DD144772A5

DD144772A5 - Verfahren zur herstellung von thiazol-verbindungen

Info

Publication number: DD144772A5
Application number: DD78214239A
Authority: DD
Inventors: Takao Takaya; Hisashi Takasugi; Kiyoshi Tsuji; Toshiyuki Chiba
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co
Priority date: 1977-03-14
Filing date: 1978-03-14
Publication date: 1980-11-05
Also published as: JPH03135971A; AR226423A1; DE2810922A1; JPH03115288A; CS217961B2; YU274582A; JPS53137988A; SE438677B; ES467828A1; JPS6434974A; FR2383951B1; ES491183A0; SE8304670L; US4604456A; ES8103753A1; YU274682A; SE8304671D0; NL8501475A; ES8101077A1; PT67773A

Description

Die Erfindung betrifft neue Verfahren zur Herstellung von neuen Thiazoi-Verbindungen, die für die Herstellung von neuen Cephem- und Cepham-Verbindungen erforderlich sind, Vielehe antimikrobielle Aktivitäten aufweisen*

Charakteristik der bekannten Lösungen:

Es sind bereits Verfahren zur Herstellung von zahlreichen Cephein- und Cepham-Verbindungen bekannt, die als Wirkstoffe in Arzneimitteln verwendet werden können. Die antimikrobielle Wirksamkeit-der nach diesen bekannten Verfahren erhaltenen Verbindungen ist jedoch noch nicht optimal, so daß man ständig auf der Suche ist nach Verfahren zur Herstellung von neuen Zwischenprodukten, aus denen neue Derivate dieser Verbindungen, die eine noch höhere antimikrobielle Aktivität aufweisen, hergestellt werden können.

Ziel der Erfindung ist es, Verfahren zur Herstellung von neuen Thiazoi-Verbindungen zu .entwickeln, aus denen in vorteilhafter Weise neue Cephem- und Cepham-Verbindungen mit einer noch

höheren antimikrobiellen Aktivität und/oder weniger Nebenwirkungen hergestellt werden können.

Darlegung._de_s_Wesens. der Erfindung^

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Herstellung von neuen Thiazol-Verbindungen zu entwickeln, aus denen in vorteilhafter Weise neue Cephem- und Cepham-Verbindungen hergestellt werden können, die eine noch höhere antiinikrobielle Aktivität als die bisher bekannten Cephem- und Cepham-Verbindungen aufweisen und/oder weniger Nebenwirkungen bei ihrer prophylaktischen und therapeutischen Verwendung-.._ besitzen«.

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung der neuen Thiazol-Verbindungen

I ο

0 - R

.worin bedeuten:

R' niederes Alkyl mit 2 bis 8 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl, niederes Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, niederes Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, Balogen(niedrig)alkyl, •Carboxy(niedrig)alkyl oder niederes'Aikoxycarbonyl(niedrig)-alkyl,

R Amino oder geschütztes Amino und

R Wasserstoff oder niederes Alkyl, ·

mit der Maßgabe, daß, . \ wenn R Äthyl, Isopropyl oder Allyl bedeutet, dann R Amino oder unsubstituiertes niederes Alkanamido und R Wasserstoff darstellen, und von deren Salzen^

gekennzeichnet dadurch, daß man 1.) i) eine Verbindung der Formel

X - CH₀CO - C - COOR⁸ 2 „ a

worin X Halogen und R niederes Alkyl bedeuten, mit einem Verätherungsmittel umsetzt und ii) die dabei erhaltene Verbindung der Formel

X- CH₉CO-C-COOH⁸ 2 μ a

• N '

¹ 2

• 0 -· IT

2 8

worin X, R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen

haben,

mit einer Thiobarnstoffverbindung der Formel umsetzt

R⁶ - C - NH₉

It . Λ .

worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat, unter Bildung einer Verbindung der Formel

r. - c.oou*

worin R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, " ·

2.) eine Verbindung der Formel ' . · .

, N^- C - COOR⁸ ...

OH

.worin R Amino oder geschütztes Amino und R die oben genannten Rsste ' bedeuten, . .

mit einem Verätherungsmittel umsetzt unter Bildung einer

Verbindung der Formel μ ο

.' ' k⁶ ^f ξ - COOR⁸

N ' Ί .

0 - R² ·

v.'orin R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

3.) eine Verbindung der Formel .

, . N-_r-C - COOR⁸

v/orin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, !. ' .

mit einem Hydroxylaminde-rivat der Formel umsetzt

.2

Viorin R die oben angegebenen Bedeutungen hat, unter Dildung einer Verbindung der Formel

/ ' ^-C- COOR⁸ ·

J A

.2ό 8 .

Viorin R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen

' haben,

4») eine Verbindung der Formel

R⁶ <

- coor|

M ·

R *) A

worin R niederes Alkyl bedeutet und R und R jeweils die oben

ongegebenen Bedeutungen haben,

einer Umwandlungsreaktion der veresterten Carboxygruppe für R in die freie Carboxygruppe unterwirft unter Bildung einer Verbindung der Formel · .

C- COOH

Vf or in R" und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben_f oder ·

. 5.) eine Verbindung der Formel

' · -N

* 2

6 ^C "· ^R 2 8

worin R geschütztes Amino bedeutet und R und R jeweils die

" oben angegebenen Bedeutungen haben,

einer Reaktion zur Eliminierung der Schutzgruppe in der ge~

schützten Aminogx-oppe für R unterwirft unter Bildung einer

Verbindung der Formel _

; C - COOR^B

I-κ²

.2

Worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben»

Aus den Thiazolverbindungen sind u.a. folgende neue Cephem- und Cepham-Verbindungen herstellbar:

*

-

worin bedeuten:

R¹ Thiazolyl der Formel

6 · ^s worin R Amino oder geschütztes Amino darstellt,

A eine Gruppe der Formel -C-

Ο-Ι

ρ

worin R die obige Bedeutung hat,

R Y/asserstoff oder niederes Alkyl,

R Wasserstoff, Halogen- niederes Alkyl oder eine Gruppe der

7 7

Formel -JO-R , worin R Wasserstoff, niederes Alkyl oder

Acyl darstellt,

5 '

R^ Carboxy oder funktionell modifiziertes Carboxy und

die gestrichelte Linie 3-Cephem- und Cepham-Kerne bzw. - Ringe einschließlich, bevorzugt

mit der Maßgabe, daß

i) R Wasserstoff, Halogen oder eine Gruppe der Formel

7 7 -Q-R", worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat,

bedeutet, wenn R .Wasserstoff darstellt,

ii) R niederes Alkyl bedeutet, wenn R^ niederes Alkyl darstellt.

Die Verbindung (i), worin R geschütztes Amino darstellt, R

7 7 eine Gruppe der Formel -Q-R , worin R- Wasserstoff oder Acyl darstellt, und/oder R funktionell modifiziertes Carboxy bedeuten, können auch als Zwischenprodukt für die Herstellung der aktiveren Verbindung verwendet -werden.

Besonders bevorzugte aktive Verbindungen sind:

IT-C-CONH-

^a · (ίο

COOH

worin R¹ Thiazolyl der Formel ^C

bedeutet, R² und R⁵ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen und R⁴ Wasserstoff, Halogen, niederes Alkyl oder eine Gruppe der Formel -0-R⁷, worin R⁷ niederes Alkyl darstellen.

Die hier verwendeten Ausdrücke und Definitionen werden nachfolgend näher erläutert.

ο) Unter der Teilstruktur der Formel R -C-CO-

IN--

. U

sind beide geometrischen Formeln zu verstehen:

j R¹^C-CO- j R¹.-c-CO-

" \ N-Q-R^{2 ünd} R2-0-N

Die Geometrie der Formel (S) wird als "syn" bezeichnet und die andere Formel (A) wird als "anti" bezeichnet.

Dementsprechend wird ein Isomeres der Verbindung mit der durch die obige Formel (S) dargestellten Teilstruktur als "syn Isomeres" bezeichnet und das andere Isomere der Verbindung mit. der anderen Struktur, die durch die obige Formel (Α) dargestellt ist, wird als "anti-Isomeres" bezeichnet. .

Vom Standpunkt der Struktur-Aktivitäts-Beziehung aus betrachtet,

sei bemerkt, daß ein syn-Isomeres der Verbindung (I') eine

viel höhere antimikrobiell Aktivität besitzt als das entsprechende anti-Isomere und daß daher das syn-Isomere der Verbindung.(l') in bezug auf den prophylaktischen und therapeutischen Wert stärker

bevorzugt ist als das entsprechende anti-Isomere.

^: r TIr b) Die Thiazolylgruppe der Formel R —ü^g>J (worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat) liegt

bekanntlich in tautomerer Beziehung mit einer Thiazolinylgruppe

HK ,

der Formel _n6 ' J -U-

₆. ^<sJ

(worin R Imino oder geschütztes Imino darstellt) vor..

Die Tautomerie zwischen den Thiazolyl- und Thiazolinyi-Gruppen kann durch das folgende Gleichgewicht dargestellt werden

6 6*

(worin R und R jev/eils die oben angegebenen Bedeutungen 'haben).

Es sei.daher darauf hingewiesen, oaß diese beiden Gruppen· im wesentlichen die gleichen sind und daß die Tautomeren, die aus diesen Gruppen bestehen, als die gleichen Verbindungen angesehen werden, insbesondere in der Herstellungschemie. Deshalb fallen beide tautomeren Formen der Verbindungen mit solchen Gruppen in ihrem Molekül in den Rahmen der vorliegenden Erfindung und sie werden vorstehend und nachfolgend aus BequemlichkeitsgrUnden nur durch einen Ausdruck "Thiazolyl" bezeichnet und durch die folgende Formel dargestellt ^

-Is

i R-Is

i (worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat).

c) Es ist bekannt, daß die 3-Hydroxy-3~cephem~Verbindung mit der Teilstruktur der Formel

in tautomerer Beziehung zu der 3-0xo~cepham-Verbindung der Formel

S vorliegt ' —<

von denen je.de als das Enol- oder Keto-Tautomere bezeichnet wird, wobei das Etjol-Tautomere in der Regel die stabilisierte Verbindung·

ist ο - '

Daher fallen beide Verbindungen mit diesen tautomeren Strukturen un~ ter diese Verbindungen- -.-^: -^' .- ;. und die Struktur und Nomenklatur dieser Tautomeren werden vorstehend und nachfolgend nur durch einen Ausdruck des stabilisierten Enol-Tautomeren, d.h. durch die 3-...- Hydroxy-3~cephem~Verbindung bezeichnet.

.Nachfolgend wurden geeignete Beispiele für und eine Erläuterung der verschiedenen Definitionen, die hier verwendet werden und in den Rahmen der vorliegenden Erfindung fallen, näher erläutert»

Unter dem hier verwendeten Ausdruck "nieder" bzw« "niedrig" ist, wenn nichts anderes angegeben ist, eine Gruppe mit 1 bis 6 Kohlenstcffatomen zu verstehen«

Die einzelnen Aausdrücke sollen, soweit nicht jeweils., etwas anderes angegeben ist, die nachfolgenden Definitionen besitzen: Der Ausdruck "Alkyl" kann umfassen einen Rest eines geraden (unverzweigten) oder verzweigten Alkans mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen,, wie Methyl, Äthyl, Propyi, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t~Butyl, Pentyl, Neopentyl, Hexyl, Heptyl, Octyl, Nonyl, Decyl, Undecyi, Dodecyl und dgl., vorzugsweise niederes Alkyl, insbe-. sondere ein solches mit 1 bis. 4 Kohlenstoffatomen.

Der Ausdruck "Alkenyl" kann umfassen einen Rest eines geraden (unverzweigten) oder verzv/eigten Alkens mit bis zu 12 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise niederes Alkenyl, wie Vinyl, Allyl, 1-Propenyl, Isopropenyl, Butenyl, Isobutenyl, Pentenyi, Hexenyl

"und dgl., insbesondere solche mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen.

"Der hier verwendete Ausdruck "Alkinyl" kann umfassen einen Resteines geraden (unverzweigten) oder verzweigten Alkins mit bis zu 12 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise niederes Alkinyl, wie Äthinyl, Propargyl, 1-Propinyl, 3-Butinyl, 2-Butinyl, 4-Pentinyl, 3-Pentinyl, 2-Pentinyl, 1-Pentinyl, 5-Hexinyl und.dgl., insbesondere solche mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen „

Der hier verwendete Ausdruck "Cycloalkyl" kann umfaseen einen Rest eines Cycloalkans mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise niederes Cycloalkyl, wie Cyclopropyl, Cyclobutyi, Cyclopentyl und Cyclohexyl, insbesondere Cyclohexyl.

Diese aliphatischen Kohlenwasserstoffreste können substituiert sein durch ein oder mehrere Halogenatome, eine oder mehrere Carboxy- oder veresterte Carboxygruppen« Dementsprechend kann • der "dliphatische Kohlenwasserstoffrest, der durch ein oder mehrere Halogenatome, ein oder mehrere Carboxy- oder veresterte Cürboxygruppen substituiert ist" alternativ auch als "halogensubstituierter, aliphatischer Kohlenwasserstoff rest", "carboxy-' substituierter aliphatischer Kohlenwasserstoffrest" bzw. "durch verestertes Carboxy substituierter aliphatischer Kohlenwasserstoffrest" bezeichnet werden, die insbesondere umfassen können: Halcgenalkyl, -alkenyl, -alkinyl und -cycloalkyl; Carboxyalkyl, -alkenyl, -alkinyl und -cycloalkyl bzw. verestertes Carboxy-alkyl, -alkenyl, -alkinyl und -cycloalkyl. Zu geeigneten Beispielen für "Halogen" können gehören Chlor, Brom, Jod und Fluor; geeignete Beispiele fur das "veresterte Carboxy" können sein Älkoxycarbonyl oder dgl., und bevorzugte

- 11 -

Beispiele für den "Alkyl-"' "Alkenyl-", "Alkinyl-", "Cycloalkyl-" und den Alkylrest von "Alkoxycarbonyl" sind die oben erwähnten Jeweiligen "niederen Reste". ..

Bevorzugte Beispiele für "Ha Io ge na Ik yl, -alkenyl, -alkinyl und -cycloalkyl" können sein Chlormethyl, Brommethyl, Jodmethyl, Fluormethyl, Trichlormethyl, Trifluormethyl, 2~Chloräthyl, l,2~Dichioräthyl, 2,2,2-Trifluoräthyl, 3~Chlorpropyl, 4-Jodbutyl, 5»Fluorpentyl, 6-Bromhexyl, 3-Fluorallyl, 3-Chlor« propargyl, 4-Fluorcyclohexyl oder dgl.

Bevorzugte Beispiele für "Carboxyalkyl, »alkenyl, -alkinyl und -cycloalkyl" können sein Carboxymethyl, 1-Carboxyäthyl, 2-Carboxycjthyl, 1-Carboxypropyl, 3-Carboxypropyl, 4~Carboxy~ butyl, 5-Carboxypentyl, 6~Carboxyhexyl, 1-Carboxyisopropyl, T"Xthyl~1-carboxyüthyl, 2-Methyl~2~carboxypropyl, 3™Carboxyollyl, 3-Carboxypropargyl, 4-Carboxycyclohexyl oder dgl.

Bevorzugte Beispiele für "verestertes Carboxyalkyl, -alkenyl,

-alkinyl und -cycloalkyl" können sein niederes Alkoxycarbonyl-(niedrig)alkyl (wie listhoxycarbonylmethyl, Ä'thoxycarbonylmethyl, Propoxycqrbonylmethyl, t-Butoxycarbonylmethyl, 2-A'thoxycarbonyläthylf 2~A'thoxycarbonylpropyl, 4-Athoxycarbonylbutyl, l~t-Butoxycarbonylisopropyl, l-t'-Butoxycarbonyl-i-methylpropyl, 4-t-Butoxy~ carbonylbutyl, 5-t-Butoxycarbonylpentyl, 6~Butoxycarbonylhexyl

"und dgl.), niederes Alkoxycarboriyl(niedrig)alkenyl (z.B.' 3-Methoxycarbonylallyl und dgl.)., niederes Alkoxycarbonyl(niedrig)™ alkinyl (wie 3-Methoxycarbonylpropargyl und dgl.), niederes Alkoxycarbonyl(niedrig)cycloalkyl (wie 4~Methoxycarbonylcyclo~ hexyl und dgl.) oder dgl., insbesondere niederes Alkoxycarbonylmethyl, wie oben beispielhaft erläutert.

ζ Λ 7

Der hier für R , R und R' verwendete Ausdruck "niederes Alkyl" bezieht sich auf solche Gruppen, wie sie oben beispielhaft angegeben worden sind; vorzugsweise kann es sich dabei um solche Gruppen mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere um Methyl handeln.

21 4 239

Bei dem hier für R verwendeten Ausdruck "Halogen" kann es sich um Chlor, Brom, Jod oder Fluor handeln und bevorzugt ist Chlor oder Brom.

Bei dem hier fur R verwendeten Ausdruck "Acyl" kann es sich handeln um niederes Alkanoyl (wie Formyl, Acetyl, Propionyl, Butyryl, Isobutyryl, Isovaleryl, Pivaloyl und dgl.), Aroyl (wie Benzoyl und dgl.), niederes Alkansulfonyi (wie Mesyl, Xthansulfonyl, 1-Methyläthansulfonyl, Propansulfonyl, Butansul™ fonyl und dgl.)/ Arensulfonyl (wie Benzolsulfonyl, Tosyl und dgl.) oder dgl.

Bei der "Schutzgruppe" in dem "geschützten Amino" für R kann es sich handeln um eine konventionelle N-Schutzgruppe, wie z.B.. substituiertes oder unsubstituiertes Ar(niedrig)alkyl (wie Benzyl, Benzhydryl, Trityl, 4-Methoxybenzyl, 3,4-Dimethoxybenzyl und dgl«.), Halogen(niedrig)alkyl (z»B. Trichlormethyl, Trichlor-. öthyl, Trifluormethyl und dgl«), Tetrahydropyranyl, substituiertes Phenylthio, substituiertes Alkyliden, substituiertes Aralkyliden, substituiertes Cycloalkyliden, Acyl oder dglc

Bei einem geeigneten Acyl für die Schutzgruppen kann es sich handeln um substituiertes oder unsubstituiertes niederes Alkanoyl (wie Formyl, Acetyl, Chloracetyl, Trifluoracetyl und dgl.), substituiertes oder unsubstituiertes niederes Alkoxycarbonyl (wie Methoxycarbonyl, Ä'thoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, 1-Cyclopropyläthoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, t-Butoxycarbonyl, Pentyloxycarbonyl·, t-pentyloxycarbonyl, Hexyl-

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oxycarbonyl, Trichloräthoxycarbonyl, ^-Pyridylmethoxycarbonyl und dgl.)f substituiertes oder unsubstituiertes Ar(niedrig)-alkoxycarbonyl (wie Benzyloxycarbonyl, Benzbydryloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl und dgl.), niederes Cycloalkoxycarbonyl (wie Cyclopentyloxycarbonyl, Cyclohexyloxycarbonyl und dglo), 8-Chinolyloxycarbonyl, Succinyl, Phthaloyl oder dgl.

Zu der Schutzgruppe kann auch gehören das Reaktionsprodukt einer Silan-, Bor-, Aluminium- oder Phosphorverbindung mit der Aminogruppe, Geeignete Beispiele Für solche Verbindungen können sein Trimethylsilylchlorid, Trimethoxysilylchlorid, Bortrichlorid, Butoxybordichlorid, Alominiumtrichlorid, Diäthoxyaluminiunichlorid, Phosphordibromid, Phenylphosphordibromid oder dgl*

Bei dem "funktionell modifizierten Carboxy" für R kann es

sich handeln um einen Ester, ein Amid oder dgl.

Geeignete Beispiele für den Ester können sein

ein Alkylester (z.B. ein Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Isopropyl-y Butyl-, Isobutyl-, t-Butyl-, Pentyl-, t-Pentyl™, Hexyl-,

Heptyi-, Octyl-, I-Cyclopropyläthylester und dgl.);

ein Alkenylester (z.B. ein Vinyl-, Allylester und dgl.); ein Alkinylester (z.B* ein Äthinyl-, Propinylester und dgl.); ein Alkox)/alkylester (z.B. ein Methoxymethyl-) A'thoxymethyi-, Isopropdxymethyl-, 1-Methoxyäthyl-, 1-Äthoxyäthylester und dgl*); ein Alkylthioalkylester (z.B. ein Methylthiomethyl-, Xthylthiomethyl-, Xthylthioäthyl-, Isopropylthiomethy!ester und dgl.);

14

ein Halogenalkylester (z.B. ein 2-Jodäthyl-, 2,2,2-Trichloräthylester und dgl.);

ein Alkanoyloxyalkylester (z.B. ein Acetoxymethyl-, Propionyloxymethyl-, Butyryloxymethyl-, Val'eryloxymethyl-, Pivaloyloxymethyl-, Hexanoyloxymethyl-, 2-Acetoxyäthyl-, 2-Propionyl-.oxyäthyl-, Palmitoyloxymethylester und dgl.)» ein Alkansulfonylalkylester. (z.B. ein Mesylmethyl-, 2-Mesyläthylester und dgl.);

ein substituierter oder unsubstituierter Arälkylester (z.B. ein Benzyl-, 4-Methoxybenzyl-, 4-Nitrobenzyl-, Phenäthyl-, Trityl-. Benzhydryl-, Bis(methoxyphenyl)methyl-, 3,4-Dimethoxybenzyl-, 4-Kydroxy-j5,5-di-t-butylhenzylester und dgl.); ein substituierter oder unsubstituierter Arylester (ζ.B₀ ein Phenyl» Tolyl-, t-Buty!phenyl-, XyIyI-, Mesityl-, Cumenyl-, Salicylester und dgl.);

ein Ester mit einer Silylverbindung, wie 2.B. einer Trialkylsilyl-, Dialkylalkoxysilyl- oder Trialkoxysilylverbindung, E₀B. ein Trialkylsilylester (wie z.B. ein Trimethylsilyl-, TrJäthylsilylester und dgl.), ein Dialkylalkoxysilylester (z.B* ein Dimethylmethoxysilyl-, Dirnethyläthoxysilyl-» Diäthylmethoxysilylester und dgl.) oder ein Trialkoxysilylester (z.B. ein Trimethoxysilyl-, Triäthoxysilylester und dgl.) oder dgl.

Bezüglich der Ausdrücke "geschütztes Amino" für R und "funktionell modifiziertes Carboxy" für R gilt, daß diese Gruppen die Bedeutung nicht nur bei der synthetischen Herstellung der Verbindungen der Formel I unter Anwendung von chemischen Verfahren, sondern auch in bezug auf die physiologischen und pharmazeutischen Eigenschaften dieser Verbindungen selbst haben.

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Das heißt, bei der synthetischen Herstellung kann die freie Äminogruppe für R und/oder die freie Carboxygruppe für R in das oben genanntö "geschützte Amino" und/öder "funktionell modifizierte Carboxy" überführt werden, bevor das •(die) Verfahren zur Verhinderung jeder möglichen unerwünschten Seitenreaktion(en) durchgeführt wird, und die "geschützte Äminogruppe" und/oder die "funktionell modifizierte Carboxygruppe" in der dabei erhaltenen Verbindung kann nach Durchführung der Reaktion in die freie Äminogruppe und/oder Carboxygruppe überführt v/erden. Dies geht aus der nachfolgenden Erläuterung der Verfahren hervor.

Andererseits wird bei der Bedeutung der physiologischen und pharmazeutischen Eigenschaften der erfindungsgemäßen Verbindung die die "geschützte Äminogruppe" und/oder die "funktionell modifizierte Carboxygruppe" tragende Verbindung gegebenenfalls zur Verbesserung der Eigenschaften, wie z.B. der Löslichkeit, der Stabilität, der Absorbierbarkeit, der Toxizität der besonders aktiven Verbindung, welche die freie Äminogruppe und/oder Carboxygruppe trägt, verwendet.

Bei einem geeigneten "pharmazeutisch verträglichen Salz" der Verbindung (l) kann es sich um ein konventionelles nichttoxisches Salz handeln und dazu können gehören ein Salz mit einer anorganischen Base oder Säure, wie z.B. ein Metallsalz, wie ein Alkalimetallsalz (z.B. ein Natrium-, Kaliura₇ salz und dgl.) und ein Erdalkalimetällsalz (z.B. ein Calcium-, Magnesiumsalz und dgl.), ein Ammoniumsalz, ein anorganisches Säuresalz (z.B. ein Hydrochlorid, Hydrobromid, Sulfat, Phosphat, Carbonat, Bicarbonat und dgl.), ein Salz mit einer

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organischen Base oder Säure, wie z.B. ein Aminsalz (z.B. ein Tr!Diethylamin-, Triäthylamin-, Pyridin-, Procain-, Picolin-, Dicyclohexylamin-, Ν,Ν¹- Dibenzyläthylendiamin-, N-Methyl- glucaiain-, Diäthanolamin-, Triäthanolamin-, Tris(hydroxymethyl-amino)methan-, Phenäthylbenzylaminsalz und dgl.), ein organisches Carbonsäure- oder SuIfonsäuresalz (z.B. ein Acetat, Maleat, Lactat, Tartrat, Mesylat, Benzolsulfonat, Tosylat und dgl.), ein basisches oder saures Aminosäuresalz (z.B. ein Arginin-, Asparaginsäure-, Glutaminsäure-, Lysin-, Serinsalz und dgl.) und dgl.

Auf dem pharmazeutischen Gebiet ist es bekannt, daß das aktive Arzneimittel (der Wirkstoff), wenn es (er) irgendeine unerwünschte physiologische oder pharmazeutische Eigenschaft, wie z.B. eine unerwünschte Löslichkeit, Stabilität, Absorbierbarkeit und dgl., aufweist, in ein modifiziertes Derivat davon umgewandelt wird, um diese unerwünschten Eigenschaften zu verbessern, und dann v/eist dieses Derivat bei der Verabreichung an einen Patienten den aktiven Wirkungsgrad auf durch Umwandlung in dem Körper in das Ausgangsarzneimittel (den Ausgangswirkstoff). In diesem Sinne sind unter dem hier verwendeten Ausdruck ''pharmazeutisch verträglicher Biovorläufer" im Prinzip alle modifizierten Derivate zu verstehen, die Strukturformeln,aufweisen, die von denjenigen der aktiven Verbindungen verschieden sind, die jedoch nach der Verabreichung im Körper in die aktiven Verbindungen umgewandelt werden, und dazu gehören auch die Derivate, die manchmal auf physiologischem Wege in dem Körper πμε den Verbindungen abgeleitet werden und eine antimikrobielle Wirksamkeit aufweisen.

- 17 -

. - 17 -

Die Verbindungen (I) können nach den in dem folgenden Reaktionsschema dargestellten Verfahren hergestellt werden:

Verfahren A: Acylierung

R^A-COOH (111) _ßl , -^S- "³

Ol - ς

Verfahren B; C-Nitrosierung (R, = Halogenacyl)

₉CONH-T-YV^{r s}Rj-C

² J-„4 mittel b ||

o Civ) ^R · _CIb)

Verfahren C; Veratherung

-> N · th-K-^K

^{CV) R5 Ea} dc)

Verfahren D: Thiazolring-Bildung

S R^C-CONH₁-Y⁵VR^{3 Ri}

0-R² R⁵ " * ^ i._R» ° T

CVD : (id)

- 18 -

Verfahren E: Eliminierung der Aminoschutzgruppe

I 3 ₂₅^

0-R² ° ' ₀-R²

R⁵ ·

R³

ir- ^R

(VIII) . (Ie)

Verfahren F: Reduktive Bildung von 3-Hydroxycepham R¹^-CONHt—/⁵^ . R¹^-CONHT-i^/S

P^ ! ^

0R2 ^r5 i2

(ix) (i£)

Verfahren G; 0-Acyligrung

R^C-CONH-r-f-S rJ-OH (X) ^-Ο^ • 0-R² R⁵ 0-R²

(If)

Verfahren H: 3-Cephem-Bildung

Base R¹^-CONHW

R^S · 0-R²

(Ig)

19 -

Verfahren I;Halogeni erung

R-C-CONIl

Halogenierungsmittel R-^-C-CONIh S

C O

(XI)

? a

0-R²

(Ii)

Verfahren J: Veresterung

R¹^A-CONIh—r^V"¹*³ Veresterungsmittel _; R³^-A-CX)N

COOH

(XII)

r;

Verfahren K: Carboxy-Bildung

R-A-CONH

Λ \

(XIII)

R^A-A-CONIf

COOH

(Ik)

worin bedeuten:

R„ einen aliphatischen Kohlenwasserstoffrest, der sub-

CX

stituiert sein kann durch Halogen, Carboxy oder verestertes Carboxy,.

4 ·

R, Halogen,

- 20 —

R verestertes Carboxy,

R, funktionell modifiziertes Carboxy, R geschütztes Amino,

R Acyl und

1 2 3 4 4 5

worin R , R , R , R , R , R und A jeweils die oben

angegebenen Bedeutungen haben.

Die obigen Verfahren werden nachfolgend näher erläutert.

Eine Verbindung (I) und ihr Salz kann-hergestellt'werden durch Umsetzung einer 7-Araino-3-cephem (oder-cepham)-Verbindung (II), ihrem reaktionsfähigen Derivat an der Aminogruppe oder einem Salz davon mit einer Carbonsäure (III), ihrem reaktionsfähigen Derivat an der Carboxygruppe oder einem Salz davon auf konventionelle Weise unter Anwendung einer sogenann-.. , ten Amidierungsreaktion, wie sie in der ß-Lactam-Chemie allgemein bekannt ist«

Die Ausgangsverbindung (III) umfaßt sowohl bekannte Verbindungen als auch, neue Verbindungen und die neuen Verbindungen (III) können nach Verfahren hergestellt werden, wie sie weiter unten näher erläutert werden«

Zu geeigneten reaktionsfähigen Derivaten an der Aminogruppe der Verbindung (II) können gehören ein konventionelles reaktionsfähiges Derivat, wie es in den verschiedensten Formen der Amidierungsreaktion verwendet wird, z« B. ein Isocyanato-, Isothiocyanato-Derivat5 ein Derivat, das gebildet wird durch Umsetzung einer Verbindung (II) mit einer SiIylverbindung (wie Trimethylsilylacetamid', Bis(trimethylsilyl)acetamid und dergleichen), mit einer Aldehydverbindung ( wie Acetaldehyd, Isopentaldehyd, Benzaldehyd, Salicylaldehyd, Phenylacetaide-· kyä> p-Nitrbbenzaldehyd, m-Chlorbenzaldehyd, p-Chlorbenzaldehyd, Hydroxynaphthoaldehyd, Furfural, Thiophencarboaldehyd und dergleichen, oder dem entsprechenden Hydrat, Acetal, Hemiacetal oder Enolat davon), mit einer Ketonverbindung (wie Aceton, Methyläthylketon, Methylisöbutylketon, Acetylaceton, Äthylacetoacetat und dergleichen oder dem entsprechenden Ketal, Hemiketal oder Enolat davon), mit einer Phosphorver-

oo - 22 -

bindung (wie Phosphoro:xychloriä, Phosphortrichlorid und dergleichen) oder mit einer Schwefelverbindung (wie Thionylchlorid und dergleichen) und dergleichen.

Geeignete Salze der Verbindung (II) können diejenigen sein, wie sie oben für die Verbindung (I) angegeben worden sind*

Zu geeigneten reaktionsfähigen Derivaten an der Carboxygruppe der Verbindung (III) können gehören z„ B. ein Säurehalogenid, ein Säureanhydrid, ein aktiviertes Amid, ein aktivierter Ester und dergleichen, und vorzugsweise ein Säurehalogenid, wie Säurechlorid, Säurebromid;.ein gemischtes Säureanhydrid mit einer Säure, wie substituierter Phosphorsäure (z. B. Dialky!phosphorsäure, Pheny!phosphorsäure, Dipheny!phosphorsäure, Dibenzylphosphorsäure, halogenierter Phosphorsäure und dergleichen), Dialkylphosphoriger Säure, Schwefliger Säure, Tlaioschwefelsäure, Schwefelsäure, Alky!kohlensäure, einer . aliphatischen Carbonsäure (wie Pivalinsäure, Pentansäure, Isopentansäure, 2-Äthylbuttersäure, Trichloressigsäure und dergleichen), einer aromatischen Carbonsäure (wie Benzoesäure und dergleichen); ein symmetrisches Säureanhydrid; ein aktiviertes Säureamid mit Imidazol, 4-substituiertem Imidazol, Mmethylpyrazol, Triazol oder Tetrazol; ein aktivierter Ester (wie Cyano niethyIester, Methoxymethylester, Dimethylaminomethylester, Vinylester, Propargylester, p-Ritrophenylester, 2,4-Dinitrophenylester, Trichlorphenylester, Pentachlorphenylester, Mesylphenylester, Phenylazophenylester, Phenylthioester, p-Nitrdphenylthioester, p-Cresylthioester, Carboxyroethylthioester, Pyranylester, Pyridylester, Piperidylester, 8-Chinolylthioester, ein Ester mit einer N-Hydroxy-Verbindung, wie N,N-Dimethy!hydroxylamin, 1-Hydroxy-2-(iH)-pyridon, N-Hydroxyauccinimid, N-Hydrcxyphthalimid,

1-Hydroxybenzotriazol, i-Hydroxy-6-chlorbenzotriazol und dergleichen) und dergleichen.

Die geeigneten reaktionsfähigen Derivate der Verbindungen" (II) und (III) können gegebenenfalls aus den oben angegebenen Verbindungen ausgewählt werden je nach Art der Verbindungen (II) und (III), die in der Praxis verwendet werden, und $e nach den angewendeten Reaktionsbedingungen.

Zu geeigneten Salzen der Verbindung (III) können gehören ein Salz mit einer anorganischen Base, z„ B. ein Alkalimetallsalz (wie ein Natrium-, Kaliumsalz und dergleichen) und ein Erdalkalimetallsalz (wie ein Calcium-, Magnesiumsalz und dergleichen), ein Salz mit einer organischen Base, z. B. mit einem tert» Amin (wie ein Trimethylamin-, Triäthylamin-, ΪΤ,Ν-Dimethylanilin-, Pyridinsalz und dergleichen), ein Salz mit einer anorganischen Säure (wie Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoff säure und dergleichen) und dergleichen»

Die Umsetzung wird in der Regel in einem konventionellen Lösungsmittel, wie Wasser, Aceton, Dioxan, Acetonitril, Chloroform, Benzol, Methylenchlorid, Äthylenchlorid, Tetrahydrofuran, Äthylacetat, Ν,Ν-Dimethylformamid, Pyridin oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, oder in einer beliebigen Mischung davon durchgeführte

Wenn das Acylierungsraittel (III) in Form einer freien Säure oder in Form eines Salzes bei dieser Reaktion verwendet wird, wird die Umsetzung vorzugsweise in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie z. B. einer Carbodiimidverbindung (wie NjN-Dicyclohexylcarbodiimid, N-Cyclohexyl-N.¹ -morpholine-

„ 24 «

äthylcarbodiimid, N-Cyclohexyl-N'-(4-diäthylaminocyclohexyl)-carbodilmid, N,N¹-Diäthylcarbodiimid, N,N¹-Diisopropylcarbo- diimid, N~Äthyl-N'~(3~diiaethylaminopropyl)carbodiimid und dergleichen), einer Bisimidazolid-Verbindung (wie N₅N¹-Carbonyrbis(2-methylimidazol) und dergleichen), einer Iminverbindung (wie Pentaniethylenketen-N-cyclohexylimin,. Di- phenylketen-N-cyclohexyliniin und dergleichen), einer olefinischen oder acetylenischen Ätherverbindung (wie Äthoxyacetylen, β-Chlorvinyläthylather und dergleichen), 1-(4--Chlorbenzol~ sulfonyloxy)-6-chlor-iH-benzotriaz'ol, N-Äthylbenzisoxazoliurasalz, N-Äthyl-^-phenylisoxazolium-J'-sulfonat, einer Phosphorverbindung (wie Polyphosphorsäure, Triallcylphosphit, Äthylpolyphosphat, Isopropylpolyphosphat, Phosphoroxychlorid, Phosphortrichlorid, Diäthylchlorphosphit, Orthophenylenchlor- · phosphit und dergleichen), Thionylchlorid, Oxalylchlorid, ein.es Vilsmeier-Eeagens, hergestellt durch Umsetzung von Dimethylformamid mit Thionylchlorid, Phosphoroxychlorid, Phosgen oder dergleichenr durchgeführt.

Bezüglich der Geometrie der bei diesem Verfahren gebildeten Verbindung (I), worin A eine Gruppe der Formel bedeutet

-C- (nachfolgend als "Öxyiminoverbindung (I)" N , bezeichnet),

sei bemerkt, daß hier eine Stereoselektivität zwischen den cyn- und anti-Isomeren vorzuliegen scheint, wie nachfolgend näher erläuterte

Für den Fall, daß die Reaktion durch-Umsetzung einer Verbindung (II) oder eines reaktionsfähigen Derivats an der Aminogruppe oder eines Salzes davon mit einer Verbindung (III), worin A eine Gruppe'der Formel

C-

Il

N-

bedeutet (nachfolgend als 'Oxyiminoacylierdungsmittel (III)" bezeichnet) in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie z. Bo Phosphorpentachlorid, Thionylchlorid und dergleichen, durchgeführt wird, entsteht ein anti-Isomeres der Oximinover«- ' bindung (I) als überwiegendes Produkt und das entsprechende ^K '' syn-Isomere davon kann aus dem Reaktionsprodukt kaum isoliert werden, selbst wenn ein syn-Isomeres des Oximinoacylierungs— mittels (III) verwendet wird«, Die Neigung zu einer solchen Isomerisierung bei der nach dem vorstehend erläuterten Verfahren durchgeführten Reaktion kann zurückzuführen sein auf die Tatsache, daß das weniger stabile syn-Isomere dazu neigt, im Verlaufe dieser Reaktion, beispielsweise in der sogenannten Acylierungsstufe des Oximinoacylierungsmittels (III), teilweise oder vollständig zu dem entsprechenden, stabileren anti-Isomeren zu isomerisieren, so daß das stabilere Isomere./ el, h. das anti-Isomere_/ der Oximinoverbindung (I) als Reaktionsprodukt isoliert werden kann.

Zur selektiven Herstellung eines syn-Isomeren der Oximinoverbindung (I) in hoher Ausbeute wird daher vorzugsweise ein syn-Isomeres des Oximinoacylierungsmittels (III) verwendet und die Umsetzung wird vorzugsweise unter ausgewählten Reaktion sbe dingungen durchgeführt«, Das heißt, ein syn-Isoseres der Oximinoverbindung (I) kann auf selektive Weise in hoher Ausbeute erhalten werden, wenn man die Umsetzung zwischen einer Verbindung (II) und einem syn-Isomeren des Oximinoacylierungsmittels (III) beispielsweise in Gegenwart eines Vilsmeier-Reagens, wie oben erwähnt, und unter etwa neutralen

~ 26

Bedingungen durchführt „

Die erfindungsgemäße Verbindung (I) und ihr Salz eignen sich. als antimikrobielles Mittel und ein Teil davon kann auch als Ausgangsmaterial in den nachfolgend beschriebenen Verfahren verwendet werden.

Verfahren B: C-Mtrosierung.

Eine erfindungsgemäße Verbindung (Ib) und ihr Salz kann her

gestellt

werden durch Umsetzung einer Verbindung (IV) oder

ihres Salzes mit einem Nitrosierungsmittel.

Die Ausgangsverbindung (IV) entspricht der 3-Cephem~Verbin~ dung (I), worin R Halogeiiacetyl, R Wasserstoff, Halogen, "

7 7 niederes Alkyl oder eine Gruppe der Formel -0-R' , worin R' niederes Alkyl darstellt, und A Methylen bedeuten, und sie kann nach dem vorstehend beschriebenen Verfahren A, vorztigs- weise durch Umsetzung einer Verbindung (II) mit Diketen und Halogen (z, B_e Chlor, Brom und dergleichen), hergestellt werden» Die so hergestellte Ausgangsverbindung (IV) kann in diesem Verfahren ohne Isolierung und/oder Reinigung verwendet werden«, ·

Zu geeigneten Hitrosierungsmitteln können gehören Salpetrige Säure und ihre konventionellen Derivate, wie Nitrosylhalogenid (z* B. Nitrosylchlorid, Nitrosylbromid und dergleichen), Alkalimetallnitrit (wie Natriumnitrat, Kaliumnitrit und dergleichen), Alkylnitrit (wie Butylnitrit, Pentylnitrit und dergleichen) und dergleichen»

r 27 -

Wenn ein Salz der Salpetrigen Säure als Nitrosierungsmittel verwendet wird, wird die Reaktion vorzugsweise in Gegenwart einer Säure, z. B. einer anorganischen oder organischen Säure (wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Ameisensäure, Essigsäure und dergleichen) durchgeführt. Auch wenn ein Ester der Salpetrigen Säure verwendet wird, wird die Reaktion vorzugsweise in Gegenwart einer starken Base, wie z.B. eines Alkalimetallalkylats oder dergleichen, durchgeführt.

Diese Reaktion wird in der Regel in einem Lösungsmittel,wie. Wasser, Essigsäure, Benzol, Methanol, Äthanol, Tetrahydrofuran oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, durchgeführt. Die Reaktionstemperatur ist nicht kritisch und die Umsetzung wird vorzugsweise innerhalb des Bereiches von Kühlung bis zur Um-. gebangstemperatur durchgeführte

Die so hergestellte Verbindung (Ib) und das Salz davon können als Ausgangsmaterial in den nachfolgend beschriebenen Verfahren C und D verwendet werden.

Verfahren C: Verätherung

Eine erfindungsgemäße Verbindung (Ic) und ihr Salz können hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (V) oder ihres Salzes mit einem Verätherungsmittel.

Die Ausgangsverbindung (V) entspricht der Verbindung (I), worin A eine . -Hydro:xyimin©methylengruppe bedeutet, und sie kann nach den vorstehend angegebenen Verfahren A und B und auch nach dem nachfolgend beschriebenen Verfahren D

- 28

hergestellt werden. ' .

