<Desc/Clms Page number 1>
Composés de l'acide glycuronique et procédé pour leur préparation.
On sait que l'acide glycuronlque possède de nombreuses propriétés thérapeutiques, Cet acide est normalement présent dans les organes vivants et est utilisé, entre autres, ,par. le foie pour ses synthèses protectives.
Cette invention se propose de promouvoir 1'activité de cet acide dans le sens soit hépato-protectif, soit désintoxicant et hypocholestérolémisant, de façon à assurer un produit applicable efficacement dans la thérapie humaine.
<Desc/Clms Page number 2>
Ce but est atteint d'âpres l'invention par le produit ,' de salification de l'acide glycuronique par une amine choisie du groupe comprenant la bétaïne (N-(CH3)3-CH2COO) et la diéthanolamine (NH-(CH2-(CH2-CH2OH)2), ce produit de salification ayant la formule ' générale:
CHO - (CH-OH)4 - COOR ou R = -N- (CH3)3-CH2COOH ou R = -NH (CH2-CH2OH)2.
Les deux produits de salification ci-dessus seront dénom- més ci-après brièvement glycuronate de bétaïne et glycuronate de diéthanolamine, respectivement.. -
La bétaïne et la diéthanolamine considérées par elles- mêmes, sont utilisées normalement par l'organisme pour la synthèse .des phospholipides, qui représentent la forme dynamique des lipides,\ évitant donc l'accumulation de ces derniers dans le foie¯et le plas- ma du sang. , ..
Les recherches expérimentales effectuées sur les animaux de laboratoire ont cependant démontré que'les propriétés utiles des deux glyçuronates selon l'invention excèdent largement toutes prévi- sions basées sur les propriétés de chaque constituant, comme le mon- trent les tableaux I et II qui suivent.
Le tableau I montre notamment que les substances selon l'invention ont une toxicité aiguë beaucoup plus basse que.les sub- stances de départ (2 à 6 fois moins toxiques). Au tableau II l'on volt, entre'autres, que dans la stéatose expérimentale le glycuronate de diéthanolamine et le glycuronate de bétaïne sont plus actifs que la métnionine comme agents lipotropes,
<Desc/Clms Page number 3>
TABLEAU I LD50 dans la souris blanche par injection Intraveineuse en mg/kg (calcul statistique d'âpres Lichtfield et Wilcoxen)
EMI3.1
<tb>
<tb> COMPOSES <SEP> N <SEP> des <SEP> LD50 <SEP> mg/kg <SEP> Limites <SEP> de <SEP> confiance <SEP> Pente <SEP> de
<tb> animaux <SEP> à <SEP> P <SEP> = <SEP> 0,
05 <SEP> la <SEP> courbe <SEP> ' <SEP>
<tb> Bétaïne <SEP> base <SEP> 20 <SEP> 3500 <SEP> 4720 <SEP> 2590 <SEP> 1,65
<tb> Bétaïne <SEP> glycu- <SEP> 20 <SEP> 5700 <SEP> 6330 <SEP> 5130 <SEP> 1,16
<tb> ronate
<tb> Diéthanolamine <SEP> 20 <SEP> 600 <SEP> 702 <SEP> 512 <SEP> 1,20
<tb> Diéthanolamine <SEP> 20 <SEP> 3600 <SEP> 3920 <SEP> 330 <SEP> 1,13
<tb> glycuronate
<tb> Acide <SEP> glycuroni- <SEP> 20 <SEP> >400 <SEP> - <SEP> - <SEP> que
<tb>
<tb>
<Desc/Clms Page number 4>
s composés examinés.
EMI4.1
6S tel 4l I rat. Actions thérap
EMI4.2
ruz < r.1 Î ' E-'
EMI4.3
'o , O Q) ' ' k t
EMI4.4
a.
