 (m, 2H), 3.35-3.23 (m, 1H), 2.84-2.67 (m, 4H), 2.61-2.50 (m, 2H), 2.34-2.19 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.97-1.83 (m, 8H), 1.75-1.59 (m, 3H), 1.55-1.41 (m, 1H), 0.94 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Primer 118: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(4-oksopiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-137)
[1180]
[1181] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 99 mg; 0,14 mmol) je rastvoren u DMA (1 mL) i dodat je DIPEA (0,07 mL; 0,4 mmol), a zatim rastvor 1,5-dihloropentan-3-ona (78-1; 21 mg; 0,14 mmol) u DMA (1 mL). Dobijena smeša je mešana na 85°C tokom 2 sata, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Dodato je još 1,5-dihloropentan-3-ona (78-1; 21 mg; 0,14 mmol) u DMA (200 uL) i mešanje je nastavljeno na 85°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, dodat je DIPEA (0,07 mL; 0,4 mmol) i smeša je zagrevana na 85°C tokom 5 sati. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCOs i ekstrahovana sa DCM: i-PrOH (4:1). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% i-PrOH u DCM da bi se dobio I-137 (11 mg; 0,024 mmol; 18%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 426,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23-7.18 (m, 1H), 7.08-7.03 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.83-4.76 (m, 1H), 4.43-4.33 (m, 1H), 4.33-4.22 (m, 1H), 3.16-3.07 (m, 1H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.78 (t, J = 6.1 Hz, 4H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.44-2.29 (m, 5H), 2.18-2.04 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 2H), 1.77-1.61 (m, 3H), 1.61-1.49 (m, 1H).
Primer 119: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC( O)OH so (I-138)
[1182]
[1183] 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 70,0 mg; 0,153 mmol) je rastvoren u MeCN (1 mL) i dodat je DIPEA (0,16 mL; 0,92 mmol), a zatim rastvor 3-hidroksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (44-2; 203 mg; 0,459 mmol ) u MeCN (1 mL) i dobijeni rastvor je mešan na 75°C preko noći.
Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Metoda Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NE4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-138 (11,0mg; 22,0 µmol; prinos 14%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 442,6.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 5.10-5.02 (m, 1H), 4.73-4.66 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.1, 9.3 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 7.9 Hz, 1H), 4.06 (s, 1H), 2.97-2.84 (m, 2H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.48-2.34 (m, 5H), 2.11-1.87 (m, 3H), 1.72-1.55 (m, 3H), 1.54-1.37 (m, 5H), 1.07 (s, 3H).
Primer 120: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-139)
[1184]
[1185] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-12; 56,0 mg; 0,163 mmol) rastvoren u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,17 mL; 0,98 mmol), a zatim rastvor 1,4-dihlorobutan-2-ola (139-1; 70,0 mg; 0,489 mmol) u MeCN (1 mL) i dobijena smeša je mešana na 75°C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i dodato je još DIPEA (0,17 mL; 0,98 mmol) i 1,4-dihlorobutan-2-ol (139-1; 70,0 mg; 0,489 mmol). Reakciona smeša je mešana na 75°C preko noći i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona metode: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min gradijent; epruvete za sakupljanje sadržale su ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-139 (13 mg; 25 µmol; prinos 16%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 414,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17-7.13 (m, 1H), 7.02 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 5.10-5.02 (m, 1H), 4.73-4.59 (m, 2H), 4.39 (dd, J = 17.2, 8.1 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 6.7 Hz, 1H), 4.18-4.10 (m, 1H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.80-2.71 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.46-2.35 (m, 3H), 2.19-2.08 (m, 1H), 2.02-1.85 (m, 3H), 1.73-1.45 (m, 5H).
Primer 120: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I- 52)
[1186]
[1187] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-12; 65,0 mg; 0,142 mmol) rastvoren u MeCN (1 mL) dodata je DIPEA (0,10 mL; 0,57 mmol), nakon čega i rastvor (((1,3-dibromopropan-2-il)oksi)metil)benzena (120-1; 109 mg; 0,354 mmol) u MeCN (1 mL). Dobijeni rastvor je mešan na 75°C. Nakon potpunog trošenja početnih materijala, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, azeotropirana toluenom (2x) i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-52 (4,70 mg; 8,60 µmol; prinos 6%) u vidu čvrste staklaste supstance. MS [M+H]<+>= 490,6.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.11-8.03 (m, 1H), 7.81-7.75 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 3H), 7.32-7.27 (m, 2H), 6.98-6.92 (m, 2H), 5.25-5.14 (m, 1H), 5.06-4.99 (m, 1H), 4.55-4.40 (m, 5H), 4.40-4.26 (m, 2H), 3.83 (s, 1H), 3.73-3.59 (m, 2H), 2.97-2.77 (m, 2H), 2.43-2.27 (m, 2H), 2.26-2.18 (m, 1H), 2.18-2.08 (m, 1H), 1.99-1.87 (m, 1H), 1.87-1.68 (m, 3H).
Primer 121: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HCl so (I-141)
[1188]
[1189] 2-(hlorometil)-2-metiloksiran (121-1; 20,0 mg; 0,188 mmol) je dodat u rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin- 2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 56,0 mg; 0,163 mmol) u TFE (0,75 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana, zatim zagrevana na 50°C i mešana na 50°C tokom 6 sati. Reakciona smeša je zatim zagrevana na 70°C preko noći uz mešanje, ohlađena do sobne temperature i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je trituriran sa acetonom (x3) i dobijena čvrsta supstanca je osušena pod vakumom da bi se dobila so HCl I-141 (28,0 mg; 57,0 µmol; prinos 35%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje. MS [M+H]<+>= 414,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.14-5.01 (m, 1H), 4.94-4.75 (m, 1H), 4.47-4.36 (m, 1H), 4.34-4.18 (m, 1H), 4.17-3.81 (m, 4H), 2.98-2.83 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.21-2.10 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 1H), 1.87-1.53 (m, 5H), 1.51-1.30 (m, 3H).
Primer 122: 3-(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-142)
[1190]
[1191] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 80,0 mg; 0,175 mmol) rastvoren u TFE (1,5 mL) je dodat izobutiraldehid (17-1a; 16 µL; 0,18 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (74 mg; 0,35 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodavani su izobutiraldehid (17-1a; 16 µL; 0,18 mmol), TFE (1 mL) i natrijum triacetoksiborohidrid (74 mg; 0,35 mmol) dok se ne primeti potpuna potrošnja I-12. Reakciona smeša je zatim sipana u zasićeni NaHCOs (vod.) (2 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-142 (45,0 mg; 0,107 mmol; prinos 61%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 400,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21-7.16 (m, 1H), 7.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.1, 4.7 Hz, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.38 (dd, J = 17.1, 9.5 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 8.3 Hz, 1H), 3.10 (s, 1H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.63-2.53 (m, 1H), 2.44-2.34 (m, 2H), 2.18-2.05 (m, 1H), 2.02-1.87 (m, 2H), 1.79-1.54 (m, 5H), 1.53-1.38 (m, 1H), 0.87 (d, J = 6.5 Hz, 6H).
Primer 123: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-143)
[1192]
[1193] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-29; 30,0 mg; 81,0 µmol) u DCE (1 mL) je dodat paraformaldehid (13,0 mg; 0,433 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (20,0 mg; 94,0 µmol) i sirćetna kiselina (1 µL; 17,0 µl) i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Reakciona smeša je zatim sipana u zasićeni NaHCO3(vod.) (2 mL) i ekstrahovana sa i-PrOH:DCM (1:9) (x4). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-143 (16,0 mg; 39,0 µmol; prinos 49%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 386,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.39 (dd, J = 17.1, 10.3 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 8.5 Hz, 1H), 3.12-2.97 (m, 1H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 2H), 2.45-2.34 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.10-2.02 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.93-1.81 (m, 1H), 1.74-1.57 (m, 3H), 1.50 (s, 1H), 0.97 (s, 3H).
Primer 124: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-144)
[1194]
Korak 1. ((3R,4S)-tetrahidrofuran-3,4-diil)dimetanol (124-2)
[1195] U cis-tetrahidrofuran-3,4-dikarboksilnu kiselinu (124-1; 690 mg; 4,31 mmol) u THF (8 mL) na 0°C i pod atmosferom azota dodat je BH3(17,2 mL; 17,2 mmol) (1M u THF) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim ugašena sa MeOH (2 mL) na 0°C i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 124-2 u vidu bezbojnog ulja. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.28-4.12 (m, 2H), 4.00-3.87 (m, 2H), 3.82-3.65 (m, 2H), 3.59-3.44 (m, 2H), 1.64-1.48 (m, 2H), 1.48-1.32 (m, 2H).
Korak 2. ((3R,4S)-tetrahidrofuran-3,4-diil)bis(metilen) dimetansulfonat (124-3)
[1196] U sirovi ((3R,4S)-tetrahidrofuran-3,4-diil)dimetanol (124-2; 569 mg; 4,31 mmol) u DIPEA (3,15 mL; 18,1 mmol) i DCM (10 mL) dodat je metansulfonil hlorid (0,733 mL; 9,47 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata, zatim razblažena sa H2O i ekstrahovana sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio 124-3 (1,21 g; 4,19 mmol; prinos 97%) u vidu ulja smeđe boje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.41-4.34 (m, 2H), 4.32-4.25 (m, 2H), 4.04-3.96 (m, 2H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.08 (s, 6H), 2.92-2.80 (m, 2H).
Korak 3.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-144)
[1197] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 500 mg; 1,46 mmol), DIPEA (1,3 mL; 7,3 mmol) i TBAI (27 mg; 0,073 mmol) u DMF (5 mL) je dodat ((3R,4S)-tetrahidrofuran-3,4-diil)bis(metilen) dimetansulfonat (124-3; 1,05 g; 3,64 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80°C tokom 55 sati. Reakciona smeša je zatim koncentrovana i dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-144 (30,4 mg; 68,0 umol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance svetlo bež boje. MS [M+H]<+>= 440,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.66 (dd, J = 8.6, 4.2 Hz, 1H), 7.00-6.88 (m, 2H), 5.19-4.96 (m, 1H), 4.74-4.57 (m, 1H), 4.38-4.14 (m, 2H), 3.77-3.60 (m, 2H), 3.55-3.41 (m, 2H), 2.89-2.60 (m, 7H), 2.49-2.31 (m, 2H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.16-2.03 (m, 2H), 2.02-1.85 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 3H), 1.62-1.50 (m, 1H).
Primer 125: So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O) OH (I-145)
[1198]
[1199] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 71,6 mg; 0,184 mmol) i pikolinaldehid (68-1; 22,9 mg; 0,214 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (55,3 mg; 0,261 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodavani su pikolinaldehid (68-1; 20 mg; 0,19 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (39 mg; 0,18 mmol) dok se nije primetio potpuni nestanak I-12. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi reakcioni materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-145 (49,8 mg; 0,103 mmol; prinos 56%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 435,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.53-8.45 (m, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.74 (tt, J = 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.63-7.57 (m, 1H), 7.47-7.40 (m, 1H), 7.27-7.20 (m, 1H), 7.14 (dd, J = 4.1, 2.2 Hz, 1H), 7.06-6.92 (m, 1H), 5.07 (ddd, J = 13.3, 5.1, 2.4 Hz, 1H), 4.72-4.64 (m, 1H), 4.45-4.19 (m, 2H), 3.97-3.82 (m, 2H), 3.21-3.15 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 18.2, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.44-2.34 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 1H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.83-1.60 (m, 3H), 1.59-1.47 (m, 1H).
Primer 126: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-146)
[1200]
[1201] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u MeCN (3 mL) je dodat 1,4-dibromobutan (66-1; 0,035 mL, 0,29 mmol) i DIPEA (0,11 mL, 0,64 mmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i zatim dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i organski rastvarač je koncentrovan do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-146 (47 mg; 12 µmol; prinos 39%), u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 398,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 12.8, 5.2 Hz, 1H), 4.79-4.68 (m, 1H), 4.44-4.20 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.0, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.83-2.70 (s, 1H), 2.65-2.50 (m, 4H, prikriven DMSO-signalom), 2.39 (td, J = 13.2, 4.4 Hz, 2H), 2.21-2.10 (s, 1H), 2.02-1.88 (d, J = 14.4 Hz, 2H), 1.75-1.51 (m, 8H).
Primer 127: 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (I-147)
[1202]
[1203] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12, 30 mg, 0,087 mmol) u MeCN (2 mL) je dodat DIPEA (0,076 mL; 0,44 mmol), a zatim 3,3-bis(bromometil)oksetan (47-1; 64 mg; 0,26 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80°C tokom 2 dana. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i dodato je još 3,3-bis(bromometil)oksetana (47-1; 64 mg; 0,26 mmol) i DIPEA (0,076 mL; 0,44 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 3 dana i zatim koncentrovana do suvoće, rastvorena u DCM, i sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3. Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3). Dobijeni proizvod je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM (x2). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio I-147 (13 mg; 0,027 mmol; prinos 32%) u vidu čvrste supstance svetlo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 426,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.01 (dt, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.60-4.54 (m, 4H), 4.50 (dd, J = 6.1, 2.2 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 17.2, 2.9 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 3.30-3.26 (m, 4H, oslanjanje na H2O signalu), 2.96-2.84 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.12-2.02 (m, 1H), 2.03-1.90 (m, 1H), 1.79-1.52 (m, 4H), 1.40-1.30 (m, 1H).
Primer 128: 3-(5-(((1S,2S)-2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-148)
[1204]
[1205] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 146 mg; 0,130 mmol) u DMF (1 mL) dodat je 3-metiloksetan-3-karbaldehid (50-1; 40 mg; 0,39 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (83 mg; 0,39 mmol).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodati su 3-metiloksetan-3-karbaldehid (50-1; 50 mg; 0,49 mmol) i natrijum triacetoksihidroborat (60 mg; 0,28 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 16 sati. Dodati su 3-metiloksetan-3-karbaldehid (50-1; 50 mg, 0,490 mmol) i natrijum triacetoksihidroborat (60 mg; 0,28 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 8 sati. Reakciona smeša je zatim koncentrovana na Celite<®>, uz azeotropiju sa heptanima (x2). Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio I-148 (98,0 mg; 0,186 mmol; prinos 91%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 512,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.02 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 14.0, 4.4 Hz, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.46-4.19 (m, 6H), 4.12 (d, J = 5.6 Hz, 4H), 2.88 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 2.59 (d, J = 13.2 Hz, 4H), 2.45-2.27 (m, 2H), 2.10-1.92 (m, 2H), 1.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 1.73-1.39 (m, 4H), 1.27 (s, 6H).
Primer 129: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-149)
Korak 1.3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (129-2)
[1207] U rastvor 3-metilpentan-1,5-diola (129-1; 650 mg, 5,50 mmol) u MeCN (15 mL) dodat je DMAP (100 mg; 0,819 mmol) i TEA (3,1 mL; 22 mmol), zatim TsCl (3,00 g; 15,7 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobio 129-2 (2,27 g; 5,32 mmol; prinos 97%) u vidu ulja svetlo žute boje. MS [M+H2O]<+>= 444,5.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.76 (m, 4H), 7.35 (dd, J = 8.7, 0.7 Hz, 4H), 4.05-3.97 (m, 4H), 2.46 (s, 6H), 1.70-1.58 (m, 3H), 1.49-1.36 (m, 2H), 0.78 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-149)
[1208] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminocikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 75,0 mg; 0,218 mmol) u MeCN (2 mL) je dodat DIPEA (0,23 mL; 1,3 mmol), a zatim 3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (129-2; 466 mg, 1,09 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 1 sat. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem 0-10% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3). Dobijeni proizvod je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCO3(vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio I-149 (36,0 mg; 0,080 mmol; prinos 37%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 426,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.73-4.66 (m, 1H), 4.45-4.18 (m, 2H), 2.97-2.76 (m, 3H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.10-1.83 (m, 5H), 1.75-1.42 (m, 5H), 1.37-1.19 (m, 2H), 1.17-1.01 (m, 2H), 0.99-0.92 (m, 1H), 0.86 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Primer 130: So 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O) OH (I-150)
[1209]
[1210] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u MeCN (3 mL) je dodat 3-(bromometil)piridin HBr (130-1; 73,7 mg; 0,291 mmol) i DIPEA (0,11 mL; 0,64 mmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i zatim dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i organski rastvarač je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3). Dobijeni materijal je tretiran sa 1: 1 MeCN/dietil etar. Dobijena suspenzija je sonikirana i filtrirana, a dobijena čvrsta supstanca je isprana dietil etrom. Filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće. Dobijeni materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-150 (8,0 mg; 0,016 mmol; prinos 5%). MS [M+H]<+>= 435,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.43 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.76 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.04-6.96 (m, 1H), 5.11-5.02 (m, 1H), 4.69-4.64 (m, 1H), 4.42-4.21 (m, 2H), 3.87-3.75 (m, 2H), 3.18-3.12 (m, 2H), 2.91 (ddd, J = 17.7, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.20-2.09 (m, 1H), 2.02-1.88 (m, 2H), 1.80-1.60 (multipleti, 3H), 1.58-1.48 (m, 1H).
Primer 131: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-151 )
[1211]
[1212] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u TFE (3 mL) je dodat izonikotinaldehid (57-1; 31 mg, 0,29 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (93 mg; 0,44 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz kolonu za separaciju faza i organski rastvarač je isparavan i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min gradijent) da bi se dobio sirovi materijal. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-151 (10,0 mg; 0,022 mmol; prinos 8%), u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 435,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm); 10.96 (s, 1H), 8.56-8.43 (m, 2H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45-7.33 (m, 2H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.05-6.98 (m, 1H), 5.12-5.02 (m, 1H), 4.72-4.57 (br m, 1H), 4.43-4.20 (m, 2H), 3.78 (br s, 2H), 3.14-3.04 (m, 1H), 2.99-2.82 (m, 1H), 2.60 (d, J = 17.6 Hz, 2H), 2.39 (br d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.23-2.10 (br m, 1H), 2.04-1.86 (m, 2H), 1.84-1.45 (br m, 4H).
Primer 132: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -152)
[1213]
[1214] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 50,0 mg; 0,146 mmol) u MeCN (1,5 mL) je dodata DIPEA (0,13 mL; 0,73 mmol), a zatim 3-metoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (44-3; 165 mg; 0,361 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 1 sata.
Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće, dobijeni ostatak rastvoren je u DCM i ispran sa zasićenim NaHCO3(vod.) i faze su razdvojene. Vodeni sloj je ekstrahovana sa DCM i kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-152 (22,0 mg; 0,046 mmol; prinos 32%), u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 456,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.4, 5.0 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.47-4.17 (m, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.59 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 2.45-2.28 (m, 5H), 2.11-1.85 (m, 3H), 1.72-1.55 (m, 5H), 1.43 (s, 3H), 1.06 (s, 3H).
Primer 133: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-153)
[1215]
Korak 1.3,3-dimetilpentan-1,5-diol (133-2)
[1216] U rastvor 3,3-dimetilpentandiojeve kiseline (133-1; 600 mg; 3,75 mmol) u THF (15 mL) ohlađenom na -20°C polako je dodat BH3(1M u THF) (9,4 mL; 9,4 mmol) i dobijena smeša je mešana na -20°C, zatim zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i ugašena vodom (8 mL). K2CO3je dodat i vodena smeša je ekstrahovana sa Et2O (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio sirovi 133-2 (516 mg) u obliku svetlo žutog ulja. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.75 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.58 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 0.95 (s, 6H).
Korak 2.3,3-dimetilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (133-3)
[1217] U rastvor 3,3-dimetilpentan-1,5-diola (133-2; 516 mg; 3,90 mmol) u MeCN (20 mL) dodat je DMAP (238 mg; 1,95 mmol) i TEA (2,2 mL; 16 mmol) a zatim TsCl (1,86 g; 9,76 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobio 133-3 (860 mg; 1,95 mmol; prinos 50%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 441,5.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.75 (m, 4H), 7.38-7.33 (m, 4H), 4.03 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 2.46 (s, 6H), 1.56 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 0.85 (s, 6H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-153)
[1218] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S) -2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 50,0 mg; 0,146 mmol) u MeCN (2 mL) je dodat DIPEA (0,13 mL; 0,73 mmol), a zatim 3,3-dimetilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (133-3; 96,0 mg, 0,218 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 3 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim vodenim NaHCOs. Faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana sa DCM, a kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-153 (26 mg; 0,056 mmol; prinos 39%), u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 440,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.39 (dd, J = 17.1, 9.9 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 8.1 Hz, 1H), 2.96-2.81 (m, 2H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.47-2.30 (m, 5H), 2.12-1.86 (m, 3H), 1.72-1.55 (m, 3H), 1.56-1.41 (m, 1H), 1.37-1.23 (m, 4H), 0.88 (s, 6H).
Primer 134: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-154)
[1219]
Korak 1. Dietil 3-metoksipentandioat (134-2)
[1220] Smeši dietil 3-hidroksigluturata (134-1; 0,455 mL; 2,45 mmol) i srebro oksida (1,42 g; 6,12 mmol) u DMF (5 mL), dodat je u kapima metil jodid (0,77 mL; 12 mmol), reakciona temperatura je održavana na 25-30°C pomoću vodenog kupatila. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona smeša je filtrirana i formirani talog je ispran dietil etrom. Filtrat je ispran sa 5% NaHSOs (vod.) i slanim rastvorom, a organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 134-2 (440 mg; 2,02 mmol; prinos 82%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.25-4.13 (m, 4H), 4.13-4.05 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.71-2.51 (m, 4H), 1.36-1.21 (m, 6H).
Korak 2.3-metoksipentan-1,5-diol (134-3)
[1221] U rastvor dietil 3-metoksipentandioata (134-2; 250 mg; 1,15 mmol) u THF (20 mL) ohlađenom na 0°C polako je dodat 1M litijum aluminijum hidrida u THF (3,44 mL; 3,44 mmol) i dobijena smeša je mešana na 0°C, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, ugašena zasićenim Na2SO4(vod.) i filtrirana. Dobijeni talog je ispran dietil etrom. Filtrat je ispran sa 5% NaHSO3(vod.) i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan do suvoće da bi se dobio 134-3 koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 3.3-metoksipentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (134-4)
[1222] U rastvor 3-metoksipentan-1,5-diola (134-3; 92,0 mg; 0,686 mmol) u MeCN (5 mL) dodat je DMAP (42 mg; 0,34 mmol) i TEA (0,38 mL; 2,7 mmol), a zatim TsCl (327 g; 1,71 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Dobijeni ostatak je tretiran dietil etrom i filtriran. Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 134-4 (40,0 g; 0,090 mmol; prinos 13%) u vidu ulja svetlo žute boje. MS [M+H2O]<+>= 460,5.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.81-7.76 (m, 4H), 7.38-7.32 (m, 4H), 4.13-4.01 (m, 4H), 3.42-3.32 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.45 (s, 6H), 1.84-1.68 (m, 4H).
Korak 4.3-(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-154)
[1223] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 31 mg; 0,090 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,047 mL; 0,27 mmol), a zatim 3-metoksimetilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (134-4; 40 mg; 0,090 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi ostatak je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCO3(vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM.
Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-10% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-154 (11 mg; 0,022 mmol; prinos 25%), u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 442,6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.73-4.66 (m, 1H), 4.45-4.18 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.17-3.09 (m, 1H), 2.97-2.81 (m, 2H), 2.79-2.66 (m,1H), 2.59 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 2.44-2.34 (m, 1H), 2.22-1.86 (m, 5H), 1.86-1.74 (m, 2H), 1.72-1.54 (m, 4H), 1.53-1.31 (m, 3H).
Primer 135: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-155)
[1224]
[1225] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-29; 0,18 g; 0,49 mmol) i oksetan-3-karbaldehid (135-1, 60 mg, 0,73 mmol) u DCE (10 mL) na 0°C je dodat NaBH(OAc)3(0,15 g; 0,73 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobilo jedinjenje I-155 (70 mg; 0,16 mmol; 33%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 442,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.10-5.05 (m, 1H), 4.66-4.62 (m, 1H), 4.57-4.53 (m, 2H), 4.37-4.25 (m, 2H), 4.21-4.18 (m, 2H), 3.22-3.12 (m, 2H), 2.92-2.89 (m, 1H), 2.75-2.72 (m, 2H), 2.60-2.55 (m, 1H), 2.46-2.32 (m, 3H), 2.05-1.95 (m, 2H), 1.90-1.88 (m, 1H), 1.66-1.62 (m, 3H), 1.52-1.49 (m,1H), 0.96-0.93 (m, 3H).
Primer 136: 3-(5-(((1S,2S)-2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-156)
[1226]
[1227] U mešani rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,580 mmol) i DIPEA (0,300 mL; 1,74 mmol) u DMF (10 mL) je dodat 1,2-bis(bromometil)benzen (136-1; 230 mg; 0,860 mmol), zatim TBAI (20 mg; 0,060 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana zasićenim vodenim NaHCs i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 10% MeOH u DCM nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: ZOBRAX ECLIPS XDB C18 (150 x 21,5 µm), Mobilna faza A: 0.01% TFA (vod.), Mobilna faza B: MeCN, Vreme (min)/%B: 0/25, 2/35, 9/65, Protok: 18 ml/min) da bi se dobilo I-156 (15 mg; 0,03 mmol; prinos 6%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 446,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.98 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 5H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.10-5.06 (m, 1H), 4.86-4.84 (m, 1H), 4.42 (d, J = 17.2, 1H), 4.28 (d, J = 17.2, 1H), 3.96-3.87 (m, 3H) 3.20-3.16 (m, 1H), 2.95-2.86 (m, 1H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.40-2.32 (m, 2H), 2.21-2.10 (m, 1H), 2.08-1.96 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 4H).
Primer 137: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-157)
[1228]
[1229] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 50,0 mg; 0,146 mmol) u MeCN (1,5 mL) je dodat DIPEA (0,15 mL; 0,87 mmol), a zatim 2-metoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (52-3; 177 mg; 0,427 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i sirovi ostatak je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM.
Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-157 (13,0 mg; 0,028 mmol; prinos 19%) u vidu providne staklaste čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 414,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.56-4.50 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 17.2, 3.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 3.6 Hz, 1H), 3.97-3.87 (m, 1H), 3.54-3.44 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.89-2.78 (m, 3H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.43-2.35 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 1H), 1.82-1.72 (m, 1H), 1.72-1.55 (m, 3H), 1.44-1.35 (m, 1H).
