SU1119609A3 - Способ получени алкалоидов спорыньи - Google Patents

Способ получени алкалоидов спорыньи Download PDF

Info

Publication number
SU1119609A3
SU1119609A3 SU813245499A SU3245499A SU1119609A3 SU 1119609 A3 SU1119609 A3 SU 1119609A3 SU 813245499 A SU813245499 A SU 813245499A SU 3245499 A SU3245499 A SU 3245499A SU 1119609 A3 SU1119609 A3 SU 1119609A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
fermentation
nutrient medium
producer
claviceps purpurea
alkaloids
Prior art date
Application number
SU813245499A
Other languages
English (en)
Inventor
Вак Геза
Кишш Янош
Лендьель Жужа
Надь Лайош
Удварди Надь Ева
Залаи Карой
Жока Эржебет
Original Assignee
Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр Рт (Инопредприятие)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр Рт (Инопредприятие) filed Critical Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр Рт (Инопредприятие)
Application granted granted Critical
Publication of SU1119609A3 publication Critical patent/SU1119609A3/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C12P17/182Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
    • C12P17/183Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing an indolo[4,3-F,G]quinoleine nucleus, e.g. compound containing the lysergic acid nucleus as well as the dimeric ergot nucleus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C07D519/02Ergot alkaloids of the cyclic peptide type
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/911Microorganisms using fungi

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛКАЛОВДОВ СПОРЫНЬИ путем ферментации продуцента Claviceps purpurea в аэробных услови х на питательной среде. содержащей источники углерода и азота , генеральные соли, с последующим выделением целевого продукта, отличающийс  тем, что, с целью направленного биосинтеза алкалоидов типа эргокорнина и повышени  содержани  /3-эргокриптина, в качестве продуцента используют штамм Claviceps purpurea MNG 00186, а ферментацию ведут при 20-26°С и рН 5,25 ,8. 2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что, с целью дополгнительного повьшени  выхода целе вых . продуктов, ферментацию ведут в присутствии 0,2 г/100 мл валика I или 0,12 г/100 мл валИна и изолейО ) цина при соотношении последних 5:1.

