WO1991009042A1

WO1991009042A1 - Nouveau complexe de platine et medicament antitumoral le contenant comme ingredient actif

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Publication number: WO1991009042A1
Application number: PCT/JP1990/001638
Authority: WO
Inventors: Ken Miyamoto; Yuichi Fujii; Toshiaki Fujihashi
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1989-12-15
Filing date: 1990-12-14
Publication date: 1991-06-27
Anticipated expiration: 1992-06-15
Also published as: US5214174A; EP0464210A1; EP0464210A4; KR920701221A

Description

明細書新規な白金錯体およびこれを有効成分とする抗腫瘍剤技術分野

本発明は、抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍剤等の医薬品として有用な新規な白金鐯体に関するものである。背景技術

白金錯体の中には、シスブラチンに代表されるように、顕著な抗腫瘍効果を持つものがあり、シスブラチンは多くの症例に対し適用されている。

しかし、シスブラチンは腎臓毒性等の毒性が極めて強く、この毒性が治療を行う上で大きな障害となっている。そこで従来の白金錯体よりも毒性が低く、より高い抗腫瘍効果を持つ薬剤の開発が望まれていた。発明の開示

本発明者等は、上記の課題を解決すべく種々の白金錯体を合成し、その抗腫瘍効果について研究を行った。そして、その結果、従来の白金錯体よりも毒性が低く、高い抗腫瘍活性を有する白金鍩体を見出し、本発明を完成するに至った。

しかして、本発明によれば、下記式 I

で表される新規な白金錯体またはその立体異性体（以下、本発明の化合物という）および該錯体を有効成分とする抗腫瘍剤が提供される。

本発明によれば、また、本発明の化合物を用いる腫瘍の治療方法が提供される。発明を実施するための最良の形態

上記式 I の化合物の立体異性体は、次の式で表される化合物を舍む。

本発明の化合物は、例えば次のようにして得ることができる。

1 , 2 —シクロオクタンジアミンを担体配位子として有するジニトラト白金錯体を原料とし、これを 0 H— 型陰ィォン交換樹脂に接触させて該錯体の二ト口基を水酸基に変換し、次にシユウ酸を作用させることにより得ることができる。場合によっては水等の適当な溶媒を用いて再結晶を行ってもよい。

また、必要に応じて反応終了後、活性炭等の吸着剤を用いて濾過を行えば、より精製された結晶を得ることができる。

ジニトラト白金錯体の具体例としては、ジニトラト（ジァミノシクロオクタン）白金（ I ) が挙げられる。

ここで、ジニトラト（ジアミノシクロオクタン）白金（ Π ) としては、ジニトラトー（ 1 R , 2 R ) ージアミノシクロォクタン白金（ Π ) およびジニトラトー（ 1 S , 2 S ) —ジァミノシクロオクタン白金（ H ) で表されるトランス体ならびにジニトラトーシス一ジアミノシクロオクタン白金（ Π ) で表されるシス体が存在する。本発明には、これらの原料に対応して合成される異性体のすべて、さらには各異性体が任意の割合で混合した混合物が包含される。

O H— 型陰イオン交換樹脂の具体例としては、ダイヤィォン SA10A0H (三菱化成社製）等を挙げることができる。

接触させる方法としては、バッチ法、カラム法等、樹脂と白金錯体が接触される方法であればいかなる方法を用いてもよく、効率面を考慮すればカラム法によるのが好ましい。シユウ酸を作用させるには、出発原料の白金錯体の化学当量よりもやや少なめのシユウ酸 · 2水和物を加えて溶解し、 12〜36時簡程度放置するのが好ましい。反応終了後は、水溶液の濃縮またはメタノール等の溶媒を加えて結晶を沈澱させ、濾取し、乾燥することにより該錯体を得ることができる。

また、本発明の化合物は、元素分析、赤外線吸収スぺクトル等で構造が確認された。

次に、本発明の化合物の抗腫瘍効果について実験例を挙げて説明する。

実験例 1

L1210 マウス白血病細胞、 P388マウス白血病細胞、ヒーラ一（HeLa)ヒト子宮頸癌細胞、 T24ヒト膀胱癌細胞および MCF7 ヒト乳癌細胞を、それぞれ 10%牛胎仔血清を舍むイーグル

