CZ305949B6 - Kukuřičná rostlina PV-ZMGT32(nk) nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, její potomstvo a její semena - Google Patents
Kukuřičná rostlina PV-ZMGT32(nk) nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, její potomstvo a její semena Download PDFInfo
- Publication number
- CZ305949B6 CZ305949B6 CZ2008-437A CZ2008437A CZ305949B6 CZ 305949 B6 CZ305949 B6 CZ 305949B6 CZ 2008437 A CZ2008437 A CZ 2008437A CZ 305949 B6 CZ305949 B6 CZ 305949B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- dna
- seq
- maize
- sequence
- plant
- Prior art date
Links
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 72
- 241001057636 Dracaena deremensis Species 0.000 title claims abstract 6
- 239000005562 Glyphosate Substances 0.000 title abstract description 12
- 229940097068 glyphosate Drugs 0.000 title abstract description 12
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 89
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 49
- 108010020183 3-phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase Proteins 0.000 claims abstract 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 49
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 claims description 46
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 claims description 46
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 abstract description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 151
- 238000000034 method Methods 0.000 description 49
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 46
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 41
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 36
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 35
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 33
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 31
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 30
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 29
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 28
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 28
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 24
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 24
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 23
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 23
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 22
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 22
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 22
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 19
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 18
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 17
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 17
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 12
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 12
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 11
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 11
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 10
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 10
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 10
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 10
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 10
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 9
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 9
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 9
- 101710197633 Actin-1 Proteins 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 8
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 7
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 7
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 7
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010031100 chloroplast transit peptides Proteins 0.000 description 5
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 4
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 4
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 3
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 3
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 241001167018 Aroa Species 0.000 description 2
- 101100491986 Emericella nidulans (strain FGSC A4 / ATCC 38163 / CBS 112.46 / NRRL 194 / M139) aromA gene Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108020005120 Plant DNA Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 101150037081 aroA gene Proteins 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 2
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 210000002706 plastid Anatomy 0.000 description 2
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- IRLPACMLTUPBCL-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylyl sulfate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O IRLPACMLTUPBCL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000007347 Apyrase Human genes 0.000 description 1
- 108010007730 Apyrase Proteins 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- YAHZABJORDUQGO-NQXXGFSBSA-N D-ribulose 1,5-bisphosphate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)C(=O)COP(O)(O)=O YAHZABJORDUQGO-NQXXGFSBSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100038183 Dictyostelium discoideum polr2a gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 244000148064 Enicostema verticillatum Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700015679 Nested Genes Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 238000012181 QIAquick gel extraction kit Methods 0.000 description 1
- 101100173636 Rattus norvegicus Fhl2 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 102000004523 Sulfate Adenylyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010022348 Sulfate adenylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 101100232046 Zea mays HSP70 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000010352 biotechnological method Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J dCTP(4-) Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)C1 RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J 0.000 description 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000007857 nested PCR Methods 0.000 description 1
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 101150086745 pre gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000012175 pyrosequencing Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 101150047139 rpo1N gene Proteins 0.000 description 1
- 101150037064 rpoA gene Proteins 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000010517 secondary reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
- C12N15/8275—Glyphosate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
- C12N15/8221—Transit peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/13—Plant traits
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Physiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
Abstract
Technické řešení se týká kukuřičné rostliny PV ZMGT32(nk603) nebo její části, tolerantní ke glyfosfátu, jejíž genom obsahuje vložený úsek DNA kódující EPSPS, přičemž vložený úsek DNA má 5' a 3' spojení s genomovou DNA kukuřice obsahující Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8, a jejího potomstva. Dále se vynález týká kukuřičné rostliny nebo její části, tolerantní ke glyfosfátu, jejíž genom obsahuje vložený úsek DNA kódující EPSPS a Sekv. č. 9, 10, 11 a 12, a jejího potomstva. Vynález se rovněž týká semena kukuřičné rostliny, která má fenotyp tolerantní ke glyfosfátu a obsahuje Sekv. č. 9, 10, 11 a 12. Vzorek semena je uložen v Americké Sbírce „American Type Culture Collection“ (ATCC) pod přístupovým číslem PTA-2478.
Description
Kukuřičná rostlina PV-ZMGT32(nk) nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, její potomstvo a její semena
Oblast techniky
Vynález se týká oblasti molekulární biologie rostlin, konkrétně se vynález týká kukuřičné rostliny nebo její části, která nese toleranci rostlin ke glyfosfátu. Dále se vynález týká potomstva této kukuřičné rostliny a jejích semen.
Dosavadní stav techniky
Vynález se týká rostliny kukuřice (Zea mays) PV-ZMGT32(nk603), tolerantní k herbicidu glyfosfátu a rostlinného expresního konstruktu kukuřičné rostliny PV-ZMGT32(nk603) a jeho potomků.
Kukuřice je důležitá plodina a je primárním zdrojem obživy v mnoha oblastech světa. Na kukuřici byly aplikovány biotechnologické způsoby za účelem zlepšení agronomických vlastností a kvality produktu. Jednou z takových agronomických vlastností je tolerance k herbicidu glyfosfátu. Tato vlastnost kukuřici dává exprese transgenu v rostlinách kukuřice (US patent 6 040 497).
O expresi cizích genů v rostlině je známo, že je ovlivněna pozicí na chromosomu, případně strukturou chromatinu (například heterochromatin), nebo přítomností transkripčních regulačních úseků (například zesilovačů) v blízkosti místa začlenění (Weising a kol., Ann. Rev. Genet. 22: 421 477, 1988). Za tímto účelem je mnohdy nezbytné prohledávat velké množství případů, aby byl identifikován případ, pro který je charakteristická optimální exprese zavedeného genu. U rostlin a u dalších organizmů bylo například zjištěno, že se úroveň exprese může velmi lišit případ od případu. Mohou zde být také rozdíly v prostorovém nebo časovém profilu exprese, například rozdíly v relativní expresi transgenu v různých rostlinných pletivech, které však neodpovídají předpokládané distribuci vzhledem k transkripčním regulačním úsekům přítomným v zavedeném genovém konstruktu. Za tímto účelem se obvykle vytvoří stovky až tisíce případů a tyto případy se prohledávají na výskyt určitého případu, který má požadovanou hladinu exprese transgenu a distribuci exprese vhodnou ke komerčním účelům. Případ, který má požadovanou hladinu nebo distribuci exprese transgenu je užitečný pro přenos transgenu do jiného genetického pozadí pohlavním křížením s použitím obvyklých pěstitelských postupů. Potomstvo takových křížení zachovává charakteristiku exprese transgenu původního transformanta. Taková strategie se používá k zajištění spolehlivé exprese genu v řadě variant, které jsou dobře adaptované na místní růstové podmínky.
Schopnost detekovat přítomnost konkrétního případu za účelem stanovení, zda potomstvo pohlavního křížení obsahuje inkriminovaný transgen, by byla výhodná. Navíc způsob detekce konkrétního případu by byl například užitečný při dodržování omezení nařízených pro předobchodní schvalování a označování potravin odvozených z rekombinantních rostlin kukuřice. Přítomnost transgenu je možné detekovat kterýmkoli známým způsobem detekce nukleových kyselin, jako je polymerázová řetězová reakce (PCR) nebo hybridizace DNA s použitím sond. Tyto detekční způsoby se však obecně zaměřují na často užívané úseky genů, jako jsou promotory, terminátory, geny pro selekční znaky atd. Výsledkem je to, že tyto způsoby nemohou být použity například pro rozlišení mezi různými případy, zvláště pak takovými, které byly vytvořeny s použitím stejného konstruktu DNA, dokud není známa sekvence oblastí chromosomální DNA („sousední DNA“), přiléhajících k zavedené DNA. PCR analýza specifická pro jednotlivé případy je diskutována například Windelem a kol. (Med. Fac. Landbouww, Univ. Genet 64/5b: 459 - 462, 1999), který identifikoval případ 40-3-2 tolerance ke glyfosfátu u sóji. Použil PCR s párem primerů spojujících úsek, který přemosťuje spoj mezi vloženou DNA a sousední DNA. Konkrétně jeden primer obsahoval sekvenci z vložené DNA a druhý primer obsahoval sekvenci ze sousední DNA.
- 1 CZ 305949 B6
Podstata vynálezu
Úkolem vynálezu je poskytnut konstrukt DNA, který nese toleranci k herbicidu glyfosfátu, když je exprimován v rostlinné buňce. S výhodou se tento vynález týká metody výroby a výběru jednoděložné rostliny kukuřice, která je tolerantní ke glyfosfátu. DNA konstrukt je složen ze dvou transgenních expresních kazet. První expresní kazeta obsahuje molekulu DNA aktinu 1 z rýže (Oryzae sativa) a intron rýžového aktinu 1 funkčně spojený s molekulou DNA kódující sekvenci transitního peptidů, opět funkčně spojenou s molekulou DNA, kódující fosfátovou rezistenci 5enolpyruvylšikimát-3-fosfátsyntetasu (EPSPS), funkčně spojenou s molekulou DNA, složenou z 3' transkripčního terminátoru. Druhá transgenní expresní kazeta z DNA konstruktu je složená z molekuly DNA promotoru 35S viru mozaiky květáku, která je funkčně spojena s molekulou DNA obsahující intron Hsp70, funkčně spojený s molekulou DNA kódující sekvenci tranzitního peptidů do chloroplastů, opět funkčně spojenou s molekulou DNA kódující rezistenci ke glyfosfátu 5-enolpyruvylšikimát-3-fosfátsyntetasu (EPSPS), funkčně spojenou s molekulou DNA tvořenou 3' transkripčním terminátorem.
V konkrétnější podobě je poskytnut konstrukt DNA, který když je exprimován v rostlinné buňce a rostlinách, zodpovídá za toleranci k herbicidu glyfosfátu. Vynález se s výhodou týká způsobu výroby a selekce rostlin kukuřice tolerantních ke glyfosfátu. DNA konstrukt se skládá ze dvou expresních kazet. První expresní kazeta obsahuje molekulu DNA aktinu 1 z rýže (Oryzae sativa) a intron rýžového aktinu 1 funkčně spojený s molekulou DNA kódující sekvenci transitního peptidu EPSPS z Arabidopsis, opět funkčně spojenou s molekulou DNA, kódující fosfátovou rezistenci 5-enolpyruvylšikimát-3-fosfátsyntetasu (EPSPS) izolovanou z Agrobacteria tumefaciens sp. kmen CP4, funkčně spojenou s molekulou DNA, složenou z transkripčního terminátoru nopalinsyntetasy. Druhá transgenní expresní kazeta z DNA konstruktu je složená z molekuly DNA promotoru 35S viru mozaiky květáku, která obsahuje tandemově zdvojený zesilovací úsek, která je funkčně spojena s molekulou DNA obsahující intron Hsp70 ze Zea mays, funkčně spojený s molekulou DNA kódující sekvenci transitního peptidů do chloroplastů (EPSPS) z Arabidopsis, opět funkčně spojenou s molekulou DNA kódující rezistenci ke glyfosfátu 5-enolpyruvylšikimát-3-fosfátsyntetasu (EPSPS) izolovanou z Agrobacteria tumefaciens sp. kmen CP4, funkčně spojenou s molekulou DNA tvořenou transkripčním terminátorem nopalinsyntetasy.
V dalším cíli vynálezu je poskytnuta kompozice a způsoby, potřebné k detekci přítomnosti transgenního/genomového vloženého úseku z nové rostliny kukuřice nazvané PV-ZMGT32(nk603). Jsou poskytnuty molekuly DNA, které obsahují alespoň jednu sekvenci spojení PV-ZMGT32(nk603), vybrané ze skupiny složené z 5' TGTAGCGGCCCACGCGTGGT 3' (Sekv. č. 9), 5' TACCACGCGACACACTCC 3' (Sekv. č. 10) a 5' TGCTGTTCTGCTGACTTT 3' (Sekv. č. 11) a jejich komplementárních řetězců. Sekvence spojení zde přemosťuje spoj mezi heterologní DNA vloženou do genomu a DNA z kukuřičných buněk, která sousedí s místem vložení a je charakteristická pro každý případ. Rostlina kukuřice a semeno, které obsahují tyto molekuly, jsou předmětem vynálezu.
Nová molekula DNA 5' ACCAAGCTTTTATAATAG 3' (Sekv. č. 12) a její komplementární řetězec, kde je molekula DNA nová v PV-ZMGT32(nk603) a jeho potomstvu. Rostlina kukuřice a semeno, které obsahují tuto molekulu, jsou předmětem vynálezu.
Dále molekuly DNA podle vynálezu obsahují nový transgenní/genomový vložený úsek, Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8 a jsou homologní, nebo komplementární k Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8.
Molekuly DNA, které obsahují dostatečně dlouhou transgenní část DNA Sekv. č. 7 a podobně dostatečně dlouhou část sousední kukuřičné DNA sekvence na 5'konci Sekv. č. 7; nebo podobně dostatečně dlouhou část transgenní DNA Sekv. č. 8 a podobně dostatečně dlouhou část sousední kukuřičné DNA sekvence na 3'konci transgenu, kde jsou tyto molekuly DNA užitečné coby příměry při způsobech amplifikace DNA, za účelem poskytnutí produktu amplifíkace DNA speci
-2CZ 305949 B6 ficky vytvořeného z DNA PV-ZMGT32(nk603) a jeho potomstva jsou dalším předmětem vynálezu.
Dalším úkolem vynálezu je poskytnout způsoby detekce přítomnosti DNA, která odpovídá případu kukuřice PV-ZMGT32(nk603) ve vzorku. Tento způsob se skládá z (a) spojení vzorku, který obsahuje DNA se sadou DNA primerů, který poskytuje při použití s genomovou DNA izolovanou z případu PV-ZMGT32(nk603) amplifikační produkt, který je diagnostikou případu kukuřičného případu PV-ZMGT32(nk603); (b) provedení amplifikační reakce nukleové kyseliny, která poskytuje amplifikační produkt; a (c) detekce amplifikačního produktu. Pár molekul DNA, složený z páru DNA primerů, které jsou homologní nebo komplementární k Sekv. č. 7 nebo Sekv. č. 8, které fungují v amplifikační reakci nukleových kyseliny za vytvoření amplifikačního produktu DNA charakteristického pro PV-ZMGT32(nk603). Konkrétněji se jedná o pár molekul DNA, který zahrnuje pár primerů DNA a kde jsou tyto molekuly identifikovány jako Sekv. č. 13, případně její komplementární řetězec a Sekv. č. 14 nebo její komplementární řetězec; Sekv. č. 15, případně její komplementární řetězec a Sekv. č. 16 nebo její komplementární řetězec. Produkt amplifikace zahrnující molekuly DNA Sekv. č. 13 a Sekv. č. 14. Produkt amplifikace zahrnující molekuly DNA Sekv. č. 15 a Sekv. č. 16. Produkt amplifikace získaný výše zmíněným způsobem, který hybridizuje za stringentních podmínek k sekvencím Sekv. č. 9 a Sekv. č. 10., Sekv. č. 1 1 a Sekv. č. 12.
Dalším cílem o vynálezu je způsob detekce přítomnosti molekuly DNA, odpovídající případu PV-ZMGT32(nk603), ve vzorku. Tyto způsoby zahrnují: (a) smíchání vzorku obsahujícího DNA, která byla extrahována z rostliny kukuřice, a molekuly sondy, která hybridizuje za stringentních podmínek s genomovou DNA případu kukuřice PV-ZMGT(nk603) a nehybridizuje za stringentních podmínek s DNA kontrolní rostliny; (b) působení stringentních hybridizačních podmínek na vzorek a sondu; a (c) detekci hybridizace sondy s DNA. Konkrétněji se jedná o způsob detekce přítomnosti molekuly DNA, odpovídající případu PV-ZMGT32(nk603), ve vzorku. Tyto způsoby zahrnují: (a) smíchání vzorku obsahujícího DNA, která byla extrahována z rostliny kukuřice, a molekuly sondy obsahující Sekv. č. 9 a Sekv. č. 10, Sekv. č. 11 a Sekv. č. 12, kde zmíněná sonda hybridizuje za stringentních podmínek s genomovou DNA případu kukuřice PVZMGT(nk603) a nehybridizuje za stringentních podmínek sDNA kontrolní rostliny; (b) působení stringentních hybridizačních podmínek na vzorek a sondu; a (c) detekci hybridizace sondy s DNA.
Dalším cílem vynálezu je poskytnout způsoby výroby rostlin kukuřice, které jsou tolerantní vůči aplikaci glyfosfátu a které zahrnují: (a) pohlavní křížení první rodičovské linie kukuřice, která obsahuje expresní kazetu podle vynálezu odpovídající za toleranci k aplikaci glyfosfátu a druhotnou rodičovskou linii kukuřice, která není tolerantní vůči glyfosfátu, které vytváří různé rostliny potomstva; a (b) výběru rostlin potomstva, které tolerují aplikaci glyfosfátu. Tyto způsoby mohou případně obsahovat ještě další krok zpětného křížení rostlin potomstva se sekundární rodičovskou linií a výroby rostliny kukuřice, která se normálně množí a toleruje aplikaci glyfosfátu.