Primer 138: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -158)
[1230]
Korak 1.3-etoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (138-1)
[1231] U rastvor 3-hidroksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (44-2; 250 mg; 0,565 mmol) i Proton-sponge<®>(242 mg; 1,13 mmol) u DCM je dodat trietiloksonijum tetrafluoroborat (1M u DCM) (1,1 mL; 1,1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodato je još trietiloksonijum tetrafluoroborata (1M u DCM) (1,1 mL; 1,1 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heptanu da bi se dobio 138-1 (61,0 mg; 0,130 mmol; prinos 23%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H2O]<+>= 488,4.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.80-7.75 (m, 4H), 7.37-7.33 (m, 4H), 4.11-4.01 (m, 4H), 3.18 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.45 (s, 6H), 1.88-1.72 (m, 4H), 1.08 (s, 3H), 1.00 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -158)
[1232] U rastvor 3-etoksi-3-metilpentan-1,5-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (138-1; 61 mg; 0,13 mmol) i 3-(5-(((1S,2S)-2- aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 40 mg; 0,12 mmol) u MeCN (1 mL) je dodat DIPEA (0,10 mL; 0,58 mmol) i rezultujući rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 12 sati. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće, a sirovi ostatak je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM.
Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-158 (10 mg; 0,019 mmol; prinos 16%) u vidu providne staklaste čvrste supstance. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20-7.14 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.73-4.65 (m, 1H), 4.43-4.19 (m, 2H), 3.30-3.24 (m, 3H, oslonjen na H2O signal), 2.98-2.81 (m, 2H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.47-2.34 (m, 4H), 2.11-1.88 (m, 3H), 1.73-1.55 (m, 5H), 1.54-1.35 (m, 3H), 1.10-1.00 (m, 6H).
Primer 139: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (I-159)
[1233]
[1234] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 0,20 g; 0,53 mmol) i (1r,4r)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (48-3; 0,15 g; 1,1 mmol) u TFE (10 mL) je dodat NaBH(OAc)3(0,17 g; 0,78 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-159 (22 mg; 0,050 mmol; 10%) u vidu čvrste supstance bledo zelene boje. [M+H]<+>= 470,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.12-5.05 (m, 1H), 4.58-4.52 (m, 1H), 4.38-4.25 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.19-2.87 (m, 3H), 2.62-2.51 (m, 2H), 2.38-2.32 (m, 2H), 2.13-2.09 (m, 1H), 1.98-1.95 (m, 4H), 1.79-1.62 (m, 5H), 1.42-1.28 (m, 3H), 1.05-0.72 (m, 4H).
Primer 140: (1S,4r)-4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril (I-160)
[1235]
Korak 1. Metil 4-karbamoilcikloheksan-1-karboksilat (140-2)
[1236] U ohlađeni rastvor (1r,4r)-4-(metoksikarbonil)cikloheksan-1-karboksilne kiseline (140-1; 5,00 g; 15,2 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) na -10°C je uzastopno dodavan TEA (7,2 mL; 38 mmol) i etil hloroformat (2,25 mL; 22,9 mmol) pod atmosferom azota i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim ohlađena na -10°C, dodat je amonijum hidroksid (25,0 mL; 91,2 mmol) i smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 ml). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (50 mL), osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 140-2 (4,80 g; 25,9 mmol; prinos 96%) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.18 (br s, 1H), 6.68 (br s, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.28-2.20 (m, 1H), 2.18-1.98 (m, 1H), 1.92-1.86 (m, 2H), 1.78-1.74 (m, 2H), 1.35-1.30 (m, 4H).
Korak 2. Metil 4-cijanocikloheksan-1-karboksilat (140-3)
[1237] U rastvor metil 4-karbamoilcikloheksan-1-karboksilata (140-2; 2,80 g; 11,4 mmol) u piridinu (28,0 mL) dodat je imidazol (0,790 g; 11,4 mmol) i fosfor oksihlorid (2,80 mL) u jednoj porciji na 0°C pod atmosferom azota i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa 2 M hlorovodoničnom kiselinom (vod.), osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 30% EtOAc u heksanu da bi se dobio 140-3 (1,60 g; 9,58 mmol; prinos 64%) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.67 (s, 3H), 2.48-2.33 (m, 2H), 2.16-2.02 (m, 4H), 1.69-1.48 (m, 4H).
Korak 3.4-(hidroksimetil)cikloheksan-1-karbonitril (140-4)
[1238] U rastvor metil 4-cijanocikloheksan-1-karboksilata (140-3; 1,00 g; 5,90 mmol) u MeOH (10 mL) na 0°C dodat je NaBH4(0,540 g; 14,8 mmol) u malim porcijama na 0°C i dobijena smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi 6 sati. Reakciona smeša je zatim ugašena ledeno hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (50 mL), osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 30% EtOAc u heksanu da bi se dobio 140-4 (0,520 g; 3,74 mmol; prinos 63%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.49-3.47 (m, 2H), 2.41-2.34 (m, 1H), 2.18-2.11 (m, 2H), 1.91-1.86 (m, 2H), 1.63-1.49 (m, 3H), 1.39-1.36 (m, 1H), 1.05-0.95 (m, 2H).
Korak 4.4-formicikloheksan-1-karbonitril (140-5)
[1239] U rastvor 4-(hidroksimetil)cikloheksan-1-karbonitrila (140-4; 0,400 g; 2,87 mmol) u DCM (20 mL) na 0°C dodat je PCC (1,23 g; 5,74 mmol) i dobijena smeša je mešano na sobnoj temperaturi 6 sati. Reakciona smeša je zatim filtrirana kroz Celite<®>i isprana sa DCM. Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 40% EtOAc u heksanu da bi se dobio 140-5 (0,150 g; 1,09 mmol, 38%) u vidu ulja bledo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.64 (s, 1H), 2.51-2.33 (m, 2H), 2.11-2.06 (m, 4H), 1.69-1.64 (m, 2H), 1.50-1.45 (m, 2H).
Korak 5. (1S,4r)-4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril (I-160)
[1240] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorida (I-12; 0,250 g; 0,658 mmol ) i (1r,4r)-4-formilcikloheksan-1-karbonitril (140-5; 0,135 g; 0,987 mmol) u DCE (10 mL) na 0°C je dodat NaBH(OAc)3(0,418 g; 1,97 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: KINETEX EVO C18, (21,2mm x 150mm), Mobilna faza: A: 0,01% amonijaka, B: acetonitril, Brzina protoka: 18 ml/min, Vreme (min)/%B 0/20, 2/30, 8/50) da bi se dobio 1-160 (0,020 g; 0,172 mmol; prinos 26%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 465,15.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.10-5.05 (m, 1H), 4.54-4.52 (m, 1H), 4.36-4.25 (m, 2H), 3.06-3.02 (m, 1H), 2.90-2.88 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 2H), 2.38-2.33 (m, 4H), 2.07-1.85 (m, 4H), 1.78-1.61 (m, 6H), 1.44-1.37 (m, 4H), 0.91-0.88 (m, 2H).
Primer 141: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion TFA so (I -161)
[1241]
[1242] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorida (I-12; 0,200 g; 0,526 mmol ) i 4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid (141-1; 0,112 g; 0,782 mmol) u TFE (10 mL) na 0°C je dodat NaBH(OAc)3(0,167 g; 0,782 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i dobijeni ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće.
Dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: KINETEX EVO C18 (150 mm x 21,0 mm), 5,0µ, Mobilna faza: 0,05% TFA u vodi (A): MeCN (B); Protok: 20 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/10, 2/20, 10/50) da bi se dobila TFA so I-161 (0,013 mg; 0,027 mmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bledo zelene boje. MS [M+H]<+>= 470,3.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.99 (s, 1H), 8.79 (br s, 2H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.40-4.24 (m, 2H), 3.71-6.62 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 3.08-3.04 (m, 1H), 2.95-2.86 (m, 3H), 2.55-2.35 (m, 2H), 2.22-2.15 (m, 2H), 2.02-1.95 (m, 3H), 1.80-1.62 (m, 5H), 1.07-0.96 (m, 4H).
z
[1243] Bočica µW od 2-5 mL je napunjena sa 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionom (I-12; 100 mg; 0,291 mmol), DIPEA (0,25 mL; 1,5 mmol), oksetan-3,3-diilbis(etan-2,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonatom) (87-6; 139 mg; 0,306 mmol) i MeCN (1 mL). Dobijena smeša je mešana 4 sati na 120°C pod µW zračenjem i zatim koncentrovana od suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min gradijent; sakupljene frakcije su sadržale ~ 1 kap mravlje kiseline) i zatim dalje prečišćene HPLC metodo reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-162 (2,0 mg; 4,7 µmol; prinos 1%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 454,5.<1>H NMR (400 MHz, Deuterijum oksid) δ 8.45 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.22-7.09 (m, 2H), 5.14 (ddd, J = 13.3, 5.3, 2.1 Hz, 1H), 5.05-4.95 (m, 1H), 4.64-4.44 (m, 6H), 3.87-3.71 (m, 1H), 3.43-3.06 (m, 3H), 3.00-2.84 (m, 2H), 2.53 (qd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 2.40-2.22 (m, 4H), 2.21-2.03 (m, 3H), 1.92-1.72 (m, 5H).
Primer 143: 3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1 -metilciklobutan-1-karbonitril HC(O)OH so (I-163) i (1R,3S)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril i (1S,3R)-3-((((1S,2S)-2- ((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril (I-164 i 1- 165)
[1244]
[1245] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-29; 91 mg; 0,25 mmol) u TFE (1 mL) je dodat 3-formil-1-metilciklobutan-1-karbonitril (77-4; 91 mg; 0,74 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (156 mg; 0,735 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodavani su 3-formil-1-metilciklobutan-1-karbonitril (77-4; 120 mg) i natrijum triacetoksiborohidrid (170 mg; 0,80 mmol) sve dok nije uočena potpuna potrošnja I-29. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-163 (38 mg; 0,078 mmol; prinos 32%) u vidu čvrste supstance bele boje, kao mešavina dijastereoizomera. MS [M+H]<+>= 479,5. So (3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)- 1-metilciklobutan-1-karbonitril HC(O)OH (I-163; 34 mg) je prečišćena korišćenjem hiralnog SFC (Kolona: Chiralpak IH 21x250 mm; Protok: 80 g u minuti; Korastvarač: 30% i-PrOH sa 10 mM NH3) nakon čega sledi prečišćavanje pomoću HPLC metode reverzih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min gradijent) da bi se dobila dva dijastereomerna proizvoda I-164 i I-165
[1246] Vršna vrednost 1: Izolovani dijastereomer I-164 (7 mg; 0,014 mmol; prinos 21%) u vidu čvrste supstance bele boje. Hiralna SFC: Rt = 2,25 min. MS [M+H]<+>= 479,2.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.02 (s, 1H), 7.72 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.11-6.93 (m, 2H), 5.25-5.05 (m, 1H), 4.49-4.27 (m, 2H), 3.66-3.32 (m, 1H), 3.22-2.73 (m, 5H), 2.72-2.40 (m, 2H), 2.41-1.93 (m, 7H), 1.96-1.63 (m, 5H), 1.62-1.33 (m, 3H), 1.28-0.94 (m, 3H). Vršna vrednost 2: Izolovani dijastereomer I-165 (3 mg; 6 µmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. Hiralna SFC Rt = 2,65 min. MS [M+H]<+>= 479,5.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.06 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16-6.93 (m, 2H), 5.12 (dd, J = 13.2, 5.2 Hz, 1H), 4.50-4.26 (m, 2H), 3.65-3.35 (m, 1H), 3.32-2.68 (m, 6H), 2.73-2.45 (m, 2H), 2.41-2.02 (m, 6H), 1.96-1.64 (m, 5H), 1.54-1.36 (m, 3H), 1.28-0.97 (m, 3H). Relativna stereohemija supstituenata na ciklobutanskom prstenu nije određena i dodeljena proizvoljno.
Primer 144: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-206)
[1247]
Korak 1.2-(2,2,2-trifluoroetoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (184-1)
[1248] U rastvor 106-6 (0,7 g; 4,0 mmol) u DCM (30 mL) dodat je Et3N (2,2 mL; 16,1 mmol), DMAP (0,017 g; 0,1 mmol) i TsCl (1,68 g; 8,8 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je ugašena hladnom vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane vodom, slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće.
Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 10% EtOAc u heksanu da bi se dobio 184-1 (0,83 g; 1,7 mmol; prinos 43%) u vidu tečnosti bledo žute boje. MS [M+H+18]<+>= 500,1.<1>H NMR (300 MHz, Hloroform-d) δ 7.68 (d, J = 8.1 Hz, 4H), 7.37 (d, J = 8.1 Hz, 4H), 4.05 (d, J = 5.1 Hz, 4H), 3.87-3.84 (m, 3H), 2.46 (s, 6H).
Korak 2.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-dion (I-206)
[1249] U rastvor I-12 (300 mg; 0,56 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je 184-1 (631 mg; 1,31 mmol) i DIPEA (0,77 mL; 4,4 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C 9 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Nakon potpune potrošnje polaznog materijala, reakciona smeša je razblažena sa zas. rastvor natrijum bikarbonata i ekstrahovana je sa DCM (3 x 30 mL).
Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 10% MeOH u DCM da bi se dobilo jedinjenje I-206 (33 mg; 0,06 mmol; prinos 8%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 482,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 4.58-4.54 (m, 1H), 4.36-4.35 (m, 1H), 4.27-4.20 (m, 2H), 4.05-3.98 (m, 2H), 3.52-3.49 (m, 2H), 2.95-2.87 (m, 4H), 2.66-2.60 ( m, 1H), 2.49-2.48 (m, 1H), 2.55-2.45 (m, 2H), 1.80-1.63 ( m, 4H), 1.37-1.31 (m, 1H).
Primer 145: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-166)
[1250]
[1251] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I -96; 20 mg; 0,047 mmol) u DCM (2 mL) i ohlađen na 0°C dodat je rastvor DAST (17 mg; 0,11 mmol) u DCM (0,2 mL) i dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 1 sat, a zatim zagrejana do sobne temperature. Nakon potpune potrošnje početnog materijala, reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-166 (2,0 mg; 4,7 mmol; prinos 10%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 430,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.06-7.01 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.1, 5.0 Hz, 1H), 4.76-4.67 (m, 2H), 4.39 (dd, J = 17.1, 9.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.1, 8.5 Hz, 1H), 2.96-2.84 (m, 2H), 2.65-2.55 (m, 3H), 2.43-2.34 (m, 3H), 2.12-2.01 (m, 1H), 2.01-1.74 (m, 4H), 1.76-1.55 (m, 5H), 1.55-1.41 (m, 1H).
Primer 146: 3-(5-(((1S,2S)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O) OH so (I-167)
[1252]
Korak 1. Dipropil 3,3'-oksidipropanoat (146-2)
[1253] Suspenzija p-toluensulfonske kiseline (61,3 g; 322 mmol) u n-propanolu (100 mL) je dodat 2-cijanoetil etar (146-1; 10,0 g; 9,62 mmol) i dobijena smeša je mešana pri refluksu tokom noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, koncentrovana do otprilike 50 mL i tretirana vodom i heptanima. Faze su razdvojene i organska faza je isprana vodenim NaHCOs i slanim rastvorom. Organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanima da bi se dobio 146-2 (11,6 mg; 47,1 mmol; prinos 59%).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.07 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 3.75 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 2.59 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 1.66 (kvint, J = 7.0 Hz, 4H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 6H).
Korak 2.3,3'-oksibis(propag-1-ol) (146-3)
[1254] U rastvor dipropil 3,3'-oksidipropanoata (146-2; 500 mg; 2,03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C dodat je litijum aluminijum hidrid (1M u THF) (3,05 mL; 3,05 mmol) i dobijena smeša je mešana na 0°C, a zatim na sobnoj temperaturi. Nakon potpune potrošnje početnog materijala, reakciona smeša je ohlađena na 0°C, polako ugašena sa 10% H2SO4(vod.) (0,5 mL) i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organska faza je izolovana i zatim osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće da bi se dobio 146-3 (269 mg; 2.00 mmol; prinos 99%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.74-3.59 (m, 4H), 3.58-3.49 (m, 4H), 1.84-1.66 (m, 4H).
Korak 3. Oksibis(propan-3,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonat) (146-4)
[1255] U rastvor 3,3'-oksibis(propan-1-ola) (146-3; 269 mg; 2,01 mmol), DMAP (8,08 mg; 0,066 mmol) i TEA (1,1 mL; 8,0 mmol) u MeCN (8 mL) i ohlađen na 0°C dodat je TsCl (841 mg; 4,41 mmol) i dobijena smeša je mešana 4 sata. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je trituriran sa dietil etrom i filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-80% EtOAc u heptanu da bi se dobio 146-4 (670 mg; 1,51 mmol; prinos 76%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 443,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.84-7.73 (m, 4H), 7.40-7.32 (m, 4H), 4.07 (t, J = 6.2 Hz, 4H), 3.35 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 2.45 (s, 6H), 1.82 (kvint, J = 6.1 Hz, 4H).
Korak 4.3-(5-(((1S,2S)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O) OH so (I-167)
[1256] U rastvor oksibis(propan-3,1-diil) bis(4-metilbenzensulfonata) (146-4; 193 mg; 0,437 mmol) i 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi )-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u MeCN (2,5 mL) je dodat DIPEA (0,25 mL; 1,5 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 120°C pod µW zračenjem tokom 3 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvoće i dobijeni ostatak je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim NaHCOs (vod.). Organske faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće.
Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-60% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) i dobijeni proizvod je stavljen u DCM i ispran sa zas. NaHCO3(vod.) a faze su razdvojene preko separatora faza. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM i kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini EtOAc, ohlađen na 0°C i polako je dodat dietil etar. Rastvarač je dekantiran i čvrsti materijal je osušen pod vakuumom. Čvrsta supstanca je prečišćena HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 10 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 25-50% MeCN, 3,5 min gradijent; sakupljene frakcije sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-167 (6,0 mg; 0,012 mmol; prinos 4%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 442,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29-7.18 (m, 1H), 7.08-7.00 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.71-4.63 (m, 1H), 4.43-4.19 (m, 2H), 3.63 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 2.96-2.84 (m, 1H), 2.68 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.43-2.35 (m, 2H), 2.16-2.03 (m, 1H), 2.03-1.85 (m, 2H), 1.75-1.55 (m, 7H), 1.55-1.44 (m, 1H).
Primer 147: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion i 3-( 5-(((1R,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-168 i I- 169)
[1257]
Korak 1. Smeša 5-(((1S,2R)-2-hidroksiciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona i 5-(((1R,2S)-2-hidroksiciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (147-2)
[1258] U smešu 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-ona (19-1a; 1,00 g; 4,69 mmol), dtbbpi (63 mg; 0,24 mmol), NiCl2(dimetoksi etan) (52 mg; 0,24 mmol) i Ir[( dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(53 mg; 47 µmol) u balonu je dodat MeCN (15,7 mL) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dodati su cis-1,2-pentandiol (147-1; 0,47 mL; 5,6 mmol) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (0,83 mL; 4,9 mmol) i balon je ponovo ispražnjen i napunjen azotom dva puta. Dobijena smeša je mešana pod plavim LED svetlom 16 sati, filtrirana i koncentrovana na Celite<®>.
Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 147-2 (787 mg; 3,36 mmol; prinos 72%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 235,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.66 (dt, J = 6.3, 4.6 Hz, 1H), 4.32 (td, J = 5.7, 4.3 Hz, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 2.04-1.79 (m, 4H), 1.74-1.61 (m, 1H).
Korak 2. Smeša (1S,2R)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata i (1R,2S)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (147-3)
[1259] U smešu 5-(((1S,2R)-2-hidroksiciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona i 5-(((1R,2S)-2-hidroksiciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (147-2; 0,100 g; 0,427 mmol) u DCM (3 mL) je dodat TsCl (179 mg; 0,939 mmol) i DIPEA (0,30 mL; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1-metilimidazol (34 µL; 0,43 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2,5 sati. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa dihlorometanom (x3). Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heksanu da bi se dobio 147-3 (787 mg; 3,36 mmol; prinos 92%) u vidu čvrste supstance narandžeste boje. MS [M+H]<+>= 389,3.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.74-7.61 (m, 3H), 7.15 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.85 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.23-5.10 (m, 2H), 4.91 (td, J = 6.1, 4.2 Hz, 1H), 4.63 (dt, J = 5.9, 4.5 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.15-1.87 (m, 5H), 1.70-1.58 (m, 1H).
Korak 3.5-(((1S,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on i 5-(((1R,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (147-4 i 147-5)
[1260] U µW bočicu sa MeCN (0,3 mL) dodata je smeša (1S,2R)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata i (1R,2S)-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (147-3; 0,100 g; 0,257 mmol) i 3,3-dimetilpiperidin (0,04 mL; 0,3 mmol) a bočica je ispražnjena i napunjena azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 150°C 3 sata pod µW zračenjem, zatim ugašena vodom i ekstrahovana dihlorometanom (x3). Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 147-4 (53,0 mg; 0,161 mmol; prinos 63%) u vidu žutog ulja i smeše izomernih proizvoda. MS [M+H]<+>= 330,3. Smeša izomera je razdvojena preko hiralnog SFC [Kolona 2,1 x 25,0 cm Chiralpak AD-H; CO2Korastvarač MeOH i 5% vode sa 0,25% izopropilamina; Izokratska metoda 20% Korastvarač pri 80 g/min na 100 bara na 25°C] da bi se dobila dva enantiomera trans izomernih proizvoda: Vršna vrednost 1: Enantiomer 1 od 2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (147-4; 15,0 mg; 0,045 mmol; prinos 18%) u vidu ulja žute boje.
Hiralna SFC Rt 2,61 min. Vršna vrednost 2: Enantiomer 2 od 2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (147-5; 18,0 mg; 0,054 mmol; prinos 21%) u vidu ulja žute boje. Hiralna SFC Rt 3,00 min. Apsolutna stereohemija nije određena.
Korak 4. Pojedinačni enantiomer etil 2-(hlorometil)-4-((-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)benzoata (147-6)
[1261] U rastvor pojedinačnog enantiomera 2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (Vršna vrednost 1, 147-4,; 15 mg; 0,045 mmol) u dihloroetanu (1 mL) i EtOH (1 mL) mešan na 70°C dodat je tionil hlorid (0,04 mL; 0,5 mmol) u kapima i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 147-6 u vidu sirovog ulja smeđe boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 394,2. Korak 5. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-168)
[1262] U balon koji sadrži 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 15 mg; 0,090 mmol) u DMF (0,75 mL) dodat je DIPEA (0,04 mL; 0,2 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 147-6 (18 mg; 0,045 mmol) rastvoren u DMF (1,1 mL) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 6 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu i zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Metoda Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 45-70% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-168 (enantiomer 1,, 2,1 mg; 4,2 µmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 440,3.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.83 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.4, 5.2 Hz, 1H), 4.78 (ddd, J = 7.1, 4.2, 2.0 Hz, 1H), 4.34 (qd, J = 16.7, 4.4 Hz, 2H), 3.01 (td, J = 8.1, 7.6, 4.0 Hz, 1H), 2.84 (ddd, J = 17.7, 13.3, 5.3 Hz, 2H), 2.74 (ddd, J = 17.7, 4.8, 2.5 Hz, 1H), 2.56-2.36 (m, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 2.17-2.00 (m, 2H), 1.82-1.57 (m, 6H), 1.31-1.24 (m, 2H), 0.96 (d, J = 8.1 Hz, 6H).
Korak 6. Pojedinačni enantiomer etil 2-(hlorometil)-4-((-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)benzoata (147-7)
[1263] U rastvor pojedinačnog enantiomera 2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-metilbenzensulfonata (Vršna vrednost 2, 147-5; 18 mg; 0,054 mmol) u dihloroetanu (1 mL) i EtOH (1 mL) mešan na 70°C dodat je tionil hlorid (0,05 mL; 0,7 mmol) u kapima i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 147-7 u vidu sirovog ulja smeđe boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 394,4. Korak 7. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-169)
[1264] U balon koji sadrži 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 18 mg; 0,11 mmol) u DMF (0,75 mL) dodat je DIPEA (0,05 mL; 0,3 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 147-7 (18 mg; 0,054 mmol) rastvoren u DMF (1,1 mL) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 6 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu i zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Metoda Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 45-70% MeCN, 3,5 min. gradijent; frakcije za prikupljanje sadrže ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-169 (enantiomer 2, 1,5 mg; 2,9 µmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 440,5.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.82 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.4, 5.2 Hz, 1H), 4.79-4.69 (m, 1H), 4.34 (qd, J = 16.7, 4.5 Hz, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.84 (ddd, J = 17.7, 13.3, 5.4 Hz, 1H), 2.74 (ddd, J = 17.7, 4.8, 2.5 Hz, 1H), 2.49-2.36 (m, 3H), 2.24-2.10 (m, 3H), 2.09-2.00 (m, 1H), 1.94-1.88 (m, 1H), 1.82-1.57 (m, 6H), 1.29-1.19 (m, 2H), 0.95 (d, J = 8.7 Hz, 6H).
Primer 148: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((lr,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-170)
[1265]
[1266] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-159; 0,10 g; 0,21 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,020 g; 0,43 mmol) u TFE (3 mL) je dodat NaBH(OAc)3(0,067 g; 0,32 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL).
Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-170 (0,023 mg; 0,046 mmol; 23%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 498,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 5.08-5.06 (m, 1H), 4.62-4.59 (m, 1H), 4.40-.21 (m, 2H), 3.35-3.33 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 2.99 (m, 3H), 2.67-2.35 (m, 4H), 2.19-2.13 (m, 2H), 2.02-1.95 (m, 3H), 1.85-1.82 (m, 2H), 1.75-1.25 (m, 7H), 1.05-0.92 (m, 4H), 0.85-0.65 (m, 2H).
Primer 149: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-171)
[1268] U rastvor jedinjenja 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion (I-159; 0,10 g; 0,21 mmol) i formaldehid (37% u vodi) (0,04 mL; 0,4 mmol) u TFE (4 mL) dodat je NaBH(OAc)3(0,067 g; 0,32 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće, a ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 4% MeOH u DCM da bi se dobio I-171 (0,040 mg; 0,082 mmol; prinos 39%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 484,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.98 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.09-5.04 (m, 1H), 4.68-4.65 (m, 1H), 4.41-4.23 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.0-2.67 (m, 3H), 2.67-2.33 (m, 2H), 2.15-2.08 (m, 5H), 2.07-1.96 (m, 4H), 1.83-1.36 (m, 6H), 1.51-1.48 (m, 2H), 1.25-1.22 (m, 2H), 0.83-0.80 (m, 2H).