Zu geeigneten Beispielen für das Verätherungsmittel gehören ein konventionelles Alkylierungsmittel, wie Dialkylsulfat (ζ". Β« Dimethylsulfat, Diäthylsulfat und dergleichen), Diazoalkan (wie Diazomethan, Diazoäthan und dergleichen), ein Alkylhalogenid (v/ie Methyl^odid, Äthyljodid, Ithylbromid -und dergleichen), ein Alkylsulfonat (vrie Methyltosylat und dergleichen), das entsprechende Alkenylierungs-, Alkinylierungs- oder Cycloalkylierungsmittel, worin der aliphatische Kohlenwasserstoff rest substituiert sein kann durch Halogen, Carboxy oder verestertes Carboxy, wie z. B«. Alkenylhalogenid (wie Allyljodid und dergleichen), Alkinylhalogenid (wie Propargylbromid un.d dergleichen), Cycloalkylhaiogenid (wie Cyclohexylbromid und dergleichen), niederes Alkoxycarbonylalkylhalogenid (wie Äthoxycarbonylmethylgodid und dergleichen) und dergleichen.

Bei Verwendung von Diazoalkan als Verätherungsmittel wird die Reaktion in der Regel in einem Lösungsmittel, wie Diäthyläther, Dioxan oder in irgendeinem anderen Lösungsmittel, \tfelches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, bei einer Temperatur innerhalb des Bereiches von Kühlen bis zu Umgebungstemperatur durchgeführte

Bei Verwendung des anderen Yerätherungsmittels wird die Reaktion in der Regel in einem Lösungsmittel, wie Wasser, Aceton, Ithanol, Diäthylather. Dimethylformamid oder irgendeinem anderen Lösungsmittel- welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, innerhalb eines Temperaturbereiches von Kühlen bis zu Erhitzen, vorzugsweise in Gegenwart einer Base, wie z. B» einer anorganischen oder organischen Base, für die

- 29 ~

geeignete Beispiele diejenigen sind., wie sie für die basische Hydrolyse in dem weiter unten erläuterten Verfahren E verwendet werden, durchgeführt.

Einige der erfindungsgemäßen Verbindungen (Ic) und Salze davon eignen sich als antimikrobielles Mittel'und einige von ihnen, insbesondere die Verbindung, worin R Halogenacetyl ..· bedeutet, können als Ausgangsmaterial in dem nachfolgend beschriebenen Verfahren I) verwendet werden.

Dieses Verfahren stellt eine Alternative für die Herstellung der Verbindung (Ic) dar, worin R eine Halogenacetylgruppe bedeutet, und außerdem ist dieses Verfahren insbesondere bevorzugt und vorteilhaft für die Herstellung der Verbindung (Ic), worin R Halogenacetyl und R _n substituiertes oder unsubstituiertes niederes Alkyl, niederes Alkenyl oder niederes Alkinyl, vorzugsweise niederes Alkyl, bedeuten.

Verfahren D: Thiazolring-Bildung

Eine Verbindung (Id) und ihr Salz kann hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (VI) oder ihres Salzes mit einer (Thioharnstoffverbindung (VII).

Die Ausgangsverbindung (VI) entspricht der 3~Cephem~Verbin~> dung (I), worin R Haiogenacetyl, R V/asserstoff, Halogen, niederes Alkyl oder eine Gruppe der Formel -O-R', worin R' niederes Alkyl darstellt, und A eine Gruppe der Formel -C-,

. Ή

. - 30 -

ρ ·

worin E die oben angegebenen Bedeutungen hat,· bedeuten und . sie kann nach den vorstehend beschriebenen Verfahren A, B und/oder C hergestellt werden«

Die Umsetzung-wird in der Regel in einem Lösungsmittel, wie Wasser, Alkohol (wie Methanol, Äthanol und dergleichen),· Benzol, Dimethylformamid, Tetrahydrofuran oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, \tfelches die Reaktion nicht nachteilig' beeinflußt, innerhalb eines Temperaturbereiches von umgebungstemperatur bis zum Erhitzen durchgeführt werden.

Dieses Verfahren stellt eine Alternative und eine sehr vorteilhafte Alternative zur Herstellung der aktiven Verbindung

(Id), insbesondere (a) der Verbindung (Id)₅ worin R Wasserstoff und R Amino bedeuten, aus der Verbindung (IV) nach dem

Verfahren B₅ und (b) der Verbindung (Id), worin R niederes' Alkyl und R Amino bee Verfahren B und C dar.

Alkyl und R Amino bedeuten, aus der Verbindung (IV) nach den

Verfahren Ej_- ^^Eliminierung der Amino schutz gruppe^

Eine Verbindung (Ie) und ihr Salz können hergestellt werden, indem man eine Verbindung (VIII) oder ihr Salz einer Reaktion zur Eliminierung der Schutzgruppe in der geschützten Amino-» gruppe für Ic unterwirft«

ο.

Die Ausgangsverbindung (VIII) entspricht der Verbindung (I),

worin R Thiazolyl der Formel R |f~^r-j}— , worin E⁶ geschütz-

a—iiyp/ a

tes Amino bedeutet, und A eine Gruppe der Formel -C- , worin

O-R-

E die oben angegebenen BedeutυIlgen hat, bedeuten "und sie können beispielsweise nach dem obigen Verfahren A hergestellt werden«,

Die Eliminierungsreaktion kann unter Anwendung eines konventionellen Verfahrens, z„ B. einer Hydrolyse, einer Reduktion oder dergleichen, durchgeführt werden. Diese Verfahren können in Abhängigkeit von der Art der zu eliminierenden Schutzgrup-

f": pe ausgewählt werden. Die Hydrolyse kann ein Verfahren umfassen, bei dem eine Säure (saure Hydrolyse), eine Base (basische Hydrolyse) oder Hydrazin und dergleichen verwendet wirdο Unter diesen Verfahren ist die Hydrolyse unter Verwendung einer Säure eines der üblichen und bevorzugten Verfahren für die Eliminierung der Schutzgruppe, wie z, B. einer Acylgruppe, wie z. B. von substituiertem oder unsubstituiertem niederem Alkanoyl, substituiertem oder unsubstituiertem niederem Alkoxycarbonyl, substituiertem oder unsubstituiertem Ar(niedrig)alkoxycarbonyl, niederem Cycloalkoxycarbonyl, sub- stituiertem Phenylthio, substituiertem Alkyliden, substituiertem Aralkyliden, substituiertem CycIoalkyliden oder dergleichen, wobei in bezug auf ihre Einzelheiten auf diejenigen

verwiesen wird, wie sie jeweils für die H-Schutζgruppe erläutert werden«,

Zu geeigneten Säuren, die bei dieser sauren Hydrolyse verwendet werden können, gehören eine organische oder anorganische Säure, wie Ameisensäure, Trifluoressigsäure, Benzolsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, 'Chlorwasserstoffsäure, ein Kationenaustauscherharz und dergleichen«, Eine bevorzugte Säure ist diejenige, die auf konventionelle Weise, beispielsweise durch Neutralisation oder durch Destillation unter vermindertem Druck, leicht von dem Reaktionsprodukt abgetrennt

werden kann, wie z. B. Ameisensäure, Trifluoressigsäure, Chlorwasserstoffsäure oder dergleichen. Die für die Reaktion geeignete Säure kann ausgewählt werden unter Berücksichtigung der chemischen Eigenschaften der AusgangsverMndung und des Produkts sowie unter Berücksichtigung der Art der zu .eliminierenden Schutzgruppe« Die saure Hydrolyse kann in Gegenwart oder Abwesenheit eines Lösungsmittels -durchgeführt v/erden.

Geeignete Lösungsmittel können sein ein konventionelles organisches Lösungsmittel, Wasser oder eine Mischung davon,-welche diese Reaktion nicht nachteilig "beeinflussen. Insbesondere dann, wenn die Hydrolyse mit Trifluoressigsäure durchgeführt wird, kann die Reaktion durch Zugabe von Anisol beschleunigt werden.

Die Hydrolyse unter Verwendung einer Base kann angewendet werden auf die Eliminierung von Schutζgruppen, wie z. B. eine ... Acylgruppe, vorzugsweise z. B. Halogenalkanoyl (wie Trifluoracetyl und dergleichen) und dergleichen·-Zu geeigneten Basen können gehören z. B. eine anorganische Base, wie ein Alkali- metallhydroxid (wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid und dergleichen), bin Erdalkalimetallhydroxid (wie Magnesiumhydroxid·, Calciumhydroxid und dergleichen), ein Alkalimetallcarbonat (wie Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat und dergleichen), ein Erdalkalimetallcarbonat (wie Magnesiumcarbonate Calciumcarbonat und dergleichen), ein Alkalimetallbicarbonat (wie Natriumbicarbonat,- Kaliumbicarbonat und dergleichen), ein Erdalkalimetallphosphat (wie Magnesiumphosphat, C.alciumphosphat und dergleichen), ein Alkalimetallhydrogenphosphat (wie' Dinatriumhydrogenphosphat, Dikaliumhydrogenphosphat und dergleichen) oder dergleichen, sowie eine organische Base, wie

ein Alkalimetallacetat (wie Natriuniacetat, Kaliumacetat und . dergleichen)5 ein Trialkylamin (wie Trimethylamine Triäthylamin und dergleichen), Picolin, N-Methy!pyrrolidin, N-Methylmorpholin, 1,5-Di azabicyclo [4,5, o]-"5~nonen, Ί,4—Diazabicyclo-[2,2,2]octan, 1,5-Diazabicyclo[5,4,θ]-7-uiidecen, ein Anionenaustauscherharz oder dergleichen«

Die Hydrolyse unter Verwendung einer Base wird häufig in Wasser oder einem konventionellen organischen Lösungsmittel oder in einer Mischung davon durchgeführt»

Die Hydrolyse unter Verwendung von Hydrazin kann für die Eliminierung einer Schutzgruppe, wie z_e B. von dibasischem Acyl, wie ζ, B₀ Succinyl, Phthaloyl oder dergleichen, angewendet werden«

Die Reduktion kann für die Eliminierung einer Schutzgruppe, wie Acyl, ζ« B. Halogen(niedrig)alkoxycarbonyl (wie Tricb,lor~- - äthoxycarbonyl und dergleichen), substituiertem oder unsubstituiertem Ar(niedrig)alkoxycarbonyl (wie Benzyloxycarbonyl, p-Mtrobenzyloxycarbonyl und dergleichen), 2-Pyridylmethoxycarbonyl und dergleichen, Aralkyl (wie Benzyl, Benzhydryl, (Drityl und dergleichen) und dergleichen angewendet werden_o . Eine geeignete 'Reduktion ist z. B_e die Reduktion unter Verwendung eines Alkalimetallborhydrids (wie Natriumborhydrid und dergleichen), eine konventionelle katalytisch^ Hydrogenolyse und dergleichen. Außerdem kann eine Schutzgruppe,v/ie Halogen(niedrig)alkoxycarbonyl oder- 8-Chinolyloxycarbönyl, eliminiert werden durch Behandlung mit einem Schwermetall, wie Kupfer, Zink oder dergleichen«

Die Reaktionstemperatur ist nicht kritisch und sie kann in

beliebiger V/eise unter Berücksichtigimg der chemischen Eigenschaften der Ausgangsverbindung, des Reaktionsproduktes sowie der Art der N-Schutζgruppe und dem angewendeten Verfahren ausgewählt werden und die Reaktion wird vorzugsweise unter milden Bedingungen, wie z_B B. unter Kühlen, bei Umgebungstemperatur oder bei schwach erhöhter Temperatur₅ durchgeführt.

Dieses Verfahren umfaßt auch die Fälle, bei denen die funktionelle modifizierte Carbo^gruppe für R^ im Verlaufe der obigen Reaktion oder bei der Nachbehandlung gleichzeitig in die freie Carbojcygruppe umgewandelt wird,= Auch bei diesem

Verfahren, besteht selbstverständlich der Zweck der vorliegenden Verbindung darin, eine allgemein aktivere Verbindung (I¹) herzustellen, in der R Aminothiazolyl bedeutet, durch Eliminieren der Schutzgruppe in der geschützten Aminogruppe der Verbindung (VIII), die nach den oben oder nachstehend erläuterten anderen Verfahren hergestellt worden ist.

^erfahren ff: Reduktive Bildung von ^-Hydroxycepham

Eine Verbindung (If) und ihr Salz können hergestellt werden d\irch Reduzieren einer Verbindung (IX) oder ihres Salzes.

Die Ausgangsverbindung (IX) entspricht der 3-Cephem-Verbin-'

•ι

dung (I), worin R Thiadiazolyl oder Thiazolyl der Formel · TF j worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat, R

4· 7 7

Wasserstoff, R eine Gruppe der Formel -0-R', worin R' Wasser-

p stoff darstellt, und A eine Gruppe der Formel -C-, worin R

U * 2

-35 -

die oben angegebenen Bedeutungen hat, bedeuten und sie können hergestellt v/erden beispielsweise nach dem oben angegebenen Verfahren A. .

Das auf dieses Verfahren angewendete Reduktionsverfahren kann. ein konventionelles Verfahren umfassen, das für die Reduktion einer ketonischen Carbonylgruppe einschließlich ihrer tautomeren Enolform zu der Hydroxymethylengruppe angewendet werden kann, und das bevorzugte Verfahren kann sein die Reduktion unter Verwendung eines Alkalimetallborhydrids (wie Natrium-

borhydrid

und dergleichen) oder einer Kombination aus einer

Säure (wie Chlorwasserstoffsäure. Schwefelsäure,, Ameisensäure, Essigsäure und dergleichen) und eines Metalls (wie Zink, Eisen, Kupfer und dergleichen), die katalytische Reduktion unter Verwendung eines konventionellen Katalysators (wie Palladium auf Kohle, Palladiumschwamm, Raney-Nickel, Platin,. Platinmohr und dergleichen) oder dergleichen.

Die Umsetzung wird in der Regel in einem konventionellen Lösungsmittel, wie Wasser, einem Alkohol (wie Methanol, Äthanol und dergleichen), Dimethylformamid, Tetrahydrofuran oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, innerhalb eines Temperaturbereiches von Abkühlen bis auf etwas erhöhte Temperatur durchgeführt.

Obgleich die so hergestellte Verbindung (If) und das Salz davon antimikrobielle Aktivitäten aufweisen, stellen sie in erster Linie ein Ausgangsmaterial in dem nachfolgend beschriebenen Verfahren G und in dem anschließend beschriebenen Verfahren H für die Herstellung der aktiveren J-Cephem-Verbindung (Ih) dar. .

Verfahren G: O-Acylierung

Eine Verbindung (Ig) und ihr Salz können hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (If).oder ihres Salzes mit einer Verbindung (X), ihrem Salz oder ihrem reaktionsfähig gen Derivat. ,

Bezüglich der Verbindung (X) sind geeignete Beispiele für

den AcyJrest für R diejenigen, wie sie oben für die Acylic a

gruppe für R der Verbindung (I) angegeben worden sind.

Bei dem reaktionsfähigen Derivat der Verbindung (X) kann es sich um ein Acylhalogenid, ein Anhydrid, Azid, einen aktivierten Ester, ein aktiviertes Amid und dergleichen handeln, für die Beispiele diejenigen sind, wie sie oben für die Verbindung (III) in dem Verfahren A angegeben worden sind, vorzugsweise ein Säurehalogenid, wie ein niederes Alkanoylhalogenid (z.B. Acetylchlorid und dergleichen), ein Aroylhalogenid (z.B.) Benzoylchlorid und dergleichen), ein .niederes Alkansulfonylhalogenid (z.B. Mesylchlorid, Mesylbromid, Äthansulfonylchlorid und dergleichen), ein Arensulfonylhalogenid (z.B. Tosylchlorid und dergleichen), ein Acylazid, z.B. ein niederes Alkansulfonylazid (wie Mesylazid und dergleichen), ein Arensulfonylazid (z.B. Tosylazid und dergleichen) oder dergleichen, insbesondere ein niederes Alkan- · sulfonylhalogenid oder Arensulfonylhalogenid. Die Umsetzung wird in der Regel in einein konventionellen Lösungsmittel, wie Dimethylformamid, Chloroform, Methylenchlorid oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches· die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, unter Kühlen oder bei Umgebungstemperatur oder bei etwas erhöhter Temperatur durchgeführt. .

- 3 7 -

Wenn das Säurehalogenid als Acylierungsmittel verwendet wird, wird die Umsetzung im allgemeinen in Gegenwart einer Base, wie sie oben in dem Verfahren E angegeben ist, durchgeführt.

Dieses Verfahren ist die erste Aktivierungsstufe für die Herstellung einer aktiveren 3-Cephem-Verbindung (lh)-aus der 3-Hydroxycepham-Verbindung (If) über die 3-Acyloxycepham-Ver-.bindung (Ig), die anschließend in dem folgenden Verfahren H mit einer Base behandelt wird.

Verfahren Hl: 3-Cephem-Bildung

Dieses Verfahren ist die. Endstufe zur Umwandlung der 3-Hydroxycephem-Verbindung (IX) in die aktivere 3-Cephem-Verbindung (Ih) oder ihr Salz. Das heißt, eine Verbindung (lh) oder ihr Salz kann hergestellt werden durch Behandeln einer Verbindung (ig), wie sie in dem obigen Verfahren C- hergestellt worden ist, oder eines Salzes davon mit einer Base.

Zu den bevorzugten Basen gehören eine anorganische Base, wie ein Metallhydroxid (z.B. Natriumhydroxid, Kaiiumhydroxid und dergleichen), ein Metallcarbonat (z,B. Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Magnesiumcarbonat und dergleichen), ein Metallbicarbonat (z.B. Natriumcarbonat, Kaliumbicarbonat und dergleichen), eine organische Base, z.B. ein tertiäres Amin (wie Trimethylamin, Triäthylamin,. Pyridin und dergleichen), ein Alkalimetallalkylat (wie Natriummethylat, Natriumäthylat und dergleichen) und dergleichen.

Die Umsetzung wird in der Regel in einem konventionellen Lösungsmittel, ζ'.B. in einem Alkohol, in Dimethylformamid,

"⁵⁸" 21 4 2 39

Chloroform, Methylenchlorid oder .in irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, unter Kühlen oder bei Umgebiingstemperattu? oder bei et was erhöhter Temperatur durchgeführte

Verfahren I: Halogenierung

Eine Verbindung (Ii) oder ihr Salz kann hergestellt werden durch Halogenierung einer Verbindung (ZI) oder ihres Salzes.

Die Ausgangsverbindung (XI) entspricht der Verbindung (I) > worin E Thiadiazolyl oder Thiazolyl der Formel

Ϊ3- .

R Ii ττ~ , worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat, R

° Il 7 7

Wasserstoff, R eine Gruppe der !Formel -0~R^r, v;orin R^r 'Wasserstoff darstellt, und A eine Gruppe der Formel -C-, worin

S ₂ .

2 °~^R

R die oben angegebenen Bedeutungen hat, bedeuten, und sie kann nach den oben erläuterten Verfahren hergestellt werden.

Zu geeigneten Halogenierungsmitteln können gehören eiiie konventionelle Halogenverbindung, wie z. B. ein Phosphorhalogenid (v/ie Phosphortrichlorid, Phosphorpentachlorid, Phosphortribrcmid, Phosphorpentabromid, Phosphorylchlorid und dergleichen), Thionylchlorid und dergleichen.

Die Umsetzung wird in der Regel in einem konventionellen Lösungsmittel, wie Chloroform, Methylenchlorid, Dimethylformamid oder in irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, vorzugsweise unter

Kühlen oder bei Umgebungstemperatur oder bei etwas erhöhter· !Temperatur durchgeführt»

Verfahren J: _ Veresterung

Dieses Verfahren liefert eine Esterverbindung (Ij) und ihr Salz zur Verbesserung der chemischen, physiologischen und/oder pharmazeutischen Eigenschaften der entsprechenden freien Carboxyverbindung (XiI), die der 3-Cephem-Verbindung (I)₅

5 worin Ir Carboxy bedeutet, oder ihrem Salz entspricht«

Die Veresterung wird durchgeführt durch Umsetzung einer freien Carboxyverbindung (XII), ihres reaktionsfähigen Deri- vats an der Carboxygruppe oder eines Salzes davon mit einem Veresterungsmittel.

Das bevorzugte reaktionsfähige Derivat an der Carboxygruppe der Verbindung (XEI) ist beispielsweise ein solches, wie es oben in dem Verfahren A für die Verbindung (III) angegeben worden ist. Bei dem Veresterungsmittel kann es sich um eine Hydroxyverbindung und ihr Reaktionsäquivalent handeln. Geeignete Beispiele für die Hydroxyverbindung können sein ein substituierter¹ oder unsubstituierter Alkohol, wie Alkanol, Aralkanol, Arenol oder dergleichen, von denen.einzelne substituierte Alkohole darstellen können, wie z. B« Alkanoyloxy(niedrig)alkanol (wie Acetoxymethanol, Propionyloxymethanol, Butyryloxymethanol, Pöiitanoyloxymethanol, Hexanoyloxymethanol, Acetoxyäthanol, Propionyloxyäthanol, Butyryloxyäthanol, Pentanoyloxyäthanol, Hexanoyloxyäthanol, Acetoxypropanol, Propionyloxypropanol, Hexanoyloxypropanol, Hexanoyloxyhexanol, Palmitoyloxymethanol und dergleichen),

- 40 -

Halogen (niedrig) alkanol (wie Mono-, Di- oder Trichl.orath.anol und dergleichen), niederes Cycloalkyl(niedrig)alkanol (wie I-Cyclopropyläthanol und dergleichen), substituiertes Ar-(niedrig)alkanol (wie 4-ITitrobenzylalkohol,. 4~Chlorbenzylal·- kohol, 4-Methoxybenzylalkohol, 3_s5-Di-tert.,-butyl~4---hydroxybenzylalkohol, Bis(methoxyphenyl)methanol und dergleichen), substituiertes Arenol (\tfie 4-Methoxyphenol und dergleichen)·, der entsprechende unsubstituierte Alkohol odor dergleichen.

Zu geeigneten reaktionsfähigen Äquivalenten der Hydroxyverbindung können gehören ein konventionelles Äquivalent, wie z. B. ein Halogenid, ein Alkansulfonat, Arensulfonat oder ein Salz der IHydroxyverbindung, Diazoalkan, Diazoaralkan und dergleichen. · .

Ein bevorzugtes Halogenid der Hydroxylverbindung kann sein ein ChloridjBromid oder Jodid. Ein bevorzugtes Alkan- oder Arensulfonat der Hydroxyverbindung kann sein ein Methansulfonat, Athansulfonat, Benzolsulfonat, Tosylat oder dergleichen. Ein bevorzugtes Salz der Hydroxyverbindung kann sein 'ein Alkalimetallsalz, wie ein Lithium-, Natrium-, Kaliumsalz oder dergleichen. Ein bevorzugtes Diazoalkan und Diazoaralkan kann sein Diazomethan, Diazoäthan, Diazopropan, Diphenyldiazomethan oder dergleichen.

Die Umsetzung kann in Gegenwart oder in Abwesenheit ein'es Lößungsmittels, wie Ν,Ν-Diinethylforinamid, Dimethylsuifoxid oder irgendeines anderen Lösungsmittels, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, und innerhalb eines Temperaturbereiches von Kühlen bis zu Erhitzen durchgeführt werden. Bei dieser Reaktion kann die flüssige Hydroxyverbindung als

- 41

239

Lösungsmittel verwendet werden.

Diese Umsetzung kann vorzugsweise in Gegenwart einer anorganischen oder organischen Base, wie sie in dem obigen Verfahren E angegeben ist, durchgeführt werden. Im Falle der Herstellung eines substituierten oder unsubstatuierten Arylesters (Ij), insbesondere eines substituierten oder unsubstituierten Phenylesters, sollte diese Reaktion durchgeführt werden durch Umsetzung (a) einer Verbindung (XII) oder ihres Salzes mit Phenol oder seinem Salz in Gegenwart eines Kondensationoinittels, wie es in dem obigen Verfahren A beispielhaft angegeben ist, oder (b) eines reaktionsfähigen Derivats der Verbindung (XII), vorzugsweise eines gemischten Säureanhydrids der Verbindung (XII)^ mit Phenol oder einem Salz davon in Gegenwart einer Base.

Wenn.eine Verbindung (XII), worin A eine Gruppe der Formel

-C- bedeutet, worin R~ einen durch Carboxy substituierten

S 2

Ο-ΊΓ

aliphatischen Kohlenwasserstoffrest' darstellt, als Ausgangsmaterial bei dieser Reaktion verwendet wird, kann diese Carboxygruppe auch mit dem Reagens und unter den angegebenen Reaktionsbedingungen verestert werden und diese Art der Reaktion liegt ebenfalls im Rahmen der vorliegenden Erfindung.'

Wenn die der Verbindung (Ij) entsprechende 2-Cephem~Verbindung hergestellt wird, kann diese 2-Cephem-Verbindung durch Oxidieren und anschließendes Reduzieren der dabei erhaltenen S-Oxid-Verbindung auf konventionelle Weise in die 3-Cephem-Verbindung (Ij) überführt werden. Diese Arten der Reaktionen liegen ebenfalls im Rahmen des erfindungsgemäßen Verfahrens.

~ 42 ~

~ 42. ~

Verfahren K: Carbon-Bildung

Dieses Verfahren liefert eine freie Carboxy-Verbindung (Ik)

Ί oder ihr Salz, insbesondere die Verbindung (Ik), worin R '

τα _

Kiiadiazolyl oder Thiazolyl der Formel Ei_][ ji bedeutet,

6 ^S

worin E die oben angegebenen Bedeutungen hat, und worin A

ο eine Gruppe der Formel -C- darstellt, worin P, die oben an»

It

N ·

^J 2

gegebenen Bedeutungen hat, die im allgemeinen höhere anti-

mikrobielle Aktivitäten aufweist als die entsprechende funktionell modifizierte C'arboxyverbindung ((XIII)₀ Die Bedeutung der funktionell modifizierten Carboxy gruppe in der Verbindung (XIII) liegt daher hauptsächlich in der synthetischen Herstellung unter Anwendung chemischer Verfahren, wie sie weiter oben erläutert sind«

Dieses Verfahren w.ird durchgeführt, indem man die funktionell modifizierte Carboxyo^ruPP^e ^^ΘΓ Ausgangsverbindung*(XIII) in die freie CarboxyS^ruPP^e überführt, und die bevorzugte funktionell modifizierte Carboxygruppe für Rr in der Verbindung (XIII) kann eine veresterte C arb oxy gruppe sein, wie für ¹Rr der Verbindung (I) beispielhaft angegeben. Das auf' diesen Prozeß angewendete Verfahren umfaßt die konventionellen Verfahren, wie z. B. die Hydrolyse, die Reduktion und dergleichen,, Das Hydrolyseverfahren umfaßt ein konventionelles Verfahren unter Verwendung einer Säure, einer Base, eines Enzyms oder eines Enzympräparats und dergleichen*

Geeignete Beispiele für die Säure und die Base sind diejenigen, wie sie in dem obigen Verfahren E beispielhaft angegeben

sind., und die saure oder basische Hydrolyse kann auf ähnliche Weise wie in dem Verfahren E durchgeführt werden. Zu geeigne ten Enzymen gehören eine Esterase und ein Esterasepräparat, die eine Esteraseaktivitat aufweisen, beispielsweise

eine Kulturbrühe von Mikroorganismen oder behandelte Mikroorganismenmaterialien, ein Tier- oder Pflanzengewebe_T präparat oder dergleichen und vorzugsweise"eine Kulturbrühe von Mikroorganismen oder ein behandeltes Material davon«,

Eine Esterase, die bei der enzymatisehen Hydrolyse verwendet werden soll, kann nicht nur im gereinigten Zustand, sondern auch im rohen Zustand verwendet werden.

solche Esterase liegt häufig in weit verbreiteter Form vor, z. Bo in verschiedenen .Arten von Mikroorganismen, die leicht aus einer Bodenprobe und anderen Quellen auf konventionelle Weise isoliert v/erden können, und außerdem kann sie leicht von den gesammelten Kulturen gewonnen v/erden, die in öffentlichen Einrichtungen für die Sammlung von Mikroorganismenkulturen, wie z.e B. ATCC (American Type Culture Collection, Maryland, USA), IAM (Institute of Applied Microbiology, University of Tokyo, Japan.), IPO (Institute for Fermentation, Osaka, Japan), !LID (The Institute for Infectious Diseases, University of Tokyo, Tokyo, Japan), CBS (Centraalbureau voor Schimmelcultures, Bearn, Netherlands), PERM (Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Techno-' logy» Chiba, Japan) und NRSL (Northern Utilization Research and Development Division, U«S. Department of Agriculture, Illinois, USA) und dergleichen zugänglich sind.

Als Mikroorganismus mit einer Esteraseaktivitat kann

44

ein solcher verwendet werden, der zu dem Genus Bacillus, Corynebacterium, Mikrokokkus, Plavobacterium, Salmonella, Staphylokokkus, Vibrio, Mi er ob act er ium, Escherichia, Arthrobacter, Azotobacter, Alcaligenes, Khizobium, Brevibacterium, Kluyvera₅ Proteus, Sarcina, Pseudomonas, Xanthomonas, Protaminobacter, Comamonus und dergleichen gehört» - -

Beispiele für die obengenannten Mikroorganismen, die verwen- ' det v/erden können, sind folgende: Bacillus subtilis IAM-1069? ΙΑΜ-Ή07, IAM-1214, Bacillus sphaericus IAM-1286, Corynebacterium equi IAII-I3O8, Micrococcus varians ΙΑΜ-13Ί4-, Flavobact.erium rigeus IAM-1238, Salmonella typhimurium IAIl-1406, Staphylococcus epidermidis IAM-12.96, Microbacterium flavum IAM-1642, Alcaligenes faecalis ATCC-875O, Arthrobacter simplex ATCC-6946, Azotobacter vinelandii IAM-IO78, Escherichia coil IAM-1101, Ehizobium japonicum IAM-0001, Vibrio metchnikovii ' IAM-IO39, Brevibacterium helvolum IAM-1637> Protaminobacter ,alboflavum IAM-1040, Comamonas terrigena IFO-12685, Sarcina . · lutea IAM-1099, Pseudomonus schuyllcilliensis IAM-1055, Xanthomonas trifolii ATCC-12287 oder dergleichen.

Bei der enzymatisehen Hydrolyse kejm die Esterase vorzugsweise in Form einer Kulturbrühe, die durch Kultivieren von Mikroorganismen mit einer Esteraseaktivität auf geeignete Weise hergestellt worden ist, oder in Form ihres bearbeiteten Materials verwendet werden. Die Kultivierung von Mikroorganismen kann im allgemeinen auf konventionelle Weise durchgeführt werden«, Als Kulturmedium kann ein Nährmedium verwendet werden, das Quellen für assimilierbaren Kohlenstoff und assimilierbaren Stickstoff sowie anorganische Salze enthält« Die bevorzugten Kohlenstoffquellen sind Z₉ B. Glucose, Saccharose,

Lactose, Zucker, Glycerin und Stärke« Die bevorzugten Stickstoffquellen sind z. B. Fleischextrakt, Pepton, Glutenmehl, Maismehl j Baumwollsamenniehl, Sojabohnenmehl, Maisquellwasser, Hefeextrakte, Caseinhydrolysat und Arainsäuren sowie anorganische und organische Stickstoff enthaltende Salze, wie Ammoniumsalze (z. B, Ammoniumsulfat, Ammoniumnitrat, Animoniumphosphat und dergleichen), Natriumnitrat oder dergleichen. Gewünschtenfalls können auch Mineralsalze, wie Calciumcarbonate Hatrium- oder Kaliumphosphat, Magnesiumsalze und Kupfersalze und verschiedene Vitamine verwendet werden«,

Der pH-Wert des Kulturmediums, die geeignete Kultivierungstemperatur und die geeignete Kultivierungsseit variieren zweckmäßig in Abhängigkeit von der Art der verwendeten Mikroorganismen» Ein erwünschter pH-Wert liegt in der Regel innerhalb des Bereiches von pH 5 bis 8„ Die Temperatur wird so gewählt, daß sie in der Regel innerhalb eines Bereiches von etwa 20 bis etwa 35°C liegt« Die Kultivierungszeit wird so gewählt, daß sie in der Regel innerhalb des Bereiches von 20 bis 120 Stunden liegt.

Die auf diese Weise erhaltene Kulturbrühe selbst .und ihr bearbeitetes Material können für die enzymatisch^ Hydrolyse in diesem Verfahren verwendet v/erden» Bei dem "bearbeiteten Material" der Kulturbrühe handelt es sich um irgendein Präparat, das eine Esteraseaktivität aufweist, das auf irgendeine konventionelle geeignete V/eise behandelt worden ist zur Erhöhung der Esteraseaktivität ο Die Esteraseaktivität der Kulturbrühe liegt in den Zellen (intrazellulär) und/oder außerhalb der Zellen (extrazellulär) vor«.

Wenn die Aktivität hauptsächlich in den Zellen vorliegt, kann

- 46 -

ί·4 239

"beispielsweise das nachfolgend angegebene Präparat als behandeltes Material der Kulturbrühe verwendet werden:

(1) rohe Zellen: sie werden auf konventionelle Weise,.beispielsweise durch Filtrieren und Zentrifugieren, von der. Kulturbrühe abgetrennt;

(2) getrocknete Zellen: sie werden erhalte_n durch Trocknen der rohen Zellen auf konventionelle Weise, beispielsweise, durch Lyophilisierung und Trocknen im Vakuum;

(3) zellfreier Extrakt: er wird erhalten durch Zerstören der rohen oder getrockneten Zellen auf konventionelle Weise (z„ B. durch Mahlen der Zellen mit Aluminiumoxid, Meer-' sand und dergleichen oder durch Behandeln der Zellen mit Ultraschallwellen) oder

(4) Enzymlösung: sie wird erhalten durch Reinigung oder teilweise Eeinigung des zellfreien Extrakts auf konventionelle V/eise»

Venn die Aktivität hauptsächlich außerhalb der Zellen vorliegt, können als behandeltes Material beispielsweise die · folgenden Präparate verwendet werden:

(1) eine überstehende Flüssigkeit oder ein Filtrat: es wird erhalten auf konventionelle Weise aus der Kulturbrühe, oder

(2) eine Enaymlösung: erhalten durch Eeinigung oder teilweise Eeinigung der überstehenden Flüssigkeit oder des Filtrats auf konventionelle Weise« ' ·

Die enzymatisch^ Hydrolyse wird durchgeführt, indem man die Verbindung (XIII) mit der Kulturbrühe der Mikroorganismen oder ihrem behandelten Material in einem wässrigen Medium, z_a

Β» in Wasser oder einer Pufferlösung (z„ B. einem Phosphatpuffer und dergleichen), vorzugsweise in Gegenwart eines konventionellen oberflächenaktiven Mittels, in Eontakt bringt. Das heißt, die Reaktion wird in der Regel durchgeführt durch Zugabe der Verbindung (XIIl) zu der Kulturbrühe der Mikroorganismen oder ihrem flüssigen behandelten Material> ζ» Β» der überstehenden Flüssigkeit, dem FiItrat, der Enzymlösung und dergleichen, oder zu der Lösung oder Suspension der Kulturbrühe oder ihrem behandelten Material in einem wässrigen Medium. Manchmal ist ein Rühren der Reaktionsini--. ßchung bevorzugt.

Der bevorzugte pH-Wert der Reaktionsmischung, die bevorzugte Konzentration der Substrate, die bevorzugte Reaktionszeit und die bevorzugte Reaktionstemperatur können in Abhängigkeit von den Eigenschaften der verwendeten Kulturbrühe oder ihres verwendeten behandelten Materials oder in Abhängigkeit von der verwendeten Verbindung (XIII) variieren. Die Reaktionsbe'din- gungen werden jedoch vorzugsweise so ausgewählt, daß sie liegen innerhalb eines pH-Vertbereiches von 4- bis 10, vorzugsweise von 6 bis &, bei einer Temperatur innerhalb des Berei-1_ ches von 20 bis 5O⁰C, vorzugsweise von 25 bis 3>5°C, und bei einer Reaktionszeit innerhalb des Bereiches von 1 bis 100. Stunden» Die Konzentration der Ausgangsverbindung (XIII), die als Substrat in dem Reaktionsgemisch verwendet wird, kann innerhalb des Bereiches von 0,1 bis 100 mg pro ml, vorzugsweise von 1 bis 20 mg pro ml, liegen«. .

Die Reduktion kann bei diesem Verfahren auf ähnliche Weise wie in dem obigen Verfahren E durchgeführt werden« Dieses Verfahren umfaßt die Fälle, bei denen die Schutzgruppe in dem ,. geschützten Amino für R , bei dem es sich um einen

39

Substituenten an der .Thiazolylgruppe für B. handelt, eliminiert wird und/oder bei dem die veresterte Garboxygruppe, die ein gegebenenfalls vorhandener Substituent an dem aliphati-

sehen Kohlenwasserstoffrest für E in der Gruppe A ist, im Verlaufe der Reaktion oder der Nachbehandlung in die freie Carboxygruppe umgewandelt (überführt) wird.

Die bei Anwendung der vorstehend erläuterten Verfahren erhaltene Verbindung kann auf konventionelle Weise isoliert und gereinigt; werden« Wenn die erfindungsgemäße Verbindung (I) eine freip Carboy gruppe für Ir und/oder eine freie Amino-. gruppe für E aufweist, kann sie unter Anwendung eines konventionellen Verfahrens in ihr pharmazeutisch verträgliches Salz überführt werden*

Unter den erfindungsgemäßen Verbindungen (I), weisen die Verbindungen (I¹) und ihre pharmazeutisch verträglichen Salze und Biovorläufer hohe antimikrobielle· Aktivitäten auf, Vielehe das Wachstum der verschiedensten pathogenen Mikroorganismen einschließlich der grampositiven und gramnegativen Bakterien hemmen bzw, verhindern und die als antimikrobielle Mittel verwendet werden können. .

Nach den vorstehend beschriebenen Verfahren können insbesondere die folgenden Verbindungen hergestellt werden;

7-/2-(2-Amino-4-thialzolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-methoxy~3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres.)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7~2,3- ' dimethyl-"3-cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7~/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetaraido7-3~ chloro~3-cephein-4-carbonsäure (anti-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido7-3~ cephem-4~carbonsäure (syxi-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-tosyloxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) "

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-äthoxyiminoacetamido7-3-cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-äthoxyiminoacetamido7-3-chloro~3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-isopropoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiminoacetamido7-3-chloro-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4~thiazolyl)-2-propoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)'

7-/2-(2-Amino~4-thiazolyl)-2-isobutyloxyiminoacetamido7- 3-cephem-4«carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-n-butoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

- 50

- 50 - . Ä

• (2-Amino-4-thiazolyl) -2-n-liexyloxyiminoacetamido7~3~ cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-cyclo.hexyloxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-allyloxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-propargyloxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-äthoxycarbonylmethoxyiminoacetamido7-3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2~Ailiino-4-thiazolyl) ~2-carboxymethoxyiminoacetamido7: 3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-n-pentyloxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2~Amino-4-thiazolyl)-2-(2,2,2-trifluoroäthoxyimino) acetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2~Amino-4~thiazolyl)-2-(2-chloroäthoxyimino)-acetamido7"3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-(2,2,2-trifluoroäthoxyimino) acetamido7^3-chloro-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7~/2-(2-Formamido~4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem--4-carbonsäure (syn-Isomeres).

7-/2~(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3- * cephem-4-carbonsäure (anti-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4~thiazolyl)-2~n-octyloxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-(2,3,3-trifluoro-2-propenyloxyimino)acetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

- 51 -

7-/2-(2~Amino-4-thiazolyl)-2-lauroyloxymethoxyiminoacet~ amido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn~Isomeres)

7-/2-(2-Amino-A-thiazolyl)-2-n-butoxyiminoacetamido7-3~ .chloro-^-cephem^-carbonsa.ure (syn-Isomeres)..

7-/2-(2-Amino~4-thiazolyl)-2-n-butoxyiminoacetamido7-3-methoxy-^-cephem-A-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-propargyloxyiminoacetamido7-3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino~4-thiazolyl)-2-trif luormethoxyiminoacetamido7--3-cephem-4·-carbonsäure (syn-Isomeres),

sowie die jintsprechenden funktionell modifizierten Derivate, wie z.B.

Hexanoyloxymethyl-y-/^-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-ceph&m-4-carboxylat (syn-Isomeres)

Pivaloyloxymethyl 7~/2-(2-amino-4~thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

4-Nitrobenzyl 7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem~4-carboxylat (syn-Isomeres)

4-Nitrobenzyl 7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-hydroxy-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

4-Nitrobenzyl 7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-athoxyiminoacetamido7-3-hydroxy-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

4-Nitrobenzyl 7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)~2-n-propoxyiminoacetamido7-3-hydroxy-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

4-Nitrobenzyl 7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isobutoxyiminoacetamido7-3-hydroxy-3-cephem-4-carboxylat (syi-Isomeres)

. «j ι & £. α " 52 -

sowie die entsprechenden Salze, wie z.B.

Natrium-7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3~cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres); ·

Calcium-7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3~cephem-4--carboxylat (syn-Isomeres);

Magnesium-7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7'-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres);

Argininsalz der 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino~ ' acetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres);

Lysinsalz der 7-/2-(2~Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres);

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl )-2-methoxy iminoacetamido7-3-cephem'-4-cartsonsäurehydrochlorid (syn-Isomeres).

Die nachfolgend angegebenen Testdaten von einigen repräsentativen Verbindungen (I¹) sollen die Brauchbarkeit der er-.findungsgemäßen aktiven Verbindungen (I¹) zeigen.

^^Antibakterielle in vitro-Aktivität 1*2 ?^e

Die antibakterielle in vitro-Aktivität wurde unter Anwendung des nachfolgend beschriebenen Zweifach-Agar-Platten-Verdünnungsverfahrens bestimmt.

Eine Ösenfüllung der 100~fachen Verdünnung einer Übernacht-Kultur jedes Teststammes in einer Tryptikase-Sojabrühe wurde auf einen Herzinfusionsagar (HI-Agar) aufgestrichen, der abge stufte Konzentrationen der Testverbindung enthielt, und 20 Stunden lang bei 37 C inkubiert; die.minimale Hemmkonzentration (MIC) wurde ausgedrückt in jug/ml.

- 53 -

2.^Testverbindungen:_

1 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7™

3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

2 —-. 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido7-

3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

3 — 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-äthoxyiminoacetamido7-

3--cephem~4-carbonsäure (syn-Isoraeres)

4 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7- .