Dalším cílem vynálezu je poskytnout způsob výběru rostlin kukuřice tolerantních ke glyfosfátu podle vynálezu a jejich potomstva. Způsob zahrnuje extrakci DNA ze vzorku rostliny, spojení DNA se značenou molekulou nukleové kyseliny, vybranou ze skupiny zahrnující Sekv. č. 9 a Sekv. č. 10, Sekv. č. 11 nebo Sekv. č. 12, nebo jejich komplementy, detekci hybridizace zmíněné značené molekuly nukleové kyseliny s DNA a provedení analýzy genetických vazeb znaku tolerance ke glyfosfátu křížením s použitím značení vzhledem ke značené molekule nukleové kyseliny.
Vynález poskytuje způsob výroby kukuřičné rostliny tolerantní k herbicidu glyfosfátu, která zahrnuje transformaci rostliny kukuřice konstruktem DNA (pMON25496), výběr kukuřičné buňky na základě tolerance k působení efektivního množství glyfosfátu a růst této kukuřičné buňky do rostliny kukuřice schopné plodit. Výsledná rostlina může být samooplozena, nebo křížena s kompatibilní variantou za účelem vytvoření pregenu, tolerantního ke glyfosfátu.
-3CZ 305949 B6
Vynález se dále vztahuje na soupravu k detekci DNA, která obsahuje alespoň jednu molekulu DNA dostatečné délky souvislých homologních nukleotidů, nebo sekvenci komplementární k Sekv. č. 7 nebo Sekv. č. 8. Tato sekvence slouží jako primer nebo sonda specifická pro případ kukuřice PV-ZMGT32(nk603), který má přístupové číslo ATCC PTA-2478 a odvozených potomků. Dále je předmětem vynálezu rostlina kukuřice nebo její části vytvořené růstem kukuřičné rostliny PV-ZMGT32(nk603), tolerantní ke glyfosfátu, pyl a vajíčka kukuřičné rostliny PVZMGT32(nk603). Dále jsou to jádra vegetativních buněk, jádra pylových buněk a jádra vaječných buněk rostliny kukuřice PV-ZMGT32(nk603) a potomků od ní odvozených. Dále je předmětem vynálezu rostlina kukuřice a semena PV-ZMGT32(nk603), které poskytují s primery DNA z tohoto vynálezu specifický amplifikační produkt.
Předešlé a další předměty a cíle vynálezu budou lépe objasněny v následujícím podrobném popisu vynálezu a doprovodných obrázcích.
Přihláška nárokuje užitek z U.S. prozatímní přihlášky 60/213,567, podané 06/22/00; U.S Provisional Application 60/214,215, podané 10/13/00 a U.S Provisional Application 60/240,014, podané 10/13/00. Jsou poskytnuty následující definice a způsoby, aby bylo možné lépe definovat tento vynález a k uvedení těch, kteří jsou zběhlí vdané problematice, do tohoto vynálezu. Pokud není uvedeno jinak, měly by být výrazy chápány dle obvyklého užití mezi odborníky. Definice obvyklých výrazů z molekulární biologie mohou být nalezeny také v Riger a kol., Glossaiy of Genetics: Classical and Molecular, páté vydání, Springer-Verlag: New York, 1991; a Lewin, Genes V, Oxford University Press: New York, 1994. Názvosloví bází DNA bylo použito tak, jak je ustanoveno v 37 CFR § 1.822.
Výraz „kukuřice“, zde použitý, znamená Zea Mays nebo kukuřici a zahrnuje veškeré rostlinné varianty, které mohou být vyšlechtěny z kukuřice, včetně divokých typů.
Výraz „zahrnuje“, zde použitý, znamená „včetně avšak bez omezení na“.
„Glyfosfát“ odpovídá N-fosfonometylglycin a jeho solím, glyfosfát je aktivní složkou herbicidu Roundupu® (Monsanto Co.). Působení „herbicidu glyfosfátu“ odpovídá působení herbicidů Roundupu®, Roundupu Ultra®, Roundupu Ultra Max® nebo jakékoli další směsi, která obsahuje glyfosfát. Výběr aplikačních dávek přípravků glyfosfátu, které obsahují biologicky aktivní dávku, je v možnostech obvyklého zemědělského technika.
Konstrukt DNA je soubor navzájem pospojovaných molekul DNA, který poskytuje jednu nebo více expresních kazet. Konstrukt DNA je s výhodou plazmid, který umožňuje replikaci sebe sama v bakteriální buňce a obsahuje různá rozpoznávací místa pro restrikční endonukleázy, které jsou užitečné k zavádění molekul DNA, které poskytují funkční genetické úseky, tj. mimo jiné promotory, introny, zaváděcí sekvence, kódující sekvence, 3'terminační kodóny. Expresní kazety obsažené v konstruktu DNA zahrnují genetické úseky, které umožňují transkripci mediátorové RNA. Expresní kazeta může být sestavena tak, aby umožňovala expresi v prokaryontních nebo eukaryotních buňkách. Expresní kazety podle vynálezu jsou nejlépe konstruovány tak, aby umožnily expresi v eukaryotních buňkách. Kombinace expresních kazet u transgenních rostlin může vést k neočekávaným fenotypům. V tomto vynálezu zvýšila kombinace kazety promotoru aktinu 1 z rýže a promotoru CaMV 35S v konstruktu DNA (pMON25496) u transgenní rostliny toleranci k herbicidu glyfosfátu v porovnání se samotnou jednou kazetou a komerčním standardem GA21, který obsahuje tři kopie kazety promotoru aktinu 1 z rýže.
Transgenní „případ“ je vyroben transformací rostlinné buňky konstruktem heterologní DNA, který obsahuje expresní kazetu nukleových kyselin, zahrnující kýžený transgen, regeneraci populace rostlin, které jsou výsledkem inzerce transgenu do genomu rostliny a výběr konkrétních rostlin, pro které je charakteristické začlenění do genomu na určitém místě. Pojem „případ“ odpovídá původnímu transformantu a potomstvu transformanta, který zahrnuje heterologní DNA. Výraz „případ“ také odpovídá potomstvu, které bylo vytvořeno pohlavním křížením mezi transformanty
-4CZ 305949 B6 a jinými variantami, a které zahrnuje heterologní DNA. I po opakovaném křížení s rodičovskou generací se nachází vložená DNA spolu se sousední DNA na stejném místě na chromosomu. Výraz „případ“ se také vztahuje na DNA z originálního transformanta, která zahrnuje vloženou DNA a sousední genomové sekvence bezprostředně přiléhající ke vložené DNA. Je možné očekávat, že bude přenesen do potomstva, které získá vloženou DNA spolu s kýženým transgenem jako výsledek pohlavního křížení jedné rodičovské linie, obsahující vloženou DNA (například původní transformant a potomek, jako výsledek samoopylení) a rodičovské linie, která neobsahuje vloženou DNA. Rostlina PV-ZMGT32(nk603) tolerantní ke glyfosfátu může být vypěstována z prvního pohlavního křížení první rodičovské rostliny kukuřice zahrnující rostlinu kukuřice, která byla vypěstována z transgenní rostliny kukuřice PV-ZMGT32(nk603) mající přístupové číslo ATCC PTA-2478 a jejich potomků, odvozených od transformantů s expresní kazetou podle vynálezu, která zaručuje toleranci k aplikaci herbicidu glyfosfátu a druhé rodičovské rostliny kukuřice, která postrádá toleranci k herbicidu glyfosfátu, což tedy vede k pluralitě rostlin prvotního potomstva; a samoopylením rostliny prvotního potomstva, což povede k pluralitě rostlin druhotného potomstva, a následnou selekcí rostlin druhotného potomstva na základě tolerance k herbicidu glyfosfátu. Tyto kroky mohou dále obsahovat zpětné křížení rostlin prvotního potomstva resistentních ke glyfosfátu, nebo prvotní rodičovské rostliny kukuřice nebo terciární rodičovské rostliny, což vede k vzniku rostlin kukuřice, které jsou schopny tolerovat aplikaci herbicidu glyfosfátu. Budiž na srozuměnou, že mohou být také kříženy dvě transgenní rostliny za vzniku nové dceřiné rostliny, která obsahuje dva exogenní geny, které se nezávisle segregují. Samoopylení vhodného potomstva může mít za výsledek rostlinu, která je homozygotem pro oba vložené exogenní geny. Zpětné křížení s rodičovskou rostlinou a křížení s rostlinou, která není transgenní, jsou také zahrnuty, podobně jako vegetativní propagace. Popis dalších způsobů křížení, které jsou obecně využívány pro různé znaky a plodiny může být nalezen v jednom z několika odkazů, například Fehr, v Breeding Methods for Cultivar Development, editor: J. Wilcox, American Society of Agronomy, Madison WI (1987).
„Sonda“ je izolovaná nukleová kyseliny, ke které je připojena konvenční, detekovatelná značka, nebo reportérová molekula, například radioaktivní isotop, ligand, chemiluminiscenční látka nebo enzym. Takováto sonda je komplementární k řetězci cílové nukleové kyseliny. Podle vynálezu je komplementární k řetězci genomové DNA z případu kukuřice PV-ZMGT32(nk603), ať již se jedná o rostlinu kukuřice nebo vzorek obsahující DNA ze zmíněného případu. Sondy podle vynálezu nezahrnují pouze desoxyribonukleové, případně ribonukleové kyseliny, ale také polyamidy a další látky, které se váží specificky na cílovou sekvenci DNA a které mohou být použity k detekci přítomnosti cílové sekvence DNA.
„Příměry“ jsou izolované nukleové kyseliny, které v rámci hybridizace nukleových kyselin, teplotně hybridizují ke komplementárnímu cílovému řetězci DNA, za vzniku hybridu mezi primerem a cílovým řetězcem DNA. Dále jsou tyto primery prodlužovány podle cílového řetězce DNA s pomocí polymerázy, například DNApolymerázy. Páry primerů podle vynálezu jsou používány k amplifikaci cílové sekvence nukleové kyseliny, například polymerázovou řetězovou reakcí (PCR), nebo jinými konvenčními způsoby amplifikace nukleových kyselin.
Primery a sondy mají dostatečný počet nukleotidů, aby se specificky vázaly na cílovou sekvenci DNA za podmínek hybridizace nukleových kyselin nebo za podmínek daných technikem. Taková délka může být jakákoli délka dostatečná k použití při zvoleném způsobu detekce. Obecně jsou užívány délky 11 nebo více nukleotidů, s výhodou 18 nebo více nukleotidů, výhodněji 24 a více nukleotidů a nejlépe 30 a více nukleotidů. Takovéto primera a sondy jsou schopny specificky hybridizovat s cílovou sekvencí za vysoce přísných hybridizačních podmínek. S výhodou mají primery a sondy podle vynálezu kompletní podobnost sekvence DNA následných nukleotidů s cílovou sekvencí. Konvenčními způsoby však mohou být vytvořeny sondy, které se od cílové sekvence DNA liší, ale zachovávají si schopnost hybridizovat s cílovou sekvencí DNA.
Způsoby přípravy a použití sond a primerů jsou popsány například v Molecular Cloning: A Laboratory Manuál, Druhé vydání, svazek 1 - 3 , vydavatelé: Sambrook a kol., Cold Spring Harbor
-5CZ 305949 B6
Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (zde dále jako Sambrook a koi., 1989); Current Protocols in Molecular Biology, Editor Ausubel a koi., Greene Publishing and WileyInterscience, New York, 1992 (s pravidelnými obnovami) (zde dále jako Ausubel a koL, 1992); a Innis a kol., PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academie Press: San Diego, 1990. Páry primerů pro PCR mohou být odvozeny od známé sekvence, například s použitím počítačových programů, určených k tomuto účelu jako je Primer (verze 0.5, © 1991 Whitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA).
Primery a sondy založené na sousedních a vložených sekvencích DNA, které jsou popsány zde, mohou být použity k ověření (a je-li třeba k opravě) přiložených sekvencí s použitím konvenčních způsobů, například opětným klonováním a sekvenováním takových sekvencí.
Primery a sondy nukleových kyselin podle vynálezu hybridizují za přísných podmínek s cílovou sekvencí DNA. Jakýkoli konvenční způsob amplifikace může být použit k identifikaci přítomnosti DNA z transgenního případu ve vzorku. Molekuly nukleových kyselin nebo jejich fragmenty jsou schopné specifické hybridizace s jinými molekulami nukleových kyselin za určitých podmínek. Za účelem použití vynálezu, jsou dvě molekuly označeny jako schopné vzájemné specifické hybridizace tehdy, když jsou tyto dvě molekuly schopny vytvořit antiparalelní dvouřetězcovou strukturu nukleových kyselin. Molekula nukleové kyseliny je označena jako „komplementární“ k jiné molekule nukleové kyseliny, jestliže se tyto dvě molekuly vyznačují kompletní komplementaritou. Za účelem použití vynálezu, jsou dvě molekuly označeny jako „kompletně komplementární“, když každý nukleotid z jedné molekuly je komplementární nukleotidu ve druhé molekule. Dvě molekuly jsou označeny jako „minimálně komplementární“, jestliže jedna s druhou hybridizují s dostatečnou stabilitou, která umožní, aby zůstaly hybridizované jedna k druhé za konvenčních „vysoce přísných“ podmínek. Konvenční přísné podmínky jsou popsány v Sambrook a kol., 1989 a v Haymes a kol., v: Nucleic Acid Hybridization, A Practical Aproach, IRL Press, Washington, DC (1985). Odchylky od komplementární sekvence jsou proto možné tak dlouho, dokud zcela nezamezí schopnost molekuly tvořit dvouřetězcovou strukturu. Za účelem použití molekuly nukleové kyseliny jako primem nebo sondy, musí být pouze dostatečně komplementární sekvence, aby byla schopna stabilní dvouřetězcovou strukturu v konkrétním použitém rozpouštědle a koncentraci solí.
Dostatečně homologní sekvence je, pro použití zde, molekula nukleové kyseliny, která specificky hybridizuje s komplementární molekulou nukleové kyseliny, se kterou je srovnávána, za vysoce přísných podmínek. Vhodné přísné podmínky, které podporují hybridizaci DNA, například 6,0 x chlorid sodný/citronan sodný (SSC) při 45 °C, následované promýváním 2,0 x SSC při 50 °C, jsou odborníkům známy nebo mohou být nalezeny v Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1 - 6.3.6. Například koncentrace solí v promývacím kroku může být volena od slabě přísných podmínek hybridizace v přibližně 2,0 x SSC při 50 °C po vysoce stringentní v přibližně 0,2 x SSC při 50 °C. Navíc teplota promývacího kroku může být zvýšena ze slabě stringentních podmínek při pokojové teplotě okolo 22 °C po vysoce přísné podmínky hybridizace při přibližně 65 °C. Jak teplota, tak soli mohou být měněny nebo může být držena konstantní koncentrace solí nebo teplota, zatímco druhá proměnná je měněna. S výhodou bude nukleová kyselina podle vynálezu specificky hybridizovat s jednou či více molekul nukleových kyselin uvedených jako Sekv. č. 9, 10, 11 a 12 nebo jejich komplementy či fragmenty i za mírně přísných podmínek, například v cca 2,0 x SSC při 65 °C. Ve zvláště výhodném provedení vynálezu bude nukleová kyselina podle vynálezu specificky hybridizovat s jednou či více molekulami nukleových kyselin uvedených jako Sekv. č. 9 až 12, nebo jejich komplementy či fragmenty i za vysoce přísných podmínek hybridizace. V dalším provedení vynálezu obsahuje značená molekula nukleové kyseliny podle vynálezu sekvenci nukleové kyseliny značenou jako Sekv. č. 9 až 12, nebo komplement či fragment některé z nich. V dalším provedení vynálezu sdílí výhodná značená molekula nukleové kyseliny podle vynálezu mezi 80% a 100% nebo 90% a 100% identickou sekvenci se sekvencí nukleové kyseliny vedenou jako Sekv. č. 9 až 12 nebo komplementem či fragmentem kterékoli z nich.
-6CZ 305949 B6
V dalším provedení vynálezu sdílí výhodná značená molekula nukleové kyseliny podle vynálezu mezi 95% a 100% identickou sekvenci se sekvencí nukleové kyseliny vedenou jako Sekv. č. 9 až 12 nebo komplementem či fragmentem kterékoli z nich. Sekv. č. 9 až 12 mohou být použity jako značky při šlechtění rostlin ve způsobech identifikace potomků genetického křížení podobných způsobům popsaným pro analýzu jednoduchých opakování sekvence DNA značením v „DNA markers: Protocols, Applications and overviews: (1997) 173 -185, vydavatelé: Cregan a kol., Wiley-Liss NY; všechny jsou zde začleněny jako odkazy ve své podstatě. Hybridizace sondy a cílové molekuly DNA může být detekována jakýmkoli z mnoha způsobů, známých odborníkům. Mezi tyto způsoby patří, avšak je to neomezuje, fluorescenční značky, radioaktivní značky, značky založené na protilátkách a chemiluminiscentní značky.
