TW201920078A - 抗體－藥物結合物之新穎製造方法 - Google Patents

抗體－藥物結合物之新穎製造方法 Download PDF

Info

Publication number
TW201920078A
TW201920078A TW107130663A TW107130663A TW201920078A TW 201920078 A TW201920078 A TW 201920078A TW 107130663 A TW107130663 A TW 107130663A TW 107130663 A TW107130663 A TW 107130663A TW 201920078 A TW201920078 A TW 201920078A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
formula
compound represented
antibody
converting
group
Prior art date
Application number
TW107130663A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI806895B (zh
Inventor
仁士良雄
坂西航平
野口滋
武田齊大
Original Assignee
日商第一三共股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 日商第一三共股份有限公司 filed Critical 日商第一三共股份有限公司
Publication of TW201920078A publication Critical patent/TW201920078A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI806895B publication Critical patent/TWI806895B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/12—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups
    • C07C233/15—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2/00—Preparation of hydrocarbons from hydrocarbons containing a smaller number of carbon atoms
    • C07C2/76—Preparation of hydrocarbons from hydrocarbons containing a smaller number of carbon atoms by condensation of hydrocarbons with partial elimination of hydrogen
    • C07C2/78—Processes with partial combustion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/12—Preparation of carboxylic acid amides by reactions not involving the formation of carboxamide groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68037—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a camptothecin [CPT] or derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C201/00—Preparation of esters of nitric or nitrous acid or of compounds containing nitro or nitroso groups bound to a carbon skeleton
    • C07C201/06—Preparation of nitro compounds
    • C07C201/12—Preparation of nitro compounds by reactions not involving the formation of nitro groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C209/00—Preparation of compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C209/30—Preparation of compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton by reduction of nitrogen-to-oxygen or nitrogen-to-nitrogen bonds
    • C07C209/32—Preparation of compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton by reduction of nitrogen-to-oxygen or nitrogen-to-nitrogen bonds by reduction of nitro groups
    • C07C209/36—Preparation of compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton by reduction of nitrogen-to-oxygen or nitrogen-to-nitrogen bonds by reduction of nitro groups by reduction of nitro groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings in presence of hydrogen-containing gases and a catalyst
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/02—Preparation of carboxylic acid amides from carboxylic acids or from esters, anhydrides, or halides thereof by reaction with ammonia or amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/30—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by doubly-bound oxygen atoms
    • C07C233/33—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by doubly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/34—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups
    • C07C233/41—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/53—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C233/54—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1008—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/10—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being six-membered, e.g. tetraline
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Combustion & Propulsion (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含藉由將式(B)所表示的化合物(其中，R1係表示經保護基保護的胺基)進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物(其中，R1係表示與前述同意義)的步驟。