3-chlorO-3-cephem-4"Carbonsäure (syn-Isomeres)

5 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)~2-n-propoxyiminoacetamido7~

3-cephem~4-carbonsaure (syn-Isomeres)

6 . —- 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-n-butoxyiminoacetainido7-

3-cephem-4"Carbonsäure (syn-Isomeres)

. 7 ___ 7-/2-(2--Amino-44;hiazolyl)-2-allyloxyiminoacetamido7--3™cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

8 7-/2-(2~Amino-4-thiazolyl)-2-propargyloxyiminoacetami~

do7"3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

9 : 7-/2-(2-AminO"4~thiazolyl)-2-n-pentyloxyiminoacetami-

do7-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

-r— 7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)~2-ri-hexyloxyiminoacetamido7-

3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

-— 7-/2-(2-Amino-4~thiazolyl)"2-cyclohexyloxyiminoacet-

amido7"3 -cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-(2-chloroäthoxyimino)-acetamido7-3-cephem-4-carbonsäure. (syn-Isomeres) _-_ 7-/2-(2-Amirio-4-thiazolyl)-2-(2-,2,2-trifluoräthoxyimino)acetamido7-3-cdphem-4-carbonsäure (syn-Isomeres)

MlCCyg/ml)

^~"~"~*~--^ Verbindung Nr. Test -Stämme ^"~"~~~--^^^	1	0.39	3	4	5	6	7	8	ft*
Staphylococcus aureus 209P JC-I	6.25	0.1	3.13	12.5	1.56	0.78	1.56	1.56
Escherxchia coli. NIHJ JC-2	£0.025	0.1	0.05 .	0.39	0.2	0.39	0.2	0.1
1 Proteus . vulgaris IAM-1025	<0.025 Esa _t	£0.025	<0.025	<0.025	£0.02S	0.05	£0.02S	£0.02.5 -
Klebsiella pneumoniae^:20	£0.025	<0.025	£0.025	0.1	<0.025	0.2.	<0.025	£0.025
Proteus .mirabilis^l&^	£0.025	6.25	<0.025	0.0125	0.1	0.2	£0.025	£0.025
Pseudomonüs'^; aeruginosa .NCTC-10490	' 0.39	12.5	£1.56	6.25	£1.56	£1.56	<1.56	£.1.56
ι ^! Serratia ' marcescens 35 · ί .	1.56	0.78	50	3.13	6.25	1.56	3.13

^""~--^_^^ Verbindung Nr. Test-Stämme - ^^~~~^-^^__^	9 .	10	11	12	13
Staphylococcus aureus 209P JC-I	0.39	1.56	0.39	1.56	1.56
Eseherichia cοIi NIHJ JC-2	3.13	1.56	3.13	0.1	' 0.2
Proteus vulgaris IAM-102 5	0.39	0.2	0.78	£0.025	<0.025
Klebsiella pneumaniae 20	0.2	0.05	0.39	0.1	0.05
Proteus mirabilis 18	1.56	0.78	1.56	0.2	0.2
Pseudoincnus aeruginosa NCTC-10490	3.13	£1.56	£1.56	£1.56	£1.56
Serratia marcescens 35	3.13	12.5	12.5	12.5	6.25

~⁵⁶~

2.) Schutzwirkung gegenüber künstlich hervorgerufenen Infektionen

bei Mäusen _ ' __|

1 *j_ Xestverfa_hren_ ' .

Es wurden 4 Wochen alte männliche Mäuse vom ICR-Stamm, die jeweils ein Gewicht von 18,5 bis 21,5 g hatten, in Gruppen zu 10 Mäusen verwendet. Die Testbakterien wurden über Nacht bei 37 C auf einem Tryptikase-Soja-Agar kultiviert und dann in 5 % Mucin suspendiert zur Herstellung der Suspension, die den Jeweiligen Erregerzellen entsprach. Die Mäuse wurden intraperitoneal mit 0,5 ml der Suspension inokuliert. Eine jede Testverbindung enthaltende Lösung wurde subkutan in variierender Dosierung 1 Stunde nach der Infizierung den Mäusen verabreicht.

Die EDc-.'-V/erte wurden aus der Anzahl der Überlebenden Mäuse 50

bei jeder Dosierung nach 4-tägiger Beobachtung errechnet.

1 ν-«·- 7«[2-(2«Amino-4-thiazolyl)-2™methoxyiminoacetamido]~·

3~cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres); Vergleichsverbindung —— 7-[2~(2»Amino-4-thiazolyl)-2»methoxy

iminoacetamido]cephalosporansäure (syn-Isomeres).

- 57 -

Test- Bakterien	inokulierte Zellen/Maus	ED₅₀Cs.	cO (mg/kg)	Vergleich	'. MIC	(yg/ml.)	3.13
	1.1 χ ΙΟ⁷	Test verbindüngen	2.8	Inokulum-¹ r· -·ο	Test verbindungen	0.1
Escherichia coll 54	8 χ ΙΟ⁶	1	0.995	Große	1 jVergleich.	3.13
Klebsieila pneumoniae 39	9.9 χ ΙΟ⁶	0.95	1.171	0 *1 10^U ^X	0.78	0.05
Proteus		<0.98		ΙΟ"²*²	0.05	50
rettgeri 24	1.2 χ ΙΟ⁷	0.39	31.427 *	10°	0.39	0.1
Serratia			10~²	<0.025	50
Marcescxns 58	3.562 ^ώ	10°	1.56.	1.56
	10~²	^0.025
10°	25
10"²	0.39

*1: Übernachtkultur _

*2: 100-fache Verdünnung der ^bernachtkultur

*3: behandelt mit zwei Teildosen 1 Std. und 3 Std. nach der Infektion

3.) Akute Toxizitöt

L*I. X^e£^X^e£/£.ⁿ£.^en,

Es wurden 10 männliche und 10 weibliche Ratten, die 6 Wochen alt waren (Stamm JCL-SD) pro Gruppe verwendet. Die" in destilliertem Wasser gelöste Testverbindung wurde den Tieren subkutan und intravenös verabreicht. Diese Tiere wurden 7 Tage lang nach der Dosierung beobachtet. Die LD₅ -Werte wurden aus der Anzahl der toten Tiere nach der Litchfield-Wilcoxon-Hethode errechnet.

7»t2=-(^«Arrtino-4-thiazol/l)~2~.methoxyiminoacetamido]-3-cephern«-4™ carbonsäure (syn-Isomeres) '

Versuchs« tier	3e schlecht	LD₅₀ (mg./kg.)	i.v.
Ratte	nännlich ved blich	S .C.	etwa 800 0 >8000
>80ü0 >80Ö0

4.) Absorbierbarkeit

Die Testverbindüng wurde oral an eine Gruppe von 5 Ratten (6 Wochen alt, weiblich, Stamm JCL-SD), die gefastet hatten, verabreicht. Nach 0 bis 6 Stunden und 6 bis 24 Stunden wurden Gallen- und Urinproben gesammelt. Die Konzentrationen der Testverbindung in den Proben wurde unter Anwendung eines biologi-

sehen NachweisVerfahrens (Scheiben-Verfahren) unter Verwendung von Bacillus subtilis ATCC-6633 als Testorganismus bestimmt und die Rückgewinnung in der Galle und in dem Urin wurde errechnet.

2.·2. Z^e:L^Y-^e£.ki-ⁿ£L^uI1.9._ 7»[2-(2-Amino-4-thiazolyl)~2-n-pentyloxyiminoacetamido]--3-

cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres) 3») X^este_raebni_s__

Die Gesamtrückgewinnung in der Galle und in dem Urin innerhalb

von 24 Stunden betrug 22,8 %.

Für die prophylaktische und/oder therapeutische Verabreichung wird die erfindungsgemäße aktive Verbindung (l¹) in Form eines konventionellen pharmazeutischen Präparats verabreicht, welches diese Verbindung als Wirkstoff (aktiven Bestandteil) gegebenenfalls in Mischung mit einem oder mehreren pharmazeutisch verträglichen Träger und/oder Hilfsstoff, wie z.B. einem organischen · oder anorganischen festen oder flüssigen Hilfsstoff enthält, der für die orale, parenterale oder externale Verabreichung geeignet ist.¹ Die pharmazeutischen Präparate (Arzneimittel) können in fester Form, z.B. in Form von Kapseln, Tabletten, Dragees, Salben oder Suppositorien, oder in flüssiger Form, z.B. als Lösung, Suspension oder Emulsion, vorliegen. Erforderlichenfalls können in den oben genannten Präparaten Hilfssubstanzen, Stabilisierungsmittel, Netz- öder Emulgiermittel, Puffer und andere üblicherweise verwendete Zusätze enthalten seine

- 60 - ·

Obgleich die Dosierung der erfindungsgemäßen Verbindungen je nach und in Abhängigkeit von dem Alter und dem Zustand des Patienten, der Art der Erkrankung und dem Grad der Infektion und außerdem der Art der verabreichten aktiven Verbindung (l ) und dgl. variieren kann, reicht eine durchschnittliche Einzeldosis von etwa 50 mg, 100 mg, 250 mg und 500 mg der aktiven Verbindung (l) für die Behandlung von Infektionserkrankungen aus, die durch pathogene Bakterien hervorgerufen worden sind. Im allgemeinen kann die aktive Verbindung (i )' in einer Menge zwischen 1 und 100, vorzugsweise zwischen 5 und 50 mg pro kg verabreicht werden.

Die Ausgangsverbindung (ill) kann wie folgt hergestellt werden:

- 61 -

X-CH₂CO-C-COOZ N OH

("Ia)

x-CH,co-c-cooz (in,)

(VII_a)

c-cooz

OH

a V S

_N J-C-COOZ (III_d)

°-^Ra

C-COOZ (HI₆)

0-R?

o-r:

ι—T-C-COOH

• o-r;

. R'-ONiU- (XIV)

9. c

-C-COOH O

worin bedeuten;

2 '

R" einen aliphatischen Kohlenwasserstoffrest, der substituiert

sein kann durch Halogen, Carboxy oder verestertes Carboxy,

R geschütztes Amino,

X Halogen,

Y niederes Älkoxycarbonyl und

Z niederes Alkyl.

Die vorstehend beschriebenen Verfahren werden nachfolgend näher erläutert.

Die Verbindungen (ill, ) und (III ,) können jeweils hergestellt v/erden durch Umsetzung einer Verbindung (ill ) bzw. (ill ) mit einem Verätherungsmittel. Diese Umsetzung kann im wesentlichen auf die gleiche 'Weise wie in dem obigen Verfahren C durchgeführt

werden.

Verfahren 2: Thiazolring-Bildung

Die Verbindungen (ill ) und (III ,) können jeweils hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (III ) bzw. (ill, ) mit einer Thioharnstoffverbindung (.VII ) und außerdem kann die Verbindung (ill ) hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (ill, ) mit Thioharnstoff. Diese Umsetzung kann im wesentlichen auf die gleiche V/eise wie in dem obigen Verführen D durchgeführt werden.

21 4 239

Ve r fa hre η 3; Elimiηieru η g der Aminoschutzgruppe

Die Verbindungen (ill ) und (ill ) können jeweils hergestellt

e g

werden, indem man eine Verbindung (ill ,) bzw. (III,.) einer Reaktion zur Eliminierung der Schutzgruppe in der geschützten Arninogruppe für R unterwirft. Diese Umsetzung kann im wesentlichen auf die gleiche Weise wie in dem obigen Verfahren E durchgeführt werden.

Die Verbindungen (lllr), (ill ) und (ill.) können jeweils hergestellt werden durch Überführung der veresterten Carboxygruppe einer Verbindung (ill,), (ill ) bzw. (ill.) in die freie Carboxygruppe. Diese Umsetzung kann im wesentlichen auf die gleiche V/eise wie in dem obigen Verfahren K durchgeführt werden.

- 64

Verfahren 5:^ Oximbildung

Die Verbindung (l_r) kann auch hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung (III,) mit einem Hydroxylaminderivat (XIV) oder einem Salz davon«

Bei dem Hydroxyiaminderivat (XIV) kann es sich um Hydroxylamin handeln, das substituiert ist durch einen aliphatischen Kohlenwasserstoff rest, der substituiert sein kann durch Halogen, Carboxy oder verestertes Carboxy, wobei Einzelheiten und Beispiele dafür weiter oben angegeben worden sind. Bei einem geeigneten Salz des Hydroxylaminderivats (XIV) kann es sich

- 65-

um das Hydrochlorid, Hydrobromid, Sulfat oder dgl. handeln.

Die Umsetzung wird in der Regel in einem konventionellen Lösungsmittel, wie Wasser, Alkohol, Tetrahydrofuran^ Acetonitril, Dimethylsulfoxid, Pyridin oder irgendeinem anderen Lösungsmittel, welches die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt, oder in einer Mischung davon durchgeführt und die Reaktionstemperatur ist nicht kritisch.

Wenn ein Salz des Hydroxylaminderivats (XIV) als Reagens verwendet wird, wird die Umsetzung vorzugsweise in Gegenwart einer konventionellen Base durchgeführt.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert?

- 66 -

e 1 sp.i e 1 e;_

Herstellung der Thiazolverbindungen

lo) 160 g pulverisiertes Kaliumcarbonat wurden zu einer Lösung

von 152 g Xthyl~2-hydroxyiminoacetoacetat (ein Gemisch der syn-

vnd anti-Isomeren) in 500 ml Aceton zugsgeben > Unter Rühren wurden innerhalb eines Zeitraums von 1 Stunde bei 45 bis 50 C 130 g Dimethylsulfat zugetropft und die Mischung wurde 2 Stunden lang gerührt. Ein unlösliches Material wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt» Das abfiltrierte unlösliche Material wurde in 500 ml Wasser gelöst und diese Lösung wurde zu dem Rückstand zugegeben. Die Mischung wurde 2 mal mit 300 ml Äthylacetat extrahiert» Der Extrakt wurde zweimal mit 200 ml Wasser und mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet* Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand wurde unter vermindertem Druck destilliert, wobei man 145,3 g Xthyl-2-methoxyiminoacetoacetat (ein Gemisch der syn- und anti-Isomeren) in Form eines farblosen Öls erhielt, Kp. 55 bis 64°C/0,5 mm Hg. .

^I>R· ^v lll^m ^{: 1745}> 1695, 1600 cm"¹ • ^N>M-^R·. ^δρρΐη CCDCiI₃) : 4.33 (4H, q, J=SHz),

4.08 (3H, s), 3.95 (3H, s) , 2.40 (3H, s), 1.63 (3H, s) , 1.33 (6H, t, J=8Hz)

2«) 235 ml Sulfurylchlorid wurden innerhalb eines Zeitraums von 20 Minuten unter Rühren und unter Eiskühlung zu einer Lösung von 500 g Xthyl~2-methoxyiminoacetoacetat (syn-Isomeres) in 500 ml Essigsäure zugetropft und die Mischung wurde über Nacht unter Kuhlen mit Wasser gerührt« In die Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang Stickstoffgas eingeleitet und die dabei erhaltene Mischung v/urde in 2,5 1 Wasser gegossen. Nach dem Extrahieren mit 500 ml Methylenchlorid und mit 2 mal 200 ml Methyienchlorid vfurden die Extrakte miteinander vereinigt. Die vereinigten Extrakte wurden mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung ge-Vfaschen und durch Zugabe von Wasser (800 ml) und Natriumbicarbonat ouf pH 6,5 eingestellt. Die Methylenchloridschicht wurde abge» trennt, mit e5.ner wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und Über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wurde abdestil-Hert, wobei;i,man 559 g Xthyl-2-methoxyimino-4~chloracetoocetat (syn-Isomeres) erhielt.

^{: 1735}' ¹⁷⁰⁵ ^Cnrl

68

3.) 50 g &thyl~2-Methoxyimino~4-chloracetoaeet'at (syn-Isomeres) wurden über einen Zeitraum von 3 Minuten unter Rühren bei Umgebungstemperatur zu einer Lösung von 18,4 g Thioharnstoff und 19,8 g Natriumacetat in einer Mischung aus 250 ml Methanol und

250 ml Wasser zugegeben. Nach 35-minütigem Rühren bsi 40 bis 45 C wurde die Reaktionsmischung mit Eis abgekühlt und mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbontitlösung auf pH 6,3 eingestellt* Nach 30-minütigem Rühren bei der gleichen Temperatur wurden die ausgefallenen Niederschläge durch Filtrieren gesain«

rasIt, mit 200 ml Wasser und dann mit 100 -ml Diisopropyläther gewaschen und getrocknet, wobei man farblose Kristalle von Äthyl»2-methoxyimino»2-(2-amino-l,3-thiazol-4-yl)acetat (syn-Isomeres) (37,8g) erhielt, F. 161 bis '162⁰C.

I.R. ν ^Nujo1 : 3400, 3300, 3150, 1725, 1630,

1559 cm"¹

N.M.R. δ _m (CDGA₃) : 6.72 (IH, s), 5.91 (2H, broad s), 4.38 (2H, q, J=7Hz) , 4.03 (3H, s), 1.38 (3H, t, J=7Hz).

- 69

Beispiel__B

10 ml Äthanol wurden zu einer Suspension von 2,2 g.Äthyl-2~methoxyimino"=2"-(2-GiT}ino-l _f 3™thiazol-4~yl)acetat (syn-Isomeres) in 12 ml einer 1 η wäßrigen.Natriumhydroxidlösung zugegeben und die Mischung wurde 15 Stunden lang bei Umgebungstemperatur gerührt«, Die .Reaktionsmischung wurde mit 10 zeiger Chlorv>asser« stoffsciure auf pH 7 eingestellt und das Äthanol wurde unter verminderten) Druck o'bdsstilliert« Die zurückbleibende wäßrige Lösung wurde miit Äthylacetat gewaschen, mit 10 /iiger Chlorwasserstoffsüure auf pH 2,8 eingestellt und unter Eiskühlung gerührt, wobei Kristalle ausfielen« Die Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, nut Aceton gewaschen und aus Äthanol umkx-istallisiert, wobei man 1.1 g farblose Nadeln von 2~Möthoxy»

imino»2-(2»ainino-1 _/3~thiazol«4-yl)essigsäure (syn-Isomeres) erhielt*

• ¹^* ^V

N.M.R. δ Cd₆-DMSO) : 7.20 (2H, breit

6.85 ClH., s), 3.83 (3H₅ s)

Beispiel C

1.) 35,2 g Sulfurylchlorid wurden auf einmal zu der gerührten Lösung von 48,9 g $thyl~2-ätho>iyimino-»3""oxobutyrat (syn-Isomeres) in 49 ml Essigsäure bei Raumtemperatur zugegeben und es wurde 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt« Nach der Zugabe der dabei erhaltenen Lösung zu 200 ml Wasser wurde die Lösung mit Methylenchlorid extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten v/äßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, mit einer wäßrigen Natriumbicarbonatlösung neutralisiert und mit Wasser gev/a se hen. Die Lösung wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wpbei man 53,8 g Äthyl-2~äthoxyimino~3«-oxo~4~chlorbutyrat (syn-Isomere.s) in Form eines blaßgelben Öls erhielt.

- 71 -

2«) Eine Mischung aus 38,7 g Äthyl»2-äthoxyimino~3~oxo-4-chlorbutyrat (syn—Isomeres), 13,2 g Thioharnstoff, 14,3 g Natriumacetat, 95 ml Methanol und 95 ml Wasser wurde 40 Minuten lang bei 48 C gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Lösung mit einer wäßrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 6,5 eingestellt worden war, wurden die entstandenen Niederschläge durch Filtrieren

gesammelt und

mit Diisopropyläther gewaschen, wobei man 14,7 g

Äthyl~2~(2~amxno«4~thiazolyl)»2»a"thoxyiminoacetat (syn-Isorneres)

erhielt, F. 130 bis 131°C. ..

¹ : 3450, 3275, 3125, 1715, 1620 cm"¹

- 72 »

- 72- 2! 4 23

3.) 5 g Athyl-2~(2-amino-4-thiazolyl.)-2-äthoxyiminoacetat (syn-lsomeres) wurden zu einer Mischung aus 45,9 ml 1 η Natriumhydroxid und 30 ml Äthanol zugegeben und es wurde Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach der Entfernung des Äthanols aus der dabei erhaltenen Lösung unter vermindertem Druck v/urde der Rückstand in 60 ml Wasser gelöst und mit 10 zeiger Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 eingestellt. Die Lösung wurde einer Aussalzung unterworfen und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet,, wobei man 2,9 g 2-(2-Amino-4-thiazGlyi)~2»cithoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt«

¹ -^{: 362S}» ^322S (Schulter), 3100, j 1650, 1615 cm"¹

j N.M.R. (Sppm (DMSO-d₆) :·1.20 (3H, t, J-7Hz),

j 4.09 (2H, q, J=7Hz), 6.82 (IH, s),

j 7.24 (2H; breit s)

4«) 100 g 2~(2-Ami"nothiazol-4-yl)~2-üthoxyiminoessigscJure (syn-Isomeres), 85,5 g Ameisensäure und 190,1 g Essigsäureanhydrid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt, wobei man 99,1 g 2«(2»Formarnidothiazol=4-yl)-2~ öthoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, TRv ^Nujo1 : 3200, 3140,-·3050, 1700 cm"¹ ^Χ·^Λ* max

N.M.R. δ(DMS0-d_6f ppm) : 1.18 (3H, t, J=6Hz),

4.22 (2H, q,;j=6Hz), 7.56 (IH, s), 8.56 (IH, s), 12.62 (IH, breit s)

_ 73 - ^ ¹^ Beispiel D

1.) Zu einer Suspension von 15 g Äthyl^-hydroxyimino^-oxobutyrat (syn-Isomeres) und 19,8 g Kaliumcarbonat in 75 ml Aceton wurden unter Rühren 16,2 g Propyljodid zugetropft und die Mischung wurde. 1,5 Stunden lang bei Umgebungstemperatur gerührt. Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren gesammelt und mit Aceton gewaschen. Die Waschwässer und das Filtrat wurden miteinander vereinigt und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft; zu dem dabei erhaltenen Rückstand wurde Wasser zugegeben und die wäßrige Lösung wurde zweimal mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck zur Trockne' eingedampft, wobei man 15,4 g Äthyl-3-oxo-^;-2-propoxyiminobutyrat (syn—Isomeres) in Form eines Öls erhielt. ' *

2.) 15,4 g Äthyl-3-oxo-2-propoxyiminobutyrat (syn-Isomeres) und 10,6 g Sulfurylchlorid wurden.in 15,4 ml Essigsäure gelöst, 10 Minuten lang unter Rühren auf 35 bis 40⁰C erwärmt und dann weitere 6 Stunden lang bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in 200 ml Eiswasser gegossen und die dabei erhaltene Mischung wurde zweimal mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer wäßrigen Natriumchloridlösung, zweimal mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und einmal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft, wobei man 15,4 g Äthyl-4-chlor-3-oxo-~2-propoxyiminobutyrat (sy>Isomeres) in Form eines Öls erhielt. .

¹⁷¹⁰> ~¹

3.) 15,4 g Äthyl-4~chlor~3-oxo~2-propoxyiminobutyrat (syn-Isomeres), 4,97 g Thioharnstoff und B_tB9 g NatriumacetatHydrat wurden in einer Mischung aus 40 ml Wasser und 50 ml Äthanol gelöst und 1 Stunde lang bei 40 C gerührt= Die Reaktionsmischung wurde mit einer gesattigten wäßrigen Kaliumcarbonatlösung unter Kühlen auf pH 6,5 eingestellt und bei der gleichen Temperatur 1/2 Stunde lang gerührte Die ausfallenden Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser und Diisopropyläther gewaschen . und dann getrocknet, wobei man 10,55 g kristallines Äthyl-2-(2«amino-4-thiazolyl)~2~propoxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt, F. 142 bis 144°G.

^{: 3460}' ³²⁶⁰' ³¹²⁰' .1720, 1620, 1540-cm"¹ N.M.R. ξ ppm (dg-DMSO) : 0.88 (3H, t, J=7Hz), 1.27 (3H, t, J=6Hz), 1.60 (2H, Sextett, J=7Hz), 4.04 (2H, t, J=7Hz), 4.28 (2H, g, J=OHz), 6.86 (IH, s), 7.23' (2H, s)

4.) Eine Lösung, von 10 g Xthyl~2~(2-amino~4~thiazolyl)~2-propoxy'-iminoacetat (syn-Isomeres) in einer Mischung aus 39 ml Tetrahydro furan, 39 ml Methanol und 75,8 ml 1 η Natriumhydroxid wurde 5 Stunden lang bei 35 bis 40 C gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Lösung unter vermindertem Druck eingeengt worden war, wurde der wäßrige Rückstand mit 10 /Siger Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,5 eingestellt« Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 6,2 g 2~(2~Amino»4~thiazolyl)-2-propoxy iminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 161 C (ZerSe).

τ R l/Nujol . _{3380/ 3120} (breit), 1630, 1610, 1460 cm ^x* ν max

N.M.R. J PP^ (DMSO-d₆) : 0.89 (3H, t, J=7Hz),

1.63 (2H, Sextett, J=7Hz),·4.05 (2H, t, J=7Hz), 6.83 (IH, s), 6.9 -8.8 (3H, br_eit-)

5.) 21,8 g 2-(2-Aminothiazol~4-yi)-2»n~propoxyiminoessigsüux-e (syn-Isomeres), 38,8 g Essigsäureanhydrid und 17,5 g Ameisen·» sUure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt und dann wurde das. dabei erhaltene Öl mit Diisopropyläther behandelt, wobei man 19,2 g 2~(2~Forrnaniidothiazol-4-yl)~2-n-propoxy™

iminoess

".gscjure (syn-Isomeres) erhielt, F. 164 C (Zers₀).

^I#i^R- ^V max ^{: 3200}> ³¹²⁰> 3050, 1700, 1550 cm"¹ N.M.R. o(DMSO-d₆, ppm) : 0.92 (3H,.t, J=7Hz),

1.67 (2H, Sextett, J= 7Hz).. 4.12 (2H, t, J=7Hz), 7.53 (IH, s), 8.5.4 (IH, s) LE ·

1·) 30 g A*thyl-2-hydroxyitnino-3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 32,5 g Isopropyljodid, 39_P5 g Kaliumcarbonat und 150 ml Aceton wurden auf ähnliche Vieise wie in Beispiel D (1 ) behandelt, wobei man 35,4 g Äthyl-2»isopropoxyinino»3-oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Ö'ls erhielt.

^X'^R' ^Vmll^m ^: 1745, 1690, 1600 cm"¹ , _ppm) : .^₃₃ ^ _t>

C6H, d,. J-6HZ), 2.32 (3H, s), 4.IM. 7 (3H, m).

2e) 35,4 g Xthyl-2-isopropoxyimino~3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 24,5 g Sulfurylchlorid und 35,4 ml Essigsäure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel D (2) behandelt«, wobei mein 41,5 g Äthyl-4-chlor~3-oxo-2~isopropoxyiminobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielt»

^I#R- ^V max" ^{: 174S}> ^171S> 137S cm"¹

3.) 41,5 g Äthyi-4-chlor»3-oxo~2-isopropoxyiminobutyrat (syn-Isomeres), 13,4 g Thioharnstoff, 14,4 g Natriumacetat, 110 ml Wasser und 110 ml Äthanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel D (3) behandelt, wobei man 27,3 g Äthyl-2->(2~aminothiazol-4~yl)-2~>isopropoxyiminoacetat (syn-Isomsres) erhielt, Fe 162 bis 164°C.

I,R. v ^NuJ^o1: 3460, 3430, 3260, 3150, 1725, 1615

JTIgIX

1540 cm"¹ N.M.R. 6(DMSO-d,, ppm) : 1.17 (6H, d, J=6Hz),

1.24 (311, t, J-7Hz)₁ 4M. 7 (3H, m) , 6.86 (IH, s), 7.24 (2H, s)

4.) 26,8 g Äthyl»2»(2-aminothiazol~4~yl)"-2--isopropoxyiminoacetat (syn«.Tsomeres), 156 ml einer In wäßrigen Natriutnhydroxidlösung, · 156 ml Methanol und 100 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche V/eise wie in Beispiel D (4) behandelt, wobei man 15,3 g 2~(2-Aminothiazol-4-yi)-2~isopropoxyiminoes$igsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 151⁰C (Zers.).

^V ϊ«^θ1·^{! 3610}' ³⁵⁸O* 3080, 1650, 1610 cm"¹ N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 1.22 (6H, d, J=6Hz),

4.33 (IH, Quintett, J=6Hz), 6.80 (IH, s), 7.22 (2H,- breit s)

5.) 4 g 2«(2~Aminothiazol-4-yl)"2-isopropoxyimirioessigsciure (syn-Isomeres), 7,6 g Essigsäureanhydrid und 3,4 g Ameisensäure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt, wobei man 3,75 g 2~(2-Formamidothiazol-4-yl)-2--isopropoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, Fc 168 bis 169°C (Zers.).

^I>R· ^V mai^{01 : 3200}> 2120, 1710, 1600, 1560 cm"¹ N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 1.26 (6H, ά), 4.4 (IH, rn),

7.54 (IH, s), 8.52 (IH, _s),

12.56 (IH, breit's)

1.) 46,9 g n-Butyljodid 'wurden zu einer gerührten Suspension von 40 g A'thyl-2-hydroxyimino~3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 52,7 g Kaliumcarbonat υηά 200 ml Aceton unter Eiskühlung innerhalb von 5 Minuten zugetropft und 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerlihrto Die dabei erhaltene Lösung v/urde filtriert und mit

( .' . Aceton gewaschen» Das Filtrat und die Waschlösung wurden mitein·"

-ander vereinigt und im Vakuum eingeengt« Nach der Zugabe von 300 ml Wasser zu dem Rückstand wurde die Lösung 3 mal mit Methylenchlorid extx-ahiert. Die Lösung wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt, wobei man 48,8 g Ä"thyl-2~ n-butoxyimino»3-oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielt.

!•^R·· ^v III™ '· 1750, 1700, 1470, 1370, 1320 cm"¹

2.) Eine Lösung von 48,8 g Äthyl~2-n-butoxyirnino-3-oxobutyrat (syn~Isomeres), 31,5 g Sulfurylchlorid und 48,8 ml Essigsäure wurden 10 Minuten long bei 40 C und weitere 5,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt« Nach der Zugabe von 300 ml V/asser zu der dabei erhaltenen Lösung unter Eiskühlung wurde die Lösung 3 mal mit Methylenchlorid extrahiert« Der Extrakt wurde mit Wasser, einer wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknete Die Lösung wurde im Vakuum eingeengt, wobei man 52,1 g Äthy!-2f«n~butoxyimino~4»chlor-3-oxobutyrat (syn~I some res) in Form eines öils erhielt. ·

^lm ^R· ^V max"^{1 : 1740}> ¹⁷¹⁰> ¹⁴⁷⁰' ¹³⁷⁰

3*) Eine Lösung von 52,1 g Xthyl-2-n-butoxyimino-4~chlor-3-oxo» butyrat (syn~Isomeres), 15,9 g Thioharnstoff, 28,4 g Natriumacetat» trihydrat, 130 ml Wasser und 180 ml Äthanol wurde 1,25 Stunden lang bei 40 C gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde mit einer wäßrigen Natriumcarbonatlösung unter Eiskühlung auf pH 6,5 eingestellt und 20 Minuten lang unter Eiskühlung gerührt. Die Niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt und mit Wasser und Diisopropyläther nacheinander gewaschen, wobei man 36,1 g Kthyl~2-»(2~aminothiazol-4~yl)-2~n-butoxyiminoacetat (syn-Isomeres), erhielt, F. 126 bis 128°C.

** ^R· ^Vlli⁰¹ ^{: 3460}> 3370, 3230, 1720, 1620,

1550 cm"'¹

N.M.R, 'δ (DMSO-Cl₆, ppm) : 0.6 - 2.0 (6H, m), ·

1.28 (3H, t, J=7Hz), 4.12 (3K, t, J=6Hz), 4.31 (2H₅ q, J=7Hz), 6.89 (IH, s), 7.24 (2H, s)

- 79 ~ ' Z I 4 I3 ¥

4.) Eine Lösung von 36 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2--nbutoxyiminoacetat (syn-Isomeres), 133 ml Methanol, 133 ml Tetrahydrofuran und 133 ml einer 2 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung wurde 5 Stunden lang bei 3O⁰C gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Lösung im Vakuum eingeengt worden war, wurde der Rückstand in V/asser gelöst. Die Lösung wurde mit 10 ^iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 7 eingestellt und mit Aktivkohle behandelt. Die Lösung wurde mit 10 %iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 eingestellt und 20 Minuten lang unter Eiskühlung gerührt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser und Aceton gewaschen und getrocknet, wobei man 25,4 g 2-(2~Aminothiazol-4~yl)-2-n-butoxyim.ino~ essigsäure (syn-Isomeres) erhielt.

: 3325, 3190, 1660, 1520 cm"¹

N.M.R,cf(DMSO-d₆, ppm) : 0.88 (3H, t, J=THz)₅ 1.0-1.9 (4H, m), 4.06 (2H-, t. J=THz), 6.81 (1H, s), 7.21 '(2H, breit s)

5· 18,95 g Ameisensäure wurden zu 42,0 g Essigsäureanhydrid unter Rühren bei Raumtemperatur über einen Zeitraum von 5 Minuten zugetropft und es wurde 1 Stunde lang bei 50⁰C gerührt« Es wurden 25 g 2-(2-Aminothiazol-4~yl)-2-n-butoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) zu der Lösung unter Eiskühlung zugegeben und es wurde 3 Stunden lang bei Raumtemperatur und eine v/eitere Stunde lang bei 30⁰C gerührt. Nach dem Einengen der dabei erhaltenen Lösung im Vakuum wurde der Rückstand in Diäthyläther gelöst« Die Lösung wurde mit Wasser und danach mit einer gesättigten wäßrigpi Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und

- 80

~ 80 -

im Vakuum eingeengt. Das erhaltene öl wurde mit einer Lösung aus 1 Teil η-Hexan und 1 Teil Diisopropyläther bs!-sandelt (verrieben) und durch Filtrieren gesammelt, wobei man 20,1 g 2~(2-Formamidothiazol~4~yl)»2~n-hutoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt.

I. R. ν Jjljj⁰¹ : 3350, 3160, 3050, 1700, 1680,

1570 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.91 (3H, t, J=6Hz), 1.0 - 2.2 (4H,'m), 4.18 (2H, t_f J=6Hz), 7.57 (IH, s), 8.59 (IH, s), 12.66 (IH, breit' s)

Beispiel G

tlim ι llliiiiiin ii im ι ι Ii mim Hill im H

Ie) 40 g Xthyl™2~hydroxyimino~3~oxobutyrat (syn-Isomeres), 200 ml N_rN-Dimethylformamid, 52,7 g Kaliumcarbonat und 34,9**4 g Isobutylbromid wurden auf ähnliche V/eioe wie in Beispiel F (1 ) behandelt, wobei man 42 g Xthyl~2->isobutoxyimino-3~exobutyrat.

(syn»-Isomeres) erhielt«

I. R. ν ^NuJ^o1 : 1740, 1670 (breit) cm"¹ • nicix

2.) 42 g Äthyl-2~isobutoxyimino~3-oxobutyrat (syn-Isomsres), 42 ml Essigsäure und 27,1 g Sulfurylchlorid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 31,9 g Äthyl-2«isobutoxyimino~4-chlor-3~cxobi;tyrat (syn-Isomeres) erhielt.

I. R. ν ^Film : 1750, 1720, 1680 cm"¹

- 81 -

J> 1 Δ. Jam

3») 31,9 g Xthyl-2-isobutoxyimino-4~chl.or~3~oxobutyrat (syn-Isomeres), 9,72 g Thioharnstoff, 17,4 g Natriumacetattrihydrat, 120 ml Äthanol und 80 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 17,6 g Äthyl~2~(2-amino·» thiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt, F. 122 bis 124⁰C.

I. R. ν JJ"^⁰¹ : 3470, 3260, 3120, 1730, 1620,

1545 cm"¹

,N.M.R. δ (DMSO-(I₆, ppm) : 0.86 (6H, d, J= 7Hz) , 1.28 (3H, t, J= 7Hz), 1.6-2.2 (IH, m), 3.86 (2H, d, J=7Hz), 4.28 (2H₅ q, J=7Hz), 6.86 (IH, s), 7.22 (2H, s)

4.) 19,6 g Äthyl-2~(2~aminothiazol-4»yl)-2~isohutoxyiminoacetGt (syn-Isomeres), 72,2 ml einer 2 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung, 72,2 ml Methanol und 72,2 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 16,1 g 2-(2~ Aminothiazol~4~yl)-2~isobutoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 180°C (Zers*)·

^{I# R}· ^v III?^{1 :} ³³⁷S, 3300, 3130, 3050, 1640 cm"¹.

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.91 (6H, d, J=7Hz), 1.5-2.3 (IH, m), ₃._{90 (2H>} d, J=7Hz), ⁶·δ7 (IH, s), 7.26 (2H, breit s)

5») 11,5 g 2-(2-Aminothiazol"4-yl)"2-isobutoxyiminoessigscJurc (syn-Isomeres), 19,3 g Essigsb'urean.hydrid und 8,7 g Ameisensäure %surden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt,

- Q9 «.

wobsi man 11,15 a 2~(2-?Formamidothiazol»4--yl)-2--isobutoxyiiiuno-" essigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 163 C (Zers«),

I. R- ν ^j⁰¹ : 3175, 3110, 3050, 1695, 1550 cm"¹ N.M.R. δ (DMSO-d ppm) : 0.91 (6H, d, J=7Hz), • 1.7-2,3 (IH, m), 3.92 (2H, d, J=7Hz),

. 7.52 (IH₅ s), 8.52 (IH, s), 12.58 (IH, breit s)

Ie) 30 g Äthyl""2»hydroxyimino-3~oxobutyrat (syn-Isomeres), TOO ml Ν,Ν-Dimethylformamid, 39,5 g Kaliumcarbonat, und 31,. 1 g Cyclohexylbromid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (1) behandelt, wobei man 41,8 g Kthyl~2~cyclohexyloxyimino·" 3-oxobutyrat (syn-Isomeres), in Form eines Öls erhielt.

¹⁶⁸° c"¹"¹

2e) 41,3 g Äthyl-^-cyciohexyloxyirnino-S-oxobutyrai (syn-Isomeres), 41.3 ml Essigsäure und 23_f8 g Sulfurylchlorid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 27,8 g Äthyl-4-chlor»2«cyclohexyloxyimino-3'»oxobutyrat (syn™Isörr,eres) in Fornj eines Öls erhielt»

I.R. ν ^^m : 1745, 1715, 1680 cm

3«) 27,8 g Xthyl~4-chlor-2~cyclchexyloxyimino-3~oxobutyrat (syn Isomeres), 7,7 g Thioharnstoff, 13,7 g Natriumacetattrihydrat, 70 ml Wasser und 140 ml Äthanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt,'wobei man 3,6 g Äthyl-2-(2-amino-

- 83 -

thiazol~4~ yl)«2~cyclohexyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt,

F. 125 bis 126°Cc

I.R. ν ^⁰¹ : 3430, 3250, 3160, 3130, 1715, \ .

1635 cm"¹ N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 1.28 (3H, t, J=7Hz),

1.0*2.2 (1OH, m), 4.22 (IH, m); .4.32 (2H, q, J=7Hz), 6.88 (IH, s), 7.24 (2H, breit s)

4») 3,5 g Xthyl~2«(2-aminothiazol~4-yl)~2™cyclohexyloxyimino"· acetat (syn-Isomeres), 11,8 ml einer 2 η wäßrigen Natriutnbydroxidlösung, 11,8 ml Methanol und 11,8 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 2,1 g 2~(2-Aminothiazol-4~yl)-2~cyclohexyloxyiminoessigsäure (syn~ Isomeres) erhielt, F* 148 C (Zers«)»

•IR ν ^Nujo1 : 3110, 1630, 1450 an"¹

¹' ^K* . max

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0..8^2.S (1OH, m) ,

4.14 (IH, m), 6.86 (IH, s) , - 7,5 (2H, breit s)

5.) 1,5 g 2-(2~Aminothiazol-4~yl)»2-cyclohexyloxoiminoessigsäure (syn-Isomeres), 2,27 g Essigsöureanhydrid und 1,03 g Ameisensäure wurden auf -ähnliche^.Weise wie in Beispiel F (5) behandelt und das dabei erhaltene Öl wurde in einer wäßrigen Natriumbicarbonatlb'sung suspendiert. Die Suspension wurde mit 10 %igez Chlorwasserstoff säure auf pH 3,5 eingestellt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 1,0 g 2-(2-Formamidoth.iazol~4~yl)-2-cyclohexyloxyimino~

84 -

essigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F_e> 230 C»

I.R. . ν ^⁰¹ : 3175, 3100, 3060, 1680 cm"¹

BeispielI

V*) 56,7 g Äthyl-^-hydroxyimino-S-oxobutyrat (syn-Isomeres), 280 ml N,N-Dimethylformamid, 72,3 g Kaliumcarbonat und 43 g Propargylbromid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (l) behandelt, wobei man 71,2 g Äthyl--2»propargyioxyimino»3~oxobutyrat (syn*»Isomeres) erhielte

I.R. ν ^Fllm : 3280, 3220, 2120, 1735, 1670 cm"¹

max

2*) 71,2 g Xthyl~2»propargyloxyimino~3~oxobutyrat (syn-Isomeres), 81 ml Essigsäure und 50_P2 g Sulfurylchlorid wurden auf ähnliche Heise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 61,6 g Äthyl-4«-chlor~3-oxo"2~propargyloxyiminobutyrat (syn-Isomeres) erhielt»

τ R V ^Film : 3300, 2130, 1745, 1720, 1675 cm"¹

^1>K* max

N.M.R. 6(CCA₄, ppm) : 1.39 (3H, t, J=7Hz), 2.57

(IH, t, J=2Hz), 4.36 (2H, q, J=7Hz), 4.56 (2H, s), 4.86 (2H, d, J=2Hz)

3e/ 61 g Äthyl-4»chIor~3->oxo-2-propargyloxyiminobutyrat (s Isomeres), 20 g Thioharnstoff, 35,8 g Natriumacetattrihydrat, 150 ml Wasser und 180 ml Äthanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 35,6 g Äthyi~2~(2~amino~ tiiiazol-4«yl)-2~propargyloxyi5ninoacetat (syn-Isomeres) erhielte

- 85 -

^ pn __

I.R. \) ^i⁰¹ : 3290, 2220, 1729 em"¹ N.M.R. S (DMS0-d₆, ppm): 1.28 (3H, t, J=

3.49 (IH₅ t, J=3Hz), 4.31 (2H, q, J= 7Hz), 4.76 (2h', d, J=3Hz)., 6.95 (1H, s), 7.29 (2H, s).