S ohledem na amplifikaci cílové sekvence nukleové kyseliny (například s pomocí PCR) s využitím konkrétního amplifikačního páru primerů jsou „přísné podmínky hybridizace“ takové podmínky, které dovolí amplifikačnímu páru hybridizovat pouze s cílovou sekvencí nukleové kyseliny, na kterou by se primer s odpovídající sekvencí divokého typu (nebo komplementární) vázal. S výhodou je tak vytvořen v teplotní amplifikační reakci DNA jedinečný produkt amplifikace.
Výraz „specifický k (cílové sekvenci)“ značí, že primer nebo sonda za přísných podmínek hybridizuje pouze s cílovou sekvencí ve vzorku, který tuto cílovou sekvenci obsahuje. Zde použitý výraz „amplifikovaná DNA“ nebo „amplikon“ značí produkt amplifikace cílové sekvence nukleové kyseliny, která je součástí templátu. Využití je například ve stanovení, zda kukuřičná rostlina, vzešlá z pohlavního křížení, obsahuje transgenní případ kukuřičné rostliny podle vynálezu v genomové DNA. DNA extrahovaná z pletiva kukuřičné rostliny může být podrobena způsobu amplifikace DNA s použitím páru DNA primerů. Tento pár zahrnuje první primer odvozený od sousedních sekvencí v genomu rostliny, přiléhajících k místu vložení vložené heterologní DNA. Tímto způsobem je možné vytvořit produkt amplifikace, který je charakteristický pro tento případ DNA. Tento amplifikační produkt má také charakteristickou délku a charakteristickou sekvenci. Délka amplikonu se pohybuje v rozmezí od součtu délek primerů plus jeden pár nukleotidových bází, s výhodou plus asi padesát párů nukleotidových bází, výhodněji plus asi dvěstěpadesát párů nukleotidových bází, nej výhodněji plus asi čtyřistapadesát párů nukleotidových bází. Případně může být pár primerů odvozen od sousedních sekvencí na obou stranách vložené DNA, přičemž je vytvořen amplikon, který obsahuje celou vloženou sekvenci nukleotidů (například fragment DNA MLU1 z expresního konstruktu pMON25496, Obr. 1, přibližně 6706 párů nukleotidových bází). Clen páru primerů může být odvozen od genomové sekvence rostliny, která je umístěna v určité vzdálenosti od vložené sekvence DNA. Tato vzdálenost se může pohybovat v rozmezí od jednoho páru nukleotidových bází až po omezení amplifikační reakce, neboli kolem dvaceti tisíc párů nukleotidových bází. Použitím výrazu „amplikon“ jsou specificky vyloučeny dimery primerů, které mohou být vytvořeny při termální reakci amplifikace DNA.
Amplifikace nukleových kyselin může být provedena kterýmkoli odborníkům známým způsobem amplifikace nukleových kyselin, včetně polymerázové řetězové reakce (PCR). Je známo několik amplifikačních způsobů a jsou mimo jiné popsány v U.S. patentu 4,683,195 a 4,683,202 a v PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Editoři: Innis a kol., Academie Press, San Diego, 1990. Byly vyvinuty způsoby PCR amplifikace schopné amplifikovat do 22 kb genomové DNA a do 42 kb DNA z bakteriofágy (Cheng a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 91: 5695 - 5699, 1994). Tyto způsoby amplifikace DNA spolu s jinými známými způsoby mohou být použity při uplatňování vynálezu v praxi. Sekvence heterologní vložené DNA nebo sousedních sekvencí DNA z případu kukuřice ZMGT32(nk603) může být ověřena (a v případě potřeby opravena) amplifikaci této sekvence z DNA extrahované ze semen nebo rostliny s přístupovým číslem PTA-2478 ATCC sbírky, a to s použitím primerů DNA odvozených od sekvencí zde poskytnutých a následným standardním sekvenováním PCR amplifikačního produktu nebo klonované DNA.
Amplikon vytvořený těmito způsoby může být detekován řadou způsobů. Jedním z těchto způsobuje „Genetic Bit Analysis“ (Nikiforov a kol., Nucleic Acid Res. 22: 4167 - 4175, 1994). V této
-7CZ 305949 B6 metodice je poskytnut primer DNA, jehož sekvence přemosťuje jak sousední sekvenci genomové DNA, tak sekvenci vložené DNA. Oligonukleotid je imobilizován v jamkách na mikrotitrační desce. Následně po PCR kýženého úseku (s použitím jednoho primeru ve vložené sekvenci a jednoho na sousední sekvenci genomové DNA) může být jednořetězcový produkt PCR hybridizován k imobilizovánému oligonukleotidu a slouží jako templát k prodlužovací reakci o jednu bázi s použitím DNApolymerázy a značených ddNTP specifických pro předpokládanou další bázi. Výstup může být fluorescenční nebo založený na ELISA. Signál ukazuje na přítomnost vložené/sousední sekvence díky úspěšné amplifíkaci, hybridizaci a prodloužení o jednu bázi.
Další způsob je pyrosekvenační technika, jak byla popsána Wingem (Innov. Pharma. Tech. 00:18 - 24, 2000). V tomto způsobu je vytvořen oligonukleotid, který přemosťuje spoj vložené DNA a sousední oblasti genomové DNA. Tento oligonukleotid je hybridizován s jednořetězcovým produktem PCR kýženého úseku (jeden primer ve vložené sekvenci a jeden v sousední genomové sekvenci). Následuje inkubace v přítomnosti DNApolymerázy, ATP, sulfurylasy, luciferasy, apyrasy, adenosin-5-fosfosíranu a luciferinu. DŇTP jsou přidávána jednotlivě a výsledek inkorporace, jehož výsledkem je světelný signál, je měřen. Světelný signál indikuje přítomnost transgenu vložené/sousední sekvence, díky úspěšné amplifíkaci, hybridizaci a prodlužování o jednu či více bází.
Další způsob, který může být použit k detekci amplikonu podle vynálezu je fluorescenční polarizace, jak byla popsána Chenem a kol. (Genome Res. 9: 492 - 498, 1999). Při použití tohoto způsobu je vytvořen oligonukleotid, který přemosťuje spoj vložené DNA a sousední oblasti genomové DNA. Tento oligonukleotid je hybridizován s jednořetězcovým produktem PCR kýženého úseku (jeden primer ve vložené sekvenci a jeden v sousední genomové sekvenci). Následuje inkubace v přítomnosti DNApolymerázy a fluorescenčně značených ddNTP. Prodlužování o jednu bázi má za výsledek inkorporaci fluorescenčně značených ddNTP. Inkorporaci je možné měřit jako změnu polarizace na fluorimetru. Změna polarizace indikuje přítomnost transgenu vložené/sousední sekvence, díky úspěšné amplifíkaci, hybridizaci a prodloužení o jednu bázi.
Taqman ® (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) je popsán coby způsob detekce a kvantifikace přítomnosti DNA sekvence a je plně srozumitelný z instrukcí poskytovaných výrobcem. Krátce, je vyrobena sonda, tvořená oligonukleotidem FRET, která přemosťuje spoj vložené DNA a sousední oblasti genomové DNA. Sonda FRET a PCR primery (jeden primer ve vložené sekvenci a jeden v sousední genomové sekvenci) jsou cyklovány v přítomnosti termostabilní polymerázy a dNTP. Hybridizace sondy FRET má za výsledek štěpení a uvolnění fluorescenční části zčásti zhášecí na sondě FRET. Fluorescenční signál indikuje přítomnost sousední/transgenní vložené sekvence, díky úspěšné amplifíkaci a hybridizaci.
Bylo popsáno použití molekulárních majáků při detekci sekvencí, jak je popsáno v Tyangi a kol. (Nature Biotech. 14: 303 - 308, 1996). Krátce, je vyrobena sonda, tvořená oligonukleotidem FRET, která přemosťuje spoj vložené DNA a sousední oblasti genomové DNA. Jedinečná struktura sondy FRET má za výsledek takovou sekundární strukturu, která drží fluorescenční a zhášecí část molekuly v těsné blízkosti. Sonda FRET je spolu s PCR primery (jeden primer ve vložené sekvenci a jeden v sousední genomové sekvenci) cyklována v přítomnosti termostabilní polymerázy a dNTP. Po úspěšné amplifíkaci PCR následuje hybridizace sondy FRET s cílovou sekvencí, což má za následek zrušení sekundární struktury sondy a separaci fluorescenční a zhášecí části molekuly. Výsledkem je fluorescenční signál. Fluorescenční signál indikuje přítomnost sousední/transgenní vložené sekvence, díky úspěšné amplifíkaci a hybridizaci.
Následující příklady použití vynálezu demonstrují příklady určitých výhodných provedení vynálezu. Odborníci by měli ocenit, že v příkladech zahrnuté techniky, které následně představují přístupy, byly shledány vynálezci dobře fungujícími v praxi vynálezu, a tudíž mohou být považovány za ustavení příkladů výhodných pro praxi. Nicméně by měli odborníci, ve světle předkládaného, ocenit, že mohou být učiněny mnohé změny specifického provedení, které bylo přiloženo a stále získají stejný či podobný výsledek bez opuštění ducha a předmětu vynálezu.
-8CZ 305949 B6
Objasnění výkresů
Obr. 1. Mapa plazmidu pMON25496
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad 1
Transgenní případ kukuřice PV-ZMGT32(nk603) (dále značený jako nk603) byl vytvořen bombardováním embrya kukuřice mikroprojektily (Songstad a kol., In Vitro Cell Plant 32: 179-183, 1996) s použitím lineárního fragmentu DNA, vyštěpeného restrikční endonukleázou Afwl z pMON25496 (Obr. 1). Tento fragment DNA obsahuje dvě expresní kazety, které společně odpovídají za toleranci kukuřice ke glyfosfátu. První kazeta je složena z promotoru rýžového aktinu 1 a intronu (P-Os.Actl a I-Os.Actl, U.S. Patent 5 641 876), který je funkčně spojen s chloroplastovým transitním peptidem EPSPS z Arabidopsis (TS-At.EPSPS:CTP2, Klee a kol., Mol. Gen. Genet. 210: 47 - 422, 1987), který je dále funkčně spojen s 5-enol-pyruvylšikimát-3-fosfatasou (EPSPS) z Agribacteria sp. kmene CP4 (AGRTU.aroJ:CP4, U.S. patent č. 5,633,435), který je opět funkčně spojen s transkripčním terminátorem nopalinsyntetasy (T-AGRTU.nos, Fraley a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 80: 4803 - 4807, 1983). Druhá transgenní expresní kazeta je složena z 35S promotoru viru mozaiky květáku, která obsahuje tandemově zdvojený zesilovací úsek (P-CaMV.35S, Kay a kol., Science 236: 1299 - 1302,1987; U.S. patent 5,164,316), který je funkčně spojen s intronem Hsp70 ze Zea mays (I-Zm.Hsp70, U.S. patent 5,362,865), který je opět funkčně spojen s chloroplastovým transitním peptidem EPSPS z Arabidopsis (TSAt.EPSPS:CTP2, Klee a kol., Mol. Gen. Genet. 210: 47 - 422, 1987), který je dále funkčně spojen s 5-enol-pyruvylšikimát-3-fosfatasou (EPSPS) z Agribacteria sp. kmene CP4 (AGRTU.íwotí:CP4, U.S. Patent 5,633,435), který je opět funkčně spojen s transkripčním terminátorem nopalinsyntetasy (T-AGRTU.nos, Fraley a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 80: 4803 - 4807, 1983). Po bombardování byly vybrány transgenní kalusy, tolerantní ke glyfosfátu na médiu, které obsahovalo 3 mM glyfosfát. Následně byly regenerovány rostliny. Bylo vyrobeno třistačtyři rostlin z 91 nezávislých transgenních případů. Z této populace byla vybrána nk603, na základě nejvhodnější kombinace charakteristik, včetně tolerance ke glyfosfátu, zemědělských schopností a pouze jedné kopie transgenního vložení. Testy případu nk603 a od něj odvozených potomků ve skleníku i na poli prokázaly, že toto transgenní vložení odpovídá za toleranci, která překračuje komerční specifikace pro plnou vegetativní i reproduktivní toleranci k 340 g glyfosfátu na 0,4 hektaru (840 g na hektar; 0,9 kg Roundupu Ultra na 0,4 hektaru) při aplikaci na listové stádium V4 a V8.
Příklad 2
Případ kukuřice nk603, tolerantní ke glyfosfátu, byl porovnán s komerčním standardem GA21 (U.S. patent 6,040,497), který je v současné době dostupný, na toleranci k vegetativnímu poškození glyfosfátem a na účinek na výnos. GA21 obsahuje alespoň 3 tandemově uspořádané expresní kazety v genomu případu kukuřice GA21 (SCP/GMO/232-Final, European Commission Health & Consumer Protection Directorate-General). Transgenní kazeta se skládá z promotoru aktinu 1 z rýže a intronu spojeného s chloroplastovým transitním peptidem ribulosa-l,5-bisfosfátkarboxylasy, spojeného s modifikovanou kukuřičnou EPSPS rezistentní ke glyfosfátu a s transkripčním terminátorem nopalinsynsyntetasy. Rostliny nk603 a GA21 byly vysety do řádků na části pole. Bylo na ně působeno následujícím způsobem: 1) nepostříkané, 2) postříkané Roundupem Ultra® o koncentraci 1,8 kg na 0,4 hektaru, v listovém stádiu V4 a znovu Roundupem Ultra® o koncentraci 1,8 kg na 0,4 hektaru, v listovém stádiu V8, 3) postříkané Roundupem Ultra® o koncentraci 2,7 kg na 0,4 hektaru, v listovém stádiu V4 a znovu Roundupem Ultra® o koncentraci 2,7 kg na 0,4 hektaru, v listovém stádiu V8. Vegetativní tolerance byla měřena jako procen
-9CZ 305949 B6 to vegetativního poranění, stanovené z počtu malformovaných listů vytvořených 10 dnů po aplikaci herbicidu v listovém stadiu V8. Byl měřen výnos na každé části pole v bušlech (=35,2 1) na 0,4 hektaru a procento snížení výnosu stanovené pro jednotlivé koncentrace herbicidu vztažené na nepostříkanou část. Výsledky, které jsou uvedeny v tabulce 1, ukazují, že nk603 vykazuje nižší procento vegetativního poranění než je tomu u GA21 rostlin. Podobně je nižší snížení výnosu u případu nk603. Nízký výskyt vegetativního poranění byl objeven i na nepostříkaných částech pole, což je možné přisoudit různým jiným vnějším faktorům, než výstavem herbicidu glyfosfátu. Dvojitá expresní kazeta pMON25496 v nk603 byla porovnána s vegetativním poraněním a plodností tří nezávislých případů kukuřice, které byly získány pouhou expresí genu tolerance ke glyfosfátu (AGRTU.aroA.CP4), řízenou promotorem CaMV.35S. Bylo objeveno, že dvojitá expresní kazeta udělovala vyšší stupeň vegetativní i reproduktivní tolerance, než tři nezávislé případy kukuřice (příklady 1, 2 a 3), které obsahovaly pouze gen tolerance ke glyfosfátu (AGRTU.aroA.CP4), řízený promotorem CaMV.35S. Vysoká hladina vegetativní tolerance vůči poranění herbicidem glyfosfátem byla objevena u nk603 a dalších tří případů kukuřice, odvozených od pMON25496 v porovnání s průměrným poraněním 6 případů kukuřice odvozených od konstruktu, kde je exprese genu pro toleranci ke glyfosfátu řízena pouze promotorem a intronem aktinu z rýže (P-Os.Actl/l-Os.Actl). Rostliny transformované dvojitou expresní kazetou vykazovaly vyšší toleranci k vegetativnímu a fertilitnímu poranění než rostliny získané transformací jednoduchou expresní kazetou, což vedlo ke snížení ztráty výnosu v důsledku aplikace herbicidu glyfosfátu. Konstrukt pMON25496 poskytnul dvě expresní kazety v jednom umístění v nk603, které propůjčily vyšší stupeň tolerance ke glyfosfátu, než trojité vložení, které se objevuje u komerčního standardu GA21.
Tabulka 1. Tolerance nk603 ke glyfosfátu - vegetativní poranění, výtěžek a hodnocení fertility
| Případ | Působení | % veg. poranění* | Výnos 1/hektar (bušl/akr) | % snížení výnosu |
| GA21 | Nepostříkané | 0,3 | 12207,9 (142,2) | |
| 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 1,8 kg (64 oz) ve V8 | 5,3 | 11512,5 (134,1) | 5,7 | |
| 2,7 kg (96 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 2,7 kg (96 oz) ve V8 | 8,3 | 11083,2 (129,1) | 9,2 | |
| nk603 | Nepostříkané | 0,9 | 12499,8 (145,6) | |
| 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 1,8 kg (64 oz)ve V8 | 2,9 | 11 890,2 (138,5) | 4,9 | |
| 2,7 kg (96 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 2,7 kg (96 oz) ve V8 | 4,7 | 12027,6 (140,1) | 3,8 |
-10CZ 305949 B6
| Působení | Hodnocení fertility** | |
| nk603 | 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V8 | 4,5 |
| CaMV.35S příp. 1 | 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V8 | 2,0 |
| CaMV.35S příp. 2 | 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V8 | 2,2 |
| CaMV.35S příp. 3 | 1,8 kg (64 oz) Roundupu Ultra® ve V8 | 2,4 |
| Působení | Prům. % veg. Poranění* | |
| Nk603 plus 3 další pMON25496 případy | 3,6 kg (128 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 3,6 kg (128 oz) ve V8 | 22,9 |
| Šest případů jednoduchých kazet P-Os.Actl | 3,6 kg (128 oz) Roundupu Ultra® ve V4 následované 3,6 kg (128 oz) ve V8 | 28,9 |
* Vegetativní poranění, získané 10 dnů po působení ve V8, je jedno měření provedené ke stanovení vegetativního poranění jako odpovědi na působení glyfosfátu. ** Hodnocení fertility samčích rostlin: 4 - 5 = plně fertilní; 3 = znatelně snížené šíření pylu; 0 - 2 = zcela sterilní - velmi sterilní, nevhodné ke komerčnímu použití.