Primer 150: Smeša 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona i soli 3-(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-172)
[1269]
Korak 1. Cink(II) tetrahidroborat (150-2)
[1270] U balon sa okruglim dnom od 100 mL sa šipkom za mešanje dodat je cink hlorid (150-1; 3,04 g; 22,3 mmol) i natrijum borohidrid (1,95 g; 51,4 mmol) i balon je pročišćen gasovitim azotom. Zatim je dodat THF (50 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 dana. Reakciona smeša je filtrirana da bi se dobio 150-2 u vidu bezbojnog rastvora (~ 0,4 M) koji je direktno korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja. Korak 2.
Smeša metil (1R,2R)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata i metila
(1S,2S)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata (150-4)
[1271] U metil 4,4-dimetil-2-oksociklopentan-1-karboksilat (150-3; 420 mg; 2,47 mmol) rastvoren u Et2O (8 mL) i ohlađen na 0°C dodat je cink(II) tetrahidroborat (150-2, 7,5 mL; 3,0 mmol; 0,4 M u THF) i dobijeni rastvor je mešan na 0°C tokom 1 sat. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom amonijum acetata (10 mL) i zatim mešana 15 minuta. Vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom, a kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-40% EtOAc u heptanu da bi se dobio 150-4 (284 mg; 1,65 mmol; prinos 67%) kao smeša trans izomera. MS [M+H]<+>= 173,3.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.45 (qd, J= 7.9, 0.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.83 (ddd, J= 10.5, 8.9, 7.9 Hz, 1H), 1.97-1.79 (m, 2H), 1.73-1.63 (m, 1H), 1.55-1.44 (m, 1H), 1.11 (s, 3H), 1.04 (s, 3H).
Korak 3. Smeša metil (1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata i metil (1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata (150-5)
[1272] U smešu metil (1R,2R)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata i metil (1S,2S)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata (150-4; 284 mg; 1.65 mmol) i imidazola (289 mg; 4.25 mmol) rastvorenog u DCM (6 mL) je dodat TBDMSCl (295 mg; 1.96 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana vodom (20 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (20 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio 150-5 (522 mg; 1,73 mmol) koji je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja MS [M+H]<+>= 287,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.52-4.38 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.81 (ddd, J = 10.0, 8.7, 6.9 Hz, 1H), 1.89-1.72 (m, 2H), 1.59 (dd, J = 12.9, 10.1 Hz, 1H), 1.45 (ddd, J = 12.9, 6.7, 1.0 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.02 (d, J = 3.5 Hz, 6H).
Korak 4. Smeša (1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilne kiseline i (1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilna kiseline (150-6)
[1273] Smeša metil (1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata i metil (1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilata (150-5; 522 mg; 1,82 mmol) i litijum hidroksid monohidrat (777 mg; 18,5 mmol) rastvoreni su u THF (3 mL), MeOH (3 mL) i voda (1 mL), mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcioni rastvor je razblažen vodom (60 mL) i acidifikovan sa 1 N HCl (vod.) rastvorom do -pH 5. Vodena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL) i kombinovane organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 150-6 (465 mg; 1,62 mmol; prinos 89%) u vidu bezbojnog ulja, koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 273,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.05 (s, 1H), 4.43 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 2.66 (ddd, J = 9.7, 8.9, 6.5 Hz, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.49 (dd, J = 12.8, 9.7 Hz, 1H), 1.37 (ddd, J = 12.7, 6.5, 1.0 Hz, 1H), 1.05 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.84 (s, 9H), 0.01 (d, J = 2.0 Hz, 6H).
Korak 5. Smeša terc-butil (((1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karbonil)oksi)karbamata i terc-butil (((1S,2S)- 2-((tercbutildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karbonil)oksi)karbamata (150-8)
[1274] U smešu (1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilne kiseline i (1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karboksilne kiseline (150-6; 465 mg; 1,71 mmol), N-Boc-hidroksilamina (150-7; 258 mg; 1,94 mmol) i HATU (692 mg; 1,82 mmol) rastvoren u DCM (8 mL) je dodat DIPEA (0,75 mL; 4,3 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL) i isprana vodom (30 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% EtOAc u heptanu da bi se dobio 150-8 (347 mg; 0,851 mmol; prinos 50%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 386,5.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.84 (s, 1H), 4.55 (dt, J = 7.3, 6.4 Hz, 1H), 2.97 (ddd, J = 9.8, 9.0, 6.6 Hz, 1H), 1.91 (ddd, J = 13.0, 9.0, 1.1 Hz, 1H), 1.82 (dd, J = 12.9, 7.3 Hz, 1H), 1.66 (dd, J = 13.0, 9.8 Hz, 1H), 1.54-1.49 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.03 (d, J = 2.1 Hz, 6H).
Korak 6. Smeša terc-butil ((1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil) oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-9)
[1275] Smeša terc-butil (((1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karbonil)oksi)karbamata i terc-butil (((1S,2S)- 2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentan-1-karbonil)oksi)karbamata (150-8; 347 mg; 0,896 mmol) i cezijum karbonata (336 mg; 1,03 mmol) u MeCN (7 mL) je mešana na 100°C tokom 5 sati.
Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz Celite<®>. Filtrat je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% EtOAc u heptanu da bi se dobio 150-9 (108 g; 0,315 mmol; prinos 35%) u čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 344,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 4.45 (s, 1H), 3.85-3.68 (m, 1H), 1.89 (dd, J = 13.1, 7.8 Hz, 1H), 1.75 (dd, J = 13.1, 7.2 Hz, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.28-1.21 (m, 2H), 1.08 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.05 (d, J = 4.9 Hz, 6H).
Korak 7. Smeša terc-butil ((1R,2R)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i tercbutil ((1S,2S)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-10)
[1276] U smešu terc-butil ((1R,2R)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-9; 30,9 mg; 0,128 mmol) u THF (2 mL) dodat je TBAF (1M u THF) (0,350 mL; 0,350 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcioni rastvor je koncentrovan do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobio 150-10 (30,9 mg; 0,128 mmol; prinos 52%). MS [M+H-t-Bu]<+>= 174.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.67 (s, 1H), 3.84-3.72 (m, 1H), 1.91 (ddd, J = 11.6, 8.1, 3.5 Hz, 2H), 1.53 (dd, J = 13.4, 7.4 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 1.05 (s, 3H).
Korak 8. Smeša terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin- 5-il)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i terc-butil ((1R,2R)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-11)
[1277] U smešu terc-butil ((1R,2R)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksi-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-10; 30,0 mg; 0,131 mmol), 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-diona (31-3a; 62,0 mg; 0,137 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (1,4 mg; 6,5 µmol), dtbbpi (1,8 mg; 6,5 µmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(1,5 mg; 1,3 µmol) prečišćen sa azotom dodat je MeCN (1 mL) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 0,024 mL, 0,14 mmol) i dobijena smeša je mešana pod plavim LED svetlima na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz Celite<®>Filtrat je koncentrovan do suvoće i prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 150-11 (29,1 g; 0,034 mmol; prinos 26%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H2O]<+>= 619,5.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.71 (dd, J = 8.6, 4.2 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 5.25-5.05 (m, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.38-4.30 (m, 2H), 3.69-3.50 (m, 2H), 3.06-2.77 (m, 2H), 2.31 (dd, J = 13.7, 4.7 Hz, 1H), 2.21-2.13 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 2H), 1.66 (dd, J = 13.9, 4.2 Hz, 1H), 1.48-1.44 (m, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.13 (d, J = 7.9 Hz, 6H), 0.95-0.89 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 9. Smeša 3-(5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona i 3-(5-(((1R,2R)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150-12)
[1278] U smešu terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata i terc-butil ((1R,2R)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)-4,4-dimetilciklopentil)karbamata (150-11; 29 mg; 0,048 mmol) u MeCN (1 mL) dodata je metansulfonska kiselina (0,013 mL; 0,20 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i pod strujom azota je dodat TEA (0,067 mL; 0,48 mmol). Rastvor je zagrejan do sobne temperature i zatim mešan 30 minuta. Zatim je dodat N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (6 µL; 0,05 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do približno polovine zapremine i dodata je smeša 1:1 zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i vode (30 mL). Vodena smeša je ekstrahovana smešom DCM/izopropanol 4:1 (3 x 30 mL) i kombinovane organske faze su osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 150-12 u vidu čvrste supstance žute boje, koja je preneta na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 372,4.
Korak 10. Smeša 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona i soli 3-( 5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-172 )
[1279] U smešu 3-(5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona i 3-(5 -(((1R,2R)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150-12; 18 mg; 0,048 mmol) i acetaldehida (2-1; 8 µL; 0,15 mmol) rastvorenog u DMF (0,5 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (56 mg; 0,26 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (45 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-80% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-172 (6,0 mg; 0,012 mmol; prinos 25%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.76-4.63 (m, 1H), 4.45-4.18 (m, 2H), 3.48 (dt, J = 11.8, 6.3 Hz, 2H), 2.97-2.83 (m, 1H), 2.63-2.51 (m, 3H), 2.44-2.31 (m, 2H), 1.98 (dd, J = 14.3, 7.5 Hz, 2H), 1.72 (dd, J = 12.3, 7.2 Hz, 1H), 1.55-1.35 (m, 2H), 1.06 (d, J = 4.6 Hz, 6H), 0.94 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Primer 151: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I -173)
[1280]
[1281] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u MeCN (1,5 mL) je dodat 4-(bromometil)-1,1-difluorocikloheksan (151-1; 68 mg; 0,32 mmol) i DIPEA (153 µL; 0,874 mmol) i dobijena smeša je mešana na 140°C tokom 45 minuta pod µW. Dodat je NaI (48 mg; 0,32 mmol) i mešanje je nastavljeno na 140°C tokom 2 sata i 45 minuta pod µW. Reakciona smeša je zatim dodata u zasićeni rastvor vodenog natrijum hidrogen karbonata (20 mL) i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x2). Kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio 1-173 (20 mg; 0,040 mmol; prinos 14%), u vidu čvrste supstance krem boje. MS [M+H]<+>= 476,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.11-4.97 (m, 1H), 4.65-4.52 (m, 1H), 4.44-4.19 (m, 2H), 3.18-3.03 (m, 1H), 2.90 (ddd, J = 18.3, 13.6, 5.4 Hz, 1H), 2.59 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 2.47-2.28 (m, 2H), 2.17-2.05 (m, 1H), 2.04-1.87 (d, J = 13.0 Hz, 4H), 1.86-1.58 (m, 8H), 1.56-1.38 (m, 2H), 1.21-1.07 (m, 2H).
Primer 152: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((1H-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-174)
[1282]
[1283] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u DMF (2 mL) pod atmosferom azota, dodat je 1H-indol-5-karbaldehid (152-1; 46,5 mg; 0,320 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (185 mg; 0,874 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je zatim dodata u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (30 mL) i ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3). Kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-20% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3), a zatim dalje prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-174 (12 mg; 0,023 mmol; prinos 8%s) u vidu čvrste supstance krem boje. MS [M+H]<+>= 473,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 10.95 (s, 2H), 7.56 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.31 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11-7.05 (m, 2H), 6.99 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.37-6.33 (m, 1H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.69-4.62 (m, 1H), 4.36-4.09 (m, 2H), 3.95-3.68 (m, 2H), 3.20-3.12 (m, 1H), 2.91 (ddd, J = 18.1, 13.7, 5.4 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 2.39 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 1H), 2.21-2.09 (m, 1H), 2.04-1.84 (m, 2H), 1.84-1.60 (m, 3H), 1.53 (d, J = 9.3 Hz, 1H).
Primer 153: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-175)
[1284]
[1285] Terc-butil 2,2,2-trihloracetimidat (153-1; 5,0 µL; 0,028 mmol) je dodat u suspenziju 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-96; 10 mg; 0,023 mmol) i skandijum triflata (1,2 mg; 2,3 µmol) u suvom DCM (0,25 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 sata. Dodati su još skandijum triflat (1,2 mg; 2,3 umol) i terc-butil 2,2,2-trikloracetimidat (5 µL; 0,03 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi nekoliko dana. Reakciona smeša je zatim filtrirana kroz Celite<®>i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-175 (3,0 mg; 5,3 mmol; prinos 23%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 484,4.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.07 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.08-6.95 (m, 2H), 5.18-5.07 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.43-4.22 (m, 2H), 3.55 (s, 1H), 3.25-2.74 (m, 6H), 2.60-2.24 (m, 3H), 2.24-2.01 (m, 3H), 1.94-1.66 (m, 6H), 1.56 (s, 2H), 1.16 (s, 9H).
Primer 154: Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona ( I-176)
[1286]
Korak 1. Pojedinačni enantiomer 5-((2-hidroksiciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (154-1)
[1287] 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (19-1a; 2,50 g; 11,7 mmol), dtbbpi (157 mg; 0,587 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (129 mg; 0,587 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(131 mg; 0,117 mmol) i MeCN (35 mL) su stavljeni u balon i balon je zatim ispražnjen i napunjen azotom tri puta. Dodati su cis-1,2-pentandiol (147-1; 1,17 mL; 14,1 mmol) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (40-2; 2,1 mL; 12 mmol), a balon je ponovo ispušten i ponovo napunjen azotom još dva puta. Dobijena smeša je mešana pod plavim LED svetlima na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana na Celite<®>i prečišćena silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio željeni proizvod (1,96 g; 8,37 mmol; prinos 71%) u vidu čvrste supstance žute boje, kao smeša cis izomera. MS [M+H]<+>= 235,3. Smeša izomera je odvojena preko hiralne SFC [Kolona: 2,1 × 25,0 cm Chiralpak AD-H; CO2Korastvarač: 20% MeOH: Brzina protoka 80 g/min pri 125 bara na 25°C] da bi se dobila dva cis izomera: Vršna vrednost 1: 154-1 (1,01 g; 4,32 mmol; prinos 37%) u vidu ulja bledo žute boje. Hiralna SFC Rt 1,71 min. Vršna vrednost 2: 154-2 (1,03 g; 4,38 mmol; prinos 37%) u vidu ulja bledo žute boje. Hiralna SFC Rt 1,87 min.
Apsolutna stereohemija nije određena.
Korak 2. Pojedinačni enantiomer 2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil 4-nitrobenzensulfonata (154-4)
[1288] U rastvor 154-1 (Vršna vrednost 1; 0,500 g; 2,13 mmol) u DCM (14,2 mL) dodat je 4-nitrobenzensulfonil hlorid (154-3; 1,42 g; 6,40 mmol) i 1-metilimidazol (0,34; 4,27 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 sati. Dodati su još 4-nitrobenzensulfonil hlorid (378 mg; 1.71 mmol) i 1-metilimidazol (0,17 mL; 2,1 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana dihlorometanom (x3). Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Ostatak sa Celite<®>je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu i dalje prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 154-4 (738 mg; 1,76 mmol; prinos 82%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 420,2.
Korak 3. Pojedinačni enantiomer 5-((2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (154-6)
[1289] Suspenzija 2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan hidrohlorida (154-5; 83,0 mg; 0,465 mmol) i Cs2CO3(0,186 g; 0,572 mmol) u MeCN (1,4 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. Suspenzija je zatim dodata u 154-4 (0,150 g; 0,358 mmol), a zatim je dodat DIPEA (0,094 mL; 0,54 mmol). Dobijena smeša je pročišćena azotom sa sonikacijom tokom 20 minuta i zatim je mešana na 120°C tokom 3 sata pod µW zračenjem. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću dihlormetana. Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu a zatim 0-20% MeOH u DCM da bi se dobio 154-6 (81,5 mg; 0,228 mmol; prinos 64%) u vidu čvrste supstance krem boje. MS [M+H]<+>= 358,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.79 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.00 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.95-6.85 (m, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.91-4.74 (m, 1H), 3.83 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.53 (s, 2H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.67-2.48 (m, 4H), 2.15-2.05 (m, 2H), 1.83-1.59 (m, 10H).
Korak 4. Pojedinačni enantiomer etil 4-((2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-2-(hlorometil)benzoata (154-7)
[1290] Mešanom rastvoru 154-6 (81,5 mg; 0,228 mmol) u dihloretanu (1,1 mL) i EtOH (1,1 mL) pri 70°C dodat je tionil hlorid (0,20 mL; 2,7 mmol) kapanjem i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je
ekstrahovan sa EtOAc (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 154-7 u vidu sirovog smeđeg ulja. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 422,4.
Korak 5. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona ( I-176)
[1291] U balon koji sadrži 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 75,0 mg; 0,456 mmol) u DMF (0,9 mL) dodat je DIPEA (0,2 mL; 1 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 154-7 (96 mg; 0,23 mmol) rastvoren u DMF (1,37 mL) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 5 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i prečišćena silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu da bi se dobio I-176 (61,7 mg; 0,128 mmol; prinos 56%) u vidu čvrste supstance krem boje. MS [M+H]<+>= 468,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (dt, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.77-4.63 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 9.6 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 7.9 Hz, 1H), 3.69 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.44 (dd, J = 11.6, 5.1 Hz, 1H), 3.39 (s, 2H), 2.97-2.80 (m, 2H), 2.63-2.53 (m, 2H), 2.46-2.34 (m, 4H), 2.06-1.90 (m, 3H), 1.70-1.57 (m, 5H), 1.51-1.45 (m, 4H). Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 155: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-177)
[1292]
[1293] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 50,0 mg; 0,146 mmol) i 2-(2-hlorofenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (94-3; 74,4 mg; 0,146 mmol) u MeCN (0,75 mL) je dodat DIPEA (0,10 mL; 0,57 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 8 sati i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-50% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-177 (34,0 mg; 0,063 mmol; prinos 44%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 510,4.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34-7.26 (m, 2H), 7.14 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.3, 2.2 Hz, 1H), 6.89-6.82 (m, 2H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.77 (kvint, J = 5.5 Hz, 1H), 4.61-4.54 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 5.7 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 4.9 Hz, 1H), 3.73 (q, J = 7.9, 7.4 Hz, 2H), 3.13-3.01 (m, 2H), 2.98-2.82 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 1H), 2.43-2.35 (m, 1H), 2.20-2.07 (m, 1H), 2.05-1.90 (m, 1H), 1.85-1.75 (m, 1H), 1.75-1.55 (m, 3H), 1.50-1.36 (m, 1H).
Primer 156: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion ( I-178)
[1294]
[1295] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 33 mg; 0,099 mmol) i 2-(2-metoksifenoksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonata) (95-3; 50 mg; 0,099 mmol) u MeCN (0,75 mL) je dodat DIPEA (0,052 mL; 0,30 mmol) i dobijen je smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 8 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i prečišćena silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-178 (16 mg; 0,028 mmol; prinos 29%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 506,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.86-6.79 (m, 1H), 6.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.10-5.01 (m, 1H), 4.75-4.66 (m, 1H), 4.62-4.54 (m, 1H), 4.39 (dd, J= 17.2, 5.4 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 17.3, 5.3 Hz, 1H), 3.74 (m, 5H), 3.15-3.00 (m, 2H), 2.90 (ddd, J = 18.4, 13.4, 5.4 Hz, 2H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.46-2.33 (m, 1H), 2.21-2.07 (m, 1H), 2.04-1.92 (m, 1H), 1.84-1.54 (m, 4H), 1.49-1.38 (m, 1H).
Primer 157: Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-179)
[1296]
Korak 1. Pojedinačni enantiomer 5-((2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (157-2)
[1297] U suspenziju 154-4 (Primer 154, Korak 2, 0,150 g; 0,358 mmol) u MeCN (1,2 mL) dodati su uzastopno 6-azaspiro[3,5]nonan (157-1; 54,0 mg; 0,429 mmol) i DIPEA (0,094 mL; 0,54 mmol) i dobijena smeša je pročišćena azotom sonikacijom tokom 20 minuta i zatim mešana na 120°C tokom 3 sata pod µW zračenjem. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću dihlormetana. Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 157-2 (83,0 mg; 0,243 mmol; prinos 68%) u vidu čvrste supstance bledo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 341,9.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.84-7.76 (m, 1H), 7.13-7.04 (m, 2H), 5.24 (s, 2H), 4.84-4.60 (m, 1H), 3.04-2.91 (m, 1H), 2.55-2.21 (m, 4H), 2.06-1.93 (m, 2H), 1.91-1.59 (m, 10H), 1.56-1.43 (m, 4H).
Korak 2. Pojedinačni enantiomer etil 4-((2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-2-(hlorometil)benzoata (157-3)
[1298] Suspenzija 157-2 (83,0 mg; 0,243 mmol) u dihloretanu (1,2 mL) i etanolu (1,2 mL) je mešana na 70°C i zatim je dodat tionil hlorid (0,21 mL; 2,9 mmol) kap po kap. Dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći, a zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. reakciona smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane do suvoće da bi se dobio 157-3 u vidu sirovog ulja smeđe boje. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 406,3.
Korak 3. Pojedinačni enantiomer cis izomera 3-(5-((2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I -179)
[1299] U balon koji je sadržao rastvor 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 80,0 mg; 0,486 mmol) u DMF (1 mL) dodata je DIPEA (0,2 mL; 1 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 157-3 (99,0 mg; 0,243 mmol) rastvoren u DMF (1,5 mL) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 4 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u heptanu (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio sirovi materijal. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu da bi se dobio I-179 (21,8 mg; 0,045 mmol; prinos 19%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 452,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.07 (dt, J = 8.5, 2.6 Hz, 1H), 5.07 (ddd, J = 13.4, 5.2, 1.9 Hz, 1H), 4.77-4.64 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.1, 9.1 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.2, 6.7 Hz, 1H), 2.96-2.84 (m, 2H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.43-2.23 (m, 5H), 2.07-1.92 (m, 2H), 1.92-1.74 (m, 3H), 1.72-1.57 (m, 7H), 1.56-1.46 (m, 1H), 1.45-1.35 (m, 4H). Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 158: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1s,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-180b)
[1300]
Korak 1. ((1S,3S)-3-metoksiciklobutil)metanol (158-2)
[1301] U rastvor cis-3-metoksiciklobutan-1-karboksilne kiseline (158-1; 1,0 g; 7.7 mmol) u THF (20 mL) na 0°C dodat je 1M BH3u THF (17 mL; 17 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i zatim mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakciona smeša je polako ugašena dodavanjem MeOH kap po kap i zatim mešana 20 min. Smeša je zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je rastvoren u MeOH (50 mL), mešan na sobnoj temperaturi 3 sata i zatim koncentrovan do suvoće da bi se dobio sirovi 158-2 (910 mg; 7,8 mmol). Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.45 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.76-3.56 (m, 1H), 3.35-3.29 (m, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.22-2.06 (m, 2H), 1.97-1.77 (m, 1H), 1.51 (tdd, J = 9.2, 7.7, 2.7 Hz, 2H).
Korak 2. ((1S,3S)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (158-3)
[1302] U rastvor ((1S,3S)-3-metoksiciklobutil)metanola (158-2; 910 mg; 7,83 mmol) u piridinu (12 mL) dodat je tozil hlorid (2,20 g; 11,8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena pomoću EtOAc i isprana vodom. Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću EtOAc (x1).
Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 158-3 (1,40 mg; 5,18 mmol; prinos 66%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 271,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.57-7.43 (m, 2H), 3.97 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.73-3.52 (m, 1H), 3.05 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.28-1.94 (m, 3H), 1.56-1.37 (m, 2H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1S,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-180)
[1303] U 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-29; 91 mg; 0,25 mmol) i ((1S,3S)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (158-3; 199 mg; 0,735 mmol) rastvoren u DMF (0,6 mL) je dodat DIPEA (0,2 mL; 1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, a zatim mešana na 60°C tokom 16 sati. TBAI (katalitička količina) i ((1S,3S)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (158-3, ∼50-200 mg) su dodati i mešanje je nastavljeno na 100°C tokom 3 dana. Dodati su ((1s,3s)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (158-3; 200 mg) i TBAI i mešanje je nastavljeno na 100°C tokom 3 sata. Dodat je DIPEA (200 µL) i mešanje je nastavljeno na 100°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena acetonom i koncentrovana do suvoće na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1) u DCM i dalje prečišćen hromatografijom reverznih faza na koloni C-18 eluiranjem sa 10-60% MeCN u vodi sa 0,1% mravlje kiseline kao modifikatorom. Dobijeni materijal je zatim prečišćen putem HPLC metode reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-95% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobio I-180 (22 mg; 0,045 mmol; prinos 18%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.08 (dt, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.08 (ddd, J = 13.6, 5.1, 2.1 Hz, 1H), 4.67-4.56 (m, 1H), 4.46-4.16 (m, 2H), 3.65 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.24 (tt, J = 8.8, 4.0 Hz, 2H), 3.07 (s, 3H), 3.01-2.81 (m, 1H), 2.72-2.56 (m, 1H), 2.45-2.19 (m, 5H), 2.07-1.78 (m, 5H), 1.73-1.57 (m, 3H), 1.54-1.34 (m, 3H), 0.95 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Primer 159: Pojedinačni enantiomer trans-3-(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-181)
[1304]
Korak 1. Smeša terc-butil ((1S,2S)-4,4-dimetil-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-4,4-dimetil-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata (159-1)
[1305] U 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (19-1a; 43,2 mg; 0,203 mmol), dodata je smeša terc-butil ((1R,2R)-2-hidroksi-4,4-dimetilsiklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-4,4-dimetil-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata (150-10; 42 mg; 0,18 mmol), NiCl2(dimetoksietana) (2 mg; 9 µmol), dtbbpi (2 mg; 9 µmol), i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(2 mg; 2 µmol) pod atmosferom azota MeCN (1 mL) i 2,2,6,6-tetrametilpiridin(40-2; 34 µL; 0,20 mmol) i dobijena smeša je mešana pod plavim LED svetlima na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz Celite<®>. Filtrat je sakupljen i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-70% EtOAc u heptanu da bi se dobio 159-1 (47,1 mg; 0,117 mmol; prinos 64%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 362,4.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.79 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.78-4.67 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 2.09 (dd, J = 13.9, 7.2 Hz, 2H), 1.70 (dd, J = 14.0, 4.1 Hz, 1H), 1.53-1.48 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H).
Korak 2. Smeša 5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona i 5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (159-2)
[1306] U smešu terc-butil ((1S,2S)-4,4-dimetil-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata i terc-butil ((1S,2S)-4,4-dimetil-2-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamata (159-1; 47,1 mg; 0,130 mmol) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0,100 mL; 1,30 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće azeotropijom sa MeOH i DCM da bi se dobio 159-2 (77,8 mg; 0,176 mmol) u vidu sirove čvrste supstance. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 262,3.