Description

со
О)
Изобретение относитс  к медицине в частности к способам получени  алкалоидов спорыньи.
Известен способ получени  алкалоидов спорыньи путем ферментации продуцента Claviceps purpurea в аэро ных услови х на питательной среде, содержащей источники углерода и азота , минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта L1
Однако известный способ не обеспечивает получени  повышенного содержани  з-эргокриптина в алкалоидной смеси.
Целью изобретени   вл етс  направленный биосинтез алкалоидов типа эргокорнина и повыше 1ше содержани  (Ь -эргокриптина.
Поставленна  цель достигаетс  тем что согласно способу алкалоидов спорыньи путем ферментагщи продуцента Claviceps purpurea в аэробных услови х на питательной среде , содержащей источники углерода и азота, минеральные соли, с последующим вьц;елением целевого продукта, в качестве продуцента используют штамм Claviceps purpurea MNG 00186, а ферментацию ведут при 20-26С и рН 5,2-5,8,
Ферментацию ведут в присутствии 0,2 г/100 МП валина или 0,12 г/100 м валина и изолейцина при соотношении последных 5:1,
Дл  осуществлени  способа используют новый штамм Claviceps purpurea MNG 00186, который получен путем многократного повторени  операции выделени  и обогащени . Штамм хранитс  в национальной коллекции культур микроорганизмов MNG под номером 00186 и характеризуетс  следующими культурально-морфйлогическими и физиолого-биохимическими свойствами
Культурально-морфологические признаки.
На примен емой дл  отбора агаровой среде, содержащей крахмал и Фриптофан, череЪ 10 дней наблкщаютс  четко разграниченные колонии со складчатой поверхностью и оранжеворозовой окраской диаметром 6-8 мм. Через 20 дней диаметр колоний состав л ет 20-25 мм, колонии имеют в середине возвышение и радиальную складчатость , цвет - розово-лиловый. Нижн   сторона колоний темно-1соричнева  питательна  среда вокруг них окрашиваетс  в лиловый цвет.
На солодовом агаре через 10 дней штамм образует светло-бежевые колонии диаметром 1-2 мм и правильной полусферической формы. Через 20 дней КОЛОНИИ имеют диаметр 2-4 мм, рост слабый, окраска измен етс  до коричневой ,
На Sf-arape колонии штамма через 10 дней четко разграничены, в направлении к середине изборождены складками, в середине имеют остроконечное возвышение, диаметр колоний 8-12 мм. Вершина имеет высоту 3-5 , Окраска колоний бежева  до светлокоричневой . Через 20 дней поверхность колоний твердеет и по направлению к кра м изборождена разве вл юШJ миc  складка1чи5 вершина становитс  кратерообразной. Колонии имеют CBSTло-коричневую окраску с оттенком какао, диаметр различный (25-40мм), высота 6-8 мм. Колонии с трудом отдел ютс  от поверхности агарНэ не образуют спор.
Микроскопическа  характеристика , Птамма в жидкой культуре. -
После 40 ч культивировани  в питательной соеде GK имеютс  колонии из немногих клеток или большей частью отдельные клетки. Величина клеток 48 X 8-20/ч-J клетки и;-шиндрические5 округленные или неправртльной формы. Деление на конце клеток и путем бокового ветвлени . Р ды клеток короткие , состо т из нескольких клеток. Под фазоБоконтрастным микроскопом клетки оказываютс  сильно гранулиро- ванными, более старые клетки содержат вакуоли. Спорообразовани  нет.
В St-питательной среде после 40 ч культивировани  наблюдаетс  идентична  картина, при этом на питательной среде имеетс  более частое образование колоний или р дов клеток.Отдельные клетки более крупные, более старые клетки не имеют вакуолей.
Физиолого-биохимические свойства.
Разрушает с помощью фермента /Э фруктофуранозидазы сахарозу с получением промежуточных олигосахаридов, орошо использует лимонную кислоту, образует пигмент антрахиннового характера , состо щий в первую очередь из оксиантрахинонов.
