CH291374A - Procédé de préparation d'une composition thérapeutique stable et limpide, à action antibiotique. - Google Patents

Description

  Procédé de préparation d'une composition     thérapeutique    stable et     limpide,    à action     antibiotique.       Le     ehloramphénicol    est. un antibiotique       plue    l'on peut obtenir par     synthèse    chimique  ou par culture de Streptomyces v     enezuelae     sur un milieu nutritif ou au sein de ce milieu  dans des conditions aérobies.

   Chimiquement,  c'est le     (1)-trans-1-p-nitrophényl-?-dichloro-          acétaniido-propane-1,3-diol,    dont' la formule  développée est  
EMI0001.0010     
    Ce composé porte également d'autres noms  chimiques tels que     D-(-)-thréo        2-dichloracét-          amido-1-p-nitrophényl-1,3-propanediol    et D  thréo-N-     (1,1'-dihydroxy-1-p-nitrophényl-iso-          propyl)        dichloroacétamide.     



  Le     ehloramphénicol    et son dérivé racémi  que optique     (dl)-trans    sont d'une grande va  leur pour le traitement de nombreuses infec  tions et de nombreuses maladies qui, avant  qu'ils ne fussent connus, étaient fatales     etiou     s'accompagnaient d'un état maladif prolongé  et persistant.

   Parmi ces infections et maladies,  on     petit    citer la fièvre typhoïde, la fièvre de  Malte, la fièvre tachetée des     1\lontagnes    Ro  cheuses, le typhus, le pian, la.     pneiunonie,    la  coqueluche, la brucellose, les infections uri  naires, la gonorrhée, certains types de syphi  lis,     etc.    On traite ces maladies généralement    à la dose de 1 à. 3 g de     chloramphénicol    par  voie     bucale,    par jour, les quantités étant ordi  nairement un peu plus grandes quand on uti  lise le dérivé racémique optique. Dans de  nombreux cas, l'administration par voie     bucale     de ces produits est impossible en raison de  l'âge ou de l'état du patient.

   Dans ces cas-là  et de nombreux antres, le mode préféré d'ad  ministration est la voie parentérale et en par  ticulier la voie     intraveineuse.        Malheureuse-          ment,        l'insolubilité    virtuelle dans     l'huile    et  dans l'eau du     chloramphénicol    et du     chlor-          amphénicol    racémique optique ne permet pas  d'utiliser cette autre méthode d'administra  tion, de telle sorte que quantité de malades  ont été privés, avant la présente invention, des  effets     thérapeutiques    de ces antibiotiques in  téressants.  



  La présente invention a pour but de pro  duire des solutions limpides contenant une  forte concentration de     chloramphénicol    ou de  son racémique optique convenant à l'adminis  tration intraveineuse ou par voie parentérale,  solutions qui sont physiquement et chimique  ment stables et desquelles le     chloramphénicol     ou son racémique optique ne se séparent pas,  même après un stockage prolongé.  



  La présente invention concerne un procédé  de préparation d'une composition thérapeu  tique stable et limpide, à action antibiotique,  ainsi que la composition thérapeutique obte  nue par ce procédé.      Le procédé selon l'invention est caracté  risé en ce que l'on prépare, par voie chimique,  l'isomère optique lévogyre     011    racémique du       trans-1-p-nitrophényl-2-dichloroa.cétamido-pro-          pane-1,3-diol,    et en ce que l'on dissout. ce  corps dans un solvant.

   comprenant au     moins          30        %        en        volume        d'une        amide        soluble        dans        l'eau,     de formule:  
EMI0002.0014     
    dans laquelle R et     Rl    sont, de l'hydrogène ou  un radical alcoyle contenant au plus deux  atomes de carbone, et     R@    est. un radical alcoyle  contenant au plus deux -atomes de carbone.  



  En solution diluée, c'est-à-dire en solution  dans laquelle le solvant n'est pas uniquement.  composé d'amide soluble dans l'eau, le reste  du solvant est formé d'eau pouvant contenir,  si on le veut, du chlorure de sodium, du sac  charose, du glucose, etc.  



  La composition obtenue par le procédé  selon la présente invention est stable chimi  quement, c'est-à-dire qu'elle conserve son titre  de     chloramphénicol    après stockage     prolonmé     et que les amides solubles     dans    l'eau ne subis  sent pas de modification chimique.