Description

抗體-藥物結合物之新穎製造方法
本發明係關於為抗體-藥物結合物之構成要素的依喜替康(exatecan)之新穎製造方法、及使用其之抗體-藥物結合物之新穎製造方法。
抗體-藥物結合物(Antibody-Drug Conjugate；ADC)，係使會結合於在癌細胞表面表現且可於細胞內在化的抗原之抗體、與具有細胞毒性的藥物進行了結合，其藉由可將藥物選擇性地送達至癌細胞，而可期待使藥物蓄積於癌細胞內，使癌細胞死亡(非專利文獻1~5)。
作為抗體-藥物結合物之一，而已知以抗體與為拓樸異構酶I抑制劑的依喜替康(exatecan)作為構成要素的抗體-藥物結合物(專利文獻1~8、非專利文獻6、7)。此等之抗體-藥物結合物，係因具有優異的抗腫瘤效果及安全性，而目前臨床試驗正在進行中。
作為依喜替康之製造方法，已知有專利文獻9至11所記載的方法。
[先前技術文獻] [專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第2014/057687號
[專利文獻2]國際公開第2014/061277號
[專利文獻3]國際公開第2015/098099號
[專利文獻4]國際公開第2015/115091號
[專利文獻5]國際公開第2015/146132號
[專利文獻6]國際公開第2015/155976號
[專利文獻7]國際公開第2015/155998號
[專利文獻8]國際公開第2018/135501號
[專利文獻9]日本特開平5-59061號公報
[專利文獻10]日本特開平8-337584號公報
[專利文獻11]國際公開第96/26181號
[非專利文獻]
[非專利文獻1]Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem.(2010)21, 5-13.
[非專利文獻2]Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology(2010)14, 529-537.
[非專利文獻3]Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther.(2004)4, 1445-1452.
[非專利文獻4]Senter P. D., et al., Nature Biotechnology(2012)30, 631-637.
[非專利文獻5]Howard A. et al., J Clin Oncol 29: 398-405.
[非專利文獻6]Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research(2016)22(20), 5097-5108.
[非專利文獻7]Ogitani Y. et al., Cancer Science(2016)107, 1039-1046.
依喜替康為式(2)所表示的化合物，
係成為本發明之抗體-藥物結合物之構成要素的化合物。
作為依喜替康之製造方法，已知有專利文獻9至11所記載的方法。該製造方法係可表示如下。即，使式(19)所表示的化合物與琥珀酸酐反應而變換為式(20)所表示的化合物，還原而變換為式(21)所表示的化合物，藉由分子內環化反應而變換為式(22)所表示的化合物，肟化而變換為式(23)所表示的化合物，藉由貝克曼重排反應(Beckmann rearrangement)而變換為式(24)所表示的化合物，藉由開環反應而變換為式(25)所表示的化合物，保護胺基而變換為式(26)所表示的化合物，水解而變換為式(27)所表示的化合物，藉由分子內環化反應而變換為式(28)所表示的化合物，藉由還原而變換為 式(29)所表示的化合物，藉由氧化而變換為式(9)所表示的化合物，其次，導入氮原子而變換為式(10)所表示的化合物，藉由選擇性地脫保護而變換為式(11)所表示的化合物，藉由與式(1)所表示的化合物之弗里德蘭德(Friedlander)反應而變換為式(12)所表示的化合物，最後，藉由將乙醯基脫保護，而製造式(2)所表示的化合物，即依喜替康的方法。然而，此製造方法由於必須重複進行開環‧閉環反應、氧化‧還原反應，而被認為步驟數目長，且需要煩雜的操作。因此，正冀望工業上優異的製造方法之開發。
本發明之一課題係發現步驟數短，且工業上優異的依喜替康之新穎製造方法。又將構築使用其之抗體-藥物結合物之新穎製造方法作為本發明之另一課題。
本發明者等人，深入檢討了依喜替康之製造方法的結果，發現了步驟數短、工業上優異的依喜替康 之新穎製造方法。進一步構築了使用藉由該製造方法所製造之依喜替康的抗體-藥物結合物之新穎製造方法。
即，本發明係關於：
〔1〕一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：藉由將式(B)所表示的化合物作分子內環化
(其中，R1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，
(其中，R1係表示與前述同意義)。
〔2〕如〔1〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔3〕如〔1〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔4〕如〔1〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔5〕如〔1〕至〔4〕中任一項記載之製造方法，其中分子內環化係藉由包含使式(B)所表示的化合物與三 氟乙酸酐反應的方法而進行。
〔6〕如〔5〕記載之製造方法，其中分子內環化係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
〔7〕如〔1〕至〔4〕中任一項記載之製造方法，其中分子內環化係藉由包含使式(B)所表示的化合物與亞硫醯氯反應的方法而進行。
〔8〕如〔7〕記載之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
〔9〕一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：藉由將式(J)所表示的化合物作分子內環化
(其中，Y係表示脫離基，R1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，
(其中，R1係表示與前述同意義)。
〔10〕如〔9〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔11〕如〔9〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔12〕如〔9〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔13〕如〔9〕至〔12〕中任一項記載之製造方法，其中Y為氯基。
〔14〕如〔9〕至〔12〕中任一項記載之製造方法，其中Y為三氟乙醯氧基。
〔15〕如〔13〕記載之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
〔16〕如〔14〕記載之製造方法，其中分子內環化係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
〔17〕一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合
(其中，X係表示脫離基，R1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與前述相同意義)；其次，將式(E)所表示的化合物還原，而變換為式(B)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與前述相同意義)；其次，將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與前述相同意義)。
〔18〕如〔17〕記載之製造方法，其中X為溴基、碘基、三氟甲烷磺醯氧基、或芳基磺醯氧基。
〔19〕如〔17〕記載之製造方法，其中X為溴基。
〔20〕如〔17〕記載之製造方法，其中X為碘基。
〔21〕如〔17〕至〔20〕中任一項記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔22〕如〔7〕至〔10〕中任一項記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔23〕如〔17〕至〔20〕中任一項記載之製造方法， 其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔24〕如〔17〕至〔23〕中任一項記載之製造方法，其中將式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟，係於由乙酸鈀(II)及三(鄰甲苯基)膦所調製的鈀錯合物之存在下進行。
〔25〕如〔17〕至〔24〕中任一項記載之製造方法，其包含：將式(E)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，利用第一有機溶媒進行分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中添加酸，並利用第二有機溶媒將式(E)所表示的化合物作分液提取的步驟。
〔26〕如〔25〕記載之製造方法，其中第一有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔27〕如〔25〕或〔26〕記載之製造方法，其中第二有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔28〕如〔25〕至〔27〕中任一項記載之製造方法，其中鹼性水溶液為氫氧化鈉水溶液。
〔29〕如〔17〕至〔28〕中任一項記載之製造方法，其中將式(E)所表示的化合物還原，而變換為式(B)所表示的化合物的步驟，係藉由使式(E)所表示的化合物於溶媒中，在鈀碳觸媒之存在下與氫反應的方法進行。
〔30〕如〔17〕至〔29〕中任一項記載之製造方法，其中將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(B)所表示的化合物與三氟乙酸酐反應的方法進行。
〔31〕如〔30〕記載之製造方法，其中分子內環化 係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
〔32〕如〔17〕至〔29〕中任一項記載之製造方法，其中將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(B)所表示的化合物與亞硫醯氯反應的方法進行。
〔33〕如〔32〕記載之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
〔34〕一種式(2)所表示的化合物之製造方法，其特徵為使用藉由〔1〕至〔33〕中任一項記載的方法所製造的式(C)所表示的化合物作為起始原料，
其包含下列步驟：將式(C)所表示的化合物變換為式(F)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與請求項1至33中任一項記載之R1同意義，R2係表示經保護基保護的胺基)；其次，將式(F)所表示的化合物，變換為式(G)所表示的化合物的步驟
(其中，R2係表示與前述相同意義)；其次，將式(G)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，
而變換為式(H)所表示的化合物的步驟
(其中，R2係表示與前述相同意義)；其次，將式(H)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟
〔35〕如〔34〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基 乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔36〕如〔34〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔37〕如〔34〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯基保護的胺基。
〔38〕如〔34〕至〔37〕中任一項記載之製造方法，其中將式(C)所表示的化合物變換為式(F)所表示的化合物的步驟，係包含：(i)於鹼之存在下，使與亞硝酸酯反應並導入亞硝基的階段；其次，(ii)於源自亞硝基的氮原子導入保護基的階段；及(iii)鉑碳觸媒之存在下，以氫加以還原的階段。
〔39〕如〔34〕至〔38〕中任一項記載之製造方法，其中將式(F)所表示的化合物變換為式(G)所表示的化合物的步驟，係於包含鹽酸/乙醇的溶媒中進行。
〔40〕如〔34〕至〔39〕中任一項記載之製造方法，其中將式(G)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(H)所表示的化合物的步驟，係於包含鄰甲苯酚的溶媒中進行。
〔41〕如〔34〕至〔40〕中任一項記載之製造方法，其中將式(H)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟，係於包含甲磺酸的蓉媒中。
〔42〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽。
〔43〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧m水合物(其中， m係0~3個之範圍內)。
〔44〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧無水物。
〔45〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧1水合物。
〔46〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧2水合物。
〔47〕如〔34〕至〔41〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧3水合物。
〔48〕一種式(2)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(3)所表示的化合物，
變換為式(4)所表示的化合物的步驟，
其次，將式(4)所表示的化合物變換為式(5)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(5)所表示的化合物變換為式(6)所表示的 化合物的步驟；
其次，將式(6)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(7)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(7)所表示的化合物變換為式(8)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(8)所表示的化合物作分子內環化，而變換為式(9)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(10)所表示的化合物變換為式(11)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(11)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，
而變換為式(12)所表示的化合物的步驟；
其次，將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟；
〔49〕如〔48〕記載之製造方法，其中將式(6)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(7)所表示的化合物的步驟，係於由乙酸鈀(II)及三(鄰甲苯基)膦調製的鈀錯合物之存在下進行。
〔50〕如〔48〕或〔49〕記載之製造方法，其包含：將式(7)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，並利用第一有機溶媒進行分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中添加酸，並利用第二有機溶媒將式(7)所表示的化合物作分液提取的步驟。
〔51〕如〔50〕記載之製造方法，其中第一有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔52〕如〔50〕或〔51〕記載之製造方法，其中第二有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔53〕如〔50〕至〔52〕中任一項記載之製造方法，其中鹼性水溶液為氫氧化鈉水溶液。
〔54〕如〔50〕至〔53〕中任一項記載之製造方法，其中將式(8)所表示的化合物作分子內環化，而變換為式(9)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(8)所表示的化合物與三氟乙酸酐反應的方法而進行。
〔55〕如〔54〕記載之製造方法，其中分子內環化係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
〔56〕如〔48〕至〔55〕中任一項記載之製造方法，其中將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟，係包含：(i)於鹼之存在下，使與亞硝酸酯反應並導入亞硝基的階段；其次，(ii)於源自亞硝基的氮原子導入保護基的階段；及(iii)鉑碳觸媒之存在下，以氫加以還原的階段。
〔57〕如〔48〕至〔56〕中任一項記載之製造方法，其中將式(10)所表示的化合物變換為式(11)所表示的化合物的步驟，係於包含鹽酸/乙醇的溶媒中進行。
〔58〕如〔48〕至〔57〕中任一項記載之製造方法，其中將式(11)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(12)所表示的化合物的步驟，係於包含鄰甲苯酚的溶媒中進行。
〔59〕如〔48〕至〔58〕中任一項記載之製造方法，其中將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟，係於包含甲磺酸的溶媒中進行。
〔60〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽。
〔61〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧m水合物(其中，m係0~3個之範圍內)。
〔62〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧無水物。
〔63〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧1水合物。
〔64〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧2水合物。
〔65〕如〔48〕至〔59〕中任一項記載之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧3水合物。
〔66〕一種式(E)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，
(其中，X係表示脫離基，R1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與前述相同意義)。
〔67〕如〔66〕記載之製造方法，其中X為溴基、碘基、三氟甲烷磺醯氧基、或芳基磺醯氧基。
〔68〕如〔66〕記載之製造方法，其中X為溴基。
〔69〕如〔66〕記載之製造方法，其中X為碘基。
〔70〕如〔66〕至〔69〕中任一項記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔71〕如〔66〕至〔69〕中任一項記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔72〕如〔66〕至〔69〕中任一項記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔73〕如〔66〕至〔72〕中任一項記載之製造方法，其係於由乙酸鈀(II)及三(鄰甲苯基)膦所調製的鈀錯合物之存在下進行。
〔74〕如〔66〕至〔73〕中任一項記載之製造方法，其包含：將式(E)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，並利用第一有機溶媒進行分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中添加酸，並利用第二有機溶媒將式(E)所表示的化合物作分液提取的步驟。
〔75〕如〔74〕記載之製造方法，其中第一有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔76〕如〔74〕或〔75〕記載之製造方法，其中第二有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
〔77〕如〔74〕至〔76〕中任一項記載之製造方法，其中鹼性水溶液為氫氧化鈉水溶液。
〔78〕一種式(B)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(E)所表示的化合物還原
(其中，R1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(B)所表示的化合物的步驟
(其中，R1係表示與前述相同意義)。
〔79〕如〔78〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔80〕如〔78〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔81〕如〔78〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔82〕如〔78〕至〔81〕中任一項記載之製造方法，其藉由使式(E)所表示的化合物於溶媒中，在鈀碳觸媒之存在下與氫反應的方法進行。
〔83〕一種式(F)所表示的化合物之製造方法，其係包含將式(C)所表示的化合物
(其中，R1係表示經保護基保護的胺基)，藉由包含下列之階段而變換為式(F)所表示的化合物
(其中，R1係表示與前述同意義，R2係表示經保護基保護的胺基)的步驟：(i)於鹼之存在下，使與亞硝酸酯反應並導入亞硝基的階段；其次，(ii)於源自亞硝基的氮原子導入保護基的階段；及(iii)鉑碳觸媒之存在下，以氫加以還原的階段。
〔84〕如〔83〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔85〕如〔83〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔86〕如〔83〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔87〕如〔83〕至〔86〕中任一項記載之製造方法，其中R2為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔88〕如〔83〕至〔86〕中任一項記載之製造方法，其中R2為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔89〕如〔83〕至〔86〕中任一項記載之製造方法，其中R2為經乙醯基保護的胺基。
〔90〕一種式(G)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟： 將式(F)所表示的化合物
(其中，R1及R2係表示經保護基保護的胺基)，於包含鹽酸/乙醇的溶媒中，變換為式(G)所表示的化合物的步驟
(其中，R2係表示與前述相同意義)。
〔91〕如〔90〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔92〕如〔90〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔93〕如〔90〕記載之製造方法，其中R1為經乙醯基保護的胺基。
〔94〕如〔90〕至〔93〕中任一項記載之製造方法，其中R2為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔95〕如〔90〕至〔93〕中任一項記載之製造方法，其中R2為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔96〕如〔90〕至〔93〕中任一項記載之製造方法， 其中R2為經乙醯基保護的胺基。
〔97〕一種式(H)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(G)所表示的化合物
(其中，R2係表示經保護基保護的胺基)，與式(1)所表示的化合物
於包含鄰甲苯酚的溶媒中進行縮合，而變換為式(H)所表示的化合物的步驟
(其中，R2係表示與前述相同意義)。
〔98〕如〔97〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
〔99〕如〔97〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯 基或三氟乙醯基保護的胺基。
〔100〕如〔97〕記載之製造方法，其中R2為經乙醯基保護的胺基。
〔101〕如〔1〕至〔100〕中任一項記載之製造方法，其未使用層析。
〔102〕一種式(6)所表示的化合物
〔103〕一種式(34)所表示的化合物
〔104〕一種式(7)所表示的化合物
〔105〕一種式(8)所表示的化合物
〔106〕一種式(14)所表示的化合物之製造方法，其 特徵為使用由〔34〕至〔65〕中任一項記載的方法所製造的式(2)所表示的化合物作為起始原料，
其包含：藉由使式(2)所表示的化合物與式(13)所表示的化合物進行縮合，
而變換為式(14)所表示的化合物的步驟
〔107〕一種式(15)所示藥物連結子(linker)與抗體藉由硫醚鍵結合的抗體-藥物結合物之製造方法
(式中，A表示與抗體之結合位置)，其特徵為使用藉由〔106〕記載之方法所製造的式(14)所表示的化合物作為原料，
其包含下列步驟：(i)將抗體加以還原的步驟；其次，(ii)使以上述方法所製造的式(14)所表示的化合物與經還原的抗體反應的步驟。
〔108〕如〔107〕記載之製造方法，其中抗體為抗HER2抗體、抗HER3抗體、抗TROP2抗體、抗B7-H3抗體、或抗GPR20抗體。
〔109〕如〔108〕記載之製造方法，其中抗體為抗 HER2抗體。
〔110〕如〔109〕記載之製造方法，其中抗HER2抗體為包含由序列識別號1胺基酸編號1至449記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號2胺基酸編號1至214記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或包含由序列識別號1記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號2記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體。
〔111〕如〔109〕或〔110〕記載之製造方法，其中抗體-藥物結合物中的每1抗體的藥物連結子之平均結合數為7至8個之範圍。
〔112〕如〔108〕記載之製造方法，其中抗體為抗HER3抗體。
〔113〕如〔112〕記載之製造方法，其中抗HER3抗體為包含由序列識別號3記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號4記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體、或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
〔114〕如〔112〕或〔113〕記載之製造方法，其中抗體-藥物結合物中的每1抗體的藥物連結子之平均結合數為7至8個之範圍。
〔115〕如〔108〕記載之製造方法，其中抗體為抗TROP2抗體。
〔116〕如〔115〕記載之製造方法，其中抗TROP2抗體係包含由序列識別號5中胺基酸編號20至470記載 之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號6中胺基酸編號21至234記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
〔117〕如〔115〕或〔116〕記載之製造方法，其中抗體-藥物結合物中的每1抗體的藥物連結子之平均結合數為3至5個之範圍。
〔118〕如〔108〕記載之製造方法，其中抗體為抗B7-H3抗體。
〔119〕如〔118〕記載之製造方法，其中抗B7-H3抗體為包含由序列識別號7中胺基酸編號20至471記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號8中胺基酸編號21至233記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
〔120〕如〔118〕或〔119〕記載之製造方法，其中抗體-藥物結合物中的每1抗體的藥物連結子之平均結合數為3至5個之範圍。
〔121〕如〔108〕記載之製造方法，其中抗體為抗GPR20抗體。
〔122〕如〔121〕記載之製造方法，其中抗GPR20抗體為包含由序列識別號9中胺基酸編號20至472記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號10中胺基酸編號21至234記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的 抗體。
〔123〕如〔121〕或〔122〕記載之製造方法，其中抗體-藥物結合物中的每1抗體的藥物連結子之平均結合數為7至8個之範圍。
依據本發明，可提供步驟數短且工業上優異的依喜替康之新穎製造方法。又可提供使用其之抗體-藥物結合物之新穎製造方法。
圖1係呈示抗HER2抗體重鏈之胺基酸序列(序列識別號1)。
圖2係呈示抗HER2抗體輕鏈之胺基酸序列(序列識別號2)。
圖3係呈示抗HER3抗體重鏈之胺基酸序列(序列識別號3)。
圖4係呈示抗HER3抗體輕鏈之胺基酸序列(序列識別號4)。
圖5係呈示抗TROP2抗體重鏈之胺基酸序列(序列識別號5)。
圖6係呈示抗TROP2抗體輕鏈之胺基酸序列(序列識別號6)。
圖7係呈示抗B7-H3抗體重鏈之胺基酸序列(序列識別號7)。
圖8係呈示抗B7-H3抗體輕鏈之胺基酸序列(序列識 別號8)。
圖9係呈示抗GPR20抗體重鏈之胺基酸序列(序列識別號9)。
圖10係呈示抗GPR20抗體輕鏈之胺基酸序列(序列識別號10)。
[實施發明之形態]
以下，針對於用以實施本發明之適合形態進行說明。又，以下說明的實施形態係呈示本發明之代表的實施形態之一例，並不藉此狹義解釋本發明之範圍。
〔抗體-藥物結合物〕
依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，係較佳為式(15)所示的藥物連結子與抗體藉由硫醚鍵而結合的抗體-藥物結合物
(式中，A表示與抗體之結合位置)。
於本發明中，將抗體-藥物結合物之中由連結子及藥物所構成的部分構造稱為「藥物連結子」。此藥 物連結子係與於抗體之鏈間雙硫鍵部位(2處之重鏈-重鏈間、及2處之重鏈-輕鏈間)產生的硫醇基(換言之，半胱胺酸殘基之硫原子)結合。
本發明之藥物連結子，係將為拓樸異構酶I抑制劑的依喜替康作為構成要素。依喜替康為式(2)所表示的化合物，
係具有抗腫瘤效果的喜樹鹼(camptothecin)衍生物。
於本發明所使用的抗體-藥物結合物，亦可為式(16)所表示者。
其中，藥物連結子係藉由硫醚鍵與抗體結合。又，n與所謂的平均藥物結合數(DAR；Drug-to-Antibody Ratio)同意義，表示每1抗體之藥物連結子之平均結合數。
本發明所使用的抗體-藥物結合物，係移行至癌細胞內後，藉由將式(18)所表示的化合物游離，而發 揮抗腫瘤效果。
式(18)所表示的化合物被認為是依據本發明所製造的抗體-藥物結合物之抗腫瘤活性的本體，被確認具有拓樸異構酶I抑制作用(Ogitani Y.et al.,Clinical Cancer Research,2016,Oct 15；22(20)：5097-5108,Epub 2016 Mar 29)。
式(18)所表示的化合物被認為是藉由式(17)所表示的化合物之胺縮醛(aminal)構造分解而產生，而式(17)所表示的化合物被認為是依據本發明所製造的抗體-藥物結合物之連結子部分被切斷而產生。
亦已知藉由本發明所製造的抗體-藥物結合物具有旁觀者效應(bystander effect)(Ogitani Y.et al.,Cancer Science(2016)107,1039-1046)。
依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，於標 的表現的癌細胞中內在化後，經游離的式(18)所表示的化合物對未表現標的之附近的癌細胞亦造成抗腫瘤效果，藉此而發揮此旁觀者效應。
〔依喜替康之製造〕
本發明之依喜替康之製造，係可按照下述之方法進行。
