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Procédé pour la préparation de dérivas d'uridine
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La JH'dot)l"\t" tnV(ntton a trait a un procédé pour la préparation d'un nouvel eater d'urtdine, z savoir le 3't5'" d1AÓ ta tl't de 1-;-D'-i:voxy-ribofurnnooyl)-5tluoro-urnoils, Ainsi zou'1 ;ii% ;nv^nin on 1-(-D-?-d6I1oxy-ribo.t'uranOllyl)- 9-fluoro 'P'1":" pur. !f.d"-:I1' cl-l\pr1I1 pur 7. #-(idaoxy--fluoro- urllinm, Le pr',;.!'! auurtit cot caractérisé en ce qu'on convertit la 21-ddnox3-5-fluoro..:uridino par traitement avec un agent d'ac4tylation n 5-fluoro-2'-d6aoxy-3',5'di-0-aobtyl-uridins,
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et qu'on transforme, le cas échéant, le produit de réaction par
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hydrolyse en 2'-d<5aoxy-5-fluoro-uridine, afin d'obtenir la eub-
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stance pure.
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La 2-déaoxy-5-fli;oro-uridtne eat un oompoaé utile comme &nUltlJpt1Ii'I/t, dt,1\1It, !iot1f' rAr GIII/lIJlh oontre 14u \1".,6"'. gran-Fooitlv9s, et comme agent antifongique. Elle eet également
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utile comme agent antimétabolique; olle contrecarre l'action métabolique de l'acide nucléique et, de ce fait, elle empêche
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la croiananca de cellules, notamment de cellule! tumoralen.
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Lorsqu'elle est préparée selon les méthodes connue., la 2'-déaoxy-5-fluoro-uridine contient souvent un pourcentage
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élevé de 5-fluoro.ura11e. Selon le pronédé susdit, ^n peut 11!1)ler anna 'H(1';Hl "du 111 2 ' ##\Anaiy-()"t lunro-urld Jn pur 4'un
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mélange de cette dernière et de 5-fluoro-uracile. En suivant le procédé en question, on obtiendra de plus un nouveau composé, 1
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savoir la 5-fluaro.-?'-d(4aoxy-3',5',-di-0-eabtyl-uridine. Cette
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substance est d'une importance thérapeutique particulière, étant donné qu'elle permet d'obtenir un taux élevé de 2'-déaoxy-
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5-tluoro-uxidlae dans le corps, fr8 de l'administration pérorale, une grande partio :: In 21-di.,soly-5-fluoro-uridine eet transformée
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en 5-flucro-uracile.
Celui-ci est à son tour partiellement dégrade en formant, par exemple, le dihydrofluoro-uracile de l'acide a-fluoro-8-uréido-propionique et de la a-fluoro-a- alanine, Seule une petite partie de la 2'-ddsoxy-5-fluoro- uridine biologiquement active est effectivement présente dans les humeurs, telles que le sang ou l'urine. On peut, par oontre,
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constater aprèe l'administration de 5-fluoro-2'-d6eoxy-3',5'-di- 0-acétyl-uridine que le taux de 2 '-désoxy-5-fluoro-uridine dans le corps est beaucoup plus élevé.
La transformation de la 2'-désoxy-5-fluoro-uridin par aoétylation en la 5-fluoro-2'-déaoxy-',5'-di-0-acétyl-uridine désirée peut as faire selon des méthodes connues. La conversion de la 5-fluoro-21-dé8oxY-3',5'-di-0-acétyl-uridine par hydrolyse en 2'-désoxy-5-fluoro-uridine est également possible selon les méthodes connues. Quelques mises en oeuvre particulières de ces
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deux réactions sont expliquées c1-aprs.