   Ces solu  tions sont. également stables     physiquement.    et  ne déposent. pas des cristaux de     chloramphé-          nicol    par stockage ou par dilution au moyen  de solvants aqueux tels que l'eau, une solu  tion de     NaCl,    une     solution        isotonique    de glu  cose ou par adjonction de plasma, même si la  solution d'amide diluée contient une concen  tration en     chloramphénicol    ou son racémique  optique supérieure à celle que l'on peut, obtenir  dans une solution aqueuse par ailleurs iden  tique, mais ne contenant pas d'amide soluble  dans l'eau.

   Cette stabilité à la dilution est  extrêmement importante en thérapeutique  intraveineuse en ce qu'elle évite le danger de  la formation de cristaux d'antibiotique dans  le courant sanguin quand on utilise les prépa  rations non     diluées.    Elle est. également impor  tante en ce qu'elle permet de fournir le     chlor-          amphénicol    ou son racémique optique sous une    forme concentrée susceptible d'être diluée au  cas où le médecin désire administrer la drogue  par     vénoclyse.     



  La composition selon la présente inven  tion, comme d'ailleurs le     chloramphénicol        lui-          même    et son racémique optique, est. relative  ment non toxique. C'est. ainsi qu'une solution  contenant 25% en poids de     ehloramphénieol     dans un solvant composé de parties égales  d'eau et de     N,N-diméthyl-aeétamide    est. utili  sable jusqu'à. la dose     maximum    tolérable par  voie intraveineuse chez le rat, albinos de  0,767     cm-ikg,    la dose léthale LD50 étant de  1,109     cmslkg.    Une solution de même compo  sition, administrée pendant six jours par voie  intraveineuse à la.

   dose de     4-        cm3    par jour à  des     malades    atteints du pian, n'a provoqué  chez aucun des patients de manifestations  toxiques à la, fin des six jours.  



  La concentration de l'antibiotique que l'on  peut obtenir dans la composition selon la pré  sente invention varie avec l'amide utilisée et  la quantité d'eau éventuellement présente  dans la préparation. Toutefois, même quand  on utilise une amide à pouvoir de dissolution  très faible pour le     chloramphénicol    (ou son  racémique) et une solution contenant de 65 à       70%        d'eau,

          on        peut        préparer        des        solutions          contenant        au        moins        1.0%        en        poids        d'anti-          biotique.    On a trouvé à ce sujet cl-Lie les  amides tertiaires, c'est-à-dire celles dans les  quelles Ri est.

   un radical alcoyle, permettent  de préparer des     solutions    plus concentrées de       chloramphénieol    (ou de son racémique) que  ne le font les amides secondaires correspon  dantes dans lesquelles     Rl    est. de l'hydrogène;  les amides tertiaires sont donc préférées pour  l'utilisation dans le procédé selon l'invention.

    Quand on utilise des amides     tertiaires    sous  forme anhydre, on peut. préparer des solu  tions contenant. environ 50 à     651/o    en poids  de     ehloramphénieol.    Les concentrations rela  tives en     chloramphénicol    que l'on peut obtenir  avec certaines des amides solubles dans l'eau  définies ci-dessus et avec diverses propor  tions d'eau sont indiquées dans le tableau  suivant:

      
EMI0003.0001     
  
    Milligrammes <SEP> de <SEP> chloramphénicol <SEP> pouvant <SEP> être
<tb>  en <SEP> vo <SEP> ume <SEP> dissous <SEP> dans <SEP> 1 <SEP> cm3 <SEP> de <SEP> solution <SEP> d'amide
<tb>  de <SEP> l'amide
<tb>  présente <SEP> das <SEP> p <SEP> II <SEP> II <SEP> 0 <SEP> II <SEP> 0 <SEP> II <SEP> 0 <SEP> II <SEP> 0 <SEP> 0
<tb>  le <SEP> <U>solvant*</U> <SEP> <B>il</B>
<tb>  HC-N(QH3)2 <SEP> CH3Q-NHCH3 <SEP> CH,C-N(CHg)2 <SEP> QH3Q-NH-C2HS <SEP> CH@C-N(CZHb)2 <SEP> CH@CHZC-N(CH3)2
<tb>  5 <SEP> Amide <SEP> pure
<tb>  100 0 <SEP> 1333 <SEP> 1000 <SEP> 1333 <SEP> 800 <SEP> 870 <SEP> 1000
<tb>  <B>85-/,,</B> <SEP> 670 <SEP> 600
<tb>  <B>75-/,,