〔式中，X係表示脫離基，較佳為表示溴基、碘基、三氟甲烷磺醯氧基、或芳基磺醯氧基，更佳為表示溴基或碘基，進一步更佳為表示溴基；R1表示經保護基保護 的胺基，較佳為表示經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基，更佳為表示經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基，進一步更佳為經乙醯基保護的胺基；R2表示經保護的胺基，較佳為表示經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基，更佳為表示經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基，進一步更佳為表示經乙醯基保護的胺基。〕
步驟1：
本步驟，係藉由將式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟。式(D)所表示的化合物可參考周知之方法製造。用於本步驟之3-丁烯酸之量只要反應會進行則未限制，但較佳為相對於式(D)所表示的化合物，為1~1.5當量。
偶合反應可於過渡金屬觸媒之存在下進行，較佳可於鈀觸媒之存在下進行。用於本步驟的鈀觸媒只要反應會進行者即可，並未特別限定，可使用例如，乙酸鈀(II)、三氟乙酸鈀(II)、氯化鈀(II)、溴化鈀(II)、碘化鈀(II)、氯化雙(三苯基膦)鈀(II)等之2價鈀鹽及其錯合物、鈀黑、鈀碳、肆三苯基膦鈀(0)、雙(二亞苄丙酮)鈀(0)等之0價鈀金属及其錯合物等，較佳為可使用乙酸鈀(II)。本步驟所使用的鈀觸媒之量，只要反應會進行則未限制，但較佳為相對於式(D)所表示的化合物，為0.003~0.03當量。
再者，本步驟較佳為可在上述鈀觸媒之外，使用用以在反應系內形成鈀錯合物之配位體。就可用於本步驟的配位體而言，可使用例如，三苯基膦、三(鄰甲苯基)膦、三(3-甲氧基苯基)膦、三(4-氯苯基)膦、三(2-呋喃基)膦、三(2-噻吩基)膦、1,2-雙(二苯基膦)乙烷、及布克瓦德配位體(Buchwald ligand)(2-二環己基膦基-2’,6’-二甲氧基聯苯基(SPhos)、2-二環己基膦基-2’,4’,6’-三異丙基聯苯基(XPhos)等)，較佳可使用三(鄰甲苯基)膦。用於本步驟的配位體之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(D)所表示的化合物，為0.006~0.06當量。
本步驟較佳可於鹼之存在下進行。就用於本步驟的鹼而言，只要反應會進行則未特別限制，但可列舉例如，三乙基胺、三丁基胺、二異丙基乙基胺、N-甲基啉、N-甲基吡咯啶、N-甲基哌啶、吡啶、2-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲基胺基吡啶、1,4-二氮雜雙環〔2.2.2〕辛烷、1,8-二氮雜雙環〔5.4.0〕十一-7-烯、及1,5-二氮雜雙環〔4.3.0〕十一-7-烯等之有機鹼、碳酸鉀、氫氧化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、乙酸鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、及第三丁醇鉀等之無機鹼，較佳可列舉三乙基胺、三丁基胺、二異丙基乙基胺、碳酸鉀、氫氧化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、及乙酸鉀，更佳可列舉二異丙基乙基胺。用於本步驟的鹼之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(D)所表示的化合物，為2~3 當量。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可使用例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉四氫呋喃。
本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為45~85℃，更佳為四氫呋喃之加熱回流下的溫度。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為2.5~10小時。
式(E)所表示的化合物係可藉由進行下列步驟而適當純化：將式(E)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，並利用第一有機溶媒進行分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中添加酸，並利用第二有機溶媒將式(E)所表示的化合物作分液提取的步驟。第一有機溶媒係較佳為2-甲基四氫呋喃。第二有機溶媒係較佳為2-甲基四氫呋喃。鹼性水溶液係較佳為氫氧化鈉水溶液。
又，於式(E)所表示的化合物中，作為幾何異構物而有E體及Z體存在，但任一者皆包含於式(E)所表示的化合物，而包含於本發明之範圍中。本發明之式(E)所表示的化合物可為E體及Z體之混合物，且可將混合物直接用於下一步驟。
又，本步驟亦可使用3-丁烯酸酯替代3-丁烯酸。於該情形，可藉由將藉由式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸酯之偶合所獲得的生成物水解，而變換為式(E)所表示的化合物。
步驟2：
本步驟係將式(E)所表示的化合物藉由還原而變換為式(B)所表示的化合物的步驟。
本步驟之還原，只要反應會進行則方法不被限制，但較佳可於氫氣環境下(較佳為0.05~0.6MPa之氫氣流下)，使用鈀觸媒、鉑觸媒、鎳觸媒、釕觸媒、或銠觸媒來進行，更佳可使用鈀觸媒來進行，進一步更佳可使用鈀碳來進行，進一步更佳可使用5%鈀碳來進行。用於本步驟的5%鈀碳之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟1所使用的式(D)所表示的化合物，為5~80重量%。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉2-甲基四氫呋喃。
本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限 制，但較佳為20~60℃。本步驟之反應時間只要反應會進行則未限制，但較佳為0.5~2小時。
步驟3：
本步驟係將式(B)所表示的化合物藉由分子內環化而變換為式(C)所表示的化合物的步驟。分子內環化，較佳可藉由分子內夫里德耳-夸夫特醯化(Friedel-Crafts acylation)反應而進行。就本步驟中的分子內夫里德耳-夸夫特醯化反應而言，只要反應會進行則方法不被限制，但較佳可列舉使用三氟乙酸酐的方法；或使用亞硫醯氯、硫醯氯、草醯氯、磷醯氯、三氯化磷或五氯化磷的方法，更佳可列舉使用三氟乙酸酐、或亞硫醯氯的方法，進一步更佳可列舉使用三氟乙酸酐的方法。本步驟所使用的三氟乙酸酐之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(B)所表示的化合物，為1~3當量。本步驟所使用的亞硫醯氯之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(B)所表示的化合物，為1~3當量。
使用三氟乙酸酐的方法的情形，本步驟較佳為於酸之存在下進行，更佳為於三氟乙酸之存在下進行。使用亞硫醯氯、硫醯氯、草醯氯、磷醯氯、三氯化磷或五氯化磷的方法的情形，本步驟較佳為於氯化鋁之存在下進行。本步驟所使用的氯化鋁之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(B)所表示的化合物，為1~5當量。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制 反應者則未特別限定，但可列舉例如，二氯甲烷、氯仿、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、及氯苯、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉二氯甲烷。又，使用三氟乙酸的情形，係較佳可含有三氟乙酸作為溶媒。
本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但使用三氟乙酸酐的情形，較佳為-10℃~20℃，使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳為10℃~40℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則方法不被限制，但使用三氟乙酸酐的方法的情形，較佳為2小時~8小時，使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳為1小時~4小時。
又，本步驟亦可分成以下2階段之步驟進行。
〔式中，Y係表示脫離基，較佳為表示氯基、溴基、碘基、氟基、或三氟乙醯氧基，更佳為表示氯基、或三氟乙醯氧基；R1係表示經保護基保護的胺基，較佳為表示經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基，更佳為表示經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基，進一步更佳為表示經乙醯基保護的胺基。〕
步驟3A係將式(B)所表示的化合物變換為式(J)所表示的化合物的步驟。
Y為氯基的情形，較佳可藉由使用亞硫醯氯、硫醯氯、草醯氯、磷醯氯、三氯化磷或五氯化磷的方法來進行本步驟，更佳可藉由使用亞硫醯氯的方法來進行本步驟。本步驟所使用的亞硫醯氯之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(B)所表示的化合物，為1~3當量。Y為三氟乙醯氧基的情形，較佳可藉由使用三氟乙酸酐的方法來進行本步驟。本步驟所使用的三氟乙酸酐之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(B)所表示的化合物，為1~3當量。就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，二氯甲烷、氯仿、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、及三氟乙酸、以及此等之混合溶媒，使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳可列舉二氯甲烷，使用三氟乙酸酐的情形，較佳可列舉三氟乙酸。
步驟3B係將式(J)所表示的化合物變換為式(C)所表示的化合物的步驟。使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳可於氯化鋁之存在下進行本步驟。本步驟所使用的氯化鋁之量，只要反應會進行則未限制，但較佳為相對於式(B)所表示的化合物，為1~5當量。使用三氟乙酸酐的情形，較佳可於酸之存在下進行本步驟，更佳可於三氟乙酸之存在下進行本步驟。
步驟3A及步驟3B之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳為10℃~40℃，於使用三氟乙酸酐的方法的情形，較佳為 -10℃~20℃。將步驟3A及步驟3B合計的反應時間，只要反應會進行則未限制，但使用亞硫醯氯的方法的情形，較佳為1小時~4小時，使用三氟乙酸酐的方法的情形，較佳為2小時~8小時。
步驟4：
本步驟係將式(C)所表示的化合物變換為式(F)所表示的化合物的步驟。本步驟較佳可藉由下列階段來進行：(i)將羰基之α位亞硝基化(或肟化)的階段；(ii)於源自亞硝基(或肟基)之氮原子導入保護基的階段；(iii)還原階段。(ii)及(iii)係可交換順序，亦可同時進行。
(i)之階段所使用的亞硝基化劑(或肟化劑)，係只要是可將式(C)所表示的化合物之羰基之α位亞硝基化(或肟化)者，則未特別限定，但較佳可使用亞硝酸酯，更佳可使用亞硝酸戊酯、亞硝酸正丁酯、或亞硝酸第三丁酯，進一步更佳可使用亞硝酸戊酯。(i)之階段所使用的亞硝酸戊酯之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(C)所表示的化合物，為1~1.6當量。
(i)之階段較佳使用鹼。就(i)之階段所使用的鹼而言，只要是可適用於式(C)所表示的化合物之羰基之α位的亞硝基化(或肟化)者則未特限制，較佳可使用第三丁醇鉀。(i)之階段所使用的第三丁醇鉀之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(C)所表示的化合物，為1~1.5當量。
就(i)之階段所使用的溶媒而言，只要不是會 抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、及二甲亞碸、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉四氫呋喃。
(i)之階段之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為-10~20℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為1.5~30小時。
(ii)之階段係可因應R2中的胺基之保護基種類而設定適當反應條件。於R2為經乙醯基保護的胺基的情形，(ii)之階段較佳可於乙酸中使用乙酸酐。
(iii)之階段係可於氫氣環境下(較佳為0.15~1.2MPa之氫氣流下)，例如，使用鉑碳觸媒而進行，亦可使用鋅粉末而進行，但較佳可使用鉑碳觸媒而進行，更佳可使用2%或5%鉑碳觸媒而進行。2%或5%鉑碳觸媒之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(C)所表示的化合物，為5~60重量%。(iii)之階段係可使用於(ii)之階段使用的溶媒。
(ii)之階段及(iii)之階段之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為0~40℃。(ii)之階段及(iii)之階段之合計的反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為2~8小時。
步驟5：
本步驟係將式(F)所表示的化合物之芳香族胺基的 保護基選擇性地脫保護，而變換為式(G)所表示的化合物的步驟。本步驟可因應R1及R2中的胺基之保護基種類而設定適當反應條件。於R1及R2為經乙醯基保護的胺基的情形，本步驟較佳可使用鹽酸來進行，更佳可使用2N鹽酸/乙醇來進行。
本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為40~60℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為2~14小時。
步驟6：
本步驟係將式(G)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(H)所表示的化合物的步驟。式(1)所表示的化合物可參考美國專利第4778891號等之記載而製造，亦可使用市售者。本步驟所使用的式(1)所表示的化合物之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(G)所表示的化合物，為0.8~1.2當量。
本步驟係於酸觸媒之存在下進行。就本步驟所使用的酸觸媒而言，較佳可列舉對甲苯磺酸吡啶鎓(pyridinium p-toluenesulfonate)。本步驟所使用的酸觸媒，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(G)所表示的化合物，為0.03~0.3當量。
本步驟係較佳於包含甲酚或酚的溶媒中進行，更佳於包含鄰甲苯酚的甲苯中進行。這係因為藉由於鄰甲苯酚或酚存在，而式(H)所表示的化合物之析出相被改善，可見產率提升、反應時間縮短等之效果。
本步驟之反應溫度只要反應會進行則未限制，但較佳為90~130℃，更佳為甲苯之加熱回流下的溫度。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為16~64小時。
又，本步驟被認為是經由作為反應中間體之式(K)所表示的化合物及式(L)所表示的化合物。
步驟7：
本步驟係將式(H)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟。式(2)所表示的化合物可為鹽，亦可進一步為水合物，任一者皆包含於本發明中的「式(2)所表示的化合物」之範圍。
本步驟較佳可於酸存在下進行，更佳可於甲磺酸及水之存在下進行。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者 則未特別限定，但較佳可使用包含2-甲氧基乙醇、及乙基環己烷的溶媒，又於包含上述之酸作為溶媒的情形，更佳可使用甲磺酸、水、2-甲氧基乙醇、及乙基環己烷之混合溶媒。
本步驟係只要反應會進行則未限制，但較佳可於80~160℃進行，更佳可於甲磺酸、水、2-甲氧基乙醇、及乙基環己烷之混合溶媒的加熱回流下的溫度進行，本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為4~16小時。
式(2)所表示的化合物係較佳可作為甲磺酸鹽而取得，更佳可作為甲磺酸鹽‧m水合物(其中，m為0~3)而取得，進一步更佳可作為甲磺酸鹽‧無水物、甲磺酸鹽‧1水合物、甲磺酸鹽‧2水合物、或甲磺酸鹽‧3水合物而取得，進一步更佳為可作為甲磺酸鹽‧2水合物而取得，任一者皆可使用於本發明之製造方法。上述之水合物數可藉由調整結晶取得‧乾燥時之濕度來控制。
式(2)所表示的化合物係更佳為按照下述之方法而製造。
步驟8：
本步驟係將式(3)所表示的化合物溴化，而變換為式(4)所表示的化合物的步驟。式(3)所表示的化合物可使用藉由周知之方法而製造者或市售者。
就用於本步驟的溴化劑而言，只要反應會進行則未限制，但可列舉例如，溴或N-溴琥珀醯亞胺，較佳可列舉N-溴琥珀醯亞胺。用於本步驟的N-溴琥珀醯亞胺之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(3)所表示的化合物，為1~1.5當量。本步驟係較佳可於硫酸及其他之溶媒的混合溶媒中進行。
其他之溶媒只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，二氯甲烷、氯仿、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、或此等之混合溶媒，較佳可列舉庚烷。
本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限制，但較佳為50~70℃。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為0.5~2小時。
步驟9：
本步驟係將式(4)所表示的化合物之硝基還原成胺基，而變換為式(5)所表示的化合物的步驟。用於本步驟的還原劑，只要是可不進行脫溴化而僅選擇性地還原硝基者即可，較佳為可於氫存在下(較佳為0.05~0.2MPa之氫氣流下)使用鉑碳觸媒，更佳可使用1%鉑碳觸媒。用於本步驟的鉑碳觸媒之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟8所使用的式(3)所表示的化合物，為5~40重量%。就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，甲醇、乙醇、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉乙酸乙酯。本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限制，但較佳為50~70℃。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為2~8小時。
步驟10：
本步驟係將式(5)所表示的化合物之胺基進行乙醯基化，而變換為式(6)所表示的化合物的步驟。用於本步驟的乙醯基化劑，可列舉例如，乙酸酐或氯化乙醯，較佳可列舉乙酸酐。用於本步驟的乙酸酐之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟8所使用的式(3)所表示的化合物，為0.5~1當量。本步驟係較佳可使用鹼。就該鹼而言，只要反應會進行則未限制，但較佳為三乙基胺。該鹼之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟8所使用的式(3)所表示的化合物，為0.75~1.5當量。就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，可列舉例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉乙酸乙酯。本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限制，但較佳為10~40℃。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為3~12小時。
步驟11：
本步驟係將式(6)所表示的化合物藉由與3-丁烯酸偶合而變換為式(7)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟1記載之方法同樣地進行。
又，於式(7)所表示的化合物，係作為幾何異構物而 有E體及Z體存在，但任一者皆包含於式(7)所表示的化合物，並包含於本發明之範圍。本發明之式(7)所表示的化合物可為E體及Z體之混合物，且可將混合物直接用於下一步驟。
步驟12：
本步驟係將式(7)所表示的化合物藉由還原而變換為式(8)所表示的化合物的步驟。
本步驟之還原，只要反應會進行則方法不被限制，但較佳為於氫氣環境下(較佳為0.05~0.2MPa之氫氣流下)，可使用鈀觸媒、鉑觸媒、鎳觸媒、釕觸媒、或銠觸媒來進行，更佳為藉由使用鈀觸媒而進行，進一步更佳可使用鈀碳來進行，進一步更佳可使用5%鈀碳來進用。用於本步驟的5%鈀碳之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟11所使用的式(7)所表示的化合物，為5~40重量%。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉2-甲基四氫呋喃。
本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限制，但 較佳為20~60℃。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為0.5~2小時。
步驟13：
本步驟係將式(8)所表示的化合物藉由分子內環化而變換為式(9)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟3記載之方法同樣地進行。
步驟14：
本步驟係將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟4記載之方法同樣地進行。
步驟15：
本步驟係將式(10)所表示的化合物之芳香族胺基的保護基選擇性地脫保護，而變換為式(11)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟5記載之方法同樣地進行。
步驟16：
本步驟係將式(11)所表示的化合物及式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(12)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟6記載之方法同樣地進行。
又，本步驟被認為是經由作為反應中間體之式(30)所表示的化合物及/或式(31)所表示的化合物。
步驟17：
本步驟係將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟7記載之方法同樣地進行。
式(2)所表示的化合物亦可按照下述之方法製造。
步驟18：
本步驟係將式(3)所表示的化合物進行碘化，而變換為式(32)所表示的化合物的步驟。式(3)所表示的化合物可使用藉由周知方法而製造者或市售者。
就用於本步驟的碘化劑而言，只要反應會進行則未限制，但可列舉例如，碘或N-碘琥珀醯亞胺，較佳可列舉N-碘琥珀醯亞胺。用於本步驟的N-碘琥珀醯亞胺之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於式(3)所表示的化合物，為1~2當量。本步驟係較佳可於硫酸及其他之溶媒的混合溶媒中進行。
其他之溶媒，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，二氯甲烷、氯仿、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、或此等之混合溶媒，較佳可列舉庚烷。
本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為-10~10℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為1~4小時。
步驟19：
本步驟係將式(32)所表示的化合物之硝基還原為胺基，而變換為式(33)所表示的化合物的步驟。用於本步驟的還原劑，只要是可不進行脫碘化而僅選擇性地還原硝基者即可，較佳可於氫存在下(較佳為0.05~0.2MPa之氫氣流下)使用鉑碳觸媒。用於本步驟的鉑碳觸媒之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟18所使用的式(3)所表示的化合物，為5~40重量%。就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，可列舉例如，甲醇、乙醇、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉乙酸乙酯。本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為50~70℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為2~8小時。
步驟20：
本步驟係將式(33)所表示的化合物之胺基乙醯基化，而變換為式(34)所表示的化合物的步驟。用於本步驟的乙醯基化劑，可列舉例如，乙酸酐或氯化乙醯基，較佳可列舉乙酸酐。用於本步驟的乙酸酐之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟18所使用的式(3)所表示的化合物，為0.5~1當量。本步驟係較佳可使用鹼。就該鹼而言，只要反應會進行則未限制，但較佳為三乙基胺。該鹼之量，只要反應會進行則未限制，但相對於步驟18所使用的式(3)所表示的化合物，較佳為0.75~1.5當量。就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉乙酸乙酯。本步驟之反應溫度，只要反應會進行則未限制，但較佳為10~40℃。本步驟之反應時間，只要反應會進行則未限制，但較佳為3~12小時。
步驟21：
本步驟係將式(34)所表示的化合物藉由與3-丁烯酸進行偶合，而變換為式(7)所表示的化合物的步驟。本步 驟係可與步驟1記載之方法同樣地進行。
步驟22：
本步驟係將式(7)所表示的化合物藉由還原而變換為式(8)所表示的化合物的步驟。
本步驟可以與步驟12同樣的方法進行，但由於會殘存的碘化物離子而有觸媒活性降低的可能性，較佳為於較步驟12更高觸媒量及氫壓下進行。
本步驟之還原，只要反應會進行則方法不被限制，但較佳可於氫氣環境下(較佳為0.15~0.6MPa之氫氣流下)，使用鈀觸媒、鉑觸媒、鎳觸媒、釕觸媒、或銠觸媒來進行，更佳為可使用鈀觸媒來進行，進一步更佳可使用鈀碳來進行，進一步更佳可使用5%鈀碳。用於本步驟的5%鈀碳之量，只要反應會進行則未限制，但較佳相對於步驟21所使用的式(34)所表示的化合物，為20~160重量%。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉例如，乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉2-甲基四氫呋喃。
本步驟之反應溫度係只要反應會進行則未限制，但 較佳為20~60℃。本步驟之反應時間係只要反應會進行則未限制，但較佳為4~16小時。
步驟23：
本步驟係將式(8)所表示的化合物分子藉由內環化而變換為式(9)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟3記載之方法同樣地進行。
步驟24：
本步驟係將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟。本步驟可以與步驟4記載之方法同樣地進行。
步驟25：
本步驟係將式(10)所表示的化合物之芳香族胺基的保護基作選擇性地脫保護，而變換為式(11)所表示的化合物的步驟。本步驟係可與步驟5記載之方法同樣地進行。
步驟26：
本步驟係將式(11)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(12)所表示的化合物的步驟。本步驟係可以與步驟16記載之方法同樣地進行。
步驟27：
本步驟係將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟。本步驟係可以與步驟7記載之方法同樣地進行。
於上述之各步驟之反應，反應結束後，各步驟之目的化合物可按照有機化學領域中周知之方法，而自反應混合物被單離。目的化合物係可藉由下列獲得，例如，(i)因應必要而將觸媒等之不溶物濾除，(ii)於反應混合物中添加水及與水不相容的溶媒(例如，二氯甲烷、二乙基醚、乙酸乙酯、或2-甲基四氫呋喃等)，而提取目的化合物，(iii)將有機層水洗，使用無水硫酸鎂等之乾燥劑而使乾燥，(iv)餾除溶媒。所獲得的目的化合物，可因應必要，利用有機化學領域周知之方法(例如，再結晶、再沉澱、矽膠管柱層析、或高速液體層析等)而進一步純化，但本發明之製造方法較佳可不使用層析來進行。
藉由本發明之製造方法所獲得的式(2)所表示的化合物，較佳可使用於將式(15)所示的藥物連結子與抗體藉由硫醚鍵而結合的抗體-藥物結合物之製造用，但並未限定於此等，亦可使用於具有其他化學構造的抗體-藥物結合物之製造、或其他用途用。
〔藥物連結子中間體之製造〕
較佳使用於本發明之抗體-藥物結合物之製造的藥物連結子中間體，係式(14)所表示的化合物。
式(14)所表示的化合物可如以下方式製造。
式(2)所表示的化合物係可使用藉由本發明之製造方法所製造者。式(13)所表示的化合物係可參照國際公開第2014/057687號、國際公開第2015/098099號、國際公開第2015/115091號、國際公開第2015/155998號等記載而製造。
變換為式(14)所表示的化合物係可藉由將式(13)所表示的化合物誘導成活性酯、混合酸酐、或酸鹵 化物等，且較佳於鹼存在下，使與式(2)所表示的化合物反應而進行。
活性酯係可藉由下列方式製造，例如，將式(13)所表示的化合物，使用N,N’-二環己基碳二亞胺(DCC)、或1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺‧鹽酸鹽(WSCD‧HCl)等之縮合劑，而使與1-羥基苯并三唑(HOBt)、1-羥基-7-氮雜苯并三唑(HOAt)、N-羥基琥珀醯亞胺、或p-硝基酚等之添加劑反應。又，活性酯亦可藉由使式(13)所表示的化合物，與O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽三氟乙酸五氟苯酯(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)、氰基磷酸二乙酯(cyanophosphonic acid diethyl ester)、或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基啉(DMTMM)等之縮合劑反應而製造。
混合酸酐係例如，可藉由使式(13)所表示的化合物，因應必要於鹼之存在下，與氯碳酸異丁酯反應而製造。
酸鹵化物係可藉由因應必要於鹼之存在下，以亞硫醯氯、或草醯氯等之酸鹵化物處理而製造。
就用於本步驟的鹼而言，只要反應會進行則未特別限制，但可列舉例如，三乙基胺、三丁基胺、二異丙基乙基胺、N-甲基啉、N-甲基吡咯啶、N-甲基哌啶、吡啶、2-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲基胺基吡啶、1,4-二氮雜雙環〔2.2.2〕辛烷、1,8-二氮雜雙環〔5.4.0〕十一-7-烯、1,5-二氮雜雙環〔4.3.0〕十一-7- 烯等之有機鹼、或碳酸鉀、氫氧化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、乙酸鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、第三丁醇鉀等之無機鹼，較佳可列舉三乙基胺、三丁基胺、二異丙基乙基胺、碳酸鉀、氫氧化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、乙酸鉀，更佳可列舉三乙基胺、二異丙基乙基胺、或N-甲基啉。
就用於本步驟的溶媒而言，只要不是會抑制反應者則未特別限定，但可列舉乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,4-二烷、乙酸乙酯、己烷、戊烷、庚烷、環己烷、乙基環己烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、2-丁酮、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒，較佳可列舉乙腈、二氯甲烷、甲醇、四氫呋喃、1,4-二烷、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、1-甲基-2-吡咯啶酮、二甲亞碸、及水、以及此等之混合溶媒。