La 2'-déaoxy-5-fluoro-uridine est avantageusement
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soumise a l'acétylation en présence d'un agent basique, tel que la pyridine ou la diméthylaniline. Comme agent d'acétylation, on utilisera de préférence l'anhydride acétique. On peut, cependant, se servir également d'autres substances, telles que le chlorure d'acétyle, etc. Afin d'obtenir une réaction aussi complète que possible, on utilisera au moins 2 moles de l'agent d'acétylation
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par mole de 21-désoxy-5-fluoro-uridine. Il est toutefois pré- férable d'ajouter l'agent d'acétylation en excès encore plus élevé.
On peut initier l'acétylation exotheialquo en mélangeant simplement les substances de départ à température ambiante, puis on refroidit avantageusement le mélange de réaction afin de main-
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tenir la tr.mpératurn rie réaction environ 'C-.t0 , 1> pré f4r",cft, on continue de remuât' Le l!1ll\nw' jnyu'J1 'La fin de la réaction.
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Cette dernière cet terminée lorsque la température de ré-
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action a atteint à peu près la température ambiante, sans qu'il y agit cetJo1n de refroidir. L'acétylation peut se faire en nr3:m n.^.e d'un oolvant. On utilisera en général un uolvant, Jlr1 lequel aunai bien la 2'-déaoxy-5-fluoro-uridirte, que l'agent 1'cdty15t1on et le produit do réaction à savoir la 5-'.uor^-" -dsoxy-3',5'di-0-actyl-uridine, sont solubles, On utilisera de préférence des solvants organiques inertes non- polaires, tels que le chloroforme, le chlorure de méthylène, etc.
Ce dernier e'eot révélé être particulièrement approprié.
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La 5-fluoro-2'-déaoxy-3f ,5'-diacétyl-uridine peut être isolée du mlar.,e de réaction selon des méthodes connues. Une des formes d'exécution consiste à verser le mélange de réaction dans de l'eau froide. Si le mélange de réaction ne contient pas de solvant organique inerte non-polaire, le produit diacétylé peut se cristalliser. Afin d'éviter la cristallisation de ce composé, on peut ajouter au mélange de réaction un mélange d'eau et d'un solvant organique miscible à l'eau, tel que le chlorure de méthylène. Lorsqu'une cristallisation se produit, le* cristaux
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peuvent être céparée facilement par filtration.
S'il n'y a pas de cristallisation, la 5-fluoro-2'-désoxy-3' ,5'-di-O-acétyl-- uridine est séparée au stade de réaction suivant par extraction de la solution aqueuse avec un solvant organique non-misoible à l'eau, Lorsque l'acétylation est faite, par exemple, en l'ab-
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ooncc d'un 3c va,nt organique non-miocible à l'eau, on peut ex- traire la nolution aqueuse, obtenue après avoir versé le mélange de réaction dans de l'aau froide, avec un solvant, tel que le chloroforme ou le chlorure de méthylène. La phase aqueuse est en-
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suite #riprû'i tilt advint orgrnique ot jetée. La phnne organique
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contenant la 5-fluoro-2'-déooxy-3' ,5'-di-O-acétyl-uridine est 1 lavée avec un acide minéral dilué, tel que l'acide sulfurique,
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l'acide chlorhydrique, etc.
Enduite, elle est lavée avec une solution froide d'une base faible, telle qu'une oolution saturée froide de bicarbonate de sodium. On lave encore une fois,
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cette toI6-n avoc de l'eau, 8?)Chnp. ox. au moyen de sulfate de sodium) et concentre li utcoité. Le rénidu, oonnintant en 5-fluoro- 2'-d6ooxy-j',5'-di-0-acityl-uridl.nn, peut le can échéant Atre dissous dans un aolvant approprié, tel que l'éther;
par concen- tration, il peut être séparé de nouveau de cette solution. Apres
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l'élimination du solvant, le réaidu eut avantageusement séché a env, 'O-50Q noua vide, Tandin que lo paragraphe précédent a trait a la des- cription d'une méthode dl4li%l)oration de mélangée de réaction obtenun lors de l'aoétylation en l'abnonce d'un oolvant non-
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miscible à l'eau, on prouvera ci-apr9o des indications au aujet de l'élaboration d'un mélange de réaction qui contient un solvant
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inhrte, non-1oo1bl à llnau, pour 19 5-tluoro-'-dfnoxy-',o'- di-0-noétyl-ut'trtin, bnnn in nar), le mêlant'! de réaction çmt, également verad dana de l'eau froide, mais la orlatallioaMon r.'eot que peu importante, ou elle ne ex produit pas du tout.