Příklad 3
Odpovídající sousední molekuly DNA z nk603 byly klonovány s použitím ligačních adaptérů a „nested“ PCR jak je popsáno v kitu Genome Walker™ (katalogové číslo K.I 807-1, CloneTech Laboratories, lne, Palo Alto, CA). Nejprve byla purifikována genomová DNA z případu nk603 způsobem využívajícím CTAB (Rogers a kol., Plant Mol. Biol. 5: 69 - 76, 1985). Genomová DNA knihovna byla připravena k amplifikaci dle instrukcí výrobce (Genome Walker™, CloneTech Laboratories, lne, Palo Alto, CA). V nezávislých reakcích byla genomová DNA štěpena přes noc při 37 °C následujícími restrikčními endonukleázami, které štěpí s tupým koncem: EcoRN, Seal, Dral, PvmII (CloneTech Laboratories, lne, Palo Alto, CA). Reakční směs byla extrahována do směsi fenokchloroform. DNA byla vysrážena z vodné fáze přídavkem etanolu a sedimentována centrifugací. Následně byla rozsuspendována v pufru Tris-EDTA (100 mM TrisHC1, pH 8,0, 1 mM EDTA). Purifikované fragmenty genomové DNA byly ligovány s adaptéry Genome Walker™, dle protokolu výrobce. Reakce byla v každé směsi zastavena zahřáním (70 °C, 5 min). Směs byla zředěna 1 Okřát pufrem Tris-EDTA. Jeden mikrolitr z každé ligace byl amplifíkován v 50 μΐ reakci, která obsahovala 1 μΐ dané knihovny ligované s adaptérem, 1 μΐ příměrů specifického pro adaptér Genome Walker™ API (5' GTATATCGACTCACTATAGGGC 3', Sekv. č. 1) o koncentraci 10 μΜ, 1 μΙ oligonukleotidu specifického pro transgen nk603 o koncentraci 10 μΜ.
(5' TGACGTATCAAAGTACCGACAAAAACATCC 3', Sekv. č. 2), 1 μΐ deoxyribonukleotidů1, 2,5 μΙ dimetylsulfoxidu, 5 μΐ 10 krát koncentrovaného reakčního pufru obsahujícího MgCl2, 0,5 μΐ (2,5 jednotek) termostabilní DNApolymerázy Amplitaq (PE Applied Biosystems, Foster City, CA a směs byla doplněna H2O do 50 μΐ. Reakce byla prováděna v termocykleru s použitím vypočítané teplotní kontroly a byly aplikovány následující cyklické podmínky: 1 cyklus 95 °C po dobu 9 min; 7 cyklů 94 °C po dobu 2 s, 70 °C po dobu 3 min; 36 cyklů 94 °C po dobu 2 s, 65 °C po dobu 3 min; 1 cyklus 65 °C po dobu 4 min. Jeden μΐ z každé reakce byl zředěn 50krát vodou a amplifíkován v sekundární reakci (1 μΐ odpovídající zředěné primární reakce, 1 μΐ 10 μΜ Geno
- 11 CZ 305949 B6 me WalkerTM „nested adapter“ primeru AP2 (5' ACTATAGGGCACGCGTGGT 3', Sekv. č. 3, dodávaná výrobcem), 1 μΐ 10 μΜ oligonukleotidu specifického pro transgen nk603.
(5'CTTTGTTTTATTTTGGACTATCCCGACTC 3', Sekv. Č. 4), 1 μΐ deoxyribonukleotidtrifosfátů, 2,5 μΐ dimetylsulfoxidu, 5 μΙ 10 krát koncentrovaného reakčního pufru obsahujícího MgCl2, 0,5 μΐ (2,5 jednotek) termostabilní DNApolymerázy Amplitaq (PE Applied Biosystems, Foster City, CA a směs byla doplněna H2O do 50 μΙ. Reakce byla prováděna v termocykleru s použitím vypočítané teplotní kontroly a byly aplikovány následující cyklické podmínky: 1 cyklus 95 °C po dobu 9 min; 5 cyklů 94 °C po dobu 2 s, 70 °C po dobu 3 min; 24 cyklů 94 °C po dobu 2 s, 65 °C po dobu 3 min; 1 cyklus 65 °C po dobu 4 min.
Produkt PCR, který reprezentuje úsek přemosťující spojení mezi nk603 transgenním vloženým úsekem a sousední kukuřičnou DNA byl purifikován s pomocí agarózové gelové elektroforézy, následované purifikací z agarózové matrice s použitím QIAquick Gel Extraction Kitu (katalogové číslo 28704, Qiagen Inc., Valencia, CA). PCR produkt byl následně přímo klonován do vektoru pGEM-T Easy (katalogové číslo A1360, Promega, Madison, WI). Identita klonovaného produktu PCR a jeho vztah s Miu I fragmentem pMON25496 byl ověřen s pomocí analýzy sekvence DNA (ABI PrismTM 377, PE Biosystems, Foster City, CA a program na analýzu sekvencí DNASTAR, DNASTAR Inc., Madison, WI).
Podobně byla amplifikována a klonována sekvence kukuřičné DNA sousedící s 3 ’ koncem nk603 s pomocí „nested“ primerů, specifických pro gen, jako je Sekv. č. 5 (5' AGATTGAATCCTGTTGCCGGTCTTGC3') a Sekv. č. 6 (5'GCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGG3'), které tepelně hybridizovaly k transkripčnímu terminátoru T-AGRTU.nos. V transgenní/genomové inzerci jsou přítomny dva transkripční terminátory T-AGRTU.nos. Jeden uvnitř konstruktu a jeden na 3' konci konstruktu sousedícího s kukuřičnou genomovou DNA. PCR produkty vytvořené v této reakci byly sekvenovány a DNA sekvence, která přemosťuje spojení mezi transgenem a sousední sekvencí byla odlišena od produktu vnitřního T-AGRTU.nos, srovnáním známých genetických úseků konstruktu pMON25496, jak bylo výše popsáno. Sekvence kukuřičné DNA sousedící na obou stranách s vloženým transgenem byla stanovena pro nk603 sekvenováním amplifikačního produktu odvozeného od Genome Walker™ a porovnána se známou sekvencí transgenu. Na 5' konci vloženého transgenu byla stanovena sekvence úseku, sousedícího se spojem, o délce 498 bp (Sekv. č. 7). Ten se skládal z 304 párů bází (bp) sousední genomové DNA kukuřice (nukleotidy 1 - 304 ze Sekv. č. 7), 45 bp náležejících k DNA sekvenci konstruktu pMON25496 (nukleotidy 305 - 349 ze Sekv. č. 7) a 149 bp DNA sekvence z 5' konce P-Os. Actl (nukleotidy 350 - 498 ze Sekv. č. 7)
Byla stanovena sekvence úseku o délce 1183 párů bází okolo 3' spoje vloženého úseku (Sekv. č. 8), která začíná úsekem 164 párů bází z transkripčního terminátoru T-AGRTU.nos (nukleotidy 1 - 164 ze Sekv. č. 8), 217 párů bází sekvence DNA konstruktu pMON25496 (nukleotidy 165 381 ze Sekv. č. 8, 305 párů bází kukuřičných plastidových genů rspfVa rpoA (částečné segmenty obou genů, které odpovídají bázím 63 - 363 dostupným v Genebank s přístupovým číslem X07810 a které odpovídají bázím 382 - 686 ze Sekv. č. 8) a ze zbývající sekvence DNA zahrnující genomovou DNA sekvenci kukuřice, sousedící s místem integrace (odpovídá nukleotidům 687 - 1183 ze Sekv. č. 8). Spojovací molekuly DNA Sekv. č. 9, Sekv. č. 10, Sekv. č. 11 a Sekv. č. 12 jsou nové molekuly DNA v nk603 a jsou pro případ kukuřice nk603 a její potomstvo charakteristické. Spojovací molekuly Sekv. č. 9, Sekv. č. 10 a, Sekv. č. 11 reprezentují cca 9 nukleotidů na každé straně místa vložení transgenního fragmentu DNA a genomové DNA kukuřice. Sekv. č. 9 se nalézá v pozici 295 - 314 Sekv. č. 7. Spojovací sekvence Sekv. č. 10 a 11 se nacházejí v pozicích 373 - 390 a 678 - 695 Sekv. č. 8 a reprezentují spojovací molekuly ze sekvence konstruktu DNA s plastidovou DNA kukuřice (Sekv. č. 10) a sekvence konstruktu s genomovou DNA kukuřice (Sekv. č. 11). Sekv. č. 12 se nachází v pozici 156 - 173 Sekv. č. 8 a reprezentuje novou molekulu DNA vnk603, protože je to fúze terminační sekvence T-AGRTU.nos s invertovaným fragmentem DNA promotoru aktinu z rýže.
- 12CZ 305949 B6
Příklad 4
Pár DNA primerů specifických pro případ byl použit k výrobě amplikonu charakteristického pro nk603. Tento pár primerů zahrnuje, ovšem není tím omezen, Sekv. č. 13 a Sekv. č. 14 pro 5' amplikon molekuly DNA a Sekv. č. 15 a Sekv. č. 16 pro 3' amplikon molekuly DNA. Krom těchto párů primerů je předmětem tohoto vynálezu jakýkoli pár odvozený od Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8, který při použití v reakci amplifikace DNA, dává vzniknout amplikonu, který je charakteristický pro nk603. Amplifikační podmínky pro tuto analýzu, týkající se 5' spojovacího úseku vloženého transgenu/úseku genomu jsou zobrazeny v tabulce 2 a tabulce 3.
Stejný způsob je aplikován pro amplifikaci 3' amplikonu molekuly DNA s použitím primerů DNA c podobě Sekv. č. 15 a Sekv. č. 16, avšak jakákoli modifikace těchto způsobů, která používá molekul DNA nebo jejich komplementů k tvorbě amplikonu molekuly DNA charakteristické pro nk603 jev rámci obvyklé znalosti problematiky. Navíc byl začleněn jako vnitřní standard pro podmínky reakce, kontrolní pár primerů (Sekv. č. 17 a 18) k amplifikaci endogenního kukuřičného genu. Analýza extraktu DNA z rostlinného pletiva nk603 by měla obsahovat pozitivní kontrolu ve formě extraktu DNA z nk603, negativní kontrolu ve formě extraktu DNA z kukuřičné rostliny, která není nk603 a negativní kontrolu, která neobsahuje žádný DNA extrakt jako templát. Další molekuly DNA primerů dostatečné délky mohou být, odborníky ve způsobech amplifikace DNA, vybrány ze Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8 a mohou být optimalizovány podmínky pro tvorbu amplikonu, které se liší od způsobů z tabulky 2 a tabulky 3, jejichž výsledkem je však amplikon charakteristický pro nk603. Použití takových modifikovaných sekvencí primerů s pozměněnými způsoby z tabulky 2 a 3 jsou také předmětem tohoto vynálezu. Předmětem tohoto vynálezu je amplikon, kde alespoň jedna molekula DNA primem dostatečné délky je odvozena ze Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8, a který je charakteristický pro nk603. Předmětem tohoto vynálezu je amplikon, kde alespoň jedna molekula DNA primem dostatečné délky je odvozena z jakéhokoli genetického úseku pMON25496 a který je charakteristický pro nk603. Zkouška na amplikon nk603 může být provedena s použitím termocyklem Robocyklem Stratagene, MJ Engine, Perkin-Elmer 9700 nebo Eppendorf Mastercycler Gradient, jak je ukázáno v tabulce 3, nebo způsobem a na přístroji, známém odborníkům.
Tabulka 2
Provedení PCR a reakční směs pro potvrzení úseku spoje mezi vloženým transgenem a genomem nk603.
| Krok | Látka | Množství | Komentář |
| 1 | Voda bez nukleas | Doplnit do 20 μΐ | - |
| 2 | 10 x reakční pufr (s MgCh) | 2,0 μΐ | Výsledná koncentrace 1 x pufr a l,5mMMgC12 |
| 3 | lOmM roztok dATP, dCTP, dGTP adTTP | 0,4 μΐ | Finální koncentrace každého dNTPje 200uM |
| 4 | Primer specifický k případu (Sekv. | 0,4 μΙ | Výsledná koncentrace 0,2μΜ |
- 13 CZ 305949 B6
| čís. 13) (rozsuspendovaný na koncentraci ΙΟμΜ v lx TE pufru nebo ve vodě prosté nukleas) | |||
| 5 | Primer specifický k případu (Sekv. čís. 14) (rozsuspendovaný na koncentraci 1 ομΜ v 1 x TE pufru nebo ve vodě prosté nukleas) | 0,4 μΐ | Výsledná koncentrace 0,2μΜ |
| 6 | Primer kontrolní (Sekv. čís. 17) (rozsuspendovaný na koncentraci ΙΟμΜ v lx TE pufru nebo ve vodě prosté nukleas) | 0,2 μΐ | Výsledná koncentrace 0, ΙμΜ |
| 7 | Primer kontrolní (Sekv. čís. 18) (rozsuspendovaný na koncentraci ΙΟμΜ v lx TE pufru nebo ve vodě prosté nukleas) | 0,2 μΐ | V ýsledná koncentrace 0,1 μΜ |
| 8 | Rnasa, prostá Dnas (500 ng/μΙ) | 0,1 μΐ | 50 ng/reakci |
| 9 | DNApolymerasa REDTaq (1 jednotka/μΙ) | 1,0 μΐ Ge doporučeno vyměnit pipety před dalším krokem) | 1 jednotka/reakci |
| 10 | Extrahovaná DNA (templát): • Vzorky k analýze * jednotlivé listy * smíchané listy (maximum je 50 listů najednou) • Negativní kontrola • Negativní kontrola • Pozitivní kontrola | • 10-200 ng genomové DNA • 200 ng genomové DNA • 50 ng genomové DNA kukuřice (nk603) • bez DNA templátu • 50 ng genomové DNA nk603 |
Tabulka 3
Doporučené parametry pro různé termocyklery. Jemně zamíchat a, pokud je třeba (termocykler nemá vyhřívané víku), přidat 1 až 2 kapky minerálního oleje na vrch každé reakce. Pokračujte s použitím Robocykleru Stratagene, MJ Engine, Perkin-Elmer 9700 nebo Eppendorf Mastercycler Gradient za následujících parametrů cyklů.
-14CZ 305949 B6
Poznámka: Běh by na termocykleru MJ Engine nebo Eppendorf Mastercycler Gradient měl odpovídat vypočítaným parametrům. Na přístroji Perkin Elmer 9700 by měl být nastaven teplotní náběh („ramp) na maximum.
| Číslo cyklu | Nastavení: Robocykler Stratagene |
| 1 | 94 °C 3 minuty |
| 38 | 94 °C 1 minuta 60 °C 1 minuta 72 °C 1 minuta |
| 1 | 72 °C 10 minut |
| Číslo cyklu | Nastavení: MJ Engine nebo Perkin Elmer 9700 |
| 1 | 94 °C 3 minuty |
| 38 | 94 °C 10 sekund 60 °C 30 sekund 72 °C 1 minuta |
| 1 | 72 °C 10 minut |
| v Číslo cyklu | Nastavení: Eppendorf Mastercycler Gradient |
| 1 | 94 °C 3 minuty |
| 38 | 94 °C 15 sekund 60 °C 15 sekund 72 °C 1 minuta |
| 1 | 72 °C 10 minut |
Vklad firmy Monsanto Company, v podobě semen případu kukuřice PV.ZMGT32(nk603), popsaných výše, byl učiněn pod záštitou Budapešťské dohody se sbírkou American Culture Collection (ATCC), 1081 University Boulevard, Manassas, Va. 20110. Přístupové číslo ATCC je PTA-2478. Vklad bude uchován v depozitáři po dobu 30 let, nebo 5 let od poslední žádosti, nebo po dobu účinnosti patentu, cokoli bude delší a bude-li třeba, bude kdykoli vyměněn.
Po znázornění a vysvětlení principů podle vynálezu by mělo být odborníkům jasné, že je možné uspořádání a detaily vynálezu modifikovat bez odchýlení od těchto principů. Nárokujeme si veškeré změny, které jsou v duchu a rámci připojených nároků.
Veškeré publikace a publikované patenty v tomto popisu citované jsou zahrnuty jako odkazy ve stejné míře, jako by byla každá jednotlivá publikace či patent specificky a individuálně označen k zahrnutí jako odkaz.