〔抗體之製造〕
本發明之抗體-藥物結合物之製造所使用的抗體，係可源自任一物種，但較佳為源自人類、大鼠、小鼠、及兔的抗體。抗體源自人類以外的情形，較佳為使用周知之技術而進行嵌合化或人類化。本發明之抗體可為多株抗體，亦可為單株抗體，但較佳為單株抗體。
本發明之抗體-藥物結合物之製造所使用的抗體，係較佳為具有可以癌細胞為標的之性質者，較佳 為具備可辨識癌細胞的特性、可與癌細胞結合的特性、被攝入癌細胞內而內在化的特性、及/或對癌細胞的殺細胞活性等。
抗體之對癌細胞的結合性，係可使用流動式細胞測量術加以確認。抗體向癌細胞內的攝入係可使用下列來確認，(1)使用會與治療抗體結合的二次抗體(螢光標識)，而將被攝入細胞內的抗體以螢光顯微鏡來可視化的分析法(Cell Death and Differentiation(2008)15,751-761)；(2)使用會與治療抗體結合的二次抗體(螢光標識)，而測定被攝入細胞內的螢光量的分析法(Molecular Biology of the Cell Vol.15,5268-5282,December 2004)；或(3)所謂的Mab-ZAP分析法(Bio Techniques 28：162-165,January 2000)，其係使用會與治療抗體結合的免疫毒素，若被攝入細胞內則毒素會被釋放，而細胞增殖會被抑制。就免疫毒素而言，亦可使用白喉毒素之觸媒區域與蛋白質G之重組複合蛋白質。
抗體之抗腫瘤活性於活體外，係可藉由測定細胞之增殖的抑制活性來確認。例如，可培養過度表現抗體之標的蛋白質的癌細胞株，對培養系統以各種濃度添加抗體，測定對於焦點形成、群落形成及球體增殖的抑制活性。於活體內係例如藉由對移植了高表現標的蛋白質之癌細胞株的裸鼠投予抗體，測定癌細胞之變化，而可確認抗腫瘤活性。
雖較佳為抗體本身具有抗腫瘤效果，但抗體-藥物結合物因已結合會發揮抗腫瘤效果的化合物，所以 抗體本身的抗腫瘤效果並非必須。由使抗腫瘤性化合物之細胞毒性於癌細胞中特異性‧選擇性地發揮之目的來看，抗體具有會內在化而移行至癌細胞內的性質係重要，且較佳。
本發明之抗體-藥物結合物之製造所使用的抗體，可藉由周知之手段取得。例如，可藉由使用於此領域通常實施的方法，將成為抗原的多肽對動物作免疫，並採取、純化活體內所產生的抗體而獲得。抗原之來源並未限定於人類，亦可將源自小鼠、大鼠等之人類以外之動物的抗原對動物免疫。於此情形，藉由試驗與所取得之異種抗原結合的抗體及人類抗原之交叉性，而可選出可適用於人類疾病的抗體。
又，亦可按照周知之方法(例如，Kohler and Milstein,Nature(1975)256,p.495-497；Kennet,R.ed.,Monoclonal Antibodies,p.365-367,Plenum Press,N.Y.(1980))，藉由使會產生對抗抗原之抗體的抗體產生細胞與骨髓瘤細胞融合，來建立融合瘤，獲得單株抗體。
又，抗原係可藉由利用基因操作而使宿主細胞中產生編碼抗原蛋白質的基因來獲得。具體而言，製作可表現抗原基因的載體，將其導入宿主細胞而使該基因表現，並純化表現的抗原即可。亦可藉由使用將由上述基因操作所致的抗原表現細胞、或表現抗原的細胞株對動物免疫的方法，而取得抗體。
於本發明之抗體-藥物結合物之製造所使用的抗體，較佳為以對人類的異種抗原性降低等為目的而 人為地改變的基因重組型抗體，例如嵌合(Chimeric)抗體、人類化(Humanized)抗體，或較佳為僅具有源自人類的抗體之基因序列的抗體，即人類抗體。此等之抗體可使用已知方法來製造。
就嵌合抗體而言，可列舉抗體之可變區域及恆定區域彼此為異種的抗體，例如將源自小鼠或大鼠的抗體之可變區域與源自人類之恆定區域接合的嵌合抗體(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,81,6851-6855,(1984))。
就人類化抗體而言，可列舉：僅將異種抗體之互補性決定區域(CDR；complementarity determining region)併入源自人類的抗體的抗體(Nature(1986)321，p.522-525)；藉由DR移植法，除了異種抗體之CDR之序列，亦移植異種抗體之一部分的框架之胺基酸殘基於人類抗體的抗體(國際公開第90/07861號)；使用基因轉換突變誘發(gene conversion mutagenesis)策略而人類化的抗體(美國專利第5821337號)。
就人類抗體而言，可列舉使用具有包含人類抗體之重鏈及輕鏈的基因的人類染色體片段的人類抗體產生小鼠，而作成的抗體(參照Tomizuka,K.et al.,Nature Genetics(1997)16,p.133-143；Kuroiwa,Y.et.al.,Nucl.Acids Res.(1998)26,p.3447-3448；Yoshida,H.et.al.,Animal Cell Technology：Basic and Applied Aspects vol.10,p.69-73(Kitagawa,Y.,Matsuda,T.and Iijima,S.eds.),Kluwer Academic Publishers,1999；Tomizuka,K.et.al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(2000)97,p.722-727等)。 或者，亦可列舉自人類抗體庫所選出之藉由噬菌體展示所取得的抗體(參照Wormstone,I.M.et.al,Investigative Ophthalmology & Visual Science.(2002)43(7),p.2301-2308；Carmen,S.et.al.,Briefings in Functional Genomics and Proteomics(2002),1(2),p.189-203；Siriwardena,D.et.al.,Ophthalmology(2002)109(3),p.427-431等)。
於本發明之抗體-藥物結合物之製造所使用的抗體，亦包含抗體之修飾體。該修飾體係意指對本發明之抗體施予化學或生物學的修飾而成者。化學的修飾體係包含具有對胺基酸骨架之化學部分之鍵結、N-鍵結或O-鍵結碳水化物鏈之化學部分的鍵結的化學修飾體等。生物學的修飾體包含經轉譯後修飾(例如，N-鍵結或O-鍵結之糖鏈附加、N末端或C末端之加工、脫醯胺化、天冬胺酸之異構化、甲硫胺酸之氧化等)者；藉由使用原核生物宿主細胞使表現，而於N末端被附加了甲硫胺酸殘基者等。又，為了可進行本發明之抗體或抗原之檢測或單離而被標識者，例如，酵素標識體、螢光標識體、親和性標識體亦包含於該修飾體之意義。此種本發明之抗體之修飾體，係有用於抗體之安定性及血中滯留性的改善、抗原性的降低、抗體或抗原之檢測或單離等。
又，藉由調節與本發明之抗體結合的糖鏈修飾(糖苷化(glycosylation)、脫岩藻糖(fucose)化等)，可增強抗體依存性細胞毒殺活性。就抗體之糖鏈修飾之調節技術而言，已知有國際公開第99/54342號、國際公開第 00/61739號、國際公開第02/31140號等，但未限定於此等。本發明之抗體亦包含該糖鏈修飾經調節的抗體。
又，於哺乳類培養細胞所生產的抗體，已知該重鏈之羧基末端的離胺酸殘基有缺失(Journal of Chromatography A,705：129-134(1995))，又，已知相同重鏈羧基末端的甘胺酸、離胺酸的2個胺基酸殘基有缺失，於新的羧基末端位置的脯胺酸殘基被醯胺化(Analytical Biochemistry,360：75-83(2007))。然而，此等之重鏈序列之缺失及修飾，並不影響對抗體之抗原結合能力及效應子(effector)機能(補體之活性化或抗體依存性細胞傷害作用等)。因此，於本發明之抗體亦包含受到該修飾的抗體及該抗體之機能性片段，亦包含於重鏈羧基末端上有1或2個胺基酸缺欠的缺失體、及經醯胺化的該缺失體(例如，羧基末端部位之脯胺酸殘基經醯胺化的重鏈)等。惟，只要保有抗原結合能力及效應子機能，本發明之抗體之重鏈的羧基末端之缺失體並未限定於上述之種類。構成本發明之抗體的2股重鏈可為選自包含完全長度及上述之缺失體的群組之重鏈的任一種，亦可為組合了任二種者。各缺失體之量比雖會受到產生本發明之抗體的哺乳類培養細胞之種類及培養條件的影響，但本發明之抗體可列舉較佳為在2股之重鏈雙方，羧基末端之一個胺基酸殘基有缺欠者。
就本發明之抗體之同型(isotype)而言，可列舉例如IgG(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)等，但可列舉較佳為IgG1或IgG2。
於本發明之抗體-藥物結合物之製造可使用的抗體並未特別限制，但可列舉例如，抗HER2抗體、抗HER3抗體、抗TROP2抗體、抗B7-H3抗體、抗CD3抗體、抗CD30抗體、抗CD33抗體、抗CD37抗體、抗CD56抗體、抗CD98抗體、抗DR5抗體、抗EGFR抗體、抗EPHA2抗體、抗FGFR2抗體、抗FGFR4抗體、抗FOLR1抗體、抗VEGF抗體、及抗GPR20抗體，較佳可列舉抗HER2抗體、抗HER3抗體、抗TROP2抗體、抗B7-H3抗體、及抗GPR20抗體。
於本發明中，「抗HER2抗體」係表示與HER2(人類表皮生長因子受體第2型(Human Epidermal Growth Factor Receptor Type 2)；ErbB-2)特異性結合，且較佳為藉由與HER2結合而具有於HER2表現細胞中內在化之活性的抗體。
就抗HER2抗體而言，可列舉例如，曲妥珠單抗(trastuzumab)(美國專利第5821337號)、及、帕妥珠單抗(pertuzumab)(國際公開第01/00245號)，較佳可列舉曲妥珠單抗。
於本發明中，「曲妥珠單抗」係一種人類化抗HER2單株抗體，其包含由序列識別號1(圖1)中胺基酸編號1至449記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號2(圖2)中胺基酸編號1至214記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成。
於本發明中，「抗HER3抗體」係表示具有與HER3(Human Epidermal Growth Factor Receptor Type 3；ErbB-3)特異性結合，且較佳為與HER3表現細胞表面上之HER3結合而於該HER3表現細胞中內在化的活性的抗體。
就抗HER3抗體而言，可列舉例如，帕曲土單抗(patritumab；U3-1287)、U1-59(國際公開第2007/077028號)、MM-121(司里班妥單抗(seribantumab))、國際公開2008/100624號記載之抗ERBB3抗體、RG-7116(鲁姆妥珠單抗(lumretuzumab))、及LJM-716(依格珠單抗(elgemtumab))，較佳可列舉帕曲土單抗及U1-59。
於本發明中，「抗TROP2抗體」係表示具有與TROP2(TACSTD2：腫瘤相關鈣訊息轉導蛋白2(Tumor-associated calcium signal transducer 2)；EGP-1)特異性結合，且較佳為藉由與TROP2結合而於TROP2表現細胞中內在化的活性的抗體。
就抗TROP2抗體而言，可列舉例如，hTINA1-H1L1(國際公開第2015/098099號)。
於本發明中，「抗B7-H3抗體」係表示具有與B7-H3(B細胞抗原# 7同源物3(B cell antigen # 7 homolog 3)；PD-L3；CD276)特異性結合，且較佳為藉由與B7-H3結合而於B7-H3表現細胞中內在化的活性的抗體。
就抗B7-H3抗體而言，可列舉例如，M30-H1-L4(國際公開第2014/057687號)。
於本發明中，「抗GPR20抗體」係表示與 GPR20(G蛋白質偶合受體20(G Protein-coupled receptor 20))特異性結合，且較佳為藉由與GPR20結合而於GPR20表現細胞中內在化的活性的抗體。
就抗GPR20抗體而言，可列舉例如，h046-H4e/L7(國際公開第2018/135501號)。
〔抗體與藥物連結子中間體之結合物〕
本發明之抗體-藥物結合物，可藉由使藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)、與具有硫醇基(或亦稱為巰基)的抗體反應而製造。
具有巰基的抗體，可以所屬技術領域中具通常知識者周知之方法來獲得(Hermanson,G.T,Bioconjugate Techniques,pp.56-136,pp.456-493,Academic Press(1996))。例如，對抗體內鏈間雙硫鍵每1個，使用參(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)等之還原劑0.3至3莫耳當量，且於包含乙二胺四乙酸(EDTA)等之鳌合劑的緩衝液中，使與抗體反應，可藉此而獲得具有抗體內鏈間雙硫鍵被部分或完全還原的巰基的抗體。
再者，可對具有巰基的抗體每1個，使用2至20莫耳當量之藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，而製造抗體每1個有2個至8個藥物結合的抗體一藥物結合物。
製造的抗體-藥物結合物之抗體每一分子之平均藥物結合數的算出，係可藉由下列方法進行，例如，藉由測定280nm及370nm之二波長中的抗體-藥物結合 物及其結合物前驅體之UV吸光度而算出的方法(UV法)；或將抗體-藥物結合物以還原劑處理，且將獲得的各片段利用HPLC測定而定量、算出的方法(HPLC法)。
抗體及藥物連結子中間體之結合物、及抗體-藥物結合物之抗體每一分子之平均藥物結合數的算出，可參考國際公開第2014/057687號、國際公開第2015/098099號、國際公開第2015/115091號、國際公開第2015/155998號、及國際公開第2018/135501號等之記載而實施。
於本發明中，「抗HER2抗體-藥物結合物」係表示抗體-藥物結合物中的抗體為抗HER2抗體的抗體-藥物結合物。
抗HER2抗體係較佳為包含由序列識別號1中胺基酸編號1至449記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號2中胺基酸編號1至214記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或包含由序列識別號1記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號2記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體。
依據本發明所製造的抗HER2抗體-藥物結合物之每1抗體的藥物連結子之平均結合數，係較佳為2至8，更佳為3至8，進一步更佳為7至8，進一步更佳為7.5至8，進一步更佳為約8。
該抗HER2抗體-藥物結合物，係可使用利用本發明之製造方法所製造的藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，參考國際公開第2015/115091 號等之記載而製造。
於本發明中，「抗HER3抗體-藥物結合物」係表示抗體-藥物結合物中的抗體為抗HER3抗體的抗體-藥物結合物。
抗HER3抗體係較佳為包含由序列識別號3記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號4記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
依據本發明所製造的抗HER3抗體-藥物結合物之每1抗體的藥物連結子之平均結合數，係較佳為2至8，更佳為3至8，進一步更佳為7至8，進一步更佳為7.5至8，進一步更佳為約8。
該抗HER3抗體-藥物結合物，係可使用利用本發明之製造方法所製造的藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，參照國際公開第2015/155998號等之記載而製造。
於本發明中，「抗TROP2抗體-藥物結合物」係表示抗體-藥物結合物中的抗體為抗TROP2抗體的抗體-藥物結合物。
抗TROP2抗體係較佳為包含由序列識別號5中胺基酸編號20至470記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號6中胺基酸編號21至234記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
依據本發明所製造的抗TROP2抗體-藥物結 合物之每1抗體的藥物連結子之平均結合數，係較佳為2至8，更佳為3至5，進一步更佳為3.5至4.5，進一步更佳為約4。
該抗TROP2抗體-藥物結合物，係可使用利用本發明之製造方法所製造的藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，參照國際公開第2015/098099號等之記載而製造。
於本發明中，「抗B7-H3抗體-藥物結合物」係表示抗體-藥物結合物中的抗體為抗B7-H3抗體的抗體-藥物結合物。
抗B7-H3抗體係較佳為包含由序列識別號7中胺基酸編號20至471記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號8中胺基酸編號21至233記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
依據本發明所製造的抗B7-H3抗體-藥物結合物之每1抗體的藥物連結子之平均結合數，係較佳為2至8，更佳為3至5，進一步更佳為3.5至4.5，進一步更佳為約4。
該抗B7-H3抗體-藥物結合物，係可使用利用本發明之製造方法所製造的藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，參考國際公開第2014/057687號等之記載而製造。
於本發明中，「抗GPR20抗體-藥物結合物」係表示抗體-藥物結合物中的抗體為抗GPR20抗體的抗 體-藥物結合物。
抗GPR20抗體係較佳為包含由序列識別號9中胺基酸編號20至472記載之胺基酸序列所構成的重鏈及由序列識別號10中胺基酸編號21至234記載之胺基酸序列所構成的輕鏈而成的抗體；或該抗體之重鏈羧基末端之離胺酸殘基有缺失的抗體。
依據本發明所製造的抗GPR20抗體-藥物結合物之每1抗體的藥物連結子之平均結合數，係較佳為2至8，更佳為3至8，進一步更佳為7至8，進一步更佳為7.5至8，進一步更佳為約8。
該抗GPR20抗體-藥物結合物，係可使用利用本發明之製造方法所製造的藥物連結子中間體(較佳為式(14)所表示的化合物)，參考國際公開第2018/135501號等之記載而製造。
〔醫藥組成物〕
依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，可含有1種以上之藥學上適合性之成分而被投予。藥學上適合性之成分，係可因應依據本發明所製造的抗體-藥物結合物之投予量或投予濃度等，而自此領域通常使用的製劑添加物及其他加以適宜選擇而適用。例如，依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，係可作為包含組胺酸緩衝劑等之緩衝劑、蔗糖或海藻糖等之賦形劑、以及聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20等之界面活性劑的醫藥組成物而被投予。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，除了對患者作為全身療法施用之外，可對癌組織局部施用而期待治療效果。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，雖可較佳對哺乳動物使用，但可更佳對人類使用。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，係較佳可作為注射劑使用，更佳可作為水性注射劑或冷凍乾燥注射劑使用，進一步更佳可作為冷凍乾燥注射劑使用。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物為水性注射劑的情形，較佳為可以適當稀釋液稀釋之後，點滴投予至靜脈內。就稀釋液而言，可列舉葡萄糖溶液(較佳為5%葡萄糖溶液)、生理食鹽液等。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物為冷凍乾燥注射劑的情形，較佳為可藉由注射用水溶解後，將必要量以適當稀釋液稀釋之後，點滴投予至靜脈內。就稀釋液而言，可列舉葡萄糖溶液(較佳為5%葡萄糖溶液)、生理食鹽液等。
就為了投予包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物而可使用的導入路徑而言，可列舉例如，靜脈內、皮內、皮下、肌肉內、及腹腔內之路徑，較佳可列舉靜脈內之路徑。
依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，可對於人類，以1~180日間1次的間隔來投予，較佳為可以 1週、2週、3週、或4週1次的間隔來投予，進一步更佳為可以3週1次的間隔來投予。又，依據本發明所製造的抗體-藥物結合物，可以每1次約0.001~100mg/kg之投予量來投予，較佳可以每1次0.8~12.4mg/kg之投予量來投予。依據本發明所製造的抗體-藥物結合物為抗HER2抗體-藥物結合物的情形，較佳可以每1次5.4、6.4、或7.4mg/kg之投予量來投予，進一步更佳可以每1次5.4mg/kg或6.4mg/kg之投予量來投予。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，係可使用於癌症之治療用，較佳可為了選自下列組成之群組中之至少一者的治療而使用：乳癌、胃癌(亦稱為胃腺癌)、大腸癌(亦稱為結腸直腸癌，包含結腸癌及直腸癌)、肺癌(包含小細胞肺癌及非小細胞肺癌)、食道癌、唾液腺癌、胃食道接合部腺癌、膽管癌、佩吉特氏病(Paget's disease)、胰臟癌、卵巢癌、子宮癌肉瘤、尿道上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、胃腸間質腫瘤、消化道間質腫瘤、子宮頸癌、扁平上皮癌、腹膜癌、肝臟癌、肝細胞癌、結腸癌、直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、腎臟癌、外陰部癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤(plasmacytoma)、骨髓瘤、神經上皮組織性腫瘤、神經鞘性腫瘤、頭頸部癌、皮膚癌、咽頭癌、膽囊癌、膽管癌、間皮瘤(mesothelioma)、及肉瘤，例如，依據本發明所製造的抗體-藥物結合物為抗HER2抗體-藥物結合物的情形，更佳為可為了選自下列組成之群組中之至少一者的治療而使用：乳癌、胃癌、 大腸癌、非小細胞肺癌、食道癌、唾液腺癌、胃食道接合部腺癌、膽管癌、佩吉特氏病、胰臟癌、卵巢癌、及子宮癌肉瘤，更佳為可為了選自下列組成之群組中之至少一者的治療而使用：乳癌、胃癌、大腸癌、非小細胞肺癌、食道癌、唾液腺癌、胃食道接合部腺癌、膽管癌、及佩吉特氏病，進一步更佳為可為了乳癌、胃癌、大腸癌、或非小細胞肺癌的治療而使用。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，係可選擇使用作為癌治療之主要治療法的藥物療法用之藥劑，作為其結果，可使癌細胞的成長延遲，抑制增殖，進而破壞癌細胞。藉由此等之作用，而於癌患者，可達成自癌所致症狀的解放、QOL之改善，保持癌患者之生命而達成治療效果。即使是未達到癌細胞之破壞的情形，亦藉由癌細胞之增殖的抑制或控制，而可於癌患者達成較高QOL，並且達成長期之生存。
於此種藥物療法中之藥物單獨的使用之外，包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，亦可於輔助療法中與其他之療法組合而使用，可與外科手術、放射線療法、荷爾蒙療法等組合。再者亦可作為新輔助療法中的藥物療法而使用。
如以上的治療的使用之外，包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，亦可期待抑制微細的轉移癌細胞之增殖，進而破壞等預防效果。例如，可期待於轉移過程中抑制體液中的癌細胞並破壞的效果、對於剛著床於任一組織後之微細的癌細胞之抑制、 破壞等之效果。因此，特別可期待於外科的癌去除後之癌轉移的抑制、預防效果。
包含依據本發明所製造的抗體-藥物結合物的醫藥組成物，係亦可與其他癌治療劑併用而投予，可藉此而使抗腫瘤效果增強。作為以此種目的被使用的其他癌治療劑，可列舉5-氟尿嘧啶(5-FU)、帕妥珠單抗(Pertuzumab)、曲妥珠單抗(Trastuzumab)、太平洋紫杉醇(Paclitaxel)、卡鉑(Carboplatin)、順鉑(Cisplatin)、吉西他濱(Gemcitabine)、卡培他濱(Capecitabine)、依立替康(Irinotecan)(CPT-11)、多西紫杉醇(Docetaxel)、培美曲塞(Pemetrexed)、索拉非尼(Sorafenib)、長春花鹼(Vinblastin)、長春瑞濱(Vinorelbine)、依維莫司(Everolims)、坦螺旋黴素(Tanespimycin)、貝伐單抗(Bevacizumab)、奧沙利鉑(Oxaliplatin)、拉帕替尼(Lapatinib)、曲妥珠單抗美坦新(Trastuzumab emtansine)(T-DM1)及國際公開第2003/038043號記載之藥劑、又LH-RH類似物(亮丙瑞林(Leuprorelin)、戈舍瑞林(Goserelin)等)、雌莫司汀磷酸鹽(Estramustine Phosphate)、動情素拮抗藥(泰莫西芬(Tamoxifen)、雷洛昔芬(Raloxifene)等)、芳香酶抑制劑(阿那曲唑(Anastrozole)、來曲唑(Letrozole)、及依西美坦(Exemestane)等)等，但只要為具有抗腫瘤活性的藥劑則未被限定。
[實施例]
以下列舉實施例而進一步詳細說明本發明， 但本發明並未限定於此等例。
實施例中之「1H-NMR」及「13C-NMR」係意指「核磁共振光譜」，括弧內之CDCl3意指為測定溶媒的氘代氯仿，DMSO-d6意指為測定溶媒的氘代二甲亞碸，D2O意指為測定溶媒的重水。使用TMS(四甲基矽烷)作為內部標準物質。1H-NMR中的多重度意指s=單峰、d=雙峰、t=三峰、q=四重峰、quint=五重峰、m=多重峰、及brs=寬單峰。
(實施例1)
N-(3-溴-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺
將2-氟-1-甲基-4-硝基苯(10.0g、64.5mmol)之濃硫酸(90%以上、50mL)及庚烷(50mL)之溶液加熱至約60℃後，將N-溴琥珀醯亞胺(13.8g、77.4mmol)分6次添加。於約60℃攪拌1小時後，冷卻至室溫。將獲得的反應液添加至冷水(50mL)。添加甲苯(50mL)而分液後，去除水層。其次將有機層以水(50mL)、6.5wt%碳酸氫鈉水溶液(50mL)、5wt%亞硫酸鈉水溶液(50mL)洗淨。於獲得的水層中添加水(50mL)、活性碳(1.0g)，於室溫攪拌1小時後，濾出不溶物，將不溶物以甲苯(20mL)洗淨。自濾液去除水層後，減壓下濃縮有機層。於濃縮殘渣(約30mL)中添加乙酸乙酯(100mL)，再度減壓下、濃縮，獲得1- 溴-3-氟-2-甲基-5-硝基苯之乙酸乙酯溶液(約30mL)。
將於1-溴-3-氟-2-甲基-5-硝基苯之乙酸乙酯溶液(約30mL)中添加1%鉑碳觸媒(2.0g)、乙酸乙酯(120mL)的懸浮液以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.1MPa)，於約60℃攪拌4小時，冷卻至室溫。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(30mL)洗淨。濾液以0.5N鹽酸水(100mL)洗淨2次而獲得有機層。將此時之水層以乙酸乙酯(50mL)提取，獲得有機層，合併有機層。之後，以6.5wt%碳酸氫鈉水溶液(50mL)、5wt%食鹽水(50mL)洗淨，減壓下，濃縮獲得的有機層。於濃縮殘渣(約30mL)中添加乙酸乙酯(50mL)，再度減壓下、濃縮而獲得3-溴-5-氟-4-甲基苯胺之乙酸乙酯溶液(約30mL)。
於3-溴-5-氟-4-甲基苯胺之乙酸乙酯溶液(約29mL)中添加乙酸乙酯(30mL)的溶液中，添加三乙基胺(7.2mL、51.8mmol)、乙酸酐(3.3mL、34.4mmol)，於室溫攪拌6小時。於獲得的反應液中添加10wt%食鹽水(50mL)而分液後，去除水層。減壓下，濃縮獲得的有機層後，添加乙酸乙酯(50mL)而再度減壓下、濃縮。於濃縮殘渣(約30mL)中添加乙酸乙酯(80mL)，添加4N鹽酸/乙酸乙酯溶液(10.9mL、43.7mmol)後，於室溫下攪拌1小時。濾出不溶物，不溶物以乙酸乙酯(40mL)洗淨。於濾液中添加10wt%食鹽水(40mL)後，添加25wt%氫氧化鈉水溶液(5.6g)而將pH作成約7。去除水層後，減壓下，濃縮有機層。於濃縮殘渣(約30mL)中添加甲苯(100mL)，將減壓下濃縮的濃縮殘渣(約30mL)於50℃攪 拌5小時後，冷卻至室溫。於室溫攪拌12小時後，冷卻至3℃而攪拌2小時。濾取析出的結晶，以冷甲苯(20mL)、冷75%含水乙腈(20mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，獲得呈白色結晶之N-(3-溴-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺(5.7g、產率37%)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ7.41(1H，s)，7.39(1H，d，J=9.2Hz)，7.20(1H，brs)，2.27(3H，d，J=2.0Hz)，2.17(3H，s)
(實施例2)
4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸
將N-(3-溴-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺(30.0g、121.9mmol)、3-丁烯酸(12.4mL、146.3mmol)、二異丙基乙基胺(46.0mL、268.2mmol)之四氫呋喃(120mL)、水(30mL)之溶液，於減壓下，脫氣並氮置換後，添加三(鄰甲苯基)膦(1.1g、3.7mmol)。再度減壓下，脫氣並氮置換後，添加乙酸鈀(II)(0.4g、1.8mmol)，減壓下，脫氣而以氮置換後加熱回流5小時。於冷卻至室溫的反應液中添加活性碳(3.0g)，於室溫攪拌1小時。濾出不溶物，不溶物以20%含水四氫呋喃(60mL)洗淨。於濾液中添加2-甲基四氫呋喃(300mL)、水(300mL)，添加25wt%氫氧化鈉 水溶液(23.4g、146.3mmol)。去除有機層，於水層中添加2-甲基四氫呋喃(300mL)、濃鹽酸(36%、22.2g、219.4mmol)後，添加氯化鈉(30g)。分液後，去除水層，有機層以10wt%食鹽水(90mL)洗淨。減壓下，濃縮獲得的有機層，獲得呈2-甲基四氫呋喃溶液(約150mL)之含有幾何異構物的4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕-3-丁烯酸。
含有幾何異構物的4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕-3-丁烯酸，以於2-甲基四氫呋喃溶液(約140mL)中添加2-甲基四氫呋喃(308mL)、5%鈀碳(5.6g)的懸浮液，以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.1MPa)，於約40℃攪拌1小時，冷卻至室溫。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以2-甲基四氫呋喃(112mL)洗淨。於濾液中添加水(140mL)，以1N鹽酸水將pH作成約2。分液後，去除水層，減壓下，濃縮獲得的有機層。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(420mL)，減壓下、濃縮。再度添加乙酸乙酯(420mL)，減壓下、濃縮而獲得濃縮殘渣(約170mL)。於50℃攪拌5小時後，添加庚烷(140mL)，冷卻至室溫。濾取析出的結晶，以乙酸乙酯/庚烷(3/7)(84mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，獲得呈白色結晶之4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(26.1g、產率91%)。
1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ12.08(1H，brs)，9.97(1H，s)，7.42(1H，dd，J=12.5，2.0Hz)，7.05(1H，d，J=1.5Hz)，2.59-2.54(2H，m)，2.28(2H，t，J=7.3Hz)，2.10(3H，d，J=2.0Hz)，2.02(3H，s)，1.71(2H，quint，J=7.5Hz)
(實施例3-1)
N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺
將4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(12.0g、47.4mmol)、三氟乙酸(24mL)之溶液冷卻至4℃後，滴加三氟乙酸酐(13.4mL、94.8mmol)，於約4℃攪拌4小時。將獲得的反應液滴加於冷卻至5℃的50%含水乙腈(120mL)中。以25wt%氫氧化鈉水溶液(77.3g)將pH作成約7後，添加水(59mL)。之後，回到室溫而濾取析出的結晶，以水(60mL)、75%含水乙腈(60mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，而獲得呈淡黄白色結晶之N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(10.2g、產率92%)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ12.31(1H，brs)，8.43(1H，d，J=12.8Hz)，2.88(2H，t，J=12.0Hz)，2.66(2H，dd，J=7.2，6.0Hz)，2.22(3H，s)，2.17(3H，d，J=2.0Hz)，2.09(3H，quint，J=6.4Hz)
(實施例3-2)
N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯 胺
將4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(5.0g、19.7mmol)、三氟乙酸(10mL)之溶液冷卻至2℃後，滴加三氟乙酸酐(5.6mL、39.5mmol)，於約5℃攪拌3小時。於反應液中滴加50%含水乙腈(50mL)。以25w/v%氫氧化鈉水溶液(33mL)將pH作成約7後，添加水(17mL)。之後，回到室溫而濾取析出的結晶，以水(25mL)、75%含水乙腈(25mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，而獲得呈淡黄白色結晶之N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(4.3g、產率92%)。
(實施例3-3)
N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺
將4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(5.0g、19.7mmol)、三氟乙酸(10mL)之溶液冷卻至2℃後，滴加三氟乙酸酐(5.6mL、39.5mmol)，於約5℃攪拌 4小時。於反應液中滴加17%含水乙腈(30mL)後，滴加水(20mL)。以25w/v%氫氧化鈉水溶液(33mL)將pH作成約7後，添加水(17mL)。之後，回到室溫而濾取析出的結晶，以水(25mL)、75%含水乙腈(25mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，獲得呈淡黄白色結晶之N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(4.3g、產率93%)。
(實施例4-1)
N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺
將N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(5.0g、21.3mmol)之四氫呋喃(75mL)溶液冷卻至6℃，添加亞硝酸戊酯(3.7mL、27.6mmol)、第三丁醇鉀(2.9g、25.5mmol)。於3℃攪拌17小時後，添加乙酸(25mL)、乙酸酐(25mL)後升溫。於約20℃添加2%鉑碳觸媒(1.5g)，以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.3MPa)，於室溫攪拌4小時。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(25mL)洗淨。於濾液中添加活性碳(0.7g)，於室溫攪拌1小時後，濾出不溶物，將不溶物以 乙酸乙酯(25mL)洗淨。將濾液冷卻至1℃，滴加5N氫氧化鈉水溶液(50mL)。去除水層，再度添加5N氫氧化鈉水溶液(50mL)，去除水層。於獲得的有機層中添加四氫呋喃(35mL)、水(25mL)後，添加5N氫氧化鈉水溶液(25mL)而將pH作成約7。升溫至室溫後，去除水層而將有機層以10wt%食鹽水(25mL)洗淨。將獲得的有機層於減壓下濃縮，作成濃縮殘渣。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(50mL)，減壓下、濃縮。本操作重複合計3次濃縮殘渣(約25mL)於40℃攪拌5小時後，冷卻至室溫，於2℃攪拌3小時。濾取析出的結晶，以冷乙酸乙酯(25mL)、水(25mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，獲得呈白色結晶之N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺(3.7g、產率60%)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ11.76(1H，s)，8.43(1H，d，J=13.0Hz)，6.53(1H，d，J=4.5Hz)，4.62(1H，dt，J=14.0，5.4Hz)，3.08-2.96(2H，m)，2.78-2.72(1H，m)，2.23(3H，s)，2.15(3H，d，J=1.5Hz)，2.11(3H，s)，1.88-1.77(1H，m)
(實施例4-2)
N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺
將N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(35.0g、148.8mmol)之四氫呋喃(525mL)溶液冷卻至4℃，添加亞硝酸戊酯(25.7mL、193.4mmol)、第三丁醇鉀(20.0g、178.6mmol)。於1℃攪拌17小時後，添加乙酸(175mL)、乙酸酐(175mL)後，升溫。於約20℃添加2%鉑碳觸媒(11.8g)，以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.3MPa)，於室溫攪拌3小時。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(175mL)洗淨。於濾液中添加活性碳(5.3g)，於室溫攪拌2小時後，濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(175mL)洗淨。將濾液冷卻至1℃，滴加5N氫氧化鈉水溶液(350mL)。去除水層，再次添加5N氫氧化鈉水溶液(350mL)，去除水層。於獲得的有機層中添加四氫呋喃(245mL)、水(175mL)後，添加5N氫氧化鈉水溶液(150mL)而將pH作成約7。升溫至室溫後，去除水層並將有機層以10wt%食鹽水(175mL)洗淨。將獲得的有機層於減壓下濃縮，作成濃縮殘渣。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(350mL)，減壓下、濃縮。本操作重複合計3次的濃縮殘渣(約175mL)於40℃攪拌5小時後，冷卻至室溫，於2℃攪拌3小時。濾取析出的結晶，以冷乙酸乙酯(175mL)、水(175mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下， 乾燥而取得白色結晶(25.1g)。
將取得的結晶(24.0g、82.1mmol)之20%含水乙醇(300mL)之懸浮液加熱至65℃。添加活性碳(4.8g)，於70℃攪拌30分鐘後，濾出不溶物，將不溶物以20%含水乙醇(72mL)洗淨。於60℃於濾液中滴加水(300mL)後，緩緩冷卻至2℃，攪拌2小時。濾取析出的結晶，以冷60%含水乙醇(120mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，獲得呈白色結晶之N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺(21.6g、產率52%)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ11.76(1H，s)，8.43(1H，d，J=13.0Hz)，6.53(1H，d，J=4.5Hz)，4.62(1H，dt，J=14.0，5.4Hz)，3.08-2.96(2H，m)，2.78-2.72(1H，m)，2.23(3H，s)，2.15(3H，d，J=1.5Hz)，2.11(3H，s)，1.88-1.77(1H，m)
(實施例4-3)
N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺
將N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(3.0g、12.8mmol)之四氫呋喃(45mL)溶液冷卻至 0℃，添加亞硝酸戊酯(2.2mL、16.6mmol)、第三丁醇鉀(1.7g、15.3mmol)。於3℃攪拌3小時後，添加乙酸(15mL)、乙酸酐(15mL)，升溫至20℃，攪拌1.5小時。約3℃添加5%鉑碳觸媒(0.4g)，以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.6MPa)，於約5℃攪拌3小時。之後，於約30℃攪拌1小時，濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(15mL)洗淨。於濾液中添加活性碳(0.5g)，於室溫攪拌2小時後，濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(15mL)洗淨。將濾液冷卻至約5℃，滴加5N氫氧化鈉水溶液(30mL)。將水層去除，添加四氫呋喃(30mL)5N氫氧化鈉水溶液(30mL)，去除水層。於獲得的有機層中添加水(15mL)，添加5N氫氧化鈉水溶液(15mL)，將pH作成約7。升溫至室溫後，去除水層並將有機層以10wt%食鹽水(15mL)洗淨。將獲得的有機層於減壓下濃縮，作成濃縮殘渣。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(30mL)，減壓下濃縮。將重複本操作合計3次的濃縮殘渣(約15mL)於40℃攪拌5小時後，冷卻至室溫，於5℃攪拌2小時以上。濾取析出的結晶，以冷乙酸乙酯(15mL)、水(15mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下乾燥，獲得呈白色結晶之N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺(2.3g、產率62%)。
(實施例5-1)
N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺
將N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺(3.0g、10.3mmol)與2N鹽酸/乙醇(30mL)之懸浮液於50℃攪拌7小時。於獲得的反應液中添加水(45mL)，冷卻至1℃。於1℃滴加三乙基胺(8.6mL、61.6mmol)後，添加亞硫酸鈉(26mg、0.2mmol)。於1℃攪拌4小時後，濾取析出的結晶，以冷60%含水乙醇(30mL)、水(15mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下乾燥而取得呈淡綠色結晶(2.4g)。將取得的淡綠色結晶(1.8g)之丙酮(18mL)之懸浮液於50℃攪拌5小時後，冷卻至室溫。濾取析出的結晶，以丙酮(9mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下，於40℃乾燥而獲得呈淡綠色結晶之N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺(1.6g、產率82%)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.07(1H，d，J=8.0Hz)，7.40(2H，brs)，6.38(1H，d，J=13.2Hz)，4.52-4.43(1H，m)，2.98-2.88(1H，m)，2.87-2.76(1H，m)，2.18-2.10(1H，m)，1.98(3H，d，J=1.2Hz)，1.90(3H，s)，1.88-1.78(1H，m)
(實施例5-2)
N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2- 基)乙醯胺
於室溫將N,N’-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺(5.0g、17.1mmol)分5份添加於2N鹽酸/乙醇(75mL)中，於50℃攪拌5小時。於獲得的反應液中添加水(113mL)，冷卻至2℃。於2℃滴加三乙基胺(22.5mL、161.4mmol)後，添加亞硫酸鈉(43mg、0.3mmol)。於2℃攪拌3小時後，濾取析出的結晶，以冷60%含水乙醇(50mL)、水(25mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，取得呈淡青色結晶(3.9g)。將取得的結晶(1.8g)之丙酮(18mL)之懸浮液於50℃攪拌5小時後，冷卻至室溫。濾取析出的結晶，以丙酮(9mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下，於40℃乾燥而獲得呈淡綠色結晶之N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺(1.6g、產率80%)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.07(1H，d，J=8.0Hz)，7.40(2H，brs)，6.38(1H，d，J=13.2Hz)，4.52-4.43(1H，m)，2.98-2.88(1H，m)，2.87-2.76(1H，m)，2.18-2.10(1H，m)，1.98(3H，d，J=1.2Hz)，1.90(3H，s)，1.88-1.78(1H，m)
(實施例6-1)
N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺
於N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺(170.0g、679mmol)及(4S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1H-哌喃并〔3,4-f〕吲-3,6,10(4H)-三酮(196.7g、747mmol)之甲苯(8.5L)懸浮液中，添加鄰甲苯酚(510mL)及對甲苯磺酸吡啶鎓(25.6g，102mmol)，回流32小時。添加甲苯(500mL)並冷卻至室溫，進一步攪拌2小時。過濾析出的結晶，將濾出的結晶以丙酮(850mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，獲得呈黄色結晶之N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺(312.5g，產率96%)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.87(3H，t，J=7.3Hz)，1.79-1.88(2H，m)，1.91(3H，s)，2.13-2.15(2H，m)，2.39(3H，s)，3.13-3.22(2H，m)，5.20(2H，dd，J=25.6，18.9Hz)，5.42(2H，s)，5.53-5.57(1H，m)，6.52(1H，s)，6.65-6.69(0.4H，m)，6.75(0.4H，d，J= 7.9Hz)，6.95-6.99(0.4H，m)，7.03(0.4H，d，J=7.3Hz)，7.13-7.27(0.4H，m).7.30(1H，s)，7.79(1H，d，J=11.0Hz)，8.46(1H，d，J=9.2Hz)，9.19(0.4H，s).
13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ7.7，10.9，10.9，15.9，22.6，23.1，27.7，30.3，44.0，49.5，65.2，72.3，96.6，109.7，109.9，114.5，118.7，119.1，121.4，123.6，123.7，123.7，125.3，125.5，126.6，128.2，128.9，130.5，136.2，136.3，140.4，145.2，147.8，147.9，149.9，152.3，155.3，156.6，160.3，162.8，169.1，172.4.
MS(ESI)(m/z)：478(〔M+H〕+).
(實施例6-2)
N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺
於N-(8-胺基-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺(2.5g、9.99mmol)及(4S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1H-哌喃并〔3,4-f〕吲-3,6,10(4H)-三酮(3.42g、12.99mmol)之甲苯(125mL)懸浮液中，添加鄰甲苯酚(7.5mL)及對甲苯磺酸吡啶鎓(0.75g，3.00mmol)，回流 19小時(經由作為中間體之式(30)所表示的化合物及式(31)所表示的化合物確認)。
式(30)所表示的化合物：N-〔(2S)-8-{[(4S)-4-乙基-4-羥基-3,10-二側氧基-3,4,8,10-四氫-1H-哌喃并〔3,4-f〕吲-6-基]胺基}-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基〕乙醯胺
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.04(3H，t，J=7.5Hz)，1.80-1.93(2H，m)，2.02-2.18(8H，m)，3.80-3.85(1H，m)，4.62-4.68(1H，m)，4.75-4.85(m，2H)，5.20-5.33(m，2H)，5.70(1H，d，J=16.0Hz)，6.35(1H，s)，6.67(1H，d，J=5.5Hz)，6.88(1H，s)，6.99(1H，d，J=12.0Hz)，11.14(1H，s).
MS(ESI)(m/z)：496.5(〔M+H〕+).
式(31)所表示的化合物：N-〔(2R)-8-{[(4S)-4-乙基-4-羥基-3,10-二側氧基-3,4,8,10-四氫-1H-哌喃并〔3,4-f〕吲-6-基]胺基}-6-氟-5-甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基〕乙醯胺
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.03(3H，t，J=7.5Hz)，1.80-1.92(2H，m)，2.02-2.18(8H，m)，3.79(1H，s)，4.60-4.68(1H，m)，4.72-4.87(m，2H)，5.28(1H，d，J=16.0Hz)，5.70(1H，d，J=16.0Hz)，6.35(1H，s)，6.68(1H，d，J=4.5Hz)，6.88(1H，s)，7.00(1H，d，J=12.0Hz)，11.10(1H，s).
MS(ESI)(m/z)：496.6(〔M+H〕+).
冷卻後，利用甲苯將液量調整為135mL，進一步攪拌2小時。過濾析出的結晶，將濾出的結晶以丙酮(12.5mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，獲得黃色結晶之N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺(4.58g，產率96%)。
機器資料係與實施例6-1記載之化合物同樣。
(實施例7-1)
甲磺酸(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-胺鎓2水合物
於N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺(300.0g，628mmol)之2-甲氧基乙醇(1.5L)、水(4.5L)、乙基環己烷(1.5L)懸浮液中添加甲磺酸(1.5L)，回流8小時。冷卻至室溫後分液而去除有機層，減壓濃縮至3L。將濃縮液加熱至40℃，耗時30分鐘滴加甲醇(6L)。攪拌2小時後，過濾析出的結晶，將濾出的結晶以甲醇(1.5L)洗淨。
將獲得的結晶溶解於水(1.2L)、甲醇(600mL)、甲磺酸(1.2L)，添加活性碳(15g)並攪拌30分鐘。添加纖維素粉末(150g)並攪拌30分鐘後，濾出不溶物，將不溶物以50%甲磺酸水(600mL)及甲醇(600mL)洗淨。將濾液加熱至40℃，耗時55分鐘滴加甲醇(4.8L)。攪拌2小時後，過濾析出的結晶，將濾出的結晶以甲醇(1.5L)洗淨。
將獲得的結晶懸浮於乙醇(6L)、水(600mL)，回流1.5小時。冷卻至室溫後，攪拌30分鐘並過濾析出的結晶，將結晶以乙醇(1.5L)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，之後於40%RH之空氣下調濕4日，獲得無色結晶之甲磺酸(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-胺鎓2 水合物(152.3g，產率43%)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6、D2O)δ0.89(3H，t，J=7.3Hz)，1.90(2H，q，J=7.3Hz)，2.35(3H，s)，2.38-2.47(1H，m)，2.64(3H，s)，3.04-3.11(1H，m)，3.30-3.34(1H，m)，5.08(1H，s)，5.34(2H，dd，J=17.7，15.9Hz)，5.50(2H，dd，J=17.7，10.4Hz)，7.41(1H，s)，7.59(1H，d，J=11.0Hz).
13C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ7.7，10.9，11.0，18.5，20.8，24.7，30.2，39.5，44.5，49.4，55.9，65.2，72.2，95.3，96.9，110.1，100.3，119.4，120.5，124.6，124.7，127.5，134.2，135.2，135.2，144.8，147.8，147.9，149.9，152.3，156.6，160.6，162.6，172.3.
MS(ESI)(m/z)：436(〔M+H〕+).
(實施例7-2)
甲磺酸(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-胺鎓
於N-〔(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔 3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1-基〕乙醯胺(3.5g，7.3mmol)之純水(53mL)、2-甲氧基乙醇(18mL)、乙基環己烷(18mL)懸浮液中添加甲磺酸(18mL)後，重複減壓氮置換3次(重複3次50mbar減壓攪拌後，常壓氮置換的操作)。將懸浮液加熱至85℃後，攪拌11小時，確認反應結束後，冷卻至25℃。將混合物減壓濃縮至38.5mL，將濃縮液加熱至40℃，耗時15分鐘滴加甲醇(18mL)。攪拌6小時後，耗時2小時滴加甲醇(53mL)，再攪拌2小時後，過濾析出的結晶，將濾出的結晶以甲醇(35mL)洗淨。
將獲得的結晶溶解於純水(14mL)、甲磺酸(14mL)之混合液，加熱至37℃後，添加甲醇(7mL)、活性碳(0.35g)及過濾助劑(0.70g，矽藻土：CelpureC1000)，重複3次減壓氮置換(50mbar、常壓氮置換3次)。將懸浮液攪拌20分鐘後，濾出不溶物，將不溶物以甲磺酸-純水-甲醇混液(7mL，7mL，3.5mL)及甲醇(7mL)洗淨。將濾液加熱至37℃，耗時15分鐘滴加甲醇(10.5mL)。攪拌6小時後，耗時1小時滴加甲醇(42mL)，再攪拌2小時後，過濾析出的結晶，將濾出的結晶以甲醇(35mL)洗淨。
將獲得的結晶懸浮於乙醇(70mL)、水(7mL)，於73℃攪拌2小時。冷卻至25℃後，攪拌2小時並過濾析出的結晶，將結晶以乙醇(18mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，獲得甲磺酸(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并〔de〕哌喃并〔3’,4’：6,7〕吲并〔1,2-b〕喹啉-1- 胺鎓(1.72g，產率44%)。
機器資料係與實施例7-1記載之化合物相同。
(實施例8)
N-(3-碘-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺
將2-氟-1-甲基-4-硝基苯(5.0g、32.3mmol)之濃硫酸(90%以上、25mL)及庚烷(25mL)之溶液冷卻至約1℃後，分6次添加N-碘琥珀醯亞胺(10.2g、45.1mmol)。於約2℃攪拌2小時。將獲得的反應液添加至冷水(25mL)。添加甲苯(25mL)而分液後，去除水層。其次將有機層以水(25mL)、6.5wt%碳酸氫鈉水溶液(25mL)、5wt%亞硫酸鈉水溶液(25mL、3次)，最後以水(25mL)洗淨。自濾液去除水層後，減壓下，濃縮有機層。於濃縮殘渣(約30mL)中添加乙酸乙酯(50mL)，再度減壓下，濃縮而獲得1-碘-3-氟-2-甲基-5-硝基苯之乙酸乙酯溶液(約15mL)。
將於1-碘-3-氟-2-甲基-5-硝基苯之乙酸乙酯溶液(約15mL)中添加1%鉑碳觸媒(1.1g)、乙酸乙酯(45mL)的懸浮液以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.1MPa)，於約60℃攪拌5小時，冷卻至室溫。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(15mL)洗淨。將濾液以0.5N鹽酸水(50mL、25mL)洗淨2次而獲得有機層。此時之水層以乙酸乙酯(25mL)提取，獲得有機層，合併有機層。 之後，以6.5wt%碳酸氫鈉水溶液(25mL)、5wt%食鹽水(25mL)洗淨，將獲得的有機層於減壓下濃縮，獲得3-碘-5-氟-4-甲基苯胺之乙酸乙酯溶液。
於3-溴-5-氟-4-甲基苯胺之乙酸乙酯溶液中添加乙酸乙酯(25mL)的溶液中，添加三乙基胺(3.7mL、26.8mmol)、乙酸酐(1.7mL、17.7mmol)而於室溫攪拌4小時。於獲得的反應液中，添加10wt%食鹽水(25mL)而分液後，去除水層。減壓下，濃縮獲得的有機層。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(50mL)，添加4N鹽酸/乙酸乙酯溶液(5.6mL、22.6mmol)後，於室溫下攪拌15分鐘。濾出不溶物，將不溶物以乙酸乙酯(20mL)洗淨。於濾液中添加10wt%食鹽水(20mL)後，添加25w/v%氫氧化鈉水溶液(2.5mL)而將pH作成約7。去除水層後，減壓下，濃縮有機層。於濃縮殘渣中添加乙腈(38mL)、水(38mL)，於25℃攪拌。濾取析出的結晶，以50%含水乙腈(15mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下於40℃乾燥，獲得呈白色結晶之N-(3-碘-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺(2.8g、產率29%)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ7.61(1H，s)，7.47(1H，d，J=10.8Hz)，7.10(1H，brs)，2.30(3H，d，J=2.3Hz)，2.16(3H，s)
(實施例9)
4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸
將N-(3-碘-5-氟-4-甲基苯基)乙醯胺(2.0g、6.8mmol)、3-丁烯酸(0.7mL、8.2mmol)、二異丙基乙基胺(2.6mL、15.0mmol)之四氫呋喃(8mL)、水(2mL)之溶液於減壓下、脫氣而氮置換後，添加三(鄰甲苯基)膦(62.3mg、0.2mmol)。再度減壓下，脫氣並氮置換後，添加乙酸鈀(II)(23.0mg、0.1mmol)，減壓下、脫氣而以氮置換後2小時加熱回流。冷卻至室溫於反應液中添加活性碳(0.2g)、2-甲基四氫呋喃(10mL)、水(10mL)而於室溫攪拌1小時。濾出不溶物，將不溶物以20%含水四氫呋喃(4mL)洗淨。於濾液中添加2-甲基四氫呋喃(10mL)、水(10mL)，添加25w/v%氫氧化鈉水溶液(1.3mL、8.2mmol)。去除有機層，於水層中添加2-甲基四氫呋喃(20mL)、濃鹽酸(36%、1.2g、12.3mmol)後，添加氯化鈉(2g)。分液後，去除水層，有機層以10wt%食鹽水(6mL)洗淨。將獲得的有機層於減壓下、濃縮，獲得包含幾何異構物的4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕-3-丁烯酸殘渣(1.9g)。
將於包含幾何異構物的4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕-3-丁烯酸殘渣(1.9g)中添加2-甲基四氫呋喃(30mL)、5%鈀碳(1.7g)的懸浮液，以氮置換後，以氫置換。氫氣流下(0.3MPa)，於約40℃攪拌8小時，冷卻至 室溫。自獲得的懸浮液濾出不溶物，將不溶物以2-甲基四氫呋喃(8mL)洗淨。於濾液中添加水(10mL)而以1N鹽酸水將pH作成約2。分液後，去除水層，減壓下，濃縮獲得的有機層。於濃縮殘渣中添加乙酸乙酯(10mL)，加熱至約50℃後，添加庚烷(10mL)，冷卻至室溫。濾取析出的結晶，以乙酸乙酯/庚烷(3/7)(6mL)洗淨。將獲得的結晶於減壓下、乾燥，獲得呈白色結晶之4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(1.4g、產率81%)。
(實施例10)
N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺
於4-〔5-(乙醯基胺基)-3-氟-2-甲基苯基〕丁酸(200mg、0.79mmol)、亞硫醯氯(86μL、1.18mmol)、二氯甲烷(4mL)之溶液中，於室溫、氮氣流下添加氯化鋁(263mg、1.97mmol)，並於室溫攪拌2小時。於獲得的反應液中添加1N鹽酸水溶液(10ml)、乙酸乙酯(50ml)。去除水層，將有氣層以水(10ml)、6.5wt%碳酸氫鈉水溶液(10ml)、水(10ml)洗淨，將獲得的有機層以硫酸鈉乾燥。濾出不溶物後，將減壓下餾除溶媒而獲得的殘渣以分取薄層層析(己烷：乙酸乙酯=2：1)純化，獲得呈淡黃白 色結晶之N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(125mg、產率67%)。
機器資料係與實施例3-1記載之化合物同樣。
[序列表非關鍵詞文字]
序列識別號1：抗HER2抗體重鏈之胺基酸序列
序列識別號2：抗HER2抗體輕鏈之胺基酸序列
序列識別號3：抗HER3抗體重鏈之胺基酸序列
序列識別號4：抗HER3抗體輕鏈之胺基酸序列
序列識別號5：抗TROP2抗體重鏈之胺基酸序列
序列識別號6：抗TROP2抗體輕鏈之胺基酸序列
序列識別號7：抗B7-H3抗體重鏈之胺基酸序列
序列識別號8：抗B7-H3抗體輕鏈之胺基酸序列
序列識別號9：抗GPR20抗體重鏈之胺基酸序列
序列識別號10：抗GPR20抗體輕鏈之胺基酸序列
<110> 第一三共股份有限公司
<120> 抗體-藥物結合物之新穎製造方法
<130> DSPCT-FP1823
<150> JP2017-167690
<151> 2017-08-31
<160> 10
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗HER2抗體之重鏈
<400> 1
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗HER2抗體之輕鏈
<400> 2
<210> 3
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗HER3抗體之重鏈
<400> 3
<210> 4
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗HER3抗體之輕鏈
<400> 4
<210> 5
<211> 470
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗TROP2抗體之重鏈
<400> 5
<210> 6
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗TROP2抗體之輕鏈
<400> 6
<210> 7
<211> 471
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗B7-H3抗體之重鏈
<400> 7
<210> 8
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗B7-H3抗體之輕鏈
<400> 8
<210> 9
<211> 472
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗GPR20抗體之重鏈
<400> 9
<210> 10
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗GPR20抗體之輕鏈
<400> 10