La pluuul 4q44une ont uipnr4ti do la [1h/Jf1!! O""'ltqUllp o lrt tt, a%rsq un solvant organique inerte non-#lac1bh l'eau, dans lequel la 5-fluoro-2'-44noxy--3',5'-di-0-acétyl-uridine est ooluble, "#'#. eu extrgitu olJflnlll1 nont rltn11t avan 1 pfnae organique, Rn p,I\r"J. on utilinerg pour réfraction le mAme ttolvar, \ni pour l':éty.. lation.
La solution organique eat lavée successivement avec de l'acide% une base, et de 1 ' eauTètTchée et cristallisée suivant la description du paragraphe précédant.
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lorsqu'on utl-Lia* comme aubotance de départ la 2'- dl4Boxy-5-tll.(')l'c-u!"td tn6 brute contenant encore du 5-fluoro- uraciln, cet 3,,con,l,tire n' eat pas modifie par l'acéty- lationr <:Y t.I<' ,,<;. qu'on obtient un mélange Je réaction quo contient aussi bi-,r l1 '-dlmo:0-i:T'lCile inchangé que la 5-fluoro-2l-défaoxy- 3' , '-.i : -;)- ' 7 ¯,riv rlc). Cn dernier compond eot dépare d'après lea mtbo,iA.? '.frites ci-dbasua et peut, ensuite, être trans- formé par hylrolynfl en la 2'-d<!aoxy-5-fluoro-uridine d6sir4., L'hydrolyse se faire dene un milieu aoide ou alcalin.
D'après Aune mise en oouvro particulière du procédé en question, le produit de dia6tï at min en auapenaion dans un alcool aliphatique tl1(érlt:I '1,')')..'J:\1rnt., t.nl (1\111 le méthanol, lldtlianol, etc, Cette DUilpen'11on pi:1. :'.i;.tionnde, par exemple, d'une solution diluée de mcthn:r; i ,1"1 sodium. Sn remuant, on refroidit le 1I1,,"ge de réaction \ nno t<>mpdrrtur" plun baane que la température sin- bianti, 9' '# ropl? environ 5 , Par l'addition d'acide, par exemple 1'01d6 ohl-orhydrique m6thanolique, on porte le pH du !l\1i1FU1W 1 rI'\,,,tOf\ \ environ 6, puin on évapore le wolvant noua '1111.... t,n fiolilu fin'. extrait \ pluaieure rttpr1.ntl" tempéra- ture dlv& avoc un aolvunt, tel que l'acétone, Leu extraita réunir) annt onrnntra sous vide jusqu'à oe que le produit criatniltue. A .
MdI!2", fin %joittn de l'éther 11. pétrole au concentré et refroidit le mélange rapidement, lainse reposer, puis r6rzr; pur ! 1 r dion '!en cristaux formde, En concentrant an00fn 17 f-'14. on ob6lhnt una quantité nupp14mtlnh1rft de 2'- d&ioxy...'i.n W) .() "uri ,\1 nl". Par r'H,r1nt,,11 tn"t\on dans un solvant approprié, toi quo l'acétate de butyle, on peut, le cas échéant,
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purifier davantage le produit de réaction.
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J"lpr}'(j uno autre fore* d'exécution du procédé
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01-d..8UI, l'hydrolyse do la 5-fluoro-2'-déeoxy-3' ,5'-di-0- ao4tyl-ur141ne peut 88 faire de la manière suivante. le produit discétylé .et d'abord mie on aunpennlon dans du méthanol froid et mélangé avec une solution eaturde d'acide chlorhydrique mé- thanolique.