EMI4.5
####-;
EMI4.6
<tb> ... <SEP> diète <SEP> con- <SEP> Poids
<tb>
EMI4.7
Dose.. Cholestérol sérique- sérul'1l . Foie graisses: sommée en corps
EMI4.8
<tb> COMPOSES <SEP> mg/kg <SEP> , <SEP> N <SEP> des <SEP> 'total. <SEP> estérif.. <SEP> index <SEP> d'esté- <SEP> . <SEP> poids <SEP> du <SEP> foie <SEP> total <SEP> ' <SEP> moyenne <SEP> par <SEP> ' <SEP> varia
<tb>
EMI4.9
' par 05" animaux : rification - # du poids fi? % du poids, jour - % début . moyen
EMI4.10
<tb> nal <SEP> du <SEP> corps <SEP> ' <SEP> frais.. <SEP> poids <SEP> du <SEP> corps <SEP> au <SEP> .2( <SEP>
<tb> jour
<tb>
EMI4.11
Bétalne . ,600: 8 87,7: 66,0 ' 75,8 5,8 ' 3J!5 165 : - I glycuronate : : :
Diéthanola- 300 8 70,1 : 47,0 : 67,0 5,2 .: 3,70 4,3 : 155 : - Il
EMI4.12
<tb> mine <SEP> glycu- <SEP>
<tb> ronate <SEP> : <SEP> : <SEP> .: <SEP> :
<tb>
EMI4.13
Méthionine 600 10 78,5 : 55,4 :. 70,q : 5,0 6,42 4,1 :,,206: - 3L Contrôles - 10 : 72,0 : 52,0 : 71,0 : 3,4 9,49 3,9 317 : - 2
EMI4.14
<tb> à <SEP> diète <SEP> de
<tb> Handler
<tb>
EMI4.15
Contrôles - 8 45,1 : 41,3 : 88,0 4,2 2,59 : 234 : -. a diète -., > .. ; "¯
EMI4.16
<tb> normale. <SEP> : <SEP> , <SEP> : <SEP> - <SEP> : <SEP> : <SEP> - <SEP> :
<tb>
<tb>
<Desc/Clms Page number 5>
Les glycuronates selon l'invention sont préparés en faisant réagir, à chaud et dans un milieu liquide, du glycuronlac- @ tone avec l'aminé correspondante.
Le glyeuronlactone est dissous dans l'eau ou l'alcool éthylique, préférablement, et chauffé' préalablement à la température de réaction ; il en est de même de l'amine, âpres quoi les deux constituants sont amenés au contact l'un de l'autre en déversant la solution aminique à une vitesse contrôlée dans la solution glycuronlactonique, en remuant continuel- lement et contrôlant la température.
D'autres détails du procédé de préparation et quelques caractéristiques chimico-physiques des glycuronates selon l'inven- tion ressortiront des deux exemples qui suivent.
EXEMPLE I. -
Dans un ballon en pyrex à 15 litres à 3 cols latéraux, muni d'un agitateur, thermomètre plongeur, entonnoir à robinet, l'on introduit 1400 g de glycuronlactone en cristaux et 5500 ce d'eau distillée.
On prépare séparément.une solution de diéthanolamine birectifiée 770 g dans 3000 ce d'eau distillée.
On chauffe au bain-marié jusqu'à dissolution complète du glycuronlactone ; la température ne doit excéder 65 C. On com- mence alors le dégouttement de la solution de diéthanolamine, en ayant soin d'interrompre chaque fois que le pH devient 6 1/2 à 6 3/4; on recommence dès que le pH est devenu 6 environ. La température doit osciller autour de 65 et ne pas excéder 70 pendant toute la durée de l'opération, le temps nécessaire est de 6 heures environ
La couleur paille du sel se formant devient évidente, la couleur devenant toujours plus intense ; versla fin il y a lieu de ralentir l'addition de diéthanolamine, afin de ne pas excéder le pH = 6 3/4 environ. On laisse refroidir, ensuite on filtre la solution par du charbon actif sur Büchner.
<Desc/Clms Page number 6>
On obtient une solution couleur paille, claire, réfractan te, dont le poids total est de 10,670 g environ.
On met dans un Claisen à 10 litres en deux reprises et l'on concentre dans le vide au bain-marié et à une température . n'excédant pas 45 C. ar Y, ,
Le Claisen doit être pesé au préalable, la concentration,' ' étant interrompue dès que l'on atteint un poids net de 4360 g.
La solution obtenue est à 50 % en poids de glycuronate de diéthanolamine, référé au poids de la diéthanolamine utilisée, qui est légèrement au-dessous du théorique, pour éviter précisément que le pH final puisse excéder 6.
On filtre à nouveau par du charbon actif, la solution !'(résultante étant jaune, claire et réfractante.
Si la solution doit être utilisée pour la préparation de comprimés, la concentration peut être poussée jusqu'à 35 % en poids, Le glycuronate de diéthanolamine a un poids moléculaire de 299,35 et.est sous la forme d'une masse visqueuse couleur jaune paille,,qu'il est impossible d'amener à la forme de cristaux.