(Eagle) 培地（HeLa, T24) 、 BPMI 1640培地（L1210, MCF7) または 5 X10-⁵Mメルカプトェタノールを添加した RPMI1640培地（P388)に懸濁して、 96穴マルチプレートに 1穴当たり 3 X 10³ 個播種し、後記実施例で得た化合物またはシスブラチン (CDDP)を生理食塩水で希釈し、種々の濃度となるように添加した。これを二酸化炭素ィンキュベータ一中で 37て、 48時間培養後、細胞の増殖を MT T 〔 3 — ( 4 , 5 -dimethylthiazol 一 2 — 1 ) — 2 , 5― diphen 1 tetrazol ium bromide ] 法

(J. Immunol. Method 65» 55, 1983) にて測定した。 48時間培養後の各濃度での吸光度を A、 48時間培養後のコントロールの吸光度を B、実施例で得た化合物添加前の吸光度を Cとして、各濃度での増殖反応率 Dを以下の式より求め、実施例で得た化合物の濃度と増殖反応率の曲線からコントロールの 50 %になる実施例で得た化合物の濃度（IC₅。、単位： / ) を求めた。

A - C

D X 100

B — C

結果を第 1表に示す

1

<マウスおよびヒト癌細胞増殖抑制作用 >

実験例 2

マウス白血病 L1210 細胞 1 X10⁵ 個を 6週令の雌性 BDF,マウスの腹腔内に移植し、その翌日から連日 3 日間 3回、後記実施例で得た化合物および CDDPを腹腔内に投与した。同様に生理食塩水のみを投与したものをコントロール群とした。

抗腫瘍作用の効果判定は、次式で表されるように、後記実施例で得た化合物投与群およびコントロール群の L1210 移植後 30日までの平均生存日数から、延命率（ TZ C値）を求め. これにより行った。実験を移植 30日後に終了し、 30日以上生存したものも 30日とみなした。

化合物投与群の平均生存曰数

T/C {%) = X100 コントロール群の平均生存日数

各投与量における平均生存日数、 Tノ C値（％) および実験終了時の生存マウス数/使用マウス数を第 2表に示し、 ILS₃。値（コントロール群に比べ 30%の延命効果を与える投与量）、 ILS_max 値（最大延命効果を与える投与量）、 T R 値（治療比、 ILS_max と ILS₃。の比）および C R (ILS_max値での完全治癒マウス数および移植後 30日で腫瘍増殖が認められないマウス数/処置マウス数）を第 3表に示す。

ただし、第 2表中、 ①は生存マウス数/"使用マウス数を示す。

第 2 表投与量平均生存曰数 T/ C ①

(mg/kg) (曰） (%)

実施例 1で 0.3 >16.8 >183 1/6 得た化合物

// 1.0 >19.7 >214 1/6

// 3.0 >20.3 >220 2/6

// 10.0 >30.0 >326 6/6 第 3 表

以上の結果より、本発明の化合物は優れた抗腫瘍活性を有することが認められた。

また、本発明の化合物の急性毒性試験を I C R系雄性マウスを用いて行ったところ、腹腔内投与の場合、本発明の化合物の L D ₅。は 29 . 5mg / k であつた。 CDDPのそれが 14 . 6mg / kg であることからも、本発明の化合物の安全性が確認された。すなわち、本発明の化合物は優れた抗腫瘍作用を示し、毒性が低い抗腫瘍剤として有用であると考えられる。

次に、本発明の化合物の投与量および製剤化について説明する。

本発明の化合物は、そのままで、あるいは慣用の製剤担体と共に動物および人に投与することができる。投与形態には特に限定がなく、必要に応じ適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令- 体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発明の化合物の重量として 10mg〜 1 gを 1 日数回に分けての服用が適当と思われる。経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、力ルポキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩壌剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体例は以下に示すごとくである。