4.) 2,8 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2~propargyloxyiminoacetat (syn-Isomeres), 23 ml Methanol, 20 ml Tetrahydrofuran und 22,17 ml einer 1 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) "behandelt, wobei man 1,924 g 2-*(2-Aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt.

I.R. v„^^a '; 2190, 1740 max

N.M.R. <T(DMsb-d₆, ppm): 3.47 (1H, t, J=1.5Hz),

. 4.74 (2H_r d, J=1.5Hz), 6.90 (1H, s)

Beispiel J

1.) 40 g Äthyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 200 ml Ν,Ν-Diinethylformamid, 52 g Kaliumcarbonat und 41,4 g n-Hexylbromid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (1) behandelt, wobei man 60,7 g Äthyl-2-n-hexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielt.

I.R. l)^^m : 1740, 1705, 1700 cm"¹ .

N.M.R. cf(CCl₄, ppm): 0.6—2.1 (14H, m), 2.37 (3H, s),

4.1^4.6 (4h, m·)

2.) 60,7 g Äthyl-2-n-hexyloxyimino-3~oxobutyrat (syn-Isomeres), 61 ml Essigsäure und 34,7 g Sulfurylchlorid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 55,6 g

·. - 86 -

· · - 86 -

Äthyl-2-n-hexyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-Isomeres) erhielt. . '

¹^-V ™ii^{m : 1}740, 1720, 1470 cm""¹ max

N.M.E- CT(CCl₄, ppm): 0.6—2.2 (14H, m), 4.1 — 4.6 (4H, in), 4.47 (2H, s)

3.) 55,6 g Äthyl-2-n-hexyloxiimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 15,2 g Thioharnstoff, 27,2 g Natriumacetattrihydrat,. 280 ml Äthanol und .140 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 29,3 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt, F, 77 bis 78°C.

: 3460, 3250, 3140, 1720, 1535 cm"¹

N.M.R. ci(DMSO-d₆) : 0.85 (3H, t, J=Hz)₅ 1.0—1.9 (11H, m), 2.07 (2H, t, J=6Hz), 2,26 (2H, q, J=THz), 6.85 (1H₅ s), 7.22 (2H, s)

4.) 29j1 g Äthyl~2-(2"aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyliminoacetat .(syn-Isomeres), 97,2 ml Methanol, 97,2 ml einer 2 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung und 50 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 24,0 g 2~(2~Aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 174°C (Zers.).

I-R-^ü=5⁰¹: ^166O> ¹⁶²5, 1425 cm"¹

N.M.R. tf(DMS0-d₆, ppm) 0.6-2.1 (11H. m), 4.07 (2H, t, J=6Hz) 6.83 (1H, s), 7.19 (2H,- s)

Beispiel K "

1.) 40 g Äthyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat .(syn-Isomeres), 200 ml Ν,Ν-Dimethylformamid, 52 g Kaliumcarbonat und 37,9 g Pentylforomid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (1)

- 87 ~.

behandelt, wobei man 57,5 g Äthyl~2-pentyloxyimino-3-oxobutyrat (syn»Isomeres) in Form eines Öls erhielt.

I.R. v £*^lm : 1745, 1680, 1470 cm"¹

N.M.R. δ (CC£₄, ppm): 0.7 - 2.2 (12H, m), 2.36 (3H, s), 4.1 - 4.6 ~(4H, m)

2e) 57,5 g £thyl~2~pentyloxyimino~3-*oxobutyrat (syn~Isomeres), 58,5 ml Essigsäure und 20,9 ml Sulfurylchlorid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 51,1 g Kthyl-2~pentyloxy5.!nino-4"chlor«-3»oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielte I.R. ν £*^lm : 1750, 1715, 1470 cm"¹.

N.M.R. δ (CCA₄, ppm) : 0.7 - 2.1 (HH, m) ,. 4.1 - 4.6 (411, m), 4.48 (2H, s}''

S.) 51,1 g Kthyl~2-pentyloxyimino~4-chlor»3~oxobutyrat (syp.-Isomeres), 14,7 g Thioharnstoff, 26,4 g Natriumacetattrihydrat, 175 ml Äthanol und 125 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 28,7 g Äthyl-2~(2-arainothio2;ol-4»yl)-2"'pentyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt, F. 86 bis 88⁰C.

τ τ) Nuiöl

' ^v max ^: 3450, .3250, 3130, 1715,

. 1535 cm"¹ N.M.R. 6/(DMSO-(I₆, ppm)" : 0.6 - 2,0 (12H,

m), 4.11 (2H, t, J=6Hz), 4.32 (2H,' ' q, J=7Hz), 6.90 (IH, s), 7.25 (2H, s)

4.) 28„6 g Kthyl-2-(2-ominothiazol-4-.yl)~2-pentyloxyiminoacetät (syn-Isomeres), 100,2 ml einer 2 η wäßrigen Natrium hydroxidlösung, 100 ml Methanol und 100 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 22_f4 g 2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2~pentyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F» Ί7ό C (Zers.).

^I>R· ^V US^{01 : 3160}> "SS-, 1620, 1460 cm"¹

N.M.R. δ (DMS0-d₆, ppm) : 0.6 - 2.2 .(9H, m) , 4.07 (2H₁ t, J=6Hz), 6.82 (IH, s) , 7.20 (2H, s)

5c) 15 g 2»(2-Äminothiazol-~4-yl)»2~peniyloxyirnir.oessigsciure (syn-'Isomeres), 23,8 g Essigsäureanhydrid und 10,7 g Ameisensäure wurden Guf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt, wobei man 14,7 g 2-(2»Formamidothiazol~4~yi)-2»pentyloxyiminoessigsäure (syn-»Isomeres) erhielt, F₈ 125 C (Zers»).

^I#R· ^V mti⁰¹ '< ³²⁰°, 3140, 1700, 1565 cm'¹

.N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.6 - 2.0 (9H, m), 1 ⁴·13 (2H, t, J=6Hz), 7.53 (IH, s) , 7.54 (IH, s), 12.66 (IH, s)

- 89 -

Beispiel L

1.) 2,91 g Allylbromi'd wurden zu einer gerührten Suspension von 10 g Xthyl~2-(2-tritylaminothia-2:ol-4-yl)-2-hydroxyimino'-acetat (syn-Isomeres), 100 ml N,N~Dimethylformamid und 4,54 g Kaliumcarbonat unter Eiskühlung über einen Zeitraum von 5 Minuten zugetropft und 4 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührt"< Nach der Zugabe von 200 ml Wasser zu der dabei erhaltenen Lösung wurde die Lösung zweimal mit Diäthyläther extrahiert» Der Extrakt wurdo mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und Über Magnesiumsulfat getrocknet. Die Lösung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde mit einer .Lösung von n-Kexon und Diäthyläther behandelt (verrieben)« Die'Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 9,4 g Äthyl-2-(2~tritylaminothiazol-4-~yl)«-2--allyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt, F. 130 bis 132°Cc

^v mai^{01 : 3380}> ^173S> 1520, 1500 cm"¹'

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 1.08 (3H, t, J=7Hz),

³-96 (2H, q, J=7Hz), 4.54 (2H, broad d, J=5Hz), 5.0^5.5 (2H', m), 5.6^6.3 (IH, m), 6.90 (15H, breit s), 7.74 (IH, s)

2») Eine Lösung von 8,7 g Athyl~2~(2-tritylaminothiazol-4~yl)~ 2-allyloxyirninoacetat (syn~Isomeres), 42,5 ml 50 /Sige Ameisensäure und 42,5 ml Tetrahydrofuran wurde 40 Minuten lang bei 60 C gerührt. Nach dem Einengen der dabei erhaltenen Lösung im Vakuum'wurde der Rückstand in Äthylacetat gelöst, mit einer wäßrigen Natriumbicarbonat» und mit einer wäßrigen gesättigten

Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Einengen der dabei erhaltenen Lösung im Vakuum wurde der Rückstand einer Säulenchromatografie an Silicagel unterworfen-, wobei nacheinander Benzol und Äthylacetat verwendet wurden, wobei man 3*7 g Xthyl~2-(2~aminothiazol~4~yl)-2-allyloxyiminoacetat (syn-Isorneres) erhielt, F. 102 bis 104 C.

ax ^{: 3460}> ³²⁶⁰> 3130, 1725, 1620, Γ 1540, 1460 cm"¹

N.M.R. <S (DMSO-Cl₆, ppm) : 1.25 (3H, t, J= 7Hz),

. 4.30 (2H, q, J=7Hz), 4.61 (2H, del, J=SHz, IHz), 5.0^5.5 (2H, m) , 5.6O.6.5 (IH, m), 6.95 (IH, s), 7.28 (2H. s)

3c) Eine Lösung von 3,6 g Äthyl~2--(2~aminothiazol~4"-yl)~2-üllyloxyiminoacetat (syn-Isomeres), 14,1 ml einer 2 η wäßrigen Natrium·" hydroxidlösung, 14,1 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Methanol wurde 1,5 Stunden lang bei 40 C gerührt. Die dabei erhaltene Lösung v/urde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde in Wasser gelöst. Nachdem die Lösung mit 10 /£iger Chlorwasserstoff säure unter Eiskühlung auf pH 2,8 eingestellt worden war, wurden die Niederschläge durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser und Aceton nacheinander gewaschen und getrocknet, wobei man 1,91 g 2-(2-Aminothiazol-4-yl)~ 2-allyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 187°C (Zers_e).

I.R. ν U^⁰¹ : 3350, 1630, 1580, 1460 cm

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 4.61 (2H, d, J=6Hz),

5.1*5.5 (2H, in) ,' 5. 7*6 . 2 (IH, m) , 6.84 (IH, s), 7.25 (2H₅ breit s)

Beispiel M

1.) 4,16 g Propargylbromid wurden zu einer Suspension von 10 g Äthyl"2-(2»trityiaminothiazol»4--yl)~2-hydroxyiminoacetat (syn.»Isomeres), 4,84 g Kaliumcarbonat und 22 ml N,N-Dimethyl» formamid unter einer Stickstoffgasatmosphäre zugegeben und 100 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Die unlösliche Substanz wurde abfiltriert und mit etwas Ν,Ν-Ditnethylformamid ^ gewaschen» Das Filtrat und die V.'aschlösung wurden miteinander

vereinigt und zu der Lösung wurden 400 ml Wasser zugegebene Nachdem die Suspension mit 400 ml Äthylacetat extrahiert worden war, wurde der Extrakt mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet» Nach der Behandlung der Lösung mit Aktivkohle wurde die Lösung im Vakuum eingeengte Der Ruckstand wurde mit Diisopropylä'ther behandelt,, (verrieben)» Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und mit Diisopropylüther gewaschen, wobei man 8,34 g Xthyl-2-(2-tritylaminothiazol~4»yl)-2~propargyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielt.

I.R. V ^i⁰¹ : 3290, 2225, 1735 cm"¹

N.M. R. 6 (DMSO-d₆, ppm) : 1..12" (3H, t, J-. 7Hz),.

3.47 (IH, t, J=. ?Hz)y 3.97 (2H, q, J= 7Hz) _t ,4,67 (2H, d, J= 6.95 (IH, s), 7.26 (15H, s), 8.77 (IH, s)

2.) 41 ml 50 %iae Ameisensäure wurden-zu einer Lösung von 8,2 g Kthyl«-2-(2-tritylaminothiazo3-"4-yl)-2-propargyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) und 41 ml Tetrahydrofuran zugegeben und eine Stunde lang bei 60 C gerührt» Die dabei erhaltene Lösung wurde unter vermindertem Druck auf die Hälfte des Anfangsvoiumens eingeengt und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und mit Diisopropyläther gewaschen. Das Filtrat und die Waschiösung wurden miteinander vereinigt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde unter Ruhren zu 200 ml Äthylacetat zugegeben» Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren gesammelt und mit Diäthyläther gewaschen, wobei man 0,3 g Äthyl"2~(2~aminotbiazol~4"yl)~2-propargyloxyiminoacetat (syn-Isomeres) erhielte Das Filtrat und die Xthylacetat-Waschlösung wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und danach mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung zweimal gewaschen und Übe ζ Magnesiumsulfat getrocknete Die Lösung wurde mit Aktivkohle behandelt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde nach der Zugabe von Benzol im Vakuum getrocknet. Der Rückstand wurde einer Säulenchromatographie an Silicagel mit Benzol und danach mit Xthyiacetat unterworfen. Das Eluat wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde mit Diisopropyläther behandelt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Diisopropyläther gewaschen, wobei man 2,658 g der gleichen Verbindung wie oben erhielt. Das IR~Spektrum und das NMR-Spektrum waren die gleichen wie diejenigen der in Beispiel I (3) erhaltenen Verbindung.

Beispiel N ·

0_f84 g Natriumbicarbonat wurden zu einer Suspension von 2 g

- 93

2-(2-Formamidothiazol-4-yl)oxylsäure in 120 ml Wasser zugegeben zur Herstellung einer Lösung. Zu der Lösung wurden 4,56 g Äthyl-2-aminooxyacetathydrochlorid zugegeben und es wurde Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt, während der pH-Wert mit Natriumbicarbonat auf 6 eingestellt wurde, Die dabei erhaltene Lösung wurde mit Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,5 eingestellt, ausgesalzen und dreimal mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeegnet. Der Rückstand wurde mit Diäthyläther pulverisiert und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 1,44 g 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-äthoxycarbonylmethoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) brhielt, F. 112⁰C (Zers.).

I. R. ^ ^j' ^; 3150, 1740, 1670, 1550 cm"¹

N.M.R. cT(DMSO-d₆, ppm) : 1.23 (3H, t, J=7Hz), 4.16

(2H, q, J=THz, 4.77 (2H₅ s), 7-56 (1H, s), - 8.54 (1H, s)

Beispiel 0 ·

1.) 60 g Äthyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 54,1 g 1-Brom-2-chloräthan, 78 g Kaliumcarbonat und 200 ml N,N-Dimethylformamid wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (1) behandelt, wobei man 83,6 g Äthyl-2-(2-chloräth oxyimino)-3-oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielt. .

?H : 17,40, 1680, 1430 cm"¹

ΙΠ9.Χ

N.M,R. (T(CC-C^, ppm): 1.34 (3H, t, J= 7Hz), 2.34 (3H, s), 3-72 (2H_S t, J=6Hz), 4.28 (2H₅ q, J=7Hz), 4.46 (2H, t, J=6Hz)

> 94 -

2.) 83,6 g Äthyl~2-(2-chloräthoxyiminö)-3-oxcbutyrat (syn-Isomeres 52,4 g Sulfurylchlorid und 83,6 ml Essigsaure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 68 g Athyl-2"· (2-chloräthoxyimino)~3»oxo-4-chlorbutyrat (syn-Iscmeres) in Form eines Öls erhielt.

^v mix"^{1 : 1740}> ¹⁷²⁰

N.M.R. 6 (CCA.,-ppm) : 1.32 (3H, t, J=7Hz),

"τ

3.70 (2H, t, J=6IIz), 4.29 (2H, q, . .

J= 7Hz), 4.47 (2H, s) , 4.48 (2H, t, J=6Hz)

3«) 68 g Äthyl~2-(2~chloräthoxyimino)~3™oxo-4~chlorbutyrat (syn-Isomeres), 20,2 g Thioharnstoff, 36,2 g Natriumacetattrihydrat, 270 ml Äthanol und 170 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 33,7 g Äthyl"-2»(2"aminotbiazol 4~yl)~2-(2~chloräthoxyiffiino)acetat (syn-Isomeres) erhielt, F, 126-bis 128⁰C.

I.R. ν ^Nu;i01 : 3440, 3260, 3140, 1725,

1620, 1540 cm"¹

N.M.R. δ (DMS0-d₆, ppm) .: 1.30 (3H, t, J= 7Hz), . 3.78 (2H, t, J=6Hz), 4.1-4,6 (4H, m) ,

6.96 (IH, s) , 7,27 (2H,. s)

4.) 30,5 g Äthyl-2»(2-aminoihiazol-4-yl)~2~(2-chloräthoxyimino)-acetat (syn-Isomeres), 220 ml einer 1 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung, 110 ml Methanol und 140 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche V/eise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 23,4 g ^(2»Aminothiaz-öl~4~yl)~2-(2~chloröthoxyimino)essigsäure (syn-

95 -

Isomeres) erhielt, F. 201 C (Zers.)

^I>R· ^v mal^{01 : 3210}> ³¹⁰⁰> ¹⁶⁴⁰> 1620,

1580 cm"¹

N.M.R. 6 (DMSO-d₆, ppm) : 3.83 (2H, t, J=6Hz) , ! 4.36 (2H, t, J=GHz), 6.92 (IH, s), \ 7.30 (2H, s)

5») 15 g 2»(2-Ami.noihiazol"4-yl)-2~(2-chloräthoxyimino)essig5äure (syn~Isomeres)_? 24,5 g Essigsäureanhydrid, 11,0 g Ameisensäure

und 50

ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel

F (5) Behandelt, wobei man 13,4 g 2-(2~Formamidothiazol~4"*yl)~ 2~(2«chlorcJthcxyimino)essigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F» 155 C ( Zers.) c ..

^v ϋϊ^^{01 : 310}°, 1740, 1690, 1660 cm"¹

jil el A

N.M. R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 3.87 (2H, t, J=6Hz) , . 4.40 (2H, t, J=6Hz), 7.60 (IH, s) , 8.56 (IH, s) , 12.62 (IH", breit s)

Eine Suspension von 3,0 g 2~(2-Formamidothiazol'-4-yl)oxalsäure in 60 ml Methanol und 60 ml Wasser wurde mit einer 1 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung unter Ruhren auf pH 8 eingestellt« 2_f24 g 2,2,2-Trifluoräthoxyaminhydrochlorid wurden zu der Lösung zugegeben und die Lösung wurde mit einer 1 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung auf pH 2,5 bis 3 eingestellt. Nachdem die Lösung 1,5 Stunden long bei. Raumtemperatur gerührt worden war, wurde das Methanol aus der

- 96

dabei erhaltenen Lösung unter vermindertem Druck entfernt* Die eingeengte wäßrige Lösung wurde mit einer 1 η wäßrigen iNatriumhydroxidlösung auf pH 7 eingestellt und mit Xthylacetat gewaschen« Zu der wäßrigen Lösung wurde Äthyöacetat zugegeben wnd mit 10 /Siger Chlorwasserstoffsäure wurde sie auf pH 1,5 eingestellt und dann mit Xthylacetat extrahiert* Die wäßrige Schicht Vv'urde erneut mit Xthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wäßrigen Matriurnchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat ga~ trocknete Die Lösung wurde im Vakuum eingeengt, wobei man 2,4 g 2- (2-Forma mi dot hia zo l-4-yl-)-2- (2,2,2»tri fluoro thoxyimino )es si g~ säure (syn-Isomeres) ei'hielt, F. 162 bis 163 C (Zers.). I.R. ν J^j⁰¹ : 3200, 1700, 1600, 1560 cm"¹

N.M.R. 6 (DMSOd₆, ppm) : 4.83 (2H, q, J=8.5Hz), 7.65 (IH, s), 8.58 (IH, s), 12.60 (IH, ^-breit s)

10 g 2~(2-Formamidothiazol-4-yi)oxalsc5ure,- 4,2 g Natriumbicarbonat %$nd 8,1 g tert.~Butyl-»2-=aniinooxyacetat wurden auf ähnliche V/eise wie in Beispiel N behandelt, wobei man ein Öl erhielt. Das Öl %?urde mit η-Hexan behandelt (verrieben) und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 11,3 g 2—(2»Formamidothia2ol-4-yl)~2~tert.-butoxycarbonylrnethoxyiminO" essigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 117 C (Zers.).

_ 97 -

I.R. OjJ"J^o1: 3180, 3140, 1750, 1690, 1630 cm"¹ max

N.M.R. /(DMSO-Cl₆, ppm) : 1.46 (9H,s), 4.66 (2H, s),

7.56 (IH, s), 8.56 (1H, s), 12.67 (1H, breit s) "

Herstellung von Cephem-und Cepham-Verbindungen Beispiel 1 -

1.) 0,16 g Ν,Ν-Dimethylformamid und 0,34 g Phosphoroxychlorid wurden auf übliche Weise gemischt zur Herstellung eines ViIs-. meier-Reagens und das dabei erhaltene Vilsmeier-Reagens wurde in trocfeiem Äthylacetat suspendiert. Zu der Suspension wurden 0,46 g 2-(2-Formamido-4·-thiazolyl)-2-methoxyiminoessigäsure (syn-Isomeres) unter Eiskühlung und unter Rühren zugegeben und dann wurde die Lösung bei der gleichen Temperatur 30 Mi- . nuten lang gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. 0,81 g p-Nitrobenzyl^-amino-^-chlor^-cephein-^-carboxylathydrochlorid wurden in einer Lösung von 2,10 g Trimethylsilylacetamid in 200 ml Äthylacetat gelöst. Zu der Lösung, wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -20 C zugegeben und die Lösung wurde 1,5 Stunden lang bei -20 bis -5 C gerührt. Nachdem Wasser und Äthylacetat (100 ml) zu der dabei erhaltenen Lösung bei -20 C zugegeben worden waren, wurde das unlösliche Produkt durch Filtrieren abgetrennt, mit Wasser und Aceton nacheinander gewaschen und dann getrocknet, wobei man 0,6 g p-Nitrobenzyl-7-(_2-(2-formamido- ' 4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidoJ--3~chlor-3-cephem-4-carboxylat (syn-lsomeres) erhielt.

Nachdem das Äthylacetat aus dem obigen Filtrat entfernt worden war, wurde die wäßrige Schicht zweimal mit 50 ml Äthylacetat

-98 -

extrahiert« Die Äthylacetatschicht und der Extrakt wurden miteinander vereinigt, mit 10 ?Siger Chlorwasserstoffsäure, einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und danach mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und dann über •Magnesiumsulfat getrocknet. Nach der Entfernung des Xthyiacetats aus der Lösung wurde Diäthyläther zu dem Rückstand zugegeben. Das unlösliche Produkt wurde durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,25 g der gleichen erfindungsgemäßen Verbindung erhielt, F. 226 bis 228 C (Zerse), Gesamtausbeute 0,85 g.

^{1 : 3250}> ¹⁷⁸⁰> 1720, 1685, 1645,

1605, 1550, 1520 cm"¹

^N*^M'^R· ⁶ppm CDMSO-Ci₆) : 3.45 (2H, b»it s) , 3.93 (3H, s), S.35 (IK, d, J=5Hz) , 5.50 (2H, s), 5.95 (IH, dd, J=5,8Hz), 7.43 (IH, s), 7.72 (2H, d, J=9Hz), ,' '

8.28 (2H, d, J=9Hz), 8.5S (IH, s), 9.80 (IH, d,.J=8Ilz)

2.) 0,8 g p-Nitrobenzyl-7-42-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido^-3-chior~3-cephem-4"carboxylat (.<?yn-Isomeres) wurden in einer gemischten Lösung aus 30 ml Methanol und 60 ml Tetrahydrofuran gelöst« Nach der Zugabe von 0,4 g 10 /tigern Palladium/Kohle zu der Lösung wurde die Mischung bei Rcaumtemperatur unter Atmosphärendruck einer katalytischen Reduktion unterworfen. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt« Zu dem Rückstand wurden 30 ml Vfesser zugegeben und die Mischung wurde mit einer wäßrigen Natrium-

99 -

bicarbonatlösung auf pH 7,-5 eingestellt» Nach der Entfernung der unlöslichen Substanz aus der Mischung durch Filtrieren wurde das FiItrat mit 50 ml Äthylacetat gewaschen« Zu der Lösung wurden 70 ml Äthylacetat zugegeben und die Mischung wurde mit 10 /£iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,5 eingestellt und dann ausreichend geschüttelt. Nachdem die Äthylacetatschicht entfernt worden war, wurde die wäßrige Schicht zweimal mit 30 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht und die Extrakte wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 0,48 g 7~{_2-(2-Formamido-4~thiazolyl)-2~methoxyiminoacetainido^~ 3-chlor-3~cephem~4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt, F, bis 174°C (Zers.)·

^I#R- ^Vü«^{Ol>: 32S0}> "80, 1730, 1690, 1660,

1550 cm"¹

N.M.R. 5_ppm (DMSO-d₆) :.3.57 (2H_t br-eu.s), ³·⁹1 (3H, s), 5_r30 (IH, d, J=SHz), "S.88 (IH, dd, J=S, 8Hz), 7.44 (IH, s), 8-52 (IH, s), 9.78 (IH, d, J=SHz), 12.60 (IH, s)

3.) 0,4 g 7-{2"(2-Formamido-4~ihiazolyl)->2-methoxyiminoacetainido3· S-chlor-S-cephem^-carbonsä-jre (syn -I some res) wurden in 15 ml Methanol suspendierte Nach der Zugabe von 0,16 g konzentrierter

Chlorwasserstoffsäure zu der Suspension wurde die Mischung 2,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Aus der dabei erhaltenen Mischung wurde unter vermindertem Druck Methanol abdestilliert und der Rückstand wurde in 15 ml Wasser gelöst. Die Lösung wurde mit 30 ml Äthylacetat und danach mit 30 ml Dichlormethan gewaschen« In die wäßrige Schicht wurde Stickstoffgas eingeleitet, um das restliche organische Lösungsmittel vollständig zv entfernen, und die Lösung wurde lypphilisiert, wobei man 0,35 g 7-^2-(2-Amino-4-thiazolyi)~2-methoxyiminoacetamidoj-3-chlori=°3-cepheni~4-carbonsäurehydrochlorid (syn-Isomeres) erhielt, F. 170 (jis'180°C (Zers,)·

IVR.' ν JJ^x^{01 : 3300}' ¹⁷⁸⁰> ¹⁷³⁰' ^{1670) 163}°* ^; 1545 cm"¹

N.M.R. 6 _m (DMS0-d₆) : 3.88 (2H, AB-q,' J=17Hz), 3.94 (3H, s), 5.26 (IH, d, J=5Hz),

;. 5.80 (IH, dd, J=5, 8Hz), 6.92 (IH, s) ,

9.88 (IH., d, J=8Hz)

4*) 1,5 g 7~[2-"(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-chlor°3»cephetri-4-carbonsäurehydrochiorid (syn-Isomeres) und 0,56 g Natriumbicarbonat wurden bei Raumtemperatur unter Ruhren in 50 ml Wasser gelöst und lyophilisiert. Zu einer Lösung des oben erhaltenen Produkts in 15 ml Dimethylformamid wurde bei -5 C eine Lösung von 0_f93 g Jodmethy.lhexanoat in 5 ml Dimethylformamid zugetropft und es wurde 30 Slinuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. 50 ml Äthylacetat und 100 ml Wasser wurden zu der dabei erhaltenen Lösung zugegeben und die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt. Die wäßrige Schicht wurde zweimal mit

13

I A . "J -4.

50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden mit der Kthylacetatschicht vereinigt, dreimal mit einer gesättigten wäßrigen Notriumbicarbonatlösung und danach dreimal mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, mit Aktivkohle behandelt und dann unter vermindertem Druck eingeengt« Nach dem Waschen des Konzentrats mit 50 ml n-Hsxan,, wurden 50 ml n~Hexan und 25 ml Diäthyläther zu dem Rückstand zugegeben und in einem Kühlschrank über Nacht stehen gelassen» Das ausfallende Pulver wurde durch Filtrieren gesammelt, mit η»Hexan gewaschen und getrocknet, v/obsi mfm 1,0 g einer Mischung aus n~Hsxanoyloxym8thyl~7-[2~(2~ amino»4™thiazolyl)-2-methoxyiininoacetamido]~3«chlor™3"Cephen}« 4-cax"boxyiat (syn-Isomeres) und n~Hexapoxloxymethyl~7~[2-(2- <mino^-t!uazolyl)-2-methoxyiminoacetatnido]»3-chlor~2-cephem~ 4~corbo>iylat (syn-Isomerec) erhielte

5_e) Die dabei erhaltene Mischung (1,0 g) wurde zu 10 mi Methylenchlorid zugegeben. Zu der Lösung wurden 7 ml Essigsäure, eine Lösung von 20 mg Natriuniwolframat (Na^WO, .2H^O) in 0,5 mi Wasser, 5 ml Methylenchlorid und 180 mg 35 /£iges U'asserstoffperoxid zugegeben und dann wurde 4 Stunden lang unter Eiskühlung gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurde Eiswasser zugegeben und es wurde mit Methylenchlorid extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mit 20 ml Diäthyläther pulverisiert, zweimal mit 10 ml Diäthylather gewaschen und getrocknet. Das Produkt wurde durch Säulenchromatographie an Silicagel (Eiuierungsrnittel: Äthylacetat) gereinigt, wobei man 600 mg n~!"texanoyloxymöthyl-7-[2~(2~amino~4~thiazolyl)-2-

102 —

methoxyiminoacetamido3«3~chlor-3-cephem-4-carboxyiat-l-oxid (syn-Isomeres) erhielt.

^{I#R# v} max^{01 : 3300}> ¹⁷⁹⁰> ¹⁷⁶⁰> ¹⁶⁸⁰> 1630, 1540, 1380 cm"¹

N.M.R. oppm (DMSO-d₆) :'θ.67 - 2.S-(IlH, m), 3.90 (3H, s), 4.20· (2H, breit, s), 5.17 (IH, d), 5.83 - 6.17 (3H, m), 6.88 (IH, s), 9.17 (IH, d) \

6«) 210 mg Phosphortrichlorid wurden zu einer Lösung von 570 mg n-H3xanoyloxymethyl-7«»[2-(2-<in:!ino~4--thiazoiyl)--2-methoxyiminoaeetGrnido]~3»chlor~3°-'Cephem"4»carboxylat~l~oxid (syn-Isomeres) in 10 ml trockenem Dimethylformamid bei -30 C zugegeben und es wurde 50 Minuten lang bei -20 bis -30 C gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 50 ml einer 10 /£igen wäßrigen Natriumchloridlösung zugegeben, mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung wurde der pH-Wert auf 8,0 eingestellt und es wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt« Der Rückstand (560 mg) wurde durch SäulenChromatographie an Silicagel (20 g) gereinigt (Eluierungsmittel: Äthylacetat) und der dabei erhaltene Rückstand (180 mg) wurde mit 10 ml η-Hexan und 5 ml Diethylether pulverisiert, wobei man 150 mg n-Hexanoyloxymethyl-7-C2~(2-amino-4-thiazo.lyl)-2-methoxyimincacetamido]-3-chior-3~eephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

- 103

I.R. \). J^⁰¹: 3400 (breit), 1780 (breit), 1760 (Schulter), 167O₅ 1620, 1530 cm"¹

N.M.R. cfppm (CDCe₃): 0.67 -.2.5 (11H, m), 3.67-(2H₅ q), 4.00 (3H, s), 5.17 (1H, d), 5.90 (1H₉ s), 6.00 (1H₅ in), 6.77 (1H₁ s), 7.83 (1H, d)

Beispiel 2

1.) 0,65 g 2-{2-(2,2,2-Trifluoracetamido)-4-thiazoiyl}-2-methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) wurden bei 0 C zu dem. Vilsmeier-Reagens zugegeben, das aus Dimethylformamid und Phosphoroxychlorid in Äthylacetat (10 ml) hergestellt worden war, und die Mischung wurde bei der gleichen Temperatur 40 Minuten lang gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. Die aktivierte Säurelösung wurde zu einer Lösung von 0,5 g 7-Amino-2,3,-dimethyl-3-cephem~4-carbensäure und 1,73 g Trimethylsilylacetamid in 30 ml Äthyiacetat bei -20⁰C zugetropft und die Mischung wurde 40 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Mischung wurden '10 ml Wasser zugegeben und die''Äthylacetätschicht wurde von der Mischung abgetrennt und mit Wasser gewaschen. Zu der Lösung warden 30 ml Wasser zugegeben und die Mischung wurde ' mit Natriumbicarbonät unter Eiskühlung auf pH 7,5 eingestellt. Nach dem Schütteln der Mischung wurde die wäßrige Schicht abgetrennt. Zu der wäßrigen Lösung wurden 50 ml Äthylacetat zu-' gegeben und die Mischung wurde mit verdünnter Chlorwasserstoff säure unter Rühren auf pH 2 eingestellt und die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit Wasser und mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, mit Aktivkohle behandelt, über Magnesiumsulfat getrocknet'und'dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der. Rückstand wurde mit Diisopropyläther pulverisiert, wobei man

.' - 104 -

~ 104 -

0,9 g 7-[2-j2-(2_/2_/2-T_rifluoracetamido)-4-thiazolylj-2-methoxyitninoacetamiclo]~2,3-dxmet.hyl-3"cephem«4-carbon5öure (syn-Isomeres) erhielt.

p_pm

: 3250, 1780, 1725, 1680, 1650 cm'

d₆) : 1.43 '(3H₁ d, J=SHz), 1,92 (IH, s), 3.82 (3H,'s)," 3.98 (IH, q, J=SHz), 5.18 (IH₅ d, J«6Hz), 5.73·(IH, AB-q, J=6Hz), 7.43 (IH, s), 9.63 (IH, d, J=8Hz)

2*) 0_f86 g 7»[2»[2~(2,2,2-=Trifluoracetamido)~4-thia2olyl]~2™methoxy iminoacetamido]~2,3-climethyl-3-»cephem-4»carbonsaure (syn-Isomeres) v/urden in 9 ml einer wäßrigen Lösung gelöst, die 2,3 g Natrium" acetattrihydrat enthielt, und die Lösung wurde 19 Stunden Iqng bei Raumtemperatur gerührt« Nach der Entfernung der unlöslichen . Substanz aus der dabei erhaltenen Mischung durch Filtrieren wurde das Filtrat mit "10 zeiger Chlorwasserstoffsüure unter Eiskuhlung ouf etv/a pH 2,5 eingestellte Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 0,16 g 7~{2~(2-Anuno~4~thiazolyl)~2-niethoxyiininoacetamidoj-2, 3-ciimethyl«-3-cephem-4-carbonsciure (syn-Isomeres) erhielt.

£-^R·' ^V max^{01 :} 3320/3200", "1770 (Schulter),

1670, 1630 cm^:1

N.M.R. 6

ppm

O-Cl₆). : 1.44 (3H, d,'j=7Hz), 1.98 (3H, s), 3 = 57. (IH-, q,-J= 7Hz), 3.82 (3H, s), 5.18 (IH, d, J-SHz), 5.73 (IH, .dd, J= 5,/8Hz), 6.76 (IH, s), 9.63 (IH, d, J=SHz).

Beispiel 3

1.) Eine Mischung aus 0,8 g 2-{2-(2,2,2-Trifluqracetamido)-4-thiazolyl}--2-methoxyiminoessigsäure·(syn-Isomeres), 0,20 g. Dimethylformamid, 0,41 g PhosphoroxyChlorid und 10 ml Athylacetat wurde 30 Minuten lang unter Eiskühlung gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung auf ähnliche Weise wie in Beispiel 2 (1). Andererseits wurde eine Lösung von 0,6 g · 7~Amino~3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäurehydrb.chlorid und 3 g Trimethylsilylacetamid in 15 ml Äthylacetat 3 Stunden lang bei 40⁰C gerührt. Zu der Lösung wurde die aktivierte Säurelösung innerhalb von 2 Minuten bei -10'bis -20 C zugetropft und die Mischung wurde 1,5 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Nachdem 10 ml Wasser zu der.dabei erhaltenen Mischung zugegeben worden waren, wurde die Äthylacetatschicht abgetrennt und stehen gelassen. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,3 g 7-/2--{2~(2,2,2-Trifluor~ acetamido)-4-thiazolyl^-2-methoxyiminoacetamido7-3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.- Die wäßrige Schicht., die von der Äthylacetatschicht abgetrennt wurde, wurde mit Äthylacetat extrahiert und der Extrakt wurde mit der oben erhaltenen Mutterlauge vereinigt. Die Äthylacetatlösung. wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann filtriert. Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand wurde mit Diäthyläther gewaschen, wobei man 0,25 g der gleichen erfindungsgemäßen Verbindung erhielt, Gesamtausbeute 0,55 g·

I.R.\Cä^UX: 3230, 1770, 1715, 1650, Ϊ580 cm"¹

- 106

- "IUD -

(DMSO-d₆) : 3.62 (2H, AB-q, J=16Hz), 3.78 (3H, s), 3.93 (3H, s),. 5.17 (IH, d, J=4Hz), S.54 (IH, dd, J.= 8, 4Hz), 7.60 (IH, s) , 9.69 (IH,- d, J=SHz)

2.) Eine Lösung von 0,55 g 7~[2-[2-(2,2,2~Trifluoracetamido)-4~thia2olyl^~2-methoxyiminoacetamido]-3-methoxy~3-cephem«4«· carbonsäure (syn-Isomeres) und 1,76 g Natriumacetattrihydrat in 3 rnl Äthylacetat; . 3 ml Tetrahydrofuran und 5,5 ml Wasser wurde ubsr Nacht bsi Raumtemperatur gerührt. Die wäßrige Schicht wurde von der dabei erhaltenen Mischung abgetrennt,. mit Dilchlormethan gewaschen und dann unter vermindertem Druck'

eingeengt, um das organische Lösungsmittel zu entfernen» Die wäßrige Lösung wurde unter Eiskühlung auf pH 4,2 eingestellt und einer Säuienchromatographie an einem Diaion HP-20-Harz (Warenname für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd», 15 ml) unterworfen« Nach dem Waschen der Säule mit Wasser wurde die erfindungsgemäße Verbindung mit 20 /oigem wäßrigem Isopropylalkohol·eluiert» Das Eluat wurde unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand wurde lyophilisiert, wobei man 0,4 g 7-|2-(2-Amino-4-thia2olyl-)-2-methoxyiminoacetoriiido\-3~niethoxy-3~cephern~4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt, F* 185 bis 190°C (Zers.)·

I.R, · ν JJ^⁰¹ : 3300, 1770, 1660, 1630, 1540 cm"¹

N.M.R. 6 (DMSO-d,) : 3.60 (2H, breit s),

ppm ο

3.75 (3H, s), 3.83 (3H, s), 5.12

(IH, d, -JMiIz), 5.55 (IH, dd, J=4,8Hz),

6.82 (IH, s), 9.52 (IH, d_s J=8Hz)

Beispiel 4

1.) Zu einer Suspension von 10,50 g p-Nitrobenzyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-ca'rboxylat in 100 ml troclmem Dichlormethan wurden 2,14 g trocteies Pyridin zugegeben. Zu der Lösung wurden bei -10⁰C 5,50 g Phosphorpentachlorid zugegeben und die Mischung wurde .45 Minuten lang bei -5°C und außerdem 1 Stunde lang bei 10⁰C gerührt. Nach der Zugabe von 520 g Methanol zu der dabei erhaltenen Mischung wurde die Mischung 1,5 Stunden lang bei -20⁰C gerührt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit 120 ml Dichlormethan und 130 ml Diäthyläther gewaschen und dann getrocknet, wobei man 7*90 g p-Ni|trobenzyl-7-amino-3-cephem-4~carboxylat erhielt, F. 182⁰C (Z'ers.). '

I.R. V^j⁰¹: 1790, 1730, 1638, I600 cm"¹ max

N.M.r/ (DMSO-dß): 3-78 '(2H, d, J=4Hz), 5.27 (2H, dd, J=5Hz) ,· ^PPm 5.44 (2H, s), 6.78 (1H, t₅ J=4Hz),

7.72 .(2H, d, J=9Hz), 8.26 (2H, d, J=9Hz)

.2.) Das Vilsmeier-Reagens, das aus 0,43 g Dimethylformamid und 0,92 g Phosijhoroxychlorid hergestellt worden war, wurde in 10 ml trockenem Äthylacetat suspendiert. Zu der Suspension wurden 1,15 g 2-(2-Formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) unter Eiskühlung und unter Rühren zugegeben und die Mischung wurde 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurei.ösung. Andererseits wurden 1,79 g p-Nitrobenzyl-7~amino-3~ cephem-4-carboxylathydrochlorid und 5,0 g Trimethylsilylacetamid in 40 ml Äthylacetat gelöst. Zu der- Lösung wurde die aktivierte Säurelösung auf einmal

. · - 108 -

- · 239

bei -20 C zugegeben und die Mischung wurde 2,5 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden όΟ ml Wasser und 200 ml Äthylacetat zugegeben und die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit 60 ml einer 10 %xgen Chlorwasserstoffsäure, 60 ml einer gesättigten wfcißx-igen Natriumbicarbonatlösung und 50 ml einer wäßrigen Natriumchioridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, mit Aktivkohle behandelt und dann unter vermindertem Druck eingedampfte Zu dem Rückstand wurde Diäthylcither zugegeben und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt,- wobei man 1,30 g p~Niti-obenzyl-7-t2=-(2-formarndio~4-thiazolyl)'-2-ri5ethoxy'™ iminoacetamido3"~3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt, Fo 2Ί0 bis 2'l2°C (Zers.)c

¹^' ^v"mai"^J" ^{: 3240}> 1780, 1730, 1690, 1655

1605, 1550, 1520 cm"¹

^N'^MtR· ⁶p_Pm CDMSO-U₆) ·_: 3.65 (2H, br_eit

3.90 (3H, s), 5.20 (IM, d, J=SHz), S.43 (2H, s), 5.95 (IH, q, J=S,8Hz), 6.68 (IH, t,\J=4Hz), 7.42 (IH, s), 7.72 (2H, d, J=9Hz), 8.28 (2H, d, J=9Hz), 8.46 (IH, s), 9.72 (IH, d, J=SHz)

3.) Zu einer Lösung von 1,25 g p~Nitrobenzyl-7~^2~(2-formamido-=> 4-thiazolyl)-2-fnethoxyiminoacetamidoJ«3-cephem~4-carboxylat (syn~

~ 109 -

Isomeres) in 40 ml Methanol und 50 ml Tetrahydrofuran wurden 0,65 g 10 7&Lges Palladium/Kohle zugegeben und die Mischung Vi'urde unter Atmos ρ häre η druck 3,5 Stunden lang einer katalytischen Reduktion bei Raumtemperatur unterworfen« Nach der Entfernung des Katalysators aus der Reaktionsmischung wurde das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem Rückstand wurden 80 ml Wasser zugegeben und die Mischung wurde mit einer gesättigten • ' wäßrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 7,5 eingestellt und dann

\_w wurda die unlösliche Substanz abfiltriert« Das Filtrat wurde

mit 50 al Äthylacetat gewaschen und dann wurden 100 ml Äthylacetat zu der Lösung zugegeben. Nach der Einstellung auf pH 1,5 mit 10 /Siger Chlorwasserstoff säure wurde die Äthylacetatschicht abgetrennt. Die zurückbleibende wäßrige Schicht wurde zweimal mit 80 ml Äthylacetat extrahiert und die Extrakte wurden mit der oben erhaltenen Äthylacetatschicht vereinigt, mit einer wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 0,60 g 7-|2~(2-Formamido-4-thiazolyl)~2-methoxyiminoacetamidoJ~3~cephem»= 4~ccrbonsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 176 bis 183 C-(Zers»). A... .