Claims (5)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Kukuřičná rostlina nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, vyznačující se tím, že její genom obsahuje vložený úsek DNA kódující EPSPS, přičemž vložený úsek DNA má 5' a 3' spojení s genomovou DNA kukuřice obsahující Sekv. č. 7 a Sekv. č. 8.
- 2. Kukuřičná rostlina nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, vyznačující se tím, že její genom obsahuje vložený úsek DNA kódující EPSPS a Sekv. č. 9, 10, 11 a 12.
- 3. Kukuřičná rostlina podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že rostlina je potomkem rostliny obsahující případ kukuřice PV-ZMGT32(NK603) a kde reprezentativní vzorek semen obsahující tento případ je uložen v Americké Sbírce „American Type Culture Collection“ (ATCC) pod přístupovým číslem PTA-2478.
- 4. Potomstvo kukuřičné rostliny tolerantní ke glyfosfátu podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že jeho genom obsahuje vložený úsek DNA kódující EPSPS a Sekv. č. 9, 10, 11 a 12.
- 5. Semeno kukuřičné rostliny, vyznačující se tím, že obsahuje případ kukuřice PV-ZMGT32(NK603) a kde reprezentativní vzorek semen obsahující tento případ je uložen v Americké Sbírce „American Type Culture Collection“ (ATCC) pod přístupovým číslem PTA2478.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US21356700P | 2000-06-22 | 2000-06-22 | |
| US24121500P | 2000-10-13 | 2000-10-13 | |
| US24001400P | 2000-10-13 | 2000-10-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ305949B6 true CZ305949B6 (cs) | 2016-05-18 |
Family
ID=27395887
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2008-437A CZ305949B6 (cs) | 2000-06-22 | 2001-06-18 | Kukuřičná rostlina PV-ZMGT32(nk) nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, její potomstvo a její semena |
| CZ20012203A CZ299722B6 (cs) | 2000-06-22 | 2001-06-18 | Kukurice tolerantní ke glyfosfátu PV-ZMGT32(nk603), DNA konstrukt PV-ZMGT32(nk603) nesoucí toleranci rostlin ke glyfosfátu a zpusob jeho detekce v rostlinných vzorcích |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20012203A CZ299722B6 (cs) | 2000-06-22 | 2001-06-18 | Kukurice tolerantní ke glyfosfátu PV-ZMGT32(nk603), DNA konstrukt PV-ZMGT32(nk603) nesoucí toleranci rostlin ke glyfosfátu a zpusob jeho detekce v rostlinných vzorcích |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (8) | US6825400B2 (cs) |
| EP (3) | EP2210951B1 (cs) |
| CN (2) | CN101186918A (cs) |
| AR (4) | AR031665A1 (cs) |
| AT (2) | ATE323168T1 (cs) |
| BG (1) | BG65315B1 (cs) |
| BR (2) | BRPI0100752B1 (cs) |
| CA (1) | CA2349841C (cs) |
| CY (2) | CY1106109T1 (cs) |
| CZ (2) | CZ305949B6 (cs) |
| DE (2) | DE60142092D1 (cs) |
| DK (3) | DK2210951T3 (cs) |
| ES (3) | ES2343252T3 (cs) |
| HU (2) | HU230814B1 (cs) |
| ID (1) | ID30575A (cs) |
| MX (1) | MXPA01006407A (cs) |
| PL (1) | PL199928B1 (cs) |
| PT (2) | PT1167531E (cs) |
| RS (1) | RS49990B (cs) |
| SI (3) | SI2210951T1 (cs) |
| UY (1) | UY26788A1 (cs) |
Families Citing this family (404)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI0100752B1 (pt) | 2000-06-22 | 2015-10-13 | Monsanto Co | moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna |
| PL214848B1 (pl) | 2000-09-29 | 2013-09-30 | Monsanto Technology Llc | Sposób wytwarzania tolerancyjnej na glifosat rosliny pszenicy, plodna tolerujaca glifosat roslina pszenicy, nasiono pszenicy, para czasteczek DNA, sposób wykrywania obecnosci diagnostycznej czasteczki DNA, sposób wykrywania sekwencji zawierajacej okreslone nukleotydy, sposób wytwarzania rosliny pszenicy z tolerancja glifosatu, zestaw do wykrywania DNA, nasiono transgenicznej pszenicy, roslina pszenicy wytworzona przez hodowle nasion, sposób wytwarzania rosliny pszenicy tolerujacej stosowanie glifosatu, sposób selektywnego kontrolowania chwastów na polu zawierajacym uprawe pszenicy, czasteczka DNA, roslina pszenicy tolerujaca glifosat, roslina zdolna do wytwarzania diagnostycznego amplikonu, nasiono, komórka |
| AU2002218413A1 (en) | 2000-11-30 | 2002-06-11 | Ses Europe N.V. | Glyphosate resistant transgenic sugar beet characterised by a specific transgene insertion (t227-1), methods and primers for the detection of said insertion |
| US7569747B2 (en) | 2002-12-05 | 2009-08-04 | Monsanto Technology Llc | Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof |
| CA2743564C (en) | 2003-01-13 | 2013-11-12 | Monsanto Technology Llc | Glyphosate tolerant alfalfa events and methods for detection thereof |
| PT1620571E (pt) * | 2003-05-02 | 2015-09-03 | Du Pont | Milho do evento tc1507 e métodos para deteção deste |
| US7157281B2 (en) * | 2003-12-11 | 2007-01-02 | Monsanto Technology Llc | High lysine maize compositions and event LY038 maize plants |
| CA2547563C (en) * | 2003-12-15 | 2014-02-18 | Monsanto Technology Llc | Corn plant mon88017 and compositions and methods for detection thereof |
| US7683237B2 (en) * | 2004-02-10 | 2010-03-23 | Monsanto Technology Llc | Maize seed with synergistically enhanced lysine content |
| AR047598A1 (es) * | 2004-02-10 | 2006-01-25 | Monsanto Technology Llc | Semilla de maiz transgenica con mayor contenido de aminoacidos |
| US7855323B2 (en) | 2004-02-10 | 2010-12-21 | Monsanto Technology Llc | Recombinant DNA for gene suppression |
| JP2007530036A (ja) | 2004-03-25 | 2007-11-01 | シンジェンタ パーティシペーションズ アクチェンゲゼルシャフト | Ｍｉｒ６０４系統トウモロコシ |
| US20050223425A1 (en) | 2004-03-30 | 2005-10-06 | Clinton William P | Methods for controlling plant pathogens using N-phosphonomethylglycine |
| US20070197474A1 (en) * | 2004-03-30 | 2007-08-23 | Clinton William P | Methods for controlling plants pathogens using N-phosphonomethylglycine |
| PT2308977E (pt) * | 2004-04-30 | 2013-05-13 | Dow Agrosciences Llc | Novo gene de resistência a herbicida |
| WO2006039376A2 (en) * | 2004-09-29 | 2006-04-13 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Corn event das-59122-7 and methods for detection thereof |
| US20070199095A1 (en) | 2005-10-13 | 2007-08-23 | Edwards Allen | Methods for producing hybrid seed |
| PT1885176T (pt) * | 2005-05-27 | 2016-11-28 | Monsanto Technology Llc | Evento mon89788 de soja e métodos para a sua deteção |
| CN101278053A (zh) | 2005-07-29 | 2008-10-01 | 孟山都技术有限公司 | 利用来自转基因杂交体的分离子来开发新的种质 |
| MEP3508A (xx) * | 2005-08-24 | 2010-02-10 | Pioneer Hi Bred Int | Kompozicije koje obezbjeđuju otpornost na više hibricida i njihov postupak upotrebe |
| WO2007041419A1 (en) * | 2005-10-03 | 2007-04-12 | Monsanto Technology Llc | Transgenic plant seed with increased lysine |
| CN101553111B (zh) | 2005-10-28 | 2013-06-26 | 美国陶氏益农公司 | 新除草剂抗性基因 |
| EP1984390A2 (en) * | 2006-01-23 | 2008-10-29 | Board of Trustees of Michigan State University | Methods for breeding glyphosate resistant plants and compositions thereof |
| EP2059601A2 (en) * | 2006-10-03 | 2009-05-20 | Monsanto Technology, LLC | Methods for hybrid corn seed production and compositions produced therefrom |
| TWM318228U (en) * | 2006-11-02 | 2007-09-01 | Datafab Sys Inc | Structure for protecting terminal of memory card adapter |
| WO2009064652A1 (en) * | 2007-11-15 | 2009-05-22 | Monsanto Technology Llc | Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87701 and methods for detection thereof |
| MX2010008928A (es) | 2008-02-15 | 2010-09-09 | Monsanto Technology Llc | Planta de soya y semilla que corresponde al evento transgenico mon87769 y metodos para deteccion del mismo. |
| AP2967A (en) | 2008-02-29 | 2014-09-30 | Monsanto Technology Llc | Zea mays plant event MON87460 and compositions andmethods for detection thereof |
| EP2113172A1 (de) * | 2008-04-28 | 2009-11-04 | Bayer CropScience AG | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| WO2010024976A1 (en) | 2008-08-29 | 2010-03-04 | Monsanto Technology Llc | Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87754 and methods for detection thereof |
| AR075549A1 (es) | 2008-09-29 | 2011-04-20 | Monsanto Technology Llc | Evento transgenico de soja mon87705 y metodos para detectar el mismo |
| AR075126A1 (es) * | 2009-01-29 | 2011-03-09 | Bayer Cropscience Ag | Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas |
| WO2010135324A1 (en) | 2009-05-18 | 2010-11-25 | Monsanto Technology Llc | Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean |
| BR112012012404B1 (pt) | 2009-11-23 | 2019-03-06 | Monsanto Technology Llc | "molécula de dna reconbinante de amplicon, sonda de dna, par de moléculas de dna mètodo para detectar a presença de uma molècula de dna e kit de detecçao de dna". |
| EP2525658B1 (de) | 2010-01-22 | 2017-03-01 | Bayer Intellectual Property GmbH | Akarizide und/oder insektizide wirkstoffkombinationen |
| CN101812527B (zh) * | 2010-04-20 | 2014-09-17 | 北京农业职业学院 | 一种快速检测6种转基因玉米的方法 |
| UA118535C2 (uk) | 2010-06-04 | 2019-02-11 | Монсанто Текнолоджи Ллс | Рекомбінантна молекула днк, що надає рослині brassica стійкості до гліфосату |
| AU2011302508B2 (en) * | 2010-09-15 | 2016-09-29 | Corteva Agriscience Llc | Monoclonal antibodies and detection methods for enzymes that confer resistance to 2,4-dichlorophenoxyacetic acid |
| KR20130119438A (ko) | 2010-10-12 | 2013-10-31 | 몬산토 테크놀로지 엘엘씨 | 유전자도입 이벤트 mon87712에 상응하는 대두 식물과 종자, 그리고 이들의 검출을 위한 방법 |
| EP2640706B1 (en) | 2010-11-15 | 2017-03-01 | Bayer Intellectual Property GmbH | N-aryl pyrazole(thio)carboxamides |
| MX2013005643A (es) | 2010-11-29 | 2013-07-03 | Bayer Ip Gmbh | Iminas alfa, beta-insaturadas. |
| EP2460407A1 (de) | 2010-12-01 | 2012-06-06 | Bayer CropScience AG | Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe |
| JP6412311B2 (ja) | 2010-12-01 | 2018-10-24 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ | 作物において線虫類を防除するための、及び、収量を増加させるための、フルオピラムの使用 |
| EP2683239A1 (en) | 2011-03-10 | 2014-01-15 | Bayer Intellectual Property GmbH | Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds |
| HUE038497T2 (hu) | 2011-03-23 | 2018-10-29 | Bayer Ip Gmbh | Hatóanyag-kombinációk |
| WO2012136581A1 (en) | 2011-04-08 | 2012-10-11 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| CA2833749C (en) | 2011-04-22 | 2019-06-04 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Active compound combinations comprising a (thio)carboxamide derivative and a fungicidal compound |
| US9241493B2 (en) | 2011-06-14 | 2016-01-26 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Use of an enaminocarbonyl compound in combination with a biological control agent |
| EP2726493B1 (en) | 2011-07-01 | 2020-10-14 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for selective regulation of protein expression |
| US9994863B2 (en) | 2011-07-28 | 2018-06-12 | Genective | Glyphosate tolerant corn event VCO-O1981-5 and kit and method for detecting the same |
| US9265252B2 (en) | 2011-08-10 | 2016-02-23 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Active compound combinations comprising specific tetramic acid derivatives |
| CN103890181A (zh) | 2011-08-22 | 2014-06-25 | 拜尔作物科学公司 | 修饰植物基因组的方法和手段 |
| CN102952861B (zh) * | 2011-08-26 | 2014-12-31 | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 | 转基因玉米多重pcr-dhplc检测引物及检测方法 |
| EP2561759A1 (en) | 2011-08-26 | 2013-02-27 | Bayer Cropscience AG | Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth |
| WO2013037717A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Fungicidal 4-substituted-3-{phenyl[(heterocyclylmethoxy)imino]methyl}-1,2,4-oxadizol-5(4h)-one derivatives |
| CA2848622A1 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2-isoxazoline-3-carboxylates for improving plant yield |
| EA029005B1 (ru) | 2011-09-16 | 2018-01-31 | Байер Интеллектчуал Проперти Гмбх | Применение фенилпиразолин-3-карбоксилатов для повышения урожайности растений |
| CN103929956B (zh) | 2011-09-16 | 2017-02-22 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 酰基磺酰胺用于改善植物产量的用途 |
| CN103842507A (zh) | 2011-10-04 | 2014-06-04 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 通过抑制酵母氨酸脱氢酶基因控制真菌和卵菌的RNAi |
| AR088363A1 (es) | 2011-10-18 | 2014-05-28 | Dow Agrosciences Llc | MATERIALES Y METODOS PARA LA DETECCION DEL EVENTO pDAB4472-1606 QUE CONTIENE EL GEN ARILOXIALCANOATO DIOXIGENASA (AAD-12) EN PLANTAS |
| CN102409094B (zh) * | 2011-11-17 | 2013-06-26 | 四川省农业科学院分析测试中心 | 转基因玉米nk603品系特异定量pcr精准检测方法 |
| CN102409092B (zh) * | 2011-11-17 | 2013-06-26 | 四川省农业科学院分析测试中心 | 转基因玉米nk603结构特异定量pcr精准检测方法 |
| KR20140102238A (ko) | 2011-11-21 | 2014-08-21 | 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 | 살진균제 n-[(트리치환실릴)메틸]-카르복사미드 유도체 |
| CN104066721B (zh) | 2011-11-30 | 2016-03-30 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 杀真菌的n-二环烷基和n-三环烷基吡唑-4-（硫代）羧酰胺衍生物 |
| US9414595B2 (en) | 2011-12-19 | 2016-08-16 | Bayer Cropscience Ag | Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops |
| JP5976837B2 (ja) | 2011-12-29 | 2016-08-24 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ | 殺菌性３−［（１，３−チアゾール−４−イルメトキシイミノ）（フェニル）メチル］−２−置換−１，２，４−オキサジアゾール−５（２ｈ）−オン誘導体 |
| JP6002242B2 (ja) | 2011-12-29 | 2016-10-05 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ | 殺菌性３−［（ピリジン−２−イルメトキシイミノ）（フェニル）メチル］−２−置換−１，２，４−オキサジアゾール−５（２ｈ）−オン誘導体 |
| US20150011389A1 (en) | 2012-01-25 | 2015-01-08 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Active Compound Combinations Containing Fluopyram and Biological Control Agent |
| PL2806740T3 (pl) | 2012-01-25 | 2018-07-31 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Kombinacje związków czynnych zawierające fluopyram, Bacillus i środek do zwalczania biologicznego |
| US8952229B1 (en) | 2012-02-21 | 2015-02-10 | Pioneer Hi Bred International Inc | Maize inbred PH1K0H1 |
| US8975469B1 (en) | 2012-02-21 | 2015-03-10 | Pioneer Hi Bred International Inc | Maize hybrid X13C704HR |
| MX360174B (es) | 2012-02-27 | 2018-10-12 | Bayer Ip Gmbh | Combinaciones de compuestos activos que contienen una tiazolilisoxazolina y un fungicida. |
| WO2013139949A1 (en) | 2012-03-23 | 2013-09-26 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield |
| EP2836489B1 (en) | 2012-04-12 | 2016-06-29 | Bayer Cropscience AG | N-acyl-2-(cyclo) alkylpyrrolidines and piperidines useful as fungicides |
| EP2838363A1 (en) | 2012-04-20 | 2015-02-25 | Bayer Cropscience AG | N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives |
| UA115663C2 (uk) | 2012-04-20 | 2017-12-11 | Байєр Кропсайнс Аг | (тіо)карбоксамідні похідні n-циклоалкіл-n-[(гетероциклілфеніл)метилену] |
| PY1319541A (es) | 2012-05-08 | 2016-06-01 | Monsanto Technology Llc | Evento de maiz mon 87411 |
| EP2662360A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides |
| EP2662363A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides |
| EP2662362A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazole indanyl carboxamides |
| EP2662370A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides |
| JP6262208B2 (ja) | 2012-05-09 | 2018-01-17 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | ピラゾールインダニルカルボキサミド類 |
| EP2662361A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazol indanyl carboxamides |
| MX2014013489A (es) | 2012-05-09 | 2015-02-12 | Bayer Cropscience Ag | 5-halogenopirazolindanil carboxamidas. |
| EP2662364A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides |
| AR091104A1 (es) | 2012-05-22 | 2015-01-14 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida |
| BR112014029224A2 (pt) | 2012-05-30 | 2017-06-27 | Bayer Cropscience Ag | composição que compreende um agente de controle biológico e um fungicida |
| EP3292764A3 (en) | 2012-05-30 | 2018-04-25 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | Composition comprising a biological control agent and a fungicide selected from inhibitors of the respiratory chain at complex iii |
| KR102095979B1 (ko) | 2012-05-30 | 2020-04-02 | 바이엘 크롭사이언스 악티엔게젤샤프트 | 생물학적 방제제 및 살곤충제를 포함하는 조성물 |
| AU2013269661B2 (en) | 2012-05-30 | 2016-10-27 | Bayer Cropscience Ag | Compositions comprising a biological control agent and an insecticide |