〔結合剤〕

デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カルボキシメチレセノレロースナトリゥム、ヒドロキシプロピゾレセノレロース、結晶セルロース、ェチルセルロース、ポリビュルピロリドン、マクロゴーノレ。

〔崩壌剤〕

デンプン、ヒドロキシブ口ピルスターチ、カルボキシメチノレセノレ口一スナトリウム、カノレボキシメチノレセゾレロース力ノレシゥム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプ口ピゾレセノレロース。

〔界面活性剤〕

ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸ェステル、ポリソルベート 80。

〔滑沢剤〕

タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸ヱステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステァリン酸アルミニウム、ボリエチレングリコ一ル。〔流動性促進剤〕

軽質無水ゲイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ゲイ酸アルミニウム、ケィ酸マグネシウム。

また、本発明の化合物は、懸濁液、ェマルジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤としても投与することができ、これらの各種剤形には、矯昧矯臭剤、着色剤を舍有してもよい。非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発明の化合物の重量として 1 日 5〜 600mgまでの静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、ラッカセィ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロビレングリコール、ボリエチレンダリコール等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口剤は安定性の点から、バィアル等に充塡後冷谏し、通常の凍結乾燥技術により水分を除まし、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもできる。さらに、必要に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟脅等の塗布剤、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って製造される。

次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによりなんら制限されるものではない。実施例 1

( 1 R , 2 R ) および（ 1 S , 2 S ) 配置を有する光学異性体を 1 ： 1 に舍むトランスシクロオクタンジアミンを担体配位子として、出発原料のジニトロ一トランスーシクロォクタンジアミン白金を合成した。このニトラト体 12.4 gを蒸留水

400m£に溶解し、ダイヤイオン SA10A0H を 300/Β£充瑱した力ラムに通し、さらに蒸留水により流出した。流出液にシユウ酸 3. 3 gを加えて溶解させ、 30'Cで 12時間反応させた。反応終了後、反応液を活性炭を吸着剤としたカラムに通し、さらに蒸留水を用いて流出した。流出液を濃縮し、水を用いて再結晶化を行うことにより、淡黄色結晶 8. 5 gを得た。

この淡黄色結晶は、下記の理化学的性質より、本発明の化合物のうち、シユウ酸一（ 1 R , 2 R ) ージアミノシクロォクタン白金 ( E ) ( oxalate- (1R, 2R) -diaminocyclooctane Platinum ( Π ) 〕およびシユウ酸— （ 1 S , 2 S ) ージアミノシクロオクタン白金（ Π ) (oxalate- (IS, 2S) -diamino- cyclooctane platinum ( E ) 〕の 1 ： 1混合物であると決定した。

元素分折 CC, _oHi ₈04N₂Pt)

計算値（％) ； C ： 28.23 ， H ： 4.27 , N ： 6.59

実測値（％) ； C ： 28.26 , H ： 4.25 , N ： 6.65

S

赤外線吸収スペクトル t^ax cm-¹

3450, 3050, 1710, 1390, 815

実施例 2

実施例 1 で得られた化合物 10m_gをメタノールに溶解し、分取用光学分割カラム (ultron ES-0VM( «520mm X25cm、粒径 10 卿、信和化工株式会社製）〕を用いてカラムクロマトグラフィ一に付し光学分割した。

力ラム条件としては、移動相は lOOmM過塩素酸ナトリウム ( 0. 2 % H₃P0₄) ：ァセトニトリノレ（90 ： 10) 、流量は 0. 5 /分、力ラム温度は 25'C付近の一定温度、検出は R I (RANGE 1/2)で行った。

その結果 4分 30秒付近で溶出してきたフラクション Aおよび 6分 30秒付近で溶出してきたフラクション Bを得た。それぞれについて脱塩操作を行った後、溶媒を留去することにより、以下の比旋光度を有する（一） —シユウ酸ジアミノシク口オクタン白金（ Π ) 4. 5 mgおよび（十） — シユウ酸ジアミノシクロオクタン fi金（ Π ) 5. 0 mgを得た。

