RS49990B - Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju - Google Patents

Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju

Info

Publication number
RS49990B
RS49990B YUP-437/01A YUP43701A RS49990B RS 49990 B RS49990 B RS 49990B YU P43701 A YUP43701 A YU P43701A RS 49990 B RS49990 B RS 49990B
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
dna
seq
molecule
maize
dna molecule
Prior art date
Application number
YUP-437/01A
Other languages
English (en)
Inventor
Carl F Behr
Gregory R. Heck
Catherine Hironaka
Jinsong You
Original Assignee
Monsanto Technology Llc.,
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27395887&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS49990(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Monsanto Technology Llc., filed Critical Monsanto Technology Llc.,
Publication of YU43701A publication Critical patent/YU43701A/sh
Publication of RS49990B publication Critical patent/RS49990B/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8275—Glyphosate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C12N15/8221—Transit peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13—Plant traits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

DNK molekul koji sadrži nukleotidne sekvence identifikovane kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8. Prijava ima 4 nezavisna zahteva i 3 zavisna zahteva.

Description

PODRUČJE PRONALASKA
Predmetni pronalazak odnosi se na podruje molekularne biologije biljaka, posebno se pronalazak odnosi na DNK konstrukt za dobijanje tolerancije na glifozat kod biljke. Pronalazak se još specifičnije odnosi na oglede za detekciju prisustva DNK biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) u uzorku i njen sastav.
STANJE TEHNIKE
Ovaj pronalazak se odnosi na biljku kukuruza(Zea mays)PV-ZMGT32(nk603) tole-rantnu na herbicid glifozat i ekspresiju konstrukta DNK biljke PV-ZMGT32(nk603) i detekciju transgen/genomski region insercije kod kukuruza PV-ZMGT32(nk603) i njeno potomstvo.
Kukuruz je važan usev i on je primarni izvor hrane u mnogim područjima sveta. Bio-tehnotoški metodi primenjeni su na kukuruz radi poboljšanja agronomskih karakteristika i kvaliteta produkta. Jedna takva agronomska karakteristika je tolerancija na herbicide, posebno, tolerancija na glifozatne herbicide. Ta karakteristika je data kukuruzu preko ekspresije transgena kod biljaka kukuruza (U.S. patent br. 6,040,497).
Poznato je da je ekspresija stranih gena kod biljaka pod uticajem njihove pozicije na hromozomima, verovatno zbog strukture hromatina (npr. heterohromatina) ili blizine elemenata za regulaciju transkripcije (npr. pobopvača) blizu mesta integracije (VVeising i sar., Ann. Rev. Genet. 22:421-477, 1988). To je razlog što je često neophodno da se pregleda veliki broj transformanata sa ciljem da se identifikuje transformant okarakterisan optimalnom ekspresijom introdukovanog gena od interesa. Na primer, kod biljaka i drugih organizama zapaženo je da može postojati široko variranje u nivoima ekspresije introdukovanih gena među transformantima. Takođe može postojati razlika u prostornim i vremenskim obrascima ekspresije, na primer, razlike u relativnoj ekspresiji transgena u različitim biljnim tkivima koja može biti ne ogovarajuća putevima očekivanim od regulatomih transkripcionih elemenata prisutnih u introdukovanom konstruktu gena. Zbog toga je uobičajeno da se produkuju stotine do hiljada različitih transformanata i da se oni pregledaju radi pojedinačnog transformanta koji ima željene nivoe ekspresije transgena i model za komercijalnu upotrebu. Transformant koji ima željene nivoe ili obrasce transgene ekspresije koristan je za prenošenje transgena u drugu genetičku pozadinu polnim ukrštanjem koristeći konvencionalne metode razmnožavanja. Potomstvo takvih ukrštanja zadržava transgene ekspresione karakteristike originalnog transformanta. Ta strategija se upotrebljava da se osigura pouzdana ekspresija gena kod određenog broja varijeteta koji su dobro adaptirani na lokalne uslove rasta.
Bilo bi korisno biti u mogućnosti da se detektuje prisustvo određenog transformanta sa ciljem da se odredi da li potomstvo polnog ukrštanja sadrži željene transgene. Dodatno, metod za detekciju određenog transformanta bio bi od pomoći, na primer, za ispunjavanje propisa neophodnih za pretržišno odobrenje i obeležavanje hrane dobijene od rekombinantnih useva. Moguće je detektovati prisustvo transgena bilo kojom dobro poznatom detekcionom metodom za nukleinske kiseline kao što su polimerazna lančana reakcija (PCR) ili DNK hibridizacija putem proba nukleinskih kiselina Ti detekcioni metodi generalno se usmeravaju na genetičke elemente koji se učestalo koriste, kao što su promotori, terminatori, marker geni itd. Kao rezultat, ti metodi ne moraju biti korisni za nalaženje razlike između različitih transformanata, posebno onih koji su produkovani koristeći isti DNK konstrukt ukoliko je DNK sekvenca hromozomalne DNK u susedstvu unesene DNK ("flanking DNK") poznata. PCR ogled za transformant-specifičan diskutovan je, na primer, od strane VVindels i sar., (Med. Fac. Landbouww, Univ. Gent. 64/5b:459-462, 1999), koji su identifikovali glifozat tolerantan transformant kod soje 40-3-2 pomoću PCR-a koristeći prajmer set koji je obuhvatao spoj između inserta I flanking DNK, posebno jedan prajmer koji je uključio sekvence iz inserta i drugi prajmer koji je uključivao sekvence iz flanking DNK.
SAŽETAK PRONALASKA
Prema jednom aspektu pronalaska, obezbeđen je DNK konstrukt koji, kada se eksprimira u biljnim ćelijama i biljkama, donosi tolerantnost na glifozat herbicide. Ovaj pronalazak odnosi se preferentno na metode za produkovanje i selekcionisanje tolerantnosti na glofozat kod monokotilnih useva. DNK konstrukt sastoji se od dve transgene ekspresione kasete. Prva ekspresiona kaseta sadrži molekul DNK promotora aktina 1 pirinča( Orizae satlva)i Intron aktina 1 pirinča operativno vezan za DNK molekul koji enkodira peptidne tranzitne sekvence hloroplasta, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšildmat-3-fosfat sintazu (EPSPS), operativno vezanu za DNK molekul koji sadrži 3' transkripcioni terminator. Druga transgena ekspresiona kaseta DNK konstrukta sadrži 35S promotor DNK molekula mozaičrtog virusa karfijola (CaMV), operativno vezan za molekul DNK koji sadrži Hsp70 intron, operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence hloroplasta, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), operativno vezanu za DNK molekul koji sadrži 3' transkripcioni terminator.
Još specifičnije, obezbeđen je DNK konstrukt koji, kada se eksprimira u biljnim ćelijama i biljkama, donosi tolerantnost na glifozatne herbicide. Ovaj pronalazak odnosi se preferentno na metode za produkovanje i selekcionisanje tolerantnosti na glofozat kod biljke kukuruza. DNK konstrukt sastoji se od dve transgene ekspresione kasete. Prva ekspresiona kaseta sadrži molekul DNK promotora aktina 1 pirinča{ Orizae sativa)operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence EPSPS hloroplastaArabidopsis- a,operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enoi-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), izolovanu izAgrobacterium tumefacienssp soj CP4, operativno vezanu za DNK molekul koji se sastoji od transkripcionog terminatora nopalin sintaze. Druga transgena ekspresiona kaseta sadrži 35S promotor DNK molekula mozaičnog virusa karfijola (CaMV) koji sadrži tandem duplikaciju poboljšanog regiona, operativno vezan za molekul DNK koji sadrži Hsp70 intronZea mays,operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence hloroplastaArabidopsis- aEPSPS, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), izolovanu izAgrobacterium tumefacienssp. soj CP4 operativno vezanu za DNK molekul koji se satstoji od transkripcionog terminatora nopalin sintaze.
Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđeni su preparati i metodi za detekciju prisustva transgen/genom regiona insercije iz nove biljke kukuruza označne kao PV-ZMGT32(nk603). Obezbeđeni su DNK molekuli koji sadrže najmanje jednu spajajuću sekvencu PV-ZMGT32(nk603) selekcionisanu iz grupe koja se sastoji od
5TGTAGAGGCCCACGCGTGGT 3' (SEQ ID br.:9), 5TACCACGCGACACACTTC 3'(SEQ ID
br.:10), i 5TGCTGTTCTGCTGACTTT 3' (SEQ ID br.:11) i njihove komplemente; gde je sekvenca za vezivanje obuhvata vezu između heterotogih DNK inseriranih u genom DNK iz ćelija kukuruza koje vise (flanking) oko mesta insercije i dijagnostičke su za transformant. Biljke kukuruza i seme koje sadrže te molekule su aspekt ovog pronalaska.
Novi DNK molekul 5'ACCAAGCTTTTATAATAG 3" (SEQ ID br:12) i njegov komplement, gde je taj DNK molekul nov u PV-ZMGT32(nk603) i njegovom potomstvu. Predmet ovog pronalaska je biljka kukuruza i seme koje sadrži taj molekul.
Prema drugom aspektu pronalaska, molekuli DNK koji sadrže nove transgeni/genom insert regione, SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8, i koji su homologi ili komplementarni SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 su aspekt ovog pronalaska.
Drugi aspekt pronalaska su molekuli DNK koji sadrže dovoljnu dužinu transgenog dela DNK sekvence SEQ ID br.:7 i sličnu dovoljnu dužinu 5' flanking DNK sekvence kukuruza od SEQ ID br.:7; ili sličnu dovoljnu dužinu transgenog dela DNK sekvence SEQ ID br.:8 l sličnu dovoljnu dužinu 3' DNK flanking transgene sekvence, gde su ti molekuli korisni kao DNK prajmeri u metodama amplifikacije DNK tako da obezbede DNK amplikon produkt posebno produkovan iz DNK PV-ZMGT32(nk603) i njegovo potomstvo. Aspekt pronalaska su prajmeri DNK homologi ili komplementarni u dužini sa SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8. Predmet pronalaska su amplikoni produkovani pomoću DNK prajmera koji su dijagnostički za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) i njegovo potomstvo.
Prema drugom aspektu pronalaska obezbeđeni su metodi za detekciju prisustva DNK koji odgovaraju kukuruznom transformantu PV-ZMGT32(nk603) u uzorku. Takvi metodi sadrže: (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK sa setom DNK prajmera, koji kada se upotrebe u reakciji amplifikacije nukleinskih kiselina sa genomskom DNK ekstrahovanom iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) produkuju amplikon koji je dijagnostički za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603); (b) izvođenje reakcije amplifikacije nukleinske kiseline, produkujući tako amplikon; i (c) detekcija amplikona. Par DNK molekula koji sadrži set DNK prajmera koji su homologi ili komplementarni SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 koji funkcioniše u reakciji amplifikacije nukleinskih kiselina da produkuje amplikon molekula DNK dijagnostičan za PV-ZMGT32(nk603). Još specifičnije, par DNK molekula koji sadrži set prajmera DNK, gde su molekuli DNK identifikovani kao SEQ ID br.:13 ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:14; ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:15; ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:16; ili njegovi komplementi. Amplikon koji sadrži molekule DNK SEQ ID br.:13 i SEQ ID br.:14. Amplikon koji sadrži molekule DNK SEQ ID br.:15 i SEQ ID br.:16. Amplikon produkovan gore opisanim metodom koji može hibridizovan" u oštrim ustavima do SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12.
Prema drugom aspektu pronalaska, metodi za detekciju prisustva molekula DNK u uzorku koji odgovaraju PV-ZMGT32(nk603) transformantu, takvi metodi sadrže: (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK ekstrakt iz kukuruza sa molekulom DNK probe koji hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa genomskom DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) i ne hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa kontrolnom DNK biljke kukuruza (b) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije i (c) detektovanje hibridizacije probe na DNK. Još preciznije, metod za detekciju prisustva u uzorku DNK molekula koji odgovara PV-ZMGT32(nk603) transformantu, takvih metoda koji se sastoje od (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza sa molekulom probe DNK koji se sastoji od SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12, gde pomenuti molekul probe DNK hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa genomskom DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) i ne hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa kontrolnom DNK biljke kukuruza; (b) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije i (c) detektovanje hibridizacije probe na DNK.
Prema još jednom aspektu pronalaska, obezbeđeni su metodi za produkovanje .biljke kukuruza koja toleriše primenu glifozata, koji sadrže sledeće korake: (a) polno ukrštanje prve parentalne linije kukuruza koja sadrži ekspresione kasete predmetnog pronalaska, koje donose tolerantnost na primenu glifozata, i drugu roditeljsku liniju kukuruza kojoj nedostaje tolerancija na glifozat, produkujući tako mnoštvo biljaka potomaka; i (b) selekcija biljaka potomaka koje tolerišu primenu glifozata. Takvi metodi mogu prema potrebi sadržati dalje korake povratnog ukrštanja biljaka potomaka do druge roditeljske linije kukuruza da se dobije prirodno-ukrštajuća biljka kukuruza koja toleriše primenu glifozata.
Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđen je metod za selekciju biljaka kukuruza predmetnog pronalaska tolerantnih u odnosu na glifozat i njihovog potomstva, koje sadrži ek-strakciju DNK iz uzoraka biljaka, kontaktiranje DNK sa marker molekulom nukleinske kiseline selekcionisanom iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12, ili njihovih komplemenata, detektujući hibridizaciju pomenutog markera molekula nukleinske kiseline na DNK, i obavljajući analizu ukrštanja uz pomoć markera za genetičko vezivanje karakteristika tolerancije na glifozat na marker molekul nukleinske kiseline.
Predmetni pronalazak obezbeđuje metode produkcije biljke kukuruza tolerantne na herbicid glifozat koji sadrže transformisanje ćelija kukuruza sa konstruktom DNK (pMON25496), selekciju ćelija kukuruza za toleranciju na tretman sa efektivnom dozom glifozata i rast ćelija kukuruza u fertilnu biljku kukuruza. Fertilna biljka kukuruza može se sama oprašiti ili ukrstiti sa odgovarajućim varijetetima kukuruza da se produkuje potomstvo tolerantno na glifozat. Pronalazak se dalje odnosi na kit za detekciju DNK koji sadrži najmanje jedan molekul DNK dovoljne dužine kontinuiranih nukleotiđa homologih ili komplementarnih sa SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 koji funkcionišu kao DNK prajmeri ili probe specifične za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) ili njegovo potomstvo.
Ovaj pronalazak dalje se odnosi na biljke i semena kukuruza( Zea mays)PV-ZMGT32(nk603) tolerantnog na glifozat koji ima ATGC prijava br. PTA-2478 i od njega dobijeno potomstvo. Biljka kukuruza ili njini delovi produkovani rastom biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) tolerantne na glifozat, poien i ovule biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603). Jedro vegetativnih ćelija, jedro ćelija polena i jedro jajne ćelije biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) i potomstvo dobijeno od nje. Produkt pronalaska je biljka kukuruza i seme PV-ZMGT32(nk603) iz koje prajmeri molekula DNK predmetnog pronalaska obezbeđuju specifični amplikon.
Gorepomenuti i drugi aspekti pronalaska postaće očigledniji na osnovu detaljnih opisa koji slede i pratećih slika.
KRATAK OPIS SLIKA
Slika 1. Mapa plazmida pMON25496
DETALJAN OPIS PREFERIRANIH OBLIKA
Ova prijava zaštićuje beneficije od U.S. privremene prijave br. 60/213,567, područje 06/22/00; U.S. privremene prijave br, 60/241,215, područje 10/13/00, i privremene prijave br. 60/240,014, područje 10/13/00. Sledeće definicije i metodi obezbeđeni su da bolje odrede predmetni pronalazak i da vode one sa prosečnim iskustvom u praksi predmetnog pronalaska. Ukoliko nije drugačije naznačeno, termini treba da se shvate prema konvencionalnoj upotrebi onih sa prosečnim iskustvom u odgovarajućoj praksi. Definicije uobičajenih termina u molekularnoj biologiji mogu se takođe naći u Rieger i sar.,Genetički rečnik: Klas& ni i molekularni,5 izdanje, Springer-Verlag: New York, 1991; i Levvin,Geni V,Oxford Universitv Press: New York, 1994. Nomenklatura za DNK baze korišćena je onako kako je utvrđena na 37 CFR § 1.822.
Onako kako se koristi ovde termin "kukuruz" značiZea maysili kukuruz i uključuje sve biljne varijetete koji se mogu ukrštati sa kukuruzom, uključujući i divlje vrste kukuruza.
Onako kako se ovde koristi termin "sadrži" znači "uključuje ali nije ograničen na".
"Glifozat" se odnosi na N-fosfonometilglicin i njegove soli, Glifozat je aktivni sastojak Roundup® herbicida (Monsanto Co.). Tretman sa "glfozat herbicidom" odnosi se na tretman sa Roundup®, Roundup UKra®, Roundup UltraMax® herbicidima ili bilo kojom drugom formulacijom herbicida koja sadrži glifozat. Selekcija stope primene za formulaciju glifozata koja čini biološki efektivnu dozu unutar veština prosečnog agronomskog tehničara.
Konstrukt DNK je agregat molekula DNK vezanih međusobno tako da obezbede jednu ili više ekspresionih kaseta. Konstrukt DNK je preferentno plazmid koji je u stanju da se sam replicira u bakterijskoj ćeliji i koji sadrži različita restrikciona mesta za enzime endonukleaze koja su korisna za uvođenje molekula DNK koji obezbeđuju funkcionalne genetičke elemente, tj. promotore, introne, lidere, kodirajuće sekvence, 3' regione terminacije, među drugima. Ekspresione kasete, smeštene unutar DNK konstrukta, sadrže neophodne genetičke elemente da obezbede transkripciju mesinđer RNK. Ekspresiona kaseta može biti dizajnirana da se eksprimira u prokariotskoj ili eukariotskoj ćeliji. Ekspresione kasete predmetnog pronalaska su dizajnirane da se eksprimiraju preferentno u biljnim ćelijama. Kombinacija ekspresionih kaseta kod transgenih biljaka može voditi neočekivanim fenotipovima. U predmetnom pronalasku, kombinacija kasete promotora aktina 1 pirinča i kasete CaMV 35S promotora obezbeđene u DNK konstruktu (pMON25496) je poboljšala toleranciju na herbicid glifozat kod tranzgene biljke kukuruza kada se uporedi sa samim pojedinačnim kasetama i komercijalnim standardnim GA21 koji sadrži tri kopije kasete promotora aktina 1 pirinča.
Transgeni "transformant" je produkovan transformacijom biljne ćelije sa heterolognim DNK konstruktom, uključujući ekspresionu kasetu nukleinske kiseline koja sadrži željene transgene od, regeneraciju populacije biljaka koja nastaje od insercije transgena u genom biljke, selekciju određene biljke okarakterisanu insercijom na lokaciju u genomu. Termin "transformant" odnosi se na originalni transformant i potomstvo transformanta koje uključuje heterotogu DNK. Termin "transformant" takođe se odnosi na potomstvo produkovano polnim ukrštanjem među transformantima i druge varijetete koji uključuju heterologu DNK. Čak i nakon ponovljenih povratnih ukrštanja sa povratnim roditeljem, inserirana DNK i flanking DNK iz transformisanog roditelja je prisutna u potomstvu ukrštanja na istoj hromozomskoj lokaciji. Termin "transformant" takođe se odnosi na DNK iz originalnog transformanta koji sadrži inseriranu DNK i flanking sekvence genoma u neposrednom susedstvu u odnosu na inseriranu DNK za koji se očekuje da će biti transformisan u potomstvu koje primi inseriranu DNK uključujući željene transgene kao rezultat polnih ukrštanja jedne roditeljske linije koja uključuje inseriranu DNK (npr., originalni transformant i potomstvo koje rezultira iz samooptođenja) i roditeljska linija koja ne sadrži inseriranu DNK. Biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) tolerantne na glifozat mogu se ukrštati polnim putem ukrštanjem prve roditeljeske biljke kukuruza koja se sastoji od biljke kukuruza koja je porasla od transgene biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) koja ima ATCC prijava br. PTA-2478 i njenog potomstva dobijenog transformacijom sa ekspresionim kasetama predmetnog pronalaska koje toleriše primenu herbicida glifozata, i druge roditeljske biljke kukuruza kojoj nedostaje tolerancija na herbicid glifozat, produkujući tako mnoštvo prvog potomstva biljaka; i selekclonišući zatim biljku iz prvog potomstva koja je tolerantna na primenu herbicida glifozata; samooplodeći prvo potomstvo biljke, produkujući tako mnoštvo biljaka drugog potomstva; i zatim sefekctonišući iz potomstva druge generacije biljke tolerantne na herbicid glifozat. Ti koraci mogu dalje uključivati povratno ukrštanje biljke tolerantne na glifozat iz prvog potomstva ili drugog potomstva tolerantnog na glifozat sa drugom roditeljskom biljkom kukuruza ili trećom roditeljskom biljkom kukuruza, produkujući tako biljku kukuruza koja toleriše primenu herbicida glifozata.
Takođe se mora shvatiti da se dve različite transgene biljke mogu takođe ukrstiti tako da prođukuju potomstvo koje sadrži dva dodana, egzogena^geria koji se nezavisno razdvajaju. Samooplodnja odgovarajućeg potomstva može prodtiRovati biljke koje su homozigotne za oba dodana, egzogena gena. Povratno ukrštanje sa roditeljskom biljkom i spoljašnje ukrštanje sa ne-transgenim biljkama je takođe razmotreno, kao i vegetativna propagacija. Opis drugih metoda ukrštanja koja se često koriste za različite karakteristike i useve mogu se naći i jednoj od nekoliko referenci, npr., Fehr, uMetodi uk& tanja za reazvite kultivara,Wilcox, J izd., American Societv of Agronomv, Madison Wl (1987).
"Proba" je izolovana nukleinska kiselina na koju je pričvršćen konvencionalni de-tektabilni označeni ili reporter molekul, npr., radioaktivni izotop, ligand, agens hemituminesce-ncije ili enzim. Takva proba je komplementarna lancu ciljne nukleinske kiseline, u slučaju predmetnog pronalaska, lancu genomske DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) bilo iz biljke kukuruza ili iz uzorka koji uključuje DNK iz transformanta. Probe prema predmetnom pronalasku uključuju ne samo dezoksiribonukleinsku ili ribonukleinsku kiselinu nego takođe i poliamide i druge probne materijale koji se specifično vezuju za ciljne sekvence DNK i koji se mogu upotrebiti da se detektuje prisustvo ciljne sekvence DNK.
"Prajmeri" su izolovane nukleinske kiseline koje su vezane za komplementarni ciljni lanac DNK putem hibridizacije nukleinske kiseline da se formira hibrida između prajmera i ciljnog lanca DNK, koji se produžuje duž ciljnog lanca DNK pomoću polimeraze, npr., DNK polimeraze. Sparivanje prajmera predmetnog pronalaska odnosi se na njihovu upotrebu za ampltfikaciju ciljnih sekvenci nukleinskih kiselina, npr., putem polimerazne lančane reakcije (PCR) ili drugim konvencionalnim metodama amplifikacije nukleinskih kiselina.
Probe i prajmeri su dovoljne nukleotidne dužine da se vezuju za ciljne sekvence DNK specifično u uslovima hibridizacije ili uslovima reakcije određenim operatorom. Ta dužina može biti bilo koje dužine koja je dovoljna da bude korisna u izabranom metodu detekcije. Generalno, koristi se 11 nukleotida dužine ili više, preferentno 18 nukleotiđa ili više, još preferentnije 24 nukleotida ili više i najpreferentnije 30 nukleotida ili više. Takve probe i prajmeri hibridizuju specifično sa ciljnom sekvencom pod jako oštrim uslovima hibridizacije. Preferentno, probe i prajmeri prema predmetnom pronalasku imaju kompletnu sličnost sekvenci DNK kontinuiranih nukleotida sa ciljnom segvencm, i ako probe koje se razlikuju od ciljne sekvence DNK i koje zadržavaju svoju sposobnost da hibridizuju sa ciljnim DNK sekvencama mogu biti dizajnirane konvencionalnim metodama.
Metodi za pripremanje i upotrebu proba i prajmera opisani su, na primer, uMolekularno kbniranje: Laboratorijski pirručnik,drugo isd., vol. 1-3 izd. Sambrook i sar., Cold Spring Harbor Laboratorv Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (pomenuti, "Sambrook i sar., 1989");Tekući protokoli u molekularnoj biologiji, Szd."Ausubel i sar.", Greene Publishing and Willey-lnte-rscience, New York, 1992 (sa periodičnim dopunama)(pomenuti, Ausubel i sar., 1992); i Innis i sar,,PCR protokoli: VodA ' za metode i primene,Academic Press: San Diego, 1990. Parovi PCR-prajmera mogu se dobiti od poznatih sekvenci, na primer, koristeći kompjuterske pro-grame namenjene za tu svrhu kao što je Primer (verzija 0.5, © 1991, VVhitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA).
Prajmeri I probe bazirani na flanking DNK i insert sekvencama obelodanjeni ovde mogu se upotrebiti da se potvrde (i ako je neophodno, koriguju) otkrivene sekvence konvencionalnim metodama, npr., putem re-kloniranja i sekvenciranja takvih sekvenci.
Probe i prajmeri nukleinskih kiselina predmetnog pronalaska hibridizuju pod oštrim uslovima na ciljne sekvence DNK. Bik) koja konvencionalna hibridizacija nukleinskih kiselina ili metod amplifikacije mogu biti upotrebljeni da se u uzorku identifikuje prisustvo DNK iz transgenog transformanta. Molekuli nukleinskih kiselina ili njihovi fragmenti su sposobni da specifično hibridizuju sa drugim molekulima nukleinskih kiselina pod određenim uslovima. Onako kako su korišćeni ovde, molekuli nukleinskih kiselina rečeno je da su sposobni da specifično hibridizuju jedan sa drugim ako su dva molekula sposobna da formiraju anti-paralelnu, dvolančanu strukturu nukleinske kiseline. Za molekul nukleinske kiseline je rečeno da je "komplement" drugog molekula nukleinske kiseline ako oni pokazuju kopletnu komplementarnost. Onako kako se koristi ovde, za molekule je rečeno da pokazuju "kompletnu komplementarnost" kada je svaki nukieotid jednog molekula komplementaran nukleotidu drugog molekula. Za dva molekula je rečeno da su "minimalno komplementarni" ako mogu hibridizovatj jedan sa drugim sa dovoljnom stabilnosti koja im omogućuje da ostanu pričvršćeni jedan uz drugi najmanje konvencionalno "uslovi niske-strogosti". Slično, za molekule je rečeno da su "komplementarni" ako hibridizuju jedan sa drugim sa dovoljnom stabilnošću koja dozvoljava da ostanu vezani jedan sa drugim pod konvencionalnom uslovima "visoke-strogostiu". Konvencionalni uslovi strogosti opisani su od strane Sambrook i sar., 1989, i Havmes i sar., u:Hibridizacija nukleinskih kiselina, praktičan pristup,IRL Press, Washington, DC (1985). Prema tome, odstupanja od kompletne komplementarnosti su dopustljiva, sve dok takva odstupanja ne onemogućuju kompletno kapacitet molekula da formiraju dvolančane strukture. Ako nukleinska kiselina treba da posluži kao prajmer Ili proba ona mora da bude dovoljno komplementarna u sekvencama da bi bila sposobna da formira dvolančanu strukturu pri upotrebljenim posebnim koncentracijama rastvarača i soli.