| MX373820B (es) | 2012-05-30 | 2020-03-24 | Bayer Cropscience Ag | Una composición que comprende un agente de control biológico y un fungicida seleccionado de inhibidores de la mitosis y la división celular y compuestos capaces de tener una acción en múltiples sitios. |
| NZ742943A (en) | 2012-05-30 | 2019-04-26 | Bayer Cropscience Ag | Compositions comprising a biological control agent and a fungicide from the group consisting of inhibitors of the respiratory chain at complex i or ii |
| US9968097B2 (en) | 2012-05-30 | 2018-05-15 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising a biological control agent and a fungicide selected from inhibitors of the lipid membrane synthesis, the melanine biosynthesis, the nucleic acid synthesis or the signal transduction |
| AU2013269723B2 (en) | 2012-05-30 | 2016-12-15 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising a biological control agent and a fungicide |
| WO2014019983A1 (en) | 2012-07-31 | 2014-02-06 | Bayer Cropscience Ag | Compositions comprising a pesticidal terpene mixture and an insecticide |
| UA119532C2 (uk) | 2012-09-14 | 2019-07-10 | Байєр Кропсайєнс Лп | Варіант hppd та спосіб його застосування |
| EP2719280A1 (en) | 2012-10-11 | 2014-04-16 | Bayer CropScience AG | Use of N-phenylethylpyrazole carboxamide derivatives or salts thereof for resistance management of phytopathogenic fungi |
| JP6153619B2 (ja) | 2012-10-19 | 2017-06-28 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | カルボキサミド誘導体を含む活性化合物の組み合わせ |
| UA114648C2 (uk) | 2012-10-19 | 2017-07-10 | Байєр Кропсайнс Аг | Спосіб обробки рослин проти грибів, стійких до фунгіцидів, із застосуванням карбоксамідних або тіокарбоксамідних похідних |
| WO2014060519A1 (en) | 2012-10-19 | 2014-04-24 | Bayer Cropscience Ag | Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants using carboxamide or thiocarboxamide derivatives |
| EP2908640B1 (en) | 2012-10-19 | 2019-10-02 | Bayer Cropscience AG | Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives |
| EP2735231A1 (en) | 2012-11-23 | 2014-05-28 | Bayer CropScience AG | Active compound combinations |
| BR112015012054A2 (pt) | 2012-11-30 | 2017-07-11 | Bayer Cropscience Ag | mistura fungicida ou pesticida binária |
| CA2892712A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Bayer Cropscience Ag | Ternary fungicidal and pesticidal mixtures |
| CA2892693C (en) | 2012-11-30 | 2021-08-10 | Bayer Cropscience Ag | Binary fungicidal mixtures |
| BR122020019349B1 (pt) | 2012-11-30 | 2021-05-11 | Bayer Cropscience Ag | composição, seu processo de preparação, método para controlar um ou mais microrganismos nocivos, semente resistente a microorganismos nocivos e seu método de tratamento |
| EP2925135A2 (en) | 2012-11-30 | 2015-10-07 | Bayer CropScience AG | Binary pesticidal and fungicidal mixtures |
| WO2014086753A2 (en) | 2012-12-03 | 2014-06-12 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising biological control agents |
| WO2014086747A2 (en) | 2012-12-03 | 2014-06-12 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising a biological control agent and a fungicide |
| PT3318129T (pt) | 2012-12-03 | 2020-02-18 | Bayer Cropscience Ag | Composição compreendendo uma combinação de paecilomyces lilacinus e fluopiram |
| EP2925144A2 (en) | 2012-12-03 | 2015-10-07 | Bayer CropScience AG | Composition comprising a biological control agent and an insecticide |
| EP2925141A2 (en) | 2012-12-03 | 2015-10-07 | Bayer CropScience AG | Composition comprising a biological control agent and a fungicide |
| US20150289518A1 (en) | 2012-12-03 | 2015-10-15 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising a biological control agent and an insecticide |
| CA2893083A1 (en) | 2012-12-03 | 2014-06-12 | Bayer Cropscience Ag | Composition comprising a biological control agent and an insecticide |
| BR112015012781A2 (pt) | 2012-12-03 | 2018-06-26 | Bayer Cropscience Ag | composição compreendendo agentes de controle biológico |
| AR093909A1 (es) | 2012-12-12 | 2015-06-24 | Bayer Cropscience Ag | Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos |
| AR093996A1 (es) | 2012-12-18 | 2015-07-01 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias |
| BR112015014307A2 (pt) | 2012-12-19 | 2017-07-11 | Bayer Cropscience Ag | difluorometil-nicotínico- tetrahidronaftil carboxamidas |
| US20150359220A1 (en) | 2013-02-11 | 2015-12-17 | Bayer Cropscience Lp | Compositions comprising gougerotin and a fungicide |
| CA2898725A1 (en) | 2013-02-11 | 2014-08-14 | Bayer Cropscience Lp | Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and an insecticide |
| BR112015018676A2 (pt) | 2013-02-11 | 2017-07-18 | Bayer Cropscience Lp | composições que compreendem gougerotina e um agente de controle biológico |
| US8907159B1 (en) | 2013-02-13 | 2014-12-09 | Pioneer Hi Bred International Inc | Maize inbred PH24DM |
| US8916744B1 (en) | 2013-02-13 | 2014-12-23 | Pioneer Hi Bred International Inc | Maize inbred PH24DV |
| US8921672B1 (en) | 2013-02-13 | 2014-12-30 | Pioneer Hi Bred International Inc | Maize inbred PH24DS |
| DK2964767T3 (da) | 2013-03-07 | 2020-03-23 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Toksingener og fremgangsmåder til anvendelse deraf |
| WO2014170345A2 (en) | 2013-04-19 | 2014-10-23 | Bayer Cropscience Ag | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants |
| JP2016519687A (ja) | 2013-04-19 | 2016-07-07 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | バイナリー殺虫または農薬混合物 |
| WO2014177514A1 (en) | 2013-04-30 | 2014-11-06 | Bayer Cropscience Ag | Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides |
| TW201507722A (zh) | 2013-04-30 | 2015-03-01 | Bayer Cropscience Ag | 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類 |
| EP3013802B1 (en) | 2013-06-26 | 2019-08-14 | Bayer Cropscience AG | N-cycloalkyl-n-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives |
| MX2016004595A (es) | 2013-10-09 | 2016-08-01 | Monsanto Technology Llc | Evento de maiz transgenico mon87403 y metodos para su deteccion. |
| AR097995A1 (es) | 2013-10-14 | 2016-04-27 | Syngenta Participations Ag | Método para sembrar filas de cultivos |
| US10070645B2 (en) | 2013-12-05 | 2018-09-11 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | N-cycloalkyl-N-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives |
| WO2015082587A1 (en) | 2013-12-05 | 2015-06-11 | Bayer Cropscience Ag | N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives |
| EP2885970A1 (en) | 2013-12-21 | 2015-06-24 | Bayer CropScience AG | Fungicide compositions comprising compound I, at least one succinate dehydrogenase (SDH) inhibitor and at least one triazole fungicide |
| BR112016020889B1 (pt) | 2014-03-11 | 2022-10-04 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Molécula de ácido nucleico recombinante, célula hospedeira bacteriana, proteína hppd recombinante, uso do ácido nucleico recombinante e produto de base |
| WO2015160618A1 (en) | 2014-04-16 | 2015-10-22 | Bayer Cropscience Lp | Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent |
| WO2015160620A1 (en) | 2014-04-16 | 2015-10-22 | Bayer Cropscience Lp | Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide |
| WO2015160619A1 (en) | 2014-04-16 | 2015-10-22 | Bayer Cropscience Lp | Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide |
| RS63232B1 (sr) | 2014-10-15 | 2022-06-30 | Monsanto Technology Llc | Geni tolerancije na herbicide i metode njihove upotrebe |
| WO2016075313A1 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | Basf Plant Science Company Gmbh | Materials and methods for increasing the tocopherol content in seed oil |
| CN104745708A (zh) * | 2015-04-02 | 2015-07-01 | 湖南省食品安全生产工程技术研究中心 | 一种转基因玉米nk603品系的lamp检测试剂盒及检测方法 |
| CN107531676A (zh) | 2015-04-13 | 2018-01-02 | 拜耳作物科学股份公司 | N‑环烷基‑n‑(双杂环基亚乙基)‑(硫代)羧酰胺衍生物 |
| CN104830845B (zh) * | 2015-04-30 | 2018-10-30 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9878的核酸序列及其检测方法 |
| CN104830846B (zh) * | 2015-04-30 | 2018-10-30 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9898的核酸序列及其检测方法 |
| CN104878090B (zh) * | 2015-04-30 | 2019-01-15 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9877的核酸序列及其检测方法 |
| CN104878094B (zh) * | 2015-04-30 | 2019-01-15 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9888的核酸序列及其检测方法 |
| CN104878096B (zh) * | 2015-04-30 | 2019-01-15 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9868的核酸序列及其检测方法 |
| CN104830847B (zh) * | 2015-04-30 | 2019-01-11 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测玉米植物dbn9936的核酸序列及其检测方法 |
| CN104878095B (zh) * | 2015-04-30 | 2018-10-26 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9858的核酸序列及其检测方法 |
| CN104846084B (zh) * | 2015-04-30 | 2019-02-01 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 用于检测玉米植物dbn9927的核酸序列及其检测方法 |
| EP3097782A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-11-30 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents |
| WO2017011462A1 (en) * | 2015-07-15 | 2017-01-19 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Use of elongator genes to improve plant disease resistance |
| BR112018004779A8 (pt) | 2015-09-11 | 2022-08-09 | Bayer Cropscience Lp | Variantes de hppd e métodos de uso |
| CN105331725B (zh) * | 2015-11-30 | 2018-04-24 | 中国农业大学 | 转maroACC基因抗除草剂玉米CC-2的侧翼序列及其应用 |
| BR112019001764A2 (pt) | 2016-07-29 | 2019-05-07 | Bayer Cropscience Ag | combinações de compostos ativos e métodos para proteção de material de propagação de plantas |
| CA3043493A1 (en) | 2016-11-23 | 2018-05-31 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Axmi669 and axmi991 toxin genes and methods for their use |
| WO2018114393A1 (en) | 2016-12-19 | 2018-06-28 | Basf Se | Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| BR112019014720A2 (pt) | 2017-01-18 | 2020-04-07 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | métodos para conferir resistência a doença em uma planta e para aumentar o rendimento em uma planta |
| UY37571A (es) | 2017-01-18 | 2018-08-31 | Bayer Cropscience Lp | Gen de toxina bp005 y procedimientos para su uso |
| US11425910B2 (en) | 2017-02-21 | 2022-08-30 | Basf Se | Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| BR112019018056A2 (pt) | 2017-03-07 | 2020-08-11 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | molécula de ácido nucleico recombinante, cassete de expressão, célula hospedeira, plantas, sementes transgênicas, polipeptídeo recombinante, métodos para conferir tolerância e para controlar ervas daninhas, produto de utilidade e uso da sequência de nucleotídeos |
| AU2018247768A1 (en) | 2017-04-07 | 2019-10-03 | Basf Se | Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2018188962A1 (en) | 2017-04-11 | 2018-10-18 | Basf Se | Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| AR111561A1 (es) | 2017-04-21 | 2019-07-24 | Bayer Cropscience Lp | Método para mejorar la seguridad de los cultivos |
| JP7160487B2 (ja) | 2017-05-04 | 2022-10-25 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 植物病原菌を駆除するための置換５－（ハロアルキル）－５－ヒドロキシ－イソオキサゾール |
| WO2018202491A1 (en) | 2017-05-04 | 2018-11-08 | Basf Se | Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2018219797A1 (en) | 2017-06-02 | 2018-12-06 | Basf Se | Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2018234139A1 (en) | 2017-06-19 | 2018-12-27 | Basf Se | 2-[[5-(trifluoromethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]aryloxy](thio)acetamides for combating phytopathogenic fungi |
| WO2019025250A1 (en) | 2017-08-04 | 2019-02-07 | Basf Se | SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR COMBATING PHYTOPATHOGENIC FUNGI |
| WO2019038042A1 (en) | 2017-08-21 | 2019-02-28 | Basf Se | SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR THE CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI |
| US11076596B2 (en) | 2017-09-18 | 2021-08-03 | Basf Se | Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2019068811A1 (en) | 2017-10-06 | 2019-04-11 | Bayer Aktiengesellschaft | COMPOSITIONS COMPRISING FLUOPYRAM AND TIOXAZAFENE |
| BR112020008092A2 (pt) | 2017-10-24 | 2020-09-15 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | método para conferir tolerância a um herbicida e planta de soja transgênica |
| WO2019083808A1 (en) | 2017-10-24 | 2019-05-02 | Basf Se | IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE AGAINST HPPD INHIBITORS BY REGULATION OF PUTATIVE REDUCED 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE REDUCES IN SOYBEANS |
| WO2019101511A1 (en) | 2017-11-23 | 2019-05-31 | Basf Se | Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2019121143A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Basf Se | Substituted cyclopropyl derivatives |
| WO2019137995A1 (en) | 2018-01-11 | 2019-07-18 | Basf Se | Novel pyridazine compounds for controlling invertebrate pests |
| WO2019145221A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | BASF Agro B.V. | New agrochemical formulations |
| EP3749660A1 (en) | 2018-02-07 | 2020-12-16 | Basf Se | New pyridine carboxamides |
| WO2019154665A1 (en) | 2018-02-07 | 2019-08-15 | Basf Se | New pyridine carboxamides |
| WO2019166257A1 (en) | 2018-03-01 | 2019-09-06 | BASF Agro B.V. | Fungicidal compositions of mefentrifluconazole |
| WO2019219464A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Basf Se | Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi |
| WO2019224092A1 (en) | 2018-05-22 | 2019-11-28 | Basf Se | Pesticidally active c15-derivatives of ginkgolides |
| WO2019226938A1 (en) | 2018-05-23 | 2019-11-28 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Fruit-specific promoters |
| WO2019233863A1 (de) | 2018-06-04 | 2019-12-12 | Bayer Aktiengesellschaft | Herbizid wirksame bizyklische benzoylpyrazole |
| EP3613736A1 (en) | 2018-08-22 | 2020-02-26 | Basf Se | Substituted glutarimide derivatives |
| EP3628158A1 (en) | 2018-09-28 | 2020-04-01 | Basf Se | Pesticidal mixture comprising a mesoionic compound and a biopesticide |
| JP7443357B2 (ja) | 2018-10-23 | 2024-03-05 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 三環式の殺有害生物化合物 |
| EP3643705A1 (en) | 2018-10-24 | 2020-04-29 | Basf Se | Pesticidal compounds |
| EP3670501A1 (en) | 2018-12-17 | 2020-06-24 | Basf Se | Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides |
| EP3908584B1 (en) | 2019-01-11 | 2023-04-26 | Basf Se | Crystalline forms of 1-(1,2-dimethylpropyl)-n-ethyl-5-methyl-n-pyridazin-4-yl-pyrazole-4-carboxamide |
| EP3696177A1 (en) | 2019-02-12 | 2020-08-19 | Basf Se | Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests |
| US12439919B2 (en) | 2019-05-10 | 2025-10-14 | Bayer Cropscience Lp | Active compound combinations |
| EP3769623A1 (en) | 2019-07-22 | 2021-01-27 | Basf Se | Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests |
| EP3975718A1 (en) | 2019-05-29 | 2022-04-06 | Basf Se | Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests |
| WO2020244970A1 (en) | 2019-06-06 | 2020-12-10 | Basf Se | New carbocyclic pyridine carboxamides |
| WO2020244969A1 (en) | 2019-06-06 | 2020-12-10 | Basf Se | Pyridine derivatives and their use as fungicides |
| MX2021014864A (es) | 2019-06-06 | 2022-01-18 | Basf Se | N-(pirid-3-il)carboxamidas fungicidas. |
| EP3766879A1 (en) | 2019-07-19 | 2021-01-20 | Basf Se | Pesticidal pyrazole derivatives |
| US20220289691A1 (en) | 2019-07-22 | 2022-09-15 | Bayer Aktiengesellschaft | 5-amino-substituted pyrazoles and triazoles as pest control agents |
| JP7689109B2 (ja) | 2019-07-23 | 2025-06-05 | バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト | 農薬としての新規ヘテロアリール－トリアゾール化合物 |
| US20220274947A1 (en) | 2019-07-23 | 2022-09-01 | Bayer Aktiengesellschaft | Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides |
| EP4007494B1 (en) | 2019-08-01 | 2026-03-18 | Bayer CropScience LLC | Method of improving cold stress tolerance and crop safety |
| EP3701796A1 (en) | 2019-08-08 | 2020-09-02 | Bayer AG | Active compound combinations |
| WO2021058659A1 (en) | 2019-09-26 | 2021-04-01 | Bayer Aktiengesellschaft | Rnai-mediated pest control |
| WO2021064075A1 (en) | 2019-10-02 | 2021-04-08 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations comprising fatty acids |