比旋光度

フラクション A ；〔 or〕 ⁰ =— 5· 5 ° ( C 0. 1 , MeOH) フラクション B ；〔な〕 ² ° = + 4. 6 ° ( C 0. 1 , MeOH) 実施例 3

① コーンスターチ 52 g

② 結晶セルロース 40 g

③ カルボキシメチルセルロースカルシウム 5 g

④ 軽質無水ケィ酸 0.5 g

⑤ ステアリン酸マグネシウム 0.5 g

⑥ 実施例 1で得た化合物 2 g

計 100 g

上記の処方に従って①〜⑥を均一に混合し、打锭機にて圧縮成型して一錠 200mgの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、実施例 1で得た化合物 4 mgが舍有されており、成人 1 日 3〜50錠を数回にわけて服用する。

実施例 4

① 結晶セルロース 92. 5 g

② ステアリン酸マグネシウム 0. 5 g

③ カルボキシメチルセルロースカルシウム 5 g

―④ -実施例 1 で得た化合物 2 g _ 計 100 g 上記の処方に従って① ， ④および②の一部を均一に混合し、圧縮成型した後、粉砕し、 ③および②の残量を加えて混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠 200mgの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、実施例 1で得た化合物 4 mgが含有されており、成人 1 日 3〜50錠を数面にわけて服用する。

実施例 5

① 結晶セルロース 42. 5 g

② 10 %ヒドロキシプロピルセルロース 50 g

ェタノール溶液

③ カルボキシメチルセルロースカルシウム 5 g

④ ステアリン酸マグネシウム 0. 5 g ―⑤ 実施例 1 で得た化合物 2 g一計 100 g 上記の処方に従って① ， ②および⑤を均一に混合し、常法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥 · 解砕した後、 ③および④を混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠 200mgの錠剤を得た。この錠剤一錠には、実施例 1で得た化合物 4 mgが舍有されており、成人 1 日 3〜50錠を数回にわけて服用する。

実施例 6

① コーンスターチ 93 g

② ステアリン酸マグネシウム 0. 5 g

③ カルボキシメチルセルロースカルシウム 5 g

④ 軽質無水ゲイ酸 0. 5 g ⑥ 実施例 1で得た化合物 l g

100 g 上記の処方に従って①〜⑤を均一に混合し、圧縮成型機にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤を得た雪

この顆粒剤 1 g には、実施例 1 で得た化合物 lOmgが舍有されており、成人 1 日 1 〜20 gを数回にわけて服用する。

実施例 7

① 結晶セルロース 69 g

② 10 %ヒドロキシプロビルセルロース 30 g ェタノール溶液

③ 実施例 1 で得た化合物 1 g

計 100 g 上記の処方に従って①〜③を均一に混合し、ねつ和した。押し出し造粒機により造粒後、乾燥し、篩別して顆粒剤を得た。

この顆粒剤 1 gには、実施例 1 で得た化合物 l Omgが舍有されており、成人 1 日 1 〜20 gを数回にわけて服用する。実施例 8

① コーンスターチ 97. 5 g

② 軽質無水ケィ酸 0. 5 g

③ 実施例 1 で得た化合物 2 g

計 100 g 上記の処方に従って①〜③を均一に混合し、 200mgを 2号カプセルに充塡した。

このカプセル剤 1 カプセルには、実施例 1で得た化合物 4 mgが含有されており、成人 1 日 3〜50カプセルを数画にわけて服用する。

実施例 9

① 注射用蒸留水適量

② ブドウ糖 200mg

③ 実施例 1で得た化合物 lOOmg

全量 5威注射用蒸留水に②および③を溶解させた後、のアンプルに注入し、 121 'Cで 15分間加圧滅菌を行って注射剤を得た < 産業上の利用可能性

本発明は、腫瘍の治療のための医薬分野に有効に利用することができる。

Claims

請求の範囲

1. 下記式 I

で表される新規な白金錯体またはその立体異性体,

2. 下記式 I

で表される白金鍩体またはその立体異性体を有効成分とする抗腫瘍剤。

3. 下記式 I

で表される白金錯体またはその立体異性体を用いる腫瘍の治療方法。