Onako kako se ovde koristi, gotovo potpuno homologe sekvence čine molekul nukleinske kiseline koji će specifično hibridizovati sa komplementom molekula nukleinske kiseline sa kojim je bio upoređen pod uslovima visoke strogosti. Odgovarajući uslovi strogosti koji potpo-mažu hibridizaciju DNK, na primer, 6.0 x natrijum hlorid/natrijum citrat (SSC) na oko 45 oC, praćeno ispiranjem sa 2.0 x SSC na 50 oC, su poznati onima sa iskustvom u praksi ili se mogu naći uTekući protokoli u molekularnoj biologiji,John Wiley & Sons, NY. (1989), 6.3.1-6.3.6. Na primer, koncentracija soli u koraku ispiranja može biti izabrana od niskih uslova strogosti od oko 2.0 x SSC na 50 oC do visokih uslova strogosti od oko 0.2 x SSC na 50 oC. U dodatku, temperatura u koraku ispiranja može biti povećana od uslova niske oštrine na sobnoj temperaturi od oko 22 oC, do uslova visoke oštrine na oko 65 oC. Obe temperature l soli mogu biti varirane, ili bilo temperatura ili koncentracija soli mogu biti držane konstantnim, dok se druga varijabla menja. U preferiranom obliku, nukleinska kiselina predmetnog pronalaska će specifično hibridizovati sa jednim ili više molekula nukleinskih kiselina postavljenih u SEQ ID br: 9,10,11 i 12 ili njihovim komplementima ili fragmentima bilo kojeg pod umereno oštrim uslovima, na primer na oko 2.0 x SSC i oko 65 oC. U posebno preferiranom obliku, nukleinska kiselina predmetnog pronalaska će specifično hibridizovati sa jednim ili više molekula nukleinske kiseline postavljenih u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim komplementima ili fragmentima pod uslovima visoke oštrine. U jednom aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska ima sekvence nukleinske kiseline postavljene u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim fragmentima ili komplementima. U drugom aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska deli između 80% i 100% iB 90% i 100% identičnosti sekvenci sa sekvencama nukleinskih kiselina postavljenim u u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim komplementima ili fragmentima. U sledećem aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska deli između 95% i 100% identičnosti sekvenci sa sekvencama postavljenim u SEQ ID br:9 do SEQ ID br;12 ili njihovom komplementu ili fragmentima. SEQ ID br.*9 do SEQ ID br:12 mogu biti upotrebljeni kao markeri u metodima ukrštanja biljaka da se identifikuje potomstvo genetičkih ukrštanja slično metodama opisanim za analizu jednostavnih sekvenci markera repetitivne DNK, u" DNK markeri: Protokoli, primena i opšti pregled" :(1997) 173-185, Cregan i sar. izd., Wiley-Liss NY; koji su svi ovde inkorporirani u celini putem referenci. Hibridizacija probe sa ciljnim molekulom DNK može biti detektovana bilo kojim od metoda poznatim onima sa iskustvom u praksi, koji uključuju, ali nisu ograničeni samo na njih, fluorescentne tagove, radioaktivne tagove, tagove bazirane na antitelima i hemiluminescentne tagove. ;U pogledu amplifikacije ciljnih sekvenci nukleinskih kiselina (npr. PCR) upotreba određenog amplffikacionog para prajmera, "uslovi strogoće" su uslovi koji dozvoljavaju prajmeru da hibridizuje samo sa ciljnom sekvencom nukleinske kiseline, za koju bi se prajmer preferentno vezao da produkuje jedinstveni amplifikacioni produkt, amplikon, u reakciji termalne amplifikacije DNA, s obzirom da Ima odgovarajuće sekvence divljeg tipa (ili njihov komplement). ;Termin "specifični za (target sekvencu)" ukazuje da proba ili prajmer hibridizuju pod oštrim uslovima hibridizacije samo sa ciljnom sekvencom u uzorku koji sadrži ciljnu sekvencu. ;Onako kako se ovde koristi "amplifikovana DNK" ili "amplikon" odnosi se na produkt amplifikacije nukleinske kiseline ciljne sekvence nukleinske kiseline koja je deo šablona nukleinske kiseline. Na primer, da se odredi da li bijka kukuruz nastala putem polnog ukrštanja sadrži genomsku DNK transgenog transformanta iz biljke kukuruza predmetnog pronalaska, uzorak DNK ekstrahovan iz tkiva biljke kukuruza može se podvrgnuti metodu amplifikacije nukleinske kiseline koristeći par DNK prajmera koji uključuje prvi prajmer dobijen iz flanking sekvenci u genomu biljke iz susedstva mesta insercije unesene heterologe DNK, i drugi prajmer dobijen iz insertovane hetrologe DNK, da se produkuje amplikon koji je dijagnostički za prisustvo DNK transformanta. Amplikon je takođe dijagnostički za transformant na osnovu dužine i sekvenci. Amlikon može imati raspon dužine od kombinovane dužine para prajmera plus jedan par nukleotidnih baza, preferentno plus oko pedeset nukleotidnih baznih parova, još preferentnije plus oko sto pedeset nukleotidnih baznih parova, i čak još preferentnije Četristo pedeset nukleotidnih baznih parova. Alternativno, par prajmera može biti izveden od flanking sekvence na obe strane inserirane DNK tako da produkuje amplikon koji uključuje celu unesenu nukleotidnu sekvencu (npr., Mtu1 fragment DNK od pMON25496 ekspresroni konstrukt, slika 1, približno 6706 nukleotidnih baznih parova). Član para prajmera dobijen od sekvenci biljnog genoma može biti lociran na nastojanju od inserirane DNK sekvence, ta distanca može biti u rasponu od jednog nukleotidnog baznog para sve do granica ampiifikacipne reakcije, ili oko dvadeset hiljada nukleotidnih baznih parova. Upotreba termina "ampliko" specifično isključuje prajmeme đimere koji se mogu formirati u DNK reakcijom termalne amplifikacije. ;Amplifikacija nukleinske kiseline može biti ostvarena bilo kojim od različitih metoda amplifikacije nukleinskih kiselina poznatim u praksi, uključujući lančanu reakciju polimeraze (PCR). Raznovrsni amplifikacioni metodi poznati su u praksi i opisani su,inter alia,u U.S. patentima br. 4,683,195 i 4,683,202 iPCR protokoli: Vodč za metode i primenu,izd., Innis i sar., Academic Press, San Diego, 1990. PCR amplifikacioni metodi razvijeni su da se amplifi-čira genomska DNK sve do 22 kb i sve do 42 kb DNK bakteriofaga (Cheng i sar., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:5695-5699, 1994) Ti metodi, kao i drugi metodi poznati u praksi amplifikacije DNK, mogu se upotrebiti u praksi predmetnog pronalaska. Sekvence heterologog inserta DNK ili flanking sekvence DNK Iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) mogu se verifikovati (i korigovatj ako je to neophodno) putem amplifikacije takvih sekvenci iz DNK ekstrahovane iz ATCC deponovane prijave br. PTA-2478 semena ili biljaka koristeći DNK prajmere izvedene iz sekvenci obezbeđenih ovde praćeno standardnim DNK sekvenciranjem PCR amplikona ili klonirane DNK. ;Amplikon produkovan ovim metodama može se detektovati mnoštvom tehnika. Jedan takam metod je Genetic Bit Analvsis (Nikiforov, i sar., Nucieic Acid Res. 22:4167-4175,1994) gde je projektovan DNK oligonukleotid koji prekriva I susedne flanking genomske sekvence i insertovane DNK sekvence. Oligonukleotid je imobiliziran u bunarčićima ploče sa mikrobunarčićima sledeci PCR region od interesa (koristeći jedan prajmer u insertovanoj sekvenci i jedan u susednim flanking genomskim sekvencama), jednolančani PCR produkt može se hibridizovati na imobilizovani oligonukleoti I služiti kao šablon za ekstenziju pojedinačnih baza koristeći reakciju DNK polimeraze i obeležene ddNTP-ove specifične za sledeću očekivanu bazu. Očitavanje može biti fluorescentno ili bazirano na ELISA. Signal indicira prisustvo insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne baze. ;Drugi metod je tehnika pirosekvenciranja kako ju je opisao Winge (Innov. Pharma. Tech. 00:18-24, 2000). U tom metodu dizajniran je oligonukleotid koji preklapa susednu genomsku DNK i vezu insert DNK. Oligonukleotid se hibridizuje na jednolančani PCR produkt regiona od Interesa (jedan prajmer u insertovanoj sekvenci i jedan u flanking genomskoj sekvenci) i inkubira u prisustvu DNK polimeraze, ATP, sulfurilaze, luciferaze, apiraze, adenozin 5" fosfosulfata i luciferina. DNTP-ovi su dodani individualno i rezultati inkorporacije u svetlosnom signalu koji je meren. Svetlosni signal ukazuje na prisustvo transgene insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne ili višestruke baze. ;Fluorescentna polarizacija kako je opisana od strane Chen i sar., (Genome Res. 9:492-498, 1999) je metod koji se može upotrebiti za detekciju amplikona predmetnog pronalaska. Koristeći taj metod dizajniran je oligonukleotid koji preklapa genomski flanking i insertovanl DNK spoj. Oligonukleotid je hibridizovan na jednolančani PCR produkt regiona od interesa (jedan prajmer u insertovanoj DNK i jedan u flanking genomskoj DNK sekvenci) i inkubiran u prisustvu DNK polimeraze fluorescentno obeleženog ddNTP. Ekstenzija pojedinačnih baza rezultirala je inkorporacijom ddNTP. Inkorporacija se može meriti kao pramena u polarizaciji koristeći ftuorometar. Pramena u polarizaciji ukazuje na prisustvo transgene Insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne baze. ;Taqman® (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA) je opisan kao metod za detekciju i kvantifikovanje prisustva sekvenci DNK 1 potpuno je razumljiv na osnovu uputstva obezbeđenog od strane proizvođača. Ukratko, dizajnirana je FRET oligonukleotidna proba koja preklapa genomski flanking i spoj insert DNK. FRET proba i PCR prajmeri (jedan prajmer u insertovanoj DNK sekvenci i jedan u flanking genomskoj sekvenci) su ciklizovani u prisustvu termostabilne polimeraze i dNTP-ova. Hibridizacija FRET probe rezultira cepanjem i oslobađanjem fluorescentne grupe udaljene od ugašene grupe FRET probe. Fluorescentni signal ukazuje na prisustvo flankingAransgen insert sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji i hibridizacijl'. ;Molecular Beacons opisani su za detekciju sekvenci onako kako je to opisano u Tvangi i sar. (Nature Biotech. 14:303-308,1996). Ukratko, dizajnirana je FRET oligonukleotidna proba koja preklapa genomski flanking i spoj insert DNK. Jedinstvena struktura FRET probe rezultira time što ona sadrži sekundarnu strukturu koja drži fluorescentnu i ugašenu grupu u neposrednoj blizini. FRET proba i PCR prajmeri (jedan prajmer u insertovanoj DNK sekvenci I jedan u flanking genomskoj sekvenci) su ciklizovani u prisustvu termostabilne polimeraze i dNTPova. Nakon uspešne PCR amplifikacije, hibridizacija FRET probe na ciljnu sekvencu rezultira uklanjanjem sekundarne strukture probe i prostornim razdvajanjem fluorescentne i ugašene grupe. Nastaje fluorescentni signal. Fluorescentni signal ukazuje na prisustvo flanking/transgen insert sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji i hibridizacijl. ;Sledeći prlmeri uključeni su da se pokažu primeri određenih preferiranih oblika pronalaska. Oni sa iskustvom u praksi treba da shvate da tehnike obelodanjene u primerima koji slede predstavljaju pristupe za koje su pronalazači otkrili da funkcionišu dobro u praksi pronalaska, pa se, prema tome, može smatrati da Čine primere preferiranih načina za njegovu upotrebu. Međutim, oni sa iskustvom u praksi treba da u svetlu predmetnog otkrića, shvate da se mogu napraviti mnoge promene u specifičnim oblicima koji su obelodanjeni a da se još uvek dobiju isti ili slični rezultati bez odstupanja od duha i delokruga pronalaska. ;PRIMERI ;P RIMER 1 ;PV-ZMGT32(nk603) (odsad ovde označen kao nk603) transgeni kukuruzni transformant dobijen bombardovanjem embriona kukuruza mikroprojektjlima (Songstad i sar., In Vrtro Cell Plant 32:179-183, 1996) koristeći linearni Mlu I DNK fragment;đ6byen<*>^pMON25496 (slika 1). Taj DNK fragment sadrži dve transgene ekspresione kasete koje žafećTno daju biljci kukuruza tolerantnost na glifozat. Prva kaseta je sastavljena od promotora 1 aktina pirinča i introna (P-Os.Act1 i l-Os.Act1, U.S. patent br. 5,641,876), operativno vezan za EPSPS tranzitni peptidhloroplasta Arabidopsis(TS-At.EPSPS:CTP2, Klee i sar., Mol. Gen. Genet. 210:47-442,1987), operativno vezan za glifozat tolerantni 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS) izAgrobacterium sp.soj CP4 (AGRTU.arc\A:CP4, U.S. patent br. 5,633,435) i operativno vezan za transkripcioni terminator nopalin sintaze (T-AGRTU.nos, Fralev i sar. Proc. Natl. Acad. SCI USA 80:4803-4807, 1983). Druga transgena ekspresiona kaseta sastoji se od 35S promotora mozaičnog virusa karfiola koji sadrži tandem duplikaciju regiona pojačavanja (P-CaMV.35S, Kay i sar., Science 236:1299-1302, 1987; U.S. patent br. 5,164,316), operativno vezan za Hsp70 intronZea mays(l-Zm.Hsp70, U.S. patent br. 5,362,865), operativno vezan za EPSPS tranzitni peptidhloroplasta Arabidopsis(TS-At.EPSPS:CTP2, Klee i sar., Mol. Gen. Genet. 210:47-442, 1987), operativno vezan za glifozat tolerantni 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS) izAgrobacterium sp.soj CP4 (AGRTU.aor>A:CP4, U.S. patent br. 5,633,435) i operativno vezan za transkripcioni terminator nopalin sintaze (T-AGRTU.nos, Fraley i sar. Proc. Natl. Acad. SCI USA 80:4803-4807,1983). Nakon bombardovarp, transgeni kalusi glifozat-tolerantni selekcio-nisani su na medijumu koji je sadržao 3 mM glifozata i biljke su postupno regenerisane. Pro-dukovane su trista četiri biljke od 91 nezavisnog transgenog transformanta, nk603 je selekcionisan Iz te populacije na osnovu superiorne kombinacije karakteristika, uključujući tolerantnost na glifozat, agronomske karakteristike i pojedinačnu transgenu inserciju. Procena nk603 transformanta i njegovog izvedenog potomstva u staklenoj baštj i polju ukazala je da ta transgena insercija donosi toleranciju koja prevazilazi komercijalne karakteristike za potpunu vegetativnu i reproduktivnu toleranciju na 340 g glifozata/jutru (840 g glifozata/hektar; 32 oz Roundup Ultra/jutru) kada se primene na V4 i V8 stupnjevima listanja.
PRIMEFL2