Claims (67)

  1. 一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：藉由將式(B)所表示的化合物進行分子內環化， (其中，R 1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(C)所表示的化合物 (其中，R 1係表示與前述同意義)。
  2. 如請求項1之製造方法，其中R 1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
  3. 如請求項1之製造方法，其中R 1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
  4. 如請求項1之製造方法，其中R 1為經乙醯基保護的胺基。
  5. 如請求項1至4中任一項之製造方法，其中分子內環化係藉由包含使式(B)所表示的化合物與三氟乙酸酐反應的方法而進行。
  6. 如請求項5之製造方法，其中分子內環化係於包含三 氟乙酸的溶媒中進行。
  7. 如請求項1至4中任一項之製造方法，其中分子內環化係藉由包含使式(B)所表示的化合物與亞硫醯氯反應的方法而進行。
  8. 如請求項7之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
  9. 一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：藉由將式(J)所表示的化合物進行分子內環化 (其中，Y係表示脫離基，R 1係表示經保護基保護的胺基)，而變換為式(C)所表示的化合物 (其中，R 1係表示與前述同意義)。
  10. 如請求項9之製造方法，其中R 1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
  11. 如請求項9之製造方法，其中R 1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
  12. 如請求項9之製造方法，其中R 1為經乙醯基保護的胺基。
  13. 如請求項9至12中任一項之製造方法，其中Y為氯基。
  14. 如請求項9至12中任一項之製造方法，其中Y為三氟乙醯氧基。
  15. 如請求項13之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
  16. 如請求項14之製造方法，其中分子內環化係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
  17. 一種式(C)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(D)所表示的化合物 (其中，X係表示脫離基，R 1係表示經保護基保護的胺基)，與3-丁烯酸偶合，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟 (其中，R 1係表示與前述相同意義)； 其次，將式(E)所表示的化合物還原，而變換為式(B)所表示的化合物的步驟 (其中，R 1係表示與前述相同意義)；其次，將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟 (其中，R 1係表示與前述相同意義)。
  18. 如請求項17之製造方法，其中X為溴基、碘基、三氟甲烷磺醯氧基、或芳基磺醯氧基。
  19. 如請求項17之製造方法，其中X為溴基。
  20. 如請求項17之製造方法，其中X為碘基。
  21. 如請求項17至20中任一項之製造方法，其中R 1為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
  22. 如請求項17至20中任一項之製造方法，其中R 1為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
  23. 如請求項17至20中任一項之製造方法，其中R 1為經乙醯基保護的胺基。
  24. 如請求項17至20中任一項之製造方法，其中式(D)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(E)所表示的化合物的步驟，係於由乙酸鈀(II)及三(鄰甲苯基)膦所調製的鈀錯合物之存在下進行。
  25. 如請求項17至24中任一項之製造方法，其包含下列步驟：將式(E)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，藉由第一有機溶媒而分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中添加酸，並藉由第二有機溶媒而將式(E)所表示的化合物作分液提取的步驟。
  26. 如請求項25之製造方法，其中第一有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
  27. 如請求項25或26之製造方法，其中第二有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
  28. 如請求項25至27中任一項之製造方法，其中鹼性水溶液為氫氧化鈉水溶液。
  29. 如請求項17至28中任一項之製造方法，其中將式(E)所表示的化合物還原，而變換為式(B)所表示的化合物的步驟，係藉由使式(E)所表示的化合物於溶媒中，在鈀碳觸媒之存在下與氫反應的方法而進行。
  30. 如請求項17至29中任一項之製造方法，其中將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(B)所表示的化合物與三氟乙酸酐反應的方法進行。
  31. 如請求項30之製造方法，其中分子內環化係於包含 三氟乙酸的溶媒中進行。
  32. 如請求項17至29中任一項之製造方法，其中將式(B)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(C)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(B)所表示的化合物與亞硫醯氯反應的方法進行。
  33. 如請求項32之製造方法，其中分子內環化係於氯化鋁之存在下進行。
  34. 一種式(2)所表示的化合物之製造方法，其特徵為使用藉由請求項1至33中任一項記載之方法所製造的式(C)所表示的化合物作為起始原料， 其包含下列步驟：將式(C)所表示的化合物變換為式(F)所表示的化合物的步驟 (其中，R 1係表示與請求項1至33中任一項記載之R 1相同意義，R 2係表示經保護基保護的胺基)；其次，將式(F)所表示的化合物，變換為式(G)所表示的化合物的步驟 (其中，R 2係表示與前述相同意義)；其次，將式(G)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合， 而變換為式(H)所表示的化合物的步驟 (其中，R 2係表示與前述相同意義)；其次，將式(H)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟
  35. 如請求項34之製造方法，其中R 2為經乙醯基、甲氧基乙醯基、三氟乙醯基、三氯乙醯基、三甲基乙醯基、 甲醯基、或苄醯基保護的胺基。
  36. 如請求項34之製造方法，其中R 2為經乙醯基或三氟乙醯基保護的胺基。
  37. 如請求項34之製造方法，其中R 2為經乙醯基保護的胺基。
  38. 如請求項34至37中任一項之製造方法，其中將式(C)所表示的化合物變換為式(F)所表示的化合物的步驟，係包含：(i)於鹼之存在下，使與硝酸酯反應並導入亞硝基的階段；其次，(ii)於源自亞硝基的氮原子導入保護基的階段；及(iii)鉑碳觸媒之存在下，以氫進行還原的階段。
  39. 如請求項34至38中任一項之製造方法，其中將式(F)所表示的化合物變換為式(G)所表示的化合物的步驟，係於包含鹽酸/乙醇的溶媒中進行。
  40. 如請求項34至39中任一項之製造方法，其中將式(G)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(H)所表示的化合物的步驟，係於包含鄰甲苯酚的溶媒中進行。
  41. 如請求項34至40中任一項之製造方法，其中將式(H)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟，係於包含甲磺酸的溶媒中進行。
  42. 如請求項34至41中任一項之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽。
  43. 如請求項34至41中任一項之製造方法，其中式(2) 所表示的化合物為甲磺酸鹽‧m水合物(其中，m係0~3個之範圍內)。
  44. 如請求項34至41中任一項之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧2水合物。
  45. 一種式(2)所表示的化合物之製造方法，其包含下列步驟：將式(3)所表示的化合物 變換為式(4)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(4)所表示的化合物變換為式(5)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(5)所表示的化合物變換為式(6)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(6)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合， 而變換為式(7)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(7)所表示的化合物變換為式(8)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(8)所表示的化合物進行分子內環化，而變換為式(9)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(10)所表示的化合物變換為式(11)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(11)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合， 而變換為式(12)所表示的化合物的步驟； 其次，將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟
  46. 如請求項45之製造方法，其中將式(6)所表示的化合物與3-丁烯酸偶合，而變換為式(7)所表示的化合物的步驟，係於由乙酸鈀(II)及三(鄰甲苯基)膦所調製的鈀 錯合物之存在下進行。
  47. 如請求項45或46之製造方法，其包含：將式(7)所表示的化合物溶解於鹼性水溶液，藉由第一有機溶媒進行分液洗淨的步驟；其次，於鹼性水溶液中加入酸，並藉由第二有機溶媒分液提取式(7)所表示的化合物的步驟。
  48. 如請求項47之製造方法，其中第一有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
  49. 如請求項47或48之製造方法，其中第二有機溶媒為2-甲基四氫呋喃。
  50. 如請求項46至49中任一項記載之製造方法，其中鹼性水溶液為氫氧化鈉水溶液。
  51. 如請求項45至50中任一項之製造方法，其中將式(8)所表示的化合物作分子內環化，變換為式(9)所表示的化合物的步驟，係藉由包含使式(8)所表示的化合物與三氟乙酸酐反應的方法而進行。
  52. 如請求項51之製造方法，其中分子內環化係於包含三氟乙酸的溶媒中進行。
  53. 如請求項45至52中任一項記載之製造方法，其中將式(9)所表示的化合物變換為式(10)所表示的化合物的步驟包含：(i)於鹼之存在下，使與亞硝酸酯反應並導入亞硝基的階段；其次，(ii)於源自亞硝基的氮原子導入保護基的階段；及(iii)鉑碳觸媒之存在下，以氫加以還原的階段。
  54. 如請求項45至53中任一項之製造方法，其中將式(10) 所表示的化合物變換為式(11)所表示的化合物的步驟，係於包含鹽酸/乙醇的溶媒中進行。
  55. 如請求項45至54中任一項之製造方法，其中將式(11)所表示的化合物與式(1)所表示的化合物縮合，而變換為式(12)所表示的化合物的步驟，係於含有鄰甲苯酚的溶媒中進行。
  56. 如請求項45至55中任一項之製造方法，其中將式(12)所表示的化合物變換為式(2)所表示的化合物的步驟，係於包含甲磺酸的溶媒中進行。
  57. 如請求項45至56中任一項之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽。
  58. 如請求項45至56中任一項之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧m水合物(其中，m係0~3個之範圍內)。
  59. 如請求項45至56中任一項之製造方法，其中式(2)所表示的化合物為甲磺酸鹽‧2水合物。
  60. 如請求項1至59中任一項記載之製造方法，其不使用層析。
  61. 一種式(6)所表示的化合物，
  62. 一種式(34)所表示的化合物，
  63. 一種式(7)所表示的化合物，
  64. 一種式(8)所表示的化合物，
  65. 一種式(14)所表示的化合物之製造方法，其特徵為使用藉由請求項34至60中任一項的方法所製造的式(2)所表示的化合物作為起始原料， 其包含：藉由將式(2)所表示的化合物及式(13)所表示的化合物加以縮合， 而變換為式(14)所表示的化合物的步驟
  66. 一種式(15)所示藥物連結子(linker)與抗體藉由硫醚鍵結合的抗體-藥物結合物之製造方法， (式中，A表示與抗體之結合位置)其特徵為使用藉由請求項65之方法所製造的式(14)所表示的化合物作為原料， 其包含下列步驟：(i)將抗體加以還原的步驟；其次，(ii)使以上述方法所製造的式(14)所表示的化合物與經還原的抗體反應的步驟。
  67. 如請求項66之製造方法，其中抗體為抗HER2抗體、抗HER3抗體、抗TROP2抗體、抗B7-H3抗體、或抗GPR20抗體。
TW107130663A 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法 TWI806895B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2017-167690 2017-08-31
JP2017167690 2017-08-31