Korak 3.5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on i 5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (159-3 i 159-4)
[1307] U smešu 5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona i 5-(((1S,2S)-2-amino-4,4-dimetilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (159-2; 49 mg; 0,13 mmol) i acetaldehida (2-1; 0,022 mL; 0,39 mmol) rastvorenog u DMF (1 mL) dodat je natrijum-borohidrid (0,14 g; 0,65 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (45 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5-100% EtOAc (sa 0,1% NEt3) u heptanu (sa 0,1% NEt3) da bi se dobila smeša dva trans izomera. Trans izomeri su razdvojeni hiralnom SFC (Metoda: Kolona Chiralpak IE (5 uM) 21 x 250 mm Mobilna faza: 40% MeOH v/ 10 mM NH3/CO280 g/min 125 bar 6,2 min; Ubrizgavanje 5,6 mg (11,2 mg/mL u MeOH) da bi se dobila dva proizvoda: Vršna vrednost 1: 159-3 (14,2 mg; 0,041 mmol) u vidu čvrste supstance. Hiralna SFC Rt 1,02 min. MS [M+H]<+>= 318,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12-7.03 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.66 (s, 1H), 5.28 (s, 2H), 3.87 (s, 1H), 3.40-3.23 (m, 2H), 3.05 (dt, J = 13.5, 6.7 Hz, 2H), 2.44-2.27 (m, 2H), 1.98 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 1.72 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.37 (dd, J = 8.3, 6.1 Hz, 6H), 1.22 (s, 3H), 1.16 (s, 3H). Vršna vrednost 2: 159-4 (8,2 mg; 0,025 mmol) u vidu čvrste supstance. Hiralna SFC Rt 1,22 min. MS [M+H]<+>= 318,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.74-5.61 (m, 1H), 5.29 (d, J = 1.7 Hz, 2H), 3.87 (s, 1H), 3.32 (dt, J = 12.8, 6.6 Hz, 2H), 3.04 (dq, J = 13.5, 6.6 Hz, 2H), 2.46-2.25 (m, 2H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.78-1.69 (m, 1H), 1.41-1.34 (m, 6H), 1.22 (s, 3H), 1.16 (s, 3H). Apsolutna stereohemija nije određena.
Korak 4. Pojedinačni enantiomer trans-etil 2-(hlorometil)-4-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)benzoata (159-5)
[1308] U 159-4 (vršna vrednost 2, 8,2 mg; 0,026 mmol) rastvoren u etanolu (1 mL) dodat je tionil hlorid (0,010 mL; 0,14 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Dodat je tionil hlorid (0,010 mL; 0,14 mmol) i mešanje je nastavljeno na 70°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće da bi se dobio 159-5. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 382,3.
Korak 5. Pojedinačni enantiomer trans-3-(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-181)
[1309] U rastvor 159-5 (9,9 mg; 0,026 mmol) u DMF (0,5 mL) i DIPEA (0,030 mL; 0,17 mmol) pod atmosferom azota dodat je 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 6,4 mg; 0,039 mmol). Rezultujuća smeša je gazirana azotom i mešana na 110°C preko noći.
Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline, 75 mL/min; 1,5 mL ubrizgavanje; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min gradijent) i zatim dalje prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u DCM (sa 1% NEt3) da bi se dobio I-181 (2,3 mg; 4,6 µmol) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.74-4.63 (m, 1H), 4.46-4.16 (m, 2H), 3.56-3.42 (m, 1H), 1H prikriven asimetričnim DMSO signalom, 2.91 (ddd, J = 18.2, 13.5, 5.4 Hz, 1H), 1.98 (dd, J = 13.8, 8.4 Hz, 2H), 1.72 (dd, J = 12.4, 7.3 Hz, 1H), 1.58-1.38 (m, 2H), 1.06 (d, J = 4.6 Hz, 6H), 0.95 (t, J = 7.0 Hz, 6H). Apsolutna stereohemija nije određena
Primer 160: 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1r,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-182)
[1310]
Korak 1. ((1r,3r)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (160-1)
[1311] U rastvor (3-metoksiciklobutil)metanola (81-2; 1,40 g; 7.83 mmol) u piridinu (13 mL) dodat je TsCl (2,20 g; 12,0 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon potpune potrošnje početnog materijala, reakciona smeša je dodata u vodeni rastvor bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (x2). Organska faza je propuštena kroz separator faza i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanima da bi se dobilo 160-1 (730 mg; 2,70 mmol; smeša cis i trans izomera) u vidu bezbojnog ulja. Dva trans izomeri su razdvojena hiralnom SFC (Metoda: Kolona: ChiralPak IG 21 x 250 mm; Protok: 80 g u minuti; Korastvarač: 10% i-PrOH) da se dobije 160-1 (300 mg; 1,11 mmol; prinos 14%) Vršna vrednost 1 kao trans izomer kako je određeno uz pomoć COSY, ROESY, HSQC i NOE NMR eksperimenata.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.90-7.69 (m, 2H), 7.55-7.33 (m, 2H), 4.03 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.89-3.74 (m, 1H), 3.06 (s, 3H), 2.43 (s, 4H), 1.96-1.85 (m, 4H).
Korak 2.3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1r,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2, 6-dion (I-182)
[1312] U rastvor ((1r,3r)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonata (160-1; 90 mg; 0,33 mmol) i 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-29; 82 mg; 0,22 mmol) u MeCN (1,5 mL) je dodat DIPEA (0,11 mL; 0,66 mmol) i dobijena smeša je mešana na 100°C pod µW zračenjem tokom 1 sat. Dodata je katalitička količina TBAI i dobijena smeša je mešana na 120°C pod µW zračenjem tokom 8 sati. Dodat je ((1r,3r)-3-metoksiciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (160-1; 90 mg; 0,33 mmol) u MeCN (0,15 mL) i dodatno TBAI (katalitička količina) i mešanje je nastavljeno na 120°C pod µW zračenjem tokom 4 sata. Sirova reakciona smeša je prečišćena pomoću HPLC metode reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-95% MeCN; 3,5 min. gradijent; Epruvete za sakupljanje sadržale su nekoliko kapi mravlje kiseline) i zatim dalje prečišćena HPLC metodom reverznih faza (Kolona:: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% TFA, 75 mL/min; 1,5 mL ubrizgavanje; Gradijent: 5-95% MeCN, 3,5 min gradijent) da bi se dobila TFA so. Izolovani proizvod je rastvoren u DCM i filtriran kroz SP-HCO3kolonu eluiranjem sa DCM da bi se dobio I-182 (12 mg; 0,02 mmol; prinos 11 %) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 470,5.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.06 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.13 (ddd, J = 13.3, 5.2, 3.4 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.41-4.23 (m, 2H), 3.85 (kvint, J = 6.4 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.95-2.74 (m, 2H), 2.61-2.41 (m, 4H), 2.41-2.27 (m, 2H), 2.24-2.15 (m, 1H), 2.03-1.89 (m, 5H), 1.85-1.68 (m, 3H), 1.67-1.44 (m, 2H), 1.04-0.98 (m, 2H).
Primer 161: Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona ( I-183)
[1313]
Korak 1. Pojedinačni enantiomer 5-((2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (161-2)
[1314] 8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan hemioksalat (161-1; 200 mg; 0,537 mmol) u metanolu (1 mL) je stavljen na 1 g (0,78 mmol) SCX kolonu. Kolona je isprana metanolom (x2) i eluirana sa 2N NH3u MeOH (x3). Eluat je koncentrovan do suvoće i korišćen u reakciji. U 154-1 (Vršna vrednost 1, Primer 154, 100 mg; 0,238 mmol) u MeCN (0,8 mL) je dodat 8-oksa-2-azaspiro[4,5]dekan (161-1; 40 mg; 0,29 mmol) i DIPEA (60 µL; 0,36 mmol) i dobijena smeša je pročišćena azotom uz sonikaciju tokom 20 minuta i zatim mešana na 120°C tokom 3 sata pod µW zračenjem. Reakciona smeša je dodata u vodu i ekstrahovana pomoću dihlormetana. Kombinovani organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu a zatim 0-20% MeOH u DCM da bi se dobio 161-2 (66,3 mg; 0,185 mmol; prinos 78%) u vidu ulja svetlo žute boje. MS [M+H]<+>= 358,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.88-4.55 (m, 1H), 3.63 (dt, J = 8.8, 3.6 Hz, 4H), 2.95-2.35 (m, 5H), 2.24-1.96 (m, 2H), 1.86-1.42 (m, 10H).
Korak 2. Pojedinačni enantiomer etil 4-((2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-2-(hlorometil)benzoata (161-3)
[1315] Suspenziji 161-2 (66,3 mg; 0,185 mmol) u DCE (0,9 mL) i etanola (0,9 mL) mešanoj pri 70°C dodat je tionil hlorid (160 µL; 2,23 mmol) kapanjem i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (x3) i kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane da bi se dobio 161-3 u vidu ulja smeđe boje. Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 422,3
Korak 3. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona ( I-183)
[1316] U balon koji je sadržao rastvor 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 60,9 mg; 0,370 mmol) u DMF (740 µL) dodata je DIPEA (162 µL; 0,925 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 161-3 (78,0 mg; 0,185 mmol) rastvoren u DMF (1,1 mL) i balon je ponovo ispražnjen i napunjen azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 6 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu. Dobijeni materijal je zatim rastvoren u 4:1 DCM:izopropanol i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je dva puta ekstrahovan pomoću 4:1 DCM:izopropanol. Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio I-183 (30,7 mg; 0,064 mmol; prinos 35%) u vidu čvrste supstance bledo ljubičaste boje. MS [M+H]<+>= 468,5.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.94 (s, 1H), 7.53 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 4.94 (ddd, J = 13.4, 5.1, 2.1 Hz, 1H), 4.61-4.52 (m, 1H), 4.31-4.10 (m, 2H), 3.44 (q, J = 5.3 Hz, 4H), 2.78-2.61 (m, 3H), 2.61-2.46 (m, 2H), 2.41 (dd, J = 9.3, 1.0 Hz, 1H), 2.37-2.21 (m, 2H), 2.10-1.97 (m, 3H), 1.68-1.55 (m, 3H), 1.54-1.33 (m, 7H).
Primer 162: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-184)
[1317]
Korak 1. Bis(2-bromoetil)sulfan (162-2)
[1318] U mešani rastvor 2,2'-tiobis(etan-1-ola) (162-1; 2,50 g; 20,5 mmol) u THF (50 mL) dodat je PBr3(1,35 mL; 14,3 mmol) pri 15°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 7% EtOAc u heksanima da bi se dobio 162-2 (1,41 g; 5,69 mmol; prinos 28%) u vidu bezbojne tečnosti.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.48 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 2.98 (t, J = 7.8 Hz, 4H).
Korak 2.3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-184)
[1319] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,582 mmol) u MeCN (10 mL) je dodat bis(2-bromoetil)sulfan (162-2; 433 mg; 1,75 mmol) i DIPEA (0,62 mL; 3,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je zatim razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-184 (95,0 mg; 0,221 mmol; 38%) u vidu čvrste supstance smeđe boje. MS [M+H]<+>= 430,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.40-4.23 (m, 3H), 2.95-2.86 (m, 1H), 2.64-2.42 (m, 5H), 2.19-2.07 (m, 4H), 2.06-1.98 (m, 2H), 1.75-1.64 (m, 3H), 1.35-1.143 (m, 4H).
Primer 163: 3-(5-(((1S,2S)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-185 )
Korak 1.2-(benziloksi)etil 4-metilbenzensulfonat (163-2)
[1321] U rastvor 2-(benziloksi)etan-1-ola (163-1; 2,00 g; 13,1 mmol) u MeCN (10 mL) na 0°C dodati su TEA (3,6 mL; 19 mmol), DMAP (48 mg; 0,39 mmol) i 4-metilbenzensulfonil hlorid (3,75 g; 19,7 mmol) uzastopno i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 15% EtOAc u heptanu da bi se dobio 163-2 (3,41 mg; 11,1 mmol; prinos 85%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 307,3.
Korak 2.3-(2-(benziloksi)etoksi)propan-1-ol (163-3)
[1322] U rastvor 2-(benziloksi)etil 4-metilbenzensulfonata (163-2; 2,20 g; 7,18 mmol) u ksilenima (40 mL) dodat je propan-1,3-diol (1,64 g; 21,5 mmol) i KOH (1,20 g; 21,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 150°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 4% MeOH u DCM da bi se dobio 163-3 (1,20 mg; 5,70 mmol; prinos 79%) u vidu bezbojnog ulja. MS [M+H]<+>= 211,3.
Korak 3.3-(2-hidroksietoksi)propan-1-ol (163-4)
[1323] U rastvor 3-(2-(benziloksi)etoksi)propan-1-ola (163-3; 1,20 g; 5,71 mmol) u EtOH-EtOAc (4:1; 12 mL) u inertnoj atmosferi dodato je 10% Pd/C (240 mg). Dobijena smeša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio 163-4 (0,60 g; 4,50 mmol; prinos 88%) koji je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 4.56 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.49-3.34 (m, 8H), 1.6-1.61(m, 2H).
Korak 4.3-(2-(toziloksi)etoksi)propil 4-metilbenzensulfonat (163-5)
[1324] U rastvor 3-(2-hidroksietoksi)propan-1-ola (163-4; 100 mg; 0,830 mmol) u MeCN (10 mL) na 0°C dodati su TEA (0,46 mL; 3,3 mmol), DMAP (3 mg, 0,02 mmol) i 4-metilbenzensulfonil hlorid (354 mg; 1,83 mmol) uzastopno i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 30% EtOAc u heptanu da bi se dobio 163-5 (230 mg; 0,540 mmol; prinos 65%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H2O]<+>= 445,9.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.78 (d, J = 11.2 Hz, 4H), 7.33 (d, J = 11.2 Hz, 4H), 4.06 (m, 4H), 3.49 (m, 4H), 2.45 (s, 6H), 1.82 (m, 2H).
Korak 5.3-(5-(((1S,2S)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-185 )
[1325] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 150 mg; 0,440 mmol) u MeCN (5 mL) dodat je 3-(2-(toziloksi)etoksi)propil 4-metilbenzensulfonat (163-5; 224 mg; 0,530 mmol) i DIPEA (0,46 mL; 2,6 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod µW zračenjem. Nakon potpune potrošnje polaznog materijala, reakciona smeša je razblažena sa zasić. rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-185 (70,0 mg; 0,160 mmol; 38%) u vidu čvrste supstance smeđe boje. MS [M+H]<+>= 428,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.05 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 5.10-5.02 (m, 1H), 4.69-4.65 (m, 1H), 4.38-4.26 (m, 2H), 3.68-3.58 (m, 4H), 3.23-3.19 (m, 1H), 2.92-2.90 (m, 1H), 2.69-2.65 (m, 4H), 2.49-2.35 (m, 2H), 2.05-1.92 (m, 4H), 1.78-1.45 (m, 5H).
Primer 164: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I- 186)
[1326]
[1327] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-96; 50,0 mg; 0,117 mmol) i AgOTf (164-2; 150 mg; 0,585 mmol) u DCM (0,5 mL) dodat je (bromometil)ciklopropan (164-1; 0,11 mL; 1,2 mmol) a dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je filtrirana i isprana sa 50% zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3. Faze su razdvojene, i vodeni sloj je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-186 (9,0 mg; 0,017 mmol; prinos 14%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 482,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.74-7.56 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.13-6.98 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.3 Hz, 1H), 4.74-4.65 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 17.2, 9.7 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 8.4 Hz, 1H), 3.96 (kvint, J = 7.2 Hz, 1H), 3.27-3.19 (m, 1H), 2.96-2.80 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.62-2.54 (m, 1H), 2.46-2.35 (m, 1H), 2.27 - 2.03 (m, 6H), 2.03 - 1.85 (m, 2H), 1.86 - 1.52 (m, 8H), 1.52 - 1.28 (m, 3H).
Primer 165: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-187)
[1328]
[1329] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I -96; 50,0 mg; 0,117 mmol) i AgOTf (164-2; 150 mg; 0,585 mmol) u DCM (0,5 mL) dodat je 2-bromopropan (165-1; 0,110 mL; 1,17 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je filtrirana i isprana sa 50% zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3. Faze su razdvojene, i vodeni sloj je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio I-187 (14,0 mg; 0,027 mmol; prinos 23%) u vidu čvrste supstance svetlo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 470,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.20-7.15 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.73-4.65 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 17.1, 9.9 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 17.1, 8.5 Hz, 1H), 3.70-3.61 (m, 1H), 2.96-2.81 (m, 2H), 2.80-2.67 (m, 2H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.21-2.02 (m, 3H), 2.02-1.84 (m, 2H), 1.80-1.69 (m, 2H), 1.69-1.55 (m, 3H), 1.54-1.40 (m, 1H), 1.41-1.28 (m, 2H), 1.20-1.13 (m, 1H), 1.04 (d, J = 5.9 Hz, 6H).
Primer 166: 3-(5-(((1S,2S)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2 -il)piperidin-2,6-dion (I-188)
[1330]
Korak 1. ((1R,2R,3S,4S)-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-diil)dimetanol (166-2)
[1331] U rastvor norkantaridina (166-2; 1,00 g; 5,95 mmol) u THF (20 mL) pod atmosferom azota dodat je LiAlH4u THF (8,9 mL; 18 mmol) kapanjem na 0°C i dobijena smeša je mešana 30 minuta na 0°C, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, razblažena sa THF (20 mL), i Na2SO4•10H2O (1,50 g) je dodavan polako u porcijama. Posle mešanja od 10 min, dodat je Na2SO4(približno 500 mg). Reakciona smeša snažno mešana 10 minuta a zatim je ostatak Na2SO4•10H2O (2,30 g) je dodavan u porcijama. Dodato je još Na2SO4(približno 500 mg) i reakciona smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi, filtrirana kroz podlogu Celite<®>i ispirana sa minimalnom količinom EtOAc. Filtrat je koncentrovan do suvoće da bi se dobio 166-2 (623 mg; 3,94 mmol; prinos 66%) u vidu bezbojnog ulja, koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.32 (t, J = 2.7 Hz, 2H), 3.85-3.77 (m, 2H), 3.77-3.65 (m, 2H), 2.28-2.13 (m, 2H), 1.77-1.67 (m, 2H), 1.57-1.50 (m, 2H).
Korak 2. ((1R,2R,3S,4S)-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-diil)bis(metilen) dimetansulfonat (166-3)
[1332] U ((1R,2R,3S,4S)-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-diil)dimetanol (166-2; 83,0 mg; 0,525 mmol), DMAP (6 mg; 0,05 mmol), DIPEA (0,46 mL; 2,6 mmol) u DCM (2 mL) dodat je MsCl (0,10 mL; 1,3 mmol) u jednoj porciji na 0°C ai dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je sipana u hladni zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i ekstrahovana sa DCM (x2). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio 166-3 (153 mg; 0,487 mmol; prinos 93%) u vidu ulja smeđe boje koje je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.48 (dd, J = 3.4, 2.2 Hz, 2H), 4.24-4.11 (m, 4H), 3.05 (s, 6H), 2.44-2.35 (m, 2H), 1.84-1.77 (m, 2H), 1.59-1.55 (m, 2H).
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2 -il)piperidin-2,6-dion (I-188)
[1333] U 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-12; 100 mg; 0,291 mmol) u DIPEA (0,30 mL; 1,7 mmol) i MeCN (1 mL) dodat je ((1R,2R,3S,4S)-7-oksabiciklo [2.2.1]heptan-2,3-diil)bis(metilen) dimetansulfonat (166-3; 110 mg; 0,349 mmol) i dobijena smeša je mešana na 140°C tokom 12 h pod µW zračenjem. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM da bi se dobio I-188 (9,30 mg; 0,019 mmol; prinos 7%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 466,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 9.51 (br s, 1H), 7.67 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 7.05-6.76 (m, 2H), 5.07 (dd, J = 13.1, 5.5 Hz, 1H), 4.77-4.53 (m, 1H), 4.47-4.23 (m, 1H), 4.23-4.01 (m, 3H), 3.27-3.00 (m, 2H), 2.93-2.70 (m, 3H), 2.33-1.91 (m, 8H), 1.77-1.51 (m, 6H), 1.40-1.25 (m, 2H).
Primer 167: 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-189)
[1334]
[1335] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- diona (I-96; 75,0 mg; 0,175 mmol) i AgOTf (164-2; 225 mg; 0,877 mmol) u DCM (0,5 mL) dodat je bromoetan (167-1; 0,13 mL; 1,8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Reakciona smeša je filtrirana i isprana sa 50% zasićenim Na2CO3(vod.). Faze su razdvojene, i vodena faza je ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) nakon čega je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-189 (5,0 mg; 9,5 µmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 456,3.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.04 (br s, 1H), 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.97-6.84 (m, 2H), 5.12-4.97 (m, 1H), 4.83 (br s, 1H), 4.34-4.11 (m, 2H), 3.37 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.29 (br s, 1H), 3.00 (br s, 1H), 2.94-2.63 (m, 4H), 2.43 (br s, 1H), 2.36-2.20 (m, 1H), 2.19-1.78 (m, 5H), 1.78-1.45 (m, 6H), 1.06 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Primer 168: 3-(5-(((1S,2S)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(SH)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-190)
[1336]
Korak 1. Etil 2-(2-etoksi-2-oksoetil)nikotinat (168-2)
[1337] U rastvor 2-(2-etoksi-2-oksoetil)nikotinske kiseline (3,50 g; 16,7 mmol) u DMF (50 mL) dodat je NaHCO3(1,61 g; 19,2 mmol) i jodoetan (2,0 mL; 25 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80°C tokom 4 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 15% EtOAc u heptanu da bi se dobio 168-2 (3,30 mg; 13,9 mmol; prinos 83%) u vidu ulja bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 237,9.
Korak 2.2-(3-(hidroksimetil)piridin-2-il)etan-1-ol (168-3)
[1338] U rastvor etil 2-(2-etoksi-2-oksoetil)nikotinata (168-2; 4,00 g; 16,9 mmol) u EtOH (50 mL) na 0°C dodati su NaBH4(3,18 g; 84,3 mmol) i CaCl2(1,68 g; 15,2 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, ugašena sa 50% vodenim EtOH (10 mL) i koncentrovana do suvoće. Dobijeni ostatak je razblažen sa EtOH, refluksovan 2 h, čvrsta supstanca je filtrirana, a filtrat je koncentrovan do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio 168-3 (2,00 mg; 13,1 mmol; prinos 77%) u vidu ulja žute boje. MS [M+H]<+>=154,3.
Korak 3.2-(2-bromoetil)-3-(bromometil)piridin (168-4)
[1339] U mešani rastvor 2-(3-(hidroksimetil)piridin-2-il)etan-1-ola (168-3; 2,00 g; 13,1 mmol) u THF (50 mL) na 0°C dodat je PBr3(3,7 mL; 39 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 75 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće.
Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 1% MeOH u DCM da bi se dobio 168-4 (0,780 g; 0,484 mmol; 21%) u vidu čvrste supstance smeđe boje.
<1>H NMR (600 MHz, CDCl3): 8.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.181-7.148 (m, 1H), 4.61-4.46 (m, 4H), 3.42-3.35 (m, 2H).
Korak 4.3-(5-(((1S,2S)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(SH)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-190)
[1340] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,580 mmol) u MeCN (10 mL) je dodat 2-(2-bromoetil)-3-(bromometil)piridine (168-4; 243 mg; 0,873 mmol) i DIPEA (0,62 mL; 3,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod µW zračenjem. Reakciona smeša je zatim razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 5% MeOH u DCM da bi se dobio I-190 (45,0 mg; 970 µmol; 17%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+H]<+>= 461,5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 8.319-8.31 (m, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.14-7.06 (m, 2H), 5.09-5.05 (m, 1H), 4.90-4.86 (m,1H), 4.42 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 38 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 3.67 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.14-2.95 (m, 1H), 2.95-2.81 (m, 5H), 2.67-2.33 (m, 2H), 2.12-1.96 (m, 3H), 1.73-159 (m, 4H).
Primer 169: 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1s,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion (I-191)
[1341]
[1342] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-yl)piperidin-2,6-diona (I-12; 0,20 g; 0,52 mmol) i (1s,4s)-4-metoksicikloheksan-1-karbaldehid(104-3; 0,11 g; 0,79 mmol) i TFE (10 mL) pri 0°C dodat je NaBH(OAc)3(0,17 g; 0,79 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Nakon potpune potrošnje početnog materijala, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL).
Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silika gel hromatografijom eluiranjem sa 4% MeOH u DCM da bi se dobilo jedinjenje I-191 (52 mg; 0,11 mmol; prinos 21%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M+H]<+>= 470,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz 1H), 7.18 (s, 1H), 7.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.09-5.06 (m, 1H), 4.55 (bs, 1H), 4.4 (dd, J = 17.2 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 17.2 Hz, 1H), 3.17 (s, 3H), 3.087 (bs, 1H), 2.90-2.86 (m, 1H), 2.56-2.38 (m, 2H), 2.38-2.33 (m, 3H), 2.10-2.09 (m,1H), 1.99-1.88 (m, 3H), 1.75-1.615 (m, 5H), 1.48-1.32 (m, 5H), 1.23-176 (m, 3H).
Primer 170: Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-((R)-3-metoksipirolodin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-192)
[1343]
Korak 1. Pojedinačni enantiomer 5-((2-((R)-3-metoksipirolodin-1-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (170-2)
[1344] (R)-3-metoksipirolodin hidrohlorid (170-1; 31 mg; 0,23 mmol) i Cs2CO3(99 mg; 0,31 mmol) su suspendovani u MeCN (1,4 mL) i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta. Reakciona smeša je dodata u balon koji je sadržao 154-4 (Primer 154; 80 mg; 0,19 mmol) i DIPEA (50 µL; 0,29 mmol) a zatim pročišćena azotom prilikom sonikacije tokom 20 minuta. Dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 3 sata pod µW zračenjem. Dodatni Cs2CO3(99 mg; 0,31 mmol) i (R)-3-metoksipirolidin hidrohlorid (31 mg; 0,23 mmol) su dodati i mešanje je nastavljeno pri 120°C tokom 3 sata pod µW zračenjem. Reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću dihlormetana. Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu a zatim 0-20% MeOH u DCM da bi se dobio 170-2 (12,3 mg; 0,0390 mmol; prinos 20%) u vidu ulja smeđe boje. MS [M+H]<+>= 318,2.
Korak 2. Pojedinačni enantiomer etil 2-(hlorometil)-4-((2-((R)-3-metoksipirolodin-1-il)ciklopentil)oksi)benzoat (170-3)
[1345] Mešanom rastvoru 170-2 (12,3 mg; 0,0390 mmol)) u DCE (0,19 mL) i etanola (0,190 mL) pri 70°C dodat je tionil hlorid (0,034 mL; 0,47 mmol) kapanjem i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, ugašena zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovana sa EtOAc (x3).
Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane da bi se dobio 170-3 u vidu ulja smeđe boje. Sirovi materijal je korišćen direktno u sledećoj reakciji. MS [M+H]+ = 382,2
Korak 3. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-((R)-3-metoksipirolodin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-192)
[1346] U balon koji je sadržao rastvor 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 13 mg; 0,078 mmol) u DMF (0,16 mL) dodata je DIPEA (34 µL; 0,20 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 170-3 (15 mg; 0,039 mmol) rastvoren u DMF (0,23 mL) i balon je ponovo ispražnjen i napunjen azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 6 sati pod µW zračenjem i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu a zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN; 3,5 min. gradijent; U cevčicama za sakupljanje bilo je ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-192 (2,0 mg; 3,9 µmol; prinos 10%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>428,2.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.74 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.92 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 4.95 (ddd, J = 13.3, 5.2, 1.5 Hz, 1H), 4.67 (dt, J = 6.8, 3.7 Hz, 1H), 4.30-4.14 (m, 2H), 3.78 (ddt, J = 8.8, 6.1, 3.1 Hz, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.86-2.78 (m, 2H), 2.73-2.58 (m, 5H), 2.57-2.50 (m, 1H), 2.31 (qd, J = 13.1, 4.7 Hz, 1H), 2.15-1.98 (m, 2H), 1.94-1.88 (m, 1H), 1.67-1.49 (m, 5H).
Apsolutna stereohemija nije utvrđena.
Primer 171: Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-193)
[1347]
Korak 1. Pojedinačni enantiomer 5-((2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (171-2)
[1348] (S)-3-metoksipirolidin hidrohlorid (171-1; 20 mg; 0,15 mmol) i Cs2CO3(65 mg; 0,20 mmol) su suspendovani u MeCN (1,4 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta i zatim dodata u balon sa 154-4 (Primer 154; 52 mg; 0,12 mmol) i DIPEA (0,032 mL; 0,19 mmol). Balon je pročišćen azotom uz sonikaciju tokom 20 minuta. Reakciona smeša je mešana na 120°C 3 h pod µW zračenjem, a zatim ugašena vodom i ekstrahovana dihlorometanom. Organske faze su kombinovane, propuštene kroz fazni separator i koncentrovane na Celite<®>. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heptanu a zatim 0-20% MeOH u DCM da bi se dobio 171-2 (18 mg; 0,055 mmol; prinos 20%) u vidu ulja bledo žute boje. MS [M+H]<+>= 318,0.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.93-6.85 (m, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.92-4.55 (m, 1H), 4.02-3.66 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.08-2.85 (m, 3H), 2.82-2.53 (m, 2H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 2H), 1.95-1.72 (m, 5H).
Korak 2. Pojedinačni enantiomer etil 2-(hlorometil)-4-((2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)benzoata (171-3)
[1349] U mešanu suspenziju 171-2 (17 mg; 0,055 mmol) u DCE (0,28 mL) i etanola (0,28 mL) pri 70°C dodat je tionil hlorid (0,048 mL; 0,66 mmol) kapanjem i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodena smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (x3). Kombinovane organske faze su propuštene kroz separator faza i koncentrovane da bi se dobio 171-3 u vidu ulja smeđe boje, koje je iskorišćeno direktno u sledećoj reakciji bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 382,3
Korak 3. Pojedinačni enantiomer 3-(5-((2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-193)
[1350] U balon koji je sadržao rastvor 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorida (1-1c; 18,1 mg; 0,11 mmol) u DMF (0,22 mL) dodata je DIPEA (48 µL; 0,28 mmol) i balon je ispražnjen i ponovo napunjen azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, dodat je 171-3 (21 mg; 0,055 mmol) rastvoren u DMF (0,33 mL) i balon je ponovo ispražnjen i napunjen azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 85°C preko noći i zatim mešana na 150°C tokom 6 sati pod µW zračenjem i zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% NEt3) u heptanu a zatim dalje prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN; 3,5 min. gradijent; U cevčicama za sakupljanje bilo je ~ 3 kapi mravlje kiseline). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-193 (5,5 mg; 11 µmol; prinos 20%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,3.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ 8.80 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.92 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 4.95 (ddd, J = 13.6, 5.3, 2.3 Hz, 1H), 4.78-4.70 (m, 1H), 4.30-4.14 (m, 2H), 3.82 (tt, J = 6.0, 2.9 Hz, 1H), 3.10 (s, 3H), 3.00-2.87 (m, 2H), 2.85-2.75 (m, 1H), 2.74-2.58 (m, 4H), 2.30 (qdd, J = 13.4, 4.8, 2.8 Hz, 1H), 2.15-1.88 (m, 4H), 1.73-1.51 (m, 5H). Apsolutna stereohemija nije utvrđena.
Primer 172: 3-(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-194)
[1351]
[1352] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,58 mmol) u MeCN (10 mL) dodati su (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (53-2; 240 mg; 0,87 mmol) i DIPEA (0,32 mL; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod µW zračenjem. Reakcija je zatim razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 6% MeOH u DCM da bi se dobio I-194 (50 mg; 0,11 mmol; 19%) u vidu čvrste supstance bledo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 448,25.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.98 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.58-4.54 (m, 1H), 4.41-4.22 (m, 2H), 3.13-3.11 (m, 1H), 2.95-2.87 (m, 2H), 2.67-2.51 (m, 5H), 2.42-2.12 (m, 6H), 1.99-1.85 (m, 2H), 1.72-1.55 (m, 2H), 1.48-1.39 (m, 1H).
Primer 173: So 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O )OH (I-195)
[1353]
[1354] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-96; 100 mg; 0,234 mmol) u MeCN (4 mL), dok je bubrio sa azotom, dodata je 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil) sirćetna kiselina (173-1; 208 mg; 1,17 mmol) i CuI (9 mg; 0,5 µmol) i dobijena smeša je mešana na 100°C tokom 1 sata pod µW. Reakciona smeša je dodata u vodu (20 mL) i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL). Vodena smeša je ekstrahovana sa 20% i-PrOH u DCM (x3) i kombinovane organske faze su prošle kroz kolonu za separaciju faza i koncentrovane su do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-15% i-PrOH (sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) a zatim dalje prečišćen metodom HPLC reverznih faza (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 10-30% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-195 (7,0 mg; 0,013 mmol; prinos 5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 478,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.69 (t, J = 77.9Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.74-4.67 (m, 1H), 4.45-4.19 (m, 2H), 4.15-4.02 (m, 1H), 2.98-2.82 (m, 2H), 2.80-2.65 (m, 2H), 2.59 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 2.40 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 1H), 2.30-2.19 (m, 2H), 2.14-1.77 (m, 5H), 1.73-1.40 (m, 6H).
Primer 174: 3-(5-(((1S,2S)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion (I-196)
[1355]
Korak 1. Piridin-3,4-diildimetanol hidrohlorid (174-2)
[1356] U rastvor dimetil piridin-3,4-dikarboksilata (174-1; 1,50 g; 7,68 mmol) u EtOH (45 mL) na 0°C dodati su NaBH4(1,45 g; 38,4 mmol) i CaCl2(0,760 g; 6,92 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, ugašena sa 50% vodenim EtOH (10 mL) i koncentrovana do suvoće. Dobijeni ostatak je razblažen sa EtOH, refluksovan 2 h, čvrsta supstanca je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi materijal je tretiran sa 1,4-dioksan-HCl, mešan 1 h i koncentrovan do suvoće. Ostatak je triturisan dietil etrom i osušen pod visokim vakuumom da bi se dobila HCl so 174-2 (1,30 g; 7,40 mmol; prinos 96%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 140,2.
Korak 2.3,4-bis(hlorometil)piridin hidrohlorid (174-3)
[1357] U mešani rastvor piridin-3,4-diildimetanol hidrohlorida (174-2; 800 mg; 4,55 mmol) u DCM (15 mL) na 0°C dodat je SOCh (15 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je tretiran sa 1,4-dioksan-HCl, mešan 1 h i koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je triturisan dietil etrom i osušen pod visokim vakuumom da bi se dobila HCl so 174-3 (800 mg; 3,76 mmol; prinos 83%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 176,2.
Korak 3.3-(5-(((1S,2S)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion (I-196)
[1358] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 150 mg; 0,440 mmol) u MeCN (10 mL) dodat je 3,4-bis(hlorometil)piridin hidrohlorid (174-3; 139 mg; 0,650 mmol) i DIPEA (0,39 mL; 2,2 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C tokom 16 h pod zračenjem µV. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana. Filtrat je tretiran sa 1,4-dioksan-HCl i mešan 1 h. Dobijeni rastvor je liofilizovan, dobijeni sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC reverzne faze (Kolona: KINETEX (150 mm x 21,2 mm), Mobilna faza A: 0.01% HCOOH (vod.), Mobilna faza B: MeCN, Vreme (min)/%B: 0/5, 2/10, 10/628.4 Brzina protoka: 20 ml/min; Razblaživač:
Mobilna faza). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-196 (15,0 mg; 33,0 µmol; prinos 7%). MS [M+H]<+>= 447,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.39-8.38 (m, 1H) 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.367.30 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09-5.04 (m, 1H), 4.90-4.85 (m, 1H), 4.43-4.22 (m, 3H), 3.99-3.96 (m, 3H), 3.29-3.24 (m, 1H), 2.95-2.86 (m, 2H), 2.66-2.32 (m, 1H), 2.30-2.22 (m, 2H), 2.0-1.96 (m, 2H), 1.74-1.65 (m, 3H).
Primer 175: So 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC (O)OH (I-197)
[1359]
Korak 1. terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-il)karbamat (175-2)
[1360] Smeša (3aR,6S,6aS)-oktahidrociklopenta[b]pirol-6-ola (175-1; 2,00 g; 13,4 mmol), di-terc-butil dikarbonata (3,51 g; 16,1 mmol), TEA (2,8 mL; 20 mmol) i MeOH (10 mL) je snažno mešana na sobnoj temperaturi 48 sati. Reakciona smeša je razblažena slanim rastvorom (25 mL) i ekstrahovana sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobilo 175-2 (3,28 g; 13,2 mmol; prinos 98%) u vidu žutog ulja. Proizvod je iskorišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 7.37-7.09 (m, 4H), 5.09 (s, 1H), 4.84 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.34 (td, J = 7.8, 6.3 Hz, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.23 (dd, J = 15.7, 7.6 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 15.7, 8.1 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H).
Korak 2. Terc-butil ((1S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi )-2,3-dihidro-1H-inden-1-il)karbamat (175-3)
[1361] Smeši 3-(5-bromo-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-diona (31-3a; 2,0 g; 4,4 mmol), Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(0,049 g; 0,044 mmol), NiCl2(dimetoksietana) (0,048 g; 0,22 mmol), TMP (1,1 mL; 6,6 mmol) i terc-butil ( (1S,2S)-2-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-il)karbamata (175-2; 1,21 g; 4,9 mmol) pod atmosferom azota dodat je MeCN (20 mL) i rezultujući smeša je mešana pod zračenjem plavih LED svetla tokom 20 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 40% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1) u DCM da bi se dobilo 175-3 (2,51 g; 4,04 mmol; prinos 92%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M-H]<->= 620,2.
Korak 3. So 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC (O)OH (I-197)
[1362] U terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)-2,3-dihidro-1H-inden-1-il)karbamate (175-3; 1,92 g; 3,09 mmol) u DCM (7 mL) dodata je metansulfonska kiselina (0,80 mL; 12 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Dodata je TEA (4,3 mL; 31 mmol) kapanjem na 0°C i reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu. Dodat je N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (0,37 mL; 3,4 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa 50% zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3u vodi i ekstrahovana sa DCM:i-PrOH (v/v = 4:1) (x2). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobio sirovi I-197 (1,18 g; 3,09 mmol). Mala količina sirovog materijala je prečišćena pomoću HPLC metode reverzne faze (Kolona: X-bridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-197 (5,0 mg; 0,01 mmol; prinos 0,4%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]+ = 392,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47-7.31 (m, 1H), 7.31-7.17 (m, 4H), 7.12 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.84 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 4.52-4.21 (m, 3H), 3.61-3.54 (m, 2H), 3.10-2.75 (m, 2H), 2.66-2.55 (m, 1H), 2.46-2.26 (m, 1H), 2.06-1.93 (m, 1H).
Primer 176: So 3-(5-(((1S,2S)-1-(etilamino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion HC(O)OH (I-198)
[1363]
[1364] U 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-197; 60 mg; 0,14 mmol) u DIPEA (0,2 mL; 0,6 mmol) i DMF (1 mL) dodat je jodoetan (0,016 mL; 0,20 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN, 3,5 min. gradijent; sakupljene frakcije sadržale su kap mravlje kiseline) da bi se dobila formatna so I-198 (19 mg; 0,041 mmol; prinos 29%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 420,5.<1>H NMR (400 MHz, Deuterijum oksid) δ 8.45 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.43-7.32 (m, 3H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.24-5.18 (m, 1H), 5.13 (dd, J = 13.3, 4.9 Hz, 1H), 4.64-4.42 (m, 3H), 3.65 (dd, J = 17.3, 5.8 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 2.98-2.77 (m, 4H), 2.60-2.42 (m, 1H), 2.36-2.20 (m, 1H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Primer 177: 3-(5-(((1S,2S)-1-(dietilamino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion (I-199)
[1365]
[1366] U 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-197; 120 mg; 0,267 mmol), dodat je acetaldehid (2-1;
0,06 mL; 1 mmol) u TFE (2 mL) NaBH(OAc)3(226 mg; 1,07 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1% NEt3) da bi se dobio 1-199 (18,9 mg; 0,0410 mmol; prinos 15%) u vidu belog praha. MS [M+H]<+>= 448,1.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.47 (s, 1H), 7.96-7.57 (m, 1H), 7.40-7.27 (m, 1H), 7.26-7.14 (m, 3H), 7.13-7.00 (m, 2H), 5.21-4.97 (m, 2H), 4.72 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.51-4.21 (m, 2H), 3.50 (dd, J = 16.9, 7.3 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 16.9, 4.4 Hz, 1H), 2.87-2.78 (m, 2H), 2.66-2.44 (m, 4H), 2.42-2.24 (m, 1H), 2.22-2.13 (m, 1H), 1.07 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
Primer 178: So 3-(5-(((1S,2S)-1-(etil(metil)amino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-200) i 3-(5-(((1S,2S)-1-(dimetilamino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin -2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-201)
[1367]
Korak 1. Smeša 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- diona i 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-1-(hidroksimetil) piperidin-2,6-diona (178-1)
[1368] U terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-1-oksoizondolin-5-il)oksi)-2,3-dihidro-1H-inden-1-il)karbamat (175-3; 1,92 g; 3,09 mmol) u DCM (7 mL) dodata je metansulfonska kiselina (0,80 mL; 12 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Kapanjem je dodata TEA (4,3 mL; 31 mmol) na 0°C i reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu. Dodat je N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (0,37 mL; 3,4 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa 50% zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3u vodi i ekstrahovana sa DCM:i-PrOH (v/v = 4:1) (x2). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće da bi se dobilo 178-1 (1,18 g; 3,09 mmol), što je preneto u sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 2. So 3-(5-(((1S,2S)-1-(etil(metil)amino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion (I-200) i 3-(5-(((1S,2S)-1-(dimetilamino)-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin -2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-201)
[1369] U smešu 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona i 3-(5-(((1S,2S)-1-amino-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-1-(hidroksimetil)piperidin-2,6-diona (178-1; 100 mg; 0,222 mmol) i NaBH(OAc)3(141 mg; 0,667 mmol) u DCM (2 mL), pod atmosferom azota, dodat je acetaldehid (2-1; 0,037 mL; 0,67 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana i zatim koncentrovana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: Xbridge C18 OBD 5um 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 5 mM NH4OH 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 15-40% MeCN; 3,5 min. gradijent; sakupljene frakcije sadržale su kap mravlje kiseline) da bi se dobila so mravlje kiseline I-201 (13,0 mg; 0,028 mmol; prinos 12%) u vidu belog praha.
[1370] Frakcije koje su sadržale nečist I-200 su kombinovane, liofilizovane i zatim dalje hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 0,1% NEt3) u DCM (sa 0,1 % NEt3) da bi se dobilo I-200 (8,9 mg; 0,021 mmol; prinos 9%) u vidu belog praha. Podaci za I-200: MS [M+H]<+>= 434,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.21 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.37-7.30 (m, 1H), 7.28-7.17 (m, 3H), 7.11-7.04 (m, 2H), 5.19-5.05 (m, 2H), 4.57 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.42-4.26 (m, 2H), 3.49 (dd, J = 17.0, 7.0 Hz, 1H), 2.96 (dd, J = 17.0, 3.9 Hz, 1H), 2.90-2.73 (m, 2H), 2.56 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.41-2.27 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.19-2.13 (m, 1H), 1.10 (t, J = 7.1 Hz, 3H). Podaci za I-201: MS [M+H]<+>= 420,2.<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ 8.20 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.37-7.22 (m, 3H), 7.14-7.09 (m, 1H), 7.05 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.27-5.19 (m, 1H), 5.13 (dd, J= 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.43-4.28 (m, 2H), 3.54 (dd, J = 17.1, 6.7 Hz, 1H), 3.02 (dd, J = 17.1, 3.3 Hz, 1H), 2.90-2.74 (m, 2H), 2.40 (s, 6H), 2.38-2.25 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H).
Primer 179: 3-(5-(((1R,2S,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH so (I-207) i 3-(5-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-208)
[1371]
Korak 1. Dietil 3-metilheksandioat (179-2)
[1372] U rastvor 3-metiladipinske kiseline (179-1; 2,00 g; 12,6 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je tionil hlorid (2,0 mL; 27 mmol) kapanjem i dobijena smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je razblažen sa 1:1 rastvorom zasić. natrijum bikarbonata (50 mL) i ekstrahovan dihlorometanom (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su zatim osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane da bi se dobilo sirovi 186-2 (2,71 g; 12,5 mmol). Sirovi proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 217,2.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 4.22-4.09 (m, 4H), 2.45-2.26 (m, 3H), 2.23-2.09 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 1H), 1.62-1.47 (m, 1H), 1.36 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 1.33-1.19 (m, 6H), 0.98 (d, J= 6.7 Hz, 3H).
Korak 2. Etil 2-metil-5-oksociklopentan-1-karboksilat (179-3)
[1373] U rastvor dietil 3-metilheksandioata (179-2; 2,71 g; 12,5 mmol) u THF (60 mL) dodat je natrijum etoksid (5,70 mL; 15,3 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Reakcioni rastvor je ugašen vodom (40 mL) i zatim ekstrahovan dihlorometanom (3 x 40 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-40% EtOAc u heptanima da bi se dobilo 179-3 (1,42 g; 8,31 mmol; prinos 66% smeše regioizomera) u vidu tečnosti. MS [M+H]<+>= 171,1.
Korak 3. Etil trans-2-hidroksi-5-metilciklopentan-1-karboksilat (179-4)
[1374] U rastvor etil 2-metil-5-oksociklopentan-1-karboksilata (179-3; 1,42 g; 8,31 mmol) u Et2O (28 mL) dodat je cink(II)tetrahidroborat (150-2; 24 mL; 9,60 mmol; 0,4M u THF) i dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 1 sata. Reakciona smeša je zatim ugašena kapanjem zasić. rastvora amonijum acetata (100 mL) i ekstrahovana dihlorometanom (3 x 80 mL).
Kombinovane organske faze su zatim osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-20% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 179-4 (496 mg; 2,88 mmol; prinos 35%; smeša regioizomera i dijastereoizomera) u vidu bezbojne tečnosti. MS [M+H]<+>= 173,2.
Korak 4. Etil trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentan-1-karboksilat (179-5)
[1375] U rastvor etil trans-2-hidroksi-5-metilciklopentan-1-karboksilata (179-4; 496,4 mg; 2,88 mmol), imidazola (498 mg; 7,32 mmol) i DMAP (31,7 mg; 0,259 mmol) u THF (10 mL) dodat je TBDPSCl (0,90 mL; 3,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (160 mL) i isprana vodom (30 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-10% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 179-5, u vidu bistre, viskozne tečnosti. Ovaj uzorak je zatim dalje prečišćen korišćenjem hiralnog SFC (kolona: 2,1 × 25,0 cm Chiralpak OD-H; CO2korastvarač: heptan/2-propanol (v/v = 9:1) sa 10 mM NH3; Izokratski metod: 15% ko-rastvarač pri 80 g/min; Sistemski pritisak: 150 bara) da bi se dobilo 179-5 (513 mg; 1,19 mmol; prinos 41%; smeša trans-regioizomera) u vidu bezbojnog ulja. Vršna vrednost 1 hiralnog SFC: Rt 0,83 min; MS [M+18]<+>= 428,4.
Korak 5. Trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentan-1-karboksilna kiselina (179-6)
[1376] Etil trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentan-1-karboksilat (179-5; 513 mg; 1,25 mmol) i litijum hidroksid monohidrat (519,9 mg; 12,39 mmol) su rastvoreni u THF (3 mL), MeOH (3 mL) i vodi (1 mL) u reakcionoj bočici sa šipkom za mešanje i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 5 dana. Reakciona smeša je razblažena vodom (30 mL) i acidifikovana sa 1 N rastvorom HCl do -pH 5. Rastvor je zatim ekstrahovan etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su zatim osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvoće da bi se dobio sirovi 179-6 (591 mg; 1,54 mmol; smeša transregioizomera) u vidu žutog ulja koje je korišćeno u sledećem koraku bez prečišćavanja. MS [M]<->= 381,3.
Korak 6. Terc-butil (trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentil)karbamat (179-7)
[1377] U reakcionu bočicu koja sadrži trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentan-1-karboksilnu kiselinu (179-6; 478 mg; 1,25 mmol), TBAB (60 mg; 0,19 mmol) i cink trifluorometansulfonat (23 mg; 0,062 mmol; 0,4 M u THF) dodati su natrijumazid (298 mg; 4,58 mmol) i THF (4 mL) i reakciona bočica je stavljena pod atmosferu azota. Zatim su dodati Boc-anhidrid (320 mg; 1,47 mmol) i terc-butanol (0,072 mL; 0,75 mmol) i dobijena smeša je mešana na 40°C tokom 24 sata. Reakciona smeša je ugašena sa 10% rastvorom natrijum nitrita (25 mL) i etil acetatom (10 mL) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 30 minuta. Rastvor je razblažen etil acetatom (120 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-20% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 179-7 (274 mg; 0,603 mmol; prinos 48%) u vidu bistre tečnosti, kao smeša trans-regioizomera. MS [M+H]<+>= 454,4.
Korak 7. Terc-butil (trans-2-hidroksi-5-metilciklopentil)karbamat (179-8)
[1378] U reakcionu bočicu sa šipkom za mešanje koja je sadržala rastvor terc-butil (trans-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-5-metilciklopentil)karbamata (179-7; 162 mg; 0,358 mmol) u THF (2 mL) dodat je 1M TBAF u THF (0,45 mL; 0,45 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcioni rastvor je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobio 179-8 (92,1 mg; 0,342 mmol; prinos 96%) u vidu čvrste supstance bele boje, kao smeša trans-regioizomera. MS [M+H]<+>= 216,3.
Korak 8. Terc-butil ((1R,2S,SR)-2-metil-5-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (179-10) i terc-butil ((1S,2R,SS)-2-metil-5-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (179-11)
[1379] U reakcionu bočicu sa šipkom za mešanje dodat je 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (179-9; 89,8 mg; 0,422 mmol), terc-butil (trans-2-hidroksi-5-metilciklopentil)karbamat (179-8; 92,1 mg; 0,428 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (4,5 mg; 0,020 mmol), dtbbpi (10 mg; 0,038 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(4,6 mg; 4,1 µmol) ai reakciona bočica je zatim pročišćena azotnim gasom. Dodati su MeCN (2 mL) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (0,08 mL; 0,5 mmol) i dobijena smeša je mešana pod plavim LED svetlima na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Sirovi rastvor je razblažen etil acetatom i filtriran kroz Celite<®>. Precipitat je ispran etil acetatom i filtrat je koncentrovan do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-55% EtOAc u heptanu da bi se dobili racemski trans proizvodi. Smeša je razdvojena hiralnom SFC (Kolona: 2,1 × 25,0 cm Chiralpak IH; CO2ko-rastvarač: IPA; Izokratska metoda: 35% ko-rastvarač pri 80 g/min; Sistemski pritisak: 150 bara) da bi se dobili: Enantiomer 1 (179-10) (hiralna SFC Rt = 2,07 min.; 24,0 mg; 0,068 mmol; prinos 16%) u vidu čvrste supstance bele boje, MS [M-tBu+H]<+>= 292,3<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.00-6.90 (m, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.71-4.50 (m, 2H), 3.61 (td, J = 8.5, 5.0 Hz, 1H), 2.19-2.04 (m, 1H), 1.97-1.75 (m, 3H), 1.53-1.46 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.11 (d, J = 6.5 Hz, 3H): Enantiomer 2 (179-11) (hiralna SFC Rt = 2,30 min.; 25,0 mg; 0,071 mmol; prinos 17%) u vidu čvrste supstance bele boje, MS [M-tBu+H]<+>= 292,3.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.74-4.49 (m, 2H), 3.61 (td, J = 8.5, 4.9 Hz, 1H), 2.21-2.03 (m, 1H), 1.98-1.73 (m, 3H), 1.52-1.47 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.11 (d, J = 6.5 Hz, 3H). Apsolutna stereohemija dva enantiomera koji odgovaraju dva pika proizvoda je nepoznata i dodeljena je proizvoljno.
Korak 9.5-(((1R,2R,3S)-2-amino-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (179-12)
[1380] U reakcionu bočicu sa mešalicom koja sadrži rastvor terc-butil ((1R,2S,5R)-2-metil-5-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi) ciklopentil)karbamat (179-10; vršna vrednost 1; 24 mg; 0,069 mmol) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0,05 mL; 0,65 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 14 h. Rastvor je zatim koncentrovan do suvoće.
Dobijeni proizvod je zatim azeotropovan sa metanolom i dihlorometanom da bi se dobio sirovi 179-12 u vidu bistre gume koja je preneta u sledeći korak bez prečišćavanja MS [M+H]<+>= 248,3.
Korak 10.5-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (179-13)
[1381] U reakcionu bočicu sa mešalicom koja je sadržala rastvor 5-(((1R,2R,3S)-2-amino-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (179-12; 25 mg; 0,069 mmol) i acetaldehida (0,02 mL; 0,356 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (78 mg; 0,368 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 23 h.
Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom i 50% zas. vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i propuštena kroz separator faza. Vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom. Kombinovane organske faze su zatim koncentrovane do suvoće da bi se dobio sirovi 179-13 u vidu tečnosti boje ćilibara. MS [M+H]<+>= 304,3. Proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja.
