RS49990B - Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju - Google Patents

Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju

Info

Publication number
RS49990B
RS49990B YUP-437/01A YUP43701A RS49990B RS 49990 B RS49990 B RS 49990B YU P43701 A YUP43701 A YU P43701A RS 49990 B RS49990 B RS 49990B
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
dna
seq
molecule
maize
dna molecule
Prior art date
Application number
YUP-437/01A
Other languages
English (en)
Inventor
Carl F Behr
Gregory R. Heck
Catherine Hironaka
Jinsong You
Original Assignee
Monsanto Technology Llc.,
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27395887&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS49990(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Monsanto Technology Llc., filed Critical Monsanto Technology Llc.,
Publication of YU43701A publication Critical patent/YU43701A/sh
Publication of RS49990B publication Critical patent/RS49990B/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8275—Glyphosate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C12N15/8221—Transit peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13—Plant traits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

DNK molekul koji sadrži nukleotidne sekvence identifikovane kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8. Prijava ima 4 nezavisna zahteva i 3 zavisna zahteva.

Description

PODRUČJE PRONALASKA
Predmetni pronalazak odnosi se na podruje molekularne biologije biljaka, posebno se pronalazak odnosi na DNK konstrukt za dobijanje tolerancije na glifozat kod biljke. Pronalazak se još specifičnije odnosi na oglede za detekciju prisustva DNK biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) u uzorku i njen sastav.
STANJE TEHNIKE
Ovaj pronalazak se odnosi na biljku kukuruza(Zea mays)PV-ZMGT32(nk603) tole-rantnu na herbicid glifozat i ekspresiju konstrukta DNK biljke PV-ZMGT32(nk603) i detekciju transgen/genomski region insercije kod kukuruza PV-ZMGT32(nk603) i njeno potomstvo.
Kukuruz je važan usev i on je primarni izvor hrane u mnogim područjima sveta. Bio-tehnotoški metodi primenjeni su na kukuruz radi poboljšanja agronomskih karakteristika i kvaliteta produkta. Jedna takva agronomska karakteristika je tolerancija na herbicide, posebno, tolerancija na glifozatne herbicide. Ta karakteristika je data kukuruzu preko ekspresije transgena kod biljaka kukuruza (U.S. patent br. 6,040,497).
Poznato je da je ekspresija stranih gena kod biljaka pod uticajem njihove pozicije na hromozomima, verovatno zbog strukture hromatina (npr. heterohromatina) ili blizine elemenata za regulaciju transkripcije (npr. pobopvača) blizu mesta integracije (VVeising i sar., Ann. Rev. Genet. 22:421-477, 1988). To je razlog što je često neophodno da se pregleda veliki broj transformanata sa ciljem da se identifikuje transformant okarakterisan optimalnom ekspresijom introdukovanog gena od interesa. Na primer, kod biljaka i drugih organizama zapaženo je da može postojati široko variranje u nivoima ekspresije introdukovanih gena među transformantima. Takođe može postojati razlika u prostornim i vremenskim obrascima ekspresije, na primer, razlike u relativnoj ekspresiji transgena u različitim biljnim tkivima koja može biti ne ogovarajuća putevima očekivanim od regulatomih transkripcionih elemenata prisutnih u introdukovanom konstruktu gena. Zbog toga je uobičajeno da se produkuju stotine do hiljada različitih transformanata i da se oni pregledaju radi pojedinačnog transformanta koji ima željene nivoe ekspresije transgena i model za komercijalnu upotrebu. Transformant koji ima željene nivoe ili obrasce transgene ekspresije koristan je za prenošenje transgena u drugu genetičku pozadinu polnim ukrštanjem koristeći konvencionalne metode razmnožavanja. Potomstvo takvih ukrštanja zadržava transgene ekspresione karakteristike originalnog transformanta. Ta strategija se upotrebljava da se osigura pouzdana ekspresija gena kod određenog broja varijeteta koji su dobro adaptirani na lokalne uslove rasta.
Bilo bi korisno biti u mogućnosti da se detektuje prisustvo određenog transformanta sa ciljem da se odredi da li potomstvo polnog ukrštanja sadrži željene transgene. Dodatno, metod za detekciju određenog transformanta bio bi od pomoći, na primer, za ispunjavanje propisa neophodnih za pretržišno odobrenje i obeležavanje hrane dobijene od rekombinantnih useva. Moguće je detektovati prisustvo transgena bilo kojom dobro poznatom detekcionom metodom za nukleinske kiseline kao što su polimerazna lančana reakcija (PCR) ili DNK hibridizacija putem proba nukleinskih kiselina Ti detekcioni metodi generalno se usmeravaju na genetičke elemente koji se učestalo koriste, kao što su promotori, terminatori, marker geni itd. Kao rezultat, ti metodi ne moraju biti korisni za nalaženje razlike između različitih transformanata, posebno onih koji su produkovani koristeći isti DNK konstrukt ukoliko je DNK sekvenca hromozomalne DNK u susedstvu unesene DNK ("flanking DNK") poznata. PCR ogled za transformant-specifičan diskutovan je, na primer, od strane VVindels i sar., (Med. Fac. Landbouww, Univ. Gent. 64/5b:459-462, 1999), koji su identifikovali glifozat tolerantan transformant kod soje 40-3-2 pomoću PCR-a koristeći prajmer set koji je obuhvatao spoj između inserta I flanking DNK, posebno jedan prajmer koji je uključio sekvence iz inserta i drugi prajmer koji je uključivao sekvence iz flanking DNK.
SAŽETAK PRONALASKA
Prema jednom aspektu pronalaska, obezbeđen je DNK konstrukt koji, kada se eksprimira u biljnim ćelijama i biljkama, donosi tolerantnost na glifozat herbicide. Ovaj pronalazak odnosi se preferentno na metode za produkovanje i selekcionisanje tolerantnosti na glofozat kod monokotilnih useva. DNK konstrukt sastoji se od dve transgene ekspresione kasete. Prva ekspresiona kaseta sadrži molekul DNK promotora aktina 1 pirinča( Orizae satlva)i Intron aktina 1 pirinča operativno vezan za DNK molekul koji enkodira peptidne tranzitne sekvence hloroplasta, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšildmat-3-fosfat sintazu (EPSPS), operativno vezanu za DNK molekul koji sadrži 3' transkripcioni terminator. Druga transgena ekspresiona kaseta DNK konstrukta sadrži 35S promotor DNK molekula mozaičrtog virusa karfijola (CaMV), operativno vezan za molekul DNK koji sadrži Hsp70 intron, operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence hloroplasta, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), operativno vezanu za DNK molekul koji sadrži 3' transkripcioni terminator.
Još specifičnije, obezbeđen je DNK konstrukt koji, kada se eksprimira u biljnim ćelijama i biljkama, donosi tolerantnost na glifozatne herbicide. Ovaj pronalazak odnosi se preferentno na metode za produkovanje i selekcionisanje tolerantnosti na glofozat kod biljke kukuruza. DNK konstrukt sastoji se od dve transgene ekspresione kasete. Prva ekspresiona kaseta sadrži molekul DNK promotora aktina 1 pirinča{ Orizae sativa)operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence EPSPS hloroplastaArabidopsis- a,operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enoi-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), izolovanu izAgrobacterium tumefacienssp soj CP4, operativno vezanu za DNK molekul koji se sastoji od transkripcionog terminatora nopalin sintaze. Druga transgena ekspresiona kaseta sadrži 35S promotor DNK molekula mozaičnog virusa karfijola (CaMV) koji sadrži tandem duplikaciju poboljšanog regiona, operativno vezan za molekul DNK koji sadrži Hsp70 intronZea mays,operativno vezan za molekul DNK koji enkodira tranzitne peptidne sekvence hloroplastaArabidopsis- aEPSPS, operativno vezane za molekul DNK koji enkodira glifozat rezistentnu 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS), izolovanu izAgrobacterium tumefacienssp. soj CP4 operativno vezanu za DNK molekul koji se satstoji od transkripcionog terminatora nopalin sintaze.
Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđeni su preparati i metodi za detekciju prisustva transgen/genom regiona insercije iz nove biljke kukuruza označne kao PV-ZMGT32(nk603). Obezbeđeni su DNK molekuli koji sadrže najmanje jednu spajajuću sekvencu PV-ZMGT32(nk603) selekcionisanu iz grupe koja se sastoji od
5TGTAGAGGCCCACGCGTGGT 3' (SEQ ID br.:9), 5TACCACGCGACACACTTC 3'(SEQ ID
br.:10), i 5TGCTGTTCTGCTGACTTT 3' (SEQ ID br.:11) i njihove komplemente; gde je sekvenca za vezivanje obuhvata vezu između heterotogih DNK inseriranih u genom DNK iz ćelija kukuruza koje vise (flanking) oko mesta insercije i dijagnostičke su za transformant. Biljke kukuruza i seme koje sadrže te molekule su aspekt ovog pronalaska.
Novi DNK molekul 5'ACCAAGCTTTTATAATAG 3" (SEQ ID br:12) i njegov komplement, gde je taj DNK molekul nov u PV-ZMGT32(nk603) i njegovom potomstvu. Predmet ovog pronalaska je biljka kukuruza i seme koje sadrži taj molekul.
Prema drugom aspektu pronalaska, molekuli DNK koji sadrže nove transgeni/genom insert regione, SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8, i koji su homologi ili komplementarni SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 su aspekt ovog pronalaska.
Drugi aspekt pronalaska su molekuli DNK koji sadrže dovoljnu dužinu transgenog dela DNK sekvence SEQ ID br.:7 i sličnu dovoljnu dužinu 5' flanking DNK sekvence kukuruza od SEQ ID br.:7; ili sličnu dovoljnu dužinu transgenog dela DNK sekvence SEQ ID br.:8 l sličnu dovoljnu dužinu 3' DNK flanking transgene sekvence, gde su ti molekuli korisni kao DNK prajmeri u metodama amplifikacije DNK tako da obezbede DNK amplikon produkt posebno produkovan iz DNK PV-ZMGT32(nk603) i njegovo potomstvo. Aspekt pronalaska su prajmeri DNK homologi ili komplementarni u dužini sa SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8. Predmet pronalaska su amplikoni produkovani pomoću DNK prajmera koji su dijagnostički za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) i njegovo potomstvo.
Prema drugom aspektu pronalaska obezbeđeni su metodi za detekciju prisustva DNK koji odgovaraju kukuruznom transformantu PV-ZMGT32(nk603) u uzorku. Takvi metodi sadrže: (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK sa setom DNK prajmera, koji kada se upotrebe u reakciji amplifikacije nukleinskih kiselina sa genomskom DNK ekstrahovanom iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) produkuju amplikon koji je dijagnostički za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603); (b) izvođenje reakcije amplifikacije nukleinske kiseline, produkujući tako amplikon; i (c) detekcija amplikona. Par DNK molekula koji sadrži set DNK prajmera koji su homologi ili komplementarni SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 koji funkcioniše u reakciji amplifikacije nukleinskih kiselina da produkuje amplikon molekula DNK dijagnostičan za PV-ZMGT32(nk603). Još specifičnije, par DNK molekula koji sadrži set prajmera DNK, gde su molekuli DNK identifikovani kao SEQ ID br.:13 ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:14; ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:15; ili njegovi komplementi; SEQ ID br.:16; ili njegovi komplementi. Amplikon koji sadrži molekule DNK SEQ ID br.:13 i SEQ ID br.:14. Amplikon koji sadrži molekule DNK SEQ ID br.:15 i SEQ ID br.:16. Amplikon produkovan gore opisanim metodom koji može hibridizovan" u oštrim ustavima do SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12.
Prema drugom aspektu pronalaska, metodi za detekciju prisustva molekula DNK u uzorku koji odgovaraju PV-ZMGT32(nk603) transformantu, takvi metodi sadrže: (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK ekstrakt iz kukuruza sa molekulom DNK probe koji hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa genomskom DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) i ne hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa kontrolnom DNK biljke kukuruza (b) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije i (c) detektovanje hibridizacije probe na DNK. Još preciznije, metod za detekciju prisustva u uzorku DNK molekula koji odgovara PV-ZMGT32(nk603) transformantu, takvih metoda koji se sastoje od (a) kontaktiranje uzorka koji sadrži DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza sa molekulom probe DNK koji se sastoji od SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12, gde pomenuti molekul probe DNK hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa genomskom DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) i ne hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa kontrolnom DNK biljke kukuruza; (b) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije i (c) detektovanje hibridizacije probe na DNK.
Prema još jednom aspektu pronalaska, obezbeđeni su metodi za produkovanje .biljke kukuruza koja toleriše primenu glifozata, koji sadrže sledeće korake: (a) polno ukrštanje prve parentalne linije kukuruza koja sadrži ekspresione kasete predmetnog pronalaska, koje donose tolerantnost na primenu glifozata, i drugu roditeljsku liniju kukuruza kojoj nedostaje tolerancija na glifozat, produkujući tako mnoštvo biljaka potomaka; i (b) selekcija biljaka potomaka koje tolerišu primenu glifozata. Takvi metodi mogu prema potrebi sadržati dalje korake povratnog ukrštanja biljaka potomaka do druge roditeljske linije kukuruza da se dobije prirodno-ukrštajuća biljka kukuruza koja toleriše primenu glifozata.
Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđen je metod za selekciju biljaka kukuruza predmetnog pronalaska tolerantnih u odnosu na glifozat i njihovog potomstva, koje sadrži ek-strakciju DNK iz uzoraka biljaka, kontaktiranje DNK sa marker molekulom nukleinske kiseline selekcionisanom iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br.:9, SEQ ID br.:10, SEQ ID br.:11, ili SEQ ID br.:12, ili njihovih komplemenata, detektujući hibridizaciju pomenutog markera molekula nukleinske kiseline na DNK, i obavljajući analizu ukrštanja uz pomoć markera za genetičko vezivanje karakteristika tolerancije na glifozat na marker molekul nukleinske kiseline.
Predmetni pronalazak obezbeđuje metode produkcije biljke kukuruza tolerantne na herbicid glifozat koji sadrže transformisanje ćelija kukuruza sa konstruktom DNK (pMON25496), selekciju ćelija kukuruza za toleranciju na tretman sa efektivnom dozom glifozata i rast ćelija kukuruza u fertilnu biljku kukuruza. Fertilna biljka kukuruza može se sama oprašiti ili ukrstiti sa odgovarajućim varijetetima kukuruza da se produkuje potomstvo tolerantno na glifozat. Pronalazak se dalje odnosi na kit za detekciju DNK koji sadrži najmanje jedan molekul DNK dovoljne dužine kontinuiranih nukleotiđa homologih ili komplementarnih sa SEQ ID br.:7 i SEQ ID br.:8 koji funkcionišu kao DNK prajmeri ili probe specifične za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) ili njegovo potomstvo.
Ovaj pronalazak dalje se odnosi na biljke i semena kukuruza( Zea mays)PV-ZMGT32(nk603) tolerantnog na glifozat koji ima ATGC prijava br. PTA-2478 i od njega dobijeno potomstvo. Biljka kukuruza ili njini delovi produkovani rastom biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) tolerantne na glifozat, poien i ovule biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603). Jedro vegetativnih ćelija, jedro ćelija polena i jedro jajne ćelije biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) i potomstvo dobijeno od nje. Produkt pronalaska je biljka kukuruza i seme PV-ZMGT32(nk603) iz koje prajmeri molekula DNK predmetnog pronalaska obezbeđuju specifični amplikon.
Gorepomenuti i drugi aspekti pronalaska postaće očigledniji na osnovu detaljnih opisa koji slede i pratećih slika.
KRATAK OPIS SLIKA
Slika 1. Mapa plazmida pMON25496
DETALJAN OPIS PREFERIRANIH OBLIKA
Ova prijava zaštićuje beneficije od U.S. privremene prijave br. 60/213,567, područje 06/22/00; U.S. privremene prijave br, 60/241,215, područje 10/13/00, i privremene prijave br. 60/240,014, područje 10/13/00. Sledeće definicije i metodi obezbeđeni su da bolje odrede predmetni pronalazak i da vode one sa prosečnim iskustvom u praksi predmetnog pronalaska. Ukoliko nije drugačije naznačeno, termini treba da se shvate prema konvencionalnoj upotrebi onih sa prosečnim iskustvom u odgovarajućoj praksi. Definicije uobičajenih termina u molekularnoj biologiji mogu se takođe naći u Rieger i sar.,Genetički rečnik: Klas& ni i molekularni,5 izdanje, Springer-Verlag: New York, 1991; i Levvin,Geni V,Oxford Universitv Press: New York, 1994. Nomenklatura za DNK baze korišćena je onako kako je utvrđena na 37 CFR § 1.822.
Onako kako se koristi ovde termin "kukuruz" značiZea maysili kukuruz i uključuje sve biljne varijetete koji se mogu ukrštati sa kukuruzom, uključujući i divlje vrste kukuruza.
Onako kako se ovde koristi termin "sadrži" znači "uključuje ali nije ograničen na".
"Glifozat" se odnosi na N-fosfonometilglicin i njegove soli, Glifozat je aktivni sastojak Roundup® herbicida (Monsanto Co.). Tretman sa "glfozat herbicidom" odnosi se na tretman sa Roundup®, Roundup UKra®, Roundup UltraMax® herbicidima ili bilo kojom drugom formulacijom herbicida koja sadrži glifozat. Selekcija stope primene za formulaciju glifozata koja čini biološki efektivnu dozu unutar veština prosečnog agronomskog tehničara.
Konstrukt DNK je agregat molekula DNK vezanih međusobno tako da obezbede jednu ili više ekspresionih kaseta. Konstrukt DNK je preferentno plazmid koji je u stanju da se sam replicira u bakterijskoj ćeliji i koji sadrži različita restrikciona mesta za enzime endonukleaze koja su korisna za uvođenje molekula DNK koji obezbeđuju funkcionalne genetičke elemente, tj. promotore, introne, lidere, kodirajuće sekvence, 3' regione terminacije, među drugima. Ekspresione kasete, smeštene unutar DNK konstrukta, sadrže neophodne genetičke elemente da obezbede transkripciju mesinđer RNK. Ekspresiona kaseta može biti dizajnirana da se eksprimira u prokariotskoj ili eukariotskoj ćeliji. Ekspresione kasete predmetnog pronalaska su dizajnirane da se eksprimiraju preferentno u biljnim ćelijama. Kombinacija ekspresionih kaseta kod transgenih biljaka može voditi neočekivanim fenotipovima. U predmetnom pronalasku, kombinacija kasete promotora aktina 1 pirinča i kasete CaMV 35S promotora obezbeđene u DNK konstruktu (pMON25496) je poboljšala toleranciju na herbicid glifozat kod tranzgene biljke kukuruza kada se uporedi sa samim pojedinačnim kasetama i komercijalnim standardnim GA21 koji sadrži tri kopije kasete promotora aktina 1 pirinča.
Transgeni "transformant" je produkovan transformacijom biljne ćelije sa heterolognim DNK konstruktom, uključujući ekspresionu kasetu nukleinske kiseline koja sadrži željene transgene od, regeneraciju populacije biljaka koja nastaje od insercije transgena u genom biljke, selekciju određene biljke okarakterisanu insercijom na lokaciju u genomu. Termin "transformant" odnosi se na originalni transformant i potomstvo transformanta koje uključuje heterotogu DNK. Termin "transformant" takođe se odnosi na potomstvo produkovano polnim ukrštanjem među transformantima i druge varijetete koji uključuju heterologu DNK. Čak i nakon ponovljenih povratnih ukrštanja sa povratnim roditeljem, inserirana DNK i flanking DNK iz transformisanog roditelja je prisutna u potomstvu ukrštanja na istoj hromozomskoj lokaciji. Termin "transformant" takođe se odnosi na DNK iz originalnog transformanta koji sadrži inseriranu DNK i flanking sekvence genoma u neposrednom susedstvu u odnosu na inseriranu DNK za koji se očekuje da će biti transformisan u potomstvu koje primi inseriranu DNK uključujući željene transgene kao rezultat polnih ukrštanja jedne roditeljske linije koja uključuje inseriranu DNK (npr., originalni transformant i potomstvo koje rezultira iz samooptođenja) i roditeljska linija koja ne sadrži inseriranu DNK. Biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) tolerantne na glifozat mogu se ukrštati polnim putem ukrštanjem prve roditeljeske biljke kukuruza koja se sastoji od biljke kukuruza koja je porasla od transgene biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) koja ima ATCC prijava br. PTA-2478 i njenog potomstva dobijenog transformacijom sa ekspresionim kasetama predmetnog pronalaska koje toleriše primenu herbicida glifozata, i druge roditeljske biljke kukuruza kojoj nedostaje tolerancija na herbicid glifozat, produkujući tako mnoštvo prvog potomstva biljaka; i selekclonišući zatim biljku iz prvog potomstva koja je tolerantna na primenu herbicida glifozata; samooplodeći prvo potomstvo biljke, produkujući tako mnoštvo biljaka drugog potomstva; i zatim sefekctonišući iz potomstva druge generacije biljke tolerantne na herbicid glifozat. Ti koraci mogu dalje uključivati povratno ukrštanje biljke tolerantne na glifozat iz prvog potomstva ili drugog potomstva tolerantnog na glifozat sa drugom roditeljskom biljkom kukuruza ili trećom roditeljskom biljkom kukuruza, produkujući tako biljku kukuruza koja toleriše primenu herbicida glifozata.
Takođe se mora shvatiti da se dve različite transgene biljke mogu takođe ukrstiti tako da prođukuju potomstvo koje sadrži dva dodana, egzogena^geria koji se nezavisno razdvajaju. Samooplodnja odgovarajućeg potomstva može prodtiRovati biljke koje su homozigotne za oba dodana, egzogena gena. Povratno ukrštanje sa roditeljskom biljkom i spoljašnje ukrštanje sa ne-transgenim biljkama je takođe razmotreno, kao i vegetativna propagacija. Opis drugih metoda ukrštanja koja se često koriste za različite karakteristike i useve mogu se naći i jednoj od nekoliko referenci, npr., Fehr, uMetodi uk& tanja za reazvite kultivara,Wilcox, J izd., American Societv of Agronomv, Madison Wl (1987).
"Proba" je izolovana nukleinska kiselina na koju je pričvršćen konvencionalni de-tektabilni označeni ili reporter molekul, npr., radioaktivni izotop, ligand, agens hemituminesce-ncije ili enzim. Takva proba je komplementarna lancu ciljne nukleinske kiseline, u slučaju predmetnog pronalaska, lancu genomske DNK iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) bilo iz biljke kukuruza ili iz uzorka koji uključuje DNK iz transformanta. Probe prema predmetnom pronalasku uključuju ne samo dezoksiribonukleinsku ili ribonukleinsku kiselinu nego takođe i poliamide i druge probne materijale koji se specifično vezuju za ciljne sekvence DNK i koji se mogu upotrebiti da se detektuje prisustvo ciljne sekvence DNK.
"Prajmeri" su izolovane nukleinske kiseline koje su vezane za komplementarni ciljni lanac DNK putem hibridizacije nukleinske kiseline da se formira hibrida između prajmera i ciljnog lanca DNK, koji se produžuje duž ciljnog lanca DNK pomoću polimeraze, npr., DNK polimeraze. Sparivanje prajmera predmetnog pronalaska odnosi se na njihovu upotrebu za ampltfikaciju ciljnih sekvenci nukleinskih kiselina, npr., putem polimerazne lančane reakcije (PCR) ili drugim konvencionalnim metodama amplifikacije nukleinskih kiselina.
Probe i prajmeri su dovoljne nukleotidne dužine da se vezuju za ciljne sekvence DNK specifično u uslovima hibridizacije ili uslovima reakcije određenim operatorom. Ta dužina može biti bilo koje dužine koja je dovoljna da bude korisna u izabranom metodu detekcije. Generalno, koristi se 11 nukleotida dužine ili više, preferentno 18 nukleotiđa ili više, još preferentnije 24 nukleotida ili više i najpreferentnije 30 nukleotida ili više. Takve probe i prajmeri hibridizuju specifično sa ciljnom sekvencom pod jako oštrim uslovima hibridizacije. Preferentno, probe i prajmeri prema predmetnom pronalasku imaju kompletnu sličnost sekvenci DNK kontinuiranih nukleotida sa ciljnom segvencm, i ako probe koje se razlikuju od ciljne sekvence DNK i koje zadržavaju svoju sposobnost da hibridizuju sa ciljnim DNK sekvencama mogu biti dizajnirane konvencionalnim metodama.
Metodi za pripremanje i upotrebu proba i prajmera opisani su, na primer, uMolekularno kbniranje: Laboratorijski pirručnik,drugo isd., vol. 1-3 izd. Sambrook i sar., Cold Spring Harbor Laboratorv Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (pomenuti, "Sambrook i sar., 1989");Tekući protokoli u molekularnoj biologiji, Szd."Ausubel i sar.", Greene Publishing and Willey-lnte-rscience, New York, 1992 (sa periodičnim dopunama)(pomenuti, Ausubel i sar., 1992); i Innis i sar,,PCR protokoli: VodA ' za metode i primene,Academic Press: San Diego, 1990. Parovi PCR-prajmera mogu se dobiti od poznatih sekvenci, na primer, koristeći kompjuterske pro-grame namenjene za tu svrhu kao što je Primer (verzija 0.5, © 1991, VVhitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA).
Prajmeri I probe bazirani na flanking DNK i insert sekvencama obelodanjeni ovde mogu se upotrebiti da se potvrde (i ako je neophodno, koriguju) otkrivene sekvence konvencionalnim metodama, npr., putem re-kloniranja i sekvenciranja takvih sekvenci.
Probe i prajmeri nukleinskih kiselina predmetnog pronalaska hibridizuju pod oštrim uslovima na ciljne sekvence DNK. Bik) koja konvencionalna hibridizacija nukleinskih kiselina ili metod amplifikacije mogu biti upotrebljeni da se u uzorku identifikuje prisustvo DNK iz transgenog transformanta. Molekuli nukleinskih kiselina ili njihovi fragmenti su sposobni da specifično hibridizuju sa drugim molekulima nukleinskih kiselina pod određenim uslovima. Onako kako su korišćeni ovde, molekuli nukleinskih kiselina rečeno je da su sposobni da specifično hibridizuju jedan sa drugim ako su dva molekula sposobna da formiraju anti-paralelnu, dvolančanu strukturu nukleinske kiseline. Za molekul nukleinske kiseline je rečeno da je "komplement" drugog molekula nukleinske kiseline ako oni pokazuju kopletnu komplementarnost. Onako kako se koristi ovde, za molekule je rečeno da pokazuju "kompletnu komplementarnost" kada je svaki nukieotid jednog molekula komplementaran nukleotidu drugog molekula. Za dva molekula je rečeno da su "minimalno komplementarni" ako mogu hibridizovatj jedan sa drugim sa dovoljnom stabilnosti koja im omogućuje da ostanu pričvršćeni jedan uz drugi najmanje konvencionalno "uslovi niske-strogosti". Slično, za molekule je rečeno da su "komplementarni" ako hibridizuju jedan sa drugim sa dovoljnom stabilnošću koja dozvoljava da ostanu vezani jedan sa drugim pod konvencionalnom uslovima "visoke-strogostiu". Konvencionalni uslovi strogosti opisani su od strane Sambrook i sar., 1989, i Havmes i sar., u:Hibridizacija nukleinskih kiselina, praktičan pristup,IRL Press, Washington, DC (1985). Prema tome, odstupanja od kompletne komplementarnosti su dopustljiva, sve dok takva odstupanja ne onemogućuju kompletno kapacitet molekula da formiraju dvolančane strukture. Ako nukleinska kiselina treba da posluži kao prajmer Ili proba ona mora da bude dovoljno komplementarna u sekvencama da bi bila sposobna da formira dvolančanu strukturu pri upotrebljenim posebnim koncentracijama rastvarača i soli.
