CZ291386B6

CZ291386B6 - Chinazolinové deriváty jako inhibitory VEGF, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Info

Publication number: CZ291386B6
Application number: CZ19982535A
Authority: CZ
Inventors: Andrew Peter Thomas; Craig Johnstone; Laurent François André Hennequin
Original assignee: Zeneca Limited; Zeneca-Pharma Sa
Priority date: 1996-02-13
Filing date: 1997-02-10
Publication date: 2003-02-12
Also published as: EP0880508B1; HUP9901155A2; HUP9901155A3; NZ330868A; SI0880508T1; DE69720965D1; AU719434B2; DK0880508T3; JP2009013181A; NO983687L; PT880508E; PL328310A1; CN1211239A; SK285141B6; TR199801530T2; JP2000504714A; JP4471404B2; KR19990082463A; IL125686A0; BR9707495A

Abstract

Řešení se týká chinazolinového derivátu obecného vzorce I, kde Z znamená -O-, -NH- nebo S, m znamená celé číslo 1 až 5, R.sup.1.n. znamená vodík, hydroxyskupinu, nebo alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; R.sup.2.n. je vodík, R.sup.3.n. je hydroxyskupina, halogen, alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, alkanoyloxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, trifluormethylová skupina nebo kyanoskupina; X.sup.1.n. znamená -O-, -CH.sub.2.n.-, -NR.sup.7.n.- nebo -NR.sup.8.n.CO; (kde R.sup.7.n. a R.sup.8.n. každý znamená vodík); R.sup.4.n. znamená skupinu, kterou je alkenylová, alkinylová nebo případně substituovaná alkylová skupina, kde alkylová skupina může případně obsahovat skupinu vázající heteroatomy, kde alkenylová, alkinylová nebo alkylová skupina může nést terminální, případně substituovanou 5 nebo 6člennou heterocyklickou skupinu a jejich solí, způsobu jejich přípravy, farmaceutických prostředků, které obsahují chinazolinový derivát obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli jako aktivní složku. Chinazolinové sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli inhibují účinky VEGF, což je cenná vlastnost při léčbě řady chorobných stavů, včetně rakoviny a revmatické artritidy.ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká chinazolinových derivátů, způsobů jejich přípravy, farmaceutických prostředků, které je obsahují jako aktivní složku, způsoby léčení nemocných stavů spojených s angiogenezí a/nebo zvýšenou vaskulámí permeabilitou, jejich použití jako léčiv ajejich použití k přípravě 10 léčiv pro použití pro vyvolání účinků snižujících antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeabilitu u teplokrevných živočichů, jako je člověk.

Dosavadní stav techniky

Normální angiogeneze má důležitou úlohu v řadě procesů, včetně vývoje zárodku, hojení ran a několika součástí samičí reprodukční funkce. Nežádoucí nebo patologická angiogeneze je spojována s nemocnými stavy, jako je diabetické retinopatie, psoriáza, rakovina, revmatická artritida, atherom, Kaposiho sarkom, hemangion (Fan a kol., 1995, Trends Pharmacol. Sci. 16:57 20 až 66; Folkman, 1995, Nátuře Medicine 1: 27-31). Má se za to, že změna vaskulámí permeability má význam v normálních i patologických fyziologických postupech (Cullinan-Bove a kol., 1993, Endocrinology 133: 829-837; Senger a kol. 1993, Cancer and Metastasis Reviews, 12: 303-324). Byly identifikovány některé polypeptidy s účinností podporující in vitro endotheliální buněčný růst, včetně kyselých a bazických fibroblastových růstových faktorů (aFGF & bFGF) a vaskulár25 ního endotheliálního růstového faktoru (VEGF). Cestou omezené exprese jejich receptorů, aktivita růstového faktoru VEGF, na rozdíl od aktivity FGF je relativně specifická vůči endotheliálním buňkám. Nejnovější zjištění indikují, že VEGF je důležitým stimulátorem jak normální, tak patologické angiogeneze (Jakeman a kol., 1993, Endocrinology, 133: 848-859; Kolch a kol., 1995, Breast Cancer Research and Treatment, 36: 139-155) a vaskulámí permeability (Connolly 30 a kol., 1989, J. Biol. Chem. 264: 20017-20024). Antagonismus působení VEGF vyloučením

VEGF s protilátkou může vést k inhibici růstu nádorů (Kim a kol., Nátuře 362: 841-844).

Receptorové tyrosin kinázy (RTK) jsou důležité při přenosu biochemických signálů přes plazmovou membránu buněk. Tyto transmembránové molekuly se skládají z domén vázající 35 extracellulámí ligand, spojený přes segment v plazmové membráně k doméně intracellulámí tyrosin kinázy. Vazba ligandu k receptorů vede ke stimulaci účinnosti receptor-tyrosin kináza, což vede k fosforylaci tyrosinových zbytků jak na receptorů, tak na ostatních intracellulámích molekulách. Tyto změny ve fosforylaci tyrosinu vyvolávají signalizační kaskády vedoucí křadě cellulámích odezev. Do dnešního data bylo identifikováno alespoň devatenáct odlišných rodin 40 RTK definovaných homologickou řadou aminokyselin. Jedna z těchto rodin je v této době tvořena rodinami podobnými receptorů tyrosin kinázy. Fit nebo Fltl, kináze zavádějící receptor obsahující doménu, KDR (také označované jako Flk-1) a dalším je receptor tyřosinkinázy, Flt4. O dvou těchto příbuzných RTK (Fit a KDR) bylo zjištěno, že vážou VEGF s vysokou afinitou (DeVries a kol., 1992, Science 255. 989-991; Terman a kol., 1992, Biochem. Biophys. Res. 45 Comm. 1992, 187: 1579-1586). Vazba VEGF k těmto receptorům, vyjádřených v heterologních buňkách se spojuje se změnami ve statutech fosforylace tyrosinu buněčných proteinů a toku vápníku.

Sloučeniny, které se vyznačují dobrou účinností proti epidermálnímu růstového faktoru (EGF) 50 receptorů tyrosin kinázy jsou popsány v Evropské patentové publikaci č. 0566226, ale neuvádí se zde žádný návrh, že sloučeniny vykazují účinek VEGF. Evropská patentová publikace č. 0326330 popisuje určité chinolinové, chinazolinové a chinnolinové fungicidy rostlin. O některých z těchto fungicidů rostlin se také uvádí, že mají insekticidní a miticidní účinnost. Není zde však nic uvedeno, že kterákoliv z objemových sloučenin může být použita pro účely živočichů,

-1 CZ 291386 B6 jako je člověk. Zejména, Evropská patentová publikace neobsahuje žádný údaj týkající se angiogeneze a/nebo zvýšené vaskulární permeability vyvolané růstovými faktory , jako je VEGF.

Předkládaný vynález je založen na objevení sloučenin, které neočekávaně inhibují účinky VEGF, cenná vlastnost při léčení nemocí spojených s angiogenezí a/nebo zvýšenou vaskulární permeabilitou, jako je rakovina, diabet, psoriáza, revmatoidní artritida, Kaposiho sarkom, hemangiom, akutní a chronická nefropatie, atherom, arteriální restenóza, autoimunní nemoci, akutní zánět a oční nemoci s retinální cévní proliferací. Sloučeniny podle předkládaného vy nálezu vykazují vyšší účinnost proti VEGF receptorů tyrosin kinázy, přičemž vykazují určitou účinnost proti EGF receptorů tyrosin kinázy. Dále sloučeniny podle předkládaného vynálezu vykazují podstatně vyšší účinnost proti VEGF receptorů tyrosin kinázy než proti EGF receptorů ty rosin kinázy nebo FGF R1 receptorů tyrosin kinázy. Tak sloučeniny podle předkládaného vynálezu, které byly testovány, vykazují účinnost proti VEGF receptorů tyrosin kinázy, takže se mohou použít v množství dostatečném k inhibici VEGF receptorů tyrosin kinázy, přičemž neprojevují žádný podstatný účinek vůči EGF receptorů tyrosin kinázy nebo FGF R1 receptorů tyrosin kinázy.

Podstata vynálezu

Podle jednoho aspektu se předkládaný vynález týká chinazolinového derivátu obecného vzorce I

(I) kde Z znamená -O-, -NH- nebo -S-;

m znamená celé číslo 1 až 5 s tím, že když Z znamená -NH-, m je číslo od 3 do 5;

R* je vodík, hydroxyskupina nebo alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku;

R² je vodík;

R³ je hydroxyskupina, halogen, alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, alkanoyloxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, trifluormethylová skupina nebo kyanoskupina;

X¹ znamená -O-, -CH₂-, -NR⁷- nebo -NR⁸CO-, kde R⁷ a R⁸ každý znamená vodík;

R⁴ je vybrán z jedné z následujících skupin;

1) vodík, alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyalkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku (výhodně hydroxyalkylová skupina se 2 až 5 atomy uhlíku), aminoalkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku;

2) alkylX²COR¹² s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde X² je -O- a R¹² je alkylová skupina s 1 až atomy uhlíku);

-2CZ 291386 B6

3) alkylX³R¹⁷ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde X³ znamená -0-, -S-, -SO-, -SO2-, -NR¹⁸CO- -CONR¹⁹-, -NR²¹SO₂- nebo -NR²²- (kde R¹⁸, R¹⁹, R²¹ a R²² každý nezávisle znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu) a R¹⁷ je vodík, alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina nebo 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina vybraná z tetrahydropyranu a morfolinoskupiny);

4) alkylR²³ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde R²'’ je 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy nezávisle na sobě vybranými z O, Sa N, přičemž heterocyklická skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku);

5) alkenylR²³ se 2 až 5 atomy uhlíku v alkenylu (kde R²³ má význam definovaný výše);

6) alkyíX⁴alkylX⁵R²⁴ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylech (kde X⁴ a X⁵, které jsou stejné nebo různé, znamenají -0-, -S-, -SO-, -SO2-, -NR²⁵CO-, -SO2NR²⁷-, -NR²⁸SO₂- nebo -NR²⁹- (kde R^2:>, R²⁷, R²⁸ a R²⁹ každý nezávisle znamená vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku) a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku);

kromě 4-(3,4,5-trimethoxyfenoxy)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-methoxyfenylthio)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenylthio)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenoxy)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenylthio)-6,7-dimethylchinazolinu a 4-(3,4,5-trimethoxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolinu;

a jeho soli.

Z je výhodně -S-, zejména -O-, ale obzvláště -NH-.

Kde Z je -S- nebo -0-, m je výhodně celé číslo od 2 do 5, výhodněji 2 nebo 3,

Kde Z je -NH-, m je výhodně 3.

R¹ je výhodně vodík, hydroxyskupina nebo alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku.

R¹ je výhodněji vodík, hydroxyskupina, methoxyskupina nebo ethoxyskupina, ještě výhodněji vodík, hydroxyskupina, methoxyskupina, zejména methoxyskupina.

Kde X¹ je -NR⁸CO-, R¹ je výhodněji vodík.

R² je výhodněji vodík.

V jednom provedení předkládaného vynálezu R³ představuje hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, trifluormethylovou skupinu nebo kyanoskupinu, výhodněji hydroxyskupinu, halogen nebo alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, zejména hydroxyskupinu nebo halogen.

Výhodně v dalším provedení předkládaného vynálezu jeden substituent R³ je výhodně hydroxyskupina, výhodněji meta-hydroxy skupina a další jsou vybrány ze souboru, který znamená halogen, methylovou skupinu a methoxyskupinu.

V dalším provedení vynálezu je fenylová skupina nesoucí (R³)_m výhodněji obecného vzorce II

-3CZ 291386 B6

R^b

R^C (Π) kde

R^a znamená vodík, methylovou skupinu, fluor nebo chlor, výhodněji vodík, fluor nebo chlor, zejména fluor,

R^b znamená vodík, methylovou skupinu, methoxyskupinu, brom, fluor nebo chlor,

R^c znamená vodík nebo hydroxyskupinu, zejména hydroxyskupinu,

R^d znamená vodík, fluor, chlor, zejména vodík nebo fluor.

Výhodně v dalším provedení vynálezu dva substituenty R³ znamenají halogen, zejména orto, orto'-difluor, a ostatní jsou vybrány ze souboru, který znamená halogen, hydroxyskupinu a methylovou skupinu, zejména halogen a methylovou skupinu.

Ve zvláštní aspektu předkládaného vynálezu fenylová skupina nesoucí (R³)_m je 2-fluor-5-hydroxy-4-methylfenylová skupina, 4-brom-2,6-difluorfenylová skupina, 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyfenylová skupina, 4-chlor-2,6-difluorfenylová skupina nebo 2,4-difluor-5-hydroxyfenylová skupina, nebo kde Z znamená O nebo S, 4-chlor-2-fluorfenylová skupina.

Výhodněji fenylová skupina nesoucí (R³)m je 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyfenylová skupina nebo 2-fluor-5-hydroxy-4-methylfenylová skupina, nebo kde Z znamená O nebo S, 4—chlor-2-fluorfenylová skupina. 4-Chlor-2-fluor-5-hydroxyfenylová skupina je zejména výhodná pro fenylovou skupinu nesoucí (R³)m.

Obvykle X¹ představuje -O-, -CH₂-, -NR⁸CO~, nebo -NR⁷- (kde R⁷ a R⁸ každý znamená vodík)

Výhodně X¹ představuje -O-, -NR⁸CO-, nebo -NR⁷- (kde R⁷ a R⁸ znamená vodík)

Výhodněji X¹ představuje -O-, -NR⁸CO-, (kde R⁸ znamená vodík) nebo NH.

Ještě výhodněji X¹ představuje -O-, -NR⁸CO- (kde R⁸ znamená vodík) nebo NH.

Zejména X¹ znamená -O-, nebo -NHCO-, zejména -O-.

Výhodně X² znamená -O-.

Výhodně X³ znamená -0-, -S-, -SO-, -SO2- -NR¹⁸CO-, -NR²¹SO2- nebo -NR²²- (kde R¹⁸, R²¹ a R²² každý nezávisle znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku nebo alkoxyethylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkoxylu).

-4CZ 291386 B6

Výhodněji X³ znamená -0-, -S-, -SO-, -SO₂- nebo -NR²²- (kde R²² znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku nebo alkoxyethylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkoxylu).

Ještě výhodněji X³ znamená -O- nebo -NR²²- (kde R²² znamená vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku).

Výhodně X⁴ a X⁵, které mohou být stejné nebo různé znamenají -O-, -S-, -SO-, -SO₂- nebo -NR²⁹- (kde R²⁹ znamená vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku).

Výhodněji X⁴ a X⁵, které mohou být stejné nebo různé znamenají -0-, -S- nebo -NR²⁹- (kde R²⁹ znamená vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku).

Ještě výhodněji X⁴ a X⁵, které mohou být stejné nebo různé znamenají -O- nebo -NH-.

Obvy kle je R⁴ vybrán z následujících skupin:

1) alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyalkylová skupina se 2 až 5 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku,

2) alkylX²COR¹² s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde X² má význam definovaný shora a R¹²znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku,

3) alkylX³R¹⁷ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde X³ má význam definovaný shora a R¹⁷znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu nebo 5 nebo 6 člennou nasycenou heterocyklickou skupinu vybranou z tetrahydropyranylové skupiny a morfolinové skupiny;

4) alkylR³⁰ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde R³⁰ je 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy nezávisle vybrané z O, S aN, přičemž heterocyklická skupina je vázána k alkylové skupině s 1 až 5 atomy uhlíku přes atom uhlíku a kde heterocyklická skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku) nebo alkylR³¹ se 2 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde R³¹ je 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy ze kterých jeden je dusík a ostatní jsou nezávisle vybrané z O, S a N, přičemž heterocyklická skupina je vázaná k alkylové skupině se 2 až 5 atomy uhlíku přes atom dusíku a kde heterocyklická skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku),

5) alkenylR³⁰ se 3 až 4 atomy uhlíku v alkenylu (kde R³⁰ má význam definovaný shora),

6) alkenylR³¹ se 3 až 4 atomy uhlíku v alkenylu (kde R³¹ má význam definovaný shora),

7) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylech (kde X⁴ a X⁵ mají význam definovaný shora a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku).

Výhodně je R⁴ vybrán z následujících skupin:

2) alkylX²COR¹² se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu (kde X² má význam definovaný shora a R¹²znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku,

-5CZ 291386 B6

3) alkylX³R¹⁷ se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylu (kde X³ má význam definovaný shora a R¹⁷znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cyklopentylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu,

4) alkylR³⁰ s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylu (kde R³⁰ je vybrán ze souboru, který’ zahrnuje pyrrolidinylovou skupinu, piperazinylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, 1.3-dioxolan-2-ylovou skupinu, l,3-dioxan-2-ylovou skupinu, l,3-dithiolan-2-ylovou skupinu a l,3-dithian-2-ylovou skupinu, kde příslušná skupina je vázaná k alkylové skupině s 1 až 4 atomy uhlíku přes atom uhlíku a kde skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku) nebo alkylR³¹ se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylu (kde R³¹ je skupina vybraná ze souboru, který zahrnuje morfolinovou skupinu, thiomorfolinovou skupinu, pyrrolidin-l-ylovou skupinu, piperazin-l-ylovou skupinu a piperidinovou skupinu kde příslušná skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku),

7) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ s 2 až 3 atomy uhlíku v alkylech (kde X⁴ a X⁵ mají význam definovaný shora a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku).

Výhodněji je R⁴ vybrán z následujících skupin:

1) alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyalkylová skupina se 2 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina se 2 až 3 atomy uhlíku,

2) alkylX³R¹⁷ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu (kde X³ má význam definovaný shora a R¹⁷znamená alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, cyklopentylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu;

3) alkylR³⁰ s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylu (kde R³⁰ je vybrán ze souboru, který zahrnuje pyrrolidinylovou skupinu, piperazinylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, 1,3-dioxolan-2-ylovou skupinu, 1,3-dioxan-2-ylovou skupinu, 1,3-dithioIan-2-ylovou skupinu a l,3-dithian-2-ylovou skupinu, kde příslušná skupina je vázaná k alkylové skupině s 1 až 2 atomy uhlíku přes atom uhlíku a kde skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku) nebo alkylR³ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu (kde R³¹ je skupina vybraná ze souboru, který zahrnuje morfolinovou skupinu, thiomorfolinovou skupinu, pyrrolidin-l-ylovou skupinu piperazin-l-ylovou skupinu a piperidinovou skupinu kde příslušná skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku),

4) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylech (kde X⁴ a X⁵ mají význam definovaný shora a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku).

Ještě výhodněji R⁴ znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu, 2-hydroxyethylovou skupinu, 3-hydroxypropylovou skupinu, 2-methoxyethylovou skupinu, 3-methoxypropylovou skupinu, 2-(methylsulfmyl)ethylovou skupinu, 2-(methylsulfonyl)ethylovou skupinu, 2-sulfamoylethylovou skupinu, 2-(N,N-dimethylamino)ethylovou skupinu, 3-(N,N-dimethylamino)propylovou skupinu, 2-morfolinoethylovou skupinu, 3-morfolinopropylovou skupinu, 2

-6CZ 291386 B6 piperidinoethylovou skupinu, 3-piperidinopropylovou skupinu, 2-(piperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(piperazin-l-yl)propylovou skupinu, 2-(pyrrolidin-l-yl)ethylovou skupinu, 3(pyrrolidin-l-yl)propylovou skupinu, (l,3-dioxolan-2-yl)methylovou skupinu, 2-(l,3-dioxolan-2-yl)ethylovou skupinu, 2-(2-methoxyethylamino)ethylovou skupinu, 3-(2-methoxyethylamino)propylovou skupinu, 2-thiomorfolinoethylovou skupinu, 3-thiomorfolinopropylovou skupinu, 2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylovou skupinu nebo 2-(2-methoxyethoxy)ethylovou skupinu.

Zejména R⁴ znamená 2-hydroxyethylovou skupinu, 3-hydroxypropylovou skupinu, 2-methoxyethylovou skupinu, 3-methoxypropylovou skupinu, 2-(methyisulfinyl)ethylovou skupinu, 2(methylsulfonyl)ethylovou skupinu, 2-(N,N-dimethylamino)ethylovou skupinu, 3-(N,N-dimethylamino)propylovou skupinu, 2-morfolinoethylovou skupinu, 3-morfolinopropylovou skupinu, 2-piperidinoethylovou skupinu, 3-piperidinopropylovou skupinu, 2-(piperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(piperazin-l-yl)propylovou skupinu, 2-(pyrrolidin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(pyrrolidin-l-yl)propylovou skupinu, (l,3-dioxolan-2-yl)methylovou skupinu, 2-(1,3dioxolan-2-yl)ethylovou skupinu, 2-(2-methoxyethylamino)ethylovou skupinu, 3-(2-methoxyethylamino)propylovou skupinu, 2-thiomorfolinoethylovou skupinu, 3-thiomorfolinopropylovou skupinu, 2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylovou skupinu nebo 2-(2-methoxyethoxy)ethylovou skupinu.

Výhodnými sloučeninami jsou:

4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4-brom-2-fluor-5-hydroxyanilino-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolin, 6,7-dimethoxy-4-(3-hydroxy-4-methylfenoxy)chinazolin,

4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolin,. 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy—4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-(methylsulfmyl)ethoxy)chinazolin, 4-(4—chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin, 4-(4—chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethylamino)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-cyklopentyloxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino}-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolin, 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin a jejich soli, zejména jejich hydrochloridy.

Výhodnější sloučeniny jsou:

4-(4-brom-2-fluor-5-hydroxyanilino-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolin, 6,7-dimethoxy-4-(3-hydroxy-4-methylfenoxy)chinazolin,

4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-(methylsulfinyl)ethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(2-fluor-5-hydiOxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethylamino)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-cyklopentyloxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazoiin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-{3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino}-7-methoxyacetamidochinazolin, 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfoIinopropoxy)chinazolin a jejich soli, zejména jejich hydrochloridy. ,¾¾

Ještě výhodnější sloučeniny jsou: x

4-(4-chlor-2-fluor-5-hydiOxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino}-6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pynOlidin-l-yl)ethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethylamino)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-cyklopentyloxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolin, 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin a jejich soli, zejména jejich hydrochloridy.

Ještě výhodnější sloučeniny jsou:

4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazo!in,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin,

-8CZ 291386 B6

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolin,

4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin a jejich soli, zejména jejich hydrochloridy.

Zvlášť výhodné sloučeniny jsou:

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methy lan i 1 ino)-7-methoxyacetam i doch inazolin, 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin a jejich soli, zejména jejich hydrochloridy.

Je třeba vzít v úvahu, že tam, kde se v popisu skupina kvalifikuje termínem „uvedeným shora“ nebo „definovaným shora“, pak uvedená skupina zahrnuje první výskyt a nejširší definici a rovněž každou a všechny výhodné definice této skupiny.