La suspension qui en résulte est remuée a. tempéra- ture ambiante jusqu'à l'obtention d'une solution claire. Celle-ci est noncentrée sous vide à une température d'environ 30 , de aorte qu'on obtient une mousse amorphe presque incolore qui est dissoute dans de l'éthanol. Par l'addition d'éther de pétrole, on peut provoquer la cristallisation de la 2'-désoxy-5-fluoro-
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uridine. En grattant ou en inoculant avec de la 21-désoxy-5- fluoro-uridinn pure, on peut accélérer la cristallioation. La 2>-déeoxy-5-fluoro-uridine cristallisée peut être purifiée, le cas échéant, par recristallisation dans un solvant approprié, tel que l'acétate de butyle.
Exemple 1
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5,0 g (0,02 mole) de 21-déuoxy-5-fluoro-uridine Dont dissous dans 200 ml de pyridine sèche. Cette solution eat addi- tionnée de 75,0 ml d'anhydride acétique. En remuant continuelle- ment, on maintient le mélange de réaction pendant env. 17 heures à température ambiante, Ensuite, on verse le mélange dans 750 ml d'eau glacée et extrait la solution obtenue avec du chloroforme (6 x 50 ml). les extraits de chloroforme réunie sont lavée avec de l'acide sulfurique 0,3N froid (4 x 50 ml). On lave les extraits d'abord avec 50 ml de solution de bicarbonate de sodium aqueuse, puis avec 50 ml d'eau glacée. On sèche les extraits de chloro- forme au moyen de sulfate de sodium anhydre et concentre à siccité. Le résidu est repris dans 50 ml d'éther et la solution
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éthérée eet concentrée siccité.
On répète cdte "prt:ltion d fa1A Le 1^rdu at alrme3tt n n .\ 1CJ acuf- vide. Cn obtient aintJ1 la 5-fluro-
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2'-déeoxy-'.5'-di-f-acityl-uridine fondant a 151, 5-152 . r: m 1,1 Or: :cultive e6 cellules d' ècherichia coli dans un milieu nutritif synthétique contenant des sels et du glucose comme seule coures =le carbone. Ce milieu, ainsi que la croissance
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des cellule d'3;9h9richia coli qui s'y trouvent, aont décrit par 3.S. Cohon .)t ILJ..Ahrogllst dans J. Exp. Med. 1,,(1950) 619, Après une période d'incubation de 24 heures, on sépare les cellules par centrifugation. Lea cellules obtenues sont lavées
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A plusieurs rpr15s avec de l'eau, et enouite broyea avec de l'oxyde d'al'j.ïlnlua :1::'1n de préparer une bouillie.
On extrait avec de l'eau, an utilisant 4 ml d'eau par g de cellules humides, L'extrait brut est centrifugé (25000 foie la gravita terrestre),
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de aorte qu'en obtient une uolution surnageante visqueuse de couleur Jaun<V;r<3, 214,0 tl,h4 5 mmol.na) do 5-fluoro-uraoile et 400 g (1,6i5 asmctor) dn hYll1i1in sont ajoutée à 36,5 litrea d'une aolution (pli - 8) contenant 179 g de trihydroxyméthylsrainon6thane.
A cette solution, on ajoute 82,0 mg de phosphate de potassium
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(KH2PO4). Par l'addition d'hydroxyde de potassium, on porte le pH des solutions réunies à 8. La préparation d'enzyme brute, décrite dans le 1er paragraphe de cet exemple, eat ensuite ajoutée à la solution. La quantité de préparation d'enzyme ajoutée
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correspond approximativement à celle de 70 g de cellules humides.
On incube le- i4l.îr. pendant environ 40 heures à env. 37 .
L'enzyme eat limita inactivée par l'addition de 1,3 litres
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d'acide perchlorlqua à 71. On laieoe reposer le mélange de ré- action pendant 30 minutes à température ambiante, puis élimine par filtras Ion lo précipité de protéines.