  </B> <SEP> 1000 <SEP> 560 <SEP> 1000 <SEP> 600
<tb>  <B>67%</B> <SEP> 420
<tb>  <B>60%</B> <SEP> 800 <SEP> 800 <SEP> 330 <SEP> 540
<tb>  <B>500/0</B> <SEP> 500 <SEP> 500 <SEP> 182 <SEP> 440 <SEP> 500
<tb>  400/0 <SEP> 275 <SEP> 280 <SEP> 250
<tb>  Eau <SEP> pure
<tb>  0% <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 3
<tb>  * <SEP> Le <SEP> complément <SEP> pour <SEP> atteindre <SEP> 100 <SEP> % <SEP> est <SEP> constitué <SEP> par <SEP> de <SEP> Peau <SEP> distillée.

         La présente invention est illustrée par les  exemples suivants    <I>Exemple 2:</I>  Un mélange de     144    g de maltose, 72 g de   solubles de distillation  (fraction hydro  soluble du résidu de distillation de l'alcool  d'un bouillon de fermentation), 72 g     d'hydro-          lysat    de caséine, 72 g de chlorure de sodium  et de suffisamment d'eau du robinet pour  amener le volume à 14,4 litres est ajusté à  un pH de 7,5-7,7 avec une solution  d'hydroxyde de sodium 10 N, et réparti à rai  son de 300     em3    dans 48 flacons     d'Erlen-          meyer    à large col de 1 litre.

   Les flacons sont  bouchés avec deux     couches    de disques fil  trants de gaze et de coton, et les bouchons  sont. fixés avec des pinces à ressort. Les fla  cons sont placés dans un autoclave et stéri  lisés à 121  C pendant 20 minutes. Après re  froidissement, on ouvre les     flacons    et on les  ensemence avec 5     cm3    par flacon d'une cul  ture en flacon secouée de trois jours de   Streptomyces     venezuelae .    Les flacons inocu  lés sont bouchés et incubés ensuite pendant  trois jours à     2224     C, placés sur une machine  à secouer du type rotatif (150     t/min.,    rayon       ciu    cercle 5 cm).  



  On acidifie 12     litres    de culture (pH 7,39),  qui contiennent un total de 600 mg de l'anti  biotique recherché, avec 190     cm3    d'acide    chlorhydrique 3 N, à un pu de 2. On ajoute  304 g de silicate d'aluminium absorbant et on       brasse    la suspension pendant 30 à 60 minutes.  On ajoute encore 304 g de l'adsorbant et on  filtre le mélange sur une couche de 50 g de  silicate d'aluminium. On lave le précipité  avec 1212     cm3    d'eau distillée et on l'élimine.  On réunit le filtrat et les portions de lavage  et on les traite en brassant pendant 10 mi  nutes avec un quart de volume d'acétate  d'éthyle. On recueille la couche d'acétate  d'éthyle et on répète l'extraction.

   On élimine  la couche aqueuse et on sèche les extraits  d'acétate d'éthyle réunis sur 50 g de sulfate  de sodium anhydre à 5  C.  



  On élimine le sulfate de sodium par filtra  tion et on distille l'acétate d'éthyle sous vide  à une température du bain de     30     C. On  traite le résidu brun avec de petites portions  d'éther     diéthylique,    au total 300     cm3.    L'extrait  éthéré contient 504 mg de l'antibiotique, soit  les     841/o    de l'antibiotique présent dans la cul  ture.  



  On     divise    l'extrait éthéré en trois portions,  et on verse chacune d'elles dans une colonne  (16,5 X 1,9 cm) de 15 g     d'oxyde    d'aluminium  qui a été ajustée au préalable au pH 4,7 avec  de l'acide     chlorhydrique.    Dans chaque colonne,  on fait passer 120     cm3    d'éther     diéthylique,     par portions de 20     cm3.    On change les réci  pients récepteurs sous chaque colonne pour      obtenir au total cinq fractions dans chaque  colonne. Les premières fractions réunies con  tiennent     -118    mg de l'antibiotique, les secondes  65 mg et les fractions restantes 17 mg.  