V tomto popise termín „alkyl“ zahrnuje alkylovou skupinu s rovným nebo rozvětveným řetězcem, přičemž odkazy na individuální alkylové skupiny, jako je „propyl“ jsou specifické pouze pro verzi s přímým řetězcem. Analogické konvence se uplatňuje i u ostatních generických termínů. Pokud není uvedeno jinak, termín „alkyl“ se výhodně týká řetězce s 1 až 6 atomy uhlíku, výhodněji s 1 až 4 atomy uhlíku. V tomto popise termín „alkoxy“ znamená alkylovou skupinu jak je definována shora, vázanou k atomu kyslíku. V tomto popise termín „aryl“ zahrnuje aromatickou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku, která může nést, je-li to žádoucí, jeden nebo více substituentů vybraných ze souboru, který zahrnuje halogen, alkylovou skupinu, alkoxylovou skupinu, kyanoskupinu, nitroskupinu nebo trifluormethylovou skupinu (kde alkylová a alkoxylová skupina jsou definovány shora). Termín „aryloxy“ znamená arylovou skupinu jak je definována shora vázanou k atomu kyslíku. V tomto popise termín „sulfonyloxy“ zahrnuje alkylsulfonyloxylovou a arylsulfonyloxylovou skupinu, kde „alkyl“ a „aryl“ jsou definovány shora. Termín „alkanoyl“ jak se zde používá a pokud není uvedeno jinak, zahrnuje skupiny alkylC=O, kde „alkyl má význam definovaný shora, například ethanol znamená CH₃C=O. V tomto popise pokud není uvedeno jinak, termín „alkenyl“ zahrnuje alkenylové skupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, ale odkazy na jednotlivé alkenylové skupiny, jako je 2-butenyl jsou specifické pouze pro verzi s přímým řetězcem. Pokud není uvedeno jinak, termín „alkenyl“ se výhodně týká řetězců s 2 až 5 atomy uhlíku, výhodně 3 až 4 atomy uhlíku. V tomto popise, pokud není uvedeno jinak, termín „alkinyl“ zahrnuje alkinylové skupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, ale odkazy na individuální alkinylové skupiny, jako je 2-butinylová skupina jsou specifické pouze pro verzi s rovným řetězcem. Pokud není uvedeno jinak, termín „alkinyl“ výhodně znamená řetězce se 2 až 5 atomy uhlíku, výhodně se 3 až 4 atomy uhlíku.

V obecném vzorce I, jak je definováno shora, vodík se nachází v pozicích 2 a 8 chinazolinové skupiny.

Je třeba vzít v úvahu, že chinazolinový derivát obecného vzorce I nebo jeho sůl mohou být v tautomemích formách a že vzorce uváděné v popisu mohou představovat pouze jednu z možných tautomemích forem. Je třeba vzít v úvahu, že vynález zahrnuje jakoukoliv tautomemí formu, která inhibuje účinnost VEGF receptoru tyrosin kinázy a není omezena pouze na tautomemí formu použitou ve vzorcích.

Je třeba dále vzít v úvahu, že některé chinazolinové deriváty obecného vzorce I a jejich soli mohou existovat v solvatovaných a rovněž v nesolvatovaných formách, jako jsou například hydratované formy. Je třeba vzít v úvahu, že vynález zahrnuje všechny takové solvatované formy, které inhibují VEGF receptoru tyrosin kinázy.

-9CZ 291386 B6

Je třeba dále vzít v úvahu, že když například X¹ je skupina obecného vzorce -NR⁸CO~, je to dusíkový atom nesoucí skupinu R⁸ který je připojený k chinazolinovému kruhu a karbonylová skupina (CO) je připojena k R⁴, zatímco když X¹ je například skupina obecného vzorce -CONR⁹-, je to karbonylová skupina, která je připojena k chinazolinovému kruhu a dusík vázaný ke skupině R⁹ je připojen k R⁴. Podobné konvence se používají u dalších dvou atomů skupin X , jako je -NRⁿSO2- a -SO2NR10-. Jestliže X¹ je skupina -NR⁷-, je to atom dusíku nesoucí skupinu R⁷, který je vázán k chinazolinovému kruhu a k R⁴. Analogická konvence platí i u ostatních skupin. Je třeba dále vzít v úvahu, že když X¹ znamená -NR⁷- a R⁷ znamená alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu, je to alkylová část se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, která je vázána k atomu dusíku X¹ a analogická konvence se uplatňuje u jiných skupin.

Je třeba dále vzít v úvahu, že ve sloučeninách obecného vzorce I, když R⁴ je například skupina alkylR²³ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, je to terminální alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, která je vázaná k X* a podobně, když R⁴ je například skupina obecného vzorce alkenylR²³ se 2 až 5 atomy uhlíku v alkenylu, je to alkenylová část se 2 až 5 atomy uhlíku, která je vázána k XI a analogické konvence se uplatňuje u jiných skupin. Jestliže R⁴ je skupina l-R²³prop-l-en-3-yl, je to první atom uhlíku ke kterému je skupina R²³ vázána a je to třetí atom uhlíku, který je vázán k X¹ a analogické konvence se uplatňují u jiných skupin.

Předkládaný vynález se týká sloučenin obecného vzorce I jak jsou definovány shora a rovněž jejich soli. Soli pro použití ve farmaceutických prostředcích budou farmaceuticky přijatelné soli, ale mohou se použít i jiné soli k přípravě sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí. Farmaceuticky přijatelné soli podle vynálezu mohou například zahrnovat kyselé adiční soli sloučenin obecného vzorce I jak jsou definovány shora, které jsou dostatečně bazické k tvorbě takových solí. Vhodné adiční soli zahrnují například soli s anorganickými a organickými kyselinami poskytujícími farmaceuticky přijatelné anionty, takové jako s halogenvodíky (zejména kyselina chlorovodíková nebo kyselina bromovodíková, ze kterých je zvlášť vhodná kyselina chlorovodíková) nebo s kyselinou sírovou, kyselinou fosforečnou nebo s kyselinou trifluoroctovou, kyselinou citrónovou nebo kyselinou maleinovou. Dále, jestliže jsou sloučeniny obecného vzorce I dostatečně kyselé, farmaceuticky přijatelné soli se mohou tvořit s anorganickými nebo organickými bázemi, které poskytují farmaceuticky přijatelný kationt. Takové soli s anorganickými nebo organickými bázemi zahrnují například soli alkalických kovů, jako jsou sodné nebo draselné soli, soli kovů alkalických kovů, jako jsou vápenaté nebo hořečnaté soli, amonné soli nebo například soli s methylaminem, dimethylaminem, trimethylaminem, piperidinem, morfolinem nebo tris-(2-hydroxyethyl)aminem.

Sloučenina obecného vzorce I nebo její sůl a ostatní sloučeniny vynálezu (jak jsou definovány dále) se mohou připravit jakýmkoliv známým způsobem, který je použitelný pro přípravu chemicky příbuzných sloučenin. Vhodné postupy jsou například uvedeny v Evropských patentových přihláškách č. 0 520 722, 0 566 226, 0 602 851 a 0 635 498. Tyto postupy, jsou dalším rysem vynálezu a jsou popsány dále. Potřebné výchozí materiály se mohou získat standardními postupy organické chemie. Příprava těchto výchozích materiálů je popsána v připojených neomezujících příkladech. Alternativně se mohou potřebné výchozí materiály získat analogickými postupy, které jsou známé odborníkům v organické chemii.

-10CZ 291386 B6

Následující postupy (a) až (g) a (i) až (v) tvoří další rysy předkládaného vynálezu.

(a) Sloučenina obecného vzorce I a její soli se mohou připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce III

(HI) kde R¹, R², X¹ a R⁴ mají význam uvedený shora a L¹ znamená odštěpitelnou skupinu), se sloučeninou obecného vzorce IV

ZH (IV) kde Z, R³ a m mají význam uvedený shora, za vzniku sloučenin obecného vzorce I a jejich solí. Konvenční odštěpitelná skupina L¹ je například halogen, alkoxyskupina (výhodně alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku) aryloxyskupina, sulfonyloxyskupina, například chlor, brom, methoxyskupina, fenoxyskupina, methansulfonyloxyskupina nebo toluen-4-sulfonyloxyskupina.

Reakce se výhodně provádí v přítomnosti kyseliny nebo báze. Výhodná kyselina je například bezvodá anorganická kyselina, jako je chlorovodík. Výhodná báze je například organický amin, například pyridin, 2,6—lutidin, kollidin, 4-dimethylaminopyridin, triethylamin, morfolin, Nmethylmorfolin nebo diazabicyklo[5.4]undec-7-en, nebo například uhličitan nebo hydroxid alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, například uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný nebo hydroxid draselný. Alternativně je báze například hydrid alkalického kovu, například hydrid sodný nebo amid alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, například amid sodný nebo bis(trimethylsilyl)amid sodný. Reakce se výhodně provádí v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla, například alkanolu nebo esteru, jako je methanol, ethanol, izopropanol nebo ethylacetát, halogenovaných rozpouštědel, jako je methylenchlorid, trichlormethan nebo chlorid uhličitý, etheru, jako je tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan, aromatických uhlovodíkových rozpouštědel, jako je toluen nebo dipolárních aprotických rozpouštědel, jako je N,N-dimethyíformamid, Ν,Ν-dimethylacetamid, N-methylpyrrolidon-2on nebo dimethylsulfoxid. Reakce se obvykle provádí při teplotě v rozsahu například 10 až 50 °C, výhodně v rozsahu 20 až 80 °C.

Sloučenina podle vynálezu se může připravit tímto postupem ve formě volné báze nebo může být alternativně připravena ve formě soli s kyselinou obecného vzorce H-L¹, kde L¹ má význam uvedený shora. Je-li třeba získat volnou bázi ze soli, pak se tato sůl nechá reagovat s vhodnou bází, jak jsou uvedeny shora za použití konvenčního postupu.

-11 CZ 291386 B6 (b) Při přípravě těch sloučenin obecného vzorce I, kde skupina obecného vzorce Ha

(Ha) (kde R^? a m mají význam uvedený shora) znamená fenylovou skupinu nesoucí jednu nebo více hydroxylových skupin, sloučenina obecného vzorce I a její sůl se mohou připravit odstraněním 5 chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce V

(V) kde X¹, m, R¹, R², R³, R⁴ a Z mají význam uvedený shora, P znamená chránící skupinu fenolické hydroxylové skupiny a p¹ znamená celé číslo od 1 do 5, rovné počtu chráněných hydroxylových skupin a tak, že m-p¹ je rovno počtu substituentů R³, které nemají chráněny hydroxyskupiny. ío Výběr chránící skupiny P fenolické hydroxylové skupiny vyplývá z úrovně standardních znalostí.....

organického chemika, například se použijí ty, které jsou uvedeny v publikaci „Protective Groups in Organic Synthesis“ T. W. Greene a R. G. M. Wuts, 2. vydání, Wiley, 1991, zahrnující ethery (například methyl, methoxymethyl, allyl a benzyl), silylethery (například terc.butyldifenylsilyl a terc.butyldimethylsilyl), estery (například acetát a benzoát) a karbonáty (například methyl 15 a benzyl). Odstranění takových fenolických hydroxylových chránících skupin se může provést jakýmkoliv známým postupem, například přeměnou, zahrnující takové podmínky, které jsou uvedeny ve standardní literatuře, jak je například uvedena shora nebo příbuznými postupy. Reakční podmínky jsou výhodně takové, že hydroxyderivát se získá bez nežádoucích reakcí na jiných místech ve výchozích sloučeninách nebo produktech. Například, jestliže je chránící skupi20 nou P acetát, přeměna se může obvykle provést zpracováním chinazolinového derivátu s bází jak je uvedeno shora a zahrnující amoniak a jeho mono a dialkylaminové deriváty, výhodně v přítomnosti protického rozpouštědla nebo korozpouštědla, jako je voda nebo alkohol, například methanol nebo ethanol. Taková reakce se může provést v přítomnosti dalšího inertního rozpouštědla nebo ředidla jak je definováno shora a při teplotě v rozsahu 0 až 50 °C, obvykle při teplotě 25 20 °C.

-12CZ 291386 B6 (c) Příprava těch sloučenin obecného vzorce I a jejich solí, kde substituent X¹ znamená -0-, -S- nebo -NR⁷- se může provést reakcí, obvykle v přítomnosti báze, jak je definováno shora, sloučeniny obecného vzorce VI

(VI) kde X¹, R¹, R², R³ a Z mají význam uvedený shora, se sloučeninou obecného vzorce VII

R⁴-L’ (VII) kde R⁴ a L¹ mají význam uvedený shora; L¹ je odštěpitelná skupina například halogen, sulfonylio oxyskupina, jako je brom nebo methansulfonyloxyskupina. Reakce se výhodně provádí v přítomnosti báze (jak je definováno shora v postupu (a) a výhodně v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla (jak je definováno shora v postupu (a)), výhodně při teplotě v rozsahu například 10 až 150 °C, konvenčně při teplotě okolo 50 °C.

(d) Sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli se mohou připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VIII

(VIII) se sloučeninou obecného vzorce IX

(IX) kde L¹, R¹, R², R³, R⁴, Z a X¹ mají význam uvedený shora.

Reakce se výhodně provádí v přítomnosti báze (jak je definováno shora v postupu (a) a výhodně 25 v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla (jak je definováno shora v postupu (a)), výhodně při teplotě v rozsahu například 10 až 150 °C, konvenčně při teplotě okolo 100 °C.

-13CZ 291386 B6 (e) Sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli, kde R⁴ znamená alkylR³² s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, [kde R’ je vybrán z následujících skupin:

1) X⁶alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylu (kde X⁶ znamená -O-, -S-, -SO3-, -NR³³CO- nebo -NR'⁴SO2- (kde R³³ a R’⁴ znamenají nezávisle vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxj alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu;

2) NR³’R^j6 (kde R³⁵ a R³⁶, které mohou být stejné nebo různé a každý znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu;

3) X alkylX⁵R‘⁴ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu (kde X⁷ znamená -0-, -S-, -SO2-, -NR³⁷CO-, NR³⁸SO2- nebo -NR³⁹- (kde R³⁷, R³⁸ a R³⁹ znamenají každý nezávisle vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu) a X⁵ a R²⁴ mají význam definovaný shora) a

4) R³¹ (kde R³¹ má vý znam definovaný shora) se mohou připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce X

(X) (kde L¹, X¹, R¹, R², R³, Z a m mají význam definovaný shora a R⁴⁰ znamená alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku), se sloučeninou obecného vzorce XI (xi) (kde R³² má význam definovaný shora) za vzniku sloučeniny obecného vzorce I. Reakce se může konvenčně provést v přítomnosti báze (jak je definováno shora v postupu (a)) a výhodně v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla (jak je definováno shora u postupu (A)) a při teplotě v rozsahu od 0 do 150 °C, obvykle při teplotě 50 °C.

(f) Příprava těchto sloučenin obecného vzorce I a jejich solí, kde substituent R¹ je představován skupinou NR⁵R⁶, kde jeden nebo oba symboly R⁵ a R⁶ znamenají alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku se může provést reakcí sloučeniny obecného vzorce I, kde substituent R¹ znamená aminovou skupinu a alkylačního činidla, výhodně v přítomnosti báze, jak je definována shora. Výhodná alkylační činidla jsou alkylové části s 1 až 3 atomy uhlíku, nesoucí odštěpitelnou část, jak je definováno shora, například alkylhalogenidy s 1 až 3 atomy uhlíku, například alkylchlorid, alkylbromid nebo alkyljodid s 1 až 3 atomy uhlíku. Reakce se výhodně provede v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla (jak je definováno shora v postupu (a)) a při teplotě v rozsahu například 10 až 100 °C, obvykle při okolní teplotě. Tento postup se také může použít pro přípravu sloučenin, ve kterých R⁴-X^! znamená alkylaminovou skupinu nebo dialkylaminovou skupinu.

(g) Příprava sloučenin obecného vzorce I a jejich solí, kde jeden nebo více substituentů R¹, R²nebo R³ znamenají aminoskupinu nebo kde R⁴-X’ znamená aminoskupinu se může provést

-14CZ 291386 B6 redukcí odpovídající sloučeniny obecného vzorce I, kde substituenty v odpovídajících polohách chinazolinového a/nebo fenylového kruhu jsou nitroskupiny. Redukce se může obvykle provést jak je popsáno v postupu (i) shora. Příprava sloučeniny obecného vzorce I a jejích solí, kde substituenty v odpovídajících polohách chinazolinového a/nebo fenylového kruhu jsou nitroskupiny se může provést postupem popsaným shora a dále v postupech (a-e) a (i-v), za použití chinazolinové sloučeniny vybrané ze sloučenin obecného vzorce I až XXVII, kde substituenty v odpovídajících polohách chinazolinového kruhu jsou nitroskupiny.

Příprava meziproduktů (i) Sloučeniny obecného vzorce III a jejich soli představují další rys předkládaného vynálezu. Tyto sloučeniny, kde L¹ znamená halogen se mohou například připravit halogenací sloučeniny obecného vzorce XII

(ΧΠ) (kde R¹, R², R⁴ a X¹ mají význam uvedený shora).

Obvyklá halogenační činidla zahrnují halogenidy anorganických kyselin, například thionylchlorid, chlorid fosforitý, oxychlorid fosforečný a chlorid fosforečný. Halogenační reakce se obvykle provádí v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla, jako je například halogenované rozpouštědlo, například methylenchlorid, trichlormethan, chlorid uhličitý nebo aromatické uhlovodíkové rozpouštědlo, jako je benzen a toluen. Reakce se obvykle provádí při teplotě v rozsahu 10 až 150 °C, výhodně při teplotě 40 až 100 °C.

Sloučeniny obecného vzorce XII a jejich soli, které představují další rys předkládaného vynálezu se mohou například připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XIII

(ΧΠ1) (kde R¹, R² a L¹ mají význam uvedený shora) se sloučeninou obecného vzorce IX jak je definováno shora. Reakce se obvykle provádí v přítomnosti báze (jak je definováno shora v postupu (a)) a výhodně v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla (jak je definováno shora v postupu (a)), výhodně při teplotě v rozsahu například 10 až 150 °C, obvykle při teplotě okolo 100 °C.

-15CZ 291386 B6

Sloučeniny obecného vzorce Xll ajejich soli se mohou připravit cyklizací sloučeniny obecného vzorce XIV

(Xiv) kde R¹, R², R⁴ a X¹ mají význam uvedený shora a A¹ znamená hydroxyskupinu, alkoxyskupinu (výhodně alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku) nebo aminoskupinu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XII nebo její soli. Cyklizace se může provést reakcí sloučeniny obecného vzorce XIV, kde A¹ znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s formamidem nebo jeho ekvivalentem schopným způsobit cyklizaci, přičemž se získá sloučenina obecného vzorce XII nebo její sůl, jako je [3-(dimethylamino)-2-azaprop-2-enyliden]dimethylamoniumchlorid.

Cyklizace se obvykle provádí v přítomnosti formamidu jako rozpouštědla nebo v přítomnosti inertního rozpouštědla, jako je ether, například 1,4-dioxan. Cyklizace se obvykle provádí při zvýšené teplotě, výhodně v rozsahu 80 až 200 °C. Sloučeniny obecného vzorce XII se také mohou připravit cyklizací sloučeniny obecného vzorce XIV, kde A¹ znamená aminoskupinu, s kyselinou mravenčí nebo jejím ekvivalentem schopným způsobit cyklizaci za vzniku sloučeni15 ny obecného vzorce XII nebo její soli. Ekvivalenty kyseliny mravenčí schopné způsobit cyklizaci zahrnují například trialkoxymethan s 1 až 4 atomy uhlíku, například triethoxymethan atrimethoxymethan. Cyklizace se obvykle provádí v přítomnosti katalytického množství bezvodé kyseliny, jako je kyselina sulfonová, například kyselina p-toluensulfonová a v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla, jako je například halogenované rozpouštědlo, jako je 20 methylenchlorid, trichlormethan nebo chlorid uhličitý, etheru, jako je diethylether nebo tetrahydrofuran nebo aromatického uhlovodíkového rozpouštědla, jako je toluen. Cyklizace se obvykle provádí při teplotě v rozsahu 10 až 100 °C, výhodně v rozsahu 20 až 50 °C.

Sloučeniny obecného vzorce XIV a její soli, které tvoří další rys předkládaného vynálezu se mohou například připravit redukcí nitroskupiny ve sloučenině obecného vzorce XV

(XV) (kde R¹, R², R⁴, X¹ a A¹ mají význam uvedený shora) za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIV, jak je definována shora. Redukce nitroskupiny se obvykle může provést jakýmkoliv způsobem známým pro takovou přeměnu. Redukce se může provést například hydrogenací 30 roztoku nitrosloučeniny v přítomnosti inertního rozpouštědla nebo ředidla jak je definováno shora v přítomnosti kovu schopného katalyzovat hydrogenační reakce, jako je palladium nebo platina. Jako další redukční činidla se mohou například použít aktivovaný kov, jako je aktivované železo (připraveno například promytím železného prášku se zředěným roztokem kyseliny, jako je

-16CZ 291386 B6 kyselina chlorovodíková). Například redukce se může provést zahříváním nitrosloučeniny a aktivovaného kovu přítomnosti rozpouštědla nebo ředidla, jako je směs vody a alkoholu, například methanolu nebo ethanolu na teplotu například 50 až 150 °C, obvykle při teplotě 70 °C.

Sloučeniny obecného vzorce XV a jejich soli, které tvoří další rys předkládaného vynálezu se mohou například připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XVI

(XVI) (kde R¹, R², L¹ a A¹ mají význam uvedený shora) se sloučeninou obecného vzorce IX jak je definována shora za vzniku sloučeniny obecného vzorce XV. Reakce sloučenin obecného vzorce XVI a IX se obvykle provádí při podmínkách, jak je uvedeno v postupu (d) shora.

Sloučeniny obecného vzorce XV a jejich soli se mohou například také připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XVII

(XVII) (kde R¹, R², X¹ a A¹ mají význam uvedený shora s tím, že X¹ neznamená -CH₂-) se sloučeninou obecného vzorce VII jak je definována shora a získá se sloučenina obecného vzorce XV jak je definována shora. Reakce sloučenin obecného vzorce XVII a VII se obvykle provede při podmínkách, jak je uvedeno pro postup (c) shora.

Sloučeniny obecného vzorce III a jejich soli se také mohou připravit například reakcí sloučeniny obecného vzorce XVIII

(XVIII)

- 17CZ 291386 B6 (kde R¹, R² a X¹ mají význam uvedený shora stím, že X¹ neznamená -CH₂- a L² znamená odštěpitelnou chránící část) se sloučeninou obecného vzorce VII jak je definováno shora, za vzniku sloučeniny obecného vzorce III, kde L¹ je představováno L².

Ve sloučenině XVII, která se obvykle použije znamená L² fenoxyskupinu, která může, je-li to žádoucí, nést až 5 substituentů, výhodně až 2 substituenty, vybrané z halogenu, nitroskupiny a kyanoskupiny. Reakce se může obvykle provést za stejných podmínek jak je popsáno v postupu (c) shora.

Sloučenina obecného vzorce XVIII a jejich soli jak je definováno shora se mohou například připravit odstraněním chránící skupiny u sloučeniny obecného vzorce XIX

(XIX) (kde R¹, R², P, X¹ a L² mají význam definovaný shora, stím, že X¹ neznamená -CH₂-). Odstranění chránící skupiny se může provést způsoby známými v literatuře, například když P znamená benzylovou skupinu, odstranění se může provést hydrogenolýzou nebo působením kyseliny trifluoroctové.

Jedna sloučenina obecného vzorce III může být, je-li to žádoucí, převedena na druhou sloučeninu obecného vzorce III, kde část L¹ je jiná. Tak například sloučenina obecného vzorce III, kde L¹ je jiná skupina než halogen, například případně substituovaná fenoxyskupina může být převedena na sloučeninu obecného vzorce III, kde L¹ znamená halogen hydrolýzou sloučeniny obecného vzorce III (kde L¹ je jiná skupina než halogen) za vzniku sloučeniny obecného vzorce XII jak je definována shora a potom zavedením halogenidu do sloučeniny obecného vzorce XII, získané jak je definováno shora a získá se sloučenina obecného vzorce III, kde L¹ znamená halogen.

(ii) Sloučeniny obecného vzorce V a jejich soli tvoří další rys předkládaného vy nálezu a mohou se například připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce III jak je definována shora se sloučeninou obecného vzorce XX .A-p¹

I

ZH (XX) (kde R³, m, p¹, P a Z mají význam jak je definováno shora). Reakce se může například provést jak je popsáno pro postup (a) shora.

-18CZ 291386 B6

Sloučeniny obecného vzorce V a jejich soli se mohou také připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XXI

(XXI) (kde R¹, R², L¹, Z, R³, m, p¹ a P mají význam definovaný shora) se sloučeninou obecného vzorce IX jak je definována shora. Reakce se může například provést jak je popsáno pro postup (d) shora.