Kukuruzni transformant nk603 tolerantan na glifozat upoređen je sa sadašnjim komercijalnim standardnim, GA21 (U.S. patent br. 6,040,497), za tolerantnost na vegetativnu štetu glifozata I efekte na prinos. GA21 transformant (SCP/GMC7232-Final, European Commissfon Health & Consumer Protection Directorate-General). Transgena kaseta GA21 sastoji se od promotora aktina 1 pirinča i na intron vezanog za ribulozo 1,5-bisfosfat karboksllazu tranzitni peptid hloroplasta vezan za modifikovan kukuruzni glifozat otporan EPSPS i reglon terminacije transkripcije 3' nopalin sintaze. Biljke nk603 i GA21 posađene su u redovima u ponovljenim površinama na polju. Tretmani su bili 1) nesprejovane, 2) sprejovane u srazmeri 64 unce/jutru Roundup Ultra® na V4 lisnom stupnju i ponovo sa 64 unce/jutru Roundup Ultra® na V8 lisnom stupnju, 3) sprejovane u srazmeri 96 unoeVjutru Roundup Ultra® na V4 lisnom stupnju i ponovo sa 96 unce/jutru Roundup Ultra® na V8 lisnom stupnju. Vegetativna tolerancija merena je kao procenat vegetativne štete determlnisane kao količina malformacija lista zapažena 10 dana nakon tretmana herbickJom na V8 lisnom stupnju. Prinos sa svake površine meren je u bušelima^utru i određen je procenat redukcije u prinosima određenim za svaki tretman herbicidom relativno u odnosu na nesprejovani tretman. Rezultati prikazani u tabeli 1 ilustruju da nk603 pokazuje niže procente nivoa vegetativne štete nego GA21 biljke i opaženi procenat redukcije prinosa je takođe manji za nk603 transformant. Nizak opseg vegetativne štete zapažen je na nesprejovanim površinama, ovo zapažanje može se pripisati drugim sređinskim faktorima sem izlaganja herbicidu glifozatu. Dupla eksperesiona kaseta pMON25496 u nk603 upoređena je sa vegetativnom štetom i stepenom fertilnosti 3 nezavisna kukuruzna transformanta dobijena od samo CaMV.35S promotorom vođene ekspresije gena tolerancije na glifozat (AGRTU.aarA:CP4). Zapaženo je da je dvostruka ekspresiona kaseta donela viši nivo vegetativne tolerancije i reproduktivne tolerancije nego tri nezavisna kukuruzna transformanta (ev 1, ev 2 i ev 3) koji su sadržali samo ekspresionu kasetu gde je ekspresija gena tolerancije na glifozat vođena CaMV.35S promotorom. Viši nivo vegetativne tolerancije na štetu od herbicida glifozata zapažen je kod nk603 plus 3 dodatna kukuruzna transformanta izvedena od pMON25496 kada se upoređe sa prosečnom štetom 6 kukuruznih transformanata izvedenih od konstrukta gde je ekspresija gena tolerancije na glifozat vođena samo promotorom aktina pirinča i intronom (P-Os.Act1/l-Os.Act1). Biljke transformisane sa dvostrukom ekspresionom kasetom imale su viši nivo glifozatne tolerancije na vegetativnu štetu i fertilitet od biljaka izvedenih transformacijom sa jednom ekspresionom kasetom. To je rezultiralo u poboljšanoj rezistenciji na gubitke prinosa usled primene herbicida glifozata. Konstrukt pMON25496 obezbeđuje biljci dve ekspresione kasete na jednoj lokaciji u nk603 koja donosi viši nivo tolerancije na glifozat od trostruke tandem insercije koja se odigrava kod komercijalnog standardnog, GA21.
EBJMER 3
Odgovarajući flanking molekul DNK iz nk603 kloniran je koristeći vezivne adaptere i ugnježdeni PCR kao što je opisano u Genome VValker™ kit (katalog # K1807-1, CIoneTech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). Prvo je genomska DNK iz nk603 transformanta prečišćena putem CTAB metoda prečišćavanja (Rogers i sar., Plant Mol. Biol. 5:69-76, 1985). Genomske DNK biblioteke za amplifikaciju pripremljene su prema uputstvima proizvođača (Genome VValker™ , done Tech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). U odvojenim reakcijama, genomska DNK digestovana je tokom noći na 37 oC sa sledećim blunt-end restrikcionim endonukleazama: EcoRV, Seal,Dral, Pvu\\ I Sful(Clone Tech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). Reakcione mešavine su ekstrahovane sa fenol:hloroformom, DNK je oborena dodavanjem etanola vodenoj fazi, iztaložena centrifugiranjem i zatim resuspendovana u Tris-EDTA puferu (10 mM Tris-HCI, pH 8.0,1 mM EDTA). Prečišćeni blunt-ended genomski DNK fragmenti povezani su sa Genome VValker™ adapterima prema protokolu proizvođača. Nakon povezivanja, svaka reakcija je treti-rana toplotom (70 oC tokom 5 minuta) da se prekine reakcija i zatim razblažena 10 puta u Tris-EDTA puferu. JednaCd svake dotične veze je zatim amplifikovana u 50 u,l reakciji koja je uključivala 1 u,l dotične adapter-vezane biblioteke, 1 uJ od 10 U.M Genome VValker™ adapter prajmera AP1 (5'GTATATCGACTCACTATAGGGC 3', SEQ ID br:1), 1 uJ od 10U.M nk603 transgen-specifičnog oligonukleotida.
{5' TGACGTATCAAAGTACCGACAAAAACATCC 3' SEQ ID br:2), 1 ui od 10 U.M de-zoksiribonukleotida, 2.5 uJ dlmetll sulfokslda, 5 ui od10 X PCR pufera koji sadrži MgCI2, 0.5 u,l (2.5 jedinice) Amplitaq termostabilneDNK polimeraze (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA), i H20 do 50 uJ. Reakcija je obavljena u termocikleru koristeći proračunatu kontrolu temperature i sledeće ciklične uslove: 1 krug od 95 oC tokom 9 minuta, 7 krugova od 94 oC tokom 2 sekunde, 70 oC tokom 3 minuta; 1 krug od 65 oC tokom 4 minuta. 1 uJ od svake primame reakcije razblažen je 50-puta sa vodom i amplifikovan u sekundarnoj reakciji (1 ui dotične razblažene primame reakcije, 1 jal od 10 u,M Genome VValker™ ugnježdenog prajmera adaptera AP2 (5' ACTATAGGGCACGCGTGGT 3', SEQ ID br:3, dobijen od proizvodađa), 1 ui od 10 uM nk603 transgen-specifičnog ugnježdenog oligonukleotida.
-i
(5' CTTTGTTTTATTTTGGACTATCCCGACTC 3'SEQ ID br:4), 1 \ x\ od 10 uM dezoksiri-bonukleotida, 2.5 u,l dimetil sulfoksida, 5 uJ od 10 X PCR pufera koji sadrži MgCI2, 0.5 u,l (2.5 jedinice) Amplitaq termostabilneDNK polimeraze (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA), i H20 do 50 u.l koristeći sledeće ciklične uslove: 1 krug od 95 oC tokom 9 minuta, 5 krugova od 94 oC tokom 2 sekunde, 70 oC tokom 3 minuta; 24 krug od 94 oC tokom 2 sekunde, 1 krug 65 oC tokom 3 minuta, 1 krug 65 oC tokom 4 minuta.
PCR produkti, koji su predstavljali 5' regione koji spajaju kratk rastojanja između nk603 transgene insercije i susedne flanking DNK kukuruza, prečišćeni su na agaroznom gelu elektroforezom praćenom prečišćavanjem iz agaroznog matriksa koristeći QIAquick Gel Extraction Kit (kataloški br. 28704, Oiagen Inc., Valencia, CA) i direktno kloniranje u pGEM-T Easy vektor (kataloški br. A1360, Promega, Madison, Wl). Identitet kloniranih PCR produkata i odnos prema fragmentu Mlu I od pMON25496 potvrđen je analizom sekvenci DNK (ABI Prism™377, PE Biosvstems, Forster City, CA i DINASTAR softverom za analizu sekvenci, DINASTAR Inc., Madison, Wl).
Slično tome, nk603 3' flanking DNK sekvenca kukuruza amplifikovana je i klonirana ko-risteći za gene ugnježdene specifične prajmere, kao što je SEQU ID br:5.
(5' GCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGG 3') koji se vezuje za T-AGRTU.nos terminator transkripcije. Dva T-AGRTU.nos terminatori transkripcije prisutni su u nk603 trans-gen/genomska insercija, jedan interni u konstruktu i jedan na 3' kraju konstrukta u susedstvu kukuruzne genomske DNK. PCR produkti produkovani u toj reakciji su sekvencionirani i DNK sekvenca koja premošćava vezu između transgena i flanking sekvence je razdvojena od produkta unutrašnjeg T-AGRTU.nos poređenjem sa poznatim genetičkim sekvencama elementa pMON25496 konstrukta kako je to prethodno opisano.
Kukuruzne DNK flanking sekvence sa obe strane transgene insercije određene su za nk603 sekvenciranjem amplifikacionog produkta dobijenog od GenomeVValker™ poravnanjem sa poznatim transgenim sekvencama. Na 5' kraju transgene insercije, sekvenca segmenta od 498 bp oko insercione veze određena je (SEG ID br:7). To se sastojalo od 304 bazna para (bp) flanking genomskih DNK sekvenci kukuruza (nukleotidi 1-304 od SEQ ID br:7), 45 bp od pMON25496 sekvence DNK konstrukta (nukleotidi 305-349 od SEQ ID br:7) i 149 bp DNK sekvenci od 5' kraja od P-Os.Act1 (nukleotidi 350-498 od SEQ ID br:7).
DNK sekvenca je određena za 1183 bp segment oko 3' insercione veze (SEQ ID br:8), koja počinje sa 164 bp od T-AGRTU.nos terminatorom transkripcije (nukleotidi 1-164 od SEQ ID br:8), 217 bp od pMON25496 konstrukta DNK sekvence (nukleotidi 165-381 od SEQ ID br:8), 305 bp plastidnih gena kukuruza,rps 11irpoA(delimični segmenti svakog gena koji odgovaraju bazama 63-363 prijave Banke gena X07810, koji odgovaraju bazama 382-686 od SEQ ID br:8), i preostale DNK sekvence koje se sastoje od genomskih flanking DNK sekvenci kukuruza sa mesta integracije (koje odgovaraju bazama 687-1183 SEQ ID br:8).
DNK molekuli za spajanje, SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, i SEQ ID br:12 su novi DNK molekuli u nk603 i dijagnostički su za biljke kukuruza nk603 i njihovo potomstvo. DNK molekuli za spajanje, SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, i SEQ ID br:12 predstavljaju oko 9 nukleotida na svakoj strani mesta insercije transgenog fragmenta DNK i kukuruzne genomske DNK. SEQ ID br:9 je nađen na nukleotidnim pozicijama 295-314 SEQ ID br:7. Vezujuće sekvence SEQ ID br:10 i 11 locirane su respektivno na nukleotidnim pozicijama 373-390 i 678-695, SEQ ID br:8, predstavljajući molekul DNK za povezivanje sekvence DNK konstrukta sa DNK sekvencama plastida kukuruza (SEQ ID br:10) i sekvencama konstrukta sa sekvencama genomske DNK kukuruza (SEQ ID br:11). SEQ ID br:12 je lociran na nukleo-tidnoj poziciji 156-173 od SEQ ID br:8 i predstavlja novi DNK molekul u nk603 zato što je on fuzija T-AGRTU.nos sekvence terminacije sa invertovanim fragmentom promotorske sekvence DNK aktina pirinča.
PRIMER 4
Parovi prajmera DNK transformanta upotrebljeni su da se produkuje amplikon koji može poslužiti za dijagnozu nk603. Ti parovi prajmera transformanta uključuju, ali nisu ograničeni na SEQ ID br:13 i SEQ ID br:14 za 5' amplikon molekula DNK i SEQ ID br:15 i SEQ ID br:16 za 3' amplikon molekula DNK. U dodatku tim parovima perajmera aspekt predmetnog pronalaska je bilo koji par prajmera izveden od SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 koji kada se koristi u reakciji amplifikacije DNK produkuje DNK amplikon koji je dijagnostički za nk603. Uslovi amplifikacije za tu analizu ilustrovani su u tabeli 2 i tabeli 3 za 5' transgene insert/genomski region povezivanja. Isti metod je primenjen za amplifikaciju 3' amlikona molekula DNK prajmer molekula DNK SEQ ID br:15 i SEQ ID br:16, međutim, bilo kakva modifikacija tih metoda koja koristi molekule DNK ili njihove komplemente da se produkuje amplikon molekula DNK dijagno-stički za nk603 je u okviru uobičajene prakse. U dodatku, kontrolni par prajmera (SEQ ID br:17 1 18) za amplifikaciju endogenih gena kukuruza uključen je kao unutrašnji standard za uslove reakcije. Analiza nk603 uzorka DNK ekstrakta biljnog tkiva treba da uključi pozitivnu kontrolu DNK ekstrakta tkiva iz nk603, negativnu kontrolu DNK ekstrakta iz biljke kukuruza koja nije nk603 i negativnu kontrolu koja ne sadrži šablon DNK ekstrakta kukuruza. Dodatni DNK molekuli prajmera dovoljne dužine mogu se selekcionisati iz SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 od strane onih koji imaju dovoljno iskustva u praksi sa metodama amplifikacije DNK i uslovima optimizovanim za produkciju amplikona koji se mogu razlikovati od metoda prikazanih u tabeli 2 i tabeli 3, ali rezultirati amplikonom dijagnostičkim za nk603. Upotreba tih prajmer sekvenci sa modifikacijama u odnosu na metode iz tabela 2 i 3 su u delokrugu pronalaska. Aspekt ovog pronalaska je amplikon kojim je najmanje jedan DNK prajmer molekul dovoljne dužine izveden iz SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 koji je dijagnostički za nk603. Aspekt ovog pronalaska je amplikon kod kojeg je najmanje jedan DNK prajmer dovoljne dužine izveden od bilo kog od genetičkih elemenata od pMON25496 koji je dijagnostički za nk603. Ogled za amplikon nk603 može se izvesti korišćenjem Stratagene Robocvcler, MJ Engine, Perkin-EImer 9700, ili
Eppendorf Mastercvcler Građient thermocvcler kako je pokazano u tabeli 3, ili metodama i aparaturama poznatim onima sa iskustvom u praksi.
Tabela 3. Preporučeni PCR parametri za različite termociklere
Blago pomešaj i, ako je potrebno (nema toplog vrha na terrrtocikleru), dodaj 1-2 kapi mineralnog ulja na površinu svake reakcije. Produži sa PCR-om u Tratagene Robocvcler, MJ, Engine, Perkin-EImer 9700, ili Eppendorf Mastercvcler Građient termocikler koristeći sledeće parametre ciklusa.
Napomena: MJ, Engine ili Eppendorf Mastercvcler Građient termocikler mora raditi na proračunatom modusu. Pusti Perkin-EImer 9700 termocvcler sa maksimalnom brzinom obrtaja.
Prijava depozita, firme Monsanto Companv, semena kukuruznog transformanta P V-ZMGT32<nk603) gore opisanog urađena je u skladu sa Budlpeštanskim sporazumom kod American Type Cutture Collection (ATCC, 10801 Universitv Boulevard, Manassas, Va. 20110. Broj prijave ATCC je PTA-2478. Prijava depozita će biti čuvana u depozitorijumu u periodu od 30 godina, ili 5 godina nakon poslednjeg zahteva, ili za stvarno vreme trajanja patenta, šta god da je duže i bfće zamenjena prema potrebi tokom ovog perioda.
Poto su prikazani i opisani principi predmetnog pronalaska, treba da bude očigledno osobama sa iskustvom u ovoj oblasti da pronalazak može biti izmenjena u aranžmanima i detaljima bez odstupanja od takvih principa. Mi tražimo zaštitu za sve izmene koje su u duhu i obimu priloženih patentnih zahteva.
Sve publikacije i objavljeni patentni spisi citirani u ovoj specifikaciji su uključeni ovde putem referenci u istom obimu, kao što je svaka pojedinačna publikacija ili patentna prijava, specifično i individualno naznačena da bude uključena referencom.