Onako kako se ovde koristi, gotovo potpuno homologe sekvence čine molekul nukleinske kiseline koji će specifično hibridizovati sa komplementom molekula nukleinske kiseline sa kojim je bio upoređen pod uslovima visoke strogosti. Odgovarajući uslovi strogosti koji potpo-mažu hibridizaciju DNK, na primer, 6.0 x natrijum hlorid/natrijum citrat (SSC) na oko 45 oC, praćeno ispiranjem sa 2.0 x SSC na 50 oC, su poznati onima sa iskustvom u praksi ili se mogu naći uTekući protokoli u molekularnoj biologiji,John Wiley & Sons, NY. (1989), 6.3.1-6.3.6. Na primer, koncentracija soli u koraku ispiranja može biti izabrana od niskih uslova strogosti od oko 2.0 x SSC na 50 oC do visokih uslova strogosti od oko 0.2 x SSC na 50 oC. U dodatku, temperatura u koraku ispiranja može biti povećana od uslova niske oštrine na sobnoj temperaturi od oko 22 oC, do uslova visoke oštrine na oko 65 oC. Obe temperature l soli mogu biti varirane, ili bilo temperatura ili koncentracija soli mogu biti držane konstantnim, dok se druga varijabla menja. U preferiranom obliku, nukleinska kiselina predmetnog pronalaska će specifično hibridizovati sa jednim ili više molekula nukleinskih kiselina postavljenih u SEQ ID br: 9,10,11 i 12 ili njihovim komplementima ili fragmentima bilo kojeg pod umereno oštrim uslovima, na primer na oko 2.0 x SSC i oko 65 oC. U posebno preferiranom obliku, nukleinska kiselina predmetnog pronalaska će specifično hibridizovati sa jednim ili više molekula nukleinske kiseline postavljenih u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim komplementima ili fragmentima pod uslovima visoke oštrine. U jednom aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska ima sekvence nukleinske kiseline postavljene u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim fragmentima ili komplementima. U drugom aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska deli između 80% i 100% iB 90% i 100% identičnosti sekvenci sa sekvencama nukleinskih kiselina postavljenim u u SEQ ID br:9 do SEQ ID br:12 ili njihovim komplementima ili fragmentima. U sledećem aspektu predmetnog pronalaska, preferirani marker molekula nukleinske kiseline predmetnog pronalaska deli između 95% i 100% identičnosti sekvenci sa sekvencama postavljenim u SEQ ID br:9 do SEQ ID br;12 ili njihovom komplementu ili fragmentima. SEQ ID br.*9 do SEQ ID br:12 mogu biti upotrebljeni kao markeri u metodima ukrštanja biljaka da se identifikuje potomstvo genetičkih ukrštanja slično metodama opisanim za analizu jednostavnih sekvenci markera repetitivne DNK, u" DNK markeri: Protokoli, primena i opšti pregled" :(1997) 173-185, Cregan i sar. izd., Wiley-Liss NY; koji su svi ovde inkorporirani u celini putem referenci. Hibridizacija probe sa ciljnim molekulom DNK može biti detektovana bilo kojim od metoda poznatim onima sa iskustvom u praksi, koji uključuju, ali nisu ograničeni samo na njih, fluorescentne tagove, radioaktivne tagove, tagove bazirane na antitelima i hemiluminescentne tagove. ;U pogledu amplifikacije ciljnih sekvenci nukleinskih kiselina (npr. PCR) upotreba određenog amplffikacionog para prajmera, "uslovi strogoće" su uslovi koji dozvoljavaju prajmeru da hibridizuje samo sa ciljnom sekvencom nukleinske kiseline, za koju bi se prajmer preferentno vezao da produkuje jedinstveni amplifikacioni produkt, amplikon, u reakciji termalne amplifikacije DNA, s obzirom da Ima odgovarajuće sekvence divljeg tipa (ili njihov komplement). ;Termin "specifični za (target sekvencu)" ukazuje da proba ili prajmer hibridizuju pod oštrim uslovima hibridizacije samo sa ciljnom sekvencom u uzorku koji sadrži ciljnu sekvencu. ;Onako kako se ovde koristi "amplifikovana DNK" ili "amplikon" odnosi se na produkt amplifikacije nukleinske kiseline ciljne sekvence nukleinske kiseline koja je deo šablona nukleinske kiseline. Na primer, da se odredi da li bijka kukuruz nastala putem polnog ukrštanja sadrži genomsku DNK transgenog transformanta iz biljke kukuruza predmetnog pronalaska, uzorak DNK ekstrahovan iz tkiva biljke kukuruza može se podvrgnuti metodu amplifikacije nukleinske kiseline koristeći par DNK prajmera koji uključuje prvi prajmer dobijen iz flanking sekvenci u genomu biljke iz susedstva mesta insercije unesene heterologe DNK, i drugi prajmer dobijen iz insertovane hetrologe DNK, da se produkuje amplikon koji je dijagnostički za prisustvo DNK transformanta. Amplikon je takođe dijagnostički za transformant na osnovu dužine i sekvenci. Amlikon može imati raspon dužine od kombinovane dužine para prajmera plus jedan par nukleotidnih baza, preferentno plus oko pedeset nukleotidnih baznih parova, još preferentnije plus oko sto pedeset nukleotidnih baznih parova, i čak još preferentnije Četristo pedeset nukleotidnih baznih parova. Alternativno, par prajmera može biti izveden od flanking sekvence na obe strane inserirane DNK tako da produkuje amplikon koji uključuje celu unesenu nukleotidnu sekvencu (npr., Mtu1 fragment DNK od pMON25496 ekspresroni konstrukt, slika 1, približno 6706 nukleotidnih baznih parova). Član para prajmera dobijen od sekvenci biljnog genoma može biti lociran na nastojanju od inserirane DNK sekvence, ta distanca može biti u rasponu od jednog nukleotidnog baznog para sve do granica ampiifikacipne reakcije, ili oko dvadeset hiljada nukleotidnih baznih parova. Upotreba termina "ampliko" specifično isključuje prajmeme đimere koji se mogu formirati u DNK reakcijom termalne amplifikacije. ;Amplifikacija nukleinske kiseline može biti ostvarena bilo kojim od različitih metoda amplifikacije nukleinskih kiselina poznatim u praksi, uključujući lančanu reakciju polimeraze (PCR). Raznovrsni amplifikacioni metodi poznati su u praksi i opisani su,inter alia,u U.S. patentima br. 4,683,195 i 4,683,202 iPCR protokoli: Vodč za metode i primenu,izd., Innis i sar., Academic Press, San Diego, 1990. PCR amplifikacioni metodi razvijeni su da se amplifi-čira genomska DNK sve do 22 kb i sve do 42 kb DNK bakteriofaga (Cheng i sar., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:5695-5699, 1994) Ti metodi, kao i drugi metodi poznati u praksi amplifikacije DNK, mogu se upotrebiti u praksi predmetnog pronalaska. Sekvence heterologog inserta DNK ili flanking sekvence DNK Iz kukuruznog transformanta PV-ZMGT32(nk603) mogu se verifikovati (i korigovatj ako je to neophodno) putem amplifikacije takvih sekvenci iz DNK ekstrahovane iz ATCC deponovane prijave br. PTA-2478 semena ili biljaka koristeći DNK prajmere izvedene iz sekvenci obezbeđenih ovde praćeno standardnim DNK sekvenciranjem PCR amplikona ili klonirane DNK. ;Amplikon produkovan ovim metodama može se detektovati mnoštvom tehnika. Jedan takam metod je Genetic Bit Analvsis (Nikiforov, i sar., Nucieic Acid Res. 22:4167-4175,1994) gde je projektovan DNK oligonukleotid koji prekriva I susedne flanking genomske sekvence i insertovane DNK sekvence. Oligonukleotid je imobiliziran u bunarčićima ploče sa mikrobunarčićima sledeci PCR region od interesa (koristeći jedan prajmer u insertovanoj sekvenci i jedan u susednim flanking genomskim sekvencama), jednolančani PCR produkt može se hibridizovati na imobilizovani oligonukleoti I služiti kao šablon za ekstenziju pojedinačnih baza koristeći reakciju DNK polimeraze i obeležene ddNTP-ove specifične za sledeću očekivanu bazu. Očitavanje može biti fluorescentno ili bazirano na ELISA. Signal indicira prisustvo insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne baze. ;Drugi metod je tehnika pirosekvenciranja kako ju je opisao Winge (Innov. Pharma. Tech. 00:18-24, 2000). U tom metodu dizajniran je oligonukleotid koji preklapa susednu genomsku DNK i vezu insert DNK. Oligonukleotid se hibridizuje na jednolančani PCR produkt regiona od Interesa (jedan prajmer u insertovanoj sekvenci i jedan u flanking genomskoj sekvenci) i inkubira u prisustvu DNK polimeraze, ATP, sulfurilaze, luciferaze, apiraze, adenozin 5" fosfosulfata i luciferina. DNTP-ovi su dodani individualno i rezultati inkorporacije u svetlosnom signalu koji je meren. Svetlosni signal ukazuje na prisustvo transgene insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne ili višestruke baze. ;Fluorescentna polarizacija kako je opisana od strane Chen i sar., (Genome Res. 9:492-498, 1999) je metod koji se može upotrebiti za detekciju amplikona predmetnog pronalaska. Koristeći taj metod dizajniran je oligonukleotid koji preklapa genomski flanking i insertovanl DNK spoj. Oligonukleotid je hibridizovan na jednolančani PCR produkt regiona od interesa (jedan prajmer u insertovanoj DNK i jedan u flanking genomskoj DNK sekvenci) i inkubiran u prisustvu DNK polimeraze fluorescentno obeleženog ddNTP. Ekstenzija pojedinačnih baza rezultirala je inkorporacijom ddNTP. Inkorporacija se može meriti kao pramena u polarizaciji koristeći ftuorometar. Pramena u polarizaciji ukazuje na prisustvo transgene Insert/flanking sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji, hibridizacijl i ekstenziji pojedinačne baze. ;Taqman® (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA) je opisan kao metod za detekciju i kvantifikovanje prisustva sekvenci DNK 1 potpuno je razumljiv na osnovu uputstva obezbeđenog od strane proizvođača. Ukratko, dizajnirana je FRET oligonukleotidna proba koja preklapa genomski flanking i spoj insert DNK. FRET proba i PCR prajmeri (jedan prajmer u insertovanoj DNK sekvenci i jedan u flanking genomskoj sekvenci) su ciklizovani u prisustvu termostabilne polimeraze i dNTP-ova. Hibridizacija FRET probe rezultira cepanjem i oslobađanjem fluorescentne grupe udaljene od ugašene grupe FRET probe. Fluorescentni signal ukazuje na prisustvo flankingAransgen insert sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji i hibridizacijl'. ;Molecular Beacons opisani su za detekciju sekvenci onako kako je to opisano u Tvangi i sar. (Nature Biotech. 14:303-308,1996). Ukratko, dizajnirana je FRET oligonukleotidna proba koja preklapa genomski flanking i spoj insert DNK. Jedinstvena struktura FRET probe rezultira time što ona sadrži sekundarnu strukturu koja drži fluorescentnu i ugašenu grupu u neposrednoj blizini. FRET proba i PCR prajmeri (jedan prajmer u insertovanoj DNK sekvenci I jedan u flanking genomskoj sekvenci) su ciklizovani u prisustvu termostabilne polimeraze i dNTPova. Nakon uspešne PCR amplifikacije, hibridizacija FRET probe na ciljnu sekvencu rezultira uklanjanjem sekundarne strukture probe i prostornim razdvajanjem fluorescentne i ugašene grupe. Nastaje fluorescentni signal. Fluorescentni signal ukazuje na prisustvo flanking/transgen insert sekvence zahvaljujući uspešnoj amplifikaciji i hibridizacijl. ;Sledeći prlmeri uključeni su da se pokažu primeri određenih preferiranih oblika pronalaska. Oni sa iskustvom u praksi treba da shvate da tehnike obelodanjene u primerima koji slede predstavljaju pristupe za koje su pronalazači otkrili da funkcionišu dobro u praksi pronalaska, pa se, prema tome, može smatrati da Čine primere preferiranih načina za njegovu upotrebu. Međutim, oni sa iskustvom u praksi treba da u svetlu predmetnog otkrića, shvate da se mogu napraviti mnoge promene u specifičnim oblicima koji su obelodanjeni a da se još uvek dobiju isti ili slični rezultati bez odstupanja od duha i delokruga pronalaska. ;PRIMERI ;P RIMER 1 ;PV-ZMGT32(nk603) (odsad ovde označen kao nk603) transgeni kukuruzni transformant dobijen bombardovanjem embriona kukuruza mikroprojektjlima (Songstad i sar., In Vrtro Cell Plant 32:179-183, 1996) koristeći linearni Mlu I DNK fragment;đ6byen<*>^pMON25496 (slika 1). Taj DNK fragment sadrži dve transgene ekspresione kasete koje žafećTno daju biljci kukuruza tolerantnost na glifozat. Prva kaseta je sastavljena od promotora 1 aktina pirinča i introna (P-Os.Act1 i l-Os.Act1, U.S. patent br. 5,641,876), operativno vezan za EPSPS tranzitni peptidhloroplasta Arabidopsis(TS-At.EPSPS:CTP2, Klee i sar., Mol. Gen. Genet. 210:47-442,1987), operativno vezan za glifozat tolerantni 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS) izAgrobacterium sp.soj CP4 (AGRTU.arc\A:CP4, U.S. patent br. 5,633,435) i operativno vezan za transkripcioni terminator nopalin sintaze (T-AGRTU.nos, Fralev i sar. Proc. Natl. Acad. SCI USA 80:4803-4807, 1983). Druga transgena ekspresiona kaseta sastoji se od 35S promotora mozaičnog virusa karfiola koji sadrži tandem duplikaciju regiona pojačavanja (P-CaMV.35S, Kay i sar., Science 236:1299-1302, 1987; U.S. patent br. 5,164,316), operativno vezan za Hsp70 intronZea mays(l-Zm.Hsp70, U.S. patent br. 5,362,865), operativno vezan za EPSPS tranzitni peptidhloroplasta Arabidopsis(TS-At.EPSPS:CTP2, Klee i sar., Mol. Gen. Genet. 210:47-442, 1987), operativno vezan za glifozat tolerantni 5-enol-piruvilšikimat-3-fosfat sintazu (EPSPS) izAgrobacterium sp.soj CP4 (AGRTU.aor>A:CP4, U.S. patent br. 5,633,435) i operativno vezan za transkripcioni terminator nopalin sintaze (T-AGRTU.nos, Fraley i sar. Proc. Natl. Acad. SCI USA 80:4803-4807,1983). Nakon bombardovarp, transgeni kalusi glifozat-tolerantni selekcio-nisani su na medijumu koji je sadržao 3 mM glifozata i biljke su postupno regenerisane. Pro-dukovane su trista četiri biljke od 91 nezavisnog transgenog transformanta, nk603 je selekcionisan Iz te populacije na osnovu superiorne kombinacije karakteristika, uključujući tolerantnost na glifozat, agronomske karakteristike i pojedinačnu transgenu inserciju. Procena nk603 transformanta i njegovog izvedenog potomstva u staklenoj baštj i polju ukazala je da ta transgena insercija donosi toleranciju koja prevazilazi komercijalne karakteristike za potpunu vegetativnu i reproduktivnu toleranciju na 340 g glifozata/jutru (840 g glifozata/hektar; 32 oz Roundup Ultra/jutru) kada se primene na V4 i V8 stupnjevima listanja.
PRIMEFL2