Sloučeniny obecného vzorce V a jejich soli se mohou také připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XXII

(XXII) (kde R¹, R², R³, X¹, Z, P, p¹ a m mají význam definovaný shora s tím, že X¹ neznamená -CH₂- se sloučeninou obecného vzorce VII jak je definována shora. Reakce se může například provést jak je popsáno pro postup (c) shora.

Sloučeniny obecného vzorce XXI a jejich soli se mohou například připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XXIII

(XXIII) (kde R¹, R² a L¹ mají význam definovaný shora a L¹ ve 4- a 7- poloze může být stejné nebo různé) se sloučeninou obecného vzorce XX jak je definována shora. Reakce se může provést například postupem jak je popsáno v (a) shora.

-19CZ 291386 B6

Sloučeniny obecného vzorce XXII a jejich soli se mohou připravit reakcí sloučenin obecného vzorce XIX a XX jak jsou definovány shora při podmínkách popsaných v (a) shora a získá se sloučenina obecného vzorce XXIV

(XXIV) (kde R¹, R², R³, P, Z, X¹, p¹ a m mají význam definovaný shora s tím, že X¹ neznamená -CH₂-) a potom odstraněním chránící skupiny u sloučeniny obecného vzorce XXIV, například jak je popsáno v (i) shora.

(iii) Sloučeniny obecného vzorce VI jak jsou definovány shora a jejich soli se mohou připravit odstraněním chránící skupiny u sloučeniny obecného vzorce XXV

(XXV) (kde R¹, R², R³, P, Z, X¹ a m mají význam definovaný shora) postupem například jak je popsáno v (i) shora.

Sloučeniny obecného vzorce XXV a jejich soli se mohou připravit reakcí sloučenin obecného vzorce XIX a IV jak jsou definovány shora při podmínkách popsaných v (a) shora a získá se sloučenina obecného vzorce XXV nebo její sůl.

(iv) Sloučeniny obecného vzorce VII a jejich soli jak jsou definovány shora se mohou připravit reakcí sloučenin obecného vzorce XXIII a IV jak jsou definovány shora, přičemž reakce se může provést například postupem popsaným v (a) shora.

(v) Sloučeniny obecného vzorce X jak jsou definovány shora a jejich soli se mohou například připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VI jak je definována shora se sloučeninou obecného vzorce XXVI

L'-R⁴⁰-L' (XXVI) (kde L¹ a R⁴⁰ mají význam uvedený shora) a získá se sloučenina obecného vzorce X. Reakce se může provést například postupem popsaným v (c) shora.

-20CZ 291386 B6

Sloučeniny obecného vzorce X a jejich soli se mohou také připravit například odstraněním chránící skupiny u sloučeniny obecného vzorce XXVII

(XXVII) (kde L¹, R⁴⁰, X¹, R¹, R², R³, Z, P, m a p* mají význam definovaný shora) postupem například jak je popsáno v (b) shora.

Sloučeniny obecného vzorce XXVII a jejich soli se mohou připravit například reakcí sloučenin obecného vzorce XXII a XXVI jak jsou definovány shora, při podmínkách popsaných v (c) shora.

Jestliže je třeba připravit farmaceuticky přijatelnou sůl sloučeniny obecného vzorce I, může se tato sůl získat například reakcí uvedené sloučeniny s kyselinou, za použití běžných postupů, přičemž kyselina má farmaceuticky použitelný aniont.

Řada meziproduktů definovaných v předkládané přihlášce je nová, například meziprodukty obecných vzorců III, V, XIV a tyto meziprodukty jsou dalším rysem předkládaného vynálezu.

Meziprodukty obecných vzorců VIII, X, XXI, XXII, XXIV, XXV a XXVII jsou rovněž dalším rysem předkládaného vynálezu.

Identifikace sloučenin, které silně inhibují účinnost tyrosin kinázy spojenou s VEGF receptory, jako je Fit a/nebo K.DR a které inhibují angiogenezi a/nebo zvýšenou vaskulámí permeabilitu je žádoucí a je předmětem předkládaného vynálezu. Tyto vlastnosti mohou být stanoveny například za použití jedné nebo více procedur, uvedených dále:

a) In vitro test inhibice receptoru tyrosin kinázy

Tato zkouška stanovuje schopnost testované sloučeniny inhibovat účinnost tyrosin kinázy. Cytoplazmatické domény DNA kódující VEGF nebo EGF receptory mohou být získat totální genovou syntézu (Edwards M, Intemational Biotechnology Lab 5(3), 19-25, 1987) nebo klonováním. Tyto domény pak mohou být vyjádřeny vhodným systémem k získání polypeptidu s účinností tyrosin kinázy. Například cytoplazmatické domény receptoru VEGF a EGF, které byly získány expresí rekombinantního proteinu v buňkách hmyzu, projevují vnitřní účinnost receptoru tyrosin kinázy. V případě VEGF receptoru Fit (genová banka, přírůstkové číslo X51602), 1,7 kb DNA fragment kódující většinu cytoplazmatické domény, začínající s methioninem 783 a zahrnující terminační kodon, jak popsali Shibuya a kol. (Oncogene, 1990, 5: 519-524), byl izolován z cDNA a klonován do baculovirového transplacementního vektoru, například pAcYMl (viz The Baculovirus Expression Systém: A Laboratoiy Guide, L. A. King a R. D. Possee, Chapman a Halí, 1992) nebo pAc360 nebo pBlueBacHis (dostupné od Invitrogen Corporation). Tato rekombinantní konstrukce byla transfektována do buněk hmyzu (například Spodoptera frugiperda 21 (Sf21) virovou DNA (například Pharmingen BaculoGold) k přípravě rekombinantního baculoviru (podrobnosti a metody pro uspořádání molekul rekombinantní DNA a příprava a použití

-21 CZ 291386 B6 rekombinantního baciloviru mohou být nalezeny ve standardních testech, například Sambrook a kol, 1989, Molecular cloning - A Laboratory Manual, 2. vydání, Cold Spring Harbour Laboratory Press and O'Reilly a kol., 1992, Bacilovirus Expression Vectors - A Laboratory Manual, W. H. Freeman a Co, New York). Další tyrosin kinázy pro použití ve zkouškách, cytoplazmatické fragmenty vycházející zmethioninu 806 (KDR, Genová banka, přírůstkové číslo L04947) a methioninu 668 (receptor EGF, Genová banka, přírůstkové číslo X00588), mohou být klonovány a vyjádřeny podobným způsobem.

Pro vyjádření účinnosti cFtl tyrosin kinázy, byly buňky Sf21 infikovány nezamořeným rekombinantním virem při násobnosti infekce 3 a byly sklizeny po 48 hodinách. Sklizené buňky byly promyty ledovým fosfátovým pufrovým fyziologickým roztokem (PBS) (10 mM fosforečnan vápenatý pH 7,4, 138 mM chlorid sodný, 2,7 mM chlorid draselný) a potom byly znovu suspendovány v ledem chlazeném HNTG/PMSF (20 mM Hepes pH 7,5, 150 mM chlorid sodný, 10 % objem/objem glycerol, 1 % objem/objem Triton X100, 1,5 mM chlorid hořečnatý, 1 mM ethylenglykolbis (Baminoethylether) Ν,Ν,Ν',Ν'-tetraoctová kyselina (EGTA), 1 mM PMSF (fenylmethylsulfonylfluorid); PMSF se přidá těsně před použitím z čerstvě připraveného 100 mM roztoku v methanolu) za použití 1 ml HNTG/PMFS na 10 milionů buněk. Suspenze se odstředí 10 minut při 13 000 otáčkách/min. při teplotě 4 °C, supematant (enzymová surovina) se odstraní a uchová se v podílech při teplotě -70 °C. Každá nová dávka enzymové suroviny se titruje ve zkoušce zředěním ředidlem enzymu (100 mM Hepes pH 7,4, 0,2mM orthovanadičnan sodný, 0,1 % objem/objem Triton XI00, 0,2 mM dithiotheritol). Pro typickou dávku se enzymová surovina zředí 1:2000 ředidlem enzymu a 50 μΐ zředěného enzymu se použije pro každou zkušební jamku.

Zásobní roztok substrátu se připraví ze statistického kopolymerů obsahující tyrosin, například Póly (Glu, Ala, Tyr) 6:3:1 (Sigma P3899) skladovaný jako 1 mg/ml zásobní roztok v PBS při -20 °C a zředěný 1:500 s PBS pro plošné povlékání.

Jeden den před zkouškou se 100 μΐ zředěného substrátového roztoku disperguje do všech jamek zkušebních ploten (Nunc maxisorp 96-well immunoplates), které se utěsní a nechají se přes noc při 4 °C.

V den kdy se provádí zkouška se substrátový roztok odstraní a jamky ve kterých se provádí zkouška se promyjí jednou PBST (PBS obsahující 0,05 % objem/objem Tween20) a jednou 50mM Hepes pH 7,4.

Sloučeniny se zředí 10% dimethylsulfoxidem (DMSO) a 25 μΐ zředěné sloučeniny se převede do jamek v promytých zkušebních plotnách. „Totální“ kontrolní jamky obsahují 10% DMSO místo sloučeniny. Do všech zkušebních jamek, kromě „prázdné“ kontroly, která obsahuje chlorid manganatý bez ATP se přidá 25 μ! 40mM chloridu manganatého obsahujícího 8 μΜ adenosin5'-trifosfátu (ATP). K zahájení reakcí se přidá do každé jamky 50 μΐ čerstvě zředěného enzymu a plotny se inkubují při teplotě místnosti po dobu 20 minut. Kapalina se odstraní a jamky se promyjí dvakrát PBST. Potom se přidá do každé jamky 100 μΐ myší IgG antifosfotyrosinové protilátky (Upstate Biotechnology Inc. produkt 05-321) zředěné v poměru 1:6000 s PBST obsahující 0,5 % hmotn./objem hovězího sérového albuminu (BSA) a plotny se inkubují 1 hodiny při teplotě místnosti před odstraněním kapaliny a promytím jamek dvakrát s PBST. Přidá se 100 μΐ křenové peroxidázy (Amersham produkt NXA 931), zředěné v poměru 1:500 sPBST obsahující 0,5 % hmotn./objem BSA a plotny se inkubují po dobu 1 hodinu při teplotě místnosti před odstraněním kapaliny a promytím jamek dvakrát s PBST. Potom se přidá do každé jamky 100 mikrolitrů roztoku 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonové kyseliny) (ABTS) čerstvě připraveného použitím 50 mg ABTS tablet (Boehringer 1204 521) v 50 ml čerstvě připraveného 50 mM fosfát-citrátového pufru pH 5,0 + 0,03 % perborátu sodného (připraveného z 1 dílu fosfátového citrátového pufru s perborátem sodným (PCSB) ve formě kapslí (Sigma P4922) na 100 ml destilované vody. Plotny se potom inkubují po dobu 20 až 60 minut při

-22CZ 291386 B6 teplotě místnosti dokud hodnota optické hustoty „totálních“ kontrolních jamek, měřená při 405 nm použitím spektrofotometru nedosáhne hodnoty 1,0. „Prázdné“ (bez ATP) a „totální“ (bez sloučeniny) kontrolní jamky se použijí ke stanovení rozsahu testovaných sloučeniny, které vykazují 50% inhibici účinnosti enzymu.

(b) In vitro HUVEC proliferační zkouška

Tato zkouška stanovuje schopnost testované sloučeniny inhibovat růstovým faktorem stimulovanou proliferaci endotheliálních buněk lidských umbilikálních vén (HUVEC).

Buňky HUVEC se izolují vMCDB 131 (Gibco BRL) + 7,5 % objem/objem fetálního telecího séra (FCS) a očkují se mimo (při průchodu 2 až 8) vMCDB 131 + 2 % objem/objem FCS + 3pg/ml heparinu + 1 pg hydrokortisonu, při koncentraci 1000 buněk/jamku v 96 jamkách. Po minimálně 4 hodinách se dávkují vhodným růstovým faktorem (tj. VEGF 3 ng/ml, EGF 3 ng/ml nebo b-FGF 0,3 ng/ml) a sloučeninou. Kultury se potom inkubují po dobu 4 dnů při teplotě 37 °C s 7,5% oxidem uhličitým. Za 4 dny se kultury pulsují 1 pCi/jamku trithiovaným thymidinem (Amersham produkt TRA 61) a inkubují se po dobu 4 hodin. Buňky se seberou za použití zařízení pro sebrání plotny s 96 jamkami (Tomtek) a potom se zkoušejí na začlenění tritia s plotnovým čítačem Beta. Začlenění radioaktivity do buněk, vyjádřené jako cpm se použije k měření inhibice růstovým faktorem stimulované proliferace buněk sloučeninou.

(c) Zkouška in vivo otoku dělohy krysy

Tento test stanovuje kapacitu sloučenin ke snížení akutního zvýšení hmotnosti dělohy u krys, ke kterému dochází 4 až 6 hodin po stimulaci estrogenem. Toto počáteční zvýšení hmotnosti dělohy je dlouho známé v důsledku otoku způsobeného zvýšenou permeabilitou vasculatury dělohy a nedávno (Cullinan-Bove a Koss, Endocrinology, 1993, 133: 829-837) demonstrovali těsnou časovou závislost se zvýšenou expresí zvýšenou expresí VEGF mRNA v děloze. Zjistili jsme, že předchozí léčba krys neutralizační monoklonální protilátkou vůči VEGF podstatně snižuje akutní zvýšení hmotnosti dělohy, což dokazuje že zvýšení hmotnosti je podstatně vyvoláno VEGF.

Skupiny 20 až 22 dnů starých krys byly ošetřeny jednou subkutánní dávkou estradiol benzoátu (2,5 pg/krysu) v rozpouštědle nebo pouze rozpouštědlem. Krysu ošetřené pouze rozpouštědlem sloužily jako nestimulovaná kontrola. Testované sloučeniny byly podávány v různou dobu před podáním estradiol benzoátu. 5 hodin po podání estradiol benzoátu byly krysy usmrceny a jejich děloha byla rozřezána a zvážena. Zvýšení hmotnosti dělohy ve skupinách léčených testovanou sloučeninou a estradiol benzoátem a estradiol benzoátem samotným bylo porovnáno za použití testu Student T. Inhibice účinku estradiol benzoátu byla považována za dostatečnou při p<0,05.

Podle dalšího aspektu se vynález týká farmaceutického prostředku, který obsahuje sloučeninu obecného vzorce I jak je definováno shora nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, společně s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou nebo nosičem.

Prostředek může být ve formě vhodné pro perorální podání, například jako tablety nebo kapsle, ve formě pro parenterální podání injekcí (včetně intravenózního, subkutánního, intramuskulárního, intravaskulámího nebo infuzního podání), například ve formě sterilního roztoku nebo sterilní suspenze nebo emulze, ve formě vhodné pro topické podání, například ve formě masti nebo krému, nebo ve formě vhodné pro rektální podání, například ve formě čípků. Obecně, shora uvedené prostředky se mohou připravit konvenčním způsobem, za použití konvenčních pomocných látek.

Prostředky podle předkládaného vynálezu jsou výhodně v jednotkové dávkové formě. Sloučenina se bude normálně podávat teplokrevnému živočichovi v jednotkové dávce s 5 až 5000 mg/m²povrchové plochy teplokrevného živočicha, tj. přibližně 0,1 až 100 mg/kg. Jednotková dávka v rozsahu například 1 až 100 mg/kg, výhodně 1 až 50 mg/kg je normální terapeuticky účinná

-23CZ 291386 B6 dávka. Jednotková dávková forma, jako je tableta nebo kapsle bude obvykle obsahovat například až 250 mg aktivní složky.

Předmětem vynálezu je rovněž sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky použitelná sůl jak je definováno shora, pro použití při způsobu léčení lidského nebo zvířecího těla terapií.

Nyní bylo zjištěno, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují účinnost VEGF receptoru tyrosin kinázy a jsou proto zajímavé pro své antiangiogenní účinky a/nebo pro svojí schopnost snižovat vaskulámí permeabilitu.

Dalším aspektem předkládaného vynálezu je sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky použitelná sůl, pro použití jako léčiva, konvenčně sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky použitelná sůl pro použití jako léčiva pro vyvolání účinku snižujícího antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeabilitu u teplokrevných živočichů, jako je člověk.

Tak podle dalšího aspektu se vynález týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky použitelné soli pro přípravu léčiva pro použití k vyvolání účinku snižujícího antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeability u teplokrevných živočichů, jako je člověk.

Podle dalšího aspektu se vynález týká způsobu vyvolání účinku snižujícího antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeability u teplokrevných živočichů, jako je člověk, v případě potřeby takového ošetření, který zahrnuje podání uvedenému živočichovi účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli, jakje definováno shora.

Jak bylo uvedeno shora, velikost dávky nutné pro terapeutické nebo profylaktické ošetření určité nemoci je nutně proměnlivá a závislí na hostiteli, který má být léčen, na způsobu podání a na vážnosti onemocnění, které má být léčeno. Výhodná denní dávka je v rozsahu 1 až 50 mg/kg. Nicméně, denní dávka bude závislá na hostiteli který má být léčen, zejména na způsobu podání a vážnosti nemoci, která má být léčena. Optimální dávku stanoví lékař ošetřující pacienta.

Léčba snížení antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeability, jak je definována shora, se může aplikovat jako jediná terapie nebo se kromě sloučenin podle vynálezu může použít navíc jedna nebo více jiných substancí a/nebo léčení. Takovéto spojení ošetření se může provést dávkováním jednotlivých složek, které se podávají současně, postupně nebo odděleně. V lékařské onkologii je normální praxe použít kombinace různých forem léčby při léčbě pacientů nemocných rakovinou. V lékařské onkologii ostatní způsoby takovéhoto spojeného ošetření spočívají v přidání k léčbě snížení antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeability definované shora mohou být: chirurgie, radioterapie nebo chemoterapie. Chemoterapie může zahrnovat tři hlavní kategorie terapeutických činidel:

(i) jiná antiangiogenní činidla, která působí jinými mechanismy než ty, které byly definovány shora (například linomid, inhibitory integrinové ανβ3 funkce, angiostatin, razoxin, thalidomid);

(ii) cytostatická činidla, jako antiestrogeny (například tamoxifen, toremifen, raloxifen, droloxifen, jodoxyfen), progesterony (například megestrol acetát), inhibitory aromatázy (například anastrozol, letrazol, vorazol, exemestan), antiprogesterony, antiandrogeny (například flutamid, nilutamid, bicalutamid, cyproteron acetát), agonisty a antagonisty LHRH (například goserelin acetát, luprolid), inhibitory testosteron 5a-dihydroreduktázy (například finasterid) antizáchvatová činidla (například inhibitory metalloproteinázy, jako marimstat a inhibitory funkce urokinázového plazminogenového aktivátorového receptoru a inhibitory funkce růstového faktoru Qako jsou růstové faktory, například EGF, FGF, od destiček odvozeného růstového faktoru a hepatocytového růstového faktoru a takové inhibitory zahrnují protilátky růstového faktoru, protilátky receptoru růstového faktoru, inhibitory tyrosin kináz a inhibitory serinových nebo threoninových kináz);

-24CZ 291386 B6 a

(iii) antiproliferační/antineoplastická léčiva a jejich kombinace jak se používají v lékařské onkologii, takové jako antimetabolity (například antifolianty, jako methotrexat, fluorpyrimidiny, jako 5-fluoruracilové, purinové a adenosinové analogy, cytosin arabinosid); protinádorová antibiotika (například antracykliny, jako doxorubicin, daunomycin, epirubicin a idarubicin, mitomycin-C, dactinomycin, mithramycin); deriváty platiny (například cisplatin, carboplatin); alkylační činidla (například mechlorethamin, melphalan, chlorambucil, busulfan, cyklofosfamid, ifosamid, nitrosomočovina, thiotepa); antimitotická činidla (například vínkové alkaloidy a taxoidy, jako taxol, taxoter); inhibitory topoisomerázy (například epipodophyllotoxiny, jako etoposid a teniposid, amsacrin, topotecan).

Jak bylo uvedeno shora, sloučeniny podle vynálezu jsou zajímavé vzhledem kjejich účinkům snížení antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeability. Očekává se, že takovéto sloučeniny budou užitečné v širokém rozmezí nemocí, včetně rakoviny, psoriázy, revmatické artritidy, Kaposiova sarkomu, hemangiomu, akutních a chronických nefropatií, atheromu, arteriální resteonózy, autoimunních nemocí, akutních zánětů a očních nemocí s retinální cévní proliferací. Zejména sloučeniny podle vynálezu snižují výhodně růst primárních a opakujících se nádorů, například tlustého střeva, prsu, prostaty, plic a kůže. Sloučeniny podle vy nálezu obzvlášť inhibují růst takových primárních a opakujících se nádorů, zejména nádorů, které jsou spojené s VEGF, zejména těch nádorů, které jsou podstatně závislé na VEGF pro svůj růst a rozšířenost, včetně například určitých nádorů tlustého střeva, prsu, prostaty, plic, vulvy a kůže.

Dále, sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I a jejich farmaceuticky použitelné soli jsou vedle svého terapeutického použití také užitečné jako farmakologický nástroj pro vývoj a standardizaci in vivo a in vitro testů pro hodnocení účinků inhibitorů VEGF receptorové tyrosinkinázy u laboratorních zvířat, jako jsou kočky, psy, králíci, opice, krysy a myši, jako část výzkumu nových terapeutických činidel.

Je třeba vzít v úvahu, že termín „ether“, pokud se používá kdekoliv popisu, znamená diethylether.

Předložený vynález je dále blíže objasněn v následujících příkladech, které jej naprosto neomezují a kde, pokud není uvedeno jinak:

(i) odpařování se provádí na vakuové rotační odparce a zpracování se provádí po odstranění zbylých pevných látek, jako jsou sušicí činidla, filtrací;

(ii) pracovní postupy se provádějí při teplotě místnosti, to je v rozmezí 18 až 25 °C, a v atmosféře inertního plynu, jako je argon;

(iii) sloupcová chromatografie (mžikovým postupem) a střednětlaká kapalinová chromatografie (MPLC) se provádí na silikagelu Měrek (9385) nebo Měrek Lichroprep RP - 18 (9303) silikagelu s reverzní fází dostupných od firmy E. Měrek, Darmstadt, Německo;

(iv) výtěžky jsou uváděny pouze pro ilustraci a nejsou tedy nutně maximálně dosažitelnými;

(v) teploty tání jsou nekorigovány a byly stanoveny za použití automatického bodotávku Mettler SP 62, olejové lázně nebo Kofflerova přístroje;

(vi) struktury konečných produktů obecného vzorce I byly potvrzeny nukleární (obvykle protonovou) magnetickou rezonancí (NMR) a hmotnostní spektrometrií, hodnoty chemického posunu protonové magnetické rezonance byly měřeny v delta stupnici a multiplicita píku je uváděna následujícím postupem: s = singlet, d = dublet, t = triplet, m = multiplet, š = široký, q = kvartet;

-25CZ 291386 B6 (vii) meziprodukty nebyly obvykle plně charakterizovány a čistota byla stanovena chromatografií v tenké vrstvě (TLC), vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC), infračervenými spektry (IR) nebo NMR analýzou;

(viii) jsou používány následující zkratky:

DMF DMSO DMA TFA = N.N-dimethylformamid = dimethylsulfoxid = N,N-dimethylacetamid = trifluoroctová kyselina.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Izopropanolový roztok chlorovodíku (0,1 ml 5M roztoku) se přidá k roztoku 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolinu (202 mg, 0,9 mmol) a 4-brom-2-fluor-5-hydroxyanilinu (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) (206 mg, 1 mmol) v butanolu (8 ml). Směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 45 minut a potom se nechá ochladit. Vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se 2-butanolem a potom etherem a suší se ve vakuu a získá se hydrát hydrochloridu 4-(4-brom2-fluor-5-hydroxyanilino}-6,7-dimethoxychinazolinu (340 mg, 87 %) jako bílá pevná látka.

teplota tání 265 až 270 °C 'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 4,0 (2s, 6H), 7,13 (d, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,64 (d, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,8 (s, 1 Η), 10,6 (s, 1 Η), 11,3 (s, 1H)

MS - ESI: 394 až 396 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₆H_l3BrFN₃O₃.1HC1.1,05H₂O

Nalezeno: C 43,42% H3,68% N 9,33 %

Vypočteno: C 42,75 % H 3,61 % N 9,35 %

Výchozí materiál se připraví následujícím postupem:

Směs 4,5-dimethoxyantranilové kyseliny (19,7 g) a formamidu (10 ml) se míchá a zahřívá na teplotu 190 °C po dobu 5 hodin. Směs se nechá ochladit na přibližně 80 °C a přidá se voda (50 ml). Směs se nechá stát při okolní teplotě po dobu 3 hodin. Sraženina se izoluje, promyje se vodou a sušením se získá 6,7-dimethoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-on (3,65 g).