Korak 11. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)benzoat (179-14)
[1382] U rastvor 5-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (179-13; 21 mg; 0,069 mmol) u etanolu (1 mL) dodat je tionil hlorid (0,03 mL; 0,4 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C tokom 17 h. Reakciona smeša je koncentrovana i azeotropirana sa dihlorometanom da bi se dobio sirovi 179-14 u vidu čvrste supstance svetlo smeđe boje. Proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 368,3.
Korak 12. So 3-(5-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion HC(O)OH (I-207)
[1383] U rastvor etil 2-(hlorometil)-4-(((1R,2R,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)benzoata (179-14; 25,5 mg; 0,069 mmol) u DMF (0,5 mL) i DIPEA (0,07 mL; 0,4 mmol) gaziran azotom dodat je 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 18,8 mg; 0,114 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je ponovo gazirana azotom.
Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 20 h i zatim je razblažena etil acetatom (40 mL). Vodena smeša je isprana sa zas. vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovan do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOH:EtOAc (v/v = 1:3) u DCM sa 0,1% trietilamin modifikatorom i zatim dalje prečišćen metodom HPLC reverzne faze (Kolona: Xbridge C18 OBD 5 µm 30 x 50 mm; Uslovi:
Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN, 3,5 min. gradijent) da bi se dobila formatna so I-207 (0,5 mg; 1 µmol; prinos 2%). MS [M+H]<+>= 414,4.<1>H NMR (400 MHz, Acetonitril-d3) δ 8.79 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13-7.06 (m, 1H), 7.01 (dd, J= 8.4, 2.2 Hz, 1H), 5.11-4.94 (m, 1H), 4.85-4.73 (m, 1H), 4.43-4.22 (m, 2H), 3.02 (dd, J = 9.3, 5.0 Hz, 1H), 2.89-2.58 (m, 7H), 1.75-1.66 (m, 1H), 1.37 (dtd, J = 12.4, 10.2, 7.7 Hz, 1H), 1.12 (d, J= 6.5 Hz, 3H), 1.06 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
Korak 13.5-(((1S,2R,SS)-2-amino-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (179-15)
[1384] U reakcionu bočicu sa mešalicom koja sadrži rastvor terc-butil ((1S,2R,SS)-2-metil-5-((1-okso-1,3-dihidroizobenzofuran-5-il)oksi) ciklopentil)karbamat (179-11; vršna vrednost 2; 25 mg; 0,072 mmol) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0,05 mL; 0,65 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 14 h. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće i zatim azeotropirana sa metanolom i dihlorometanom da bi se dobio sirovi 179-15 u vidu bistre gume. Proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 248,3.
Korak 14.5-(((1S,2s,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-on (179-16)
[1385] U reakcionu bočicu sa mešalicom koja je sadržala rastvor 5-(((1S,2R,SS)-2-amino-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (179-15; 26 mg; 0,072 mmol) i acetaldehida (0,02 mL; 0,4 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (82 mg; 0,39 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 23 h. Reakcioni rastvor je razblažen dihlorometanom i 50% zas. vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i propušten kroz separator faza. Vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom i zatim koncentrovan do suvoće da bi se dobio sirovi 179-16 (25 mg; 0,065 mmol; prinos 90%) u vidu tečnosti boje ćilibara. Proizvod je prenet na sledeći korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 304,4.
Korak 15. Etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)benzoat (179-17)
[1386] U rastvor 5-(((1S,2S,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)izobenzofuran-1(3H)-ona (179-16; 22 mg; 0,073 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je tionil hlorid (0,03 mL; 0,4 mmol) i dobijena smeša je mešana na 70°C tokom 17 h. Reakcioni rastvor je koncentrovan i azeotropiran dihlorometanom da bi se dobio sirovi 179-17 u vidu gume tamno smeđe boje. Sirovi materijal je prenet u sledeći reakcioni korak bez prečišćavanja. MS [M+H]<+>= 368,3.
Korak 16.3-(5-(((1S,2S,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-208)
[1387] Rastvoru etil 2-(hlorometil)-4-(((1S,2S,3S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)benzoata (179-17; 26,7 mg; 0,073 mmol) u DMF (0,5 mL) i DIPEA (0,07 mL; 0,4 mmol) i gaziranom azotom dodat je 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (1-1c; 19,5 mg; 0,118 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je ponovo gazirana azotom.
Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 20 h i zatim je razblažena etil acetatom (40 mL). Smeša je isprana sa zas. vod. rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% EtOH:EtOAc (v/v = 1:3) u DCM sa 0,1% trietilamin modifikatorom i zatim dalje prečišćen metodom HPLC reverzne faze (Kolona: Xbridge C18 OBD 5 µm 30 x 50 mm; Uslovi: Voda/MeCN sa 0,1% mravlje kiseline 75 mL/min; ubrizgavanjem 1,5 mL; Gradijent: 5-20% MeCN; 3,5 min. gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-208 (1,1 mg; 2,27 µmol; prinos 3%). MS [M+H]<+>= 414,4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20-7.14 (m, 1H), 7.07-6.98 (m, 1H), 5.12-5.01 (m, 1H), 4.76-4.66 (m, 1H), 4.44-4.22 (m, 2H), 2.96-2.82 (m, 2H), 2.06-1.92 (m, 2H), 1.89-1.71 (m, 3H), 1.66-1.53 (m, 1H), 1.38-1.25 (m, 2H), 1.05 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.99 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Primer 180: 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-202)
[1388]
[1389] U rastvor 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,580 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je 2-etoksipropan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (54-1; 374 mg; 0,870 mmol) i DIPEA (0,36 mL; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 h pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 6% MeOH u DCM da bi se dobio I-202 (25,0 mg; 0,0580 mmol; prinos 10%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 428,25.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.97 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.52 (bs, 1H), 4.40-4.23 (m, 2H), 4.00-3.97 (m, 1H), 3.52-3.56 (m, 2H), 2.87-2.810 (m, 5H), 2.60-2.32 (m, 2H), 2.10-1.96 (m, 3H), 1.75-1.63 (m, 4H), 1.39-1.38 (m, 1H), 1.07 (t, 6.8 Hz, 3H).
Primer 181: 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridin-3-iloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-203)
[1390]
[1391] Rastvoru 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (I-12; 200 mg; 0,580 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je 2-(piridin-3-iloksi)propan-1,3-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (181-6; 330 mg; 0,690 mmol) i DIPEA (0,45 g; 3,5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 120°C tokom 16 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovane do suvoće. Dobijeni sirovi materijal je prečišćen HPLC metodom reverznih faza (Kolona: ZORBAXECLIPSEXDB C18 (150 mm x 19 mm); 5,0µ; Mobilna faza-A: 0,01% HCOOH (vod.); Mobilna faza-B: acetonitril; Vreme (min)/%B: 0/5, 2/20, 10/40. Protok: 20 ml/min). Frakcije sa željenim proizvodom su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio I-203 (25,0 mg; 50,0 µmol; prinos 9%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 477,3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96 (s, 1H), 8.20-8.17 (m, 2H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33-7.25 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.58-4.22 (m, 3H), 3.77-3.73 (m, 2H), 3.12-2.67 (m, 4H), 2.60-2.32 (m, 4H), 2.14-2.12 (m, 1H), 1.98-1.95 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 4H), 1.44-1.41 (m, 1H).
Primer 182: 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-213) i 3-(5- (((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-214):
[1392]
Korak 1.5-bromo-4-fluoro-3-hidroksiizobenzofuran-1(3H)-on (182-2)
[1393] U mešani rastvor TMP (9,7 mL; 57 mmol) u THF (40 mL) pod atmosferom azota kapanjem je dodat BuLi (2,7 M u heptanu; 20,3 mL; 54,7 mmol) na 0°C i dobijeni smeša je mešana 30 min. na 0°C. Reakciona smeša je zatim ohlađena na oko -45°C (korišćenjem kupatila sa suvim ledom/MeCN) i 4-bromo-3-fluorobenzoeva kiselina (182-1; 4,99 g; 22,8 mmol), rastvorena u THF (15 mL), je dodata kapanjem nakon čega je nastavljeno mešanje na -45°C tokom 5 h. DMF (2,7 mL; 34 mmol) je zatim dodat u kapima i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je ugašena sa vod.3M HCl (40 mL) na 0°C i ekstrahovan sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 182-2 (2,91 g; 11,4 mmol; prinos 50%) u vidu čvrste supstance svetlo smeđe boje. MS [M+H]<+>= 247,0.<1>H NMR (400 MHz, Acetonitril-d3) δ 7.90 (dd, J = 8.0, 5.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 5.92 (br s, 1H).
Korak 2.3-(5-bromo-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (182-3)
[1394] Mešanom rastvoru 182-2 (2,90 g; 11,7 mmol) u DMF (20 mL) dodata je 3-aminopiperidin-2,6-dion HCl so (1-1c; 2,90 g; 17,6 mmol) i NaBH(OAc)3(6,22 g; 29,3 mmol) i dobijena smeša je mešana 2 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa H2O (50 mL) i ohlađena na 0°C sa vodenim/ledenim kupatilom što je rezultiralo formiranjem precipitata. Dobijena smeša je filtrirana i tamnoplava čvrsta supstanca je isprana sa Et2O (x3). Dobijena čvrsta supstanca je osušena u vakuumskoj peći da bi se dobilo182-3 (1,89 g; 5,31 mmol; prinos 45%) u vidu čvrste supstance sive boje. MS [M+H]<+>= 341,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.02 (s, 1H), 7.88 (dd, J = 8.0, 6.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 2.99 -2.85 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 1H), 2.47 - 2.36 (m, 1H), 2.05 - 1.96 (m, 1H).
Korak 3.3-(5-bromo-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-dion (182-4)
[1395] U mešanu suspenziju 182-3 (500 mg; 1,47 mmol) i DBU (0,44 mL; 2,9 mmol) u DMF (4 mL) dodat je SEMCl (0,39 mL; 2,2 mmol) u jednoj porciji na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ugašena sa zasić. vod. NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc (x3). Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 182-4 (232 mg; 0,463 mmol; prinos 32%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS [M-H]<->= 469,1.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.70 (dd, J = 8.0, 5.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.31-5.15 (m, 3H), 4.55 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 3.66-3.58 (m, 2H), 3.04 (ddd, J = 17.9, 4.7, 2.5 Hz, 1H), 2.96-2.84 (m, 1H), 2.35 (qd, J = 13.3, 4.7 Hz, 1H), 2.26-2.16 (m, 1H), 0.97-0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 4. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (182-5)
[1396] U smešu 182-4 (232 mg; 0,492 mmol), terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksiciklopentil)karbamata (1-1e; 149 mg; 0,738 mmol), NiCl2(dimetoksietana) (5,4 mg; 0,025 mmol), dtbbpi (6,6 mg; 0,025 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(5,5 mg; 4,9 µmol) u MeCN (4 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (TMP; 0,13 mL; 0,74 mmol). Dobijena smeša je zatim snažno mešana tokom 49 sati pod zračenjem plavih LED svetla na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 10% EtOH u DCM da bi se dobilo 182-5 (207 mg; 0,175 mmol; čistoća ~50%; prinos 36%) u vidu čvrste supstance bledo žute boje. MS [M-H]<->= 590,1. Jedinjenje je preneto u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
Korak 5.3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-213)
[1397] U rastvor 182-5 (207 mg; 0,175 mmol; -50% čistoće) u MeCN (1 mL) dodata je metan sulfonska kiselina (0,11 mL; 1,7 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Et3N (0,37 mL; 2,6 mmol) je zatim dodat kapanjem na 0°C i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Dodat je N,N-dimetiletilendiamin (0,03 mL; 0,3 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa zasić. vod. NaHCO3i ekstrahovana sa DCM:EtOH (v/v = 4:1) (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-213 (37 mg; 0,10 mmol; prinos 58%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 362,2.<1>H NMR (400 MHz, Acetonitril-d3) δ 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 13.4, 5.2 Hz, 1H), 4.53-4.27 (m, 3H), 3.38 (tt, J = 5.8, 2.8 Hz, 1H), 2.88-2.66 (m, 2H), 2.41 (qd, J = 13.2, 4.9 Hz, 1H), 2.23-2.15 (m, 1H), 2.13-2.07 (m,<1>H, oslonjen na rezidualni vrh H2O ), 2.04-1.97 (m, 3H), 1.82-1.68 (m, 3H), 1.46-1.34 (m, 1H).
Korak 6.3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-214)
[1398] Mešanom rastvoru I-213 (35 mg; 0,097 mmol) i NaBH(OAc)3(62 mg; 0,29 mmol) u DMF (1 mL) dodat je acetaldehid (0,02 mL; 0,3 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 35 min. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-214 (29 mg; 0,068 mmol; prinos 70%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 418,3.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.81 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.28 (ddd, J = 8.5, 7.3, 2.3 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 13.4, 5.2 Hz, 1H), 4.66 (dt, J = 7.0, 3.1 Hz, 1H), 4.45-4.30 (m, 2H), 3.41-3.26 (m, 1H), 2.88-2.73 (m, 2H), 2.64-2.48 (m, 4H), 2.38-2.25 (m, 1H), 2.21-2.10 (m, 1H), 2.01-1.89 (m, 2H), 1.84-1.76 (m, 1H), 1.76-1.68 (m, 2H), 1.59-1.47 (m, 1H), 0.99 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
Primer 183: 3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-215) i 3-(5- (((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-216).
[1399]
Korak 1. Metil 4-bromo-2-(bromometil)-5-fluorobenzoat (183-2):
[1400] U mešani rastvor 4-bromo-5-fluoro-2-metilbenzoata (183-1; 2700 mg; 10,93 mmol) u DCE (25 mL) pod atmosferom ayota dodat je NBS (2140 mg; 12,02 mmol), a zatim NBS (90 mg; 0,55 mmol), i dobijena smeša je snažno mešana na 85°C tokom 8 h. Reakciona smeša je ugašena sa zas. vod. Na2S2O3a zatim ekstrahovana sa DCM (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 50% EtOAc u heptanu da bi se dobilo 183-2 (3,37 mg; 9,30 mmol; prinos 85%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.73 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 4.89 (s, 2H), 3.95 (s, 3H).
Korak 2.3-(5-bromo-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (183-3):
[1401] U rastvor 183-2 (3,37 g; 9,30 mmol) u DMF (20 mL) dodata je 3-aminopiperidin-2,6-dion HCl so (1-1c; 2,30 g; 14,0 mmol), praćeno sa DIPEA (8,1 mL; 47 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na 85°C tokom 2 dana. Višak DIPEA je uklonjen koncentrisanjem smeše do konstantne zapremine na 100 mbar i na temperaturi od 40°C. Reakciona smeša je zatim sipana u konusni balon koji sadrži H2O (80 mL). Nastali talog je filtriran i ispran sa H2O (x2) i Et2O (x2). Dobijena čvrsta supstanca je sušena u vakuum pećnici 5 sati da bi se dobilo 183-3 (2,22 g; 6,51 mmol; prinos 70%) u vidu čvrste supstance tamno sive boje. MS [M+H]<+>= 341,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.01 (s, 1H), 8.05 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 2.97-2.83 (m, 1H), 2.65-2.56 (m, 1H), 2.39 (qd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.09-1.94 (m, 1H).
Korak 3.3-(5-bromo-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-2,6-dion (183-4)
[1402] Mešanom rastvoru 183-3 (800 mg; 2,35 mmol) i DBU (0,70 mL; 4,7 mmol) u DMF (5 mL) dodat je SEMCl (0,62 mL; 3,5 mmol) pri 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati su dodatni DBU (0,70 mL; 4,7 mmol) i SEMCl (0,62 mL; 3,5 mmol) na 0°C i mešanje je nastavljeno tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa zas. vod. NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc (x3). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 30% acetona u heptanu da bi se dobio 183-4 (683 mg; 1,45 mmol; prinos 62%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 471,2.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.73 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.23-5.09 (m, 3H), 4.36 (q, J = 16.2 Hz, 2H), 3.62-3.57 (m, 2H), 2.99 (ddd, J = 17.9, 4.8, 2.6 Hz, 1H), 2.87 (ddd, J = 18.0, 13.3, 5.5 Hz, 1H), 2.32 (qd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 2.25-2.14 (m, 1H), 0.94-0.87 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 4. Terc-butil ((1S,2S)-2-((2-(2,6-diokso-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)piperidin-3-il)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)karbamat (183-5)
[1403] Smeši 183-4 (683 mg; 1,45 mmol), terc-butil ((1S,2S)-2-hidroksicikopentil)karbamata (1-1e; 350 mg; 1,74 mmol), NiCl2(dimetoksietan) (16 mg; 0,072 mmol), dtbbpi (19 mg; 0,072 mmol) i Ir[(dF(CF3)ppi)2dtbbpi]PF6(16 mg; 0,014 mmol) u MeCN (8 mL) pod atmosferom azota dodat je 2,2,6,6-tetrametilpiperidin (0,37 mL; 2,2 mmol) i rezultujuća smeša je zatim snažno mešana 48 sati pod zračenjem plave LED svetlosti na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim filtrirana i koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc u heptanu da bi se dobio 183-5 (420 mg; 0,639 mmol; prinos 44%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS [M+Na]<+>= 614,2.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 7.62-7.49 (m, 1H), 7.47 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 5.22-5.04 (m, 3H), 4.78-4.67 (m, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.40-4.25 (m, 2H), 4.12-3.99 (m, 1H), 3.63-3.56 (m, 2H), 3.02-2.79 (m, 2H), 2.40-2.24 (m, 1H), 2.22-2.13 (m, 2H), 2.12-2.02 (m, 1H), 1.96-1.85 (m, 2H), 1.84-1.71 (m, 1H), 1.60-1.49 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.94-0.87 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Korak 5.3-(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-215)
[1404] Mešanom rastvoru 183-5 (420 mg; 0,639 mmol) u MeCN (2 mL) dodata je metansulfonska kiselina (0,5 mL; 7 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Et3N (1,5 mL; 11 mmol) je dodat kapanjem na 0°C i reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu. N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (0,15 mL; 1,4 mmol) je zatim dodat i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa zasić. vod. NaHCO3i ekstrahovana sa DCM:EtOH (v/v = 4:1) (x4). Kombinovane organske faze su koncentrovane do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa 0 do 100% EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-215 (183 mg; 0,496 mmol; prinos 78%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 362,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.99 (s, 1H), 7.57 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.09 (dt, J = 13.1, 4.6 Hz, 1H), 4.94-4.85 (m, 1H), 4.41 (dd, J = 17.3, 7.2 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 17.3, 8.0 Hz, 1H), 3.79-3.58 (m, 1H), 2.98-2.84 (m, 1H), 2.75-2.54 (m, 1H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.30-2.20 (m, 1H), 2.20-2.07 (m, 1H), 2.04-1.94 (m, 1H), 1.87-1.61 (m, 4H).
Korak 6.3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (I-216)
[1405] Mešanom rastvoru I-215 (150 mg; 0,415 mmol) i NaBH(OAc)3(264 mg; 1,25 mmol) u DMF (2 mL) dodat je acetaldehid (0,07 mL; 1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen silikagel hromatografijom eluiranjem sa EtOAc:EtOH (v/v = 3:1, sa 1% Et3N) u DMC da bi se dobio I-216 (87,5 mg; 0,206 mmol; prinos 50%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS [M+H]<+>= 418,2.<1>H NMR (400 MHz, Metilen hlorid-d2) δ 8.45 (br s, 1H), 7.51 (dd, J = 9.8, 3.1 Hz, 1H), 7.37 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.16 (ddd, J = 13.3, 5.3, 3.5 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.48-4.17 (m, 2H), 3.51-3.34 (m, 1H), 2.96-2.80 (m, 2H), 2.73-2.56 (m, 4H), 2.45-2.28 (m, 1H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.10-1.96 (m, 2H), 1.93-1.74 (m, 3H), 1.64 (s, 1H), 1.07 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
Biološke analize i podaci
[1406] Aktivnost jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je proceniti sledećim in vitro metodama
Primer 184: Prolabel kvantifikacija nivoa proteina IKZF1, IKZF2 ili GSPT1 u ćelijama 293GT
[1407] Sistem Prolabel kompanije DiscoverX korišćen je za razvoj kvantitativnih analiza visoke propusnosti za merenje promena nivoa proteina IKZF1, IKZF2 i GSPT1 u odgovoru na jedinjenja. Oznaka Prolabel je izvedena iz alfa fragmenta beta galaktosidaze i ima sledeću proteinsku sekvencu: mssnslavvlqrrdwenpgvtqlnrlaahppfaswmseeartdrpsqqlrslnge.
Komplementarni fragment beta-galaktosidaze (od DiscoverX) dodaje se Prolabel oznaci da bi se formirao aktivni beta galaktosidazni enzim čija se aktivnost može precizno izmeriti. Na ovaj način, nivoi fuzionog proteina sa oznakom Prolabel mogu se kvantifikovati u ćelijskim lizatima.
[1408] Konstruisani su lentivirusni vektori, zasnovani na Invitrogen pLenti 6.2/V5 DEST kičmi, koji postavljaju Prolabel oznaku uzvodno od IKZF1, IKZF2 ili GSPT1 i eksprimiraju fuzioni protein iz CMV promotora.
[1409] Da bi se obezbedila umerena i konzistentna ekspresija ProLabel fuzionih proteina u svim ćelijama u populaciji, konstruisane su stabilne ćelijske linije od ćelija koje eksprimiraju jednu kopiju konstrukta. Lentivirus upakovan sa konstruktima napravljen je korišćenjem Virapower kompleta kompanije Invitrogen. Snažno adherentne 293GT ćelije, GripTite 293 MSR ćelije kompanije Thermo Fisher Scientific (kataloški broj: R79507), inficirane su virusom pri maloj multiplicitnosti infekcije i selektovane sa 5 µg/ml blasticidina tokom 2 nedelje.
[1410] Nivoi fuzionih proteina sa oznakom Prolabel u ćelijskim linijama tretiranim jedinjenjem mereni su na sledeći način:
Prvog dana ćelije su razblažene na 1,0 × 10<6>ćelija/ml u normalnom medijumu rasta.17,5 µL ćelija je postavljeno na ploču svakog bazenčića, na ploči sa 384 neprovidno belih bazenčića. Ploče su inkubirane preko noći u inkubatoru kulture tkiva na 37°C.
Drugog dana, serijska razređivanja jedinjenja izvršena su na 384 ploče bunarčića iz zaliha od 10 mM. U svaki bazenčić na ploči sa 384 bazenčića dodato je 15 µL DMSO. U prvoj koloni dodato je 15 μL jedinjenja zaliha. Rastvor je pomešan i 15 µL je prebačeno u sledeću kolonu. To je ponovljeno sve dok nije pripremljeno 20 dvostrukih razblaženja.2,5 µL razblaženih jedinjenja prebačeno je u 60 µL medijuma ćelijske kulture na drugu ploču sa 384 bazenčića i dobro promešano.2,5 µL ove smeše je dodato u ćelije ploče. Konačna koncentracija DMSO bila je 0,5%, a najveća koncentracija jedinjenja bila je 50 µM. Ploče su inkubirane preko noći (npr. oko 14 h, 18 h ili 24 h) u inkubatoru kulture tkiva na 37°C.
Trećeg dana, ploče su uklonjene iz inkubatora i ostavljene da se uravnoteže na sobnoj temperaturi 30 minuta. Prolabel supstrat (DiscoverX PathHunter Prolabel Detection Kit, User Manual: 93-0180) je dodat kako je opisano u protokolima proizvođača. Ploče su inkubirane na sobnoj temperaturi tokom tri sata, a luminiscencija je očitana korišćenjem čitača Envision (Perkin Elmer). Podaci su analizirani i vizualizovani korišćenjem softverskog paketa Spotfire.
Tabela 14 prikazuje aktivnost degradacije jedinjenja pronalaska kada su u pitanju Helios (IKZF2), Ikaros (IKZF1) i G1 u S faznog prelaza 1 (GSPT1) u Pro-label analizama na ćelijama 293GT (% degradacije je na 10 µM).
Primer 185: Kvantifikacija In Vitro supresivne potencije primarnih humanih regulatornih T ćelija ekspandiranih u prisustvu jedinjenja
Materijali i metode
Sortiranje Treg ćelija:
[1411] Humani slojevi istaloženih leukocita i trombocita dobijeni su od BioreclamationIVT, SAD. CD4+ T ćelije su izolovane iz navedenih slojeva istaloženih leukocita i trombocita korišćenjem koktela za obogaćivanje T ćelija RosetteSep Human CD4+ (Stemcell Technologies, sad) i gradijentnog centrifugiranja preko Ficoll Pakue Plus (GE HealthCare LifeSciences, SAD) prema preporukama proizvođača. Ćelije su resuspendovane u medijumu RPMI sa dodatkom 1% rastvora penicilina-streptomicina, 10% fetalnog goveđeg seruma, HEPES (10 mM), MEM NEAA (100 nM), natrijum piruvata (1 mM) (svi dodaci kompanije Thermo Fisher Scientific, SAD) , nakon čega su nazvane kompletnim RPMI (cRPMI) i ostavljene preko noći na 37°C, 5% CO2u prisustvu 2U/mL rhIL-2 (Proleukin, Novartis). Ćelije su prikupljene i resuspendovane u puferu autoMACS Running Buffer dopunjene sa BSA (Miltenyi Biotec, USA) i obeležene pomoću CD4-FITC antitela (klon RPA-T4), CD25-APC antitela (klon M-A251) (Biolegend) i CD25 Microbeads (Miltenyi Biotec, USA). Ćelije obogaćene sa CD25 su zatim izolovane pomoću separatora autoMACS Pro. Visoko prečišćena populacija Treg ćelija je zatim dobijena dodatnim sortiranjem CD4+ CD25Hi ćelija korišćenjem uređaja za sortiranje ćelija Sony SH800. Rezultirajuća populacija Treg ćelija bila je rutinski iznad 90% čista prema ekspresiji FOXP3.
Ekspanzija Treg ćelija:
[1412] Prečišćene Treg ćelije su postavljene u cRPMI u ploče sa 96 bunarčića, okruglog dna u gustini od 25000-50000 ćelija po bunarčiću i aktivirane u prisustvu 500 U/ml rhIL2 i Treg ekspandera Dynabeads (Thermo Fisher Scientific, SAD) prema preporukama proizvođača, u prisustvu ili odsustvu 100 µM rapamicina (Thermo Fisher Scientific, SAD). Jedinjenja ovog pronalaska su zatim dodata u konačnoj koncentraciji od 10 µM i DMSO je dodat kao kontrola vehikuluma. Ćelije su inkubirane pri 37°C, 5% CO2ukupno 12-14 dana. Jedinjenje i rhIL2 su dopunjavani svakih 48h tokom cele kulture.