Kukuruzni transformant nk603 tolerantan na glifozat upoređen je sa sadašnjim komercijalnim standardnim, GA21 (U.S. patent br. 6,040,497), za tolerantnost na vegetativnu štetu glifozata I efekte na prinos. GA21 transformant (SCP/GMC7232-Final, European Commissfon Health & Consumer Protection Directorate-General). Transgena kaseta GA21 sastoji se od promotora aktina 1 pirinča i na intron vezanog za ribulozo 1,5-bisfosfat karboksllazu tranzitni peptid hloroplasta vezan za modifikovan kukuruzni glifozat otporan EPSPS i reglon terminacije transkripcije 3' nopalin sintaze. Biljke nk603 i GA21 posađene su u redovima u ponovljenim površinama na polju. Tretmani su bili 1) nesprejovane, 2) sprejovane u srazmeri 64 unce/jutru Roundup Ultra® na V4 lisnom stupnju i ponovo sa 64 unce/jutru Roundup Ultra® na V8 lisnom stupnju, 3) sprejovane u srazmeri 96 unoeVjutru Roundup Ultra® na V4 lisnom stupnju i ponovo sa 96 unce/jutru Roundup Ultra® na V8 lisnom stupnju. Vegetativna tolerancija merena je kao procenat vegetativne štete determlnisane kao količina malformacija lista zapažena 10 dana nakon tretmana herbickJom na V8 lisnom stupnju. Prinos sa svake površine meren je u bušelima^utru i određen je procenat redukcije u prinosima određenim za svaki tretman herbicidom relativno u odnosu na nesprejovani tretman. Rezultati prikazani u tabeli 1 ilustruju da nk603 pokazuje niže procente nivoa vegetativne štete nego GA21 biljke i opaženi procenat redukcije prinosa je takođe manji za nk603 transformant. Nizak opseg vegetativne štete zapažen je na nesprejovanim površinama, ovo zapažanje može se pripisati drugim sređinskim faktorima sem izlaganja herbicidu glifozatu. Dupla eksperesiona kaseta pMON25496 u nk603 upoređena je sa vegetativnom štetom i stepenom fertilnosti 3 nezavisna kukuruzna transformanta dobijena od samo CaMV.35S promotorom vođene ekspresije gena tolerancije na glifozat (AGRTU.aarA:CP4). Zapaženo je da je dvostruka ekspresiona kaseta donela viši nivo vegetativne tolerancije i reproduktivne tolerancije nego tri nezavisna kukuruzna transformanta (ev 1, ev 2 i ev 3) koji su sadržali samo ekspresionu kasetu gde je ekspresija gena tolerancije na glifozat vođena CaMV.35S promotorom. Viši nivo vegetativne tolerancije na štetu od herbicida glifozata zapažen je kod nk603 plus 3 dodatna kukuruzna transformanta izvedena od pMON25496 kada se upoređe sa prosečnom štetom 6 kukuruznih transformanata izvedenih od konstrukta gde je ekspresija gena tolerancije na glifozat vođena samo promotorom aktina pirinča i intronom (P-Os.Act1/l-Os.Act1). Biljke transformisane sa dvostrukom ekspresionom kasetom imale su viši nivo glifozatne tolerancije na vegetativnu štetu i fertilitet od biljaka izvedenih transformacijom sa jednom ekspresionom kasetom. To je rezultiralo u poboljšanoj rezistenciji na gubitke prinosa usled primene herbicida glifozata. Konstrukt pMON25496 obezbeđuje biljci dve ekspresione kasete na jednoj lokaciji u nk603 koja donosi viši nivo tolerancije na glifozat od trostruke tandem insercije koja se odigrava kod komercijalnog standardnog, GA21.
EBJMER 3
Odgovarajući flanking molekul DNK iz nk603 kloniran je koristeći vezivne adaptere i ugnježdeni PCR kao što je opisano u Genome VValker™ kit (katalog # K1807-1, CIoneTech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). Prvo je genomska DNK iz nk603 transformanta prečišćena putem CTAB metoda prečišćavanja (Rogers i sar., Plant Mol. Biol. 5:69-76, 1985). Genomske DNK biblioteke za amplifikaciju pripremljene su prema uputstvima proizvođača (Genome VValker™ , done Tech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). U odvojenim reakcijama, genomska DNK digestovana je tokom noći na 37 oC sa sledećim blunt-end restrikcionim endonukleazama: EcoRV, Seal,Dral, Pvu\\ I Sful(Clone Tech Laboratories, Ine, Palo Alto, CA). Reakcione mešavine su ekstrahovane sa fenol:hloroformom, DNK je oborena dodavanjem etanola vodenoj fazi, iztaložena centrifugiranjem i zatim resuspendovana u Tris-EDTA puferu (10 mM Tris-HCI, pH 8.0,1 mM EDTA). Prečišćeni blunt-ended genomski DNK fragmenti povezani su sa Genome VValker™ adapterima prema protokolu proizvođača. Nakon povezivanja, svaka reakcija je treti-rana toplotom (70 oC tokom 5 minuta) da se prekine reakcija i zatim razblažena 10 puta u Tris-EDTA puferu. JednaCd svake dotične veze je zatim amplifikovana u 50 u,l reakciji koja je uključivala 1 u,l dotične adapter-vezane biblioteke, 1 uJ od 10 U.M Genome VValker™ adapter prajmera AP1 (5'GTATATCGACTCACTATAGGGC 3', SEQ ID br:1), 1 uJ od 10U.M nk603 transgen-specifičnog oligonukleotida.
{5' TGACGTATCAAAGTACCGACAAAAACATCC 3' SEQ ID br:2), 1 ui od 10 U.M de-zoksiribonukleotida, 2.5 uJ dlmetll sulfokslda, 5 ui od10 X PCR pufera koji sadrži MgCI2, 0.5 u,l (2.5 jedinice) Amplitaq termostabilneDNK polimeraze (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA), i H20 do 50 uJ. Reakcija je obavljena u termocikleru koristeći proračunatu kontrolu temperature i sledeće ciklične uslove: 1 krug od 95 oC tokom 9 minuta, 7 krugova od 94 oC tokom 2 sekunde, 70 oC tokom 3 minuta; 1 krug od 65 oC tokom 4 minuta. 1 uJ od svake primame reakcije razblažen je 50-puta sa vodom i amplifikovan u sekundarnoj reakciji (1 ui dotične razblažene primame reakcije, 1 jal od 10 u,M Genome VValker™ ugnježdenog prajmera adaptera AP2 (5' ACTATAGGGCACGCGTGGT 3', SEQ ID br:3, dobijen od proizvodađa), 1 ui od 10 uM nk603 transgen-specifičnog ugnježdenog oligonukleotida.
-i
(5' CTTTGTTTTATTTTGGACTATCCCGACTC 3'SEQ ID br:4), 1 \ x\ od 10 uM dezoksiri-bonukleotida, 2.5 u,l dimetil sulfoksida, 5 uJ od 10 X PCR pufera koji sadrži MgCI2, 0.5 u,l (2.5 jedinice) Amplitaq termostabilneDNK polimeraze (PE Applied Biosvstems, Foster City, CA), i H20 do 50 u.l koristeći sledeće ciklične uslove: 1 krug od 95 oC tokom 9 minuta, 5 krugova od 94 oC tokom 2 sekunde, 70 oC tokom 3 minuta; 24 krug od 94 oC tokom 2 sekunde, 1 krug 65 oC tokom 3 minuta, 1 krug 65 oC tokom 4 minuta.
PCR produkti, koji su predstavljali 5' regione koji spajaju kratk rastojanja između nk603 transgene insercije i susedne flanking DNK kukuruza, prečišćeni su na agaroznom gelu elektroforezom praćenom prečišćavanjem iz agaroznog matriksa koristeći QIAquick Gel Extraction Kit (kataloški br. 28704, Oiagen Inc., Valencia, CA) i direktno kloniranje u pGEM-T Easy vektor (kataloški br. A1360, Promega, Madison, Wl). Identitet kloniranih PCR produkata i odnos prema fragmentu Mlu I od pMON25496 potvrđen je analizom sekvenci DNK (ABI Prism™377, PE Biosvstems, Forster City, CA i DINASTAR softverom za analizu sekvenci, DINASTAR Inc., Madison, Wl).
Slično tome, nk603 3' flanking DNK sekvenca kukuruza amplifikovana je i klonirana ko-risteći za gene ugnježdene specifične prajmere, kao što je SEQU ID br:5.
(5' GCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGG 3') koji se vezuje za T-AGRTU.nos terminator transkripcije. Dva T-AGRTU.nos terminatori transkripcije prisutni su u nk603 trans-gen/genomska insercija, jedan interni u konstruktu i jedan na 3' kraju konstrukta u susedstvu kukuruzne genomske DNK. PCR produkti produkovani u toj reakciji su sekvencionirani i DNK sekvenca koja premošćava vezu između transgena i flanking sekvence je razdvojena od produkta unutrašnjeg T-AGRTU.nos poređenjem sa poznatim genetičkim sekvencama elementa pMON25496 konstrukta kako je to prethodno opisano.
Kukuruzne DNK flanking sekvence sa obe strane transgene insercije određene su za nk603 sekvenciranjem amplifikacionog produkta dobijenog od GenomeVValker™ poravnanjem sa poznatim transgenim sekvencama. Na 5' kraju transgene insercije, sekvenca segmenta od 498 bp oko insercione veze određena je (SEG ID br:7). To se sastojalo od 304 bazna para (bp) flanking genomskih DNK sekvenci kukuruza (nukleotidi 1-304 od SEQ ID br:7), 45 bp od pMON25496 sekvence DNK konstrukta (nukleotidi 305-349 od SEQ ID br:7) i 149 bp DNK sekvenci od 5' kraja od P-Os.Act1 (nukleotidi 350-498 od SEQ ID br:7).
DNK sekvenca je određena za 1183 bp segment oko 3' insercione veze (SEQ ID br:8), koja počinje sa 164 bp od T-AGRTU.nos terminatorom transkripcije (nukleotidi 1-164 od SEQ ID br:8), 217 bp od pMON25496 konstrukta DNK sekvence (nukleotidi 165-381 od SEQ ID br:8), 305 bp plastidnih gena kukuruza,rps 11irpoA(delimični segmenti svakog gena koji odgovaraju bazama 63-363 prijave Banke gena X07810, koji odgovaraju bazama 382-686 od SEQ ID br:8), i preostale DNK sekvence koje se sastoje od genomskih flanking DNK sekvenci kukuruza sa mesta integracije (koje odgovaraju bazama 687-1183 SEQ ID br:8).
DNK molekuli za spajanje, SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, i SEQ ID br:12 su novi DNK molekuli u nk603 i dijagnostički su za biljke kukuruza nk603 i njihovo potomstvo. DNK molekuli za spajanje, SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, i SEQ ID br:12 predstavljaju oko 9 nukleotida na svakoj strani mesta insercije transgenog fragmenta DNK i kukuruzne genomske DNK. SEQ ID br:9 je nađen na nukleotidnim pozicijama 295-314 SEQ ID br:7. Vezujuće sekvence SEQ ID br:10 i 11 locirane su respektivno na nukleotidnim pozicijama 373-390 i 678-695, SEQ ID br:8, predstavljajući molekul DNK za povezivanje sekvence DNK konstrukta sa DNK sekvencama plastida kukuruza (SEQ ID br:10) i sekvencama konstrukta sa sekvencama genomske DNK kukuruza (SEQ ID br:11). SEQ ID br:12 je lociran na nukleo-tidnoj poziciji 156-173 od SEQ ID br:8 i predstavlja novi DNK molekul u nk603 zato što je on fuzija T-AGRTU.nos sekvence terminacije sa invertovanim fragmentom promotorske sekvence DNK aktina pirinča.
PRIMER 4
Parovi prajmera DNK transformanta upotrebljeni su da se produkuje amplikon koji može poslužiti za dijagnozu nk603. Ti parovi prajmera transformanta uključuju, ali nisu ograničeni na SEQ ID br:13 i SEQ ID br:14 za 5' amplikon molekula DNK i SEQ ID br:15 i SEQ ID br:16 za 3' amplikon molekula DNK. U dodatku tim parovima perajmera aspekt predmetnog pronalaska je bilo koji par prajmera izveden od SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 koji kada se koristi u reakciji amplifikacije DNK produkuje DNK amplikon koji je dijagnostički za nk603. Uslovi amplifikacije za tu analizu ilustrovani su u tabeli 2 i tabeli 3 za 5' transgene insert/genomski region povezivanja. Isti metod je primenjen za amplifikaciju 3' amlikona molekula DNK prajmer molekula DNK SEQ ID br:15 i SEQ ID br:16, međutim, bilo kakva modifikacija tih metoda koja koristi molekule DNK ili njihove komplemente da se produkuje amplikon molekula DNK dijagno-stički za nk603 je u okviru uobičajene prakse. U dodatku, kontrolni par prajmera (SEQ ID br:17 1 18) za amplifikaciju endogenih gena kukuruza uključen je kao unutrašnji standard za uslove reakcije. Analiza nk603 uzorka DNK ekstrakta biljnog tkiva treba da uključi pozitivnu kontrolu DNK ekstrakta tkiva iz nk603, negativnu kontrolu DNK ekstrakta iz biljke kukuruza koja nije nk603 i negativnu kontrolu koja ne sadrži šablon DNK ekstrakta kukuruza. Dodatni DNK molekuli prajmera dovoljne dužine mogu se selekcionisati iz SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 od strane onih koji imaju dovoljno iskustva u praksi sa metodama amplifikacije DNK i uslovima optimizovanim za produkciju amplikona koji se mogu razlikovati od metoda prikazanih u tabeli 2 i tabeli 3, ali rezultirati amplikonom dijagnostičkim za nk603. Upotreba tih prajmer sekvenci sa modifikacijama u odnosu na metode iz tabela 2 i 3 su u delokrugu pronalaska. Aspekt ovog pronalaska je amplikon kojim je najmanje jedan DNK prajmer molekul dovoljne dužine izveden iz SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 koji je dijagnostički za nk603. Aspekt ovog pronalaska je amplikon kod kojeg je najmanje jedan DNK prajmer dovoljne dužine izveden od bilo kog od genetičkih elemenata od pMON25496 koji je dijagnostički za nk603. Ogled za amplikon nk603 može se izvesti korišćenjem Stratagene Robocvcler, MJ Engine, Perkin-EImer 9700, ili
Eppendorf Mastercvcler Građient thermocvcler kako je pokazano u tabeli 3, ili metodama i aparaturama poznatim onima sa iskustvom u praksi.
Tabela 3. Preporučeni PCR parametri za različite termociklere
Blago pomešaj i, ako je potrebno (nema toplog vrha na terrrtocikleru), dodaj 1-2 kapi mineralnog ulja na površinu svake reakcije. Produži sa PCR-om u Tratagene Robocvcler, MJ, Engine, Perkin-EImer 9700, ili Eppendorf Mastercvcler Građient termocikler koristeći sledeće parametre ciklusa.
Napomena: MJ, Engine ili Eppendorf Mastercvcler Građient termocikler mora raditi na proračunatom modusu. Pusti Perkin-EImer 9700 termocvcler sa maksimalnom brzinom obrtaja.
Prijava depozita, firme Monsanto Companv, semena kukuruznog transformanta P V-ZMGT32<nk603) gore opisanog urađena je u skladu sa Budlpeštanskim sporazumom kod American Type Cutture Collection (ATCC, 10801 Universitv Boulevard, Manassas, Va. 20110. Broj prijave ATCC je PTA-2478. Prijava depozita će biti čuvana u depozitorijumu u periodu od 30 godina, ili 5 godina nakon poslednjeg zahteva, ili za stvarno vreme trajanja patenta, šta god da je duže i bfće zamenjena prema potrebi tokom ovog perioda.
Poto su prikazani i opisani principi predmetnog pronalaska, treba da bude očigledno osobama sa iskustvom u ovoj oblasti da pronalazak može biti izmenjena u aranžmanima i detaljima bez odstupanja od takvih principa. Mi tražimo zaštitu za sve izmene koje su u duhu i obimu priloženih patentnih zahteva.
Sve publikacije i objavljeni patentni spisi citirani u ovoj specifikaciji su uključeni ovde putem referenci u istom obimu, kao što je svaka pojedinačna publikacija ili patentna prijava, specifično i individualno naznačena da bude uključena referencom.