Claims (8)

1. DNK molekul koji sadrži nukleotidne sekvence identifikovane kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8.
2. Par DNK molekula koji sadrži; prvi molekul DNK i drugi molekul DNK, gde su molekuli DNK dovoljne dužine, u odnosu na susedne nukleotideSEO. ID br:7 ili njegov komplement, da funkcionišu kao prajmeri DNK ili probe dijagnostičke za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo.
3. Par DNK molekula koji sadrži: prvi molekul DNK i drugi molekul DNK, gde su molekuli DNK dovoljne dužine, u odnosu na susedne nukleotida SEQ ID br:8 ili njegov komplement, da funkcionišu kao prajmeri DNK ili probe dijagnostičke za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo.
4. Postupak za detektovanje prisustva molekula DNK izabranog iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 i SEQ ID br8 u uzorku DNK, naznačen time što sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz biljke kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa parom DNK prajmera koji sadrži prajmer molekule DNK dovoljne dužine u odnosu na susedne nukleotide SEQ ID br:7 ili njegovog komplementa, ili SEQ ID br:8 ili njegovog komplementa da bi mogli da funkcionišu kao prajmeri DNK ili dijagnostičke probe za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo (c) obezbeđivanje uslova reakcije amplifikacije nukleinskih kiselina; (d) izvođenje pomenute reakcije amplifikacije nukleinskih kiselina produkujući na taj način molekul DNK amplikon; i (e) detektovanje DNK molekula amplikona.
5. Postupak za detektovanje prisustva molekula DNK izabranog Iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 u uzorku DNK, naznačen time što postupak sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz biljke kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa molekulom DNK identifikovanim kao SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, ili SEQ ID br:12, gde je pomenuti molekul DNK proba DNK koja hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa molekulom DNK izabranim iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8, i ne hibridizuje pod strogim uslovima hibridizacije sa DNK uzorka koji ne sadrži molekul DNK identifikovan kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8; (c) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije; i detektovanje hibridizovanja probe sa DNK.
6. DNK molekul naznačen time što je izabran iz grupe koja se sastoji od SEQID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, SEQ ID br:12 i njihovih komplemenata.
7. Postupak selekcije tolerancije na glifozat u biljkama kukuruza, naznačen time što sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz potomstva biljaka kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa marker molekulom nukleinske kiseline izabranim iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:9, i,SEQ ID br10, SEQ ID br:11, SEQ ID br:12 ili njihovih komplemenata; (c) izvođenje postupka ukrštanja uz pomoć markera za karakteristike tolerancije na glifozat, gde je karakteristika tolerancije na glifozat genetički vezana za komplement marker molekula nukleinske kiseline.
8. Kit za detekciju DNK, naznačen time što sadrži: najmanje jedan molekul DNK dovoljne dužine u odnosu na susedne nukleotide homologe ili komplementarane sa SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8 da bi funkcionisali kao DNK prajmer ili proba specifična za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) i/ili njegovo potomstvo.
YUP-437/01A 2000-06-22 2001-06-18 Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju RS49990B (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US21356700P 2000-06-22 2000-06-22
US24001400P 2000-10-13 2000-10-13
US24121500P 2000-10-13 2000-10-13

Publications (2)

Publication Number Publication Date
YU43701A YU43701A (sh) 2003-12-31
RS49990B true RS49990B (sr) 2008-09-29

Family

ID=27395887

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YUP-437/01A RS49990B (sr) 2000-06-22 2001-06-18 Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju

Country Status (21)

Country Link
US (8) US6825400B2 (sr)
EP (3) EP1167531B1 (sr)
CN (2) CN101186918A (sr)
AR (4) AR031665A1 (sr)
AT (2) ATE466945T1 (sr)
BG (1) BG65315B1 (sr)
BR (2) BRPI0100752B1 (sr)
CA (1) CA2349841C (sr)
CY (2) CY1106109T1 (sr)
CZ (2) CZ305949B6 (sr)
DE (2) DE60118660T2 (sr)
DK (3) DK1582592T3 (sr)
ES (3) ES2343252T3 (sr)
HU (2) HU226193B1 (sr)
ID (1) ID30575A (sr)
MX (1) MXPA01006407A (sr)
PL (1) PL199928B1 (sr)
PT (2) PT1167531E (sr)
RS (1) RS49990B (sr)
SI (3) SI1167531T1 (sr)
UY (1) UY26788A1 (sr)