Fenotipska analiza ekspanzije Treg ćelija:
[1413] Ćelije su prikupljene i prebrojane, a veličina ekspanzije je izračunata kao (broj oporavljenih ćelija)/(broj ćelija postavljenih na ploču). Deo ćelija je fiksiran i permeabilizovan korišćenjem puferskog kompleta za bojenje eBioscience Foxp3 (eBioscience, Thermo Fisher Scientific, SAD) i obojen antitelom Helios-PECyanine7 (klon 22F6). Da bi se odredila ekspresija IL2, ekspandirane Treg ćelije su dodatno inkubirane u prisustvu koktela za stimulaciju ćelija sa inhibitorima proteina eBioscience (Thermo Fisher Scientific) tokom 4 sata, nakon čega je usledila fiksacija i bojenje sa antitelima IL2-BV711 (klon MQ1-17H12) (Biolegend, SAD). Ćelije su ubačene u LSRFortessa (Becton Dickinson, SAD) i analiza je izvršena pomoću softvera FlowJo (TreeStar, SAD).
Funkcionalna analiza ekspandiranih Treg ćelija:
[1414] Primarne humane mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMS) su dobijene iz sveže pripremljenih slojeva istaloženih leukocita i trombocita (BioReclamationIVT) korišćenjem gradijentnog centrifugiranja preko Ficoll Paque Plus prema preporukama proizvođača. Ćelije su zatim obeležene sa CFSE (5(6)-karboksifluorescein diacetat N-sukcinimidil estrom, Sigma-Aldrich, SAD) i obložene u triplikatima cRPMI u pločama sa 96 bazenčića sa okruglim dnom, samostalno ili sa ekspandiranim Treg ćelijama u odnosu 1:2 PBMC:Treg. Jedinjenja ovog pronalaska su zatim dodata u konačnoj koncentraciji od 10 µM i DMSO je dodat kao kontrola vehikuluma. Ćelije su aktivirane korišćenjem rastvorljivih anti-CD3 antitela (klon OKT3) (eBioscience, ThermoFisher Scientific, SAD) u konačnoj koncentraciji od 100 ng/ml. Ćelije su inkubirane pri 37°C, 5% CO2ukupno 4-5 dana. Na kraju kreiranja kulture, ćelije su obojene korišćenjem sredstva za bojenje Live/Dead Blue Viability (Thermo Fisher Scientific, SAD) prema uputstvima proizvođača, nakon čega je usledilo bojenje sa CD4-BUV737 (klon SK3) (BDBiosciences, SAD) i CD8-BV711 (klon RPA-T8) (Biolegend, SAD). Ćelije su ubačene u LSRFortessa (Becton Dickinson, SAD) i analiza je izvršena pomoću softvera FlowJo (TreeStar, SAD). Proliferacija je procenjena u svakoj populaciji kao proporcija ćelija sa razblaženim CFSE. Supresija je procenjena za svako stanje u poređenju sa smo uzorcima koji su postavljeni na ploče samostalno.

Claims (17)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule (I')
    pri čemu: X1i X2su svaki nezavisno H, (C1-C4)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C4)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, (C3-C7)cikloalkil, halogen, -CN, -OH ili -NH2; Rxje H ili D; R1je
    svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili -NH2; R4je -OR5ili -NR6R6'; R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C2-C6)hidroksialkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan jednim do tri R7i pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R12; ili R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 8-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 4- do 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9; svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH, -NR13R14, -NH2, -O(C3-C7)cikloalkil, -O-4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, -O(C6-C10)arila ili -O-5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan jednim do tri R10a cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril su opciono supstituisani jednim do tri R11; ili dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa dva R15; ili dva R8kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R8zajedno sa istim atomom za koji su vezani formiraju a =(O); svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, (C3-C6)cikloalkil, -OH, -CN, -NH2ili -NR13R14; ili dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; ili dva R9kada su na susednim atomima zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; svako R10je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; svako R11je nezavisno u svakoj instanci izabrano između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C1-C6)alkoksija, (C1-C6)haloalkoksija, halogena, -OH, -CN i -NH2; svako R12je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH, -CN ili -NH2; dva R12zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S; R13i R14su svaki nezavisno izabrani između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; dva R15zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C4-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S; m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2; n1 je 0, 1, 2 ili 3; i svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4; ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
  2. 2. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, sa Formulom (I),
    pri čemu: Rxje H ili D; R1je
    svako R2je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -CN, -OH ili -NH2; ili dva R2zajedno sa atomima ugljenika na koje su spojeni formiraju (C3-C7)cikloalkil ili 4-do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R2zajedno, kada se nalaze na susednim atomima ugljenika, formiraju fenil ili 5- ili 6-člani heteroarilni prsten koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; svako R3je (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, halogen, -OH ili -NH2; R4je -OR5ili -NR6R6'; R5je H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)aril ili 5- ili 6-člani heteroaril koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim ili tri supstituenta nezavisno izabrana između (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji se sastoji od 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; R6i R6'su svaki nezavisno H, (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, (C3-C7)cikloalkil, 5- ili 6-člani heterocikloalkil koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu je alkil opciono supstituisan sa jednim do tri R7; ili R6and R6'zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S i opciono supstituisana sa jednim do četiri R8; ili R2i R6zajedno sa atomima ugljenika i azota za koje su vezani formiraju 5- ili 6-člani heterocikloalkilni prsten koji opciono sadrži 1-2 dodatna heteroatoma izabrana između O, N i S, i opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenta, svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; svako R7je (C3-C7)cikloalkil, 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila ili 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, pri čemu su cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril opciono supstituisani jednim do četiri R9; svako R8je nezavisno u svakoj instanci halogen, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)haloalkil, (C1-C6)haloalkoksi, -CN, -OH ili -NH2, pri čemu je alkoksi opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenata nezavisno izabrana između (C3-C7)cikloalkila, 4- do 7-članog heterocikloalkilnog prstena koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S, (C6-C10)arila i 5- ili 6-članog heteroarila koji sadrži 1-3 heteroatoma izabrana između O, N i S; ili dva R8zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 4- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S; svako R9je nezavisno u svakoj instanci (C1-C6)alkil, (C1-C6)haloalkil, halogen, -OH, -CN ili -NH2; ili dva R9zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju (C5-C7)cikloalkil ili 5- do 7-člani heterocikloalkilni prsten koji sadrži 1-2 heteroatoma izabrana između O, N i S opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između (C1-C6)alkila, (C1-C6)haloalkila, halogena, -OH, -CN i -NH2; m i m1 su svaki nezavisno 0, 1 ili 2; n1 je 0, 1, 2 ili 3; i svako s i n su nezavisno 1, 2 ili 3, pri čemu je s n ≤ 4; ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
  3. 3. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je R1
  4. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je n1 0, 1 ili 2.
  5. 5. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 3, pri čemu je m10 ili je m12.
  6. 6. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je R1
  7. 7. Jedinjenje iz patentnog zahteva 6, pri čemu je n 2 a s je 1 ili 2.
  8. 8. Jedinjenje iz patentnog zahteva 6 ili 7, pri čemu je m 0 ili 1.
  9. 9. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili 2, sa Formulom (la), Formulom (lb), Formulom (Ic), Formulom (Id), Formulom (le), Formulom (If), Formulom (Ig), Formulom (Ih), Formulom (li), Formulom (Ij), Formulom (Ik), Formulom (Il), Formulom (Im), Formulom (In), Formulom (Io), Formulom (Ip), Formulom (Iq), Formulom (Ir), Formulom (Is) ili Formulom (It):
    ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera i tautomera.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 je izabrano između: -(5-(((1S,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((2,2-difluoroetil)(etil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1-metiloktahidrociklopenta[b]pirol-6-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-metoksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-hidroksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-hidroksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(izobutilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benziloksi)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-aminociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-aminocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-fenoksicikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benzilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4S)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4S)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4R)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4R)-3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((3-(benzilamino)tetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(((R)-1-feniletil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(izopropil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-metoksiciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-hidroksicikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(bis(ciklopropilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-morfolinociklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(dibenzilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; cis-3-(5-((2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; trans-3-(5-((2-(dietilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(metilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 1-((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril; 1-((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril; 1-((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril; -((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril; -(2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-metilpiperidin-4-karbonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benzil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4S)-3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4S)-3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4R)-3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4R)-3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((3-aminotetrahidro-2H-piran-4-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1S,2S)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1R,2R)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1S,2R)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1R,2S)-2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(2-(benzilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4S)-4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4R)-4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4R)-4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4S)-4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((4-aminotetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4S)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3R,4R)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4R)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((3S,4S)-4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((4-(dietilamino)tetrahidrofuran-3-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil) benzonitril; -(5-((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1R,2S)-2-(dietilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(2-(dietilamino)ciklobutoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dione; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil) benzonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(izopropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-((2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksi-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-hidroksi-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-hidroksi-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-hidroksi-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-((2-(4-hidroksi-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-(trifluorometil)piperidin-4-karbonitril; -((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-(trifluorometil)piperidin-4-karbonitril; -((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-(trifluorometil)piperidin-4-karbonitril; -((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-(trifluorometil)piperidin-4-karbonitril; -(2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)-4-(trifluorometil)piperidin-4-karbonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(2,2-difluoroetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(ciklopropilmetoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(benziloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-hidroksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(4-oksopiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-hidroksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(izobutilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi )izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((3aR,6aS)-tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(tetrahidro-1H-furo[3,4-c]pirol-5(3H)-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-2-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(pirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(bis((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-4-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4,4-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-metoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(oksetan-3-ilmetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(izoindolin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-metoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(4-etoksi-4-metilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-((((1R,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-((((1R,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; 3-(5-((2-((((1R,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; (1S,4R)-4-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril; (1R,4r)-4-((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril; (1R,4r)-4-((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril; (1S,4r)-4-((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil )cikloheksan-1-karbonitril; (1r,4r)-4-(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil)cikloheksan-1-karbonitril; 4-(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)amino)metil)cikloheksan-1-karbonitril; 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1S,3R)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil) amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1R,3S)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil) amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril; trans-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril; cis-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)ciklopentil)(etil)amino)metil)-1 -metilciklobutan-1-karbonitril; 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-fluoropiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(1,5-oksazokan-5-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)(metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion; trans-3-(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; cis-3-(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((4,4-difluorocikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((1H-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((1H-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((1H-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((1H-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((lH-indol-5-il)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-(terc-butoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(6-azaspiro[3.5]nonan-6-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1S,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(((1s,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(((1s,3s)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)-4,4-dimetilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(((1R,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(((1r,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(((1r,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(((1r,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(((1r,3r)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2S)-2-(8-oksa-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-tiomorfolinociklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(1,4-oksazepan-4-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-izopropoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-(4-(ciklopropilmetoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3- (5-(((1S,2R)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3- (5-(((1R,2R)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3- (5-(((1R,2S)-2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3- (5-((2-((3aR,4R,7S,7aS)-oktahidro-2H-4,7-epoksiizoindol-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-etoksipiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin- 2,6-dion; -(5-((2-(7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1S,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1s,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1s,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1s,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1s,4s)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((R)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((R)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((R)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((R)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((R)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((S)-3-metoksipirolidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-(difluorometoksi)piperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(propilamino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dipropilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-4-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((1-etil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((1-izopropil-1H-pirazol-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etil(metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dimetilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((oksetan-3-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((2-hidroksietil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(pirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-morfolinocikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((piridin-2-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((3-hidroksi-3-metilbutil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((6-metilpiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((5-metoksipiridin-2-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((6-metoksipiridin-3-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; 3-((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; 3-((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; 3-((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; 3-(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1S,3R)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1R,3R)-3-((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1R,3R)-3-((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1S,3r)-3-((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1r,3r)-3-(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; (1R,3S)-3-((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1S,3s)-3-((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1S,3s)-3-((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1R,3s)-3-((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil )-1-metilciklobutan-1-karbonitril; (1s,3s)-3-(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)-1-metilciklobutan- 1-karbonitril; 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-((2-(piperidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1S,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1s,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1s,3s)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((cis-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((cis-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((cis-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((cis-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((cis-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1R,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1s,3S)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1s,3R)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1s,3s)-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((trans-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((trans-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((trans-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((trans-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((trans-3-metoksiciklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1r,4r)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((4-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((pirimidin-5-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((4-metoksitetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((2,2-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1S,2R)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1R,2R)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-(((1R,2S)-2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6- dion; -(5-((2-((7-oksaspiro[3.5]nonan-2-il)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)ciklobutan-1-karbonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-((pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-ilmetil)amino)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((4,4-difluorocikloheksil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((2,4-difluorobenzil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-((2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-((2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-((2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-((2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((1R,2R)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((1S,2S)-2-metoksiciklopentil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1 ]pentan-1-karbonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)biciklo[1.1.1]pentan-1-karbonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-(3-fluorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1S,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1s,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1s,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1s,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1s,4s)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((cis-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((trans-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(bis(((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(bis(((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(bis(((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(bis(((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(bis(((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil)benzonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)amino)metil) benzonitril; -((((1S,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)(metil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2S)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)(metil)amino)metil)benzonitril; -((((1R,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)(metil)amino)metil)benzonitril; -((((1S,2R)-2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)(metil)amino)metil)benzonitril; -(((2-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-5-il)oksi)cikloheksil)(metil)amino)metil)benzonitril; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-((2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(etilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(benzilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(4-metoksi-4-metilpiperidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(izobutilamino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(propilamino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-((((1R,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1S,2R)-2-((((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2R)-2-((((1r,4R)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-(((1R,2S)-2-((((1r,4S)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6 -dion; -(5-((2-((((1r,4r)-4-metoksicikloheksil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3-metiloksetan-3-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin -2,6-dion; -(5-((2-(((3-fluorobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-metoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(((3,3-difluorociklobutil)metil)amino)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)-3-metilciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(3-(piridazin-3-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(3-(2,2,2-trifluoroetoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3,3-dimetilpiperidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(3-izopropoksiazetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S,3S,4R)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S,3R,4R)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R,3R,4R)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R,3S,4R)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,4R)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S,3S,4S)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S,3R,4S)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R,3R,4S)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R,3S,4S)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il )piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,4S)-3-(3-etoksiazetidin-1-il)biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2S)-2-(3-(pirazin-2-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1S,2R)-2-(3-(pirazin-2-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2R)-2-(3-(pirazin-2-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-(((1R,2S)-2-(3-(pirazin-2-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(1-okso-5-((2-(3-(pirazin-2-iloksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-aminociklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-((2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-4-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1S,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2R)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; -(5-(((1R,2S)-2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-((2-aminociklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2R)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1R,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; i 3-(5-((2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-6-fluoro-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion. ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, predlekova, solvata, stereoizomera ili tautomera.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 je izabrano između: 3-(5-(((1S,2S)-2-(dietilamino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(etilamino)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(etil(2-fluoroetil)amino)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(3,3-difluorociklobutoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)cikloheksil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-metoksifenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-(2-hlorofenoksi)azetidin-1-il)ciklopentil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; i 3-(5-(((1S,2S)-2-(3-etoksiazetidin-1-il)cikloheptil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion; ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, hidrata, solvata, stereoizomera ili tautomera.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje
    ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, solvati, stereoizomeri i tautomeri.
  13. 13. Farmaceutski sastav koji sadrži terapijski efikasnu količinu jedinjenja u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-12, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijens.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer ili farmaceutski sastav u skladu sa patentnim zahtevom 13, za primenu u lečenju karcinoma.
  15. 15. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 14 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer ili farmaceutski sastav za primenu prema patentnom zahtevu 14, pri čemu je karcinom izabran između karcinoma pluća nemalih ćelija (NSCLC), melanoma, trostruko negativnog karcinoma dojke (TNBC), nazofaringealnog karcinoma (NPC), mikrosatelitski stabilnog kolorektalnog karcinoma (mssCRC), timoma, karcinoida, akutne mijelogene leukemije i gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST).
  16. 16. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, za primenu u terapiji.
  17. 17. Kombinacija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrate, solvate, stereoizomere ili tautomere i jedan ili više terapijskih agenasa. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 1096
RS20230980A 2018-07-10 2019-07-08 3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion derivati i njihova primena u lečenju bolesti zavisnih od cink prsta 2 (ikzf2) iz porodice ikaros RS64759B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862695920P 2018-07-10 2018-07-10
US201962835543P 2019-04-18 2019-04-18
EP19782691.0A EP3820573B1 (en) 2018-07-10 2019-07-08 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of ikaros family zinc finger 2 (ikzf2)-dependent diseases
PCT/IB2019/055804 WO2020012334A1 (en) 2018-07-10 2019-07-08 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of ikaros family zinc finger 2 (ikzf2)-dependent diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64759B1 true RS64759B1 (sr) 2023-11-30

Family

ID=68136441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20230980A RS64759B1 (sr) 2018-07-10 2019-07-08 3-(5-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion derivati i njihova primena u lečenju bolesti zavisnih od cink prsta 2 (ikzf2) iz porodice ikaros

Country Status (34)

Country Link
US (2) US11192877B2 (sr)
EP (2) EP4306111A3 (sr)
JP (2) JP7640450B2 (sr)
KR (2) KR102873348B1 (sr)
CN (2) CN112261970B (sr)
AU (1) AU2019301944B2 (sr)
BR (2) BR112020026947B1 (sr)
CA (1) CA3103385A1 (sr)
CL (1) CL2021000038A1 (sr)
CO (1) CO2021000078A2 (sr)
CR (1) CR20210001A (sr)
CU (1) CU20210002A7 (sr)
DK (1) DK3820573T3 (sr)
EC (2) ECSP21000990A (sr)
ES (1) ES2963694T3 (sr)
FI (1) FI3820573T3 (sr)
HR (1) HRP20231295T1 (sr)
HU (1) HUE063715T2 (sr)
IL (1) IL278951B (sr)
JO (1) JOP20210001B1 (sr)
LT (1) LT3820573T (sr)
MX (1) MX2021000309A (sr)
PE (1) PE20210405A1 (sr)
PH (1) PH12021550045A1 (sr)
PL (1) PL3820573T3 (sr)
PT (1) PT3820573T (sr)
RS (1) RS64759B1 (sr)
SA (1) SA521420985B1 (sr)
SG (1) SG11202011872QA (sr)
SI (1) SI3820573T1 (sr)
TW (1) TWI831803B (sr)
UY (1) UY38297A (sr)
WO (1) WO2020012334A1 (sr)
ZA (1) ZA202007154B (sr)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
IL322264A (en) * 2014-04-07 2025-09-01 Novartis Ag Cancer treatment using chimeric antigen receptor (CAR) against CD19
CU20210002A7 (es) 2018-07-10 2021-08-06 Novartis Ag Derivados de 3-(5-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y su uso en el tratamiento de trastornos dependientes de la proteína con dedos de zinc 2 de la familia ikaros (ikzf2)
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
WO2020117759A1 (en) * 2018-12-03 2020-06-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Small molecule degraders of helios and methods of use
MA55628A (fr) 2019-04-12 2022-02-16 C4 Therapeutics Inc Agents de dégradation tricycliques d'ikaros et d'aiolos
CN110331124B (zh) * 2019-06-14 2022-03-22 浙江大学 一种导电聚吡咯/细胞外基质复合薄膜及其制备方法
KR20220103753A (ko) 2019-11-19 2022-07-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 헬리오스 단백질의 억제제로서 유용한 화합물
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
WO2022081925A1 (en) * 2020-10-14 2022-04-21 C4 Therapeutics, Inc. Tricyclic ligands for degradation of ikzf2 or ikzf4
CN113005151A (zh) * 2021-03-12 2021-06-22 广东药科大学 一种kdr-car-nk细胞的制备方法及其应用
PT4320112T (pt) 2021-04-06 2025-07-07 Bristol Myers Squibb Co Compostos de oxoisoindolina substituídos por piridinilo
CR20230614A (es) * 2021-06-03 2024-02-01 Novartis Ag Derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y sus usos médicos
CN115504963A (zh) * 2021-06-22 2022-12-23 苏州开拓药业股份有限公司 一种c-Myc蛋白降解剂
WO2023283430A1 (en) * 2021-07-09 2023-01-12 Plexium, Inc. Cycloalkyl compounds and pharmaceutical compositions that modulate ikzf2
EP4366835A1 (en) 2021-07-09 2024-05-15 Plexium, Inc. Heterocycloalkyl and heteroaryl compounds and pharmaceutical compositions that modulate ikzf2
MX2024000313A (es) * 2021-07-09 2024-03-06 Plexium Inc Compuestos de arilo y composiciones farmaceuticas que modulan la ikzf2.
AU2022375782B2 (en) 2021-10-28 2026-02-26 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
AU2022376954B2 (en) 2021-10-29 2026-04-23 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
CA3237577A1 (en) * 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
AU2022419982B2 (en) * 2021-12-22 2026-04-16 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
CN116640122A (zh) * 2022-02-16 2023-08-25 苏州国匡医药科技有限公司 Ikzf2降解剂及包含其的药物组合物和用途
US20250161242A1 (en) * 2022-03-01 2025-05-22 Vanda Pharmaceuticals Inc. Trichostatin a (tsa) sensitivity in the treatment of tumors
EP4493554A1 (en) 2022-03-17 2025-01-22 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
CR20240451A (es) 2022-04-21 2024-12-04 Gilead Sciences Inc Compuestos de modulación de kras g12d
CN114853754B (zh) 2022-05-23 2023-04-18 云白药征武科技(上海)有限公司 一种硫代酰胺衍生物及其制备方法和应用
PE20250758A1 (es) 2022-07-01 2025-03-13 Gilead Sciences Inc Compuestos de cd73
JP2025529185A (ja) * 2022-08-30 2025-09-04 パンネックス セラピューティクス インコーポレイテッド パネキシン－１調節剤及びパネキシン－１が関与する疾患の治療方法
CN120225509A (zh) 2022-12-22 2025-06-27 吉利德科学公司 Prmt5抑制剂及其用途
AU2024206123A1 (en) * 2023-01-04 2025-07-17 Plexium, Inc. Spirocycloalkyl compounds and pharmaceutical compositions that modulate ikzf2
AU2024252725A1 (en) 2023-04-11 2025-11-06 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
PE20260121A1 (es) 2023-04-21 2026-01-16 Gilead Sciences Inc Inhibidores de prmt5 y usos de los mismos
AU2024306338A1 (en) 2023-06-30 2026-01-08 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
WO2025024811A1 (en) 2023-07-26 2025-01-30 Gilead Sciences, Inc. Parp7 inhibitors
KR20260046403A (ko) 2023-07-26 2026-04-07 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Parp7 저해제
IL325934A (en) * 2023-07-27 2026-03-01 Plexium Inc Processes for the preparation of aryl compounds that modulate IKZF2
WO2025024823A1 (en) * 2023-07-27 2025-01-30 Plexium, Inc. Salts and solid forms of compounds that modulate ikzf2
AU2024337913A1 (en) 2023-09-08 2026-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine-containing polycyclic derivatives as kras g12d modulating compounds
US20250101042A1 (en) 2023-09-08 2025-03-27 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
US20250154172A1 (en) 2023-11-03 2025-05-15 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
TW202540200A (zh) 2023-12-01 2025-10-16 美商基利科學股份有限公司 抗ｆａｐ－ｌｉｇｈｔ融合蛋白及其用途
WO2025137640A1 (en) 2023-12-22 2025-06-26 Gilead Sciences, Inc. Azaspiro wrn inhibitors
WO2025245003A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2026039365A1 (en) 2024-08-12 2026-02-19 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
WO2026089992A1 (en) 2024-10-21 2026-04-30 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (209)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2779780A (en) 1955-03-01 1957-01-29 Du Pont 1, 4-diamino-2, 3-dicyano-1, 4-bis (substituted mercapto) butadienes and their preparation
US5114946A (en) 1987-06-12 1992-05-19 American Cyanamid Company Transdermal delivery of pharmaceuticals
US4818541A (en) 1987-08-19 1989-04-04 Schering Corporation Transdermal delivery of enantiomers of phenylpropanolamine
US7196170B2 (en) 1992-09-14 2007-03-27 The General Hospital Corporation Aiolos, Helios, Daedalos and Ikaros: genes, polypeptides, regulatory elements and uses thereof
US5262564A (en) 1992-10-30 1993-11-16 Octamer, Inc. Sulfinic acid adducts of organo nitroso compounds useful as retroviral inactivating agents anti-retroviral agents and anti-tumor agents
IL143236A0 (en) 1998-12-16 2002-04-21 Warner Lambert Co Treatment of arthritis with mek inhibitors
EP1234031B2 (en) 1999-11-30 2021-11-24 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1, a novel immunoregulatory molecule
WO2002006213A2 (en) 2000-07-19 2002-01-24 Warner-Lambert Company Oxygenated esters of 4-iodo phenylamino benzhydroxamic acids
US7718600B2 (en) 2000-09-29 2010-05-18 The Trustees Of Princeton University IAP binding compounds
WO2002044372A2 (en) 2000-12-01 2002-06-06 Parker Hughes Institute Nucleotide and protein sequence of helios 3 and methods of use
NZ531294A (en) 2001-08-06 2005-11-25 Childrens Medical Center Synthesis and anti-tumor activity of nitrogen substituted thalidomide analogs
BR0307544A (pt) 2002-02-01 2004-12-07 Ariad Gene Therapeutics Inc Compostos contendo fósforos, componentes e composição bem como, sua utilização através de métodos de tratamentos
US7799827B2 (en) 2002-03-08 2010-09-21 Eisai Co., Ltd. Macrocyclic compounds useful as pharmaceuticals
TWI275390B (en) 2002-04-30 2007-03-11 Wyeth Corp Process for the preparation of 7-substituted-3- quinolinecarbonitriles
US7968569B2 (en) 2002-05-17 2011-06-28 Celgene Corporation Methods for treatment of multiple myeloma using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione
PT1537878E (pt) 2002-07-03 2010-11-18 Ono Pharmaceutical Co Composições de imunopotenciação
GB0215823D0 (en) 2002-07-09 2002-08-14 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
US20040087558A1 (en) 2002-10-24 2004-05-06 Zeldis Jerome B. Methods of using and compositions comprising selective cytokine inhibitory drugs for treatment, modification and management of pain
US20050203142A1 (en) 2002-10-24 2005-09-15 Zeldis Jerome B. Methods of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for treatment, modification and management of pain
WO2004056875A1 (en) 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
UA83504C2 (en) 2003-09-04 2008-07-25 Селджин Корпорейшн Polymorphic forms of 3-(4-amino-1-oxo-1,3 dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione
US7399865B2 (en) 2003-09-15 2008-07-15 Wyeth Protein tyrosine kinase enzyme inhibitors
US7612096B2 (en) 2003-10-23 2009-11-03 Celgene Corporation Methods for treatment, modification and management of radiculopathy using 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3yl)-4-aminoisoindoline
MXPA06008095A (es) 2004-01-16 2007-03-28 Univ Michigan Mimeticos de smac conformacionalmente restringidos y sus usos.