Claims (8)

1. DNK molekul koji sadrži nukleotidne sekvence identifikovane kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8.
2. Par DNK molekula koji sadrži; prvi molekul DNK i drugi molekul DNK, gde su molekuli DNK dovoljne dužine, u odnosu na susedne nukleotideSEO. ID br:7 ili njegov komplement, da funkcionišu kao prajmeri DNK ili probe dijagnostičke za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo.
3. Par DNK molekula koji sadrži: prvi molekul DNK i drugi molekul DNK, gde su molekuli DNK dovoljne dužine, u odnosu na susedne nukleotida SEQ ID br:8 ili njegov komplement, da funkcionišu kao prajmeri DNK ili probe dijagnostičke za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo.
4. Postupak za detektovanje prisustva molekula DNK izabranog iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 i SEQ ID br8 u uzorku DNK, naznačen time što sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz biljke kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa parom DNK prajmera koji sadrži prajmer molekule DNK dovoljne dužine u odnosu na susedne nukleotide SEQ ID br:7 ili njegovog komplementa, ili SEQ ID br:8 ili njegovog komplementa da bi mogli da funkcionišu kao prajmeri DNK ili dijagnostičke probe za DNK ekstrahovanu iz biljke kukuruza PV-ZMGT32(nk603) ili njeno potomstvo (c) obezbeđivanje uslova reakcije amplifikacije nukleinskih kiselina; (d) izvođenje pomenute reakcije amplifikacije nukleinskih kiselina produkujući na taj način molekul DNK amplikon; i (e) detektovanje DNK molekula amplikona.
5. Postupak za detektovanje prisustva molekula DNK izabranog Iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 i SEQ ID br:8 u uzorku DNK, naznačen time što postupak sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz biljke kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa molekulom DNK identifikovanim kao SEQ ID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, ili SEQ ID br:12, gde je pomenuti molekul DNK proba DNK koja hibridizuje pod oštrim uslovima hibridizacije sa molekulom DNK izabranim iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8, i ne hibridizuje pod strogim uslovima hibridizacije sa DNK uzorka koji ne sadrži molekul DNK identifikovan kao SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8; (c) podvrgavanje uzorka i probe oštrim uslovima hibridizacije; i detektovanje hibridizovanja probe sa DNK.
6. DNK molekul naznačen time što je izabran iz grupe koja se sastoji od SEQID br:9, SEQ ID br:10, SEQ ID br:11, SEQ ID br:12 i njihovih komplemenata.
7. Postupak selekcije tolerancije na glifozat u biljkama kukuruza, naznačen time što sadrži: (a) ekstrahovanje uzorka DNK iz potomstva biljaka kukuruza; (b) kontaktiranje uzorka DNK sa marker molekulom nukleinske kiseline izabranim iz grupe koja se sastoji od SEQ ID br:9, i,SEQ ID br10, SEQ ID br:11, SEQ ID br:12 ili njihovih komplemenata; (c) izvođenje postupka ukrštanja uz pomoć markera za karakteristike tolerancije na glifozat, gde je karakteristika tolerancije na glifozat genetički vezana za komplement marker molekula nukleinske kiseline.
8. Kit za detekciju DNK, naznačen time što sadrži: najmanje jedan molekul DNK dovoljne dužine u odnosu na susedne nukleotide homologe ili komplementarane sa SEQ ID br:7 ili SEQ ID br:8 da bi funkcionisali kao DNK prajmer ili proba specifična za kukuruzni transformant PV-ZMGT32(nk603) i/ili njegovo potomstvo.
YUP-437/01A 2000-06-22 2001-06-18 Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju RS49990B (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US21356700P 2000-06-22 2000-06-22
US24001400P 2000-10-13 2000-10-13
US24121500P 2000-10-13 2000-10-13

Publications (2)

Publication Number Publication Date
YU43701A YU43701A (sh) 2003-12-31
RS49990B true RS49990B (sr) 2008-09-29

Family

ID=27395887

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YUP-437/01A RS49990B (sr) 2000-06-22 2001-06-18 Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju

Country Status (21)

Country Link
US (8) US6825400B2 (sr)
EP (3) EP2210951B1 (sr)
CN (2) CN101186918A (sr)
AR (4) AR031665A1 (sr)
AT (2) ATE323168T1 (sr)
BG (1) BG65315B1 (sr)
BR (2) BRPI0100752B1 (sr)
CA (1) CA2349841C (sr)
CY (2) CY1106109T1 (sr)
CZ (2) CZ305949B6 (sr)
DE (2) DE60142092D1 (sr)
DK (3) DK1582592T3 (sr)
ES (3) ES2564464T3 (sr)
HU (2) HU226193B1 (sr)
ID (1) ID30575A (sr)
MX (1) MXPA01006407A (sr)
PL (1) PL199928B1 (sr)
PT (2) PT1167531E (sr)
RS (1) RS49990B (sr)
SI (3) SI1582592T1 (sr)
UY (1) UY26788A1 (sr)