Směs části (2,06 g) takto získaného materiálu, thionylchloridu (20 ml) a DMF (1 kapka) se míchá a zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se promyje vodou, suší se (MgSO₄) a odpaří se. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií za použití postupně polárnějších směsí methylenchloridu a ethylacetátu jako elučního činidla a získá se 4-chlor6,7-dimethoxychinazolin (0,6 g, 27 %).

-26CZ 291386 B6

Příklad 2

Pevný hydroxid sodný (71 mg, 1,2 mmol) a potom 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolin (0,25 g, 1,1 mmol), (připravený jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1) se přidají k roztavenému 2,4-dihydroxytoluenu (0,6 g, 4,8 mmol) při teplotě 140 °C. Směs se míchá při teplotě 140 °C po dobu 15 minut a potom se ochladí. Směs se zředí vodou a okyselí se na pH 4 a potom se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se promyje solankou, suší se (MgSO4) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Surový produkt se prvně čistí mžikovou chromatografii eluováním směsí petroletheru a ethylacetátu v poměru 1:9 a potom absorpční HPLC eluováním směsí trichlormethanu a acetonitrilu v poměru 85:15 a získá se 6,7-dimethoxy-4-(3-hydroxy-4-methylfenoxy)chinazolin (116 mg, 34 %).

teplota tání 213 až 216 °C 'H NMR spektrum: (CDC1₃) 2,22 (s, 3H), 4,05 (s, 6H), 6,6 (s, 1H), 6,69 (dd, 1H), 7,2 (d, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 8,35 (Š s, 1H), 8,65 (s, 1H)

MS-ESI: 313 [313]

Elementární analýza:

C17H16N2O4

Nalezeno: C 65,36 % H 5,53 % N 8,92 %

Vypočteno: C 65,38 % H5,16% N 8,97 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Bromid boritý (3,1 ml, 3,2 mmol) se přidá k roztoku 2,4-dimethoxytoluenu (1 g, 6,5 mmol) v pentanu (10 ml) při teplotě -70 °C. Reakční směs se nechá ohřát na okolní teplotu a směs se míchá další 2 hodiny. Potom se přidá ledová voda a ethylacetát a vodná vrstva se alkalizuje na pH 9,5 pomocí 2M hydroxidu sodného. Směs se míchá 10 minut. Směs se míchá 10 minut, organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem. Spojený organický extrakt se promyje solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí mžikovou chromatografii eluováním směsí methylenchloridu a ethylacetátu v poměru 9:1 a získá se 2,4-dihydroxytoluen (759 mg, 94 %) jako bílá pevná látka.

Příklad 3

Jako část postupu popsaném v příkladu 2 se druhá sloučenina extrahuje během absorpční HPLC eluováním směsí trichlormethanu a acetonitrilu v poměru 75:25 a získá se 6,7-dimethoxy-4-(5hydroxy-2-methylfenoxy)chinazolin (123 mg, 36 %).

teplota tání 231 až 239 °C 'HNMR spektrum (CDCl₃)2,l (s, 3H), 4,05 (s, 6H), 6,6 (s, 1H), 6,72 (dd, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 8,65 (s, 1H)

MS-ESI: 313 [MH]⁺

-27CZ 291386 B6

Elementární analýza:

C_I7H₁₆N₂0₄.0,1H₂0

Nalezeno: C 65,05 %

Vypočteno: C 65,00 %

H 5,68 %

H 5,20 %

N 8,6 %

N 8,92 %

Příklad 4

Směs 4-(4-chlor-2-fluorfenoxy)-7-hydroxy-6-methoxychinazolinu (160 mg, 0,5 mmol), 2bromethylmethyletheru (83 mg, 0,6 mmol) a uhličitanu draselného (207 mg, 1,5 mmol) v DMF (3 ml) se zahřívá na teplotu 180 °C po dobu 45 minut. Reakční směs se nechá ochladit, zředí se vodou a okyselí se na pH 3,5. Vodná směs se extrahuje ethylacetátem a organický extrakt se 15 promyje vodou a solankou a suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí mžikovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a etheru v poměru 7:3 a získá se 4-(4-chlor-2-fluorfenoxy)-7-(2-methoxyethoxy)-6-methoxychinazolin (138 mg, 68 %).

teplota tání 167 až 168 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,76 (t, 2H), 3,99 (s, 3H), 4,34 (t, 2H), 7,4 (d, 1H), 7,44 (s, 1H),

7,56 (t, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,70 (dd, 1H), 8,56 (s, 1H)

MS-ESI: 379 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₈H₁₆FC1N₂0₄.0,1H₂0

Nalezeno: C 57,03% H4,53% N 7,41 %

Vypočteno: C 56,81% H4,29% N7,36%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs 2-amino-4-benzyloxy-5-methoxybenzamidu (J. Med. Chem. 1977, díl 20, 146 až 149, 10 g, 0,04 mol) a Goldova činidla (7,4 g, 0,05 mmol) v dioxanu (100 ml) se míchá a zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin. K. reakční směsi se přidá octan sodný (3,02 g, 0,037 mol) a kyselina octová (1,65 ml, 0,029 mol) a směs se zahřívá další 3 hodiny. Směs se odpaří, ke zbytku se přidá voda, pevná látka se odfiltruje, promyje se vodou a suší. Rekrystalizací z kyseliny 40 octové se získá 7-benzyloxy-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-on (8,7 g, 84 %).

Směs 7-benzyloxy-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (2,82 g, 0,01 mol), thionylchloridu (40 ml) a DMF (0,28 ml) se míchá a zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Směs se odpaří a azeotropicky se destiluje s toluenem a získá se hydrochlorid 7-benzyloxy-445 chlor-6-methoxychinazolinu (3,45 g).

4-Chlor-2-fluorfenol (264 mg, 1,8 mmol) se přidá k roztoku hydrochloridu 7-benzyloxy-4chlor-6-methoxychinazolinu (506 mg, 1,5 mmol) v pyridinu (8 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 45 minut. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se rozdělí mezi 50 ethylacetát a vodu. Organická vrstva se promyje 0,lM HC1, vodou a solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Pevná látka se rozetře s petroletherem a surový produkt se sebere filtrací a čistí se mžikovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a etheru v poměru 9:1 a získá se 7-benzyloxy-4-(4-chlor-2-fluorfenyl)-6-methoxychinazolin (474 mg, 77 %) jako krémová pevná látka.

-28CZ 291386 B6 teplota tání 179 až 180 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,99 (s, 3H), 5,36 (s, 2H), 7,35- 7,5 (m, 4H), 7,55-7,65 (m,5H), 7,72 (d, 1H), 8,6 (s, 1H)

MS-ESI: 411 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₂₂H₁₆C1FN₂03.0,06H₂0.0,05CH₂C1₂

Nalezeno: C 63,8 % H4,7% N 6,78 %

Vypočteno: C 63,64 % H 3,93 % N 6,73 %

Roztok 7-benzyloxy-4-(4-chlor-2-fluorfenoxy)-6-methoxychinazolinu (451 mg, 1,1 mmol) v TFA (4,5 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Směs se zředí toluenem a těkavé podíly se odstraní odpařením. Zbytek se rozetře s methylenchloridem, sebere se filtrací, promyje se etherem a suší se ve vakuu a získá se 4-(4-chlor-2-fluorfenoxy)-7-hydroxy-6methoxychinazolin (320 mg, 90 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 4,0 (s, 3H), 7,27 (s, 1H), 7,43 (dd, 1H), 7,56 (t, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,72 (dd, 1H), 8,5 (s, 1H)

MS-ESI: 321 [MH]⁺

Příklad 5

4-Chlor-6,7-dimethoxychinazolin (200 mg, 0,89 mmol) (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1) se přidá k roztoku 3-hydroxybenzenthiolu (168 mg, 1,3 mmol) a N,N-diizopropylethylaminu (23 μΐ, 1,3 mmol) v DMF (5 ml). Po zahřívání na teplotu 40 °C po dobu 10 minut se reakční směs nechá ochladit, zředí se vodou, okyselí se na pH 3 a směs se extrahuje ethylacetátem. Organický extrakt se promyje solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se rekrystaluje ze směsi ethanolu a etheru a získá se 6,7-dimethoxy-4-(3hydroxyfenylthio)chinazolin (259 mg, 93 %) jako bílá pevná látka.

teplota tání 221 až 230 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 4,0 (2s, 6H), 6,9 (dd, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,07 (d, 1H), 7,34 (t, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 8,7 (s, 1H), 9,8 (š s, 1H)

MS-ESI: 315 [MH]⁺

Elementární analýza:

CkHuNAS

Nalezeno: C 61,06 % H 4,61 % N 8,95 %

Vypočteno: C 61,13 % H 4,49 % N 8,91 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Bromid boritý (1,4 ml, 14 mmol) se přidá k roztoku 3-methoxybenzenthiolu (1 g, 7,1 mmol) v methylenchloridu (10 ml) při teplotě 0 °C. Směs se nechá ohřát na okolní teplotu a míchá se dalších 60 minut. Reakční směs se zředí ethylacetátem a vodou a alkalizuje se vodným 2M rozto

-29CZ 291386 B6 kem hydroxidu sodného na pH 9. Směs se potom extrahuje ethylacetátem, spojené extrakty se promyjí solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí mžikovou chromatografií eluováním směsí petroletheru a ethylacetátu v poměru 8:2 a získá se 3hydroxybenzothiol (819 mg, 91 %).

'HNMR spektrum: (CDC1₃) 3,42 (s, 1H), 4,85 (š s, 1H), 6,6 (d, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,1 (t, 1H)

Příklad 6

Koncentrovaný vodný amoniak (5 ml) se přidá k roztoku 4-(5-acetoxy-4-chlor-2-fluoranilino)6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (180 mg, 0,4 mmol) v methanolu (50 ml). Směs se míchá při okolní teplotě po dobu 3 hodin a potom se zředí vodou. Většina methanolu se odstraní odpařením a vzniklá sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se a získá se 4-(4chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin (73 mg, 45 %).

teplota tání >250 °C 'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 3,29 (s, 3H), 3,74 (t, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,28 (t, 2H), 7,15 (d, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 9,40 (s, 1H)

MS-ESI: 394 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₈Hi₇N₃C1FO₄.1,6H₂O

Nalezeno: C 51, l % H 4,6 % N 9,8 %

Vypočteno: C51,2% H 4,8 % N9,9%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (2,5 g, 15 mmol) (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) a 7-benzyloxy-4-chlor-6-methoxychinazolinu (4,2 g, 14 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 4 ale se zpracováním vodou) v izopropanolu se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit a pevný produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 7-benzyloxy-4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxychinazolinu (4,8 g, 81 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,98 (s, 3H), 5,18 (s, 2H), 7,05 (d, 1H), 7,18 - 7,27 (m, 7H), 8,06 (s, lH),8,38(s, 1H).

Triethylamin (216 ml, 1,5 mmol) a potom anhydrid kyseliny octové (133 ml, 1,4 mmol) se přidají k míchané suspenzi hydrochloridu 7-benzyloxy-4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyaniIino)-6methoxychinazolinu (600 mg, 1,4 mmol) v methylenchloridu (7 ml). Směs se míchá při okolní teplotě po dobu 3 hodin a nerozpustný materiál se odstraní filtrací. Těkavé podíly se odstraní z filtrátu odpařením a zbytek se čistí mžikovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 100:0 v polaritu 97:3 a získá se 4-(5-acetoxy-4-chlor-2-fluoranilino)-7-benzyloxy-6-methoxychinazolin (340 mg, 52 %) jako pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,34 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 5,28 (s, 2H), 7,28 (s, 1H), 7,35 - 7,44 (m, 2H), 7,50 (d, 2H), 7,58 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,30 (s, 1H)

MS-ESI: 468 [MH]⁺

-30CZ 291386 B6

Roztok 4-(5-acetoxy-4-chlor-2-fluoranilino)-7-benzyloxy-6-methoxychinazolinu (250 mg, 0,54 mmol) v methanolu (5 ml), trichlormethanu (5 ml) a DMF (1 ml) se míchá pod vodíkem při 0,098 MPa s 5% palladiem na aktivním uhlí jako katalyzátorem (100 mg) po dobu 4 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, promyje se vodou a solankou a suší se (MgSO₄). Většina rozpouštědla se odstraní odpařením, směs se ochladí a přidá se hexan a získá se pevný produkt, který se sebere filtrací, promyje se směsí hexanu a ethylacetátu a sušením se získá 4-(5-acetoxy-

4- chlor-2-fluoranilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolin (170 mg. 45 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,37 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 7,08 (s, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,48 (s, 1H).

l-l'-(Azodikarbonyl)dipiperidin (413 mg, 1,6 mmol) se přidá po částech při teplotě 0 °C k míchané směsi 4-(5-acetoxy-4-chlor-2-fluoranilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolinu (250 m, 0,66 mmol), 2-methoxyethanolu (63 ml, 0,8 mmol) a tributylfosfinu (405 ml, 1,6 mmol) v methylenchloridu. Vzniklý roztok se nechá ohřát na okolní teplotu a míchá se po dobu 2 hodin. Vysrážená pevná látka se odstraní filtrací, rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením a zbytek se čistí mžikovou chromatografií eluováním směsí acetonitrilu a methylenchloridu (směs 1:9, až postupně polárnější směs 4:6) a získá se 4-(5-acetoxy-4-chlor-2-fluoranilino)-6-methoxy-7(2-methoxy)chinazolin (180 mg, 62 %), jako pevná látka.

'H NMR spektrum: (DMSOd₅) 2,35 (s, 3H), 3,33 (s, 3H), 3,75 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,28 (t, 2H), 7,22 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,39 (s. 1H), 9,60 (s, 1H)

MS - ESI: 436 [MH]⁺

Příklad 7

Směs hydrochloridu 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolinu (2,1 g, 8 mmol), (připravena jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1, ale bez zpracování vodou) a 4-chlor-2-fluor-5hydroxyanilinu (1,43 g, 8,9 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 Al), v izopropanolu (150 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit, pevný produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a sušením se získá hydrochlorid 4-(4-chlor-2-fluor-

5- hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolinu (1,45 g, 47 %).

teplota tání >250 °C ‘H NMR spektrum: (DMSOd₆) 4,0 (s, 6H), 7,17 (d, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,80 (s,lH)

MS - ESI: 350 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₆H₁₃N₃C1FO₃.1HCI

Nalezeno: C 49,2 % H 3,7 % N10,9%

Vypočteno: C49,7% H3,6% N10,9%

-31 CZ 291386 B6

Příklad 8

Směs hydrochloridu 4-€hlor-6,7-dimethoxychinazolinu (2,5 g, 9,6 mmol), (připravena jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1, ale bez zpracování vodou) a 2-fluor-5-hydroxy-4methylanilinu (1,48 g, 10,5 mmol) v izopropanolu (150 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit, pevný produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy—l-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolinu (2,2 g, 71 %).

teplota tání >250 °C ‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,15 (s, 3H), 3,99 (s, 6H), 6,88 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,32 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 9,66 (s, 1H)

Elementární analýza:

C₁₇Hi₆N₃FO₃.lHC1.0,65C₃H₈O

Nalezeno: C 56,3 % H 5,4 % N 10,4 %

Vypočteno: C 56,3 % H 5,5 % N10,4%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Methylchlorformiát (6,8 ml, 88 mmol) se přidá v průběhu 30 minut a při teplotě 0 °C k roztoku 4-fluor-2-methylfenolu (10 g, 79 mmol) v 6% vodném hydroxidu sodném. Směs se míchá po dobu 2 hodin a potom se extrahuje ethylacetátem (100 ml). Ethylacetátový extrakt se promyje vodou (100 ml) a suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 4-fluor-2methylfenylmethylkarbonát (11,4 g, 78 %) jako olej.

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,14 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 7,05 (m, 1H), 7,1 - 7,25 (m, 2H)

Směs koncentrované kyseliny dusičné (6 ml) a koncentrované kyseliny sírové (6 ml) se přidá pomalu k roztoku 4-fluor-2-methylfenylmethylkarbonátu (11,34 g, 62 mmol) v koncentrované kyselině sírové (6 ml), tak, aby se teplota reakční směsi se udržovala pod 50 °C. Směs se míchá 2 hodiny a potom se přidá směs ledu a vody a vysrážený produkt se sebere filtrací. Surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu eluováním postupně polárnější směsí methylenchloridu a hexanu (1:19) a získá se 4-fluor-2-methyl-5-nitrofenol (2,5 g, 22 %) jako pevná látka.

'HNMRspektrum: (DMSOd₆, CD₃CO₂D)2,31 (s,3H), 7,38 (d, 1H), 7,58 (d, 1H)

MS-ESI: 171 [MH]⁺

Směs 4-fluor-2-methyl-5-nitrofenolu (2,1 g, 13 mmol), železného prášku (1 g, 18 mmol) a síranu železnatého (1,5 g, 10 mmol) ve vodě (40 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem 4 hodiny. Reakční směs se nechá zchladnout, neutralizuje se 2M vodným hydroxidem sodným a extrahuje se ethylacetátem (100 ml). Ethylacetátový roztok se suší (MgSO₄) a rozpouštědlo se odpaří a získá se 2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilin (0,8 g, 47 %) jako pevná látka.

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 1,94 (s, 3H), 4,67 (s, 2H), 6,22 (d, 1H), 6,65 (d, 1H), 8,68 (s, 1H)

MS-ESI: 142 [MH]⁺

-32CZ 291386 B6

Příklad 9

Směs 4-chlor-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (76 mg, 0,28 mmol) a 2-fluor-5hydroxy-4-methylanilinu (40 mg, 0,28 mmol) (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 8) v izopropanolu (2,5 ml) se míchá a zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 7 hodin. Reakční směs se nechá zchladnout a vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6methoxy-7-(2-methoxy)chinazolinu (79 mg, 66 %) jako bílá pevná látka.

teplota tání >275 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,19 (s, 3H), 3,36 (s. 3H), 3.80 (m, 2H), 4,00 (s, 3H), 4,33 (m, 2H), 6,90 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,37 (s, 1H), 8,20 (s. 1H). 8,75 (s, 1H), 9,65 (š s, 1H), 11,25 (š s, 1H)

MS-ESI: 374 [MH]*

Elementární analýza:

C19H20N3F4O.IHCI

Nalezeno: C 55,7 % H4,8% N 10,1 %

Vypočteno: C 55,7 % H 5,2 % N 10,3 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs ethyl 4-hydroxy-3-methoxybenzoátu (9,8 g, 50 mmol), 2-bromethylmethyletheru (8,46 ml, 90 mmol) a uhličitanu draselného (12,42 g, 90 mmol) v acetonu (60 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 30 hodin. Směs se nechá ochladit a pevné látky se odstraní filtrací. Těkavé podíly se odstraní z filtrátu odpařením a zbytek se rozetře s hexanem a získá se ethyl 3-methoxy-4-(2-methoxyethoxy)benzoát (11,3 g, 89 %) jako bílá pevná látka.

teplota tání 57 až 60 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆)l,31 (t, 3H), 3,29 (s, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,68 (m,2H), 4,16 (m, 2H), 4,28 (q, 2H), 7,06 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,56 (dd, 1H)

MS-FAB: 255 [MH]⁺

Ethyl 3-methoxy-4-(2-methoxyethoxy)benzoát (9,5 g, 37 mmol) se přidá po částech k míchané koncentrované kyselině dusičné (75 ml) při teplotě 0 °C. Směs se nechá ohřát na okolní teplotu a míchá se dalších 90 minut. Směs se zředí vodou a extrahuje se methylenchloridem, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se rozetře v hexanu a získá se ethyl 5-methoxy-4-(2-methoxyethoxy)-2-nitrobenzoát (10,6 g, 95 %) jako oranžová pevná látka.

teplota tání 68 až 69 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 1,27 (t, 3H), 3,30 (s, 3H), 3,69, (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,25 (m, 2H), 4,29 (q, 2H), 7,30 (s, 1H), 7,65 (s, 1H)

MS-Cl: 300 [MH]⁺

Směs ethyl 5-methoxy-4-(2-methoxyethoxy)-2-nitrobenzoátu (10,24 g, 34 mmol), cyklohexenu (30 ml) a 10% palladia na aktivním uhlí (2,0 g) v methanolu (150 ml) jako katalyzátoru se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Reakční směs se nechá ochladit a zředí se

-33CZ 291386 B6 methylenchloridem. Katalyzátor se odstraní filtrací a těkavé podíly se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se rekrystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanu a získá se 2-amino-5-methoxy-4(2-methoxyethoxy)benzoát (8,0 g) jako bledě žlutá pevná látka. K tomuto produktu se přidá formamid (80 ml) a směs se zahřívá na teplotu 170 °C po dobu 18 hodin. Okolo poloviny rozpouštědla se odstraní odpařením za vysokého vakua a zbytek se nechá stát přes noc. Pevný produkt se sebere filtrací, promyje se etherem a suší se a získá se 6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-on (5,3 g, 62 % ve dvou stupních) jako šedá pevná látka.

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆)3,35 (s, 3H), 3,74 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,26 (m, 2H), 7,15 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 12,03 (š s, 1H)

MS-Cl: 251 [MH]⁺

DMF (0,5 ml) se přidá ke směsi 6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4onu (5,1 g, 20 mmol) v thionylchloridu (50 ml). Směs se míchá a zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin, nechá se ochladit a přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením. Zbytek se suspenduje v methylenchloridu a promyje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze se extrahuje methylenchloridem a spojené extrakty se suší (MgSC^). Surový produkt se rekrystaluje ze směsi methylenchloridu a hexanu a získá se 4-chlor-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin (2,8 g, 51 %) jako čistá bílá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,37 (s, 3H), 3,77 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,37 (m, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 8,88 (s, 1H)

MS-Cl: 269 [MH]⁺

Příklad 10

Směs hydrochloridu 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolinu, (152 mg, 0,6 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1, ale bez zpracování vodou) a 4-brom-2,6-difluoranilinu (121 mg, 0,6 mmol) v izopropanolu (7 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit, pevný produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6,7-dimethoxychinazolinu (81 mg, 35 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 4,0 (s x 2, každý 3H), 7,2 (s, 1H), 7,35 (d, 2H), 8,2 (s, 1H), 8,9 (s, 1H), 11,8 (š s, 1H)

MS-ESI: 396 [MH]⁺

Příklad 11

Hydrochlorid 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolinu (300 mg, 1,15 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1, ale bez zpracování vodou) a 2,4-difluor-5-hydroxyanilin (184 mg, 0,90 mmol) v izopropanolu (10 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Reakční směs se nechá ochladit, vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolinu (250 mg, 65 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,99 (s, 6H), 7,05 (dd, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,40 (dd, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,68 (s, 1H)

MS-ESI: 334 [MH]⁺

-34CZ 291386 B6

Elementární analýza:
C₁₆H₁₃N₃O₃F₂.1HC1
Nalezeno: C51,8%	H 3,9 %	N 11,3%
Vypočteno: C 52,0 %	H 3,8 %	N 11,4%
Výchozí materiál se připraví	následovně:

Methylchlorformiát (16,35 ml, 0,173 mmol) se přidá k roztoku 2,4-difluorfenolu (25 g, 0,192 mol) a hydroxidu sodného (8,1 g, 0,203 mol) ve vodě (140 ml). Směs se míchá při okolní teplotě po dobu 2 hodin a potom se extrahuje ethylacetátem. Extrakt se promyje vodou, suší se (MgSO₄) a těkavé podíly se odstraní odpařením a získá se 2,4-difluor-l-methoxykarbonyloxybenzen (32 g, 89 %).