CA2553871A1 (en) 2004-01-16 2005-08-04 The Regents Of The University Of Michigan Smac peptidomimetics and the uses thereof
CA2558615C (en) 2004-03-23 2013-10-29 Genentech, Inc. Azabicyclo-octane inhibitors of iap
RS52545B (sr) 2004-04-07 2013-04-30 Novartis Ag Inhibitori protein apoptoze (iap)
US20070161696A1 (en) 2004-04-23 2007-07-12 Zeldis Jerome B Methods of using and compositions comprising selective cytokine inhibitory drugs for treatment, modification and management of pain
CA2570321C (en) 2004-07-02 2013-10-08 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
WO2006010118A2 (en) 2004-07-09 2006-01-26 The Regents Of The University Of Michigan Conformationally constrained smac mimetics and the uses thereof
BRPI0513310A (pt) 2004-07-12 2008-05-06 Idun Pharmaceuticals Inc análogos de tetrapeptìdeo
WO2006020060A2 (en) 2004-07-15 2006-02-23 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Iap binding compounds
ES2437592T3 (es) 2004-09-03 2014-01-13 Celgene Corporation Procedimientos para la preparación de 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolinas sustituidas
JP4731867B2 (ja) 2004-10-01 2011-07-27 国立大学法人三重大学 Ｃｄ８陽性の細胞傷害性ｔリンパ球の誘導方法
CN101111234A (zh) 2004-12-01 2008-01-23 细胞基因公司 包含免疫调节化合物的组合物及其治疗免疫缺陷疾病的用途
ATE481504T1 (de) 2004-12-10 2010-10-15 Siemens Healthcare Diagnostics Für die vorhersage des ansprechens maligner neoplasie auf eine auf taxan beruhende medizinische behandlung geeignete genetische veränderung
KR20120127754A (ko) 2004-12-20 2012-11-23 제넨테크, 인크. Ｉａｐ의 피롤리딘 억제제
AU2006230099B2 (en) 2005-03-25 2012-04-19 Gitr, Inc. GITR binding molecules and uses therefor
PL2161336T5 (pl) 2005-05-09 2017-10-31 Ono Pharmaceutical Co Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku Programmed Death 1 (PD-1) oraz sposoby leczenia raka z zastosowaniem samych przeciwciał anty-PD-1 lub w połączeniu z innymi środkami immunoterapeutycznymi
BRPI0611814A2 (pt) 2005-06-10 2008-12-09 Bipar Sciences Inc moduladores parp e tratamento de cÂnceres
CA2612241C (en) 2005-07-01 2018-11-06 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
WO2007014011A2 (en) 2005-07-21 2007-02-01 Ardea Biosciences, Inc. N-(arylamino)-sulfonamide inhibitors of mek
ES2434946T3 (es) 2005-08-31 2013-12-18 Celgene Corporation Compuestos de isoindol imida y composiciones que los comprenden y métodos para usarlo
WO2007067500A2 (en) 2005-12-05 2007-06-14 Genomic Health, Inc. Predictors of patient response to treatment with egfr inhibitors
AU2006332680A1 (en) 2005-12-29 2007-07-12 Anthrogenesis Corporation Improved composition for collecting and preserving placental stem cells and methods of using the composition
US20070269827A1 (en) 2006-05-18 2007-11-22 Oklahoma Medical Research Foundation Predicting and Diagnosing Patients With Autoimmune Disease
KR101342035B1 (ko) 2006-06-20 2013-12-16 한국과학기술연구원 신장독성 및 부작용 유발 약물 검색용 바이오마커 및 이를이용한 신장독성 및 부작용 유발 약물 검색 방법
US8877780B2 (en) 2006-08-30 2014-11-04 Celgene Corporation 5-substituted isoindoline compounds
WO2008033567A1 (en) 2006-09-15 2008-03-20 Celgene Corporation N-methylaminomethyl isoindole compounds and compositions comprising and methods of using the same
LT2420498T (lt) 2006-09-26 2017-10-25 Celgene Corporation 5-pakeistieji chinazolinono dariniai, kaip priešvėžiniai agentai
AU2008229383B2 (en) 2007-03-20 2013-09-05 Celgene Corporation 4'-O-substituted isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
US9244059B2 (en) 2007-04-30 2016-01-26 Immutep Parc Club Orsay Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
NZ598890A (en) 2007-04-30 2013-10-25 Genentech Inc Inhibitors of iap
KR101586617B1 (ko) 2007-06-18 2016-01-20 머크 샤프 앤 도메 비.브이. 사람 프로그램된 사멸 수용체 ｐｄ-1에 대한 항체
AU2008298948B2 (en) 2007-09-12 2014-09-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Combinations of phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and chemotherapeutic agents, and methods of use
ES2523925T3 (es) 2007-09-26 2014-12-02 Celgene Corporation Derivados de quinazolinona sustituidos en posición 6, 7 u 8 y composiciones que los contienen y métodos de uso de los mismos
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
JP2009092508A (ja) 2007-10-09 2009-04-30 Norihiro Nishimoto リウマチ治療剤の効果の予測方法
EP2214675B1 (en) 2007-10-25 2013-11-20 Genentech, Inc. Process for making thienopyrimidine compounds
WO2009068621A1 (en) 2007-11-30 2009-06-04 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Method for classifying cancer patients as responder or non-responder to immunotherapy
KR100957051B1 (ko) 2007-12-28 2010-05-13 한국과학기술연구원 니트로푸란토인 처리에 따른, 폐독성 유발 약물 검색용마커유전자 및 이를 이용한 검색 방법
GB2456390A (en) 2008-01-15 2009-07-22 Glaxo Group Ltd Bipolar disorder treatments
WO2009094592A2 (en) 2008-01-23 2009-07-30 Perlegen Sciences, Inc. Genetic basis of alzheimer's disease and diagnosis and treatment thereof
RU2531758C2 (ru) 2008-02-11 2014-10-27 Куретек Лтд. Моноклональные антитела для лечения опухолей
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
EP2227780A4 (en) 2008-03-19 2011-08-03 Existence Genetics Llc GENETIC ANALYSIS
WO2009137095A2 (en) 2008-05-08 2009-11-12 The Johns Hopkins University Compositions and methods for modulating an immune response
US8168784B2 (en) 2008-06-20 2012-05-01 Abbott Laboratories Processes to make apoptosis promoters
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
ES2545609T3 (es) 2008-08-25 2015-09-14 Amplimmune, Inc. Composiciones de antagonistas de PD-1 y métodos de uso
JP2012500652A (ja) 2008-08-25 2012-01-12 アンプリミューン、インコーポレーテッド 標的化共刺激ポリペプチドおよび癌を処置するための使用方法
CA2736829C (en) 2008-09-12 2018-02-27 Isis Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
PL2342226T3 (pl) 2008-09-26 2017-01-31 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Ludzkie przeciwciała anty-PD-1, PD-L1 i PD-L2 oraz ich zastosowania
EP2177615A1 (en) 2008-10-10 2010-04-21 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Method for a genome wide identification of expression regulatory sequences and use of genes and molecules derived thereof for the diagnosis and therapy of metabolic and/or tumorous diseases
EP2358697B1 (en) 2008-10-29 2015-10-21 Celgene Corporation Isoindoline compounds for use in the treatment of cancer.
EP4209510B1 (en) 2008-12-09 2024-01-31 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
EP3192811A1 (en) 2009-02-09 2017-07-19 Université d'Aix-Marseille Pd-1 antibodies and pd-l1 antibodies and uses thereof
AU2010249615B2 (en) 2009-05-19 2013-07-18 Celgene Corporation Formulations of 4-amino-2-(2,6-dioxopiperidine-3-yl)isoindoline-1,3-dione
TWI428332B (zh) 2009-06-09 2014-03-01 Hoffmann La Roche 雜環抗病毒化合物
CN102596946B (zh) 2009-08-05 2015-06-17 港大科桥有限公司 抗病毒化合物及其制备和使用方法
US9212177B2 (en) 2009-08-05 2015-12-15 Versitech Limited Antiviral compounds and methods of making and using thereof
PT3023438T (pt) 2009-09-03 2020-05-08 Merck Sharp & Dohme Anticorpos anti-gitr
WO2011056505A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Abbott Laboratories Detection of chromosomal abnormalities associated with prognosis of non small cell lung cancer
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
NO2504364T3 (sr) 2009-11-24 2018-01-06
SG10201501062SA (en) 2010-02-11 2015-04-29 Celgene Corp Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
EP2545078A1 (en) 2010-03-11 2013-01-16 UCB Pharma, S.A. Pd-1 antibody
WO2011142827A2 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Schutzer Steven E Diagnostic markers for neuropsychiatric disease
US20120149715A1 (en) 2010-05-28 2012-06-14 Yi Tsun Richard Kao Compounds and methods for the treatment of viral infections
WO2011151941A1 (ja) 2010-06-04 2011-12-08 国立大学法人東京大学 制御性ｔ細胞の増殖または集積を誘導する作用を有する組成物
WO2011155607A1 (ja) 2010-06-11 2011-12-15 協和発酵キリン株式会社 抗ｔｉｍ－３抗体
CA2802344C (en) 2010-06-18 2023-06-13 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
US20130281304A1 (en) 2010-08-13 2013-10-24 Andrew P. Feinberg Comprehensive Methylome Map of Myeloid and Lymphoid Commitment from Hematopoietic Proenitors
JP2014502258A (ja) 2010-10-22 2014-01-30 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド 免疫反応を抑制するためにプログラムされた制御性ｔ細胞の発見
RS56770B1 (sr) 2011-03-11 2018-04-30 Celgene Corp Čvrste forme 3-(5-amino-2-metil-4-okso-4h-hinazolin-3-il)-piperidin-2,6-diona i njihove farmaceutske smeše i upotrebe
SI2699264T1 (en) 2011-04-20 2018-08-31 Medimmune Llc Antibodies and other molecules that bind b7-h1 and pd-1
JP6001060B2 (ja) 2011-06-06 2016-10-05 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション 筋萎縮を阻害するための方法
EP2723362A1 (en) 2011-06-21 2014-04-30 Innate Pharma NKp46-MEDIATED NK CELL TUNING
AU2012279225A1 (en) 2011-07-01 2014-01-16 Beckman Coulter, Inc. Regulatory T cells and methods of identifying, obtaining and using to treat immuno-based disorders
WO2013006490A2 (en) 2011-07-01 2013-01-10 Cellerant Therapeutics, Inc. Antibodies that specifically bind to tim3
CN103797120B (zh) 2011-09-16 2017-04-12 上海长海医院 前列腺癌的生物学标志物、治疗靶点及其用途
US9624298B2 (en) 2011-11-28 2017-04-18 Merck Patent Gmbh Anti-PD-L1 antibodies and uses thereof
EP2785828B1 (en) 2011-12-01 2020-04-08 The University of Tokyo Human-derived bacteria that induce proliferation or accumulation of regulatory t cells
US9481866B2 (en) 2011-12-16 2016-11-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods of producing T cell populations enriched for stable regulatory T-cells
IN2014CN04935A (sr) 2011-12-31 2015-09-18 Moni Abraham Kuriakose
WO2013131045A1 (en) 2012-03-02 2013-09-06 The Regents Of The University Of California Expansion of alloantigen-reactive regulatory t cells
GB201207297D0 (en) 2012-04-26 2012-06-06 Senzagen Ab Analytical methods and arrays for use in the same
WO2013179174A1 (en) 2012-05-29 2013-12-05 Koninklijke Philips N.V. Lighting arrangement
AU2013267161A1 (en) 2012-05-31 2014-11-20 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind PD-L1
GB201213571D0 (en) 2012-07-31 2012-09-12 Univ Leuven Kath Growth factor cocktail to enhnce osteogenic differentiayion of mesenchymal
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
EP2682750A1 (en) 2012-07-02 2014-01-08 Sotio a.s. In vitro method for the diagnosis and surveillance of cancer
WO2014022758A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Single agent anti-pd-l1 and pd-l2 dual binding antibodies and methods of use
US9694015B2 (en) * 2012-09-10 2017-07-04 Celgene Corporation Methods for the treatment of locally advanced breast cancer
BR112015007672A2 (pt) 2012-10-04 2017-08-08 Dana Farber Cancer Inst Inc anticorpos anti-pd-l1 monoclonais humanos e métodos de uso
EP2903692B1 (en) 2012-10-08 2019-12-25 St. Jude Children's Research Hospital Therapies based on control of regulatory t cell stability and function via a neuropilin-1:semaphorin axis
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
US20160007893A1 (en) 2013-02-06 2016-01-14 Loxbridge Research Llp Systems and methods for early disease detection and real-time disease monitoring
AU2014236285A1 (en) 2013-03-14 2015-11-05 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for reprogramming hematopoietic stem cell lineages
US10280221B2 (en) 2013-03-15 2019-05-07 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Anti-LAG-3 binding proteins
BR112015022490A2 (pt) 2013-03-15 2017-07-18 Veracyte Inc métodos e composições para classificação de amostras
JP6742903B2 (ja) 2013-05-02 2020-08-19 アナプティスバイオ インコーポレイティッド プログラム死−１（ｐｄ−１）に対する抗体
US9676853B2 (en) 2013-05-31 2017-06-13 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind PD-1
WO2014200952A2 (en) 2013-06-10 2014-12-18 Suregene, Llc Genetic markers of antipsychotic response
US20160145355A1 (en) 2013-06-24 2016-05-26 Biomed Valley Discoveries, Inc. Bispecific antibodies
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
GB2532672A (en) 2013-09-09 2016-05-25 Scripps Research Inst Methods and systems for analysis of organ transplantation
LT3702373T (lt) 2013-09-13 2022-11-10 Beigene Switzerland Gmbh Anti-pd1 antikūnai ir jų naudojimas terapijai ir diagnostikai
US10927412B2 (en) 2013-10-01 2021-02-23 The Regents Of The University Of California Endometriosis classifier
UY35790A (es) 2013-10-21 2015-05-29 Teva Pharma Marcadores genéticos que predicen la respuesta al acetato de glatiramer
AU2014339900B2 (en) 2013-10-25 2019-10-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Anti-PD-L1 monoclonal antibodies and fragments thereof
WO2015081158A1 (en) 2013-11-26 2015-06-04 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating hiv by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
HUE046249T2 (hu) 2013-12-12 2020-02-28 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd PD-1 antitest, antigén-kötõ fragmense, és gyógyászati alkalmazása
EP3094351B9 (en) 2014-01-15 2022-04-13 Kadmon Corporation, LLC Immunomodulatory agents
WO2015109212A1 (en) 2014-01-17 2015-07-23 Pfizer Inc. Anti-il-2 antibodies and compositions and uses thereof
WO2015107196A1 (en) 2014-01-20 2015-07-23 Institut Curie Use of thalidomide or analogs thereof for preventing neurologic disorders induced by brain irradiation
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
CA2935423C (en) 2014-01-24 2023-11-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
PT3556775T (pt) 2014-01-28 2021-12-31 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos anti-lag-3 para tratar neoplasias malignas hematológicas
AU2015210750B2 (en) 2014-01-31 2020-08-20 Children's Medical Center Corporation Antibody molecules to TIM-3 and uses thereof
WO2015138920A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Novartis Ag Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
US20160058872A1 (en) 2014-04-14 2016-03-03 Arvinas, Inc. Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use
US20180228907A1 (en) 2014-04-14 2018-08-16 Arvinas, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
CN119591582A (zh) 2014-04-14 2025-03-11 阿尔维纳斯运营股份有限公司 基于酰亚胺的蛋白水解调节剂和相关使用方法
DK3148579T3 (da) 2014-05-28 2021-03-08 Agenus Inc Anti-gitr antistoffer og fremgangsmåder til anvendelse deraf
DK3149042T3 (da) 2014-05-29 2019-11-04 Spring Bioscience Corp PD-L1-antistoffer og anvendelser deraf
AU2015271709B2 (en) 2014-06-06 2020-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
WO2015195163A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 R-Pharm Overseas, Inc. Pd-l1 antagonist fully human antibody
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
TWI726608B (zh) 2014-07-03 2021-05-01 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 抗pd-l1抗體及其作為治療及診斷之用途
US9499514B2 (en) 2014-07-11 2016-11-22 Celgene Corporation Antiproliferative compounds and methods of use thereof
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
RU2017115315A (ru) 2014-10-03 2018-11-08 Дана-Фарбер Кэнсер Инститьют, Инк. Антитела к рецептору глюкокортикоид-индуцированного фактора некроза опухоли (gitr) и способы их применения
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
WO2016061142A1 (en) 2014-10-14 2016-04-21 Novartis Ag Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
ES2901509T3 (es) 2014-10-30 2022-03-22 Kangpu Biopharmaceuticals Ltd Derivado de isoindolina, compuesto intermedio, métodos de preparación, composición farmacéutica y uso del mismo
ES2763548T3 (es) 2014-11-06 2020-05-29 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-TIM3 y procedimientos de uso
CA2967447C (en) 2014-12-05 2025-07-08 Foundation Medicine, Inc. MULTIGEN ANALYSIS OF TUMOR SAMPLES
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
EP3034620A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 Diaxonhit Compositions and methods for diagnosing thyroid cancer
WO2016103269A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Populations of neural progenitor cells and methods of producing and using same
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
EP3247701B1 (en) 2015-01-20 2021-09-22 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Anthelmintic compounds, compositions and method of using thereof
EP3050570A1 (en) 2015-01-31 2016-08-03 Neurovision Pharma GmbH Pharmaceutical composition consisting of a combination of G-CSF with GM-CSF
WO2016140974A1 (en) 2015-03-01 2016-09-09 Novena Therapeutics Inc. Process for measuring tumor response to an initial oncology treatment
CN107922484A (zh) 2015-03-06 2018-04-17 索伦托治疗有限公司 结合tim3的抗体治疗剂
EP3277321B1 (en) 2015-04-01 2024-08-14 AnaptysBio, Inc. Antibodies directed against t cell immunoglobulin and mucin protein 3 (tim-3)
WO2016191178A1 (en) 2015-05-22 2016-12-01 Biotheryx, Inc. Compounds targeting proteins, compositions, methods, and uses thereof
JP6585737B2 (ja) 2015-06-02 2019-10-02 セルジーン コーポレイション セレブロン関連タンパク質の比を使用してがんの治療のための薬物の有効性を決定するための方法
JP6812364B2 (ja) 2015-06-03 2021-01-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 癌診断用抗ｇｉｔｒ抗体
CA2988119A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce conversion of regulatory t cells into effector t cells for cancer immunotherapy
KR20240119196A (ko) 2015-06-04 2024-08-06 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 단백질분해의 이미드계 조절인자 및 관련된 이용 방법
WO2016209806A1 (en) 2015-06-22 2016-12-29 President And Fellows Of Harvard College Induction of lamina propria regulatory t cells
CN108650886B (zh) 2015-07-23 2022-07-05 英伊布里克斯公司 多价和多特异性gitr-结合融合蛋白
WO2017025610A1 (en) 2015-08-12 2017-02-16 Medimmune Limited Gitrl fusion proteins and uses thereof
WO2017042337A1 (en) 2015-09-09 2017-03-16 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmhotz-Gemeinschaft Short-chain fatty acids for use in the treatment of cardiovascular disease
WO2017044979A2 (en) 2015-09-11 2017-03-16 Ventria Bioscience Inc. Lactoferrin compositions and methods for modulation of t cell subtypes and treatment of autoimmune diseases
US10954300B2 (en) 2015-09-28 2021-03-23 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Use of pentoxifylline with immune checkpoint-blockade therapies for the treatment of melanoma
AU2016330967B2 (en) 2015-09-30 2021-03-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Thalidomide analogs and methods of use
WO2017075465A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting gata3
WO2017075451A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting pou2af1
EP3368689B1 (en) 2015-10-28 2020-06-17 The Broad Institute, Inc. Composition for modulating immune responses by use of immune cell gene signature
US11090373B2 (en) 2015-12-04 2021-08-17 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Antigen-specific T cells for inducing immune tolerance
WO2017161001A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Children's Medical Center Corporation Methods and compositions relating to hematopoietic stem cell expansion
AU2017246453A1 (en) * 2016-04-06 2018-11-08 The Regents Of The University Of Michigan Monofunctional intermediates for ligand-dependent target protein degradation
WO2017191274A2 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Curevac Ag Rna encoding a therapeutic protein
WO2017197056A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Bromodomain targeting degronimers for target protein degradation
EP3455219A4 (en) 2016-05-10 2019-12-18 C4 Therapeutics, Inc. AMINE-RELATED C3-GLUTARIMIDE DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
LT3660004T (lt) 2016-10-11 2023-06-12 Arvinas Operations, Inc. Junginiai ir metodai, skirti tikslinei androgeno receptoriaus degradacijai
EP3535265A4 (en) 2016-11-01 2020-07-08 Arvinas, Inc. PROTACS TARGETING ON TAU PROTEIN AND RELATED METHODS FOR USE
WO2018102725A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Arvinas, Inc. Tetrahydronaphthalene and tetrahydroisoquinoline derivatives as estrogen receptor degraders
EP3559006A4 (en) 2016-12-23 2021-03-03 Arvinas Operations, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR TARGETED DEGRADATION OF F TAL LIVER KINASE POLYPEPTIDES
RU2019121527A (ru) 2016-12-23 2021-01-15 Эрвинэс Оперейшнс, Инк. Химерные молекулы, нацеливающиеся на протеолиз egfr, и связанные с ними способы применения
EP3558994A4 (en) 2016-12-23 2021-05-12 Arvinas Operations, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR TARGETED DEGRADATION OF FAST ACCELERATED FIBROSARCOMA POLYPEPTIDES
US11191741B2 (en) 2016-12-24 2021-12-07 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of enhancer of zeste homolog 2 polypeptide
MX2019008934A (es) 2017-01-26 2019-11-05 Arvinas Operations Inc Moduladores de la proteolisis del receptor de estrogeno y métodos asociados de uso,.
EP3577109A4 (en) 2017-01-31 2020-11-18 Arvinas Operations, Inc. CEREMONY LIGANDS AND BIFUNCTIONAL COMPOUNDS CONTAINING THEM
CN106932576A (zh) 2017-03-22 2017-07-07 山东大学深圳研究院 一种人调节性t细胞的免疫抑制功能的检测方法
JP7258009B2 (ja) 2017-07-10 2023-04-14 セルジーン コーポレイション 抗増殖化合物及びその使用方法
TWI793151B (zh) * 2017-08-23 2023-02-21 瑞士商諾華公司 3-(1-氧異吲哚啉-2-基)之氫吡啶-2,6-二酮衍生物及其用途
KR20200086278A (ko) * 2017-10-18 2020-07-16 노파르티스 아게 선택적 단백질 분해를 위한 조성물 및 방법
KR20210018199A (ko) * 2018-03-26 2021-02-17 씨4 테라퓨틱스, 인코포레이티드 이카로스의 분해를 위한 세레블론 결합제
CU20210002A7 (es) 2018-07-10 2021-08-06 Novartis Ag Derivados de 3-(5-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y su uso en el tratamiento de trastornos dependientes de la proteína con dedos de zinc 2 de la familia ikaros (ikzf2)
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
CN120698983A (zh) 2018-12-20 2025-09-26 C4医药公司 靶向蛋白降解

Also Published As

Publication number Publication date
FI3820573T3 (fi) 2023-11-01
LT3820573T (lt) 2023-11-10
HRP20231295T1 (hr) 2024-02-02
MX2021000309A (es) 2021-04-12
CO2021000078A2 (es) 2021-01-18
IL278951A (en) 2021-01-31
US20230067476A1 (en) 2023-03-02
IL278951B (en) 2022-08-01
DK3820573T3 (da) 2023-10-23
PE20210405A1 (es) 2021-03-02
WO2020012334A1 (en) 2020-01-16
CN112261970A (zh) 2021-01-22
SI3820573T1 (sl) 2023-12-29
CR20210001A (es) 2021-04-19
ES2963694T3 (es) 2024-04-01
ECSP21000990A (es) 2021-03-31
AU2019301944A1 (en) 2020-12-24
PT3820573T (pt) 2023-10-30
JOP20210001A1 (ar) 2021-01-05
UY38297A (es) 2020-02-28
EP4306111A3 (en) 2024-04-17
KR102873348B1 (ko) 2025-10-20
PH12021550045A1 (en) 2021-09-20
CN119241499A (zh) 2025-01-03
US20200017461A1 (en) 2020-01-16
ZA202007154B (en) 2024-07-31
BR122022012697B1 (pt) 2023-04-04
KR20210031680A (ko) 2021-03-22
JP2024147561A (ja) 2024-10-16
KR20250154535A (ko) 2025-10-28
CU20210002A7 (es) 2021-08-06
ECSP24026637A (es) 2024-05-31
BR112020026947A2 (pt) 2021-03-30
US12570625B2 (en) 2026-03-10
SG11202011872QA (en) 2021-01-28
EP3820573A1 (en) 2021-05-19
SA521420985B1 (ar) 2023-02-19
BR112020026947B1 (pt) 2022-11-22
TWI831803B (zh) 2024-02-11
EP4306111A2 (en) 2024-01-17
EP3820573B1 (en) 2023-08-09
CL2021000038A1 (es) 2021-07-30
JP2021524484A (ja) 2021-09-13
HUE063715T2 (hu) 2024-01-28
PL3820573T3 (pl) 2024-02-19
US11192877B2 (en) 2021-12-07
CA3103385A1 (en) 2020-01-16
AU2019301944B2 (en) 2022-02-24
JP7640450B2 (ja) 2025-03-05
CN112261970B (zh) 2025-02-07
TW202012387A (zh) 2020-04-01
JOP20210001B1 (ar) 2024-04-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12570625B2 (en) 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US11833142B2 (en) 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US12479817B2 (en) Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20250289802A1 (en) 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
WO2022029573A1 (en) Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
RU2797559C2 (ru) Производные 3-(5-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил) пиперидин-2,6-диона и их применение в лечении заболеваний, связанных с белком с &#34;цинковыми пальцами&#34; 2 (ikzf2) семейства ikaros
HK40042782B (en) 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of ikaros family zinc finger 2 (ikzf2)-dependent diseases
HK40042782A (en) 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of ikaros family zinc finger 2 (ikzf2)-dependent diseases
EA049001B1 (ru) Производные 3-(5-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона и их применение в лечении заболеваний, связанных с белком с &#34;цинковыми пальцами&#34; 2 (ikzf2) семейства ikaros