  On réunit les premières et les secondes  fractions des colonnes et on distille l'éther  sous vide. On traite le résidu brun plusieurs  fois avec de l'eau distillée, en utilisant au  total     6\35        cm3.    On secoue les extraits aqueux       réunis    avec un demi-volume d'éther de pétrole  et on répète l'extraction encore une fois. On  élimine les extraits à l'éther de pétrole et on  concentre la phase aqueuse sous     vide    à. une  température du bain de 30  C jusqu'au point.

    de cristallisation (environ 20     em3).    On refroi  dit la solution à 5  C pendant une nuit, on  recueille les     erista.ux,    on les lave avec une pe  tite     quantité    d'eau froide et on les sèche sous  vide sur du chlorure de calcium. Point de fusion  après     purification    par recristallisation: 150 à  151  C. L'antibiotique ainsi obtenu est. le       chloramphénicol    ou     (1)-trans-1-p-nitrophényl-          2-dichloroacétaniido-propane-l,3-diol.     



  On ajoute 25 g de ce     chloramphénieol    à  80     cms    d'un solvant constitué par un mélange  de volumes égaux de     N,N-diméthylacétamide     et d'eau distillée, à la température ambiante,  et on agite le mélange ou on le secoue jus  qu'à ce que la     dissolution    soit complète. On  stérilise la solution par filtration sur de la  porcelaine ou une pierre filtrante poreuse et  on en remplit des ampoules. Chaque centi  mètre cube de la solution ainsi obtenue con  tient 25% en poids, soit. 250 mg de     chlor-          amphénicol.    Cette solution est chimiquement  et physiquement stable pendant longtemps.

    Par dilution au moyen d'eau, d'une solution  normale de     NaCI,    d'une solution isotonique  de glucose ou de plasma, il ne se forme pas  de troubles ou de cristaux. Elle est relative  ment non toxique et peut être administrée  sans danger par voie intraveineuse à. l'homme  pendant. au     moins    six jours, à des doses attei  gnant 2     cm3    par jour.

           Exemple        N:     On chauffe sur un bain à vapeur, pendant  une heure et demie, un mélange composé de    0,35 g de     (dl)-trans-1-p-nitroliliényl-2-amino-          propane-l,3-diol    et de     \?,5        eni3    de     dichlor-          acétate    de     méthyIe.    On extrait le     mélangre    ob  tenu trois fois avec 15     em3        d'éther    de pétrole  et on cristallise le résidu deux fois dans un  mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pé  trole.

   Par recristallisation dans de l'eau, on  obtient finalement le     (dl)-trans-1-p-nitro-          phényl-2-diehloroacétamido-propane-l,3-cliol          (chlorainphénicol    racémique) recherché sous  forme pure; point. de fusion: 150  5-151  5 C.  



  Pour obtenir le (dl)     -t.rans-1-p-nitrophényl-          2-amiiiopropaiie-l,â-diol    de départ, on peut,  par exemple,     procéder    de la     faeon    suivante:  On condense de la     benzaldéhyde    avec du     fi-          nitroéthanol    pour obtenir le     1-phényl-2-nitro-          propane-1,3-diol.    Ce dernier est ensuite réduit       catalytiquement    en     1-pliényi-2-aniinopropane-          1,

  3-diol    et on sépare la forme     cis    de la forme       trans    par cristallisation fractionnée clans le  chloroforme par exemple. On     convertit    ensuite  le     trans-1-pliényl-2-aniinopropane-1,3-diol    en  un     aminodiol    correspondant.     complètement          acylé        (par        exemple        acéty    lé) et. on soumet le  dérivé     O,O,N-triaeylé    à.

   une nitration du  noyau     phény    ligue à l'aide d'acide nitrique  concentré ou fumant ou à l'aide d'un mélange  de     HN03    et     1I-SO.i    concentrés, le groupe  nitro se fixant dans la position para du     noyau          phénylique.    Ensuite, on soumet. le     dérivé     nitré à une     hydrolyse    complète de ces groupes  acyle pour obtenir le     trans-1-p-nitrophényl-2-          aminopropane-1,3-diol    racémique servant de  corps de départ.  