‘H NMR spektrum: (DMSOd₆) 3,85 (s, 3H), 7,64 (d, 2H), 7,72 (d, 1H)

Směs koncentrované kyseliny dusičné (4 ml) a koncentrované kyseliny sírové (4 ml) se přidává pomalu k ochlazené směsi 2,4-difluor-l-methoxykarbonyloxybenzenu (5,0 g, 0,027 mmol) v koncentrované kyselině sírové (4 ml) tak, aby se reakční teplota udržovala pod 30 °C. Směs se míchá další 3 hodiny, zředí se směsí ledu a vody a vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se a získá se 2,4-difluor-5-methoxykarbonyloxy-l-nitrobenzen (2,8 g, 45 %).

’HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,85 (s, 3H), 7,97 (dd, 1H), 8.44 (dd, 1H)

Směs 2,4-difluor-5-methoxykarbonyloxy-l-nitrobenzenu (2,7 g, 0,012 mol) a 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (500 mg) v ethanolu (20 ml) a ethylacetátu (10 ml) se míchá pod atmosférou vodíku po dobu 4 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 2,4-difluor-5-methoxykarbonylanilin (2,3 g, 97 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 3,82 (s, 3H), 5,20 (s, 2H), 6,65 (dd, 1H), 7,20 (dd, 1H)

MS - ESI: 204 [MH]⁺

Koncentrovaný vodný amoniak (20 ml) se přidá k roztoku 2,4-difluor-5-methoxykarbonyloxyanilinu (2,0 g, 9,85 mmol) v ethanolu (100 ml) a směs se míchá při okolní teplotě po dobu 3 hodin. Reakční směs se zředí vodou a většina organických těkavých látek se odstraní odpařením. Vodný zbytek se neutralizuje na pH 7 a extrahuje se ethylacetátem. Extrakty se promyjí vodou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 2,4-difluoro-5hydroxyanilin (1,2 g, 85 %).

‘H NMR spektrum: (DMSOd₆) 4,78 (s, 2H), 6,34 (t, 1H), 6,87 (t, 1H), 9,23 (s, 1H)

MS-ESI: 145 [MH]⁺

Příklad 12

6-Methoxy-7-(2-methoxyethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-on (200 mg, 0,8 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 9) a DMF (0,1 ml) v thionylchloridu (20 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se rozpustí v izopropanolu (15 ml), přidá se 2,4-difluor-5-hydroxyanilin (128 mg, 0,88 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí mate

-35CZ 291386 B6 riál v příkladu 11) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Reakční směs se nechá ochladit, sraženina se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (83 mg, 28 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)3,35 (s, 3H), 3,77 (t,2H), 4,00 (s, 3H), 4,30 (t, 2H), 7,10 (dd, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,40 (t, 2H), 8,20 (s, 1H), 8,78 (d, 2H)

MS-ESI: 378 [MH]⁺

Elementární analýza:

C_lgHi7N3O₄F₂.lHCl

Nalezeno: C51,8% H4,2% N 10,1 %

Vypočteno: C 52,2 % H4,4% N10,2%

Příklad 13

Směs 7-(2-acetoxyethoxy)-4-( 5-benzyloxy-2-fluor-4-methylan i 1 ino)-6-methoxych inazol inu (133 mg, 0,27 mmol) a 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (50 mg) v ethylacetátu (8 ml) se míchá 0,098 MPa vodíku při okolní teplotě po dobu 18 hodin. Katalyzátor se odfiltruje přes infuzóriovou hlinku a většina rozpouštědla se odstraní odpařením a ke zbytku se přidá hexan. Vzniklá sraženina se sebere filtrací a suší se a získá se 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(2-fluor5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin (16 mg, 15 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,05 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 4,3 - 4,4 (m, 4H), 6,90 (d, 1H), 6,98 (d, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 9,15 (s, 2H)

MS-ESI: 402 [MH]⁺

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs 4-fluor-2-methyl-5-nitrofenolu (4,69 g, 27 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v přikladu 8), benzylbromidu (3,59 ml, 30 mmol) a uhličitanu draselného (7,58 g, 55 mmol) v DMF (100 ml) se zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 4 hodin. Reakční směs se nechá ochladit a zředí se vodou a míchá se 15 minut. Srážený produkt se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se a získá se 5-benzyloxy-2-fluor-4-methyl-l-nitrobenzen (6,4 g, 89 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,28 (s, 3H), 5,22 (s, 2H), 7,3 - 7,5 (m, 6H), 7,70 (s, 1H)

5-Benzyloxy-2-fluor—4-methyl-l-nitrobenzen (500 mg, 1,9 mmol) v methanolu (10 ml) se přidá k suspenzi Raneyova niklu (75 g) a hydrazinhydrátu (465 ml, 9,5 mmol) v methanolu (10 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem. Směs se udržuje pod zpětným chladičem po dobu 15 minut a nerozpustné materiály se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku. Filtrační polštářek se promyje methanolem a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením a získá se 5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilin (440 mg, 99 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,02 (s, 3H), 4,88 (s, 2H), 4,98 (s, 2H), 6,44 (d, 1H), 6,76 (d, 1H), 7,3 - 7,5 (m, 5H)

Směs 7-benzyloxy-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (5,0 g), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 4), acetanhydridu (200 ml), octanu sodného (12 g), 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (1,5 g) v toluenu (100 ml) se míchá pod atmosférou vodíku po

-36CZ 291386 B6 dobu 3 hodin. Směs se filtruje a filtrát se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi směs ethylacetátu (500 ml), methanolu (20 ml) a vody (300 ml). Organická fáze se oddělí, suší (MgSO4) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se rozetře s hexanem a získá se 7-acetoxy-6-methoxy-3,4dihydrochinazolin-4-on (1,1 g, 27 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,29 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 7,42 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 8,1 (š s, 1H)

MS - ESI: 235 [MH]⁺

Směs 7-acetoxy-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (l,69g, 7,2 mmol), thionylchloridu (50 ml) a DMF (3 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se rozdělí mezi methylenchlorid a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se oddělí, suší (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Ke zbytku se přidá 5-benzyloxy-2fluor-4-methylanilin (1,8 g, 7,8 mmol) v izopropanolu (50 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit, přidá se hexan a vysrážený produkt se sebere filtrací a získá se 7-acetoxy-4-(5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin (1,34 g, 43 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,24 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 5,10 (s, 2H), 7,1 - 7,5 (m, 7H), 7,75 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,77 (s, 1H)

Koncentrovaný vodný amoniak (25 ml) se přidá k roztoku 7-acetoxy-4-(5-benzyloxy-2-fluor4-methylanilino)-6-methoxychinazolinu (1,5 g, 3,4 mmol) v methanolu (100 ml). Směs se míchá při okolní teplotě po dobu 30 minut a většina organických těkavých látek se odstraní odpařením. Přidá se další voda a sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se a získá se 4-(5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolin (1,2 g, 89 %), který se použije bez další charakterizace.

Směs 4-(5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolinu (440 mg, mmol), 2-bromethanolu (77 ml, 1 mmol) a uhličitanu draselného (150 mg, 1,1 mmol) v DMF (5 ml) se zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 1 hodiny. Potom se přidá další 2-bromethanol (42 ml, 0,6 mmol) a uhličitan draselný (150 mg, 1,1 mmol) a směs se udržuje při teplotě 50 °C po dobu hodin. Reakční směs se zředí vodou, neutralizuje se 2M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se ethylacetátem. Extrakty se suší (MgSO₄), rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se rozetře s etherem a hexanem a získá se 4-(5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolin (200 mg, 41 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,21 (s, 3H), 3,80 (t, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,14 (t, 2H), 4,90 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 7,05 - 7,2 (m, 2H), 7,25 - 7,45 (m, 5H), 7,79 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 9,20 (s, 1H)

Anhydrid kyseliny octové (55 ml, 0,58 mmol) se přidá ke směsi 4-(5-benzyloxy-2-fluor-4methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolinu (233 mg, 0,52 mmol), triethylaminu (80 ml, 0,57 mmol) a 4-(N,N-dimethylamino)pyridinu (5 mg) v ethylacetátu (50 ml). Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 2 hodin, přidá se voda, organická vrstva se oddělí, promyje se vodou a solankou a suší se (MgSO₄). Většina rozpouštědla se odstraní odpařením a přidá se hexan. Sražený produkt se sebere filtrací a získá se 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(5benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin (110 mg, 43 %) *H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,03 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 4,3 - 4,4 (m, 4H), 5,08 (s, 2H), 7,13 (d, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,3 - 7,45 (m, 5H), 7,80 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 9,42 (s, 1H)

-37CZ 291386 B6

Příklad 14

Směs 4-(5-benzyloxy-2-fluor-4-methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolinu (150 mg, 0,33 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí látku v příkladu 13) a 10% palladium na aktivním uhlí jako katalyzátor (20 mg) v ethylacetátu (8 ml) se míchá pod 0.098 MPa vodíku při okolní teplotě po dobu 18 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku a většina rozpouštědla se odstraní odpařením a ke zbytku se přidá hexan. Vzniklá sraženina se sebere filtrací, suší se a získá se 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolin (50 mg, 41 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,14 (s, 3H), 3,80 (q, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,15 (t, 2H). 4.90 (t, 1H), 6,90 (d, 1H), 7,00 (d, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 9,32 (s, 1H), 9,37 (s, 1H)

MS - ESI: 360 [MH]⁺

Příklad 15

Hydrochlorid 4-chlor-6,7-dimethoxychinazolinu (210 mg, 0,8 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 1, ale bez zpracování vodou), a hydrochlorid 4-chIor-2,6-difluoranilinu (177 mg, 0,89 mmol) v izopropanolu (8 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Reakční směs se nechá ochladit, přidá se hexan a vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem, suší se a získá se hydrochlorid 4-(4-chlor-2,6-difluoranilino)-6,7-dimethoxychinazolinu (45 mg, 16 %).

teplota tání >250 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 4,00 (s, 3 H), 4,01 (s, 3H), 7,35 (s, 1H), 7,63 (d, 2H), 8,22 (s, 1H), 8,81 (s, 1H)

MS-ESI: 352 [MH]⁺

Výchozí materiál se připraví následovně:

Roztok 3,5-difluornitrobenzenu (20 g, 126 mmol) a ethyldichloracetátu (15,8 ml, 129 mmol) v DMF (60 ml) se přidá při teplotě -25 °C v průběhu 30 minut k terc.butoxidu draselnému (31,8g, 283 mmol) v DMF (500 ml). Směs se míchá po dobu 15 minut při teplotě -25 °C a potom se vlije do směsi ledu (600 g) a 2M kyseliny chlorovodíkové (500 ml). Vodná směs se extrahuje ethylacetátem, spojené extrakty se promyjí vodou a roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se ethyl 2-chlor-2(2,6-difluor-4-nitrofenyl)ethanoát (34 g, 97 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 1,15 (t, 3H), 4,1 - 4,3 (m, 2H), 6,44 (s, 1H), 8,17 (d, 2H)

2,5M vodný roztok hydroxidu sodného (300 ml) se přidá během 5 minut při teplotě 5 °C k roztoku ethyl 2-chlor-2-(2,6-difluor-4-nitrofenyl)ethanoátu (34,86 g, 125 mmol) v ethanolu (300 ml) tak, aby se reakční teplota udržela pod 25 °C. Směs se ochladí na teplotu 18 °C a přidá se 30% peroxid vodíku (40 ml). Směs se míchá při teplotě 20 °C po dobu 2,5 hodiny. Přidá se siřičitan sodný, dokud není test na peroxid vodíku negativní. Směs se okyselí na pH 1 pomocí 6M kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se ethylacetátem. Organické extrakty se zpětně extrahují nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodné extrakty se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a extrahují se ethylacetátem. Extrakty se suší (MgSO4) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 2,6-difluor—4-nitrobenzoová kyselina (4,89 g, 19%).

-38CZ 291386 B6 'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 8.14 (d, 2H)

Směs 2,6-difluor-4-nitrobenzoové kyseliny (2,5 g, 12 mmol) a 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (500 mg) v ethanolu (150 ml) se míchá při 0,098 MPa vodíku při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku, filtrační polštářek se promyje ethanolem, rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 4-amino-2,6-difluorbenzoová kyselina (3,8 g, 91 %).

'H NMR spektrum: (DMSOde) 6,12 (d, 2H), 6,28 (s, 2H)

MS-ESI: 174 [MH]⁺

Roztok dusitanu sodného (220 mg, 3,18 mmol) v koncentrované kyselině sírové (2 ml) se přidá během 15 minut k suspenzi 4-amino-2,6-difluorbenzoové kyseliny (550 mg, 3,18 mmol) v kyselině octové (6 ml) při teplotě 15 °C. Směs se míchá pří teplotě 15 °C po dobu 1 hodiny a potom se zahřívá na 90 °C a vlije se do roztoku chloridu měďného (800 mg) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (11 ml) při teplotě 95 °C. Směs se zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 45 minut a potom se nechá ochladit. Směs se zředí vodou, extrahuje se ethylacetátem, organická vrstva se suší (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 4-chlor-2,6-difluorbenzoová kyselina (600 mg, 98 %).

’H NMR spektrum: (DMSOd₆) 7,50 (d, 2H)

MS-ESI: 192 [MH]⁺

4-Chlor-2,6-difluorbenzoová kyselina (500 Mg, 2,6 mmol) se přidá k roztoku difenylfosfory 1azidu (737 mg, 3 mmol) v terc.butanolu (8 ml), a přidá se triethylamin (477 ml, 6 mmol) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Reakční směs se nechá ochladit a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, promyje se vodou, suší se (MgSO₄) a čistí se sloupcovou chromatografií za použití více a více polárních směsí methylenchloridu, hexanu a methanolu (1:1:0 až 95:0:5) a získá se N-terc.butoxykarbonyl-4-chlor-2,6difluoranilin (170 mg, 25 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₅) 1,41 (s, 9H), 7,39 (d, 2H), 8,86 (s, IH)

Nasycený roztok chlorovodíku v ethylacetátu (4 ml) se přidá kN-terc.butoxykarbonyl—4-chlor2,6-difluoranilinu (330 mg, 1,3 mmol) a směs se míchá při okolní teplotě po dobu 2 hodin. Sraženina se sebere filtrací a získá se hydrochlorid 4-chlor-2,6-difluoranilinu (140 mg, 56 %).

’H NMR spektrum: (DMSOd₆) 6,12 (s, 2H), 7,08 (d, 2H)

Příklad 16

Směs 6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (370 mg, 1,16 mmol), thionylchloridu (5 ml) a DMF (3 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. K pevnému zbytku se přidá roztok 2-fluor-5-hydroxy—4-methylanilinu (220 mg, 1,56 mmol) v izopropanolu (10 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Vzniklá sraženina se sebere filtrací, promyje se methylenchloridem a suší se. Pevný produkt obsahující nečistoty se zpracuje vodným hydrogenuhličitanem sodným a získá se suspenze a produkt se znovu sebere filtrací a čistí se sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 9:1 a získá se 4—(2— fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin (140 mg, 27 %).

-39CZ 291386 B6 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,0 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 2.35 - 2,55 (m, 6H), 3,55 (š t, 4H), 3,90 (s, 3H), 4,20 (t, 2H), 6,85 - 6,95 (m, 2H), 7,10 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 9,20 (s, 2H)

Elementární analýza:

C₂₃H₂₇N₄O₄F

Nalezeno: C 62,2 % H6,l% N12,4%

Vypočteno: C 62,4 % H 6,2 % N 12,7 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Hydrid sodný (400 mg 80% suspenze v parafinovém oleji, 13,3 mmol) se přidá k roztoku fenolu (1,26 g, 13,3 mmol) v suchém l-methyl-2-pyrrolidinonu (20 ml) a směs se míchá po dobu 10 minut. Potom se přidá 7-benzyloxy-^l-chlor-6-methoxychinazolin (1,6 g, 5,3 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 4 ale bez zpracování vodou) a reakční směs se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 2 hodin. Směs se nechá zchladnout, přidá se voda a směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 100 ml). Spojené extrakty se promyjí 2M roztokem hydroxidu sodného, vodou a solankou. Odstraněním rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 7-benzyloxy-

6- methoxy-4-fenoxychinazolin (1,6 g, 84 %) jako nažloutlá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,98 (s, 3H), 5,37 (s, 2H), 7.25-7,6 (m, 11H), 7,60 (s, 1H), 8,54 (s, 1H)

MS-ESI: 300 [MH]⁺

7- Benzyloxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolin (160 mg, 0,44 mmol) v TFA (3 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 30 minut. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se zpracuje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se vodou a po vysušení se získá 7-hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazoIin (105 mg, 88 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)4,00 (s, 3H), 7,20 (s, 1H), 7,25-7,35 (m, 3H), 7,4- 7,55 (m, 2H), 7,58 (s, 1 Η), 10,73 (s, 1H)

MS-ESI: 269 [MH]⁺

4-(3-Chlorpropyl)morfolin (0,9 g, 4,5 mmol) (J. Am. Chem. Soc. 1945, 67, 736) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (1,0 g, 3,7 mmol), uhličitanu draselnému (2,6 g, 18,8 mmol) v DMF (30 ml). Směs se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 4 hodin a potom se nechá zchladnout. Pevné látky se odstraní filtrací a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografii eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 96:4) a získá se 6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)-4-fenoxychinazolin (1,0 g, 68 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,0 (m, 2H), 2,35 - 2,55 (m, 6H), 3,6 (š s, 4H), 3,95 (s, 3H), 4,25 (t, 2H), 7,25 - 7,35 (m, 3H), 7,40 (s, 1H), 7,45 - 7,55 (m, 2H), 7,55 (s, 1H), 8,50 (s, 1H)

MS-ESI: 396 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)-4-chinazolinu (980 mg, 2,48 mmol) a 2M kyseliny chlorovodíkové (25 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 2 hodin a nechá se ochladit. Roztok se alkalizuje pevným hydrogenuhličitanem sodným a produkt se extrahuje methylenchloridem. Organická fáze se filtruje přes filtrační papír a po odpaření rozpouštědla se získá 6-methoxy-7-40CZ 291386 B6 (3-morfolinopropoxy)-3,4-dihydrochinazolin^l-on (750 mg, 95 %) jako světle hnědá pevná látka, která se použije bez dalšího čištění.

MS - ESI: 320 [MH]⁺

Příklad 17

Směs 6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (370 mg, 1,16 mmol), (připravena jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16), thionylchloridu (5 ml) a DMF (3 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá ochladit. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Potom se k pevnému zbytku přidá roztok 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (210 mg, 1,30 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) v izopropanolu (10 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Směs se ředí acetonem a sraženina se sebere filtrací. Surový pevný produkt se suspenduje ve vodném hydrogenuhličitanu sodném, sebere se opět filtrací a čistí se sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, methanolu a amoniaku v poměru 100:10:1 a získá se 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7(3-morfolinopropoxy)chinazolin (160 mg, 30 %) ’HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,0 (m, 2H), 2,35 -2,55 (m, 6H), 3,6 (t, 4H), 3,95 (s, 3H), 4,15 (t, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,35 (d, 1H), 7,75 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 10,15 (s, 1H)

MS - ESI: 463 [MH]⁺

Elementární analýza:

C22H24N4O4FCI

Nalezeno:	C 57,1 %	H 5,3 %	N 12,0%
Vypočteno:	C 57,1 %	H 5,2 %	N 12,1 %
Příklad 18
1M etherový	chlorovodík	(3,1 ml, 3,1	mmol) se přidá k 4-chlor-6-methoxy-7-(2-methyl-

thioethoxy)chinazolinu (0,8 g, 2,8 mmol) a 2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilinu (0,44 g, 3,12 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 8), v izopropanolu (25 ml). Směs se zahřívá po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Vzniklá suspenze se zředí acetonem a sraženina se sebere filtrací a čistí se chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, methanolu a amoniaku v poměru 100:8:1 a získá se 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolin (580 mg, 52 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,15 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,94 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,33 (t, 2H), 6,92 (d, 1H), 7,00 (d, 1H), 7,83 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 9,33 (s, 1H)

MS-ESI: 390 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₉H2oN303FS.O,5H₂0

Nalezeno: C 57,4 % H 5,1 % N 10,5 %

Vypočteno: C 57,3 % H 5,3 % N10,5%

-41 CZ 291386 B6

Výchozí materiál se připraví následovně:

2-Chlorethylmethylsulfid (1,2 g, 10,9 mmol) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (2,25 g, 8,4 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16) a uhličitanu draselnému (6,0 g, 43,4 mmol) v DMF (70 ml). Směs se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 4 hodin a potom se nechá ochladit. Směs se filtruje a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 96:4 a získá se 6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)-4-fenoxychinazolin (1,55 g, 54%).

Směs 6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)-4-fenoxychinazolinu (1,5 g, 4,4 mmol) a2M kyseliny chlorovodíkové (25 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 2 hodin. Směs se nechá zchladnout, a za míchání se přidá methylenchlorid a získá se bílá sraženina. Sraženina se sebere filtraci, promyje se vodou a methylenchloridem a získá se hydrochlorid 6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)-3,4-dihydrochinazolin^4-onu (1,1 g, 83 %).

*H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,22 (s, 3H), 2,94 (t, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,30 (t, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 8,80 (s, 1H)

MS - ESI: 267 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₂Hi₄N₂O₃S.1HC1

Nalezeno: C 46,4 % H 5,2 %

Vypočteno: C 47,6 % H 5,0 %

N 8,8 %

N 9,3 %

Směs 6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (1,07 g, 4,0 mmol), thionylchloridu (20 ml) a DMF (4 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a pak se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Pevný zbytek se rozdělí mezi vodný hydrogenuhličitan sodný a methylenchlorid, organická fáze se oddělí a promyje se solankou. Organická fáze se filtruje přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 4-chlor-6-methoxy-7-(2methylthioethoxy)chinazolin (810 mg, 71 %).

MS - ESI: 285 [MH]⁺

Příklad 19 a 20

3- Chlorperoxybenzoová kyselina (vlhká, 50 až 60%, 500 mg), (3-CPBA), se přidá k roztoku

4- (2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolinu (485 mg, 1,2 mmol), (připraven jak je popsáno v příkladu 18) v methylenchloridu (90 ml) a DMA (6 ml). Po 2 hodinách se přidají další 2 části 3-CPBA (celkem 160 mg). Směs se kontroluje na zbytek oxidačního činidla a těkavé látky se odstraní odpařením. 2 produkty se oddělí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 9:1 a získá se 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-(methylsulfonyl)ethoxy)chinazolin (94 mg, 19 %).

’HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,15 (s, 3H), 3,18 (s, 3H), 3,70 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,50 (t, 2H), 6,92 (d, 1H), 6,97 (d, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 9,30 (s, 1H)

MS - ESI: 422 [MH]⁺

-42CZ 291386 B6

Elementární analýza:
C_l9H₂₀N3O₅SF.0,5H₂O
Nalezeno: C 53,0 %	H 4,9 %	N 9,7 %
Vypočteno: C 53,0 %	H 4,9 %	N 9,8 %

a 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylsulfinyl)ethoxy)chinazolin (120 mg, 25%).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆)2,16 (s, 3H), 2,69 (s, 3H), 3,15 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 3,94 (s,3H), 4,53 (m,2H), 6,92 (d, 1H), 6.97 (d. 1H), 7,83 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 9,30 (s, 1H)

MS - ESI: 406 [MH]⁺

Elementární analýza:

C19H20N3O4SF

Nalezeno: C 55,5 % H 5,0 % N10,0%

Vypočteno: C 56,0 % H 5,4 % N 10,3 %

Příklad 21

Směs 6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (260 mg, 0,90 mmol), thionylchloridu (5 ml) a DMF (2 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 45 minut a potom se nechá ochladit. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Potom se ke zbytku přidá roztok 4-chlor-2-fluor-hydroxyanilinu (160 mg, 1,0 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2), v izopropanolu (5 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny a potom se nechá zchladnout. Směs se zředí acetonem a pevný produkt se sebere filtrací, promyje se acetonem a suší se a získá se hydrochlorid 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolinu (381 mg, 83 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd_ó) 1,85-2,15 (š m, 4H), 3,20 (š s, 2H), 3,5 - 3,7 (š m, 4H), 4,05 (s, 3H), 4,65 (t, 2H), 7,20 (d, 1H), 7,5 (m, 2H), 8,45 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 10,5 (š s, 1H), 11,35 (š s, 1H), 11,75 (š s, 1H)

MS-ESI: 433 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₂iH₂₂N4C>3C1F.2HC1.0,17 izopropanol

Nalezeno: C 49,7 % H 5,0 % N10,6%

Vypočteno: C 50,1 % H5,0% N10,9%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Hydrochlorid l-(2-chlorethyl)pyrrolidinu (1,27 g, 7,5 mmol) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy4-fenoxychinazolinu (1,0 g, 3,7 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16) a k uhličitanu draselnému (3,9 g, 28,3 mmol) v DMF (30 ml). Směs se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 4 hodin a nechá se zchladnout. Směs se filtruje a těkavé látky se odstraní z filtrá

-43 CZ 291386 B6 tu odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, methanolu a amoniaku v poměru 100:8:1 a získá se olej, který se rozetře s ethylacetátem a získá se 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolin (200 mg, 15 %) jako bílá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 1,65 (m. 4H), 2,55 (m, 4H), 2,85 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,25 (t, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,38 (s, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,55 (s, 1H), 8,5 (s, 1H

MS - ESI: 366 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolinu (565 mg, 1,55 mmol) a 2M kyseliny chlorovodíkové (5 ml) se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 90 minut a pak se nechá ochladit. Roztok se neutralizuje vodným hydrogenuhličitanem sodným a voda se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, 15 methanolu a amoniaku v poměru 100:8:1 a získá se 6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)3,4-dihydrochinazolin—4-on (480 mg). Tento materiál se použije bez další charakterizace.

Příklad 22

1M etherový chlorovodík (0,72 ml, 0,72 mmol) se přidá k 4-chlor-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolinu (210 mg, 0,65 mmol) a 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (115 mg, 0,71 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) v izopropanolu (5 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladit. Směs se zředí acetonem a vysrá25 zený produkt se sebere filtrací. Produkt obsahující nečistoty se rozpustí ve směsi methylenchloridu a amoniaku v poměru 100:1 a methanolu, nerozpustné látky se odstraní filtrací a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením. Pevný zbytek se promyje vodou a suší se a získá se 4-(4chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin (60 mg, 21 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,45 - 2,60 (m, 4H), 2,78 (t, 2H), 3,58 (t, 4H), 3,94 (s, 3H), 4,26 (t, 2H), 7,17 (d, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 10,17 (s, 1H)

MS - ESI: 449 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₂iH₂₂N₄O₄ClF.l,25H₂O

Nalezeno: C 53,5 % H5,2% NI 1,6%

Vypočteno: C 53,5 % H 5,3 % NI 1,9%

Výchozí materiál se připraví následovně:

1,2-Dibromethan (1,6 ml, 18,6 mmol) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (0,5 g, 1,86 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16) a uhličitanu draselnému (1,2 g, 8,7 mmol) v DMF (60 ml) a směs se zahřívá na teplotu 85 °C po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Nerozpustné látky se odstraní filtrací a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením a získá se zbytek, který se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí 50 methylenchloridu a methanolu v poměru 97:3 a získá se 7-(2-bromethoxy)-6-methoxychinazolin (440 mg, 63 %).

MS - ESI: 375 [MH]⁺

-44CZ 291386 B6

Směs morfolinu (8 ml) a 7-(2-bromethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (450 mg, 1,2 mmol) se míchá při okolní teplotě po dobu 3 hodin. Přebytek morfolinu se odstraní odpařením a zbytek se rozdělí mezi vodný hydrogenuhličitan sodný a methylenchlorid. Organická fáze se filtruje přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Rozetřením zbytku s izohexanem se získá pevná látka, která se sebere filtrací a suší se a získá se 6-methoxy-7-(2-morfoIinoethoxy)-4-fenoxychina2olin (410 mg, 90 %).

MS-ESI: 382 [MH]

Směs 6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)-4-fenoxychinazolinu (400 mg, 1,05 mmol) a2M kyseliny chlorovodíkové (10 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Směs se neutralizuje pevným hydrogenuhličitanem sodným. Přidáním methylenchloridu se získá bílá sraženina, která se sebere filtrací, promyje se acetonem a suší se a získá se 6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-on (320 mg, 100 %).

MS - ESI: 306 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (310 mg, 1,02 mmol), thionylchloridu (10 ml) a DMF (2 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin a potom se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se rozdělí mezi vodný hydrogenuhličitan sodný a methylenchlorid. Organická vrstva se oddělí, promyje se solankou a filtruje přes filtrační papír. Těkavé látky se odstraní odpařením a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 96:4 a získá se 4-chlor-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin (225 mg, 68 %).

MS - ESI: 324 [MH]⁺

Příklad 23

1M etherový chlorovodík (0,34 ml, 0,34 mmol) se přidá k 4-chlor-6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolinu (115 mg, 0,34 mmol) a 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (61 mg, 0,38 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) v izopropanolu (5 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 90 minut a potom se nechá zchladnout. Směs se zředí acetonem a pevný produkt se sebere filtrací. Pevná látka obsahující nečistoty se zpracuje směsí methylenchloridu, methanolu a amoniaku v poměru 100:8:1 (5 ml) a přidá se voda. Znovu sražený produkt se sebere filtrací a suší se a získá se 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolin (32 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,28 (s, 3H), 2,53 (m, 4H), 2,60 (m, 4H), 2,81 (t, 2H), 3,95 (s,3H), 4,25 (t, 2H), 7,18 (d, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 10,18 (šs, 1H)

MS-ESI: 462 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₂₂H25N₅O3CÍF.1,3H₂O

Nalezeno: C 54,1 % H 5,3 % N 14,0 %

Vypočteno: C 54,4 % H 5,7 % N 14,4 %

-45CZ 291386 B6

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs 1-methylpiperazinu (7 ml) a 7-(2-bromethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (1,0 g, 2,67 mmol), (připravena jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 22) se míchá při okolní teplotě po dobu 5 hodin. Přebytek 1-methylpiperazinu se odstraní odpařením a zbytek se rozdělí mezi vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a methylenchlorid. Organická fáze se oddělí, filtruje se přes filtrační papír a těkavé látky se odstraní odpařením a získá se 6-methoxy-7-(2(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy-4-fenoxychinazolin (970 mg, 92 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,21 (s, 3H), 2,38 (m, 4H), 2,58 (m, 4H), 2,85 (t, 2H), 4,02 (s, 3H), 4,35 (t, 2H), 7,39 (m, 3H), 7,46 (s, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,61 (s, 1H), 8,59 (s, 1H)

Směs 6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)-4-fenoxychinazolinu (960 mg, 2,4 mmol) a 2M kyseliny chlorovodíkové (20 ml) se zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 2 hodin a nechá se zchladnout. Roztok se alkalizuje pevným hydrogenuhličitanem sodným, voda se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se promyje za odsávání methylenchloridem, promývací kapaliny se spojí, nerozpustné materiály se odstraní filtrací a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)-3,4-dihydrochinazolin—4-on (500 mg, 66 %).

MS-EI: 319 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (500 mg, 1,57 mmol), thionylchloridu (20 ml) a DMF (3 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin a potom se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se zpracuje vodným hydrogenuhličitanem sodným a produkt se extrahuje methylenchloridem. Spojené extrakty se promyjí solankou, filtrují se přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 4-chlor6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolin (120 mg, 23 %).

MS-ESI: 337 [MH]⁺

Příklad 24

Směs 6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (440 mg, 1,45 mmol), thionylchloridu (15 ml) a DMF (3 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin a potom se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem a získá se surový hydrochlorid 4-chlor-6-methoxy-7-(2piperidinoethoxy)chinazolinu (640 mg).

Vzorek (320 mg, 0,89 mmol) tohoto materiálu se přidá k roztoku 4-chlor-2-fluor-5-hydroxychinazolinu (130 mg, 0,8 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2), v izopropanolu (10 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 90 minut a nechá se zchladnout. Směs se zředí acetonem a vysrážený produkt se sebere filtrací a suší se. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, methanolu a amoniaku (10:8:1). Čistý produkt se rozpustí v acetonu a přidá se 1M etherový chlorovodík (1 ml, 1 mmol). Vzniklá sraženina se sebere filtrací a suší se a získá se hydrochlorid 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolinu (137 mg, 32 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 1,75 (š m, 6H), 4,00 (s, 3H), 4,65 (t, 2H), 7,15 (d, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 10,4 (s, 1H), 10,6 (š s, 2H)

MS-ESI: 447 [MH]⁺

-46CZ 291386 B6

H 5,4 % N10,6%

H 5,0 % N10,8%

Elementární analýza:

C22H24N.1O3CIF.2HCI

Nalezeno: C51,0%

Vypočteno: C 50,8 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Hydrochlorid l-(2-chlorethyl)piperidinu (0,83 g, 4,5 mmol) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy4-fenoxychinazolinu (1,0 g, 3,73 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál příkladu 16), a uhličitanu draselnému (2,6 g, 18,8 mmol) v DMF (30 ml) a směs se zahřívá na teplotu 110°C po dobu 2,5 hodiny a nechá se zchladnout. Nerozpustné materiály se odstraní filtrací a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 9:1 a získá se 6-methoxy-4-fenoxy7-(2-piperidinoethoxy)chinazolin (1,2 g, 85 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 1,38 (m, 2H), 1,50 (m, 4H), 2,4-2,5 (m, 4H), 2,75 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,27 (t, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,40 (s, 1H), 7,46 (m, 2H), 7,54 (s, 1H), 8,52 (s, 1H)

MS-ESI: 380 [MHf

Směs 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolinu (1,15 g, 3,0 mmol) a 2M kyseliny chlorovodíkové (20 ml) se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Směs se neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným a extrahuje se methylenchloridem. Organická fáze se oddělí, filtruje se přes filtrační papír a těkavé látky se odstraní odpařením a získá se pevný produkt (230 mg). Potom se upraví pH vodné fáze na hodnotu 10, vzniklá sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a sušením se získá druhá část produktu (220 mg). Produkty se spojí a získá se 6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-on (450 mg, 50 %).

MS - ESI: 304 [MHf

Příklad 25

Směs 7-(2-cyklopentyloxyethoxy)-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (260 mg, 0,85 mmol), thionylchloridu (5 ml) a DMF (2 kapky) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom se nechá zchladnout. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se destiluje azeotropicky s toluenem. Ke zbytku se přidá roztok 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (140 mg, 0,87 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2), v izopropanolu (5 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny a nechá se zchladnout. Suspenze se zředí acetonem a sraženina se sebere filtrací. Surový produkt se rozpustí ve směsi methylenchloridu, methanolu a amoniaku v poměru 100:8:1, (2 ml), nerozpustný materiál se odstraní filtrací a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se rozpustí v acetonu, přidá se 1M etherový chlorovodík (1 ml, 1 mmol) a vzniklá sraženina se sebere filtrací a suší se a získá se hydrochlorid 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-7-(2-cyklopentyloxyethoxy)-6-methoxychinazolinu (50 mg, 12 %).

‘H NMR spektrum: (DMSOd₆) 1,5 - 1,75 (m, 8H), 3,75 (m, 2H), 3,9 - 4,1 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 4,80 (t, 2H), 7,20 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 10,5 (š s, 1H), 11,4 (š s, 1H)

MS-ESI: 448 [MH]⁺

-47CZ 291386 B6

Elementární analýza:

C₂₂H₂₃N₃O₄C1F. 1 HC1.0,1H₂0

Nalezeno: C 54,1 % H 4,8 % N 8,5 %

Vypočteno: C 54,4 % H 5,0 % N8,6%

Výchozí materiál se připraví následovně:

2-Cyklopentyloxyethanol (4,3 g, 33,1 mmol) v pyridinu (18 ml) se přidá po kapkách při teplotě 5 °C k roztoku 3-toluensulfonylchloridu (6,8 g, 35,7 mmol) v pyridinu (27 ml). Směs se nechá ohřát na okolní teplotu a míchá se přes noc. Směs se vlije do ledu obsahujícího koncentrovanou kyselinu chlorovodíkovou (46 ml) a produkt se extrahuje etherem. Organická fáze se promyje 2M kyselinou chlorovodíkovou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 2-cyklopentyloxyethyl-4-toluensulfonát (6,9 g, 73 %), který se použije bez dalšího čištění.

7-Hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolin (1,11 g, 4,2 mmol), (připravený jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16), v DMF (17 ml) se přidá k suspenzi hydridu sodného (184 mg, 60% suspenze v oleji, 4,6 mmol) v DMF (3 ml). Směs se míchá dokud se vyvíjí plyn a potom se po kapkách přidá 2-cyklopentyloxyethyl-4-toluensulfonát (1,25 g, 4,45 mmol) v DMF (3 ml). Směs se míchá při okolní teplotě po dobu 30 minut, potom se zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 2 hodin a potom na teplotu 80 °C po dobu další 4 hodiny a potom se nechá zchladnout. Směs se vlije do ledu a extrahuje se methylenchloridem. Spojené extrakty se promyjí solankou, filtrují se přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním ethylacetátem. Čistý produkt se rozetře s izohexanem a získá se 7-(2-cyklopentyloxyethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolin (480 mg, 28 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 1,2-1,7 (m, 8H), 3,77 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,0 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,38 (s, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,55 (s, 1H), 8,50 (s, 1H)

MS-ESI: 381 [MH]⁺

Směs 7-(2-cyklopentyloxyethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (470 mg, 1,2 mmol) a 2M kyseliny chlorovodíkové (6 ml) se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 2 hodin a nechá se zchladit. Přidá se voda a produkt se extrahuje methylenchloridem. Spojené extrakty se promyjí vodným hydrogenuhličitanem sodným, filtrují se přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Rozetřením s ethylacetátem se získá 7-(2-cyklopentyloxyethoxy)-6-methoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-on (270 mg, 74 %).

MS - ESI: 305 [MH]⁺

Příklad 26

1M vodný roztok hydroxidu sodného (4 ml, 4 mmol) se přidá k roztoku 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolinu (820 mg, 2,2 mmol) v methanolu (20 ml) a směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Potom se přidá koncentrovaná kyselina chlorovodíková (0,8 ml), těkavé podíly se odstraní odpařením a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu (60:40) a získá se 4-(2fluor-5-hydroxy-4-methy!anilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolin (313 mg, 45 %).

teplota tání 276 až 278 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,18 (s, 3H), 6,88 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,76 (s, 1H)

-48CZ 291386 B6

H4,4% NI 1,5%

H4,3% NI 1,9%

MS-ESI: 316 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₆H₁₄N₃0₃F.1HC1.0,1H₂0

Nalezeno: C 54,4 %

Vypočteno: C 54,4 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Roztok (4-fluor-2-methyl-5-nitrofenyl)methylkarbonátu (3 g, 13 mmol), (připraven jak je popsáno v EP 0 307 777 A2) v ethanolu (60 ml) obsahující oxid platičitý (300 mg) se míchá pod vodíkem při tlaku 0,0294 MPa po dobu 1 hodiny. Po filtraci a odpaření rozpouštědla se izoluje 2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilin jako pevná látka (2,6 g, 100 %).

'H NMR spektrum: (CDClj) 2,07 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,52 (d, 1H), 6,80 (d, 1H)

Roztok 7-benzyloxy-4-chlor-6-methoxychinazolinu (800 mg, 2,6 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál příkladu 4 ale bez zpracování vodou), a 2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilinu (570 mg, 2,89 mmol) v izopropanolu (20 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Po ochlazení na okolní teplotu se pevná látka odfiltruje, promyje se izopropanolem a suší se ve vakuu a získá se 7-benzyloxy-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin (1,0 g, 77 %).

’HNMR spektrum: (DMSOd₅, CFjCOOD) 2,2 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 4,0 (s, 3H), 5,37 (s, 2H), 7,3 - 7,55 (m, 8H), 8,13 (s, 1H), 8,86 (s, 1H)

MS - ESI: 464 [MH]⁺

Roztok 7-benzyloxy-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolinu (700 mg, 1,4 mmol) v DMF (10 ml) methanolu (10 ml) a trichlormethanu (10 ml) obsahující 10% palladium na aktivním uhlí (100 mg) se míchá pod atmosférou vodíku po dobu 1 hodiny. Po filtraci a odpaření rozpouštědla se zbytek rozetře s etherem, filtruje se a suší se ve vakuu a získá se 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-hydroxy-6-methoxychinazolin (570 mg, 98 %) ’HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,23 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 7,37 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,5 (d, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 11,35 (s, 1H), 11,79 (s, 1H)

MS-ESI: 374 [MH]⁺

Příklad 27

Roztok hydrochloridu 4-chlor-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (275 mg, 1 mmol) a 2-fluor-5hydroxy-4-methylanilinu (170 mg, 1,2 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 8) ve 2-pentanolu (5 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit a sraženina se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a etherem a suší se ve vakuu při teplotě 70 °C a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2methoxyethoxy)chinazolinu (295 mg, 78 %) jako krémová pevná látka.

teplota tání 217 až 220 °C

-49CZ 291386 B6 'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,17 (s. 3H), 3,36 (s, 3H), 3.75 (t, 2H), 4,34 (t, 2H), 6,89 (d, 1H),

7,11 (d, l H), 7,30 (d, 1H), 7,52 (dd, 1H). 8,66 (d, 1H). 8,82 (s, 1H), 9,68 (s, 1 Η), 11,40 (s, 1H)

MS-ESI: 344 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₈H₁₈N₃O₃F.1HC1

Nalezeno: C 56,8 % H 5,2 % N 11.1 %

Vypočteno: C 56,9 % H 5,0 % N 11.1 %

Výchozí materiál se připraví následujícím způsobem:

Roztok 2-amino-4-fIuorbenzoové kyseliny (3 g, 19,3 mmol) ve formamidu (30 ml) se zahřívá na teplotu 150 °C po dobu 6 hodin. Reakční směs se vlije do směsi ledu a vody (1:1, 250 ml). Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se a získá se 7-fluor-3,4-dihydrochinazolin-4-on (2,6 g, 82 %).

Sodík (400 mg, 17 mmol) se opatrně přidá k 2-methoxyethanolu (10 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 30 minut. Potom se přidá k vzniklému roztoku 7-fluor-3,4-dihydrochinazolin-4-on (750 mg, 4,57 mmol) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 15 hodin. Směs se ochladí a vlije se do vody (250 ml). Směs se okyselí na pH 4 pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Vzniklý pevný produkt se sebere filtrací, promyje se vodou a potom etherem a suší se ve vakuu a získá se 7-(2-methoxyethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4on (580 mg, 58 %).

Roztok 7-(2-methoxyethoxy)-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (500 mg, 2,2 mmol) vthionylchloridu (15 ml) a DMF (0,1 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Těkavé látky se odstraní odpařením a získá se hydrochlorid 4-chlor-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu jako krémová pevná látka (520 mg, 83 %).

Příklad 28

Roztok hydrochloridu 4-chlor-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (275 mg, 1,0 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 27) a 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (193 mg, 1,2 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2), ve 2-pentanolu (5 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá ochladit, sraženina se sebere filtrací, promyje se izopropanolem a etherem a suší se ve vakuu při teplotě 70 °C a získá se hydrochlorid 4-(4-chlor2-fluor-5-hydroxyanilino)-7-(2-methoxyethoxy)chinazolinu (178 mg, 45 %) jako krémová pevná látka.

teplota tání 224 až 227 °C ‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,36 (s, 3H), 3,76 (t, 2H), 4,34 (t, 2H), 7,14 (d, 1H), 7,3 (d, 1H), 7,53 (m, 2H), 8,66 (d, 1H), 8,85 (s, 1H), 10,58 (s, 1H), 11,40 (s, 1H)

MS-ESI: 364 [MH]⁺

-50CZ 291386 B6

Elementární analýza:
Ci₇H₁₅N₃O₃FC1.1HC1
Nalezeno: C 50,8 %	Η 4,1 %	N 10,4%
Vypočteno: C51,0%	H 4,0 %	N 10,5%

Příklad 29

Roztok 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinoxalinu (201 mg, 0,5 mmol) v methanolu (5 ml) a 2M vodném roztoku hydroxidu sodného (0,5 ml) se míchá při okolní teplotě po dobu 1 hodiny. Směs se zředí vodou a pH se upraví pomocí kyseliny 2M chlorovodíkové na hodnotu 6. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, promyje se vodou, suší se a potom se rozpustí ve směsi methylenchloridu a methanolu. Potom se přidá 5M roztok chlorovodíku v izopropanolu (0,3 ml) a většina rozpouštědla se odstraní odpařením. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, promyje se methylenchloridem a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolinu (70 mg, 36 %) jako žlutá pevná látka.

teplota tání 213 až 215 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,18 (s, 3H), 3,43 (s, 3H), 4,16 (s, 2H), 6,90 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,62 (d, 1H), 8,86 (s, 1H)

MS - ESI: 357 [MH]’

Elementární analýza:

C_i8H₁₇N₄O₃F.1HC1.0,5H₂O

Nalezeno: C 53,7 % H 4,9 % N13,9%

Vypočteno: C 53,8 % H4,8% N13,9%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Směs 7-nitro-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (5 g, 26 mmol) v thionylchloridu (50 ml) a DMF (1 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 1,5 hodiny. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Zbytek se suspenduje v etheru, sebere se filtrací a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-chlor-7-nitrochinazolinu (6,4 g, 100%).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 8,26 (dd, 1H), 8,36 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,42 (dd, 1H)

MS-ESI: 209 [MH]’

Roztok hydrochloridu 4-chlor-7-nitrochinazolinu (2,46 g, 10 mmol) a 2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilinu (2,2 g, 11 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 26), v izopropanolu (25 ml) se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 1 hodiny. Směs se nechá zchladnout, vysrážená pevná látka se sebere filtrací, rekrystaluje se ze směsi methylenchloridu, methanolu a izopropanolu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy4-methylanilino)-7-nitrochinazolinu (1,8 g, 45 %) jako žlutá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,21 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 7,40 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 8,49 (dd, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,89 (d, 1H)

-51 CZ 291386 B6

MS-ESI: 373 [MH]

Elementární analýza:

C₁₇H₁₃N4O₅F.1HCI

Nalezeno: C 50,0 % H 3,6 %

Vypočteno: C 50,0 % H 3,5 %

N 13,8%

N 13,7%

Směs hydrochloridu 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-nitrochinazolinu (5,3 g, 13 mmol) a 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátor (1 g) v ethanolu (100 ml), 7M ethanolického chlorovodíku (1.8 ml) a methanolu (20 ml) se míchá pod vodíkem při 0,166 MPa po dobu 75 minut. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku a filtrační polštářek se promyje methylenchloridem, methanolem a etherem a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením a získá se hydrochlorid 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy—4methylanilino)chinazolinu (4,8 g, 97 %) jako žlutá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,22 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,77 (s, 1H), 7,08 (dd, 1H), 7,15 (m, 2H), 7,41 (m, 2H), 8,35 (d, 1H), 8,63 (s, 1H), 11,03 (s, 1H)

MS-ESI: 343 [MH]

Methoxyacetylchlorid (119 mg, 1,1 mmol) a potom triethylamin (232 mg, 2,3 mmol) se přidají k suspenzi hydrochloridu 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)chinazolinu (415 mg, 1,1 mmol) v methylenchloridu (10 ml) a směs se míchá po dobu 1 hodiny. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva se oddělí, promyje se solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Vzniklá pevná látka se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a acetonitrilu v poměru 50:50 a potom směsí methylenchloridu, acetonitrilu a methanolu v poměru 50:45:5 a získá se 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolin (250 mg, 60 %) jako žlutá pevná látka).