Families Citing this family (403)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0100752B1 (pt) * 2000-06-22 2015-10-13 Monsanto Co moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna
CZ300073B6 (cs) 2000-09-29 2009-01-21 Monsanto Technology Llc Zpusob vylepšení tolerance vuci glyfosátu u rostliny pšenice, její bunka, její DNA, dvojice molekulDNA primeru, zpusoby její detekce, zpusob šírení vlastnosti tolerance vuci glyfosátu u rostlin, DNAdetekcní kit
AU2002218413A1 (en) 2000-11-30 2002-06-11 Ses Europe N.V. Glyphosate resistant transgenic sugar beet characterised by a specific transgene insertion (t227-1), methods and primers for the detection of said insertion
US7569747B2 (en) 2002-12-05 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof
CA2743564C (en) 2003-01-13 2013-11-12 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant alfalfa events and methods for detection thereof
MXPA05011795A (es) * 2003-05-02 2006-02-17 Dow Agrosciences Llc Evidencia de maiz tc1507 y metodos para deteccion del mismo.
US7157281B2 (en) * 2003-12-11 2007-01-02 Monsanto Technology Llc High lysine maize compositions and event LY038 maize plants
HUE025703T2 (en) 2003-12-15 2016-04-28 Monsanto Technology Llc MON88017 corn plant and compositions, and a method for detecting them
US7855323B2 (en) * 2004-02-10 2010-12-21 Monsanto Technology Llc Recombinant DNA for gene suppression
AR047598A1 (es) * 2004-02-10 2006-01-25 Monsanto Technology Llc Semilla de maiz transgenica con mayor contenido de aminoacidos
US7683237B2 (en) * 2004-02-10 2010-03-23 Monsanto Technology Llc Maize seed with synergistically enhanced lysine content
EP2281447B1 (en) * 2004-03-25 2016-07-27 Syngenta Participations AG Corn event MIR604
EP1729580B1 (en) 2004-03-30 2018-04-11 Monsanto Technology LLC Methods for controlling plant pathogens using n-phosphonomethylglycine
US20070197474A1 (en) * 2004-03-30 2007-08-23 Clinton William P Methods for controlling plants pathogens using N-phosphonomethylglycine
PT2319932E (pt) * 2004-04-30 2013-11-27 Dow Agrosciences Llc Novo gene de resistência a herbicida
UA97088C2 (ru) * 2004-09-29 2012-01-10 Пионер Хай-Бред Интернешнл, Инк. Трансгенная кукуруза das-59122-7, стойкая к насекомым, и способы его обнаружения
AP2693A (en) 2005-05-27 2013-07-16 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
WO2007015945A2 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Monsanto Technology Llc Development of novel germplasm using segregates from transgenic crosses
US7973218B2 (en) * 2005-08-24 2011-07-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for controlling weeds
UA102367C2 (ru) * 2005-10-03 2013-07-10 Монсанто Текнолоджи Ллс Семя трансгенной кукурузы с повышенным содержанием лизина
CA2625031C (en) 2005-10-13 2016-07-19 Monsanto Technology Llc Methods for producing hybrid seed
EP1947926B1 (en) 2005-10-28 2014-11-26 Dow AgroSciences LLC Novel herbicide resistance genes
CN101437843B (zh) * 2006-01-23 2013-08-07 密歇根州立大学评议会 抗草甘膦植物的育种方法及组合物
BRPI0719815A2 (pt) * 2006-10-03 2014-05-20 Monsanto Technology Llc Métodos para produção de semente de milho híbrido e composições produzidas a partir dos mesmos
TWM318228U (en) * 2006-11-02 2007-09-01 Datafab Sys Inc Structure for protecting terminal of memory card adapter
BR122017018105B1 (pt) * 2007-11-15 2024-01-23 Monsanto Technology Llc Molécula de dna genômico de soja transgênica
EP2240586A1 (en) 2008-02-15 2010-10-20 Monsanto Technology, LLC Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87769 and methods for detection thereof
BR122018010813B1 (pt) 2008-02-29 2023-12-19 Monsanto Technology Llc Cromossomo, alimento processado ou produto alimentício de milho processado, métodos de detecção da presença de sequências em uma amostra de tecido de milho e para obtenção de uma planta de milho tolerante a déficit de água que carece de um gene marcador selecionável e polinucleotídeo
EP2113172A1 (de) * 2008-04-28 2009-11-04 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
US9078406B2 (en) 2008-08-29 2015-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event MON87754 and methods for detection thereof
AR075549A1 (es) 2008-09-29 2011-04-20 Monsanto Technology Llc Evento transgenico de soja mon87705 y metodos para detectar el mismo
AR075126A1 (es) * 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
WO2010135324A1 (en) 2009-05-18 2010-11-25 Monsanto Technology Llc Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean
US8618358B2 (en) 2009-11-23 2013-12-31 Monsanto Technology Llc Transgenic maize event MON 87427 and the relative development scale
CN102811617A (zh) 2010-01-22 2012-12-05 拜耳知识产权有限责任公司 杀螨和/或杀虫活性物质结合物
CN101812527B (zh) * 2010-04-20 2014-09-17 北京农业职业学院 一种快速检测6种转基因玉米的方法
WO2011153186A1 (en) 2010-06-04 2011-12-08 Monsanto Technology Llc Transgenic brassica event mon 88302 and methods of use thereof
CN103209993B (zh) * 2010-09-15 2014-12-10 陶氏益农公司 针对赋予对2,4-二氯苯氧乙酸的抗性的酶的单克隆抗体和检测方法
CA2814532C (en) 2010-10-12 2021-07-27 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87712 and methods for detection thereof
WO2012065944A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Bayer Cropscience Ag N-aryl pyrazole(thio)carboxamides
EP2646413A1 (de) 2010-11-29 2013-10-09 Bayer Intellectual Property GmbH Alpha-beta-ungesättigte imine
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
KR20130123416A (ko) 2010-12-01 2013-11-12 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 작물에서 선충류를 구제하고 수확량을 증가시키기 위한 플루오피람의 용도
US20130345058A1 (en) 2011-03-10 2013-12-26 Wolfram Andersch Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
HUE038497T2 (hu) 2011-03-23 2018-10-29 Bayer Ip Gmbh Hatóanyag-kombinációk
BR112013025871A2 (pt) 2011-04-08 2016-07-26 Bayer Ip Gmbh composto de fórmula (i) e sua utilização, composição para o controle dos fungos nocivos fitopatogênicos, método para o controle de fungos fitopatogênicos das culturas e processo para a produção das composições
PL2699093T3 (pl) 2011-04-22 2016-04-29 Bayer Cropscience Ag Kombinacje związku aktywnego zawierające pochodną karboksyamidową i związek grzybobójczy
ES2699258T3 (es) 2011-06-14 2019-02-08 Bayer Cropscience Ag Uso de un compuesto de enaminocarbonilo en combinación con un agente de control biológico
AP2013007316A0 (en) 2011-07-01 2013-12-31 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for selective regulation of protein expression
WO2013014241A1 (en) 2011-07-28 2013-01-31 Genective Glyphosate tolerant corn event vco-ø1981-5 and kit and method for detecting the same
WO2013020985A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compound combinations comprising specific tetramic acid derivatives
MX348003B (es) 2011-08-22 2017-03-08 Bayer Cropscience Nv Metodos y medios para modificar un genoma vegetal.
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
CN102952861B (zh) * 2011-08-26 2014-12-31 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 转基因玉米多重pcr-dhplc检测引物及检测方法
MX347562B (es) 2011-09-12 2017-05-03 Bayer Ip Gmbh Derivados fungicidas de 3-fenil[(heterociclilmetoxi)imino]metil}-1 ,2,4-oxadiazol-5(4h)-ona sustituidos en 4.
PH12014500562A1 (en) 2011-09-16 2014-04-14 Bayer Ip Gmbh Use of acylsulfonamides for improving plant yield
JP6100265B2 (ja) 2011-09-16 2017-03-22 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 植物収量を向上させるためのフェニルピラゾリン−３−カルボン酸化合物の使用
AU2012307322B2 (en) 2011-09-16 2016-07-14 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2 isoxazoline-3 carboxylates for improving plant yield
EA028662B1 (ru) 2011-10-04 2017-12-29 Байер Интеллекчуал Проперти Гмбх Рнк-интерференция для борьбы с грибами и оомицетами путем ингибирования гена сахаропиндегидрогеназы
AR088363A1 (es) 2011-10-18 2014-05-28 Dow Agrosciences Llc MATERIALES Y METODOS PARA LA DETECCION DEL EVENTO pDAB4472-1606 QUE CONTIENE EL GEN ARILOXIALCANOATO DIOXIGENASA (AAD-12) EN PLANTAS
CN102409094B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603品系特异定量pcr精准检测方法
CN102409092B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603结构特异定量pcr精准检测方法
MX2014005976A (es) 2011-11-21 2014-08-27 Bayer Ip Gmbh Derivados de n-[(silil trisustituido)metil]-carboxamida fungicidas.
CA2857438A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicidal n-bicycloalkyl and n-tricycloalkyl (thio)carboxamide derivatives
IN2014CN04325A (sr) 2011-12-19 2015-09-04 Bayer Cropscience Ag
BR112014015993A8 (pt) 2011-12-29 2017-07-04 Bayer Ip Gmbh composto, composição, método para o controle dos fungos, utilização dos compostos e processo para a produção das composições
KR102028903B1 (ko) 2011-12-29 2019-10-07 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 살진균 3-[(피리딘-2-일메톡시이미노)(페닐)메틸]-2-치환-1,2,4-옥사디아졸-5(2h)-온 유도체
ES2665361T3 (es) 2012-01-25 2018-04-25 Bayer Intellectual Property Gmbh Combinación de principios activos que contiene bacilo de fluopyram y agente de control biológico
EP2806739A1 (en) 2012-01-25 2014-12-03 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations containing fluopyram and biological control agent
US8952229B1 (en) 2012-02-21 2015-02-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH1K0H1
US8975469B1 (en) 2012-02-21 2015-03-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize hybrid X13C704HR
BR122019010639B1 (pt) 2012-02-27 2020-12-22 Bayer Intellectual Property Gmbh combinação, método para controle de fungos fitopatogênicos prejudiciais e uso da referida combinação
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
US9357778B2 (en) 2012-04-12 2016-06-07 Bayer Cropscience Ag N-acyl-2-(cyclo)alkypyrrolidines and piperidines useful as fungicides
CA2865599C (en) 2012-04-20 2020-10-27 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-[(heterocyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
WO2013156560A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
JP6315481B2 (ja) 2012-05-08 2018-04-25 モンサント テクノロジー エルエルシー トウモロコシイベントｍｏｎ８７４１１
MX2014013497A (es) 2012-05-09 2015-02-10 Bayer Cropscience Ag Pirazol indanil carboxamidas.
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
US9375005B2 (en) 2012-05-09 2016-06-28 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
PL2854548T4 (pl) 2012-05-30 2019-06-28 Bayer Cropscience Ag Kompozycja zawierająca środek do kontroli biologicznej i środek grzybobójczy wybrany z metalaksylu- i metalalksylu-M
PL3488700T3 (pl) 2012-05-30 2021-05-31 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Kompozycja zawierająca środek do kontroli biologicznej i środek grzybobójczy
BR112014029906A2 (pt) 2012-05-30 2018-04-17 Bayer Cropscience Ag composições compreendendo um agente de controle biológico e um inseticida.
KR20150021539A (ko) 2012-05-30 2015-03-02 바이엘 크롭사이언스 아게 생물학적 방제제, 및 유사분열 및 세포 분열의 억제제 또는 다중부위 작용을 갖는 화합물로부터 선택된 살진균제를 포함하는 조성물
DK2854547T3 (en) 2012-05-30 2018-11-26 Bayer Cropscience Ag COMPOSITION CONTAINING A BIOLOGICAL PESTICID AND TRIFLOXY STROBIN
US9386773B2 (en) 2012-05-30 2016-07-12 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and a fungicide from the group consisting of inhibitors of the respiratory chain at complex I or II
CN104507317B (zh) 2012-05-30 2019-11-15 拜尔农作物科学股份公司 包含生物防治剂和杀真菌剂的组合物、及其用途、试剂盒
EP2854535A1 (en) 2012-05-30 2015-04-08 Bayer Cropscience AG Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
CA2880369C (en) 2012-07-31 2021-05-04 Bayer Cropscience Ag Pesticidal compostions comprising a terpene mixture and flupyradifurone
MX369284B (es) 2012-09-14 2019-11-04 Bayer Cropscience Lp Variantes de hppd y metodos de uso.
EP2719280A1 (en) 2012-10-11 2014-04-16 Bayer CropScience AG Use of N-phenylethylpyrazole carboxamide derivatives or salts thereof for resistance management of phytopathogenic fungi
CA2888600C (en) 2012-10-19 2021-08-10 Bayer Cropscience Ag Active compound combinations comprising carboxamide derivatives
MX380476B (es) 2012-10-19 2025-03-12 Bayer Cropscience Ag Método de promoción de crecimiento de planta usando derivados de carboxamida.
LT2908641T (lt) 2012-10-19 2018-04-25 Bayer Cropscience Ag Būdas, skirtas augalų apdorojimui kovojant prieš grybus, kurie yra atsparūs fungicidams, panaudojant karboksamido arba tiokarboksamido darinius
WO2014060519A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Bayer Cropscience Ag Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
BR112015012054A2 (pt) 2012-11-30 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag mistura fungicida ou pesticida binária
CN104994736B (zh) 2012-11-30 2018-02-06 拜耳作物科学股份公司 二元农药和杀真菌混合物
CN104981162B (zh) 2012-11-30 2017-11-28 拜耳作物科学股份公司 三元杀真菌混合物
UA116223C2 (uk) 2012-11-30 2018-02-26 Байєр Кропсайєнс Акцієнгезелльшафт Подвійна фунгіцидна суміш
PY1356939A (es) 2012-11-30 2017-08-01 Bayer Cropscience Ag Mezclas de fungicidas ternarios y pesticidas
US20150282490A1 (en) 2012-12-03 2015-10-08 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and a fungicide
WO2014086750A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
CN105451563A (zh) 2012-12-03 2016-03-30 拜耳作物科学股份公司 包含生物防治剂的组合物
MX356779B (es) 2012-12-03 2018-06-13 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un fungicida.
JP2015535532A (ja) 2012-12-03 2015-12-14 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 生物農薬および殺菌剤を含む組成物
WO2014086758A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
EP2925142B1 (en) 2012-12-03 2018-01-31 Bayer CropScience AG Composition comprising a biological control agent and an insecticide
WO2014086753A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
WO2014090765A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Bayer Cropscience Ag Use of 1-[2-fluoro-4-methyl-5-(2,2,2-trifluoroethylsulfinyl)phenyl]-5-amino-3-trifluoromethyl)-1 h-1,2,4 tfia zole for controlling nematodes in nematode-resistant crops
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
WO2014095677A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Bayer Cropscience Ag Difluoromethyl-nicotinic- tetrahydronaphtyl carboxamides
WO2014124369A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and a fungicide
EP2953468A1 (en) 2013-02-11 2015-12-16 Bayer Cropscience LP Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and an insecticide
MX2015010313A (es) 2013-02-11 2015-11-18 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden gougerotina y por lo menos un agente de control biologico.
US8907159B1 (en) 2013-02-13 2014-12-09 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DM
US8921672B1 (en) 2013-02-13 2014-12-30 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DS
US8916744B1 (en) 2013-02-13 2014-12-23 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DV
BR112015021651B1 (pt) 2013-03-07 2021-12-28 Bayer Cropscience Lp Molécula de ácido nucleico recombinante, cassete de expressão, célula hospedeira de bactéria, polipeptídeo recombinante, composição e métodos para aplicação dos mesmos
KR20150144779A (ko) 2013-04-19 2015-12-28 바이엘 크롭사이언스 악티엔게젤샤프트 살충성 또는 농약성 2성분 혼합물
CA2909725A1 (en) 2013-04-19 2014-10-23 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
CN105636939B (zh) 2013-06-26 2018-08-31 拜耳作物科学股份公司 N-环烷基-n-[(二环基苯基)亚甲基]-(硫代)甲酰胺衍生物
BR112016007566A2 (pt) 2013-10-09 2017-09-12 Monsanto Technology Llc evento de milho transgênico mon87403 e métodos para a detecção do mesmo
AR097995A1 (es) 2013-10-14 2016-04-27 Syngenta Participations Ag Método para sembrar filas de cultivos
US10070645B2 (en) 2013-12-05 2018-09-11 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-N-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
TW201607929A (zh) 2013-12-05 2016-03-01 拜耳作物科學公司 Ｎ－環烷基－ｎ－｛［２－（１－經取代環烷基）苯基］亞甲基｝－（硫代）甲醯胺衍生物
EP2885970A1 (en) 2013-12-21 2015-06-24 Bayer CropScience AG Fungicide compositions comprising compound I, at least one succinate dehydrogenase (SDH) inhibitor and at least one triazole fungicide
CN106459986B (zh) 2014-03-11 2020-06-30 拜耳作物科学有限合伙公司 Hppd变体和使用方法
WO2015160619A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide
WO2015160618A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent
WO2015160620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide
UY36337A (es) 2014-10-15 2016-06-01 Monsanto Technology Llc Adn recombinante que codifica genes de tolerancia a herbicidas, plantas y métodos de uso de los mismos
AU2015344980B2 (en) 2014-11-14 2021-11-11 Basf Plant Science Company Gmbh Materials and methods for increasing the tocopherol content in seed oil
CN104745708A (zh) * 2015-04-02 2015-07-01 湖南省食品安全生产工程技术研究中心 一种转基因玉米nk603品系的lamp检测试剂盒及检测方法
EP3283476B1 (en) 2015-04-13 2019-08-14 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-(biheterocyclyethylene)-(thio)carboxamide derivatives
CN104846084B (zh) * 2015-04-30 2019-02-01 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9927的核酸序列及其检测方法
CN104830846B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9898的核酸序列及其检测方法
CN104878090B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9877的核酸序列及其检测方法
CN104830845B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9878的核酸序列及其检测方法
CN104878094B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9888的核酸序列及其检测方法
CN104830847B (zh) * 2015-04-30 2019-01-11 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9936的核酸序列及其检测方法
CN104878096B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9868的核酸序列及其检测方法
CN104878095B (zh) * 2015-04-30 2018-10-26 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9858的核酸序列及其检测方法
EP3097782A1 (en) 2015-05-29 2016-11-30 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents
WO2017011462A1 (en) * 2015-07-15 2017-01-19 University Of Florida Research Foundation, Inc. Use of elongator genes to improve plant disease resistance
KR20180043838A (ko) 2015-09-11 2018-04-30 바이엘 크롭사이언스 악티엔게젤샤프트 Ｈｐｐｄ 변이체 및 사용 방법
CN105331725B (zh) * 2015-11-30 2018-04-24 中国农业大学 转maroACC基因抗除草剂玉米CC-2的侧翼序列及其应用
BR112019001764A2 (pt) 2016-07-29 2019-05-07 Bayer Cropscience Ag combinações de compostos ativos e métodos para proteção de material de propagação de plantas
CA3043493A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Axmi669 and axmi991 toxin genes and methods for their use
EP3555056A1 (en) 2016-12-19 2019-10-23 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
CN110431234B (zh) 2017-01-18 2024-04-16 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司 Bp005毒素基因及其使用方法
UY37570A (es) 2017-01-18 2018-08-31 Bayer Cropscience Lp Uso de bp005 para el control de patógenos de planta
US11425910B2 (en) 2017-02-21 2022-08-30 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018165091A1 (en) 2017-03-07 2018-09-13 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
EP3606912A1 (en) 2017-04-07 2020-02-12 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018188962A1 (en) 2017-04-11 2018-10-18 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018195256A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Bayer Cropscience Lp Method of improving crop safety
WO2018202491A1 (en) 2017-05-04 2018-11-08 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
JP7160487B2 (ja) 2017-05-04 2022-10-25 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 植物病原菌を駆除するための置換５－（ハロアルキル）－５－ヒドロキシ－イソオキサゾール
WO2018219797A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
US20200190043A1 (en) 2017-06-19 2020-06-18 Basf Se 2-[[5-(trifluoromethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]aryloxy](thio)acetamides for combating phytopathogenic fungi
WO2019025250A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR COMBATING PHYTOPATHOGENIC FUNGI
WO2019038042A1 (en) 2017-08-21 2019-02-28 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR THE CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI
EP3684761A1 (en) 2017-09-18 2020-07-29 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019068811A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Bayer Aktiengesellschaft COMPOSITIONS COMPRISING FLUOPYRAM AND TIOXAZAFENE
BR112020008092A2 (pt) 2017-10-24 2020-09-15 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC método para conferir tolerância a um herbicida e planta de soja transgênica
WO2019083808A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE AGAINST HPPD INHIBITORS BY REGULATION OF PUTATIVE REDUCED 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE REDUCES IN SOYBEANS
WO2019101511A1 (en) 2017-11-23 2019-05-31 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019121143A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Basf Se Substituted cyclopropyl derivatives
WO2019137995A1 (en) 2018-01-11 2019-07-18 Basf Se Novel pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
US12285015B2 (en) 2018-01-29 2025-04-29 BASF Agro B.V. Agrochemical formulations
WO2019154665A1 (en) 2018-02-07 2019-08-15 Basf Se New pyridine carboxamides
EP3749660A1 (en) 2018-02-07 2020-12-16 Basf Se New pyridine carboxamides
CN111801014B (zh) 2018-03-01 2022-05-27 巴斯夫农业公司 氯氟醚菌唑的杀真菌组合物
WO2019219464A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019224092A1 (en) 2018-05-22 2019-11-28 Basf Se Pesticidally active c15-derivatives of ginkgolides
WO2019226938A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Fruit-specific promoters
CN112513033A (zh) 2018-06-04 2021-03-16 拜耳公司 除草活性的双环苯甲酰基吡唑
EP3613736A1 (en) 2018-08-22 2020-02-26 Basf Se Substituted glutarimide derivatives
EP3628158A1 (en) 2018-09-28 2020-04-01 Basf Se Pesticidal mixture comprising a mesoionic compound and a biopesticide
KR102896266B1 (ko) 2018-10-23 2025-12-04 바스프 에스이 트리시클릭 살충 화합물
EP3643705A1 (en) 2018-10-24 2020-04-29 Basf Se Pesticidal compounds
EP3670501A1 (en) 2018-12-17 2020-06-24 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
SI3908584T1 (sl) 2019-01-11 2023-07-31 Basf Se Kristalne oblike 1-(1,2-dimetilpropil)-n-etil-5-metil-n-piridazin-4-il -pirazol-4-karboksamida
EP3696177A1 (en) 2019-02-12 2020-08-19 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
US12439919B2 (en) 2019-05-10 2025-10-14 Bayer Cropscience Lp Active compound combinations
EP3769623A1 (en) 2019-07-22 2021-01-27 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
EP3975718A1 (en) 2019-05-29 2022-04-06 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
WO2020244969A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se Pyridine derivatives and their use as fungicides
WO2020244970A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se New carbocyclic pyridine carboxamides