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201920078A true TW201920078A (zh) 2019-06-01
TWI806895B TWI806895B (zh) 2023-07-01

Family

ID=65527350

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW107130663A TWI806895B (zh) 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法
TW112121011A TWI868726B (zh) 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法
TW113147001A TW202515848A (zh) 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112121011A TWI868726B (zh) 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法
TW113147001A TW202515848A (zh) 2017-08-31 2018-08-31 抗體-藥物結合物之新穎製造方法

Country Status (12)

Country Link
US (3) US11318212B2 (zh)
EP (1) EP3677568A4 (zh)
JP (4) JP7248578B2 (zh)
KR (4) KR20250047840A (zh)
CN (4) CN117838880A (zh)
AU (3) AU2018327170B2 (zh)
BR (1) BR112020003466B1 (zh)
CA (1) CA3074208C (zh)
IL (1) IL272964B2 (zh)
SG (1) SG11202001514XA (zh)
TW (3) TWI806895B (zh)
WO (1) WO2019044946A1 (zh)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3050668C (en) * 2017-01-17 2023-08-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-gpr20 antibody and anti-gpr20 antibody-drug conjugate
EP3673918A4 (en) * 2017-08-23 2021-05-19 Daiichi Sankyo Company, Limited PREPARATION OF AN ANTIBODY INGREDIENT CONJUGATE AND LYOPHILIZATION FOR IT
ES3057444T3 (en) * 2017-08-31 2026-03-02 Daiichi Sankyo Co Ltd Improved method for producing antibody-drug conjugate
BR112020003466B1 (pt) * 2017-08-31 2023-12-12 Daiichi Sankyo Company, Limited Métodos de produção de composto, e, composto
IL288485B2 (en) * 2019-05-29 2026-04-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Anti-TROP2 antibody conjugates - a drug for use in cancer treatment
CN114341162B (zh) 2019-07-10 2025-10-17 赛博克萨2公司 作为治疗剂的细胞毒素的肽缀合物
TW202116356A (zh) 2019-07-10 2021-05-01 美商斯布雷克薩三號公司 作為治療劑之微管靶向藥劑之肽結合物
CN111470998B (zh) * 2020-06-28 2020-09-25 上海皓元生物医药科技有限公司 用于合成喜树碱衍生物的中间体及其制备方法和用途
WO2022033978A2 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Innate Pharma Cancer treatment methods using anti-cd73 antibodies
CN114516808B (zh) * 2020-11-20 2024-01-19 华东师范大学 一种氨基保护的苯并环酮类化合物的制备方法
CN115197088A (zh) * 2021-04-02 2022-10-18 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种喜树碱衍生物中间体的制备方法
JP2024513227A (ja) 2021-04-05 2024-03-22 ハリア・セラピューティクス・インコーポレイテッド Ｎｅｋ７阻害剤
TW202320858A (zh) 2021-07-19 2023-06-01 美商薩諾管理公司 免疫接合物及方法
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
CN115703712A (zh) * 2021-08-17 2023-02-17 江苏迈威康新药研发有限公司 5,8-二氨基-3,4-二氢-2h-1-萘酮的合成方法以及其中采用的中间体化合物
CN115724758B (zh) * 2021-08-24 2024-12-27 杭州中美华东制药有限公司 喜树碱衍生物中间体及其合成方法和利用中间体合成喜树碱衍生物的方法
CN118119594A (zh) * 2021-10-26 2024-05-31 上海弼领生物技术有限公司 一种喜树碱类衍生物中间体、其制备方法和用途
CN113956267B (zh) * 2021-11-03 2022-06-21 上海禧耀医药科技有限公司 一种抗肿瘤药物依喜替康甲磺酸盐的制备方法
EP4434548A1 (en) 2021-11-15 2024-09-25 Systimmune, Inc. Bispecific antibody-camptothecin drug conjugate and pharmaceutical use thereof
CN116375594A (zh) * 2021-12-24 2023-07-04 山东恒屹生物医药有限公司 一种依喜替康中间体制备工艺
CR20240375A (es) 2022-03-11 2025-01-06 Mablink Bioscience Conjugados anticuerpo-fármaco y sus usos
CA3250941A1 (en) 2022-04-29 2025-03-20 Systimmune, Inc. Conjugated ligand-drug containing a hydrophilic sugar structure
CN117088786B (zh) * 2022-05-12 2025-09-19 上海医药工业研究院有限公司 一种依沙替康中间体及其制备方法
EP4558506A1 (en) 2022-07-22 2025-05-28 NJ Bio, Inc. Hexacyclic topoisomerase inhibitors having cytotoxic activity on cancer cells
CN117024438A (zh) * 2022-07-29 2023-11-10 杭州爱科瑞思生物医药有限公司 依沙替康衍生物及其应用
CN115521222A (zh) * 2022-09-20 2022-12-27 天津药明康德新药开发有限公司 一种n-（3-氟-4甲基-8氧-5,6,7,8-四氢化萘）棕榈酸酐的制备方法
CN117752813A (zh) 2022-09-26 2024-03-26 成都百利多特生物药业有限责任公司 抗cd33抗体和抗cd33抗体-药物偶联物及其用途
PE20252282A1 (es) * 2022-10-09 2025-09-18 Lanova Medicines Ltd Compuestos, composiciones y metodos
EP4623936A1 (en) 2022-11-22 2025-10-01 Keymed Biosciences (Chengdu) Co., Ltd. Fused ring compound, conjugate thereof and use thereof
WO2024149193A1 (zh) 2023-01-09 2024-07-18 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 含氮稠环化合物的制备方法
TW202502774A (zh) 2023-03-01 2025-01-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 一種茚并［１，２－ｂ］喹啉－１０，１３－二酮衍生物的製備方法
IL326205A (en) 2023-07-27 2026-03-01 Sigma Aldrich Co Llc Intermediates for the synthesis of ecstocaine mesylate
TW202545568A (zh) * 2024-01-29 2025-12-01 日商第一三共股份有限公司 抗her2抗體-藥物結合物與其他劑之組合
TW202543683A (zh) * 2024-02-28 2025-11-16 日商第一三共股份有限公司 抗egfr抗體-藥物結合物與其他劑之組合
TW202543682A (zh) * 2024-02-28 2025-11-16 日商第一三共股份有限公司 抗ｃｄｈ６抗體—藥物結合物與其他劑之組合
WO2025206085A1 (ja) * 2024-03-28 2025-10-02 東レ株式会社 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物