'HNMRspektrum: (DMSOd₆) 2,18 (s, 3H), 3,41 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 8,22 (s, 1H), 8,36 (d, 1H), 8,44 (s, 1H), 9,74 (s, 1H), 10,21 (s, 1H)

MS-ESI: 437 [MNaf

Příklad 30 lMvodný roztok hydroxidu sodného (2,1 ml, 2,1 mmol) se přidá k roztoku hydrochloridu 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-hydroxychinazolinu (400 mg,

1,05 mmol) v methanolu (10 ml) a směs se míchá 50 minut při teplotě okolí. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se rozpustí ve vodě a pomocí kyseliny chlorovodíkové se upraví pH na 7. Vodná směs se extrahuje ethylacetátem, extrakty se promyjí solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 95:5 a 80:20. Čistá pevná látka se rozpustí v methanolu a přidá se methanol nasycený chlorovodíkem. Těkavé látky se odstraní odpařením, zbytek se rozetře s pentanem a získá se 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-hydroxychinazolin (149 mg, 44 %) jako žlutá pevná látka.

teplota tání 274 až 278 °C

-52CZ 291386 B6 'HNMR spektrum: (DMSOd_ó)2,16 (s, 3H), 6,87 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,32 (ss, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,76 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 11,24 (s, 1H), 11,70 (s, 1H)

MS-ESI: 285 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₅H_I2N₃O₂F. 1 HC1.0,3H₂0.0,05NaCl

Nalezeno: C 54,2 % H 4,1 % N 12,3 %

Vypočteno: C 54,6 % H 4,2 % N 12,7 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Sodík (368 mg, 16 mmol) se přidá k benzylalkoholu (10 ml, 96 mmol) a směs se zahřívá na teplotu 148 °C po dobu 30 minut a potom se přidá 7-fluor-3,4-dihydrochinazolin-4-on (656 mg, 4 mmol), (J. Chem. Soc., sekce B 1967, 449) a směs se udržuje při teplotě 148 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs se nechá ochladit, roztok se vlije do vody (170 ml) a pH vodné směsi se upraví na 3 pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou, etherem a suší se ve vakuu a získá se 7-benzyloxy-3,4-dihydrochinazolin—4-on (890 mg, 89 %) jako bílá pevná látka.

teplota tání 267 až 269 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CFjCOOD) 5,32 (s, 2H), 7,25 (d, 1H), 7,32 - 7,52 (m, 6H), 8,12 (d, 1H), 8,99 (s, 1H)

ME-ESI: 252 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₁₅H_I2N₂0₂.0,04H₂0

Nalezeno: C 71,5 % H 4,9 % N 10,7 %

Vypočteno: C71,2% H4,8% Nll,l%

Směs 7-benzyloxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (800 mg, 3,17 mmol) v thionylchloridu (20 ml, 0,27 mmol) a DMF (100 μΐ) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 7-benzyloxy-4-chlorchinazolinu (835 mg, 86 %) jako krémová pevná látka.

teplota tání 131 až 132 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF3COOD) 5,32 (s, 2H), 7,29 (d, 1H), 7,34-7,52 (m, 6H), 8,12 (d, 1H), 9,03 (s, 1H)

MS-ESI: 270 [MH]⁺

2-Fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilin (883 mg, 4,4 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 26) se přidá při teplotě 120 °C k roztoku hydrochloridu 7benzyloxy-4-chlorchinazolinu (1 g, 3,7 mmol) v pentanolu (15 ml) a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Sraženina se sebere filtrací, promyje se izopropanolem, potom etherem a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 7-benzyloxy-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)chinazolinu (1,65 g, 97 %) jako krémová bílá pevná látka.

-53 CZ 291386 B6 teplota tání 219 až 220 °C *H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,22 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 5.37 (s, 2H), 7,30 - 7,60 (m, 9H), 8,60

(d, 1H), 8,80 (s, 1H), 11,2 (s,	1H)
MS - ESI: 434 [MH]⁺
Elementární analýza:
C₂₄H₂₀N₃O₄F.lHCI.0,5H₂O
Nalezeno: C 60,1 %	H 4,9 %	N 8,5 %
Vypočteno: C 60,2 %	H 4,6 %	N 8,8 %

Hydrochlorid 7-benzyloxy-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)chinazolinu (1,53 g, 3,25 mmol) a 10% palladium na aktivním uhlí jako katalyzátor (180 mg) ve směsi methanolu, DMF a trichlormethanu (75 ml, 6 ml, 30 ml) se míchá pod vodíkem při 0,1470 MPa po dobu 45 minut. Katalyzátor se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením. Zbytek se rozetře s etherem, vzniklá pevná látka se sebere filtrací a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyIoxy-4-methylanilino)-7-hydroxychinazolinu (1,23 g, 84 %) jako oranžová pevná látka.

teplota tání 205 až 210 °C ‘HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,22 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 7,24 (d, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 8,58 (d, 1H), 8,81 (s, 1H), 11,40 (s, 1H), 11,76 (s, 1H)

MS-ESI: 344 [MH]⁺

Příklad 31

2M vodný roztok hydroxidu sodného (453 mg, 0,9 mmol) se přidá k suspenzi 4-(2-fluor-5methoxykarbonyloxy—4-methylanilino)-7-(3-morfolinopropionamido)chinazolinu (219 mg, 0,45 mmol) v methanolu (6 ml) a směs se míchá po dobu 1 hodiny. Reakční směs se zředí vodou a potom se pH upraví pomocí 2M kyseliny chlorovodíkové na 6. Vzniklá sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou, ethanolem a suší se. Pevná látka se rozpustí ve směsi methylenchloridu a methanolu a přidá se 5M roztok chlorovodíku v izopropanolu (0,3 ml). Těkavé látky se odstraní odpařením, vzniklá pevná látka se promyje etherem a suší se ve vakuu a získá se

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(3-morfolinopropionamido)chinazolin (186 mg, 80 %) jako žlutá pevná látka teplota tání 228 až 233 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,21 (s, 3H), 3,1 (t, 2H), 3,22 (t, 2H), 3,5-3,6 (m,4H), 3,8 (t,2H), 4,05 (d, 2H), 6,94 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,88 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,7 (d, 1H), 8,9 (s, 1H)

MS-ESI: 426 [MH]⁺

-54CZ 291386 B6

Elementární analýza:

C22H24N5O3F. 1,9HC1.0,6H₂0.0,2 izopropanol

Nalezeno: C 52,1 % H 5,8 % N13,4%

Vypočteno: C 52,5 % H 5,6 % N13,5%

Výchozí materiál se připraví následovně:

Hydroxid draselný (485 mg, 8,6 mmol) se přidá k roztoku methyl 3-morfolinopropionátu (1 g, 5,7 mmol) v ethanolu (20 ml) a směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě 80 °C. Roztok se nechá zchladnout a pH se upraví pomocí 6M kyseliny chlorovodíkové na 1. Nerozpustné materiály odstraní filtrací a těkavé látky se odstraní z filtrátu odpařením. Vzniklý olej se rozetře s etherem, pevný produkt se sebere filtrací, promyje se methylenchloridem a suší se ve vakuu 15 a získá se 3-morfolinopropionová kyselina (993 mg, 89 %) jako bílá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF3COOD) 2,83 (t, 2H), 3,13 (t, 2H), 3,36 (t, 2H), 3,46 (d, 2H),

3,73 (t, 2H), 3,97 (d, 2H)

MS - ESI: 159 [MH]⁺

1.3- Dicyklohexylkarbodiimid (343 mg, 1,6 mmol) se přidá k suspenzi 3-morfolinopropionové kyseliny (325 mg, 1,6 mmol) v pyridinu (12 ml) a směs se míchá po dobu 10 minut. Potom se přidá hydrochlorid 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)chinazolinu (3 70 mg, 0,97 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 29) a směs se míchá po dobu 32 hodin. Přidá se 3-morfolinopropionová kyselina (57 mg, 0,29 mmol) a potom

1.3- dicyklohexylkarbodiimid (100 mg, 0,48 mmol) a směs se míchá dalších 18 hodin. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát a pH vodné fáze se upraví nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného na 8. Organická vrstva se oddělí, promyje se solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 95:5 a získá se 4-(2-fluor-5-methylenchloridu a methanolu v poměru 95:5 a získá se 4-(2-fluor-5methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-7-(3-morfolinopropionamido)chinazolin (226 mg, 48 %) jako bílá pevná látka.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,18 (s, 3H), 2,4-2,5 (m, 4H), 2,5-2,6 (m, 2H), 2,62- 2,7 (m,2H), 3,58 (t,4H), 3,85 (s, 3H), 7,30 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,7 (d, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,35 (d, 1H), 8,41 (s, 1H), 9,7 (s, 1H), 10,46 (s, 1H)

Příklad 32

2M roztok hydroxidu sodného (760 μΐ, 1,5 mmol) se přidá při teplotě 5 °C k roztoku 4-(2-fluor5-methoxykarbonyloxy-4-methylani lino)-7-(2-methoxyethylam i no)chinazol inu (3 04 mg,

0,76 mmol) v methanolu (8 ml) a směs se míchá po dobu 30 minut při okolní teplotě. Směs se zředí vodou a pH se upraví pomocí 2M kyseliny chlorovodíkové na 6. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací a potom se suspenduje ve směsi methylenchloridu a methanolu. Přidá se 5M roztok chlorovodíku v izopropanolu (0,4 ml) a těkavé látky se odstraní za vzniklého roztoku odpařením. Zbytek se rozetře s etherem, pevný produkt se sebere filtrací, promyje se etherem a suší se ve 50 vakuu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethylamino)chinazolinu (260 mg, 90 %) jako žlutá pevná látka.

teplota tání 192 - 197 °C

-55CZ 291386 B6 'HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,16 (s, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,38 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 6,71 (šs, IH), 6,88 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 7,2 (d, 1H), 7,73 (m, 1H), 8,37 (d, 1H), 8,61 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 10,95 (s, 1H)

MS - ESI: 343 [MH]⁺

Výchozí materiál se připraví následovně:

Roztok dimethylacetal methoxyacetaldehydu (1,27 g, 10 mmol) ve vodě (7 ml) a 2M kyselině chlorovodíkové (76 μΐ) se zahřívá na teplotu 50 až 60 °C po dobu 2 hodin. Směs se nechá zchladnout a pH se upraví pomocí nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného na 7,5. Tento roztok se přidá k suspenzi hydrochloridu 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)chinazolinu (400 mg, 1 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 30) v ethanolu (32 ml) a kyseliny octové (95 μΐ, 1,5 mmol). Směs se potom míchá po dobu 5 minut, přidá se kyanoborohydrid sodný (133 mg, 2 mmol) a pH roztoku se upraví pomocí ledové kyseliny octové na 5. Směs se míchá 18 hodin a organické rozpouštědlo se odstraní odpařením a vzniklá vodná směs se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva se oddělí, promyje se solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu (96:4 a potom 12:8) a získá se 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino}-7-(2-methoxyethylamino)chinazolin (308 mg, 77 %) jako žlutá pěna.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,22 (s, 3H), 3,33 (s, 3H), 3,41 (t, 2H), 3,60 (t, 2H), 3,87 (s, 3H), 6,68 (š s, 1H), 7,22 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,43 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,7 (s, 1H)

Příklad 33

2M vodný roztok hydroxidu sodného (620 μΐ) se přidá po kapkách při teplotě 5 °C k suspenzi 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-methoxyacetainidochinazolinu (275 mg, 0,62 mmol) v methanolu (8 ml) a směs se míchá po dobu 90 minut při okolní teplotě. Reakční směs se zředí vodou a pH směsi se upraví pomocí 2M kyseliny chlorovodíkové na 7. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, znovu se suspenduje v ethanolu a přidá se 5M roztok chlorovodíku v izopropanolu (0,3 ml). Těkavé látky se odstraní za vzniklého roztoku odpařením a pevná látka se promyje etherem a sebere se filtrací a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-methoxyacetamidochinazolinu (216 mg, 82 %).

teplota tání 300 až 306 °C 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,18 (s, 3H), 3,47 (s, 2H), 4,13 (s, 3H), 4,21 (s, 3H), 6,92 (d, 1H), 7,13 (d, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 9,72 (s, 1H), 11,49 (s, 1H)

MS - ESI: 387 [MH]⁺

Elementární analýza:

C_I9H_i9N₄O₄F. 1 HC1.0,6H₂O

Nalezeno: C 52,3 % H4,8% N12,7%

Vypočteno: C52,6% H4,9% N12,9%

-56CZ 291386 B6

Výchozí materiál se připraví následovně:

Anhydrid kyseliny octové (50 ml) se přidá po kapkách při teplotě 5 °C k roztoku 4-methoxy-2methylanilinu (49,7 g, 360 mmol) v DMA (200 ml) a směs se míchá po dobu 4,5 hodin při okolní teplotě. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a vzniklá pevná látka se promyje vodou, suší se ve vakuu a získá se N-(4-methoxy-2-methylfenyl)acetamid (57,3 g, 88 %).

‘HNMR spektrum: (CDC1₃)2.16 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 6,7-6,75 (m, 2H), 7,42 (d,lH)

Směs chloridu cíničitého (19,3 ml) a 69,5% kyseliny dusičné (10,3 ml) v methylenchloridu se přidá po kapkách k roztoku N-(4-methoxy-2-methylfenyl)acetamidu (28 g, 0,14 mol) v methylenchloridu (500 ml) ochlazeném a udržovaném při teplotě -30 °C. Reakční směs se míchá při teplotě -30 °C po dobu 1,5 hodiny, nechá se ohřát na okolní teplotu a potom se vlije do směsi ledu a vody. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem. Spojené extrakty se suší (MgSO₄), rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí sloupcovou chromatografii eluováním směsí petroletheru a ethylacetátu v poměru 2:8 a získá se N-(4-methoxy-2-methyl-

5-nitrofenyl)acetamid (17,8 g, 51 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,06 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 3,9 (s, 3H), 7,24 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 9,41 (s,lH)

Manganistan draselný (68 g) se přidá po částech při teplotě 75 °C k roztoku N-(4-methoxy-2methyl-5-nitrofenyl)acetamidu (35 g, 0,156 mol) a síranu hořečnatého (38,5 g) ve vodě 2,3 1). Směs se udržuje při teplotě 75 °C po dobu 3,5 hodiny, přidá se další síran hořečnatý (4 g) a manganistan draselný (12 g) a míchání pokračuje po dobu 30 minut při teplotě 75 °C. Nerozpustné látky se odstraní filtrací přes infuzóriovou hlinku, filtrát se ochladí a okyselí se na pH 1 pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, promyje se vodou a vodný filtrát se extrahuje ethylacetátem. Pevný produkt a ethylacetátový extrakt se spojí a extrahují se 2M roztokem hydroxidu sodného. Bazická vodná vrstva se oddělí, promyje se ethylacetátem, okyselí se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a znovu se extrahuje ethylacetátem. Ethylacetátový extrakt se promyje solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 2-acetamido-5-methoxy-4-nitrobenzoová kyselina (21,6 g, 54 %) jako žlutá pevná látka.

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 2,12 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 7,74 (s, 1H), 8,75 (s, 1H)

Roztok 2-acetamido-5-methoxy-4-nitrobenzoové kyseliny (21,6 g, 85 mmol) ve vodě (76 ml) a koncentrované kyselině chlorovodíkové (30,5 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Reakční směs se ochladí na 0 °C, vzniklá pevná látka se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se ve vakuu a získá se 2-amino-5-methoxy-4-nitrobenzoová kyselina (16,6 g, 92 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 3,79 (s, 3H), 7,23 (s, 3H), 7,52 (s, 1H), 8,8 (š s, 2H)

Roztok 2-amino-5-methoxy-4—nitrobenzoové kyseliny (16,6 g, 78 mmol) ve formamidu (250 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 4,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na 0 °C, zředí se vodou a vzniklá sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a suší se ve vakuu a získá se 6-methoxy-7-nitro-3,4-dihydrochinazolin-4-on (11,56 g, 67 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 4,02 (s, 3H), 7,8 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,18 (s, 1H)

Suspenze 6-methoxy-7-nitro-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (8 g, 36 mmol) v thionylchloridu (150 ml) a DMF (0,8 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Vzniklá pevná

-57CZ 291386 B6 látka se rozetře s etherem, sebere se filtrací a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-chlor-6methoxy-7-nitrochinazolinu (7,5 g, 75 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆) 4,13 (s, 3H), 7,8 (s, 1H), 8,7 (s. 1H), 9.13 (s, 1H)

Směs hydrochloridu 4-chlor-6-methoxy-7-nitrochinazolinu (784 mg. 2,8 mmol) a 2-fluor-5methoxykarbonyloxy-4-methylanilinu (621 mg, 3,1 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 26), v izopropanolu (10 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Směs se nechá zchladnout, vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se izopropanolem, etherem a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilÍno)-6-methoxy-7-nitrochinazoIinu (1,12 g. 90 %).

'H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,22 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 4,10 (s, 3H). 7,41 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 11,4 (š s, 1H)

MS - ESI: 403 [MH]⁺

Směs hydrochloridu 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-nitrochinazolinu (1,1 g, 25 mmol) a 10 % palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (220 Mg) v methanolu (200 ml) a ethanolu (10 ml) se míchá pod vodíkem při 0.2646 MPa po dobu 7 hodin. Katalyzátor se odfiltruje přes infuzóriovou hlinku, rozpouštědlo se odstraní z filtrátu odpařením a pevný zbytek se promyje etherem, sebere se filtrací a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolinu (930 mg, 91 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆)2,22 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 6,9 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,99 (s, 1H), 8,62 (s, 1H)

MS-ESI: 372 [MH]⁺

Methoxyacetylchlorid (62 μΙ, 0,68 mmol) se přidá po kapkách při teplotě 0 °C k roztoku hydrochloridu 7-amino-4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolinu (215 mg, 0,52 mmol) v methylenchloridu (5 ml) a pyridinu (1,5 ml) a směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě 0 °C. Přidá se další methoxyacetylchlorid (14 μΐ, 0,15 mmol) a směs se míchá po dobu 20 minut při teplotě 0 °C. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetát a vodu a vodná vrstva se upraví na pH 9 pomocí nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí, promyje se solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, acetonitrilu a methanolu v poměru 60:38:2 a získá se 4-(2-fluor-5-methoxykarbonyloxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-methoxyacetamidochinazolin (175 mg, 75 %) jako bílá pevná látka.

‘H NMR spektrum: (DMSOd₆) 2,21 (s, 3H), 3,47 (s, 2H), 3,87 (s, 3H), 4,07 (s, 3H), 4,15 (s, 3H), 7,35 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,96 (s, 1), 8,40 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 9,65 (s, 1H)

Příklad 34

Roztok etherového chlorovodíku (1,0 ml, l,0M roztok, 1,0 mmol) se přidá k 4-chlor-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolinu (340 mg, 1,0 mmol) a 4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilinu (200 mg, 1,2 mol), (jak je popsán v EP 0 061 741 A2) v terc.butanolu (15 ml). Směs se zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 1 hodiny a pak se míchá po dobu 18 hodin při okolní teplotě. Reakční směs se zředí acetonem a vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se acetonem a suší se a získá se hemihydrát hydrochloridu 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolinu (480 mg, 88 %) jako béžový prášek.

-58CZ 291386 B6 'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,67 (t, 2H), 4,04 (s, 3H), 4,70 (t, 2H), 7,18 (d, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,51 (dd, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,82 (s, 1 Η), 10,6 (š s, 1 Η), 11,7 (š s, 1H)

MS - ESI: 465 [MH]⁺

Elementární analýza:

C₂iH₂₂N₄C1FO₃S.2HCI.0,5H₂O

Nalezeno: C 45,8 % H 4,4 % N 10,0 %

Vypočteno: C46,l% H4,6% N10,2%

Výchozí materiál se připraví následovně:

1,2-Dibromethan (19,2 ml, 286 mmol) se přidá k 7-hydroxy-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (6,0 g, 22 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 16) a uhličitanu draselnému (14,4 g, 107 mmol) v DMF. Směs se míchá při teplotě 85 °C po dobu 2,5 hodin, nechá se zchladnout a nerozpustné materiály se odstraní filtrací. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 93:7. Produkt se rozetře s ethylacetátem a získá se 7-(2-bromethoxy)-6methoxy-4-fenoxychinazolin (5,3 g, 63 %).

Směs 7-(2-bromethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (2,0 g, 5,3 mmol) v thiomorfolinu (15 ml) se míchá při okolní teplotě po dobu 5 hodin. Směs se zředí vodou a vzniklá sraženina se sebere filtrací. Pevný produkt se rozpustí v methylenchloridu, promyje se solankou a filtruje se přes filtrační papír. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2thiomorfolinoethoxy)chinazolin (2,0 g, 94 %) jako světle žlutá pevná látka.

MS - ESI: 398 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolinu (2,0 g, 5 mmol) ve 2M kyselině chlorovodíkové (25 ml) se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 1,5 hodiny. Směs se nechá zchladnout a upraví se na pH 7 pomocí pevného hydrogenuhličitanu sodného. Přidá se methylenchlorid a vzniklý polotuhý produkt se izoluje dekantací a filtrací vodné směsi. Tento produkt se rozpustí v acetonu a nerozpustné materiály se odstraní filtrací. Rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje a získá se 6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)-3,4dihydrochinazolin-4-on (1,5 g, 92 %) jako bílá pevná látka.

MS - ESI: 322 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)-3,4-dihydrochinazo!in—4-onu (1,5 g, 4,6 mmol), thionylchloridu (25 ml) a DMF (0,2 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Vzniklá guma se rozdělí mezi vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a methylenchlorid. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje methylenchloridem (4 x 40 ml). Spojené extrakty se filtrují, rozpouštědlo se odstraní odpařením a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 95:5. Čistý produkt se rozetře s acetonem a získá se 4-chlor-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolin (400 mg, 25 %) jako oranžověhnědá pevná látka.

MS - ESI: 342 [MH]⁺

-59CZ 291386 B6

Příklad 35

Roztok etherového chlorovodíku (1,0 ml, l,0M roztok, 1.0 mmol) se přidá k 4-chlor-6methoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy)chinazolinu (110 mg. 3,5 mmol) a 4-chlor-25 fiuor-5-hydroxyanilinu (72 mg, 4,5 mmol), (jak je popsáno v EP 0 061 741 A2) v terc.butanolu (5 ml). Směs se zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 1 hodiny, nechá se zchladnout a zředí se acetonem. Vysrážený produkt se sebere filtrací, promyje se methylenchloridem a acetonem a suší se a získá se hydrát hydrochloridu 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(2methoxyethylamino)ethoxy)chinazolinu (110 mg, 59 %) jako béžový’ prášek.