KR20220017940A (ko) 2019-06-06 2022-02-14 바스프 에스이 살진균 n-(피리드-3-일)카르복사미드
EP3766879A1 (en) 2019-07-19 2021-01-20 Basf Se Pesticidal pyrazole derivatives
UY38795A (es) 2019-07-22 2021-02-26 Bayer Ag 5-amino pirazoles y triazoles como plaguicidas
CA3148209A1 (en) 2019-07-23 2021-01-28 Bayer Aktiengesellschaft Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
UY38794A (es) 2019-07-23 2021-02-26 Bayer Ag Novedosos compuestos de heteroaril-triazol como plaguicidas
WO2021022069A1 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Bayer Cropscience Lp Method of improving cold stress tolerance and crop safety
EP3701796A1 (en) 2019-08-08 2020-09-02 Bayer AG Active compound combinations
EP4034656A1 (en) 2019-09-26 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft Rnai-mediated pest control
CN114760842A (zh) 2019-10-02 2022-07-15 拜耳公司 包含脂肪酸的活性化合物结合物
WO2021063736A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se Bicyclic pyridine derivatives
WO2021063735A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se New bicyclic pyridine derivatives
TW202128663A (zh) 2019-10-09 2021-08-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
AU2020363864A1 (en) 2019-10-09 2022-04-21 Bayer Aktiengesellschaft Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
US12241075B2 (en) 2019-10-14 2025-03-04 Basf Agricultural Solutions Us Llc Insect resistant genes and methods of use
WO2021089673A1 (de) 2019-11-07 2021-05-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte sulfonylamide zur bekämpfung tierischer schädlinge
WO2021097162A1 (en) 2019-11-13 2021-05-20 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with paenibacillus
TW202134226A (zh) 2019-11-18 2021-09-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
EP4061131A1 (en) 2019-11-18 2022-09-28 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
TW202136248A (zh) 2019-11-25 2021-10-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
AR121242A1 (es) 2020-01-31 2022-05-04 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de escape a la sombra en plantas
MX2022010059A (es) 2020-02-18 2022-08-25 Bayer Ag Nuevos compuestos de heteroaril-triazol como pesticidas.
EP3708565A1 (en) 2020-03-04 2020-09-16 Bayer AG Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides
CA3180157A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021209490A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides
TW202200570A (zh) 2020-04-21 2022-01-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之經２—（雜）芳基取代的稠合雜環衍生物
CN115443267B (zh) 2020-04-28 2025-09-05 巴斯夫欧洲公司 杀害虫化合物
EP3903582A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ii
EP3903583A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iii
EP3903584A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iv
EP3903581A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors i
TWI907288B (zh) 2020-05-06 2025-12-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
BR112022022595A2 (pt) 2020-05-06 2022-12-20 Bayer Ag Piridina (tio)amidas como compostos fungicidas
JP2023525349A (ja) 2020-05-12 2023-06-15 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 殺真菌性化合物としてのトリアジンおよびピリミジン（チオ）アミド化合物
EP3909950A1 (en) 2020-05-13 2021-11-17 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
CN115803317B (zh) 2020-05-19 2025-07-15 拜耳作物科学股份公司 作为杀真菌化合物的氮杂双环(硫代)酰胺
CN116096230A (zh) 2020-06-02 2023-05-09 成对植物服务股份有限公司 控制分生组织大小以改良作物的方法
US12565489B2 (en) 2020-06-04 2026-03-03 Bayer Aktiengesellschaft Heterocyclyl pyrimidines and triazines as novel fungicides
BR112022024413A2 (pt) 2020-06-10 2023-02-07 Bayer Ag Heterociclos substituídos com azabiciclila como fungicidas inovadores
EP3945089A1 (en) 2020-07-31 2022-02-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors v
WO2021249800A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
PY2149243A (es) 2020-06-17 2022-03-16 Pairwise Plants Srvices Inc Métodos para el control del tamaño del meristemo para la mejora de cultivos
CA3187296A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 3-(pyridazin-4-yl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine derivatives as fungicides for crop protection
EP4167738A1 (en) 2020-06-18 2023-04-26 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
UY39276A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones.
UY39275A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos
BR112022025692A2 (pt) 2020-06-19 2023-02-28 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazóis e seus derivados como fungicidas
BR112022025710A2 (pt) 2020-06-19 2023-03-07 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas e 1,3,4-oxadiazol piridinas como fungicidas
EP3929189A1 (en) 2020-06-25 2021-12-29 Bayer Animal Health GmbH Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides
EP4175961A1 (de) 2020-07-02 2023-05-10 Bayer Aktiengesellschaft Heterocyclen-derivate als schädlingsbekämpfungsmittel
CN111826387A (zh) * 2020-07-07 2020-10-27 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 一种转基因玉米品系鉴定阳性质粒分子
EP3960727A1 (en) 2020-08-28 2022-03-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors vi
EP3939961A1 (en) 2020-07-16 2022-01-19 Basf Se Strobilurin type compounds and their use for combating phytopathogenic fungi
WO2022017836A1 (en) 2020-07-20 2022-01-27 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions comprising (r)-2-[4-(4-chlorophenoxy)-2-(trifluoromethyl)phenyl]-1- (1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol
US20230313221A1 (en) * 2020-07-31 2023-10-05 Inari Agriculture Technology, Inc. Expedited breeding of transgenic crop plants by genome editing
US12529062B2 (en) 2020-07-31 2026-01-20 Inari Agriculture Technology, Inc. INIR12 transgenic maize
EP3970494A1 (en) 2020-09-21 2022-03-23 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors viii
WO2022033991A1 (de) 2020-08-13 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022053453A1 (de) 2020-09-09 2022-03-17 Bayer Aktiengesellschaft Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022058327A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents
EP3974414A1 (de) 2020-09-25 2022-03-30 Bayer AG 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
US20230397607A1 (en) 2020-10-27 2023-12-14 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
CN112266419B (zh) * 2020-10-29 2023-02-03 中国科学院微生物研究所 一种人工合成的抗除草剂蛋白
WO2022090069A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Compositions comprising mefenpyr-diethyl
WO2022090071A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Use of mefenpyr-diethyl for controlling phytopathogenic fungi
WO2022106304A1 (en) 2020-11-23 2022-05-27 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
EP4259627B1 (en) 2020-12-14 2025-08-20 Basf Se Sulfoximine pesticides
EP3915971A1 (en) 2020-12-16 2021-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides
WO2022129196A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
CA3205419A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Use of dhodh inhibitor for controlling resistant phytopathogenic fungi in crops
WO2022129190A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
WO2022129188A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides
EP4036083A1 (de) 2021-02-02 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4291641A1 (en) 2021-02-11 2023-12-20 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying cytokinin oxidase levels in plants
EP4043444A1 (en) 2021-02-11 2022-08-17 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
WO2022182834A1 (en) 2021-02-25 2022-09-01 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture in plants
BR112023019400A2 (pt) 2021-03-30 2023-12-05 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
WO2022207496A1 (en) 2021-03-30 2022-10-06 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4333616A1 (en) 2021-05-03 2024-03-13 Basf Se Additives for enhancing the pesticidal effectiveness of pesticidal microorganisms
JP2024516278A (ja) 2021-05-06 2024-04-12 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト アルキルアミド置換環付加イミダゾール類及び殺虫剤としてのそれらの使用
CN117651702A (zh) 2021-05-12 2024-03-05 拜耳公司 作为害虫防治剂的2-(杂)芳基取代的稠合杂环衍生物
EP4091451A1 (en) 2021-05-17 2022-11-23 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
IL308529A (en) 2021-05-18 2024-01-01 Basf Se New converted pyridines as fungicides
AU2022278417A1 (en) 2021-05-18 2023-11-30 Basf Se New substituted pyridines as fungicides
BR112023023989A2 (pt) 2021-05-18 2024-01-30 Basf Se Compostos, composição, método para combater fungos fitopatogênicos e semente
MX2023014775A (es) 2021-06-17 2024-01-15 Pairwise Plants Services Inc Modificacion de factores de transcripcion de la familia de factores reguladores del crecimiento en soja.
UY39827A (es) 2021-06-24 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
MX2023014883A (es) 2021-07-01 2024-02-12 Pairwise Plants Services Inc Metodos y composiciones para mejorar el desarrollo del sistema radicular.
EP4119547A1 (en) 2021-07-12 2023-01-18 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
AU2022321882A1 (en) 2021-08-02 2024-02-15 Basf Se (3-pirydyl)-quinazoline
CN117794908A (zh) 2021-08-02 2024-03-29 巴斯夫欧洲公司 (3-喹啉基)-喹唑啉
CA3229056A1 (en) 2021-08-12 2023-02-16 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
PL4384016T3 (pl) 2021-08-13 2026-01-19 Bayer Aktiengesellschaft Kombinacje związków aktywnych i kompozycje grzybobójcze je zawierające
PY2270221A (es) 2021-08-17 2023-03-20 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas
EP4140986A1 (en) 2021-08-23 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
WO2023025682A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 Bayer Aktiengesellschaft Novel pyrazinyl-triazole compounds as pesticides
EP4140995A1 (en) 2021-08-27 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
EP4395531A1 (en) 2021-08-30 2024-07-10 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement
EP4144739A1 (de) 2021-09-02 2023-03-08 Bayer Aktiengesellschaft Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel
AR126938A1 (es) 2021-09-02 2023-11-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento
EP4151631A1 (en) 2021-09-20 2023-03-22 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4405377A1 (en) 2021-09-21 2024-07-31 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for reducing pod shatter in canola
EP4413127A1 (en) 2021-10-04 2024-08-14 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
UY39970A (es) 2021-10-07 2023-04-28 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de la flor y el rendimiento de semillas
WO2023072670A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors x
WO2023072671A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ix
EP4426677A1 (en) 2021-11-03 2024-09-11 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether (thio)amides as fungicidal compounds
WO2023099445A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds
EP4194453A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
AR127904A1 (es) 2021-12-09 2024-03-06 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas
EP4198033A1 (en) 2021-12-14 2023-06-21 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4198023A1 (en) 2021-12-16 2023-06-21 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
AR128372A1 (es) 2022-01-31 2024-04-24 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas
CN119012913A (zh) 2022-02-01 2024-11-22 环球化学股份有限公司 控制害虫的方法和组合物
WO2023148030A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Globachem Nv Methods and compositions for controlling pests in corn
EP4479392A1 (en) 2022-02-17 2024-12-25 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
EP4238971A1 (en) 2022-03-02 2023-09-06 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
US20240327858A1 (en) 2022-03-02 2024-10-03 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
EP4499842A1 (en) 2022-03-31 2025-02-05 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering rosaceae plants with improved characteristics
US20230357789A1 (en) 2022-04-07 2023-11-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight
UY40232A (es) 2022-04-21 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar rasgos de rendimiento
PY2331827A (es) 2022-05-02 2023-11-08 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar el rendimiento y la resistencia a enfermedades
KR20250004024A (ko) 2022-05-03 2025-01-07 바이엘 악티엔게젤샤프트 원치 않는 미생물을 방제하기 위한 (5s)-3-[3-(3-클로로-2-플루오로페녹시)-6-메틸피리다진-4-일]-5-(2-클로로-4-메틸벤질)-5,6-디히드로-4h-1,2,4-옥사디아진의 용도
CN119522219A (zh) 2022-05-03 2025-02-25 拜耳公司 (5s)-3-[3-(3-氯-2-氟苯氧基)-6-甲基哒嗪-4-基]-5-(2-氯-4-甲基苄基)-5,6-二氢-4h-1,2,4-噁二嗪的晶型
UY40255A (es) 2022-05-05 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectur radicular y/o mejorar los rangos de rendimient
UY40326A (es) 2022-06-27 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar el escape a la sombra en plantas
AR129748A1 (es) 2022-06-29 2024-09-25 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristemo para el mejoramiento de cultivos
UY40336A (es) 2022-06-29 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristemo para el mejoramiento de cultivos
AU2023317620A1 (en) 2022-08-02 2025-02-13 Basf Se Pyrazolo pesticidal compounds
US20240043857A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
US20240060081A1 (en) 2022-08-11 2024-02-22 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
EP4584282A1 (en) 2022-09-08 2025-07-16 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
EP4342885A1 (en) 2022-09-20 2024-03-27 Basf Se N-(3-(aminomethyl)-phenyl)-5-(4-phenyl)-5-(trifluoromethyl)-4,5-dihydroisoxazol-3-amine derivatives and similar compounds as pesticides
EP4295688A1 (en) 2022-09-28 2023-12-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combination
WO2024068519A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068517A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068520A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068518A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4361126A1 (en) 2022-10-24 2024-05-01 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xv
EP4619399A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se New substituted tetrahydrobenzoxazepine
CN120202195A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的苯并二氮杂䓬类
CN120202194A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的四氢苯并二氮杂䓬
EP4619393A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se Substituted benzodiazepines as fungicides
EP4385326A1 (en) 2022-12-15 2024-06-19 Kimitec Biogorup Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants
UY40567A (es) 2022-12-19 2024-06-28 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Genes de toxina de insecto y métodos de uso de estos
EP4389210A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Basf Se Heteroaryl compounds for the control of invertebrate pests
WO2024165343A1 (en) 2023-02-08 2024-08-15 Basf Se New substituted quinoline compounds for combatitng phytopathogenic fungi
WO2024173622A1 (en) 2023-02-16 2024-08-22 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants
UY40661A (es) 2023-03-02 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la evitación de la sombra en plantas
UY40664A (es) 2023-03-09 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de la vía de señalización de brasinoesteroide para mejorar rasgos de rendimien
KR20250156732A (ko) 2023-03-17 2025-11-03 바스프 에스이 식물병원성 진균을 퇴치하기 위한 치환된 피리딜/피라지딜 디히드로벤조티아제핀 화합물
EP4455137A1 (en) 2023-04-24 2024-10-30 Basf Se Pyrimidine compounds for the control of invertebrate pests
AU2023445097A1 (en) 2023-04-26 2025-11-06 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xvi
PY2439028A (es) 2023-05-18 2025-06-18 Monsanto Technology Llc Métodos y composiciones para mejorar las características de rendimiento de las plantas
EP4467535A1 (en) 2023-05-25 2024-11-27 Basf Se Lactam pesticidal compounds
WO2025008447A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
CN121399131A (zh) 2023-07-05 2026-01-23 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的吡啶基/吡嗪基二氢吡咯并三嗪化合物
WO2025008446A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
CN121464139A (zh) 2023-07-05 2026-02-03 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的喹啉基/喹喔啉基二氢吡咯并三嗪化合物
EP4488273A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488269A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488270A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
PY2455894A (es) 2023-07-18 2025-03-28 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectura radicular en plantas
AR133310A1 (es) 2023-07-27 2025-09-17 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar rasgos de rendimiento de las plantas
WO2025026738A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Bayer Aktiengesellschaft 6-[5-(ethylsulfonyl)-1-methyl-1h-imidazol-4-yl]-7-methyl-3-(pentafluoroethyl)-7h-imidazo[4,5-c]pyridazine derivatives as pesticides
WO2025026815A1 (en) 2023-08-01 2025-02-06 Globachem Nv Insecticidal mixtures
EP4501112A1 (en) 2023-08-01 2025-02-05 Globachem NV Plant defense elicitors
CN121693504A (zh) 2023-08-09 2026-03-17 拜耳公司 作为新杀真菌剂的氮杂联芳基取代的4,5-二氢-1h-2,4,5-噁二嗪
WO2025031843A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
CN121693501A (zh) 2023-08-09 2026-03-17 拜耳公司 作为新的杀菌剂的哒嗪-4-基噁二嗪
WO2025031842A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazepine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025064734A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering black raspberry plants with improved characteristics
WO2025068226A2 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur and selected terpenes
WO2025078181A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted pyridines
WO2025078183A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted quinazolyl quinolines
WO2025078128A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-3-one-4-yloxadiazines as novel fungicides
US20250122522A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving crop yield traits
WO2025098876A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098874A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having fungicidal/insecticidal/acaricidal properties
WO2025098875A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025131902A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur, selected terpenes and phosphites.
EP4574819A1 (en) 2023-12-22 2025-06-25 Basf Se Diazinone compounds for the control of invertebrate pests
WO2025168620A1 (en) 2024-02-07 2025-08-14 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
US20250270578A1 (en) 2024-02-22 2025-08-28 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
WO2025180964A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Basf Se New substituted benzoxazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025186065A1 (en) 2024-03-05 2025-09-12 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted (aza)quinoxaline derivatives as pesticides
WO2025190927A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025211272A1 (en) 2024-04-04 2025-10-09 Nihon Nohyaku Co., Ltd. Pesticidal mixtures comprising an ethylsulfone compound
EP4640052A1 (en) 2024-04-24 2025-10-29 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
WO2025223904A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
EP4652843A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests in plants
EP4652842A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests, diseases and weeds in plants
WO2025257121A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025257122A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2026002763A1 (en) 2024-06-26 2026-01-02 Basf Se Pesticidal mixtures and applications of beauveria bassiana and dimpropyridaz
WO2026012814A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Basf Se Compositions and methods to enhance crop yield and plant health
WO2026021911A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021910A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021912A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021909A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026027375A1 (de) 2024-07-29 2026-02-05 Bayer Aktiengesellschaft Hydroxy-dihydropyridinon carboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2026027723A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Syngenta Crop Protection Ag Herbicide resistant plants
WO2026037853A1 (en) 2024-08-14 2026-02-19 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
WO2026041702A1 (en) 2024-08-21 2026-02-26 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
WO2026057375A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Basf Se Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide
EP4710766A1 (en) 2024-09-11 2026-03-18 Basf Se Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US5164316A (en) 1987-01-13 1992-11-17 The University Of British Columbia DNA construct for enhancing the efficiency of transcription
US5641876A (en) 1990-01-05 1997-06-24 Cornell Research Foundation, Inc. Rice actin gene and promoter
US5633435A (en) 1990-08-31 1997-05-27 Monsanto Company Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases
US5593874A (en) * 1992-03-19 1997-01-14 Monsanto Company Enhanced expression in plants
US5362865A (en) 1993-09-02 1994-11-08 Monsanto Company Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences
US5853973A (en) * 1995-04-20 1998-12-29 American Cyanamid Company Structure based designed herbicide resistant products
WO1998044140A1 (en) * 1997-04-03 1998-10-08 Dekalb Genetics Corporation Glyphosate resistant maize lines
US6040497A (en) * 1997-04-03 2000-03-21 Dekalb Genetics Corporation Glyphosate resistant maize lines
US5948956A (en) 1997-10-16 1999-09-07 Oms Investments, Inc. Transgenic plants and method for node segment transformation
DE69941009D1 (de) 1998-11-17 2009-07-30 Monsanto Technology Llc Phosphonat metabolisierende pflanzen
BRPI0100752B1 (pt) * 2000-06-22 2015-10-13 Monsanto Co moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna
CZ300073B6 (cs) * 2000-09-29 2009-01-21 Monsanto Technology Llc Zpusob vylepšení tolerance vuci glyfosátu u rostliny pšenice, její bunka, její DNA, dvojice molekulDNA primeru, zpusoby její detekce, zpusob šírení vlastnosti tolerance vuci glyfosátu u rostlin, DNAdetekcní kit
US7569747B2 (en) * 2002-12-05 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof

Also Published As

Publication number Publication date
YU43701A (sh) 2003-12-31
HU226193B1 (en) 2008-06-30
CZ20012203A3 (cs) 2002-02-13
US6825400B2 (en) 2004-11-30
PL348225A1 (en) 2002-01-02
DK1167531T3 (da) 2006-08-14
AR031665A1 (es) 2003-10-01
PT1582592E (pt) 2010-06-16
BG105637A (en) 2002-04-30
SI1167531T1 (sl) 2006-10-31
HU0800015D0 (en) 2008-03-28
EP1582592B1 (en) 2010-05-05
ID30575A (id) 2001-12-27
US9701980B2 (en) 2017-07-11
EP2210951B1 (en) 2016-01-06
EP2210951A3 (en) 2011-01-05
US20100017902A1 (en) 2010-01-21
HU0102569D0 (en) 2001-08-28
BRPI0100752B1 (pt) 2015-10-13
DE60118660D1 (de) 2006-05-24
CN101186918A (zh) 2008-05-28
SI2210951T1 (sl) 2016-04-29
BG65315B1 (bg) 2008-01-31
CN1332246A (zh) 2002-01-23
CA2349841C (en) 2012-12-11
DE60142092D1 (de) 2010-06-17
US20020013960A1 (en) 2002-01-31
MXPA01006407A (es) 2004-05-11
SI1582592T1 (sl) 2010-08-31
CA2349841A1 (en) 2001-12-22
CZ305949B6 (cs) 2016-05-18
US7582434B2 (en) 2009-09-01
DK1582592T3 (da) 2010-08-16
AR053231A2 (es) 2007-04-25
PL199928B1 (pl) 2008-11-28
US7193071B2 (en) 2007-03-20
AR066163A2 (es) 2009-07-29
CY1106109T1 (el) 2011-06-08
BR0100752A (pt) 2002-02-13
CZ299722B6 (cs) 2008-10-29
HU230814B1 (hu) 2018-06-28
ES2343252T3 (es) 2010-07-27
EP1167531A1 (en) 2002-01-02
US20040139493A1 (en) 2004-07-15
US20070056056A1 (en) 2007-03-08
EP2210951A2 (en) 2010-07-28
UY26788A1 (es) 2001-10-25
CY1110083T1 (el) 2015-01-14
US8273959B2 (en) 2012-09-25
DE60118660T2 (de) 2007-03-29
EP1582592A1 (en) 2005-10-05
CN100350043C (zh) 2007-11-21
BR122013026754B1 (pt) 2018-02-27
US20070292854A1 (en) 2007-12-20
ATE323168T1 (de) 2006-04-15
US8722969B2 (en) 2014-05-13
US20140304849A1 (en) 2014-10-09
HUP0102569A2 (hu) 2003-08-28
DK2210951T3 (en) 2016-03-21
US20120329654A1 (en) 2012-12-27
AR065690A2 (es) 2009-06-24
US20170327838A1 (en) 2017-11-16
EP1167531B1 (en) 2006-04-12
ATE466945T1 (de) 2010-05-15
ES2564464T3 (es) 2016-03-22
ES2261330T3 (es) 2006-11-16
PT1167531E (pt) 2006-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS49990B (sr) Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju
EP2298921B1 (en) Cotton event mon 88913 and compositions and methods for detection thereof
JP4903051B2 (ja) トウモロコシ植物ｍｏｎ８８０１７および組成物ならびにその検出方法
EP1869187A2 (en) Elite event a2704-12 and methods and kits for identifying such event in biological samples
CN120574986A (zh) 转基因大豆事件lp689-2及其检测方法
CN120464785B (zh) 转基因玉米事件lp1141-2及其检测方法
CN120591459B (zh) 转基因大豆事件lp689-1及其检测方法
CN120464784B (zh) 转基因玉米事件lp1141-1及其检测方法
ME00840B (me) Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju
HK1151558B (en) Cotton event mon 88913 and compositions and methods for detection thereof