| WO2021063736A1 (en) | 2019-10-02 | 2021-04-08 | Basf Se | Bicyclic pyridine derivatives |
| WO2021063735A1 (en) | 2019-10-02 | 2021-04-08 | Basf Se | New bicyclic pyridine derivatives |
| PH12022550862A1 (en) | 2019-10-09 | 2023-04-24 | Bayer Ag | Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides |
| TW202128664A (zh) | 2019-10-09 | 2021-08-01 | 德商拜耳廠股份有限公司 | 作為除害劑之新穎雜芳基三唑化合物 |
| AU2020367523A1 (en) | 2019-10-14 | 2022-04-28 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Novel insect resistant genes and methods of use |
| US20220380318A1 (en) | 2019-11-07 | 2022-12-01 | Bayer Aktiengesellschaft | Substituted sulfonyl amides for controlling animal pests |
| WO2021097162A1 (en) | 2019-11-13 | 2021-05-20 | Bayer Cropscience Lp | Beneficial combinations with paenibacillus |
| WO2021099271A1 (en) | 2019-11-18 | 2021-05-27 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations comprising fatty acids |
| TW202134226A (zh) | 2019-11-18 | 2021-09-16 | 德商拜耳廠股份有限公司 | 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物 |
| TW202136248A (zh) | 2019-11-25 | 2021-10-01 | 德商拜耳廠股份有限公司 | 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物 |
| PY2107343A (es) | 2020-01-31 | 2021-11-04 | Pairwise Plants Services Inc | Supresión de la respuesta de escape a la sombra en plantas |
| EP4107151A1 (en) | 2020-02-18 | 2022-12-28 | Bayer Aktiengesellschaft | Heteroaryl-triazole compounds as pesticides |
| EP3708565A1 (en) | 2020-03-04 | 2020-09-16 | Bayer AG | Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides |
| WO2021209490A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Bayer Aktiengesellschaft | Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides |
| EP4135512A1 (en) | 2020-04-16 | 2023-02-22 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
| WO2021213978A1 (de) | 2020-04-21 | 2021-10-28 | Bayer Aktiengesellschaft | 2-(het)aryl-substituierte kondensierte heterocyclen-derivate als schädlingsbekämpfungsmittel |
| WO2021219513A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-04 | Basf Se | Pesticidal compounds |
| EP3903584A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-03 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iv |
| EP3903583A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-03 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iii |
| EP3903582A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-03 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ii |
| EP3903581A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-03 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors i |
| CN115915941B (zh) | 2020-05-06 | 2025-07-15 | 拜耳公司 | 作为杀真菌化合物的吡啶（硫代）酰胺 |
| TWI907288B (zh) | 2020-05-06 | 2025-12-01 | 德商拜耳廠股份有限公司 | 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物 |
| EP4149929B1 (en) | 2020-05-12 | 2026-01-28 | Bayer Aktiengesellschaft | Triazine and pyrimidine (thio)amides as fungicidal compounds |
| EP3909950A1 (en) | 2020-05-13 | 2021-11-17 | Basf Se | Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests |
| CN115803317B (zh) | 2020-05-19 | 2025-07-15 | 拜耳作物科学股份公司 | 作为杀真菌化合物的氮杂双环(硫代)酰胺 |
| EP4156909A1 (en) | 2020-06-02 | 2023-04-05 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
| US12565489B2 (en) | 2020-06-04 | 2026-03-03 | Bayer Aktiengesellschaft | Heterocyclyl pyrimidines and triazines as novel fungicides |
| EP3945089A1 (en) | 2020-07-31 | 2022-02-02 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors v |
| WO2021249800A1 (en) | 2020-06-10 | 2021-12-16 | Basf Se | Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides |
| WO2021249995A1 (en) | 2020-06-10 | 2021-12-16 | Bayer Aktiengesellschaft | Azabicyclyl-substituted heterocycles as fungicides |
| WO2021257775A1 (en) | 2020-06-17 | 2021-12-23 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
| KR20230026388A (ko) | 2020-06-18 | 2023-02-24 | 바이엘 악티엔게젤샤프트 | 작물 보호를 위한 살진균제로서의 3-(피리다진-4-일)-5,6-디히드로-4h-1,2,4-옥사디아진 유도체 |
| US20230292747A1 (en) | 2020-06-18 | 2023-09-21 | Bayer Aktiengesellschaft | Composition for use in agriculture |
| BR112022025692A2 (pt) | 2020-06-19 | 2023-02-28 | Bayer Ag | 1,3,4-oxadiazóis e seus derivados como fungicidas |
| UY39276A (es) | 2020-06-19 | 2022-01-31 | Bayer Ag | Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones. |
| BR112022025710A2 (pt) | 2020-06-19 | 2023-03-07 | Bayer Ag | 1,3,4-oxadiazol pirimidinas e 1,3,4-oxadiazol piridinas como fungicidas |
| UY39275A (es) | 2020-06-19 | 2022-01-31 | Bayer Ag | 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos |
| EP3929189A1 (en) | 2020-06-25 | 2021-12-29 | Bayer Animal Health GmbH | Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides |
| US20230247994A1 (en) | 2020-07-02 | 2023-08-10 | Bayer Aktiengesellschaft | Heterocyclene derivatives as pest control agents |
| CN111826387A (zh) * | 2020-07-07 | 2020-10-27 | 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 | 一种转基因玉米品系鉴定阳性质粒分子 |
| EP3960727A1 (en) | 2020-08-28 | 2022-03-02 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors vi |
| EP3939961A1 (en) | 2020-07-16 | 2022-01-19 | Basf Se | Strobilurin type compounds and their use for combating phytopathogenic fungi |
| WO2022017836A1 (en) | 2020-07-20 | 2022-01-27 | BASF Agro B.V. | Fungicidal compositions comprising (r)-2-[4-(4-chlorophenoxy)-2-(trifluoromethyl)phenyl]-1- (1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol |
| US12529062B2 (en) | 2020-07-31 | 2026-01-20 | Inari Agriculture Technology, Inc. | INIR12 transgenic maize |
| US20230313221A1 (en) * | 2020-07-31 | 2023-10-05 | Inari Agriculture Technology, Inc. | Expedited breeding of transgenic crop plants by genome editing |
| EP3970494A1 (en) | 2020-09-21 | 2022-03-23 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors viii |
| WO2022033991A1 (de) | 2020-08-13 | 2022-02-17 | Bayer Aktiengesellschaft | 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel |
| WO2022053453A1 (de) | 2020-09-09 | 2022-03-17 | Bayer Aktiengesellschaft | Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel |
| WO2022058327A1 (en) | 2020-09-15 | 2022-03-24 | Bayer Aktiengesellschaft | Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents |
| EP3974414A1 (de) | 2020-09-25 | 2022-03-30 | Bayer AG | 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel |
| WO2022089969A1 (en) | 2020-10-27 | 2022-05-05 | BASF Agro B.V. | Compositions comprising mefentrifluconazole |
| CN112266419B (zh) * | 2020-10-29 | 2023-02-03 | 中国科学院微生物研究所 | 一种人工合成的抗除草剂蛋白 |
| WO2022090069A1 (en) | 2020-11-02 | 2022-05-05 | Basf Se | Compositions comprising mefenpyr-diethyl |
| WO2022090071A1 (en) | 2020-11-02 | 2022-05-05 | Basf Se | Use of mefenpyr-diethyl for controlling phytopathogenic fungi |
| WO2022106304A1 (en) | 2020-11-23 | 2022-05-27 | BASF Agro B.V. | Compositions comprising mefentrifluconazole |
| AU2021403544A1 (en) | 2020-12-14 | 2023-06-29 | Basf Se | Sulfoximine pesticides |
| EP3915971A1 (en) | 2020-12-16 | 2021-12-01 | Bayer Aktiengesellschaft | Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides |
| WO2022129196A1 (en) | 2020-12-18 | 2022-06-23 | Bayer Aktiengesellschaft | Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides |
| WO2022129188A1 (en) | 2020-12-18 | 2022-06-23 | Bayer Aktiengesellschaft | 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides |
| EP4262394A1 (en) | 2020-12-18 | 2023-10-25 | Bayer Aktiengesellschaft | Use of dhodh inhibitor for controlling resistant phytopathogenic fungi in crops |
| WO2022129190A1 (en) | 2020-12-18 | 2022-06-23 | Bayer Aktiengesellschaft | (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides |
| EP4036083A1 (de) | 2021-02-02 | 2022-08-03 | Bayer Aktiengesellschaft | 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel |
| EP4291641A1 (en) | 2021-02-11 | 2023-12-20 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying cytokinin oxidase levels in plants |
| EP4043444A1 (en) | 2021-02-11 | 2022-08-17 | Basf Se | Substituted isoxazoline derivatives |
| CA3211121A1 (en) | 2021-02-25 | 2022-09-01 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying root architecture in plants |
| WO2022207494A1 (en) | 2021-03-30 | 2022-10-06 | Bayer Aktiengesellschaft | 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide |
| BR112023019788A2 (pt) | 2021-03-30 | 2023-11-07 | Bayer Ag | 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida |
| EP4333616A1 (en) | 2021-05-03 | 2024-03-13 | Basf Se | Additives for enhancing the pesticidal effectiveness of pesticidal microorganisms |
| WO2022233777A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-10 | Bayer Aktiengesellschaft | Alkylamide substituted, annulated imidazoles and use thereof as insecticides |
| US20240294533A1 (en) | 2021-05-12 | 2024-09-05 | Bayer Aktiengesellschaft | 2-(het)aryl-substituted condensed heterocycle derivatives as pest control agents |
| EP4091451A1 (en) | 2021-05-17 | 2022-11-23 | BASF Agro B.V. | Compositions comprising mefentrifluconazole |
| EP4341257A1 (en) | 2021-05-18 | 2024-03-27 | Basf Se | New substituted quinolines as fungicides |
| AU2022279357A1 (en) | 2021-05-18 | 2023-11-30 | Basf Se | New substituted pyridines as fungicides |
| MX2023013719A (es) | 2021-05-18 | 2024-01-17 | Basf Se | Nuevas piridinas sustituidas como fungicidas. |
| US20220411813A1 (en) | 2021-06-17 | 2022-12-29 | Pairwise Plants Services, Inc. | Modification of growth regulating factor family transcription factors in soybean |
| UY39827A (es) | 2021-06-24 | 2023-01-31 | Pairwise Plants Services Inc | Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento |
| US12529063B2 (en) | 2021-07-01 | 2026-01-20 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for enhancing root system development |
| EP4119547A1 (en) | 2021-07-12 | 2023-01-18 | Basf Se | Triazole compounds for the control of invertebrate pests |
| US20250019361A1 (en) | 2021-08-02 | 2025-01-16 | Basf Se | (3-quinolyl)-quinazoline |
| CA3227665A1 (en) | 2021-08-02 | 2023-02-09 | Wassilios Grammenos | (3-pirydyl)-quinazoline |
| MX2024001883A (es) | 2021-08-12 | 2024-02-29 | Pairwise Plants Services Inc | Modificacion de los genes receptores de brasinoesteroides para mejorar los rasgos de rendimiento. |
| CA3228942A1 (en) | 2021-08-13 | 2023-02-16 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations and fungicide compositions comprising those |
| PY2270221A (es) | 2021-08-17 | 2023-03-20 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas |
| EP4140986A1 (en) | 2021-08-23 | 2023-03-01 | Basf Se | Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests |
| WO2023025682A1 (en) | 2021-08-25 | 2023-03-02 | Bayer Aktiengesellschaft | Novel pyrazinyl-triazole compounds as pesticides |
| EP4140995A1 (en) | 2021-08-27 | 2023-03-01 | Basf Se | Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests |
| CA3230167A1 (en) | 2021-08-30 | 2023-03-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement |
| EP4144739A1 (de) | 2021-09-02 | 2023-03-08 | Bayer Aktiengesellschaft | Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel |
| AR126938A1 (es) | 2021-09-02 | 2023-11-29 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento |
| EP4151631A1 (en) | 2021-09-20 | 2023-03-22 | Basf Se | Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests |
| AU2022352997A1 (en) | 2021-09-21 | 2024-04-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for reducing pod shatter in canola |
| UY39966A (es) | 2021-10-04 | 2023-04-28 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos para mejorar la fertilidad de la flor y el rendimiento de semillas |
| CA3234455A1 (en) | 2021-10-07 | 2023-04-13 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for improving floret fertility and seed yield |
| WO2023072670A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors x |
| WO2023072671A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ix |
| US20250064060A1 (en) | 2021-11-03 | 2025-02-27 | Bayer Aktiengesellschaft | Bis(hetero)aryl thioether (thio)amides as fungicidal compounds |
| EP4441049A1 (en) | 2021-11-30 | 2024-10-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds |
| EP4194453A1 (en) | 2021-12-08 | 2023-06-14 | Basf Se | Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests |
| UY40060A (es) | 2021-12-09 | 2023-07-14 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas |
| EP4198033A1 (en) | 2021-12-14 | 2023-06-21 | Basf Se | Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests |
| EP4198023A1 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-21 | Basf Se | Pesticidally active thiosemicarbazone compounds |
| UY40132A (es) | 2022-01-31 | 2023-08-31 | Pairwise Plants Services Inc | Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas |
| US20250212874A1 (en) | 2022-02-01 | 2025-07-03 | Globachem Nv | Methods and compositions for controlling pests |
| US20250160323A1 (en) | 2022-02-01 | 2025-05-22 | Globachem Nv | Methods and compositions for controlling pests in corn |
| US20250197358A1 (en) | 2022-02-17 | 2025-06-19 | Basf Se | Pesticidally active thiosemicarbazone compounds |
| EP4238971A1 (en) | 2022-03-02 | 2023-09-06 | Basf Se | Substituted isoxazoline derivatives |
| MX2024010647A (es) | 2022-03-02 | 2024-09-06 | Pairwise Plants Services Inc | Modificacion de genes del receptor de brasinoesteroides para mejorar rasgos de rendimiento. |
| US20260043040A1 (en) | 2022-03-31 | 2026-02-12 | Pairwise Plants Services, Inc. | Early flowering rosaceae plants with improved characteristics |
| US20230357789A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-11-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight |
| CN119278208A (zh) | 2022-04-21 | 2025-01-07 | 成对植物服务股份有限公司 | 用于改善产量性状的方法和组合物 |
| UY40250A (es) | 2022-05-02 | 2023-11-15 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para mejorar el rendimiento y la resistencia a enfermedades |
| CA3256572A1 (en) | 2022-05-03 | 2023-11-09 | Bayer Aktiengesellschaft | USE OF (5S)-3-[3-(3-CHLORO-2-FLUOROPHENOXY)-6-METHYLPYRIDAZIN-4-YL]-5-(2-CHLORO-4-METHYLBENZYL)-5,6-DIHYDRO-4H-1,2,4-OXADIAZINE TO COMBAT UNDESIRABLE MICROORGANISMS |
| CN119522219A (zh) | 2022-05-03 | 2025-02-25 | 拜耳公司 | (5s)-3-[3-(3-氯-2-氟苯氧基)-6-甲基哒嗪-4-基]-5-(2-氯-4-甲基苄基)-5,6-二氢-4h-1,2,4-噁二嗪的晶型 |
| UY40255A (es) | 2022-05-05 | 2023-11-15 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar la arquitectur radicular y/o mejorar los rangos de rendimient |
| UY40326A (es) | 2022-06-27 | 2023-12-29 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar el escape a la sombra en plantas |
| UY40337A (es) | 2022-06-29 | 2023-12-29 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristemo para el mejoramiento de cultivos |
| CA3259677A1 (en) | 2022-06-29 | 2024-01-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR REGULATING MERISTEMUM SIZE TO IMPROVE CROP PRODUCTION |
| AU2023317620A1 (en) | 2022-08-02 | 2025-02-13 | Basf Se | Pyrazolo pesticidal compounds |
| EP4565689A1 (en) | 2022-08-04 | 2025-06-11 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield traits |
| EP4568477A1 (en) | 2022-08-11 | 2025-06-18 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement |
| EP4584282A1 (en) | 2022-09-08 | 2025-07-16 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield characteristics in plants |
| EP4342885A1 (en) | 2022-09-20 | 2024-03-27 | Basf Se | N-(3-(aminomethyl)-phenyl)-5-(4-phenyl)-5-(trifluoromethyl)-4,5-dihydroisoxazol-3-amine derivatives and similar compounds as pesticides |
| WO2024068518A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Bayer Aktiengesellschaft | 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide |
| WO2024068520A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Bayer Aktiengesellschaft | 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide |
| WO2024068519A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Bayer Aktiengesellschaft | 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide |
| EP4295688A1 (en) | 2022-09-28 | 2023-12-27 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combination |
| WO2024068517A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Bayer Aktiengesellschaft | 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide |
| EP4361126A1 (en) | 2022-10-24 | 2024-05-01 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xv |
| EP4619399A1 (en) | 2022-11-16 | 2025-09-24 | Basf Se | New substituted tetrahydrobenzoxazepine |
| CN120202195A (zh) | 2022-11-16 | 2025-06-24 | 巴斯夫欧洲公司 | 作为杀真菌剂的取代的苯并二氮杂䓬类 |
| CN120202196A (zh) | 2022-11-16 | 2025-06-24 | 巴斯夫欧洲公司 | 作为杀真菌剂的取代的苯并二氮杂䓬类 |
| WO2024104822A1 (en) | 2022-11-16 | 2024-05-23 | Basf Se | Substituted tetrahydrobenzodiazepine as fungicides |
| EP4385326A1 (en) | 2022-12-15 | 2024-06-19 | Kimitec Biogorup | Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants |
| AU2023408197A1 (en) | 2022-12-19 | 2025-06-26 | Basf Agricultural Solutions Us Llc | Insect toxin genes and methods for their use |
| EP4389210A1 (en) | 2022-12-21 | 2024-06-26 | Basf Se | Heteroaryl compounds for the control of invertebrate pests |
| WO2024165343A1 (en) | 2023-02-08 | 2024-08-15 | Basf Se | New substituted quinoline compounds for combatitng phytopathogenic fungi |
| US20240279673A1 (en) | 2023-02-16 | 2024-08-22 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants |
| PY2415568A (es) | 2023-03-02 | 2024-11-25 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar la evitación de la sombra en plantas |
| UY40664A (es) | 2023-03-09 | 2024-10-15 | Pairwise Plants Services Inc | Modificación de genes de la vía de señalización de brasinoesteroide para mejorar rasgos de rendimien |
| JP2026509904A (ja) | 2023-03-17 | 2026-03-25 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 植物病原真菌を駆除するための置換ピリジル／ピラジジルジヒドロベンゾチアゼピン化合物 |
| EP4455137A1 (en) | 2023-04-24 | 2024-10-30 | Basf Se | Pyrimidine compounds for the control of invertebrate pests |
| WO2024223034A1 (en) | 2023-04-26 | 2024-10-31 | Basf Se | Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xvi |
| UY40746A (es) | 2023-05-18 | 2024-12-13 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para mejorar las características de rendimiento de las plantas |
| EP4467535A1 (en) | 2023-05-25 | 2024-11-27 | Basf Se | Lactam pesticidal compounds |
| WO2025008447A1 (en) | 2023-07-05 | 2025-01-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Composition for use in agriculture |
| WO2025008226A1 (en) | 2023-07-05 | 2025-01-09 | Basf Se | Substituted quinolyl/quinoxalyl dihydropyrrolotriazine compounds for combatting phyto-pathogenic fungi |
| WO2025008227A1 (en) | 2023-07-05 | 2025-01-09 | Basf Se | Substituted pyridyl/pyrazinyl dihydropyrrolotriazine compounds for combatting phytopath-ogenic fungi |
| WO2025008446A1 (en) | 2023-07-05 | 2025-01-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Composition for use in agriculture |
| EP4488269A1 (en) | 2023-07-06 | 2025-01-08 | Basf Se | Triazole compounds for the control of invertebrate pests |
| EP4488273A1 (en) | 2023-07-06 | 2025-01-08 | Basf Se | Triazole compounds for the control of invertebrate pests |
| EP4488270A1 (en) | 2023-07-06 | 2025-01-08 | Basf Se | Triazole compounds for the control of invertebrate pests |
| PY2455894A (es) | 2023-07-18 | 2025-03-28 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar la arquitectura radicular en plantas |
| PY2461802A (es) | 2023-07-27 | 2025-05-19 | Monsanto Technology Llc | Métodos y composiciones para modificar rasgos de rendimiento de las plantas |
| WO2025026738A1 (en) | 2023-07-31 | 2025-02-06 | Bayer Aktiengesellschaft | 6-[5-(ethylsulfonyl)-1-methyl-1h-imidazol-4-yl]-7-methyl-3-(pentafluoroethyl)-7h-imidazo[4,5-c]pyridazine derivatives as pesticides |
| WO2025026815A1 (en) | 2023-08-01 | 2025-02-06 | Globachem Nv | Insecticidal mixtures |
| EP4501112A1 (en) | 2023-08-01 | 2025-02-05 | Globachem NV | Plant defense elicitors |
| WO2025031842A1 (en) | 2023-08-09 | 2025-02-13 | Basf Se | New substituted benzoxazepine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2025031668A1 (en) | 2023-08-09 | 2025-02-13 | Bayer Aktiengesellschaft | Azaheterobiaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides |
| WO2025031843A1 (en) | 2023-08-09 | 2025-02-13 | Basf Se | New substituted benzoxazine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| CN121693501A (zh) | 2023-08-09 | 2026-03-17 | 拜耳公司 | 作为新的杀菌剂的哒嗪-4-基噁二嗪 |
| AR133901A1 (es) | 2023-09-21 | 2025-11-12 | Pairwise Plants Services Inc | Plantas de frambuesa negra de floración temprana con características mejoradas |
| AU2024352308A1 (en) | 2023-09-29 | 2026-04-09 | Basf Se | Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur and selected terpenes |
| AU2024358203A1 (en) | 2023-10-09 | 2026-04-16 | Basf Se | Fungicidal mixture comprising substituted pyridines |
| WO2025078183A1 (en) | 2023-10-09 | 2025-04-17 | Basf Se | Fungicidal mixture comprising substituted quinazolyl quinolines |
| WO2025078128A1 (en) | 2023-10-11 | 2025-04-17 | Bayer Aktiengesellschaft | Pyridazin-3-one-4-yloxadiazines as novel fungicides |
| US20250122522A1 (en) | 2023-10-11 | 2025-04-17 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving crop yield traits |
| WO2025098875A1 (en) | 2023-11-10 | 2025-05-15 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties |
| WO2025098876A1 (en) | 2023-11-10 | 2025-05-15 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties |
| WO2025098874A1 (en) | 2023-11-10 | 2025-05-15 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having fungicidal/insecticidal/acaricidal properties |
| WO2025131902A1 (en) | 2023-12-21 | 2025-06-26 | Basf Se | Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur, selected terpenes and phosphites. |
| EP4574819A1 (en) | 2023-12-22 | 2025-06-25 | Basf Se | Diazinone compounds for the control of invertebrate pests |
| WO2025168620A1 (en) | 2024-02-07 | 2025-08-14 | Bayer Aktiengesellschaft | Heteroaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides |
| US20250270578A1 (en) | 2024-02-22 | 2025-08-28 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield characteristics in plants |
| WO2025180964A1 (en) | 2024-03-01 | 2025-09-04 | Basf Se | New substituted benzoxazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2025186065A1 (en) | 2024-03-05 | 2025-09-12 | Bayer Aktiengesellschaft | Heteroaryl-substituted (aza)quinoxaline derivatives as pesticides |
| WO2025190927A1 (en) | 2024-03-14 | 2025-09-18 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties |
| WO2025211272A1 (en) | 2024-04-04 | 2025-10-09 | Nihon Nohyaku Co., Ltd. | Pesticidal mixtures comprising an ethylsulfone compound |
| WO2025223904A1 (en) | 2024-04-24 | 2025-10-30 | Basf Se | Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i |
| EP4640052A1 (en) | 2024-04-24 | 2025-10-29 | Basf Se | Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i |
| EP4652843A1 (en) | 2024-05-21 | 2025-11-26 | Kimitec Biogroup S.L | Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests in plants |
| EP4652842A1 (en) | 2024-05-21 | 2025-11-26 | Kimitec Biogroup S.L | Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests, diseases and weeds in plants |
| WO2025257121A1 (en) | 2024-06-12 | 2025-12-18 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties |
| WO2025257122A1 (en) | 2024-06-12 | 2025-12-18 | Bayer Aktiengesellschaft | Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties |
| WO2026002763A1 (en) | 2024-06-26 | 2026-01-02 | Basf Se | Pesticidal mixtures and applications of beauveria bassiana and dimpropyridaz |
| WO2026012814A1 (en) | 2024-07-10 | 2026-01-15 | Basf Se | Compositions and methods to enhance crop yield and plant health |
| WO2026021910A1 (en) | 2024-07-23 | 2026-01-29 | Basf Se | New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2026021909A1 (en) | 2024-07-23 | 2026-01-29 | Basf Se | New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2026021911A1 (en) | 2024-07-23 | 2026-01-29 | Basf Se | New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2026021912A1 (en) | 2024-07-23 | 2026-01-29 | Basf Se | New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi |
| WO2026027375A1 (de) | 2024-07-29 | 2026-02-05 | Bayer Aktiengesellschaft | Hydroxy-dihydropyridinon carboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel |
| WO2026027723A1 (en) | 2024-08-01 | 2026-02-05 | Syngenta Crop Protection Ag | Herbicide resistant plants |
| WO2026037853A1 (en) | 2024-08-14 | 2026-02-19 | Basf Se | Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds |
| WO2026041702A1 (en) | 2024-08-21 | 2026-02-26 | Basf Se | Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds |
| EP4710766A1 (en) | 2024-09-11 | 2026-03-18 | Basf Se | Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide |
| WO2026057375A1 (en) | 2024-09-11 | 2026-03-19 | Basf Se | Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide |
| EP4721566A1 (en) | 2024-10-07 | 2026-04-08 | Kimitec Biogroup S.L | Microbial composition based on bacillus infantis strain for agricultural use |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998044140A1 (en) * | 1997-04-03 | 1998-10-08 | Dekalb Genetics Corporation | Glyphosate resistant maize lines |
| US5948956A (en) * | 1997-10-16 | 1999-09-07 | Oms Investments, Inc. | Transgenic plants and method for node segment transformation |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
| US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
| US5164316A (en) | 1987-01-13 | 1992-11-17 | The University Of British Columbia | DNA construct for enhancing the efficiency of transcription |
| US5641876A (en) | 1990-01-05 | 1997-06-24 | Cornell Research Foundation, Inc. | Rice actin gene and promoter |
| US5633435A (en) | 1990-08-31 | 1997-05-27 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
| US5593874A (en) | 1992-03-19 | 1997-01-14 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants |
| US5362865A (en) * | 1993-09-02 | 1994-11-08 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences |
| US5853973A (en) * | 1995-04-20 | 1998-12-29 | American Cyanamid Company | Structure based designed herbicide resistant products |
| US6040497A (en) * | 1997-04-03 | 2000-03-21 | Dekalb Genetics Corporation | Glyphosate resistant maize lines |
| WO2000029596A1 (en) | 1998-11-17 | 2000-05-25 | Monsanto Company | Phosphonate metabolizing plants |
| BRPI0100752B1 (pt) * | 2000-06-22 | 2015-10-13 | Monsanto Co | moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna |
| PL214848B1 (pl) * | 2000-09-29 | 2013-09-30 | Monsanto Technology Llc | Sposób wytwarzania tolerancyjnej na glifosat rosliny pszenicy, plodna tolerujaca glifosat roslina pszenicy, nasiono pszenicy, para czasteczek DNA, sposób wykrywania obecnosci diagnostycznej czasteczki DNA, sposób wykrywania sekwencji zawierajacej okreslone nukleotydy, sposób wytwarzania rosliny pszenicy z tolerancja glifosatu, zestaw do wykrywania DNA, nasiono transgenicznej pszenicy, roslina pszenicy wytworzona przez hodowle nasion, sposób wytwarzania rosliny pszenicy tolerujacej stosowanie glifosatu, sposób selektywnego kontrolowania chwastów na polu zawierajacym uprawe pszenicy, czasteczka DNA, roslina pszenicy tolerujaca glifosat, roslina zdolna do wytwarzania diagnostycznego amplikonu, nasiono, komórka |
| US7569747B2 (en) * | 2002-12-05 | 2009-08-04 | Monsanto Technology Llc | Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof |
-
2001
- 2001-02-22 BR BRPI0100752A patent/BRPI0100752B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-02-22 BR BR122013026754-9A patent/BR122013026754B1/pt active IP Right Grant
- 2001-06-01 US US09/872,051 patent/US6825400B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 ID IDP00200100445D patent/ID30575A/id unknown
- 2001-06-15 DE DE60142092T patent/DE60142092D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 DE DE60118660T patent/DE60118660T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 SI SI200131049T patent/SI2210951T1/sl unknown
- 2001-06-15 EP EP10154997.0A patent/EP2210951B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 EP EP05105879A patent/EP1582592B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 EP EP01202314A patent/EP1167531B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 ES ES05105879T patent/ES2343252T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 SI SI200130973T patent/SI1582592T1/sl unknown
- 2001-06-15 PT PT01202314T patent/PT1167531E/pt unknown
- 2001-06-15 ES ES10154997.0T patent/ES2564464T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 AT AT01202314T patent/ATE323168T1/de active
- 2001-06-15 AT AT05105879T patent/ATE466945T1/de active
- 2001-06-15 DK DK10154997.0T patent/DK2210951T3/en active
- 2001-06-15 SI SI200130562T patent/SI1167531T1/sl unknown
- 2001-06-15 PT PT05105879T patent/PT1582592E/pt unknown
- 2001-06-15 ES ES01202314T patent/ES2261330T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 DK DK01202314T patent/DK1167531T3/da active
- 2001-06-15 DK DK05105879.0T patent/DK1582592T3/da active
- 2001-06-18 CZ CZ2008-437A patent/CZ305949B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-18 CZ CZ20012203A patent/CZ299722B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-18 RS YUP-437/01A patent/RS49990B/sr unknown
- 2001-06-20 CA CA2349841A patent/CA2349841C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-21 MX MXPA01006407A patent/MXPA01006407A/es active IP Right Grant
- 2001-06-21 HU HU0800015A patent/HU230814B1/hu unknown
- 2001-06-21 HU HU0102569A patent/HU226193B1/hu unknown
- 2001-06-22 UY UY26788A patent/UY26788A1/es not_active IP Right Cessation
- 2001-06-22 CN CNA2007101543414A patent/CN101186918A/zh active Pending
- 2001-06-22 AR ARP010102985A patent/AR031665A1/es active IP Right Grant
- 2001-06-22 BG BG105637A patent/BG65315B1/bg unknown
- 2001-06-22 CN CNB011220368A patent/CN100350043C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-22 PL PL348225A patent/PL199928B1/pl unknown
-
2004
- 2004-03-01 US US10/790,430 patent/US7193071B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-08-16 US US10/919,423 patent/US20070292854A1/en not_active Abandoned
-
2006
- 2006-04-19 AR ARP060101550A patent/AR053231A2/es unknown
- 2006-06-29 CY CY20061100886T patent/CY1106109T1/el unknown
- 2006-11-03 US US11/592,497 patent/US7582434B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-03-11 AR ARP080100998A patent/AR065690A2/es unknown
- 2008-08-15 AR ARP080103584A patent/AR066163A2/es unknown
-
2009
- 2009-07-21 US US12/460,523 patent/US8273959B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2010
- 2010-06-15 CY CY20101100549T patent/CY1110083T1/el unknown
-
2012
- 2012-05-18 US US13/475,841 patent/US8722969B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-03-06 US US14/199,883 patent/US9701980B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2017
- 2017-05-24 US US15/604,462 patent/US20170327838A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998044140A1 (en) * | 1997-04-03 | 1998-10-08 | Dekalb Genetics Corporation | Glyphosate resistant maize lines |
| US5948956A (en) * | 1997-10-16 | 1999-09-07 | Oms Investments, Inc. | Transgenic plants and method for node segment transformation |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ305949B6 (cs) | Kukuřičná rostlina PV-ZMGT32(nk) nebo její část, tolerantní ke glyfosfátu, její potomstvo a její semena | |
| CN103088017B (zh) | 棉花事件mon 88913及其组合物和检测方法 | |
| CN101252831B (zh) | 大豆事件mon89788和检测它的方法 | |
| CZ2003629A3 (cs) | Rostlina pšenice 33391 tolerantní ke glyfosátu a kompozice a způsoby její detekce | |
| AU2002215363A1 (en) | Cotton event PV-GHGT07(1445) and compositions and methods for detection thereof | |
| WO2002034946A2 (en) | Cotton event pv-ghgt07(1445) and compositions and methods for detection thereof | |
| CA2616535A1 (en) | Development of novel germplasm using segregates from transgenic crosses | |
| ME00840B (me) | Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20210618 |