Families Citing this family (406)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0100752B1 (pt) * 2000-06-22 2015-10-13 Monsanto Co moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna
CA2420406C (en) * 2000-09-29 2014-12-09 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant wheat plant 33391 and compositions and methods for detection thereof
EP1337669A2 (en) 2000-11-30 2003-08-27 Ses Europe N.V./S.A. Glyphosate resistant transgenic sugar beet characterised by a specific transgene insertion (t227-1), methods and primers for the detection of said insertion
AU2003299579B2 (en) 2002-12-05 2008-09-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof
BR122015019398B1 (pt) 2003-01-31 2019-10-01 Monsanto Technology Llc Métodos para produzir planta de alfafa tolerante a glifosato tendo evento transgênico j-163 e para produzir feno de alfafa
AU2004236718C1 (en) * 2003-05-02 2010-06-10 Corteva Agriscience Llc Corn event TC1507 and methods for detection thereof
US7157281B2 (en) * 2003-12-11 2007-01-02 Monsanto Technology Llc High lysine maize compositions and event LY038 maize plants
HRP20150814T1 (xx) * 2003-12-15 2015-08-28 Monsanto Technology, Llc Biljka kukuruza mon88017 te sastavi i postupci za njezino otkrivanje
AR047598A1 (es) * 2004-02-10 2006-01-25 Monsanto Technology Llc Semilla de maiz transgenica con mayor contenido de aminoacidos
US7855323B2 (en) * 2004-02-10 2010-12-21 Monsanto Technology Llc Recombinant DNA for gene suppression
US7683237B2 (en) * 2004-02-10 2010-03-23 Monsanto Technology Llc Maize seed with synergistically enhanced lysine content
JP2007530036A (ja) * 2004-03-25 2007-11-01 シンジェンタ パーティシペーションズ アクチェンゲゼルシャフト Ｍｉｒ６０４系統トウモロコシ
US20070197474A1 (en) * 2004-03-30 2007-08-23 Clinton William P Methods for controlling plants pathogens using N-phosphonomethylglycine
EP1729580B1 (en) 2004-03-30 2018-04-11 Monsanto Technology LLC Methods for controlling plant pathogens using n-phosphonomethylglycine
CN102094032B (zh) 2004-04-30 2014-02-26 美国陶氏益农公司 新除草剂抗性基因
EP1794308B1 (en) * 2004-09-29 2013-08-28 Pioneer-Hi-Bred International, Inc. Corn event das-59122-7 and methods for detection thereof
AP2693A (en) 2005-05-27 2013-07-16 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
CA2616535A1 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Monsanto Technology Llc Development of novel germplasm using segregates from transgenic crosses
BRPI0615087A2 (pt) * 2005-08-24 2011-05-03 Pioneer Hi Bred Int métodos e composições para a expressão de um polinucleotìdeo de interesse
RU2460281C2 (ru) * 2005-10-03 2012-09-10 Монсанто Текнолоджи Ллс Семена трансгенных растений с повышенным содержанием лизина
EA023885B1 (ru) 2005-10-13 2016-07-29 МОНСАНТО ТЕКНОЛОДЖИ, ЭлЭлСи Конструкция рекомбинантной днк для индуцирования стерильности в трансгенном растении, стерильные трансгенные растения и способы получения гибридных семян
ES2637948T3 (es) 2005-10-28 2017-10-18 Dow Agrosciences Llc Nuevos genes de resistencia a herbicidas
CA2639900C (en) * 2006-01-23 2014-08-26 Board Of Trustees Of Michigan State University Methods for breeding glyphosate resistant plants and compositions thereof
WO2008063755A2 (en) * 2006-10-03 2008-05-29 Monsanto Technology Llc Methods for hybrid corn seed production and compositions produced therefrom
TWM318228U (en) * 2006-11-02 2007-09-01 Datafab Sys Inc Structure for protecting terminal of memory card adapter
WO2009064652A1 (en) * 2007-11-15 2009-05-22 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87701 and methods for detection thereof
CN101939437A (zh) 2008-02-15 2011-01-05 孟山都技术公司 对应于转基因事件mon87769的大豆植物和种子及其检测方法
MX341747B (es) 2008-02-29 2016-08-31 Monsanto Technology Llc Evento de maiz mon87460 y composiciones y metodos para detectarlo.
EP2113172A1 (de) * 2008-04-28 2009-11-04 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
WO2010024976A1 (en) 2008-08-29 2010-03-04 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87754 and methods for detection thereof
CN107699545A (zh) 2008-09-29 2018-02-16 孟山都技术公司 大豆转基因时间mon87705及其检测方法
AR075126A1 (es) * 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
US10555527B2 (en) 2009-05-18 2020-02-11 Monsanto Technology Llc Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean
WO2011062904A1 (en) 2009-11-23 2011-05-26 Monsanto Technology Llc Transgenic maize event mon 87427 and the relative development scale
EA022553B1 (ru) 2010-01-22 2016-01-29 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Применение комбинации биологически активных веществ, набор и средство, содержащие комбинацию биологически активных веществ, для борьбы с вредителями животного происхождения и способ улучшения использования продукционного потенциала трансгенного растения
CN101812527B (zh) * 2010-04-20 2014-09-17 北京农业职业学院 一种快速检测6种转基因玉米的方法
NZ603506A (en) 2010-06-04 2013-11-29 Monsanto Technology Llc Transgenic brassica event mon 88302 and methods of use thereof
US8673583B2 (en) * 2010-09-15 2014-03-18 Dow Agrosciences, Llc. Monoclonal antibodies and detection methods for enzymes that confer resistance to 2,4-dichlorophenoxyacetic acid
CN103270173B (zh) 2010-10-12 2017-11-21 孟山都技术公司 对应于转基因事件mon87712的大豆植物和种子及其检测方法
AR083875A1 (es) 2010-11-15 2013-03-27 Bayer Cropscience Ag N-aril pirazol(tio)carboxamidas
WO2012072489A1 (de) 2010-11-29 2012-06-07 Bayer Cropscience Ag Alpha-beta-ungesättigte imine
KR20180096815A (ko) 2010-12-01 2018-08-29 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 작물에서 선충류를 구제하고 수확량을 증가시키기 위한 플루오피람의 용도
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
BR112013022998A2 (pt) 2011-03-10 2018-07-03 Bayer Ip Gmbh método para aprimorar a germinação das sementes.
EP3292761A1 (en) 2011-03-23 2018-03-14 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations
CN103517900A (zh) 2011-04-08 2014-01-15 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂肟基-四唑衍生物
WO2012143127A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Bayer Cropsciences Ag Active compound combinations comprising a (thio)carboxamide derivative and a fungicidal compound
WO2012171914A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of an enaminocarbonyl compound in combination with a biological control agent
CN103635483B (zh) 2011-07-01 2016-11-09 孟山都技术公司 用于选择性调控蛋白质表达的方法和组合物
MX2014001072A (es) 2011-07-28 2014-09-25 Genective Evento vco-ø1981-5 de maiz tolerante a glifosato y kit y metodo para detectar el mismo.
IN2014DN00156A (sr) 2011-08-10 2015-05-22 Bayer Ip Gmbh
BR112014003919A2 (pt) 2011-08-22 2017-03-14 Bayer Cropscience Ag métodos e meios para modificar um genoma de planta
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
CN102952861B (zh) * 2011-08-26 2014-12-31 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 转基因玉米多重pcr-dhplc检测引物及检测方法
CN103874681B (zh) 2011-09-12 2017-01-18 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌性4‑取代的‑3‑{苯基[(杂环基甲氧基)亚氨基]甲基}‑1,2,4‑噁二唑‑5(4h)‑酮衍生物
UA115971C2 (uk) 2011-09-16 2018-01-25 Байєр Інтеллектуал Проперті Гмбх Застосування ацилсульфонамідів для покращення врожайності рослин
AR087873A1 (es) 2011-09-16 2014-04-23 Bayer Ip Gmbh Uso de fenilpirazolin-3-carboxilatos para mejorar el rendimiento de las plantas
EP2755484A1 (en) 2011-09-16 2014-07-23 Bayer Intellectual Property GmbH Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2 isoxazoline-3 carboxylates for improving plant yield
ES2628436T3 (es) 2011-10-04 2017-08-02 Bayer Intellectual Property Gmbh ARNi para el control de hongos y oomicetos por la inhibición del gen de sacaropina deshidrogenasa
CA2792804A1 (en) 2011-10-18 2013-04-18 Dow Agrosciences Llc Materials and methods for detecting the aryloxyalkanoate dioxygenase gene (aad-12) containing event pdab4472-1606 in plants
CN102409092B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603结构特异定量pcr精准检测方法
CN102409094B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603品系特异定量pcr精准检测方法
WO2013075817A1 (en) 2011-11-21 2013-05-30 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicide n-[(trisubstitutedsilyl)methyl]-carboxamide derivatives
US9725414B2 (en) 2011-11-30 2017-08-08 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicidal N-bicycloalkyl and N-tricycloalkyl pyrazole-4-(thio)carboxamide derivatives
WO2013092519A1 (en) 2011-12-19 2013-06-27 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
CN104039769B (zh) 2011-12-29 2016-10-19 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌的3-[(1,3-噻唑-4-基甲氧基亚氨基)(苯基)甲基]-2-取代的-1,2,4-噁二唑-5(2h)-酮衍生物
WO2013098147A1 (en) 2011-12-29 2013-07-04 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicidal 3-[(pyridin-2-ylmethoxyimino)(phenyl)methyl]-2-substituted-1,2,4-oxadiazol-5(2h)-one derivatives
JP6182158B2 (ja) 2012-01-25 2017-08-16 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ フルオピラムとバシルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）と生物学的防除剤とを含んだ活性化合物組合せ
EP2806739A1 (en) 2012-01-25 2014-12-03 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations containing fluopyram and biological control agent
US8975469B1 (en) 2012-02-21 2015-03-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize hybrid X13C704HR
US8952229B1 (en) 2012-02-21 2015-02-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH1K0H1
PE20190345A1 (es) 2012-02-27 2019-03-07 Bayer Ip Gmbh Combinaciones de compuestos activos
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
JP2015517996A (ja) 2012-04-12 2015-06-25 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ 殺真菌剤として有用なｎ−アシル−２−（シクロ）アルキルピロリジンおよびピペリジン
EP2838363A1 (en) 2012-04-20 2015-02-25 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
AU2013251109B2 (en) 2012-04-20 2017-08-24 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-N-[(heterocyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
UA126903C2 (uk) 2012-05-08 2023-02-22 Монсанто Текнолоджи Ллс Об'єкт кукурудзи mon 87411
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
CN104768934B (zh) 2012-05-09 2017-11-28 拜耳农作物科学股份公司 吡唑茚满基甲酰胺
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
BR112014027644A2 (pt) 2012-05-09 2017-06-27 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopirazol-indanil-carboxamidas
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
CN107027809A (zh) 2012-05-30 2017-08-11 拜耳作物科学股份公司 包含生物防治剂和选自呼吸链复合物i或ii抑制剂的杀真菌剂的组合物
PT2854552T (pt) 2012-05-30 2019-07-25 Bayer Cropscience Ag Composição compreendendo um agente de controlo biológico e um fungicida selecionado a partir de inibidores da biossíntese de aminoácidos ou proteínas, inibidores da produção de atp e inibidores da síntese da parede celular
HRP20181752T1 (hr) 2012-05-30 2018-12-28 Bayer Cropscience Ag Pripravak koji sadrži biološko kontrolno sredstvo i fluopikolid
TR201816257T4 (tr) 2012-05-30 2018-11-21 Bayer Cropscience Ag Bir biyolojik kontrol ajanı ve trifloksistrobin içeren bileşim.
EP3281526A1 (en) 2012-05-30 2018-02-14 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Composition comprising a biological control agent and a fungicide
WO2013178658A1 (en) 2012-05-30 2013-12-05 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
EP2854535A1 (en) 2012-05-30 2015-04-08 Bayer Cropscience AG Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
KR20150023475A (ko) 2012-05-30 2015-03-05 바이엘 크롭사이언스 아게 생물학적 방제제, 및 지질막 합성, 멜라닌 생합성, 핵산 합성 또는 신호 전달의 억제제로부터 선택된 살진균제를 포함하는 조성물
EP2879493B1 (en) 2012-07-31 2018-09-19 Bayer CropScience AG Pesticidal compositions comprising a terpene mixture and flupyradifurone
WO2014043435A1 (en) 2012-09-14 2014-03-20 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
EP2719280A1 (en) 2012-10-11 2014-04-16 Bayer CropScience AG Use of N-phenylethylpyrazole carboxamide derivatives or salts thereof for resistance management of phytopathogenic fungi
ES2665320T3 (es) 2012-10-19 2018-04-25 Bayer Cropscience Ag Procedimiento de tratamiento de plantas contra hongos resistentes a fungicidas usando derivados de carboxamida o de tiocarboxamida
CA2888559C (en) 2012-10-19 2021-03-02 Bayer Cropscience Ag Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
CN105357968A (zh) 2012-10-19 2016-02-24 拜尔农科股份公司 包含羧酰胺衍生物的活性化合物复配物
PL2908640T3 (pl) 2012-10-19 2020-06-29 Bayer Cropscience Ag Sposób stymulowania wzrostu roślin przy pomocy pochodnych karboksamidu
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
BR112015012473A2 (pt) 2012-11-30 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag misturas binárias pesticidas e fungicidas
EP2925138A1 (en) 2012-11-30 2015-10-07 Bayer CropScience AG Ternary fungicidal and pesticidal mixtures
WO2014083033A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropsience Ag Binary fungicidal or pesticidal mixture
WO2014083088A2 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal mixtures
EP2925134B1 (en) 2012-11-30 2019-12-25 Bayer CropScience AG Ternary fungicidal mixtures
WO2014086759A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
CN105007741A (zh) 2012-12-03 2015-10-28 拜耳作物科学股份公司 包含生物防治剂和杀真菌剂的组合物
PT2925142T (pt) 2012-12-03 2018-05-18 Bayer Cropscience Ag Composição que compreende um agente de controlo biológico e um insecticida
EP2925144A2 (en) 2012-12-03 2015-10-07 Bayer CropScience AG Composition comprising a biological control agent and an insecticide
WO2014086753A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
JP2015535532A (ja) 2012-12-03 2015-12-14 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 生物農薬および殺菌剤を含む組成物
EP3318129B1 (en) 2012-12-03 2019-11-06 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Method for pest control by applying a combination of paecilomyces lilacinus and fluopyram
MX2015006631A (es) 2012-12-03 2015-08-05 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un insecticida.
AR093909A1 (es) 2012-12-12 2015-06-24 Bayer Cropscience Ag Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
BR112015014307A2 (pt) 2012-12-19 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag difluorometil-nicotínico- tetrahidronaftil carboxamidas
KR20150119031A (ko) 2013-02-11 2015-10-23 바이엘 크롭사이언스 엘피 스트렙토미세스-기반 생물학적 방제제 및 살곤충제를 포함하는 조성물
MX2015010260A (es) 2013-02-11 2016-04-04 Bayer Cropscience Lp Composicion que comprenden un agente de control biologico y un fungicida.
MX2015010259A (es) 2013-02-11 2015-10-29 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden un agente de control biologico basado en la cepa nrrl b-50550 de streptomyces microflavus y otro agente de control biologico.
US8907159B1 (en) 2013-02-13 2014-12-09 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DM
US8921672B1 (en) 2013-02-13 2014-12-30 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DS
US8916744B1 (en) 2013-02-13 2014-12-23 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DV
RU2723717C2 (ru) 2013-03-07 2020-06-17 Атеникс Корп. Гены токсинов и способы их применения
US9554573B2 (en) 2013-04-19 2017-01-31 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Binary insecticidal or pesticidal mixture
BR112015026235A2 (pt) 2013-04-19 2017-10-10 Bayer Cropscience Ag método para melhorar a utilização do potencial de produção de plantas transgênicas envolvendo a aplicação de um derivado de ftaldiamida
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
US9770022B2 (en) 2013-06-26 2017-09-26 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-N-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
CN105611827A (zh) 2013-10-09 2016-05-25 孟山都技术公司 转基因玉米事件mon87403和其检测方法
AR097995A1 (es) 2013-10-14 2016-04-27 Syngenta Participations Ag Método para sembrar filas de cultivos
CN105793243A (zh) 2013-12-05 2016-07-20 拜耳作物科学股份公司 N-环烷基-n-{[2-(1-取代的环烷基)苯基]亚甲基}-(硫代)甲酰胺衍生物
US10071967B2 (en) 2013-12-05 2018-09-11 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-N-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
EP2885970A1 (en) 2013-12-21 2015-06-24 Bayer CropScience AG Fungicide compositions comprising compound I, at least one succinate dehydrogenase (SDH) inhibitor and at least one triazole fungicide
MX2016011745A (es) 2014-03-11 2017-09-01 Bayer Cropscience Lp Variantes de hppd y metodos de uso.
WO2015160620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide
WO2015160618A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent
WO2015160619A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide
PT3837970T (pt) 2014-10-15 2023-09-12 Monsanto Technology Llc Genes de tolerância a herbicidas e métodos de uso dos mesmos
WO2016075327A2 (en) 2014-11-14 2016-05-19 Basf Plant Science Company Gmbh Production of pufas in plants
CN104745708A (zh) * 2015-04-02 2015-07-01 湖南省食品安全生产工程技术研究中心 一种转基因玉米nk603品系的lamp检测试剂盒及检测方法
EP3283476B1 (en) 2015-04-13 2019-08-14 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-(biheterocyclyethylene)-(thio)carboxamide derivatives
CN104878095B (zh) * 2015-04-30 2018-10-26 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9858的核酸序列及其检测方法
CN104830845B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9878的核酸序列及其检测方法
CN104830846B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9898的核酸序列及其检测方法
CN104830847B (zh) * 2015-04-30 2019-01-11 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9936的核酸序列及其检测方法
CN104878090B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9877的核酸序列及其检测方法
CN104846084B (zh) * 2015-04-30 2019-02-01 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9927的核酸序列及其检测方法
CN104878096B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9868的核酸序列及其检测方法
CN104878094B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9888的核酸序列及其检测方法
EP3097782A1 (en) 2015-05-29 2016-11-30 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents
US10829779B2 (en) 2015-07-15 2020-11-10 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Use of elongator genes to improve plant disease resistance
EA201890696A1 (ru) 2015-09-11 2018-09-28 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Варианты гфпд и способы применения
CN105331725B (zh) * 2015-11-30 2018-04-24 中国农业大学 转maroACC基因抗除草剂玉米CC-2的侧翼序列及其应用
BR112019001764A2 (pt) 2016-07-29 2019-05-07 Bayer Cropscience Ag combinações de compostos ativos e métodos para proteção de material de propagação de plantas
BR112019010476A2 (pt) 2016-11-23 2019-09-10 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC molécula de ácido nucleico recombinante, vetor, célula hospedeira, planta transgênica, semente transgênica, polipeptídeo recombinante, composição, método para controlar uma população de pragas, para matar pragas, para produzir um polipeptídeo, planta ou célula vegetal, método para proteger uma planta contra uma praga, para aumentar o rendimento em uma planta, uso e produto primário
BR112019011293A2 (pt) 2016-12-19 2019-10-08 Basf Se compostos de fórmula i, intermediários, composição agroquímica, uso e método para combater fungos nocivos fitopatogênicos
CN110431234B (zh) 2017-01-18 2024-04-16 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司 Bp005毒素基因及其使用方法
US11286498B2 (en) 2017-01-18 2022-03-29 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Use of BP005 for the control of plant pathogens
US11425910B2 (en) 2017-02-21 2022-08-30 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
BR112019018056A2 (pt) 2017-03-07 2020-08-11 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC molécula de ácido nucleico recombinante, cassete de expressão, célula hospedeira, plantas, sementes transgênicas, polipeptídeo recombinante, métodos para conferir tolerância e para controlar ervas daninhas, produto de utilidade e uso da sequência de nucleotídeos
AU2018247768A1 (en) 2017-04-07 2019-10-03 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018188962A1 (en) 2017-04-11 2018-10-18 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
EP3612029A1 (en) 2017-04-21 2020-02-26 Bayer CropScience LP Method of improving crop safety
JP7160487B2 (ja) 2017-05-04 2022-10-25 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 植物病原菌を駆除するための置換５－（ハロアルキル）－５－ヒドロキシ－イソオキサゾール
WO2018202491A1 (en) 2017-05-04 2018-11-08 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018219797A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018234139A1 (en) 2017-06-19 2018-12-27 Basf Se 2-[[5-(trifluoromethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]aryloxy](thio)acetamides for combating phytopathogenic fungi
WO2019025250A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR COMBATING PHYTOPATHOGENIC FUNGI
WO2019038042A1 (en) 2017-08-21 2019-02-28 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR THE CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI
BR112020004441B1 (pt) 2017-09-18 2024-01-16 Basf Se Compostos da fórmula i, composição agroquímica, semente revestida, uso de compostos e método não-terapêutico de combate de fungos
WO2019068811A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Bayer Aktiengesellschaft COMPOSITIONS COMPRISING FLUOPYRAM AND TIOXAZAFENE
US20210032651A1 (en) 2017-10-24 2021-02-04 Basf Se Improvement of herbicide tolerance to hppd inhibitors by down-regulation of putative 4-hydroxyphenylpyruvate reductases in soybean
WO2019083810A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE FOR 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE DIOXYGENASE (HPPD) INHIBITORS BY NEGATIVE REGULATION OF HPPD EXPRESSION IN SOYBEANS
US11147275B2 (en) 2017-11-23 2021-10-19 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019121143A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Basf Se Substituted cyclopropyl derivatives
WO2019137995A1 (en) 2018-01-11 2019-07-18 Basf Se Novel pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2019145221A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 BASF Agro B.V. New agrochemical formulations
WO2019154665A1 (en) 2018-02-07 2019-08-15 Basf Se New pyridine carboxamides
US20200354321A1 (en) 2018-02-07 2020-11-12 Basf Se New pyridine carboxamides
US11917995B2 (en) 2018-03-01 2024-03-05 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions of mefentrifluconazole
WO2019219464A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019224092A1 (en) 2018-05-22 2019-11-28 Basf Se Pesticidally active c15-derivatives of ginkgolides
US11091768B2 (en) 2018-05-23 2021-08-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Fruit-specific promoters
EP3802521A1 (de) 2018-06-04 2021-04-14 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame bizyklische benzoylpyrazole
EP3613736A1 (en) 2018-08-22 2020-02-26 Basf Se Substituted glutarimide derivatives