При культйвироаании на питательной среде, содержащей сахар и аммониевую соль органической кислоты, пггамм продуцирует алкалоиды, 25-30% образукнцейс  смеси алкалоидов представл ет собой fj -эргокриптин, осно ное количество (55-60%) - эргокорнин оставша с  часть - -эргокриптин. Кроме характерных пептидных алкалоидов , штамм образует только эргометрин Пример 1 , Выращенную на St-агар-питательной среде культуру Claviceps purpurea MNG-00186 икокулируют на 100 МП питательной среды GK, наход щейс  в колбе Эрленмейера (ЗОО мл) и инкубируют при на встр хивающем аппарате (300 встр у:кваний в 1 мин) в течение 4 дней. Полученную культуру по 10 МП повторна инокулируют в восьми других колбах, содержаищх по 100 мл St-питательной среды/ Эти культуры ферментируют при 24°С на встр хивающем аппарате в те чение 7 дней. В 4 колбы не прибавл ют исходное вещество, к содержимому других- 4 колб в начале ферментации прибавл ют по,2 г валина в ка честве исходного вещества. На 7 ден ферментацию прекращают. Культуральные жидкости без исходного вещества объедин ют определ ют содержание алкалоидов в FCHX. Содержание эргокорнина cocTaejiifer 80 -у/мп,; о6-эрго криптина - и э-эргокриптина ЗО/мп. Приготовленные вместе с исходным веществом культуральные жидкости так же объедин ют и опредеа ют содержани алкалоидов. Эти жидкости содержат. /мл sproKopm-iH 250,, ei-эргокриптин 25 и уэ-эргокриптин 30, Примен емые питательные среды. Питательна  среда: Трипказин,. г7,; О Лимонна  кислота, г4,0 Кислый форсфорнокислый калий (первичный ), г Сульфат магни , г Гидроокись аммони  ДорН 5,7-5 До 840 Вода, мл В колбы наливают по 84 или 840 м питательной среды и в-стерильньк ус ви х смешивают соответственно с 16 160 МП 50%-ной лимонной кислоты. St-питательна  среда: Сахароза, г100,0 Янтарна  кислота,г10,0 Кислый фосфорнокислый калий (первичный) 5г0,25 Сульфат магни ,г0,25 Нитрат аммони , г Хлористьй{ калий, г Гидооокись аммони  ДорН 5, 2-5,3 Вода, Mil, До 1000 Питательную среду стерилизуют пор-ци ми по 100 мл в колбах Эрленмейера или в количестве 100 л в полупроизврД ственном ферменторе. St-агар-питательна  среда (Blake) отличаетс  от жидкой питательной среды St TeMj. что к ней прибавл ют 25-г/л порошка агара. После добавки агара питательную среду кип т т, порци ми по 150 мл наливают в бутылочки и стерилизуют. Пример 2. Типичные выращенные на St-агар-питательной среде двадцатидневного возраста колонии Claviceps purpurea ШС 00186 отдел ют от поверхности агара, гомогенизируют в 20 мл стерильного физиологичес кого раствора поваренной соли и 10 мп суспензии прибавл ют к 100 мл предварительно простерилизованной наход щейс  в колбе Эрленмейера (500 мл) St-питательной среды. Культуру культивируют в течение 6 дней при 24 С на встр хивающем аппарате и затем повторно инокулируют на 100 мл наход щейс  в колбе Эрленмейера (500 мл) питательной среды ТС-54, После 3 дней ферментатдаи на встр хивающем аппарате 10 МП культуры повторно инокулируют на 100 МП наход щейс  в колбе Эрлеимейера (500 мл) простерилизованной St-питательной среды. Эту культуру .при укзанньгх услови х культивируют на встр хивающем аппарате в течение 7 днейь После этого она содержит следующие количества алкалои-дов , у/мл: эргокор шн 150, oi,-3proкриптин 40,и /i-эргокриптин 90. Пример 3. Двадцатип тидневную культуру Claviceps purpurea MNG 00186 на St-агар-питательной среде удал ют, соскреЬа , с поверхности агара и гомогенизируют в 100 мл физиологического раствора поваренной соли. Полученной суспензией инокулируют. I л питательной среды GK предварительно простерилизованной в колбе Эрленмейера объемом 3 л. Культуру встр хивают при в течение 44 Затем культуру помещают в. ферментор объемом 15 л, в котором находитс  10 л питательной среды ТС-54. Ферментируют при 24°С подаче 0,25 л/л мин воздуха и 240 об/мин. Через 3 дн  культуру перенос т в кислотостойкий лабораторньш ферментор (150 л), а
5 11196096
котор ом находитс  100 л.81:-питательнойЮО г вааина и 20 г изолейцисреды . Эту культуру культивируют„a.
при 22°С 150 об/мин и 0,35 л/л минПосле ферментации в течение шести
подводимого воздуха в -(еченке 6 дней.дней культуральна  жидкость содержит
На / -, 3- и 5-й день к культу-5 -у/мп: эргокорнин 320, оС-эргокриптин
рапьной жидкости прибавл ют по60 и /3-эргокриптин 160,