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Le filtrat @insi obtenu est passé à travers une colonne de "Dovex 1-X4" (Cl") , qui eot un échangeur d'anions consistant en un copolymère lié on croix do atyrno et do divinyl-benzène. Avant l'uaage, on mélange 20 kg de résine échangeuse d'ion aveo 10 litres d'hydroxyde de sodium 5N, puis lave d'abord par décantation et annuité par filtration à travers un filtre céramique avec 600 litres d'eau distillée, jus- qu'à ce que son pH soit porté à env. 11. La rénine est mélangée aveo 9 litreo d'acide ohlorhydrique et lavée avec 250 litres d'eau, jusqu'à oe que son pH soit porté env, 5.
Elle eot traitée de nouveau avec de l'hydroxyde de sodium 5N, mélangée, comme dé- crit ci-dessus, avec de l'acide chlorhydrique et ensuite avec 10 litres de chlorure d'ammonium 1N, et avec 75 litrea d'eau jusqu'à l'obtention d'un pH d'env. 6. Finalement, on mélange la rénine avec 9 litreo d'acide chlorhydrique, la lave avec 300 litres d'eau distilillée jusqu'à réaction neutre, la met en suspension dans env. 15 litres d'eau distillée, la verse dans un tube de verre (200 cm x 177 cm2), et relavé. Après 1'infusion du filtrat dans la colonne décrite ci-dessus, on élue en utilisant du chlorure d'ammonium aqueux. A 30 minutes d'intervalle, on retire des fractions de 3,5 litres. Chaque fraction est examinée indi- viduellement par l'absorption dans l'ultraviolet.
On obtient lee fractions suivantes:
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Eluant ?rcHcn:i Absorption Rapport Grameu
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<tb> total <SEP> d'absorption
<tb>
<tb> (pH <SEP> 14) <SEP> 280 <SEP> m
<tb>
<tb> 260 <SEP> m
<tb>
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'2'0 p 2E30 mg TDR Il rUDR FU pH 7,4 1 -It z- ¯ - - pH 7,4 111-31 5"CF3 2ît30 0,72 143,0 - PH ",l 7'-<'î := -i" ?766 0.94 81,5 23.0 - pi 7,4 40-19 10S0 2930 1,3 - 58,4 - pU 7,4 0-r¯,5 pli 5,45 o4-e2 ' t?9.1 745 0,91 - 3,8 - pH 5,45 -,'',,t3 r:? 2210 0198 - os, 7 3on pFi 5,45 9C-95 1d10 1730 1,201 - 49,6 12,0 pH 5,45 96-100 935 1480 1,583 - - 24 ,1 18,4 pH 5,45 101--i119 ?C4 1721 2,144 - 10,6 29,1 pil 5,45 1C*-11S ! 1162 306C 2,625 - - 2,5 59,2
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TDR tymlJ1n6 T - th '!:T11 n :":;;JR * ;;, :
'1,5,oj(Y-5..nuoro\lr1d1ne FU 5-fluoro-uraclla Les fractions désignées, dana la table ci-dessus,
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comme fractions 96 - 100 oor,t concentrées a 8icc1t6 k 400 moue vide, Le produit obtrnu ert annuité séché au moyen de .l4thyl-éu;y1,. cétone. On remue le rdeidu aec dans 710 al d'acétone bouillante, puis refroidit la solution pendantenviron 1 heure dans de la gluce et la filtre, afin d'éliminer le chlorure d'ammonium ainsi que
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le 5-fluoro-uracile non-dtoooU5. Apres concentration du filtrat siccité, on obtient un produit ayant un rapport d'absorption 280 au/260 m de 1,092, ce qui correspond à une teneur de 29,5 g
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de 2'¯dé8Oi7-5 fluoro-uridin et de 3,9 g de 5-fluoro-uracile.
Ce produit eat dissous dans 18 ml d'acétate de butyle bouillant.