'HNMR spektrum: (DMSOd₆) 3,2 - 3,6 (m, 4H), 3,38 (s, 3H), 3,73 (t, 2H), 4,09 (s, 3H), 4,58 (t, 2H), 7,24 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,55 (s, lh), 8,48 (s, 1H). 7,85 (s. 1H), 9,35 (š s, 1H), 10,65 (š s, 1H), 11,75 (š s, 1H)

MS - ESI: 437 [MH]⁺

Elementární analýza:

C20H24N4CIFO4.2HCI. 1,2H₂O

Nalezeno: C45,l% H4,6% N 10,1 %

Vypočteno: C 45,2 % H 5,0 % N 10,5 %

Výchozí materiál se připraví následujícím způsobem:

Směs 7-(2-bromethoxy)-6-methoxy-4-fenoxychinazolinu (1,1 g, 2,9 mmol), (připraven jak je popsáno pro výchozí materiál v příkladu 22) v methoxyethylaminu (8 ml) se míchá při okolní teplotě po dobu 4 hodin. Směs se zředí vodou a extrahuje se methylenchloridem (5 x 25 ml). Spojené extrakty se promyjí solankou a filtrací se přes filtrační papír. Rozpouštědlo se odstraní 30 a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, methanolu a vodného amoniaku v poměru 100:8:1 a získá se 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy)chinazolin (760 mg, 70 %) jako bílá pevná látka.

MS-ESI: 379 [MH]⁺

Směs 6-methoxy-4-fenoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy)chinazolinu (760 mg, 2 mmol) ve 2M kyselině chlorovodíkové (5 ml) se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 1,5 hodiny. Směs se nechá zchladnout a pevným hydrogenuhličitanem sodným se směs upraví na pH 7. Voda se odstraní odpařením a zbytek se extrahuje směsí methylenchloridu, methanolu a vodného amonia40 ku v poměru 100:8:1. Těkavé látky se odstraní z extraktu odpařením, zbytek se rozpustí v methylenchloridu, filtruje se přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se

6-methoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-on (600 mg, 99 %) jako bílá pevná látka.

Směs 6-methoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy-3,4-dihydrochinazolin-4-onu (300 mg, mmol), thionylchloridu (5 ml) a DMF (0,1 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu minut. Přebytek thionylchloridu se odstraní odpařením a zbytek se azeotropicky destiluje s toluenem. Vzniklá guma se rozdělí mezi vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a methylenchlorid. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje methylenchloridem (4 x 40 ml). 50 Spojené extrakty se filtrují přes filtrační papír a rozpouštědlo se odstraní odpařením a získá se

4-chlor-6-methoxy-7-(2-(2-methoxyethylamino)ethoxy)chinazolin (120 mg, 38 %) jako žlutá pevná látka.

-60CZ 291386 B6

Příklad 36

Směs 4-chlor-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolinu (202 mg, 0,6 mmol) a 5M izopropanolového chlorovodíku (1,5 ml) v izopropanolu (5 ml) se zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 18 hodin. Směs se nechá zchladnout a těkavé látky se odstraní odpařením. Zbytek se rozdělí mezi methylenchlorid a vodu a vodná vrstva se upraví na pH 6,5 pomocí 0,lM hydroxidu sodného. Organická vrstva se oddělí, promyje se vodou a solankou, suší se (MgSO₄) a rozpouštědlo se odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu (95:5). Čistá pevná látka se rozpustí ve směsi methylenchloridu a methanolu a přidá se 2,2 M etherový roztok chlorovodíku. Těkavé látky se odstraní odpařením, pevný zbytek se suspenduje v etheru, sebere se filtrací, promyje se etherem a suší se ve vakuu a získá se hydrochlorid 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolinu (91 mg, 26 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,3 - 2,4 (m, 2H), 3,1 -3,2 (m, 2H), 3,3- 3,4 (m,2H), 3,55 (d, 2H), 3,75 (t, 2H), 4,01 (d, 2H), 4,03 (s, 3H), 4,35 (t, 2H), 7,43 (s, IH), 7,76 (d,2H), 8,21 (s, IH), 8,93 (s, IH).

MS-ESI: 511 [MH]⁺

Elementární analýza;

C₂2H₂3N₄O₃BrF₂.0,3H₂0.1,85HC1.0,09ether.0,05CH₂Cl₂

Nalezeno: C 45,4 % H 4,7 % N 9,2 %

Vypočteno: C 45,4 % H 4,5 % N 9,4 %

Výchozí materiál se připraví následovně:

Diethylazodikarboxylát (2,67 ml, 17 mmol) se přidá po kapkách k roztoku 3-morfolinopropan1-olu (1,54 g, 10 mmol), 7-hydroxy-3,4-dihydro-6-methoxy-3-((pivaloyloxy)methyl)chinazolin-4-onu (2,6 g, 8,5 mmol) a trifenylfosfinu (4,45 g, 17 mmol) v methylenchloridu (40 ml). Po 2 hodinovém míchání při okolní teplotě se těkavé látky odstraní odpařením. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methanolu, nejprve v poměru 97:3, poté v poměru 95:5 a získá se 3,4-dihydro-6-methoxy-3-((pivaloyIoxy)methyl)-7-(3morfolinopropoxy)chinazolin-4-on (3,6 g, 97 %).

'HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 1,12 (s, 9H), 2,2 - 2,3 (m, 2H), 3,1 - 3,2 (m, 2H), 3,32 (t, 2H), 3,55 (d, 2H), 3,65 - 3,75 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,05 (d, 2H), 4,25 (t, 2H), 5,93 (s, 2H), 7,23 (s, IH), 7,54 (s, IH), 8,41 (s, IH)

Roztok 3,4-dihydro-6-methoxy-3-((pivaloyloxy)methyl)-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin4-onu (4,93 g, 11,4 mmol) v nasyceném roztoku methanolického amoniaku se míchá při okolní teplotě po dobu 2 dnů. Těkavé látky se odstraní odpařením. Pevná látka se suspenduje v etheru, sebere se filtrací, promyje se etherem a suší se ve vakuu a získá se 4-hydroxy-6-methoxy-7-(3morfolinopropoxy)chinazolin (2,87 g, 79 %).

‘HNMR spektrum: (DMSOd₆, CF₃COOD) 2,2 -2,3 (m, 2H), 3,15 (t, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,55 (d,2H), 3,7 (t, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,05 (d, 2H), 4,26 (t, 2H), 7,29 (s, IH), 7,56 (s, IH), 8,96 (s, IH)

Roztok 4-hydroxy-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolinu (2,87 g, 9 mmol) a DMF (1 ml) v thionylchloridu (35 ml) se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 45 minut. Po přidání toluenu se těkavé podíly odstraní odpařením. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu a vodná vrstva se upraví na pH 8 pomocí 2M vodného hydroxidu sodného. Organická vrstva se promyje

-61 CZ 291386 B6 vodou a solankou, suší se (MgSO₄) a těkavé látky se odstraní odpařením. Pevný zbytek se čistí sloupcovou chromatografií eluováním směsí methylenchloridu, acetonitrilu a methanolu v poměru 50:47:2,5 a získá se 4-chlor-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin (2 g, 66 %) ’H NMR spektrum: (CDC1₃) 2,13 (m, 2H), 2,48 (š s, 4H), 2,56 (t, 2H), 3,72 (t, 4H), 4,05 (s, 3H), 4,29 (t. 2H), 7,37 (d, 2H), 8,86 (s, 1H)

Příklad 37

Zde jsou uvedeny reprezentativní farmaceutické dávkové formy obsahující sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl (zde označovány jako sloučenina X) pro terapeutické nebo profylaktické použití u lidí:

tableta I	mg/tableta
sloučenina X	100
laktóza Ph. Eur.	182,75
sodná sůl kroskarmelózy	12,0
pasta kukuřičného škrobu
(5 % hmotn./obj. pasta)	2,25
stearát hořečnatý	3,0
tableta II	mg/tableta
sloučenina X	50
laktóza Ph. Eur.	223,75
sodná sůl kroskarmelózy	6,0
kukuřičný škrob	15,0
polyviny lpyrrol idon
(5 % hmotn./obj. pasta)	2,25
stearát hořečnatý	3,0
tableta III	Mg/tableta
sloučenina X	1,0
laktóza Ph. Eur.	93,25
sodná sůl kroskarmelózy	4,0
kukuřičný škrob
(5 % hmotn./obj. pasta)	0,75
stearát hořečnatý	1,0
kapsle	Mg/kapsle
sloučenina X	10
laktóza Ph. Eur.	488,5
stearát hořečnatý	1,5

-62CZ 291386 B6

(e)	injekce I	(50 mg/ml)
	sloučenina X	5,0 % hmotn./obj.
	IN roztok hydroxidu sodného O,1N kyselina chlorovodíková (k úpravě pH na 6)	15,0 % obj./obj.
	polyethylenglykol 400 voda pro injekce do 100 %	4,5 % hmotn./obj.
Φ	injekce II	(10 mg/ml)
	sloučenina X	1,0 % hmot./obj.
	fosforečnan sodný BP	3,6 % hmot./obj.
	0,lN roztok hydroxidu sodného voda pro injekce do 100 %	15,0 % obj./obj.
(g)	injekce III	1 mg/ml, pufrováno na pH 6)
	sloučenina X	0,1 % hmot./obj.
	fosforečnan sodný BP	2,26 % hmot./obj.
	kyselina citrónová	0,38 % hmot./obj.
	polyethylenglykol 400 voda pro injekce do 100 %	3,5 % hmot./obj.
Poznámka
Výše uvedené přípravky lze připravit obvyklými způsoby, které jsou z farmaceutické praxe dobře

známy. Tablety (a) až (c) mohou být připraveny obvyklými způsoby v enterosolventní formě, například za použití povlaku z acetát-ftalátu celulózy.

PATENTOVÉ

NÁROKY

Claims

1. Chinazolinový derivát obecného vzorce I (I) kde Z znamená -O-, -NH- nebo -S-;

-63 CZ 291386 B6

R¹ je vodík, hydroxyskupina nebo alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku;

R² je vodík;

R⁴ je vybrán z jedné z následujících skupin:

1) vodík, alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyalkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, výhodně hydroxyalkylová skupina se 2 až 5 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku;

2) alkylX²COR¹² s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, kde X² je -O- a R¹² je alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku;

3) alkylX³R¹⁷ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, kde X³ znamená -O-, -S-, -SO-, -SO₂-NR^I8CO-, -CONR¹⁹-, -NR²¹SOr- nebo -NR²²-, kde R¹⁸, R¹⁹, R²¹ a R²² každý nezávisle znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu a R¹⁷ je vodík, alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina nebo 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina vybraná z tetrahydropyranu a morfolinoskupiny;

4) alkylR²³ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, kde R²³ je 5 nebo 6 členná nasycená heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy nezávisle na sobě vybranými z O, Sa N, přičemž heterocyklická skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

5) alkenylR²³ se 2 až 5 atomy uhlíku v alkenylu, kde R²³ má význam definovaný výše;

6) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylech, kde X⁴ a X⁵, které jsou stejné nebo různé, znamenají -O-, -S-, -SO-, -SO2-, -NR²⁵CO-, -SO2NR²⁷-, -NR²⁸SO₂- nebo -NR²⁹-, kde R , R , R a R každý nezávisle znamená vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku;

kromě 4-(3,4,5-trimethoxyfenoxy)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-methoxyfenylthio)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenylthio)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenoxy)-6,7-dimethoxychinazolinu, 4-(3-chlorfenylthio)-6,7-dimethylchinazolinu a 4-(3,4,5-trimethoxyanilino)-6,7-<iimethoxychinazolinu;

a jeho soli.

2. Chinazolinový derivát podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R¹ znamená vodík, hydroxylovou skupinu, methoxyskupinu nebo ethoxyskupinu.

3. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 2 obecného vzorce I, kde fenylová skupina nesoucí (R³)_m má obecný vzorec II:

-64CZ 291386 B6 (Π) , kde

R^a znamená vodík, methylovou skupinu, fluor nebo chlor,

R^b znamená vodík, methylovou skupinu, methoxyskupinu, brom, fluor nebo chlor;

R^c znamená vodík nebo hydroxyskupinu a

R^d znamená vodík, fluor nebo chlor.

4. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 3 obecného vzorce I, kde Z znamená NH.

5. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 4 obecného vzorce I, kde X¹ znamená -0-, -NR⁸CO~, kde R⁸ znamená vodík nebo NH.

6. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 5 obecného vzorce I, kde R⁴ je vybrán z následujících skupin:

1) alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyalkylová skupina se 2 až 5 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku,

2) alkylX²COR¹² se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu, kde X² má význam definovaný v nároku 1 a R¹² znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku;

3) alkylX³R¹⁷ se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylu, kde X³ má význam definovaný v nároku 1 a R¹⁷znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cyklopentylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu;

4) alkylR³⁰ s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylu, kde R³⁰ je vybrán ze souboru, který zahrnuje pyrrolidinylovóu skupinu, piperazinylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, l,3-dioxolan-2-ylovou skupinu, l,3-dioxan-2-ylovou skupinu, l,3-dithiolan-2-ylovou skupinu a l,3-dithian-2-ylovou skupinu, kde příslušná skupina je vázaná k alkylové skupině s 1 až 4 atomy uhlíku přes atom uhlíku a kde skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku nebo alkylR³¹ se 2 až 4 atomy uhlíku v alkylu, kde R³¹ je skupina vybraná ze souboru, který zahrnuje morfolinovou skupinu, thiomorfolinovou skupinu, pyrrolidin-l-ylovou skupinu, piperazin-l-ylovou skupinu a piperidinovou skupinu, kde příslušná skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku;

5) alkenylR³⁰ se 3 až 4 atomy uhlíku v alkenylu, kde R³⁰ má uvedený význam;

6) alkenylR³¹ se 3 až 4 atomy uhlíku v alkenylu, kde R³¹ má výše uvedený význam;

-65CZ 291386 B6

7) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ s 2 až 3 atomy uhlíku v alkylech, kde X⁴ a X⁵ mají význam definovaný v nároku 1 a R²⁴ alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku.

7. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 6 obecného vzorce I, kde R⁴ je vybrán z následujících skupin:

2) alkylX³R¹⁷ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu, kde X³ má význam definovaný podle nároků 1 aR¹⁷ znamená alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, cyklopentylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu;

3) alkylR³⁰ s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylu, kde R³⁰ je vybrán ze souboru, který zahrnuje pyrrolidinylovou skupinu, piperazinylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, l,3-dioxolan-2-ylovou skupinu, l,3-dioxan-2-ylovou skupinu, l,3-dithiolan-2-ylovou skupinu a l,3-dithian-2-ylovou skupinu, kde příslušná skupina je vázaná k alkylové skupině s 1 až 2 atomy uhlíku přes atom uhlíku a kde skupina může nést jeden substituent vybraný ze souboru, který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku nebo alkylR³¹ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu, kde R³¹ je skupina vybraná ze souboru, který zahrnuje morfolinovou skupinu, thiomorfolinovou skupinu, piperidinoskupinu, pyrrolidin-l-ylovou skupinu a piperazin-1ylovou skupinu, kde příslušná skupina může nést jeden substituent vybraný ze souboru který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a

4) alkylX⁴alkylX⁵R²⁴ se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylech, kde X⁴ a X⁵ mají význam definovaný podle nároku 1 a R²⁴ znamená alkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku.

8. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 7 obecného vzorce I, kde

R⁴ znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu, 2-hydroxyethylovou skupinu, 3-hydroxypropylovou skupinu, 2-methoxyethylovou skupinu, 3-methoxypropylovou skupinu, 2(methylsulfinyl)ethylovou skupinu, 2-(methylsulfonyl)ethylovou skupinu, 2-(N,N-dimethylamino)ethylovou skupinu, 3-(N,N-dimethylamino)propylovou skupinu, 2-morfolinoethylovou skupinu, 3-morfolinopropylovou skupinu, 2-piperidinoethylovou skupinu, 3-piperidinopropylovou skupinu, 2-(piperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(piperazin-l-yl)propylovou skupinu, 2(pyrrolidin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(pyrrolidin-l-yl)propylovou skupinu, (l,3-dioxolan-2yl)methylovou skupinu, 2-(l,3-dioxolan-2-yl)ethylovou skupinu, 2-(2-methoxyethylamino)ethylovou skupinu, 3-(2-methoxyethylamino)propylovou skupinu, 2-thiomorfolinoethylovou skupinu, 3-thiomorfolinopropylovou skupinu, 2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3(4-methylpiperazin-l—yl)propylovou skupinu nebo 2-(2-methoxyethoxy)ethylovou skupinu.

9. Chinazolinový derivát podle nároků 1 až 8 obecného vzorce I, kde

R⁴ znamená 2-hydroxyethylovou skupinu, 3-hydroxypropylovou skupinu, 2-methoxyethylovou skupinu, 3-methoxypropylovou skupinu, 2-(methylsulfinyi)ethylovou skupinu, 2-(methylsulfonyl)ethylovou skupinu, 2-(N,N-dimethylamino)ethylovou skupinu, 3-(N,N-dimethylamino)propylovou skupinu, 2-morfolinoethylovou skupinu, 3-morfolinopropylovou skupinu, 2piperidinoethylovou skupinu, 3-piperidinopropylovou skupinu, 2-(piperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(piperazin-l-yl)propylovou skupinu, 2-(pyrrolidin-l-yl)ethylovou skupinu, 3(pyrrolidin-l-yl)propylovou skupinu, (l,3-dioxolan-2-yl)methylovou skupinu, 2-(l,3-dioxolan-2-yl)ethylovou skupinu, 2-(2-methoxyethylamino)ethylovou skupinu, 3-(2-methoxyethylamino)propylovou skupinu, 2-thiomorfolinoethylovou skupinu, 3-thiomorfolinopropylovou

-66CZ 291386 B6 skupinu, 2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethylovou skupinu, 3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylovou skupinu nebo 2-(2-methoxyethoxy)ethylovou skupinu.

10. Chinazolinový derivát podle nároku 1, kterým je 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-methoxyacetamidochinazolin, 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin a jejich soli.

11. Chinazolinový derivát podle nároku 1, kterým je: 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(pyrrolidin-l-yl)ethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-methylthioethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(4-ch lor-2-fl uor-5-hydroxy an i 1 i no)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)chinazol in, 7-(2-acetoxyethoxy)-4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-morfolinoethoxy)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-piperidinoethoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-methoxyethylamino)chinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-cyklopentyloxyethoxy)chinazolin, 4-(2,4-difluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin,

4-(2,4-d ifluor-5-hydroxyan i 1 ino)-6-methoxy-7-(2-methoxyethoxy)ch inazol in a jejich soli.

12. Chinazolinový derivát podle nároku 1, kterým je 4-(4-brom-2,6-difluoranilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4-brom-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-thiomorfolinoethoxy)chinazolin, 6,7-dimethoxy-4-(3-hydroxy-4-methylfenoxy)chinazolin,

4-(4-chlor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(3-morfolinopropoxy)chinazolin, 4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-7-(2-hydroxyethoxy)-6-methoxychinazolin,

-67CZ 291386 B6

4-(4-chIor-2-fluor-5-hydroxyanilino)-6-methoxy-7-(2-(4-methylpiperazin-l-yl)ethoxy)chinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy—4-methylanilino)-7-(2-methoxyethoxy)chinazolin,

4-(2-fluor-5-hydroxy-4-methylanilino)-6-methoxy-7-(2-(methylsulfinyl)ethoxy)chinazolin a jejich soli.

10 13. Chinazolinový derivát obecného vzorce I podle nároků 1 až 12, který je ve formě farmaceuticky přijatelné soli.

14. Způsob přípravy chinazolinového derivátu obecného vzorce I nebo jeho soli, jak je definován v nároku 1, v y z n a č uj í c í se t í m , že zahrnuje (a) reakci chinazolinového derivátu obecného vzorce III (Π1), kde R¹, R², X¹ a R⁴ mají význam definovaný v nároku 1 a L¹ znamená odštěpitelnou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce IV:

ZH (IV), kde Z, R³ a m mají význam definovaný v nároku 1, čímž se získá chinazolinoderivát obecného vzorce I, (b) pro přípravu chinazolinových derivátů obecného vzorce I a jejich solí, ve kterých skupina 25 obecného vzorce Ha:

(Ha),

-68CZ 291386 B6 kde R·’ a m mají význam definovaný v nároku 1, představuje fenylovou skupinu nesoucí jednu nebo více hydroxyskupin, odstranění chránící skupiny z chinazolinového derivátu obecného vzorce V (V), kde X¹, m, R¹, R², R³, R⁴ a Z mají význam definovaný v nároku 1, P znamená chránící skupinu fenolické hydroxylové skupiny a p¹ je celé číslo 1 až 5 rovné počtu chráněných hydroxylových skupin a že m-p¹ je rovno počtu substituentů R³, které nejsou chráněné hydroxyskupiny, (c) pro přípravu těch chinazolinových derivátů obecného vzorce I ajejich solí, kde substituent X¹ je -0-, nebo -NR⁷-, kde R¹ má význam definovaný v nároku 1, reakci chinazolinového derivátu obecného vzorce VI:

kde X¹, R¹, R², R³ a Z mají význam definovaný v nároku 1, se sloučeninou obecného vzorce VII

R⁴-L>

(VII) kde R⁴ má význam definovaný v nároku 1 a L¹ má význam definovaný výše, (d) reakci chinazolinového sloučeniny obecného vzorce VIII:

(VIII),

-69CZ 291386 B6 kde R¹, R², R³, Zam mají významu definovaný v nároku 1 a L¹ má uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce IX:

R⁴-X'-H (IX), kde R⁴ a X¹ mají význam definovaný v nároku 1;

(e) pro přípravu chinazolinových derivátů obecného vzorce I a jejich solí, kde R⁴ znamená alkylR³² s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, kde R^j2 je vybrán z jedné z následujících čtyř skupin:

1) X⁶alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylu, kde X⁶ znamená -0-, -S-, -SO2-, -NR³³CO- nebo -NR³⁴SO2- kde R³³ a R³⁴ každý nezávisle znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu;

2) NR³⁵R³⁶, kde R³⁵ a R³⁶, které mohou být stejné nebo různé, každý znamená vodík, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylu a 2 až 3 atomy uhlíku v alkylu,

3) X⁷alkylX⁵R²⁴ s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylu, kde X⁷ znamená -0-, -S-, -SO2-, -NR³⁷CO~, -NR³⁸SO2- nebo -NR³⁹-, kde R³⁷, R³⁸ a R^j9 každý znamená nezávisle vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a X⁵ a R²⁴ mají význam definovaný v nároku 1 a

4) R³¹ kde R³¹ je 5 nebo óčlenná nasycená heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy, ze kterých je jeden atom dusíku a druhý je vybrán nezávisle se souboru, který zahrnuje O, S a N, přičemž heterocyklická skupina je vázána k alkylové skupině se 2 až 5 atomy uhlíku přes atom dusíku a kde heterocyklická skupina může nést jeden nebo dva substituenty vybrané ze souboru, který zahrnuje oxoskupinu, hydroxyskupinu, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

reakci chinazolinové sloučeniny obecného vzorce X (X) kde X¹, R¹, R², R³, Z a m mají význam definovaný v nároku 1, L¹ má uvedený význam a R⁴⁰znamená alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, se sloučeninou obecného vzorce XI

R³²-H (XI), kde R³² má uvedený význam, (f) pro přípravu chinazolinových sloučenin obecného vzorce I a jejich solí, kde substituent R⁴-X' znamená alkylaminovou skupinu, reakci chinazolinových derivátů obecného vzorce I, kde substituent R⁴-X' znamená aminovou skupinu, s alkylačním činidlem;

-70CZ 291386 B6 (g) pro přípravu chinazolinových sloučenin obecného vzorce I a jejich solí, kde R⁴-X' je aminoskupina, redukci odpovídajícího chinazolinového derivátu obecného vzorce I, kde substituent v odpovídající poloze chinazolinového kruhu je nitroskupina;

a kde pokud je požadována sůl chinazolinového derivátu obecného vzorce I, reaguje získaná sloučenina s kyselinou nebo bázi za vzniku žádané soli.

15. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku chinazolinový derivát obecného vzorce I, jak je definován v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou nebo nosičem.

16. Použití chinazolinového derivátu podle kteréhokoli z nároků 1 až 13 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro vyvolání účinku snižujícího antiangiogenní a/nebo vaskulámí permeabilitu v případě potřeby u teplokrevných živočichů, jako je člověk.