I.R. «v ^NuJ_^o1: 3250, 1780, 1690, 1660, 1550 cm"¹ N.M.R. δ (DMSO-Ci₆) : 3.63 (2H, d, J=4Hz),

: 3.93 (3H, s), 5.10 (IH₅ d, J=5Hz),

j · 5.90 (IH, q, J=5_f8Hz)·, 6.53 (IH, t,

": J=4Hz), 7.47 (IH, s) , 8.57 (IH, s) ,.

9.70 (IH, d, J=SHz), 12.63 (IH, s)

- 110

- no - Ζϊ 4 239·

4.) 95 rag 7-/2-(2-Formamido~4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetaiaidoj—3-cephein-4-carbonsäure (syn-Isomeres) wurden in 4 ml Methanol suspendiert. Zu der Suspension wurden 110 mg konzentrierte Chlorwasserstoffsäure zugegeben und die Lösung wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Abdestillieren des Methanols unter vermindertem Druck wurde der Rückstand in 30 ml Wasser gelöst und die wäßrige Lösung wurde mit 10 ml Äthylacetat und danach mit 15 ml Dichlormettei gewaschen. In die wäßrige Lösung wurde Stickstoffgas eingeleitet, um das restliche organische Lösungsmittel zu entfernen und die wäßrige Lösung wurde lyophilisiert, wobei man . 83 mg 7-(_2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidoj'-3-cephem-4-carbonsäurehydrochlorid (syn-Isomeres) erhielt, F. 180 bis 190⁰C (Zers.)·

I.R. V?"J⁰¹: 3300, 1770, 1710, 1660, I630 cnT¹

N.M.R. ο (DMSO-d₆) : 3-64 (2H,"breit s), 3*95 (3H,'s),

5.14 (1H₅ d, J=5Hz), 5.82 (1H, t,"J=4Hz), 6.95 (1H, s), 9.80 (1H, d, J=SHz)

5e) Eiüe Lösung von 10,8 g 7-r2-(2-Formamido-4-thiazolyl)-2~ methoxyiminoacetamido7--3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres), 11 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure und 350 ml Methanol wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem. Einengen der dabei erhaltenen Lösung unter vermindertem •Druck wurde Äthylacetat zu dem Rückstand zugegeben. Die Lösung wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 8,0 eingestellt und die wäßrige Schicht wurde abgetrennt und mit Diäthyläther gewaschen. Nach dem Einleiten von Stickstoffgas in die wäßrige Lösung wurde die wäßrige Lösung mit 10 %iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 4,0 ein-

' - 111 -.

. - 111 -

gestellt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und mit Wasser gewaschen, wobei man 8,2 g 7-(_2-(2~Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidpJ'-3-cephem~4~carbonsäure" .(syn-Isomeres) erhielt, F.> 290⁰C.

IR^ÜoJ⁰¹: 3470, 3280,'3200, 1780, 1695, 1655, 1622 cm*"¹ ·

NMR /ppm (DMS0-d₆) : 3.60 (2H, breit s), 3.84 (3H, s)_;

5.12 (1H, dd, J=5Hz), 5-.84 (1H, dd, J=5,8Hz), 6.52 (1H, breit t), 6.76 (1H, s), 7.26 (2H, breit s), 9-65 (1H₅ d, J- 8Hz)

6.) 1,04 g Natriumbicarbonat wurden zu einer Lösung von 2,6 g 7-/2~(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-cärbonsäurehydrochlorid (syn-Isomeres) in 100 ml Wasser unter Eiskühlung und unter Rühren bei Raumtemperatur zugegeben. Die dabei erhaltene Lösung wurde lyophilisiert, wobei man das Natrium-7-/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

Ü^i: 3100, 1760, 1650, 1590, 1530 ein"¹

DIdX

N.M.R. <T(d₂O, ppm) 3.60 (2H, breit q), 4.00 (3H, s),

5.22 (1H, d), 5.88(1H, d), 6.35 '(1H, q), 7.03 (1H, s)

7.) Das oben erhaltene Produkte wurde in 20 ml trockenem Ν,Ν-Dimethylformamid gelöst. Zu der Lösung wurde eine Lösung von 1,33 g Jodmethyl-n-hexanoat und 5 ml trockenes N,N-Dimethylformamid über einen Zeitraum von 5 Minuten bei -40⁰G zugetropft und dann wurde bei der gleichen. Temperatur 40 Minuten lang und danach 45 Minuten lang unter Eiskühlung gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde zu einer gemischten

- 112 -

21 β ffy *§ #& » **^ ^₉ *)Ji ^f

Lösung aus 6θ ml Äthylacetat und 125 ml-Wasser zugegeben. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit einer"gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und'danach mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann mit Aktivkohle behandelt. Nach der Entfernung des Äthylacetats aus der Lösung wurde der Rückstand mit Diäthyläther behandelt (verrieben), wobei man 750 mg n-Hexanoyloxymethyl-7-/2-(2-amino-4-thiai'.olyl)-2-rnethoxyiminoacetamido7-3-cephem-4~carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

J¹ 3170, 1780, 1750 (Schulter), 1670, 1630, 1530 cm"'

N.M.R. (T(CDCl₃₅ ppm) 0.68-1.84 (9H, m), 2.20-2.48 (2H, t), 3.20-3.80 (2H, m), 4.02 (3H, s), .5.04 (1H," d), 5.6O-6.2O (3H, m), 6.62 (1H, q), 6.80 (1H, s), 7.72 (1H_} d)

8.) 1,1 g p-Nitrobenzyl-7-/2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) wurden in einer Mischung aus 10 ml Äthanol und 15 ml Wasser suspendiert. Zu der Suspension wurden bei 5 bis 7⁰C über einen Zeitraum von 10 Minuten 6 ml einer 1 η wäßrigen Kaliumhydroxidlösung zugegeben und es wurde 10 Minuten lang gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde mit .10 %iger Chlorwasserstoff säure auf pH 7,5 eingestellt, mit Äthylacetat gewaschen und mit 10 ^iger Chlorwässerstoffsäure auf pH 2,5 eingestellt. Die ausgefallenen Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man eine Mischung aus 0,32 g 7-/2-2(Formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidp_7-3-cephem~4-carbonsäure (dem syn-Isomeren) und 0,035 g 7-"[2-(2-Amino-4-thiazolyl) -^-lüethoxyiminoacetamidoy -3- cephem-4- carbonsäure

(dem syn-Isomeren) erhielt.

9») Sg 7-[2-(2"Amino~4~thiazolyl-2«methaxyiminoacetamido]~3-cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres) wurden langsam zu 30 ml einer wäßrigen Lösung von 1,04 g Natriumbicarbonat bei 35 bis 40 C zugegeben und es wurde 30 Minuten lang bei 50 bis 53 C gerührt. Nach der Entfernung der unlöslichen Substanz aus der dabei erhaltenen Lösung wurde das Filtrat mit Aktivkohle (0,3 g) behandelt und filtriert. Das Filtrat wurde lyophilisiert, wobei man 4,2 g Natrium-7~[2~(2-amino~4-thiazolyl)-2~methoxyiniinoacet- " amido3~3«»cephem«4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

¹ : 3300-3100, 1760, 1670, 1595, 1530 cm"¹

N.M.R. <5ppm (DMSO-d^ : 3.50 (2H, breit s) , '

3.83 (3H, s), 5.00 (IH, d, J=SHz), 5.68 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.13 (IH, breit s), 6.73 (IH, s), 7.3 (2H, breit s), 9.60 (IH, d, J=8Hz)

10'·) 1,15 g 7-[2™(2-Aminothiazol~4-yl)-2-rnethoxyiminoacetGinidoJ-3-cephem-4~carbonsö'ure (syn-Isomeres) wurden zu einer wäßrigen Lösung von 0,11 g Kalciumhydroxid in 100 ml Wasser zugegeben und die Lösung wurde 10 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem die Lösung filtriert worden war, wurde das Filtrat lyophilisiert, wobei man 1,2 g 0alcium~7-[2~(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]~3~cephem-4-carboxylat (.syn-Isomeres) erhielt.

-

.- 114 -

^v max^{01 : 3350}' ¹⁷⁶⁰> ¹⁶⁷'0> 1590, 1535, 1465cm"¹

N.M.R. 6 (D₂O, ppm) : 3.51 (IH, d, J=SHz), 3.59 (IH, d, J= 3Hz), .3.97 (3H, s), 5.15 (IH, d, J=5Hz), 5.82 (IH, d, J=5Hz), 6.33 (IH, dd, J=5Hz_;. 3Hz), 6.95 (IH, s)

11») 1,15 g 7-[2~(2«-Aminothiazol»4-yl)-2-raethoxyiminoGcötamido]-3-cephem"4-carbons9-ure (syn-Isomeres) wurden zu einer Suspension von 0_f088 g Magnesiumhydroxid in 100 ml Wasser zugegeben und die Mischung wurde 30 Minuten lang bei 70 C gerührt unter Bildung einer Lösung« Nachdem die dabei erhaltene Lösung filtriert worden war, wurde das Filtrat lyophilisiert, wobei man 1,1 g Magnesium-7~C2~(2~atniriothiazol»4-"yl)"-2-methoxyiminoacetamido]-3-"cephem"-4" carboxylat (syn-Isomeres) erhielt«

!•R- ν ^j⁰¹ : 3350, 1760, 1660, 1610,

1530, 1460cm"¹

N.M.R-. δ (D₂O, ppm) : 3.53 (IH, d, J=5Hz) , 3.59 (IH, d, J=3Hz), 3.96 (3H, s), 5.16 (IH, d, J=5Hz), 5.84' (IH, d, J=SHz), 6.32 (IH, dd, J=5Hz, 3Hz), 7.98 (IH, s)

12o) 1,15 g 7~[2~(2-Aminothiazol-4»yl)-2-inethoxyiminoacGtamido3-3~cephem~4»carbonsäure (syn-Isomeres) wurde zu einer Lösung von 0,523 g Arginin in 50 ml Wasser zugegeben und die Lösung wurde

- 115 -

10 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Mischung filtriert worden war, wurde das Filtrat lyophilisiert, wobei 'man ein Argininsalz von 7-[2~(2-Amino~ thiazol-4-yl)-=2~methoxyirninoacetamido]-3-cephem-^;'4«carbonsäure (syn^Isomeres) erhielt.

I.R. ν ^j⁰¹. : 3350, 3150, 1770 1650 (breit),

1580, 1530, 1460cm"¹

' N.M.R. δ (D₂O, ppm) : 1.4.- 2.1 (4H, m) , 3.22 (2H, t, J=6Hz), 3.55 (IH, d, J=6Hz), 3.65 (IH, d, J-3Hz) , j 3.82 (IH, d, J=6Hz), 3.97 (3H, s),

5.18 (IH, d, J=5Hz), 5.85. (IH, d, J=SKz), 6.33 (IH, dd, J=6Hz; 3Hz), 7.00 (IH, s)

13«) 1,21 g Natrium»7~[2-(2-arninothiazol-4»yl)-2"methOxyiminoacet»· amido]~3-cephem-4-carboxylat (syn~Isomeres) wurden zu einer Lösung von 0,55 g Lysinhydrochlorid in 12 ml Wasser zugegeben. Die Lösung wurde lyophilisiert, wobei" man ein Lysinsalz der 7~[2-(2-Amino~ thiazol-4»yl)-2~methoxyiminoocetamidp]~3-cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt«

-

^{: 3}'³⁵⁰> ³¹⁵⁰> ¹⁷⁷⁰* 1600(breit), 1S30, 14-60 cm"¹

N.M.R. 6(D₂O, ppm) : 1.3 - 2.1 (6H, m) , 3.03 (2H, t, J=7Hz), 3.54 (IH, d, J=SHz), 3.64 (IH, d, J=3Hz), 3.80 (IH, d, J=6Hz), 3.97 (3H, s), 5.17 (IH, d, J=SHz), 5.84 (IH, d, J=SHz), 6.32 (IH, dd, J=5Hz, 3Hz), 6.99 (IH, s)

14») Eine 20 %ige wäßrige Natriumhydroxidlösung wurde zu einer Suspension von 15 g 7-[2«(2~Aminothiazol~4~yl)-2-niethoxyiminoacetamidoj~3-cephem"4"-carbonsäure (syn-Isomeres) in einer Mischung aus 8 ml Äthanol und 8 ml Wasser bei Raumtemperatur zugegeb3n zur Herstellung einer Lösung mit einem pH-Wert von 7,5» Nach dem Filtrieren und Waschen wurden das Filtrat und die Waschwässer miteinander vereinigt (die 18,3 ml Wasser enthielten) und bei 20 bis 25 C unter Rühren zu 4ό ml Äthanol zugetropft und 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt» Innerhalb eines Zeitraums von 30 Minuten wurden 28 ml Äthanol zu der Mischung zugetropft und 2 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit 20 ml Äthanol gewaschen und im Vakuum bei Raumtemperatur getrocknet, wobei man 13,5 g Natrium~7-[2-(2~aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carb" oxylatdihydrat (syn-Isomeres) in Form von Plättchen erhielt,

F. 200°C (Zers.).

*-^R· ^v S^{01 : 3430}> ³²⁵⁰> ¹⁷⁶⁰ (Schulter. )>

1745, 1650, 1630 (Schulter )> Ϊ590, 1540 cm"¹

15.)15gNatrium-7-/2-(2-aminothiazol-4~yl)-2-methoxyiminoacetamido7~3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) wurden in 13 ml Wasser unter Rühren bei 35 "bis 45⁰C gelöst. Zu der gerührten Lösung wurden 52 ml warmes Äthanol (30^QC) zugetropdft und es wurde 5 Minuten lang bei der gleichen Temperatur und dann 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Nieder-*· schlage wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Äthanol gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet, wobei man 13>45 g Natrium-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylatdihydrat (syn-Isomeres) in Form von Plättchen erhielt.

- 118 -

-118 - .'21 4 .Z

(16) Eine 4-n wässrige Natriumhydroxidlösung wurde vorsichtig

zu einer gerühmten Suspension von 52 g 7~[2~(2~Aminothiazol-^—yl)~2-methosyiminoacetamido] -^-cephem-^—carbonsäure (syn-Isonieres) in 100 ml Wasser unterhalb 5°C zugetropft zur Herstellung einer Lösung mit einem pH-Wert von 7?0 bis 7>5> ITach dem filtrieren und Waschen wurden das vereinigte Filtrat und die Waschwässer (200 ml) unter Rühren innerhalb von JO Minuten zu 2 1 Äthanol zugetropft und es wurde 15 Minuten lang bei Saumtemperatur und dann 1 Stunde lang bei 5 "bis 10⁰C gerührte Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit 200 ml Äthanol gewaschen und im Vakuum bei 30⁰C getrocknet, wobell man 46,3 g amorphes Natrium~7~f2-(2-äminothiazol-4—yl)-2-methoD^yiminoacetamiao] -3-cephem-'^!l~-carboxylat (s'yn.-Isomeres)! erhielt*

(1?) Eine Suspension von 10 g Natrium~7~r2~(2~aio,inothia2ol~

4-yl) -2~methoxyimino acet ejnidoj ~3-cephem"4"C arboxylat (syn-Isomeres) in 25Ο ml Methanol wurde mit einer- Ultraschall-Vorrichtung behandelt, um eine klare Lösung zu erhalten» Die Lösung wurde bei Raumtemperatur stehengelassen und dann 3 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührte Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und mit -Methanol gewaschen, wobei man amorphes· Natrium-7-[2~(2-aminothiazol-4— yl)-2-metho:xyiminoacetamido]-3-cephem-4—carboxylat (syn-Isoes) erhielt.

(18) Die in dem obigen Beispiel 4~(14) erhaltenen Kristalle wurden im Vakuum über P2O5 einen Tag lang bei Raumtemperatur getrocknet, wobei man andere Plättchen von Hatrium-7- £2-(2-aminoth.iazol-4-yl)-2-me'thoKyiminoacetamido~|-3-cephem-4—

_ Ί Ί Q _

carboxylat (syn-Isomeres) erhielt,

Beispiel 3

(1) Das Vilsineier-Eeagens, hergestellt aus 0,22 g Dimethylformamid und 0,46 g Phosphoroxychlorid,wurde in 20 nxl trockenem Äthylacetat suspendiert. Zu der Suspension wurden unter Eiskühlung und unter Rühren 0,62 g 2-(2~Formamido-4~ thiazolyl)~2-methoxyiiüinoessigsäure (anti-Isomeres) zugegeben und die Mischung wurde JO Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung« Die Lösung wurde auf einmal zu einer Lösung von 1 g p-H'itrobenzyl-7-sMno-3-chlor-3~cephem-4—carbo:xylat und 2,53 g Irimethylsilylacetamid in 20 ml Äthylacetat bei -20⁰C unter Rühren, zugegeben und die gemischte Lösung wurde' 1,5 Stunden lang bei -10 bis -20⁰C gerührt«, Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 20 ml Wasser zugegeben und die Lösung wurde bei ~2Q°C gerührt« Nach der Abtrennung der Äthylacetatschicht wurde' die wässrige Schicht mit 20 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthyl*· acetatschicht und der Extrakt wurden miteinander vereinigt, zweimal mit 20 ml 1Obiger Chlorwasserstoffsäure, einmal mit 20 ml V/asser und dreimal mit 20 ml einer 5%igen wässrigen Hatriumbicarbonatlösung und danach einmal mit 20 ml einer wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt«, Der Rückstand, wurde mit 5?0 ml Diäthyläther gewaschen, wobei man 1,27 g p-Nitroberizyl-7~f2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyimincacetamidoJ-»3-chlor-J-cephem-A-carboxylat (anti-Isomeres) erhielt, F. 14-5°0 (Zersetzung). ' '

- 120

IR: v5YJ^o1: 5^50 bis 3300 (breit), 1780, 1730,

lüttJi. λ

1670 bis 1690 (breit) era*"'

BME: δ...._ (DMS0-d₆) : 3,83 (2H, AB-q, J=17Hz) ,.

ppm

3.97 (3H, s), 5.23 (IH, d, J=SHz) , 5.41 (2H, s), 5.9 (IH, dd J=5,8Hz),

7.62 (2H, d, J=SHz), 8.0 (IH, s) !

8.2 (2H, d, J=SHz), 8.42 (IH, s), 9.55 (IH, d, J=8Hz), 12.43 (IH, s)

- 121 -

(2) 0,6 g ^O % Palladium/Kohle wurden zu einer Lösung von

1»16 S p-Nitrobenzyl-7~[2-(2~formamido-4-thiazolyl).-2- \ methoxyiminoacetamido]-3-chlor~3-cephem~4-cajrboxylat (anti-Isomeres) in 20 ml Methanol -und 40 ml Tetrahydrofuran zugege- ·. ben iuid die Mischung wtirde "bei Raumtemperatur unter Attaosphärendruck 5 Stunden lang kataly'cisch reduziert« Hach der Entfernung des Katalysators aus der Reaktionsmischung wurde das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt«, Es wurden 30 ml Wasser und 6Q ml Äthylacetat zu dem Rückstand zugegeben und die Mischung wurde mit einer vrässrigen Katriumbicarbonatlösung-auf pH 7»5.eingestellt und ausreichend geschüttelt« Sie wässrige Schicht wurde abgetrennt und zu der wässrigen Lösung wurden 90 ml Äthylacetat zugegeben» Die wässrige Schicht wurde mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure unter Rühren und unter Eislcühlung auf pH 2,5 eingestellt und die Äthylacetatschicht .wurde abgetrennt«, Die zurückbleibende wässrige Schicht wurde mit 30 ml Äthylacetat extrahiert und der Extrakt und die Äthylacetatschicht wurden miteinander vereinigt, mit einer ^~' wässrigen Hatriumchloridlösung gewaschen_t getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt«, Der Rückstand wurde mit Diisopropyläther gewaschen, wobei man. 0,47 g 7-{2-(2-Form-

- 122 -

amido-4-tliiazolyl)-2-methoxyimin,oacetamidoj ~3-chlor~3-cephera-4~carbonsäure (anti-Isomeres) erhielt» Die .Verbindung färbte sich bei 21O⁰C und sie zersetzte sich oberhalb 25O°C_e

I.R.· ν ^Nü^^ol _: 3250, 1780, 1720 {Schulder), 1670

IHäX

to 1690 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆) : 3.8 (2H, AB-q, J=17Hz),

4.0 (3H, s)", 5.21 (IH, d, J=SHz), 5.83 (IH, dd, J--=5,8Hz), 8.05 (IH, s) , 8.47 (IH, s), 9.55 (IH, d, J=8Hz), 12.55 (IH, breit s) .

- 123 -

Beispiel 6 ·

0,4- g 7-{2-(2-Fonaamiäo-4-tliiazolyl)-2-met]ioxyindnoacetamido}-3-cli.lor~3--ceplieni-^—carbonsäure (anti-Isomeres) wurden in 15 ml Methanol suspendiert« Zu der Suspension wurden O₅16 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure zugegeben und die Mischung wurde 5 Stunden lang bei Raumtemperatur ge« rührte Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt * mit einem LJSsungsmittelgemisch aus Methanol und Diäthyläther ^Verhältnis!1:1) gewaschen und'getrocknet, wobei man 0,3^ S-7-{2-(2~Amino-^zi-~thiazol5^rl)-2-methoxyipainoacetamidoJ -3~chlor~ 3~cephein-"4-carbonsäurehydrochlorid (anti-Isomeres) erhielt, 3?. >-250°C.

•I.R. ν ^Klujo1 : 3250, 3200, 1788, 1720, 1680,

ΪΪ13.Χ

1640 cm"¹

.. - N.M.R. 6 ' (DMSO-d₆) : .3.81 (2H, AB-q_s J=17Hz) ,

4.08 (3H, s), 5.22 (IH, d, J=SHz),

5.7 (IH, dd, J=S,8 Hz), 7.59 (IH, s),

9.5 (IH, d, J=SHz)

- Ί24 -

1 4 23.9

Beispiel ?

1,7 g 7~Aniino-3~cephem-4-carbonsaure -und 2,04- g Natriumbicarbonat wurden in einer Mischung aus 35 ml Wasser und 35 ml Aceton gelöst. Andererseits wurden 1,95 ml Phosphoroxychlorid zu einer Suspension von 3,42 g 2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2- · methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) in 34 ml trockenem Itbylacetat über einen Zeitraum von 10 Minuten bei 0 bis 6° C zugetropft und die Mischung wurde 30 Minuten lang bei der gleichen ,Temperatur gerührte Zu der Lösung wurde eine Lösung von 2,39 S Trimethylsilylacetamid in 5 ml Äthylacetat innerhalb von i20 Minuten bei O bis 6°C augetropft und die Mischung wurde 20 Minuten lang gerührt« Nachdem 1,95 ml Phosphoro;<y~ chlorid bei der obigen Temperatur innerhalb von 10 Minuten zu der Mischung zugetropft worden waren, wurde die erhaltene Mischung 30 Minuten lang gerührt. Zu der Mischung wurden über einen Zeitraum von 10 Minuten außerdem 1,29 ml Dimethylformamid bei der gleichen Temperatur zugetropft und es wurde 1 'Stunde lang gerührt, wobei man eine klare Lösung'erhielt« Die Lösung wurde zu der Lösung von 7-'Am:bao~3-cepheEi-4--carbonsäure innerhalb von 30 Minuten bei -5 bis 5 C bei einem pH-Wert von 6*5 bis 7 ·> 5 zugetropft und die Ee akt ions mischung wurde 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt«, Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 200 ml Äthylacetat zugegeben und die wässrige Schicht wurde abgetrennt, mit Methylenchlorid-gewaschen, Stickstoffgas eingeleitet und mit Essigsäure auf pH 4 eingestellt. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie unterworfen unter Verwendung eines makroporösen, nicht-ionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP-20" (Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries, Ltd») und mit einer 20%igen wässrigen Isop'ropylalkohollösung eluiert-Das Eluat wurde unter vermindertem Druck eingeengt und

- 125 -

_ ^-• „

lyophilisiert, wobei man 2,0 g 7-£2~(2--Amino-4-thiazolyl)~2·- methoxyindno acetamido] -3~cephem~4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt* Das Produkt wurde mit einer authentischen Probe an Hand der IR- und NKR~Spektren identifiziert*

Beispiel 8 " .

(1) 12 g PhosphorosycM-orid vnirden auf einmal zu einer S Suspension von 1,23 g 2~(2~Amino~4-tMazolyl)-2-metho:xy~ iminoessigsäure (syn-Isomeres) in 12 ml Äthylacetat bei 5°C zugegeben und 30 Minuten lang bei 4- bis 6⁰C gerührt« Zu der Lösung wurden 1*0 g Trimethylsilylacetamid zugegeben und es wurde 30 Minuten lang bei M- bis 6 C gerührt <, Zu der Lösung vjuröen erneut 1,2 g Phosphoroixychlorid zugegeben und 1.5 Minuten lajig gerührte» Außerdem wurden 0,5 S Dimethylformamid auf einmal zu der Lösung bei 4 bis 6⁰C zugegeben und 40 Hinuten lang gerührt, wobei man eine klare Lösung erhielte Andererseits wurden 1,9 g p-Nitrobenzyl~7~ai£ino-3~cephem-4-carb~ oxylathydrochlorid zu einer Mischung aus 30 ml Tetrahydrofuran und 10 ml Aceton zugegeben und zu der Mischung wurden 20 ml einer wässrigen Lösung von 0,6 g Natriumbicarbonat zugegeben» Zu der Lösung wurde die oben erhaltene Lösung bei 0 bis 5°C und bei pH 8,0 sugetropft* Hach 30~ffiinütigem Kühren der Mischung bei -2 bis +2⁰C bei pH 8,0 wurde die unlösliche Substanz abfiltriert« Das Filtrat wurde mit Äthylacetat extrahiert und der Extrakt wurde mit eine_sr gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt» Der Rückstand wurde mit Diisopropylather pulverisiert, wobei.man 1,6 g p~Nitrobenzyl~7-£2»(2-amino-4~thiazolyl)~2-methoxyiminoacetamidoJ-3'-cephem-4~carbo:xylat (syn-lsomeres) erhielt.

126

> ^1?80s "'730/Ί670, 1520 cm"¹ N.M.R. " 6ppm (DMSO-d₆) : 3.60 (2H_f'm), 3.81 (3H, s),

5.12 (IH, d, J=5Hz), 5.85 (IH, dd, J=5Hz, 10Hz),

6.64 (IH, m), 6.70 (IH, s), 7.20 (2H, s),

7.65 (2H, d, J=IOHz), 8.19 (2H, d, J=IOHz), "9.60 (IH, d, J=IOHz)

(2) 7,8 β p-Nitrbbenzyl-7-f2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-

methosyiminoacetaniiäo][~5-cepliem-^—carboxylat (syn-Isomeres) wurden in einer Mischling aus 60 ml Äthanol und 60 ml Wasser suspendiert«, Zu der gerührten Suspension wurdei unter Eiskühlung über einen Zeitraum von 10 Minuten 4-5 ml einer Ίη wässrigen Kaliumhydroxidlösung zugetropft und 15 Minuten lang bei 5°0 gerührt» Die dabei erhaltene Lösung wurde mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf pH 7^0 eingestellt, mit Xthylacetat gewaschen und unter vermindertem Druck auf die Hälfte ihres Anfangsvolumens eingeengt» Die eingeengte Lösung wurde auf pH 5*0 eingestellt und einer Säulenchromatographie unterworfen unter Verwendung eines makroporösen nicht-ionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP~20" (Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd., 80 ml) und mit ^ig©^' wässrigem Isopropylalkohol eluiert«. Die die erfindungsgemäße Verbindung enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt und mit iO%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 3,2 eingestellt« Die ausgefallenen Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 2,3 g 7~[~2-(2-* Amino-'-!—thiazolyl) ^- carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt«,

Beispiel 9

3ί^ S p~Nitrobenzyl~7-&^mi£O-3-cephem-4--carbosylat wurden in 60 nii Tetrahydrofuran suspendiert und zu der Suspension wurden 20 ml einer wässrigen Lösung von 1_t2 g Nat riumbi carbon at zugegeben«, Zu der Lösung wurden bei 3 bis 4⁰C JO ml einer 1n wässrigen Natriumhydroxidlösung zugetropft und es wurde 20 Hinuten lang gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde mit iO%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 7?0 eingestellt und un~ ter vermindertem Druck eingeengt«, Die unlösliche Substanz wurde abfiltriert und das Filtrat wurde mit Xthylacetat gewaschen« Zu <|lem Filtrat wurden 30 ml Aceton zugegeben und es wurde auf -'-5⁰C abgekühlt_e Eine auf ähnliche Weise wie in'Beispiel 7 hergestellte Lösung aus Phosphororxychlorid, Dimethyl» formamid, Trim.ethylsilylacetamid und 2~(2-Aiaino~4~thiasolyl)~ 2~methoxyiminoessigsaure (syn~I_tsomeres, 2,2 g) wurde zu der oben erhaltenen Lösung bei -5 bis O⁰C und bei einem pH-Wert von 7»5 "bis 8,5 zugegeben* Die Mischung wurde 2 Stunden lang bei 3 bis 7°C und einem pH-Wert von 7*5 bis 8,5 gerührt und äie unlösliche Substanz wurde abfiltriert_o Die wässrige Schicht wurde von dein Filtrat abgetrennt, mit A'thylacetat gewaschen und auf pH 3*0 eingestellt, wobei man 1,1 g 7"T^-C2~ Amino-^/l—thiazolyl)<-2-methoxyimino acetamido!-3-cephem~4·- carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

Beispiel 10

(1) 1}764- g Phosphorylchlorid wurden zu einer Suspension von

1,0 g 2~(2~Amino~4--thiazolyl)-2-äthoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) in 10 nil Tetrahydrofuran unterhalb 5°C zugegeben und es wurde 20 Minuten lang bei der gleichen Temperatur

- 128

128- 2

gerührt« Zu der lösung wurden 0,4 g Trimethylsilylacetamid •und 0,4 g Ν,Ν-Dimethylformamid zugegeben und die Lösung wurde 40 Minuten lang unterhalb 5°C gerührt (Lösung A)₀ Andererseits 'wurden 3,5 S Trimethylsilylacetamid zu einer Suspension von 1,5 g A—Nitroberizyl-'^-amino-'^—cephera-^—carboxylat in 15 ml Tetrahydrofuran zugegeben und 1,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Lösung wurde- die oben erhaltene Lösung A bei -20⁰C auf einmal zugegeben und die Lösung wurde eine weitere Stunde lang bei -5 bis 0⁰C gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden bei -20⁰C 20 ml Wasser zugegeben und die Lösung wurde mit einer wässrigen Uatriumbicarbonatlösung auf pH 7i^!5 eingestellt. Zu der Lösung wurden 70 ml Tetrahydrofuran und 50 ml einer gesättigten wässrigen Natrium«-- chloridlösung zugegeben und die Lösung wurde ausreichend geschüttelt. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt.und mit !Detrahydrofuran extrahiert. Die Tetrahydrofuranschicht und der Extrakt wurden miteinander vereinigt und mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen· Die Lösung wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt» Der Rückstand wurde mit Diisopropyläther behandelt (verrieben), wobei man 2,5 g 4—Nitrobenzyl~7-/^2-(2-amino~^z!—thiazolyl)-.2-äthoxyiminoacetamidol-3-cephera-^zl— carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

I. R.ν ^⁰¹ : 3330, 1780, 1730, 1680, 1640,

1610 cm"¹

N.M.R. opprn(DMSO-d₆) : 1.17 (3H, t, J=7Hz) , 3.50 (2H, m), 4.05 (2H, q,' J=7Hz), 5*10. (IH, d, J=5Hz), 5.85 (IH, dd, .J=SHz, 8Hz), 6.67 (IH, s), 7.17 (2H, m), 7.63 (2H, d., J=SHz), 8.18 (2H, d, J=8Hz), 10.13 (IH, d, J=SHz).

-¹29- 214 2 39

(2) 1,0 g .Palladium auf Kohle, angefeuchtet mit 3 mti Vasser,

wurde zu einer Lösung von 2,3 g 4--Nitrobenzyl-7-j[2-(2-amino~4-thiazolyl)-2-äthoxyiminoacet amidol -J-cephem-A—carboxylat (syn-Isomeres) in einer Mischung aus 30 ml Tetrahydrofuran und 15 ώΐ Methanol sowie 0,3 ^l Essigsäure zugegeben und die Suspension wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur unter Normaldruck katalytisch reduziert. Nach der Entfernung des Katalysators aus der dabei erhaltenen Mischung durch Filtrieren wurde das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengte Zu dem Rückstand wurde Äthylacetat zugegeben und die Lösung wurde mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösuug auf pH eingestellt« Nach der Entfernung der unlöslichen Substanzdurch Filtrieren wurde die wässrige Lösung abgetrennt,-mit Äthylacetat gewaschen, auf pH 5₅5 eingestellt und dann mit Aktivkohle behandelt« Die wässrige Lösung wurde auf pH 3i2 eingestellt und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 0,6 g 7-f2™(2~Amino~4·- thiazolyl )~2»äthoxyiminoacetamidoJ-3~cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielte

I.R. vjj^j.⁰¹ : 3500, 3300, 3200, 1785', 1625,

16Q0 cm"¹ N.M.R. 6ppm(DMSO-d₆): 1.20 (3H, t, J=7Hz), '

3.57 (2H, m), 4.08 (2H, q, J=7Hz),

5.08 (IH, d, J=SHz), 5.83 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), 6.47 (IH, m), 6.73(1H, s), 7.20(2H, m),

9.58 (IH, d, J=8Hz)

-.130-

Bei.spiel 11

(1) 2,37 S Triäthylamin, 7,12 g Dimethyl anilin -und 3,93 g

Trimethylsilylchlorid wurden zu einer gerührten Suspension von 10 g 4-Nit r ob enzy 1-7-(2-phenyl ac et amido )-3-hydro:xy-3-cephem-4—carbosylat in 200 ml Methylenchlorid zugegeben.und die Lösung wurde 1 Stunde lang bei Baumtemperatur gerührt-« Zu der Lösung wurden bei -30 bis -25°C 4·,88 g Phosphorpentachlorid zugegeben und es wurde 3 Stunden lang bei -25 bis -20⁰C gerührt. Zu' der Lösung wurden bei -25 bis -20⁰C 4-2 ml Methanol zugegeben und es wurde 1 Stunde lang gerührt. Zu der Lösung wurden 35 ml Wasser bei -25 bis -20⁰C zugegeben und die Lösung wurde bei Raumtemperatur gerührt _o Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Methylenchlorid und danach mit Diäthyläther gewaschen und getrocknet, wobei man 5,2 g 4— Nitrobenzyl~7-amino~3-hydro2qy-3~cephem-4--carboxylat, ϊν 14-8⁰C (Zersc), erhielt.

I.R. ^vjjax° ^: 3440, 3300, 1760, 1740 cnf¹ '

N.M.R. δ ppm (DMSOd₆) :' 2.8 - 3.7 (2H, m) ,

4.90'(1H, t, J=4Hz), 5.29 (IH, d, J=4Hz), 5.38 (2H-, s), 7.71 (2H, d, J= 8Hz), .

8.'26 (2H, d, J= 8Hz).

(2) 2,87 g Phosphorylchlorid wurden zu einer Lösung von

%37 g N,IT™Dimethylformamid in 10 ml Äthylacetat bei 5 bis 10⁰C zugetropft. Zu der Lösung wurden 4-0 ml Äthylacetat zugegeben und es wurde 4-0 Minuten lang unter Eiskühlung gerünrt. Zu der Lösung, wurden 3,58 g 2-(2-Formamido~4~thiazolyl)-2-methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) zugegeben und die Lösung wurde 4-0 Minuten lang bei 0 bis 5°C gerührt. Die dabei

-131 - -

erhaltene Lösung vrurde auf einmal zu einer Mischung aus 5 S 4--Hitrobenzyl-7--aiiiino-3-bydroxy-3™cephem--4-carbo.xylat, 50 ml ' Äthylacetat, 14-, 3 S Trimethylsilylacetamid und 5*8 S Bis-(trinietbylsilyl)acetamid bei -15⁰C zugegeben und 1,2 Stunden lang bei -20 bis -15⁰C gerührt.

50 ml Wasser wurden zu der dabei erhaltenen Lösung bei -25. bis -20⁰C zugegeben und es wurde gerührt, bis die Temperatur auf 5°C anstieg. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt und mit Äthylacetat extrahiert» Die Äthylacetatschicht und der Extrakt wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wässrigen ITatriumchloridlösung gewaschen und über -Magnesiumsulfat getrocknet«, Nachdem die Lösung unter vermindertem Druck auf ein Volumen von 50 ml eingeengt worden war, wurden die niederschlage durch Filtrieren gesammelt und mit Äthylacetat gewaschen, wobei man 3,5 g ^zi~Nitrobenzyl~7-[2~(2-form~ amido-/+-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidoJ-3-hydroxy-3- · cephem—4~carboxylat (syn-Isomeres).erhielt, Fo 163°C (Zers«)«.

I.R. ν ^Nujo1 : 3210, 3160, 3050, 1780,

ΪΏ3.Χ

• 1665. cm N.M.R. 6ppm (DMSO-d₆): 3.0 - 4.2 _t(2H, m), 3.95

(3H·, s), 5.28 (IH, d, JMHz), 5.41 (2H, s) , .5.64 (IH, dd, J=4Hz, 9Hz), 7.49 (IH, s) 7.67 (2H, d, J=8Hz), 8.21 (2H, d, J=8Hz), 8.50 (IH, t, J=9Hz).

(3) Eine Lösung der oben erhaltenen Verbindung (1 g) in I5 ' ml Methanol und 5 ml Tetrahydrofuran und 0,72 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure wurde 1 Stunde lang bei

Raumtemperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 100 ml Diäthyläther Zugegeben und dann wurde damit behandelt (verrieben)* Die Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,65 g 4-Mtrobenzyl-7-/_2-(2-aminothiazol»-4-yl)--2~ methoxyiminoacetamidcTj -J-hydroxy-p-cephem—^-carboxylathydrochlorid (syn-Isomeres) erhielt,

¹^* ^foi⁰¹ -5180,1780,.1680,.1670,1640Cm""¹ N.M.R. J. ppm (DMS0-d₆) : 3.2 - 4.0 (2H, in), 5.97

(5H, s), 5.27 (IH, d, JM-Hz), 5.41 (2H, s), 5.60 (IH, dd, J=4Kz, 8Hz), 7.10 (IH, s), 7.66 (2H, d, J=SHz), 8.25 (2H, d, J=9Hz), 9.73 (IH, . d, J=SHz)-

12

O) 1*76 g Phosphorylchlorid und 0,4- g Trimethylsilylacetamid

wurden zu einer gerührten Suspension.von 1,0 g 2-(2-Amino~4-thiazolyl)-2~äthoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) in .10. ml [Tetrahydrofuran unterhalb 5°C zugegeben und es wurde $0 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt.-Zu der Lösung wurden 0,4- g Ν,Ν-Dimethylformamid zugegeben und es wurde 20 Minuten lang unterhalb 5°C gerührt (Lösung A). Zu einer gerührten Suspension von 1,9 g 4-Nitrobenzyl-7~amino-3-chlor-3-cephem~4—carboxylathydrochlorid in I5 ml Tetrahydrofuran wurden 4,8 g Trimethylsilylacetamid zugegeben und die Lösung wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt« Zu der Lösung wurde die obige Lösung A auf einmal bei -20⁰C zugegeben und die Lösung wurde 1 Stunde lang bei O⁰C gerührt. Zu der dabei

- 133 -

erhaltenen Lösung wurden bei -20⁰C 50 ml Vasse.r zugegeben und' sie wurde mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 8,0 eingestellt. Zu der Lösung wurden 50 ml Tetrahydrofuran \md 50 ml einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung augegeben«. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gex^aschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Einengen der'Lösung unter vermindertem Druck wurde der Rückstand mit Diisopropyl™ äther behandelt (verrieben) und die Niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt., wobei man 2,0 g 4-Nitrobenzyl~7-[]2~(2-amino~4~thia2olyl)-2~äthoxyiniinoacetamido3-3-"Chlor~5--cephem~4~carbozylat (syn-Ißomeres) erhielt»

³²⁰⁰> ¹⁷⁸⁰» !7.3Q, 1670 cm"¹

N.M.R. «ppm (DMSO-d₆): 1.23 (3H, t, J=7Hz), 3.96 (2H, s), 4.13 (2H, q, J=7Hz), ⁵-31 (IH, d, J=SHz), 5.88 QH, dd, J«5Hz/8Hz), 6.77 (IH, s) , 7.67 (2H, d, J=8Hz), 8.25 (2H, <J, >8Hz) , 10.30 ' (IH, d, J=SHz).