Claims (2)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛКАЛОИДОВ СПОРЫНЬИ путем ферментации продуцента Claviceps purpurea в аэробных условиях на питательной среде, содержащей источники углерода и азота, минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью направленного биосинтеза алкалоидов типа эргокорнина и повышения содержания /3-эргокриптина, в качестве продуцента используют штамм Claviceps purpurea MNG 00186, а ферментацию ведут при 20-26°С и pH 5,25,8.
2. Способ поп. 1, отличающийся тем, что, с целью допол^нительного повышения выхода деле вых. продуктов, ферментацию ведут в присутствии 0,2 г/100 мл валина или 0,12 г/100 мп вапйна и изолейцина при соотношении последних 5:1.
60961II “ nS ΐ
SU813245499A 1980-02-08 1981-02-06 Способ получени алкалоидов спорыньи SU1119609A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU8080282A HU178405B (en) 1980-02-08 1980-02-08 Process for preparing ergocornine and beta-ergocryptine by fermentation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1119609A3 true SU1119609A3 (ru) 1984-10-15

Family

ID=10948889

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU813245499A SU1119609A3 (ru) 1980-02-08 1981-02-06 Способ получени алкалоидов спорыньи

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4369252A (ru)
JP (1) JPS56158094A (ru)
BE (1) BE887391A (ru)
CA (1) CA1154699A (ru)
CH (1) CH648846A5 (ru)
CS (1) CS215148B2 (ru)
DD (1) DD156189A5 (ru)
DE (1) DE3104151A1 (ru)
DK (1) DK151274C (ru)
FR (1) FR2475573A1 (ru)
GB (1) GB2071651B (ru)
HU (1) HU178405B (ru)
IL (1) IL62079A (ru)
IT (1) IT1135359B (ru)
NL (1) NL8100567A (ru)
SU (1) SU1119609A3 (ru)
YU (1) YU27881A (ru)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS222391B1 (en) * 1981-07-28 1983-06-24 Karin Strnadova Microorganism strain of the claviceps purpurea /fr./ tul,ccm f-725 species
JPS58178988A (ja) * 1982-04-14 1983-10-20 松下電器産業株式会社 調理器ユニツト
DE3420953A1 (de) 1984-06-01 1985-12-05 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Verfahren zur herstellung von (alpha)-ergokryptin
WO2007051651A1 (en) * 2005-11-07 2007-05-10 Ivax Pharmaceuticals S.R.O. INDUSTRIAL PRODUCING STRAIN OF THE FUNGUS CLAVICEPS PURPUREA (Fr.) Tul.

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3884762A (en) * 1972-04-21 1975-05-20 Richger Gedeon Vegyeszeti Gyar Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids
IT1059516B (it) * 1974-06-07 1982-06-21 Farmaceutici Italia Procedimento per la preparazione di beta-ergocriptina

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Патент Бельгии № 824987, кл. С 12 D, 1977 (прототип). *

Also Published As

Publication number Publication date
IT1135359B (it) 1986-08-20
DK52581A (da) 1981-08-09
IL62079A (en) 1984-04-30
DE3104151C2 (ru) 1989-09-14
BE887391A (fr) 1981-08-05
US4369252A (en) 1983-01-18
DK151274B (da) 1987-11-16
DD156189A5 (de) 1982-08-04
FR2475573A1 (fr) 1981-08-14
GB2071651A (en) 1981-09-23
DE3104151A1 (de) 1981-12-03
NL8100567A (nl) 1981-09-01
YU27881A (en) 1983-10-31
DK151274C (da) 1988-06-20
FR2475573B1 (ru) 1984-04-27
CH648846A5 (de) 1985-04-15
CS215148B2 (en) 1982-07-30
IT8119586A0 (it) 1981-02-06
JPS56158094A (en) 1981-12-05
CA1154699A (en) 1983-10-04
HU178405B (en) 1982-04-28
IL62079A0 (en) 1981-03-31
GB2071651B (en) 1983-10-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5627068A (en) Monascus purpureus strain producer of pigments and by-products
IE841735L (en) Cl -1577 antibiotic/antitumor compounds
SU695565A3 (ru) Способ получени клавулановой кислоты и ее солей
US4226941A (en) Process for the optical resolution of d,l-2-amino-4-methylphosphinobutyric acid
JPH04360895A (ja) Fo−1289a物質およびその製造法
CN102864114A (zh) 一种恩拉霉素高产菌株及其制备方法和应用
SU1119609A3 (ru) Способ получени алкалоидов спорыньи
JPS585189A (ja) 新規なアミドヒドロラ−ゼ
GB2031896A (en) A process for the optical resolution of D,L-2-amino-4- methylphosphinobutyric acid
SU521849A3 (ru) Способ получени цефалоспорина с
JPS61148189A (ja) Cl−1577dおよびcl−1577e抗生/抗腫瘍化合物およびそれらの製法
CA2085522A1 (en) Microbial process for the production of trans-4-hydroxy-l-proline
RU2095409C1 (ru) Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных
CN110257449A (zh) 一种发酵生产茴香霉素的方法及培养基
NO315750B1 (no) Resolusjon av arylalkansyrer
US3775255A (en) L-trans-2-amino-4-(2-aminoethoxy)-3-butenoic acid
CN105385634B (zh) 一株橡胶树根际促生菌株hbrm-86及其应用
Tremaine et al. Effect of six vitamins on ascospore formation by an isolate of bakers' yeast
US3930946A (en) Yeasts
SU1200854A3 (ru) Способ получени сисомицина и штамм @ @ @ 1/109-продуцент сисомицина
SI9600120A (en) New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts
SU1631070A1 (ru) Штамм гриба ASpeRGILLUS FоетIDUS - продуцент инулиназы
SU582772A3 (ru) Способ получени деацетоксицефалоспорина с
JPS6018394B2 (ja) 微生物によるラクタ−ゼの製造法
US4430431A (en) Producing fusafungine