Composition.centésimale :
EMI6.1
<tb>
<tb> C <SEP> % <SEP> = <SEP> 40,3 <SEP> %
<tb> H <SEP> % <SEP> = <SEP> 7,02 <SEP> %
<tb> O <SEP> % <SEP> = <SEP> 48 <SEP> %
<tb> N <SEP> % <SEP> = <SEP> 4,68 <SEP> %
<tb>
Dans un ballon en pyrex à 15 litres à trois cols latéraux, muni d'un agitateur, réfrigérant à reflux, thermomètre, entonnoir à robinet, bain-marie l'on introduit 7500 ce d'alcooléthyliqueà 95 et 1000 g de glycuronlactons ; on chauffe au bain-marie jusqu'à une température de 78 environ (ébullition). Le glycuronlactone est dis- sous aux 9/10. On prépare séparément la solution alcoolique de 665 g de bétalne de base et 4500 ce d'alcool éthylique pur à 95 %, chauf- fé préalablement à 70 - 75 C environ.
<Desc/Clms Page number 7>
On amène rapidement la solution alcoolique de bétaïne par l'entonnoir à robinet en 5 minutes environ, en remuant sans cesse.
L'ensemble passe en solution, une faible réaction exothermique se produit an même-temps. On continue à remuer et à chauffer au-reflux jusqu'à l'obtention d'une solution claire et complète.
Des cristaux blancs caractéristiques se forment parfois si la température est au-dessous de 75 0. De toute façon l'on attend que la solution soit complète.
Durée globale : 1 heure à 1---heure 15 minutes environ.
Chauffage des deux solutions : 30 à 45 minutes environ.
On filtre, au moyen d'un filtre BUchner et d'un vase col- lecteur chauffés, rapidement, au moyen de charbon, et l'on introduit la solution claire incolore dans un cristallisateur en l'y laissant pendant une nuit. Le matin suivant on filtre les cristaux blancs, assez durs et compacts ; onpresse sur un filtre, on lave avec un peu d'alcool, on sèche à 1 étuve à 65 (poids constant). On obtient
1200 à 1250 g. de glycuronate de.bétalne en cristaux blancs, sem- blables à ceux du sucre, assez durs, solubles dans l'alcool bouil- lant, très solubles dans l'eau à pH neutre. La solution aqueuse s'hydrolise lentement à froid, plus rapidement à chaud, le pH des- cendant au-dessous de 3.
On effectue la récupération de l'alcool au bain-marie sous un faible vide, en vue de maintenir une température autour de 40 -50 dans le bain. Autrement le produit resté en solution subit une al- tération, et l'alcool sent la triméthylamine et ne peut être réutili- sé pour la préparation successive.
Le glycuronate de bétaïne a un poids moléculaire de 203,272 et un point de fusion de 152 - 153 C. Sa composition centésimale est la suivante :
EMI7.1
<tb>
<tb> C <SEP> % <SEP> = <SEP> 45,0 <SEP> %
<tb> H <SEP> % <SEP> = <SEP> 6,479 <SEP> % <SEP>
<tb> 0 <SEP> % <SEP> = <SEP> 43,65 <SEP> % <SEP> '
<tb> N <SEP> % <SEP> = <SEP> 4,77 <SEP> %
<tb>
<Desc/Clms Page number 8>
Le glycuronate est sous la forme d'une poudre blanche, fine, très hygroscopique.
Il est évidente à l'expert de la description qui précède, que les glycuronates selon l'invention se prêtent à la formulation de préparations médicinales liquides, en comprimés ou en poudre, selon les exigences, et que la formulation comporte principalement l'utilisation d'un excipient ou solvant approprié. Le glycuronate de diéthanolamine obtenu d'après l'exemple I peut être malaxé avec de l'amidon, par exemple, et réduit en comprimés, ou bien dilué avec de l'eau distillée et conditionné en fioles.
Quant au glycu- ; ronate de bétalne, l'expérience dérivant de l'exemple 2 conseille la préparation et la'conservation à l'état cristallin ou de poudre; des préparations en solution peuvent cependant être obtenues facile- ment grâce à la solubilité élevée à l'eau du glycuronate de bétaYne.
Il est donc entendu que l'invention vise des compositions thérapeutiques liquides, en poudre ou en comprimés contenant les glycuronates décrits ci-dessus.