Family Cites Families (107)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0220601B1 (en) 1985-10-21 1991-12-11 Daiichi Seiyaku Co., Ltd. Pyranoindolizine derivatives and preparation process thereof
WO1989006692A1 (en) 1988-01-12 1989-07-27 Genentech, Inc. Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5183884A (en) 1989-12-01 1993-02-02 United States Of America Dna segment encoding a gene for a receptor related to the epidermal growth factor receptor
JP2893893B2 (ja) * 1990-02-02 1999-05-24 三菱化学株式会社 環状ケトン類の製造方法
JP3008226B2 (ja) * 1991-01-16 2000-02-14 第一製薬株式会社 六環性化合物
US5658920A (en) 1991-01-16 1997-08-19 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Substituted 1H,12H-benz-[DE]pyrano[3',4':6,7] indolizino[1,2-B]quinoline-10,13(9H,15H)-dione compound
EP1400536A1 (en) 1991-06-14 2004-03-24 Genentech Inc. Method for making humanized antibodies
JP3359955B2 (ja) * 1992-07-16 2002-12-24 第一製薬株式会社 抗腫瘍剤
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US5849945A (en) 1995-02-22 1998-12-15 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Aminotetralone derivatives and preparation process thereof
US6504029B1 (en) 1995-04-10 2003-01-07 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Condensed-hexacyclic compounds and a process therefor
JPH08337584A (ja) 1995-04-10 1996-12-24 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 縮合六環式アミノ化合物、これを含有する医薬及びその製法
SG50747A1 (en) 1995-08-02 1998-07-20 Tanabe Seiyaku Co Comptothecin derivatives
JPH1095802A (ja) 1995-12-28 1998-04-14 Tanabe Seiyaku Co Ltd カンプトテシン誘導体
CA2192725C (en) 1995-12-28 2004-04-20 Kenji Tsujihara Camptothecin derivatives
US5968511A (en) 1996-03-27 1999-10-19 Genentech, Inc. ErbB3 antibodies
TW527183B (en) 1996-06-06 2003-04-11 Daiichi Seiyaku Co Drug complex
TW409058B (en) 1996-06-06 2000-10-21 Daiichi Seiyaku Co Method for preparation of a drug complex
JPH1171280A (ja) 1997-06-26 1999-03-16 Tanabe Seiyaku Co Ltd 医薬組成物
JPH1192405A (ja) 1997-09-19 1999-04-06 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 薬物複合体
US6071719A (en) 1998-03-11 2000-06-06 Smithkline Beecham Corporation DNA encoding ECR 673: A 7-transmembrane G-protein coupled receptor
ES2434961T5 (es) 1998-04-20 2018-01-18 Roche Glycart Ag Ingeniería de glicosilación de anticuerpos para mejorar la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
GB9808667D0 (en) * 1998-04-23 1998-06-24 Merck Sharp & Dohme Therapeutic compounds
HK1040052B (zh) 1998-05-22 2006-09-15 第一制药株式会社 药物复合物
GB9822116D0 (en) * 1998-10-09 1998-12-02 Zeneca Ltd Herbicides
ID29943A (id) 1998-10-30 2001-10-25 Daiichi Seiyaku Co Senyawa dds dan metode pengukurannya
EP1176195B1 (en) 1999-04-09 2013-05-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP1191944A2 (en) 1999-06-25 2002-04-03 Genentech, Inc. METHODS OF TREATMENT USING ANTI-ErbB ANTIBODY-MAYTANSINOID CONJUGATES
CA2376596C (en) 1999-06-25 2009-10-06 Genentech, Inc. Humanized anti-erbb2 antibodies and treatment with anti-erbb2 antibodies
JP2002060351A (ja) 2000-03-22 2002-02-26 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 水酸基を有する薬物を含むｄｄｓ化合物
EP1298145A4 (en) 2000-06-29 2004-12-08 Daiichi Seiyaku Co DDS CONNECTION AND METHOD FOR PRODUCING THE SAME
MXPA03000387A (es) 2000-07-13 2003-09-22 Daiichi Seiyaku Co Derivados de 4-fenil-piridina como antagonistas del receptor de neuroquinina-1.
ES2639222T5 (es) 2000-10-06 2023-11-24 Kyowa Kirin Co Ltd Células que producen unas composiciones de anticuerpo
US20030018989A1 (en) 2001-03-29 2003-01-23 Brennan Thomas J. Transgenic mice containing GPCR5-1 gene disruptions
EP1283053A1 (en) 2001-08-09 2003-02-12 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Inhibitors of HER3 activity
TWI313609B (en) 2001-08-21 2009-08-21 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Pharmaceutical composition for inhibiting the metastasis or preventing the recurrence of malignant tumor
CN100506277C (zh) 2001-11-01 2009-07-01 Uab研究基金会 肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体受体的选择性抗体和其它治疗剂的联合体系
CA2467242A1 (en) 2001-11-20 2003-05-30 Seattle Genetics, Inc. Treatment of immunological disorders using anti-cd30 antibodies
US8877901B2 (en) 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US9745380B2 (en) 2002-03-01 2017-08-29 Immunomedics, Inc. RS7 antibodies
WO2003074566A2 (en) 2002-03-01 2003-09-12 Immunomedics, Inc. Rs7 antibodies
EP1581648A2 (en) 2002-09-09 2005-10-05 Nura, Inc. G protein coupled receptors and uses thereof
US20080260744A1 (en) 2002-09-09 2008-10-23 Omeros Corporation G protein coupled receptors and uses thereof
JP3896483B2 (ja) * 2002-12-09 2007-03-22 独立行政法人産業技術総合研究所 環状ケトン類の製造方法
EP1572242B1 (en) 2002-12-13 2014-04-16 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US20040202666A1 (en) 2003-01-24 2004-10-14 Immunomedics, Inc. Anti-cancer anthracycline drug-antibody conjugates
WO2005040825A2 (en) 2003-10-24 2005-05-06 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with g protein-coupled receptor 20 (gpr20)
EA200601558A1 (ru) 2004-02-26 2007-08-31 Инотек Фармасьютикалз Корпорейшн Производные изохинолинов и способы их использования
AU2005218642B2 (en) 2004-03-02 2011-04-28 Seagen Inc. Partially loaded antibodies and methods of their conjugation
JP4806680B2 (ja) 2004-05-19 2011-11-02 メダレックス インコーポレイテッド 自己犠牲リンカー及び薬剤複合体
KR20120064120A (ko) 2004-06-01 2012-06-18 제넨테크, 인크. 항체 약물 접합체 및 방법
KR20140032004A (ko) 2004-07-22 2014-03-13 제넨테크, 인크. Ｈｅｒ２ 항체 조성물
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
EP1817341A2 (en) 2004-11-29 2007-08-15 Seattle Genetics, Inc. Engineered antibodies and immunoconjugates
CA2592177A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Genentech, Inc. Fixed dosing of her antibodies
DE102005009099A1 (de) 2005-02-28 2006-08-31 Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh Proteinbindende Camptothecin-Peptid-Derivate und diese enthaltende Arzneimittel
DE102005009084A1 (de) 2005-02-28 2006-08-31 Ktb Tumorforschungsgesellschaft Mbh Proteinbindende Anthrazyklin-Peptid-Derivate und diese enthaltende Arzneimittel
US7833979B2 (en) 2005-04-22 2010-11-16 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
AR056857A1 (es) 2005-12-30 2007-10-24 U3 Pharma Ag Anticuerpos dirigidos hacia her-3 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano-3) y sus usos
US20080131428A1 (en) 2006-02-24 2008-06-05 Arius Research, Inc. Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of TROP-2
SI2032606T1 (sl) 2006-05-30 2014-02-28 Genentech, Inc. Protitelesa in imunokonjugati in njihove uporabe
ES2567402T3 (es) 2006-05-30 2016-04-22 Genentech, Inc. Anticuerpos anti CD22, sus inmunoconjugados y usos de los mismos
TWI279518B (en) 2006-06-12 2007-04-21 Ind Tech Res Inst Loop type heat dissipating apparatus with spray cooling device
ITMI20061473A1 (it) 2006-07-26 2008-01-27 Indena Spa Derivati della camptotecina ad attivita antitumorale
JP2008115165A (ja) * 2006-10-10 2008-05-22 Astellas Pharma Inc チオペプタイド化合物
MX2009006885A (es) 2006-12-21 2009-08-28 Schering Corp Derivados de pirrolo[3,2-a]piridina para inhibir la actividad de la proteina cinesina del huso.
SG178789A1 (en) 2007-02-16 2012-03-29 Merrimack Pharmaceuticals Inc Antibodies against erbb3 and uses thereof
JP2010523478A (ja) 2007-03-22 2010-07-15 スローン − ケタリング・インスティテュート・フォー・キャンサー・リサーチ モノクローナル抗体８ｈ９の使用
CN101687927B (zh) 2007-05-15 2013-10-30 霍夫曼-拉罗奇有限公司 针对g蛋白偶联的受体（gpcr）的抗体
JP5263754B2 (ja) * 2007-12-27 2013-08-14 独立行政法人産業技術総合研究所 環状ケトンの製造方法
KR20200058590A (ko) 2008-04-30 2020-05-27 이뮤노젠 아이엔씨 가교제 및 그 용도
EP2277044B1 (en) 2008-05-13 2015-06-17 Genentech, Inc. Analysis of antibody drug conjugates by bead-based affinity capture and mass spectrometry
CN102282168A (zh) 2008-11-18 2011-12-14 梅里麦克制药股份有限公司 人血清白蛋白接头以及其结合物
EP3912643B8 (en) 2009-02-13 2023-08-23 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US20120171201A1 (en) 2009-07-22 2012-07-05 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating her2 positive cancer with her2 receptor antagonist in combination with multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin
JP5829520B2 (ja) 2009-08-20 2015-12-09 国立大学法人 千葉大学 コルヒチン誘導体
WO2011038159A2 (en) 2009-09-24 2011-03-31 Seattle Genetics, Inc. Dr5 ligand drug conjugates
MX358013B (es) 2009-11-13 2018-08-01 Amgen Inc Materiales y metodos para el tratamiento o prevencion de enfermedades asociadas al her-3.
ES2978177T3 (es) 2009-12-02 2024-09-06 Immunomedics Inc Combinación de radio inmunoterapia y conjugados anticuerpo-fármaco para mejorar la terapia contra el cáncer
CA2797095A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity
MX369106B (es) 2010-05-17 2019-10-29 Chiome Bioscience Inc Anticuerpo anti trop-2 humano que tiene actividad anti-tumoral in vivo.
AU2011255647A1 (en) 2010-05-18 2012-11-15 Cerulean Pharma Inc. Compositions and methods for treatment of autoimmune and other diseases
JPWO2011155579A1 (ja) 2010-06-10 2013-08-15 北海道公立大学法人 札幌医科大学 抗Ｔｒｏｐ−２抗体
WO2012007896A1 (en) 2010-07-12 2012-01-19 Covx Technologies Ireland, Ltd. Multifunctional antibody conjugates
WO2012019024A2 (en) 2010-08-04 2012-02-09 Immunogen, Inc. Her3-binding molecules and immunoconjugates thereof
AU2011286407A1 (en) 2010-08-06 2013-02-21 Amgen Use of HER3 binding agents in prostate treatment
WO2012064733A2 (en) 2010-11-09 2012-05-18 Medimmune, Llc Antibody scaffold for homogenous conjugation
JP5889912B2 (ja) 2010-11-17 2016-03-22 ジェネンテック， インコーポレイテッド アラニニルメイタンシノール抗体コンジュゲート
HUE043221T2 (hu) * 2011-05-27 2019-08-28 Lexicon Pharmaceuticals Inc Notum pektinacetilészteráz 4H-tieno[3,2-C]kromén-alapú inhibitorai és alkalmazási eljárásaik
AU2012335205A1 (en) 2011-11-11 2014-05-29 Rinat Neuroscience Corp. Antibodies specific for Trop-2 and their uses
US9427464B2 (en) 2011-11-22 2016-08-30 Chiome Bioscience Inc. Anti-human TROP-2 antibody having an antitumor activity in vivo
AU2012351685A1 (en) 2011-12-14 2014-07-03 Seattle Genetics, Inc. FGFR antibody drug conjugates (ADCs) and the use thereof
US20130280282A1 (en) 2012-04-24 2013-10-24 Daiichi Sankyo Co., Ltd. Dr5 ligand drug conjugates
JP2015521602A (ja) 2012-06-14 2015-07-30 アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. 核受容体リガンドポリペプチドに対して複合化されている抗ｐｓｍａ抗体
DK2907824T3 (en) 2012-10-11 2018-07-23 Daiichi Sankyo Co Ltd ANTIBODY-drug conjugate
EP2910573B1 (en) 2012-10-19 2020-02-19 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate produced by binding through linker having hydrophilic structure
FR2997696B1 (fr) 2012-11-08 2014-12-05 Servier Lab Nouveau procede de synthese du (2e)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)prop-2-enenitrile, et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels d'addition a un acide pharmaceutiquement acceptable
JP6262768B2 (ja) 2013-01-03 2018-01-17 セルトリオン， インク． 抗体−リンカー−薬物結合体、その製造方法およびそれを含む抗癌剤組成物
LT3424955T (lt) 2013-12-25 2025-06-25 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-trop2 antikūno ir vaisto konjugato gamybos būdas
SI3466976T1 (sl) * 2014-01-31 2021-12-31 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-her2 konjugat protitelesa-zdravila
EP3593812A3 (en) 2014-03-15 2020-05-27 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
JP2017114763A (ja) 2014-03-26 2017-06-29 第一三共株式会社 抗ｃｄ９８抗体−薬物コンジュゲート
JP6612738B2 (ja) 2014-04-10 2019-11-27 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ２抗体−薬物コンジュゲート
KR102399277B1 (ko) 2014-04-10 2022-05-18 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항her3 항체-약물 콘주게이트
CA3050668C (en) 2017-01-17 2023-08-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-gpr20 antibody and anti-gpr20 antibody-drug conjugate
BR112020003466B1 (pt) 2017-08-31 2023-12-12 Daiichi Sankyo Company, Limited Métodos de produção de composto, e, composto

Also Published As

Publication number Publication date
BR112020003466A2 (pt) 2020-08-25
IL272964A (en) 2020-04-30
AU2018327170B2 (en) 2021-03-11
CA3074208C (en) 2023-10-03
CN111065621A (zh) 2020-04-24
IL272964B2 (en) 2024-02-01
EP3677568A4 (en) 2021-05-12
JP2023090704A (ja) 2023-06-29
AU2023216894B2 (en) 2025-08-14
AU2021203889A1 (en) 2021-07-08
IL272964B1 (en) 2023-10-01
JP2026001084A (ja) 2026-01-06
TW202342419A (zh) 2023-11-01
SG11202001514XA (en) 2020-03-30
WO2019044946A1 (ja) 2019-03-07
JP7248578B2 (ja) 2023-03-29
CN117838881A (zh) 2024-04-09
AU2018327170A1 (en) 2020-03-12
CA3074208A1 (en) 2019-03-07
KR102422860B1 (ko) 2022-07-19
KR20250047840A (ko) 2025-04-04
KR20200033949A (ko) 2020-03-30
TWI806895B (zh) 2023-07-01
AU2023216894A1 (en) 2023-09-07
JPWO2019044946A1 (ja) 2020-10-15
JP2024105458A (ja) 2024-08-06
CN117838880A (zh) 2024-04-09
US20240082418A1 (en) 2024-03-14
BR112020003466B1 (pt) 2023-12-12
KR102630307B1 (ko) 2024-01-29
EP3677568A1 (en) 2020-07-08
KR20220104292A (ko) 2022-07-26
US20200384121A1 (en) 2020-12-10
JP7751026B2 (ja) 2025-10-07
CN117865839A (zh) 2024-04-12
TW202515848A (zh) 2025-04-16
KR20240018674A (ko) 2024-02-13
TWI868726B (zh) 2025-01-01
CN111065621B (zh) 2024-01-26
AU2021203889B2 (en) 2023-05-18
US20220226497A1 (en) 2022-07-21
US11318212B2 (en) 2022-05-03
JP7488389B2 (ja) 2024-05-21
KR102789333B1 (ko) 2025-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7751026B2 (ja) 抗体－薬物コンジュゲートの新規製造方法
JP7728821B2 (ja) 抗体－薬物コンジュゲートの改良製造方法
TWI915810B (zh) 抗體-藥物結合物之改良製造方法
HK40021326A (zh) 制备抗体-药物缀合物的新方法