  On ajoute 10 g du     chloramphénieol    racé  mique obtenu comme décrit ci-dessus à. 32     em3     d'un solvant formé d'un mélange de volumes  égaux de     N,N-dimétliylacétainide    et d'eau dis  tillée, à. la     température    ordinaire. On secoue  le mélange jusqu'à. ce que la dissolution soit  complète et on le stérilise par filtration sur  un filtre en pierre poreuse. La solution ainsi  obtenue contient     251/o    en poids de     chloram-          phénicol    racémique (270     nlg/cni3)    et convient  à. l'administration à, l'homme par voie intra  veineuse.

   La solution reste     parfaitement.    lim  pide si on la dilue au moyen d'eau, d'une so  lution normale de     NaCI    ou d'une solution      isotonique de glucose. La préparation non di  luée est à la fois chimiquement et physique  ment stable pendant longtemps.  



       Exemple   <I>3:</I>  On prépare du     chloramphénicol    de la faon  décrite dans l'exemple 1 et on ajoute 26,6 g  de ce     chloramphénicol    à 20     cm3    de     N,N-di-          méthylacétamide    et on secoue le mélange jus  qu'à ce que la dissolution soit complète. La  solution ainsi obtenue, après stérilisation par  filtration sur un filtre en pierre poreuse, con  vient à l'administration par voie intraveineuse  ou à l'emploi pour préparer dans ce but des  solutions plus diluées. La solution est stable  sous sa forme non diluée et aussi sous sa  forme diluée à l'aide d'eau, d'une solution nor  male de     NaCI,    etc.

   Elle contient. environ  645 mg de     ehloramphénicol    par     em3.     



  <I>Exemple 4:</I>  On chauffe à, 100 C, pendant une heure  et demie, un mélange de 1,5 g de la base libre  du     (1)-trans-1-p-nitrophényl-2-aminopropane-          1,3-diol    (p. d. f. = 157  C) et de 1,5 g de     di-          chloracétate    de méthyle. Le mélange est en  suite refroidi et traité avec 25     cm3    d'éther de  pétrole. On recueille la partie du résidu qui  demeure insoluble, on la lave avec deux autres  portions d'éther de pétrole de 10     em3    cha  cune, puis on la sèche.

   Le produit ainsi obtenu  est le     (1)-trans-1-p-nitrophényl-2-dichloroacét-          amido-propane-1,3-diol    ou     chloramphénicol.    Le  produit de départ peut être obtenu comme  décrit dans l'exemple 2, après avoir dédoublé  le     trans-1-phényl-2-amino-propane-1,3-diol    en  ses isomères optiques selon un procédé de dé  doublement connu, et en utilisant l'isomère  lévogyre pour la suite de la synthèse.  



  On ajoute 10 g du     chloramphénicol    ainsi  obtenu à 22     cm3    d'un solvant formé d'un mé  lange de trois volumes de     N,N-diméthylform-          amide    et un volume de solution saline     isotoni-          que.    On secoue le mélange jusqu'à ce que la  dissolution soit complète, on le stérilise par  filtration sur un filtre en pierre poreuse et  on en emplit des ampoules.

   La solution ainsi    obtenue contient 93-Y     /o    en poids, soit  333     mg/cms    de     chloramphénicol.    Elle convient  pour l'administration par voie     intraveineuse     et possède les mêmes propriétés que les solu  tions des exemples précédents.  



  <I>Exemple 5:</I>  On ajoute 16 g de     p-nitro-a-dichloroacét-          amido-,B-hydroxypropiophénone    à 10 g     d'iso-          propylate    d'aluminium dans 250     cms        d'isopro-          panol    sec et on traite le mélange à reflux pen  dant six heures. Pendant cette période de  chauffage, on fait passer un courant d'azote  dans la solution et une petite quantité du mé  lange réactionnel s'élimine continuellement  par distillation. On élimine     l'isopropanol    par  distillation dans le vide, on traite le résidu  avec 250     cm3    d'eau et on chauffe le mélange  à ébullition.