EP3628158A1 (en) 2018-09-28 2020-04-01 Basf Se Pesticidal mixture comprising a mesoionic compound and a biopesticide
WO2020083662A1 (en) 2018-10-23 2020-04-30 Basf Se Tricyclic pesticidal compounds
EP3643705A1 (en) 2018-10-24 2020-04-29 Basf Se Pesticidal compounds
EP3670501A1 (en) 2018-12-17 2020-06-24 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
CA3122208A1 (en) 2019-01-11 2020-07-16 Basf Se Crystalline forms of 1-(1,2-dimethylpropyl)-n-ethyl-5-methyl-n-pyridazin-4-yl-pyrazole-4-carboxamide
EP3696177A1 (en) 2019-02-12 2020-08-19 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
WO2020231751A1 (en) 2019-05-10 2020-11-19 Bayer Cropscience Lp Active compound combinations
CN113923987B (zh) 2019-05-29 2024-10-01 巴斯夫欧洲公司 用于防除动物害虫的介离子咪唑鎓化合物和衍生物
EP3769623A1 (en) 2019-07-22 2021-01-27 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
WO2020244970A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se New carbocyclic pyridine carboxamides
WO2020244969A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se Pyridine derivatives and their use as fungicides
AU2020286573A1 (en) 2019-06-06 2021-12-23 Basf Se Fungicidal n-(pyrid-3-yl)carboxamides
EP3766879A1 (en) 2019-07-19 2021-01-20 Basf Se Pesticidal pyrazole derivatives
MX2022000950A (es) 2019-07-22 2022-02-14 Bayer Ag 5-amino pirazoles y triazoles como plaguicidas.
CN118561817A (zh) 2019-07-23 2024-08-30 拜耳公司 作为农药的新的杂芳基-三唑化合物
BR112022000942A2 (pt) 2019-07-23 2022-05-17 Bayer Ag Compostos de heteroaril-triazol como pesticidas
CA3149206A1 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Bayer Cropscience Lp Method of improving cold stress tolerance and crop safety
EP3701796A1 (en) 2019-08-08 2020-09-02 Bayer AG Active compound combinations
WO2021058659A1 (en) 2019-09-26 2021-04-01 Bayer Aktiengesellschaft Rnai-mediated pest control
CA3156302A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Bayer Aktiengesellschaft COMBINATIONS OF ACTIVE COMPOUNDS INCLUDING FATTY ACIDS
WO2021063736A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se Bicyclic pyridine derivatives
WO2021063735A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se New bicyclic pyridine derivatives
UY38911A (es) 2019-10-09 2021-05-31 Bayer Ag Compuestos de heteroarilo-triazol como pesticidas, formulaciones, usos y métodos de uso de los mismos
AR120176A1 (es) 2019-10-09 2022-02-02 Bayer Ag Compuestos de heteroarilo-triazol como pesticidas
US12241075B2 (en) 2019-10-14 2025-03-04 Basf Agricultural Solutions Us Llc Insect resistant genes and methods of use
US20220380318A1 (en) 2019-11-07 2022-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Substituted sulfonyl amides for controlling animal pests
WO2021097162A1 (en) 2019-11-13 2021-05-20 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with paenibacillus
WO2021099271A1 (en) 2019-11-18 2021-05-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
TW202134226A (zh) 2019-11-18 2021-09-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
TW202136248A (zh) 2019-11-25 2021-10-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
WO2021155084A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Pairwise Plants Services, Inc. Suppression of shade avoidance response in plants
PY2112437A (es) 2020-02-18 2022-08-16 Bayer Ag Nuevos compuestos de heteroaril-triazol como pesticidas
EP3708565A1 (en) 2020-03-04 2020-09-16 Bayer AG Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides
WO2021209490A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides
WO2021211926A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
US20230212163A1 (en) 2020-04-21 2023-07-06 Bayer Aktiengesellschaft 2-(het)aryl-substituted condensed heterocyclic derivatives as pest control agents
EP3903583A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iii
EP3903584A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iv
WO2021219513A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Basf Se Pesticidal compounds
EP3903581A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors i
EP3903582A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ii
EP4146628A1 (en) 2020-05-06 2023-03-15 Bayer Aktiengesellschaft Pyridine (thio)amides as fungicidal compounds
TWI891782B (zh) 2020-05-06 2025-08-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
WO2021228734A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Bayer Aktiengesellschaft Triazine and pyrimidine (thio)amides as fungicidal compounds
EP3909950A1 (en) 2020-05-13 2021-11-17 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4153566A1 (en) 2020-05-19 2023-03-29 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Azabicyclic(thio)amides as fungicidal compounds
MX2022015107A (es) 2020-06-02 2023-03-01 Pairwise Plants Services Inc Metodos para controlar el tama?o del meristema para mejorar los cultivos.
US12565489B2 (en) 2020-06-04 2026-03-03 Bayer Aktiengesellschaft Heterocyclyl pyrimidines and triazines as novel fungicides
EP3945089A1 (en) 2020-07-31 2022-02-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors v
WO2021249800A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
CA3186659A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft Azabicyclyl-substituted heterocycles as fungicides
WO2021257775A1 (en) 2020-06-17 2021-12-23 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
US20230292747A1 (en) 2020-06-18 2023-09-21 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
CN116157017A (zh) 2020-06-18 2023-05-23 拜耳公司 作为杀菌剂用于作物保护的3-(哒嗪-4-基)-5,6-二氢-4h-1,2,4-噁二嗪衍生物
WO2021255089A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazole pyrimidines and 1,3,4-oxadiazole pyridines as fungicides
UY39276A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones.
WO2021255091A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazoles and their derivatives as fungicides
UY39275A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos
EP3929189A1 (en) 2020-06-25 2021-12-29 Bayer Animal Health GmbH Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides
KR20230039665A (ko) 2020-07-02 2023-03-21 바이엘 악티엔게젤샤프트 해충 방제제로서의 헤테로사이클 유도체
CN111826387A (zh) * 2020-07-07 2020-10-27 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 一种转基因玉米品系鉴定阳性质粒分子
EP3960727A1 (en) 2020-08-28 2022-03-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors vi
EP3939961A1 (en) 2020-07-16 2022-01-19 Basf Se Strobilurin type compounds and their use for combating phytopathogenic fungi
WO2022017836A1 (en) 2020-07-20 2022-01-27 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions comprising (r)-2-[4-(4-chlorophenoxy)-2-(trifluoromethyl)phenyl]-1- (1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol
US12529062B2 (en) 2020-07-31 2026-01-20 Inari Agriculture Technology, Inc. INIR12 transgenic maize
US20230313221A1 (en) * 2020-07-31 2023-10-05 Inari Agriculture Technology, Inc. Expedited breeding of transgenic crop plants by genome editing
EP3970494A1 (en) 2020-09-21 2022-03-23 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors viii
WO2022033991A1 (de) 2020-08-13 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022053453A1 (de) 2020-09-09 2022-03-17 Bayer Aktiengesellschaft Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022058327A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents
EP3974414A1 (de) 2020-09-25 2022-03-30 Bayer AG 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022089969A1 (en) 2020-10-27 2022-05-05 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
CN112266419B (zh) * 2020-10-29 2023-02-03 中国科学院微生物研究所 一种人工合成的抗除草剂蛋白
WO2022090071A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Use of mefenpyr-diethyl for controlling phytopathogenic fungi
WO2022090069A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Compositions comprising mefenpyr-diethyl
WO2022106304A1 (en) 2020-11-23 2022-05-27 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
WO2022128524A1 (en) 2020-12-14 2022-06-23 Basf Se Sulfoximine pesticides
EP3915971A1 (en) 2020-12-16 2021-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides
WO2022129196A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
WO2022129190A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
JP2023554063A (ja) 2020-12-18 2023-12-26 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 作物における耐性植物病原性真菌を防除するためのｄｈｏｄｈ阻害剤の使用
WO2022129188A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides
EP4036083A1 (de) 2021-02-02 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4043444A1 (en) 2021-02-11 2022-08-17 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
EP4291641A1 (en) 2021-02-11 2023-12-20 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying cytokinin oxidase levels in plants
US12365910B2 (en) 2021-02-25 2025-07-22 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture in plants
WO2022207496A1 (en) 2021-03-30 2022-10-06 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
BR112023019400A2 (pt) 2021-03-30 2023-12-05 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
EP4333616A1 (en) 2021-05-03 2024-03-13 Basf Se Additives for enhancing the pesticidal effectiveness of pesticidal microorganisms
WO2022233777A1 (en) 2021-05-06 2022-11-10 Bayer Aktiengesellschaft Alkylamide substituted, annulated imidazoles and use thereof as insecticides
EP4337661A1 (de) 2021-05-12 2024-03-20 Bayer Aktiengesellschaft 2-(het)aryl-substituierte kondensierte heterocyclen-derivate als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4091451A1 (en) 2021-05-17 2022-11-23 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
BR112023023989A2 (pt) 2021-05-18 2024-01-30 Basf Se Compostos, composição, método para combater fungos fitopatogênicos e semente
EP4341258B1 (en) 2021-05-18 2025-12-03 Basf Se New substituted pyridines as fungicides
CN117355518A (zh) 2021-05-18 2024-01-05 巴斯夫欧洲公司 用作杀真菌剂的新型取代吡啶类
US20220411813A1 (en) 2021-06-17 2022-12-29 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of growth regulating factor family transcription factors in soybean
UY39827A (es) 2021-06-24 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
US12529063B2 (en) 2021-07-01 2026-01-20 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing root system development
EP4119547A1 (en) 2021-07-12 2023-01-18 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4380926A1 (en) 2021-08-02 2024-06-12 Basf Se (3-quinolyl)-quinazoline
US20240351995A1 (en) 2021-08-02 2024-10-24 Basf Se (3-pirydyl)-quinazoline
US12365911B2 (en) 2021-08-12 2025-07-22 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
JP2024529148A (ja) 2021-08-13 2024-08-01 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 活性化合物組合せおよびこれらを含む抗真菌剤組成物
PY2270221A (es) 2021-08-17 2023-03-20 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas
EP4140986A1 (en) 2021-08-23 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
MX2024002386A (es) 2021-08-25 2024-03-14 Bayer Ag Nuevos compuestos de pirazinil-triazol como pesticidas.
EP4140995A1 (en) 2021-08-27 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
EP4395531A1 (en) 2021-08-30 2024-07-10 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement
EP4144739A1 (de) 2021-09-02 2023-03-08 Bayer Aktiengesellschaft Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel
AR126938A1 (es) 2021-09-02 2023-11-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento
EP4151631A1 (en) 2021-09-20 2023-03-22 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
CA3232804A1 (en) 2021-09-21 2023-03-30 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for reducing pod shatter in canola
US20230108968A1 (en) 2021-10-04 2023-04-06 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
AR127300A1 (es) 2021-10-07 2024-01-10 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de la flor y el rendimiento de semillas
WO2023072671A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ix
WO2023072670A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors x
CN118541353A (zh) 2021-11-03 2024-08-23 拜耳公司 作为杀真菌化合物的双(杂)芳基硫醚(硫代)酰胺
WO2023099445A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds
EP4194453A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
AR127904A1 (es) 2021-12-09 2024-03-06 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas
EP4198033A1 (en) 2021-12-14 2023-06-21 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4198023A1 (en) 2021-12-16 2023-06-21 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
UY40132A (es) 2022-01-31 2023-08-31 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas
CN119012913A (zh) 2022-02-01 2024-11-22 环球化学股份有限公司 控制害虫的方法和组合物
CN118984651A (zh) 2022-02-01 2024-11-19 环球化学股份有限公司 控制玉米上害虫的方法和组合物
US20250197358A1 (en) 2022-02-17 2025-06-19 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
PY2314419A (es) 2022-03-02 2023-09-25 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes del receptor de brasinoesteroides para mejorar rasgos de rendimiento
EP4238971A1 (en) 2022-03-02 2023-09-06 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
WO2023192838A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering rosaceae plants with improved characteristics
AU2023251095A1 (en) 2022-04-07 2024-10-17 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight
EP4511387A1 (en) 2022-04-21 2025-02-26 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
UY40250A (es) 2022-05-02 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar el rendimiento y la resistencia a enfermedades
JP2025516324A (ja) 2022-05-03 2025-05-27 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 望ましくない微生物を防除するための（５ｓ）－３－［３－（３－クロロ－２－フルオロフェノキシ）－６－メチルピリダジン－４－イル］－５－（２－クロロ－４－メチルベンジル）－５，６－ジヒドロ－４ｈ－１，２，４－オキサジアジンの使用
CN119522219A (zh) 2022-05-03 2025-02-25 拜耳公司 (5s)-3-[3-(3-氯-2-氟苯氧基)-6-甲基哒嗪-4-基]-5-(2-氯-4-甲基苄基)-5,6-二氢-4h-1,2,4-噁二嗪的晶型
UY40255A (es) 2022-05-05 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectur radicular y/o mejorar los rangos de rendimient
UY40326A (es) 2022-06-27 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar el escape a la sombra en plantas
US20240002873A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
CN119487055A (zh) 2022-06-29 2025-02-18 成对植物服务股份有限公司 用于控制分生组织大小以进行作物改良的方法和组合物
CA3263381A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Basf Se PYRAZOLO PESTICIDE COMPOUNDS
WO2024030984A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
CA3264244A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Pairwise Plants Services, Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR REGULATING MERISTEME SIZE FOR CROP IMPROVEMENT
EP4584282A1 (en) 2022-09-08 2025-07-16 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
EP4342885A1 (en) 2022-09-20 2024-03-27 Basf Se N-(3-(aminomethyl)-phenyl)-5-(4-phenyl)-5-(trifluoromethyl)-4,5-dihydroisoxazol-3-amine derivatives and similar compounds as pesticides
WO2024068520A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068518A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4295688A1 (en) 2022-09-28 2023-12-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combination
WO2024068517A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068519A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4361126A1 (en) 2022-10-24 2024-05-01 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xv
EP4619399A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se New substituted tetrahydrobenzoxazepine
CN120202194A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的四氢苯并二氮杂䓬
CN120202196A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的苯并二氮杂䓬类
WO2024104815A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Basf Se Substituted benzodiazepines as fungicides
EP4385326A1 (en) 2022-12-15 2024-06-19 Kimitec Biogorup Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants
AU2023408197A1 (en) 2022-12-19 2025-06-26 Basf Agricultural Solutions Us Llc Insect toxin genes and methods for their use
EP4389210A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Basf Se Heteroaryl compounds for the control of invertebrate pests
EP4662210A1 (en) 2023-02-08 2025-12-17 Basf Se New substituted quinoline compounds for combatitng phytopathogenic fungi
EP4665747A1 (en) 2023-02-16 2025-12-24 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants
UY40661A (es) 2023-03-02 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la evitación de la sombra en plantas
UY40664A (es) 2023-03-09 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de la vía de señalización de brasinoesteroide para mejorar rasgos de rendimien
KR20250156732A (ko) 2023-03-17 2025-11-03 바스프 에스이 식물병원성 진균을 퇴치하기 위한 치환된 피리딜/피라지딜 디히드로벤조티아제핀 화합물
EP4455137A1 (en) 2023-04-24 2024-10-30 Basf Se Pyrimidine compounds for the control of invertebrate pests
AU2023445097A1 (en) 2023-04-26 2025-11-06 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xvi
UY40746A (es) 2023-05-18 2024-12-13 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar las características de rendimiento de las plantas
EP4467535A1 (en) 2023-05-25 2024-11-27 Basf Se Lactam pesticidal compounds
CN121464139A (zh) 2023-07-05 2026-02-03 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的喹啉基/喹喔啉基二氢吡咯并三嗪化合物
WO2025008447A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2025008446A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2025008227A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Basf Se Substituted pyridyl/pyrazinyl dihydropyrrolotriazine compounds for combatting phytopath-ogenic fungi
EP4488269A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488273A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488270A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
PY2455894A (es) 2023-07-18 2025-03-28 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectura radicular en plantas
AR133310A1 (es) 2023-07-27 2025-09-17 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar rasgos de rendimiento de las plantas
WO2025026738A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Bayer Aktiengesellschaft 6-[5-(ethylsulfonyl)-1-methyl-1h-imidazol-4-yl]-7-methyl-3-(pentafluoroethyl)-7h-imidazo[4,5-c]pyridazine derivatives as pesticides
KR20260042262A (ko) 2023-08-01 2026-03-30 글로바켐 엔브이 살충 혼합물
EP4501112A1 (en) 2023-08-01 2025-02-05 Globachem NV Plant defense elicitors
CN121646591A (zh) 2023-08-09 2026-03-10 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的新型取代的苯并噁嗪吡啶甲腈化合物
WO2025031842A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazepine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025031668A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Bayer Aktiengesellschaft Azaheterobiaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
CN121693501A (zh) 2023-08-09 2026-03-17 拜耳公司 作为新的杀菌剂的哒嗪-4-基噁二嗪
WO2025064734A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering black raspberry plants with improved characteristics
WO2025068226A2 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur and selected terpenes
AU2024358155A1 (en) 2023-10-09 2026-04-16 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted quinazolyl quinolines
AU2024358203A1 (en) 2023-10-09 2026-04-16 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted pyridines
WO2025078128A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-3-one-4-yloxadiazines as novel fungicides
WO2025080600A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving crop yield traits
WO2025098875A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098876A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098874A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having fungicidal/insecticidal/acaricidal properties
WO2025131902A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur, selected terpenes and phosphites.
EP4574819A1 (en) 2023-12-22 2025-06-25 Basf Se Diazinone compounds for the control of invertebrate pests
WO2025168620A1 (en) 2024-02-07 2025-08-14 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
WO2025178902A1 (en) 2024-02-22 2025-08-28 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
WO2025180964A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Basf Se New substituted benzoxazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025186065A1 (en) 2024-03-05 2025-09-12 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted (aza)quinoxaline derivatives as pesticides
WO2025190927A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025211272A1 (en) 2024-04-04 2025-10-09 Nihon Nohyaku Co., Ltd. Pesticidal mixtures comprising an ethylsulfone compound
EP4640052A1 (en) 2024-04-24 2025-10-29 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
WO2025223904A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
EP4652842A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests, diseases and weeds in plants
EP4652843A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests in plants
WO2025257122A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025257121A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2026002763A1 (en) 2024-06-26 2026-01-02 Basf Se Pesticidal mixtures and applications of beauveria bassiana and dimpropyridaz
WO2026012814A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Basf Se Compositions and methods to enhance crop yield and plant health
WO2026021909A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021911A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021912A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021910A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026027375A1 (de) 2024-07-29 2026-02-05 Bayer Aktiengesellschaft Hydroxy-dihydropyridinon carboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2026027723A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Syngenta Crop Protection Ag Herbicide resistant plants
WO2026037853A1 (en) 2024-08-14 2026-02-19 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
WO2026041702A1 (en) 2024-08-21 2026-02-26 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
WO2026057375A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Basf Se Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide
EP4710766A1 (en) 2024-09-11 2026-03-18 Basf Se Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide
EP4721566A1 (en) 2024-10-07 2026-04-08 Kimitec Biogroup S.L Microbial composition based on bacillus infantis strain for agricultural use
WO2026082481A1 (en) 2024-10-17 2026-04-23 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2026082514A1 (en) 2024-10-18 2026-04-23 Basf Se Pesticidal mixtures and applications of dimpropyridaz