(2) Eine Suspension von 0,8 g Palladium auf Kohle in 5 ml

Wasser wurde au einer Mischung von 2,0 g 4—Nitrohenzyl« 7-|j2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-äthoxyiminoacetamidoJ-3-chior-3 eephem-4~carboxylat (syn-Isomeres), 0,6 ml Essigsäure und 60 ml ^tetrahydrofuran zugegeben und die Suspension wurde 3 Stun den lang bei Raumtemperatur unter Normaldruck katalytisch re duziert« Nach der Entfernung des Katalysators durch Filtrieren wurde das Piltrat unter vermindertem Druck eingeengt«

- 134 -

Hach der Zugabe von 50 ml Äthylacetat au dem Rückstand wurde die Lösung mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 7,5 eingestellt und die unlösliche Substanz wurde abfiltriert. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt und mit 10%iger Chlorwasserstoff säure auf pH 6,0 eingestellt und dann wurde das organische Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt«. Die wässrige Lösung wurde einer Säulenchromatographie unterworfen unter Verwendung eines makroporösen nicht-ionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP-20" (Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd«) (30 ml). Die Säule wurde mit Wasser gewaschen und mit 5%lgem wässrigem Isopropylalkohol eluiert«, Das Eluat wurde lyophilisiert, wobei man 0,3 6 lTatrium-7-{j2-(2-amino-4-thia2,olyl)-2-äthoxyiminoacetamido] -3-chlor~3-cephem-4«ca.rbo:xylat (syn-Isomeres) erhielt« .

ϋ "¹

*· ^R· ^v

^335Ü» 3200, 1770, 1675, 1620 cm

N.M.R.

δ ppm (D₂O) : 1.33 (3H, t, J=7Hz), 3.76 (2H, q, J=18Hz, 30Hz), 4.30 (2H, q, J=7Hz), 5.33 (IH, d, J=5Hz), 5.83 (IH, d, J=5Hz), 7.06 (IH, s).

Beispiel 1^ .

(1) 4,6 g Phosphorylchlorid, 0,95 g Trimethylsilylacetamid

und 1,2 g ϊί,ΙΤ-Dimethylformamid vmrden zu einer gerührten Suspension von 2,8 g 2-(2-Amino~4-thiazolyl)-2-isopropoxyirainoessigsäure (syn-Isomeres) in 25 ml Tetrahydrofuran innerhalb von 30 Minuten unterhalb 5°C zugegeben (Lösung A) _β

Andererseits wurden 10,5 S Triniethyisiiylacetamid zu einer Suspension von 3?9 S ¹^-Nitrobenzyl~7-amino-3-cephem-4--carboxylat in 50 ml Tetrahydrofuran zugegeben und es wurde 1,5 Stunden lang "bei Raumtemperatur gerührt«, Zu der Lösung vrurde die obige Lösung A bei -20⁰G auf einmal zugegeben und die erhaltene Lösung vrurde 40 Minuten lang bei -5 bis O⁰C gerührt* Zu der erhaltenen Lösung wurden bei -20⁰C 70 eil V/asser und· 100 ml Tetrahydrofuran zugegeben,, Die Lösung wurde mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 7,5 eingestellt und 1 Stun.de lang gerührte Nachdem 200 ml einer gesättigten wässrigen Hatriuincliloridlösung zugegeben worden waren, wurde die organische Schicht abgetrennt» Die zurückbleibende wässrige Schicht \furde mit Tetrahydrofuran extrahiert und der Extrakt und die obige organische Schicht wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem -Druck eingeengt«, Der Rückstand wurde mit Diisopropyläther behandelt (verrieben) und die Niederschläge wurden ·. durch Filtrieren gesammelt, wobei man 6,0 g 4-ITitrobenzyl-7~ £2-(2~-amino»4-thia.zolyl)'-2-isopropoxyiniinoacetamidoJ-3-cephem-4-carboxylat (syn~Isomeres) erhielt.

^{: 3320}' ³²⁷⁰' ¹⁷⁷S/ 1730, 1670, 1630 cm"¹

N.M.R. J ppm (DMSO-d₆) : 1.17 (6H, d, J=6Hz),

3.63 (2H, m), 4.33 (IH, q, J=GHz), 5.17 (IH, d, J=5Hz), 5.42 (2H, s), 5.92 (IH, dd, J=5Hz, 8Kz), 6.67 (IH, m), 6.70 (IH, s), 7.22 (2H, m), 7.70 (2H, d, J=SHz), 8.25 (2H, d, J=SHz), 10.13 (IH, d, J=8Hz)

- 136 -

(2) 1 ml Essigsäure und eine Suspension von 1.0 % Palladium

auf Kohle (2,0 g) in 8 ml Wasser wurden zu einer Lösungvon. 5,0 g 4™Nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isoprppoxyimino acetamido*] -3*-cephem-4-carboxylat (syn~Isomeres) in 150 ml Tetrahydrofuran zugegeben und die Suspension wurde bei Normaldruck und Raumtemperatur katalytisch reduziert.· Nach der Entfernung des Katalysators durch. Filtrieren wurde öas Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt« Zu dem Rückstand wurden 80 ml Äthylacetat zugegeben und mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 7?5 eingestellt. Die organische Schicht wurde abgetrennt und mit einer v/äs sr igen liatriumbicarbonatlösung extrahiert» Der Extrakt und die oben erhaltene wässrige Schicht wurden miteinander vereinigt, mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf pH 3,0.eingestellt und mit Tetrahydrofuran extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wässrigen Hatriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Die ausgefallenen Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 0,8 g 7-][2~(2-Amino-. 4—thiazolyl)-2~isopropcxyiminoacetamidoj~3-cephem~4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt«

I.R. [/¹^⁰¹ . 3320, 1780, 1670, 1635 cm"¹ "max

N.M.R. /ppm (DMSO-dg) : 1.20 (6H, d, J=6Hz), 3.55 (2H, mj , 4.30 (HI, q, J=6Hz), 5.08 (IH, d, J=SHz)," 5.82 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz),6.45 (HI, m), 6.68 (IH, s), 7.10 (2H, m), 10.08 (IH, d, J=8Hz)

- 137 -

Beispiel 14-

(1) 4-,6 g Phosphorylchlorid, 0,95 S Trimethylsilylacetamic!

und 1,2 g IT ,N-Dimethyl formamid wurden zu einer gerührten Suspension von 2,8 g 2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiininoessigsäure (syn~Isomeres) in 25 ml-Tetrahydrofuran unterhalb 5⁰G zugegeben, und es "wurde 20 Hinuten lang gerührt. Die Lösung wurde zu einer Suspension von 3,9 g 4—Nitrobenzyl-7-

f^ amino~3-cephem--4-~carboxylat in einer Mischung aus 20 ml Tetrahydrofuran, 20 ml Wasser und 20 ml Aceton bei -5 his 5°C zugetropft, wobei der pH-Wert mit einer 20%igen Natriumcarbonatlösung bei 6,9 bis 7»1 gehalten wurde. Die Lösung·wurde JO Minuten lang bei -5 bis 5°C und eine weitere Stunde lang bei 1O⁰C gerührt, dann wurde der pH-Wert auf 7*5 eingestellt« Nachdem 100 ml Tetrahydrofuran und 200 ml einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung zu der dabei erhaltenen Lösung zugegeben worden waren, wurde die unlösliche Substanz abfil- ' trierto Die organische Schicht wurde von dem ]?iltrat getr.ennt, mit einer gesättigten wässrigen Katriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt., Der Rückstand wurde mit Diisopropyl-

^ ather behandelt (verrieben) und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 5^8 g 4--Nitrobenzyl-7- £2-(2~amino~4-thiazolyl)-2-propoxyiminoacetamido])-$-cephem-4«-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt«

^{: 3300}' 1780, 1730, 1670, 1640 cm"¹

N.M.R. J ppm '(DMSO-dg) s 0.S3 (3H, t_f J=6Hz) , 1.70 (2H, in), 3.70 (2M, m), 4.08 (2H, t, J=6Hz), 4.5 (2H, m), 5.23 (IH, d, J=5Kz), 5.50 (2K, s), 5.97 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), 6.73 (IH, m),.6.80 (IH, s), 7.75 (2H, d, J=9Hz), 8.30 (2H, d, J=9Hz), 9.65 (IH, d, J=8Hz).

- 133 -

(2) 5»0 S ^Nitrobenzyl-7-£2~(2-am:ijio-4-thiazolyl)-2-prop~

oxyiminoacetamidoJ^-cephem-^-carboxylat (syn~Isomeres) wurden auf ähnliche Weise xvie in Beispiel 13r(2) beh.andelt, wobei man 0,9 g 7-£2~(2-Amino-4-thiazolyl)-2-propo:xyiminoacet8inido]-3-cephem~4-carbonsäure (syn~Isomeres) erhielt.

I.R. j l^Nu3^o1 _: 3250, 1770, 1650, 1660, 1620 cm"¹

N.M.R. (J ppm (DMSO-dg) : 0.93 (3H, t, J=7Hz), 1.67 (2H, Sextett J=7Hz), 3.60 (2H, m) , 4.03 (2H, t, J=7Hz), 5.13 (IH, d, J=5Hz), 5.83 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), (:.48 (211, t, J=4Hz), 6.70 (IH, s) , 7.18 (2H, m) , δ.53 (IH, d, J=8Hz)

(1) 13*2 g PhospJaorylchlorid \inirden zu einer gerührten Lößung von 6,3 g N_VN-Dimethylformamid und 24-,7"^l Tetrahydrofuran bei -5°C zugetropft und 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der Lösung wurden bei -5°C 120 ml Tetrahydrofuran und Ί9?5 S 2-(2-iOrraamidothiazol-4— yl)-2-n-butoxyiminoessigsaure (syn-Isomeres) zugegeben und es wurde 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Die Lösung wurde zu einer gerührten Suspension von 24-,7" S ^~ lίitrobenzyl-7-amino-3""Cephem-4-carboxy.lat, 120 ml Tetrahydrofuran, 60 ml Aceton und 60 ml Wasser bei -5 bis 5°C über einen Zeitraum von 15 Minuten zugetropft, v/ährend der pH-Wert mit einer 20%igen wässrigen Natriumcarbonatlösung auf 7 bis 7?5 eingestellt wurde, und dann wurde die Lösung Minuten lang gerührt«, Die unlösliche Substanz wurde

- 139 -

abfiltriert und au äem Filtrat wurde eine gesättigte wässrige liatriuinchloridlösung zugegeben. Die Lösung wurde zweimal mit Tetrahydrofuran extrahiert» Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengte Der Rückstand wurde mit Diisopropyläther verrieben, wobei man 34₅6 g 4-Nitrobenzyl»7-C2~(2-formamidothia2;ol4-yl)-2-n-butoxyiniinoacetamido]]--3~cephem-4~carboxylat (syn-Isomeres) erhielt«

I.R. ν iJ"j^o1: 3240, 3050, 1780, 1730, 1695,

IuciX

1660 cm

IuciX

"¹

N.M.R. δ CDMSO-dg, ppm) : 0.92 (3H, t, J=7Hz), ' - .0.8—2.2 (4H, m), 3.67 (2H, d, -

J=4Hz), 4.16 (2H, t, J=7Hz), . 5.23 (IH, d, J=5Hz), 5.46 (2H, s), 5.99 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), 6.71 (IH, t, J=5Hz), 7.43 (IH, s), 7.76 (2H, d, J=9Hz), 8.30 (2H, d, ^:J«9Hz), 8.58 (IH, s), 9.72 (IH, d, J-SHz), 12.66 ClH, s)

Eine Mischung (2) aus 54,5 g* 4-Kitrobenzyl-7-[2~(2«forinamidothiazol«4-yl)-

2~n~butoxyiminoacetamido]-3-cephem--4~carboxylat (syn-Isomeres), 345 ml Tetrahydrofuran, 14 g 1ü%iges Pallad.iumA Kohle, 140 ml Methanol, 2,5 ml Essigsäure und 50 ml V/asser wurden unter Normaldruck bei Raumtemperatur 3 Stunden lang katalytisch reduziert« Die dabei erhaltene Mischung wurde filtriert und mit Tetrahydrofuran gewaschen. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde in einer

- 140

«140 -

Mischung aus Äthylacetat und einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung gelöst. Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren entfernt. Nachdem die Äthylacetatschicht abgetrennt und mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung extrahiert worden war, wurden die wässrige Schicht und der wässrige Extrakt miteinander vereinigt. Nachdem die wässrige Lösung mit Äthylacetat und danach mit Diäthyläther gewaschen worden war, wurde die Lösung mit iO%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 eingestellt und 30 Minuten lang gerührt· Die Niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen undüber Magnesiumsulfat getrocknet, wobei man 18,3 g 7-[~2--(2-Forinamidothiazol-^/4~yl)-2~butoxyiminoacetamido^| ^ carbonsäure (syn~Isomeres) erhielt«,

I.R- ν jj^j⁰¹: 3330, 3040, 1780, 1725, 1695,

1655 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, t, J=7Hz),

1.1^1.9 (411, m), 3.58 (2H," d, J=SHz) , 4.12 (2H, t, J=7Hz), 5.13 (IH, d, J=SHz), 5.86 (IH, dd, J=5Hz,

8Hz), 6.46 (IH, t, J=4Hz), 7.40 (IH₅ s), 8.50 (IH, s), 9.63 (IH, d, J=OHz),

12.57 (IH, breit s)

(3) Eine Mischung aus 12,7 S 7-[2-(2-Formamidothiazol~4-yl)-

2-n-butoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres), 9»6 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure. 9^5 Methanol und 9,5 ml· Tetrahydrofuran wurde 3 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührte Die erhaltene Lösung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde in V/asser suspendierte Die

- 141 -

Suspension wurde mit ITatriumbicarbönät unter Eiskühlung auf · pH 3}5 eingestellt und es wurde 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und über Magnesiumsulfat getrocknet, wobei man 10 g eines Pulvers erhielte Das Pulver wurde in 300 ml Wasser suspendiert und mit Natriumbicarbonat auf pH 7₅O eingestellt* Die Lösung wurde mit iO%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 6»0 eingestellt und einer Säulenchromatographie unter- (' · worfen unter Verwendung eines nicht-ionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP-20" (Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd») (300 ml) und mit einer 10%igen wässrigen Isopropylalkohollö'sung eluiert«, Das Eluat •wurde mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure unter Eiskühlung auf pH 3,5 eingestellt und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 7_S2 g 7-E2-(2~Aminothiazol4-yl)-2-n-butoxyiminoacetamidoj~3~cephem~4~carbonsäure (syn-Isotneres) erhielt»

'¹

³³²⁰» !775, 1660 cm N.M.R. 6 (DMSO-d₆, ppm) : 0.88 (3H, t,.J»7Hz),

9 (4H, m), 3.58 (2H, breit s),

4.05 (2Η, t, J-7Hz), 5.08 (IH, d, J=SHz), 5.80 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), 6.44 (IH, bieibt s), 7.18 (2H, s) , 9.51 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 16

(1) 6,48 g 2-(2-Forraamidothiazol-4-yl)-2-iso~butoxyimino·

essigsaure (syn-Isomeres), 2,10 g Ν,ΪΤ-Bimethylformaraid, 4₅40 g Phosphorylchlorid, 110 ml Tetrahydrofuran, 8,23 g 4-Nitro~ benzyl~7-^ino~3~cephem~4~carboxylat, 16 ml Aceton und. 16 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(O behandelt, wobei man 12,8 g 4-lTitrobenzyl-7-jj2-(2--forniamido-thiazol~4-yl)-2~iso-butoxyiminoacetamidoJ-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt. . ·

I.R. ν ^NuJ^o1 : 3240, 3050, 1780, 1720·, 1700, max

1655 cm'¹ N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) :' 0.92 (6H, d, J= 7Kz),

1.7*2.2 ClH, m), 3.67 (2H, brei« s), 3.91 (2H, d, J=7Hz), 5.21 (IH, d, J=5Hz), 5.95 (IH, dd, J=SHz, 9Hz), 6.67 (IH, t, J=4Hz), 7.37 (IH, s), 7.72 (2H, d, J-8Hz),^ 8.24 (2H, d, J=8Hz), 8.52 (IH, s), 9.68 (IH, d, J=9Hz), 12.58 (IH, breit s)

(2) 14,2 g 4--Mtrobenzyl-7-[2-(2-formamidothia2ol-4-yl)-2-

iso-butoxyiminoacetamidol-J-cephem-^—carboxylat (syxi-Isomeres), 5,7 g 10 % PalladiumAohle, 57 ml Methanol, 142 ml Tetrahydrofuran, 1 ml Essigsäure und 10 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel -i5-(2) behandelt, wobei man 4,2p g 7- 2~(2-Forraamidothiazol-4-yl)-2~isobutoxyiminoacetamido -3-cephem-4-carbonsäure (syn~Isomeres) erhielt«

¹: 3260, 1790, 1725, 1670 cm'¹

- 143 -

- 143- ^Ä6 ^

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.92 (6H, d, J=GHz)₅*

1.6*2.3 .(1H, m), 3.61 (2IT, d, J=4Hz), 3.91 (2H, d, J=6Hz), 5.14 (IH, d,

. .,-;.. J=SHz), 5.88 (IH, dd, J=SHz, 8Hz),

6.50 (IH, t, J=5Hz), 7.40 (IH, s), 8.56 (IH, s), 9.64 (IH,. d, J~8Hz)

(3) ^»'1 g 7-r2~(2~

acetamiäol-J-cepliein-i—carbonsäure (syn-Isomeres)_} 3,65 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure und 61,5 ml Methanol wurden auf ähnliche V/eise v/ie in Beispiel 15-Q) behandelt, •wobei man 2,4 g 7"-[2-(2-Aminothiazol~^—yl)-2-iso-butoxyiminoacetamidoj -3-cephem-^carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt« I.R. ν ^Nu;Jo1 : 3330, 1780, 1665, 1630, 1545 cm"¹

Hl 3.X

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.89 (6H, d, J=7Hz),

1.6^2.2 (IH, m), 3.58 (211, breit s) , "3.84 (2H, d, J=7Hz>, 5.10 (IH, d, J=SIIz), 5.82-(IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.46 (IH, breat s), 6.68 (IH, s),

»

7.20 (2H, s), 9.53 (IH, d, J=9Hz)

0,9 S 2-(2-]?oriüamiäotliia2iol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres), 266 mg Ν,Ν-Dimethylformaiaid, mg Phosphorylchlorid, 20 ml Tetrahydrofuran, 1,05 S

- 144 -

^-Nitrobenzyl^-amino-J-eephem-^carboxylat, 5 .&1 Aceton,und 5 ml Wasser wurden^auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(1) "behandelt, wobei man 1,69 S ^zi~Nitrobenzyl-7-['2-(2~formamidothiazol-4-yl )~2-cyclohe3q7loxyiminoacet amidoj-J-cephem carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

I-^R· ^v ¹Σί^Ό '· ³²⁶°» 3170, 3070 , 1785, 1725, 1700,

1655 cm"¹

N.M.R. <S(DMSO-d₆, ppm) : 0.8^2.2 (1OH, m), 3.66 (2H,.

breiSs), 4.10 (IH, m)., 5.16 (IH, d, J=5Hz), 5.42 (2H, s), 5.95 (IH, dd, J= 5Hz, 9Hz), 6.66 (IH > breit s.), j 7.37 (IH, s), 7.70 (2H, d, J=8Hz)₅

... . ..8.22 (2H, d, J=8Hz), 8.50 (IH, s),

9.63 (IH, d, J=9Hz), 12.60 (IH₅ breit s)

(2) 2,0 g 4~Hitrobenzyl-7-[2-»(2~formamidothiazoi-^-yl)-2-

cyclohexylo^iminoacetamido] -3-cephem-4--carbo:xylat (syn-Isomeres), 0,8 g 10% PalladiumAohle, 8 ml Methanol, 20 ml !Tetrahydrofuran, 0,14 ml "Essigsäure und 1,4- ml Wasser vrorden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(2) behandelt, wobei man 0,77 g 7-jj2-(2-5Ormamidothiazol-4-yl)-'2-»cyclohexyloxyiminoacetamido] -3-cephem~4— carbonsäure (syn-Isomei'es) erhielt.

I.R. ν ^"j⁰¹ : 3275, 3070, 1780, .1675 cm"¹ "N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.8^2.2 (1OH, m), 3.62

(2H, breii.s), 4.12 (IH₅ m), 5.13 (IH, d, J=SHz), 5.87 (IH,

- 145 -

' dd, J=BHz, 9Hz), 6.47 (IH, breit s>, 7.37 (IH, s), 8.50 (IH,- s), 9.58 (IH, d, J=9Hz), 12.61 '(1H, breit s)

(5) 0,72 g 7-[2~(2-Formamidotliiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoacetamido]) -3>~cephem~4— carbonsäure (syn-Isomeres), 10,8 ml Methanol und 0,61 g konzentrierte Chlorwasserstoffeäure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15~(3) "behandelt, wobei, man 0,28 g 7-{]2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2~cycloh.exyloxyimino acet amidqj -^-cephem-A—carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt»

I*R_e vfZl⁰¹ i 5350, 1775, 1665» 1620,1540 cm*"¹

K.M.R. ' δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.8^2.2 (10H₅ m), 3.60 (2H,

. breit s), 4.04 (IH, m), 5.09 (IH, d, J=5Hz), 5.83 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.45 (IH, t, JMHz), 6.67 (IH, s), 7.19 (2H, s), 9.48 (IH, d, J=9Hz)

Beispiel 18

0,84·. g Phosphoryl chlor id wurden zu einer gerührten Suspension von 1jO g 2~(2-Aminothiazol—4—yl)-2-allyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres)5 10 ml Tetrahydrofuran und 0_$05 ml Wasser bei 5°C zugetropft und 20 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt« Zu der Lösung wurden 0,66 g Trimethylsilylacetamid, 0,84 g Phosphorylchlorid und O₅4-5 g Ν,Ν-Dimethylformamid zugegeben und 1 Stunde lang bei 5 0 gerührt zur

- 146 ~

Herstellung der aktivierten Säurelösungο Andererseits wurden 4,0 6 Trimethylsilylacetamid zu einer Suspension von 0,88 g 7-Amino-3-cephem-4--carbonsäure in 10 ml Tetrahydrofuran bei 40⁰C zugegeben und 50 Minuten lang gerührt. Zu der Lösung wurde auf einmal die oben erhaltene aktivierte Säurelösung bei ~20°C zugegeben und 1 Stunde lang bei O⁰C gerührt. Nachdem 20 ml Wasser zu der dabei erhaltenen Lösung bei -20⁰C zugegeben worden waren, wurde die Lösung mit einer wässrigen ITatriumbicarbonatlösung auf pH 7,5 eingestellt« Zu der Lösung wurde üthylacetat zugegeben und die wässrige Schicht wurde abgetrennt. Die Lösung wurde mit Äthylacetat und danach mit Diisopropyläther gewaschen, auf pH 5»0 eingestellt und danach mit Aktivkohle behandelt. Nachdem die Lösung auf pH 3,0 eingestellt worden war, wurden die Niederschläge durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und über Phosphorpentoxid getrocknet, wobei man 0,8 g 7-[2-(2-Aminothiazol»4-yl)~2~ allyloxyiminoacetamido] -3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomer) erhielt«

"¹

: 3300, 1780, 1660, 1630 cm N.M.R. δ (DMSO.-d₆, ppm) : 3.67 (2H, d, J=4Hz),

4.67 (2H, m), 5.17 (IH, d, J=5Hz), 5.25 (IH, in), 5.50 (IH, m), 5.90 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.03 (IH, m), 6.55 (IH, m), 6.80 (IH, s), .

7.50 (2H, m), 9.68 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 19

1,4 g Phosphorylchlorid wurden zu einer Suspension von 1,7 g

- 147 —

2~(2-Aminothiazol-4~yl)-2-propargylo:xyiminoessigsäure (syn-Isomeres) in 15 ml Tetrahydrofuran -unterhalb 7°C zugetropft und es wurde 10 Minuten lang bei .der gleichen Temperatur gerührt- 1,4 g Phosphorylchlorid, 1,3 g Trimethylsilylacetamid und 0,76 g Ν,Ν-Dimethylformamid wurden zu einer Lösung ^gegeben und 20 Minuten lang gerührt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung» Andererseits wurden 7>8 g Trimethylsilylacetamid au einer Suspension von 1,5 g 7-Amino-3-cephem-4-earbonsäure in 20 ial Tetrahydrofuran zugegeben und JO Minuten lang bei 40⁰C gerührt· Zu der Lösung wurde auf einmal die oben erhalltene aktivierte Säurelösung bei -20⁰C zugegeben und 30 Minuten lang bei O⁰C gerührt» Nach der Zugabe von 20 ml Wasser zu der dabei erhaltenen Lösung bei -20⁰C" wurde d'ie Lösung mit einer wässrigen ITatriumbicarbonatlösung auf pH 7*5 eingestellt«, Die wässrige Schicht wurde abgetrennt, mit Äthylacetat und danach mit Diisopropyläther gewaschen und mit Aktivkohle bei pH 5,5 behandelt«, Die Lösung wurde auf pH 3*0 eingestellt und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und über Phosphorpentoxid unter vermindertem Druck getrocknet, wobei man 1,47 g 7-L2~(2~Aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetamido]] -3-cephem~4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielte

I.R.

Nu j öl max

3500, 3300, 1780, 1720, 1660,' 1630 cm"¹

N.M.R. (S(DMSO-d_6} ppm) : 3.48 (IH, m) , 3.67 (2H, m) ,

4.80 (2H, d> J=2Hz), 5.17 (IH, d, J=SHz), 5.8 8 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), 6.55 (IH, m), 6.85. (IH, s), 7.33 (2H, M), 9.73 (IH, d, J=8Hz)

- 148 -

4 2 3

Beispiel 20 .

(1) 3 Tropfen Ν,Ν-Dimethylformamid wurden zu einer Suspen-' sicm von 23 g 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-metho2yimino-

•χ-essigsäure (syn-Isomeres) zugegeben und. 5 Hinuten lang bei 60⁰C gerührt· Nach dem Einengen der Lösung im Vakuum wurde'zu dem Rückstand Benzol zugegeben. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, dreimal mit 30 ml Benzol und danach mit Diäthyläther gewaschen, wobei man 18 g 2-(2-Formamidothiazol~4-yl)~2-metho^iminoacetylchlorid (anti-Isomeres) erhielt. Andererseits wurden 46 g Trimethylsilylacet-•amid zu einer Suspension von 16,8 g 4-Nitrobenzyi-7-amino~3-cephem-4-carboxylat in 168 ml Methylenchiοrid zugegeben und 1 Stunde lang bei 40 C gerührt,. Su der Suspension wurden langsam 13,6 g 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2~metho:xyimino~ acetylchlorid (anti-Isomeres) bei -5 bis 0 C zugegeben und es wurde 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu ßer dabei erhaltenen Lösung wurden I50 ml Wasser zugegeben 'und es wurde I5 Minuten lang gerührt. Die Niederschläge wur-· den durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und über Phosphorpentoxid unter vermindertem Druck getrocknet, wobei man 25,7 S 4-Nitrobenzyl-7-L²-(²-f°^rmamiäothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (anti-Isomeres)-erhielt.

I.R. ν Jj^j⁰¹ : 3300 (breit), 1780, 1730, 1680,

1520 cm"¹ .

N.M.R. δ (DMSO^d₆, ppm) : 3.70 (2H, breit s), 4.07

(3H, s), 5.19 (IH, d, J=SHz-), 9.57

(IH, dy J=SHz)^OO (IH, dd, J=5Hz, 8H2), 5.3Ο (2H₁ s),

* in 230 ml Thionylchlorid ₍

. - 149 -

6.70 (IH, t, J=4Hz), 7.71, 8.25 (.4H, A₂B₂, J=9Hz), 8.07 (IH, s), 8.50 (IH, s), .12.55 (IH, breit s)

(2) Eine Suspension von 4,2 g 4-Kitrobenzyl-7-[2~(2-Form·-

amidothiazol-4~yl)-2-metho:xyiminoacetamido^-3-cephem~4~-. carbo:xylat (anti-Isomeres), 1,7 g 10% Palladium/Kohle, 0,63 ml Essigsäure^ 6,3 ml· Wasser, 42 ml Methanol und 84 ml Tetrahydrofuran wurden in einer Vasserstoffatmosphäre 2 Stunden lang bei Raumtemperatur katalytisch reduziert_o Nach der Entfernung des Katalysators durch Filtrieren tfurde das. FiItrat unter vermindertem Druck auf ein Volumen von etwa ml eingeengte. Zu der eingeengten Lösung wurden. 30 ml Wasser und 50 ^rfll Äthylacetat zugegeben und die Lösung wurde unter Rühren mit ITatriumbicarbonat auf pH 8,0 eingestellt« Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren entfernt und die wässrige Schicht wurde abgetrennt xvaä mit 50 ml Äthylacetat gewaschen«. Die Lösung wurde mit Aktivkohle behandelt und mit 10%iger Chlorwasserstoff säure· unter Eiskiihlung auf pH 2,2 eingestellt« Die niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt und mit Wasser gewaschen, wobei man 2,52 g 7-£2~(2~Formatüidothiazol-4-yl)«2-methoxyiininoacetamidoD-3~cephem--4-cartonsäure (anti-Isomeres) erhielte Nu j öl

I.R.

N.M.R.

max

3300 (breit) "¹

6(DMSO-(L

1780, 1680, 1670, 1550 cm'¹ ppm) : 3.63 (2H, br©Afc s), 4.08 (3H, s)_s 5.15 (IH, d, J«5Hz), 5.87 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.55 (IH, t, J=4Hz), 8.09 (IH, s), 8.52 (IH, s), 9.46 (IH, d, J=8Hz)

- 150 -

(5) Eine Suspension von 2,5 g 7-L2-(2-Formamidothiazol-4-

yl)-2-methoxyiminoacetamido] ~3~cephem-4-carbonsäure (anti-Isomeres), 2,5 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure und 38 ml Methanol wurden 2 Stunden lang bei. Raumtemperatur gerührt· Nach der Behandlung der dabei erhaltenen Lösung mit Aktivkohle wurde die'Lösung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in 100 ml Diisopropylather kristallisiert und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und mit $0 ml Diisopropyläther gewaschen, wobei man 2,1 g 7-^2~(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamidq]-3-cephem-4-carbonsäurehydrochlorid (anti-Isomeres) erhielt· Die Kristalle wurden zu 20 ml Wasser zugegeben und mit Natriumbi-? carbonat auf pH 6,0 eingestellt. Die Lösung wurde einer. Säulenchromafographie unterworfen unter Verwendung eines nichtionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP-20" (Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd_e) (75 eil) und mit 10%igem Diisopropyläther eluiert. Das Eluat wurde mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 3,5 eingestellt und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 0,7 g 7-£2-(2-Arainothiazol-4-yl)-2-metho2cyiminoacetojnido3-3--ciepb.em-4-carbonsäure (anti-Isomeres) erhielt*

I.R.

N.M.R.

Nu j öl max

δ (DMSO-d₆,	ppm)
	4.
	5,
	6,
.00
.82
.48

3400^3200 (breit), 1770, 168Q,

1640, 1S20 cm"¹

: 3.60 (2H, d, J=SHz), (3H, s), 5.10 (IH, d, J=5Hz), (IH, dd, J=SHz, 8Hz), (IH, t, J=4Hz), 7.13 (2H,

breit), 7.47 (IH, s), 9.42 (IH, d)

- 151 -

Beispiel 21

(1) Das Vilsmeier-F.eagens wurde hergestellt aus 0₅4 g N,N-

Dimethylformamid und 0,86 g Phosphorylchlorid auf übliche -Weise· Nachdem das Reagens in 10 ml Äthylacetat suspendiert worden war, wurden 1,3 g 2~(2~l?ormaaidothiazol-^z}~-yl)-2-n-propoxyiminoessigsaure (syn-Isomeres) zu der gerührten Suspension unter Eiskühluiig zugegeben und es rurde JO Minuten lang bei der gleichen üemperatur gerührt. Die Lösung wurde zu einer Lösung von 2,0 g 4-ITitrobenzyl-7-amino-35-chlor--3~ cepheav-^—carboxylathydrochlorid, 5*2 g Trimethylsilylacetamid

und 40 ml

Äthylacetat bei -25 0 zugegeben und 1,5 Stunden

lang bei -20 bis -10 C gerührt« Nach der Zugabe.von Wasser zu Öer dabei erhaltenen Lösung wurde die Lösung mit 60 ml'Äthylacetat extrahiert. Die wässrige Schicht .wurde mit 50 ml Ithylacetat extraliiert"_e Die Extrakte wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung und mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet« Die Lösung wurde in Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde 'mit Diäthyläther behandelt (verrieben)« Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, gewaschen und getrocknet, wobei man 2₅55 g 4~Nitrobenzyl~7-£2-(2~formamidothiazol-4-yl)~2~nproposyiminoacetamido] -J-chlor-i-cephem»-'!—carboxylat (syn~ .Tsomeres) erhielt.

I,R. ν J?"i^o1: 3250^3150, 1780, 1730, 1690, ^ 1660, 1610, 1550, 1520 cm"¹

. N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.87 (3H, t,.J=7Hz),

1.63 (IH, m)', 3,.88 (2H, q\ J=17Hz), 3.97 (2H, q, -J=7Hz), 5.30 (IH, d,

- 152

J=5Hz), 5.40 -(2H, s), 5.92 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 7.33 (IH, s), 7.65 (2H, d, J=9Hz), 8.20 (2H, d, J=9Hz), 8.47 (IH, s), 9.70 (IH, d, J=8Hz), 12.40 (IH, s)

(2) Eine Suspension von 2,4 g 4-lTitro'benzyl-7-f2-.(2~form-

amidothiazol--4~yl)--2~n-propoxyiüiinoacetamidoJ--3-cnlor--3~ cephem-4-carbo:xylat (syn-Isomeres), 1,0 g 10 % Palladium/Koh-Ie₁ 24 ml Methanol, 3»6 ml Wasser und 48 ml Tetrahydrofuran vrurde unter Normaldruck bei Bäumteniperatur katalytisch reduziert. Wach der Entfernung der unlöslichen Substanz durch Filtrieren vrurde das Filtrat im Vakuum eingeengt. Es wurden Wasser und Ithylacetat zu dem Rückstand zugegeben und mit einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 8 eingestellt. Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren entfernt und die wässrige Schicht wurde abgetrennt. Es wurde JLthylacetat zu der Lösung zugegeben, mit Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatlösung und der Extrakt wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wässrigen Hatriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet» Die Lösung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde mit Diäthyläther behandelt (verrieben) und durch Filtrieren gesammelt, wobei man 1,6 g 7~[}^(2-Formamidothiazol—4-yl)-2~npropoxyiminoacetamido] ~3~chlor-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

^I#R- ^V max⁰""" ^{: :} 3300^,3150, 1780, 1720, 1685,

1650, 1540 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 0.93 (3H, t, J=7Hz)_s

.1.72 (IH, m), 3.88 (2H, q, J=18Hz), 4.08 (2H,. q, J=7Hz), 5.33 (IH, d, J=SHz), 5.92 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 7.43 (IH, s), 8.57 (IH, s), 9.73 (IH, d, J=SHz)

(3) Eine Suspension von 1,5 S 7-£2-(2-Pormamidotliiazol-4-

yl)-"2-n~propoxyiminoacet amido] ~3~chlor-3"Cephem~4~· carbonsäure (syn~Isomeres), 0,7 ml konzentrierter Chlorv;as-Berstoffsäure und 30 dl Methanol wurde 1,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt„ Nach der Entfernung des Methanols aus der dabei erhaltenen Lösung im Vakuum v/urden 30 ml Wasser zu dem Rückstand zugegeben. Nachdem die Lösung mit einer gesättigten wässrigen ITatriumbicarbonatlösung auf pH 7»5 eingestellt worden war, wiirde die unlösliche Substanz durch ]?il·- trieren entfernt» T)as Piltrat wurde mit 1Obiger Chlorwasser-* stoffsäure auf pH 3 eingestellt« Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und über Phosphorpentoxid getrock-/"^v · net,, wobei man. 0,6· g 7-f2-(2-Aminothiazol~4-~yl)-2-n-pxOpoxyiminoacetamidoj ~3~chlor-3-cephem-4-carbonsäure (syn~l3omeres) erhielt«

^I#R· ^V max^{01 : 3300}' ¹⁷⁸⁰> 1670, 1630,- 1S30 cm"¹ N.M.R, Ö(DMSO-d₆, ppm) : 0,92 (3H₅ t,_; J=7Hz),

1.67 (IH, m),3..7O (2H; q, J= 18Hz) , 4.00 (2H, q, J=7Hz)₅ 5.25 (IH, d_s J-5HZ),. 5.83 (IH, dd,^ J= 5Hz , 8Hz) , 6.75 (IH, s), 9.63 (IH, d, J=SHz)

- 154

Beispiel 22

5 6 2-(2-AmiiiotMazol--4»yl)-2-n-bexyloxyiminoessigsäure (syn~ Isomeres), 0,If? g Wasser, 3₅8 g Phosphorylchlorid, 10,7 g iPrimethylsilylacetamid, 1,0 g N,N-Dimethylformaniid, 50 ml Tetrahydrofuran und 2,0 g 7-Amino-3-cephem-4-carbonsäure wurden auf ähnliche Weise wie in Eeispiel 18 behandelt, wobei man 1,1 g 7-£2-(2~Aminothiaaol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetamidcTj ~3~cephem-4-~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

I.R.· Vl*i⁰¹ 3250, 1760, 1640, 1600 ceT¹

N.M.R. i(DMSO-d₆, ppm) : 1.88 (3H, m), 1.1^1.9 (8H, m), 3.60, (2H, in), 4.06 (2H, t, J=6Hz), 5.10 (IH, d, J~5Hz), 5.82 (IH, dd, J= 5Hz, 8Hz), 6.46 (IH, m), 6.70 (IH, s), 7.26 (2H, m), 9.56 (IH, d, J=8Hz)

, -Beispiel 23

0,5>06 g 2«-(2-Eormamidothiazol-4-yl)-2~propargyloxyi»iinoessigsäure.(syn-Isomeres), 0,161 g ΙΤ,Ν-Dimethylformamid, O»337 S Phosphorylohlorid und 7?9 ml Ä'thylacetat wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15~(1) behandelt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. Andererseits wurden 1,85 g Tritaethylsilylacetamid und 1,50 g Bis(trimethylsilyl)acetamid zu einer Suspension von 0,703 g 4—Nitrobenzyl~7-amino-3-hydroxy^-cephem-^-carboxylat in 10 ml Äthylacetat zugegeben und Λ Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Lösung wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -10⁰C zugegeben und 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der Lösung wurden 20 ml V/asser und 20 ml

155

jithylacetat zugegeben. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit 8 ml einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung und. 15 ^ml einer wässrigen Fatriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. nachdem die Lösung im Vakuum eingeengt worden war, wurde der Rückstand mit Diäthyläther pulverisiert und die Niederschläge wurden durch Filtrieren, gesammelt, wobei man 0,71 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido- ^: thiazol-4—yl)-2~propargylo:xyiminoacet amidol-3hydroxy~3--r" eephem-4-carbo2ylat (syn-Isomeres)*erhielt.

"¹

I. R. ν Jj^j⁰¹ : 3270, 1770, 1740, 1670 cm"

N.M.R. δ (DMSO-d₆ , ppm) : 3.39 (IH₅ m) ,

3.63 (2H, broad s), 4.90 (2H, breit s), 5.23 - 5.90 (4H_S m), 7.57 (IH, s), 7.83 (2H, d, J=9Hz), 8,40 (211, d, J=9Hz), 8.67 (IH, s) , 9.80 (IH, d, Jf= 8Hz) , 12.83 (IH, brßi^ s) <

S 2"-(2-Formamidothiasol—^£)—yl)-2~propoxyiminoessigsäui"e (syn~Isomeres), 0,161 g N,N~Dimethylformamid, 0,337 S Phosphorylchlorid und 7_?9 ml Äthylacetat wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-O) behandelt, zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. Andererseits wurden 1,85 6 Trimethyl-Bilylacetamid und 1,60 g· Bis(trimethylsilyl)acetamid zu einer Suspension,von 0,703 g ^/+~Nitrobenzyl-7-amino-3-hydroxy-3~· cephem—^-carboxylat in 10 ml Äthylacetat zugegeben und

- 156 -

-156. 21

1 Stunde lang "bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Lösung wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -10⁰C zugegeben und 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 20 ml Wasser und 20 ml Äthylacetat zugegeben. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit 8 ml einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung und 14 ml Wasser gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet, liachdem die Lösung im Vakuum eingeengt worden war, wurde der Rückstand mit Diäthyläther pulverisiert und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,75 S 4-Mtrobenzyl-7-£2-(2-formamidothiasol-4-yl)-2-propoxyiminoacetamidoTJ-3-hydro3qy-3-cephem-4—carbosqylat (syn-Ißomeres)j erhielt.

I. R.	Nujol i ^v max	: 3250, 1765,	ppm):0.	90	1740, 16	70 cm"¹
N .MvH.	6 (DMSO-	^d6>.	, 3:40	(2H	(3H, t,	J= 8Hz),
	1.67 (2H	, m)	J=8Hz)	j	, AB-q,	J=20Hz),
	4.08 (2H	» q,	(4H, m)	, 7
	5,03 - 5	.83	J= 9Hz)	, 8	.40 (IH,	s),
	7.70 (2H		.27 (2H,	d,

J=9Hz), 8.53 (IH, s), 9,50 (IH, d, J=8Hz), 12.60 (IH, breit s)

Beispiel 25

S 2-(2-Pormamidothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoessigsäure,(syn-Isomeres), 0,16 g Ν,Ν-Dimethylformamid, 0,34 g Phosphorylchlorid und 10 ml Äthylacetat wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-0) behandelt · zur Herstellung der

- 157 -

aktivierten Säurelösung· Andererseits wurden 1,85 g Trimethylsilylacetamid, und 1,62 g Bis(trimethylsilyl)acetamid zu einer Suspension von O₁? g 4~liitrobenzyl-7-aniiiio-3-byaroxy-3-cephem-A-carbo:xylat in 10 ml Ithyläcetat zugegeben und 30 Minuten lang bei 40⁰C gerührte Me oben erhaltene aktivierte Säurelösung wurde zu der Lösung auf einmal bei -20⁰C zugegeben und 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 10 ml Wasser zugegeben und die organische Schicht wurde abgetrennt, mit Wasser, mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung und mit einer wässrigen gesättigten Natriumchloridlösung gewaschen und dann getrocknete Nachdem die Lösung im Vakuum eingeengt worden war, wurde der Rückstand mit LiisoTjropyläther pulverisiert« Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Diisopropyläther gewaschen und getrocknet, \</obei man 1,09 g 4-Bfitrobenzyl-7~["2-(2"formamidothiazol-4-yl)-2~isobuto^iminoacetamidoj-3-bydro2£y-3"Cephem-4~carboxylat (syn~Isomeres) erhielt.