La solution ainsi obtenue est combinée avec d'autres solutions
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d'acétate de butyle contenant dis mélangea de 2'-d6aoxy-ç- t'luoro-ur1d1:1:1 e. d 5-fluoro¯ur ciln (c"a solutions d'acétate de butylf: sont 00.,",". l' 3prèf la .11é t.hoJ décrite c1-d"'JHUIJ).
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On concentre la solution combinée à siccité et sèche le résidu à 60 @ou@ vide, de aorte qu'on obtient 188,5 g d'une poudre 280 jaune, ayant un rapport E260280 de 1,139, ce qui correspond à une
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teneur de 152,5 g de 2'-.déaozy-fluoro-uridine. Ce produit est mis en suspension dans 200 ml de pyridine, refroidi au bain de glaoe et traité aveo 280 ml d'anhydride acétique. Durant l'addi- tion de l'anhydride acétique, la suspension est refroidie et remuée.
La réaction exothermique provoque la dissolution de la
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2'-déeoxy-5-fluoro-uridine suspendue. On laisse reposer la solu- tion obtenue jusqu'au lendemain à température ambiante; pendant ce temps, un précipité cristallisé se forme. Ce précipité est séparé des eaux-mères par décantation. On triture le produit aveo 60 ml d'éther, filtre, lave avec de l'eau glacée et sèche à environ 60 sous vide. On obtient ainsi 88,0 g de 5-fluoro-
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2'-dénoZY-3'#51-di-0-aodtyl-uridine fondant à 152-153 .
En remuant, on verse les eaux-mères qui reotent après l'élimination de la 5-fluoro-2'-déaoxy-3',5'-di-0-acétyl-uridine dans 2800 ml d'un mélange de glace et d'eau, de aorte qu'on ob- tient une huile qui se oristallise par la suite. On lave lo pro- duit d'abord avec de l'eau glacée, et ensuite aveo de l'éther
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froid, puim sèche à 60 sous vide. Après recristallination dans de l'éthanol, on obtient 87 g de 5-fluoro-2'-déeoxy-3',5'-di-0- aoétyl-uridine soue forme de cristaux blancs. Par une nouvelle cristallisation des eaux-mères aqueuses et alcooliques combinée-:, et en lavant aveo de l'éther, on obtient 12,3 g supplémentaires du composé diacétylé cristallisé.
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La première fraction de 88 g de 5-fluoro-2'-déao)cy- 3',5'-di-0-acétyl-uridine est convertie en 21-dé;loxy-5-fluoro- uridine de la manière OU1VMtOl on mot 88 g du =iriv6 diar6tyle
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en suspension dan asl de méthanol glace, puis ajoute 150 al de solution eatur glacée d'acide chlorhydrique m6thanollque.
On agite la su9 p pendant env. 75 minutee température ambiante et ob'.i:i4 ai une solution claire. Àprèe évaporation de la solution . eiBBB 300 sous vide, on obtient une mousse in- coZare; t.. ,., dana 200 d'éthnnol. ajoutant colore: eell-ci d1eoout dans 200 ml d'éthanol. En ajoutant petit à petit 200 mo d'éther de pétrole, et par grattage et ense- mencement avec de la.é'-désoxy-5-fluoro-uridine pure, on provoque la cristallisation, qu'on laisse ee poursuivre plusieurs heurea.
On eépare le produit cristallise de la solution par filtration, puis le lave d'abord avec un mélange contenant une quantité égale d'éthanol et d'éther de pétrole, et ensuite uniquement avec ce dernier eolvant. Après avoir sèche à 60 sous vide, on obtient 39 g de 2'-désoxy-5-fluoro-uridine fondant à 147-148 . Pour ob- tenir une quantité supplémentaire de 2'-désoxy5-fluoro-uridine cristalline, on laisse repoaer les eaux-mères et les eaux de lavage à température ambiante, et ajoute de l'éther de pétrole.