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US5164316A (en) 1987-01-13 1992-11-17 The University Of British Columbia DNA construct for enhancing the efficiency of transcription
US5641876A (en) 1990-01-05 1997-06-24 Cornell Research Foundation, Inc. Rice actin gene and promoter
US5633435A (en) 1990-08-31 1997-05-27 Monsanto Company Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases
US5593874A (en) 1992-03-19 1997-01-14 Monsanto Company Enhanced expression in plants
US5362865A (en) 1993-09-02 1994-11-08 Monsanto Company Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences
US5853973A (en) * 1995-04-20 1998-12-29 American Cyanamid Company Structure based designed herbicide resistant products
AR012335A1 (es) * 1997-04-03 2000-10-18 Dekalb Genetics Corp Planta de maiz transgenica fertil y metodo para prepararla, dichas plantas endogamica y cruzada resistentes al glifosato, metodos para cultivar eincrementar el rendimiento de maiz, producir forraje, alimento para seres humanos, almidon, y criar plantas.
US6040497A (en) * 1997-04-03 2000-03-21 Dekalb Genetics Corporation Glyphosate resistant maize lines
US5948956A (en) 1997-10-16 1999-09-07 Oms Investments, Inc. Transgenic plants and method for node segment transformation
EP1135511B1 (en) * 1998-11-17 2009-06-17 Monsanto Technology LLC Phosphonate metabolizing plants
BRPI0100752B1 (pt) * 2000-06-22 2015-10-13 Monsanto Co moléculas e pares de moléculas de dna, processos para detectar molécula de dna e para criar um traço tolerante a glifosato em plantas de milho, bem como kit de detecção de dna
CA2420406C (en) * 2000-09-29 2014-12-09 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant wheat plant 33391 and compositions and methods for detection thereof
AU2003299579B2 (en) * 2002-12-05 2008-09-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CY1106109T1 (el) 2011-06-08
US20140304849A1 (en) 2014-10-09
CN101186918A (zh) 2008-05-28
US20100017902A1 (en) 2010-01-21
HUP0102569A2 (hu) 2003-08-28
UY26788A1 (es) 2001-10-25
AR031665A1 (es) 2003-10-01
SI1582592T1 (sl) 2010-08-31
CZ305949B6 (cs) 2016-05-18
CY1110083T1 (el) 2015-01-14
ES2261330T3 (es) 2006-11-16
EP2210951B1 (en) 2016-01-06
YU43701A (sh) 2003-12-31
HU230814B1 (hu) 2018-06-28
ATE323168T1 (de) 2006-04-15
EP2210951A3 (en) 2011-01-05
HU0102569D0 (en) 2001-08-28
EP1167531A1 (en) 2002-01-02
BG65315B1 (bg) 2008-01-31
US20120329654A1 (en) 2012-12-27
US8273959B2 (en) 2012-09-25
CA2349841A1 (en) 2001-12-22
CN1332246A (zh) 2002-01-23
EP2210951A2 (en) 2010-07-28
CN100350043C (zh) 2007-11-21
MXPA01006407A (es) 2004-05-11
US7582434B2 (en) 2009-09-01
SI1167531T1 (sl) 2006-10-31
ES2343252T3 (es) 2010-07-27
SI2210951T1 (sl) 2016-04-29
US20070056056A1 (en) 2007-03-08
HU0800015D0 (en) 2008-03-28
EP1582592A1 (en) 2005-10-05
ES2564464T3 (es) 2016-03-22
DK1582592T3 (da) 2010-08-16
CZ299722B6 (cs) 2008-10-29
US8722969B2 (en) 2014-05-13
BRPI0100752B1 (pt) 2015-10-13
CZ20012203A3 (cs) 2002-02-13
PL199928B1 (pl) 2008-11-28
DK1167531T3 (da) 2006-08-14
US20020013960A1 (en) 2002-01-31
US9701980B2 (en) 2017-07-11
AR066163A2 (es) 2009-07-29
EP1582592B1 (en) 2010-05-05
ID30575A (id) 2001-12-27
BR0100752A (pt) 2002-02-13
AR053231A2 (es) 2007-04-25
US20040139493A1 (en) 2004-07-15
US20070292854A1 (en) 2007-12-20
DE60142092D1 (de) 2010-06-17
DE60118660D1 (de) 2006-05-24
BR122013026754B1 (pt) 2018-02-27
CA2349841C (en) 2012-12-11
PL348225A1 (en) 2002-01-02
EP1167531B1 (en) 2006-04-12
AR065690A2 (es) 2009-06-24
PT1167531E (pt) 2006-07-31
ATE466945T1 (de) 2010-05-15
US6825400B2 (en) 2004-11-30
PT1582592E (pt) 2010-06-16
DE60118660T2 (de) 2007-03-29
DK2210951T3 (en) 2016-03-21
HU226193B1 (en) 2008-06-30
US7193071B2 (en) 2007-03-20
BG105637A (en) 2002-04-30
US20170327838A1 (en) 2017-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS49990B (sr) Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju
EP2298921B1 (en) Cotton event mon 88913 and compositions and methods for detection thereof
JP4903051B2 (ja) トウモロコシ植物ｍｏｎ８８０１７および組成物ならびにその検出方法
EP1869187A2 (en) Elite event a2704-12 and methods and kits for identifying such event in biological samples
CN120574986A (zh) 转基因大豆事件lp689-2及其检测方法
CN120464785B (zh) 转基因玉米事件lp1141-2及其检测方法
CN120591459B (zh) 转基因大豆事件lp689-1及其检测方法
CN120464784B (zh) 转基因玉米事件lp1141-1及其检测方法
ME00840B (me) Dnk sekvence vezane za kukuruzni transformant pv-zmgt 32 (nk 603) i preparati i metode za njegovu detekciju
HK1151558B (en) Cotton event mon 88913 and compositions and methods for detection thereof