!· ^R· ^v ϋϊΐ^{01 : 325}°» 3050,*1750, 1650, .

1610 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.97 (6H, d,-J=6Hz), 2.0 (IH, m), 3.60 (2H, AB-q, J=18Hz), 3.95 (2H, d, J=6Hz), 5.1 - S.8 (4H, m), 7.53 (IH, s), 7.63 (2H, d, J=8Hz) , 3.18 (2H, d, J=8Hz), 8.58 (IH, s), 9.47 (IH, d, J=9Hz), 12.77 (IH, breit s)

- 158

Beispiel 26

s Ν,Ν-Dimethylformamid, 0,240 g Phosphorylchlorid und 0,5 ^ml Äthylacetat vraräen auf übliche Weise miteinander umgesetzt zur Herstellung eines Vilsmeier-Reagens. 5 ml Äthylacetat und 0,35 g 2-(2-Formamidothiazol-4^yl)-2-ätho:xyiminoessigsäure (syn-Isomeres) wurden "bei der gleichen Temperatur innerhalb von JO Minuten zugegeben zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. Andererseits wurden 1,31 S Trimethylsiljlacetamid und 1,14- g Bis(trimethylsilyl)acetamid zu einer Suspension von 0,50 g 4-Nitrobenzyl-7-amino-3~hydroxy-3-cep&em—4-carboxylat in 7>5 ml Äthylacetat zugegeben und 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Lösung wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -10 C zugegeben und 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden.15 ml Wasser und .15 ml Äthylacetat zugegeben. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit 15 ml einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung und 10 ml V/asser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit Diäthylather pulverisiert und die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,634· g 4-lTitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-äthoxyiminoacetamidoJ-3-hydroxy-3-cephem—4—carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

^{1 : 3220}> ¹⁷⁶⁰> 1740, 1670cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-Cl₆, ppm) : 1.24 (3H, t, J=8Hz), 3.36 (2H, AB-q, J=20Hz) , 4.15 (2H, q, J=8Hz), 5.10.- 5.60 (4H,

~ 159 -

-.159-

m), 7.37 (IH, s), 7.65 (2H, d, J=9Hz) ,

8.22 (2H, d, J=9Hz), 8.48 (IH, s) ,

9.52 (IH, d, J=8Hz), 12.'58 (IH, breiS s)

Beispiel 2?

(1) 4,14 g 2-(2-IOrmamidothiazol-4-yl)~2-pentyloxyiniinoessigsäure (syn-Isomeres), 4,5' S 4-Nitrobenzyl~7-amino-

3-cephem~4_rcarboxylat, 1,41 g IT,!^Dimethylformamid, 2,96 g Ph.osph.orylohlorid, 72 ml Tetrahydrofuran, I5 ml Aceton und I ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15~O) "behandelt, ₍wobei man 8,1 g 4-Nitrobenzyl-7-[^%2-(2-formamido~ thiazol-4~yl)~2-pentyloxyiminoacetamidoj -J-cephem-^-carbosqjriat (syn-Isomeres) erhielt.

I. R. ν ^Nu3^o1 : 3240, 3050, 1780, 1730, max

1655 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.6 - 2.0 (9H, m), 3.66 (2H, s), 4.10 (2H,'t, J=6Hz), 5.19 (IH, d, J=5Hz),-5.42 (2H, s), 5.95 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.16 (IH, brei* s)., 7.38 (IH, 's), 7.72 (2H, d, J=9Hz) , 8.26 (2H, d, J=SHz), 8.54 (IH, s), 9.69 (IH, d, J=SHz), 12.69 (IH, breit s)

(2) 8 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidotliiaz-ol-4-yl)-.2-pentyloxyiminoacetamidoj -3-cephem-4-carboxylat (syn-Iso meres), 3,6 g 10 % Palladium/Kohle, 36 ml Methanol, 90 ml

160

Tetrahydrofuran, 0,65 S Essigsäure und 6,3 tal V/asser wurden auf ähnliche V/eise wie in Beispiel 15-(2) behandelt, wobei man 3,4- g 7-[*2-(2-Pormamidothiazol-^zi—yl)-2-pentyloxyiminoacetamidq] ^-cephem-^—carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

^{: 3275}' ³⁰⁷⁵> ¹⁷⁹⁵» ¹⁷⁰⁰>

1660, 1630 cm"¹ N.M.R. . δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.6 - 2.0 (9H, m),

3.60 (2H, d, J=4Hz), 4.12 (2H, t,

J=6Hz), 5.14 (IH, d, J=SHz),

5.87 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.49 (IH,

t, J=3Hz), 7.40 (IH, s), 8.53 (IH, s),

9.64 (IH, d, J=9Hz), 12.68 (IH, s)

(3) 3*3 g 7~L2-(2-]?ormamidotMazol-4-yl)-2-pentyloxyimino-

acetamidoj~3-cephem-^/}—carbonsäure (syn-Isomeres), 2,80 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure, 20 ml Tetrahydrofuran '"und 50 ml Methanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(3) behandelt, wobei man 2,3 g 7-[2-(2-Aminothiazol-^!-~yl)-S-pentyloxyiminoacetamido^]-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt»

"¹

!•^R· ^v ϋοί-^{01 :} 3300, 1775, 1650, 1540cm

ill 3 X

N.M.R. 6 (DMSO-d₆, ppm) : 0.6-2.0 (9H, m) , 3.56 (2Η·, d, J=2Hz), 4.03 (2H, t, J=6Hz), 5.08 (IH, d, J=5Hz),_r5.81 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.46 (IH, t, J=4Hz), 6.69 (IH, s), 7.20 (2H, s), 9.15 (IH, d, J=8Hz)

-!•161.-

Beis£iel_28

(1) 3,4-1 g Triäthylamin, 10,3 6 If, N-Mme thy !phenyl amin. und

5,64 g Trimethylchlorsilan vnirden zu einer gerührten Lösung von 15 g 7-Phenylacet3jnido-3-tosylo:xy-3-cephem~4-carbon~ ßäure in I50 ml Methylenchlorid "bei Raumtemperatur zugegeben und die Lösung wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt«. Zu der Lösung wurden bei -35°C'-7>03 S Piiosphorpentachlorid zugegeben und es wurde 1,5 Stunden lang bei -25 bis -20⁰C gerührt · Zu der Lösung wurden 61 ml Methanol zugegeben und es wurde 40 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt«, Zu

der dabei erhaltenen Lösung wurden 50 ml Wasser bei

-20 bis -1¹O⁰C zugegeben« Die organische Schicht wurde ab'getrennt'und,'Zweimal mit V/asser gewaschen. Die wässrige Schicht und die Waschwässer-'wurden miteinander vereinigt und zweimal. mit Methylenchlorid und danach mit Diäthyläther gewaschen. Nachdem die Lösung mit einer 1Oxigen wässrigen Natriumnydroxidlösung unter Kühlen auf pH 4,7 eingestellt worden . .-war, vnirden die Niederschläge durch Filtrieren gesammelt, mit ' Wasser, Aceton und dann mit Diäthyläther gewaschen und anschließend über PhosphorpentoxLd getrocknet, wobei man 5?01 g < 7-Amino-3-tosylo2q7-3™cephem-4~carbonsäure, P«, i72°C (Zers«), erhielte

I.R. ν JJ"j^o1 : 3210, 1800, 1653, 1620cm"¹

N.M.R. δ (D₂O+NaHCO₃, ppm): 2.45 (3H, _s) _t 3.51 (2H, q, J=18Hz), 5.08 (IH, d, J=SHz), 5.51 (IH, d, J=SHz), 7.48 (2H, d, J=9Hz), 7.84 (2H., d, J=9Hz)

(2) 0,76 S 2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-metho:xyim:Lnoessigsäure

(syn-Isomeres), 0,53 g Ν,ΐί-Diinethylformaiiiiä, 1,46 g Phosphorylchlorid, 0,5 g Trimethylsilylacetamid und 10 ml Äthylacetat wurden auf übliche Weise behandelt zur Herstellung der aktivierten Säurelösung. Andererseits wurden 2,7 g Triiaethylsilylacetamid zu einer Suspension von 1,0 g 7-Amino-3-tosylo2q7~3"Cephem-4-carbonsäure in 15 ml Äthylacetat zugegeben und bei Raumtemperatur gerührt« Zu der Lösung wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -15°C zugegeben und 1 Stunde lang bei -5·bis 5°C gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Lösung auf -20⁰C abgeschreckt worden war, wurden zu der abgeschreckten Lösung 30 ml Wasser zugegeben ' und sie wurde mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 6₅5 eingestellt«, Die unlösliche Substanz wurde durch Filtrieren entfernt. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt und mit Chlorwasserstoffsäure auf pH 3*0 eingestellt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 1,0 g 7-|_2-(2-Äminothiazol-ⁱ{—yl)-2-methoxyiminoaeetamidq]-3-tosyloxy-3-cehpem—4—carbonsäure (syn-Isomeres) er- . hielt·

I.R. ^v max^{01 : 3350}> 1780,. 1670, 1630cm'¹

N.M.R. 6 (DMSO-d₆, ppm) : 2.17 (3H, s),

3.71 (2H, m), 3.92 (3H, s), 5.32 (IH, d, J=5Hz), 5.87 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.82 (IH, s), 7.50 (2H, d, J=8Hz), 7.92 (2H, d, J=SHz), 9.73 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 29

(1) 1»35 S 2-(2-Pormamidothiazol»A-yl)-2-äthoxycarbonyl~

methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres), 1,5^ g.4~Nitrobenzyl-7~^am^°~3-cephem-4-carbo:xylat, 393 mg ίΓ,Ν-Dimethylformamid, 825 ^mE Phosphorylchlorid, 21,2 ml Tetrahydrofuran, 3,9 ml Aceton und 3*9 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(1) behandelt, wobei man 2,52 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol~4-yl)-2-äthoxycarbonylinethoxyimino·- acetamidoj-~3~cephem-4~carbo:xylat (syn-Isomeres) erhielt«

I.' R.

N.M.R,

^x : 3250, 1790, 1730, 1690, 1640 cm"¹

6(DMSO-d₆, ppm): 1.23 (3H, t, J= 7Hz) , 3.66 (2H, S), 4.13 (2H, q, J= 7Hz), 4.74 (2H, s), 5.22 (IH, d, J=5Hz), 5.42 (2H, s), 5.98 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.49 (IH, breit s), 7.43 (IH, s)·, 7.71 (2H, d, J=9Hz), 8.23 (2H, d, J=9Hz), 8.52 (IH, s), 9.68 (IH, d, J= 9Hz), 12.66 (IH, s)

(2) 2,52 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-fonaan)iäotMazol-4^yl)-2-

äthoxycarbcnylmethoxyiminoacetamidoj -3-ceph.em-4~carb-> ozylat (syn-Isomeres), 1,3 g 10 % Palladium/Kohle, 13 ml Ithanol, 25 ml Tetrahydrofuran, 0,22 ml Essigsäure und 2,2 ml Wasser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(2) behandelt, wobei man 0,4- g 7-[2-(2-Forniamidothiazol-4-»yl)«2~ äthoxycarbonyliaethoxyimin.oacetami(üo]~3-cephem»4-carbonEäux'e

21 4

(syn-Isomeres) erhielt«

I. R. ν ^Nu-^io1 : -3250, 3060, 1780, 1750,

ΙΏΗΧ ·

. 1690, 1660 cm*¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 1.23 (3H, t, J= 7Hz) , 3.61 (2Η, breit s), 4.15 (2H, q, J=7Hz), 4.73 (2H, s), 5.13 (IH, d, J=5Hz), 5.87 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.48 (IH, broit s),-7.43 (IH, s), 8.50 (IH, s), 9.62 (IH, d, J=9Hz), 12.58 (IH, s)

(3.) Eine Lösimg von 0,35 g 7-[^%2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-

äthoxycarbonylmeth-oxyiminoacetamidoj ^-cephem-^—carbonsäure (syn-Isomeres), 0,39 g konzentrierter Chlorwasserstoffsäure, 5»3 ^l Äthanol und δ ml Tetrahydrofuran wurden 4,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem die dabei erhaltene Lösung im Vakuum eingeengt worden war, wurde der Rückstand in einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung gelöst, mit Aktivkohle behandelt; und filtriert. Das Piltrat wurde mit IC^iger Chlorwasserstoffsäure unter Eiskühlung auf pH 3»5 eingestellt* Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 0,1 g 7-^2~(2-Aminothiazol-4-yl)-2-äthoxycarbonylmethoxyiminoacet- -3-cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

„ Nujol

I. R. N.M.R

max

3250, 3050, 1775, 1720,

-1

1660, 1630, 1550 cm 6 (DMSO-d₆, ppm) : 1.21 (3H, t, J=7Hz), 3.S9 (2H, s) ₉ 4.14 (2H, q, J=7Hz),

4.66 (2H, s), 5.10 (IH, d, J=5Hz) ,

5.83 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.47 (IH,

breit s), 6.78 (IH, s), 7.23 (2H, s),

9.52 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 30

(1) Auf übliche Weise wurde aas Yilsmeier-Reagens hergestellt aus O„J2 g Η,ΐί-Diniethylformamiä und 0,67 g Phos™ phorylchloride liachdeia das Reagens in 10 ml Athylacetat suspendiert worden war, wurden 1,2 g 2-(2~Formamidothiaz.ol~4— yl)-2-(2_$2_i2-trifluoräthoxyimino)essigsäure (syn-Isonieres) zu öer gerührten Suspension unter Eiskühlung zugegeben und es wurde pO Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührte Die Lösung v/urde zu einer Lösung von O₅8 g 7-A^iE-O-3~cephera-4-carbonsäure und 4-, 2 g Trimetnylsilylacetamid in 20 ml .Äthylacetat bei -2^lJ>°C zugegeben und 1 Stunde lang bei -20 bis -10°C gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden Wasser und Äthylacetat zugegeben und die Äthylacetatschicht wurde . abgetrennt. Die wässrige Schicht wurde mit Äthylacetat erneut extrahiert» Zu dem vereinigten Extrakt wurde Wasser zu-. gegeben und mit >einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung wurde der pH-Wert auf 7»5> eingestellt und dann wurde öie wässrige Schicht abgetrennte Zu der wässrigen Schicht wurde Äthyiacetat zugegeben, mit Chlorwasserstoffsäure wurde der pH-Wert auf 1,5 eingestelD.t und'die Äthylaeetatschicht wurde abgetrennt» Die wässrige Schicht wurde erneut mit Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden miteinander vereinigt, mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet» Nach dem

Einengen der Lösung im Vakuum wurde der Rückstand mit Diätbyläther behandelt' (verrieben) und die Niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 1,55 g 7- Γ2-(2-Formamidothiasol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluoräthoxyimino)-acet8jnidoJ-3-cephem-4--carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt..

IUelX

^32S0» ¹⁷⁹⁰» ¹⁶⁹⁰» ¹⁶⁶⁰»

1630, 1605, 1580, 1550 cm

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 3.67 (2H, breit s), 4.78 (2H, q, J=8.5Hz), 5.17 (IH, d, J=5Hz), 5.92 (IH, dd, J=SHz, 8Hz), j 6.53 (IH, t, J=4Hz), 7.52 (IH, s), 8.57 (IH, s), 9.83 (IH, d, J=8Hz), 12.67 (IH, breit s)

(2) Eine Suspension von 1,5 g 7-[^>2-(2-Formamidothia2ol-4-

yl)-2-(2,2,2-trif luoräthoxyimino)acetamidoJ-3-cephem~^z{— carbonsäure (syn-Isotaeres), 1,3 ml konzentrierter Chlorwasserstoff säure, 10 ml tetrahydrofuran-und 30 ml Methanol wurde auf ähnliche V/eise wie in. Beispiel 21-(3) behandelt, wobei man 1,1 g 7-[2-(2-AmiD.othiazol-^yl)-2-(2,2,2-trifluoräthoxyimino)acetamidol -J-cephem-^-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt. ·

: 3450, 3300, 1780, 1660,

-1

1625, 1590, 1550 cm'

N.M.R. <S (DMSO-d₆, ppm) : 3.60 (2H, breit s) 4.70 (2H, q, J=8..5Hz); 5.13 (IH, d, J=5Hz), 5.87 (IH, dd, J=SHz, 8Hz),

-167-

6.52 (IH, t, J=4Hz), 6.87 (IH, s), 9.80 (IH, d, J= 8Hz)

(1) Eine Lösung von.3,^7 S 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)~2~

(2-chloräthoxyimino)essigsäure (syn-Isomeres), 1,1 g ( !!,^-Dimethylformamid und 2,3 g Phosphorylchlorid in 35 ml Äthylacetat uad eine Lösiing von 2,5 S 7-Amino-3-cephem-4-cärbonsätire "und 12,7 g Bis(trimethylsilyl)acetamid. in 25 ml Äthylacetat wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(1) "behandelt, wobei man 1,85 S 7-£2-(2-Formamidothiazol-^zi—yl)-2~ (2~chloräthoxyimino)acetamido]-3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt»

I.R. ν ^Nu^⁰¹ : 3250, 3050, 1780, 1695,

1685, 1655, 1625 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 3.62 (2H, d, J=4Hz),

3.86 (2Hj t, J=6Hz), 4.37 (2H, t, V" ' J=6Hz), 5.16 (IH, d, J=SHz-), 5.90

(IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6,52 (XH, t, . J=4Hz), 7.50 (IH, s), 8.53 (IH, s),

9.68 (IH, d, J=9Hz), 12.72 (IH, breit s)

(2) 1,8 g 7-C²~^²-

imino)acetamidoj-3-CePhGPi-A-CaTbOnSaUTe (syn~Isomeres), 1,6 g kori7.entri.erte Chlorwasserstoff säure, 27 ml Methanol und 40 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in

Beispiel 15-(j5) behandelt, wobei man 1,4- g 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2~(2-chloräthoxyimino)acet amidoj -3-cephem-4~ carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

I.R. v^NUJ01 : 3440, 3300, 3070, 1780,

max

1660, 1625, 1555 cm

-1

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 3.60 (2H, s) , 3.80 (2H, t, J=6Hz), 4.30 (2H, t, J=6Hz) , 5.10 (IH, d, J=5Hz), 5.83 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.47 (IH, s) , 6.78 (IH, s), 7.24 (2H, s), 9.58 (IH, d, J=9Hz)

Beispiel 32

(1) Eine Lösung von 3,2 g 2-(2-3?ormamidothiazol-4~yl)~2~

(tert.-buto^carbonylmethosyimino) essigsäure (syn-Isomeres), 0,852 g Π,Ν-Dimethylformamid vmä 1,79 g Phosphorylchlorid in J4 ml Ithylacetat und eine Lösung von 1,95 S 7~ Amino«3-cephem-4--carbonsäure und 9,9 g Bis(trimethylsilyl)-acetamid in 19»5 ^l Äthylacetat ^^nirden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 15-(1) behandelt, wobei man 2,9 g 7-[2-(2~Formamidothiazol~4-yl )-2-(tert ο-butoxycarbonylmetho^imino) acetamid oj-3-c ephem-4—carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

Nu j öl

I.R.

max

3260, 3180, 3060, 1785, 1730, 1690, 1640 cm"¹

N.M,R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 1.44 (9H, s), 3.63 (2H, s), 4.62 (2H, s), 5.12 (IH, d, J=5Hz), 5.87 (IH₅ dd,

-169 - *"

J=SHz, 9Hz), 6.48 (IH, breit s), 7.42 (IH, s), 8.50 (IH, s), 9.57 (IH, d, J=9Hz), 12.62 (IH, breifc s)

(2) Eine Mischung aus 2,8 g 7-["2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-(terto-buto3q7carbonylmethoxyimino)acetamidoJ-3-cephem-A-carbonsäure (syn-Isomeres), 2,8 ml Anisol und 11,2 ml Tri~ fluoressigsäure wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur ge- ^- rührt* Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden Äthylacetat und Wasser zugegeben und mit Katriumbicarbonat wurde der pH-Wert' auf 7,0 eingestellt«, Die wässrige Schicht wurde abgetrennt und die Äthyl ac et at schicht wurde mit V/asser extrahiert. Die wässrigen Extrakte wurden miteinander vereinigt, mit Äthylacetat und danach mit Diäthyläther gewaschen und dann mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure unter Eislriihlung auf pH 2,0 eingestellt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit V/asser gewaschen und getrocknet, wobei man 1,4-3 g 7-£2~(2-]?ormamidothiazol-4—yl)-2-carbo:xymetho:xyiminoacet~ - amidol-3»cex)hem-4-carbonsäure (s:ra-Isomeres) erhielt.

^I#R* ^V max° ^{; 3270}' ³¹²⁰» 3070, 1760, ^f' ' " . 1720, 1690, 1660, 1620 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 3.60 (2H, s),

4.63 (2H, s), 5.11 (IH, d, J=5Hz), 5.88 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 6.48 (IH,

: t, J=4Hz), 7.44 (IH, s), 8.52 (IH, s),

9.59 (IH, d, J=9Hz), 12.64 (IH, brei*

($) Eine Mischung aus 1_t35 g 7-L2-(2-Formam.idothiaaol-4~yl)-

2-carboxymethoxyiminoacetamidoj.-3-cephem--4-carbonsäujce

(syn-Isomeres), 3>926 g konzentrierter Chlorwasserstoffsäure, 20 ml Methanol, 10 ml Vasser und 40 ml Tetrahydrofuran wurde 6 Stunden lang "bei 30°C gerührt« Die dabei erhaltene Lösung wurde im Yakuum eingeengt, um das Methanol zu verdampfen, und die-erhaltene wässrige Lösung wurde mit einer /!Obigen wässrigen Katriumhydroxidlösung auf pH 4,2 eingestellt. Die Lösung wurde mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 3?0 einge-. stellt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 0,8 g 7-[.2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamidoj --3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt,

I.R. ν ^NuJ^o1 : 3300 (breit), 3200 (breit), mäx

177S, 1670, 1635 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 3.64 (2H, s),

4.64 (2H, s), 5.13 (IH, d, J=SHz), 5.86 (IH, dd, J=5Hz, 7Hz), 6.49 (IH, t, J=4Hz), 6.82 (IH, s), 7.33 (2H, s)", 9.57 (IH, d,.J=9Hz)

Beispiel J>3

(1) Eine Lösung von 0,9 g 2-(2-Pormamidothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorätho:<yimino)essigsäure (syn-Isomeres), 0,24 g lYjN-Dimethylformamid und 0,5 g Phosphorylchlorid in 10 ml Äthylacetat und eine Lösung von 1,23 g 4-Nitrobenzyl-7-andno-3-chlor-3~cephem-4-carboxylathydrochlorid und 2,8 g. Trimethylsilylacetamid in 20 ml Ithylacetat wui'den auf ähnliche

39

Weise wie in Beispiel 21 -O) behandelt, wobei man 1,9 g Hitrobenzyl-7-Jj2-(2-formamidotliiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluoräthoxyimino)acetamidq]-3-c]ilor-3-cephem-4-car'boxylat (syn~ Isomeres) erhielt.

I.R. ^v max^{01 : 32S0}» ¹⁷⁹⁰> ¹⁷⁴⁰> ¹⁷⁰⁰'

1660, 1610, 1530 cm'¹ ' .

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 3.92 (2H, q, J=17Hz) , 4.77 (2H, q, J=8.5Hz), 5.35 (IH, d, J=5Hz), 5.48 (2H, s), 5.95 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 7.50 (IH, s), 7.70 (2H, d, J=9Hz), 8.27 (2H, d, J=9Hz), 8.53 (IH, s), 9.92 (IH, d, 'J-SHz), 12.67 - (IH, breit s).

(2) Eine Suspension von 1,8 g 4~Nitrobenzyl-7-[2~(2-forEi- · amidothiazcl-4-yl)~2-(2,2,2-trifluoräthoxyimino)acetamidoj—3~chlor-3~cepheta-4-carboxylat (syn-Isomeres) und 0,9 S 10 % Palladi-uta/Kohle in 20 ml Methanol -und 20 ml Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche Veise wie in Beispiel 21-(2) behandelt'^ wobei man 1,0 g 7-£2-(2-Pormamidothiazol-4-yl)-2-.(2_i2,2-trifluoräthoxyimino)acetamidol -J-chlor-J-cephem-^-carbonsäure-(syn-Isomeres) erhielt«.

¹^* ^v max^{01 : 3250}> ¹⁷⁸°» ¹⁶⁹⁰>

• 1530 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 3.86 (2H, q, J=17Hz), 4.80 (2H, q, J=8.5Hz), 5.33 (IH, d, J=SHz), 5.92 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz),

7.53 (IH, s), 8.53 (IH, s), 9.93 (IH, d, J=8Hz), 12.70 (IH, breit s)

(3) 0,7 g 7-["2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluor-

äthoxyiinino)acetamido^ -J-chlor-J-cephem-^-carbonsaure (syn-Isoineres), 0,4-3 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure · und 16 ml Methanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 21-(3) behandelt, wobei man 0,65 S 7-j~2~(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluoräthoxyimino)acetamidoJ-3-chlor-3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt»

I.R.

N.M.R.

Nujol max

3320, 3150, 1775, 1720, 1660, 1645, 1600, 1545 cm

6(DMSO-d₆, ppm) : 3.87 (2H, q, J=ISHz), 4.80 (2H, q, J=8.5Hz), 5.30 (IH, d, J=5Hz), 5.83 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 7.05 (IH₁ s), 10.00 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 34

(1) Eine Lösung von 1,5 g 2~(2-Eormamidothiazol-4-yl)-2-butoxyirninoessigsäure (syh-Isomeres), 440 mg N,IT-Dimethylformamid und 920 mg PhosphorylChlorid in 12.ml Äthylacetat und eine Lösung von 2,03 6 4~Nitrobenzyl~7-o-mino~3-chlor-3-cepheni-4—carboxylat, 7 g Trimethylsilylacetamid und 2 ml Bis(trimethylsilyl)acetamid in 25 ml Äthylacetat wurden auf ähnliche V/eise wie in Beispiel 21-(1) behandelt, wobei man 2,8 g 4-Nitrobenzyl~7-[2-(2-formamidothiazol~4-yl)-2-buto3qfiDiinoacetainidoJ~3-chlor-3-cephem-4-carboxylat

(syn-Isomeres) in Form eines gelben Pulvers erhielt.

I.R. ν ""i"·¹· : 3200-3250, 1780, 1730, 1690, .

1655, 1605, 1530, 1350 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, m), . 1.2-1.6 (4H, m), 3.88 (2H, AB-q, J=19Hz), 4.0-4.2 (2H, m), 5.32 (IH, d, JMHz), 5.44 (2H, s) , 5.92 (IH, d,d, JMHz, 8Hz), 7.36 (IH, s) , 7.68 (2H, d, J=8Hz), 8.22 (2H, d, J=8Hz) , 8.50 (IH, s), 9.72 (IH, d, J=8Hz) , 12.56 (IH, s)

(2) Eine Mischung aus 2,7 g 4-lTitrobenzyl~7-['2-(2-form-

amidothiazol-»4-yl)~2-butoxyiminoacetamidoj -3-chlor~3-cephem-4—carboxylat (syn-Isomeres)₅ 1,3 g 10 % Palladium/Kohle, 4 ml Wasser, 0,4- ml Essigsäure, 27 ml Methanol und 54 dl ^Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel 21-(2) behandelt, wobei man 1,4 g 7-£2-(2-Formamidothiazol~4-yi)-2~butoxyiminoacetamiäqj ~3-^chlor-3-cepheni--4-carbonsäure (syn-Isomeres) in Form eines blaßgelben Pulvers erhielt·

l.R. ν ^Nujo1 : 3250, 2400-2600, 1780, 1700,

«13-X

1690, 1650, .1610 cm*¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, m), ,1.2-1.70 (4H, m), 3.88 (2H, ABq, J=19Hz), 4.0-4.25 (2H, m) , 5.32 · (IH, d, J=SHz), 5.90 (lH,d,d,

J=5Hz, 9Hz), 7.42 (IH, s), 8.50 (IH, s), 9.73 (IH, d, J=8Hz) , 12.60 (IH, s)

(5) Eine Mischung aus 1,5 g 7-^2-(2-Pormamidotliiazol-4-yl)~ 2-butoxyiminoacetamidq]~3-chlcr-3-cepl2em-4-carbonsäure· (syn-Isomeres), 1,3 &1 konzentrierter Chlorwasserstoffsäure, und 20 ml Methanol wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel 21-(3) "behandelt, wobei man 1,2 g 7-£2-(2-Am:mothiazol-4~yl)-2-butoxyiminoacetamidq] -3"Chlor-3-cephem—ⁱi—carbonsäure (syn-

Isomeres)

in Form eines blaßgelben Pulvers erhielt,

^v üai^{01 : 33}OO, 2500-2600, 1785,

JIl d X

"¹

1730, 1655, 1630 cm

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, m),

1.2-1.75 (4H, m), 3.88 (2H, AB-q, J=19Hz), 5.17 (2H, m), 5.33 (IH, d, J=SHz), 5.83 (IH, d,d, J=SHz, 8Hz), 6.93 (IH, s), 9.50 (2H, breit's), 9.85 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel ^

(1) Eine Lösung von 1,09 g 2-(2-Formamidothiazol-4~yl)-2-

bu'tO3iyiminoessigsäure (syn-Isomeres), 322 mg K,N-Disiethylformamid und 675 mg Phosphorylchlorid in 9,2 ml Äthylacetat und eine Lösung von 1,5 g-4-Nitrobenzyl-7-amino'-3-methoxy-3-cephem-4-carboxylathydrochlorid, 5 g Trimethyl-

silylacetamid und 2 ml Bis(trimethylsilyl)acetamid in 30 ml Äthylacetat wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel 3--(O behandelt, wobei man 1,8 g 4«lTitrobenzyl-7-[2-(2~j-ormamiäothiazol-4~yl)-2-butO:xyiininoacetamido] ~3-metho:xy~3--cephem~4— carboxylat (syn-Isomeres) erhielte

I.R. ν Ü"i⁰¹ : 3300, 3220, 1770, 1715,

1690, 1650, 1610, 1540, 1350 cm"

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, m),

1.2-1.7 (4H, m), 3.72 (2H, breit s), -3.96 C3H, s), 4.10 (2H, m), 5.22 (IH,- ! d, J=4Hz), 5.32 (2H, s), 5.75 (IH, . d,d, J=4Hz, -8Hz), 7.43 (IH, s) ,

7.64 (2H, d, J=9Hz), 8.20 (2H, d, J=9Hz), 8v48 (IH, s), 9.56 (IH, d, J=8Hz), 12.59 (IH, s)

(2) Eine Mischung aus 1,7 6 4-lTitrobenzyl-7-f2-(2-form-

cephem—f-carboxylat (syn~Isomeres)_t 1 g 10 % Palladium/Kohle, 3 ml Wasser, 0,3 ml Essigsaure', 20 al Methanol und 35 ^l Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel· i5-(2) behandelt, wobei man 1 g 7-[2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-buto^iminoacetamido] -3-methoxy-3~cephem-4~carbonsäure (syn~Isomeres) in Form eines gelben Pulvers erhielt.

₁₇6 214 2

^T' ^R· ^V max^{01 :} 3200-32S0, 2B00, 1775,

1700, 1690, 1650 cm"¹

N.M.R. 6(DMSO-d₆, ppm) : 1.0 (3H, m),

1.2-1.75 (4H, m), 3.67 (2H, broifcs), 3.86 (3H, s), 4.0-4.3 (2H, m.), 5.23 ClH, d, J=4Hz), 5.68 (IH, d,d, J=4Hz, 8Hz), 7.50 (IH, s), 8.58 (IH, s), 9.63 (IH, d, J=8Hz)

(5) Eine Mischung aus 0,9 S 7-[2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-

2-buto^iminoacetamido3 ~3-iaet ho xy-3-cephem-4—carbonsäure (syn-Isomeres), 0,8 ml konzentrierter Chlorwasserstoffsäure "und 13 j5 κ! Methanol wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel i5-(3) behandelt, wobei man 0,4 g 7-[2-(2-Aminothiazol-4--yl)-2-butoxyiminoacet amido]] ~3-methoxy~3-cephem~4~carbonsäure (syn-lsomeres) in Form eines gelblich«v/eißen Pulvers erhielt»

I.R. ν JJ^j⁰¹ : 3200-3300, 2600, 1770,

1705, 1670, 1620 cm'¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.90 (3H, m), 1.2-1.65 (4H, m), 3.60 (2H, s), 3.96 (3H, s), 4.0-4.16 (2H, m), 5.12 (IH, d, J=4Hz), 5.55 (IH, d,d, J=4Hz, 8Hz), 6.80 (IH, s), 7.2-7.6 (2H, breit s), 9.50 (IH, d, J=8Hz) ! ' '

-177-

Beispiel 36

(1) 5 g A--Mtrobenzyl'^-amino-J-oephein-^-carboxylat wurden

in einer Lösung von 1318 g Trimethylsilylacetamid und 10 inl Bis(trimethylsilyl)acetamid in 50 ml trockenem ith.ylac.etat gelöst Und 1,5 Stunden lang bei 45°C gerührt. Eine Lösimg von 2,88 g Brom in 7 ml Methylenchlorid wurde zu einer Lösung von

1,5 g Diketen in 7 ^l Methylenchlorid über einen Zeitraum von r-v ' 20 Minuten bei -4O⁰G zugetropft und 1 Stunde lang bei ~30°C gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde zu der obigen Lösung des 4—Nitrobenzyl-7-aniino-3-cephem—4-carboxylats unter

Kühlen bei

C zugetropft und dann 30 Minuten lang bei der

gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Losung wurden 50 ^ml Wasser zugegeben und es vairde mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 6,15 g öliges 4-Nitrobenzyl~7-£2-(2~bromacetyl)acetamidoJ ~3.-cephem-4~carbo:xylat erhielt«

I.R. ν JJ"j⁰¹ : 1780, 1740, 1630 cm"¹

N.M.R. 6ppm (DMSO-dg) : 3.62 (2H, breit s), 4.37 (2H, s), 5.08 (IH, d, J=SHz), 5.40 (2H, s), 5.77 - 6.05 (m), 6.67 (IH, t_f J=5Hz), 7.68, 8.04 (4H, m, J=9Hz), 9.07 (IH, d, J=8Hz)

(2) 8,40 g 4-Nitrobenzyl~7-[2-(2~bromacetyl)acetamido]-3-

cephem-4~carboxylat v/urden in einer Mischung aus 150 ml ^Tetrahydrofuran und 30 ml Wasser suspendiert. Zu der Suspen- ^; sion'Wurden. 50 ml Essigsäure und eine Lösung von 1,20 g Hatriumnitrit in 15 ml Wasser unter Eiskühlung zxigegeben und

es wurde 1,5 Stunden lang bei 20 bis 22⁰C gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde in 300 ml Eiswasser gegossen und 20. Minuten lang gerührt. Die ausgefallene Substanz wurde durch !Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen, getrocknet und dann aus Äthylacetat uinkristallisiert, wobei man 3>1 g 4-Nitrobenzyl-7-j_2-(2-bromacetyl)-2-hydro:xyimino acetamido*] -3-cephem-A—carboxylat (syn-Isomeres) erhielt, 5¹· 153 bis 162⁰C ^r*^R- ^Vmax^{01 : 32S0}' ¹⁷·⁸⁰» 1720, 1705, 1650, 1610,

1600 föchulfier), 1550, 1520 cm"¹

N.M.R. «Sppm (DMSO-d_ß).: 3.67 (2H, d, JMHz),

4.63 (1.5H, s), 4.88 (0.5H, s), 5.18 (IH, d, J=5Hz), 5.45 (2H, s)_f. 5.95 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6.72 (IH, t, J=4Hz), 7.73 (2H, d,-J=9Hz), _:8.28 (2H, d, J=9Hz), 9.38 (IH, d, J=SHz), 11.27 (IH, s)

(3) Eine Lösung von Diazomethan in Diäthyläther wurde nach und nach zu einer Lösung von 0,9 g 4-lTitrobenzyl-7-£2-(2~bromacetyl)-2-hydroxyiminoacetämido[l-3-cephem-4-carbo3qrlat in 30 ml Tetrahydrofuran unter EisMihlung bis zur Beendigung der Reaktion zugegeben und dann wurde Essigsäure zu der dabei erhaltenen Lösung zugegeben zur Zersetzung des überschüssigen Diazomethaneο Die dabei erhaltene Lösung wurde unter vermindertem Druck eingeengt, ivobei man 0,9 g 4-L^Titrobenzyl~7-["2-(2-bromacetyl)-2~methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4~-carbo:xylat (syn-Isomeres) erhielt, und zwar in !Form eines schaumigen Produktsο

2 3

(4-) 0,14 g Thioharnstoff wurden zu einer Lösung von 0,8 g M-

Nitrobenzyl-7- [β- (2-"bromacetyl)~2--metho2q7iininoacetamidol-3~cephem-4~-carbo:!cylat (syn-Isomeres) Ια 20 ml'Äthanol und 5 nil Wasser zugegeben und es wurde 3»5 Stunden lang bei Baumtemperatur gerührte Die dabei erhaltene Lösung wurde unter vermindertem Druck eingeengt und au dem Rückstand wurden Wasser und Äthylacetat zugegeben. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat ger"\ . trocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 0,6 g Rohprodukt erhielt. Das Produkt wurde durch Säulenchromatographie an Silicagel (Eluierungsmittel Benzol/Äthylacetat (8/2)) gereinigt, wobei man 0,21 g 4-Nitrobenzyl~7~[2-X2-amino-4~thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -J-cephem-'-fcarboxylat (syn~Isomeres) erhielt, F. 165 bis 170°C

!•^R· ν !J"i⁰¹ : 3350-3200, 1770, 1720, 1665,

IjIaX

•^ ' 1615, 1515 cm"¹

N.M.R. 6ppm (DMSO-d₆) : 3.60 (2H, breit s), 3.81 (3H, s), 5.12 (IH, d, J=5Hz), 5.36 (2H, s), 5.83 (III, dd, J=5Hz, 8Hz),

6.64 (IH, t, J=4Hz), 6.70 (IH, s), 7.20 (2H, s),

7.65 (2H, d, J=9Hz.), 8.19 (2H, d, J=9Hz) , 9.60 (IH, d, J=8Hz) -.

Beispiel 37

(1) Eine IJÖsυng von 4-3,0.g Brom in 30. ml Methylenchlorid

,wurde zu meiner Lösuag von 22^6 g Diketen in 30 ml

Kethylenchlorid über einen Zeitraum von 35 Minuten bei -30⁰C

.. 180«

zugetropft und 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Die Lösung .wurde zu einer gerührten Lösung von 75»1 g 4-Nitroben27l-7-amino-3-cephem-4-carboxylat und 68,4 g Bis(tricaethylsilyl)acetamid in 1,5 1 Tetrahydrofuran über einen Zeitraum von 10 Minuten bei —15°C augetropft und die Lösung wurde 50 Minuten lang bei der gleichen Temperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 35 ^l Wasser und 35 HiI einer wässrigen Lösung von 18,6 g Natriumnitrat zugegeben, wobei ihr pH-Wert bei 2,0 gehalten wurde, und die Lösung wurde 15 Minuten lang bei 10 bis 15°C gerührt. Nachdem die Lösung mit einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung auf pH 4,5 eingestellt worden war, wurden 150 ml einer wässrigen' Lösung von 17» 1 S Thioharnstoff zu der Lösung zugegeben, mit einer gesättigten vrässrigen Natriumbicarbonatiösung auf pH 6,0 eingestellt und 20 Minuten lang gerührt. Die organische Schicht wurde abgetrennt und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde in 1,5 1 Äthylacetat . gelöst und dreimal mit Wasser gewaschen. Die Lösung wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, mit Aktivkohle behandelt und unter vermindertem Druck eingeengt. Nachdem der Rückstand mit 200 ml Diäthyläther behandelt (verrieben) worden war, wurden die Niederschläge durch Dekantieren gesammelt und mit 300 ml Äthylacetat, einer- Mischung aus 500 ml Tetrahydrofuran und 1 1 Äthylacetat bei 60°C und dann dreimal mit 100 ml Äthylacetat gewaschen und getrocknet, wobei man 55?5 S 4~* Iiitrobenzyl-7-{_2-(2-amino—4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacet-8JnidoJ->3-cephem-4~carboxylat (syn-Isomere3) erhielt.

I.R. ν ^⁰¹ : 1760, 1710, 1660,1630 cm"¹ N.M.R. 6ppm (DMSO-dg) : 3.60 (2H, d, J=5Hz), 5,12 (IH, d, J=5Hz), 5.39(2H, s).

5.88 (IH, dd, J=SHz, 5Hz)., 6.63 (IH, s),

6.53 - 6.77 (IH, m), 7.08 (2H, breit s) , 7.68 (2H, d, J=9Hz), 8.22 (2H, d, J«9Hz), 9.47 (IH, d, J=SHz), 11.33 (IH, s)

0,35 S ΊΟ °/o Pelladium/Kohle wurden zu einer Lösung von 0,7 S 4-Mtrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-tniazolyl)-2-hyaroxyiminoacetamiaoJ-^-cephem-^carboxylat; (syn-Isomeres) in 70 ml Methanol zugegeben und die Mischung wurde 1,5 Stun- ^- den lang bei Raumtemperatur unter Atmosphärendruck katalytisch reduziert. Die dabei erhaltene Mischung wurde filtriert und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem Rückstand 'wurde eine wässrige Lösung von ITatriumbicarbonat zugegeben und die unlösliche Substanz wurde abfiltriert. Das Piltrat wurde mit Äthylacetat und danach mit Methylenchlorid gewaschen, es wurde Stickstoffgas hindurchgeleitet und dann wurde.es lyophilisiert. Der Rückstand wurde in JO ml Wasser gelöst und mit iO%iger Chlorwasserstoffsäure auf pH .-3*8 eingestellt. Die Lösung wurde einer Säulenchromatographie ' unterworfen unter Verwendung eines makroporösen nicht-ionischen Adsorptionsharzes "Diaion HP-20" (Warenzeichen für ein , ' Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries Ltd., 20 ml), mit Wasser gewaschen und dann mit 40%igem wässrigem Aceton eluierte !Nachdem das Aceton unter vermindertem Druck aus dem Eluat entfernt worden war, wurde der Rückstand lyophili- : siert, wobei man 0,25 g 7~|j2-(2-Amino-4-—thiazolyl)-2-kydroxyiminoacetamido] -3-cephem~4—carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt« .