La quantité totale de 2'-désoxy-5-fluoro-uridine obtenue à partir du dérivé diaoétylé s'élève à 61,83 g, oe qui correspond a 94,1% de la théorie..
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Par eoristallisat1an a a première quantité obtenue, z savoir 39 g de 21-ddaoxy-5-flu uridine, dans 195ú ml d'aa4. tate de butyle, on obtient 29,3 2'-déeoxy-5-fluoro-uridine fondant m 150-151 . Une quantité plmenta1re de cristaux de cette dernière .substance est obt après oonoentration de@ eaux-mères d'ac3tato de butyle.
Exemple 3
Cet exemple est destiné à illustrer l'hydrolyse de la 5-fluoro-2'-déoxy-3'-,5'-di-O-acétyl-uridine avec un alcali.
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Une fraction (correspondant aux fractions 96 à 100 utilisées dans l'exemple 2) contenant un mélange de 2'-déaoxy-5-'
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fluoro-uridine et de 5-fluorc-uracile est diaabtylbe d'après la méthode décrite dans l'exemple 2. On sépare le produit pulvérulent du mélange de réaction, en suivant également la méthode décrite dans l'exemple 2. 1000 g du produit ainsi obtenu sont triturée aveo 1500 ml d'alcool anhydre. A cette bouille, on ajoute en re- muant 2000 ul de solution . 10% de méthoxyde de sodium méthano- lique. Il en résulte une solution claire.
On laisse reposer cette dernière à env. 5' jusqu'au lendemain, puis on porte son pH à 6 en utilisant une solution à 10% d'acide chlorhydrique méthanolique.
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On évapore la solution aioo1t6 et triture enouite le réaidu dur obtenu avec 2 litrea d'acétone chaude. Le mélange est filtré et le gâteau de filtration séché sous vide, broyé et extrait 10 minutes avec 20 litres d'acétone bouillante. Le mélange est filtré a chaud, de sorte qu'où obtient un gâtoau de filtrage de 181,8 g,
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contenant 34 g de 2'-déeoxy-5-fluoro-uridine. On extrait encore une foie avec de l'acétone bouillante. Lee extraits d'acétone de cet échelon sont combinés avec les extraits précédemment obtenue,
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puis les extraits combinée sont concentrée à env. 35 sous vide, jusqu'à l'obtention d'un volume d'env, 1600 ml.
La criotalliaation commence à cette concentration. On obtient une bouillie lourde en ajoutant, lentement et en remuant, 300 ml d'éther de pétrole à la solution concentrée. La bouillie est refroidie et enouit@
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filtrée. On obtient ainsi 452,3 g de 2'-dbeoxy-5-fluoro-uridine orintnllieée relativement pure. En concentrant lac Aaux-màrra encore une foie souci vide, on obtient une quantité Hupplbrmntalra de 182 C de 21-dénoxy-5-fluorc-uridine orlt111!14. Un concnn- trant une nouvelle foin, une quantité supplémentaire de 61 g de la substance ci-dessus peut être obtenue.
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L'ensemble dn3 portions de 21-ddeoxy-5-fluoro-uridine orhtal118e6 obtenues, \ savoir une quantité de 695,3 g, correspond à une rendement de 97,7 de la théorie, calculé sur la quantité dc '-d;ooxy-5-iluoro-urldin présente dans lea 1000 a
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du mélange initial.
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La 5-fluaro-2'-<iéQoxy-3,5'-di-0-acétyl¯uridine de l'in- vontion peut 3û>e transforaée en préparations médicamenteuses contenant la eubetance aot1ve6c-un-vhicule pharmaceutique qui peut Otro C''''o..''11q\11\ ou Inorganique, solide ou liquide, adapté a l'administration per os ou parentérale. Comme véhicule pharma- ceutique, on peut utiliser des aubotancee qui ne réagissent pas avec le co:poa6 nouveau, par exemple l'eau, la gélatine, le lao- tose, l'amidon, le stéarate de magn4e1um, le talc, lea gommes, les polyalcoylneg1yco18, la vaseline, et les lee autres véhicules
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d'usage dans lea préparations médicamenteuses. Ces préparations
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peuvent se préaenter sous forme de comprimés, dragées, aupponi- toires, capeulea ou de solutions, nuapenalons ou émulsionn.