   On élimine l'hydroxyde d'alumi  nium par filtration et on évapore le filtrat à  siccité dans le vide. On lave le résidu avec  plusieurs petites portions d'acétate d'éthyle, et  le solide cristallin contenant le     (dl)-trans-1-p-          nitrophényl-    2 -     dichloroacétamido-propane-1,3-          diol    qui ne se dissout pas est recueilli puis  recristallisé dans l'eau pour obtenir l'isomère       (dl)-trans    (ou     dl-U)    sous forme pure; point  de fusion: 150  5-151  5 C.  



  On ajoute 10 g du     chloramphénicol    racé  mique ainsi obtenu à 35     cm3    d'un mélange  solvant formé de vol-Lunes égaux de     N,N-di-          éthylacétamide    et d'eau     distillée.    On secoue le  mélange jusqu'à ce que la     dissolution    soit com  plète, puis on ajoute 1 g de-glucose. On secoue  le mélange jusqu'à ce que le glucose soit dis  sous, puis on complète le volume à 50     cm3     par addition du mélange solvant de l'amide.  On stérilise la solution limpide par filtration  sur de la porcelaine et on en remplit des am  poules. La solution ainsi obtenue convient à  l'administration par voie intraveineuse.

   Elle       contient        20        %        en        poids,        soit        200        mg/cms        de          chloramphénicol    racémique et est à la fois  physiquement et chimiquement stable. Elle  peut être diluée au moyen d'une quantité  quelconque d'eau sans que le     chloramphénicol     se sépare de la solution. .

        <I>Exemple 6:</I>  On prépare du     chloramphénicol    comme dé  crit dans l'exemple 4 et on ajoute 10 g de ce       chloramphénicol    à 32     cm3        d'un    solvant formé  d'un mélange de volume égaux de     N,N-dimé-          thyl-propionamide    et d'eau distillée et on se  coue le mélange ainsi obtenu à la température  ambiante jusqu'à ce que la dissolution soit  complète. On stérilise la     solution    par filtration  sur un filtre en pierre poreuse et on en emplit  des ampoules.

   Cette solution convient à l'ad  ministration par voie intraveineuse et     con-          tient        25        %        en        poids,        soit        250        nig/em3        de        chlor-          amphénicol.    Le     chloramphénicol    présent dans  la solution ne se sépare pas par cristallisation  par repos ou dilution au moyen d'eau, d'une  solution normale de     NaCl,    de plasma ou d'une  solution isotonique de glucose.

Claims (1)

1. REVENDICATION I: Procédé de préparation d'une composition thérapeutique stable et limpide, à action anti biotique, caractérisé en ce qûe l'on prépare, par voie chimique, l'isomère optique lévogy re ou racémique du trans-1-p-nitrophényl-2-di- ehloroaeétamido-propane-1,3-diol,

   et en ce que l'on dissout ce corps dans un solvant compre- nant au moins 30 % en volume d'une amide soluble dans l'eau, clé formule: EMI0006.0039 dans laquelle R et R.i sont clé l'hydrogène ou un radical alcoyle contenant au plus deux atomes de carbone, et RI, est un radical alcoyle contenant au plus deux atomes de carbone.

   SOUS-REVEN DICATIONS 1. Procédé selon la revendication I, carae- térisé en ce que, pour préparer l'isomère opti que lévogy re du trans-1-p-nitrophéiiyl-?-di- chloroacétamido-propane-1,3-diol, on fait une culture du microorganisme Streptomyces vene- zuelae, en aérobiose, sur un milieu nutritif et on isole l'antibiotique formé de ce milieu. 2.

   Procédé selon la revendication I, carac térisé en ce que ledit solvant est. constitué par une amide anhydre soluble dans l'eau, de la dite formule. 3. Procédé selon la revendication I, earac- térisé en ce que ladite amide soluble dans l'eau est une amide tertiaire. 4. Procédé selon la revendication I, carac térisé en ce que ladite amide soluble dans l'eau est la N,N-diméthylacétamide. 5. Procédé selon la revendication I, carac térisé en ce que ladite amide soluble dans l'eau est. la N,N-diniétlivlfoi-nianiide. REVENDICATION II: Composition thérapeutique obtenue par le procédé selon la revendication I.