^{01 : 33S0 t0 3200}» ¹⁷⁷⁰» ¹⁶⁷⁰» ¹⁶³⁰ ™^Ύ

N.M.R. δ ppm (DMSO-d₆) : 3,60 (2H, brei* s),

5,10 (IH, d, J=SHz), 5,83 (IH, dd, J=5Hz,

»182-

_182_ ^ä

8Hz), 6.47 (IH, t, J=4Hz), 6.67 (IH, s), 9.47 (IH, d, J=8Hz) .

Beispiel 38

(1) 0,18 g Thioharnstoff wurden zu einer Suspension von 1,05

g 4-Hitrobenzyl-7-£2-(2-'bromacetyl)-2-liydroxyiniinoacetemidq]-J-cephem-^-carboxylat (syn-Isomeres) in 25 ml Äthanol, 25 ml Tetrahydrofuran und 5 ^ml Wasser zugegeben und es wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt«, Die dabei erhaltene Lösung wurde unter vermindertem Druck eingeengt und abgekühlt. Der Rückstand wurde durch Behandlung mit einer Mischung aus Tetrahydrofuran und Äthylacetat kristallisiert und durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,95 S 4—Nitrobenzyl-7- ^-(S-amino-A—thiazolyl )-2-hydroxyiminoacetamido3-3-cephem-4— carboxylat (syn-Isomeres) in Form von farblosen Kristallen erhielt, F. I.72 bis 175°C (Zers„).

^v üo^.^{01 : 3350} - ³²⁰⁰» ¹⁷⁷⁰» ¹⁷²⁵» ¹⁶⁷⁰>

"¹

1625, 1520 cm

N.M.R. 6ppm (DMSO-d₆) : 3.68 (2H, d, J=4Hz), 5.20 (IH, d, J=5Hz), 5.43 (2H, s), 5.90 (IH, dd, J=8Hz, 5Hz), 6.70 (IH, t, J=4Hz), 6.8B (IH, s), 7.70 (2H, d, J=9Hz), 8.23 (2H, d, J= 9Hz), 9.68 (IH, d, J.= 8Hz)

(2) Eine Lösung von Diazomethan in Diäthyläther wurde nach und nach zu einer Lösung von 0,3 g 4—Nitrobenzyl-7~[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido! -3~cephem-4-

carboxylat (syn-lsomeres) in 30 ml Methanol zugegeben, Dis die Reaktion beendet war. Die dabei erhaltene Lösung wurde unter vermindertem Druck eingeengt.und der Rückstand wurde mit Diäthyläther pulverisiert, durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, v/obei man 0,26 g 4-Nitrobenzyl-7-^2-(2-amino-4-thiazolyl )-2~methoxyiininoacetamidoJ ~3~cephem-4-carboxyiat (syn-lsomeres) erhielt. Dieses Produkt wurde, mit einer authentischen Probe identifiziert.

Beispiel 39

£s54· S 7~Amino-3-cephem-4~carbonsäure wurden in einer Lösung von 11,7 S Trimethylsilylacetamid und 15 ml Bis(trimethylßilyl)acetamid in 50 ml trockenem Äthylacetat gelöst. Eine Lösung von 2,43 g Brom in 10 ml getrocknetem Methylenchlorid wurde zu einer Lösung von 1,28 g Diketen in 25 ml getrocknetem Methylenchlorid über einen Zeitraum von 10 Minuten bei -30 C zugetropft und 1,5 Stunden lang bei der gleichen Temperatur gerührt» Die Lösung wurde zu der obigen, 7-Amino«3-cephem-4-carbonsäure enthaltenden Lösung über einen Zeitraum von 10 Minuten bei -15°C zugegeben und 1,5 Stunden lang bei -15 his -10⁰C gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 50 ml V/asser zugegeben. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt und mit einer wässrigen Natriumbxcarbonatlosung extrahiert. Der wässrige Extrakt wurde mit 10%iger Chlorwasserßtoffsäure auf pH 2,0 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert« Der Äthylac et at extrakt wurde mit V/asser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 2,82 g 7~|_2.-(2-Broiaacetyl)acetamido]-3-cephem-4-carbonsäure erhielte

- 184-

: 1760, 1660 cm

"¹

N.M.R. δ ppm (DMSO-dg) : 3.58 (2H, d, J=4Hz),

3.65 (2H, s), 4.40 (2H, s), 5.06 (IH, d, J=5Hz),

5.73 (IH, dd, J=8Hz, 5Hz), 6.50 (IH, t, J=4Hz),

9.08 (IH, d, J=8Hz)

Beispiel 40 , , > . ; *

Auf ähnliche Weise wie in Beispiel 36 wurden die folgenden Verbindungen hergestellt: "···..

(1) 4-Nitrobenzyl--7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-äthoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

(2) 4-Nitrobenzyl-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

.(3) 4~Nitrobenzyl-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

Beispiel 41

Auf ähnliche Weise wie in Beispiel 38 (2) wurden die folgenden Verbindungen hergestellt:

(1) 4-Nitrobenzyl~7-Z2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-äthoxyiminoacetamidg7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

(2) 4~;Nitrobenzyl-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propoxyiminoacetamido7-3~cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

(3) 4-Nitrobenzyl-7-/2-(2~aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres)

• Beispiel 42

1.) 160 mg Natriumborhydrid wurden zu einer Suspension von 1 g 4-Nitro.benzyl-7-/2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyimin,oacetamido_7-3-hydroxy-3-cephen;-4-carboxylat (syn-Isomeres) in 10 ml Tetrahydrofuran, 3 ml Essigsäure und 1 ml Wasser über. einen Zeitraum von 10 Minuten bei O⁰C zugegeben und 55 Minu-

- 186

- 186 - . ^{Ä 8}

ten lang bei O bis 3⁰C gerührt. - Nachdem Wasser zu der dabei erhaltenen Lösung zugegeben worden war, wurde die Lösung mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung, einer gesättigten wäßri- " gen Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten \^äßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Die Lösung wurde unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand wurde mit Diäthyläther pulverisiert, wobei man 0,77 g 4-Nitrobenzyl~-7-/2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidq7-3-hydroxycepham-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt, F. 172 bis 175°C (Zers.).

3250, 1775, 1745, 1660 cm"¹

N.M.R. cfppm (DMSO-d₆): 2.76 (1H, dd, J=14 Hz, 3Hz), 3.17 (1H, dd, J=14Hz, 13Hz), 3-92 (3H, s), 4.03 (1H, m), 4.72 (1H, d, J=6Hz), 5-24 (1H, d, J=4Hz), 5.37 (2H, s), 5.56 (1H, dd, J=9Hz, 4Hz), 6.07 (1H, d, J=4Hz), 7.44 (1H, s), 7.72 (2H, d, •J=8Hz), 8.27 (2H, d, J=8Hz), 8.54.(1H,s), 9.67 (1H₁ d, J=9Hz).

2.) 0,406 g Mesylchlorid wurden zu einer gerührten Mischung von 1 g 4-Nitrobenzyl-7-/2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-hydroxycepham-4~carboxylat (syn-Isomeres), 10 ml Ν,Ν-Dimethylformamid und 0,732 g Kaliumcarbonat über einen Zeitraum von 2 Minuten bei 0 bis 5°C zugetropft und die Lösung wurde 2,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem Äthylacetat und passer zu der dabei erhaltenen Lösung zugegeben worden waren, wurde die Lösung mit Äthyl-

- 187

- 187 - ^{Ä ß}

acetat extrahiert. Die zurückbleibende wäßrige Schicht wurde erneut mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextraktlösung wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natrium-Chloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde einer Säulenchromatographie an Silicagel (30 g) unterworfen und mit einem Chloroform/Äthylacetat-Gemisch eluiert. Das Eluat wurde unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man ' 0,12 g 4-Nitrobenzyl-7~/2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-meth- , o'xyiminoacetämido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt, Fc 224⁰C (Zers.).

Beispiel 43

704 mg Phosphorylchlorid wurden zu einer Lösung von 336 mg Ν,Ν-Dimethylformamid in 8 ml Äthylacetat unterhalb 5°C zugetropft und 30 Min-uten lang bei der -gleichen Temperatur gerührt. Zu der Lösung wurden 1 g 2-(2-Formamidothiazol-4~yl)~ 2-methoxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) zugegeben und es wurde 1^%Stunde lang bei 5 bis 10⁰C gerührt. Die Lösung wurde zu einer. Lösung von 872 mg 7-Amino-3-hydroxycepham-4-carbonsäure und 1,05 g Trimethylsilylacetamid in 20 ml Äthylacetat über einen Zeitraum von 5 Minuten bei -20⁰C zugetropft und 1 Stunde lang bei.-20 bis -25°C gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 50 ml Wasser zugegeben und ..mit Natriumbicarbonat wurde der pH-Wert auf 7,Oi eingestellt. Die wäßrige Schicht wurde abtrennt und die Äthylacetatschicht wurde erneut mit 10 ml Wasser extrahiert. Die wäßrigen Extrakte wurden miteinander vereinigt', auf pH 6 eingestellt und an einem · makroporösen nicht-ionischen Adsorptionsharz Diaion HP-20 (50 ml, Warenzeichen für ein Produkt der Firma Mitsubishi Chemical Industries) adsorbiert.

' - 188 -

Die Säule wurde mit 50 ml Wasser gewaschen und mit 30 tigern wäßrigem Isopropylalkohol eluiert. Das Eluat, welches die gewünschte Verbindung enthielt, wurde auf pH 6,5 eingestellt und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde lyophilisiert, wobei man 1,1 g Natrium-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-hydroxycepham-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

N.M.R. 6(D₂O, ppm): 2.72 - 3.18 (2H, m) , 4.02 (3H, s), 4.02 - 4.28 (IH, m), 4.54 (IH, d, J=4Hz), 5.28 (IH, d, jf=4Hz), 5.53 (IH, d, J=4Hz) , 7.50 (IH, s) , 8.53 (IH, s)

Beispiel 44

0,423 g Thionylchlorid wurden zu einer gerührten Lösung von 1 0 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formarnido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamidoj-S-hydroxy-S-cephem-^-carboxylat (syn-Isomeres) in 10 ml Ν,Ν-Dimethylformamid unter Eiskühlung über einen Zeitraum von 2 Minuten zugetropft und die Lösung wurde 1,1 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Zu der dabei erhaltenen Lösung wurden 40 ml Äthylacetat und 30 ml Wasser zugegeben und es wurde Gusreichend geschüttelt. Die wäßrige Schicht wurde mit Äthylacetat extrahiert und der Extrakt wurde mit der oben abgetrennten Äthylacetatschicht vereinigt. Die Äthylacetatlösung wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchlcridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde einer Säulenchromatographie an Silicagel (30 g) unterworfen und mit Chloroform und danach mit einem Chloroform/Xthylacetat· (7/3)-Gemisch eluiert. Das zuletzt genannte Eluat wurde unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man

- toy

0,2 g 4-Ni-crobenzyl-7-[2-(2<~formamic!o™4-thia2olyi)-2-methoxy™ iminoacetamido]~3-chlor-3-cephem~4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt, F. 216° C (Zers.)«

max^{1 : 3}>²³⁰ CSchulter), 3110, 3050, 1785,

1725, 1690, 1655 cm"¹ N.M.R. δ ppm (DMSO-d₆) : 3.93 (3H, s), 3.93 (2H,

q, J=i8Hz), 5.36 (IH, d, J=SHz), 5.50 (2H, s), 5.97 (IH, dd, J=5Hz, 9Hz), 7.45 (IH, ζ), -,' 7.73 (2H₁. d, J=9Hz), 8.29 (2H, d, J= 9Hz) ,

8.56 (IH, s), 9.78 (IH, d, J=9Hz).

Beispiel 45

Auf öhnliche Weise wie in Beispiel 44 wurden die folgenden Verbindungen hergestellt:

(1) 4-Nitrobenzyl-7»[2-(2-formaniidothiazol-4~yl)-2~propoxyiminoacetamido]-J-chloro-^-cQphem-A-carboxylat (syn-Isomeres);

(2) 4-Nitrobenzyl^w7-[2~(2--forinainidothiazol-4-yl)-2" (2,2,2-trifluoroötb.oxyimlno)acetamido]-3-chloro~3~ cephem-4-carboxylat (syn «.Jsomöres); ·

(5) 4~Nitrobenzyl-T-[2-(2~formamidothiazol»4-yl)~2-butoxyiminoacetamido]~5-chlorO"3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres).

· : * '. · 21 4 239

Beispiel 46

Fermentation -

Vorkulturmedium: Trypticase-Sojabrühe (BBL)

Hauptkulturmedium:

Glycerin 3g ·

Pepton . 1g

Maisquellwasser 1g'

trockene Hefe 2g'

Natriumcarbonat 0,1 g

KH₂PO₄ 0,55 g

Na₂HPO^.12H₂O 2,15 g

; (Die obigen Komponenten wurden in einer zum Auffüllen auf

100 ml ausreichenden Menge Wasser gelöst und das Medium

wurde auf pH 7,2 eingestellt).

100 ml der Hauptkulturbrühe wurden in einen 500 ml-Sakaguchi-Kolben eingeführt und 20 Minuten lang bei 120°C sterilisiert. In dieses Medium wurden 1 ml einer Kulturbrühe jedes der nachfolgend angegebenen Mikroorganismen eingeimpft (inokuliert), die jeweils in dem Vorkulturmedium kultiviert wurden, und zwar 18 Stunden lang bei 30⁰C, woraufhin eine Schüttelkultur bei 30⁰C 48 Stunden lang geführt wurde.

Reaktion .

Der oben genannten Kulturbrühe (1 ml) wurden 0,1 g des nach-, folgend angegebenen Substrats,suspendiert in 1 ml eines 0,1' M Phosphatpuffers (pH-7,2), zugesetzt und dann wurde die Mischung 48 Stunden lang bei 30⁰C geschüttelt.

- 191 -

- 191·

Identififzierunq und Nachweis

Nach der Reaktion wurde zur Identifizierung des erzeugten Produktes der oben e.rhaltenen Reaktionsmischung auf Eastman chromatogram 6065-Cellulose bei Raumtemperatur .chromatographiert. Als Entwicklungsmittel wurde verwendet: (A) die obere Schicht einer Mischung aus n-Butanol, Äthanol und Wasser (Volumenverhältnis 4:1:5) und (B) eine Mischung aus n-Propanol und Wasser · (Volumenverhältnis 7:3). Der R_f-Wert wurde durch den Index der antimikrobiellen Aktivität gegenüber einem empfindlichen Stamm von Escherichia coli ES ΠΊ bestimmt und als Ergebnis wurde nur ein FIeLk beobachtet, der zeigte, daß jedes der Produkte I und II auf per Eastman chromatogram 6065-Cellulose zu erkenne war, ohne daß irgendein Fleck jedes der Substrate I und II auftrat« Die R ,.-Werte sind in der folgenden Tabelle angegeben.

	Entwicklungslösungsmittel	B
Reaktionsmischung (Produkt I) Bezugssubstanz (Substrat I)	A	' 0.90 0.60
Rea^tions-mischung (Produkt II) Bezugssubstaη2 (Substrat II)	0.85 0.39	0.92 0.54
0.90 0.36

Fußnoten: Substrat I:

Produkt I: Substrat II:

Produkt II:

4-Nitrobenzyl-7-/2-formamido-4-thiazolyl)~ 2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres); '

7-/2-(2-Formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) 4-Nitrobenzyl-7-/2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido7-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres);

7-/2-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacet- . amido7-3-cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres)

Das in der oben erhaltenen Reaktionsmischung erzeugte Produkt wurde mittels der Papierscheibenplattenmethode nachgewiesen unter Verwendung eines empfindlichen Stammes von Escherichia coli ES 111 (16 Stunden bei 37°C kultiviert) und die Ausbeute wurde daraus errechnet. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle angegeben.

für die enzymatische Hydrolyse verwendeter Mikroorganismus	Ausbeute	Produkt II ·
,Bacillus subtilis IAM 1069	Produkt I	60
¹¹ sphaericus IAM 1286	75	20
¹¹ subtilis IAM 1107	75	95
" subtilis IAM 1214	75	20
Corynebacterium equi IAM 1038	85	95
Micrococcus varians IAM 1314 '	95	20
Flavobacterium rigens IAM 1238 /'.	70	90
Salmonella typhimurium IAM 1406	85	20 -
Staphylococcus epiderraidis IAM 1296	90 ^c	95
Microbacterium flavum IAM 164 2	90	95
90

Nachfolgend werden einige Beispiele für pharmazeutische Zubereitungen bzw. pharmazeutische Mittel angegeben, die erfindungsgemäß hergestellt wurden und die als aktive Substanz (Wirkstoff) 7-[2-(2~Amino~4~thiazolyl)-2-methoxyiminoacetatiiido]-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres, Verbindung A) enthielten.

Beispiel 47

Lypphilisiertes Präparat für die Injektion

Das Natriumsalz der Verbindung A (20 g~Potenz)wurde in 200 ml Wasser gelöst und 5 ml der Lösung wurden jeweils in eine 10 ml-Phiole eingefüllt« Diese Phiolen wurden eingefroren und im Vakuum getrocknet (Lyophilisierung)»

Beispiel 48

Suspension für die Injektion

Verbindung A 25 g

liethylcelluiose 0,5 g

Methyl-4-oxobenzoat 0,1 g

Polysolvate 80 0,1 g

Lidocainhydrochlorid · 0,5 g

Wasser für die Injektion zum Auffolien auf 100 ml

Diese wößrige Suspension eignete sich für die intramuskuläre Injektion.

Beispiel 49 Tabletten fur die orale Verabreichung

Verbindung A 500 mg

Lactose 375,5 mg

Hydroxypropylcellulose 2 mg

Magnesiumstearat 22,5 mg

Diese Mischung ergab eine Tablette für die orale Verwendung für die Behandlung von Infektionserkrankungen, die durch pathogene Bakterijen hervorgerufen wurden.

ι

Beispiel 50

Kapsel für die orale Verabreichung Verbindung A 500 mg

Magnesiumstearat 10 mg

Diese Mischung ergab eine Kapsel für die orale Verabreichung für die Behandlung von Infektionserkrankungsn, die durch pathogene Bakterien hervorgerufen wurden.

- 195 -

Beispiel 51

1#) Eine Lösung von 3,24 g 2-(2-Forniamidothiazol~4-yl)-2-nhexyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres), 0,951 g N,N-DimethyI-formamid und 2,00 g Phosphorylchlorid in 20 ml· Athylacetat und eine Lösung von 4 g 4~Nitrobenzyl«7-amino-3-chlor-3-cephe.m-4-carboxylathydrochlorid in einer Mischung aus 20 ml Aceton, 20 ml Wasser und 40 ml Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel 21 (1) behandelt, wobei man 5,78 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-forniamidothiazoi~4~yl)-2~n-hexyloxyiminoacetamido]-3~ chlor~3-cephem~4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt,

I.R.. ^v fax^{01 : 3240}» ³²⁰⁰> ^30S0> ¹⁷⁸⁰> 1730, • I ·'_ 1695, 1660 cm"¹ . .

N.M. R. δ (DMS0-d₆,"ppm) .: 0.6^2.1 (HH, m),

3.96 (2H, q, J=19Hz), 4.15 (2H, t, J=6Hz), 5.37 (III, d, J«5Hz), 5.50 (2H, s), . 5.97 (IJI, d, d, J=5Hz, 8Hz), 7.42 (IH, s) , ' . 7.72 (211, d, J=9Hz), 8/28 (2H, d, J-9Hz) , 8.54 (IH, s), 9.74 (IH, d, J=SHz),

12.73 (IH, breit s) 2.) Eine Mischung aus 5,6 g 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazo.l-4™yl)-2-n-hexyloxyiminoacetamido]-3-chlor~3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres), 0,4 ml Essigsäure, 2,24 g 10 % Palladium/Kohlenstoff, 4 ml Wasser, 23 ml Methanol und 56 ml Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche V/eise wie in Beispiel 21 (2) behandelt, wobei man 2,5 g 7-[2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyimincacetamido]-3-chlor-3-cephem-4-carbonsäure

-196 -

(syn-Isomeres) erhielt.

;.^I#R· ^v max^{01 : 3225}> 1785, 1690, 1650 cm"¹ N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.6*2.0 (HH, m),

3.86 (2H, q, J=ISHz), 4.13 (2H, t, J=6Hz), . • 5.30 (IH, d, J=5Hz), 5.88 (IH, d, d,

J=5Hz, 8Hz), 7.41 (IH, s), 8.54 (IH, s),. & · 9.7C (IH, d, J=8Hz), 12.68 (IH, s) ·

3.) Eine Mischung aus 2,4 g 7-[2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetamido]-3-chlor~3-cephem-4-carbonsäure (syn-Xsomeres), 1,84 g konzentrierte: Chlorwasserstoffsäure, 36 ml Methanol und 30 ml Tetrahydrofuran wurde 2 Stunden lang bei 30 C gerührt. Die dabei erhaltene Lösung wurde im Vakuum eingeengt. Zu dem Ruckstand wurden 60 ml Wasser zugegeben und die ausgefallenen Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit V/asser gewaschen und über Phosphorpentoxid getrocknet, wobei man 1,86 g 7-[2~(2-Aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetamido3-3-chlor-¹S S-cephem-^-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt.

I.R. ν ^N"i^o1 : 3300, 1780, 1665, 1535 cm"¹

IU 3 X

N.M.R. 6 (DMSO-d₆, ppm) :. 0.6*2.0 (HH, m) ,

¹ 3.84 (2H, q, J=18Hz), 4.08 (2H, t, J=7Hz) ,

S^ 28 (IH, d, J=5Hz), 5.82 (IH, d, d, J-5HZ, 8Hz), 6.77 (IH, s), 9.66 (IH, d, J=SHz), 6.0^8.0 (2H, breites)

- 197 -

Beispiel 52

1.) .1,27 g 2--(2~Formamidothiazol"4-yl)-2-propargyloxyimino~ essigsaure (syn-Isomeres), 402 mg N,^Dimethylformamid, 843 eg' Phosphorylchlorid und 11,2 ml Äthylacetat wurden auf konventionelle Weise behandelt zur Herstellung einer aktivierten Säurelösung. Andererseits wurde eine Mischung aus 1,33 g 7-Amino~3-methoxy~3-cephem-4-carbonsäurehydrochlorid, 4 g Trimethylsilylacetamid, 2 ml Bis-(trimethylsilyl)acetamid und. 20 ml Äthylacetat 1 Stunde lang bei 40 bis 45⁰C gerührt. Zu 'der Lösung wurde die oben erhaltene aktivierte Säurelösung auf einmal bei -15°C zugegeben und dann wurde 1,5 Stunden lang bei -5 bis -10⁰C gerührt. Zu der erhaltenen Lösung wurden 30 ml Wasser zugegeben, es wurde filtriert und die organische Schicht wurde abgetrennt. Die abfiltrierte unlösliche Substanz wurde in einer gesättigten wäßrigen Natriumbicar.bonatlösung gelost und die Lösung wurde zu der. organischen Schicht zugegeben. Die Lösung wurde auf pH 7,5 eingestellt und die wäßrige Lösung wurde abgetrennt und dann mit Äthylacetat bei pH 2,0 extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiuinsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt, wobei man 1,0 g 7-/2-(2-Formamidothiazol-4--yl)2-propargyloxyiminoacetamido7-3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) in Form eines gelben Pulvers erhielt. .

: 3200-330O₅ 2500-^2600, 2120, 1770, 1710,

1690, 1670 cm" . . . · N.M.R. i(DMS0-d₆, ppm): 3-50 (1H, m), 3.65 (2H, s),

3.82 (3H, s), 4.80 (2H, d, J=2Hz), 5.20 (IH, d, J=4Hz), 5.62 (1H, d,d, J=4Hz, SHz), 7.52 (1H, s), 8.55 (1H, s), 9.68 (1H, d, J=8Hz>, Ϊ2.'65» (1H, breit s)

- 198

• — 198 -

2.) Eine Mischung aus 0,9 g 7-/2~(2-Formamdiothiazol-4-yl)-2-Propargyloxyiminoacetamido7-3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres), 0,9 ml konzentrierter Chlorwasserstoffsäure und 13,5 ml Methanol wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Einengen der dabei erhaltenen Lösung im Vakuum" bei 35⁰C wurde der Rückstand in Wasser gelöst und mit Äthylacetat gewaschen. Die wäßrige Lösung wurde mit Natriumbicarbonat auf pH 7,0 eingestellt und mit Äthylacetat und Diäthyläther gewaschen. Nach der Entfernung des organirschen Lösungsmittels durch Einleiten von Stickstoffgas wurde die Lösung mit 10 %iger Chlorwasserstoffsäure auf pH 3,0 eingestellt und unter Eiskühlung gerührt. Die Niederschläge wurden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 0,25 g 7-/2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetamido7-3-methoxy-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) in Form eines weißgelben Pulvers erhielt.

si

1670, 1620 cm"¹

¹: 330O₅ 2500 — 2600, 2120, 1775, 1710,

si

N.M.R. 0

(DMS0-d₆, ppm) : 3.52 (1H, m),3.82 (3H, s), 4.77 (2H, d, J=2Hz), 5.17 (1H, d, J=4Hz), 5-58 (1H, d,d, J=4Hz, 8Hz), 6.93 (1H, s), 7.1-7.3 (2H, breit s), 9.67 (1H, d, J=8Hz)

Beispiel 53

1.) 1,27 g 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)~2-propargyloxyimino-· essigsäure (syn-Isomeres), 400 mg N₅N - Dimethylformamid, 850 mg Phosphorylchlorid und 11,2 ml Äthylacetat wurden auf konventionelle Weise behandelt zur Herstellung der aktivierten

Säureiösung. Die aktivierte Säurelösung wurde zu einer Lösung von 2 g y-Amino^-chlor-S-cephem-A-carbonsäurehydrochlorid, 6 g Trimethylsilylace'tamid und 3 ml Bis ("trimethylsilyl) acetamid in 40 ml Äthylacetat bei -15⁰C auf einmal zugegeben und es wurde 1,5 Stunden lang bei -5 bis -10⁰C gerührt. Nach der Zugabe von 30 ml Wasser zu der dabei erhaltenen Lösung wurde die Äthylacetatschicht abgetrennt und mit einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Zu dem wäßrigen Extrakt wurde Äthyla'cetat zugegeben und der pH-Wert wurde mit 10 %iger Chlorwasserstoff säure auf 2,0 eingestellt., Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über

Magnesiumsulj

rat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde

im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde in einem Äthylacetat/Diisopropyläther-Gemisch kristallisiert. Die Niederschlage wurden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 1;5 g 7-Z2-(2-Forinamidothiazol-4-yl)-2-propargylöxyiminoacetamido7-3-chlor-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) in Form eines gelben Pulvers erhielt.

^I'^R· max°^1: 3250—3300, 2500—2600, 2120, 1780,

1725, 1690, 1670 cm"¹· . N.M.R. d (DMSO-d₆, ppm): 3.45 (1H, m), 3.57 (2H, AB-q,

J=20Hz), 4.77 (2H, d,J=2Hz), 5-28 (1H, d, J=4Hz), • . 5.80 (1H, d,d₅ J=4Hz, 8Hz), 8.42 (1H, s), 8,52 ' (1H, s), 9.78 (1H, d, J=8Hz)., 12,72 (1H, breit s)

- 200.-

2·) Eine Mischung aus 1,4 g 7-[2-(2-Formamidothiazol-4->yl)T 2-propargyloxyiminoacetamido]~3~chlor-3-cephem=4-carbonsäure (syn-Isomeres), 1,4 ml konzentrierter Chlorwasserstoffsäure und 20 ml Methanol wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel (2) behandelt, wobei man 0,7 g 7-[2-(2~Aminothiazol-4-yl)-. 2-propargyloxyiminöacetamido]~3~chlor-3~cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) in Form eines gelblich-weißen Pulvers erhielt.

^ItR' y max^{01 : 3350}' .25001,2600, 2130, 1775,

17-10, 1670, 1630 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-Cl₆, ppm) : 4.38 (IH, m) , 4.48

(2H, AB-q, J=19Hz), 4.72 (2H", d, J = 2Hz), 5.28 (IH, d, JMHz),. 5.80 (IH, d,d, J»4*ilz, 8Hz), 6.78 (IH, s) , 9.7 3 (IH, d,

Beispiel 54

11 mg Thioharnstoff und eine Lösung von 30 mg 7-[2-(2-Bromacetyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) in 2 ml Äthanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 36 (4) behandelt zur Herstellung der 7-[2-(2-Amino-4-thiazolyl)~2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres)β Das Produkt wurde mit einer authentischen Probe durch Dünnschichtchromatographie identifiziert.

Beispiel 55

1») Eine Lösung von 15,0 g 4-Nitrobenzyl-7-amino-3-chlor-3~

- 201

cepliem^-carboxylathydrochlorid, 11,3 g Bis(trimethylsilyl)~ acetamid und 9,7 g Trirnethylsily!acetamid in 300 ml Tetrahydrofuran/ eine Lösung von 3,41ml Diketen in 4 ml Methylenchlorid, eine Lösung von 2,27 ml Brom in 4 ml Methylenchlorid, eine Lösung •von 3,1 g Natriumnitrit in 20 ml Wasser und eine Lösung von 4,0 g Thioharnstoff in 40 ml V/asser wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 37 (1) behandelt, wobei man 10,4 g 4«Nitrobenzyl~7-[2-(2-aminothia2ol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3--chlor-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres) erhielt.

I.R. v^j⁰¹ : 3300, 3180, 1777, 1730, 1670,

1603 cm"¹

N.M.R. S (DMSO-d₆, ppm) : 3.93 (2H, d, J=5Hz),. 5.33 (IH, d, J=SHz), 5.49 (2H, s), S.90 (IH, d,d, J=5Hz, 8„2Hz), 6.68 (IH, S), 7.14 (IH, breit, s), 7.72 (2H, d, .' J=9.2Hz), 8.27 (2H, d, J=9.2Hz), 9.54

(IH, d, J=8.2Hz)

2.) 5,0 g 4~Nitrobenzyl-7-[2-(2~aminothiazol"4-yl)~2-hydroxyim.ino· ocetamido]-3-chlor-3-cephem-4-carboxylat (syn-Isomeres), 3,0 g 10 % Palladium/Kohle, 100 ml Methanol, 10 ml Wasser und 150 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 37 (2) behandelt, wobei man 1,28 g 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3~chlor-3-cephem-4~carbonsäure (syn~

20.2 -

- 202 - λ| j <^ *ϊλ

Isomeres) erhielt.

³³³⁰> ^177S> ¹⁶⁷⁵> 1630 cnf¹ • N.M.R. δ (DiMSO-d₆, ppm) : 3.72 (2H, m), 5.24

(IH, d, J=5Hz), 5.80 (IH, d,d, J=S.OHz, 8.2Hz), 6.66 (IH, s), 9.50 (IH, d)

Beispiel R

"L) 100 g Äthyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-Isomeres), 300 ml Ν,Ν-Dimethylformamid, 130 g Kaliumcarbonat und 121 g Bromoctan wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (1 ) behandelt, wobei man 165,5 g Äthyi-^-n-octyloxyimino-S-oxobutyrat (syn-Isomeres) in Form eines Öls erhielt.

"¹

I.R. ν ^^m : 1745, 1695, 1470 cm

N.M.R. 6 (CCA₄, ppm ) : 0.6*2.1 (18H, m) , 2.35 (3H, s), 4.0-V4.6 (4H, m)

2.) 165,5 g Äthyl^-n-octyloxyimino-S-oxobutyrat (syn-Isomeres), 84,7 g Sulfurylchlorid und 165 ml Essigsäure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (2) behandelt, wobei man 169,6 g Äthyl-2-n~octyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat in Form eines Öls erhielt,

^v Üoi^{m :} 1745, 1710, 1465 cm"¹

N.M.R. 6 (CCJl₄, -ppm) : 0.6*2.1 (18H, m) , 4.0*4.6 (4H, m), 4.48 (2H, s).

3o) 169,6 g Xthyl^-n-octyloxyimino^-chlor-S-oxobütyrat (syn-

- 203 -

Isomeres), 42,3 g Thioharnstoff, 75,5 g Natriumacetattrihydrat, 420 ml Wasser und 1020 ml Äthanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (3) behandelt, wobei man 65 g Äthyl-2~(2-aminothiazol-4»yl)~2-n~octyioxyiminoocetat (syn-Isomeres) erhielt,

F. 77 bis 78⁰C.

R.

³⁴⁷⁰* ^{3250> 312S}» ¹⁷³⁵» ^1S45> 1465 cm"¹

N.M.R. δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.81 (3H, t, J=6Hz) , 0.6*1.9. (ISH, m), 4.07 (2H, t, J=6Hz), ;j ;' 4.28 (2H, q, J^7Hz), 6.86 (IH, s) , 7.02 (2H, breit) s)

4.) 64 g Äthyl-2-(2~aminothiazol»4-yl)«2~n-octy.loxyiminoacetat (syn-Isomeres), 196 ml einer 2 η wäßrigen Natriumhydroxidlösung, 190 ml Methanol und 300 ml Tetrahydrofuran wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (4) behandelt, wobei man 52,5 g 2-(2-Aminothiazol-4->yl)-2-n»octyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 146°C (Zers.)*

I.R. ν ^Nu?„^o1 : 3170, 1635, 1565, 1460 cm"¹ N.M.R.- δ (DMSO-d₆, ppm) : 0.86 (3H, t, J=6Hz) ,

0.6VL. 9 (12H, m), 4.06 (211, t, J=6Hz) ,

6.81 (IH, s), 7.22 (2H, s)

5.) 20 g 2-(2-Äminothiazol~4-yl)~2-n~octyloxyiminoessigsäure (syn-1-someras), 27,3 g Essigsäureanhydrid und 12,3 g Ameisensäure wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel F (5) behandelt,

wobei man 21,3 g 2-(2-Formamidothia2Ol~4-yl)-2-n-octyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres) erhielt, F. 122.C (Zers.. ) ·

¹ : 3350, 3150, 30.50, 1700,

1675, 1560 cm"¹

N.M.R. δ (DMSOd₆, ppm) : 0.6*2.0 (15H, m) , 4.1t) (2H, t, J=6Hz), 7.56 (IH, s) , 8.57 (IH, s), 12.67 (IH, s)

Beispiel 56

1·) Eine Lösung von 7,52 g 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)-2-noctyloxyiminoessigsäure (syn-Isomeres), 5,4 g Phosphorylchlorid und 2_f58 g Ν,Ν-Dimethylformamid in 16 ml Tetrahydrofuran, die auf ähnliche Weise wie in Beispiel 30 (1) hergestellt worden war, und eine Lösung von 4 g 7-Amino-3-cephem-4-carbonsäure in einer Mischung aus 20 ml Aceton, 20 ml Wasser und 20 ml Tetrahydrofuran wurde auf ähnliche Weise wie in Beispiel 30

(1) behandelt, wobei man 8,1 g 7-[2-(2~Formamidothiazol-4-yl)~ 2-n-octyloxyiminoessigsäure]-3-cephem-4~carbonsäure (syn-Isomeres)

erhielt.

^1%R' ^v max⁰* ^{: 328}°* ³²⁰°» ³⁰⁶⁰» ¹⁷⁹⁵> ¹⁷⁰⁵>

1660, 1630 cm" ^λ

N.M.R. δ (DMSO-d₆·, ppm) : 0.6*2.1 -(15K, m) ,

3.62 (2H, d, J=4Hz), 4.14 (2H, t,J=6Hz)_f" 5.16 (IH, d, J=5Hz), 5.88 (IH, d,d, J=5Hz, SHz), 6.51 (IH, t, JMHz), 7·. 42 (IH, s) , . 8.54 (IH, s.), 9.63 (IH, d, J=8Hz), 12.66 (IH, s)

205 - .21

2.) 8,0 g 7-[2-(2-Formamiclothiazol-4-yl)-4-n-octyloxyiminoacetarnido]-3~cephem~4-carbonsc]ure (syn-Isomeres), 6,23 g konzentrierte Chlorwasserstoffsäure/ 15 ml Tetrahydrofuran und 120 tnl Methanol wurden auf ähnliche Weise wie in Beispiel 21 (3) behandelt, wobei man 6,95 g 7~[2-(2-Aminothiazol~4-yl)~ 2-n~octyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carbonsäure (syn-Isomeres) erhielt. . '

I.R. V !^ol . 3320 (Schulter 0,· 1785, 1660,

' 1630, 1535

K.M.R. δ (DMS0-d₆, ppm) : 0.6^2..0 (15H, ra) ,

3.62 (2H, brei! s), 4.07 (2H, t, _J-6Hz), 5.12 (IH, d, J=SHz), 5.83 (IH, . d,d, J«?5Hz, 9Hz), 6.48 (IH, breiü s) ,

6.72 (IH, s), 7.22 (2H, s), 9.53 (IH, d,' J=9Hz)

- 206 -

Claims

_ · · - -206 - . ^I 4 ZJ? Brfindungsanspru'en

1 2

O - R^

worin R und R jeweils die in Punkt 1 angegebenen Bedeu tungen haben,

gekennzeichnet dadurch, daß man eine Verbindung der Formel

.· T^r- C - COOR⁸

» 2

O - R

1 2

0 - R, '

p />

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben

und R niederes Alkyl bedeutet,

einer Reaktion zur Umwandlung der veresterten Carboxygruppe fur

ο
R in die freie-Carboxylgruppe unterwirft. ·

.6, _; Verfahreq/zür Herstellung einer Verbindung der Formel

C - COOR⁸ _N

1· Verfahren zur Herstellung -von Thiazolverbindungen der

Formel R

worin bedeuten:

R niederes Alkyl mit 2 bis 8 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl, niederes Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, niederes Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen(niedrig)alkyl, CarbfiXy(niedrig)alkyl oder niederes Alkoxycarbonyl(niedrig).-

alkyi, -"· ·-

i ·

R Amino oder geschütztes Amino und

R Viiasserstoff oder niederes Alkyl,

2 ..

mit der Maßgabe, daß_/ - v/enn R Äthyl, Isopropyl oder Allyl

bedeutet, dann R Amino oder unsubstituiertes niederes Alkanamidp und R V.'asserstoff darstellen, und \*"on deren Salzen, gekennzeichnet dadurch, daß man
1«) i) eine Verbindung der Formel

X - CH₉CO - C - COOI^

² . Il ^a . -

. N '

In

X- CH-CO-C-COOR?

^L II ^a

i - · N ·

» 2 "

.- 207

•4

Og

worin X, R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen

haben,

mit einer Thioharnstoff verbindung der Formel umsetzt

R⁶ - C - NH₉

s

worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat,· unter Bildung einer Verbindung der Formel

_N C - COOR* \

worin R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

2.) eine Verbindung der Formel

, N-,- C - COOR⁸ ⁶ -iX

R¹

i- :. OH

S ρ

woi'in R Amino oder geschütztes Amino und R die oben genannten Re;

bedeuten,

mit einem Verätherungsmittel umsetzt unter Bildung einer

Verbindunq der Formel _{M c}

R⁶ -/ T" ^C - COOR⁸

0 - R²

woran R _f R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, .

- 208 -

3.) eine Verbindung der Formel

, · N -τ— C - COOR⁸

ο .

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

mit einem Hydroxylaminderivat der Formel umsetzt

R² - ONH₂ ·

.- -. i-v/

.268
worin R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen

haben,

4.) eine Verbindung der Formel

c- coor|

N

I _n2 ' 0 - R · .

ο Ο A.

worin R niederes Alkyl bedeutet und R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

einer Umwandlungsreaktion der veresterten Carboxygruppe für R in die freie Carboxygruppe unterwirft unter Bildung einer Verbindung der Formel

- COOlI

R⁰ -i

- 209- Z ^ ^ "*·

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, oder

5.) eine Verbindung der Formel

N

* 2

6 ° - ^R 2 8 ...

worin R geschütztes Amino bedeutet und R und R jeweils die

ψ : oben angegebenen Bedeutungen haben,

einer Reaktion zur Eliminierung der Schutzgruppe in der ge· schützten Aminogruppe
Verbindung der Formel

schützten Aminogruppe für R unterwirft unter Bildung einer

_N C - COOR⁸ 2 S- _N

Viorin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben

2. Verfahre*n)fzu~r Herste llung einer Verbindung der Formel

,8

worin R ,,R und R jeweils die in Punkt 1 angegebenen Bedeutungen haben,
gekennzeichnet dadurch, daß man,
eine Verbindung der Formel .

. X - CII.CO - C - COOR⁸

¹ Ii ^a,

N .

. · OH"

worin X Halogen bedeutet und R die oben angegebenen Bedeutungen

mit einem Verätherungsmittel umsetzt und dann die dabei erhaltene

Verbindung der Formel

* ^; · χ - CH₂CO - C- COOR^

9 8
worin X, R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

mit einer Thioharnstoffverbindung der Formel umsetzt

R⁶ - C - NH₉

Ii *

worin R die oben angegebenen Bedeutungen hat.

χ . Verfαhre?|~ziiJr~Hersteilung einer Verbindung der Formel

. N-T- C - COOR⁸

R⁶ ^X «ι

^S N * O- R²

p Z p

worin R , R und R jeweils die in Punkt 1 angegebenen Bedeutungen haben,
gekennzeichnet dadurch, daß man eine Verbindung der Formel

OH

- 21t -

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit einem Verätherungsmittel umsetzt.

ι ! ι ν I /i

Verfahrender Herstellung einer Verbindung der Formel

C - COOR⁸ N

,268..
worin R , R und R jeweils die in Punkt 1 angegebenen

Bedeutungen haben,
gekennzeichnet dadurch, daß man •eine Verbindung der Formel

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit einem Hydroxylaminderivat der Formel umsetzt

R² - ONH₂

worin R die oben angegebenen Bedeutungen bat.

AUSJa
5« VerfahrenYzur Herstellung einer Verbindung der. Formel

worin R und R jeweils die in Punkt 1 , angegebenen Bedeu tungen haben,

gekennzeichnet dadurch, daß man · eine Verbindung der Formel .

N-T-C - COOR?

O U ^a

N . - ·

2 8

worin R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben

und R geschütztes Amino bedeutet, einer Reaktion zur Eliminierung der Schutzgruppe in dem geschützten Amino für R unterwirft.