Le cas échéant, les préparations peuvent être 8trl11B4es et/ou
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peuvent contenir dea substances auxiliaire@, par exemple des agents coneervateuro, stabilisants, de mouillage ou d'émulai-
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fication. Ils peuvent également contenir des oela rgulr1"ant la premalon comotique ou des componée-tampon, et titra combiné avec d'autres uubatancèe thérapeutiquement utiles. Ces prépara- tl.ono sont obtenues par leo procédée usuels, illuntr4m ci-npres. f'm.1 %tant donné QU" 11\ r-tmrn-:'-dnmy-7',h'lp. aadtyl..uridine n'ent PAR /tUrrUI...4rf\nnt. Q\"b\e 101'" d'une non-
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nervation prolongée, dans une solution aqueuse, il est avanta-
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geux de lyophiliner les formes d'application prévues pour
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l'injection.
On prépare comme suit des ampoulée ayant la oompo- mition indiquée ci-après:
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5-f luoro-2 ' -désoxy-3 # , 5 ' -diacétyl-uridine 500 mg Hydroxyde de sodium ad pH 8,5 Eau redistillée ad 10 ml
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La 5-fluoro-21-déeoxy-31,51-di-0-acétyl-uridine est mise en eue- pension dans une partie de l'eau redistillie. Le pH eet ensuite porté à environ 7,2 par l'addition lente d'hydroxyde de sodium à 10%. Après l'addition du volume d'eau résiduel, on filtre à travers une bougie de filtration. Le filtrat est mis dans une ampoule de 10 ml, et lyophilisé de manière usuelle. Avant l'utili- eation, on ajoute 10 ml d'eau redistillée au contenu des ampoules.
Exemple
On prépare comme suit des comprimés ayant la composition ci-après:
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5-flucro-21-dénoxy-3lt5l-di-0-acétyl-uridine 250 mg Lactose 100 mg Amidon de maïa 120 mg
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Amidon de mate prégilatinisé 20 mg Talo 7 mg Stéarate de magnésium 3 mg
500 mg
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La 5-f luoro-2 ' -désoxy-3 ' , 5 ' -di-O-aoétyl-urldine , le lactose, l'amidon de maïa et l'amidon de maïa prégélatininé sont mélangée dans un récipient approprié. Le mélange est granulé aveo de l'eau, de aorte qu'on obtient une pâte lourde. La manne humide est passée à travers un tamie, le le granulé humide ré- parti sur un plateau reoouvert de papier. Ensuite, on laisse
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sécher pendant env. 10-12 heures a 43 .
Le granulé 600 est paaaé à travers un tamis, versé dans un mélangeur approprié, puis additionné de etéarate de magnésium. On mélange tous les com-
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posants jusqu'à l'obtention d'une masse uniforme. Après com- pression du granulé, on obtient un comprimé de 500 mg.
Exemple 6
On prépare comme Duit des capsules ayant la composi- tion ci-après !
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5-f luoro-2 ' -déeoxy-3 ' 5 ' -di-O-ace* tyl-urldine 500 mg
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<tb> Lactose <SEP> 75 <SEP> mg
<tb>
<tb>
<tb> Amidon <SEP> de <SEP> maïs <SEP> 75 <SEP> mg
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> Stéarate <SEP> de <SEP> magnésium <SEP> 10 <SEP> mg
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 660 <SEP> mg
<tb>
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La 5-tluoro-2'-déeoxy-3',5di-0-acétyl-uridine, le laotoae, l'amidon de mats et le stéarate de magnésium sont mélangea Intimement dans un mélangeur approprié. Le mélange est vers' dans une capnule de gélatine dure,